JP2001502361A

JP2001502361A - α―９インテグリンアンタゴニストおよびその抗炎症性組成物

Info

Publication number: JP2001502361A
Application number: JP11511273A
Authority: JP
Inventors: エイ．イエドノック，テオドア; エイ．プリース，マイケル
Original assignee: エランファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド
Priority date: 1997-07-31
Filing date: 1998-07-31
Publication date: 2001-02-20
Also published as: EP1000051B1; NO20000413L; DE69824007D1; KR100639055B1; DE69824007T2; ATE267188T1; AR016133A1; CN1265657A; AU8605098A; AU8584998A; BR9811598A; DE69812890T2; WO1999006391A1; ES2221183T3; AU740681B2; CA2290745A1; DE69812890D1; NZ502578A; EP0954519B1; CA2290745C

Abstract

(57)【要約】開示される本発明は、炎症状態、特に、α-9インテグリンの、１つ以上のそのリガンドへの増加される結合によって特徴づけられる状態を、処置するための薬学的組成物および方法に関する。また、このような組成物および方法において使用するための化合物を選択するための方法が開示される。

Description

【発明の詳細な説明】 α-9インテグリンアンタゴニストおよびその抗炎症性組成物発明の分野本発明は、特定のインテグリン分子であるα₉β₁の、そのレセプターへの結合を調節する組成物に関し、このような化合物を用いる処置の方法に関し、およびこのような処置方法における使用のためのさらなる調節化合物を同定するのに適切なスクリーニングアッセイに関する。このような化合物を含む薬学的組成物は、炎症およびα₉β₁レセプター相互作用の調節が所望される他の障害を処置することにおいて有用である。発明の背景インテグリンは、広範に多様な細胞（ここで、インテグリンは、細胞膜にまたは細胞外マトリクス中に存在するレセプターとの相互作用を介して、細胞−細胞および細胞−マトリクス接着を媒介する）に存在する糖タンパク質の群である。種々のインテグリンファミリーメンバーについての公知のレセプターとしては、細胞表面免疫グロブリン、細胞外マトリクスタンパク質（ラミニン、コラーゲン、フィブロネクチン、テネイシン）、およびカドヘリンが挙げられる。インテグリンファミリーの全ての公知のメンバーは、αおよびβと呼ばれる２つのサブユニットから構成される。現在、少なくとも16個の認識されたαサブユニットおよび８個の異なるβサブユニットが存在し；βサブユニットのβ₁形態を含有するインテグリンは、「β₁インテグリンファミリー」として知られている。このファミリーのメンバーは、多様な分布の組織によって発現され、そして特異的な結合特性を示す。従って、α₁β₁インテグリンは、Ｔリンパ球および線維芽細胞によって発現され、そしてコラーゲンおよびラミニンに結合する；対照的に、α₄β₁インテグリン（VLA-4）は、いくつかのタイプの造血細胞によって発現され、そしてVCAM-1、フィブロネクチン、およびmadCAMに結合する。それゆえ、タンパク質にレセプター結合特性を明らかに付与するのは、αサブユニットである。比較的新しいメンバーのβ₁インテグリンファミリー、α₉β₁（本明細書中でまた、「α-9インテグリン」と呼ばれる）は、テネイシンおよびオステオポンチン（これらの両方は、炎症部位で誘導される細胞外マトリクスの成分である（Yo kosaki；Smith））に結合することが示されている。種々のαサブユニットの配列が比較される場合、α-9インテグリンは、α-4サブユニットに最も近い配列同一性を有することが示された；しかし、これはわずか39%の配列同一性を示す（P almer）。さらに、２つのサブユニットは異なる細胞分布および組織分布を有する。α₉β₁は、気道平滑筋細胞および非腸管上皮細胞において発現され（Pamler ）、ならびに肝細胞および基底のケラチノサイトにおいて分散して発現されるが（Yokosaki，1994）、α₄β₁インテグリンは、主に造血細胞に存在する。これまで、上記のように、いくつかの組織に存在するにもかかわらず、α₉β₁ インテグリンについてのインビボ機能の明確な決定がなく、α₉β₁−レセプター相互作用の破壊の生理学的重要性も同定されていない。また、オステオポンチンおよびテネイシンとの相互作用にもかかわらず、α-9インテグリンが炎症障害において役割を果たし得るということを推測する理由がない。なぜなら、α₉β₁分子は、この障害と一般に関連する造血細胞のいずれとも結合しないからである。本発明を支持して行われた研究において、α₉β₁が、炎症において重要な役割を果たす食細胞のクラスの１つである好中球に存在することが今や見出される。ヒトにおいて、これらの細胞は、それらがα4/β-1インテグリンを相対的に欠損することについて顕著である。それゆえ、本発明は、急性の炎症性応答における α₉β₁の関与についての基礎を提供する。 β₁インテグリン間のさらなる差異は、それらの結合特異性または内因性リガンドと関連する。これらは全て、細胞外マトリクスを形成する１つ以上のタンパク質またはプロテオグリカンを結合するが、それぞれのインテグリンファミリーメンバーは、その生理学的特異性を、部分的に、指図し得る別の分子特異性を示す。従って、α-4/β-1インテグリンは、フィブロネクチン、およびVCAM-1に結合することが知られるが、α-9インテグリンはマトリクスタンパク質のオステオポンチンおよびテネイシンを結合するとして特徴づけられている（Yokosaki，19 94；Smith，1996）。本発明に関するさらなる発見によれば、α-9インテグリンはまたVCAM-1を結合するが、以下に考察されるように、このような結合は、α-4 結合部位とは異なる部位で生じるようである。それゆえ、本発明は、α-9インテグリンのそのリガンド（特に、炎症性応答に関与するリガンド）への結合を調節することに関する、新規の治療レジメについての基礎を提供する。さらに、本発明のさらなる発見は、α-4/β-1インテグリン結合を調節（阻害もしくは増強）する多くの化合物または薬物がまた、α-9インテグリン結合を調節するということである。それゆえ、この発見は、α-９インテグリン結合を調節するための新規の薬学的組成物および処置の方法、ならびに新規のα-9インテグリン調節化合物を同定するためのスクリーニング方法を提供する。発明の要旨本発明は、α-9インテグリンの結合を包含する障害についての薬学的組成物および処置の方法、ならびにこのような組成物および方法において使用するための化合物を同定することにおいて有用なスクリーニングアッセイに関する。より具体的には、本発明は炎症状態、特に、本明細書中に記載されるように、本発明の発見により、膜においてα-9インテグリンを保有すること、および公知のアクチベーター分子、fMLPによる刺激に対する応答においてα-9インテグリンの増大した発現を示すことが今や知られる、マクロファージまたは好中球の増大した接着を含む状態に関する。それゆえ、多くの炎症障害は、本発明に従う処置に感受性であり、気道過敏応答（hyper-responsiveness）および慢性喘息に付随して生じる閉塞、アテローム性動脈硬化症における平滑筋細胞の増殖、血管形成術後の血管閉塞、腎疾患の結果としての線維症および糸球体廠痕化、大動脈狭窄、慢性関節リュウマチにおける滑膜肥大、ならびに潰瘍性大腸炎およびクローン病の進行とともに生じる炎症および瘢痕化が挙げられるがこれらに限定されない。好ましい実施態様において、本発明の薬学的組成物および処置の方法は、α-9 インテグリンとα-9インテグリンリガンドとの間の結合を阻害するα-9アンタゴニスト化合物を用いる。この点に関して好ましいリガンドとしては、オステオポンチン、テネイシン、およびVCAM-1によって例示されるような、α-9インテグリンに特異的に結合することが見出される任意のリガンドが挙げられる。炎症性反応とのその関連に起因して、V-CAM-1は、この点における試験化合物について特に好ましい。１つの実施態様において、本発明の薬学的組成物および処置方法は、以下の９個の参照化合物からなる群から選択される化合物によって示される阻害性潜在力の少なくとも1/1000の高さ、および好ましくは少なくとも1/100の高さである、 α-9インテグリンとα-9インテグリンリガンドとの間の結合の阻害における潜在力を示すα-9インテグリンアンタゴニスト化合物を含む：N-(トルエン-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4(4-メチルピペラジン-1-イルカルボニルオキシ)フェニルアラニン、N-(トルエン-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、N-(1-メチルピラゾール-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、N-(トルエン-4-スルホニル)-L-(1,1-ジオキソ-5,5-ジメチル)チアプロリル-L-4-(N,N-ジメチルカバミルオキシ)フェニルアラニン、N-(トルエン-4-スルホニル)-N-メチル-L-アラニル-L-4-(N,N-ジメチルカバミルオキシ)フェニルアラニン、N-(トルエン-4-スルホニル)-L-[1,1-ジオキソ]チアモルホリン-3-カルボニル]-L-4-(N,N-ジメチルカバミルオキシ)フェニルアラニン、N-(N-p-トルエンスルホニル)プロピル-4-( ピペラジノイルオキシ)フェニルアラニン、N-(N-p-トルエンスルホニル)サルコシル-4-(N,N-ジメチルカバミルオキシ)フェニルアラニン、およびN-(トルエン-4 -スルホニル)-L-(5,5-ジメチル)チアプロリル-L-4-[3-(N,N-ジメチル)プロポキシ]フェニルアラニン。上述の化合物の群は、本質は例示であり、例示的なリガンド、テネイシンへの、α-9インテグリン結合を阻害することにおける、それらの比較的高い潜在力について選択されている。上述の化合物はまた、本発明の別の局面−本明細書中に記載される薬学的組成物および処置の方法において使用するための、候補化合物の豊富な供給源は、α-4/β-1インテグリン（VLA-4）の結合または活性を阻害することが知られている化合物であること−を示す。上述の９個の参照標準化合物はまた、上記の薬学的組成物および処置の方法において使用され得る。別の実施態様において、薬学的組成物および処置の方法は、α-9インテグリンとα-9インテグリンリガンドとの間の結合の阻害を測定するアッセイにおいて測定されるように、約100μＭ未満のK₁またはIC₅₀を有する、α-9インテグリンアンタゴニストを用いる。別の関連する実施態様において、本発明の薬学的組成物および処置の方法において有用である化合物は、式： R¹-SO₂-NR₂-CHR³-Q-CHR⁵-CO₂Hを有し、ここで、 R¹は、アルキル、置換されたアルキル、アリール、置換されたアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロ環式、置換されたヘテロ環式、ヘテロアリール、および置換されたヘテロアリールからなる群より選択され； R²は、水素、アルキル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、ヘテロ環式、置換されたヘテロ環式、置換されたアルキル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリールからなる群より選択され、ならびにR¹およびR²は、R²に結合する窒素原子およびR¹に結合するSO₂基とともに、ヘテロ環式基または置換されたヘテロ環式基を形成し得； R³は、水素、アルキル、置換されたアルキル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、ヘテロ環式、置換されたヘテロ環式からなる群より選択され、ならびにR²がR¹とヘテロ環式基を形成しない場合、R²およびR³は、R²に結合する窒素原子およびR³に結合する炭素原子とともに、ヘテロ環式基または置換されたヘテロ環式基を形成し得； R⁵は、−(CH₂)_x-Ar-R^5'であり、R^5'は、-O-Z-NR⁸R^8'および-O-Z-R¹²からなる群より選択され、ここでR⁸およびR^8'は、水素、アルキル、置換されたアルキル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロ環式、置換されたヘテロ環式からなる群より独立して選択され、ならびにR⁸およびR^8'は結合されて、複素環または置換された複素環を形成し、R¹²は、複素環および置換された複素環からなる群より選択され、そしてＺは、-C(O)-および-SO₂-からなる群より選択され、 Arは、アリール、ヘテロアリール、置換されたアリール、または置換されたヘテロアリールであり、ｘは、１〜４の整数であり；Ｑは、-C(X)NR⁷-であり、ここでR⁷は水素およびアルキルからなる群より選択され；そしてXは酸素および硫黄、ならびにそれらの薬学的に受容可能な塩からなる群より選択される。さらに別の関連する実施態様において、本発明は、小分子化合物を用いる薬学的組成物および方法を含む。化合物は、α-9インテグリンとα-9インテグリンリガンドとの間の結合を阻害するその能力について選択され、上述に列挙される参照化合物の群から選択される化合物の少なくとも1/1000の高さの潜在力である、 α-9インテグリン−α-9インテグリンリガンド結合アッセイにおける潜在力を示すことによって証明される。関連する実施態様において、このような化合物はまた、VCAM-1に対するα-4/β-1インテグリン結合のインヒビターのインヒビターであり、上述に列挙される参照標準の群から選択される化合物によって示される潜在力の少なくとも1/1000の高さの潜在力で、このような結合を阻害するその能力によって証明される。全ての薬学的組成物および処置の方法は、薬学的に有効な投薬量を用い、そして開業医によって選択される特定の処置レジメに適切である賦形剤および様式で送達される。関連する局面によれば、本発明は、α-9インテグリンの関与によって特徴づけられる状態、特に、炎症状態（例えば、上述に列挙される状態）を処置することにおいて有効な治療学的化合物についてスクリーニングする方法を包含する。本方法は、α-9インテグリンリガンドに結合するα-9インテグリンの量を測定するアッセイ系に試験化合物を添加する工程、およびこの化合物が、上述に列挙される参照標準化合物の群から選択される化合物によって示される活性の少なくとも 1/1000である結合阻害活性を示す場合、有効な治療薬物候補として試験化合物を選択する工程を包含する。この態様において選択される候補化合物は、本明細書中に記載される薬学的組成物および処置の方法において使用する前に、当該分野において周知の方法に従って、安全性および毒性についてさらに試験される。スクリーニング方法において試験するための試験化合物の選択は、現在市販されているかまたは科学文献を通して利用可能である、豊富なコンビナトリアルライブラリーを考慮して、開業医の能力の範囲内で十分である。それにもかかわらず、本発明によれば、特に好ましい試験化合物は、α-4/β-1インテグリンと任意のそのリガンド（しかし特に、VCAM-1）との間の結合を調節する（特に、阻害する）ことにおいて活性を示すことが知られる化合物である。好ましい実施態様によれば、化合物は、上述に列挙される参照標準の群から選択される化合物によって示される阻害性潜在力の少なくとも1/1000の高さの阻害性潜在力を示す場合、アッセイによって選択される。関連する実施態様によれば、好ましい化合物は、式：R¹-SO₂-NR₂-CHR³-Q-CHR⁵-CO₂H（ここで置換基および置換部分は、上記のように定義される）を有する群から選択される。これらの化合物はまた、共有に係る親出願である、1997年７月31日に出願された米国特許出願第08/904,424号および1997年８月１日に出願された米国仮出願第60/054,453号（これらは、本明細書中に参考として援用される）に記載される。本発明のこれらのおよび他の局面は、以下の本発明の詳細な説明が、添付の図面と合わせて読まれる場合に、より十分に明白になる。図面の簡単な説明図１は、ヒト好中球におけるα-9インテグリンの発現を示す棒グラフを示す；および図２は、fMLPによる活性化後のヒト好中球におけるα-9インテグリン（「抗-a 9インテグリン」）の発現の選択的な増強（右側の棒）を、コントロール（「イソ型コントロール」）と比較して示す棒グラフを示す。発明の詳細な説明Ｉ．定義この節は、本明細書中で使用される特定の用語の定義を提供する。特に規定されない限り、全ての他の使用される他の科学的および技術的用語は、本発明が属する当業者によって一般に理解されるのと同じ意味を有する。本発明の目的のための簡便な参考文献は、Stedman's Medical Dictlonary第24版（Willlamsおよび Wilkins，Baltimore）である。用語「α-9インテグリン」は、β₁インテグリンファミリーのヘテロ二量体タンパク質メンバーをいい、これはまた、α₉β₁といわれる。用語「α-9インテグリンリガンド」は、α-9インテグリンが、インビトロで、または好ましくはインビボで結合する分子をいう。好ましくは、このような結合は、少なくとも約10^-4M、および典型的には、約10^-5〜10^-8Mの間の範囲の結合親和性または結合力で生じる。この用語はまた、このような結合親和性の特性を保有するこのような化合物のフラグメントをいう。例示的なα-9インテグリンリガンドとしては、テネイシン、オステオポンチン、およびVCAM-1が挙げられるが、これらに限定されない。本明細書中で使用されるように、用語「結合親和性」は、２つ以上の分子がともに結合する、相対強度をいう。本明細書中でのこの使用において、この用語は、代表的には、所望の効果（例えば、１/２最大結合または応答（EC₅₀もしくはK_d ）、または結合の阻害（IC₅₀もしくはK_i）を認めるのに必要な化合物のモル量に関して表現されるが、本明細書中で記載されるインテグリン飽和アッセイにおけるように、リガンドの最小の飽和を認めるのに必要な化合物の量を表すために、比較上の意味においても使用され得る。用語「潜在力」は、一般に、相対的な親和性および効力をいうために使用される；２つが同じモル濃度で比較される場合に、ある化合物が参照化合物よりも効果的である場合、またはある化合物がより低い濃度で同じ効果を生じる場合、その化合物は別の化合物よりも「高い潜在力」を有する。この用語はまた、任意の効果を認めるのに必要とされる種々の化合物の量を比較するために使用され得る。一例として、試験化合物が、参照標準について必要とされる濃度のわずか1000 倍のモル濃度で参照標準と同じ効果を生じる場合、試験化合物は「参照標準の潜在力の少なくとも1/1000の高さの潜在力」を示すといわれる。それゆえ、参照標準が１μＭの濃度で所定の効果を生じる場合、試験化合物は、これが、1000μＭ（１mM）未満の任意の濃度で同じ効果を生じ得る場合、潜在力として少なくとも 1/1000である。用語「薬学的組成物」は、薬物または生物製剤の薬学的に活性な調製物をいい、これは、薬学的賦形剤（例えば、緩衝化生理食塩水もしくは被験体への投与のために適切な生理学的緩衝液）において調製される。適切な賦形剤（希釈剤、充填剤などを含むがこれらに限定されない）は、投与の予測される態様に基づいて処方され、および当業者によって容易に決定される。用語「小分子」は、一般に、約2000未満の、および好ましくは約1000未満の分子量を有する有機化合物をいう；小分子は、短いペプチドおよびペプチド模倣物を含み得る。用語「α-4/β-1インテグリン」は、ヘテロ二量体タンパク質をいい、α₄β₁ およびVLA-4ともまたいわれる。用語「α-4/β-1インテグリンリガンド」は、α-4/β-1インテグリンがインビトロで、または好ましくはインビボで結合する分子をいう。好ましくは、このような結合は、少なくとも約10^-4Mの、そして代表的には、約10^-5〜10^-8Mの間の範囲の結合親和性で生じる。この用語はまた、このような結合親和性の特性を有するこのような化合物のフラグメントをいう。例示的なα-4/β-1インテグリンリガンドとしては、フィブロネクチン（HEPIIドメインおよびCS1ドメイン）、VCAM -1、オステオポンチン、およびmadCAM1が挙げられるが、これらに限定されない。一般に、このようなリガンドは、配列EILDVを有するペプチド結合部位を含む。用語「α-9インテグリンリガンドへのα-9インテグリンの結合に関連する状態」とは、内因性のα-9インテグリンリガンドに結合される、正常に比べて増加されたかまたは減少されたα-9インテグリンの存在と一致する特性を有する状態を記載する。増加されたα-9インテグリン結合の例は、オステオポンチンもしくはテネイシン、または炎症の間の別のα-9リガンドに対する好中球の増加された接着である。本発明を支持して行われた、および本明細書中に記載される研究を考慮して、α-9インテグリンはこのような増加される接着に関与するようである。従って、炎症は、α-9インテグリンの結合を関連する状態を考慮される。「α-9インテグリン調節化合物」あるいは「α-9インテグリン調整化合物」は、α-9インテグリンとα-9インテグリンリガンドとを含む混合物に添加される場合、インテグリン分子とリガンドとの間の結合を、−例えば、このような結合の増加または減少を生じることによって−影響する、化合物であり、好ましくは小分子であるが、そうである必要はない。一例として、テネイシンへのα-9インテグリン結合を阻害または減少する調節化合物は、α-9インテグリンアンタゴニストとしていわれる。適切なコントロールに比較されるときに、適切な統計学的方法によって分析される場合、試験応答が統計学的に有意な変化を示す場合に、効果または応答は、「有意に異なる」、「有意に高い」、または「有意に低い」。一般に、応答または効果が増加または減少されることが言及される場合、観察される増加または減少は、統計学的に有意であること、または適切な実験分析に供される場合に統計学的に有意であると予測されることが意味され得る。共通のアミノ酸は、それらの１文字または３文字略語によって、以下のように言及される：アラニン（Ａ、Ala）、システイン（Ｃ、Cys）、アスパラギン酸（Ｄ、Asp）、グルタミン酸（Ｅ，Glu)、フェニルアラニン（Ｆ，Phe）、グリシン（Ｇ、Gly）、ヒスチジン（Ｈ、His）、イソロイシン（Ｉ、Ile）、リジン（Ｋ、Lys）、ロイシン（Ｌ、Leu）、メチオニン（Ｍ、Met）、アスパラギン（Ｎ、A sn）、プロリン（Ｐ、Pro）、グルタミン（Ｑ、Gln）、アルギニン（Ｒ、Arg）、セリン（Ｓ、Ser）、スレオニン（Ｔ、Thr）、バリン（Ｖ、Val）、トリプトファン（Ｗ、Trp）、チロシン（Ｙ、Tyr）。 I.α-9インテグリンこの節は、α-9インテグリンについてのさらなる背景情報を提供する。これは他のインテグリンからそれを区別するための手段を含む。このような区別する手段は、（ｉ）α₉β₁インテグリンとそのリガンドとの間の結合または結合の阻害を測定し得るアッセイを確立するにおいて、および（ii）好ましくは、α₉β₁インテグリンとそのリガンドとの間の相互作用をブロックし得る小分子アンタゴニストである化合物を同定するにおいて、重要である。Ａ．物理的特徴上記のように、α₉β₁インテグリンは、α₉（または「α-9」）と呼ばれるα サブユニットと、βサブユニット、一般にβ₁(または「β-1」）とからなるヘテロ二量体タンパク質である。２つのサブユニットは、互いに非共有結合的に結合し、そしてそれぞれは、高度に保存された配列GFF(R/K)Rを含む比較的短いカルボキシ末端細胞内ドメイン、単一の膜貫通ドメイン、および細胞の表面に一般に突出する比較的大きいアミノ末端細胞外ドメインからなる。 α-9サブユニットの推定されるアミノ酸配列は、クローニングによって決定されている（Palmer，1993；GENBANKアクセス番号L24158）。ヒトα-9サブユニットは、1006個のアミノ酸のタンパク質である。αサブユニットの種々の形態を比較する研究によって、α-9サブユニットは、α-4インテグリンサブユニットとわずか39％の配列同一一性を示すことが明らかになった。Ｂ．α-9インテグリンの組織局在性および結合選択性 α₉β₁インテグリンは、上記のように、多くの異なる細胞タイプによって発現される。例えば、α₉β₁は、気道平滑筋細胞、および非腸管上皮細胞、ならびに奇形腫細胞株において見出され（Palmer）、そして肝細胞および基底のケラチノサイトにおいて分散して見出される（Yokosaki，1994）。これまで、α-9は、任意の造血細胞に存在することは示されていなかった。図１は、本発明を支持して行われた実験の結果を示し、これは上記の以前に公知の組織分布に加えて、α-9インテグリンはまたヒト好中球によて発現されることを示す。この実験において、α-9サブユニット、α-4サブユニット、およびβ -1サブユニットは、上述のサブユニットのそれぞれと特異的な反応性の、蛍光標識された抗体とヒト好中球とを反応させた後、測定された。これは、驚くべきことに、ヒト好中球がβ-1サブユニットとともにα-9サブユニットを発現することを示し、そしてこれらは、もしあったとしても、α-4サブユニットをほとんど発現しないことを確認した。好中球は、以下に記載されるように、多くの炎症状態、特に、急性の炎症に関与する食細胞血球である。これらの細胞は、それらが、全てのまたはほとんど全ての他の循環する白血球によって発現されるα-4/β-1インテグリンを欠損することによって以前に特徴づけられた。本発明の支持におけるさらなる実験は、α-9インテグリンが、好中球を含む炎症性応答に関与するようであることを示した。ホルミル-Met-Leu-Phe（fMLP）は、炎症に関与する活性化因子である。図２は、コントロールイディオ型特異的マーカーに比較して、fMLPによる活性化後にα-9インテグリンの発現が有意におよび選択的に増加されることを示す、棒グラフである。この増加される発現は、炎症の間、好中球の活性化におけるα-9の関与と一致する。 α-9インテグリンの結合選択性に対する研究により、分子は、「フィブリノーゲン様」タイプ−III反復（「TNfn3」と呼ばれる）で、テネイシンに結合することが明らかになった。テネイシンのこの領域は、他のインテグリン（α₈β₁、α_v β₃、およびα_vβ₆）に優先的に結合する特徴的な「RGD」（Arg-Gly-Asp）ペプチド結合部位を含むが、これは明らかに、α-9インテグリンによって結合される部位ではない（Yokosaki，1994）。むしろ、α₉β₁インテグリンは、ペプチド配列AEIDGIELを含むB-Cループに優先的に結合し、そしてこの配列を含むペプチドはα-9インテグリンを発現する細胞とTNFn3との間の結合を破壊することが示されている（Yokosaki、1998）。 III．α-9インテグリン調節化合物この節は、本発明に従う薬学的組成物および処置方法における使用のために適切なα-9インテグリン調節化合物として使用するための、化合物を同定するための指針を提供する。具体的には、本発明を支持して行われた研究において、α-4 /β-1インテグリンおよびα-9インテグリンは明らかに、上記のそれらの配列およびリガンド結合部位の非類似性にもかかわらず、小分子についての類似の結合部位を共有すること、ならびにこのような部位への結合は、内因性リガンドに結合するそれらの能力を同様に調節するために作用することが、見出されている。それゆえ、本発明の好ましい局面によれば、α-4/β-1インテグリンの、そのリガンドへの結合はまた、α-9インテグリンアッセイにおいて活性を有するようである。従って、以下に記載されるように、α-9インテグリン調節アッセイにおいて試験するための化合物の豊富な供給源は、ペプチドおよびペプチド模倣物を含む小分子からなり、この小分子はα-4/β-1インテグリンアゴニストまたはアンタゴニストとして特徴づけられる。さらなる候補化合物は、種々のライブラリー（以下の、Ｂ部においてより詳細に考察されるような、スクリーニングについて当該分野において周知であり、そして／または市販されているような、コンビナトリアルライブラリー、発酵ブロスおよび溶解物、ファージライブラリーなどを含むがこれらに限定されない）によって、提供される。上記のα-4/β-1調節因子および任意の他の化合物に加えて、このような化合物のライブラリーは、本明細書中に記載される例示のアッセイをに関して、当該分野において公知のアッセイ形式において簡便にスクリーニングされ得る。このようなアッセイはさらに、当該分野において公知の方法に従って、高い処理量の化合物のスクリーニングを提供するために改変され得る。Ａ．α-4/β-1インテグリンアゴニストおよびアンタゴニストごく最近、特徴づけられたα-9インテグリンとは対照的に、α-4/β-1インテグリンは広範に研究されており、および多数の薬物開発プログラムの焦点である。α-4/β-1インテグリンは、好中球を除く造血細胞のほとんどの形態によって発現される（例えば、α₄β₁は、Ｔリンパ球、Ｂリンパ球、単球、および特定の抗原提示細胞によって発現される）。α-4/β-1インテグリンは、フィブロネクチン、粘膜アドレシン（addressin）（MadCAM-1）、血管細胞接着分子-1（VCAM- 1；Cd106）、およびオステオポンチンを含む内因性リガンドを結合する。特に、急性の炎症性応答の間、血管上皮において誘導されるVCAM-1とのその相互作用、白血球でのその存在、および炎症の部位でのこのような白血球の増強された接着におけるその認識される関与は、多様な炎症性疾患（特に、慢性関節リュウマチ、心臓疾患、および潰瘍性大腸炎を含む）を処置するための開発において、α₄ β₁を、化合物についての標的にする。本発明を支持して行われた研究は、α-4/β-1の、その任意のリガンド（VCAM- 1を含む）への結合を調節する化合物はまた、一般に、α-9インテグリンの、そのリガンドへの結合を調節するための良好な候補物であることを明らかにした。より具体的には、以下のIV節において記載されるように、α-4/β-1インテグリンの特異的なアンタゴニストはまた、テネイシンへのα-9インテグリン結合をブロックする。それゆえ、この発見は、本発明の薬学的組成物および方法において使用するための豊富な候補化台物を提供する。例えば、本明細書中に参考として援用される、共有に係る、同時に出願された関連出願の、米国特許出願第号（PCT ）（これは、同じ最初の米国特許出願である、1997年７月31 日に出願された米国特許出願第08/904,424号および1997年８月１日に出願された米国仮出願第60/054,453号（これらは、その全体が本明細書中に参考として援用される）に対して優先権を主張する）は、α-4/β-1インテグリンの、そのリガンドへの結合のインヒビター（すなわち、α₄β₁アンタゴニスト）として特徴づけられている一連のカルバミルオキシ化合物を記載する。この系列のいくつかの例示的な化合物の試験および使用が以下に記載される。このような化合物を作製するための方法は、本明細書中、実施例４に詳述される。同様に、本出願人が所有する米国特許出願の、米国特許出願第08/904,415号、米国特許出願第08/903,585号、米国特許出願第08/904,423号、米国特許出願第08 /920,353号、米国特許出願第08/904,417号、米国特許出願第08/920,394号、および米国特許出願第08/904,416号（これらは全て、1997年７月31日に出願された）は、α-4/β-1インテグリンの、そのリガンドへの結合を阻害する、さらなる、構造的に異なるα-4/β-1インテグリンアンタゴニストを記載する。これによって、上述の出願は、本発明に従って、本発明の主題である薬学的組成物および処置の方法において使用するための候補であるこのような化合物のそれらの技術について、本明細書中に参考として援用される。以下に表すデータを考慮して、多くのこれらの化合物が、α-9インテグリンを阻害するにおいて、α-4/β-1インテグリンを阻害するにおけるのとほぼ等しい潜在力の阻害活性を示すことが理解される。Ｂ．試験化合物の供給源それゆえ、候補α-9インテグリン調節化合物のさらなる供給源が、α-4/β-1 （VLA-4）阻害組成物の少なくとも有意なサブセットが、α-9インテグリンアンタゴニストとして活性であり得るという発見を考慮して、明らかである。すなわち、当業者は、α-4/β-1インテグリンの、そのリガンドへの結合を阻害または増強するとして特徴づけられる化合物は、α-9インテグリンの、そのそれぞれのリガンドへの結合を調節するための強力な候補であることを認識する。それゆえ、本発明の教示を考慮して、例えば、α-4/β-1（VLA-4）阻害組成物について、特許文献または化学文献のデータベースサーチを行うことによって、候補化合物を同定することは、比較的日常的な事柄である。このような化合物をさらに試験する（例えば、結合の特異性および選択性について、ならびに相対的な結合親和性について）ための例示的な方法は、以下のIV節において提供される。自動化された、高い処理量のスクリーニング手順の出現およびコンビナトリアル化学ライブラリーの多様な形態の開発を伴って、当業者は、さらなるα-9調節化合物を、本明細書中に提供されるこのような化合物を選択するための指針を考慮して、同定することは比較的日常的な操作であることを認識する。例えば、本発明に対する限定の手段ではないが、ランダムライブラリーは、材料の豊富な供給源である。さらに、コンビナトリアルライブラリーは、段階的な様式において合成され得る多くのタイプの化合物について生成され得る。このような化合物としては、ペプチド、β-ターン模倣物、多糖、リン脂質、ホルモン、プロスタグランジン、ステロイド、芳香族化合物、ヘテロ環式化合物、ベンゾジアゼピン、オリゴマーのN-置換型グリシン、およびオリゴカルバメートが挙げられる。化合物の大きなコンビナトリアルライブラリーは、Affymax、WO 95/12608、Affimax 、WP 0306121、Coluinbia University WO 94/08051、Pharmacopeia，WO 95/3550 3、およびScripps WO 95/30642（これらのそれぞれは、全ての目的のために本明細書中に参考として援用される）に記載されるコード化合成ライブラリー（ESL ）法によって構築され得る。ペプチドライブラリーはまた、ファージディスプレイほうによって生成され得る。例えば、Devlin、WO 91/18980（本明細書中に参考として援用される）を参照のこと。コンビナトリアルライブラリーおよび他の化合物は、α-9インテグリン活性アッセイ（例えば、１つ以上の本明細書中に記載されるアッセイ）において試験することによって最初にスクリーニングされ、そして化合物は、これが、本明細書中、特にIV節に記載される基準を満たす場合、本発明の薬学的組成物および方法において使用するために選択される。Ｃ．α-9インテグリン調節化合物を含む組成物試験化合物（好ましいが、必ずしも上記のように選択されおよび下記のように試験される必要はない）は、以下に考察されるように、特定の参照化合物によって測定される閾値活性に匹敵する、α-9インテグリンアッセイにおける潜在力を示す場合、本発明の薬学的組成物における使用についてさらに考慮される。このような組成物は、薬学的組成物におけるさらなる使用に適切であり、特定の標的異常に対する適切なインビボモデルにおける試験に供され、および処置される哺乳動物種についての安全性の適切な試験に供される。考えられる適切な投薬量は、以下のＶ節において考察されるように、標準的な薬物動力学分析に従って確立される。一般的な指針としては、化合物の有効な投薬量は、以下に考察されるような、インビトロアッセイまたはインビボアッセイから決定される有効な濃度を参照して、標的組織において有意な生化学的効果を生じるに有効である化合物の量である。 IV．α-9インテグリン結合を調節する化合物についてのスクリーニングアッセイ上記のように、本発明の薬学的組成物および処置の方法における包含に適切な化合物の非常に富化された供給源は、α-4/β-1インテグリンアンタゴニストとして同定される化合物である。科学文献および特許文献を参照するか、または以下のＡ部に例示されるように、α-4/β-1インテグリン結合アッセイにおいて経験的に試験することによるかのいずれかで、このような化合物は同定される。Ｂ部は、本発明に従うα-9インテグリン調節化合物に対する情報を提供する、例示的なα-9インテグリン活性アッセイを記載する。Ａ．α-4/β-1インテグリンの結合アッセイおよび活性アッセイ α-4/β-1インテグリンに結合するにおいて、およびα-4/β-1インテグリンの活性を調節するにおいて、試験化合物が活性であるか否かを決定するための、アッセイおよび試験系は、当該分野において周知である。一例として、しかし限定するものではないが、このようなアッセイとしては、１つ以上のそのリガンド（例えば、VCAM-1）に結合することが知られる細胞に存在するα-4/β-1インテグリンの能力を測定するインビトロアッセイが挙げられる。この目的に適切な、例示的な細胞溶解性VCAM-1タンパク質アッセイは、本明細書中、実施例１に記載され、およびまた、親出願である、1997年７月31日に出願された米国特許出願第08 /904,424号および1997年８月１日に出願された米国仮出願第60/054,453号（これらの両方は、その全体が本明細書中に参考として援用される）においてさらに記載される。これらの書類はまた、このアッセイにおける数百の有効なα-4/β-1 インテグリンアンタゴニスト化合物を同定する結果を記載する。簡潔には、このアッセイにおいて化合物を試験するために、化合物は合成され、上述のIII節に考察されるように、スクリーニングライブラリーを含む市販の供給源から得られる。本発明を支持して行われた実験において、化合物は、例えば、本明細書中、実施例４に詳述されるように合成された。次いで、試験化合物は、スクリーニングアッセイに添加され、インキュベートされ、そしてα-4/β- 1インテグリンとそのリガンド（例えば、VCAM-1）との間の結合の量は、実施例１に詳述されるように測定される。一例として、この相互作用を測定するための適切なアッセイは、β-1サブユニット上の活性化／リガンド誘導性エピトープに結合する抗体を用いる。それゆえ、これは、リガンド活性化細胞にのみ結合し、それゆえ、試験化合物の存在下、どのくらいのリガンドが結合しているのか（または、逆に、置換されているのか）を測定するために使用され得る。簡潔には、本発明を支持して行われた実験において、α4β1インテグリンの活性は、可溶性VCAM-1と、高レベルのα4β1インテグリンを発現するヒトＴ細胞株（Jurkat）との相互作用によって測定された。組換え可溶性VCAM-1は、Ｎ末端に VCAM-1の７つの細胞外ドメインおよびＣ末端にヒトIgG1重鎖定常領域を含むキメラ融合タンパク質として発現された。「15/7」と呼ばれるディテクター抗体は、免疫精製されたα₄β₁インテグリンに対するモノクローナル抗体として生じ、およびU937細胞（ATCC;CRL1593）との表面反応性に基づいて選択され、次いで、Ju ekat細胞およびTHP-1細胞（ATCC;TIB-202）との特異的な反応性についてスクリーニングされた。この抗体は、上記の反応性を有することがさらに特徴づけられた（Yednock）。15/7抗体に類似の抗体は、他の研究者によって調製されており（Luqueら、1996，J．Bio．Chem．271:11067）、そしてこのアッセイにおいて使用され得る。 Jurkat細胞は、氷上で、Mn²⁺および15/7抗体とともにインキュベートされた。 Mn2+は、レセプターを活性化してリガンド結合を増強し、そして15/7はα4β1インテグリンの活性化／リガンド占有化配座を認識し、この配座に分子を固定し、それによってVCAM-1/α4β1インテグリン相互作用を安定化する。次いで、細胞は、室温で30分間、標準的な５点連続希釈を用いる種々の濃度における候補化合物とともに、インキュベートされた。次いで、可溶性組換えVCAM-1融合タンパク質は、Jurkat細胞に添加され、そして氷上で30分間、インキュベートされた。次いで、細胞は、2回洗浄され、そしてPE-結合ヤギF(ab')2抗マウスIgG Fc（Immun otech，Westbrook，ME）中に再懸濁され、氷上で、暗所下、30分間インキュベートされた。細胞は、２回洗浄され、そしてYednockら、上述に記載されるように標準的な蛍光活性化細胞ソーター（「FACS」）分析を用いて分析した。約１mM未満の、および好ましくは約100μＭ未満のIC₅₀を有する化合物は、さらなる試験について考慮されるのに十分な結合活性を保有する。表１は、上述のアッセイにおいて活性を有することが見出された例示的なα-4 /β-1インテグリン阻害化合物を列挙する。さらに、本発明を支持する実験は、親出願である、1997年７月31日に出願された米国特許出願第08/904,424号および 1997年８月１日に出願された米国仮出願第60/054,453号、および／または本出願と同時に出願された共有に係る出願PCT/US98/ （これらの全ては、本明細書中に参考として援用される）において記載される全ての373個の化合物が、以下のＢ部に記載されるように、α-9スクリーニングについての候補として考慮されるのに十分なα-4-β-1インテグリン阻害活性を示すことを明らかにした。 α-4/β-1インテグリン調節活性が、当業者に公知のおよび利用可能な１つ以上の他の適切なアッセイにおいて代替的に測定され得ることが理解される。絶対阻害濃度値は、アッセイおよび操作者によって変わり得るが、約１mM以下、および好ましくは約100μＭ以下の濃度で、活性を阻害（または増強する）化合物は、α-9インテグリン調節剤についての候補として考慮されるべきである。Ｂ．α-9インテグリンの結合アッセイおよび活性アッセイ実施例２は、α-9インテグリンの結合および活性を測定するための例示的なアッセイを記載する。簡便なアッセイは、上記のアッセイに類似するアッセイであり、VCAM-１へのα-４-β-１インテグリンの結合に関して、活性化β-1サブユニットを認識する同じ15/7抗体を使用するが、α-9サブユニットを発現する細胞をアッセイにおいて置換する。本発明を支持して行われた実験において、SW480細胞は、Yokosakiら（1994、1996）(これらの両方は、本明細書中に参考として援用される)により記載されるように、α-9サブユニットの発現可能なコード領域を含むプラスミドでトランスフェクトされた。化合物は、テネイシンへのこれらの細胞の結合を妨げる能力について評価された。本明細書中に記載される化合物１〜９は、約１μＭ未満の濃度で、α₉トランスフェクト細胞においてリガンド占有化エピトープ（15/7）を強力に誘導したが、コントロールの擬トランスフェクト細胞においては誘導しなかった。さらに、結合飽和アッセイにおけるこれらの化合物の活性は、実施例２に記載される方法に従う、テネイシンへのα₉-依存性細胞の接着を阻害するそれらの能力に対応することが見出された。これらの実験に基づいて、α-9阻害活性は、約100μＭ未満の、および好ましくは約20μＭ未満のIC₅₀あるいは有効濃度によって証明されるように、テネイシンへのα-9インテグリン結合の阻害として規定され得る。より一般には、本発明の薬学的組成物および方法において有用な活性なα-9インテグリンアンタゴニスト化合物は、上記の９個の化合物によって例示される潜在力に対して規定される活性を有することが理解される。すなわち、本発明の好ましい実施態様によれば、活性なα-9アンタゴニスト化合物は、本明細書中で例示される最も低い活性の化合物の少なくとも1/1000の、および好ましくは少なくとも1/100の潜在力を反映する活性を有する。従って、化合物のスクリーニングに従事する従業者は、参照標準として上述に列挙される化合物を試験すること、および試験化合物の活性を、上記の参照標準の活性に比較することを理解する。本発明のこの好ましい実施態様によれば、試験化合物は、これが、上述で例示される最も低い活性の化合物の少なくとも1/1000、および好ましくは少なくとも1/ 100である活性を示す場合、活性であると考慮される。一例として、所定のアッセイにおいて最も低い活性の参照標準化合物が１μＭのIC₅₀を示す場合、1000μ Ｍ（１mM）および好ましくは100μＭ程度の高さのIC₅₀を示す試験化合物は、本発明に従う活性なα-9アンタゴニストであると考慮される。上述で参照した参照標準化合物を調製するための方法は、例えば、本明細書中、実施例４において（化合物１〜６）、親出願である、1997年７月31日に出願された米国特許出願第08/904,424号もしくは1997年８月１日に出願された米国仮出願第60/054,453号において（これらの両方は、本出願と同時にPCT/US98/ として出願された）、または1997年７月31日に出願された米国特許出願第08/920 ,394号（PCT/US98/ として同時に出願された）において見出され、これらの特許出願の全ては、本明細書中に参考として援用される。Ｃ．α-9インテグリンについての選択性本発明に従うα-9調節化合物のさらに所望の活性は、α-9インテグリン活性を選択的に調節する能力である。本発明を支持して行われた実験において、化合物は、当該分野において周知の方法および試薬を用いる、種々のインテグリン（Ma dCAM1への結合によって評価されるようなα₄β₇インテグリン、フィブロネクチンへの結合によって評価されるようなα₅β₁インテグリン、ICAM-1への結合によって評価されるようなαＬβ₂インテグリンを含む）の活性を測定するアッセイにおいて、活性について試験された。上述で考察されるように、上述の化合物はまた、VCAM-1に結合するα-4/β-1インテグリンについて試験された。試験された多くのα-4/β-1インテグリンアンタゴニストは、本明細書中に記載されるα-4/β-1インテグリン活性アッセイおよびα-9インテグリン活性アッセイにおいて等価な活性を示したが、アッセイの１つにおいて、阻害について、他に比べて10倍以上の選択性を有する化合物がまた、見出された。試験された本明細書中に記載される９個の全ての参照化合物は、α-9インテグリンアッセイにおいて、α₅β₁インテグリンアッセイおよびα₄β₇インテグリンアッセイに比較して少なくとも100倍の選択性を示し、そしてαLB₂インテグリンアッセイにおいて不活性であった。従って、これらの化合物は、α₅β₁、α₄β₇ 、またはαLB₂活性とは対照的に、α-9インテグリン活性について選択的であると特徴づけられる。このような選択性は、活性の特異性が特に所望される場合、望ましくあり得る。本明細書および特定の試験化合物が使用される特定の治療学的適用の教示により導かれて、当業者は、（ａ）比較の目的のために適切な薬物活性アッセイを決定し得、および（ｂ）このような治療学的適用の情況において受容可能である選択比を選択し得る。Ｄ．α-9インテグリン調節化合物の選択についての基準本発明に従う活性なα-9インテグリン調節化合物は、α-9インテグリンと、１つ以上のそのリガンド（例えば、テネイシン、オステオポンチン、またはVCAM-1 ）との間の結合を、薬学的組成物を提供するのに十分な潜在力である濃度で、増加または減少させる。一般に、有用な薬物は、約100μＭ未満の、および好ましくは約20μＭ未満の濃度で、インビトロまたはインビボにおいて活性であることが理解される。それゆえ、本発明によれば、有用なα-9インテグリン調節化合物は、本明細書中に記載されるように、適切なα-9インテグリン活性においてこの濃度の範囲で活性である。本明細書中で例示されるのは、多くの活性なα-9インテグリンアンタゴニストあるいはその全てが活性であるために必要な潜在力を有する阻害化合物である。本発明によれば、これらの化合物は、例示のα-9アンタゴニスト活性アッセイまたは任意の他の適切なα-9活性アッセイにおける参照標準として使用され得る。同じアッセイにおいて試験される（run）化合物は、これが、本明細書中に示される化合物１〜９から選択される最も低い活性の参照化合物の少なくとも1/1000 、および好ましくは少なくとも1/100の潜在力である活性を示す場合、活性であると考慮される。本明細書中に例示される、本発明の特に有用な実施態様によれば、α-4/β-1 調節活性を有する化合物は、α-9調節化合物を同定するための開始化合物の特に有用な「ライブラリー」を形成することが理解される。これは、本発明の薬学的組成物および方法において使用するための化合物を選択するために、有用であるが、必須の基準ではない。さらに、他のインテグリンまたは他の薬理学的活性に比較して、α-9インテグリン活性の調節に比較的選択的であるα-9調節化合物を選択することが、有利であり得ることが理解される。選択性についての示唆される基準は、上述に提供される。本明細書中に記載される薬学的組成物および処置方法において有用な化合物は、受容可能なレベルの毒性に適合させるべきであることがさらに理解される；当業者はさらに、当該分野において公知の標準的な方法、および／または適切な規制機関によって指令される方法に従って、試験化合物を毒性アッセイに供する。Ｖ．有用性本活性に従って選択されるα-9インテグリン調節化合物は、薬学的組成物、処置の方法における有用性を有する。さらに、上記の選択アッセイは、このような化合物および方法において使用するための化合物を同定するにおいて有用である。Ａ．α-9インテグリン結合に関連した、薬学的組成物および障害の処置本発明に従って同定および選択されるα-9インテグリン調節化合物は、α-9インテグリン活性に関連した多くの障害における使用を見出す。特に、α-9インテグリンの好中球局在化に関して本明細書中に記載された発見、およびVCAM-1と相互作用するその能力を考慮して、α-9インテグリン阻害化合物は、特に、炎症性成分を含む多様な障害を含む、特に炎症性成分がα-9インテグリンへのVLA-4の結合に関連する障害を処置するにおける有用性を見出すことが理解される。１．治療学的効能本発明の薬学的組成物は、多くの疾患および障害に関連する細胞接着をブロックまたは阻害するために使用され得る。例えば、多くの炎症性障害は、インテグリンまたは好中球に関連する。処置可能な障害としては、例えば、移植片拒絶（例えば、同種移植片拒絶）、アルツハイマー病、アテローム性動脈硬化症、AIDS 痴呆、糖尿病（急性若年発症糖尿病を含む）、網膜炎、ガン転移、慢性関節リュウマチ、種々の肺障害（喘息を含む）、腎炎、ならびに急性のおよび慢性の炎症（アトピー性皮膚炎を含む）、乾癬、心筋虚血、ならびに炎症性腸疾患（クローン病および潰瘍性大腸炎を含む）が挙げられる。好ましい実施態様において、薬学的組成物組成物は、アルツハイマー病、AIDS痴呆、多発性硬化症（MS）、ウイルス性髄膜炎、および脳炎のような炎症性脳障害、ならびに発作（脳虚血）関連障害を処置するために使用される。より具体的には、α-9インテグリン結合は、α-9インテグリンによって媒介される炎症状態についてのインビボでの有用性が予測されるので、本発明の組成物および方法は、一例として、気道過応答性および慢性喘息とともに生じる閉塞、アテローム性動脈硬化症における平滑筋細胞の増殖、血管形成術後の血管閉塞、腎疾患の結果としての線維症および糸球体瘢痕化、大動脈狭窄、慢性関節リュウマチにおける滑膜の肥大、ならびに潰瘍性大腸炎およびクローン病の進行とともに生じる炎症および瘢痕化を処置するために使用され得る。本発明によれば、α-9インテグリン調節化合物、特に阻害活性を示す化合物は、全てではないにしても、多くの上述の障害を処置するにおける有用性を見出すことが理解される。次いで、本明細書中に記載される方法に従って阻害活性について選択される化合物は、例えば、投薬量、分配の容量などを決定するために、適切な動物モデルにおいて試験される。効力はまた、当該分野において周知であるこのようなモデルにおいて確認され得る。例えば、炎症性応答を処置するにおける効力を実証するための適切なインビボモデルとしては、マウス、ラット、モルモット、ヤギ、または霊長類における喘息モデル、ならびにα-9インテグリンが関与する他の炎症性モデルが挙げられる。喘息は、種々の気管支気道の発作性狭窄を増す、種々の刺激に対する気管気管支の樹状分岐の増加される応答性によって特徴づけられる。刺激は、IgE−コート化肥満細胞から炎症の種々のメディエーター（ヒスタミン、好酸性および好中球性の化学走性因子、ロイコトリエン（leukotrine）、プロスタグランジン、および血小板活性化因子を含む）の放出を引き起こす。これらの因子の放出は、好塩基球、好酸球、および好中球を補充し、これは炎症性損傷を引き起こす。本発明によれば、気道過応答性および慢性喘息とともに生じる閉塞は、少なくとも部分的には、α-9インテグリン結合相互作用によって媒介されることが考えられる。これは、本明細書中、実施例３に記載されるような標準モデルにおいて証明される。炎症性大腸疾患は、クローン病および潰瘍性大腸炎として呼ばれる２つの類似の疾患についての集合的な用語である。クローン病は、肉芽腫性の炎症反応による、大腸壁の全ての層の、はっきりと範囲が定められたおよび典型的に経壁的な関与によって特徴づけられる突発性の、慢性潰瘍狭窄性の炎症性疾患である。口から肛門まで、胃腸管の任意のセグメントが関与し得るが、この疾患は、末端回腸および／または結腸を最も一般に罹患させる。潰瘍性大腸炎は、大腸粘膜および粘膜下組織に大きく制限される。リンパ球およびマクロファージは、炎症性大腸疾患の病変において非常に多く、ならびに炎症性損傷に寄与し得る。アテローム性動脈硬化症は、動脈（例えば、冠状動脈、頸動脈、大動脈、および腸骨動脈）の疾患である。基本的な病変であるアテロームは、内膜内のじゅく状の（raised）病巣プラークからなり、脂質の芯および被覆する繊維性のおおいを有する。アテロームは、動脈血流を傷つけ、罹患動脈を弱くする。心筋梗塞および脳梗塞は、この疾患の主な結果である。マクロファージおよび白血球は、アテロームに対して補充され、そして炎症性損傷に寄与する。慢性関節リュウマチは、主に関節の障害および破壊を引き起こす、慢性の、再発する炎症性疾患である。慢性関節リュウマチは、通常、手および足の小関節を最初に罹患させるが、次いで、手根、肘、足根関節、および膝を包含し得る。関節炎は、滑膜細胞と、循環から関節の滑膜内層へ浸潤する白血球との相互作用から生じる。例えば、Paul，Immunology（第３版、Raven Press，1993）を参照のこと。本発明の化合物についての別の効能は、VLA-4によって媒介される器官または移植片拒絶の処置においてである。近年にわたって、組織および器官（例えば、皮膚、腎臓、肝臓、心臓、肺、膵臓、および骨髄）を移植するための外科的技術の効率においてかなりの改良がなされてきた。おそらく、主な未解決の問題は、移植された同種移植片または器官に対して、受容者における免疫寛容を誘導するための、満足のいく薬剤の欠損である。同種の細胞または器官が、宿主に移植される（すなわち、提供者および被提供者が同じ種由来の異なる個体である）場合、宿主の免疫系は、移植片における外来抗原に対して免疫応答を開始し（対宿主性移植片病）、移植された組織の破壊を導くようである。CD8+細胞、CD4細胞、および単球は全て、移植片組織の拒絶に関与する。α-9インテグリンに結合する本発明の化合物は、とりわけ、被提供者における同種抗原誘導性の免疫応答をブロックし、それによって、このような細胞が移植された組織または器官の破壊に関与することを防止するために有用である。例えば、Paulら、Transplant Inter na tional ９，420-425(1996)；Georczynskiら、Immunology 87，573-580(1996)；G eorcynskiら、Transplant Immunol．3，55-61(1995)；Yangら、Transplantation 60，71-76(1995)；Andersonら、APMIS 102，23-27(1994)を参照のこと。 α-9インテグリンに結合する、本発明の化合物についての関連の使用は、「対宿主性移植片」病（GVHD）に関与する免疫応答を調節するにおいてである。例えば、Schlegelら、J．Immunol．155，3856-3865(1995)を参照のこと。GVHDは、免疫適格細胞が、同種の受容者に移される場合に生じる強力に致死的な疾患である。この状況において、提供者の免疫適格細胞は、受容者における組織を攻撃し得る。皮膚、腸上皮、および肝臓の組織は、頻繁な標的であり、ならびにGVHDの進行の間、破壊され得る。この疾患は、免疫組織が移植される場合（例えば、骨髄移移植）、特に重篤な問題を示すが；他の症例（心臓移植および肝臓移植を含む）においても、ほとんど重篤でないGVHDが同様に報告されている。本発明の治療学的薬剤は、とりわけ、提供者のＴ細胞の活性化をブロックし、それによって宿主における標的細胞を溶解するその能力を妨げるために使用される。本発明の化合物のさらなる使用は、腫瘍転移を阻害することである。いくつかの肺瘍細胞は、VLA-4のようなインテグリンを発現すること、および内皮細胞へのこのような細胞の接着をブロックすることが報告されている。Steinbackら、U rol．Res．23，175-83(1955)；Oroszら、Int．J．Cancer 60，867-71(1995)；Fr eedmanら、Leuk．Lymphoma 13，47-52(1994);Okaharaら、Cancer Res．54，3233 -6(1994)。本発明の化合物のさらなる使用は、多発性硬化症を処置することにおいてである。多発性硬化症は、合衆国において推定250,000〜350,000人に影響を及ぼす進行性の神経性自己免疫疾患である。多発性硬化症は、特定の白血球がミエリン（神経繊維を覆う絶縁鞘）を攻撃して、ミエリンの破壊を開始する、特定の自己免疫反応の結果であると考えられている。多発性硬化症についての動物モデルにおいて、VLA-4のようなインテグリンに対して指向されるマウスモノクローナル抗体は、内皮への白血球の接着をブロックすること、従って、動物における中枢神経系の炎症およびその後の麻痺を防止することが示されている。２．薬学的組成物本発明の薬学的組成物は、多様な薬物送達系における使用に適切である。本発明における使用に適切な処方物は、Remington's Pharmaceutical Sciences，Mac e Publishing Company，Philadelphia，PA，第17版（1985）に見出される。このような薬学的組成物は、特に、上記の第１部に考察されるような、炎症性成分を有する疾患を処置するにおいて有用である。本発明の薬学的組成物はまた、例えば、炎症の部位を同定するためのインビボ診断画像化において使用され得、放射性同位体が、代表的に、周知の技術に従って使用される。放射性同位体は、中間の官能基を用いて直接的または間接的のいずれかで、ペプチドに結合し得る。例えば、ジエチレントリアミン五酢酸（DTPA ）およびエチレンジアミン四酢酸（EDTA）のようなキレート剤、ならびに類似の分子が、金属イオン放射性同位体にタンパク質を結合するために使用されてきた。複合体はまた、インビボ診断の目的のために、磁気共鳴画像化（MRI）または電子スピン共鳴（ESR）（これらの両方は周知である）においてのように、常磁性同位体で標識され得る。一般に、診断画像を可視化するための任意の従来の方法が使用され得る。通常、γ-および陽電子-放射性同位体は、カメラの画像化について使用され、そして常磁性同位体は、MR1について使用される。従って、化合物は、個体における炎症性応答の寛解の過程をモニターするために使用され得る。α-9インテグリンを発現するマクロファージおよび／もしくは好中球の増加または減少を測定することにより、疾患を寛解することを目指す特定の治療措置が有効である否かを決定することが可能である。所望の生物学的活性を有する化合物は、改善された薬理学的特性（例えば、インビボ安定性、生物学的利用能）のような所望の特性、または診断の適用において検出される能力を提供するために必要に応じて改変され得る。例えば、本明細書中に記載されるスルホンアミド組成物における１つ以上のD-アミノ酸の包含は、代表的にインビボ安定性を増加する。安定性は、ペプチダーゼ、またはヒト血漿もしくは血清とのインキュベーションの間のタンパク質の半減期を測定することによるような、多様な方法においてアッセイされ得る。多くのこのようなタンパク質安定性アッセイが記載されている（例えば、Verhoefら、Eur．J．Drug Me tab．Pharmacokinet.，1990，15(2):83-93を参照のこと）。血清半減期を増強するために、化合物はカプセル化され得るか、リポソームの内腔へ導入され得るか、コロイドとして調製され得るか、または化合物の延長された血清半減期を提供する他の従来の技術が用いられ得る。Szokaら、米国特許第4,235,871号、同第4,501,728号、および同第4,837,028号（これらのそれぞれは、本明細書中に参考として援用される）において記載されるように、多様な方法がリポソームを調製するために利用可能である。適切な処置投薬量、および投薬スケジュールは、処置される状態、および多くの変数（投与の意図される態様、活性な化合物の薬物動力学、被験体の大きさを含むが、これらに限定されない）に従って決定される。例えば、静脈内投与について、用量は、典型的に、１kg体重あたり約20μｇ〜約500μｇの範囲、好ましくは１kg体重当たり約100μｇ〜約300μｇの範囲においてである。鼻腔内投与についての適切な投薬量範囲は、一般に、１kg体重あたり約0.1pg〜１mgである。投薬量は、適切な推定量に基づき得るか、または当業者によって経験的に決定され得る。一般に、相対的な投薬量は、本明細書中に記載される１つ以上のスクリーニングアッセイにおける効力の比較に基づいて評価され得る。有効な用量は、インビトロ試験系または動物モデル試験系に由来する用量−応答曲線から推定され得る。一般に、有効な投薬量は、本明細書中で記載される推測的なインビトロアッセイから確立され得る。すなわち、生体における標的組織で、このようなアッセイにおける化合物IC₅₀の1/10〜10倍の濃度の範囲である化合物の濃度であるように、有効用量は算定される。患者に投与される組成物は、上記の薬学的組成物の形態である。これらの組成物は、従来の滅菌化技術によって滅菌され得るか、または滅菌濾過され得る。得られる水溶液は、そのまま使用のためにパッケージされ得るか、または凍結乾燥され得、凍結乾燥された調製物は、投与の前に滅菌の水性キャリアと合わせられる。化合物のpHは、代表的には３と11との間であり、より好ましくは５〜９であり、最も好ましくは、７〜８である。いくつかの上述の腑形剤、キャリア、または安定化剤の使用により、薬学的塩の形成を生じることが理解される。患者に投与される量は、投与されるもの、投与の目的（例えば、予防または治療）、患者の状態、投与の様式などに依存して変化する。治療学的適用において、組成物は、疾患およびその合併症の症状を治癒するか、部分的に停止するのに十分な量で、すでに疾患を被る患者に投与される。これを達成するのに十分な量は、「薬学的に有効な用量」として規定される。この使用について有効な量は、処置される疾患の状態、ならびに炎症の重篤度、患者の年齢、体重、および一般的な状態などのような要因に依存する、主治医の判断による疾患の状態に依存する。Ｂ．薬物スクリーニングアッセイ本明細書中に記載されるスクリーニングアッセイは、上記の処置方法および薬学的組成物における使用のために、新規な化合物を同定することにおいて有用である。その最も基礎で、スクリーニングアッセイは、α-9インテグリンと１つ以上のそのリガンド（例えば、オステオポンチン、VCAM-1、またはテネイシン）との間の結合を妨げる（または増強する）それらの能力について、候補化合物を試験する工程を包含する。試験化合物はまた、このような結合を競合的に阻害する能力について、またはα-9インテグリンと、α-9インテグリンに結合することが既知である標識化化合物（例えば、本明細書中に記載される化合物もしくはα-9 インテグリンに対する抗体のうちの１つ）との間の結合を拮抗的に阻害する能力について試験され得る。好ましくは、スクリーニングアッセイは、α-9インテグリン阻害化合物を同定するために使用される。なぜなら、本発明によれば、このような化合物は、上記のように、多様な状態における炎症を処置することにおいて、特に有用だからである。本発明のこの局面によれば、試験化合物は、α-9インテグリンと１つ以上のそのリガンド（例えば、オステオポンチン、VCAM-1、またはテネイシン）との間の結合を検出するように構成されたアッセイ系に添加され、そして化合物はこのような結合を阻害する能力について試験される。特に有用な化合物は、本明細書中に提供される参照標準（表１を参照のこと）によって規定される活性範囲の範囲の（またはその活性の範囲よりも多くとも約100倍強力ではない）活性を示す化合物である。上記のように、試験化合物は種々の供給源（コンビナトリアルライブラリー、発酵培地などを含む）から選択され得る。本明細書中で同定される、特に良好な供給源は、α-4/β-1インテグリン（VLA-4）と１つ以上のそのリガンド（例えば、VCAM-1）との間の結合を阻害することが知られるか、または阻害することが見出される化合物のプールである。多くの形式が、薬物についてスクリーニングするためのアッセイについて使用され得る。好ましい実施態様において、アッセイは、高い処理量のスクリーニングについて適合される。例えば、α-9インテグリンまたはα-9インテグリンを発現する細胞からの膜は、固体表面（例えば、必要に応じて分子の非リガンド結合部分に対する抗体のような結合補助とともに適合される、マイクロタイタープレートまたはガラス繊維フィルター）上に固定化され得る。このようなアッセイ形式は、一般に、少なくとも１つの検出可能に標識されるアッセイ成分を用いる。標識系は、種々の形態であり得る。標識は、当該分野において周知の方法に従って、アッセイの所望の成分に、直接的または間接的に結合され得る。広範な種々の標識が使用され得る。この成分は、いくつかの方法のいずれか１つによって標識され得る。最も一般的な検出の方法は、³Ｈ、¹²⁵Ｉ、³⁵Ｓ、¹⁴Ｃ、または³²Ｐ標識化合物などを用いる、オートラジオグラフィーの使用である。非放射性標識としては、標識化抗体、発蛍光団、化学発光剤、酵素、および標識化リガンドについての特異的な結合対メンバーとして作用し得る抗体に結合するリガンドが挙げられる。標識の選択は、必要とされる感度、化合物との結合の容易さ、安定性の必要条件、および利用可能な器機に依存する。本発明の薬学的組成物のインビトロ使用は、α-9インテグリンを発現する、好中球を含むマクロファージの存在を検出することによって、炎症性応答をモニターするような、診断的適用を含む。本発明の組成物はまた、このような細胞を単離または標識するために使用され得る。脳内皮細胞への接着をブロックする能力を測定するためのアッセイについて、国際特許出願公開第WO 91/05038号に記載されるアッセイが、当業者の十分な範囲内の方法に従って、本明細書中に記載される試薬に適合するので、特に好ましい。この出願は、その全体が本明細書中に参考として援用される。以下の実施例は、本発明を説明するが、本発明を限定することはいかようにも意図されない。実施例実施例１：α₄β₁インテグリン（VLA-4）への化合物の結合Ａ．15/7抗体アッセイ以下に記載される細胞接着アッセイは、Yednockら(1995)（これは、本明細書中に参考として援用される）による刊行物に詳述されるアッセイに基づく。α₄ β₁インテグリンへの候補化合物の結合を評価するために、インビトロアッセイを使用した。このアッセイにおいて結合する化合物は、従来のアッセイ（例えば、拮抗的結合アッセイ）によって、生物学的サンプル中のVCAM-1レベルを評価するために使用され得る。このアッセイは、約１nM程度の低さのIC₅₀に感受性である。 α₄β₁インテグリンの活性を、可溶性VCAM-1と、高レベルのα4β1インテグリンを発現するヒトＴ細胞株であるJurkat細胞（例えば、アメリカンタイプカルチャーコレクション番号TIB 152、TIB 153、およびCRL 8163；アメリカンタイプカルチャーコレクション、Manassas，VA）との相互作用によって測定した。VCAM-1 は、α4β1インテグリン依存性の様式において、細胞表面と相互作用する（Yedn ock）。組換えの可溶性VCAM-1を、Ｎ末端においてVCAM-1の７つの細胞外ドメインおよびＣ末端においてヒトIgG重鎖定常領域を含む、キメラ融合タンパク質として発現させた。VCAM-1融合タンパク質を、Yednock、前出によって記載される様式によって作製し、そして精製した。Jurkat細胞を、Yednock、前出に記載されるように、10％ウシ胎児血清、ペニシリン、ストレプトマイシン、およびグルタミンを補充したRPMI 1640中で増殖させた。Jurkat細胞を、1.5mM MnCl2および5μｇ/ mLの15/7抗体とともに、30分間氷上でインキュベートした。Mn+2は、レセプターを活性化して、リガンド結合を増強し、そして15/7は、α₄β₁インテグリンの活性化／リガンド占有立体構造を認識して、この立体構造に分子を固定し、それによってVCAM-1/α₄β₁インテグリン相互作用を安定化する、モノクローナル抗体である。Yednockら、前出。15/7抗体に類似する抗体が、他の研究者によって調製されており（Luqueら、1996、J．Bio．Chem．271:11067）、そしてこのアッセイにおいて使用され得る。次いで、細胞を、室温で30分間、標準的な５点連続希釈を用いて、66μｇ/mL 〜0.01μｇ/mLの範囲の種々の濃度の候補化合物とともにインキュベートした。次いで、15μＬの可溶性の組換えVCAM-1融合タンパク質を、Jurkat細胞に添加し、そして30分間氷上でインキュベートした。（Yednockら、前出）。次いで、細胞を2回洗浄し、そしてPE-結合ヤギF(ab')2抗マウスIgG Fc（Immunotech，Westb rook，ME）に、1:200で再懸濁し、そして氷上、暗所下で、30分間、インキュベートした。細胞を２回洗浄し、そして、Yednockらに記載されるように、標準的な蛍光標示式細胞分取器（「FACS」）分析を用いて分析した。このアッセイにおいて試験した場合、親出願の米国特許出願第08/904,424（PC T/US98/ ）の実施例１〜373に記載される化合物、または対応のエステル化合物のカルボン酸塩（すなわち、プロドラッグ）のそれぞれは、15μＭ以下のIC₅₀ を示した。Ｂ．α₄β₁への候補化合物の結合を決定するためのインビトロ飽和アッセイ対数増殖期のJurkat細胞を洗浄し、そして20μｇ/mlの15/7抗体（上記の実施例に記載される）を含有する正常な動物血漿中に再懸濁した。Jurkat細胞を、標準曲線についての標準的な12点連続希釈を用いて、66μｇ/mL〜0.01μｇ/mLの範囲の種々の濃度において既知の候補化合物量を含有する正常な血漿サンプル、または候補化合物で処置した動物の抹消血から得た血漿サンプルのいずれかを、２倍希釈した。次いで、細胞を、室温で30分間インキュベートし、２%ウシ胎児血清および１mMの塩化カルシウムおよび塩化マグネシウムの各々を含有するリン酸緩衝化生理食塩水（「PBS」）(アッセイ培地)で、２回洗浄して、未結合の15/7 抗体を除去した。次いで、フィコエリトリン結合ヤギF(ab')2抗マウスIgG Fc（I mmunotech，Westbrook，ME）（これは、試験される動物種からの５%血清との同時インキュベーションによって、任意の非特異的な交差反応性について吸収された）に、1:200で細胞を曝露し、そして暗所で、４?Cにて30分間、インキュベートした。細胞を、アッセイ培地で２回洗浄し、そしてアッセイ培地に再懸濁した。次いで、Yednockら、J．Bio．Chem.，1995，270:28740に記載されるように、標準的な蛍光標示式細胞分取器（「FACS」）分析を用いて、細胞を分析した。データを、例えば、正常な用量応答様式において、蛍光対用量としてグラフ化した。上部プラトーの曲線を生じる用量レベルは、インビボモデルにおける効力を得るために必要とされるレベルを表す。以下の実施例２に記載するように、α-9インテグリンを発現する適切な細胞を用いて、他のインテグリン（例えば、α9β₁インテグリン）の結合部位を飽和するために必要とされる血漿レベルを決定するために、このアッセイをまた使用した。実施例２：テネイシンへの細胞接着以下のアッセイは、最初にYokosakiら（1994）によって記載され、そして以下の実施例３に詳述する喘息モデルによって例示されるような、α-9インテグリン結合に関連する炎症性疾患を処置するために必要とされる化合物の血清レベルを評価するために、使用され得る。細胞外マトリクスタンパク質への細胞接着の評価を、以下のように行った：簡潔には、非組織培養処理ポリスチレン96ウエルの平底マイクロタイタープレート（Linbro/Titertek，Flow Laboratories，McLean，VA）のウエルを、37℃にて１時間、または４℃にて16時間の、PBS中のインタクトなテネイシン（10μｇ/ml）または組換えテネイシンフラグメント（１μｇ/ml〜10μｇ/ml）とのインキュベーションによって、被覆した。ウェルをPBSで洗浄し、次いで、DMEM中の１%ウシ血清アルブミンでブロックした。50,000個の細胞（α-9インテグリンでトランスフェクトされたSW480細胞株（Yokosaki，1996）、D.Sheppard、Dept．of Medici ne，University of California，San Fransiscoの贈与物）を、0.05%のウシ血清アルブミンを含む200μｌの無血清DMEMにおいて各ウェルに添加した。ブロッキング実験のために、細胞を、プレーティングする前に、30分間４℃にて、関連の試薬とともにインキュベートした。プレートを10×gにて５分間遠心分離し、次いで５%CO₂の加湿化雰囲気中、１時間、37℃にてインキュベートした。非接着細胞を、48×gにて５分間、逆向き(top-side-down)で遠心分離によって除去した。接着した細胞を１%のホルムアルデヒドで固定して、0.5クリスタルバイオレットで染色し、そして過剰の染料をPBSで洗い流した。細胞を、50μｌの２% Triton X-100に可溶化し、そしてMicroplate Reader（Bio-Rad）において595nmでの吸光度を測定することによって定量した。このアッセイにおけるポジティブな接着結果は、増加された吸光度に相関する。単離された好中球の集団はまた、上述のアッセイにおいて、トランスフェクトした細胞の代わりに使用され得る。さらに、フィブロネクチン、VCAM-1、またはオステオポンチンのようなリガンドが、このアッセイにおいて置換され得る。実施例３：喘息モデル α−９インテグリンにより媒介される炎症状態は、例えば、気道過剰応答および慢性喘息とともに発生する閉塞を含む。以下は、喘息モデルを記載し、これは、喘息を処置する際の使用のための本発明の化合物のインビボ効果を研究するために使用され得る。 Abrahamら、J.Clin.Invest．93:776-787(1994)およびAbrahamら、Am J.Respir Crit Care Med、156:696-703(1997)（その両方は、その全体が参考として援用される）により記載される手順に従い、本発明の化合物は、エアロゾル中に処方され、そしてAscaris sunm抗原に対して過敏性であるヒツジに投与される。初期の抗原誘発気管支応答を低減させ、そして／または後期の気道応答を遮断する（例えば、抗原誘発後期応答および気道過敏性（「AHR」）に対する保護的効果を有する）化合物は、このモデルにおいて活性であると見なされる。吸引したAsca ris suum抗原に対して初期および後期の両方の気管支応答の発症を示すアレルギー性ヒツジを使用して、候補化合物の気道効果を研究する。鼻孔の２％のリドカインの局所麻酔後に、バルーンカテーテルを鼻孔を通して食道の低部にまで進ませた。次いで、動物に、曲がった気管内チューブを、他方の鼻孔に、フレキシブル光ファイバー気管支鏡をガイドとして挿管した。胸膜圧をAbraham(1994)に従って測定する。エアロゾル（以下の処方物を参照のこと）を、使い捨ての医療用噴霧器（これは、Andersenカスケードインパクターで測定される場合、質量中央値空気力学的直径3.2μmを有するエアロゾルを提供する）を使用して生成する。噴霧器を、ソレノイドバルブと圧縮空気（20psi ）の供給源からなる線量計系に接続する。噴霧器の出力は、プラスチックのＴ片へと向けられ、その一端は、ピストン人工呼吸器の吸息部に連結されていた。ソレノイドバルブを、人工呼吸器の吸息サイクルの開始時に１秒間活性化する。エアロゾルを、500mLのVTおよび20呼吸／分の速度で送達する。0.5％重炭酸ナトリウム溶液のみを、コントロールとして使用した。気管支の応答を評価するために、カルバコールに対する累積濃度−応答曲線を、Abraham(1994)に従って作製する。気管支生検を処置の開始の前および後ならびに抗原投与の24時間後にとる。気管支生検は、Abraham(1994)に従って行う。肺胞マクロファージのインビトロ接着研究もまた、Abraham(1994)に従って行い、そして接着細胞の百分率を計算する。エアロゾル処方物 30.0mg/mLの濃度の0.5％重炭酸ナトリウム／生理食塩水（w/v）中の候補化合物の溶液を、以下の手順を用いて調製する。Ａ．100mLの0.5％重炭酸ナトリウム／生理食塩水ストック溶液の調製：１．100mL容量のフラスコへ0.5gの重炭酸ナトリウムを加える。２．およそ90.0mLの生理食塩水を加え、そして溶解するまで超音波処理する。３．生理食塩水で100.0mLにし、そして完全に混和させる。Ｂ．10.0mLの30.0mg/mLの候補化合物の調製：１．10.0mL容量のフラスコへ0.300gの候補化合物を加える。２．およそ9.7mLの0.5％重炭酸ナトリウム／生理食塩水ストック溶液を加える。３．候補化合物が完全に溶解するまで超音波処理する。４．0.5％重炭酸ナトリウム／生理食塩水ストック溶液で10.0mLにし、そして完全に混和させる。実施例４：α-9インテグリン調整化合物の合成本実施例は、本明細書中に記載される前駆化合物および参照標準化合物の代表的な有機合成を提供する。親の出願である米国特許出願第08/904,424号（1997年７月31日出願）および米国仮出願第60/054,453号（1997年８月１日出願）ならびに共願に係る同時に出願された米国特許出願第号および対応する PCT出願PCT/US98/ （これらすべての出願は、その全体が本明細書中で参考として援用される）は、これらのおよび多くの他の関連化合物の調製方法のために具体的に参照される。Ａ．一般的参照方法方法１：Ｎ−トシル化手順適切なアミノ酸のＮ−トシル化を、Cupps,BoutinおよびRapoport J.Org.Chem. 1985.50,3972の方法を介して実施した。方法２：メチルエステル調製手順アミノ酸メチルエステルをBrennerおよびHuber Helv.Chim.Acta 1953,36,1109 の方法を用いて調製した。方法３：BOPカップリング手順所望のジペプチドエステルを、適切なN-保護化アミノ酸（１当量）と適切なアミノ酸エステルまたはアミノ酸エステルヒドロクロリド（１当量）、ベンゾトリアゾール-1-イルオキシ-トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート[BOP]）（2.0当量）、トリエチルアミン（1.1当量）、およびDMFとを反応させることにより調製した。反応混合物を室温で一晩撹拌した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーで精製してジペプチドエステルを得た。方法４：水素化手順I 水素化を、30psiで一晩、メタノール中で10％パラジウム炭素（10重量％）を用いて、行った。混合物をセライトのパッドを通して濾過し、そして濾液濃縮し所望のアミノ化合物を得た。方法５：加水分解手順I 冷却（0℃）した適切なエステルのTHF/H20溶液（2:1，５〜10mL）に、LiOH（またはNa0H）（0.95当量）を加えた。温度を０℃に維持し、そして反応は１〜３時間で完了した。反応混合物を酢酸エチルで抽出して、そして水相を凍結乾燥して所望のカルボン酸塩を得た。方法６：エステル加水分解手順II 冷却（0℃）した適切なエステルのTHF/H20溶液（2:1，５〜10mL）に、LiOH（1 .1当量）を加えた。温度を０℃に維持し、そして反応は１〜３時間で完了した。反応混合物を濃縮し、そして残渣をH20に入れ、そしてpHを、HCl水溶液で２〜３に調整した。生成物を酢酸エチルで抽出して、そして合わせた有機相をブラインで洗い、MgSO4で乾燥させ、濾過し、そして濃縮して所望の酸を得た。方法７：エステル加水分解手順III 適切なエステルをジオキサン/H2O（1:1）に溶解し、そして0.9当量の0.5NのNa OHを加えた。反応物を３〜16時間撹拌し、次に濃縮した。得られた残渣をH2Oに溶解し、そして酢酸エチルで抽出した。水相を凍結乾燥して所望のカルボン酸ナトリウム塩を得た。方法８：スルホニル化手順I 塩化メチレン（25mL）に溶解し、-78℃に冷却した、適切に保護されたアミノフェニルアラニンアナログ（11.2mmol）に、所望のスルホニルクロリド（12mmol ）を加え、続いてピリジン（2mL）を滴下した。溶液を室温まで昇温させて、そして48時間撹拌した。反応溶液を、塩化メチレン（100mL）を入れた250mLの分液漏斗に移し、そして1N HCl（50mL×３）、ブライン（50mL）、および水（100mL ）で抽出した。有機相を乾燥させ（MgSO4）、そして溶媒を濃縮して所望の生成物を得た。方法９：還元的アミノ化手順 Tos-Pro-p-NH2-Pheの適切なアルデヒドでの還元的アミノ化を、酢酸、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム、塩化メチレンを用いて実施し、そして合わせた混合物を室温で一晩撹拌した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーで精製した。方法１０：BOC除去手順無水塩化水素（HCl）ガスを、0℃で15分間、適切なBocアミノ酸エステルのメタノール溶液を通してバブリングし（bubble）、そして反応混合物を３時間撹拌した。溶液を濃縮してシロップ状にし、そしてEt2Oに溶解し、そして再濃縮した。この手順を繰り返し、そして得られた固体を一晩高真空下に置いた。方法１１：tert-ブチルエステル加水分解手順I tert-ブチルエステルをCH2Cl2に溶解し、そしてTFAで処理した。反応は１〜３時間で完了した。この時点で、反応混合物を濃縮し、そして残渣をH2Oに溶解し、そして凍結乾燥して所望の酸を得た。Ｂ：調製調製１ N-（トルエン-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4-(4-メチルピペラジン-1- イルカルボニルオキシ)フェニルアラニンエチルエステルの合成表題化合物を、調製４の調製にまとめられる手順および適切な出発材料の代替物に従い調製した。 NMRデータは以下の通りであった：調製２ N-(トルエン-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニンエチルエステル（化合物２）の合成反応バイアル中で、7.00g（15.2mmol、1.0当量）Ts-Pro-Tyr(H)-OEtおよび1.8 6g（15.2mmol、1.0当量）DMAPを合わせた。次いで、塩化メチレン（50mL）、トリエチルアミン(2.12mL--1.54g、15.2mmol、1.0当量)、およびジメチルカルバミルクロリド（1.68mL--1.96g、18.2mmol、1.2当量）を加えた。バイアルにきつくキャップをし、そして反応溶液を撹拌して、均質な溶液を得た。次いで、反応溶液を40℃に加熱した。48時間後、得られた無色の溶液のTLCにより完全な変換を示した。反応溶液の後処理は以下のようであった：50mL EtOAcおよび50mLヘキサンの反応混合物への添加、ならびに３×50mL 0.5Mクエン酸、２×50mL水、２×5 0mL 10% K2C03、および１×50mL飽和NaClでの洗浄。MgSO4での乾燥。濾過。エバボレートして8.00g(99％)の表題化合物を明澄な油状物（これは、放置すると固化する）として得る。5:3;2ヘプタン／EtOAc／CH2Cl2から再結晶する。 NMRデータは以下の通りであった：調製３ N-(トルエン-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4-(4-メチルピペラジン-1- イルカルボニルオキシ)フェニルアラニンイソプロピルエステルの合成表題化合物を調製４の調製のためにまとめられる手順および適切な出発材料の代替物に従って調製した。 NMRデータは以下の通りであった：調製４ N-(トルエン-4-スルホニル)-L−プロリル-L-4-(4-メチルピペラジン-1- イルカルボニルオキシ)フェニルアラニンtert-ブチルエステルの合成 41.2g(84.34mmol、1.0当量)のTs-Pro-Tyr(H)-OtBuと17.0g(84.34mmol,1.0当量 )の4-ニトロフェニルクロロホルメートとを合わせる。700mL CH₂Cl₂を加える。セプタムでキャップする。N2ラインに接続する。フラスコを4:1水／EtOH+ドライアイススラリー中に浸し、そして撹拌して-15℃にまで冷却する。29.38mL(21.33 g,210.81mmol、2.5当量)のEt3Nを５分間にわたり撹拌しながら加える。-10〜-1 5℃で１時間撹拌する。9.35mL（8.45g,84.34mmol,1.0当量）のN-メチルピペラジンを３分間にわたって撹拌しながら加える。室温にまで温めながら一晩撹拌する。700mLヘキサンで希釈する。黄色（4-ニトロフェノール）が水相において見られなくなるまで10％のK2C03で繰り返し洗浄する。飽和NaClで洗浄する。無水MgS O4で乾燥する。濾過する。エバポレートする。500mL EtOHに溶解し、そしてエバボレートしてEt3Nを除去する。一回反復する。400mL EtOHに溶解し、そして600m Lの水を撹拌しながら加え、固体または油状物を沈澱させる。油状物の場合、激しく撹拌して固化する。濾過によって個体を分離する。溶解、沈澱、および濾過を１回繰り返す。水ですすいで微量の黄色を除去する。一定量に対する高度の減圧により表題化合物を白色固体として得る。 NMRデータは以下の通りであった：調製５ N-(トルエン-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4-(4-メチルピペラジン-1- イルカルボニルオキシ)フェニルアラニン（参照化合物１）の合成表題化合物を方法７に記載される手順を用いて調製１の生成物から調製した。 NMRデータは以下の通りであった：調製９ N-(トルエン-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニンの合成表題化合物を方法７に記載される手順を用いて調製２の生成物から調製した。 NMRデータは以下の通りであった：調製10 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-プロリル-L-3-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニンエチルエステルの合成表題化合物を、調製２の調製のためにまとめられる手順および適切な出発材料の代替物に従って調製した。 NMRデータは以下の通りであった：調製11 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-（5,5-ジメチル）チアプロリル-L-4-(N, N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニンイソプロピルエステルの合成表題化合物を、調製２の調製のためにまとめられる手順および適切な出発材料の代替物に従って調製した。 NMRデータは以下の通りであった：調製12 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-（5,5-ジメチル）チアプロリル-L-4-(N, N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニンtert-ブチルエステルの合成表題化合物を、調製２の調製のためにまとめられる手順および適切な出発材料の代替物に従って調製した。 NMRデータは以下の通りであった：調製13 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-（5,5-ジメチル）チアプロリル-L-4-(N, N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニンの合成表題化合物を、調製11の生成物から、方法７に記載される手順を用いて調製した。 NMRデータは以下の通りであった：調製18 N-(トルエン-4-スルホニル）サルコシル-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニンイソプロピルエステルの合成表題化合物を、調製２の調製のためにまとめられる手順および適切な出発材料の代替物に従って調製した。 NMRデータは以下の通りであった：調製19 N-(トルエン-4-スルホニル)サルコシル-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニンtert-ブチルエステルの合成表題化合物を、調製２の調製のためにまとめられる手順および適切な出発材料の代替物に従って調製した。 NMRデータは以下の通りであった：調製20 N-(トルエン-4-スルホニル)サルコシル-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン（参照化合物８）の合成表題化合物を、調製18の生成物から、方法７に記載される手順を用いて調製した。 NMRデータは以下の通りであった：調製29 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-(1,1-ジオキソ-5,5-ジメチル)-チアプロリル-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニンtert-ブチルエステルの合成調製12の生成物をLarssonおよびCarlson(Acta Chemica Scan.1994,48,517-525 )の方法により酸化して、表題化合物を白色固体として得た。 NMRデータは以下の通りであった：調製30 N-(1-メチルイミダゾリル-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニンの合成表題化合物を、実施例106の生成物から、方法11に記載の手順を使用して調製した。 NMRデータは以下の通りであった：調製31 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-(1,1-ジオキソ-5,5-ジメチル)-チアプロリル-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン（参照化合物４）の合成表題化合物を、調製29の生成物から、方法11に記載の手順を使用して調製した。 NMRデータは以下の通りであった：調製49 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-（チアモルホリン-3-カルボニル）-L-4- (N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニンtert-ブチルエステルの合成 L-チアモルホリン-3-カルボン酸を、LarssonおよびCarlson（Acta Chemica Sc an．1994,48,517-525）の方法により調製した。N-（トルエン-4-スルホニル）-L -チアモルホリン-3-カルボン酸を方法１に記載の手順を用いて調製した。表題化合物を、調製２の合成のための手順に従って適切な出発物質の代替物を用いて調製した。 NMRデータは以下の通りであった：調製50 N-(トルエン-4-スルホニル)サルコシル-L-4-(1,1-ジオキソチアモルホリン-4-イルカルボニルオキシ)フェニルアラニンの合成表題化合物を、調製121の生成物から、方法11に記載される手順を使用して調製した。 NMRデータは以下の通りであった：調製51 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-(1,1-ジオキソチアモルホリン-3-カルボニル)-L-4-(N.N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニンtert-ブチルエステルの合成表題化合物を、調製49の生成物から、LarssonおよびCarlson（Acta Chemica S can．1994,48,522）によって記載される手順に従って調製した。 NMRデータは以下の通りであった：調製60 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-(1,1-ジオキソチアモルホリン-3-カルボニル)-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン（参照化合物６）の合成表題化合物を、調製51の生成物から、方法11に記載される手順を使用して調製した。 NMRデータは以下の通りであった：本発明は、具体的な方法および実施態様を参照して記載されているが、本発明から逸脱することなく種々の改変および変更がなされ得ることが理解される。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｐ 9/10 Ａ６１Ｐ 11/00 11/00 11/06 11/06 13/12 13/12 17/00 17/00 17/08 17/08 25/00 25/00 25/28 25/28 27/02 27/02 29/00 29/00 １０１１０１ 35/04 35/04 37/06 37/06 Ｇ０１Ｎ 33/15 ＺＧ０１Ｎ 33/15 33/50 Ｚ 33/50 33/566 33/566 Ｃ０７Ｋ 5/078 // Ｃ０７Ｋ 5/078 Ａ６１Ｋ 37/02 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ) ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者プリース，マイケルエイ. アメリカ合衆国カリフォルニア 94087, サニーベイル，ステラコート 848

Claims

【特許請求の範囲】１．哺乳動物被験体における炎症状態を処置するのに有効な薬学的組成物であって、薬学的有効用量のα-9インテグリンアンタゴニスト化合物および薬学的賦形剤を含む、薬学的組成物。２．前記炎症状態が、好中球接着の増大によって特徴づけられる、請求項１に記載の薬学的組成物。３．前記α-9アンタゴニスト化合物が、α-9インテグリンとα-9インテグリンリガンドとの間の結合を阻害する、請求項１に記載の薬学的組成物。４．請求項３に記載の薬学的組成物であって、前記α-9インテグリンアンタゴニスト化合物は、α-9インテグリンとα-9インテグリンリガンドとの間の結合を阻害する際に、以下： N-(トルエン-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4(4-メチルピペラジン-1-イルカルボニルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4(N,N-ジメチルカルバミルオキシ) フェニルアラニン、 N-(1-メチルピラゾール-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-(1,1-ジオキソ-5,5-ジメチル)チアプロリル-L- 4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-N-メチル-L-アラニニル-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-[1,1-ジオキソ)チアモルホリン-3-カルボニル] -L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(N-p-トルエンスルホニル)プロリル-4-(ピペラジノイルオキシ)フェニルアラニン、 N-(N-p-トルエンスルホニル)サルコシル-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ) フェニルアラニン、および N-(トルエン-4-スルホニル)-L-(5,5-ジメチル)チアプロリル-L-4-[3-(N,N-ジメチル)プロポキシ]フェニルアラニン、からなる群から選択される化合物によって示される阻害性潜在力の少なくとも1/ 1000の潜在力を示す、薬学的組成物。５．請求項３に記載の薬学的組成物であって、前記α-9インテグリンアンタゴニスト化合物は、α-9インテグリンとα-9インテグリンリガンドとの間の結合を阻害する際に、このような阻害についての約100μＭ未満のIC₅₀によって示されるように、有効である、薬学的組成物。６．請求項５に記載の薬学的組成物であって、前記α-9インテグリンアンダゴニスト化合物が、α-4/β-1インテグリンのα-4/β-1インテグリンリガンドへの結合を阻害する化合物の群から選択される、薬学的組成物。７．請求項１に記載の薬学的組成物であって、前記化合物は、式： R¹-SO₂-NR₂-CHR³-Q-CHR⁵-CO₂H を有する化合物および薬学的に受容可能なその塩からなる群から選択され、ここで、 R¹は、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロ環式、置換ヘテロ環式、ヘテロアリール、および置換ヘテロアリールからなる群から選択され； R²は、水素、アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、ヘテロ環式、置換ヘテロ環式、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールからなる群から選択され、R¹およびR²は、R²に結合した窒素原子およびR¹に結合したSO₂基とともに、ヘテロ環式または置換ヘテロ環式基を形成し得； R³は、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環式、置換ヘテロ環式からなる群から選択され、そして、R²がR¹とヘテロ環式基を形成しない場合には、R²およびR³は、R²に結合した窒素原子およびR³に結合した炭素原子とともに、ヘテロ環式または置換ヘテロ環式基を形成し得； R⁵は、−(CH₂)_x-Ar-R^5'であり、ここでR^5'は-O-Z-NR⁸R^8'および-O-Z-R¹²からなる群から選択され、ここでR⁸およびR^8'は、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロ環式、置換ヘテロ環式からなる群から独立して選択され、そしてR⁸およびR^8'が結合してヘテロ環または置換ヘテロ環を形成する場合、R¹²は、ヘテロ環および置換ヘテロ環からなる群から選択され、そしてZは、-C(O)-および-SO₂−からなる群から選択され、 Arは、アリール、ヘテロアリール、置換アリール、または置換ヘテロアリールであり、 xは、１から４までの整数であり； Qは、-C(X)NR⁷-であり、ここでR⁷は水素およびアルキルからなる群から選択され；そしてXは、酸素およびイオウからなる群から選択される、薬学的組成物。８．請求項１に記載の薬学的組成物であって、前記α-9インテグリンアンタゴニストは、以下： N-(トルエン-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4(4-メチルピペラジン-1-イルカルボニルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4(N,N-ジメチルカルバミルオキシ) フェニルアラニン、 N-(1-メチルピラゾール-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-(1,1-ジオキソ-5,5-ジメチル)チアプロリル-L- 4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-N-メチル-L-アラニニル-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-[1,1-ジオキソ)チアモルホリン-3-カルボニル] -L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(N-p-トルエンスルホニル)プロリル-4-(ピペラジノイルオキシ)フェニルアラニン、および N-(N-p-トルエンスルホニル)サルコシル-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ) フェニルアラニン、および N-(トルエン-4-スルホニル)-L-(5,5-ジメチル)チアプロリル-L-4-[3-(N,N-ジメチル)プロポキシ]フェニルアラニン、からなる群から選択される、薬学的組成物。９．哺乳動物被験体において炎症状態を処置するための薬学的組成物であって、薬学的賦形剤；および α-9インテグリンとα-9インテグリンリガンドとの間の結合を阻害するその能力について選択される低分子化合物であって、その能力が、該分子がα-9インテグリン-α-9インテグリンリガンド結合アッセイにおいて、以下： N-(トルエン-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4(4-メチルピペラジン-1-イルカルボニルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4(N,N-ジメチルカルバミルオキシ) フェニルアラニン、 N-(1-メチルピラゾール-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン， N-(トルエン-4-スルホニル)-L-(1,1-ジオキソ-5,5-ジメチル)チアプロリル-L- 4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-N-メチル-L-アラニニル-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-[1,1-ジオキソ)チアモルホリン-3-カルボニル] -L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(N-p-トルエンスルホニル)プロリル-4-(ピペラジノイルオキシ)フェニルアラニン、および N-(N-p-トルエンスルホニル)サルコシル-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ) フェニルアラニン、および N-(トルエン-4-スルホニル)-L-(5,5-ジメチル)チアプロリル-L-4-[3-(N,N-ジメチル)プロポキシ]フェニルアラニン、からなる群から選択される化合物の潜在力の少なくとも1/1000の潜在力を示すことによって示される、低分子化合物を含む、薬学的組成物。１０．請求項９に記載の薬学的組成物であって、前記化合物が、α-4/β-1インテグリンのVCAM-1への結合のインヒビターであり、それは以下： N-(トルエン-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4(4-メチルピペラジン-1-イルカルボニルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4(N,N-ジメチルカルバミルオキシ) フェニルアラニン、 N-(1-メチルピラゾール-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-(1,1-ジオキソ-5,5-ジメチル)チアプロリル-L- 4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-N-メチル-L-アラニニル-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-[1,1-ジオキソ）チアモルホリン-3-カルボニル ]-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(N-p-トルエンスルホニル)プロリル-4-(ピペラジノイルオキシ)フェニルアラニン、および N-(N-p-トルエンスルホニル)サルコシル-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ) フェニルアラニン、および N-(トルエン-4-スルホニル)-L-(5,5-ジメチル)チアプロリル-L-4-[3-(N,N-ジメチル)プロポキシ]フェニルアラニン、からなる群から選択される化合物によって示される潜在力の少なくとも1/1000の潜在力を有する、該結合を阻害するその能力によって示される、薬学的組成物。１１．炎症状態の処置に有効な治療的化合物のスクリーニング方法であって、試験化合物を、α-9インテグリンリガンドへのα-9インテグリン結合の量を測定するアッセイ系に添加する工程、ならびに該化合物が、以下： N-(トルエン-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4(4-メチルピペラジン-1-イルカルボニルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4(N,N-ジメチルカルバミルオキシ) フェニルアラニン、 N-(1-メチルピラゾール-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-(1,1-ジオキソ-5,5-ジメチル)チアプロリル-L- 4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-N-メチル-L-アラニニル-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-[1,1-ジオキソ)チアモルホリン-3-カルボニル] -L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(N-p-トルエンスルホニル)プロリル-4-(ピペラジノイルオキシ)フェニルアラニン、 N-(N-p-トルエンスルホニル)サルコシル-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ) フェニルアラニン、および N-(トルエン-4-スルホニル)-L-(5,5-ジメチル)チアプロリル-L-4-[3-(N,N-ジメチル)プロポキシ]フェニルアラニン、からなる群から選択される化合物によって示される活性の少なくとも1/1000の潜在力の結合阻害活性を示す場合には、有効な治療薬物候補として該試験化合物を選択する工程、を包含する、方法。１２．前記炎症状態が、好中球接着の増強を含む、請求項１１に記載の方法。１３．前記試験化合物が、α-4/β-1インテグリンのα-4/β-1インテグリンリガンドへの結合を阻害する化合物の群から選択される、請求項１１に記載の方法。１４．前記α-4/β-1インテグリン阻害性化合物の群が、以下： N-(トルエン-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4(4-メチルピペラジン−1-イルカルボニルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4(N,N-ジメチルカルバミルオキシ) フェニルアラニン、 N-(1-メチルピラゾール-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-(1,1-ジオキソ-5,5-ジメチル)チアプロリル-L- 4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-N-メチル-L-アラニニル-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-[1,1-ジオキソ)チアモルホリン-3-カルボニル] -L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(N-p-トルエンスルホニル)プロリル-4-(ピペラジノイルオキシ)フェニルアラニン、 N-(N-p-トルエンスルホニル)サルコシル-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ) フェニルアラニン、および N-(トルエン-4-スルホニル)-L-(5,5-ジメチル)チアプロリル-L-4-[3-(N,N-ジメチル)プロポキシ]フェニルアラニン、からなる群から選択される化合物によって示される阻害性潜在力の少なくとも1/ 1000の阻害性潜在力を示す、請求項１３に記載の方法。１５．前記α-4/β-1インテグリンの結合の阻害が、該α-4/β-1インテグリン分子のVCAM-1への結合を測定する試験アッセイにおいて測定される、請求項１４に記載の方法。１６．請求項１３に記載の方法であって、前記試験化合物が、式： R¹-SO₂-NR₂-CHR³-Q-CHR⁵-CO₂H を有するカルバミル化合物および薬学的に受容可能なその塩からなる群から選択され、ここで、 R¹は、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロ環式、置換ヘテロ環式、ヘテロアリール、および置換ヘテロアリールからなる群から選択され； R²は、水素、アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、ヘテロ環式、置換ヘテロ環式、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールからなる群から選択され、R¹およびR²は、R³に結合した窒素原子およびR¹に結合したSO₂基とともに、ヘテロ環式または置換ヘテロ環式基を形成し得； R³は、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環式、置換ヘテロ環式からなる群から選択され、そして、R²がR¹とヘテロ環式基を形成しない場合には、R²およびR³は、R²に結合した窒素原子およびR³に結合した炭素原子とともに、ヘテロ環式または置換ヘテロ環式基を形成し得； R⁵は、−(CH₂)_x-Ar-R^5'であり、ここでR^5'は-O-Z-NR⁸R^8'および-O-Z-R¹²からなる群から選択され、ここでR⁸およびR^8'は、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロ環式、置換ヘテロ環式からなる群から独立して選択され、そしてR⁸およびR^8'が結合してヘテロ環または置換ヘテロ環を形成する場合、R¹²は、ヘテロ環および置換ヘテロ環からなる群から選択され、そしてZは、-C(O)-および-SO₂-からなる群から選択され、 Arは、アリール、ヘテロアリール、置換アリール、または置換ヘテロアリールであり、 xは、１から４までの整数であり； Qは、-C(X)NR⁷-であり、ここでR⁷は水素およびアルキルからなる群から選択され；そしてXは、酸素およびイオウからなる群から選択される、方法。１７．請求項１１に記載の方法であって、前記α-9インテグリンアンタゴニストが、 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4(4-メチルピペラジン-1-イルカルボニルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4(N,N-ジメチルカルバミルオキシ) フェニルアラニン、 N-(1-メチルピラゾール-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-(1,1-ジオキソ-5,5-ジメチル)チアプロリル-L- 4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-N-メチル-L-アラニニル-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-[1,1-ジオキソ)チアモルホリン-3-カルボニル] -L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(N-p-トルエンスルホニル)プロリル-4-(ピペラジノイルオキシ)フェニルアラニン、および N-(N-p-トルエンスルホニル)サルコシル-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ) フェニルアラニン、および N-(トルエン-4-スルホニル)-L-(5,5-ジメチル)チアプロリル-L-4-[3-(N,N-ジメチル)プロポキシ]フェニルアラニン、からなる群から選択される、方法。１８．哺乳動物被験体において炎症状態を処置する方法であって、該被験体に薬学的有効量のα-9インテグリンアンタゴニスト化合物を投与する工程を包含する、方法。１９．前記炎症状態が、好中球接着の増大によって特徴づけられる、請求項１８に記載の方法。２０．前記α-9インテグリンアンタゴニスト化合物が、α-4/β-1インテグリンリガンドへのα-4/β-1インテグリン結合を阻害する化合物の群から選択される、請求項１８に記載の方法。２１．請求項１８に記載の方法であって、前記α-9インテグリンアンタゴニスト化合物が、α-9インテグリンとα-9インテグリンリガンドとの間の結合を阻害する際に、以下： N-(トルエン-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4(4-メチルピペラジン-1-イルカルボニルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4(N,N-ジメチルカルバミルオキシ) フェニルアラニン、 N-(1-メチルピラゾール-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-(1,1-ジオキソ-5,5-ジメチル)チアプロリル-L- 4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-N-メチル-L-アラニニル-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-[1,1-ジオキソ)チアモルホリン-3-カルボニル] -L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(N-p-トルエンスルホニル)プロリル-4-(ピペラジノイルオキシ)フェニルアラニン、および N-(N-p-トルエンスルホニル)サルコシル-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ) フェニルアラニン、および N-(トルエン-4-スルホニル)-L-(5,5-ジメチル)チアプロリル-L-4-[3-(N,N-ジメチル)プロポキシ]フェニルアラニン、からなる群から選択される化合物によって示される阻害性潜在力の少なくとも1/ 1000の潜在力を示す、方法。２２．請求項１８に記載の方法であって、前記化合物が、式： R¹-SO₂-NR₂-CHR³-Q-CHR⁵-CO₂H を有するカルバミル化合物および薬学的に受容可能なその塩からなる群から選択され、ここで、 R¹は、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロ環式、置換ヘテロ環式、ヘテロアリール、および置換ヘテロアリールからなる群から選択され； R²は、水素、アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、ヘテロ環式、置換ヘテロ環式、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールからなる群から選択され、R¹およびR²は、R²に結合した窒素原子およびR¹に結合したSO₂基とともに、ヘテロ環式または置換ヘテロ環式基を形成し得； R³は、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環式、置換ヘテロ環式からなる群から選択され、そして、R²がR¹とヘテロ環式基を形成しない場合には、R²およびR³は、R²に結合した窒素原子およびR³に結合した炭素原子とともに、ヘテロ環式または置換ヘテロ環式基を形成し得； R⁵は、−(CH₂)_x-Ar-R^5'であり、ここでR^5'は-O-Z-NR⁸R^8'および-O-Z-R¹²からなる群から選択され、ここでR⁸およびR^8'は、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロ環式、置換ヘテロ環式からなる群から独立して選択され、そしてR⁸およびR^8'が結合してヘテロ環または置換ヘテロ環を形成する場合、R¹²は、ヘテロ環および置換ヘテロ環からなる群から選択され、そしてZは、-C(O)-および-SO₂-からなる群から選択され、 Arは、アリール、ヘテロアリール、置換アリール、または置換ヘテロアリールであり、 xは、１から４までの整数であり； Qは、-C(X)NR⁷-であり、ここでR⁷は水素およびアルキルからなる群から選択され；そしてXは、酸素およびイオウからなる群から選択される、方法。２３．請求項１８に記載の方法であって、前記α-9インテグリンアンタゴニストが、以下： N-(トルエン-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4(4-メチルピペラジン-1-イルカルボニルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4(N,N-ジメチルカルバミルオキシ) フェニルアラニン、 N-(1-メチルピラゾール-4-スルホニル)-L-プロリル-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-(1,1-ジオキソ-5,5-ジメチル)チアプロリル-L- 4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-N-メチル-L-アラニニル-L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(トルエン-4-スルホニル)-L-[1,1-ジオキソ)チアモルホリン-3-カルボニル] -L-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ)フェニルアラニン、 N-(N-p-トルエンスルホニル)プロリル-4-(ピペラジノイルオキシ)フェニルアラニン、および N-(N-p-トルエンスルホニル)サルコシル-4-(N,N-ジメチルカルバミルオキシ) フェニルアラニン、および N-(トルエン-4-スルホニル)-L-(5,5-ジメチル)チアプロリル-L-4-[3-(N,N-ジメチル)プロポキシ]フェニルアラニン、からなる群から選択される、方法。