JP2010213719A - 低圧精子細胞分離システム - Google Patents
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Abstract
【課題】精子細胞の制御された精子細胞受精特性を有する精子細胞授精サンプルを生成するための精子細胞プロセスシステムを提供すること。
【解決手段】本発明は、精子細胞の制御された精子細胞受精特性を有する精子細胞授精サンプルを生成するための精子細胞プロセスシステムを提供する。本発明はまた、精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、以下:a.哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する工程;b.フロー特性を有する流体流を生成する工程;c.該流体流のフロー特性を変化させて、流体流圧を調整する工程;d.該精子細胞を該流体流中に運び去る工程;e.精子細胞受精特性を該流体流圧の調整を介して制御する工程;およびf.制御された精子細胞受精特性を有する精子細胞授精サンプルを生成する工程、を包含する、方法を提供する。
【選択図】なし
【解決手段】本発明は、精子細胞の制御された精子細胞受精特性を有する精子細胞授精サンプルを生成するための精子細胞プロセスシステムを提供する。本発明はまた、精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、以下:a.哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する工程;b.フロー特性を有する流体流を生成する工程;c.該流体流のフロー特性を変化させて、流体流圧を調整する工程;d.該精子細胞を該流体流中に運び去る工程;e.精子細胞受精特性を該流体流圧の調整を介して制御する工程;およびf.制御された精子細胞受精特性を有する精子細胞授精サンプルを生成する工程、を包含する、方法を提供する。
【選択図】なし
Description
本国際特許協力条約特許出願は、2002年8月1日に出願された米国仮特許出願番号60/400,971の利益を主張する。
(I.技術分野)
対応して選択的に調整可能な流動特性を有する流体流における同調を通して生成された、選択的に制御された精子細胞受精特性を有する精子細胞授精サンプル、および精子細胞授精サンプル受精能の比較を評価する方法。
対応して選択的に調整可能な流動特性を有する流体流における同調を通して生成された、選択的に制御された精子細胞受精特性を有する精子細胞授精サンプル、および精子細胞授精サンプル受精能の比較を評価する方法。
(II.背景)
性の事前選択は、精子細胞を富化X染色体保有集団および富化Y染色体保有集団に分離する安全かつ信頼性のある方法の開発に従って、家畜の多くの種において達成されている。WO 00/06193;WO 02/043574;WO 01/85913;WO 99/33956;WO 01/40765;WO 98/34094;WO 99/42810;WO 02/043486によって開示される例示的な方法および装置を参照のこと。
性の事前選択は、精子細胞を富化X染色体保有集団および富化Y染色体保有集団に分離する安全かつ信頼性のある方法の開発に従って、家畜の多くの種において達成されている。WO 00/06193;WO 02/043574;WO 01/85913;WO 99/33956;WO 01/40765;WO 98/34094;WO 99/42810;WO 02/043486によって開示される例示的な方法および装置を参照のこと。
性選択した精子細胞に伴う重大な問題は、従来技術による市販のために生存可能であるかまたは有意に受精可能である性選択した授精サンプルまたは性選択した授精物を生成するのに有意な速度での精子細胞の分離が、流動細胞計測器の増加する流体流圧力または1平方インチ当たり約50ポンドまでの流動分類機器(flow sort instrument)を必要としていることであり得る。この圧力の適用から生じる流動特性を有する流体流中に同調された哺乳動物の多くの種の精子細胞に関して、生存率、運動性、または他の受精特性が変化した。
性選択した精子細胞授精物または性選択した精子細胞授精サンプルに伴う別の重大な問題は、サンプル間で非常に変動し得る精子細胞受精能における大変大きな違いであり得る。従って、実質的に同一条件下で実施される人工受精の成功は、それに対応して異なる妊娠率を生じ得る。
既存の精子細胞性選択技術に伴う別の重大な問題は、性選択した精子細胞の受精能が、インビボ(例えば、人工受精手順に関連して)およびインビトロ(例えば、IVF手順に関連して)で直接比較され得るアッセイがないことであり得る。
本発明は、富化X染色体保有集団および富化Y染色体保有集団に分離された、低下した精子細胞受精精子、ならびに分離した精子細胞もしくは分類した精子細胞、および特に流動分類した精子細胞の機能および受精能を比較するための異種精子アッセイの欠乏に関連する種々の問題に取り組む。
(III.発明の開示)
従って、本発明の広範な目的は、哺乳動物種の雄性から得られた精液から単離された精子細胞の精子細胞受精特性(例えば、運動性、生存率、受精率、卵割率、胚盤胞率など)を制御するためのデバイス、およびこのようなデバイスを使用する方法を提供する。
従って、本発明の広範な目的は、哺乳動物種の雄性から得られた精液から単離された精子細胞の精子細胞受精特性(例えば、運動性、生存率、受精率、卵割率、胚盤胞率など)を制御するためのデバイス、およびこのようなデバイスを使用する方法を提供する。
本発明に従って制御された精子細胞受精能を提供することは、多数かつ多様な種の哺乳動物(ウシ種の哺乳動物、ウマ種の哺乳動物、ヒツジ種の哺乳動物、イヌ 種の哺乳動物、ネコ種の哺乳動物、ブタ種の哺乳動物、海洋哺乳動物、シカ種の哺乳動物、霊長類種の哺乳動物、ヤギ種の哺乳動物、あるいはWilson,D.EおよびReeder,D.M.、MammalSpecies of the World、Smithsonian Institution Press(1993)(本明細書中で参考として援用される)によって列挙された種の哺乳動物からなる群より選択される哺乳動物が挙げられるが、これらに限定されない)から得られる精子細胞を用いて達成され得る。
本発明の特定の実施形態に関して、制御された精子細胞受精特性は、哺乳動物種の雄性の精液から精子細胞を単離することに先立つ受精特性の肯定的選択(affirmative selection)、および精子細胞受精特性を変化させるために本発明の適用して、所望の受精特性を提供することを含む。本発明の他の実施形態に関して、精子細胞処理条件は、特定の種の哺乳動物の精子細胞を処理して制御された受精特性を有する精子細胞を得るために使用され得る、精子細胞処理条件の広範囲内で選択される。制御された受精特性は、処理した精子細胞の集団内に運動性の精子細胞、無傷のアクロソーム、生存可能な精子細胞を有する所望の集団;または処理した精子細胞がインビトロで卵母細胞を受精させるために使用される場合には、卵母細胞の所望の卵割率もしくは胚盤胞形成率;または処理した精子細胞が人工授精のために使用される場合には、所望の妊娠率もしくは子孫の性比を含み得る。本発明の特定の実施形態に関して、処理した精子細胞集団内での運動性の精子細胞のより大きい集団、生存可能な精子細胞のより大きい集団、無傷のアクロソームのより大きい集団、または受精可能な精子細胞のより多数は、同一の精子細胞集団の従来の処理と比較して達成され得る。本発明の特定の実施形態は、新鮮な射精液中の精子細胞の受精特性と実質的に異ならないか、または実質的に匹敵する、制御された受精特性を有する精子細胞の供給を可能にする。他の事例において、本発明の特定の実施形態の適用は、所望の場合、新鮮な射精液の精子細胞の受精特性と実質的に異なる、制御された受精特性を有する精子細胞を生じ得る。特に、本発明の特定の実施形態は、制御された受精特性を有するウシ精子細胞を提供するために使用され得るか、または制御された受精特性を有するウマ精子細胞を提供するために使用され得、所望の場合、新鮮なウシ射精液またはウマ射精液中のウシ精子細胞またはウマ精子細胞の受精特性に実質的に匹敵する受精特性を伴って提供され得る。
本発明の別の広範な目的は、制御された精子細胞受精特性を有する精子細胞授精サンプルを提供することであり得、このような精子細胞授精サンプルは、限定なしに、動物種の雌性の人工授精、インビトロでの卵母細胞の受精、または精子細胞の細胞質内注射などのために構成され得る。
本発明の別の広範な目的は、精子細胞受精特性(例えば、運動性、生存率、受精率、卵割率、胚盤胞率など)の肯定的制御を提供し得る、精子細胞を性選択する方法を提供することであり得る。本発明のこの広範は目的の1つの局面は、フローサイトメトリーまたは細胞を分類するデバイス、あるいは性選択した精子細胞の受精特性の肯定的制御を可能にする、フローサイトメトリーまたは細胞を分類する方法を提供することであり得る。
本発明の別の目的は、ウシ種の哺乳動物の雌性の人工授精のために構成された、制御された精子細胞受精特性を有する性選択したウシ精子細胞授精サンプルを提供することであり得、そのウシ精子細胞授精サンプルは、制御された精子細胞受精特性を有する約100,000と約3,000,000との間の性選択したウシ精子細胞を含む。
本発明の別の目的は、ウマ種の哺乳動物の雌性の人工授精のために構成された、制御された精子細胞受精特性を有する性選択したウマ精子細胞授精サンプルを提供することであり得、そのウマ精子細胞授精サンプルは、制御された精子細胞受精特性を有する約5,000,000と約50,000,000との間の性選択したウマ精子細胞を含む。
本発明の別の本質的な目的は、精子細胞の加工、精子細胞の保存、または精子細胞の使用(雌性哺乳動物の授精または卵母細胞の受精が挙げられるが、これらに限定されない)に関して、精子細胞の制御された精子細胞受精特性を維持するデバイスまたは方法を提供することであり得る。
本発明の別の本質的な目的は、制御された精子細胞受精特性を有する精子細胞授精サンプルを用いて、哺乳動物種の雌性を人工授精する方法を提供することであり得る。本発明の特定の実施形態に関して、制御された受精特性を有する、少数もしくは減少された数の精子細胞を用いる授精方法を、このような精子細胞が富化X染色体保有集団もしくは富化Y染色体保有集団に分離されるか否かに関わらず、このような人口授精手順において使用される通常の数もしくは代表的な数の精子細胞と比較した。
本発明の別の広範な目的は、精子細胞集団の比較受精能を評価する方法を提供することであり得る。本発明の特定の実施形態は、各々の雄性由来の精子細胞が実質的に同一のフローサイトメトリー処理に曝される場合に、哺乳動物種の異なる雄性由来の精子細胞の比較受精能を評価する方法を提供する。本発明の他の実施形態は、異なるフローサイトメトリー処理に曝される哺乳動物種の同一の雄性由来の精子細胞の比較受精能を評価する方法を提供する。本発明の特定の実施形態は、制御された受精特性を有する精子細胞の比較受精能を示す方法を提供する。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
(項目1)
精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、以下:
a.哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する工程;
b.フロー特性を有する流体流を生成する工程;
c.該流体流のフロー特性を変化させて、流体流圧を調整する工程;
d.該精子細胞を該流体流中に運び去る工程;
e.精子細胞受精特性を該流体流圧の調整を介して制御する工程;および
f.制御された精子細胞受精特性を有する精子細胞授精サンプルを生成する工程
を包含する、方法。
(項目2)
項目1に記載された精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、ここで、前記哺乳動物の種が、哺乳動物のウシ種、哺乳動物のウマ種、哺乳動物のヒツジ種、哺乳動物のイヌ種、哺乳動物のネコ種、哺乳動物のブタ種、哺乳動物の海洋動物種、哺乳動物のシカ種、哺乳動物の霊長類種、哺乳動物のヤギ種からなる群から選択される、方法。
(項目3)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、ここで前記流体流が、シース流体流を含む、方法。
(項目4)
項目3に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記シース流体流が、リン酸緩衝化生理食塩水(PBS)を含むシース流体を含む、方法。
(項目5)
項目3に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、シース流体流が、クエン酸緩衝液を含有するシース流体を含む、方法。
(項目6)
項目5に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記クエン酸緩衝液が、約2.9%のクエン酸ナトリウムを含む、方法。
(項目7)
項目3に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記シース流体流が、HEPES緩衝液を含有しているシース流体を含む、方法。
(項目8)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記流体流が、フローサイトメーターまたはセルソーター中で生成される、方法。
(項目9)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記流体流のフロー特性を変化させて流体流圧を調整する前記工程が、該フロー特性を変化させて該流体流圧を1平方インチ当たり約20ポンドと1平方インチ当たり約60ポンドとの間に調整する工程を包含する、方法。
(項目10)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウシ種の雄からウシ精液を獲得する工程を包含し、そして前記流体流圧の調整を介して精子細胞受精特性を制御する前記工程が、該精液中の該ウシ精子細胞の該ウシ精子細胞受精特性と実質的に異ならない該流体流中に運び去られる前記ウシ精子細胞の前記ウシ精子細胞受精特性を確立する工程を包含する、方法。
(項目11)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウシ種の雄からウシ精液を獲得する工程を包含し、そして前記流体流圧の調整を介して精子細胞受精特性を制御する前記工程が、該精液中の該ウシ精子細胞の該ウシ精子細胞受精特性と実質的に同等である該流体流中に運び去られる該ウシ精子細胞の該ウシ精子細胞受精特性を確立する工程を包含する、方法。
(項目12)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウシ種の雄からウシ精液を獲得する工程を包含し、そして制御された精子細胞受精特性を有する精子細胞授精サンプルを生成する前記工程が、該ウシ精液中の該ウシ精子細胞のウシ精子細胞受精特性と実質的に異ならない該ウシ精子細胞受精特性を有する該ウシ精子細胞授精サンプルを生成する工程を包含する、方法。
(項目13)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウシ種の雄からウシ精液を獲得する工程を包含し、そして制御された精子細胞受精特性を有する精子細胞授精サンプルを生成する前記工程が、該ウシ精液中の該ウシ精子細胞のウシ精子細胞受精特性と実質的に同等である該ウシ精子細胞受精特性を有する該ウシ精子細胞授精サンプルを生成する工程を包含する、方法。
(項目14)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウシ種の雄からウシ精液を獲得する工程を包含し、そして前記流体流のフロー特性を変化させて流体流圧を調整する前記工程が、該流体流の該フロー特性を調整して1平方インチ当たり約30ポンドと1平方インチ当たり約50ポンドとの間に流体流圧を調整する工程を包含する、方法。
(項目15)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウシ種の雄からウシ精液を獲得する工程を包含し、そして前記流体流のフロー特性を変化させて流体流圧を調整する前記工程が、該流体流の該フロー特性を調整して1平方インチ当たり約30ポンドと1平方インチ当たり約40ポンドとの間に流体流圧を調整する工程を包含する、方法。
(項目16)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウシ種の雄からウシ精液を獲得する工程を包含し、そして前記流体流のフロー特性を変化させて流体流圧を調整する前記工程が、該流体流の該フロー特性を調整して流体流圧を1平方インチ当たり約40ポンドに調整する工程を包含する、方法。
(項目17)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウマ種の雄からウマ精液を獲得する工程を包含し、そして前記流体流圧の調整を介して精子細胞受精特性を制御する前記工程が、該精液中の該ウマ精子細胞のウマ精子細胞受精特性と実質的に異ならない、該流体流中に運び去られる該ウマ精子細胞の該ウマ精子細胞受精特性を確立する工程を包含する、方法。
(項目18)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウマ種の雄からウマ精液を獲得する工程を包含し、そして前記流体流圧の調整を介して精子細胞受精特性を制御する前記工程が、該精液中の該ウマ精子細胞のウマ精子細胞受精特性と実質的に同等である、該流体流中に運び去られる該ウマ精子細胞の該ウマ精子細胞受精特性を確立する工程を包含する、方法。
(項目19)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウマ種の雄からウマ精液を獲得する工程を包含し、そして制御された精子細胞受精特性を有する精子細胞授精サンプルを生成する前記工程が、該ウマ精液中の該ウマ精子細胞のウマ精子細胞受精特性と実質的に異ならない、該ウマ精子細胞受精特性を有するウマ精子細胞授精サンプルを生成する工程を包含する、方法。
(項目20)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウマ種の雄からウマ精液を獲得する工程を包含し、そして制御された精子細胞受精特性を有する精子細胞授精サンプルを生成する前記工程が、該ウマ精液中の該ウマ精子細胞のウマ精子細胞受精特性と実質的に同等である、ウマ精子細胞受精特性を有するウマ精子細胞授精サンプルを生成する工程を包含する、方法。
(項目21)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウマ種の雄からウマ精液を獲得する工程を包含し、そして前記流体流のフロー特性を変化させて流体流圧を調整する前記工程が、該流体流の該フロー特性を調整して1平方インチ当たり約30ポンドと1平方インチ当たり約50ポンドとの間に流体流圧を調整する工程を包含する、方法。
(項目22)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウマ種の雄からウマ精液を獲得する工程を包含し、そして前記流体流のフロー特性を変化させて流体流圧を調整する前記工程が、該流体流の該フロー特性を調整して1平方インチ当たり約30ポンドと1平方インチ当たり約40ポンドとの間に流体流圧を調整する工程を包含する、方法。
(項目23)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウマ種の雄からウマ精液を獲得する工程を包含し、そして前記流体流のフロー特性を変化させて流体流圧を調整する前記工程が、該流体流の該フロー特性を調整して1平方インチ当たり約40ポンドに流体流圧を調整する工程を包含する、方法。
(項目24)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、該精子細胞受精特性の1つが、精子細胞運動性を含む、方法。
(項目25)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、ウシ精子細胞運動性を含む、方法。
(項目26)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、ウマ精子細胞運動性を含む、方法。
(項目27)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、精子細胞生存力を含む、方法。
(項目28)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、ウシ精子細胞生存力を含む、方法。
(項目29)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、ウマ精子細胞生存力を含む、方法。
(項目30)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、制御された精子細胞受精特性を有する該精子細胞授精サンプルで授精される哺乳動物の前記種の雌の妊娠率を含む、方法。
(項目31)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、制御された精子細胞受精特性を有するウシ精子細胞授精サンプルで授精される哺乳動物のウシ種の雌の妊娠率を含む、方法。
(項目32)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、制御された精子細胞受精特性を有するウマ精子細胞授精サンプルで授精される哺乳動物のウマ種の雌の妊娠率を含む、方法。
(項目33)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、制御された精子細胞受精特性を有する該精子細胞授精サンプルで受精される卵母細胞の卵割率を含む、方法。
(項目34)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、制御された精子細胞受精特性を有するウシ精子細胞授精サンプルで受精されるウシ卵母細胞の卵割率を含む、方法。
(項目35)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、制御された精子細胞受精特性を有するウマ精子細胞授精サンプルで受精されるウマ卵母細胞の卵割率を含む、方法。
(項目36)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、制御された精子細胞受精特性を有する精子細胞授精サンプルで受精される卵母細胞の胚盤胞率を含む、方法。
(項目37)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、制御された精子細胞受精特性を有するウシ精子細胞授精サンプルで受精されるウシ卵母細胞の胚盤胞率を含む、方法。
(項目38)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、制御された精子細胞受精特性を有するウマ精子細胞授精サンプルで受精されるウマ卵母細胞の胚盤胞率を含む、方法。
(項目39)
項目31に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、制御された精子細胞受精特性を有する前記ウシ精子細胞授精サンプルが、約1×10 5 個と2×10 7 個との間のウシ精子細胞を含む、方法。
(項目40)
項目31に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、制御された精子細胞受精特性を有する前記ウシ精子細胞授精サンプルが、約1×10 6 個と3×10 6 個との間のウシ精子細胞を含む、方法。
(項目41)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記精子細胞を染色する工程をさらに包含する、方法。
(項目42)
項目41に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記精子細胞を染色する前記工程が、Hoechst33342で該精子細胞を染色する工程を包含する、方法。
(項目43)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記流体流中の液滴を生成する工程をさらに包含し、該液滴のいくらかが、前記精子細胞の各々1つを含む、方法。
(項目44)
項目43に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、性形質に基づいて精子細胞を識別する工程をさらに包含する、方法。
(項目45)
項目44に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、性形質に基づいて前記精子細胞を識別する前記工程が、DNA含有量に基づいて該精子細胞を識別する工程を包含する、方法。
(項目46)
項目44に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、性形質に基づいて前記精子細胞を識別する前記工程が、精子頭部容積に基づいて該精子細胞を識別する工程を包含する、方法。
(項目47)
項目44に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記性形質に基づいて精子細胞を分離する工程をさらに包含する、方法。
(項目48)
項目47に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、収集コンテナ中で制御された精子細胞受精特性を有する該精子細胞授精サンプルを収集する工程をさらに包含する、方法。
(項目49)
項目48に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、収集コンテナ中で制御された精子細胞受精特性を有する該精子細胞授精サンプルを収集する前記工程が、該収集コンテナ中に性選択された精子細胞授精サンプルを収集する工程を包含する、方法。
(項目50)
項目49に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記性選択された精子細胞授精サンプルが、人工授精の性別を選択された精子細胞授精サンプルを含む、方法。
(項目51)
項目49に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記性選択された精子細胞授精サンプルが、体外受精の性別を選択された精子細胞授精サンプルを含む、方法。
(項目52)
項目49に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記性選択された精子細胞授精サンプルが、細胞質内で性別を選択された精子細胞注入サンプルを含む、方法。
(項目53)
性選択された精子細胞受精を評価する方法であって、以下:
a.哺乳動物の1種の雄から精子細胞を獲得する工程;
b.第1の処理条件に曝された性別を選択されたY染色体を持つ精子細胞を提供する工程;
c.第2の処理条件に曝された性別を選択されたX染色体を持つ精子細胞を提供する工程;
d.該第1の処理条件に曝された性別を選択された該Y染色体を持つ精子細胞と第2の処理条件に曝された性別を選択された該X染色体を持つ精子細胞の所定の比を有する授精サンプルを生成する工程;
e.該第1の処理条件に曝された該Y染色体を持つ精子細胞と第2の処理条件に曝された該X染色体を持つ精子細胞の該比を有する該授精サンプルで哺乳動物の該種の少なくとも1匹の雌を授精させる工程;
f.哺乳動物の該種の少なくとも1の雌から子孫を産生する工程;
g.哺乳動物の該種の少なくとも1の子孫の性比の該第1の処理条件に曝された該Y染色体を持つ精子細胞と第2の処理条件に曝された該X染色体を持つ精子細胞の該比との比較により該性別を選択された精子細胞の受精を評価する工程
を包含する、方法。
(項目54)
項目53に記載の性別を選択された精子細胞受精を評価する方法であって、前記第1の処理条件に曝された前記Y染色体を持つ精子細胞と第2の処理条件に曝された前記X染色体を持つ精子細胞の前記比が、該第1の処理条件に曝された該Y染色体を持つ精子細胞と第2の処理条件に曝された該X染色体を持つ精子細胞の数が実質的に等しいことを含む、方法。
(項目55)
項目53に記載の性別を選択された精子細胞受精を評価する方法であって、哺乳動物の前記種の前記少なくとも1の雌の子孫の前記性比が、胚の性比を含む、方法。
(項目56)
項目53に記載の性別を選択された精子細胞受精を評価する方法であって、哺乳動物の前記種の前記少なくとも1の雌の子孫の前記性比が、胎児の性比を含む、方法。
(項目56)
項目53に記載の性別を選択された精子細胞受精を評価する方法であって、哺乳動物の前記種の前記少なくとも1の雌の子孫の前記性比が、産まれる子孫の性比を含む、方法。
(項目57)
項目53に記載の性別を選択された精子細胞受精を評価する方法であって、前記哺乳動物の前記種の前記少なくとも1の雌が、十分な数の子孫を産生し、子孫の該性比を確立する、該種の雌の十分な数を含む、方法。
(項目58)
哺乳動物の種の雄からの精子細胞の受精を評価する方法であって、以下:
a.哺乳動物の1種の少なくとも2の雄から精子細胞を獲得する工程;
b.前記種の前記少なくとも2の雄の各々からの該精子細胞を実質的に同じフローサイトメトリー処理に曝す工程;
c.該実質的に同じフローサイトメトリー処理に曝される哺乳動物の該種の該少なくとも2の雄の各々からの実質的に等しい数の精子細胞混合物で哺乳動物の該種の少なくとも1の雌を授精する工程;
d.哺乳動物の該種の該少なくとも1の雌から胚を収集する工程;
e.哺乳動物の該種の少なくとも2の雄のどちらが各々の胚を生み出したかを決定する工程;ならびに
f.該少なくとも2の雄の各々により生み出される同等の数の胚に基づいて少なくとも哺乳動物の該種の雄に対する同等の受精をランク付けする工程
を包含する、方法。
(項目59)
項目58に記載の哺乳動物の種の雄から精子細胞の受精を評価する方法であって、前記フローサイトメトリー処理が、性形質に基づいて前記少なくとも2の雄から該精子細胞を分離する工程を包含する、方法。
(項目60)
項目58に記載の哺乳動物の種の雄から精子細胞の受精を評価する方法であって、前記フローサイトメトリー処理が、前記少なくとも2の雄からの精子細胞の性別を選択する工程を包含する、方法。
(項目61)
哺乳動物の種の雄からの精子細胞の受精を評価する方法であって、以下:
a.哺乳動物の1種の少なくとも2の雄から精子細胞を獲得する工程;
b.前記種の前記少なくとも2の雄の各々からの該精子細胞を実質的に同じフローサイトメトリー処理に曝す工程;
c.該実質的に同じフローサイトメトリー処理に曝される哺乳動物の該種の該少なくとも2の雄の各々からの実質的に等しい数の精子細胞混合物で卵母細胞を体外受精する工程;
d.該卵母細胞の該体外受精を介して生成される胚を収集する工程;
e.哺乳動物の該種の少なくとも2の雄のどちらが各々の胚を生み出したかを決定する工程;ならびに
f.該少なくとも2の雄の各々により生み出される同等の数の胚に基づいて少なくとも哺乳動物の該種の雄に対する同等の受精をランク付けする工程
を包含する、方法。
当然ながら、本発明のさらなる本質的な目的は、以降の本発明の説明において明確にされる。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
(項目1)
精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、以下:
a.哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する工程;
b.フロー特性を有する流体流を生成する工程;
c.該流体流のフロー特性を変化させて、流体流圧を調整する工程;
d.該精子細胞を該流体流中に運び去る工程;
e.精子細胞受精特性を該流体流圧の調整を介して制御する工程;および
f.制御された精子細胞受精特性を有する精子細胞授精サンプルを生成する工程
を包含する、方法。
(項目2)
項目1に記載された精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、ここで、前記哺乳動物の種が、哺乳動物のウシ種、哺乳動物のウマ種、哺乳動物のヒツジ種、哺乳動物のイヌ種、哺乳動物のネコ種、哺乳動物のブタ種、哺乳動物の海洋動物種、哺乳動物のシカ種、哺乳動物の霊長類種、哺乳動物のヤギ種からなる群から選択される、方法。
(項目3)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、ここで前記流体流が、シース流体流を含む、方法。
(項目4)
項目3に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記シース流体流が、リン酸緩衝化生理食塩水(PBS)を含むシース流体を含む、方法。
(項目5)
項目3に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、シース流体流が、クエン酸緩衝液を含有するシース流体を含む、方法。
(項目6)
項目5に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記クエン酸緩衝液が、約2.9%のクエン酸ナトリウムを含む、方法。
(項目7)
項目3に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記シース流体流が、HEPES緩衝液を含有しているシース流体を含む、方法。
(項目8)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記流体流が、フローサイトメーターまたはセルソーター中で生成される、方法。
(項目9)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記流体流のフロー特性を変化させて流体流圧を調整する前記工程が、該フロー特性を変化させて該流体流圧を1平方インチ当たり約20ポンドと1平方インチ当たり約60ポンドとの間に調整する工程を包含する、方法。
(項目10)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウシ種の雄からウシ精液を獲得する工程を包含し、そして前記流体流圧の調整を介して精子細胞受精特性を制御する前記工程が、該精液中の該ウシ精子細胞の該ウシ精子細胞受精特性と実質的に異ならない該流体流中に運び去られる前記ウシ精子細胞の前記ウシ精子細胞受精特性を確立する工程を包含する、方法。
(項目11)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウシ種の雄からウシ精液を獲得する工程を包含し、そして前記流体流圧の調整を介して精子細胞受精特性を制御する前記工程が、該精液中の該ウシ精子細胞の該ウシ精子細胞受精特性と実質的に同等である該流体流中に運び去られる該ウシ精子細胞の該ウシ精子細胞受精特性を確立する工程を包含する、方法。
(項目12)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウシ種の雄からウシ精液を獲得する工程を包含し、そして制御された精子細胞受精特性を有する精子細胞授精サンプルを生成する前記工程が、該ウシ精液中の該ウシ精子細胞のウシ精子細胞受精特性と実質的に異ならない該ウシ精子細胞受精特性を有する該ウシ精子細胞授精サンプルを生成する工程を包含する、方法。
(項目13)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウシ種の雄からウシ精液を獲得する工程を包含し、そして制御された精子細胞受精特性を有する精子細胞授精サンプルを生成する前記工程が、該ウシ精液中の該ウシ精子細胞のウシ精子細胞受精特性と実質的に同等である該ウシ精子細胞受精特性を有する該ウシ精子細胞授精サンプルを生成する工程を包含する、方法。
(項目14)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウシ種の雄からウシ精液を獲得する工程を包含し、そして前記流体流のフロー特性を変化させて流体流圧を調整する前記工程が、該流体流の該フロー特性を調整して1平方インチ当たり約30ポンドと1平方インチ当たり約50ポンドとの間に流体流圧を調整する工程を包含する、方法。
(項目15)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウシ種の雄からウシ精液を獲得する工程を包含し、そして前記流体流のフロー特性を変化させて流体流圧を調整する前記工程が、該流体流の該フロー特性を調整して1平方インチ当たり約30ポンドと1平方インチ当たり約40ポンドとの間に流体流圧を調整する工程を包含する、方法。
(項目16)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウシ種の雄からウシ精液を獲得する工程を包含し、そして前記流体流のフロー特性を変化させて流体流圧を調整する前記工程が、該流体流の該フロー特性を調整して流体流圧を1平方インチ当たり約40ポンドに調整する工程を包含する、方法。
(項目17)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウマ種の雄からウマ精液を獲得する工程を包含し、そして前記流体流圧の調整を介して精子細胞受精特性を制御する前記工程が、該精液中の該ウマ精子細胞のウマ精子細胞受精特性と実質的に異ならない、該流体流中に運び去られる該ウマ精子細胞の該ウマ精子細胞受精特性を確立する工程を包含する、方法。
(項目18)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウマ種の雄からウマ精液を獲得する工程を包含し、そして前記流体流圧の調整を介して精子細胞受精特性を制御する前記工程が、該精液中の該ウマ精子細胞のウマ精子細胞受精特性と実質的に同等である、該流体流中に運び去られる該ウマ精子細胞の該ウマ精子細胞受精特性を確立する工程を包含する、方法。
(項目19)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウマ種の雄からウマ精液を獲得する工程を包含し、そして制御された精子細胞受精特性を有する精子細胞授精サンプルを生成する前記工程が、該ウマ精液中の該ウマ精子細胞のウマ精子細胞受精特性と実質的に異ならない、該ウマ精子細胞受精特性を有するウマ精子細胞授精サンプルを生成する工程を包含する、方法。
(項目20)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウマ種の雄からウマ精液を獲得する工程を包含し、そして制御された精子細胞受精特性を有する精子細胞授精サンプルを生成する前記工程が、該ウマ精液中の該ウマ精子細胞のウマ精子細胞受精特性と実質的に同等である、ウマ精子細胞受精特性を有するウマ精子細胞授精サンプルを生成する工程を包含する、方法。
(項目21)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウマ種の雄からウマ精液を獲得する工程を包含し、そして前記流体流のフロー特性を変化させて流体流圧を調整する前記工程が、該流体流の該フロー特性を調整して1平方インチ当たり約30ポンドと1平方インチ当たり約50ポンドとの間に流体流圧を調整する工程を包含する、方法。
(項目22)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウマ種の雄からウマ精液を獲得する工程を包含し、そして前記流体流のフロー特性を変化させて流体流圧を調整する前記工程が、該流体流の該フロー特性を調整して1平方インチ当たり約30ポンドと1平方インチ当たり約40ポンドとの間に流体流圧を調整する工程を包含する、方法。
(項目23)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、哺乳動物の1種の雄から精液を獲得する前記工程が、哺乳動物のウマ種の雄からウマ精液を獲得する工程を包含し、そして前記流体流のフロー特性を変化させて流体流圧を調整する前記工程が、該流体流の該フロー特性を調整して1平方インチ当たり約40ポンドに流体流圧を調整する工程を包含する、方法。
(項目24)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、該精子細胞受精特性の1つが、精子細胞運動性を含む、方法。
(項目25)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、ウシ精子細胞運動性を含む、方法。
(項目26)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、ウマ精子細胞運動性を含む、方法。
(項目27)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、精子細胞生存力を含む、方法。
(項目28)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、ウシ精子細胞生存力を含む、方法。
(項目29)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、ウマ精子細胞生存力を含む、方法。
(項目30)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、制御された精子細胞受精特性を有する該精子細胞授精サンプルで授精される哺乳動物の前記種の雌の妊娠率を含む、方法。
(項目31)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、制御された精子細胞受精特性を有するウシ精子細胞授精サンプルで授精される哺乳動物のウシ種の雌の妊娠率を含む、方法。
(項目32)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、制御された精子細胞受精特性を有するウマ精子細胞授精サンプルで授精される哺乳動物のウマ種の雌の妊娠率を含む、方法。
(項目33)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、制御された精子細胞受精特性を有する該精子細胞授精サンプルで受精される卵母細胞の卵割率を含む、方法。
(項目34)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、制御された精子細胞受精特性を有するウシ精子細胞授精サンプルで受精されるウシ卵母細胞の卵割率を含む、方法。
(項目35)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、制御された精子細胞受精特性を有するウマ精子細胞授精サンプルで受精されるウマ卵母細胞の卵割率を含む、方法。
(項目36)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、制御された精子細胞受精特性を有する精子細胞授精サンプルで受精される卵母細胞の胚盤胞率を含む、方法。
(項目37)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、制御された精子細胞受精特性を有するウシ精子細胞授精サンプルで受精されるウシ卵母細胞の胚盤胞率を含む、方法。
(項目38)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記受精特性が、制御された精子細胞受精特性を有するウマ精子細胞授精サンプルで受精されるウマ卵母細胞の胚盤胞率を含む、方法。
(項目39)
項目31に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、制御された精子細胞受精特性を有する前記ウシ精子細胞授精サンプルが、約1×10 5 個と2×10 7 個との間のウシ精子細胞を含む、方法。
(項目40)
項目31に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、制御された精子細胞受精特性を有する前記ウシ精子細胞授精サンプルが、約1×10 6 個と3×10 6 個との間のウシ精子細胞を含む、方法。
(項目41)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記精子細胞を染色する工程をさらに包含する、方法。
(項目42)
項目41に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記精子細胞を染色する前記工程が、Hoechst33342で該精子細胞を染色する工程を包含する、方法。
(項目43)
項目1に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記流体流中の液滴を生成する工程をさらに包含し、該液滴のいくらかが、前記精子細胞の各々1つを含む、方法。
(項目44)
項目43に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、性形質に基づいて精子細胞を識別する工程をさらに包含する、方法。
(項目45)
項目44に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、性形質に基づいて前記精子細胞を識別する前記工程が、DNA含有量に基づいて該精子細胞を識別する工程を包含する、方法。
(項目46)
項目44に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、性形質に基づいて前記精子細胞を識別する前記工程が、精子頭部容積に基づいて該精子細胞を識別する工程を包含する、方法。
(項目47)
項目44に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記性形質に基づいて精子細胞を分離する工程をさらに包含する、方法。
(項目48)
項目47に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、収集コンテナ中で制御された精子細胞受精特性を有する該精子細胞授精サンプルを収集する工程をさらに包含する、方法。
(項目49)
項目48に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、収集コンテナ中で制御された精子細胞受精特性を有する該精子細胞授精サンプルを収集する前記工程が、該収集コンテナ中に性選択された精子細胞授精サンプルを収集する工程を包含する、方法。
(項目50)
項目49に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記性選択された精子細胞授精サンプルが、人工授精の性別を選択された精子細胞授精サンプルを含む、方法。
(項目51)
項目49に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記性選択された精子細胞授精サンプルが、体外受精の性別を選択された精子細胞授精サンプルを含む、方法。
(項目52)
項目49に記載の精子細胞授精サンプルを生成する方法であって、前記性選択された精子細胞授精サンプルが、細胞質内で性別を選択された精子細胞注入サンプルを含む、方法。
(項目53)
性選択された精子細胞受精を評価する方法であって、以下:
a.哺乳動物の1種の雄から精子細胞を獲得する工程;
b.第1の処理条件に曝された性別を選択されたY染色体を持つ精子細胞を提供する工程;
c.第2の処理条件に曝された性別を選択されたX染色体を持つ精子細胞を提供する工程;
d.該第1の処理条件に曝された性別を選択された該Y染色体を持つ精子細胞と第2の処理条件に曝された性別を選択された該X染色体を持つ精子細胞の所定の比を有する授精サンプルを生成する工程;
e.該第1の処理条件に曝された該Y染色体を持つ精子細胞と第2の処理条件に曝された該X染色体を持つ精子細胞の該比を有する該授精サンプルで哺乳動物の該種の少なくとも1匹の雌を授精させる工程;
f.哺乳動物の該種の少なくとも1の雌から子孫を産生する工程;
g.哺乳動物の該種の少なくとも1の子孫の性比の該第1の処理条件に曝された該Y染色体を持つ精子細胞と第2の処理条件に曝された該X染色体を持つ精子細胞の該比との比較により該性別を選択された精子細胞の受精を評価する工程
を包含する、方法。
(項目54)
項目53に記載の性別を選択された精子細胞受精を評価する方法であって、前記第1の処理条件に曝された前記Y染色体を持つ精子細胞と第2の処理条件に曝された前記X染色体を持つ精子細胞の前記比が、該第1の処理条件に曝された該Y染色体を持つ精子細胞と第2の処理条件に曝された該X染色体を持つ精子細胞の数が実質的に等しいことを含む、方法。
(項目55)
項目53に記載の性別を選択された精子細胞受精を評価する方法であって、哺乳動物の前記種の前記少なくとも1の雌の子孫の前記性比が、胚の性比を含む、方法。
(項目56)
項目53に記載の性別を選択された精子細胞受精を評価する方法であって、哺乳動物の前記種の前記少なくとも1の雌の子孫の前記性比が、胎児の性比を含む、方法。
(項目56)
項目53に記載の性別を選択された精子細胞受精を評価する方法であって、哺乳動物の前記種の前記少なくとも1の雌の子孫の前記性比が、産まれる子孫の性比を含む、方法。
(項目57)
項目53に記載の性別を選択された精子細胞受精を評価する方法であって、前記哺乳動物の前記種の前記少なくとも1の雌が、十分な数の子孫を産生し、子孫の該性比を確立する、該種の雌の十分な数を含む、方法。
(項目58)
哺乳動物の種の雄からの精子細胞の受精を評価する方法であって、以下:
a.哺乳動物の1種の少なくとも2の雄から精子細胞を獲得する工程;
b.前記種の前記少なくとも2の雄の各々からの該精子細胞を実質的に同じフローサイトメトリー処理に曝す工程;
c.該実質的に同じフローサイトメトリー処理に曝される哺乳動物の該種の該少なくとも2の雄の各々からの実質的に等しい数の精子細胞混合物で哺乳動物の該種の少なくとも1の雌を授精する工程;
d.哺乳動物の該種の該少なくとも1の雌から胚を収集する工程;
e.哺乳動物の該種の少なくとも2の雄のどちらが各々の胚を生み出したかを決定する工程;ならびに
f.該少なくとも2の雄の各々により生み出される同等の数の胚に基づいて少なくとも哺乳動物の該種の雄に対する同等の受精をランク付けする工程
を包含する、方法。
(項目59)
項目58に記載の哺乳動物の種の雄から精子細胞の受精を評価する方法であって、前記フローサイトメトリー処理が、性形質に基づいて前記少なくとも2の雄から該精子細胞を分離する工程を包含する、方法。
(項目60)
項目58に記載の哺乳動物の種の雄から精子細胞の受精を評価する方法であって、前記フローサイトメトリー処理が、前記少なくとも2の雄からの精子細胞の性別を選択する工程を包含する、方法。
(項目61)
哺乳動物の種の雄からの精子細胞の受精を評価する方法であって、以下:
a.哺乳動物の1種の少なくとも2の雄から精子細胞を獲得する工程;
b.前記種の前記少なくとも2の雄の各々からの該精子細胞を実質的に同じフローサイトメトリー処理に曝す工程;
c.該実質的に同じフローサイトメトリー処理に曝される哺乳動物の該種の該少なくとも2の雄の各々からの実質的に等しい数の精子細胞混合物で卵母細胞を体外受精する工程;
d.該卵母細胞の該体外受精を介して生成される胚を収集する工程;
e.哺乳動物の該種の少なくとも2の雄のどちらが各々の胚を生み出したかを決定する工程;ならびに
f.該少なくとも2の雄の各々により生み出される同等の数の胚に基づいて少なくとも哺乳動物の該種の雄に対する同等の受精をランク付けする工程
を包含する、方法。
当然ながら、本発明のさらなる本質的な目的は、以降の本発明の説明において明確にされる。
(V.本発明を実施するための様式)
種々の収集手順、操作手順、保存手順、輸送手順、分離手順または授精手順の文脈内で精子細胞の生物学的特質、化学的特質、物理的特質、生理学的特質または機能的特質を維持、増強、アッセイ、試験または決定するための精液または精子細胞加工システム。
種々の収集手順、操作手順、保存手順、輸送手順、分離手順または授精手順の文脈内で精子細胞の生物学的特質、化学的特質、物理的特質、生理学的特質または機能的特質を維持、増強、アッセイ、試験または決定するための精液または精子細胞加工システム。
本発明の実施形態は、上記で広範に定義されるような哺乳動物種から精子細胞を入手する工程を包含し得る。次いで、精子細胞は、流動特性を有する流体流中に同調され得る。導管内の流体流は、流体流の流体力学的(rhealogical)特性、流体流が流れる導管の構成または幾何学、ならびに流体流に適用される外力(例えば、静水圧、振動性振動、圧電性振動、加熱における振動など)によって影響を受ける流動特性を有する。
重要なことには、流体流のこれらの流動特性は、導管内の流体を移動させるために必要な圧力の量に寄与する。非限定的な例として、フローサイトメトリーにおいて、流体は、比較的大きな交差部分領域内を移動し、次いで、分析インターフェースを越えて比較的小さい交差部分領域から最終収集点の範囲内を移動する。
流体流の流体力学的特性に沿ったこの型の構成または幾何学的配置は、局所的力(例えば、圧縮力、湾曲力(sheer force)など)生じ得、これは、粒子(例えば、流体流中に同調された精子細胞)の物理的完全性に影響を有し得る。
精子細胞を分析、精子細胞特性に基づいて分離、性選択するための方法、または他の賢明なプロセスとして、フローサイトメトリーまたは細胞分類に関わる構成要素または工程を包含する本発明のこれらの実施形態に関して、概念上の非限定的な流動細胞計測器または細胞分類機器が、図1によって示される。
流動細胞計測器または細胞分類機器は、図1によって示される構成要素(分析、分離、受精特性を制御するためか、または他の方法では処理される精子細胞を、樹立または供給するように作動する精子細胞供給源(1)が挙げられるが、これに限定されない)のすべてまたは一部を備える。
精子細胞は、その精子細胞がシース流体(3)のよって囲まれるような様式でノズル(2)内に堆積される。流動細胞計測器もしくは流動分類機器と互換性があり、かつ流動分析または加工中に精子細胞に対して利用可能な環境を提供する任意のシース流体が、本発明と共に利用され得る。シース流体としては、リン酸緩衝化生理食塩水、クエン酸塩溶液(例えば、2.9%クエン酸ナトリウム溶液)、またはHEPES緩衝溶液を単独で含むかまたは種々の組み合わせ中に含むシース流体が挙げられるが、これらに限定されない。
シース流体(3)は、通常は、いくつかのシース流体供給源(4)によって供給され、その結果、精子細胞供給源(1)が精子細胞を供給すると、シース流体(3)が同時にノズル(2)を通って供給される。この様式において、シース流体(3)は、細胞に対してシース流体環境を形成する。種々の流体が、いくらかの圧力にて流動細胞計測器に提供されるので、これらはノズル(2)の外へと流れ、そしてノズル開口部(5)で流れる。
発振器制御(7)によって非常に正確に制御され得る、ある型の発振器(6)を提供することによって、圧力波が、ノズル(2)内に確立され得、そしてノズル開口部(5)でノズル(2)を出て行くようにシース流体に伝わる。発振器(6)は、このように、シース流体(3)に対して作動するので、ノズル開口部(5)を出て行く流れ(8)は、最終的にかつ規則的に液滴(9)を形成する。細胞はシース流体環境に囲まれるため、液滴(9)は、それらの中に別個に単離された精子細胞(10)を含み得る。
液滴(9)は、一般的に、単離された精子細胞(10)を含むので、流動細胞計測器または細胞分類機器は、液滴(9)内に含まれる精子細胞を識別する精子細胞特性に基づいて液滴を識別しかつ分離し得る。このことは、精子細胞感知システム(11)を通して達成される。精子細胞感知システムは、少なくとも、各々の液滴(9)内に含まれる精子細胞に応答するある型の検出器(12)を備える。
精子感知システム(11)の1つの型は、Johnsonに対する米国特許第5,135,759号(本明細書中で参考として援用される)に十分に考察されるような型である。Johnsonの特許が精子細胞について説明するように、細胞感知システム(11)は、ある刺激物(例えば、レーザービーム(13))によって励起され得る特定の色素の相対的存在または相対的非存在に依存する作動を生じ得る。精子細胞の各々の型が色素で染色され得るが、異なる長さのX染色体およびY染色体が、異なるレベルの染色を引き起こす。従って、精子細胞に存在する色素の程度を感知することによって、X染色体保有精子とY染色体保有精子との間でそれらの異なる放射レベルにより識別することが可能である。代替的な光学システム、検出システムおよび精子細胞分析システムが公知であり、これらもまた本発明に従って使用され得、そしてJohnsonの特許によって提供される説明が例示目的であることが意図され、その結果、本発明の多数かつ様々な用途が理解され得る。WO01/85913(本明細書中で参考として援用される)もまた参照のこと。
流動細胞計測器または細胞分類機器分離技術において適切な細胞の最終的な分離および単離を達成するために、センサー(12)によって受け取られたシグナルは、所望の細胞がその液滴(9)内に存在するか否かに基づいて非常に素早く決定を行いかつ差動的に各々の液滴(9)を荷電し得る、ある型のソーター識別システム(14)に送られる。この様式において、ソーター識別システム(14)は、静電偏向板(15)が、液滴(9)が特定の精子細胞特性を有する精子細胞を含むか否かに基づいて液滴(9)を偏向するのを許可するように作動する。結果として、流動細胞計測器または細胞分類機器は、細胞が1以上の収集容器(16)に到着するのを引き起こすことによって細胞を分離するように作動する。従って、精子細胞のある特性を感知することによって、流動細胞計測器または細胞分類機器は、特定の特性に基づいて細胞を識別し得、そしてそれらを適切な収集容器(16)に配置し得る。特定の流動細胞計測器または細胞分類機器において、X染色体保有精子液滴は正に荷電され、従って、一方向に偏向する。Y染色体保有精子液滴は負に荷電され、従って、他の方向に偏向する。そして不要な流れ(すなわち、分類し得ない細胞)は荷電されず、従って、吸引チューブなどへの偏向されない流れに収集される。
ここで、主に図2を参照すると、このプロセスがさらに理解され得る。この図に示されるように、ノズル(2)は、流れ(8)を放出し、この流れ(8)は、発振器(7)(図2には示さず)が原因で液滴(9)を形成する。細胞供給源(1)(図2には示さず)が、Johnsonによって記載されるように、染色され得る(または本発明の特定の実施形態において、DIC技術を使用する場合には染色され得ない)精子細胞(10)を供給するので、色素(DIC技術が利用される場合には精子頭部)に入射するレーザー(またはDIC技術を使用する場合には照明源)(13)によって生じるビームによって生じる発光は、センサー(12)によって差動的に測定され、その結果、各々の液滴(9)の電荷の存在または非存在が、流れ(8)から分離しながら流動細胞計測器によって制御され得る。この制御は、液滴(9)の内容物に基づいて、正に荷電した液滴(9)、負に荷電した液滴(9)、および荷電していない液滴(9)を生じる。図2に示されるように、特定の液滴は、偏向された液滴(17)として示される。これらの偏向された液滴(17)は、一方または他方の性であり得る精子細胞(10)を含む液滴である。次いで、これらは、適切な収集器(16)に堆積され、これによって、性選択された精子細胞の集団が生成される。
流体流が、流動細胞計測器、細胞分類器、または精子細胞を流体流内に同調する他のデバイス内で生じるにせよ、流れの流動特性は特徴付けられ得、そして流体流の流動特性を変えるための調整手段が、力(例えば、圧縮力、湾曲力(sheer force)など)を増大または低下させるために導入され得、その結果、流体流に同調された粒子が、物理的に、生理的に、機能的に、または機械的に変化され得る。
従って、流動経路について選択的に調整可能な範囲の流体流特性が、調整手段を使用して生じられ得、増分測定として表され得る。例えば、流動細胞計測器の文脈内または細胞分類機器の文脈内での流体流特性の変化は付加的に調整され得、1平方インチ当たりのポンドで測定され、代表的には、流体流速度もしくはシース流体速度の相応する増加または減少を伴って、約20ポンド/平方インチと100ポンド/平方インチとの間で流体流圧における付加的な増加または減少を可能にする。
本発明の特定の実施形態に従って、特定の種の哺乳動物の精子細胞が、適切な流体流流動特性を有する流体流に同調される。次いで、流体流の流動特性が、同調された精子細胞が生存能力を維持する段々と測定された範囲にわたって、選択的に調整される。次いで、精子細胞受精特性が、複数の精子細胞サンプルの各々について評価され、測定された範囲内で生じた複数の流動特性の各々に相当すると解釈される。
その後、哺乳動物種または哺乳動物種の個々のメンバー由来の精子細胞に関する精子細胞受精特性が制御され得、所望の精子細胞受精特性を有する精子細胞授精サンプルが、生成され得る。
例えば、6頭の雄ウシ(bull)の各々由来の精子細胞を、Hoechst33342で34℃にて45分間染色し、そして30ポンド/平方インチ、 40psi、または50psiの圧力を有する流体流を用いて、約95%の精度で、X染色体保有集団またはY染色体保有集団(あるいは両方)に大量分類(bulk−sort)(部分集団への分類を行わない流動細胞計測器また細胞分類機器を通して)するか、または内径70μmのノズルを有する流動細胞計測器を用いて分類した。50psiから30psiへの流体流圧力の減少は、分類速度をわずか2〜3%しか低下させなかった。
その後、精子細胞を5℃まで冷却し、そして遠心分離によって濃縮し、100μlカラム当たり約2×106総精子細胞で0.25mlストローに充填し、そして分類されていないコントロールと共に蒸気凍結方法を使用して凍結させた。その後、そのストロー中の精子細胞を解凍した。
次いで、精子細胞を、進行性の運動性については解凍30分後および120分後に2人の観察者によって盲目的に、ならびに解凍105分後に流動細胞計測器によって、生存精子細胞パーセントについてはPI染色によって、ならびにHamilton Thorneシステムを使用して解凍後120分後にCASA分析によって、種々の精子細胞特性に関して評価した。全体の手順を2回繰り返した。
階乗ANOVAは、雄ウシおよび圧力効果の両方が有意であったことを示した(P<0.005、表1)。
(表1.分類中の異なるシステム圧力に対する解凍後の精子の応答a)
*側頭部変位の振幅
より大きい数は、硬さがより低くかつより正常な運動性を意味する。すべての応答において、雄ウシ間で典型的な相違があった。しかし、1つを例外として、処理による雄ウシの相互作用は小さく、このことは、知見が集団におけるほとんどの雄ウシに同様に当てはまることを意味する。圧力が増加するように漸進的に調整された流体流の流動特性は、実質的に測定されたすべての精子細胞受精特性に影響を及ぼしたが、高度に統計上有意なもののみが、表1にある。
理解され得るように、約50psiで採取された精子細胞サンプルと約40psiで採取された生細胞サンプルとの間には、精子細胞の受精能の特性における大きな変化が存在し、次いで、約40psiと約30psiとの間の遙かに小さな変化が存在する。このことは、精子細胞受精能特性に対する効果が、線形的ではあり得ないことを示す。30psiにおいて記載されるフロー特性に曝されるウシ精子細胞に関しては、精子細胞受精能特性は、非ソートコントロールと実質的に同じであったか、または非ソートコントロールに匹敵し、およびいくつかのよりよい応答(精子細胞が、ウシ種の雌の授精または人工授精のために使用される場合)について、同様であった。類似の手順を、類似の結果および結論を有する種付けウシから得られた精子細胞を用いて行った。
精子細胞受精能特性は、制御され得、哺乳動物から得られた精子細胞に関し得る。大部分の哺乳動物種について、流体ストリーム特性を変化させて、流体ストリーム圧を漸増して低下させることは、フローサイトメトリーまたは他の方法の状況におけるかどうかに拘わらず、精子細胞受精能特性を変化させた対応する等級付けした精子細胞サンプルを生じ得る。これは、以下に記載されるように、人工授精、体外受精、または細胞質内注入を含む種々の手順のために使用され得る。
本発明は、二項応答(例えば、妊娠/非妊娠)を評価するために別の試験を提供する。この応答は、代表的には、処置の差異がかなり大きい場合を除いて、統計的有意性を得るために1回の処置あたり多数の動物を要する。処置の差異に起因して性別選択された精子の精子細胞受精能特性における差異を増幅し得る本発明の一実施形態は、授精前に、異なる処理の精子または雄の精子を混合し、そして各雄または処理に由来する胚、胎仔または子孫の生成を決定する、競合的な、または不均一精子の(heterospermic)受精能を含む。
例えば、精子細胞をフローサイトメトリーによってまたは2つの異なる流体ストリーム圧でのDNA含有量についての細胞ソーティングによって性別選択した後の受精能は、遺伝子マーカーとして性別を使用する不均一精子の授精を使用して評価され得る。2匹の雄ウシの各々に由来する精子細胞を、X染色体保有集団またはY染色体保有集団にソートし、すなわち両方を、30psiまたは50psiのいずれかに調節した流体ストリーム圧によって約95%の正確度で、ソートした。遠心分離によりソート後の精子細胞を濃縮した後、30psiでソートした1×106のX染色体保有精子細胞を、各雄ウシについて50psiでソートした1×106Y染色体保有精子細胞と一緒に0.25mLのストローに入れ、同様に他のストローにおいては、逆を行った:30psiでの1×106Y精子+50psiでの1×106 X精子。これらの精子細胞は、ソートされていないコントロールとともに、次いで凍結し、数ヶ月後に融解し、85頭のホルスタイン未経産牛の子宮体内で授精させ、12または24時間後のいずれかには、2回の授精にわたってバランスを保った亜群で発情期を観察した。
授精2ヶ月後、43頭の未経産牛のうちの81%が妊娠し、30psiで処理した精子の性別に対応する性別の胎仔(超音波により決定された)を妊娠した。このことは、2つの圧力でソートされた精子細胞の精子細胞受精能特性に差異があった場合、予測された50:50性別比とは異なったことを示す(P<0.01)。2×106精子/用量における性別選択された精子での妊娠率は、51%(43/85)であり;これは、同じ射出物に由来する20×106の雌雄選別されていない精子/用量の制御に類似した(39%(9/23))。
本発明の別の実施形態は、卵割速度および制御された精子細胞受精能特性を有する精子細胞を使用する胚盤胞形成の速度を変化させる方法を提供する。2つのウシ精子細胞サンプル(各々、制御された受精能特性を有する)を、それぞれ、40psiおよび50psiにてウシ精子細胞をフローソーティングすることによって生成した。受精培地中での精子細胞濃度の用量応答を、各精子細胞サンプルに由来するX染色体保有精子細胞およびY染色体保有精子細胞を用いて行った。従って、2流体ストリーム圧、3つの精子細胞濃度(1×106精子/ml、0.33×106精子/mlおよび0.11×106精子/ml)、6頭の雄牛および2種の性別を含む多因子性手順を行い得る。
約2,000個の卵母細胞を、屠殺場の卵巣からの約2mm〜約8mmの卵胞から吸引した。化学的に規定された培地(CDM)を、Journal of Animal Sciences,78:152−157(2000)(本明細書中に参考として援用される)によって記載されるように全体を通して使用した。成熟は、M−CDM(0.5% FAF−BSA、15ng/ml NIDDK−oFSH−20、1μg/ml USDA−LH−B−5、0.1μg/ml E2、50ng/μl EGFおよび0.1mM システアミンを補充)中で、38.8℃および空気中5% CO2において23時間の間に起こった。2×106細胞/ストローで凍結した、ソートした精子細胞を融解し、2mlの45% および2mlの90% Percoll勾配を通して、20分間、400gで遠心分離した。次いで、上清を廃棄し、2mlのFCDM(0.5% FAF−BSA、2mM カフェインおよび0.02% ヘパリンを補充)を精子ペレットに添加し、500gにて5分間遠心分離した。その上清を廃棄し、約50μlの精子懸濁液を残した。成熟卵母細胞を、FCDM中で1回洗浄し、鉱油の下にあるFCDMの25μlの液滴の中に、5μlで15の群に移した。受精は、一滴あたり10μlの精子懸濁液を38.8℃および空気中5% CO2にて18時間添加することによって起こった。予定運命の接合体を、CDM1中で2日間、およびCDM2中で4.5日間、38.5℃、5% O2、5% CO2および90% N2中で培養した。7.5日目に、胚盤胞発生を評価した:品質1〜4(1は、優秀および4は、不十分)および発生段階6〜8(6は、完全、6.5は拡張している、7は拡張した、7.5は脱出、および8は脱出した胚盤胞)。データ(表1)は、ANOVAおよびアークサイン変換後の一次偏差(first deviation)によって分析された。
卵割(53.6および43.6%)ならびに胚盤胞(18.2および14.7%)の割合は、約50psiよりも約40psiで得られた制御された精子細胞特性を有する精子細胞を利用する手順についてより高かった(P<0.01)。用量と圧力との間には何ら相互作用はなく;従って、各精子濃度で圧力を低くすることは類似の利点があった。卵割および胚盤胞生成についての精子細胞濃度の明らかな用量応答が見いだされた(表2)。また、両方の応答について雄牛の中で大きな差異(P<0.01)があり、卵割%について雄牛×用量相互作用があった(P<0.01)。このデータは、精子用量が何頭かの雄牛について>1.0×106/mlであるべきであることを示す。胚の品質は、X精子よりもY精子がより高かった(P<0.01)(1.12 対 1.57)。他は、胚を性別鑑別した場合に、IVF胚についてこのことを示した。およびこの効果は、いまや、性別鑑定された精子で確認された。
(表2.雄牛によって提示された、1卵母細胞あたりの卵割(%、C)および胚盤胞(%、B)データ)
**ソートされた精子の受精能は、フローサイトメトリーによる精子ソーティングの間の機械的損傷に部分的に起因して、ソートされていないコントロール精子に比較して低かった。システム圧力を低下させることにより、IVFにおける精子品質および受精能の両方が改善した。現在の研究は、精子ソーティングの間のシステム圧力の影響を評価し、ICSI後の胚発生時の卵母細胞の成熟を長期化した。3頭の雄牛の各々に由来する精子を、34℃で125μM Hoechst 33342で45分間染色し、40psiまたは50psiのSX MoFlo(登録商標)ソーターの圧力を用いて、95%正確度でX染色体保有集団およびY染色体保有集団にソートし、次いで、低温保存した。1mlのCDM1(0.5% FAF−BSA、2mM グルコース、50ng/ml EGF、15ng/ml NIDDK−oFSH−20、1μg/ml USDA−LH−B−5、1μg/ml E2および0.1mM システアミンを補充)を有するウェルあたり、屠殺場の卵巣から得た50個のウシ卵母細胞を入れ、次いで、38.5℃、空気中5% CO2で24時間または30時間にわたって成熟させた。成熟卵母細胞の卵丘細胞(cumulus cell)を、ボルテックスすることにより除去し、極体を有する卵母細胞を、選択した。ソートした凍結融解精液からの運動性の精子を、45%および90%のPercollの各2mlによる遠心分離により回収し、その濃度を4×106/mlに調節した。成熟卵母細胞を、Piezo注射システムを使用して、2つの注射群(ICSIおよび偽注射)に分けた。精子注射ピペットの外径は、8〜10μmであった。全ての操作を、室温(24〜25℃)にて行った。注射後、卵母細胞を、5μM イオノマイシンで4分間活性化させ、5%CO2,5%O2および90% N2の下で、50μlのCDM1中、38.5℃にて培養し、注射後72時間で卵割について評価した。ICSIおよび偽注射群からの卵割していない卵母細胞を、オルセインで染色し、受精状態について評価した。卵割した胚をさらに培養し、胚盤胞発生を、注射後7.5日目に評価した。データを、ANOVAに供し;アークサイン変換を、%データについて使用した。
24時間成熟卵母細胞を用いると、40psiでソートした精子と、50psiでソートした精子との間には、卵割割合についても胚盤胞割合についても何ら差異はなく(P>0.1)、圧力×雄牛相互作用もなかった。研究した全ての応答について、雄牛の有意な影響はなかった(P<0.05)。40psiでソートした精子を注射した場合、30時間にわたって成熟させた卵母細胞は、24時間成熟卵母細胞よりも高い卵割割合を生じ(22.9% 対 12.2%、P<0.05)、胚盤胞割合においても何ら差異はなかった(P>0.1)。全体的な胚盤胞発生は、偽注射においてよりもICSIにおいてより高かった(7.5% 対 1.3%、P<0.05)。24時間成熟から卵割していない卵母細胞を、受精状態に関して評価した場合、ICSIは、偽注射と比較して、2つの極体および/または脱凝集精子を有するより高いパーセンテージを示した(15.7% 対 1.7%,P<0.05)。30時間成熟卵母細胞を用いても、それらの2群の間の受精状態において何ら差異はなかった。本発明者らは、40psi 対 50psiでソートした運動性精子を使用するICSI後に、卵割にも胚盤胞への発生にも何ら差異はないことを結論づける。
本発明の別の実施形態において、遺伝子マーカーとしての性別を使用する不均一精子の授精を使用して、雄の受精能をランク付けし得、精子性別鑑定に関係しない精子処理の受精能をランク付けし得る。精子機能の現在のインビトロ試験は、雄の受精能と高くは相関せず、均一精子(homospermic)授精は、正確な受精能データを得るために、1回の処理につき、数百回もの授精を要する。2頭以上の雄牛の精子を混合する不均一精子の授精は、試験された大部分の種における相対的受精能の正確な予測を提供する。
凍結された、4頭の雄牛の4群からのフローソートした精子を融解し、群内での3頭の全ての組み合わせ(ABC、ABD、ACD、BCD)において発情期が 始まって12時間または24時間後に、未経産牛に授精させた。同数の前進運動性の精子を、融解後の合計600,000の運動性精子を各雄牛から授精させた。各注入物の半分を、各子宮角に入れた。胚を、発情して14.5日後〜20日後に非外科的に回収した。回収により、332頭の未経産牛から165の伸長した胚を得た(48%)。多型DNAマーカーを使用して胚を遺伝子型決定し、各胚の生検の種牛を決定した。遺伝子型決定後、165個の胚のうち、118個を、特定の種牛に割り当てることができた。各雄牛群をランク付けするための不均一精子指数を、最尤分析定理を使用して計算した。群内の各雄牛を、これらの指数に基づいてランク付けした(表1)。群1において、最も乏しい雄牛の受精能は、2つの他の雄牛よりも有意に低かった(P<0.05)。群2において、優性の雄牛は、最も高い指数を有した(P<0.05)。類似の区別は、群3および4において行うことができた。しかし、その群の3つにおいて、何頭かの雄牛の受精能は、明らかに高くも低くもなかった(P>0.05)。
(表1.群内の個々の雄牛の不均一精子指数±SE)
(表1.群内の個々の雄牛の不均一精子指数±SE)
これらの手順を用いると、4頭の雄牛の1群あたり30の遺伝子型決定した胚の平均は、明らかに異なる受精能を有する雄牛の検出を可能にした。精子処理をまた、この技術で評価することができた。いくらかのメスを必要とするこのインビボ試験は、どの雄牛が比較的高いまたは低い受精能を有するかに関する情報を迅速に提供する。
本発明に従って性別選択した精子細胞を用いたメスの人工授精によって得られた仔牛の集団は、性別鑑別されていない選択された精子細胞を使用するコントロールと実質的に同一である。さらに、性別選択した精子を用いたメスの人工授精は、計画した性別の仔牛の約90%を生じた。上記のように、精子細胞は、フローサイトメトリーまたはH33342での染色後の細胞ソーティングによるDNA含有量に基づいて性別選択され得る。その性別選択された精子細胞は、次いで、Theriogenology,52:1375(
)(本明細書中に参考として援用される)において記載されるように低温保存され得る。
)(本明細書中に参考として援用される)において記載されるように低温保存され得る。
発情期を、種々の肉用牛および乳用牛の未経産牛および雌牛に、0.5mg 酢酸メレンゲストロール(MGA)を毎日14日間与え、次いで、その後17〜19日に25mg プロスタグランジンF2(PGF2)を筋肉内で与えることによるか、または12日間隔で25mg PGF2の筋肉注射のいずれかによって、同期化し得た。凍結融解性別選択された授精サンプルまたは同じ射出物由来の凍結融解精子のいずれかを用いた授精を、発情を最初に観察して12時間または24時間のいずれかで行った。各飼育群について、その授精の約2/3を、性別鑑別した精子を用いて行い、一方コントロール精子を、残りにおいて使用した。妊娠および胎仔性別を、2ヶ月後に超音波診断した。
畜牛を、異なる管理レベルの下で、分娩および離乳を通して13カ所の農場で管理した(1農場につきN=49〜228)。収集したデータには、妊娠期間の長さ、出生時体重、分娩の容易さ(1=正常〜4=帝王切開)、離乳時体重、新生仔死亡、および出生時から離乳時までの死亡を含めた。全ての農場が、出生時体重および離乳時体重を記録したわけではなかった。データを、以下の因子で分散の要因分析に供した:管理群、ソートした精子 対 コントロール精子、および仔牛の性別。アークサイン変換を、パーセンテージデータについて使用した。最小2乗平均を、表1に示す。
(表1.性別鑑定した仔牛およびコントロール仔牛からの分娩結果)
研究したあらゆる応答について、性別鑑定した群 対 コントロール群に由来する仔牛の間には何ら有意差がなく(P>0.1)、有意な相互作用もなかった。研究した全ての応答について、管理群の有意な影響があった(離乳時に生存している全ての期待%についてP<0.001、P<0.02)。また、出生時体重:32.2kgおよび35.5kg;離乳時体重:232kgおよび246kg;分娩の困難さ:1.20および1.42;ならびに妊娠期間278日および280日について、雌の仔牛と雄の仔牛との間には有意差があった(全てP<0.001)。
コントロール仔牛の性別比は、51.0% 雄(N=382)であった。Xソート精子は、87.7% 雌を生じ、一方、Yソート精子は、93.6%雄を生じた(N=94)。出生時に死亡したいくらかの仔牛は、性別を記録しておらず、含めなかった。
種牛の精子のフローサイトメトリーによる分離が最近発達したことにより、予め選択された性別を有する正常仔の生成がもたらされた(Lindsey A.C.,Morris L.H.,Allen W.R.,Schenk J.L.,Squires E.L.,Bruemmer J.E.Equine vet.J.2002,34:128−132)。この技術が利用しやすいので、精子は、フローサイトメーターから雌牛に移されている。この研究は、性別の予備選択後の新鮮な種牛の精子の寿命および先体状態を試験した。7頭の種牛の各々からの3つの射出物を、人工膣により回収し、スキムミルク−グルコース増量剤(1:1 v/v)中で、20℃で、2〜6時間の間に研究室に輸送した。この精液を、400gにて10分間遠心分離し、精漿を除去した。精子ペレットを、Kenneys改変タイロード培地(KMT)中で100×106/mlに再懸濁し、Hoechst 33342(5mg/ml、Sigma−Aldrich,St.Louis MO)で染色し、30分間インキュベートし、フローサイトメトリーに供した。ソートした精子を遠心分離し、4℃または20℃での48時間保存のために、KMT中で250μlのアリコートにおいて40×106mlに再懸濁した。精子の総前進性運動(TPM)および先体状態を、ソートする前、ならびにソートして0時間後、2時間後、12時間後、24時間後、36時間後および48時間後に評価した。そのTPMを、顕微鏡で評価し、先体を、FITC−PNA(Sigma−Aldrich)で染色し、インタクト、斑状または喪失として分類した。種牛、時間および保存温度の影響を、Proc GLM手順を使用して分析しおよび最小平均比較を行った(SAS Institute)。
時間がたつにつれて、精子運動性およびインタクトな先体の割合に関して、種馬の影響があった(p=0.03)。精子をHoechst 33342で染色およびインキュベートすると、インタクトな先体の割合の減少がもたらされた(表1)。しかし、ソート後に観察されたインタクトな先体の割合は、ソート前の精子集団より高かった。ソート後48時間の間に失われた先体が増加する(p<0.0001)につれて、インタクトな先体の割合は減少した(p<0.0001)が、斑状の先体の割合に対する時間の影響は何らなかった。ソート後の精子保存温度の有意な影響があり、その結果、20℃で12時間の保存が、4℃での保存より高い運動性を生じた。フローサイトメトリーによる精子の性別ソーティングは、新鮮な精子に等しく、24時間にわたって先体完全性を維持し得る精子の集団の選択がもたらされた。FACS分離後12時間にわたる精子の寿命の維持は、性別ソートされた精子を、フローサイトメーターの部位からいくらかの距離に位置した雌牛に移すことを可能にするはずである。
(表1.経時的なフローソートした精子の運動性および先体状態)
予め決定された性別の仔牛は、正確かつ信頼性が高く研究設定において生成された(Lindseyら,Equine Vet.J.2002,34:128−132)。性別ソートされた精子は、産業によって、しかし凍結/融解された性別ソートされた精子が利用可能であった場合、より効率よく利用される。この研究の目的は、15℃で18時間保存し、フローソートし、次いで凍結した精子の運動特性を、18時間15℃で輸送した直後に低温保存した精子と比較することであった。5頭の種馬の各々に由来する2つの射出物を、使用した。収集後、両方の処理についての精子を、Kenney+改変タイロード(KMT)培地中で25×106/mLに増量し、15℃で18時間、水浴中に保存した。保存後、精子を、600gで10分間遠心分離する前に、周囲温度(約22℃)に到達させた。精漿を除去し、精子ペレットを、500×106/mlにKMT中で再懸濁した。このサンプルから精子のアリコートを取り出し(コントロール)、スキムミルク、卵黄中で87×106/mlに増量し、凍結増量し(4%グリセロール;FR5)、液体窒気体中で凍結する前に90分間にわたり5℃までゆっくりと冷却した。精子の第2のアリコート(フローソートした)を、KMT中で100×106/mlに増量し、Hoechst 33342(5mg/ml、Sigma−Aldrich,St.Louis MO)で染色し、30分間インキュベートし、その後、フローサイトメトリーによりソートした。ソートした精子を、850gで20分間遠心分離し、FR5中で87×106/mlに再懸濁し、低温保存する前に、90分間にわたって5℃までゆっくりと冷却した。両方の処理についての精子を0.25mlストローに詰め、各ストローには、2000万の精子を含めた。精子を、融解して30分および90分後に、可視的な前進運動性(2回の観察)について(盲検的に)評価した。各ストローからの精子のアリコートを、両方、KMTおよび2mMカフェインを含むKMT中に希釈した。サンプルを、評価する前に、37℃で5〜10分間平衡化した。各処理の第2のストローを、Hamilton−Thorn Motility Analyzer(CASA)を用いて(カフェインありまたはなしで)評価した。結果を、表1に示す。運動パラメーターの差異を、ANOVAにより決定した。大部分の測定した応答に従って、フローソーティングは、精子運動性に対して有害であった。さらに、2mM カフェインは、多くの精子応答を改善した。カフェインがコントロール精子よりもソートされた精子について、よりいくらかの応答を改善したことにより、相互作用があった。従って、ソーティングにより引き起こされた損傷は、カフェインにより部分的に補償され得る。類似の補償が、雌牛の生殖管において起こり得る可能性がある。保存された、低温保存された種牛精子の受精能を、低温保存前に保存およびソートされた精子の受精能と比較する研究が現在進行している。
プロゲステロンCIDRを12〜14日膣に挿入することによって、コロラド州およびミネソタ州の雌エルク(cow elk)3〜6年齢を、9月の発情期について同調させた。CIDRを除去する際に、200IUのeCGを筋内投与し、60時間後にエルクに時限受精(timed−inseminate)させた。5年齢雄エルク(bull elk)から電気的射精を通じて新鮮な精液を回収し、ニートな射精液として精子分類研究室(sperm−sorting laboratory)に輸送するために、4時間かけてゆっくりと約20℃まで冷却した。この射精液を、1.5mlアリコートを10秒間、15,000×gで遠心分離することによって系統化(straining)のために、1×109精子/mlに濃縮した。精液を、34℃で45分間、112μM Hoechst 33342を200×106精子/mlで含むTALP培地中でインキュベートし、次いで、分類のために、100×106個/mlに希釈した。X染色体保有精子およびY染色体保有精子の異なるDNA含量に基づき、精子を分類した。X染色体保有エルク精子は、Y染色体保有精子よりも3.8%多いDNAを含んでいた。MoFlo(登録商標)SXを用いて(TRISベースのシース流体を用いて50psiで操作)、精子を4時間かけてフロー分類(flow−sort)した。351帯域および364帯域のアルゴンレーザーを150mWで照射することにより、DNAに結合したHoechst 33342色素を励起させた。X染色体保有精子およびY染色体保有精子の両方(超音波処理した精子アリコートをDNAについて再分析することによって確認した場合、約92%純度)を、約4,700精子/秒で、2mlの20%卵黄TRISエクステンダーを含むチューブに回収した。分類した15ml量を、連続的に回収した。各々の性の約110×106精子を分類し、そして90分かけて5℃まで冷却した。等量のグリセロール(12%)含有エクステンダーを、5℃にて分類した容量に添加した。30mlを含有する分類した精子アリコートを、4℃で20分間、850×gで遠心分離することによって濃縮した。精子ペレットをプールし、21.7×106精子/mlに調整し、そして0.25mlストローに充填した。合計5×106精子を含有する各ストローを液体窒素蒸気中で凍結した。コントロールとして、同じ射精液由来の合計5×106精子を、有性精子と同じ時間、0.25mlストロー中で凍結させた。37℃で30秒間解凍した後、65%および60%の精子(それぞれ、コントロールおよび有性)は、徐々に運動しだした(目視による見積もりにより決定)。3つの異なる場所および管理スキームのウシ(cow)を、慣用的な子宮体における大腿骨頸部精子堆積法を用いて受精させた。妊娠特異的プロテインB(Bio Tracking,Moscow,Idaho)について血液をアッセイすることによって、妊娠を受精の40日後に決定した。1つの場所の10匹のウシ(cow)は、受精時に乏しい条件に置き、有性精子においてもコントロール精子においても妊娠が達成されなかった。他の場所での有性精子による妊娠率(61%;11/18)は、コントロールの受精(50%;3/6)と類似していた。これらの妊娠率(有性およびコントロール)は、通常のエルク人工授精において使用されるよりも少ない精子から生じた。11匹中9匹(82%)の有性仔ウシ(calf)は、予測された性別であった。
本発明はさらに、本発明の上記実施形態のいずれかに従って生産された哺乳動物、またはX染色体保有精液細胞の濃縮集団またはY染色体保有精子細胞の濃縮集団のいずれかを有する精子細胞受精サンプルを提供する本発明の種々の実施形態に従う予め決定された性別の哺乳動物、または、精子細胞受精サンプルが哺乳動物の特定の種を使用する受精に使用される代表的な数と比較して少数の精子細胞を含有する本発明の任意の実施形態において生産される哺乳動物、または上記の本発明に従って生産されるエルク子孫を包含し得る。
前述から容易に理解され得るように、本発明の基本概念は、種々の方法で具体化され得る。その方法は、精子細胞処理を達成する技術およびデバイスの両方を含む精子細胞処理系を包含する。この適用において、種々の精子細胞処理技術が、記載される種々のデバイスにより達成されることが示された結果の一部としておよびその用途に特有の工程として開示されている。これらは単に、意図され記載されるようなデバイスを用いた自然な結果である。さらに、いくつかのデバイスが開示されているが、これらは特定の方法を達成しただけでなく、多くの方法で変更され得ることが理解されるべきである。重要なことは、前述の全てに関して、これらの局面の全てが、本開示により包含されることが理解されるべきである。
この非仮出願に含まれる議論は、基礎的な記載として利用されることを意図している。読者は、詳細な説明が、可能性のある全ての実施形態を明示的に記載し得ず;多くの代替物が暗示されていることを認識するはずである。また、この説明が、本発明の全体的な性質を十分に説明し得ず、かつどの程度、各々の特徴または要素がより広範な機能または多くの種々の代替要素もしくは等価要素を実際に代表し得るかを明示的に示し得ない。繰り返すが、これらは、本開示に暗示的に含まれれている。本発明がデバイス指向技術において記載されている場合、そのデバイスの各エレメントは、機能を暗黙のうちに実施する。装置クレームは、記載されるデバイスを包含し得るだけでなく、方法クレームまたはプロセスクレームもまた、本発明および各エレメントが実施する機能を発揮することを含み得る。説明も用語も、特許出願全体に含まれるクレームの範囲を限定することを意図していない。
本発明の本質から逸脱することなく種々の変更がなされ得ることもまた理解されるはずである。このような変更もまた、この説明に暗示的に含まれる。これらはなおも、本発明の範囲内に含まれる。示される明示的な実施形態、多くの種々の暗示される代替の実施形態、および広範な方法またはプロセス等を含む広範な開示が、本開示により包含される。
さらに、本発明およびクレームの種々の各要素もまた、種々の様式で達成され得る。本開示は、各々のこのようなバリエーションを包含すること、それが任意の装置実施形態、方法実施形態、もしくはプロセス実施形態の実施形態のバリエーションであること、またはこれらの任意の要素のバリエーションでさえあることが理解されるはずである。特に、本開示は、本発明の要素に関するので、各要素についての用語は、等価な装置用語または方法用語により表現され得る(機能または結果のみが同じであったとしても)ことが理解されるはずである。このような等価な用語、より広範な用語、またはより一般的な用語でさえも、各要素または作用の説明に包含されるとみなされるはずである。このような用語は、所望の場合、本発明に与えられる権利の暗示的に広範な範囲を明示することで置換され得る。実施例は1つではないので、全ての作用が、その作用を起こす手段としてまたはその作用を引き起こす要素として表現され得ることが理解されるはずである。同様に、開示される各々の物理的要素は、その物理的要素が促進する作用の開示を包含することが理解されるはずである。この最後の局面に関して、実施例は1つではないので、「フローソーター(flow−sorter)」の開示は、「フロー分類(flow−sorting)」の作用の開示を包含する(明示的に議論していようがなかろうが)ことが理解されるはずである。逆に言うと、「フロー分類」の作用の開示が有効に存在する場合、そのような開示は、「フローソーター」の開示および「フロー分類手段」の開示さえも包含することが理解されるはずである。このような変更および代替用語は、この説明に明示的に含まれることが理解されるはずである。
本願において特許について言及される法律、法令、規定、もしくは規則の任意の行為;または本願において特許について言及される特許、刊行物、もしくは他の参考文献は、本明細書中に参考として援用する。さらに、使用される各用語に関して、本願におけるその使用がこのような解釈と矛盾しない限り、一般的な辞書の定義が、各用語について組み込まれていると理解されるべきであり、全ての定義、代替用語、および類義語(例えば、Random House Webster’s Unabridged Dictionary,第二版に含まれるようなもの)が、本明細書中に参考として援用される。最後に、「仮特許出願に従って参考として援用される参考文献」リストに列挙される全ての参考文献、または本願と共に提出された他の情報陳述が、本明細書に添付され、かつ本明細書中に参考として援用される。しかし、上述の各々に関して、参考として援用されるこのような情報または陳述がこの/これらの発明の特許化と矛盾すると解釈され得る程度まで、このような陳述が、本出願人によりなされたと明示的にみなされないべきである。
従って、本出願人は、少なくとも:i)本明細書中に開示され記載されているような精子細胞処理デバイスの各々、ii)開示され記載される関連方法、iii)これらのデバイスおよび方法の各々の類似のバリエーション、等価なバリエーション、および暗示されるバリエーションでさえ、iv)開示され記載されるような示される各機能を達成する代替設計、v)開示され記載されるものを達成することが暗示されているような示される各機能を達成する代替設計および方法、vi)別個の独立した発明として示される各特徴、要素、および工程、vii)開示される種々のシステムおよび要素によって強化される応用、viii)このようなシステムまたは要素によって生産される、得られる産物、およびix)本明細書中および添付の実施例のいずれかを参照して以前に実質的に記載された方法および装置、x)開示される各要素の種々の組み合わせおよび順列、ならびにxi)各々の潜在的に従属するクレームまたは提示される独立クレームもしくは概念の各々およびそれら一つずつに対する従属としての概念、を主張していることが理解されるはずである。これに関して、実施上の理由のためおよび潜在的な数百ものクレームを追加することを回避するため、本出願人は、最終的に、最初の従属のみを有するクレームを提示し得ることが理解されるはずである。サポートは、新規事項に関する法律(欧州特許条約第123条第2項および米国特許法第132条または他のこのような法律が挙げられるがこれらに限定されない)の下で、任意の種々の従属または1つの独立クレームもしくは概念の下で任意のほかの独立クレームまたは概念の下にある従属または要素として提示される他の要素の追加が許可されるために必要とされる程度に存在することが理解されるはずである。さらに、使用される場合、他動詞的用語「〜を含む」の使用は、従来のクレーム解釈に従って、本願において「開放」クレームを維持するために使用される。従って、その内容がそうでないことを必要としない限り、用語「〜を含む」またはそのバリエーション(例えば、「包含する」等)は、言及される要素もしくは工程または要素もしくは工程のグループの包含を意味し、任意の他の要素もしくは工程または要素もしくは工程のグループの排除を意味しないことが意図される。このような用語は、それらの最も広範な形態において、本出願人に、法的に許容される最も広い権利範囲を与えるよう解釈されるはずである。
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US8264674B2 (en) * | 2004-04-23 | 2012-09-11 | The Furukawa Electric Co., Ltd. | Methods of separating, identifying and dispensing specimen and device therefor, and analyzing device method |
US7833147B2 (en) | 2004-07-22 | 2010-11-16 | Inguran, LLC. | Process for enriching a population of sperm cells |
WO2006091717A1 (en) * | 2005-02-24 | 2006-08-31 | Biocern, Inc. | Sperm cell separation methods and compositions |
WO2006116627A1 (en) * | 2005-04-28 | 2006-11-02 | Genetics & Ivf Institute | Methods for reducing the percentage of abnormal gametes |
CL2008002118A1 (es) * | 2007-07-19 | 2008-12-19 | Xy Llc | Metodo para la produccion de un embrion equino de sexo seleccionado mediante la inyeccion intracitoplasmatica de esperma utilizando espermatozoides de equino seleccionados por sexo. |
US8251887B2 (en) | 2009-01-24 | 2012-08-28 | Xihe Li | Reproductive technology of low dose semen production and in vitro/in vitro fertilization in domestic animals |
US8512224B2 (en) * | 2009-01-24 | 2013-08-20 | Xy, Llc | Method of producing an inseminate |
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WO2014035840A1 (en) | 2012-08-29 | 2014-03-06 | Krug Kristie Marie | Magnetic removal or identification of damaged or compromised cells or cellular structures |
US10379026B2 (en) | 2012-08-29 | 2019-08-13 | Inguran, Llc | Cell processing using magnetic particles |
EP2903432B1 (en) * | 2012-10-05 | 2019-05-08 | Inguran, LLC | Methods of processing sperm for sex sorting |
US10620213B2 (en) | 2012-10-05 | 2020-04-14 | Inguran, Llc | High pressure sperm sorting and flow cytometer methods |
RU2015127205A (ru) | 2013-01-08 | 2017-02-15 | Зэ Брайгхэм Энд Вименс Хоспитал, Инк. | Способы визуализации метаболизма с целью оценки ооцитов и эмбрионов |
WO2015161045A1 (en) * | 2014-04-16 | 2015-10-22 | President And Fellows Of Harvard College | Non-linear imaging systems and methods for assisted reproductive technologies |
AU2015357516A1 (en) | 2014-12-05 | 2017-06-15 | Inguran, Llc | Cell processing using magnetic particles |
WO2016148905A1 (en) * | 2015-03-19 | 2016-09-22 | President And Fellows Of Harvard College | Flim for differentiating old and young oocytes |
WO2018136772A1 (en) * | 2017-01-20 | 2018-07-26 | Inguran, Llc | Sperm processing method, apparatus and related media compositions |
EP3687416A1 (en) | 2017-09-29 | 2020-08-05 | Nanovare SAS | Devices and methods for analysis of male infertility |
Family Cites Families (655)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US34782A (en) * | 1862-03-25 | Improvement in lamps | ||
US32350A (en) | 1861-05-21 | Improvement in machines for turning and spreading hay | ||
FR635453A (fr) | 1926-06-03 | 1928-03-16 | Motorenfabrik Deutz Ag | Procédé de démarrage de moteurs à combustion interne à injection |
US3005756A (en) | 1958-11-14 | 1961-10-24 | Noland L Van Demark | Diluter containing carbon dioxide for preserving semen |
US3299354A (en) | 1962-07-05 | 1967-01-17 | Coulter Electronics | Aperture tube structure for particle study apparatus |
US3499435A (en) | 1967-06-02 | 1970-03-10 | Paul E Rockwell | Esophageal probe for use in monitoring |
US3547526A (en) | 1967-10-26 | 1970-12-15 | Kollsman Instr Corp | Optical beam cross-section converter |
US3810010A (en) | 1968-11-02 | 1974-05-07 | Telefunken Patent | Particle analysis method and apparatus wherein liquid containing particles is sucked into a constricted flow path |
US3829216A (en) | 1968-11-26 | 1974-08-13 | M Persidsky | Optical system and method for counting sperm cells |
DE1815352C3 (de) | 1968-12-18 | 1975-03-20 | Wolfgang Prof. Dr. Dittrich | Automatisches MeB- und Zählgerät für die Teilchen einer Dispersion |
US4327177A (en) | 1969-04-10 | 1982-04-27 | Wallace Shrimpton | Method and means for controlling the sex of mammalian offspring and product therefor |
US4474875A (en) | 1969-04-10 | 1984-10-02 | Wallace Shrimpton | Method and means for controlling the sex of mammalian offspring and product therefor |
US3894529A (en) | 1969-04-10 | 1975-07-15 | Bio Controls Inc | Method and means for controlling the sex of mammalian offspring and product therefor |
DE1919628C3 (de) | 1969-04-18 | 1975-04-10 | Wolfgang Prof. Dr. Dittrich | Anordnung zum automatischen Zählen und/oder Klassifizieren von in einem strömungsfähigen Medium dispergierten Teilchen |
US3687806A (en) | 1969-11-04 | 1972-08-29 | Bio Controls Inc | Method for controlling sex of mammalian offspring |
US3788744A (en) * | 1970-01-14 | 1974-01-29 | Bio Physics Systems Inc | Method and apparatus for photoanalysis |
US3661460A (en) | 1970-08-28 | 1972-05-09 | Technicon Instr | Method and apparatus for optical analysis of the contents of a sheathed stream |
US3816249A (en) | 1970-11-23 | 1974-06-11 | B Bhattacharya | Universal medium and method for extending the useful life of semen in vitro |
US3644128A (en) | 1970-12-28 | 1972-02-22 | Stuart Lipner | Method of preparing comminuted meat products |
US3756459A (en) | 1971-01-12 | 1973-09-04 | Damon Corp | Method and apparatus for metering fluid utilizing pressure differentials |
US3791384A (en) * | 1971-07-15 | 1974-02-12 | Schaumann H | Artificial insemination of sows |
US3833796A (en) | 1971-10-13 | 1974-09-03 | Georgia Tech Res Inst | Method and apparatus for chromosome digitizing |
BE793185A (fr) | 1971-12-23 | 1973-04-16 | Atomic Energy Commission | Appareil pour analyser et trier rapidement des particules telles que des cellules biologiques |
US3826364A (en) | 1972-05-22 | 1974-07-30 | Univ Leland Stanford Junior | Particle sorting method and apparatus |
US3761941A (en) | 1972-10-13 | 1973-09-25 | Mead Corp | Phase control for a drop generating and charging system |
CA1029833A (en) | 1973-02-23 | 1978-04-18 | Hildegarde Goehde | Apparatus for the automatic counting and measuring of suspended particles |
US3791517A (en) * | 1973-03-05 | 1974-02-12 | Bio Physics Systems Inc | Digital fluidic amplifier particle sorter |
US4009260A (en) | 1973-04-19 | 1977-02-22 | Schering Aktiengesellschaft | Fractionation of sperm |
USRE29141E (en) * | 1973-06-14 | 1977-02-22 | Coulter Electronics, Inc. | Apparatus for orienting generally flat particles for sensing |
US3893766A (en) | 1973-06-14 | 1975-07-08 | Coulter Electronics | Apparatus for orienting generally flat particles for slit-scan photometry |
US3947093A (en) | 1973-06-28 | 1976-03-30 | Canon Kabushiki Kaisha | Optical device for producing a minute light beam |
US3944917A (en) * | 1973-08-13 | 1976-03-16 | Coulter Electronics, Inc. | Electrical sensing circuitry for particle analyzing device |
US3909744A (en) | 1973-09-24 | 1975-09-30 | United Technologies Corp | Unstable resonator system producing a high irradiance beam in the far field |
US3906929A (en) | 1973-11-23 | 1975-09-23 | Lynn Lawrence Augspurger | Processes for reproduction of cellular bodies |
FR2254639B1 (ja) | 1973-12-18 | 1978-06-02 | Agronomique Inst Nat Rech | |
US4070617A (en) | 1974-05-08 | 1978-01-24 | Max-Planck-Gesellschaft Zur Forderung Der Wissenschaften E.V. | Device for controlling the particle flow in an apparatus for measuring the properties of particles suspended in liquid |
US3973196A (en) | 1974-05-24 | 1976-08-03 | Coulter Electronics, Inc. | Method and apparatus for ejecting a metered amount of particulate sample |
US3963606A (en) | 1974-06-03 | 1976-06-15 | Coulter Electronics, Inc. | Semi-automatic adjusting delay for an electronic particle separator |
US3877430A (en) | 1974-07-17 | 1975-04-15 | Horst K Wieder | Artificial insemination apparatus |
US4083957A (en) | 1974-07-26 | 1978-04-11 | Lang John L | Process for the alteration of the sex-ratio of mammals |
US4006360A (en) * | 1974-08-21 | 1977-02-01 | Block Engineering, Inc. | Method of discriminating between dyed particles and background fluorescence of the dye |
USRE32350E (en) | 1974-11-22 | 1987-02-10 | Bhairab C. Bhattacharya | Thermal convection counter streaming sedimentation and forced convection galvanization method for controlling the sex of mammalian offspring |
US3976197A (en) | 1974-11-22 | 1976-08-24 | Bhattacharya Bhairab C | Thermal convection counter streaming sedimentation method and apparatus for controlling the sex of mammalian offspring |
US4092229A (en) | 1975-12-17 | 1978-05-30 | Bhattacharya Bhairab C | Thermal convection counter streaming sedimentation and forced convection galvanization method for controlling the sex of mammalian offspring |
US4014611A (en) | 1975-04-30 | 1977-03-29 | Coulter Electronics, Inc. | Aperture module for use in particle testing apparatus |
DE2521236C3 (de) | 1975-05-10 | 1978-12-14 | Hildegard Dr. 4400 Muenster Goehde Geb. Kuhl | Einrichtung zum Zählen und Messen von in einer Flüssigkeit suspendierten Teilchen |
US3960449A (en) | 1975-06-05 | 1976-06-01 | The Board Of Trustees Of Leland Stanford Junior University | Measurement of angular dependence of scattered light in a flowing stream |
US4058732A (en) | 1975-06-30 | 1977-11-15 | Analytical Radiation Corporation | Method and apparatus for improved analytical fluorescent spectroscopy |
US4007087A (en) * | 1975-10-17 | 1977-02-08 | Gametrics Limited | Sperm fractionation and storage |
AU2154077A (en) | 1976-01-27 | 1978-07-27 | Univ Edinburgh | Control of sex ratio in mammalian offspring |
US4162282A (en) | 1976-04-22 | 1979-07-24 | Coulter Electronics, Inc. | Method for producing uniform particles |
US4302166A (en) | 1976-04-22 | 1981-11-24 | Coulter Electronics, Inc. | Droplet forming apparatus for use in producing uniform particles |
GB1563856A (en) * | 1976-06-10 | 1980-04-02 | Coulter Electronics | Methods and apparatus for delectively separating small particles suspended in a liquid |
GB1583150A (en) | 1976-08-02 | 1981-01-21 | Milk Marketing Board | Apparatus for collecting eggs |
US4110604A (en) | 1976-11-04 | 1978-08-29 | Becton, Dickinson And Company | Particle density measuring system |
DE2709399C3 (de) | 1977-03-04 | 1980-07-24 | Goehde, Wolfgang, Dr., 4400 Muenster | Einrichtung zum Messen von Zelleigenschaften |
DE2716095A1 (de) | 1977-04-12 | 1978-10-19 | Zoeld Tibor Dr Phys | Gasgesteuertes verfahren zum sortieren von in einem elektrolyten suspendierten teilchen und vorrichtung zur durchfuehrung des verfahrens |
US4448767A (en) | 1977-10-11 | 1984-05-15 | Sumar Corporation | Preparation of monospecific male-specific antibody and the use thereof for increasing the percentage of mammalian offspring of either sex |
US4191749A (en) | 1977-10-11 | 1980-03-04 | Bryant Bernard J | Method and material for increasing the percentage of mammalian offspring of either sex |
US4189236A (en) * | 1978-03-20 | 1980-02-19 | Coulter Electronics, Inc. | Ellipsoid-conic radiation collector and method |
US4179218A (en) | 1978-05-15 | 1979-12-18 | The Boeing Company | Particle size analyzer |
US4251733A (en) | 1978-06-29 | 1981-02-17 | Hirleman Jr Edwin D | Technique for simultaneous particle size and velocity measurement |
DE2832091A1 (de) | 1978-07-21 | 1980-01-31 | Eidenschink Henning | Optisches verfahren zur bestimmung der teilchengroesse kolloidaler loesungen und messgeraet zur durchfuehrung des verfahrens |
US4225405A (en) | 1978-08-16 | 1980-09-30 | Lawson Rommom L | Process for separation and collection of viable female and male spermatozoa |
US4276139A (en) | 1978-08-16 | 1981-06-30 | Lawson Rommon L | Process for magnetic separation and collection of viable female and male spermatozoa |
US4230558A (en) | 1978-10-02 | 1980-10-28 | Coulter Electronics, Inc. | Single drop separator |
US4341471A (en) | 1979-01-02 | 1982-07-27 | Coulter Electronics, Inc. | Apparatus and method for measuring the distribution of radiant energy produced in particle investigating systems |
US4267268A (en) | 1979-03-12 | 1981-05-12 | Nelson Jr Robert A | Spermatozoa extenders |
US4274408A (en) | 1979-03-26 | 1981-06-23 | Beatrice Nimrod | Method for guide-wire placement and novel syringe therefor |
US4200802A (en) | 1979-03-28 | 1980-04-29 | The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy | Parabolic cell analyzer |
NO144002C (no) | 1979-04-10 | 1981-05-27 | Norsk Hydro S Inst For Kreftfo | Anordning for anvendelse ved vaeskestroemsfotometri |
US4408877A (en) | 1979-04-10 | 1983-10-11 | Ernst Leitz Wetzlar Gmbh | Device for hydrodynamic focussing of a particle-suspension in a liquid flow cytophotometer |
US4255021A (en) | 1979-04-20 | 1981-03-10 | The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy | Optical device with conical input and output prism faces |
US4263508A (en) * | 1979-04-20 | 1981-04-21 | Research Corporation | Pulse edge measurement for determining particle dimensional characteristics |
US4318481A (en) | 1979-08-20 | 1982-03-09 | Ortho Diagnostics, Inc. | Method for automatically setting the correct phase of the charge pulses in an electrostatic flow sorter |
US4318482A (en) | 1979-08-20 | 1982-03-09 | Ortho Diagnostics, Inc. | Method for measuring the velocity of a perturbed jetting fluid in an electrostatic particle sorting system |
US4318480A (en) | 1979-08-20 | 1982-03-09 | Ortho Diagnostics, Inc. | Method and apparatus for positioning the point of droplet formation in the jetting fluid of an electrostatic sorting device |
US4325483A (en) | 1979-08-20 | 1982-04-20 | Ortho Diagnostics, Inc. | Method for detecting and controlling flow rates of the droplet forming stream of an electrostatic particle sorting apparatus |
US4317520A (en) | 1979-08-20 | 1982-03-02 | Ortho Diagnostics, Inc. | Servo system to control the spatial position of droplet formation of a fluid jet in a cell sorting apparatus |
DE2943116C2 (de) | 1979-10-25 | 1986-06-19 | Gesellschaft für Strahlen- und Umweltforschung mbH, 8000 München | Einrichtung zur durchflußcytometrischen Reaktions- und/oder Diffusionsmessung |
US4284355A (en) | 1979-10-29 | 1981-08-18 | Ortho Diagnostics, Inc. | Automated method for cell volume determination |
US4400764A (en) | 1980-02-05 | 1983-08-23 | The Boeing Company | Low backscatter illumination system |
US4367043A (en) * | 1980-05-05 | 1983-01-04 | Leland Stanford Junior University | Method and means for delivering liquid samples to a sample scanning device |
US4362246A (en) | 1980-07-14 | 1982-12-07 | Adair Edwin Lloyd | Method of treating collected mammal semen and separating sperm into X Y components |
US4348107A (en) | 1980-07-18 | 1982-09-07 | Coulter Electronics, Inc. | Orifice inside optical element |
EP0046345A3 (en) | 1980-08-15 | 1982-03-03 | Ortho Diagnostic Systems Inc. | Controlled hydrodynamic flow in flow cytometry systems |
US4350410A (en) | 1980-10-08 | 1982-09-21 | The United States Of America As Represented By The Administrator Of The National Aeronautics And Space Administration | Multiprism collimator |
SE434903B (sv) * | 1980-10-30 | 1984-08-27 | I H A B International Horto Co | For plantering avsedd anordning |
US4691829A (en) | 1980-11-03 | 1987-09-08 | Coulter Corporation | Method of and apparatus for detecting change in the breakoff point in a droplet generation system |
US4487320A (en) | 1980-11-03 | 1984-12-11 | Coulter Corporation | Method of and apparatus for detecting change in the breakoff point in a droplet generation system |
US4395676A (en) | 1980-11-24 | 1983-07-26 | Coulter Electronics, Inc. | Focused aperture module |
US4361400A (en) | 1980-11-26 | 1982-11-30 | The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy | Fluidic assembly for an ultra-high-speed chromosome flow sorter |
US4680258A (en) | 1981-03-24 | 1987-07-14 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Process for sex determination in man by use of monoclonal antibodies to the H-Y antigen |
US4818103A (en) | 1981-05-15 | 1989-04-04 | Ratcom | Flow cytometry |
US4673288A (en) | 1981-05-15 | 1987-06-16 | Ratcom, Inc. | Flow cytometry |
DE3266669D1 (en) | 1981-06-24 | 1985-11-07 | Becton Dickinson Co | Analyzer for simultaneously determining volume and light emission characteristics of particles |
FR2510393A1 (fr) | 1981-07-31 | 1983-02-04 | Bertrand Cassou | Appareil de transfert d'elements de reproduction animale, tels que des embryons |
US4339434A (en) | 1981-08-17 | 1982-07-13 | Gametrics Limited | Method of increasing the incidence of female offspring |
US4395397A (en) | 1981-09-17 | 1983-07-26 | Sidney Farber Cancer Institute, Inc. | Apparatus and method for killing unwanted cells |
US4422761A (en) | 1981-09-28 | 1983-12-27 | Frommer Joseph C | Photo-electric particle sensing system |
US4515274A (en) | 1981-12-02 | 1985-05-07 | Coulter Corporation | Particle analyzing and sorting apparatus |
SU1056008A1 (ru) | 1982-01-25 | 1983-11-23 | Предприятие П/Я Р-6681 | Проточный цитофлуориметр |
JPS59500340A (ja) * | 1982-03-08 | 1984-03-01 | モトロ−ラ・インコ−ポレ−テツド | 集積回路のリ−ドフレ−ム |
US4511661A (en) | 1982-03-19 | 1985-04-16 | University Patents, Inc. | ATCC HB8116 And its monoclonal anti-H-Y antibody, Hyclonalan |
US4498766A (en) | 1982-03-25 | 1985-02-12 | Becton, Dickinson And Company | Light beam focal spot elongation in flow cytometry devices |
DE3315195A1 (de) | 1982-04-29 | 1983-11-03 | International Remote Imaging Systems Inc., 91311 Chatsworth, Calif. | Verfahren zum ausrichten von teilchen in einer fluidprobe |
DE3315194A1 (de) | 1982-04-29 | 1983-11-03 | International Remote Imaging Systems Inc., 91311 Chatsworth, Calif. | Verfahren zum trennen von in einer fluidprobe stroemenden teilchen |
US4629687A (en) | 1982-07-29 | 1986-12-16 | Board Of Trustees Of Michigan State University | Positive selection sorting of cells |
GB2125181B (en) | 1982-08-11 | 1986-01-29 | Coulter Electronics | Flow cells for particle study |
US4559309A (en) | 1982-09-01 | 1985-12-17 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | Flow cytometry-fluorescence measurements for characterizing sperm |
WO1984001265A1 (en) | 1982-10-05 | 1984-04-12 | Genetic Engineering Inc | Method of treating collected mammal semen and separating sperm into x and y components |
US4501366A (en) | 1982-12-14 | 1985-02-26 | Adolph Coors Company | Photomultiplier tube assembly |
DE3372137D1 (en) * | 1982-12-21 | 1987-07-23 | Crosfield Electronics Ltd | Light beam-splitter |
US4492436A (en) * | 1983-01-03 | 1985-01-08 | At&T Bell Laboratories | Polarization independent beam splitter |
JPS59143146A (ja) | 1983-02-07 | 1984-08-16 | Nippon Kogaku Kk <Nikon> | ミラ−集光型照明光学系 |
CA1206559A (en) | 1983-03-04 | 1986-06-24 | Robert E. Auer | Method of and apparatus for detecting change in the breakoff point of a droplet generation system |
IT1197570B (it) | 1983-02-11 | 1988-12-06 | Serono Ist Farm | Miscele di fsh e lh da ipofisi porcine in rapporto definito |
CH651930A5 (en) | 1983-03-24 | 1985-10-15 | Coulter Corp | Apparatus for analysis and sorting of particles |
JPS59174742A (ja) | 1983-03-25 | 1984-10-03 | Agency Of Ind Science & Technol | 微小粒子を区分又は選別する方法及びその装置 |
GB2145112B (en) | 1983-04-27 | 1987-02-18 | Milk Marketing Board | Sorting living spermatozoa |
US4523809A (en) | 1983-08-04 | 1985-06-18 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Air Force | Method and apparatus for generating a structured light beam array |
NZ207393A (en) | 1983-08-05 | 1987-03-31 | Neal Lloyd First | Staining dna in living cells |
IN163192B (ja) | 1983-10-11 | 1988-08-20 | Fidia Spa | |
US4538733A (en) | 1983-10-14 | 1985-09-03 | Becton, Dickinson And Company | Particle sorter with neutralized collection wells and method of using same |
US4585736A (en) * | 1983-10-18 | 1986-04-29 | The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy | Flow cytometric measurement of total DNA and incorporated halodeoxyuridine |
US4780406A (en) | 1983-10-18 | 1988-10-25 | The Regents Of The University Of California | Flow cytometric measurement of total DNA and incorporated halodeoxyuridine |
US4735504A (en) | 1983-10-31 | 1988-04-05 | Technicon Instruments Corporation | Method and apparatus for determining the volume & index of refraction of particles |
JPS617447A (ja) | 1983-12-24 | 1986-01-14 | イノテツク、アクチエンゲゼルシヤフト | 光案内集光方法およびその装置 |
US4573796A (en) * | 1984-01-06 | 1986-03-04 | The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy | Apparatus for eliminating background interference in fluorescence measurements |
US4631483A (en) | 1984-02-01 | 1986-12-23 | Coulter Electronics, Inc. | Particle analyzing apparatus and method of moving particles in suspension through such apparatus |
US4965204A (en) | 1984-02-06 | 1990-10-23 | The Johns Hopkins University | Human stem cells and monoclonal antibodies |
US4714680B1 (en) | 1984-02-06 | 1995-06-27 | Univ Johns Hopkins | Human stem cells |
WO1985004014A1 (en) | 1984-02-29 | 1985-09-12 | Research Corporation | Flow cytometers |
US4545677A (en) | 1984-03-05 | 1985-10-08 | Becton, Dickinson And Company | Prismatic beam expander for light beam shaping in a flow cytometry apparatus |
US4600302A (en) | 1984-03-26 | 1986-07-15 | Becton, Dickinson And Company | Flow cytometry apparatus with uniform incoherent light excitation |
DE3412620A1 (de) | 1984-04-04 | 1985-10-17 | Basf Ag, 6700 Ludwigshafen | Laseroptische anordnung zur messung des dispergiergrades in stroemenden systemen |
US4609286A (en) | 1984-04-16 | 1986-09-02 | Becton, Dickinson And Company | Dispersion prism for separation of wavelengths of spectrally rich light in a flow cytometry apparatus |
US4605558A (en) | 1984-04-20 | 1986-08-12 | Wallace Shrimpton | Process for cell separation |
US4660971A (en) | 1984-05-03 | 1987-04-28 | Becton, Dickinson And Company | Optical features of flow cytometry apparatus |
FR2563726B1 (fr) | 1984-05-04 | 1986-10-10 | Robert Cassou | Appareil d'insemination artificielle, notamment des carnivores |
FR2566543B1 (fr) | 1984-06-20 | 1988-02-26 | Commissariat Energie Atomique | Dispositif optique a rendement de collection eleve et cytofluorimetre en faisant application |
DE3580418D1 (de) | 1984-07-31 | 1990-12-13 | Hitachi Ltd | Elektrophoretisches trennverfahren mit freier stroemung und apparat dafuer. |
US4661913A (en) * | 1984-09-11 | 1987-04-28 | Becton, Dickinson And Company | Apparatus and method for the detection and classification of articles using flow cytometry techniques |
ATE48477T1 (de) | 1984-09-11 | 1989-12-15 | Partec Ag | Verfahren und vorrichtung zur sortierung von mikroskopischen partikeln. |
US4598408A (en) | 1984-10-22 | 1986-07-01 | Trw Inc. | High extraction efficiency cylindrical ring resonator |
JPS61139747A (ja) | 1984-12-12 | 1986-06-27 | Canon Inc | 粒子解析装置 |
FR2574656B1 (fr) | 1984-12-13 | 1988-08-05 | Cassou Robert | Sonde gynecologique notamment pour l'injection de semence ou d'embryons dans la cavite des animaux, tels que les juments |
FR2575063B1 (fr) | 1984-12-21 | 1988-07-01 | Cassou Robert | Sonde gynecologique pour insemination artificielle, notamment pour porcins |
JPS61159135A (ja) | 1984-12-31 | 1986-07-18 | Canon Inc | 粒子解析装置 |
SU1260778A1 (ru) | 1985-01-31 | 1986-09-30 | Центральный научно-исследовательский рентгено-радиологический институт | Устройство дл флуоресцентного анализа отдельных микрочастиц в потоке |
US4702598A (en) | 1985-02-25 | 1987-10-27 | Research Corporation | Flow cytometer |
US4683202A (en) | 1985-03-28 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying nucleic acid sequences |
US4683195A (en) | 1986-01-30 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences |
US4683213A (en) * | 1985-04-22 | 1987-07-28 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Method for predicting the fertility of male mammals |
CA1250808A (en) | 1985-04-29 | 1989-03-07 | David W. Dresser | Semen sexing |
US4662742A (en) * | 1985-05-10 | 1987-05-05 | Becton, Dickinson And Company | Scatter/fluorescene beam splitter in a flow cytometry apparatus |
US4877965A (en) | 1985-07-01 | 1989-10-31 | Diatron Corporation | Fluorometer |
USRE34782E (en) | 1985-07-01 | 1994-11-08 | Diatron Corporation | Fluorometer |
US4744090A (en) | 1985-07-08 | 1988-05-10 | Trw Inc. | High-extraction efficiency annular resonator |
NO156916C (no) * | 1985-07-10 | 1987-12-16 | Harald B Steen | Stroemningskammer for vaeskestroemsfotometer. |
NO156917C (no) * | 1985-07-16 | 1987-12-16 | Harald B Steen | Anordning for maaling av biologiske cellers lysspredning i vaeskestroemsfotometere. |
US4989977A (en) * | 1985-07-29 | 1991-02-05 | Becton, Dickinson And Company | Flow cytometry apparatus with improved light beam adjustment |
US4794086A (en) | 1985-11-25 | 1988-12-27 | Liquid Air Corporation | Method for measurement of impurities in liquids |
US4770992A (en) | 1985-11-27 | 1988-09-13 | Den Engh Gerrit J Van | Detection of specific DNA sequences by flow cytometry |
US4999283A (en) | 1986-01-10 | 1991-03-12 | University Of Kentucky Research Foundation | Method for x and y spermatozoa separation |
US5756696A (en) | 1986-01-16 | 1998-05-26 | Regents Of The University Of California | Compositions for chromosome-specific staining |
US5447841A (en) | 1986-01-16 | 1995-09-05 | The Regents Of The Univ. Of California | Methods for chromosome-specific staining |
US4710635A (en) | 1986-04-14 | 1987-12-01 | Becton, Dickinson And Company | Dual laser excitation from single laser source |
NL8601000A (nl) | 1986-04-21 | 1987-11-16 | Jan Greve T H Twente Afdeling | Het gebruik van gepolariseerd licht in stromingscytometrie. |
US4790653A (en) | 1986-05-22 | 1988-12-13 | Becton Dickinson And Company | Housing for a flow cytometry apparatus with particle unclogging feature |
JPS62274238A (ja) | 1986-05-22 | 1987-11-28 | ベクトン・デイツキンソン・アンド・カンパニ− | フロ−サイトメトリ−装置に用いる光学的結合用ゲル |
US4786165A (en) | 1986-07-10 | 1988-11-22 | Toa Medical Electronics Co., Ltd. | Flow cytometry and apparatus therefor |
US4867908A (en) | 1986-08-29 | 1989-09-19 | Becton, Dickinson And Company | Method and materials for calibrating flow cytometers and other analysis instruments |
US4704891A (en) | 1986-08-29 | 1987-11-10 | Becton, Dickinson And Company | Method and materials for calibrating flow cytometers and other analysis instruments |
FR2609885B1 (fr) | 1987-01-22 | 1989-04-14 | Cassou Robert | Instrument pour l'insemination artificielle, le transfert d'embryons ou le prelevement de liquides folliculaires chez les mammiferes |
US5162306A (en) | 1987-01-23 | 1992-11-10 | Donaldson Lloyd E | Composition and method for producing superovulation in mammals |
US4780451B1 (en) | 1987-01-23 | 1995-04-04 | Asua International Inc | Composition and method for producing superovulation in cattle |
DE3786657D1 (de) | 1987-02-17 | 1993-08-26 | Ratcom Inc | Durchflusszytometrie. |
US4764013A (en) | 1987-03-23 | 1988-08-16 | The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy | Interferometric apparatus and method for detection and characterization of particles using light scattered therefrom |
US4765737A (en) | 1987-03-30 | 1988-08-23 | Cornell Research Foundation | Cell size measurements using light in flow cytometry and cell sorting |
US4983038A (en) | 1987-04-08 | 1991-01-08 | Hitachi, Ltd. | Sheath flow type flow-cell device |
US5021244A (en) | 1988-12-06 | 1991-06-04 | Cytogam, Inc. | Sex-associated membrane antibodies and their use for increasing the probability that offspring will be of a desired sex |
US5346990A (en) | 1987-04-08 | 1994-09-13 | Cytogam, Inc. | Sex-associated membrane proteins and methods for increasing the probability that offspring will be of a desired sex |
JPS63262565A (ja) | 1987-04-20 | 1988-10-28 | Hitachi Ltd | フロ−セル |
ATE110467T1 (de) | 1987-04-27 | 1994-09-15 | Preikschat F K | Vorrichtung und verfahren zur untersuchung von teilchen. |
EP0289677A3 (en) | 1987-04-27 | 1989-05-10 | Fritz K. Preikschat | Apparatus and method for particle analysis |
FR2614626B1 (fr) | 1987-04-30 | 1989-07-21 | Ranoux Claude | Conteneur pour fecondation des ovocytes et replacement des embryons chez l'homme et l'animal |
JP2642632B2 (ja) | 1987-07-03 | 1997-08-20 | 株式会社日立製作所 | 微粒子計測装置および微粒子計測方法 |
GB8716285D0 (en) | 1987-07-10 | 1987-08-19 | Medical Res Council | Light collecting device |
US4979093A (en) | 1987-07-16 | 1990-12-18 | Cavro Scientific Instruments | XYZ positioner |
US4987539A (en) | 1987-08-05 | 1991-01-22 | Stanford University | Apparatus and method for multidimensional characterization of objects in real time |
US4796788A (en) * | 1987-08-26 | 1989-01-10 | Liqui-Box Corporation | Bag-in-box packaging and dispensing of substances which will not readily flow by gravity |
US4758729A (en) | 1987-08-28 | 1988-07-19 | Spectra-Physics, Inc. | Apparatus and method for measuring the included angle of a reflective cone |
DE3832901A1 (de) | 1987-10-02 | 1989-04-20 | Hitachi Ltd | Teilchenmessvorrichtung |
US4793705A (en) | 1987-10-07 | 1988-12-27 | The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy | Single molecule tracking |
US4831385A (en) | 1987-10-14 | 1989-05-16 | Burlington Industries, Inc. | Vacuum tray fluid-jet start-up system |
US4980277A (en) | 1987-10-16 | 1990-12-25 | Cultor Ltd. | Cryoprotectant solution and method |
US5712807A (en) * | 1987-10-21 | 1998-01-27 | Bangham; James Andrew | Pulse analyzing method and apparatus |
US5789155A (en) | 1987-10-30 | 1998-08-04 | California Institute Of Technology | Process for identifying nucleic acids and triple helices formed thereby |
GB8726304D0 (en) * | 1987-11-10 | 1987-12-16 | Secr Defence | Particle asymmetry analyser |
AU2620488A (en) | 1987-11-10 | 1989-06-01 | Secretary Of State For Defence In Her Britannic Majesty's Government Of The United Kingdom Of Great Britain And Northern Ireland, The | Particle monitoring system |
US4845025A (en) | 1987-11-10 | 1989-07-04 | Coulter Corporation | Biological sample mixing apparatus and method |
GB8726305D0 (en) | 1987-11-10 | 1987-12-16 | Secr Defence | Portable particle analysers |
US5040890A (en) | 1987-11-25 | 1991-08-20 | Becton, Dickinson And Company | Sheathed particle flow controlled by differential pressure |
US4988619A (en) | 1987-11-30 | 1991-01-29 | United States Department Of Energy | Flow cytometry apparatus |
US4887721A (en) | 1987-11-30 | 1989-12-19 | The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy | Laser particle sorter |
US4936465A (en) | 1987-12-07 | 1990-06-26 | Zoeld Tibor | Method and apparatus for fast, reliable, and environmentally safe dispensing of fluids, gases and individual particles of a suspension through pressure control at well defined parts of a closed flow-through system |
US4796768A (en) | 1988-01-26 | 1989-01-10 | Stuckey William C | Lockable closure cap |
US5219729A (en) | 1988-02-25 | 1993-06-15 | Serono Laboratories, Inc. | Fertility assay |
US5622820A (en) | 1988-03-10 | 1997-04-22 | City Of Hope | Method for amplification and detection of RNA and DNA sequences |
US4836038A (en) | 1988-03-18 | 1989-06-06 | Aim Instruments Ltd. | Automated sampler-injector apparatus and method for sampling a quantity of sample and testing portions of said quantity |
US5057413A (en) | 1988-06-13 | 1991-10-15 | Becton, Dickinson And Company | Method for discriminating between intact and damaged cells in a sample |
US5070080A (en) | 1988-08-10 | 1991-12-03 | Fahim Mostafa S | Method of inhibiting generation, maturation, motility and viability of sperm with minerals in bioavailable form |
JPH0718785B2 (ja) | 1988-09-19 | 1995-03-06 | 株式会社日立製作所 | フローセル装置 |
JP2635125B2 (ja) | 1988-09-30 | 1997-07-30 | 東亜医用電子株式会社 | 核の分葉指数を求めるための粒子分析装置及び方法 |
JP2635126B2 (ja) | 1988-09-30 | 1997-07-30 | 東亜医用電子株式会社 | 核の分葉指数を求めるための粒子分析装置及び方法 |
JPH02168160A (ja) | 1988-12-22 | 1990-06-28 | Omron Tateisi Electron Co | 細胞選別装置 |
US5726009A (en) * | 1989-03-20 | 1998-03-10 | Anticancer, Inc. | Native-state method and system for determining viability and proliferative capacity of tissues in vitro |
JPH02289808A (ja) | 1989-04-28 | 1990-11-29 | Olympus Optical Co Ltd | 照明光学系 |
US4981580A (en) | 1989-05-01 | 1991-01-01 | Coulter Corporation | Coincidence arbitration in a flow cytomery sorting system |
WO1990013303A1 (en) | 1989-05-10 | 1990-11-15 | The United States Of America, Represented By The Secretary, United States Department Of Commerce | Method to preselect the sex of offspring |
EP0475936B1 (en) | 1989-05-12 | 1995-09-13 | Cytogam, Inc. | Sex-associated membrane proteins and methods for increasing the probability that offspring will be of a desired sex |
US4942305A (en) | 1989-05-12 | 1990-07-17 | Pacific Scientific Company | Integrating sphere aerosol particle detector |
FR2647668A1 (fr) | 1989-06-06 | 1990-12-07 | Medizin Labortechnik Veb K | Pipette de transfert pour embryons |
US5055393A (en) | 1989-06-13 | 1991-10-08 | Salk Institute Biotechnology/Industrial Associates, Inc. | Prenatal sex determination of bovine cells using male-specific oligonucleotides |
US4954715A (en) | 1989-06-26 | 1990-09-04 | Zoeld Tibor | Method and apparatus for an optimized multiparameter flow-through particle and cell analyzer |
JPH0353164A (ja) | 1989-07-20 | 1991-03-07 | Canon Inc | サンプル供給装置及びこれを用いたサンプル測定装置 |
US5098657A (en) | 1989-08-07 | 1992-03-24 | Tsi Incorporated | Apparatus for measuring impurity concentrations in a liquid |
US5030002A (en) | 1989-08-11 | 1991-07-09 | Becton, Dickinson And Company | Method and apparatus for sorting particles with a moving catcher tube |
US5005981A (en) | 1989-09-08 | 1991-04-09 | Becton, Dickinson And Company | Apparatus for method for causing vortices in a test tube |
US5215376A (en) | 1989-09-08 | 1993-06-01 | Becton, Dickinson And Company | Method for causing vortices in a test tube |
US5167926A (en) | 1989-09-13 | 1992-12-01 | Kabushiki Kaisha Tiyoda Seisakusho | Apparatus for pretreating cells for flow cytometry |
JP2808321B2 (ja) | 1989-09-19 | 1998-10-08 | 東亜医用電子株式会社 | 細胞分析方法及び装置 |
US5072382A (en) | 1989-10-02 | 1991-12-10 | Kamentsky Louis A | Methods and apparatus for measuring multiple optical properties of biological specimens |
US5275787A (en) * | 1989-10-04 | 1994-01-04 | Canon Kabushiki Kaisha | Apparatus for separating or measuring particles to be examined in a sample fluid |
DE69025256T2 (de) | 1989-10-11 | 1996-06-27 | Canon Kk | Gerät und Verfahren zur Trennung von Teilchen aus flüssigkeitssuspendierten Teilchen in Zusammenhang mit deren Eigenschaften |
JPH03140840A (ja) | 1989-10-26 | 1991-06-14 | Hitachi Ltd | 流動細胞分析装置 |
FR2653885B1 (fr) | 1989-10-27 | 1994-01-14 | Abx | Appareil pour le comptage et la determination d'au moins une sous-population leucocytaire. |
US5034613A (en) | 1989-11-14 | 1991-07-23 | Cornell Research Foundation, Inc. | Two-photon laser microscopy |
US5101978A (en) | 1989-11-27 | 1992-04-07 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army | Fluidic sorting device for two or more materials suspended in a fluid |
AU647741B2 (en) | 1989-12-01 | 1994-03-31 | Regents Of The University Of California, The | Methods and compositions for chromosome-specific staining |
US5274240A (en) | 1990-01-12 | 1993-12-28 | The Regents Of The University Of California | Capillary array confocal fluorescence scanner and method |
DE69118429T2 (de) * | 1990-01-26 | 1996-09-12 | Canon Kk | Verfahren zur Messung einer Spezies unter Verwendung von Fluoreszenzlicht |
JP3049254B2 (ja) | 1990-02-08 | 2000-06-05 | シスメックス株式会社 | 2種類の光源を備えた光学式粒子分析装置 |
IL93634A0 (en) | 1990-03-05 | 1990-12-23 | Galai Lab Ltd | Particle size analyzer |
US5153117A (en) | 1990-03-27 | 1992-10-06 | Genetype A.G. | Fetal cell recovery method |
US5492534A (en) * | 1990-04-02 | 1996-02-20 | Pharmetrix Corporation | Controlled release portable pump |
US5150313A (en) | 1990-04-12 | 1992-09-22 | Regents Of The University Of California | Parallel pulse processing and data acquisition for high speed, low error flow cytometry |
US5076472A (en) | 1990-06-13 | 1991-12-31 | Becton, Dickinson And Company | Cleaning cycle for flow cytometers |
US5087295A (en) | 1990-06-13 | 1992-02-11 | Becton Dickinson And Company | Cleaning cycle for flow cytometers |
JPH0710226B2 (ja) | 1990-06-20 | 1995-02-08 | 株式会社ピーシーシーテクノロジー | プロトプラスト攪拌装置並びにそれを含む細胞融合装置及びフローサイトメーター装置 |
JPH0716392B2 (ja) | 1990-06-20 | 1995-03-01 | 株式会社ピーシーシーテクノロジー | 細胞融合及び融合細胞選別システム |
US5160974A (en) | 1990-06-25 | 1992-11-03 | Flow Science, Inc. | Closed sample cell for use in flow cytometry |
JPH04126065A (ja) | 1990-06-25 | 1992-04-27 | Saburo Okonogi | 食品素材の棒状体成型装置 |
US5559032A (en) | 1990-06-29 | 1996-09-24 | Pomeroy; Patrick C. | Method and apparatus for post-transfer assaying of material on solid support |
WO1992001040A1 (en) | 1990-07-09 | 1992-01-23 | Amrad Corporation Limited | Enhanced implantation, development and maintenance of embryos using leukaemia inhibitory factor |
JP2939647B2 (ja) | 1990-07-24 | 1999-08-25 | シスメックス株式会社 | フローイメージングサイトメータにおける自動焦点調整方法 |
IE76732B1 (en) * | 1990-08-07 | 1997-11-05 | Becton Dickinson Co | One step test for absolute counts |
US5259593A (en) | 1990-08-30 | 1993-11-09 | University Of Southern California | Apparatus for droplet stream manufacturing |
JPH04115136A (ja) | 1990-09-05 | 1992-04-16 | Hitachi Ltd | 粒子計測装置 |
JPH04126080A (ja) | 1990-09-14 | 1992-04-27 | Juzo Udaka | 耐熱性キシロースイソメラーゼの製造方法 |
JP2957246B2 (ja) | 1990-09-14 | 1999-10-04 | 大和化成株式会社 | 微生物起源カルボキシペプチダーゼb様酵素 |
JPH04126064A (ja) | 1990-09-14 | 1992-04-27 | Nitto Shokai:Kk | 二重包餡食品の製造法 |
US5132548A (en) | 1990-09-14 | 1992-07-21 | High Yield Technology | High sensitivity, large detection area particle sensor for vacuum applications |
US5204884A (en) * | 1991-03-18 | 1993-04-20 | University Of Rochester | System for high-speed measurement and sorting of particles |
US5273527A (en) | 1992-05-12 | 1993-12-28 | Ovamed Corporation | Delivery catheter |
US5663048A (en) | 1990-10-04 | 1997-09-02 | University Of Calgary | Y-chromosome specific polynucleotide probes for prenatal sexing |
US5840482A (en) | 1990-10-10 | 1998-11-24 | The Regents Of The University Of California | Y chromosome specific nucleic acid probe and method for determining the Y chromosome in situ |
WO1992008120A1 (en) | 1990-10-29 | 1992-05-14 | Macquarie University | Pulsed laser flow cytometry |
US5116125A (en) * | 1990-10-31 | 1992-05-26 | Biophos Medical Ab | Fertility analyzer |
WO1992008122A1 (en) | 1990-10-31 | 1992-05-14 | Biophos Medical Ab | Fertility analyzer |
JP2874746B2 (ja) | 1990-11-22 | 1999-03-24 | シスメックス株式会社 | フローイメージングサイトメータにおけるフローセル機構 |
US5991028A (en) | 1991-02-22 | 1999-11-23 | Applied Spectral Imaging Ltd. | Spectral bio-imaging methods for cell classification |
JP3121849B2 (ja) | 1991-02-27 | 2001-01-09 | シスメックス株式会社 | フローイメージサイトメータ |
JPH0734012B2 (ja) | 1991-02-27 | 1995-04-12 | 東亜医用電子株式会社 | フローイメージサイトメータ |
US5144224A (en) | 1991-04-01 | 1992-09-01 | Larsen Lawrence E | Millimeter wave flow cytometer |
US5199576A (en) | 1991-04-05 | 1993-04-06 | University Of Rochester | System for flexibly sorting particles |
EP0515211A3 (en) * | 1991-05-23 | 1993-04-07 | Becton Dickinson And Company | Apparatus and method for phase resolved fluorescence lifetimes of independent and varying amplitude pulses |
DE9107792U1 (de) | 1991-06-25 | 1991-09-12 | Labotect-Labor-Technik, Göttingen, GmbH, 3406 Bovenden | Instrumentensatz zum uterinen Embryonentransfer |
FR2678506B1 (fr) | 1991-07-01 | 2000-03-10 | Claude Ranoux | Procede de fecondation en cycle spontane. |
US5548661A (en) | 1991-07-12 | 1996-08-20 | Price; Jeffrey H. | Operator independent image cytometer |
US5412466A (en) | 1991-07-26 | 1995-05-02 | Toa Medical Electronics Co., Ltd. | Apparatus for forming flattened sample flow for analyzing particles |
DE69230902D1 (de) | 1991-08-30 | 2000-05-18 | Omron Tateisi Electronics Co | Vorrichtung zur Zellenanalyse |
US5488469A (en) * | 1991-08-30 | 1996-01-30 | Omron Corporation | Cell analyzing apparatus |
US5548395A (en) | 1991-09-20 | 1996-08-20 | Toa Medical Electronics Co., Ltd. | Particle analyzer |
US5578449A (en) | 1991-10-03 | 1996-11-26 | Hilding Ohlsson, S.A. | Procedure for the sex determination of embryos in mammals especially applied to bovine embryos |
JP3212647B2 (ja) | 1991-10-24 | 2001-09-25 | シスメックス株式会社 | イメージングフローサイトメータ |
US5919621A (en) | 1991-10-24 | 1999-07-06 | Brown; David B. | Methods for diagnosing human male infertility |
IT1253226B (it) | 1991-10-24 | 1995-07-11 | Piero Serra | Catetere per l'introduzione o l'aspirazione di liquidi di diversa natura in animali particolarmente per trattamenti ginecologici in bovini, equini e simili |
US5770363A (en) | 1991-10-24 | 1998-06-23 | Brown; David B. | Methods for diagnosing human male infertility |
US5866344A (en) * | 1991-11-15 | 1999-02-02 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Antibody selection methods using cell surface expressed libraries |
US5370842A (en) | 1991-11-29 | 1994-12-06 | Canon Kabushiki Kaisha | Sample measuring device and sample measuring system |
JP2593021B2 (ja) | 1991-12-13 | 1997-03-19 | 伊藤ハム株式会社 | ウシ胚の性の識別方法 |
JP3130628B2 (ja) | 1992-01-30 | 2001-01-31 | シスメックス株式会社 | 粒子判定装置 |
US5400179A (en) | 1992-02-18 | 1995-03-21 | Asahi Kogaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Optical multilayer thin film and beam splitter |
EP0556748B1 (en) | 1992-02-20 | 1998-10-28 | Canon Kabushiki Kaisha | Method and apparatus for particle manipulation, and measuring apparatus utilizing the same |
EP0627073A1 (en) | 1992-02-21 | 1994-12-07 | The Secretary Of State For Defence In Her Britannic Majesty's Government Of The United Kingdom Of Great Britain And Northern | Analysis of particle characteristics |
US5558998A (en) | 1992-02-25 | 1996-09-24 | The Regents Of The Univ. Of California | DNA fragment sizing and sorting by laser-induced fluorescence |
US6120735A (en) | 1992-02-26 | 2000-09-19 | The Ohio States University | Fractional cell sorter |
US5298967A (en) | 1992-06-02 | 1994-03-29 | Pacific Scientific Company | Measurement of concentrations of dissolved solvent |
JP3145486B2 (ja) | 1992-06-12 | 2001-03-12 | シスメックス株式会社 | イメージングフローサイトメータ |
CN1084426A (zh) | 1992-07-13 | 1994-03-30 | 帕尔公司 | 处理生物液体的自动化系统和方法 |
JP3215175B2 (ja) | 1992-08-10 | 2001-10-02 | シスメックス株式会社 | 粒子分析装置 |
US5315122A (en) | 1992-08-25 | 1994-05-24 | Becton, Dickinson And Company | Apparatus and method for fluorescent lifetime measurement |
EP0662124B1 (en) | 1992-09-03 | 2002-06-12 | Systemix, Inc. | High speed flow cytometric separation of viable mammalian cells |
US5466572A (en) | 1992-09-03 | 1995-11-14 | Systemix, Inc. | High speed flow cytometric separation of viable cells |
US5736410A (en) | 1992-09-14 | 1998-04-07 | Sri International | Up-converting reporters for biological and other assays using laser excitation techniques |
US5275933A (en) | 1992-09-25 | 1994-01-04 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Triple gradient process for recovering nucleated fetal cells from maternal blood |
US5371585A (en) | 1992-11-10 | 1994-12-06 | Pacific Scientific Company | Particle detecting instrument with sapphire detecting cell defining a rectangular flow path |
US5359907A (en) | 1992-11-12 | 1994-11-01 | Horiba Instruments, Inc. | Method and apparatus for dry particle analysis |
US5395588A (en) * | 1992-12-14 | 1995-03-07 | Becton Dickinson And Company | Control of flow cytometer having vacuum fluidics |
FR2699678A1 (fr) | 1992-12-23 | 1994-06-24 | Unceia | Procédé cytométrique de séparation de spermatozoïdes X et Y en fonction de leur contenu en ADN. |
WO1994016499A2 (en) | 1993-01-16 | 1994-07-21 | Bangham James A | Signal processing system |
JP2525713B2 (ja) | 1993-01-19 | 1996-08-21 | 農林水産省畜産試験場長 | 低分子チオ―ル化合物を用いた牛胚の培養法および輸送法 |
US5467189A (en) | 1993-01-22 | 1995-11-14 | Venturedyne, Ltd. | Improved particle sensor and method for assaying a particle |
JP3052665B2 (ja) | 1993-01-26 | 2000-06-19 | 株式会社日立製作所 | フローセル装置 |
CA2113957A1 (en) | 1993-01-29 | 1994-07-30 | University Of Guelph | Nucleotide sequences for bovine sex determination |
AU673245B2 (en) | 1993-02-01 | 1996-10-31 | Seq, Ltd. | Methods and apparatus for DNA sequencing |
US5453575A (en) | 1993-02-01 | 1995-09-26 | Endosonics Corporation | Apparatus and method for detecting blood flow in intravascular ultrasonic imaging |
US5367474A (en) | 1993-02-08 | 1994-11-22 | Coulter Corporation | Flow cytometer |
US5547849A (en) | 1993-02-17 | 1996-08-20 | Biometric Imaging, Inc. | Apparatus and method for volumetric capillary cytometry |
US5556764A (en) | 1993-02-17 | 1996-09-17 | Biometric Imaging, Inc. | Method and apparatus for cell counting and cell classification |
US5563059A (en) | 1993-02-23 | 1996-10-08 | Genentech, Inc. | Use of human inhibin and human activin to increase the number of mature primate oocytes |
DE69418131D1 (de) | 1993-03-01 | 1999-06-02 | Gen Signal Corp | Vorrichtung zur erzeugung einer einstellbaren ringförmigen beleuchtung für einen photolithograpischen projektionsapparat |
NO930980L (no) | 1993-03-18 | 1994-09-19 | Flowtech As | Optisk konfigurasjon for væskeströmcytofotometer |
US5658751A (en) | 1993-04-13 | 1997-08-19 | Molecular Probes, Inc. | Substituted unsymmetrical cyanine dyes with selected permeability |
US5494795A (en) | 1993-05-05 | 1996-02-27 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy | Specific oligonucleotide primers for detection of pathogenic campylobacter bacteria by polymerase chain reaction |
DE69418248T2 (de) | 1993-06-03 | 1999-10-14 | Hamamatsu Photonics Kk | Optisches Laser-Abtastsystem mit Axikon |
US5439578A (en) | 1993-06-03 | 1995-08-08 | The Governors Of The University Of Alberta | Multiple capillary biochemical analyzer |
JPH08501718A (ja) | 1993-06-04 | 1996-02-27 | クワハック・インターナショナル・カンパニー・リミテッド | 人工受精及び受精卵移植装置 |
NO932088L (no) * | 1993-06-08 | 1995-01-05 | Oddbjoern Gjelsnes | Anordning for anvendelse ved væskeströmscytometri |
US5483469A (en) | 1993-08-02 | 1996-01-09 | The Regents Of The University Of California | Multiple sort flow cytometer |
US5464581A (en) | 1993-08-02 | 1995-11-07 | The Regents Of The University Of California | Flow cytometer |
US6328071B1 (en) | 1993-08-06 | 2001-12-11 | Cary Austin | Well pressure tank |
EP0649014B1 (en) | 1993-09-16 | 2005-11-23 | Sysmex Corporation | Particle analyzing apparatus |
US5503994A (en) | 1993-10-08 | 1996-04-02 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | System for sample detection with compensation for difference in sensitivity to detection of components moving at different velocities |
US5480774A (en) | 1993-10-14 | 1996-01-02 | A/F Protein, Inc. | Determination of genomic sex in salmonids |
JP3290786B2 (ja) * | 1993-11-26 | 2002-06-10 | シスメックス株式会社 | 粒子分析装置 |
GB9324938D0 (en) | 1993-12-04 | 1994-01-26 | Atomic Energy Authority Uk | Aerosol generator |
FI96452C (fi) | 1994-01-26 | 1996-06-25 | Pekka Haenninen | Menetelmä väriaineiden virittämiseksi |
EP0748316B1 (en) | 1994-02-28 | 2002-05-08 | Sunkyong Industries Co., Ltd. | Pyrimidine acyclonucleoside derivatives |
US5475487A (en) | 1994-04-20 | 1995-12-12 | The Regents Of The University Of California | Aqueous carrier waveguide in a flow cytometer |
DE4414940C2 (de) | 1994-04-28 | 1998-07-02 | Pekka Haenninen | Lumineszenz-Rastermikroskop mit zwei Photonen Anregung |
US5595866A (en) | 1994-05-27 | 1997-01-21 | Methodist Hospital Of Indiana, Inc. | Step-wise method to remove cryoprotectant from sperm |
DE4419894A1 (de) | 1994-06-07 | 1995-12-14 | Gip Medizin Technik Gmbh | Endoskopische Punktionsnadelvorrichtung |
EP0687956B2 (de) | 1994-06-17 | 2005-11-23 | Carl Zeiss SMT AG | Beleuchtungseinrichtung |
US5601234A (en) | 1994-08-01 | 1997-02-11 | Abbott Laboratories | Fluid nozzle and method of introducing a fluid |
US5891734A (en) | 1994-08-01 | 1999-04-06 | Abbott Laboratories | Method for performing automated analysis |
JP3375203B2 (ja) | 1994-08-08 | 2003-02-10 | シスメックス株式会社 | 細胞分析装置 |
FR2723735B1 (fr) | 1994-08-18 | 1996-10-31 | Abx Sa | Boitier a branchement automatique pour distribution de reactifs dans un appareil notamment un analyseur hematologique. |
US5790692A (en) | 1994-09-07 | 1998-08-04 | Jeffrey H. Price | Method and means of least squares designed filters for image segmentation in scanning cytometry |
US20020186874A1 (en) | 1994-09-07 | 2002-12-12 | Jeffrey H. Price | Method and means for image segmentation in fluorescence scanning cytometry |
US5700692A (en) | 1994-09-27 | 1997-12-23 | Becton Dickinson And Company | Flow sorter with video-regulated droplet spacing |
US5934885A (en) | 1994-10-07 | 1999-08-10 | Bayer Corporation | Reagent pump assembly |
US5602349A (en) | 1994-10-14 | 1997-02-11 | The University Of Washington | Sample introduction system for a flow cytometer |
US5602039A (en) | 1994-10-14 | 1997-02-11 | The University Of Washington | Flow cytometer jet monitor system |
US5643796A (en) | 1994-10-14 | 1997-07-01 | University Of Washington | System for sensing droplet formation time delay in a flow cytometer |
JPH10507524A (ja) | 1994-10-14 | 1998-07-21 | ユニバーシティ オブ ワシントン | 高速フローサイトメータ液滴形成システム |
US6861265B1 (en) * | 1994-10-14 | 2005-03-01 | University Of Washington | Flow cytometer droplet formation system |
US5495719A (en) * | 1994-11-14 | 1996-03-05 | Gray, Jr.; Carl O. | Method of preserving spermatozoa |
JP3347495B2 (ja) * | 1994-11-14 | 2002-11-20 | シスメックス株式会社 | 粒子分析装置 |
US5514537A (en) | 1994-11-28 | 1996-05-07 | Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College | Process and apparatus for sorting spermatozoa |
WO1996018205A1 (en) | 1994-12-08 | 1996-06-13 | Molecular Dynamics, Inc. | Fluorescence imaging system employing a macro scanning objective |
US5632754A (en) | 1994-12-23 | 1997-05-27 | Devices For Vascular Intervention | Universal catheter with interchangeable work element |
DE69533469T2 (de) | 1994-12-26 | 2005-09-22 | Sysmex Corp. | Durchflusszytometer |
US5835262A (en) | 1994-12-28 | 1998-11-10 | Research Development Corporation Of Japan | Multi-wavelength optical microscope |
FI98765C (fi) | 1995-01-16 | 1997-08-11 | Erkki Soini | Virtaussytometrinen menetelmä ja laite |
US5608519A (en) * | 1995-03-20 | 1997-03-04 | Gourley; Paul L. | Laser apparatus and method for microscopic and spectroscopic analysis and processing of biological cells |
US5793485A (en) | 1995-03-20 | 1998-08-11 | Sandia Corporation | Resonant-cavity apparatus for cytometry or particle analysis |
US5620842A (en) * | 1995-03-29 | 1997-04-15 | Becton Dickinson And Company | Determination of the number of fluorescent molecules on calibration beads for flow cytometry |
US5786560A (en) | 1995-03-31 | 1998-07-28 | Panasonic Technologies, Inc. | 3-dimensional micromachining with femtosecond laser pulses |
US5699152A (en) | 1995-04-03 | 1997-12-16 | Alltrista Corporation | Electro-optical inspection system and method |
US5528045A (en) | 1995-04-06 | 1996-06-18 | Becton Dickinson And Company | Particle analyzer with spatially split wavelength filter |
US5682038A (en) | 1995-04-06 | 1997-10-28 | Becton Dickinson And Company | Fluorescent-particle analyzer with timing alignment for analog pulse subtraction of fluorescent pulses arising from different excitation locations |
US5641457A (en) | 1995-04-25 | 1997-06-24 | Systemix | Sterile flow cytometer and sorter with mechanical isolation between flow chamber and sterile enclosure |
US5687727A (en) | 1995-05-01 | 1997-11-18 | Danforth Biomedical Incorporated | Catheter adaptor with slitting blade and improved manual control and method of use |
CA2220550C (en) | 1995-05-09 | 2001-04-17 | Curators Of The University Of Missouri | A system for introducing a fluid into the uterus of an animal |
FR2734637B1 (fr) * | 1995-05-24 | 1997-08-14 | Abx Sa | Dispositif d'inspection optique d'un fluide, notamment pour analyses hematologiques |
US5798276A (en) | 1995-06-07 | 1998-08-25 | Molecular Probes, Inc. | Reactive derivatives of sulforhodamine 101 with enhanced hydrolytic stability |
US5650847A (en) | 1995-06-14 | 1997-07-22 | Erkki Soini | Method and device for determination of parameters of individual microparticles |
US6454945B1 (en) | 1995-06-16 | 2002-09-24 | University Of Washington | Microfabricated devices and methods |
US5716852A (en) | 1996-03-29 | 1998-02-10 | University Of Washington | Microfabricated diffusion-based chemical sensor |
US5589457A (en) | 1995-07-03 | 1996-12-31 | Ausa International, Inc. | Process for the synchronization of ovulation |
US5590815A (en) | 1995-07-13 | 1997-01-07 | Monturas S.A. | Minature pump sprayer |
US6411835B1 (en) | 1997-01-13 | 2002-06-25 | Medispectra, Inc. | Spectral volume microprobe arrays |
ATE290695T1 (de) | 1995-08-11 | 2005-03-15 | Univ Guelph | Verfahren zum identifizieren von geschlechtsspezifischen und speziesspezifischen molekülen, mit verfahren identifizierte moleküle und verwendung der moleküle |
JP2001520637A (ja) | 1995-09-06 | 2001-10-30 | ザ・リサーチ・ファンデーション・オブ・ステート・ユニバーシティ・オブ・ニューヨーク | 二光子アップコンバーティング色素および応用 |
DE19533092A1 (de) | 1995-09-07 | 1997-03-13 | Basf Ag | Vorrichtung zur parallelisierten Zweiphotonen-Fluoreszenz-Korrelations-Spektroskopie (TPA-FCS) und deren Verwendung zum Wirkstoff-Screening |
US6329158B1 (en) | 1995-09-15 | 2001-12-11 | Becton Dickinson And Company | Use of dimly fluorescing nucleic acid dyes in the identification of nucleated cells |
US6040139A (en) | 1995-09-19 | 2000-03-21 | Bova; G. Steven | Laser cell purification system |
US5726751A (en) * | 1995-09-27 | 1998-03-10 | University Of Washington | Silicon microchannel optical flow cytometer |
US5780230A (en) | 1995-10-06 | 1998-07-14 | Coriell Institute For Medical Research | Compositions and methods for human sperm activation and quantitative assessment of human sperm genome replication |
US5736330A (en) * | 1995-10-11 | 1998-04-07 | Luminex Corporation | Method and compositions for flow cytometric determination of DNA sequences |
AU723170B2 (en) | 1995-10-19 | 2000-08-17 | Bio-Origyn Llc | Methods and compositions to improve germ cell and embryo survival and function |
US6117068A (en) | 1995-10-19 | 2000-09-12 | Elite Genetics, Inc | Artificial insemination system |
ATE231682T1 (de) | 1995-11-09 | 2003-02-15 | Medical Res Council | Verwendung von cyb-medium zum transport und lagern von sperma |
DE19549015C1 (de) | 1995-12-28 | 1997-04-03 | Siemens Ag | Verfahren und Anordnung zur Überwachung eines abreißenden Flüssigkeitstrahls |
JP3584108B2 (ja) | 1996-01-08 | 2004-11-04 | キヤノン株式会社 | レンズ鏡筒 |
US6641708B1 (en) | 1996-01-31 | 2003-11-04 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Method and apparatus for fractionation using conventional dielectrophoresis and field flow fractionation |
WO1997029354A1 (de) | 1996-02-05 | 1997-08-14 | Bayer Aktiengesellschaft | Verfahren und vorrichtung zum sortieren und zur gewinnung von planar ausgebrachten biologischen objekten wie biologische zellen bzw. zellorganellen, histologischen schnitten, chromosomenteilchen etc. mit laserstrahlen |
BR9600722A (pt) * | 1996-02-14 | 1997-12-30 | Jorge Antonio Rodrigues Claro | Bomba de infusão para contidos em bolsas plásticas flexíveis |
WO1997030338A1 (en) | 1996-02-16 | 1997-08-21 | Inphocyte, Inc. | System and method for rapid analysis of cells using spectral cytometry |
JP3127111B2 (ja) | 1996-02-22 | 2001-01-22 | 株式会社日立製作所 | フロー式粒子画像解析方法および装置 |
US6143901A (en) | 1996-07-31 | 2000-11-07 | Genesoft, Inc. | Complex formation between dsDNA and pyrrole imidazole polyamides |
US6090947A (en) | 1996-02-26 | 2000-07-18 | California Institute Of Technology | Method for the synthesis of pyrrole and imidazole carboxamides on a solid support |
US5895922A (en) | 1996-03-19 | 1999-04-20 | Her Majesty The Queen In Right Of Canada, As Represented By The Minister Of National Defence | Fluorescent biological particle detection system |
US5701012A (en) | 1996-03-19 | 1997-12-23 | Her Majesty The Queen In Right Of Canada, As Represented By The Minister Of National Defence | Fluorescent biological particle detection system |
US5747349A (en) | 1996-03-20 | 1998-05-05 | University Of Washington | Fluorescent reporter beads for fluid analysis |
JP3640461B2 (ja) | 1996-04-03 | 2005-04-20 | シスメックス株式会社 | 粒子分析装置 |
US5707808A (en) | 1996-04-15 | 1998-01-13 | The Regents Of The University Of California | Optical selection and collection of DNA fragments |
IL126544A (en) * | 1996-04-25 | 2004-08-31 | Genicon Sciences Inc | Test for component detection using detectable particles in diffused light |
WO1997043620A1 (en) | 1996-05-15 | 1997-11-20 | International Remote Imaging Systems, Inc. | Selectively emphasizing particles of interest from a fluid sample for analysis |
JP2963393B2 (ja) | 1996-06-14 | 1999-10-18 | 浜松ホトニクス株式会社 | 光電子増倍管用電圧分割回路 |
US5846737A (en) | 1996-07-26 | 1998-12-08 | Molecular Probes, Inc. | Conjugates of sulforhodamine fluorophores with enhanced fluorescence |
US5909278A (en) | 1996-07-29 | 1999-06-01 | The Regents Of The University Of California | Time-resolved fluorescence decay measurements for flowing particles |
US5844685A (en) | 1996-07-30 | 1998-12-01 | Bayer Corporation | Reference laser beam sampling apparatus |
US5745308A (en) | 1996-07-30 | 1998-04-28 | Bayer Corporation | Methods and apparatus for an optical illuminator assembly and its alignment |
US5872627A (en) * | 1996-07-30 | 1999-02-16 | Bayer Corporation | Method and apparatus for detecting scattered light in an analytical instrument |
EP0822401A3 (en) | 1996-07-30 | 1999-05-06 | Bayer Corporation | Hydraulic system for a hematology analytical instrument |
ATE434173T1 (de) | 1996-07-30 | 2009-07-15 | Siemens Healthcare Diagnostics | Optisches system für blutanalysegerät |
US5719667A (en) * | 1996-07-30 | 1998-02-17 | Bayer Corporation | Apparatus for filtering a laser beam in an analytical instrument |
US6074827A (en) | 1996-07-30 | 2000-06-13 | Aclara Biosciences, Inc. | Microfluidic method for nucleic acid purification and processing |
US6042249A (en) * | 1996-07-30 | 2000-03-28 | Bayer Corporation | Illuminator optical assembly for an analytical instrument and methods of alignment and manufacture |
US5883378A (en) * | 1996-07-30 | 1999-03-16 | Bayer Corporation | Apparatus and methods for transmitting electrical signals indicative of optical interactions between a light beam and a flowing suspension of particles |
US5998140A (en) | 1996-07-31 | 1999-12-07 | The Scripps Research Institute | Complex formation between dsDNA and oligomer of cyclic heterocycles |
US5804436A (en) | 1996-08-02 | 1998-09-08 | Axiom Biotechnologies, Inc. | Apparatus and method for real-time measurement of cellular response |
WO1998005853A1 (en) | 1996-08-07 | 1998-02-12 | Cuno, Inc. | Additive dispensing apparatus |
US6432630B1 (en) | 1996-09-04 | 2002-08-13 | Scandinanian Micro Biodevices A/S | Micro-flow system for particle separation and analysis |
US5873254A (en) | 1996-09-06 | 1999-02-23 | Interface Multigrad Technology | Device and methods for multigradient directional cooling and warming of biological samples |
JP3574665B2 (ja) | 1996-09-06 | 2004-10-06 | メダレツクス・インコーポレーテツド | シアニジン組成物並びにそれらの治療的及び診断的使用 |
US6221654B1 (en) * | 1996-09-25 | 2001-04-24 | California Institute Of Technology | Method and apparatus for analysis and sorting of polynucleotides based on size |
US5759767A (en) | 1996-10-11 | 1998-06-02 | Joseph R. Lakowicz | Two-photon and multi-photon measurement of analytes in animal and human tissues and fluids |
US6002471A (en) | 1996-11-04 | 1999-12-14 | California Institute Of Technology | High resolution scanning raman microscope |
US5799830A (en) | 1996-11-08 | 1998-09-01 | Carroll; David C. | Pressure vessel access port |
US5696157A (en) | 1996-11-15 | 1997-12-09 | Molecular Probes, Inc. | Sulfonated derivatives of 7-aminocoumarin |
JP4323571B2 (ja) | 1997-01-31 | 2009-09-02 | エックスワイ, インコーポレイテッド | 光学装置 |
US5874266A (en) * | 1997-03-27 | 1999-02-23 | Palsson; Bernhard O. | Targeted system for removing tumor cells from cell populations |
US6534308B1 (en) | 1997-03-27 | 2003-03-18 | Oncosis, Llc | Method and apparatus for selectively targeting specific cells within a mixed cell population |
US6753161B2 (en) | 1997-03-27 | 2004-06-22 | Oncosis Llc | Optoinjection methods |
GB9707096D0 (en) | 1997-04-08 | 1997-05-28 | Smithkline Beecham Plc | Novel device |
JP2968231B2 (ja) | 1997-04-11 | 1999-10-25 | 株式会社荏原製作所 | 空調システム |
US6133995A (en) | 1997-05-09 | 2000-10-17 | Sysmex Corporation | Particle measuring apparatus |
US6050935A (en) | 1997-05-09 | 2000-04-18 | Biofertec | Container assembly for intravaginal fertilization and culture and embryo transfer and method of intravaginal fertilization and culture employing such a container |
WO1998057152A1 (en) | 1997-06-09 | 1998-12-17 | Guava Technologies, Inc. | Method and apparatus for detecting microparticles in fluid samples |
WO1998059233A1 (en) | 1997-06-23 | 1998-12-30 | Luminex Corporation | Interlaced lasers for multiple fluorescence measurement |
DE69834527T2 (de) | 1997-07-01 | 2007-05-10 | VLP Watertown Limited Partnership, Watertown | Verfahren zur Geschlechtsbestimmung von Säuger-Nachkommenschaft |
US6111398A (en) | 1997-07-03 | 2000-08-29 | Coulter International Corp. | Method and apparatus for sensing and characterizing particles |
BR9704313A (pt) | 1997-07-08 | 1999-04-06 | Alves Elias Walter | Utilização de ig-y de ovo de galinha associado a anticorpos monoclonais contra antigenos sexo especifico na imunosexagem de espermatozóides de bovinos |
US5899848A (en) | 1997-07-14 | 1999-05-04 | Haubrich; Mark A. | Device and process for artificial insemination of animals |
US5985216A (en) | 1997-07-24 | 1999-11-16 | The United States Of America, As Represented By The Secretary Of Agriculture | Flow cytometry nozzle for high efficiency cell sorting |
US5876942A (en) | 1997-07-24 | 1999-03-02 | National Science Council Of Republic Of China | Process for sexing cow embryos |
US5985538A (en) | 1997-08-01 | 1999-11-16 | Saint Barnabas Medical Center | Cryopreservation and cell culture medium comprising less than 50 mM sodium ions and greater than 100 mM choline salt |
US6003678A (en) | 1997-08-21 | 1999-12-21 | University Of Washington | Particle separating apparatus and method |
US5819948A (en) | 1997-08-21 | 1998-10-13 | Van Den Engh; Gerrit J. | Particle separating apparatus and method |
US5880474A (en) * | 1997-08-29 | 1999-03-09 | Becton Dickinson And Company | Multi-illumination-source flow particle analyzer with inter-location emissions crosstalk cancelation |
AU9247598A (en) | 1997-09-22 | 1999-04-12 | University Of Guelph | Reduction of sperm sensitivity to chilling |
US6540895B1 (en) * | 1997-09-23 | 2003-04-01 | California Institute Of Technology | Microfabricated cell sorter for chemical and biological materials |
US5919350A (en) | 1997-11-13 | 1999-07-06 | Regents Of The University Of California | Mediated electrochemical oxidation of organic wastes using a Co(III) mediator in a neutral electrolyte |
US6322901B1 (en) | 1997-11-13 | 2001-11-27 | Massachusetts Institute Of Technology | Highly luminescent color-selective nano-crystalline materials |
WO1999026186A1 (en) * | 1997-11-19 | 1999-05-27 | University Of Washington | High throughput optical scanner |
US6086574A (en) | 1997-11-21 | 2000-07-11 | Hyclone Laboratories, Inc. | Fluid delivery systems with diptube connector |
US5895764A (en) | 1997-11-24 | 1999-04-20 | University Of New Mexico | Controlled sheath flow injection cytometry |
US6207392B1 (en) * | 1997-11-25 | 2001-03-27 | The Regents Of The University Of California | Semiconductor nanocrystal probes for biological applications and process for making and using such probes |
US5990479A (en) | 1997-11-25 | 1999-11-23 | Regents Of The University Of California | Organo Luminescent semiconductor nanocrystal probes for biological applications and process for making and using such probes |
WO1999031488A1 (en) * | 1997-12-12 | 1999-06-24 | Chemunex S.A. | Digital flow cytometer |
US6149867A (en) | 1997-12-31 | 2000-11-21 | Xy, Inc. | Sheath fluids and collection systems for sex-specific cytometer sorting of sperm |
US6071689A (en) | 1997-12-31 | 2000-06-06 | Xy, Inc. | System for improving yield of sexed embryos in mammals |
US5908380A (en) * | 1998-01-12 | 1999-06-01 | Zavos; Panayiotis M. | Compartmentalized Zavos sperm swim-up column |
WO1999038883A1 (en) | 1998-02-03 | 1999-08-05 | Xy, Inc. | Specific oligonucleotide primers for detection of bovine male chromosome presence by polymerase chain reaction and method |
US6746873B1 (en) | 1998-02-20 | 2004-06-08 | Xy, Inc. | Vibratory system for a sorting flow cytometer |
WO1999042810A1 (en) | 1998-02-20 | 1999-08-26 | Xy, Inc. | A vibratory system for a sorting flow cytometer |
US6154276A (en) | 1998-02-23 | 2000-11-28 | The Regents Of The University Of California | Waveguide detection of right-angle-scattered light in flow cytometry |
US6211477B1 (en) * | 1998-02-26 | 2001-04-03 | Becton Dickinson And Company | Electrostatic deceleration system for flow cytometer |
US6248590B1 (en) | 1998-02-27 | 2001-06-19 | Cytomation, Inc. | Method and apparatus for flow cytometry |
US6042025A (en) | 1998-03-13 | 2000-03-28 | Smith Et Al. | Two hole dispenser with baffles |
JP2002506989A (ja) | 1998-03-16 | 2002-03-05 | パルテック パルテーケルツェールゲレーテ ゲーエムベーハー | 流体を精確な少量に分配する電子装置 |
JP3594794B2 (ja) | 1998-03-24 | 2004-12-02 | 独立行政法人 科学技術振興機構 | ナノ秒時間ゲート分光診断装置 |
US6642018B1 (en) | 1998-03-27 | 2003-11-04 | Oncosis Llc | Method for inducing a response in one or more targeted cells |
CA2325860A1 (en) | 1998-03-30 | 1999-10-07 | Bioshaf Ltd. | Flow cytometer for analysis of general diagnostic factors in cells and body fluids |
US6175409B1 (en) | 1999-04-02 | 2001-01-16 | Symyx Technologies, Inc. | Flow-injection analysis and variable-flow light-scattering methods and apparatus for characterizing polymers |
JP3350442B2 (ja) | 1998-04-09 | 2002-11-25 | 科学技術振興事業団 | 顕微鏡システム |
CA2328408C (en) | 1998-05-14 | 2005-02-15 | Luminex Corporation | Zero dead time architecture and method for flow cytometer |
AU3771599A (en) | 1998-05-18 | 1999-12-06 | University Of Washington | Liquid analysis cartridge |
AU763433B2 (en) | 1998-05-22 | 2003-07-24 | California Institute Of Technology | Microfabricated cell sorter |
US6079836A (en) | 1998-07-20 | 2000-06-27 | Coulter International Corp. | Flow cytometer droplet break-off location adjustment mechanism |
EP1100534B1 (en) | 1998-07-30 | 2008-01-16 | XY, Inc. | Equine system for non-surgical artificial insemination |
US20040107150A1 (en) | 1998-07-31 | 2004-06-03 | Chata Biosystems, Inc. Of Colorado | Apparatus and method with vessel for containing/transporting a fluent substance |
US6729369B2 (en) * | 1998-07-31 | 2004-05-04 | Chata Biosystems, Inc. | Vessel for containing/transporting a fluent substance |
DE29813921U1 (de) | 1998-08-04 | 1998-10-08 | Kisfeld, Alfons, 48691 Vreden | Vorrichtung zur Besamung von Tieren, insbesondere Sauen |
US6309815B1 (en) | 1998-08-07 | 2001-10-30 | University Of Kansas Medical Center | Composition and method for preparation, storage and activation of large populations of immotile sperm |
WO2000009113A1 (en) | 1998-08-17 | 2000-02-24 | Trout William E | Use of zeranol to modulate reproductive cycles |
AU754644B2 (en) | 1998-08-21 | 2002-11-21 | Union Biometrica, Inc. | Instrument for selecting and depositing multicellular organisms and other large objects |
US6326144B1 (en) | 1998-09-18 | 2001-12-04 | Massachusetts Institute Of Technology | Biological applications of quantum dots |
US6495333B1 (en) | 1998-09-22 | 2002-12-17 | Becton Dickinson And Company | Flow cytometric, whole blood dendritic cell immune function assay |
US6208411B1 (en) * | 1998-09-28 | 2001-03-27 | Kla-Tencor Corporation | Massively parallel inspection and imaging system |
US6707555B1 (en) | 1998-10-15 | 2004-03-16 | Sysmex Corporation | Optical information measuring apparatus |
US6423505B1 (en) | 1998-12-03 | 2002-07-23 | Becton Dickinson And Company | Methods and reagents for quantitation of HLA-DR and CD11b expression on peripheral blood cells |
US7116407B2 (en) | 1998-12-15 | 2006-10-03 | Union Biometrica, Inc. | System for axial pattern analysis of multicellular organisms |
US6128133A (en) | 1998-12-22 | 2000-10-03 | Lucent Technologies Inc. | Optical beamsplitter |
JP2000206032A (ja) | 1999-01-06 | 2000-07-28 | Bayer Corp | 可変割合体積粒子計数装置及び試料の特性を定める方法 |
US20010006416A1 (en) | 1999-01-11 | 2001-07-05 | Johnson Paul E. | Ribbon flow cytometry apparatus and methods |
US6256096B1 (en) | 1999-01-11 | 2001-07-03 | Softray | Flow cytometry apparatus and method |
US6150119A (en) * | 1999-01-19 | 2000-11-21 | Caliper Technologies Corp. | Optimized high-throughput analytical system |
US6473176B2 (en) | 1999-01-25 | 2002-10-29 | Amnis Corporation | Imaging and analyzing parameters of small moving objects such as cells |
US6671044B2 (en) | 1999-01-25 | 2003-12-30 | Amnis Corporation | Imaging and analyzing parameters of small moving objects such as cells in broad flat flow |
US6580504B1 (en) | 1999-01-25 | 2003-06-17 | Amnis Corporation | Multipass cavity for illumination and excitation of moving objects |
US6119465A (en) | 1999-02-10 | 2000-09-19 | Mullens; Patrick L. | Shipping container for storing materials at cryogenic temperatures |
FR2789778B1 (fr) | 1999-02-12 | 2001-09-14 | France Telecom | Procede pour associer des references d'acheminement a des paquets de donnees au moyen d'une memoire trie, et routeur de paquets appliquant ce procede |
US6323632B1 (en) * | 1999-08-13 | 2001-11-27 | Coulter International Corp. | Solid state RF oscillator-detector for flow cytometer |
AU3146800A (en) | 1999-03-05 | 2000-09-28 | De Danske Kvaegavlsforeninger | Determination of sperm concentration and viability for artificial insemination |
US6097485A (en) | 1999-03-08 | 2000-08-01 | Integrated Waveguides, Inc. | Microchip optical transport technology for use in a personal flow cytometer |
FR2791645B1 (fr) | 1999-04-02 | 2001-06-15 | Valois Sa | Echantillon de produit fluide destine a la presse |
US6193647B1 (en) * | 1999-04-08 | 2001-02-27 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Microfluidic embryo and/or oocyte handling device and method |
US6793387B1 (en) | 1999-05-08 | 2004-09-21 | Chata Biosystems, Inc. | Apparatus for automatic preparation of a mixture and method |
FR2793495B1 (fr) * | 1999-05-14 | 2001-08-10 | Imv Technologies | Dilueur pour la cryoconservation de spermatozoides de bovins |
FR2793708B1 (fr) | 1999-05-21 | 2001-08-03 | Valois Sa | Dispositif de distribution de produit fluide |
US6372506B1 (en) | 1999-07-02 | 2002-04-16 | Becton, Dickinson And Company | Apparatus and method for verifying drop delay in a flow cytometer |
IT1307787B1 (it) | 1999-07-26 | 2001-11-19 | Univ Firenze | Processo per incrementare la motilita' degli spermatozoi e spermatozoia motilita' superiore cosi' ottenuti. |
DE19935766A1 (de) | 1999-07-29 | 2001-02-01 | Friedrich Schiller Uni Jena Bu | Verfahren zur optischen Anregung von Fluorophor-markierter DNA und RNA |
US6664550B2 (en) | 1999-08-30 | 2003-12-16 | Sandia National Laboratories | Apparatus to collect, classify, concentrate, and characterize gas-borne particles |
US6495366B1 (en) | 1999-09-03 | 2002-12-17 | Therakos, Inc. | Uninterrupted flow pump apparatus and method |
US6813017B1 (en) | 1999-10-20 | 2004-11-02 | Becton, Dickinson And Company | Apparatus and method employing incoherent light emitting semiconductor devices as particle detection light sources in a flow cytometer |
WO2001028700A1 (en) | 1999-10-21 | 2001-04-26 | Cytomation, Inc. | Transiently dynamic flow cytometer analysis system |
US6472153B1 (en) | 1999-10-26 | 2002-10-29 | Epoch Biosciences, Inc. | Hybridization-triggered fluorescent detection of nucleic acids |
US7208265B1 (en) | 1999-11-24 | 2007-04-24 | Xy, Inc. | Method of cryopreserving selected sperm cells |
AU785290B2 (en) * | 1999-11-30 | 2006-12-21 | Intrexon Corporation | Method and apparatus for selectively targeting specific cells within a cell population |
US6263745B1 (en) * | 1999-12-03 | 2001-07-24 | Xy, Inc. | Flow cytometer nozzle and flow cytometer sample handling methods |
US6558911B1 (en) | 1999-12-10 | 2003-05-06 | Oregon Health Sciences University | Sperm quality assay |
EP1250897B1 (en) | 2000-01-03 | 2004-09-29 | Iberica de Reproduccion Asistida, S.L. | Artificial insemination device for pigs |
ATE216182T1 (de) | 2000-01-14 | 2002-05-15 | Artemis Pharmaceuticals Gmbh | Verfahren zur kryokonservierung von zebrafisch- samen |
US6465169B2 (en) | 2000-01-14 | 2002-10-15 | Artemis Pharmaceuticals Gmbh | Method for cryoconservation of Zebrafish sperm |
IT1317724B1 (it) | 2000-01-14 | 2003-07-15 | Istituto Sperimentale Italiano | Procedimento per la produzione di embrioni non umani di sessopredeterminato ad alto valore genetico. |
US6618679B2 (en) | 2000-01-28 | 2003-09-09 | Althea Technologies, Inc. | Methods for analysis of gene expression |
US6587203B2 (en) | 2000-02-17 | 2003-07-01 | Cornell Research Foundation, Inc. | Sort stream stabilizer for flow cytometer |
US6618143B2 (en) | 2000-02-18 | 2003-09-09 | Idexx Laboratories, Inc. | High numerical aperture flow cytometer and method of using same |
US6646742B1 (en) | 2000-02-19 | 2003-11-11 | Mwi, Inc. | Optical device and method for multi-angle laser light scatter |
GB2360360B (en) | 2000-03-14 | 2002-03-20 | Univ Bristol | A method of sorting cells |
JP3587755B2 (ja) | 2000-03-14 | 2004-11-10 | シスメックス株式会社 | 粒子測定装置およびその方法 |
US6482652B2 (en) | 2000-03-23 | 2002-11-19 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Biological particle sorter |
CA2403992A1 (en) | 2000-03-30 | 2001-10-11 | Max F. Rothschild | Genetic markers for improved meat characteristics in animals |
DK1290427T3 (en) * | 2000-04-11 | 2017-12-04 | Chemometec As | Method and apparatus for detecting the fluorescence of a sample |
EP1147774A1 (en) | 2000-04-20 | 2001-10-24 | Stichting Dienst Landbouwkundig Onderzoek | Method for improving the quality of sperm for artificial insemination of animals |
NZ545311A (en) * | 2000-05-09 | 2008-03-28 | Xy Inc | Flow cytometer for high purity X-chromosome bearing and Y-chromosome bearing populations of spermatozoa |
CA2409833A1 (en) | 2000-05-19 | 2001-11-29 | Cytomation, Inc. | A rapid multi-material sample input system |
US6784981B1 (en) | 2000-06-02 | 2004-08-31 | Idexx Laboratories, Inc. | Flow cytometry-based hematology system |
US6590911B1 (en) | 2000-06-02 | 2003-07-08 | Coherent, Inc. | Passively modelocked harmonic-generating laser |
US6700130B2 (en) * | 2001-06-29 | 2004-03-02 | Honeywell International Inc. | Optical detection system for flow cytometry |
US7351376B1 (en) | 2000-06-05 | 2008-04-01 | California Institute Of Technology | Integrated active flux microfluidic devices and methods |
US6503698B1 (en) * | 2000-06-16 | 2003-01-07 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Cryopreservation of swine embryos |
AU6979501A (en) | 2000-06-12 | 2001-12-24 | Xy Inc | Integrated herd management system utilizing isolated populations of x-chromosomebearing and y-chromosome bearing spermatozoa |
DE10031028B4 (de) | 2000-06-26 | 2008-09-04 | Gnothis Holding Sa | Verfahren zur Selektion von Partikeln |
GB0016920D0 (en) | 2000-07-10 | 2000-08-30 | Univ Cambridge Tech | Decondensation of DNA |
US20040005582A1 (en) | 2000-08-10 | 2004-01-08 | Nanobiodynamics, Incorporated | Biospecific desorption microflow systems and methods for studying biospecific interactions and their modulators |
CA2417595A1 (en) | 2000-08-10 | 2002-02-14 | Genzyme Transgenics Corporation | Cryopreservation of sperm |
FR2813283B1 (fr) | 2000-08-25 | 2003-02-14 | Valois Sa | Distributeur a pompe integree |
EP1190684A1 (en) | 2000-09-05 | 2002-03-27 | Universiteit Gent | Device and method for artificial insemination of bovines and other animals |
US20020028434A1 (en) | 2000-09-06 | 2002-03-07 | Guava Technologies, Inc. | Particle or cell analyzer and method |
AU2001288980B2 (en) | 2000-09-08 | 2005-12-01 | Pig Improvement Company Uk Limited | Novel PRKAG3 alleles and use of the same as genetic markers for reproductive and meat quality traits |
EP1334347A1 (en) * | 2000-09-15 | 2003-08-13 | California Institute Of Technology | Microfabricated crossflow devices and methods |
GB0023041D0 (en) | 2000-09-20 | 2000-11-01 | Univ Manchester | Identification apparatus |
CN1325909C (zh) | 2000-09-27 | 2007-07-11 | 清华大学 | 用于微粒操纵与微粒导向的装置及其使用方法 |
US7208120B2 (en) | 2000-09-27 | 2007-04-24 | The Trustees Of Boston University | Cellular diagnostic arrays, methods of using and processing for producing same |
BR0005045A (pt) | 2000-09-28 | 2002-05-14 | Marcos Fernando De Resende Mat | Método para sexagem de espermatozóides usando a via clássica do sistema complemento, com eliminação da via alternativa pela inativação da proteina "b" |
WO2002029106A2 (en) | 2000-10-03 | 2002-04-11 | California Institute Of Technology | Microfluidic devices and methods of use |
AR029030A1 (es) | 2000-10-05 | 2003-06-04 | Xy Inc | Disposicion de inseminacion histeroscopica de yeguas |
US20040031071A1 (en) | 2000-10-05 | 2004-02-12 | Xy, Inc. | System of hysteroscopic insemination of mares |
AU2002211913A1 (en) * | 2000-10-12 | 2002-04-22 | Amnis Corporation | Multipass cavity for illumination and excitation of moving objects |
JP2004537712A (ja) * | 2000-10-18 | 2004-12-16 | バーチャル・アレイズ・インコーポレーテッド | 多重細胞分析システム |
CN101091678B (zh) | 2000-10-23 | 2011-03-30 | 因斯蒂尔医学技术有限公司 | 具有在刚性小瓶内的气囊的流体分配器 |
US20040034879A1 (en) * | 2000-11-09 | 2004-02-19 | Steve Rothstein | Mammalian sex selection using genetic modification |
CA2454340A1 (en) | 2000-11-22 | 2002-05-30 | Pharmacia Corporation | Methods and apparatus for producing gender enriched sperm |
SE0004777D0 (sv) | 2000-12-22 | 2000-12-22 | Amersham Pharm Biotech Ab | Separation of X-and Y-sperm cells |
CA2822983C (en) | 2000-11-29 | 2017-05-09 | Xy, Llc | System to separate frozen-thawed spermatozoa into x-chromosome bearing and y-chromosome bearing populations |
US7713687B2 (en) | 2000-11-29 | 2010-05-11 | Xy, Inc. | System to separate frozen-thawed spermatozoa into x-chromosome bearing and y-chromosome bearing populations |
US20020064809A1 (en) | 2000-11-29 | 2002-05-30 | Mutz Mitchell W. | Focused acoustic ejection cell sorting system and method |
US20020064808A1 (en) | 2000-11-29 | 2002-05-30 | Mutz Mitchell W. | Focused acoustic energy for ejecting cells from a fluid |
US6849423B2 (en) * | 2000-11-29 | 2005-02-01 | Picoliter Inc | Focused acoustics for detection and sorting of fluid volumes |
AU2002216063A1 (en) | 2000-11-30 | 2002-06-11 | The Netherlands Cancer Institute | Membrane molecule indicator compositions and methods |
US6576291B2 (en) | 2000-12-08 | 2003-06-10 | Massachusetts Institute Of Technology | Preparation of nanocrystallites |
US20040171163A1 (en) | 2000-12-15 | 2004-09-02 | Lopez Peter A. | Electrical conductive containment system |
US6577387B2 (en) | 2000-12-29 | 2003-06-10 | Johnson & Johnson Vision Care, Inc. | Inspection of ophthalmic lenses using absorption |
EP1355887B1 (fr) | 2001-01-29 | 2007-08-15 | Universite De Geneve | Derives d'acyclonucleosides pyrimidiniques, leur procede de preparation et leur utilisation |
US6673095B2 (en) | 2001-02-12 | 2004-01-06 | Wound Healing Of Oklahoma, Inc. | Apparatus and method for delivery of laser light |
US7339090B2 (en) * | 2001-02-13 | 2008-03-04 | Avigenics, Inc. | Microinjection devices and methods of use |
US7029916B2 (en) * | 2001-02-21 | 2006-04-18 | Maxcyte, Inc. | Apparatus and method for flow electroporation of biological samples |
CA2440592C (en) * | 2001-03-12 | 2012-05-15 | The State Of Oregon Acting By And Through The State Board Of Higher Education On Behalf Of The University Of Oregon | Oxidation-reduction sensitive green fluorescent protein variants |
US6706163B2 (en) * | 2001-03-21 | 2004-03-16 | Michael Seul | On-chip analysis of particles and fractionation of particle mixtures using light-controlled electrokinetic assembly of particles near surfaces |
US20050081256A1 (en) | 2001-03-22 | 2005-04-14 | Forsberg Erik J. | Sex- specific selection of sperm from transgenic animals |
EP1565747B1 (en) | 2001-03-29 | 2013-11-27 | Cellect Technologies Corp. | Method and system for separating and sorting particles |
EP1245944B1 (en) | 2001-03-29 | 2007-02-14 | Sysmex Corporation | Flow cytometer |
US20020172622A1 (en) * | 2001-04-03 | 2002-11-21 | Weigl Bernhard H. | Microfluidic device for concentrating particles in a concentrating solution |
JP2002311027A (ja) | 2001-04-09 | 2002-10-23 | Hitachi Software Eng Co Ltd | ビーズ、ビーズ製造方法、フローサイトメータ及びプログラム |
US6416190B1 (en) | 2001-04-27 | 2002-07-09 | University Of Chicago | Apparatus for using optical tweezers to manipulate materials |
US20020186375A1 (en) | 2001-05-01 | 2002-12-12 | Asbury Charles L. | Device and methods for detecting samples in a flow cytometer independent of variations in fluorescence polarization |
WO2002092161A1 (en) | 2001-05-10 | 2002-11-21 | Biophan, Llc | Miniaturized particle analyzer |
US7345758B2 (en) | 2001-05-17 | 2008-03-18 | Cytopeia | Apparatus for analyzing and sorting biological particles |
US7012689B2 (en) | 2001-05-17 | 2006-03-14 | Dako Colorado, Inc. | Flow cytometer with active automated optical alignment system |
US20020182590A1 (en) | 2001-05-25 | 2002-12-05 | Vanderbilt University | Determining protein function in cell culture using RNA interference |
US20030048433A1 (en) * | 2001-06-01 | 2003-03-13 | Jean-Marie Desjonqueres | Cytometer signal processing system and method |
FR2825987B1 (fr) | 2001-06-19 | 2003-12-12 | Valois Sa | Distributeur de produit fluide |
WO2003007111A2 (en) | 2001-07-09 | 2003-01-23 | Rochester Institute Of Technology | Wiper blade assessment system and a method thereof |
AU2002318269A1 (en) | 2001-07-18 | 2003-03-03 | The Regents Of The University Of Michigan | Gas-focusing flow cytometer cell and flow cytometer detection system with waveguide optics |
WO2003008102A1 (en) | 2001-07-18 | 2003-01-30 | The Regents Of The University Of Michigan | Microfluidic gravity pump with constant flow rate |
FR2828281B1 (fr) | 2001-08-02 | 2004-12-31 | Biocytex | Dispositif pour l'analyse d'un echantillon notamment par cytometrie de flux |
AU2002320399A1 (en) | 2001-09-01 | 2003-03-18 | Pharmacia Corporation | Staining and sorting genomes and chromosomes using sequence-specific polyamides |
AUPR803501A0 (en) * | 2001-10-02 | 2001-10-25 | Xeno Trans Ltd | Gene transfer composition and method |
DE10151216A1 (de) * | 2001-10-16 | 2003-04-24 | Zeiss Carl Jena Gmbh | Verfahren zur optischen Erfassung von charakteristischen Größen einer beleuchteten Probe |
US20030078703A1 (en) * | 2001-10-19 | 2003-04-24 | Surromed, Inc. | Cytometry analysis system and method using database-driven network of cytometers |
US20040210955A1 (en) | 2001-10-26 | 2004-10-21 | Hidenori Akutsu | Preparation of spermatozoa for ICSI-mediated transgenesis and methods of using the same |
US6838289B2 (en) | 2001-11-14 | 2005-01-04 | Beckman Coulter, Inc. | Analyte detection system |
US6831279B2 (en) | 2001-11-27 | 2004-12-14 | Her Majesty The Queen In Right Of Canada, As Represented By The Minister Of National Defence | Laser diode-excited biological particle detection system |
AU2002363895A1 (en) | 2001-12-31 | 2003-07-15 | Institut Fur Physikalische Hochtechnologie E.V. | Cell sorting system for the size-based sorting or separation of cells suspended in a flowing fluid |
WO2003056335A2 (de) | 2001-12-31 | 2003-07-10 | Institut für Physikalische Hochtechnologie e.V. | Mikrovertiefungsarray zur grössenabhängigen sortierung oder separation von in einer strömenden flüssigkeit suspendierten zellen und verfahren zur untersuchung der funktionellen aktivität von einzelzellen |
US7071917B2 (en) | 2002-01-09 | 2006-07-04 | Sony Corporatiom | Electronic apparatus and method and program of controlling the same |
WO2003062796A1 (en) | 2002-01-22 | 2003-07-31 | Dakocytomation Denmark A/S | Environmental containment system for a flow cytometer |
US6698627B2 (en) * | 2002-02-19 | 2004-03-02 | Valois S.A.S. | Fluid dispenser |
US6849394B2 (en) * | 2002-02-21 | 2005-02-01 | Minitube Of America | Compositions comprising reproductive cell media and methods for using such compositions |
JP4557551B2 (ja) | 2002-02-27 | 2010-10-06 | ミシガン大学リージェンツ | 運動性精子選別法 |
US20030175980A1 (en) | 2002-03-14 | 2003-09-18 | Hayenga Jon W. | Ribbon flow cytometry and cell sorting |
US7223371B2 (en) | 2002-03-14 | 2007-05-29 | Micronics, Inc. | Microfluidic channel network device |
JP2004000144A (ja) | 2002-03-29 | 2004-01-08 | Aisin Seiki Co Ltd | 細胞分離選別装置、細胞整列用基板 |
US7312085B2 (en) | 2002-04-01 | 2007-12-25 | Fluidigm Corporation | Microfluidic particle-analysis systems |
JP2003336614A (ja) | 2002-05-20 | 2003-11-28 | Shinjo Seisakusho:Kk | ねじ保持ベルト |
MXPA04012850A (es) | 2002-06-28 | 2005-02-24 | Monsanto Technology Llc | Sistema de negocios para genetica porcina. |
AU2003255529B2 (en) | 2002-07-10 | 2008-11-20 | Laboratoires Serono Sa | Use of compounds for increasing spermatozoa motility |
WO2004009237A2 (en) | 2002-07-22 | 2004-01-29 | Xy, Inc. | Sperm cell process system |
US7612250B2 (en) | 2002-07-29 | 2009-11-03 | Trustees Of Tufts College | Nuclear transfer embryo formation method |
BRPI0313163B1 (pt) | 2002-08-01 | 2015-11-17 | Univ Colorado State | sistema de separação de células espermáticas a baixa pressão |
AU2003265471B2 (en) | 2002-08-15 | 2009-08-06 | Xy, Llc. | High resolution flow cytometer |
US7169548B2 (en) | 2002-09-13 | 2007-01-30 | Xy, Inc. | Sperm cell processing and preservation systems |
JP3983151B2 (ja) | 2002-09-25 | 2007-09-26 | ダイワ精工株式会社 | 魚釣用スピニングリール |
US7201875B2 (en) | 2002-09-27 | 2007-04-10 | Becton Dickinson And Company | Fixed mounted sorting cuvette with user replaceable nozzle |
US20040061853A1 (en) * | 2002-09-27 | 2004-04-01 | Blasenheim Barry J. | Prism-based flow cytometry excitation optics |
US6941005B2 (en) | 2002-11-01 | 2005-09-06 | Coulter International Corp. | Monitoring and control of droplet sorting |
US20060144707A1 (en) | 2002-11-20 | 2006-07-06 | Landers James P | Isolation of sperm cells from other biological materials using microfabricated devices and related methods thereof |
AU2003297304A1 (en) | 2002-12-19 | 2004-07-22 | Monsanto Technology Llc | Method and means for early detection of pregnancy in animals by combination testing |
WO2004067177A1 (de) | 2003-02-01 | 2004-08-12 | Evotec Ag | Dispensierverfahren |
US20040249836A1 (en) | 2003-03-24 | 2004-12-09 | John Reynders | Synchronized data-centric and document-centric knowledge management system for drug discovery and development |
DK2305173T3 (en) | 2003-03-28 | 2016-08-22 | Inguran Llc | Apparatus and method for providing sorted particles |
ATE369867T1 (de) | 2003-03-28 | 2007-09-15 | Monsanto Technology Llc | Verfahren zum anfärben von sperma |
US20060263829A1 (en) | 2003-05-15 | 2006-11-23 | Evans Kenneth M | Efficient haploid cell sorting flow cytometer systems |
WO2004104176A2 (en) | 2003-05-15 | 2004-12-02 | Paradigm Genetics, Inc. | Method for the identification of inhibitors of ornithine carbamoyltransferase, ketol-acid reductoisomerase, and fungal pathogenicity-conferring gene as antibiotics |
US20050011582A1 (en) | 2003-06-06 | 2005-01-20 | Haug Jeffrey S. | Fluid delivery system for a flow cytometer |
US7460223B2 (en) | 2003-09-19 | 2008-12-02 | Applied Biosystems Inc. | Inverted orientation for a microplate |
AU2005229073B2 (en) | 2004-03-29 | 2010-08-19 | Inguran, Llc | Sperm suspensions for use in insemination |
NZ550197A (en) | 2004-03-29 | 2009-10-30 | Inguran Llc | Use of a composition which regulates oxidation/reduction reactions intracellularly and/or extracellularly in a staining or sorting process of spermatozoa |
US7833147B2 (en) | 2004-07-22 | 2010-11-16 | Inguran, LLC. | Process for enriching a population of sperm cells |
PL2884258T3 (pl) | 2004-07-27 | 2017-04-28 | Beckman Coulter, Inc. | Poprawa zdolności dyskryminacji w cytometrii przepływowej przy użyciu transformacji geometrycznej realizowanej za pomocą komputera |
US20060118167A1 (en) | 2004-12-03 | 2006-06-08 | Xy, Inc. | Pressure regulated continuously variable volume container for fluid delivery |
US20060147894A1 (en) | 2004-12-30 | 2006-07-06 | Vicam, L.P. | Jacketed vessel for holding semen for sex biasing mammals through artificial insemination and systems and methods for enhancing the probability of sex biasing using the same |
US7591064B2 (en) * | 2005-07-20 | 2009-09-22 | Hitachi Global Storage Technologies Netherlands B.V. | Method of fabrication for tape medium read head with unitary formation of multiple elements |
US7618770B2 (en) | 2005-07-29 | 2009-11-17 | Xy, Inc. | Methods and apparatus for reducing protein content in sperm cell extenders |
WO2007047811A2 (en) | 2005-10-19 | 2007-04-26 | Scott Josephson | Improved reproductive management |
CN100998524A (zh) | 2007-01-19 | 2007-07-18 | 北京锦绣大地农业股份有限公司 | 牛性控胚胎生产方法 |
CL2008002118A1 (es) | 2007-07-19 | 2008-12-19 | Xy Llc | Metodo para la produccion de un embrion equino de sexo seleccionado mediante la inyeccion intracitoplasmatica de esperma utilizando espermatozoides de equino seleccionados por sexo. |
-
2003
- 2003-08-01 BR BRPI0313163A patent/BRPI0313163B1/pt active IP Right Grant
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