JP2004105139A - 細胞の遠心分離方法及びその遠心分離装置 - Google Patents
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Abstract
【課題】コンタミネーションの発生及び培養細胞の損傷を極力防止することができる細胞の遠心分離方法を提唱する。
【解決手段】培地が漏出することの無いガス透過膜12を有した培養容器10を用い、この培養容器10内において密閉状態にて細胞Cを付着培養した後、培養容器10ごと遠心分離可能な遠心分離装置Sを行いて、細胞Cを遠沈させ、培地と細胞Cとを分離する。培養容器10から細胞C及び培地を他の容器に移動させることなく細胞Cの回収を可能とする。
【選択図】 図3
【解決手段】培地が漏出することの無いガス透過膜12を有した培養容器10を用い、この培養容器10内において密閉状態にて細胞Cを付着培養した後、培養容器10ごと遠心分離可能な遠心分離装置Sを行いて、細胞Cを遠沈させ、培地と細胞Cとを分離する。培養容器10から細胞C及び培地を他の容器に移動させることなく細胞Cの回収を可能とする。
【選択図】 図3
Description
【0001】
【発明の属する技術分野】
本発明は、付着培養した細胞の培地交換や継代における遠心分離方法に関するものである。
【0002】
【従来の技術】
培養細胞には、培養容器の壁面に付着し、増殖を行う付着系の細胞と、培地中に浮遊した状態で増殖を行う浮遊系の細胞がある。これらの培養細胞は、一定の密度以上に増殖を行うと、死滅してしまうため、一般に、培地中の細胞密度を低減させる継代という作業を行う。また、培養細胞が増殖を行うためには、栄養源となる培地が必要となるため、一定期間ごとに、当該培地を交換する必要がある。
【0003】
ここで、図4を参照して従来の付着培養細胞の培地交換の流れについて説明する。先ず初めに、培地の入ったシャーレ等の細胞培養用の容器100に目的とする細胞Cを収容し、培養して増殖させる。細胞Cは容器100の内壁面に付着して増殖する(上段左側に示す。)。その後、トリプシン等のタンパク融解酵素を加えて、細胞Cを容器100の内壁面から剥離し、単細胞状態まで分散させる(上段中央に示す。)。そして、単細胞状態まで分散させた培養細胞C及びトリプシンを含有する培地(細胞懸濁溶液)を遠沈管101に回収する(上段右側に示す。)。
【0004】
このとき、細胞懸濁溶液中には、上述の如くトリプシン等の酵素が含有されていることから、当該トリプシン等の酵素と細胞Cとを分離させるため、上記遠沈管101を遠心分離機102に固定する。そして、遠心分離器102を運転し、遠沈管101を回転し(下段左側に示す。)、遠心により細胞Cを遠沈させる(下段中央左側に示す。)。その後、遠沈管101を遠心分離器102から取り外し、遠心管101内の上清の培地を除去する。細胞Cが残留した遠心管101に、新たな培地を加えて細胞Cを分散させる(下段中央右側に示す。)。そして、当該細胞Cを分散させた細胞懸濁溶液を再びシャーレ等の細胞培養用の容器100に移し、再び細胞Cの培養を行っていた。尚、上述の如き培地交換は、例えば、特許文献1においても記載されている。
【0005】
【特許文献1】
特許第2771424号公報(第1−2頁)
【0006】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、従来の方法による培地交換では、培養用の容器100から遠沈管101に細胞Cが分散された細胞懸濁溶液を移し、遠心を行い、その後、新たな培地に細胞Cを懸濁させ、再度培養用の容器100に移し、培養を継続していた。そのため、培地交換や継代において、少なくとも2度、細胞Cを懸濁溶液の状態で容器交換を行う必要がある。
【0007】
容器を移し替える際に、雑菌が混入するおそれが高いため、細胞Cにコンタミネーション(雑菌による汚染)が発生する危険性があった。また、容器の移し替えにより、細胞C自体に悪影響を及ぼし、培地交換後において、細胞の生存率が低下する問題があった。
【0008】
更にまた、上述の如く培地交換を行う際に、付着培養細胞Cは、トリプシンなどのタンパク融解酵素を用いて培養容器から剥離されるが、係る方法によっても細胞Cが損傷するため、培地交換後における細胞の生存率の低下を招いていた。
【0009】
そこで、本発明は、従来の技術的課題を解決するために成されたものであり、コンタミネーションの発生及び培養細胞の損傷を極力防止することができる細胞の遠心分離方法を提供するものである。
【0010】
【課題を解決するための手段】
本発明の細胞の遠心分離方法は、培地が漏出することの無いガス透過膜を有した培養容器を用い、当該容器内において密閉状態にて細胞を付着培養した後、容器ごと遠心分離を行い、細胞を遠沈させることを特徴とする。
【0011】
本発明によれば、培地が漏出することのないガス透過膜を有した培養容器を用い、当該容器内において密閉状態にて細胞を付着培養した後、容器ごと遠心分離を行い、細胞を遠沈させるので、容器を交換することなく、細胞のみを回収することができるようになる。
【0012】
これにより、細胞の培養時における培地の交換に際して、容器を交換することなく細胞と培地とを分離することができ、衛生的に培地の交換を行うことができるようになる。そのため、コンタミネーション(雑菌汚染)の発生を極力低減することができる。
【0013】
また、容器交換及び細胞の培養容器からの剥離時において生じる細胞の損傷を回避することができるようになり、細胞の死滅率も低下させることができる。これにより、培養実験の効率化を図ることができるようになる。
【0014】
請求項2の発明の遠心分離装置は、請求項1の方法を実現する培養容器を保持し、回転させることにより、前記容器内の細胞を遠沈させることを特徴とする。
【0015】
請求項2の発明の遠心分離装置によれば、請求項1の方法を実現する培養容器を保持し、回転させることにより、容器内の細胞を遠沈させるので、容易に、請求項1の方法における培養容器を用いて容器内の細胞の遠沈を行うことができるようになる。そのため、容易に請求項1の方法を実現することができるようになる。
【0016】
【発明の実施の形態】
次に、図面に基づき本発明の実施の形態を詳述する。図1は本発明に使用する細胞培養用の容器(培養容器)10の斜視図、図2は図1の培養容器10のガス透過膜12−ガス透過膜12間の横断面図、図3は本発明の細胞の遠心分離方法を適用した培地交換の手順を示した流れ図である。
【0017】
本実施例において用いられる培養容器10は、図1に示す如く2枚のガス透過膜12、12と、このガス透過膜12、12の外周を連結する枠体14とから構成されている。2枚のガス透過膜12、12は、図2に示す如く、所定間隔を存して対峙しており、このガス透過膜12、12の外周は枠体14にて囲繞されているため、ガス透過膜12、12の間には密閉空間16が形成される。
【0018】
また、枠体14には、例えば、一側面に外部と密閉空間16とを連通するアクセスポート18、18が、複数(本実施例では、二箇所)形成されている。このアクセスポート18は、通常は外部と密閉空間16とが連通しないように密閉空間16を密閉している。
【0019】
また、本実施例におけるガス透過膜12、12は厚さ100μmのポリエチレンの膜により構成されており、この膜は図2に示すように培地や細胞C等の液体を通さずに、二酸化炭素(CO2)や酸素(O2)等の気体を自在に通すことができるものである。従って、ガス透過膜12、12間に培地を注入しても当該培地及び細胞Cは、漏出しない。
【0020】
以上の構成により、付着系の培養細胞Cを培養する際には、先ず、培養容器10の密閉空間16内に当該細胞Cを含有する培地を注入する。かかる場合には、細胞Cを含有する培地を収容した図示しない注入器を枠体14に形成されたアクセスポート18に差し込み、外部から密閉空間16に培地等を注入する。尚、培地等を注入した後は、アクセスポート18から前記注入器を抜くことによりアクセスポート18は自閉し、密閉空間16は外部と遮断される。
【0021】
これにより、密閉空間16内では、目的細胞Cはガス透過膜12、12それぞれの内表面に図2に示す如く付着した状態で二次元平面的に増殖し、培養される。
【0022】
次に、本発明の細胞の遠心分離方法を適用した培地交換の手順を図3を用いて説明する。上述の如くガス透過膜12、12の内表面に細胞Cが二次元平面的に付着して増殖した培養容器10(図3の上段左側に示す。)を、遠心分離装置Sに固定する(図3の上段右側に示す。)。ここで、遠心分離装置Sは、前記培養容器10を係脱自在に保持することが可能な図示しない容器保持部が複数設けられているものである。そして、この遠心分離装置Sは、例えば、当該容器保持部を水平方向に回転可能とすることにより、保持された培養容器を遠心させることができるものとする。
【0023】
そして、上述の如き遠心分離装置Sに固定された培養容器10は、当該遠心分離装置Sが運転されることにより、培養容器10のガス透過膜12に付着した細胞Cは、遠心分離装置Sの遠心力によって、剥離され、培養容器10の特定部位、即ち、本実施例では、培養容器10の下隅部に遠沈される。
【0024】
これにより、培養容器10から細胞Cを他の容器(遠心用の容器)に移すことなく、細胞Cを遠沈させ、細胞Cのみを回収することができるようになる。
【0025】
その後、枠体14に形成されたアクセスポート18に例えば空の注入器を差し込み、密閉空間16内において細胞Cと分離された培地(上清)を注入器内に抜き出す。そして、新たな培地が充填された注入器をアクセスポート18に差し込み、密閉空間16内に当該培地を注入する。
【0026】
そして、当該培養容器10を振ることにより、密閉空間16内では、新たな培地に細胞Cが懸濁され(図3の下段中央に示す。)、再び、細胞Cの培養を継続することができるようになる(図3の下段右側に示す。)。
【0027】
これにより、上述の如く培地と細胞Cとを分離する遠心作業を、培養を行う培養容器10のまま行うことができるため、衛生的に培地の交換や継代を行うことができるようになる。そのため、コンタミネーション(殺菌汚染)の発生を極力低減することができるようになり、培地交換後の細胞Cの死滅率を低減することができるようになる。
【0028】
また、本発明による細胞Cの付着壁(本実施例では、ガス透過膜12の内表面)からの剥離は、遠心力により行われるため、トリプシンなどのタンパク融解酵素による生化学的な剥離や、剥離手段としてのラバー等による物理的な剥離による細胞Cの損傷を回避することができるようになる。そのため、より一層、細胞Cの死滅率を低減させることができ、培養実験の効率化を図ることができるようになる。
【0029】
また、本実施例において、培養容器10に密閉された培地等は、当該容器10ごと保持し回転させることができる遠心分離装置Sにより遠心分離されるため、より一層、容易に細胞Cの剥離及び細胞Cと培地との分離を行うことができるようになる。
【0030】
尚、実施例で使用した容器はそれに限定されるものでは無く、本発明を実施可能なものであれば、その形態は限定されるものではない。
【0031】
【発明の効果】
以上詳述した如く本発明によれば、培地が漏出することのないガス透過膜を有した培養容器を用い、当該容器内において密閉状態にて細胞を付着培養した後、容器ごと遠心分離を行い、細胞を遠沈させるので、容器を交換することなく、細胞のみを回収することができるようになる。
【0032】
これにより、細胞の培養時における培地の交換に際して、容器を交換することなく細胞と培地とを分離することができ、衛生的に培地の交換を行うことができるようになる。そのため、コンタミネーション(雑菌汚染)の発生を極力低減することができる。
【0033】
また、容器交換及び細胞の培養容器からの剥離時において生じる細胞の損傷を回避することができるようになり、細胞の死滅率も低下させることができる。これにより、培養実験の効率化を図ることができるようになる。
【0034】
請求項2の発明の遠心分離装置によれば、請求項1の方法を実現する培養容器を保持し、回転させることにより、容器内の細胞を遠沈させるので、容易に、請求項1の方法における培養容器を用いて容器内の細胞の遠沈を行うことができるようになる。そのため、容易に請求項1の方法を実現することができるようになる。
【図面の簡単な説明】
【図1】本発明に使用する細胞培養用の容器の斜視図である。
【図2】本発明に使用する容器10のガス透過膜−ガス透過膜間の横断面図である。
【図3】本発明の付着系の培養細胞の遠心分離方法を適用した培地交換の手順を示した流れ図である。
【図4】従来の付着系の培養細胞の培地交換の手順を示した流れ図である。
【符号の説明】
S 遠心分離装置
C 細胞
10 容器
12 ガス透過膜
14 枠体
16 密閉空間
18 アクセスポート
【発明の属する技術分野】
本発明は、付着培養した細胞の培地交換や継代における遠心分離方法に関するものである。
【0002】
【従来の技術】
培養細胞には、培養容器の壁面に付着し、増殖を行う付着系の細胞と、培地中に浮遊した状態で増殖を行う浮遊系の細胞がある。これらの培養細胞は、一定の密度以上に増殖を行うと、死滅してしまうため、一般に、培地中の細胞密度を低減させる継代という作業を行う。また、培養細胞が増殖を行うためには、栄養源となる培地が必要となるため、一定期間ごとに、当該培地を交換する必要がある。
【0003】
ここで、図4を参照して従来の付着培養細胞の培地交換の流れについて説明する。先ず初めに、培地の入ったシャーレ等の細胞培養用の容器100に目的とする細胞Cを収容し、培養して増殖させる。細胞Cは容器100の内壁面に付着して増殖する(上段左側に示す。)。その後、トリプシン等のタンパク融解酵素を加えて、細胞Cを容器100の内壁面から剥離し、単細胞状態まで分散させる(上段中央に示す。)。そして、単細胞状態まで分散させた培養細胞C及びトリプシンを含有する培地(細胞懸濁溶液)を遠沈管101に回収する(上段右側に示す。)。
【0004】
このとき、細胞懸濁溶液中には、上述の如くトリプシン等の酵素が含有されていることから、当該トリプシン等の酵素と細胞Cとを分離させるため、上記遠沈管101を遠心分離機102に固定する。そして、遠心分離器102を運転し、遠沈管101を回転し(下段左側に示す。)、遠心により細胞Cを遠沈させる(下段中央左側に示す。)。その後、遠沈管101を遠心分離器102から取り外し、遠心管101内の上清の培地を除去する。細胞Cが残留した遠心管101に、新たな培地を加えて細胞Cを分散させる(下段中央右側に示す。)。そして、当該細胞Cを分散させた細胞懸濁溶液を再びシャーレ等の細胞培養用の容器100に移し、再び細胞Cの培養を行っていた。尚、上述の如き培地交換は、例えば、特許文献1においても記載されている。
【0005】
【特許文献1】
特許第2771424号公報(第1−2頁)
【0006】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、従来の方法による培地交換では、培養用の容器100から遠沈管101に細胞Cが分散された細胞懸濁溶液を移し、遠心を行い、その後、新たな培地に細胞Cを懸濁させ、再度培養用の容器100に移し、培養を継続していた。そのため、培地交換や継代において、少なくとも2度、細胞Cを懸濁溶液の状態で容器交換を行う必要がある。
【0007】
容器を移し替える際に、雑菌が混入するおそれが高いため、細胞Cにコンタミネーション(雑菌による汚染)が発生する危険性があった。また、容器の移し替えにより、細胞C自体に悪影響を及ぼし、培地交換後において、細胞の生存率が低下する問題があった。
【0008】
更にまた、上述の如く培地交換を行う際に、付着培養細胞Cは、トリプシンなどのタンパク融解酵素を用いて培養容器から剥離されるが、係る方法によっても細胞Cが損傷するため、培地交換後における細胞の生存率の低下を招いていた。
【0009】
そこで、本発明は、従来の技術的課題を解決するために成されたものであり、コンタミネーションの発生及び培養細胞の損傷を極力防止することができる細胞の遠心分離方法を提供するものである。
【0010】
【課題を解決するための手段】
本発明の細胞の遠心分離方法は、培地が漏出することの無いガス透過膜を有した培養容器を用い、当該容器内において密閉状態にて細胞を付着培養した後、容器ごと遠心分離を行い、細胞を遠沈させることを特徴とする。
【0011】
本発明によれば、培地が漏出することのないガス透過膜を有した培養容器を用い、当該容器内において密閉状態にて細胞を付着培養した後、容器ごと遠心分離を行い、細胞を遠沈させるので、容器を交換することなく、細胞のみを回収することができるようになる。
【0012】
これにより、細胞の培養時における培地の交換に際して、容器を交換することなく細胞と培地とを分離することができ、衛生的に培地の交換を行うことができるようになる。そのため、コンタミネーション(雑菌汚染)の発生を極力低減することができる。
【0013】
また、容器交換及び細胞の培養容器からの剥離時において生じる細胞の損傷を回避することができるようになり、細胞の死滅率も低下させることができる。これにより、培養実験の効率化を図ることができるようになる。
【0014】
請求項2の発明の遠心分離装置は、請求項1の方法を実現する培養容器を保持し、回転させることにより、前記容器内の細胞を遠沈させることを特徴とする。
【0015】
請求項2の発明の遠心分離装置によれば、請求項1の方法を実現する培養容器を保持し、回転させることにより、容器内の細胞を遠沈させるので、容易に、請求項1の方法における培養容器を用いて容器内の細胞の遠沈を行うことができるようになる。そのため、容易に請求項1の方法を実現することができるようになる。
【0016】
【発明の実施の形態】
次に、図面に基づき本発明の実施の形態を詳述する。図1は本発明に使用する細胞培養用の容器(培養容器)10の斜視図、図2は図1の培養容器10のガス透過膜12−ガス透過膜12間の横断面図、図3は本発明の細胞の遠心分離方法を適用した培地交換の手順を示した流れ図である。
【0017】
本実施例において用いられる培養容器10は、図1に示す如く2枚のガス透過膜12、12と、このガス透過膜12、12の外周を連結する枠体14とから構成されている。2枚のガス透過膜12、12は、図2に示す如く、所定間隔を存して対峙しており、このガス透過膜12、12の外周は枠体14にて囲繞されているため、ガス透過膜12、12の間には密閉空間16が形成される。
【0018】
また、枠体14には、例えば、一側面に外部と密閉空間16とを連通するアクセスポート18、18が、複数(本実施例では、二箇所)形成されている。このアクセスポート18は、通常は外部と密閉空間16とが連通しないように密閉空間16を密閉している。
【0019】
また、本実施例におけるガス透過膜12、12は厚さ100μmのポリエチレンの膜により構成されており、この膜は図2に示すように培地や細胞C等の液体を通さずに、二酸化炭素(CO2)や酸素(O2)等の気体を自在に通すことができるものである。従って、ガス透過膜12、12間に培地を注入しても当該培地及び細胞Cは、漏出しない。
【0020】
以上の構成により、付着系の培養細胞Cを培養する際には、先ず、培養容器10の密閉空間16内に当該細胞Cを含有する培地を注入する。かかる場合には、細胞Cを含有する培地を収容した図示しない注入器を枠体14に形成されたアクセスポート18に差し込み、外部から密閉空間16に培地等を注入する。尚、培地等を注入した後は、アクセスポート18から前記注入器を抜くことによりアクセスポート18は自閉し、密閉空間16は外部と遮断される。
【0021】
これにより、密閉空間16内では、目的細胞Cはガス透過膜12、12それぞれの内表面に図2に示す如く付着した状態で二次元平面的に増殖し、培養される。
【0022】
次に、本発明の細胞の遠心分離方法を適用した培地交換の手順を図3を用いて説明する。上述の如くガス透過膜12、12の内表面に細胞Cが二次元平面的に付着して増殖した培養容器10(図3の上段左側に示す。)を、遠心分離装置Sに固定する(図3の上段右側に示す。)。ここで、遠心分離装置Sは、前記培養容器10を係脱自在に保持することが可能な図示しない容器保持部が複数設けられているものである。そして、この遠心分離装置Sは、例えば、当該容器保持部を水平方向に回転可能とすることにより、保持された培養容器を遠心させることができるものとする。
【0023】
そして、上述の如き遠心分離装置Sに固定された培養容器10は、当該遠心分離装置Sが運転されることにより、培養容器10のガス透過膜12に付着した細胞Cは、遠心分離装置Sの遠心力によって、剥離され、培養容器10の特定部位、即ち、本実施例では、培養容器10の下隅部に遠沈される。
【0024】
これにより、培養容器10から細胞Cを他の容器(遠心用の容器)に移すことなく、細胞Cを遠沈させ、細胞Cのみを回収することができるようになる。
【0025】
その後、枠体14に形成されたアクセスポート18に例えば空の注入器を差し込み、密閉空間16内において細胞Cと分離された培地(上清)を注入器内に抜き出す。そして、新たな培地が充填された注入器をアクセスポート18に差し込み、密閉空間16内に当該培地を注入する。
【0026】
そして、当該培養容器10を振ることにより、密閉空間16内では、新たな培地に細胞Cが懸濁され(図3の下段中央に示す。)、再び、細胞Cの培養を継続することができるようになる(図3の下段右側に示す。)。
【0027】
これにより、上述の如く培地と細胞Cとを分離する遠心作業を、培養を行う培養容器10のまま行うことができるため、衛生的に培地の交換や継代を行うことができるようになる。そのため、コンタミネーション(殺菌汚染)の発生を極力低減することができるようになり、培地交換後の細胞Cの死滅率を低減することができるようになる。
【0028】
また、本発明による細胞Cの付着壁(本実施例では、ガス透過膜12の内表面)からの剥離は、遠心力により行われるため、トリプシンなどのタンパク融解酵素による生化学的な剥離や、剥離手段としてのラバー等による物理的な剥離による細胞Cの損傷を回避することができるようになる。そのため、より一層、細胞Cの死滅率を低減させることができ、培養実験の効率化を図ることができるようになる。
【0029】
また、本実施例において、培養容器10に密閉された培地等は、当該容器10ごと保持し回転させることができる遠心分離装置Sにより遠心分離されるため、より一層、容易に細胞Cの剥離及び細胞Cと培地との分離を行うことができるようになる。
【0030】
尚、実施例で使用した容器はそれに限定されるものでは無く、本発明を実施可能なものであれば、その形態は限定されるものではない。
【0031】
【発明の効果】
以上詳述した如く本発明によれば、培地が漏出することのないガス透過膜を有した培養容器を用い、当該容器内において密閉状態にて細胞を付着培養した後、容器ごと遠心分離を行い、細胞を遠沈させるので、容器を交換することなく、細胞のみを回収することができるようになる。
【0032】
これにより、細胞の培養時における培地の交換に際して、容器を交換することなく細胞と培地とを分離することができ、衛生的に培地の交換を行うことができるようになる。そのため、コンタミネーション(雑菌汚染)の発生を極力低減することができる。
【0033】
また、容器交換及び細胞の培養容器からの剥離時において生じる細胞の損傷を回避することができるようになり、細胞の死滅率も低下させることができる。これにより、培養実験の効率化を図ることができるようになる。
【0034】
請求項2の発明の遠心分離装置によれば、請求項1の方法を実現する培養容器を保持し、回転させることにより、容器内の細胞を遠沈させるので、容易に、請求項1の方法における培養容器を用いて容器内の細胞の遠沈を行うことができるようになる。そのため、容易に請求項1の方法を実現することができるようになる。
【図面の簡単な説明】
【図1】本発明に使用する細胞培養用の容器の斜視図である。
【図2】本発明に使用する容器10のガス透過膜−ガス透過膜間の横断面図である。
【図3】本発明の付着系の培養細胞の遠心分離方法を適用した培地交換の手順を示した流れ図である。
【図4】従来の付着系の培養細胞の培地交換の手順を示した流れ図である。
【符号の説明】
S 遠心分離装置
C 細胞
10 容器
12 ガス透過膜
14 枠体
16 密閉空間
18 アクセスポート
Claims (2)
- 培地が漏出することの無いガス透過膜を有した培養容器を用い、当該容器内において密閉状態にて細胞を付着培養した後、前記容器ごと遠心分離を行い、前記細胞を遠沈させることを特徴とする細胞の遠心分離方法。
- 前記培養容器を保持し、回転させることにより、前記容器内の細胞を遠沈させることを特徴とする請求項1の方法を実現する遠心分離装置。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2002275168A JP2004105139A (ja) | 2002-09-20 | 2002-09-20 | 細胞の遠心分離方法及びその遠心分離装置 |
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JP2002275168A JP2004105139A (ja) | 2002-09-20 | 2002-09-20 | 細胞の遠心分離方法及びその遠心分離装置 |
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JP2004105139A true JP2004105139A (ja) | 2004-04-08 |
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JP2002275168A Pending JP2004105139A (ja) | 2002-09-20 | 2002-09-20 | 細胞の遠心分離方法及びその遠心分離装置 |
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JP (1) | JP2004105139A (ja) |
Cited By (4)
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JP2014083002A (ja) * | 2012-10-24 | 2014-05-12 | Mitsubishi Gas Chemical Co Inc | 密閉容器、及びそれを用いた細胞の輸送及び/又は保管方法 |
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