JP5101819B2 - 細胞培養装置 - Google Patents
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Description
{ステップ1}:培地注入
ピンチ弁30,32,34を開き、ポンプ52を動作させて、培養皿2aのみに培地を注入する。このとき培養皿2b,2c,2dには培地を注入しない。
{ステップ2}:細胞液注入
培地などと共に細胞を入れたシリンジ10を、フィルム12で覆った液溜め14に穿刺して、細胞液を注入する。その後、ピンチ弁34を閉じて、ピンチ弁16を開き、ポンプ52を動作させ、培養皿2aに細胞液を入れる。
所定期間、例えば3日程、静置して培養する。
{ステップ4}:培地交換
培地中に溶出する細胞の代謝物質、及び培地の栄養分補給のため、定期的に行うステップである。3日〜7日おきに実施し、回数は限定しない。
培地排出ピンチ弁42,62を開き、ポンプ60を動作させて、培養皿2a内部の培地を排出する。
培地注入ピンチ弁30,32,34を開き、ポンプ52を動作させて、培地を注入する。
{ステップ5}:培養
所定期間、例えば3日程、静置して培養する。
培地排出ピンチ弁42,62を開き、ポンプ60を動作させて、培養皿2a内部の培地を排出する。
洗浄液注入ピンチ弁26,32,34を開き、ポンプ52を動作させて、洗浄液を培養皿2aに注入する。
洗浄液排出ピンチ弁42,62を開き、ポンプ60を動作させて、洗浄液を排出する。
なお、このプロセスは次のステップで用いる剥離剤の効果を高めるためのもので、必要なければ省略してもよい。
剥離剤注入ピンチ弁28,32,34を開き、ポンプ52を動作させて、剥離剤を培養皿2aに注入する。
培地注入(中和)ピンチ弁30,32,34を開き、ポンプ52を動作させて、培地を培養皿2aに注入する。なお、このプロセスは培地に剥離剤の効果を停止するものが添加されている場合を示す。この剥離剤の効果を停止するものが添加されていない場合は、別途、輸液バッグに剥離剤の効果を停止する薬剤を入れ、剥離剤の隣に組み込むことで、送液系を実現できる。
細胞移送ピンチ弁34,36,38,40を開き、ポンプ52を上記ステップ1の逆方向に動作させ、培養皿2a内の細胞液をピンチ弁34の方向に排出する。そして、ポンプ54,56,58を動作させて培養皿2b,2c,2d にこの細胞液を移送する。
培地排出ピンチ弁42,44,46,48,62を開き、ポンプ60を駆動して、各培養皿の培地を排出する。なお、この動作は、移送された細胞が培養皿に接着してから行う(例えば数時間後)。
培地注入ピンチ弁30,32,34,36,38,40を開き、ポンプ52,54,56,58を動作させて、各培養皿に培地を注入する。
所定期間、例えば3日程、静置して培養する。
{ステップ8}:培地交換
培地中に溶出する細胞の代謝物質、及び培地の栄養分補給のため、定期的に行うステップである。3日〜7日おきに実施し、回数には限定しない。
培地排出ピンチ弁42,44,46,48,62を開き、ポンプ60を動作させて、培養皿内部の培地を排出する。
培地注入ピンチ弁30,32,34,36,38,40を開き、ポンプ52,54,56,58を動作させて、培地を注入する。
所定期間、例えば3日程、静置して培養する。
{ステップ10}:細胞回収
培地排出ピンチ弁42,44,46,48,62を開き、ポンプ60を動作させて、各培養皿の培地を排出する。
洗浄液注入ピンチ弁26,32,34,36,38,40を開き、ポンプ52,54,56,58を動作させて、洗浄液を注入する。なお、このプロセスは次のステップで用いる剥離剤の効果を高めるためのもので、必要なければ省略してもよい。
洗浄液排出ピンチ弁42,44,46,48,62を開き、ポンプ60を動作させて、洗浄液を排出する。
剥離剤注入ピンチ弁28,32,34,36,38,40を開き、ポンプ52,54,56,58を動作させて、各培養皿に剥離剤を注入する。
培地注入(中和)ピンチ弁30,32,34,36,38,40を開き、ポンプ52,54,56,58を動作させて、各培養皿に培地を注入する。
細胞回収ピンチ弁42,44,46,48,64を開き、ポンプ60を動作させて、細胞液を輸液バッグ66に移送する。なお、それぞれのステップにおいて稼動しているピンチ弁とポンプ以外のピンチ弁とポンプは稼動していなく、ピンチ弁は閉じられており、ポンプは動作していない。
{ステップ11}:培地注入
ピンチ弁30,32,34,36,38,40を開き、ポンプ52,54,56,58を動作させて、培養皿2a,2b,2c,2dに培地を注入する。
{ステップ12}:細胞液注入
培地などと共に細胞を入れたシリンジ10を、フィルム12で覆った液溜め14に穿刺して、細胞液を注入する。その後、ピンチ弁16,34,36,38を開き、ポンプ52,54,56,58を動作させ、培養皿2a,2b,2c,2dに細胞液を入れる。
{ステップ13}:培養
所定期間、例えば3日程、静置して培養する。
{ステップ14}:培地交換
培地中に溶出する細胞の代謝物質、及び培地の栄養分補給のため、定期的に行うステップである。3日〜7日おきに実施し、回数は限定しない。
{ステップ15}:培養
所定期間、例えば3日程、静置して培養する。
{ステップ16}:細胞回収
培地排出ピンチ弁42,44,46,48,62を開き、ポンプ60を動作させて、各培養皿の培地を排出する。
Claims (1)
- 細胞を培養する複数の培養皿と、細胞液を所定の培養皿に選択的に移送させる制御手段とを備え、
前記制御手段は、前記複数の培養皿の各々に接続されるチューブで、前記培養皿同士の間を連結させるとともに、前記チューブに各培養皿に対応させて弁を配置させ、さらに、前記各弁とそれに対応する前記各培養皿との間にポンプを配置させて、前記弁の開閉と前記ポンプの駆動との制御で、前記選択された培養皿で培養された細胞液を、前記チューブを介して他の培養皿に移送させ、
前記複数の培養皿は、密着せずに隙間を開けつつも、各培養皿の表面を重ねるように積層し、
前記チューブは、前記培養皿の底面に液体を流入させたり排出させたりする中空のアタッチメントに接続され、該アタッチメントは、前記培養皿の側面に形成されることを特徴とする細胞培養装置。
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