JP2007523828A - グルカゴン類似ペプチド−1受容体アゴニスト及びその製造方法と用途 - Google Patents
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Abstract
薬理試験により、当該アゴニストがグルカゴン類似ペプチドー1受容体との良好な結合能力を有することが明らかになった。
Description
細胞の異常反応を起し、インシュリンを破壊し始め、さらに完全機能を失うまで破壊する。約5%の糖尿病がI型に属する。現在、I型糖尿病を治療する薬物は主に外源性インシュ
リン(人インシュリンと動物インシュリンを含む)であり、インシュリン類似作用の薬物、インシュリン類似成長因子−1(TGF−1)、新しい長期有効インシュリン製剤、金が
糖降錠剤などがある。
助用薬などがある。
受容体アンタゴニスト、脂肪酸代謝インターフェランス薬、α−グルコシダーゼ抑制薬(
例えばacarbose、voglibose 、 mlglitolなど)、アルドーズ還元酵素等がある。
とグルコース依存のインシュリノトロピクペプチド−1(Glucose-dependant Insulinotropic Peptide,GIP)を釈放し、且つ、これによってインシュリンの生成、胃腸の蠕動、膵島細胞増殖などに作用し、代謝を調節する。その中、GLP-1はランゲルハンス細胞で分泌
され、膵島β細胞GLP-1受容体との高度特異的な結合によりアデニレートシクラーゼを活
性化した後、cAMPを合成し、更にプロテインキナーゼを活性化する。代謝シグナル(糖代謝)とキナーゼシグナル(GLP-1結合)が細胞膜面で協同作用し、最終にCa2+チャンネル
の開放を導いて、Ca2+は内部へ流動し、さらにインシュリンの生成を刺激すると同時にグルカゴンの生成を抑制でき、食事後の血糖を低下させ一定の水平を維持する。また、GLP-1は神経調整機能を備え、胃が空になるのを遅延し、食欲を減少する。これらは糖尿病の
制御に対し、非常に有利である。通常、GLP-1のインシュリン分泌に与える刺激は血糖濃
度に依存されるものであり、血糖濃度の低下によって、GLP-1のインシュリン分泌に対す
る促進作用は低下する。従って、GLP-1の降血糖作用は制限性があり、低血糖現象が発生
しないため、糖尿病の治療立場から見れば、GLP-1に類似する薬物は非常に理想的な糖尿
病治療薬物である。GLP-1Rアゴニストを探すことは既に国際新薬開発機構の注目を集めている。目下、GLP-1Rに対する研究はポリペプチド調整剤に集中し、例えば、Amylin会社のAC2993は既にアメリカで臨床試験(IND)を申請した。これは39−アミノ酸ポリペプチド
であり、GLP-1のインシュリン分泌を促進する作用を備えている。ポリペプチド薬物は内
服が不便、分解しやすいので、非ペプチド類GLP-1R調整剤を探索することは現在の研究の新しい方向である。
を含む置換基によって置換されたアルキルアシルオキシ基またはアルキルアシルアミノ基、酸素又はアミノ基によって置換されたC2−C6アルキレン基、フェニル基、ベンジル基、C2−C6アルキレンアシル基、C3−C6シクロアルキルアシル基、ベンゾイル基、アルキルオキシ基又はアルキルアミノ基を含む一つ、二つ又は三つ置換基によって置換されたベンゾイル基、ベンジルアシル基、テノイル(thenoyl)基、tert-ブチルオキシカルボニル基(Boc)、アダマンタンホルミル基(
XはO、S或いはNHを表す。
YはO、Sを表す。
シ基または水酸基を含む置換基によって置換されたアルキル基;C2−C6アルキレン基;C3−C6シクロアルキル基;フェニル基;ベンジル基;アルキルアシル基;ハロゲン原子、アルコキシ基または水酸基を含む置換基によって置換されたアルキルアシル基;C2−C6アルキレンアシル基;C3−C6シクロアルキルアシル基;ベンゾイル基;tert-ブチルオキシカ
ルボニル基;アルコキシ基又はアルキルアミノ基を含有する一つ、二つ又は三つ基団によって置換されたベンゾイル基;ベンジルアシル基;テノイル基;アダマンタンホルミル基;マンデルアシル基;X1はO或いはNHを表す。)である場合、
Ar2は
シ基または水酸基を含む置換基によって置換されたアルキル基;C2−C6アルキレン基;C3−C6シクロアルキル基;フェニル基;ベンジル基;アルキルアシル基;ハロゲン原子、アルコキシ基または水酸基を含む置換基によって置換されたアルキルアシル基;C2−C6アルキレンアシル基;C3−C6シクロアルキルアシル基;ベンゾイル基;tert-ブチルオキシカ
ルボニル基;アルコキシ基又はアルキルアミノ基を含有する一つ、二つ又は三つ基団によって置換されたベンゾイル基;ベンジルアシル基;テノイル基;アダマンタンホルミル基;マンデルアシル基;X2はO或いはNHを表す。)である。
アルコキシ基または水酸基を含む置換基によって置換されたアルキル基;C2−C6アルキレン基;C3−C6シクロアルキル基;フェニル基;ベンジル基;アルキルアシル基;ハロゲン原子、アルコキシ基または水酸基を含む基団によって置換されたアルキルアシル基;C2−C6アルキレンアシル基;C3−C6シクロアルキルアシル基;ベンゾイル基;tert-ブチルオ
キシカルボニル基;アルコキシ基又はアルキルアミノ基を含有する一つ、二つ又は三つ基団によって置換されたベンゾイル基;ベンジルアシル基;テノイル基;アダマンタンホルミル基;マンデルアシル基;X1はO或いはNHを表し、X2はO或いはNHを表す。)である。
アルコキシ基または水酸基を含む基団によって置換されたアルキル基;C2−C6アルキレン基;C3−C6シクロアルキル基;フェニル基;ベンジル基;アルキルアシル基;ハロゲン原子、アルコキシ基または水酸基を含む基団によって置換されたアルキルアシル基;C2−C6アルキレンアシル基;C3−C6シクロアルキルアシル基;ベンゾイル基;tert-ブチルオキ
シカルボニル基;アルコキシ基又はアルキルアミノ基を含有する一つ、二つ又は三つ基団によって置換されたベンゾイル基;ベンジルアシル基;テノイル基;アダマンタンホルミ
ル基;マンデルアシル基;X1はO或いはNHを表し、X2はO或いはNHを表す。)である場合、
Ar2は
シ基または水酸基を含む基団によって置換されたアルキル基;C2−C6アルキレン基;C3−C6シクロアルキル基;フェニル基;ベンジル基;アルキルアシル基;ハロゲン原子、アルコキシ基または水酸基を含む基団によって置換されたアルキルアシル基;C2−C6アルキレンアシル基;C3−C6シクロアルキルアシル基;ベンゾイル基;tert-ブチルオキシカルボ
ニル基;アルコキシ基又はアルキルアミノ基を含有する一つ、二つ又は三つ基団によって置換されたベンゾイル基;ベンジルアシル基;テノイル基;アダマンタンホルミル基;マンデルアシル基;X2はO或いはNHを表す。)である。
アルコキシ基または水酸基を含む基団によって置換されたアルキル基;C2−C6アルキレン基;C3−C6シクロアルキル基;フェニル基;ベンジル基;アルキルアシル基;ハロゲン原子、アルコキシ基または水酸基を含む基団によって置換されたアルキルアシル基;C2−C6アルキレンアシル基;C3−C6シクロアルキルアシル基;ベンゾイル基;tert-ブチルオキ
シカルボニル基;アルコキシ基又はアルキルアミノ基を含有する一つ、二つ又は三つ基団によって置換されたベンゾイル基;ベンジルアシル基;テノイル基;アダマンタンホルミル基;マンデルアシル基;X1はO或いはNHを表し、X2はO或いはNHを表す。)である。
化学反応式
ロ基;カルボキシ基;アルデヒド基;オキシ又はアミノ基によって置換されたtert-ブチ
ルオキシカルボニル基;テノイル基;XはO、S或いはNH3を表す。YはO、Sを表す。)に根
拠する、
或いは化学反応式
子、アルコキシ基または水酸基を含む基団によって置換されたアルキル基;C2−C6アルキレン基;C3−C6シクロアルキル基;フェニル基;ベンジル基;アルキルアシル基;ハロゲン原子、アルコキシ基または水酸基を含む基団によって置換されたアルキルアシル基;C2−C6アルキレンアシル基;C3−C6シクロアルキルアシル基;ベンゾイル基;tert-ブチル
オキシカルボニル基;アルコキシ基又はアルキルアミノ基を含有する一つ、二つ又は三つ基団によって置換されたベンゾイル基;ベンジルアシル基;テノイル基;アダマンタンホルミル基;マンデルアシル基;XはO或いはNHを表し、YはO又はSを表す。X1、X2、X3は各
々O或いはNHを表し、X4はCl又はOHを表す。)を根拠にした。
は以下の溶媒で行われた。即ち、ジクロロメタン、無水酢酸、テトラヒドロフラン、ジメチルフラン、エチレンジクロライド、トルエン、ベンゼン、水、ジオキサン又は上記溶媒の混合溶媒である。ある場合、ピリジン、N−メチルモルヒリン、塩素蟻酸イソブチルエ
ステル、トリエチルジアミン、ジエチルプロピルエチルアミン又はDMAP等の活性化剤を添加したほうが望ましい。化合物の反応状況に基づき、反応温度は、通常、−78℃〜室温(例えばWng462など)、或いは50℃〜230℃(例えばWng520など)まで加熱する。反応時間
は具体的な反応物によって決まる。通常、TLC分析により反応進行状況を判断し、反応終
了後、吸引ろ過、反応液の濃縮による溶媒除去、抽出、カラムクロマトグラフィなどの後処理方法が利用される。最終生成物IIIはNMRで測定し確認した。
参照。
られない。
合成例1−3における化合物の製造方法は主に以下の三つの反応方法からなる。
で加熱し、溶融状態を1時間保持した後、エタノールを添加し冷却した結果、生成物の結
晶が析出された。吸引ろ過して残った液体を濃縮させ、溶媒を除去して、カラムクロマトグラフィによって分離した。
酸を添加し、室温まで徐々に昇温させた後、TLCで反応追跡し、化合物Iが完全に反応した後、トリフルオロ酢酸を完全に除去した。更に残余物をジクロロメタンに溶解させ、−20℃の氷塩浴にて冷却して、ピリジン、アシルクロライドを順次に添加し、室温まで徐々に昇温させた後、TLCで反応追跡した。反応物を濃縮させてからカラムクロマトグラフィに
よって分離させ、生成物を得た。
酸を添加し、室温までに徐々に昇温した後、TLCで反応を追跡し、化合物Iが完全に反応した後、トリフルオロ酢酸を完全に除去した。さらに、化合物IIをテトラヒドロフラン(THF)に溶解させ、−20℃の氷塩浴にて冷却した後、N−メチルモルヒリン(NMM)、塩素蟻
酸イソブチルエステル(ClCOOiBU)を順番に加えた。化合物Iとトリフルオロ酢酸の反応
生成物をテトラヒドロフラン(THF)に溶解させ、シリンジで上記混合物に添加し、室温
に反応させた。TLCで反応を追跡し、反応終了後、反応液を濃縮させ、カラムクロマトグ
ラフィによって分離させ、生成物を得た。
化合物wang520から、反応方法2によって製造され、化合物wang516−1、wang591は化合物wang520から、反応方法3によって製造された。
ラフィで行い、用いたシリカゲル(200−300篩目)は青島海洋化学工場支場製の粗空(ZLX-II)型である。
リウム(146 mg, 1.78 mmol)と無水酢酸2 mlを混合させ、170℃までに加熱し、溶融してから溶融状態で1時間保持した。その後、エタノール2 mlを添加し、室温までに冷却させた後、黄色固体が析出し、吸引ろ過した。残った液体を濃縮させ、溶媒除去して最初製品を得た。最初製品を石油エ−テル/酢酸エチル(5/1, 体積比)、カラムクロマトグラフィ
にて分離した結果、生成物wang520が556 mg得られた(収率60%)。
1H NMR(300 MHz, CDCI3) δ1.54(s, 9H), 3.95(s, 3H), 6.79(br, 1H), 7.16(s, 1H), 7.20(dd, J = 4.8 Hz, 3.9 Hz, 1H), 7.25(d, J = 9.9 Hz, 1H), 7.53(d, J =9.0 Hz, 2H),
7.63(dd, J = 8.4Hz, 2.1 Hz, 1H), 7.69(dd, J = 4.8 Hz, 1.2 Hz, 1H), 8.02(dd, J =3.9 Hz, 1.2 Hz, 1H), 8.06(d, J = 8.7 Hz, 2H), 8.17(d, J = 1.5Hz, 1H); 13C NMR(75 MHz, CDCI3) δ28.17, 55.79, 81.23, 115.28, 117.92, 119.11, 123.09, 125.74, 128.02, 129.29, 129.41, 132.18, 132.75, 133.29, 133.71, 134.99, 141.57, 143.46, 151.37, 152.08, 159.93, 163.13, 167.46。
リウム(146 mg, 1.78 mmol)と無水酢酸2 mlを混合させ、200℃までに加熱し、溶融して、溶融状態で1時間を保持した。その後、エタノール2 mlを添加し、室温に冷却した後、液体を濃縮させ、溶媒除去後、最初製品が得られ、最初製品は石油エーテル/酢酸エチル
(5/1, 体積比)、カラムクロマトグラフィにて分離した結果、生成物wang520−1を100 mg得た。油エーテル/酢酸エチル(1/1, 体積比)、カラムクロマトグラフィにて分離し
た結果、生成物wang462−1を158 mg得た。
1H NMR(300 MHz, CDCI3, wang520−1) δ1.50(s, 9H), 3.88(s, 3H), 7.27(s, 1H), 7.33-7.37(2H), 7.69(d, J = 8.7 Hz, 2H), 8.01(d, J = 8.7Hz, 2H), 8.07(d, J =3.9 Hz, 1H), 8.13(d, J = 4.8Hz, 1H), 8.22-8.26(2H), 9.93(s, 1H)。
1H NMR(300 MHz, CDCI3, wang462−1) δ2.22(s, 3H), 3.91(s, 3H), 7.07(d,J =8.7 Hz,
1H), 7.14(s, 1H), 7.21(m, 1H), 7.42(m, 1H), 7.66(d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.71(d, J = 4.8Hz, 1H), 7.99(d, J =8.7 Hz, 1H), 8.05(m, 1H), 8.10(d, J = 8.4Hz, 2H), 8.19(m, 1H)。
ウム(0.8g, 9.8 mmol)と無水酢酸2.8 mlを混合させ170℃まで加熱し、溶融してから溶
融状態で1時間を保持した。その後、エタノール5 mlを添加し、室温までに冷却させた後、黄色固体が析出し、吸引ろ過した結果生成物wang337を2.0g得た(収率62%)。
1H NMR(300 MHz, CDCI3) δ2.35(s, 3H), 3.97(s, 3H), 7.13(d, J = 8.4Hz, 1H), 7.20
(s, 1H), 7.50-7.56(2H), 7.59-7.65(2H), 8.12-8.15(3H)。
ム(82 mg, 1 mmol)と無水酢酸1 mlを混合させ、170℃までに加熱し、溶融してから溶融状態で1時間を保持した。その後、エタノール5 mlを添加し室温までに冷却させた後、黄色固体が析出し、吸引ろ過した。残った液体を濃縮させ、溶媒除去して最初製品を得た。最初製品を石油エーテル/酢酸エチル(6/1,体積比)、カラムクロマトグラフィにて分離
した結果、生成物wang405が265 mg得られた(収率58%)。
1H NMR(300 MHz, CDCI3) δ3.97(s, 3H), 7.20(dd, J = 4.8Hz, 3.9 Hz, 1H), 7.24(s, 1H), 7.26(d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.51-7.57(2H), 7.60-7.70(3H), 8.02(dd, J =3.6 Hz, 0.9 Hz, 1H), 8.14-8.19(3H)。
ム(82 mg, 1 mmol)と無水酢酸4 mlを混合させ加熱し、210℃〜230℃状態で1時間を保持した。その後、エタノール5 mlを添加し、室温までに冷却させた後、黄色固体が析出し、吸引ろ過した結果、生成物wang450が100 mg得られた(収率22%)。
1H NMR(300 MHz, CDCI3) δ3.97(s, 3H), 7.21(dd, J = 4.8Hz, 3.9 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.37(s, 1H), 7.70(d, J =5.1 Hz, 1H), 7.73(dd, J = 9.9Hz, 1.5 Hz, 1H), 8.02(d, J = 3.9Hz, 1H), 8.09(d, J =1.8 Hz, 1H), 8.33(d, J = 9.0 Hz, 2H), 8.40(d, J = 9.3Hz, 2H)。
跡し、化合物Iが完全に反応した後、反応液を濃縮させ、トリフルオロ酢酸を完全に除去
して、更に反応中間体をジクロロメタン2 mlに溶解させ、−20℃の氷塩浴にて冷却して、ピリジン40μL(0.6 mmol)を加え、室温までに徐々に昇温させた後、TLCで反応を追跡した。反応物を濃縮させ、溶媒を除去することにより、最初製品が得られ、最初製品を石油エーテル/酢酸エチル(2/1, 体積比)、カラムクロマトグラフィにて分離させた結果、
生成物wang420が38 mg得られた(収率90%)。
1H NMR(300 MHz, CDCI3) δ3.94(s, 3H), 7.20-7.24(m, 2H), 7.27(d, J = 1.8Hz, 1H), 7.66 (dd, J = 8.1 Hz, 1.5 Hz, 1H), 7.71(dd, J = 4.8 Hz, 0.9 Hz, 1H), 7.76(d, J =9.0 Hz, 2H), 8.03(dd, J = 3.6Hz, 0.9 Hz, 1H), 8.07(d, J = 1.5Hz, 1H), 8.14(d, J
=8.7 Hz, 2H), 8.20(br, 2H)。
追跡し、化合物Iが完全に反応した後、溶液を濃縮させ、トリフルオロ酢酸を完全に除去
して、更に反応中間体をジクロロメタン2 mlに溶解させ、−20℃の氷塩浴にて冷却してからピリジン40μL(0.6 mmol)、化合物II(27μL 0.39 mmol)を加え、室温までに徐々に昇温させた後、TLCで反応を追跡した。反応物を濃縮させ、溶媒を除去して最初製品を得
た。最初製品を石油エーテル/酢酸エチル(1.5/1,体積比)、カラムクロマトグラフィに
て分離させた結果、生成物wang462が26 mg得られた(収率56%)。
1H NMR(300 MHz, CDCI3) δ2.19(s, 3H), 3.88(s, 3H), 7.12(s, 1H), 7.20-7.24(m, 2H), 7.55(d, J = 1.5Hz, 1H), 7.60 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.71(dd, J = 4.8 Hz, 0.9 Hz,
1H), 7.77(br, 1H), 7.97(d, J =8.7 Hz, 2H), 8.03(dd, J = 3.9Hz, 0.9 Hz, 1H), 8.07(d, J = 1.5Hz, 1H); 13C NMR(75 MHz, CDCI3) δ24.66, 55.84, 155.64, 119.55, 120.54, 123.35, 126.15, 128.43, 129.59, 129.87, 132.37, 133.12, 133.52, 134.26, 135.41, 141.85, 143.13, 151.63, 160.63, 163.28, 167.60, 168.99。
冷却してからトリフルオロ酢酸1 mlを添加し、室温までに徐々に昇温させた後、TLCで反
応追跡し、化合物Iが完全に反応した後、溶液を濃縮させ、トリフルオロ酢酸を完全に除
去して、更に反応中間体をジクロロメタン2 mlに溶解させ、−20℃の氷塩浴にて冷却してからピリジン40μL(0.6 mmol)、化合物II(23μL ,0.2 mmol)を添加し、室温までに徐々に昇温させた後、TLCで反応を追跡した。反応液を濃縮させ、溶媒を除去して最初製品
を得た。最初製品を石油エーテル/酢酸エチル(5/1,体積比)、カラムクロマトグラフィ
にて分離させた結果、生成物wang524が15 mg得られた(収率36%)。
1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ3.90(s, 3H), 7.22 (d, J = 5.4Hz, 1H), 7.33 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.39-7.44(1H), 7.50-7.58(2H), 7.83 (d, J = 8.4 Hz), 7.98 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 8.04-8.22(7H), 10.74(s, 1H)。
冷却してからトリフルオロ酢酸1 mlを添加し、室温までに徐々に昇温させた後、TLCで反
応追跡し、化合物Iが完全に反応してから、溶液を濃縮させ、トリフルオロ酢酸を完全に
除去して、更に反応中間体をジクロロメタン2 mlに溶解させ、−20℃の氷塩浴にて冷却してからピリジン40μL(0.6 mmol)、化合物II(25μL 0.2 mmol)を加え、室温までに徐
々に昇温させて、TLCで反応を追跡した。反応液を濃縮させ、溶媒を除去して最初製品を
得た。最初製品を石油エーテル/酢酸エチル(4/1,体積比)カラムクロマトグラフィにて
分離させた結果、生成物wang516が25 mg得られた(収率62.5%)。
1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ1.57(m, 2H), 1.63-1.77(m, 4H), 1.80-1.89(m, 2H), 2.84(m, 1H), 3.89(s, 3H), 7.31(m, 2H), 7.40(d, J = 8.4Hz, 1H), 7.86 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.94 (dd, J = 8.4 Hz, 1.8 Hz, 1H), 8.03 (dd, J = 3.9 Hz, 1.2 Hz, 1H), 8.07(d, J = 9.0 Hz, 2H), 8.10 (dd, J = 4.8 Hz, 1.2 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 1.8 Hz, 1H),
10.35(s, 1H); 13C NMR(75 MHz, DMSO-d6) δ25.62, 30.00, 55.97, 115.74, 118.71, 1
19.04, 123.52, 125.27, 128.51, 128.77, 129.24, 131.19, 132.78, 133.34, 135.43, 135.50, 140.86,144.42,151.04,159.24, 162.91, 166.93, 175.11。
冷却してからトリフルオロ酢酸1 mlを添加し、室温まで徐々に昇温させ、TLCで反応追跡
し、化合物Iが完全に反応した後、溶液を濃縮させ、トリフルオロ酢酸を完全に除去して
、更に反応中間体をジクロロメタン2 mlに溶解させ、−20℃の氷塩浴にて冷却してからピリジン40μL(0.6 mmol)、化合物II(23μL 0.2 mmol)を加え、室温まで徐々に昇温さ
せ、TLCで反応を追跡した。反応液を濃縮させ、溶媒を除去してから最初製品をえた。最
初製品を石油エーテル/酢酸エチル(4/1, 体積比)、カラムクロマトグラフィにて分離
させ結果、生成物wang488が25 mg得られた(収率64%)。
1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ0.80(m, 2H), 0.85(m, 2H), 1.84(m, 1H), 3.88(s, 3H), 7.28(s, 1H), 7.32(dd, J = 5.1Hz, 3.9Hz, 1H), 7.39 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.85 (d, J
= 8.7Hz, 2H), 7.92 (dd, J = 8.4Hz, 1.5 Hz, 1H), 8.04(m, 1H), 8.05(d, J = 8.7 Hz, 2H), 8.11 (dd, J = 4.8 Hz, 1.2 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 10.68(s, 1H); 13C NMR(75 MHz, DMSO-d6) δ7.78, 14.83, 55.97, 115.71, 118.73, 118.93, 123.53,
125.32, 128.54, 128.81, 129.32, 131.22,132.80, 133.36, 135.46, 135.53, 140.88, 144.24, 151.05, 159.29, 162.91, 166.96, 172.44。
冷却してからトリフルオロ酢酸1 mlを添加し、室温までに徐々に昇温させ、TLCで反応追
跡し、化合物Iが完全に反応した後、溶液を濃縮させ、トリフルオロ酢酸を完全に除去し
て、更に反応中間体をジクロロメタン2 mlに溶解させ、−20℃の氷塩浴にて冷却してからピリジン40μL(0.6 mmol)、化合物II(23μL 0.2 mmol)を加え、室温までに徐々に昇
温させて、TLCで反応を追跡した。反応物を濃縮させ、溶媒を除去して最初製品を得た。
最初製品を石油エーテル/酢酸エチル(4/1,体積比)、カラムクロマトグラフィにて分離
させた結果、生成物wang568が26 mg得られた(収率57%)。
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ3.95(s, 2H), 4.13(s, 2H), 4.68(s, 2H), 7.18(s, 1H), 7.19−7.26(m, 2H), 7.39−7.50(m, 5H), 7.63(dd, J = 6.9Hz, 0.9Hz, 1H), 7.69(d, J = 4.8 Hz, 0.9 Hz, 1H), 7.74(d, J = 9.0Hz, 2H), 8.01 (dd, J = 3.6Hz, 1.2 Hz, 1H), 8.10 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 8.16 (d, J = 1.5Hz, 1H), 8.56(s, 1H)。
冷却してからトリフルオロ酢酸1 mlを添加し、室温までに徐々に昇温させ、TLCで反応追
跡し、化合物Iが完全に反応した後、溶液を濃縮させ、トリフルオロ酢酸を完全に除去し
て、更に反応中間体をジクロロメタン2 mlに溶解させ、−20℃の氷塩浴にて冷却してからピリジン40μL(0.6 mmol)、化合物II(23μL 0.2 mmol)を添加し、室温までに徐々に
昇温させた後、TLCで反応を追跡した。反応物を濃縮させ、溶媒を除去して最初製品を得
た。最初製品を石油エーテル/酢酸エチル(4/1,体積比)、カラムクロマトグラフィにて
分離させた結果た結果、生成物wang502が22 mg得られた(収率56%)。
1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ1.81−1.94(m, 2H), 2.12−2.28(m, 4H), 3.29(m, 1H), 3.89(s, 3H), 7.31(s, 1H), 7.33(m, 1H), 7.40(d, J = 7.5Hz, 1H), 7.87(d, J =8.1 Hz, 2H), 7.94(d, J = 8.1Hz, 2H), 8.04-8.08 (2H), 8.12 (d, J = 5.1Hz, 1H), 8.19(s, 1H) , 10.20(s, 1H)。
冷却してからトリフルオロ酢酸1 mlを添加し、室温までに徐々に昇温させ、TLCで反応追
跡し、化合物Iが完全に反応した後、溶液を濃縮させ、トリフルオロ酢酸を完全に除去し
て、更に反応中間体をジクロロメタン2 mlに溶解させ、−20℃の氷塩浴にて冷却してからピリジン40μL(0.6 mmol)、化合物II(23μL 0.2 mmol)を加え、室温までに徐々に昇
温させた後、TLCで反応を追跡した。反応液を濃縮させ、溶媒を除去して最初製品を得た
。最初製品を石油エーテル/酢酸エチル(4/1,体積比)、カラムクロマトグラフィにて分
離させた結果、生成物wang530が24 mg得られた(収率57%)。
1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ1.20−1.48(6H), 1.65−1.81(4H), 2.39(m, 1H), 3.89(s, 3H), 7.32(s, 1H), 7.34(m, 1H), 7.41(d, J = 8.4Hz, 1H), 7.87(d, J =8.1 Hz, 2H), 7.95(d, J = 8.1Hz, 1H), 8.04 (m, 1H), 8.08 (d, J = 8.7Hz, 2H), 8.12(d, J =4.8Hz, 1H), 8.20(m, 1H) , 10.31(s, 1H)。
冷却してからトリフルオロ酢酸1 mlを添加し、室温までに徐々に昇温させ、TLCで反応追
跡し、化合物Iが完全に反応した後、溶液を濃縮させ、トリフルオロ酢酸を完全に除去し
て、更に反応中間体をジクロロメタン2 mlに溶解させ、−20℃の氷塩浴にて冷却してからピリジン40μL(0.6 mmol)、化合物II(23μL 0.2 mmol)を添加し、室温までに徐々に
昇温させた後、TLCで反応を追跡した。反応物を濃縮させ、溶媒を除去して最初製品を得
た。最初製品を石油エーテル/酢酸エチル(6/1, 体積比)、カラムクロマトグラフィに
て分離させた結果、生成物wang504が4 mg得られた(収率10%)。
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ1.34(s, 9H), 3.94(s, 3H), 7.15(s, 1H), 7.20(dd,J = 4.8Hz, 3.6Hz, 1H), 7.23(s, 1H), 7.58(br, 1H), 7.64−7.69(2H), 7.72(d, J = 8.7Hz, 2H), 8.02(dd, J = 3.6Hz, 1.5Hz, 1H), 8.08 (d, J = 9.0Hz, 2H), 8.11(d, J =1.8Hz, 1H)。
冷却してからトリフルオロ酢酸1 mlを添加し、室温までに徐々に昇温させ、TLCで反応追
跡し、化合物Iが完全に反応した後、溶液を濃縮させ、トリフルオロ酢酸を完全に除去し
て、更に反応中間体をジクロロメタン2 mlに溶解させ、−20℃の氷塩浴にて冷却してか
らピリジン40μL(0.6 mmol)、化合物II(27μL 0.2 mmol)を加え、室温までに徐々に
昇温させた後、TLCで反応を追跡した。反応物を濃縮させ、溶媒を除去して最初製品を得
た。最初製品をCH2Cl2、カラムクロマトグラフィにて分離させた結果、生成物wang554が4
0 mg得られた(収率89%)。
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ3.83(s, 3H), 6.28(s, 1H), 7.05(s, 1H), 7.16(d,J = 8.1Hz, 1H), 7.20(dd, J = 5.1Hz, 3.6Hz, 1H), 7.39−7.41(2H), 7.50−7.55(3H), 7.60(d, J
= 9.0Hz, 2H), 7.71(dd, J = 5.1Hz, 1.2Hz, 1H), 7.92 (d, J = 8.4Hz, 2H), 7.99(d, J =1.2Hz), 8.03(dd, J = 3.6Hz, 0.9Hz, 2H), 8.24(s, 1H), 8.42(s, 1H)。
し、化合物Iが完全に反応した後、溶液を濃縮させ、トリフルオロ酢酸を完全に除去して
、更に反応中間体をジクロロメタン2 mlに溶解させ、−20℃の氷塩浴にて冷却してからピリジン40μL(0.6 mmol)、化合物II(10 mg, 0.2 mmol)を加え、室温までに徐々に昇温させた後、TLCで反応を追跡した。反応液を濃縮させ、溶媒を除去して最初製品を得た。
最初製品をCH2Cl2、カラムクロマトグラフィにて分離させた結果、生成物wang866が19 mg得られた(収率44%)。
1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ3.89(s, 6H), 7.33(dd, J = 4.8Hz, 3.9Hz, 2H), 7.36(s, 2H), 7.41 (d, J = 8.4Hz, 2H), 7.93−7.96(2H), 7.96(d, J = 8.7Hz, 4H), 8.04(dd, J
= 3.3Hz, 0.9Hz, 2H), 8.12(dd, J = 4.8Hz, 0.9Hz, 2H), 8.17(d, J = 8.7Hz, 4H), 8.20(d, J = 1.8Hz, 2H), 11.66(s, 2H)。
合成した。
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ1.41(t, J = 6.9Hz, 3H), 2.24(s, 3H), 4.18(q, J =6.9Hz, 2H), 7.11(s, 1H), 7.19(m, 1H), 7.45(m, 2H), 7.62−7.70(4H), 8.02(m, 1H), 8.08(d,
J = 9.0Hz, 2H) (収率56%)。
量)のアダマタンホルミルクロライドからwang582を製造した。
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ1.76(6H), 1.99(6H), 2.12(3H), 3.95(s, 3H), 7.14−7.23(2H), 7.54(s, 1H),7.61−7.70(2H), 7.73(d, J =9.0Hz, 2H), 8.02(dd, J = 3.9Hz, 1H) ,
8.09(d, J = 9.0Hz, 2H) , 8.12(d, J = 1.8Hz, 1H),(収率38%)。
当量)のベンジルアセチルクロライドII からwang538を製造した。
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ3.78(s, 2H), 3.92(s, 3H), 7.16(s, 1H), 7.19−7.24(2H), 7.34−7.74(6H), 7.59(d, J =8.7Hz, 2H), 7.62(m, 1H), 7.70(d, J = 4.8Hz, 1H) , 8.02(d, J = 8.7Hz, 2H) ,8.13(m, 1H),(収率58%)。
量)の塩素アセチルクロライドからwang496を製造した。
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ3.89(s, 3H), 4.36(s, 2H), 7.34(s, 1H), 7.41(d,J =8.1Hz,
1H), 7.88(d, J = 9.0Hz, 2H) , 7.93−7.98(2H), 8.05(m, 1H), 8.12(d, J = 7.5Hz, 2H) , 8.22 (m, 1H), 8.89 (m, 1H), 10.95(s, 1H),(収率70%)。
し、化合物Iが完全に反応した後、溶液を濃縮させ、トリフルオロ酢酸を完全に除去した
。化合物II(19μL 0.16 mmol)をテトラヒドロフラン2 mlに溶解させ、−20℃の氷塩浴
にて冷却し, 同じ温度で10分間攪拌した後、N−メチルモルヒリン(NMM)(53μL 0.48 mmol)、塩素蟻酸イソブチルエステル(ClCOOiBU)(21μL 0.16 mmol)を加えた。続けて−20℃で半時間攪拌した。化合物Iとトリフルオロ酢酸の生成物をテトラヒドロフラン1mlに溶解させてしシリンジを用い、上記混合物に添加し室温でおよそ15時間反応させた。
反応物を濃縮させ、溶媒を除去して最初製品を得た。最初製品を石油エーテル/酢酸エチ
ル(5/1, 体積比)、カラムクロマトグラフィにて分離させた結果、生成物wang516-1が12 mg得られた(収率30%)。
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ1.74(s, 3H), 1.87(s, 3H), 3.18(d, J = 7.8Hz, 2H), 3.95(s, 3H), 5.42(m, 1H), 7.19(s, 1H), 7.20−7.27(2H), 7.63(2H), 7.65(d, J = 1.8Hz, 1H), 7.70(d, J = 8.4Hz, 2H), 8.02(dd, J = 3.6Hz, 0.9Hz, 1H), 8.09(d, J = 9.0Hz, 2H), 8.16(d, J = 2.1Hz, 1H)。
)のBoc-Ala-OHからwang591を製造した。
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ 1.45(d, J =6.9Hz, 3H), 1.48(s, 9H), 3.95(s, 3H), 4.35 (m, 1H), 4.98(d, J =7.8Hz, 1H), 7.15(s, 1H),7.20(dd, J = 4.8Hz, 3.9Hz, 1H) , 7.24(d, J = 8.4Hz, 1H) , 7.62(d, J = 1.8Hz, 1H), 7.67(d, J = 8.1Hz, 2H) , 7.70(d, J
= 1.5Hz, 1H), 8.02(dd, J = 3.9Hz, 1.2Hz, 1H) , 8.05(d, J = 8.7Hz, 2H), 8.12(d, J = 2.1Hz, 1H) ,9.04 (br, 1H),(収率18%)。
した後、0.2 ml(1M)BCI3/n-ヘキサン溶液を加え、また−78℃に10分間反応させ、−18℃にまで昇温させ、さらに4時間反応させた。エ−テル2 mlを加え反応を中止し、室温で30分攪拌してから5 ml水を添加した。水相と有機相を分離し、水相をジクロロメタンで抽出し、有機相と合一させ、無水 MgSO4で乾燥させて有機相を濃縮した。最初製品を石油エーテル/酢酸エチル(1/2,体積比)、カラムクロマトグラフィにて分離させた結果、生
成物wang477が得られた。(1.5 mg、収率17%)。
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ1.86 (br, 1H), 3.95(s, 3H), 4.26 (s, 2H), 7.18(s, 1H), 7.20(dd, J = 8.7Hz, 4.8Hz, 1H) , 7.23(d, J = 3.3Hz, 1H) , 7.63(d, J = 8.1Hz, 1H), 7.71(dd, J = 5.1Hz, 1.5Hz, 1H) , 7.75(d, J = 8.7Hz, 2H), 8.02(d, J = 3.6Hz, 1H) , 8.08(d, J = 8.7Hz, 2H), 8.14(m, 1H) , 8.57 (br, 1H)。
ルオロ酢酸0.15 mlを添加し、室温までに昇温させ、TLCで反応進行を追跡し、原料がなくなったことを確認した後、溶媒とリフルオロ酢酸を完全に乾燥させて、生成物wang605を2
mg 得た(収率65%)。
1H NMR(300 MHz, Methyl-d3 Alcohol- d) δ 1.63(d, J = 7.2Hz, 3H), 3.95(s, 3H), 4.09 (m, 1H), 7.265(s, 1H), 7.267(d, J = 8.7Hz, 1H) , 7.29(d, J = 8.1Hz, 1H) , 7.81(dd, J = 8.7Hz, 2.1Hz, 1H), 7.87(d, J = 9.0Hz, 2H) , 7.91(dd, J = 5.1Hz, 1.2Hz,
1H), 8.01(dd, J = 3.6Hz, 0.9Hz, 1H) , 8.16(d, J = 9.3Hz, 2H), 8.25(d, J = 2.1Hz, 1H),。
[実施例4] 生物活性測定試験
1. レポータージーン エクスプレッション検定
GLP―1RはGLP―1又はアゴニストと結合した後、そのGαサブ単位が活性化され、アデニルサイクラーゼに刺激を与える、かつ細胞内cAMPのレベルを上昇させる。前インシュリン遺伝子のプロモ−タゾ−ンにcAMP反応素子が存在しているので、cAMPは当該反応素子と結合した後、前インシュリン遺伝子の遺伝子転写をプロモートし、グルコースに対する膵島β細胞の敏感性を向上させ、インシュリンのエクスプレッションと分泌を促す(Diabetes,2000,Vol.49:1156-1164)。スクリーンモデルは安定ZS GLP−IR受容体遺伝子エクスプ
レッション担体と、cAMP反応素子で調整されたホタル・ルシフェラーゼレポータージーン
エクスプレッション担体の人胚腎細胞株を用い、測定された化合物に対する反応を検定する(Cell Biology, 1992, Vol.89: 8641-8645; Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1987,
Vol.84: 3434-3438)。化合物をスクリーニングする時、ホタル・ルシフェラーゼレポータージーン エクスプレッションを誘導できるものはGLP―1 アゴニスト活性を有すると評価する。
細胞株:GLP−IRとホタル・ルシフェラーゼが安定に表現できるHEK 293/GLPIR+Luc細胞株(国家新薬選別センター)
胎牛血清(GIBCO/BRL会社)
DMEM培基(GIBCO/BRL会社)
Steady-gloTM ホタル・ルシフェラーゼ分析システム(Promega会社)
GLP−1基準品(Sigma会社)
G418(Invitrogen会社)
Forma二酸化炭素培養容器(Form会社)
Victor 読み出し機(Wallac会社)
測定される化合物:wang524、wang520、wang462、2f、wang516、wang516-2、wang502、wang504。
HEK293/GLPIR+Luc細胞は20000個/100μl/穴 で96穴アッセイプレートに入れ、10%胚牛
血清と500μg/ ml G418nのDMEM培基、37℃で一晩培養した。測定されるwang516-2、wang502、wang504はそれぞれ2mM、1mM、0.3mM、0.01mM、0.003mMに希釈し、外の化合物は1:3
の比率から始め、8段階(30mM、10mM、3mM、1mM、0.3mM、0.1mM、0.03mM、0.01mM)に希
釈して、1μl/穴で上記96穴微量アッセイプレートに加入した。37℃、5%CO2の条件で6時間培養した。Steady-gloTM ホタル・ルシフェラーゼ分析システム試薬キットの説明によ
ってホタル・ルシフェラーゼ活性を検定し、Victor 2にて読み出した。陽性コントロールとしては30n MGLP-1基準品を用いた。
測定した化合物のレポーター遺伝子試験結果は図1と表1に示した:
図1から、最終濃度が30μMのwang520は一番よい相対活性(94%)を用い、2fの活性(21
%)は明らかに上昇したことを分かる。尚、表1に表示されたすべての化合物はGLP−1Rのアゴニスト活性に対し、試薬量の依存性を持ち、その中にwang520、wang516、wang516、wang554、wang488、wang516−2、wang502及びwang504の半数が有効な試薬量(EC50)が共
に10μMより低い。この結果は化合物とGLP−IR相互作用の有利な構造を確定するための方向を明らかにした。
上記測定はレポーター遺伝子のエクスプレッション状況によって間接に細胞内のcAMPレベルを判断するので、間接的な検定方法である。活性物質は確実に細胞内のcAMP濃度を向上できることを確認するため、直接cAMP検定試薬キットで何回も測定してから確定した。
cAMP検定試薬キット(Applied Biosystems 会社)
Forma 二酸化炭素培養箱(Forma 会社)
Victor 2読み出し機 (Wallc 会社)
GLP−IRと、ホタル・ルシフェラーゼが安定に表現できるHEK293細胞株(国家新薬選
別センター)
検定化合物:2f
cAMP 基準品(試薬キット備え)(Applied Biosystems 会社)
2.2 試験方法
HEK293細胞を20000個/100ul/孔で96穴アッセイプレートに植え、37℃で一晩培養した。ジメチルスルホキシドで2fを1.00E−03M、1.00E−04M、1.00E−05M、1.00E−06M、1.00E
−07Mまで希釈させ、1ul/孔で上記96穴アッセイプレートに添加した。5%二酸化炭素の条件で1時間培養した。cAMP-screen direct TM system試薬キットの説明に基づいて細胞内cAMPの濃度レベルを測定した。
細胞内cAMP濃度の測定結果は図2に示した。図2から2f濃度の増加に従い、刺激されたcAMP濃度が指数で上昇した。これは本化合物がGLP-IRアゴニストとしてGLP-IRシグナル伝達作用に対して一定の作用を持っていることを示唆した。2f濃度を30μMと100μMまでに高
めた場合、cAMP濃度が低下の傾向を示した。これは高濃度2f細胞の毒作用の結果である。
活性物質が受容体に対する結合能力を確定するために、大量のGLP−1Rエクスプレッシ
ョン細胞を製造し、125IマーキングGLP−1を配位基とすると同時に測定化合物を添加した。測定化合物は125IマーキングGLP−1と競争して結合を行う場合、細胞膜におけるアイソトープ標記が減少される。これによって化合物が受容体に対する親合力(J Mol Bndocrinol.2000 VoI.25;321-35)を評価できる。
HEK293/GLPIR+Luc 細胞株(国家新薬選別センター)
標記化合物:125IマキングGLP−1(Amersham Biosciences会社)
Wallac mlcro Bata (perkin EIner会社)
Tom tech細胞収集器(Tom Tec会社)
測定緩衝液:
20mM tris-HCl(pH7.4)(上海生工生物工程技術服務有限公司)、100 mM NaCl(上海化
学試剤公司)、2mM ジオキシピリドキシン(deoxypyridoxine)(Sigma公司)、0.2mM フ
ェニルメチルサルフォニルフロライド(phenylmethylsulfonylfluoride)(Sigma公司)、
アプロチニン(上海生工生物工程技術服務有限公司)(1μg/ ml)、ルペプチン(leupeptin)(上海生工生物工程技術服務有限公司)(1μg/ ml)。
20mM tris-HCl(pH7.4)、100 mM NaCl、15mM NaF
シンチレーション液:(Wallac公司)
測定化合物はジメチルスルホキシドで希釈され、濃度グレードが0.1 mM、1 mM、1 0mM
、100 mM、1000 mM、10000 mM、100000mMである。
105 ロガリズム成長期のHEK293/GLPIR+Luc細胞を取り、25℃で、200μl の測定緩衝液において、125I標GLP−I陽性ペプチド(最終濃度40pM)と共に、4時間インキュベーター
すると同時に、非標記陽性ペプチド又は選別薬物を加える。細胞収集器を使用し、洗浄液で細胞を三回洗浄する。シンチレーション液を添加し、 mlcrobataカウンターにて穴毎の示度を読み出す。
受容体結合試験結果は表3に示した。表3に示された結果から2fがGLP―1Rに対し比較的
な良い親和活性を備え、wang520、wang516の作用は少し弱い、ほかの化合物は測定濃度範囲に基本的に結合してないことを分かる。
Claims (9)
- 一般式
XはO、S或いはNHを表す、
YはO、Sを表す。)で表されることを特徴とするグルカゴン類似ペプチド−1受容体アゴニスト。 - Ar1は
シ基または水酸基を含む置換基によって置換されたアルキル基;C2−C6アルキレン基;C3−C6シクロアルキル基;フェニル基;ベンジル基;アルキルアシル基;ハロゲン原子、アルコキシ基または水酸基を含む置換基によって置換されたアルキルアシル基;C2−C6アルキレンアシル基;C3−C6シクロアルキルアシル基;ベンゾイル基;アルコキシ基又はアルキルアミノ基を含有する一つ、二つ又は三つ基団によって置換されたベンゾイル基;tert-ブチルオキシカルボニル基;ベンジルアシル基;テノイル基;アダマンタンホルミル基
;マンデルアシル基;X1はO或いはNHを表す。)である場合、
Ar2は
シ基または水酸基を含む置換基によって置換されたアルキル基;C2−C6アルキレン基;C3−C6シクロアルキル基;フェニル基;ベンジル基;アルキルアシル基;ハロゲン原子、アルコキシ基または水酸基を含む置換基によって置換されたアルキルアシル基;C2−C6アルキレンアシル基;C3−C6シクロアルキルアシル基;ベンゾイル基;アルコキシ基又はアルキルアミノ基を含有する一つ、二つ又は三つ基団によって置換されたベンゾイル基;tert-ブチルオキシカルボニル基;ベンジルアシル基;テノイル基;アダマンタンホルミル基
;マンデルアシル基;X2はO或いはNHを表す。)である、
或いはAr2は
アルコキシ基または水酸基を含む置換基によって置換されたアルキル基;C2−C6アルキレン基;C3−C6シクロアルキル基;フェニル基;ベンジル基;アルキルアシル基;ハロゲン原子、アルコキシ基または水酸基を含む基団によって置換されたアルキルアシル基;C2−C6アルキレンアシル基;C3−C6シクロアルキルアシル基;ベンゾイル基;アルコキシ基又はアルキルアミノ基を含有する一つ、二つ又は三つ基団によって置換されたベンゾイル基;tert-ブチルオキシカルボニル基;ベンジルアシル基;テノイル基;アダマンタンホル
ミル基;マンデルアシル基;X1はO或いはNHを表し、X2はO或いはNHを表す。)であることを特徴とする請求項1記載のグルカゴン類似ペプチド−1受容体アゴニスト。 - Ar1は
アルコキシ基または水酸基を含む基団によって置換されたアルキル基;C2−C6アルキレン基;C3−C6シクロアルキル基;フェニル基;ベンジル基;アルキルアシル基;ハロゲン原子、アルコキシ基または水酸基を含む基団によって置換されたアルキルアシル基;C2−C6アルキレンアシル基;C3−C6シクロアルキルアシル基;ベンゾイル基;アルコキシ基又はアルキルアミノ基を含有する一つ、二つ又は三つ基団によって置換されたベンゾイル基;tert-ブチルオキシカルボニル基;ベンジルアシル基;テノイル基;アダマンタンホルミ
ル基;マンデルアシル基;X1はO或いはNHを表し、X2はO或いはNHを表す。)である場合、
Ar2は
コキシ基または水酸基を含む基団によって置換されたアルキル基;C2−C6アルキレン基;C3−C6シクロアルキル基;フェニル基;ベンジル基;アルキルアシル基;ハロゲン原子、アルコキシ基または水酸基を含む基団によって置換されたアルキルアシル基;C2−C6アルキレンアシル基;C3−C6シクロアルキルアシル基;ベンゾイル基;アルコキシ基又はアル
キルアミノ基を含有する一つ、二つ又は三つ基団によって置換されたベンゾイル基;tert-ブチルオキシカルボニル基;ベンジルアシル基;テノイル基;アダマンタンホルミル基
;マンデルアシル基;X2はO或いはNHを表す。)である、
或いはAr2は
アルコキシ基または水酸基を含む基団によって置換されたアルキル基;C2−C6アルキレン基;C3−C6シクロアルキル基;フェニル基;ベンジル基;アルキルアシル基;ハロゲン原子、アルコキシ基または水酸基を含む基団によって置換されたアルキルアシル基;C2−C6アルキレンアシル基;C3−C6シクロアルキルアシル基;ベンゾイル基;アルコキシ基又はアルキルアミノ基を含有する一つ、二つ又は三つ基団によって置換されたベンゾイル基;tert-ブチルオキシカルボニル基;ベンジルアシル基;テノイル基;アダマンタンホルミ
ル基;マンデルアシル基;X1はO或いはNHを表し、X2はO或いはNHを表す。)であることを特徴とする請求項1記載のグルカゴン類似ペプチド−1受容体アゴニスト。 - 化合物
ルコキシ基または水酸基を含む基団によって置換されたアルキル基;C2−C6アルキレン基;C3−C6シクロアルキル基;フェニル基;ベンジル基;アルキルアシル基;ハロゲン原子、アルコキシ基または水酸基を含む基団によって置換されたアルキルアシル基;C2−C6アルキレンアシル基;C3−C6シクロアルキルアシル基;ベンゾイル基;tert-ブチルオキシ
カルボニル基;アルコキシ基又はアルキルアミノ基を含有する一つ、二つ又は三つ基団によって置換されたベンゾイル基;ベンジルアシル基;テノイル基;アダマンタンホルミル基;マンデルアシル基;XはO或いはNHを表し、YはO又はSを表す、X1、X2、X3は各々O或いはNHを表し、X4はCI又はOHを表す。)ことを特徴とする請求項1記載のグルカゴン類似ペプチド−1受容体アゴニストの製造方法。 - 縮合反応溶媒はジクロロメタン、無水酢酸、テトラヒドロフラン、ジメチルフラン、エチレンジクロライド、トルエン、ベンゼン、水、ジオキサン又は上記溶媒の混合溶媒であることを特徴とする請求項4または5記載のグルカゴン類似ペプチド−1受容体アゴニストの製造方法。
- 反応温度は−78℃〜室温或いは加熱温度は50℃〜230℃であることを特徴とする請求項
4または5記載のグルカゴン類似ペプチド−1受容体アゴニストの製造方法。 - 縮合反応するにはピリジン、トリエチルジアミン、ジエチルプロピルエチルアミン、DMAP、N−メチルモルヒリン、塩素蟻酸イソブチルエステル等活性化剤を使用することを特
徴とする請求項4または5記載のグルカゴン類似ペプチド−1受容体アゴニストの製造方
法。 - 請求項1記載のグルカゴン類似ペプチド−1受容体アゴニストを使用したことを特徴とするII型糖尿病、インシュリン不敏感、肥満症等の糖代謝紊乱に関連する病気の薬物。
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Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0350532A (ja) * | 1989-07-19 | 1991-03-05 | Ajinomoto Co Inc | 有機非線形光学材料 |
JPH11273865A (ja) * | 1998-03-23 | 1999-10-08 | Nec Corp | 有機エレクトロルミネッセンス素子材料およびそれを使用した有機エレクトロルミネッセンス素子 |
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US4912221A (en) * | 1988-10-27 | 1990-03-27 | Occidental Chemical Corporation | Chiral 1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline-3-carboxylic acid and precursors and preparation thereof |
JPH09244229A (ja) * | 1996-03-07 | 1997-09-19 | Toshiba Corp | 感光性組成物及びそれを用いたパターン形成方法 |
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Patent Citations (2)
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---|---|---|---|---|
JPH0350532A (ja) * | 1989-07-19 | 1991-03-05 | Ajinomoto Co Inc | 有機非線形光学材料 |
JPH11273865A (ja) * | 1998-03-23 | 1999-10-08 | Nec Corp | 有機エレクトロルミネッセンス素子材料およびそれを使用した有機エレクトロルミネッセンス素子 |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
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