JP2004313181A - 感染症起炎菌検出用プローブ及びプローブセット、ならびに担体及び遺伝子検査方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】感染症起炎菌遺伝子を検出するための感染症起炎菌検出用プローブセットは、特定のの塩基配列及びその相補配列を含む第1群と、特定の塩基配列及びその相補配列を含む第2群と、特定の塩基配列及びその相補配列を含む第3群と、特定の塩基配列及びその相補配列を含む第4群と、特定の塩基配列及びその相補配列を含む第5群と、特定の塩基配列及びその相補配列を含む第6群と、特定の塩基配列及びその相補配列を含む第7群と、特定の塩基配列及びその相補配列を含む第8群と、特定の塩基配列及びその相補配列を含む第9群と、特定の塩基配列及びその相補配列を含む第10群より選択された複数群の各々から選択された塩基配列を有するオリゴヌクレオチドで形成される複数種類のプローブを含む。
【選択図】なし
Description
感染症起炎菌遺伝子を検出するための感染症起炎菌検出用プローブセットであって、
SEQ ID No.1〜14の塩基配列及びその相補配列を含む第1群と、SEQ ID No.15〜24の塩基配列及びその相補配列を含む第2群と、SEQID No.25〜36の塩基配列及びその相補配列を含む第3群と、SEQ ID No.37〜47の塩基配列及びその相補配列を含む第4群と、SEQ IDNo.48〜57の塩基配列及びその相補配列を含む第5群と、SEQ ID No.58〜68の塩基配列及びその相補配列を含む第6群と、SEQ ID No.69〜77の塩基配列及びその相補配列を含む第7群と、SEQID No.78〜85の塩基配列及びその相補配列を含む第8群と、SEQ ID No.86〜97の塩基配列及びその相補配列を含む第9群と、SEQ IDNo.98〜106の塩基配列及びその相補配列を含む第10群より選択された複数群の各々から選択された塩基配列を有するオリゴヌクレオチドで形成される複数種類のプローブを含む。
また、本発明によれば、複数の菌種に共通に利用可能で、菌種が不明な状態でも効果的に起炎菌の16srRNAを増幅可能なプライマーセットが提供される。
更に、本発明によれば、複数種類の起炎菌の16srRNAを同一PCR条件で増幅可能であるようなプライマーセットが提供される。
[1.プローブDNAの準備]
上記10種の起炎菌の株検出用プローブとして表1〜10に示す核酸配列を設計した。具体的には、各菌の16s rRNAをコーディングしているゲノム部分より、以下に示したプローブ塩基配列を選んだ。これらのプローブ塩基配列群は、当該菌に対し非常に特異性が高く、それぞれのプローブ塩基配列でばらつきのない、十分なハイブリダイゼーション感度が期待できるように設計されている。なお、表1〜10に示す各プローブ塩基配列はこれに完全に一致したものに限定される必要はなく、各プローブ塩基配列を含む20から30程度の塩基長を有するプローブ塩基配列も各表に示す各プローブ塩基配列に含まれるものとする。また、上述のように各表に示した塩基配列の相補的な配列(相補鎖)を用いてもよい。
上記の起炎菌検出用の為の16s rRNA遺伝子(標的遺伝子)増幅用PCRPrimerとして以下の表11に示す核酸配列を設計した。具体的には、16s rRNAをコーディングしているゲノム部分を特異的に増幅するプローブセット、つまり約1400〜1700塩基長の16srRNAコーディング領域の両端部分で、特異的な融解温度をできるだけ揃えたプライマーを設計した。なお、変異株や、ゲノム上に複数存在する16s rRNAコーディング領域も同時に増幅できるように複数種類のプライマーを設計した。なお、起炎菌の16srRNAコーディング領域に対して共通にほぼ全長を増幅できるプライマーセットであれば、下記の表11に挙げたプライマセットに限定する必要はないのは言うまでもない。
[3-1]微生物の培養 & Genome DNA 抽出の前処理
まず、上記各起炎菌の標準株(黄色ブドウ球菌標準株(ATCC12600)、表皮ブドウ球菌標準株(ATCC14990)、大腸菌標準株(ATCC11775)、肺炎桿菌標準株(ATCC13883)、緑膿菌標準株(ATCC10145)、セラチア菌株、肺炎連鎖球菌標準株、インフルエンザ菌株、腸球菌標準株(ATCC13047)、エンテロコッカス フェカリス菌標準株(ATCC19433))を定法に従って培養し、微生物培養液を生成した。これらの微生物培養液のそれぞれを1.5ml容量のマイクロチューブに1.0ml(OD600=0.7)採取し、遠心分離で菌体を回収した(8500rpm、5min、4℃)。次に、上精を捨てた後、EnzymeBuffer(50mM Tris-HCl:p.H. 8.0、25mM EDTA)300μlを加え、ミキサーを用いて再縣濁した。再縣濁した菌液は、再度、遠心分離で菌体を回収した(8500rpm、5min、4℃)。上精を捨てた後、回収された菌体に、以下の酵素溶液を加え、ミキサーを用いて再縣濁した。
以下に示す微生物のGenome DNA抽出は、核酸精製キット(MagExtractor-Genome-:TOYOBO社製)を用いて行った。
次に、分離用スタンド(Magical Trapper)にマイクロチューブをセットし、30秒間静置して磁性粒子をチューブの壁面に集め、スタンドにセットした状態のまま、上精を捨てた(ステップ2)。
次に、洗浄液900μlを加え、ミキサーで5sec程度攪拌して再縣濁を行った(ステップ3)。
次に、分離用スタンド(Magical Trapper)にマイクロチューブをセットし、30秒間静置して磁性粒子をチューブの壁面に集め、スタンドにセットした状態のまま、上精を捨てた(ステップ4)。
次に、分離用スタンド(Magical Trapper)にマイクロチューブをセットし、30秒間静置して磁性粒子をチューブの壁面に集め、スタンドにセットした状態のまま、上精を捨てた(ステップ7)。
ステップ6、7を繰り返して70%エタノールによる2度目の洗浄(ステップ8)を行った後、回収された磁性粒子に純水100μlを加え、チューブミキサーで10分間攪拌を行った(ステップ9)。
次に分離用スタンド(Magical Trapper)にマイクロチューブをセットし、30sec静置して磁性粒子をチューブ壁面に集め、スタンドにセットした状態のまま、上精を新しいチューブに回収した。
回収された微生物(各起炎菌株)のGenome DNAは、定法に従って、アガロース電気泳動と260/280nmの吸光度測定を行い、その品質(低分子核酸の混入量、分解の程度)と回収量を検定した。本実施例では、それぞれの菌において、約9〜10μgのGenomeDNA が回収され、Genome DNAのデグラデーションやrRNAの混入は認められなかった。回収したGenome DNAは、最終濃度50ng/μlとなるようにTE緩衝液に溶解し、以下の実施例に使用した。
DNAマイクロアレイを、特開平11−187900号公報に開示された方法に従って用意した。
[4-1]ガラス基板の洗浄
合成石英のガラス基板(サイズ:25mm×75mm×1mm、飯山特殊ガラス社製)を耐熱、耐アルカリのラックに入れ、所定の濃度に調製した超音波洗浄用の洗浄液に浸した。一晩洗浄液中で浸した後、20分間超音波洗浄を行った。続いて基板を取り出し、軽く純水ですすいだ後、超純水中で20分超音波洗浄をおこなった。次に80℃に加熱した1N水酸化ナトリウム水溶液中に10分間基板を浸した。再び純水洗浄と超純水洗浄を行い、DNAマイクロアレイ用の石英ガラス基板を用意した。
シランカップリング剤KBM-603(信越シリコーン社製)を、1%の濃度となるように純水中に溶解させ、2時間室温で攪拌した。続いて、先に洗浄したガラス基板をシランカップリング剤水溶液に浸し、20分間室温で放置した。ガラス基板を引き上げ、軽く純水で表面を洗浄した後、窒素ガスを基板の両面に吹き付けて乾燥させた。次に乾燥した基板を120℃に加熱したオーブン中で1時間ベークし、カップリング剤処理を完結させ、基板表面にアミノ基を導入した。次いで同仁化学研究所社製のN−マレイミドカプロイロキシスクシイミド(N-(6-Maleimidocaproyloxy)succinimido)(以下EMCSと略す)を、ジメチルスルホキシドとエタノールの1:1混合溶媒中に最終濃度が0.3mg/mlとなるように溶解したEMCS溶液を用意した。
実施例1で作製した微生物検出用プローブを純水に溶解し、それぞれ、最終濃度(インク溶解時)10μMとなるように分注した後、凍結乾燥を行い、水分を除いた。
グリセリン7.5wt%、チオジグリコール7.5wt%、尿素7.5wt%、アセチレノールEH(川研ファインケミカル社製)1.0wt%を含む水溶液を用意した。続いて、先に用意した7種類のプローブ(表1)の夫々を上記の混合溶媒に規定濃度なるように溶解した。得られたDNA溶液をバブルジェット(登録商標)プリンタ(商品名:BJF-850 キヤノン社製)用インクタンクに充填し、印字ヘッドに装着した。
30分間の反応後、100mMのNaClを含む10mMのリン酸緩衝液(pH7.0)により表面に残ったDNA溶液を洗い流し、ガラス基板表面に一本鎖DNAが固定した遺伝子チップ(DNAマイクロアレイ)を得た。
検体となる微生物遺伝子の増幅、および、標識化反応を以下に示す。
上述の[4.DNAマイクロアレイの作製]で作製した遺伝子チップと[5.検体の増幅と標識化(PCR増幅&蛍光標識の取り込み)]で作製した標識化検体を用いて検出反応を行った。
BSA(牛血清アルブミンFraction V:Sigma社製)を1wt%となるように100mMNaCl/10mM Phosphate Bufferに溶解し、この溶液に[4.DNAマイクロアレイの作製]で作製した遺伝子チップを室温で2時間浸し、ブロッキングを行った。ブロッキング終了後、0.1wt%SDS(ドデシル硫酸ナトリウム)を含む2xSSC溶液(NaCl300mM 、Sodium Citrate (trisodium citrate dihydrate, C6H5Na3・2H2O)30mM、pH 7.0)で洗浄を行った後、純水でリンスしてからスピンドライ装置で水切りを行った。
水切りした遺伝子チップをハイブリダイゼーション装置(GenomicSolutions Inc. Hybridization Station)にセットし、以下に示すハイブリダイゼーション溶液、条件でハイブリダイゼーション反応を行った。
6xSSPE / 10% Form amide / Target(2nd PCR Products 全量)
(6xSSPE: NaCl 900mM、NaH2PO4・H2O60mM、EDTA 6mM、p.H. 7.4)。
65℃ 3min → 92℃ 2min → 45℃ 3hr → Wash 2xSSC/ 0.1% SDS at 25℃ → Wash 2xSSC at 20℃ → (Rinse with H2O : Manual) → Spin dry(65℃で3分、92度で2分、45℃で3時間ハイブリダイゼーション反応させた後、2xSSC/ 0.1% SDS、25℃で洗浄、2xSSC、20℃で洗浄後、純水でリンスしスピンドライした)。
上記ハイブリダイゼーション反応終了後の遺伝子チップを遺伝子チップ用蛍光検出装置(Axon社製、GenePix 4000B)を用いて蛍光測定を行った。その結果、以下の表12〜21に示すように、各菌において、再現性良く、十分なシグナルで各菌を検出することができた。また、他の菌のプローブに対するハイブリッド体は検出されなかった。
実施例1同様に、プローブDNA、検体増幅用PCRプライマー、各起炎菌のGenome DNA、DNAマイクロアレイを用意し、以下の実験を行った。
検体となる微生物遺伝子の増幅(1st PCR)、および、標識化(2ndPCR)反応を以下に示す。
実施例1と同様に行った。
ハイブリダイゼーション反応終了後のDNAマイクロアレイをDNAマイクロアレイ用蛍光検出装置(Axon社製、GenePix 4000B)を用いで蛍光測定を行った。測定結果を表22〜31に示す。
実施例1、2同様に、プローブDNA、検体増幅用PCRプライマー、各起炎菌のGenome DNA、DNAマイクロアレイを用意し、以下の実験を行った。
検体となる微生物遺伝子の増幅(1st PCR)、および、標識化(2nd PCR)反応を以下に示す。
実施例1と同様に行った。
ハイブリダイゼーション反応終了後のDNAマイクロアレイをDNAマイクロアレイ用蛍光検出装置(Axon社製、GenePix 4000B)を用いで蛍光測定を行った。測定結果を表32〜41に示す。
上記実施例において、黄色ブドウ球菌、表皮ブドウ球菌、大腸菌、肺炎桿菌、緑膿菌、セラチア菌、肺炎連鎖球菌、インフルエンザ菌、エンテロバクター・クロアカエ菌、及びエンテロコッカス・フェカリス菌のいずれか、或いは複数の16s rRNA遺伝子配列を増幅するのに用いられたプライマーセット(表11)を説明する。
起炎菌検出用の為の16s rRNA遺伝子(標的遺伝子)増幅用PCR Primerとして表11に示す核酸配列を設計した。
ヒトの血液200μl(採血EDTA血)に実施例1で説明し手順で培養した腸球菌を103、104、105加え、菌血症モデル系とした。この溶液のそれぞれにN-アセチルムラミダーゼ溶液(0.2mg/ml in Enzyme Buffer)を加え、37℃30分加温した後、Qiamp Blood mini Kit(キアゲン社製)を用いてDNAを抽出し、PCR反応用のテンプレートとした。
Claims (49)
- 感染症起炎菌遺伝子を検出するための感染症起炎菌検出用プローブセットであって、
SEQ ID No.1〜14の塩基配列及びその相補配列を含む第1群と、SEQ ID No.15〜24の塩基配列及びその相補配列を含む第2群と、SEQID No.25〜36の塩基配列及びその相補配列を含む第3群と、SEQ ID No.37〜47の塩基配列及びその相補配列を含む第4群と、SEQ IDNo.48〜57の塩基配列及びその相補配列を含む第5群と、SEQ ID No.58〜68の塩基配列及びその相補配列を含む第6群と、SEQ ID No.69〜77の塩基配列及びその相補配列を含む第7群と、SEQID No.78〜85の塩基配列及びその相補配列を含む第8群と、SEQ ID No.86〜97の塩基配列及びその相補配列を含む第9群と、SEQ IDNo.98〜106の塩基配列及びその相補配列を含む第10群より選択された複数群の各々から選択された塩基配列を有するオリゴヌクレオチドで形成される複数種類のプローブを含むことを特徴とする感染症起炎菌検出用プローブセット。 - 請求項1に記載の感染症起炎菌検出用プローブセットに含まれるプローブが化学的に固定されている担体。
- 請求項2に記載の担体を用いて感染症起炎菌遺伝子を検出する遺伝子検査方法。
- SEQ ID No.1〜14の塩基配列及びその相補配列のうちのいずれかを有するオリゴヌクレオチドから成ることを特徴とする黄色ブドウ球菌由来の遺伝子を検出可能な感染症検出用プローブ。
- SEQ ID No.1〜14の塩基配列及びその相補配列のうちのいずれかを有するオリゴヌクレオチドから成る感染症検出用プローブのうちの1種類以上の感染症検出用プローブを含むことを特徴とする黄色ブドウ球菌由来の遺伝子を検出可能なプローブセット。
- 請求項5に記載のプローブセットに含まれる感染症検出用プローブが化学的に固定されていることを特徴とする担体。
- 請求項6に記載の担体を用いて黄色ブドウ球菌由来の遺伝子を検出することを特徴とする遺伝子検査方法。
- SEQ ID No.15〜24の塩基配列及びその相補配列のうちのいずれかを有するオリゴヌクレオチドから成ることを特徴とする表皮ブドウ球菌由来の遺伝子を検出可能な感染症検出用プローブ。
- SEQ ID No.15〜24の塩基配列及びその相補配列のうちのいずれかを有するオリゴヌクレオチドから成る感染症検出用プローブのうちの1種類以上の感染症検出用プローブを含むことを特徴とする表皮ブドウ球菌由来の遺伝子を検出可能なプローブセット。
- 請求項9に記載のプローブセットに含まれる感染症検出用プローブが化学的に固定されていることを特徴とする担体。
- 請求項10に記載の担体を用いて表皮ブドウ球菌由来の遺伝子を検出することを特徴とする遺伝子検査方法。
- SEQ ID No.25〜36の塩基配列及びその相補配列のうちのいずれかを有するオリゴヌクレオチドから成る、大腸菌由来の遺伝子を検出可能な感染症検出用プローブ。
- SEQ ID No.25〜36の塩基配列及びその相補配列のうちのいずれかを有するオリゴヌクレオチドから成る感染症検出用プローブのうちの1種類以上の感染症検出用プローブを含む、大腸菌由来の遺伝子を検出可能なプローブセット。
- 請求項12に記載の感染症検出用プローブのうち、少なくとも1種類の感染症検出用プローブが化学的に固定されていることを特徴とする担体。
- 請求項13に記載の担体を用いて大腸菌由来の遺伝子を検出することを特徴とする遺伝子検査方法。
- SEQ ID No.37〜47の塩基配列及びその相補配列のうちのいずれかを有するオリゴヌクレオチドから成ることを特徴とする肺炎桿菌由来の遺伝子を検出可能な感染症検出用プローブ。
- SEQ ID No.37〜47の塩基配列及びその相補配列のうちのいずれかを有するオリゴヌクレオチドから成る感染症検出用プローブのうちの1種類以上の感染症検出用プローブを含むことを特徴とする肺炎桿菌由来の遺伝子を検出可能なプローブセット。
- 請求項17に記載の感染症検出用プローブのうち、少なくとも1種類の感染症検出用プローブが化学的に固定されていることを特徴とする担体。
- 請求項18に記載の担体を用いて肺炎桿菌由来の遺伝子を検出することを特徴とする遺伝子検査方法。
- SEQ ID No.48〜57の塩基配列及びその相補配列のうちのいずれかを有するオリゴヌクレオチドから成ることを特徴とする緑膿菌由来の遺伝子を検出可能な感染症検出用プローブ。
- SEQ ID No.48〜57の塩基配列及びその相補配列のうちのいずれかを有するオリゴヌクレオチドから成る感染症検出用プローブのうちの1種類以上の感染症検出用プローブを含むことを特徴とする緑膿菌由来の遺伝子を検出可能なプローブセット。
- 請求項21に記載のプローブセットに含まれる感染症検出用プローブが化学的に固定されていることを特徴とする担体。
- 請求項22に記載の担体を用いてセラチア球菌由来の遺伝子を検出することを特徴とする遺伝子検査方法。
- SEQ ID No.58〜68の塩基配列及びその相補配列のうちのいずれかを有するオリゴヌクレオチドから成ることを特徴とするセラチア菌由来の遺伝子を検出可能な感染症検出用プローブ。
- SEQ ID No.58〜68の塩基配列及びその相補配列のうちのいずれかを有するオリゴヌクレオチドから成る感染症検出用プローブのうちの1種類以上の感染症検出用プローブを含むことを特徴とするセラチア菌由来の遺伝子を検出可能なプローブセット。
- 請求項25に記載のプローブセットに含まれる感染症検出用プローブが化学的に固定されていることを特徴とする担体。
- 請求項26に記載の担体を用いてセラチア球菌由来の遺伝子を検出することを特徴とする遺伝子検査方法。
- SEQ ID No.69〜77の塩基配列及びその相補配列のうちのいずれかを有するオリゴヌクレオチドから成ることを特徴とする肺炎連鎖球菌由来の遺伝子を検出可能な感染症検出用プローブ。
- SEQ ID No.69〜77の塩基配列及びその相補配列のうちのいずれかを有するオリゴヌクレオチドから成る感染症検出用プローブのうちの1種類以上の感染症検出用プローブを含むことを特徴とする肺炎連鎖球菌由来の遺伝子を検出可能なプローブセット。
- 請求項29に記載の感染症検出用プローブのうち、少なくとも1種類の感染症検出用プローブが化学的に固定されていることを特徴とする担体。
- 請求項30に記載の担体を用いて肺炎連鎖球菌由来の遺伝子を検出することを特徴とする遺伝子検査方法。
- SEQ ID No.78〜85の塩基配列及びその相補配列のうちのいずれかを有するオリゴヌクレオチドから成ることを特徴とするインフルエンザ菌由来の遺伝子を検出可能な感染症検出用プローブ。
- SEQ ID No.78〜85の塩基配列及びその相補配列のうちのいずれかを有するオリゴヌクレオチドから成る感染症検出用プローブのうちの1種類以上の感染症検出用プローブを含むことを特徴とするインフルエンザ菌由来の遺伝子を検出可能なプローブセット。
- 請求項33に記載の感染症検出用プローブのうち、少なくとも1種類の感染症検出用プローブが化学的に固定されていることを特徴とする担体。
- 請求項34に記載の担体を用いてインフルエンザ菌由来の遺伝子を検出することを特徴とする遺伝子検査方法。
- SEQ ID No.86〜97の塩基配列及びその相補配列のうちのいずれかを有するオリゴヌクレオチドから成ることを特徴とするエンテロバクタークロアカエ菌由来の遺伝子を検出可能な感染症検出用プローブ。
- SEQ ID No.86〜97の塩基配列及びその相補配列のうちのいずれかを有するオリゴヌクレオチドから成る感染症検出用プローブのうちの1種類以上の感染症検出用プローブを含むことを特徴とするエンテロバクタークロアカエ菌由来の遺伝子を検出可能なプローブセット。
- 請求項37に記載の感染症検出用プローブのうち、少なくとも1種類の感染症検出用プローブが化学的に固定されていることを特徴とする担体。
- 請求項38に記載の担体を用いてエンテロバクター クロアカエ菌由来の遺伝子を検出することを特徴とする遺伝子検査方法。
- SEQ ID No.98〜106の塩基配列及びその相補配列のうちのいずれかを有するオリゴヌクレオチドから成ることを特徴とするエンテロコッカウフェカリス菌由来の遺伝子を検出可能な感染症検出用プローブ。
- SEQ ID No.98〜106の塩基配列及びその相補配列のうちのいずれかを有するオリゴヌクレオチドから成る感染症検出用プローブのうちの1種類以上の感染症検出用プローブを含むことを特徴とするエンテロコッカウフェカリス菌由来の遺伝子を検出可能なプローブセット。
- 請求項41に記載の感染症検出用プローブのうち、少なくとも1種類の感染症検出用プローブが化学的に固定されていることを特徴とする担体。
- 請求項42に記載の担体を用いてエンテロコッカス フェカリス菌由来の遺伝子を検出することを特徴とする遺伝子検査方法。
- 感染症起炎菌の16s rRNA遺伝子配列をPCR増幅させるのに用いられるプライマーであって、
SEQ ID No.73〜78の塩基配列のいずれかを有するオリゴヌクレオチドからなることを特徴とする感染症起炎菌増幅反応用プライマー。 - ヒトゲノムDNAの塩基配列と3塩基以上配列が異なることを特徴とする請求項44に記載の感染症起炎菌増幅反応用プライマー。
- 感染症起炎菌の16s rRNA遺伝子配列をPCR増幅させるのに用いられるプライマーセットであって、
SEQ ID No.107〜109の塩基配列のうちの少なくとも一つ以上と、SEQ ID No.110〜112の塩基配列のうちの少なくとも一つ以上の複数の塩基配列の各々を有するオリゴヌクレオチドからなる複数のプライマーを含むことを特徴とする感染症起炎菌増幅反応用プライマーセット。 - ヒト血液検体に対して、該プライマーセットのうちの全てを同時に用いて、PCR反応させることを特徴とする請求項46記載の感染症起炎菌増幅反応用プライマーセット。
- 請求項46に記載の感染症起炎菌増幅反応用プライマーセットを用いてPCR増幅処理を行なってDNAプローブによる感染症起炎菌の検出を行なうことを特徴とする感染症起炎菌検出方法。
- 感染症起炎菌遺伝子を検出するための感染症起炎菌検出用プローブセットであって、
SEQ ID No.1〜9の塩基配列及びその相補配列を含む第1群と、SEQ ID No.15〜21の塩基配列及びその相補配列を含む第2群と、SEQID No.25〜31の塩基配列及びその相補配列を含む第3群と、SEQ ID No.37〜42の塩基配列及びその相補配列を含む第4群と、SEQ IDNo.48〜55の塩基配列及びその相補配列を含む第5群と、SEQ ID No.58〜62の塩基配列及びその相補配列を含む第6群と、SEQ ID No.69〜75の塩基配列及びその相補配列を含む第7群と、SEQID No.78〜84の塩基配列及びその相補配列を含む第8群と、SEQ ID No.86〜92の塩基配列及びその相補配列を含む第9群と、SEQ IDNo.98〜105の塩基配列及びその相補配列を含む第10群より選択された複数群の各々から選択された塩基配列を有するオリゴヌクレオチドで形成される複数種類のプローブを含むことを特徴とする感染症起炎菌検出用プローブセット。
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