JP7016371B2 - 接着細胞培養基質サンプリングデバイス - Google Patents
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Description
なし
本出願は、2016年11月9日に出願された米国仮特許出願番号第62/4119613号からの優先権を主張しており、その内容は、参考として本明細書に参考として援用される。
なし
該当なし
当該技術分野は、懸濁細胞培養または接着細胞培養のいずれかを使用する大規模細胞培養を教示する。一般的に、Merten, Otto-Wilhelmら、Manufacturing Of Viral Vectors For Gene Therapy: Part I-Upstream Processing、2 Pharmaceutical Bioprocessing、183~203頁(2014年)を参照のこと。懸濁細胞培養は、例えば、液体細胞培養培地中で自由に浮遊している細胞を培養することを伴う。あるいは、マイクロビーズに付着した細胞を培養し、次に、培地中に自由に浮遊させる場合もある。本特許の目的のために、本発明者は、「懸濁」細胞培養という用語を、これらの細胞培養アプローチの両方を包含するものとして使用する。
本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
(項目1)
バイオリアクター容器外部およびバイオリアクター容器内部を画定するバイオリアクター容器壁を有するバイオリアクター容器であって、前記バイオリアクター容器内部が、液体細胞培養培地および接着細胞培養用の固体基質を無菌的に含有することができる、バイオリアクター容器
を有する接着細胞培養バイオリアクターであって、
前記バイオリアクター容器壁が、前記バイオリアクター容器外部と前記バイオリアクター容器内部の間の連通を可能にするために、バイオリアクター容器壁を通して配置されているポートを有し、
前記ポートが、サンプリングデバイス筐体外部およびサンプリングデバイス筐体内部を有するサンプリングデバイス筐体に無菌的に接続されており、前記サンプリングデバイス筐体は、前記サンプリングデバイス筐体内部が前記バイオリアクター容器内部と無菌的に連通できるように前記ポートに配置されており、
前記サンプリングデバイス筐体内部が、前記バイオリアクター容器内部に含有される接着細胞培養用の固体基質の試料を得ることができる固体基質サンプリングデバイスを無菌的に収容し、
前記固体基質サンプリングデバイスが、前記サンプリングデバイス筐体内部に配置されており、それによって、前記固体基質サンプリングデバイスが、前記バイオリアクター容器の内部に含有される接着細胞培養用の固体基質の試料を無菌的に得ることができる、接着細胞培養バイオリアクター。
(項目2)
前記サンプリングデバイスが、ピンセット、鉗子、吸引デバイスおよびフックからなる群から選択される、項目1に記載のバイオリアクター。
(項目3)
前記サンプリングデバイス筐体がチューブを含み、前記サンプリングデバイスがピンセットを含む、項目2に記載のバイオリアクター。
(項目4)
前記サンプリングデバイス筐体がバッグを含み、前記サンプリングデバイスが異物鉗子を含む、項目2に記載のバイオリアクター。
(項目5)
前記サンプリングデバイス筐体の外部に配置されている磁石をさらに含み、前記磁石が、前記サンプリングデバイス筐体の内部に配置されている前記サンプリングデバイスを操作することができる、項目1に記載のバイオリアクター。
(項目6)
前記バイオリアクター容器内部と前記サンプリングデバイス筐体内部との間に配置されている膜をさらに含む、項目1に記載のバイオリアクター。
(項目7)
前記サンプリングデバイス筐体を、前記ポートから無菌的に取り外すことができる、項目1に記載のバイオリアクター。
(項目8)
バイオリアクター容器の内部に含有される接着細胞培養用の固体基質の試料を無菌的に得るための装置であって、前記装置が、
サンプリングデバイス筐体外部およびサンプリングデバイス筐体内部を有するサンプリングデバイス筐体であって、前記サンプリングデバイス筐体内部が接着細胞培養バイオリアクターのポートを介してバイオリアクター容器内部と無菌的に連通できるように、前記ポートにおいて使い捨てできるように構成されているサンプリングデバイス筐体
を含み、
前記サンプリングデバイス筐体内部が、前記バイオリアクター容器内部に含有される接着細胞培養用の固体基質の試料を得ることができる固体基質サンプリングデバイスを収容し、
前記固体基質サンプリングデバイスが、前記サンプリングデバイス筐体内部に配置されており、それによって、前記固体基質サンプリングデバイスが、前記バイオリアクター容器の内部に含有される接着細胞培養用の固体基質の試料を無菌的に得ることができる、装置。
(項目9)
前記サンプリングデバイスが、ピンセット、鉗子、吸引デバイスおよびフックからなる群から選択される、項目8に記載の装置。
(項目10)
前記サンプリングデバイス筐体がチューブを含み、前記サンプリングデバイスがピンセットを含む、項目9に記載の装置。
(項目11)
前記サンプリングデバイス筐体がバッグを含み、前記サンプリングデバイスが異物鉗子を含む、項目9に記載のバイオリアクター。
(項目12)
接着細胞培養基質の試料を無菌的に採取するための方法であって、
項目1に記載のバイオリアクターを得るステップであって、前記バイオリアクター容器内部が液体細胞培養培地および接着細胞培養用の固体基質を無菌的に含有する、ステップと、次いで、
前記サンプリングデバイスを使用して、前記接着細胞培養用の固体基質の試料を無菌的に得るステップと
を含む方法。
(項目13)
接着細胞培養基質の試料を無菌的に採取するための方法であって、
項目7に記載のバイオリアクターを得るステップであって、前記バイオリアクター容器内部が液体細胞培養培地および接着細胞培養用の固体基質を無菌的に含有する、ステップと、次いで、
前記サンプリングデバイスを使用して、前記接着細胞培養用の固体基質の試料を無菌的に得るステップと、次いで、
前記サンプリングデバイス筐体を前記ポートから無菌的に取り外すステップと
を含む方法。
(項目14)
細胞培養生成物を生成するための方法であって、
項目1に記載のバイオリアクターを得るステップであって、前記バイオリアクター容器内部が液体細胞培養培地と接着細胞培養用の固体基質とを無菌的に含有する、ステップと、次いで、
前記液体細胞培養培地中で細胞培養物を培養するステップと、次いで、
前記サンプリングデバイスを使用して、前記接着細胞培養用の固体基質の試料を無菌的に得るステップと、次いで、
前記試料を分析して前記細胞培養生成物の存在を確認するステップと
を含む方法。
(項目15)
細胞培養生成物を生成するための方法であって、
項目7に記載のバイオリアクターを得るステップであって、前記バイオリアクター容器内部が液体細胞培養培地と接着細胞培養用の固体基質とを無菌的に含有する、ステップと、次いで、
前記液体細胞培養培地中で細胞培養物を培養するステップと、次いで、
前記サンプリングデバイスを使用して、前記接着細胞培養用の固体基質の試料を無菌的に得るステップと、次いで、
前記試料を分析して前記細胞培養生成物の存在を確認するステップと
を含む方法。
(項目16)
項目14のプロセスによって得られる細胞培養生成物。
(項目17)
項目15のプロセスによって得られる細胞培養生成物。
本発明者の装置を試験するために、標準的なiCELLis(商標)500単回使用バイオリアクターにおいて評価した。図3~6としてこの研究の写真を提供する。サンプリングの準備期中、サンプリングデバイス(この例ではピンセット)が挿入され、最初に、サンプリングチップがバイオリアクターのポートに対応する直径を有するサンプリングデバイス筐体の第1の末端に挿入される。これを図3に示す。3/4インチのガス排出ポートに適合する3/4インチのチューブを使用した。この例では、チューブの第1の末端に設置したアダプター(MPXアダプター)を使用した。チューブの第2の末端を密封してもよく、またはアダプターを第2の末端に設置してもよい。次いで、アダプターに対する適切なキャップ(この場合には、MPXアダプターに適合するMPXキャップ)を有するこのサンプリング装置をオートクレーブした。装置をオートクレーブした後、ラミナーフローフード内で、無菌的方式で、MPXキャップを使用して筐体を閉じた。
Claims (17)
- バイオリアクター容器外部およびバイオリアクター容器内部を画定するバイオリアクター容器壁を有するバイオリアクター容器であって、前記バイオリアクター容器内部が、液体細胞培養培地および接着細胞培養用の固体基質を無菌的に含有することができる、バイオリアクター容器
を有する接着細胞培養バイオリアクターであって、
前記バイオリアクター容器壁が、前記バイオリアクター容器外部と前記バイオリアクター容器内部の間の連通を可能にするために、バイオリアクター容器壁を通して配置されているポートを有し、
前記ポートが、サンプリングデバイス筐体外部およびサンプリングデバイス筐体内部を有するサンプリングデバイス筐体に無菌的に接続されており、前記サンプリングデバイス筐体は、前記サンプリングデバイス筐体内部が前記バイオリアクター容器内部と無菌的に連通できるように前記ポートに配置されており、
前記サンプリングデバイス筐体内部が、前記バイオリアクター容器内部に含有される接着細胞培養用の固定床から固体基質の試料を得ることができる固体基質サンプリングデバイスを無菌的に収容し、
前記固体基質サンプリングデバイスが、前記サンプリングデバイス筐体内部に配置されており、それによって、前記固体基質サンプリングデバイスが、前記バイオリアクター容器の内部に含有される接着細胞培養用の固定床から固体基質の試料を無菌的に得ることができる、接着細胞培養バイオリアクター。 - 前記サンプリングデバイスが、ピンセット、鉗子、吸引デバイスおよびフックからなる群から選択される、請求項1に記載のバイオリアクター。
- 前記サンプリングデバイス筐体がチューブを含み、前記サンプリングデバイスがピンセットを含む、請求項2に記載のバイオリアクター。
- 前記サンプリングデバイス筐体がバッグを含み、前記サンプリングデバイスが異物鉗子を含む、請求項2に記載のバイオリアクター。
- 前記サンプリングデバイス筐体の外部に配置されている磁石をさらに含み、前記磁石が、前記サンプリングデバイス筐体の内部に配置されている前記サンプリングデバイスを操作することができる、請求項1に記載のバイオリアクター。
- 前記バイオリアクター容器内部と前記サンプリングデバイス筐体内部との間に配置されている膜をさらに含む、請求項1に記載のバイオリアクター。
- 前記サンプリングデバイス筐体を、前記ポートから無菌的に取り外すことができる、請求項1に記載のバイオリアクター。
- バイオリアクター容器の内部に含有される接着細胞培養用の固定床から固体基質の試料を無菌的に得るための装置であって、前記装置が、
サンプリングデバイス筐体外部およびサンプリングデバイス筐体内部を有するサンプリングデバイス筐体であって、前記サンプリングデバイス筐体内部が接着細胞培養バイオリアクターのポートを介してバイオリアクター容器内部と無菌的に連通できるように、前記ポートにおいて使い捨てされるように構成されているサンプリングデバイス筐体
を含み、
前記サンプリングデバイス筐体内部が、前記バイオリアクター容器内部に含有される接着細胞培養用の前記固定床から固体基質の試料を得ることができる固体基質サンプリングデバイスを収容し、
前記固体基質サンプリングデバイスが、前記サンプリングデバイス筐体内部に配置されており、それによって、前記固体基質サンプリングデバイスが、前記バイオリアクター容器の内部に含有される接着細胞培養用の前記固定床から固体基質の試料を無菌的に得ることができる、装置。 - 前記サンプリングデバイスが、ピンセット、鉗子、吸引デバイスおよびフックからなる群から選択される、請求項8に記載の装置。
- 前記サンプリングデバイス筐体がチューブを含み、前記サンプリングデバイスがピンセットを含む、請求項9に記載の装置。
- 前記サンプリングデバイス筐体がバッグを含み、前記サンプリングデバイスが異物鉗子を含む、請求項9に記載のバイオリアクター。
- 接着細胞培養基質の試料を無菌的に採取するための方法であって、
請求項1に記載のバイオリアクターを得るステップであって、前記バイオリアクター容器内部が液体細胞培養培地および接着細胞培養用の固体基質を無菌的に含有する、ステップと、次いで、
前記サンプリングデバイスを使用して、前記接着細胞培養用の前記固定床から固体基質の試料を無菌的に得るステップと
を含む方法。 - 接着細胞培養基質の試料を無菌的に採取するための方法であって、
請求項7に記載のバイオリアクターを得るステップであって、前記バイオリアクター容器内部が液体細胞培養培地および接着細胞培養用の固体基質を無菌的に含有する、ステップと、次いで、
前記サンプリングデバイスを使用して、前記接着細胞培養用の前記固定床から固体基質の試料を無菌的に得るステップと、次いで、
前記サンプリングデバイス筐体を前記ポートから無菌的に取り外すステップと
を含む方法。 - 細胞培養生成物を生成するための方法であって、
請求項1に記載のバイオリアクターを得るステップであって、前記バイオリアクター容器内部が液体細胞培養培地と接着細胞培養用の固体基質とを無菌的に含有する、ステップと、次いで、
前記液体細胞培養培地中で細胞培養物を培養するステップと、次いで、
前記サンプリングデバイスを使用して、前記接着細胞培養用の前記固定床から固体基質の試料を無菌的に得るステップと、次いで、
前記試料を分析して前記細胞培養生成物の存在を確認するステップと
を含む方法。 - 細胞培養生成物を生成するための方法であって、
請求項7に記載のバイオリアクターを得るステップであって、前記バイオリアクター容器内部が液体細胞培養培地と接着細胞培養用の固体基質とを無菌的に含有する、ステップと、次いで、
前記液体細胞培養培地中で細胞培養物を培養するステップと、次いで、
前記サンプリングデバイスを使用して、前記接着細胞培養用の前記固定床から固体基質の試料を無菌的に得るステップと、次いで、
前記試料を分析して前記細胞培養生成物の存在を確認するステップと
を含む方法。 - 前記サンプリングデバイスが、吸引デバイスを含む、請求項2に記載のバイオリアクター。
- 前記サンプリングデバイスが、吸引デバイスを含む、請求項8に記載の装置。
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