JP2002536978A5

JP2002536978A5 -

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Publication number: JP2002536978A5
Application number: JP2000599878A
Authority: JP
Filing date: 2000-02-17
Publication date: 2007-02-15
Anticipated expiration: 2020-02-17

Description

【特許請求の範囲】
【請求項１】塩基対２１１から塩基対１７４０までのオープンリーディングフレームを有する配列番号１に記載の配列を含む、またはこの上記配列と少なくとも５０％の相同性を有する、または厳格な条件下でこの上記配列とハイブリダイズする、またはこの上記ＤＮＡ配列とは遺伝コードが縮重している配列を含む、ことを特徴とするＤＮＡ分子であって、該配列がフコシルトランスフェラーゼ活性を有する植物タンパク質をコードするか、あるいはそれと相補的である該ＤＮＡ分子。
【請求項２】ＧｌｃＮＡｃ−α１,３−フコシルトランスフェラーゼ活性、特にコア−α１,３−フコシルトランスフェラーゼ活性を有するタンパク質をコードすることを特徴とする、請求項１に記載のＤＮＡ分子。
【請求項３】配列番号１に記載の配列と少なくとも７０〜８０％、特に好ましくは少なくとも９５％の相同性を有することを特徴とする、請求項１または２に記載のＤＮＡ分子。
【請求項４】２１５０〜２２５０個、特に２１９８個の塩基対を含むことを特徴とする、請求項１〜３のいずれかに記載のＤＮＡ分子。
【請求項５】配列番号３に記載の配列を含むか、あるいはこの配列と少なくとも８５％、特に少なくとも９５％の相同性を有する配列または厳格な条件下でこの配列とハイブリダイズする配列またはこのＤＮＡ配列とは遺伝コードが縮重している配列を含むことを特徴とするＤＮＡ分子。
【請求項６】請求項１〜４のいずれかに記載のＤＮＡ分子の部分配列を含み、配列番号１に記載の配列と少なくとも８０％ホモローガスであり、サイズが２０〜２００、好ましくは３０〜５０塩基対であることを特徴とするＤＮＡ分子。
【請求項７】検出可能なマーカー物質と共有結合していることを特徴とする、請求項１〜６のいずれかに記載のＤＮＡ分子。
【請求項８】請求項１〜７のいずれかに記載のＤＮＡ分子、または少なくとも２０塩基対を有する種々の長さのその複数の部分を含むことを特徴とする生物学的機能性ベクター。
【請求項９】請求項１〜７のいずれかに記載のＤＮＡ分子または種々の長さのその複数の部分であって、そのプロモーターに対して逆向きに配向するものを含むことを特徴とする生物学的機能性ベクター。
【請求項１０】リボザイムをコードするＤＮＡ分子であって、請求項１〜７のいずれかに記載のＤＮＡ分子の配列セクションと相補的な、それぞれ少なくとも１０〜１５塩基対の長さを有する２つの配列セクションを有し、これにより該リボザイムが天然ＧｌｃＮＡｃ−α１,３−フコシルトランスフェラーゼＤＮＡ分子によって転写されるｍＲＮＡと複合体形成し、該ｍＲＮＡを切断することを特徴とするＤＮＡ分子。
【請求項１１】請求項１０に記載のＤＮＡ分子を含むことを特徴とする生物学的機能性ベクター。
【請求項１２】昆虫または植物細胞、特に胚軸細胞からＲＮＡを単離し、逆転写酵素およびプライマーを加えた後、該ＲＮＡを用いて逆転写を行うことを特徴とする、請求項１〜５のいずれかに記載のＤＮＡ分子を含むｃＤＮＡの調製方法。
【請求項１３】請求項１〜５のいずれかに記載のＤＮＡ分子をベクターにクローニングした後、これを宿主細胞または宿主にトランスフェクトし、トランスフェクトされた宿主細胞の選択および増幅によって、活性なＧｌｃＮＡｃ−α１,３−フコシルトランスフェラーゼを発現するセルラインを得ることを特徴とする、ＧｌｃＮＡｃ−α１,３−フコシルトランスフェラーゼのクローニング方法。
【請求項１４】ＧｌｃＮＡｃ−α１,３−フコシルトランスフェラーゼの産生が抑制されているか、あるいは完全に停止されている組換え宿主細胞、特に植物もしくは昆虫細胞、または植物若しくは昆虫それぞれの調製方法であって、該宿主細胞、または植物若しくは昆虫それぞれに、それぞれ請求項８、９または１１に記載のベクター、および欠失、挿入、および/または置換突然変異を含む請求項１〜７のいずれかに記載のＤＮＡ配列を含むベクターのうち少なくとも１つを挿入することを特徴とする方法。
【請求項１５】組換え宿主細胞、特に植物もしくは昆虫細胞、または植物若しくは昆虫それぞれの調製方法であって、該宿主細胞、または植物若しくは昆虫それぞれのゲノムに、欠失、挿入、および/または置換突然変異を含む請求項１〜７のいずれかに記載のＤＮＡ分子を変異されていない相同配列の位置において挿入することを特徴とする方法。
【請求項１６】請求項１４または１５に記載の方法によって調製され、そのＧｌｃＮＡｃ−α１,３−フコシルトランスフェラーゼ産生が抑制されているか、あるいは完全に停止されていることを特徴とする組換え植物または植物細胞。
【請求項１７】請求項１４または１５に記載の方法によって調製され、そのＧｌｃＮＡｃ−α１,３−フコシルトランスフェラーゼ産生が抑制されているか、あるいは完全に停止されていることを特徴とする組換え昆虫または昆虫細胞。
【請求項１８】請求項１〜６のいずれかに記載のＤＮＡ分子の配列と相補的な塩基配列およびその部分配列を含むことを特徴とするＰＮＡ(ペプチド核酸)分子。
【請求項１９】請求項１〜６のいずれかに記載のＤＮＡ分子の配列に対応する塩基配列およびその部分配列を含むことを特徴とするＰＮＡ分子。
【請求項２０】ＧｌｃＮＡｃ−α１,３−フコシルトランスフェラーゼの発現が転写または翻訳レベルでブロックされている植物若しくは昆虫、または細胞、特に植物もしくは昆虫細胞それぞれの作成方法であって、請求項１８または１９に記載のＰＮＡ分子を細胞に挿入することを特徴とする方法。
【請求項２１】組換え糖タンパク質の調製方法であって、請求項１６または１７に記載の系、または請求項２０に記載の方法によって調製される植物若しくは昆虫または細胞それぞれを、その糖タンパク質を発現する遺伝子でトランスフェクトし、組換え糖タンパク質を発現させることを特徴とする方法。
【請求項２２】組換えヒト糖タンパク質の調製方法であって、請求項１６または１７に記載の系、または請求項２０に記載の方法によって調製される植物若しくは昆虫または細胞それぞれを、その糖タンパク質を発現する遺伝子でトランスフェクトし、組換え糖タンパク質を発現させることを特徴とする方法。
【請求項２３】医療用の組換えヒト糖タンパク質の調製方法であって、請求項１６または１７に記載の系、または請求項２０に記載の方法によって調製された植物若しくは昆虫または細胞それぞれを、その糖タンパク質を発現する遺伝子でトランスフェクトし、組換え糖タンパク質を発現させることを特徴とする方法。
【請求項２４】試料中のＧｌｃＮＡｃ−α１,３−フコシルトランスフェラーゼをコードするＤＮＡ分子の選択方法であって、ＧｌｃＮＡｃ−α１,３−フコシルトランスフェラーゼをコードするＤＮＡ分子と結合する、請求項７に記載のＤＮＡ分子を該試料に加えることを特徴とする方法。
【請求項２５】該試料が植物または昆虫生物のゲノムＤＮＡを含むことを特徴とする、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】請求項２４または２５に記載の方法によって選択され、次いで試料から単離されることを特徴とする、ＧｌｃＮＡｃ−α１,３−フコシルトランスフェラーゼをコードするＤＮＡ分子。