JP2015514218A - 核酸シークエンシングに有用な統合化した読取りヘッド及び流体カートリッジ - Google Patents
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Abstract
Description
該オペレーション実施ステップと、を有する。
Claims (101)
- 検出装置において、
(a) 複数個の顕微蛍光測定器を有するキャリッジであって、
前記顕微蛍光測定器のそれぞれは広視野画像検出のために構成した対物レンズを含み、
前記複数個の顕微蛍光測定器は、共通平面における複数の広視野画像を同時に取得するよう配置し、また
前記広視野画像のそれぞれは前記共通平面の異なるエリアからのものとする、
該キャリッジと、
(b) 前記共通平面に平行である少なくとも1つの方向に前記キャリッジを移動するよう構成した並進ステージと、及び
(c) 前記共通平面内に基板を保持するよう構成したサンプルステージと、
を備える、検出装置。 - 請求項1記載の検出装置において、前記顕微蛍光測定器のそれぞれは、さらに、専用の自動合焦モジュールを有する、検出装置。
- 請求項2記載の検出装置において、前記自動合焦モジュールは、検出器及びアクチュエータを有し、前記アクチュエータは、前記共通平面に対する前記顕微蛍光測定器の焦点を変化させるよう構成し、また前記検出器は前記アクチュエータの移動を管理するよう構成する、検出装置。
- 請求項3記載の検出装置において、前記検出器は、さらに、前記広視野画像を取得するよう構成する、検出装置。
- 請求項4記載の検出装置において、前記検出器は、さらに、画像データを前記キャリッジの外部に配置した処理ユニットに出力するよう構成する、検出装置。
- 請求項3記載の検出装置において、前記検出器は前記自動合焦モジュールに専用化し、また前記顕微蛍光測定器は、画像データを前記キャリッジの外部に配置した処理ユニットに出力するよう構成した第2検出器を有する、検出装置。
- 請求項2記載の検出装置において、該検出装置における第1顕微蛍光測定器のための前記自動合焦モジュールは、該検出装置における第2顕微蛍光測定器のための第2自動合焦モジュールからのデータを統合化するよう構成し、これにより、前記自動合焦モジュールは、第1顕微蛍光測定器の焦点位置及び第2顕微蛍光測定器の焦点位置に基づいて、前記第1顕微蛍光測定器の焦点を変化させる、検出装置。
- 請求項1又は2記載の検出装置において、前記顕微蛍光測定器それぞれは、さらに、ビームスリッタ及び検出器を有し、前記ビームスリッタは、励起放射源からの励起放射を前記対物レンズに指向させ、また前記対物レンズからの発光放射を前記検出器に指向させる、検出装置。
- 請求項8記載の検出装置において、前記顕微蛍光測定器それぞれは、さらに、前記励起放射源を有する、検出装置。
- 請求項9記載の検出装置において、前記励起放射源は、前記励起放射を、前記複数個の顕微蛍光測定器における個別顕微蛍光測定器の前記対物レンズに指向させ、各顕微蛍光測定器は、別個の励起放射源を有する、検出装置。
- 請求項9記載の検出装置において、前記キャリッジは、さらに、前記励起放射源に熱接触するヒートシンクを有する、検出装置。
- 請求項11記載の検出装置において、前記ヒートシンクは、前記キャリッジにおける単一放射源に熱接触する、検出装置。
- 請求項11記載の検出装置において、前記ヒートシンクは、前記キャリッジにおける複数個の放射源に熱接触する、検出装置。
- 請求項8記載の検出装置において、前記励起放射源は、励起放射を、前記複数個の顕微蛍光測定器における2個又はそれ以上の顕微蛍光測定器の対物レンズに指向させ、したがって、前記2個又はそれ以上の顕微蛍光測定器は励起放射源を共有する、検出装置。
- 請求項8記載の検出装置において、前記顕微蛍光測定器のそれぞれは、さらに、少なくとも2個の励起放射源を有する、検出装置。
- 請求項8記載の検出装置において、前記励起放射源は、LEDを有する、検出装置。
- 請求項1,2又は8記載の検出装置において、前記顕微蛍光測定器それぞれにおける対物レンズは、0.2〜0.5の範囲内の開口数を有する、検出装置。
- 請求項1,2,8又は17記載の検出装置において、前記顕微蛍光測定器それぞれは、50ミクロン未満の距離で離間する特徴を区別するのに十分な解像度で検出するよう構成する、検出装置。
- 請求項1,2,8,17又は18記載の検出装置において、前記顕微蛍光測定器それぞれの広視野画像は、少なくとも1mm2の面積を有する、検出装置。
- 請求項1,2,8,17,18又は19記載の検出装置において、前記キャリッジは、前記顕微蛍光測定器相互間の側方移動を防止する、検出装置。
- 請求項20記載の検出装置において、前記顕微蛍光測定器は、前記キャリッジに共成形する、検出装置。
- 請求項1,2,8,17,18,19又は20記載の検出装置において、前記キャリッジは、少なくとも4個の顕微蛍光測定器を有し、前記少なくとも4個の顕微蛍光測定器の前記対物レンズは、少なくとも2列に配列する、検出装置。
- 請求項22記載の検出装置において、前記少なくとも4個の顕微蛍光測定器の前記対物レンズは、六方密配列とする、検出装置。
- 請求項22記載の検出装置において、前記基板は少なくとも4個の平行なチャネルを有し、また前記対物レンズそれぞれは、前記少なくとも4個の平行なチャネルのうち唯一のチャネルを画像化するよう配置する、検出装置。
- 請求項24記載の検出装置において、前記対物レンズそれぞれは、前記唯一のチャネルの一部分を画像化するよう配置する、検出装置。
- 請求項22記載の検出装置において、前記キャリッジは少なくとも6個の顕微蛍光測定器を有し、前記少なくとも6個の顕微蛍光測定器の前記対物レンズは、少なくとも2列に配列し、また前記少なくとも6個の顕微蛍光測定器の前記対物レンズは、六方密配列とする、検出装置。
- 請求項26記載の検出装置において、前記基板は少なくとも6個の平行なチャネルを有し、また前記対物レンズそれぞれは、前記少なくとも6個の平行なチャネルのうち唯一のチャネルの一部分を画像化するよう配置する、検出装置。
- 請求項22記載の検出装置において、前記顕微蛍光測定器それぞれは、さらに、放射源、ビームスリッタ及び検出器を有し、前記ビームスリッタは、励起放射源からの励起放射を前記対物レンズに指向させ、また前記対物レンズからの発光放射を前記検出器に指向させ、前記励起放射及び前記発光放射は互いに直交する方向に指向する、検出装置。
- 請求項28記載の検出装置において、前記少なくとも4個の顕微蛍光測定器の前記放射源は、前記共通平面に対向する前記キャリッジの第1側面サイドに配置し、前記検出器のうち少なくとも2個の検出器は、前記第1側面サイドに直交しかつ前記共通平面に直交する前記キャリッジの第2側面サイドに配置し、また前記検出器のうち少なくとも2個の検出器は、前記第1側面サイドに直交しかつ前記共通平面に直交する前記キャリッジの第3側面サイドに配置する、検出装置。
- 請求項28記載の検出装置において、前記少なくとも4個の検出器は、前記共通平面に対向する前記キャリッジの第1側面サイドに配置し、前記放射源のうち少なくとも2個の放射源は、前記第1側面サイドに直交しかつ前記共通平面に直交する前記キャリッジの第2側面サイドに配置し、また前記放射源のうち少なくとも2個の放射源は、前記第1側面サイドに直交しかつ前記共通平面に直交する前記キャリッジの第3側面サイドに配置する、検出装置。
- 請求項1,2,8,17,18,19又は20記載の検出装置において、前記キャリッジは、少なくとも4個の顕微蛍光測定器を有し、前記少なくとも4個の顕微蛍光測定器の前記対物レンズは、1列に配列する、検出装置。
- 請求項31記載の検出装置において、前記基板は少なくとも4個の平行なチャネルを有し、また前記対物レンズそれぞれは、前記少なくとも4個の平行なチャネルのうち唯一のチャネルを画像化するよう配置する、検出装置。
- 請求項32記載の検出装置において、前記対物レンズそれぞれは、前記唯一のチャネルの一部分を画像化するよう配置する、検出装置。
- 基板を画像化する方法において、
(a) 表面上に蛍光特徴を有する基板を準備するステップと、
(b) 複数個の顕微蛍光測定器を使用して前記表面における第1部分の複数の広視野画像を取得する画像取得ステップであって、
前記顕微蛍光測定器それぞれは、前記表面の異なる場所からの広視野画像を取得し、
前記複数個の顕微蛍光測定器はキャリッジに固定するものとした、該画像取得ステップと、
(c) 前記表面に平行な方向に前記キャリッジを並進移動させ、前記表面の第2部分のためにステップ(b)を繰返すステップと、
を有する、方法。 - 請求項34記載の方法において、前記表面の前記第1部分は、前記表面における複数の隣接エリアを含む、方法。
- 請求項34又は35記載の方法において、さらに、合焦技術を使用して、前記複数個の顕微蛍光測定器における各顕微蛍光測定器を個別に合焦するステップを有する、方法。
- 請求項36記載の方法において、前記合焦技術は、前記広視野画像を取得するのには用いない、少なくとも1個の専用検出器を使用する、方法。
- 請求項36記載の方法において、前記顕微蛍光測定器それぞれは、個別の自動合焦モジュールを有する、方法。
- 請求項38記載の方法において、前記顕微蛍光測定器それぞれは、広視野画像を取得し、また前記合焦技術の焦点を検出する画像検出器を有する、方法。
- 請求項36記載の方法において、前記複数個の顕微蛍光測定器における第1顕微蛍光測定器に使用される前記合焦技術は、前記複数個の顕微蛍光測定器における第2顕微蛍光測定器に使用される合焦技術からのデータを統合化し、これにより、第1顕微蛍光測定器の焦点位置及び第2顕微蛍光測定器の焦点位置に基づいて、前記第1顕微蛍光測定器の焦点を調整する、方法。
- 請求項34,35又は36記載の方法において、前記顕微蛍光測定器それぞれは、対物レンズ及び検出器を有し、前記広視野画像は、励起放射源からの励起放射を前記対物レンズ経由で前記表面に指向させ、また前記表面からの発光放射を前記対物レンズ経由で前記検出器に指向させることによって取得する、方法。
- 請求項41記載の方法において、前記顕微蛍光測定器それぞれは、さらに、前記励起放射を発生する励起放射源を有する、方法。
- 請求項41記載の方法において、単一励起放射源が、前記複数個の顕微蛍光測定器における少なくとも2個の顕微蛍光測定器に向けられる励起放射を発生する、方法。
- 請求項41記載の方法において、前記顕微蛍光測定器それぞれは、さらに、前記励起放射及び前記発光放射を互いに直交する方向に指向させるビームスリッタを有する、方法。
- 請求項34,35,36又は41記載の方法において、前記顕微蛍光測定器それぞれは、前記ステップ(b)で前記表面における少なくとも2つの広視野画像を取得し、前記少なくとも2つの広視野画像それぞれは、互いに異なる励起又は発光の波長で蛍光を検出する、方法。
- 請求項45記載の方法において、前記顕微蛍光測定器それぞれは、さらに、少なくとも2個の励起放射源を有し、前記少なくとも2つの広視野画像は、前記少なくとも2個の励起放射源からの互いに異なる波長の励起放射で前記表面を励起することによって取得する、方法。
- 請求項34,35,36,41又は45記載の方法において、前記蛍光特徴は、最も近接する隣接部の中心−中心間の平均間隔が50ミクロン未満であり、前記蛍光特徴は、広視野画像内で個別に解像される、方法。
- 請求項34,35,36,41,45又は47記載の方法において、前記顕微蛍光測定器それぞれは、少なくとも1mm2の面積の広視野画像を取得する、方法。
- 請求項34,35,36,41,45,47又は48記載の方法において、前記複数個の顕微蛍光測定器は少なくとも4個の顕微蛍光測定器とする、方法。
- 請求項49記載の方法において、前記顕微蛍光測定器それぞれは対物レンズを有し、前記対物レンズは少なくとも2列に配列し、また前記対物レンズは六方密配列とする、方法。
- 請求項50記載の方法において、前記基板は少なくとも4個の平行なチャネルを有し、また前記ステップ(b)で各対物レンズが取得した前記広視野画像は、前記4個の平行なチャネルにおける唯一のチャネルからのものとする、方法。
- 請求項50記載の方法において、前記少なくとも4個の顕微蛍光測定器は、前記少なくとも4個の平行なチャネルの広視野画像を同時に取得する、方法。
- 請求項49記載の方法において、前記複数個の顕微蛍光測定器は、それぞれが対物レンズを有する少なくとも6個の顕微蛍光測定器とし、前記対物レンズは少なくとも2列に配列し、また前記対物レンズは六方密配列とし、前記基板は少なくとも6個の平行なチャネルを有し、また前記ステップ(b)で各対物レンズが取得した前記広視野画像は、前記6個の平行なチャネルにおける唯一のチャネルからのものとする、方法。
- 請求項49記載の方法において、前記少なくとも4個の顕微蛍光測定器の前記対物レンズは、1列に配列する、方法。
- 請求項49記載の方法において、前記基板は少なくとも4個の平行なチャネルを有し、また前記対物レンズそれぞれが前記ステップ(b)で取得する広視野画像は、前記少なくとも4個の平行なチャネルのうち唯一のチャネルからのものである、方法。
- 請求項34,35,36,41,45,47,48又は49記載の方法において、前記複数の広視野画像は、前記ステップ(b)で同時に取得する方法。
- 請求項34,35,36,41,45,47,48,49又は56記載の方法において、前記ステップ(b)における各広視野画像の取得は、前記表面の第1部分の複数の広視野画像を取得するステップと、及び対応するピクセルからの信号を合算するステップとを含む、方法。
- 請求項34,35,36,41,45,47,48,49,56又は57記載の方法において、さらに、
(d) 前記表面の前記第1部分における第2複数広視野画像を取得する位置に前記キャリッジを復帰させるステップを有する、方法。 - 請求項58記載の方法において、さらに、前記ステップ(c)後かつ前記ステップ(d)前に、前記蛍光特徴を変更するステップを有し、前記第2複数広視野画像は、前記第1複数広視野画像とは異なるものである、方法。
- 請求項59記載の方法において、前記蛍光特徴は核酸を含み、前記変更ステップは、シークエンシング・バイ・シンセシス技術で核酸を変化させるステップを含む、方法。
- 請求項58記載の方法において、さらに、前記ステップ(d)前に前記ステップ(c)を複数回繰返すステップを有し、これにより、前記表面の少なくとも第3部分及び第4部分を画像化する、方法。
- 透光性表面、流入口及び流出口を有するフローセルと、及び
不透光性及び水性液体に対する不浸透性を有する材料で構成するハウジングと
を備える流体カートリッジであって、前記ハウジングは、
(i) サンプルリザーバと、
(ii) 前記サンプルリザーバと前記フローセルの前記流入口との間における流体ラインと、
(iii)前記フローセルの前記流入口を介して前記フローセルと流体連通する複数個の試薬リザーバと、
(iv) 前記リザーバと前記フローセルの前記流入口との間における流体連通を仲立ちするよう構成した少なくとも1個のバルブと、及び
(v) 前記サンプルリザーバ又は前記試薬リザーバからの液体を、前記フローセルの前記流入口経由で前記フローセルに移動させるよう構成した少なくとも1個の圧力源と、を保持し、
透光性の窓が前記ハウジングを中断し、かつ流入ポートが前記ハウジングを中断し、
前記流入ポートは前記サンプルリザーバに流体連通し、また
前記透光性表面は前記窓に配置する、
流体カートリッジ。 - 請求項62記載の流体カートリッジにおいて、前記試薬リザーバは、シークエンシング・バイ・シンセシス技術のための試薬を含む、流体カートリッジ。
- 請求項63記載の流体カートリッジにおいて、前記試薬は、ポリメラーゼ、蛍光ラベル付きヌクレオチド、ブロック解除剤、又は洗浄溶液のうち少なくとも1つとする、流体カートリッジ。
- 請求項62又は63記載の流体カートリッジにおいて、さらに、前記フローセルの前記流出口から前記試薬リザーバのうちの少なくとも1つに至る流体ラインを備える、流体カートリッジ。
- 請求項65記載の流体カートリッジにおいて、前記少なくとも1個のバルブは、さらに、前記フローセルの前記流出口と前記試薬リザーバのうちの少なくとも1つとの間で流体連通の仲立ちをするよう構成する、流体カートリッジ。
- 請求項65記載の流体カートリッジにおいて、さらに、前記フローセルの前記流出口と前記試薬リザーバのうちの少なくとも1つとの間で流体連通の仲立ちをするよう構成した少なくとも第2バルブを備える、流体カートリッジ。
- 請求項65記載の流体カートリッジにおいて、前記少なくとも1個の圧力源は、さらに、前記フローセルの前記流出口から前記試薬リザーバのうちの少なくとも1つに液体を移動させるよう構成する、流体カートリッジ。
- 請求項65記載の流体カートリッジにおいて、さらに、前記フローセルの前記流出口から前記試薬リザーバのうちの少なくとも1つに液体を移動させるよう構成した少なくとも第2圧力源を備える、流体カートリッジ。
- 請求項62,63又は65記載の流体カートリッジにおいて、前記ハウジングは、さらに、
(vi) 廃棄リザーバ、及び
(vii)前記フローセルの前記流出口から前記廃棄リザーバへの流体ライン
を保持する、流体カートリッジ。 - 請求項62,63,65又は70記載の流体カートリッジにおいて、前記試薬リザーバは可撓性バッグとする、流体カートリッジ。
- 請求項62,63,65,70又は71記載の流体カートリッジにおいて、前記ハウジングは、
(i) 前記サンプルリザーバと、
(ii) 前記サンプルリザーバと前記フローセルの前記流入口との間における前記流体ラインと、
(iii)前記フローセルの前記流入口を介して前記フローセルと流体連通する前記複数個の試薬リザーバと、
(iv) 前記リザーバと前記フローセルの前記流入口との間における流体連通を仲立ちするよう構成した前記少なくとも1個のバルブと、及び
(v) 前記サンプルリザーバ又は前記試薬リザーバからの液体を、前記フローセルの前記流入口経由で前記フローセルに移動させるよう構成した前記少なくとも1個の圧力源と、を完全に包囲する、流体カートリッジ。 - 請求項62,63,65,70,71又は72記載の流体カートリッジにおいて、前記フローセルは、それぞれが異なるポンプに流体連通する複数個のチャネルを有する、流体カートリッジ。
- 請求項73記載の流体カートリッジにおいて、前記フローセルにおける前記チャネルの数は、前記流体カートリッジにおけるポンプの数と同一である、流体カートリッジ。
- 請求項73記載の流体カートリッジにおいて、前記異なるポンプは単独のバルブによって動作させ、これにより、前記各チャネルは、互いに独立した流体制御下にある、流体カートリッジ。
- 請求項73記載の流体カートリッジにおいて、前記試薬リザーバを少なくとも4個、前記サンプルリザーバを少なくとも4個設け、単一バルブにより、前記フローセルの各チャネルと前記各試薬リザーバとの間における独立支持体流体連通を生ずるようにし、また前記単一バルブにより、前記フローセルの各チャネルと前記各サンプルリザーバとの間における独立支持体流体連通を生ずるように流体カートリッジ。
- 請求項62,63,65,70,71,72又は73記載の流体カートリッジにおいて、前記フローセルは、前記ハウジング内の受容空間を占有し、また前記受容空間は、前記フローセルを前記ハウジングに対して浮遊させることができるサイズ及び形状にする、流体カートリッジ。
- 請求項77記載の流体カートリッジにおいて、前記窓は、少なくとも1個のフローセル整列構成要素のための取付け具を有する、流体カートリッジ。
- 請求項77記載の流体カートリッジにおいて、前記流体ラインは、前記フローセルへの可撓性接続部を有し、これにより前記フローセルの浮遊を許容する、流体カートリッジ。
- 核酸をシークエンシングする方法であって、
(a) 流体カートリッジ準備ステップであって、前記流体カートリッジは、
(i) 透光性表面を有するフローセル、
(ii) 核酸サンプル、
(iii)シークエンシング反応のための複数の試薬、及び
(iv) 前記試薬を前記フローセルに配給する流体システム
を有するものとする、該流体カートリッジ準備ステップと、
(b) 検出装置準備ステップであって、前記検出装置は、
(i) 複数個の顕微蛍光測定器であり、それぞれがx次元及びy次元における画像平面で広視野画像検出を行うよう構成した対物レンズを有する、該複数個の顕微蛍光測定器、及び
(ii) サンプルステージ
を有するものとする、該検出装置準備ステップと、
(c) 前記透光性表面が画像平面内に位置するよう、前記流体カートリッジを前記サンプルステージに送給するステップと、及び
(d) 前記流体カートリッジ内で核酸シークエンシング手順の流体オペレーション、及び検出装置内で前記核酸シークエンシング手順の検出オペレーションを実施するオペレーション実施ステップであって、
(i) 前記試薬を前記流体システムによって前記フローセルに配給し、また
(ii) 核酸特徴の広視野画像を前記複数個の顕微蛍光測定器によって検出する、
該オペレーション実施ステップと、
を有する、方法。 - 請求項80記載の方法において、前記複数個の顕微蛍光測定器は、前記核酸シークエンシング手順実施中に前記顕微蛍光測定器相互間のx及びy次元での相対移動を阻止するよう前記顕微蛍光測定器を固定する読取りヘッドを有する、方法。
- 請求項81記載の方法において、前記検出装置は、さらに、
(iii)前記x次元及びy次元の少なくとも一方で前記読取りヘッドを移動させるよう構成した並進ステージを有する、方法。 - 請求項81記載の方法において、前記ステップ(d)は、さらに、前記読取りヘッドを前記y次元で並進移動させるステップと、前記フローセルの複数部分のために前記ステップ(d)の(ii)を繰返すステップとを含む、方法。
- 請求項81又は82記載の方法において、前記流体カートリッジの前記流体システムは、前記試薬の前記フローセルへの配給を仲立ちする少なくとも1個のバルブ及び少なくとも1個の圧力源を有する、方法。
- 請求項80、81又は84記載の方法において、前記核酸シークエンシング手順を実施するステップは、さらに、前記画像平面内で核酸特徴のアレイを形成する条件下で前記核酸サンプルを前記流体カートリッジにおけるリザーバから前記フローセルに配給するステップを含む、方法。
- 請求項85記載の方法において、前記流体カートリッジの前記流体システムは、前記核酸サンプルの前記フローセルへの配給を仲立ちする少なくとも1個のバルブ及び少なくとも1個の圧力源を有する、方法。
- 請求項80,81,84又は85記載の方法において、さらに、
(e) 前記流体カートリッジを前記サンプルステージから取外すステップと、
(f) 第2流体カートリッジを前記サンプルステージに送給するステップと、及び
(g) 前記第2流体カートリッジ内で核酸シークエンシング手順の流体オペレーション、及び検出装置内で核酸シークエンシング手順の検出オペレーションを実施するステップと、
を有する、方法。 - 請求項87記載の方法において、前記第2流体カートリッジは、前記ステップ(a)における前記流体カートリッジの前記核酸サンプルとは異なる第2核酸サンプルを有する、方法。
- 請求項87記載の方法において、さらにステップ(e),(f)及び(g)を数回繰返す、方法。
- 請求項80,81,84,85又は87記載の方法において、ステップ(a)は、さらに、試薬の第1サブセットを有する第1サブカートリッジを取得するステップと、試薬の第2サブセットを有する第2サブカートリッジを取得するステップと、前記第1サブカートリッジ及び前記第2サブカートリッジを組合せて前記流体カートリッジにするステップとを含む、方法。
- 請求項90記載の方法において、前記第1サブカートリッジは、0℃より暖かくない保存場所から取得し、前記第2サブカートリッジは0℃より暖かい保存場所から取得する、方法。
- 請求項90記載の方法において、前記試薬の前記第1サブセットは冷凍固体である試薬であり、前記試薬の前記第2サブセットは液体である、方法。
- 請求項80,81,84,85,87又は90記載の方法において、前記流体カートリッジは、さらに廃棄リザーバを有し、また前記核酸シークエンシング手順の前記流体オペレーションは、さらに、前記試薬を前記フローセルから前記廃棄リザーバに取出すステップを含む、方法。
- 請求項80,81,84,85,87,90又は93記載の方法において、前記流体カートリッジは、さらに混合リザーバを有し、また前記核酸シークエンシング手順の前記流体オペレーションは、さらに、同様な試薬を前記フローセルから前記混合リザーバに取出し、したがって、前記核酸シークエンシング手順の複数回サイクルからの同様な試薬よりなる混合試薬を形成するステップを含む、方法。
- 請求項94記載の方法において、さらに、前記核酸シークエンシング手順の少なくとも1回のサイクルで、前記混合リザーバからの前記混合試薬を前記フローセルに配給するステップを有する、方法。
- 請求項80,81,84,85,87,90,93又は94記載の方法において、前記フローセルは複数個のチャネルを有し、前記ステップ(d)の(i)は前記チャネルの第1サブセットに対して実施し、前記ステップ(d)の(ii)は前記チャネルの第2サブセットに対して実施する、方法。
- 請求項96記載の方法において、前記フローセルは、少なくとも4個の直線的なチャネルを有し、前記チャネルの少なくとも一部分は互いに平行に配列される、方法。
- 請求項97記載の方法において、前記チャネルの前記第1サブセットは、前記少なくとも4個の直線的なチャネルにおける1つおきのチャネルとする、方法。
- 請求項98記載の方法において、前記複数個の顕微蛍光測定器は、前記フローセルの1つおきのチャネルを同時に検出するよう前記顕微蛍光測定器を固定する読取りヘッドを有する、方法。
- 請求項98記載の方法において、前記複数個の顕微蛍光測定器は、前記フローセルの数に対して半分の数の前記顕微蛍光測定器を有する、方法。
- 請求項80,81,84,85,87,90,93,94又は96記載の方法において、前記核酸シークエンシング手順は、合成によるシークエンシングステップを有し、また前記試薬は、ポリメラーゼ、蛍光ラベル付きヌクレオチド、ブロック解除剤又は洗浄溶液のうち少なくとも1つとする、方法。
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