JP2004269407A - 便秘改善剤及びそれを含有する飲食品 - Google Patents
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Abstract
【課題】アウレオバシジウム属に属する菌の培養液に含まれる様々な有用成分を損なうことなく利用でき、優れた便秘改善効果を有し、更には免疫賦活効果等も期待できる便秘改善剤及びそれを含有する飲食品を提供する。
【解決手段】便秘改善剤の有効成分として、アウレオバシジウム属に属する菌を培養して得られるβ−１，３−１，６−グルカンを含む培養物と、乳酸菌菌体とを含有させる。前記アウレオバシジウム属に属する菌は、アウレオバシジウムプルランス Ｍ−１（ＦＥＲＭ Ｐ−１９２１３）であることが好ましい。また、固形分中に、前記培養物をβ−１，３−１，６−グルカン換算で１〜４０質量％含有し、かつ前記乳酸菌菌体を４〜９５質量％含有することが好ましい。更に、前記乳酸菌はエンテロコッカス・フェカリスであることが好ましい。更にまた、前記乳酸菌は加熱殺菌されたものであることが好ましい。
【選択図】 なし
【解決手段】便秘改善剤の有効成分として、アウレオバシジウム属に属する菌を培養して得られるβ−１，３−１，６−グルカンを含む培養物と、乳酸菌菌体とを含有させる。前記アウレオバシジウム属に属する菌は、アウレオバシジウムプルランス Ｍ−１（ＦＥＲＭ Ｐ−１９２１３）であることが好ましい。また、固形分中に、前記培養物をβ−１，３−１，６−グルカン換算で１〜４０質量％含有し、かつ前記乳酸菌菌体を４〜９５質量％含有することが好ましい。更に、前記乳酸菌はエンテロコッカス・フェカリスであることが好ましい。更にまた、前記乳酸菌は加熱殺菌されたものであることが好ましい。
【選択図】 なし
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、β−グルカン、特にβ−１，３−１，６−グルカンを含むアウレオバシジウム属に属する菌の培養物と乳酸菌の菌体とを有効成分として含有する便秘改善剤及びそれを含有する飲食品に関する。
【０００２】
【従来の技術】
アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌（通称、黒酵母）が産生するβ−１，３−１，６−グルカンは、免疫増強作用、抗腫瘍活性、ガン細胞増殖抑制作用、抗アレルギー作用、抗炎症作用、コレステロール低下作用、抗血栓作用、食物繊維作用、血圧降下作用、血糖降下作用、肝機能亢進等の様々な生理活性を有していることが知られており、機能性素材として利用されている。
【０００３】
例えば、上記β−１，３−１，６−グルカンを食品や医薬品用途、特に便秘の予防・改善のために用いた例として、下記特許文献１には、不完全菌黒色菌科アウレオバシジウム（Ａｕｒｅｏｂａｃｉｄｉｕｍ）属の菌（微工研寄託Ｎｏ．４２５７号）が産生する多糖を主成分とする整腸剤その他の医薬が開示されている。
【０００４】
また、下記特許文献２には、フラクトオリゴ糖とβ−１，３−１，６グルカンを主成分とする飲食品の製造方法が開示されており、この飲食品は、健康維持飲料（腸内ビフィズス菌の増殖、便秘防止、免疫増強）、整腸剤等に利用できる旨記載されている。
【０００５】
また、下記特許文献３には、β−１，３−１，６−グルカン及びリンゴ抽出物を含有する組成物が開示されており、この組成物が飲料や皮膚塗布剤として有用である旨、該飲料には、各種アレルギー症状の低減効果、免疫異常疾患の改善効果、がん抑制効果、血管障害疾患の改善効果、ウイルス性疾患の改善効果、泌尿器系疾患の改善効果、便秘、下痢等の消化器系疾患の改善効果が期待できる旨記載されている。
【０００６】
【特許文献１】
特開昭５７−１４９３０１号公報
【特許文献２】
特公平５−４０６３号公報
【特許文献３】
特開２００２−３３５９２６号公報
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌の培養液に含まれるβ−１，３−１，６−グルカンの濃度は低濃度（通常、０．２％（ｗ／ｖ）前後、高くても０．５〜０．６％（ｗ／ｖ））であるため、上記特許文献２に記載されているように培養液をそのまま利用する場合は、比較的大量に摂取しなければ十分な生理活性が期待できないという問題があった。
【０００８】
また、β−１，３−１，６−グルカン濃度を高めるために、上記特許文献１に記載されているように精製を行った場合は、精製コストがかかるだけでなく、精製工程で培養液中に含まれる他の有用成分（例えば、β−グルカンの吸収を助ける成分であるリン、カリウム、マグネシウム、ビタミンＣ、オレイン酸、リノール酸等）が失われてしまうという問題があった。
【０００９】
一方、上記特許文献３には、アウレオバシジウム（Ａｕｒｅｏｂａｃｉｄｉｕｍ）属の微生物の培養液に、ビフィズス活性を補完する目的で、イソマルトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、キシルシュクロース、キシロオリゴ糖、キトサン、グリコマクロペプチド、小麦ファイバー、コーンファイバー、大豆オリゴ糖、ヘミセルロース又は大豆ペプチド等を配合できることが記載されているが、上述したように培養液中のβ−１，３−１，６−グルカン含量が低いので、上記のような成分を併用しても、十分な便秘改善効果はあまり期待できない。
【００１０】
したがって、本発明の目的は、アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｃｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌の培養液に含まれる様々な有用成分を損なうことなく利用でき、優れた便秘改善効果を有し、更には免疫賦活効果等も期待できる便秘改善剤及びそれを含有する飲食品を提供することにある。
【００１１】
【課題を解決するための手段】
上記目的を達成するため、本発明の便秘改善剤は、アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌を培養して得られるβ−１，３−１，６−グルカンを含む培養物と、乳酸菌菌体とを有効成分として含有することを特徴とする。
【００１２】
本発明の便秘改善剤は、アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌を培養して得られるβ−１，３−１，６−グルカンを含む培養物をそのまま用いるので、該培養物に含まれるβ−１，３−１，６−グルカン以外の様々な有用成分も損なうことなく利用することができる。そして、該培養物に乳酸菌菌体を配合しているので、これらの成分の相乗効果により、優れた便秘改善効果だけでなく、免疫賦活効果等も期待できる。
【００１３】
本発明の便秘改善剤においては、前記アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌は、アウレオバシジウム プルランス Ｍ−１（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｐｕｌｌｕｌａｎｓ Ｍ−１）（ＦＥＲＭ Ｐ−１９２１３）であることが好ましい。この態様によれば、より生理活性の高いβ−１，３−１，６−グルカンを得ることができる。
【００１４】
また、固形分中に、前記培養物をβ−１，３−１，６−グルカン換算で１〜４０質量％含有し、かつ前記乳酸菌菌体を４〜９５質量％含有することが好ましい。
【００１５】
更に、前記培養物は、固形分中にβ−１，３−１，６−グルカンを１質量％以上含むものであることが好ましい。
【００１６】
更にまた、前記乳酸菌はエンテロコッカス・フェカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）であることが好ましい。
【００１７】
これらの態様によれば、β−１，３−１，６−グルカンと乳酸菌菌体による相乗的な便秘改善効果や免疫賦活効果等をより期待することができる。
【００１８】
更にまた、前記乳酸菌は加熱殺菌されたものであることが好ましい。この態様によれば、加熱処理が必要な飲食品にも幅広く添加することができ、また、保存安定性が高く、飲食品や医薬品の原料として用いる場合の安全性も非常に高い便秘改善剤を提供できる。
【００１９】
本発明の飲食品は、前記便秘改善剤を含有することを特徴とする。本発明の飲食品は、アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌を培養して得られるβ−１，３−１，６−グルカンを含む培養物と乳酸菌菌体とを有効成分として含有する便秘改善剤を含有するので、摂取することにより優れた便秘改善効果だけでなく、免疫賦活効果等も期待できる。
【００２０】
【発明の実施の形態】
本発明において、アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌を培養して得られる培養物（以下、単に培養物という。）としては、アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属し、β−１，３−１，６−グルカン生産能を有する菌を培養した培養液そのもの、該培養液の濃縮液、あるいは該培養液から水分を除いた固形物などを用いることができる。
【００２１】
上記アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌としては、例えば、特開昭５７−１４９３０１号公報、特公平５−４０６３号公報、特開２００２−３３５９２６号公報等に記載された菌株を用いることができるが、本発明においては、アウレオバシジウム プルランス Ｍ−１（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｐｕｌｌｕｌａｎｓ Ｍ−１、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター寄託番号ＦＥＲＭ Ｐ−１９２１３）が好適に用いられる。なお、本発明において、β−１，３−１，６−グルカンとは、グルコースがβ−１，３結合した主鎖からβ−１，６結合でグルコースが分岐した構造を有するものを意味する。
【００２２】
上記アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌の培養は、公知の方法（特開昭５７−１４９３０１号公報等参照）に準じて行うことができる。すなわち、炭素源（ショ糖）０．５〜１．０質量％、Ｎ源０．１質量％、その他微量物質（例えば、ビタミン類、無機質）を加えた培地（ｐＨ５．２〜６．０）に菌を接種し、温度２０〜３０℃で２〜３日間通気培養、好ましくは通気撹拌培養すればよい。β−１，３−１，６−グルカンが生成されるにしたがって培養液の粘度が上昇し、粘性の高いジェル状になる。このようにして得られる培養液には、通常、０．６〜１．８質量％の固形分が含まれており、該固形分中にはβ−１，３−１，６−グルカンが５〜８０質量％含まれている。また、β−１，３−１，６−グルカン以外にも、例えば、該グルカンの吸収を助ける成分であるリン、カリウム、マグネシウム、ビタミンＣ、オレイン酸、リノール酸等の他の有用成分も含まれているので、β−１，３−１，６−グルカンの有する生理活性効果を効率よく発揮できる。本発明においては、固形分中にβ−１，３−１，６−グルカンを１質量％以上含む培養物が好ましく用いられ、固形分中にβ−１，３−１，６−グルカンを５質量％以上含む培養物がより好ましく用いられる。培養物中のβ−１，３−１，６−グルカン濃度が低すぎると、該グルカンの生理活性効果が十分に期待できない。
【００２３】
なお、β−１，３−１，６−グルカンの定量は、特公平３−４８２０１号公報に記載された方法に準じて行うことができる。すなわち、培養終了後、培養液を殺菌して、遠心分離して菌体を除去し、得られた溶液にクロロホルム／ブタノール混合液を１０％（ｖ／ｖ）加えて振とう（Ｓｅｖａｇｅ法）した後、遠心処理してクロロホルムと不溶物を除去する。この操作を２回繰り返した後、エタノール沈殿により、沈殿物を回収して蒸留水に溶解し、酵素処理により、プルランを分解し、蒸留水中で透析を行い、透析液をエタノール沈殿して、沈殿物（β−１，３−１，６−グルカン）を回収して収量を求めればよい。
【００２４】
本発明においては、上記のようにして得られる培養液をそのまま加熱又は加圧加熱殺菌して用いてもよく、遠心分離等により菌体を分離除去した後殺菌して用いてもよい。また、必要に応じて濃縮したもの、更には乾燥したものを用いることもできる。なお、アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌の培養物は、増粘安定剤等の食品添加物として使用されているものであり、安全性は高い。
【００２５】
また、本発明で用いられる乳酸菌としては、飲食品に使用可能な乳酸菌であれば特に制限なく用いることができるが、具体的には、エンテロコッカス・フェカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）、エンテロコッカス・フェシウム（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ）、ラクトバチルス・アシドフィルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、ラクトバチルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ）、ストレプトコッカス・クレモリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｃｒｅｍｏｒｉｓ）、ストレプトコッカス・ラクティス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ）、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）、ビフィドバクテリウム・ロンガム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ Ｌｏｎｇｕｍ）、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ）、ビフィドバクテリウム・ビフィダム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｉｆｉｄｕｍ）等が例示できる。上記乳酸菌は単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
【００２６】
なお、エンテロコッカス・フェカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）、エンテロコッカス・フェシウム（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ）は乳酸菌製剤等に用いられている乳酸菌である。ラクトバチルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ）、ラクトバチルス・アシドフィルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）は、チーズ、発酵乳、ヨーグルト、乳酸菌飲料等に用いられている乳酸菌である。ストレプトコッカス・クレモリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｃｒｅｍｏｒｉｓ）、ストレプトコッカス・ラクティス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ）、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）は、チーズ、ヨーグルト等に用いられている乳酸菌である。ビフィドバクテリウム・ロンガム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ Ｌｏｎｇｕｍ）、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ）、ビフィドバクテリウム・ビフィダム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｉｆｉｄｕｍ）は発酵乳等に用いられている乳酸菌である。したがって、これらの乳酸菌は、いずれも当業者が容易に入手できるものである。
【００２７】
本発明においては、上記の乳酸菌の中でも、エンテロコッカス・フェカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ、例えば、ＡＴＣＣ １９４３３、ＡＴＣＣ １４５０８、ＡＴＣＣ １２３６５５、ＩＦＯ １６８０３等）及び／又はストレプトコッカス・クレモリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｃｒｅｍｏｒｉ ｓ）が好ましく用いられ、エンテロコッカス・フェカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）が特に好ましく用いられる。エンテロコッカス・フェカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）は、強い免疫賦活活性を有していることが知られており、上記培養物と併用することにより、これらの成分による相乗的な便秘改善効果及び免疫賦活効果が期待できる。
【００２８】
本発明において、上記乳酸菌は加熱殺菌されたものであることが好ましい。これにより、加熱処理が必要な飲食品にも幅広く添加することができ、また、保存安定性が高く、飲食品や医薬品の原料として用いる場合の安全性も非常に高くなる。
【００２９】
上記乳酸菌の培養は常法にしたがって行えばよく、例えば、上記乳酸菌を常法にしたがって培養して得られた培養物から、濾過、遠心分離等の方法により菌体を回収し、水洗後、水等に懸濁して８０〜１１５℃、３０分〜３秒間加熱処理すればよい。加熱殺菌した乳酸菌は、必要に応じて濃縮、乾燥してから用いてもよい。
【００３０】
本発明の便秘改善剤は、例えば、上記アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌の培養液を殺菌したものに、上記乳酸菌の加熱殺菌菌体を混合して分散させることにより得ることができる。また、必要に応じて、錠剤、カプセル剤、粉末、顆粒、液状、ペースト状、ゼリー状等の各種形態とすることもできる。
【００３１】
本発明の便秘改善剤は、固形分中に、上記培養物をβ−１，３−１，６−グルカン換算で１〜４０質量％含有し、かつ上記乳酸菌菌体を４〜９５質量％含有することが好ましく、上記培養物をβ−１，３−１，６−グルカン換算で２〜４０質量％含有し、かつ上記乳酸菌菌体を１０〜９５質量％含有することがより好ましく、上記培養物をβ−１，３−１，６−グルカン換算で３〜４０質量％含有し、かつ上記乳酸菌菌体を３０〜９５質量％含有することが特に好ましい。また、上記基本的成分以外に、香料、甘味料、ビタミン類、ミネラル類、オリゴ糖、増粘多糖類、デキシトリン等を適宜含むことができる。
【００３２】
本発明の便秘改善剤の有効摂取量は、成人１日当たり、上記培養物をβ−１，３−１，６−グルカン換算で０．０１〜１０ｇ、かつ上記乳酸菌菌体を０．０１〜１０ｇであり、好ましくは、上記培養物をβ−１，３−１，６−グルカン換算で０．５〜５ｇ、かつ上記乳酸菌菌体を０．０５〜１ｇである。
【００３３】
また、本発明の便秘改善剤は、例えば、清涼飲料、ゼリー飲料、果汁飲料、野菜ジュース、スープ、味噌汁等の各種飲食品に配合することもできる。上記各飲食品における本便秘改善剤の添加量は、上記の成人１日当たりの有効摂取量に基づいて設定すればよいが、通常、１〜５０質量％が好ましく、１０〜２０質量％がより好ましい。なお、添加方法は、特に制限はなく、各飲食品に用いられる他の原料と一緒に最初から添加することもできる。
【００３４】
【実施例】
以下、実施例を挙げて本発明を具体的に説明する。なお、以下の説明において、特に断りのない限り、「％」は「質量％」を表す。
【００３５】
実施例
（１）アウレオバシジウムの培養
アウレオバシジウム プルランス Ｍ−１（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｐｕｌｌｕｌａｎｓ Ｍ−１）（ＦＥＲＭ Ｐ−１９２１３）の前培養液を、ショ糖１％、アスコルビン酸０．２％、米糠０．２％を含む液体培地（ｐＨ５．３）に適量接種して、２５℃、２日間、通気撹拌培養を行った。培養終了後、この培養液を１２１℃、１５分間殺菌した。この培養液は固形分１質量％であり、該固形分中に３５質量％のβ−１，３−１，６−グルカンを含んでいた。
【００３６】
（２）エンテロコッカス・フェカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）の培養エンテロコッカス・フェカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ、ＩＦＯ １６８０３）を、ロゴサ培地で３７℃、２４時間培養した前培養液を、酵母エキス４％、ポリペプトン３％、乳糖１０％を含む液体培地に適量接種し、ｐＨスタットを用いてｐＨ６．８〜７．０に苛性ソーダ水溶液で調整しながら３７℃、２２〜２４時間中和培養を行った。
【００３７】
培養終了後、連続遠心機で菌体を分離、回収した後、水を加えて元の液量まで希釈して再度連続遠心機で菌体を分離、回収した。この操作を合計４回繰り返して菌体を洗浄した。次いで、洗浄した菌体を適量の水に懸濁し、１００℃、３０分間殺菌した後、スプレードライヤーを用いて菌体を乾燥して加熱殺菌菌体粉末を調製した。
【００３８】
（３）便秘改善効果の確認
上記（１）で得られたアウレオバシジウム培養物と、上記（２）で得られた乳酸菌菌体を用いて、以下の方法により便秘改善効果の確認試験を行った。
【００３９】
試験期間は４週間とし、便秘体質のボランティア１０名に、最初の１週間（第１週目）は何も投与せず、次の１週間（第２週目）は乳酸菌菌体（２００ｍｇ／日）を投与し、次の１週間（第３週目）はアウレオバシジウム培養物（１５ｍｌ／日）を投与し、最後の１週間（第４週目）はアウレオバシジウム培養物（１５ｍｌ／日）及び乳酸菌菌体（２００ｍｇ／日）を投与した。そして、各試験サンプルの投与期間１週間における排便回数をチェックしてもらった。その結果を表１に示す。
【００４０】
【表１】
【００４１】
表１から、乳酸菌菌体のみを投与した場合には、若干の便秘改善効果が認められるが、アウレオバシジウム培養物のみを投与した場合は、便秘改善効果がほとんど認められないことが分かる。一方、アウレオバシジウム培養物と乳酸菌菌体を併用した場合、排便回数の増加が認められ、明らかに便秘が改善されていることが分かる。
【００４２】
【発明の効果】
以上説明したように、本発明の便秘改善剤は、アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌を培養して得られるβ−１，３−１，６−グルカンを含む培養物をそのまま用いているので、該培養物に含まれる様々な有用成分を損なうことなく利用することができる。そして、該培養物に乳酸菌菌体を配合しているので、これらの成分の相乗効果によって優れた便秘改善効果だけでなく、免疫賦活効果等も期待できる。
【発明の属する技術分野】
本発明は、β−グルカン、特にβ−１，３−１，６−グルカンを含むアウレオバシジウム属に属する菌の培養物と乳酸菌の菌体とを有効成分として含有する便秘改善剤及びそれを含有する飲食品に関する。
【０００２】
【従来の技術】
アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌（通称、黒酵母）が産生するβ−１，３−１，６−グルカンは、免疫増強作用、抗腫瘍活性、ガン細胞増殖抑制作用、抗アレルギー作用、抗炎症作用、コレステロール低下作用、抗血栓作用、食物繊維作用、血圧降下作用、血糖降下作用、肝機能亢進等の様々な生理活性を有していることが知られており、機能性素材として利用されている。
【０００３】
例えば、上記β−１，３−１，６−グルカンを食品や医薬品用途、特に便秘の予防・改善のために用いた例として、下記特許文献１には、不完全菌黒色菌科アウレオバシジウム（Ａｕｒｅｏｂａｃｉｄｉｕｍ）属の菌（微工研寄託Ｎｏ．４２５７号）が産生する多糖を主成分とする整腸剤その他の医薬が開示されている。
【０００４】
また、下記特許文献２には、フラクトオリゴ糖とβ−１，３−１，６グルカンを主成分とする飲食品の製造方法が開示されており、この飲食品は、健康維持飲料（腸内ビフィズス菌の増殖、便秘防止、免疫増強）、整腸剤等に利用できる旨記載されている。
【０００５】
また、下記特許文献３には、β−１，３−１，６−グルカン及びリンゴ抽出物を含有する組成物が開示されており、この組成物が飲料や皮膚塗布剤として有用である旨、該飲料には、各種アレルギー症状の低減効果、免疫異常疾患の改善効果、がん抑制効果、血管障害疾患の改善効果、ウイルス性疾患の改善効果、泌尿器系疾患の改善効果、便秘、下痢等の消化器系疾患の改善効果が期待できる旨記載されている。
【０００６】
【特許文献１】
特開昭５７−１４９３０１号公報
【特許文献２】
特公平５−４０６３号公報
【特許文献３】
特開２００２−３３５９２６号公報
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌の培養液に含まれるβ−１，３−１，６−グルカンの濃度は低濃度（通常、０．２％（ｗ／ｖ）前後、高くても０．５〜０．６％（ｗ／ｖ））であるため、上記特許文献２に記載されているように培養液をそのまま利用する場合は、比較的大量に摂取しなければ十分な生理活性が期待できないという問題があった。
【０００８】
また、β−１，３−１，６−グルカン濃度を高めるために、上記特許文献１に記載されているように精製を行った場合は、精製コストがかかるだけでなく、精製工程で培養液中に含まれる他の有用成分（例えば、β−グルカンの吸収を助ける成分であるリン、カリウム、マグネシウム、ビタミンＣ、オレイン酸、リノール酸等）が失われてしまうという問題があった。
【０００９】
一方、上記特許文献３には、アウレオバシジウム（Ａｕｒｅｏｂａｃｉｄｉｕｍ）属の微生物の培養液に、ビフィズス活性を補完する目的で、イソマルトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、キシルシュクロース、キシロオリゴ糖、キトサン、グリコマクロペプチド、小麦ファイバー、コーンファイバー、大豆オリゴ糖、ヘミセルロース又は大豆ペプチド等を配合できることが記載されているが、上述したように培養液中のβ−１，３−１，６−グルカン含量が低いので、上記のような成分を併用しても、十分な便秘改善効果はあまり期待できない。
【００１０】
したがって、本発明の目的は、アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｃｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌の培養液に含まれる様々な有用成分を損なうことなく利用でき、優れた便秘改善効果を有し、更には免疫賦活効果等も期待できる便秘改善剤及びそれを含有する飲食品を提供することにある。
【００１１】
【課題を解決するための手段】
上記目的を達成するため、本発明の便秘改善剤は、アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌を培養して得られるβ−１，３−１，６−グルカンを含む培養物と、乳酸菌菌体とを有効成分として含有することを特徴とする。
【００１２】
本発明の便秘改善剤は、アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌を培養して得られるβ−１，３−１，６−グルカンを含む培養物をそのまま用いるので、該培養物に含まれるβ−１，３−１，６−グルカン以外の様々な有用成分も損なうことなく利用することができる。そして、該培養物に乳酸菌菌体を配合しているので、これらの成分の相乗効果により、優れた便秘改善効果だけでなく、免疫賦活効果等も期待できる。
【００１３】
本発明の便秘改善剤においては、前記アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌は、アウレオバシジウム プルランス Ｍ−１（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｐｕｌｌｕｌａｎｓ Ｍ−１）（ＦＥＲＭ Ｐ−１９２１３）であることが好ましい。この態様によれば、より生理活性の高いβ−１，３−１，６−グルカンを得ることができる。
【００１４】
また、固形分中に、前記培養物をβ−１，３−１，６−グルカン換算で１〜４０質量％含有し、かつ前記乳酸菌菌体を４〜９５質量％含有することが好ましい。
【００１５】
更に、前記培養物は、固形分中にβ−１，３−１，６−グルカンを１質量％以上含むものであることが好ましい。
【００１６】
更にまた、前記乳酸菌はエンテロコッカス・フェカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）であることが好ましい。
【００１７】
これらの態様によれば、β−１，３−１，６−グルカンと乳酸菌菌体による相乗的な便秘改善効果や免疫賦活効果等をより期待することができる。
【００１８】
更にまた、前記乳酸菌は加熱殺菌されたものであることが好ましい。この態様によれば、加熱処理が必要な飲食品にも幅広く添加することができ、また、保存安定性が高く、飲食品や医薬品の原料として用いる場合の安全性も非常に高い便秘改善剤を提供できる。
【００１９】
本発明の飲食品は、前記便秘改善剤を含有することを特徴とする。本発明の飲食品は、アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌を培養して得られるβ−１，３−１，６−グルカンを含む培養物と乳酸菌菌体とを有効成分として含有する便秘改善剤を含有するので、摂取することにより優れた便秘改善効果だけでなく、免疫賦活効果等も期待できる。
【００２０】
【発明の実施の形態】
本発明において、アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌を培養して得られる培養物（以下、単に培養物という。）としては、アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属し、β−１，３−１，６−グルカン生産能を有する菌を培養した培養液そのもの、該培養液の濃縮液、あるいは該培養液から水分を除いた固形物などを用いることができる。
【００２１】
上記アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌としては、例えば、特開昭５７−１４９３０１号公報、特公平５−４０６３号公報、特開２００２−３３５９２６号公報等に記載された菌株を用いることができるが、本発明においては、アウレオバシジウム プルランス Ｍ−１（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｐｕｌｌｕｌａｎｓ Ｍ−１、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター寄託番号ＦＥＲＭ Ｐ−１９２１３）が好適に用いられる。なお、本発明において、β−１，３−１，６−グルカンとは、グルコースがβ−１，３結合した主鎖からβ−１，６結合でグルコースが分岐した構造を有するものを意味する。
【００２２】
上記アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌の培養は、公知の方法（特開昭５７−１４９３０１号公報等参照）に準じて行うことができる。すなわち、炭素源（ショ糖）０．５〜１．０質量％、Ｎ源０．１質量％、その他微量物質（例えば、ビタミン類、無機質）を加えた培地（ｐＨ５．２〜６．０）に菌を接種し、温度２０〜３０℃で２〜３日間通気培養、好ましくは通気撹拌培養すればよい。β−１，３−１，６−グルカンが生成されるにしたがって培養液の粘度が上昇し、粘性の高いジェル状になる。このようにして得られる培養液には、通常、０．６〜１．８質量％の固形分が含まれており、該固形分中にはβ−１，３−１，６−グルカンが５〜８０質量％含まれている。また、β−１，３−１，６−グルカン以外にも、例えば、該グルカンの吸収を助ける成分であるリン、カリウム、マグネシウム、ビタミンＣ、オレイン酸、リノール酸等の他の有用成分も含まれているので、β−１，３−１，６−グルカンの有する生理活性効果を効率よく発揮できる。本発明においては、固形分中にβ−１，３−１，６−グルカンを１質量％以上含む培養物が好ましく用いられ、固形分中にβ−１，３−１，６−グルカンを５質量％以上含む培養物がより好ましく用いられる。培養物中のβ−１，３−１，６−グルカン濃度が低すぎると、該グルカンの生理活性効果が十分に期待できない。
【００２３】
なお、β−１，３−１，６−グルカンの定量は、特公平３−４８２０１号公報に記載された方法に準じて行うことができる。すなわち、培養終了後、培養液を殺菌して、遠心分離して菌体を除去し、得られた溶液にクロロホルム／ブタノール混合液を１０％（ｖ／ｖ）加えて振とう（Ｓｅｖａｇｅ法）した後、遠心処理してクロロホルムと不溶物を除去する。この操作を２回繰り返した後、エタノール沈殿により、沈殿物を回収して蒸留水に溶解し、酵素処理により、プルランを分解し、蒸留水中で透析を行い、透析液をエタノール沈殿して、沈殿物（β−１，３−１，６−グルカン）を回収して収量を求めればよい。
【００２４】
本発明においては、上記のようにして得られる培養液をそのまま加熱又は加圧加熱殺菌して用いてもよく、遠心分離等により菌体を分離除去した後殺菌して用いてもよい。また、必要に応じて濃縮したもの、更には乾燥したものを用いることもできる。なお、アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌の培養物は、増粘安定剤等の食品添加物として使用されているものであり、安全性は高い。
【００２５】
また、本発明で用いられる乳酸菌としては、飲食品に使用可能な乳酸菌であれば特に制限なく用いることができるが、具体的には、エンテロコッカス・フェカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）、エンテロコッカス・フェシウム（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ）、ラクトバチルス・アシドフィルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、ラクトバチルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ）、ストレプトコッカス・クレモリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｃｒｅｍｏｒｉｓ）、ストレプトコッカス・ラクティス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ）、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）、ビフィドバクテリウム・ロンガム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ Ｌｏｎｇｕｍ）、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ）、ビフィドバクテリウム・ビフィダム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｉｆｉｄｕｍ）等が例示できる。上記乳酸菌は単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
【００２６】
なお、エンテロコッカス・フェカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）、エンテロコッカス・フェシウム（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ）は乳酸菌製剤等に用いられている乳酸菌である。ラクトバチルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ）、ラクトバチルス・アシドフィルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）は、チーズ、発酵乳、ヨーグルト、乳酸菌飲料等に用いられている乳酸菌である。ストレプトコッカス・クレモリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｃｒｅｍｏｒｉｓ）、ストレプトコッカス・ラクティス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ）、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）は、チーズ、ヨーグルト等に用いられている乳酸菌である。ビフィドバクテリウム・ロンガム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ Ｌｏｎｇｕｍ）、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ）、ビフィドバクテリウム・ビフィダム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｉｆｉｄｕｍ）は発酵乳等に用いられている乳酸菌である。したがって、これらの乳酸菌は、いずれも当業者が容易に入手できるものである。
【００２７】
本発明においては、上記の乳酸菌の中でも、エンテロコッカス・フェカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ、例えば、ＡＴＣＣ １９４３３、ＡＴＣＣ １４５０８、ＡＴＣＣ １２３６５５、ＩＦＯ １６８０３等）及び／又はストレプトコッカス・クレモリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｃｒｅｍｏｒｉ ｓ）が好ましく用いられ、エンテロコッカス・フェカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）が特に好ましく用いられる。エンテロコッカス・フェカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）は、強い免疫賦活活性を有していることが知られており、上記培養物と併用することにより、これらの成分による相乗的な便秘改善効果及び免疫賦活効果が期待できる。
【００２８】
本発明において、上記乳酸菌は加熱殺菌されたものであることが好ましい。これにより、加熱処理が必要な飲食品にも幅広く添加することができ、また、保存安定性が高く、飲食品や医薬品の原料として用いる場合の安全性も非常に高くなる。
【００２９】
上記乳酸菌の培養は常法にしたがって行えばよく、例えば、上記乳酸菌を常法にしたがって培養して得られた培養物から、濾過、遠心分離等の方法により菌体を回収し、水洗後、水等に懸濁して８０〜１１５℃、３０分〜３秒間加熱処理すればよい。加熱殺菌した乳酸菌は、必要に応じて濃縮、乾燥してから用いてもよい。
【００３０】
本発明の便秘改善剤は、例えば、上記アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌の培養液を殺菌したものに、上記乳酸菌の加熱殺菌菌体を混合して分散させることにより得ることができる。また、必要に応じて、錠剤、カプセル剤、粉末、顆粒、液状、ペースト状、ゼリー状等の各種形態とすることもできる。
【００３１】
本発明の便秘改善剤は、固形分中に、上記培養物をβ−１，３−１，６−グルカン換算で１〜４０質量％含有し、かつ上記乳酸菌菌体を４〜９５質量％含有することが好ましく、上記培養物をβ−１，３−１，６−グルカン換算で２〜４０質量％含有し、かつ上記乳酸菌菌体を１０〜９５質量％含有することがより好ましく、上記培養物をβ−１，３−１，６−グルカン換算で３〜４０質量％含有し、かつ上記乳酸菌菌体を３０〜９５質量％含有することが特に好ましい。また、上記基本的成分以外に、香料、甘味料、ビタミン類、ミネラル類、オリゴ糖、増粘多糖類、デキシトリン等を適宜含むことができる。
【００３２】
本発明の便秘改善剤の有効摂取量は、成人１日当たり、上記培養物をβ−１，３−１，６−グルカン換算で０．０１〜１０ｇ、かつ上記乳酸菌菌体を０．０１〜１０ｇであり、好ましくは、上記培養物をβ−１，３−１，６−グルカン換算で０．５〜５ｇ、かつ上記乳酸菌菌体を０．０５〜１ｇである。
【００３３】
また、本発明の便秘改善剤は、例えば、清涼飲料、ゼリー飲料、果汁飲料、野菜ジュース、スープ、味噌汁等の各種飲食品に配合することもできる。上記各飲食品における本便秘改善剤の添加量は、上記の成人１日当たりの有効摂取量に基づいて設定すればよいが、通常、１〜５０質量％が好ましく、１０〜２０質量％がより好ましい。なお、添加方法は、特に制限はなく、各飲食品に用いられる他の原料と一緒に最初から添加することもできる。
【００３４】
【実施例】
以下、実施例を挙げて本発明を具体的に説明する。なお、以下の説明において、特に断りのない限り、「％」は「質量％」を表す。
【００３５】
実施例
（１）アウレオバシジウムの培養
アウレオバシジウム プルランス Ｍ−１（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｐｕｌｌｕｌａｎｓ Ｍ−１）（ＦＥＲＭ Ｐ−１９２１３）の前培養液を、ショ糖１％、アスコルビン酸０．２％、米糠０．２％を含む液体培地（ｐＨ５．３）に適量接種して、２５℃、２日間、通気撹拌培養を行った。培養終了後、この培養液を１２１℃、１５分間殺菌した。この培養液は固形分１質量％であり、該固形分中に３５質量％のβ−１，３−１，６−グルカンを含んでいた。
【００３６】
（２）エンテロコッカス・フェカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）の培養エンテロコッカス・フェカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ、ＩＦＯ １６８０３）を、ロゴサ培地で３７℃、２４時間培養した前培養液を、酵母エキス４％、ポリペプトン３％、乳糖１０％を含む液体培地に適量接種し、ｐＨスタットを用いてｐＨ６．８〜７．０に苛性ソーダ水溶液で調整しながら３７℃、２２〜２４時間中和培養を行った。
【００３７】
培養終了後、連続遠心機で菌体を分離、回収した後、水を加えて元の液量まで希釈して再度連続遠心機で菌体を分離、回収した。この操作を合計４回繰り返して菌体を洗浄した。次いで、洗浄した菌体を適量の水に懸濁し、１００℃、３０分間殺菌した後、スプレードライヤーを用いて菌体を乾燥して加熱殺菌菌体粉末を調製した。
【００３８】
（３）便秘改善効果の確認
上記（１）で得られたアウレオバシジウム培養物と、上記（２）で得られた乳酸菌菌体を用いて、以下の方法により便秘改善効果の確認試験を行った。
【００３９】
試験期間は４週間とし、便秘体質のボランティア１０名に、最初の１週間（第１週目）は何も投与せず、次の１週間（第２週目）は乳酸菌菌体（２００ｍｇ／日）を投与し、次の１週間（第３週目）はアウレオバシジウム培養物（１５ｍｌ／日）を投与し、最後の１週間（第４週目）はアウレオバシジウム培養物（１５ｍｌ／日）及び乳酸菌菌体（２００ｍｇ／日）を投与した。そして、各試験サンプルの投与期間１週間における排便回数をチェックしてもらった。その結果を表１に示す。
【００４０】
【表１】
表１から、乳酸菌菌体のみを投与した場合には、若干の便秘改善効果が認められるが、アウレオバシジウム培養物のみを投与した場合は、便秘改善効果がほとんど認められないことが分かる。一方、アウレオバシジウム培養物と乳酸菌菌体を併用した場合、排便回数の増加が認められ、明らかに便秘が改善されていることが分かる。
【００４２】
【発明の効果】
以上説明したように、本発明の便秘改善剤は、アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌を培養して得られるβ−１，３−１，６−グルカンを含む培養物をそのまま用いているので、該培養物に含まれる様々な有用成分を損なうことなく利用することができる。そして、該培養物に乳酸菌菌体を配合しているので、これらの成分の相乗効果によって優れた便秘改善効果だけでなく、免疫賦活効果等も期待できる。
Claims (7)
- アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌を培養して得られるβ−１，３−１，６−グルカンを含む培養物と、乳酸菌菌体とを有効成分として含有することを特徴とする便秘改善剤。
- 前記アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌は、アウレオバシジウム プルランス Ｍ−１（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｐｕｌｌｕｌａｎｓ Ｍ−１）（ＦＥＲＭ
Ｐ−１９２１３）である、請求項１に記載の便秘改善剤。 - 固形分中に、前記培養物をβ−１，３−１，６−グルカン換算で１〜４０質量％含有し、かつ前記乳酸菌菌体を４〜９５質量％含有する、請求項１又は２に記載の便秘改善剤。
- 前記培養物は、固形分中にβ−１，３−１，６−グルカンを１質量％以上含むものである、請求項１〜３のいずれか一つに記載の便秘改善剤。
- 前記乳酸菌はエンテロコッカス・フェカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）である、請求項１〜４のいずれか一つに記載の便秘改善剤。
- 前記乳酸菌は加熱殺菌されたものである、請求項１〜５のいずれか一つに記載の便秘改善剤。
- 請求項１〜６のいずれか一つに記載の便秘改善剤を含有することを特徴とする飲食品。
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