HUT70024A - Process for preparing water soluble camptothecin analogs - Google Patents

Description

A jelen találmány tárgya eljárás vízoldékony kamptotecin analógok -éa oaek köabonoő· termékeérnek- előállítására. A találmány kiterjed as ol-járágaal előállított vegyületokror A vízoldékony kamptotecin analógokat az ilyen analógokra érzékeny tumorsejtek növekedésének gátlására lehet használni.

A DNS szálak elkülönülése alapvető olyan sejt folyamatok szempontjából, mint amilyen a DNS replikáció és transzkripció. Mivel az eukariotikus DNS kromatinná szerveződik kromoszomális fehérjék segítségével, és a DNS szálak végei összenyomódnak, a szálak nem tudnak lecsavarodni a topológiát megváltoztató enzimek segítsége nélkül. A topoizomerázok olyan enzimek, amelyek a DNS topológiát az eukariotikus sejtekben képesek megváltoztatni. Ennek a működésnek a kapcsán döntő fontosságúak az eukariotikus sejtek szaporodása szempontjából. A topoizomeráz I körülbelül 100 000 molekulatömegű monomer enzim. Az enzim a DNShez kötődik, egy egyszálú átmeneti szakaszt vezet be, lecsavarja a kettős spirált, vagy pedig ennek előfordulását teszi lehetővé, majd ismét lezárja a szakaszt, mielőtt leválna a DNS szálról. Ennélfogva a topoizomeráz I hatását gátló szerek rákellenes szerként működhetnek, mivel beavatkoznak az eukariotikus sejtek szaporodásába.

A kamptotecin vízoldékony citotoxikus alkaloid, amelyet a Kínában honos Camptotheca accuminata és az Indiában honos Nothapodytes foetida, másnéven Mappia foetida termel. A kamptotecin és néhány közeli analóg vegyület arról ismert, hogy gátolja a a topoizomeráz I-et. A kamptotecin és közeli topoizomeráz I-t gátló analógjai nem bizonyultak alkalmasnak

........ ···· ·’ ..... · · · • · · ♦·· · · ·

- 3 citolitikus szerként a klinikai gyakorlatban, mert klinikai hatásuk hiányzik, elfogadhatatlan dóziskorlátozó a toxicitásuk, előre nem látható a toxicitásuk, csekély mértékű a vízoldékonyságuk és/vagy nem elfogadható a tárolási stabilitásuk. Ezért olyan tumorellenes szerre van szükség, amely ezen vegyületek nemkívánatos tulajdonságaival nem rendelkezik.

A 4 604 463 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban Miyasaka és munkatársai olyan kampotecin-származékokat írnak le, amelyek az A gyűrű 9-, 10- és 11-helyzete közül valamelyikben amino-karbonil-oxi- vagy klór-karbonil-oxi-csoportot tartalmaznak, és azt állítják, hogy ezek a vegyületek alacsony toxicitás mellett tumorellenes hatással rendelkeznek. A

604 463 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban említett kamptotecin-származékok előállítása úgy történik, hogy a 9-, 10- és 11-helyzetben lévő hidroxilcsoportot tartalmazó kamptotecin-származékot, amely adott esetben a 7-helyzetben is szubsztituált, foszgénnal reagálhatnak, és adott esetben a kapott klór-karboniloxi-származékot aminnal reagáltatják, vagy pedig a 9-, 10- és 11-es helyzet valamelyikében hidroxilcsoportot tartalmazó és adott esetben a 7-helyzetben szubsztituált kamptotecin-származékot közvetlenül egy karbaminsav reakcióképes származékával reagáltatják.

A 4 473 692 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban és a 00 4 256 számú európai szabadalmi közzétett leírásban tumorellenes hatású alacsony toxicitású kamptotecinszármazékokról írnak Miyasaka és munkatársai. Ezen iratokban szereplő vegyületek az 5-, 7- és 10-es helyzetben tartalmaznak • · • · · ·

- 4 szubsztituenseket. A fenti irodalmi helyeken eljárásokat is említenek a vegyületek előállítására, illetve ezen vegyületek intermedierjeinek előállítására. Az egyik ilyen módszer szerint az 1,2,6,7-tetrahidro-kamptotecirít\ícatalitikus hidrogénezésével állítják elő oldószerben, például ecetsavban, dioxán és ecetsav elegyében vagy dioxán és sósav elegyében, nemesfém katalizátor jelenlétében atmoszférikus nyomáson. A kapott tetrahidro-származékot 10-nitrokamptotecinné alakítják egy soklépéses bonyolult eljárással, amely magában foglalja a tetrahidro-származék oxidálószerrel történő dehidrogénezését is. Ez az oxidálószer a kamptotecin-származékba nem vezet be hidroxilcsoportot. A nitrocsoportot számos hasonló vegyületté lehet átalakítani az ott leírt kémia segítségével. Egy másik módszer szerint 10-hidroxi-kamptotecint állítanak elő egy kétlépéses eljárással kamptotecin-l-oxid fotolízisével.

A 10-hidroxi-kamptotecin is farmakológiai hatással rendelkezik az irodalom szerint. A még nem vizsgált 59-5188 számú japán szabadalmi leírásban leírják a 10-hidroxi-kamptotecin előállítását 1,2,6,7-tetrahidro-kamptotecinből. Az utóbbi vegyületet a japán szabadalmi leírás szerint kamptotecin hidrogénezésével állítják elő ecetsavban vagy dioxán és ecetsav elegyében, atmoszférikus nyomáson és hőmérsékleten platina katalizátor jelenlétében. A 10-hidroxi-kamptotecint úgy állítják elő, hogy 1,2,6,7-tetrahidro-kamptotecint oxidálószerrel kezelnek, és az oxidálószer lehet ólom-tetraacetát, cérium (IV) ammónium-nitrát (CAN) vagy Fremy-féle só, amely kálium-nitrozo-diszulfonát, (KSOg^NO), krómsav vagy anhidrid, dikromátsók, ♦ ·♦·· ··· ·· ···· ·· ·· ····· ···· ·· ··· ♦· ♦·

- 5 kálium-permanganát és vas-klorid.

A 00 88 642 számú közzétett európai szabadalmi bejelentés kamptotecin-7-karboxamidokra és származékaikra vonatkozik. Az itt leírt vegyületek előállítása úgy történik, hogy először a kamptotecin-7-karbonsavat karboxil-csoport aktiválószerrel reagáltalak, majd ammóniával, vagy a megfelelő aminnal. Az európai szabadalmi leírás leírás szerint ezek a vegyületek hasznosak gyógyszerkészítmények vagy más új kamptotecin-származékok közbenső termékeiként.

Wani és munkatársai a J. Med. Chem. 29., 2358-2363 (1986) szakirodalmi helyen több kamptotecin-származék tumorellenes hatását értékelik ki, beleértve a 9-nitro-20(S)-kamptotecint, a 9-amino-20(S)-kamptotecint, a 9-nitro-10-metoxi-20(S)-kamptotecint, a 9-amino-10-metoxi-20(S)-kamptotecint, a 9-nitro-10-hidroxi-20(S)-kamptotecint és a 9-acetamido-10-hidroxi-20(S)-kamptotecint. Ezen vegyületek előállítását is leírják.

A J. Med. Chem. 23., 554-560 (1980) szakirodalmi helyen Wani és munkatársai különböző kamptotecin-analógok szintézisét írják le, beleértve azt az analógot is, ahol a 10-es szénatomon dimetil-amino-etil-éter van.

Wani és munkatársai a J. Med. Chem. 30. 1774-1779 (1987) szakirodalmi helyen különböző 11-szubsztituált kamptotecin-vegyület szintézisét írják le, beleértve a ciano-, nitro-, amino-, dimetil-amino-, formil-, amino-metil- és hidroxi-metil-származékok előállítását. Wani és munkatársai különböző vegyületek előállítását írják le. A 11-amino-metil analóg előállítása eszerint úgy történik, hogy 11-formil-kamptotecin és 2-amino6

-izovajsav dimetil-formamidos oldatát visszafolyató hűtő alatt melegítik, majd bepárolják és vizes sósavat adnak hozzá. Az irodalom szerint azonban a 11-amino-metil analóg és a hidroklorid-sója nem hatásos.

A fenti kísérletek ellenére további igény mutatkozott hatásos tumorellenes szerek és hatásos előállításuk iránt.

A találmány szerint vízoldékony kamptotecin analógokat állítunk elő új eljárással, beleértve az intermedierek előállítását is. A jelen találmány szerint előállított vegyületek kielégítik a topoizomeráz I gátló szerek iránt támasztott igényt is, melyeket klinikai gyógyszerfejlesztésben is felhasználnak citolitikumokként.

A jelen találmány szerint tehát (Ώ) általános képletű vízoldékony kamptotecin analógokat állítunk elő, ahol

R jelentése hidrogénatom vagy 1-6 szénatomos alkoxicsoport, R¹ jelentése -0-R², -S-R vagy N-(R⁴)(R5);

R², R³ , R⁴ és R⁵ jelentése azonos vagy különböző, és lehet hidrogénatom, 1-6 szénatomos alkil-, 2-6 szénatomos hidroxi-alkil-, 1-6 szénatomos dialkilamino-2-6 szénatomos alkil-, 1-6 szénatomos alkil-amino-2-6 szénatomos alkil-, 2-6 szénatomos amino-alkil- vagy 3-7-tagú telítetlen vagy telített karbociklusos gyűrű; vagy ha R¹ jelentése -N-(R⁴)(R⁵), az R⁴ és R⁵ a nitrogénatommal együtt, melyhez kapcsolódnak, szubsztituált vagy szubsztituálatlan, adott esetben további heteroatomokat tartalmazó heterociklusos gyűrűt képezhet; és

R⁶ jelentése hidrogénatom, 1-6 szénatomos szubsztituálatlan ···· ···· • · • « « · • · ·

·· • · • · • · vagy szubsztituált alifás csoport, vagy egy olyan csoport, amely az oxigénatommal együtt, melyen keresztül kapcsolódik, gyógyászatilag elfogadható észtercsoportot képez, vagy gyógyászatilag elfogadható sóit is előállítjuk.

Az (B) általános képletű vegyületek különösen tumorellenes szerként használhatók. A találmány az (BJ általános képletű vegyületeket felhasználó módszerekre is kiterjed.

Az 1. reakcióvázlat szemlélteti az (B) általános képletű vegyületek előállítását. Az (la) képletű vegyületek olyan (Ity általános képletű vegyületeknek felelnek meg, ahol R¹ jelentése -N-(R⁴)(R⁵), és sem R⁴, sem R⁵ nem jelent hidroxi-etil-csoportot. Az R⁴ vagy R⁵ helyén hidroxi-etil-csoportot tartalmazó (B) általános képletű vegyületeket például az 1. reakcióvázlat 2. lépésében előállított vegyület és para-formaldehid és etanol-amin ecetsavban történő Mannich-reakciójával állíthatjuk elő.

Az 1. reakcióvázlat az R⁶ helyén hidrogénatomot tartalmazó vegyületek előállítását szemlélteti. Az R⁶ helyén hidrogénatomtól eltérő csoportot tartalmazó (D) általános képletű vegyületeket például úgy kaphatjuk, hogy a megfelelő éter- vagy észtercsóportot képezzük azután, hogy a 3. lépésben hozzáadnánk a 9-helyzetű szubsztituenst. Az éter- vagy észtercsoportot előállító lépéseket a szakember az irodalomból kiválaszthatja.

A gyűrűk számozását és a szubsztituensek helyzetét az (IA) képlettel illusztráljuk.

Az 1. reakcióvázlatból látható, hogy a szintézis első ·· ···· ···· · · ····· · : · ·· ···· · · • · · ·· ♦· · ···· ·· ··· ·· ··

- 8 lépése szerint kamptotecint vagy 11-alkoxi analógját 1,2,6,7-tetrahidro-kamptotecinné alakítjuk (a továbbiakban tetrahidro-kamptotecinné), vagy 11-alkoxi-analógját állítjuk elő. A 11alkoxi-kamptotecin kiindulási anyagot bármilyen ismert módon előállíthatjuk, például a kamptotecin analógok előállítására szolgáló Wani és munkatársai, J. Med. Chem. 29, 2358-2363 (1986) szakirodalmi helyen leírt módszerével. A találmány szerint előnyösen 11-metoxi-kamptotecint használunk 11-alkoxi-kamptotecinként.

Ennek a lépésnek a kiindulási kamptotecinjét a fent leírt módon állíthatjuk elő természetes előállítású alkaloid formájában. Ezenkívül ismeretesek módszerek a kamptotecin totál szintézisére [lásd például Hutchinson, Tetrahedron, 37. 1047 (1981) és Suffness és Cordell, The Alkaloids. Chemistry and Pharmacology, Brossi, A., ed., 25. kötet, Academic Press, Orlando Florida, 73 (1985) szakirodalmi helyen]. Az egyik módszer szerint a 20-as helyzetű szénatomon racém kamptotecin előállítására ismeretes Wani és munkatársai módszere a J. Med. Chem. 23, 5554 (1980) szakirodalmi helyről. Itt a Wani és munkatársai által kapott racém kamptotecint kromatográfiásan tisztítják, majd ezt követően speciális közegből kristályosítják. A Wani és munkatársai által alkalmazott anyag a kristályosításhoz azonban gyenge oldószer ahhoz, hogy a közeleső alkaloid szennyeződésektől megtisztítható volna a kamptotecin, úgyhogy a tisztítási eljárás szükséges lépése a kromatografálás.

Vagy természetesen, vagy szintetikusan előállított kamptotecint alkalmazhatunk a találmány szerint kiindulási anyagként.

···· ·· • · · • · • · · · ·· ·· ·· ·♦ ·· ·· • · · · · * · · ··· • · · · ···· ·· ···

- 9 A 20-as helyzet szempontjából előnyös ha a kiindulási anyag S izomer.

Kamptotecin vagy 11-alkoxi-kamptotecin kiindulási anyag tisztítása

A kamptotecint vagy 11-(1-6 szénatomos)-alkoxi-analógját különösen jó eredménnyel tisztíthatjuk az alábbi módszer szerint, ha kiindulási anyagként ezeket az anyagokat használjuk a vízoldékony kamptotecin analógok előállítási szintéziséhez. Különösen a kamptotecin vagy 11-(1-6 szénatomos)-alkoxi-kamptotecin tisztítására használatos módszer első lépésben a kamptotecint vagy 11-(1-6 szénatomos)-alkoxi-kamptotecint és szennyeződéseit tartalmazó elegyet oldószerrel hozzuk érintkezésbe, ahol az oldószer képes a kamptotecintől és a 11-(1-6 szénatomos) -alkoxi-kamptotecintől eltérő alkaloidok elválasztására, beleértve azokat a szennyeződéseket is, amelyek késleltetni tudják a kamptotecin vagy 11-(1-6 szénatomos)-alkoxi-kamptotecin megfelelő 1,2,6,7-tetrahidro-analóggá történő hidrogénezését, majd feloldjuk a kamptotecin vagy 11-(1-6 szénatomos)-alkoxi-kamptotecin egy részét, vagy a szennyeződéseket, vagy mindkettőt, és egy második lépésben a kamptotecintt vagy 11-(1-6 szénatomos)-alkoxi-kamptotecint elválasztjuk a szennyeződésektől. A tisztítási eljárás második lépésében az elválasztott kamptotecin vagy 11-(1-6 szénatomos)-alkoxi-kamptotecin előnyösen mentes az olyan szennyeződésektől, amelyek képesek lennének késleltetni a kamptotecin vagy 11-(1-6 szénatomos)-alkoxi-kamptotecin hidrogénezését 1,2,6,7-tetrahidro-analógokká. A tisztítási módszert ugyanazzal vagy egy másik oldószerrel meg• · ··«· ··· · ·· • · · · • « · · · ·

- ιοί smét élhetjük, hogy ezáltal fokozzuk kívánt esetben a kamptotecin vagy 11-alkoxi-analógjának tisztaságát.

A tisztítási eljárás különösen olyan szennyeződések eltávolításánál hasznos, amelyeket az össz-szintézis későbbi lépéseiben nehéz már eltávolítani. így például a 85-87 tömeg % kamptotecint és 9 - 12 % szennyeződést (HPLC, PÁR (csúcs felület arányok)) tartalmazó szennyezett kamptotecin tisztítását elvégezve több mint 96 % kamptotecint tartalmazó terméket kapunk (HPLC, PÁR). A tisztított kamptotecint vagy 11-alkoxi-kamptotecint megbízhatóbban hidrogénezhetjük tetrahidro-származékokká összevetve a nem tisztított vegyületekkel, melyek a hidrogénezést késleltető szennyeződéseket tartalmaznak. Ez különösen a nagyobb méretben végzett hidrogénezésnél fontos. Ezenkívül a módszer segítségével viszonylag kis térfogatú oldószert használhatunk, miközben a szennyeződéseket hatásosan eltávolítjuk.

Az első lépésben előnyösen 10 - 35 térfogat oldószert használunk a kamptotecin vagy 11-alkoxi-kamptotecin térfogatára vonatkoztatva. A tisztítás során alkalmazhatunk oldószerként N,N-dimetil-formamidot, N-metil-pirrolidont, ecetsavat, trifluor-ececetsavat, dimetil-szulfoxidot vagy ecetsav és dimetil-szulfoxid elegyét, etanol és dimetil-szulfoxid elegyét és ecetsav és sósav elegyét.

A tisztítási módszerrel vagy a természetesen előállított, vagy szintetikus kamptotecin tisztítását végezhetjük. Oldószerként a fent említett oldószereket használhatjuk előnyösen. A Nothapodytes foetida növényekből kapott kamptotecint előnyösen ,· *Μ4 4·«· ♦ · • · · · * * * * • · · ··· ♦ · • * * * * ···· ·· ··· *♦ *·

- 11 ecetsavval vagy Ν,Ν-dimetil-formamiddal tisztíthatjuk egy egyszeri tisztítási kezeléssel vagy különösen úgy, hogy először ecetsavval, különösen forró ecetsavval tisztítjuk, majd kívánt esetben egy második tisztítási eljárásnak vetjük alá előnyösen Ν,Ν-dimetil-formamiddal, különösen forró N,N-dimetil-formamiddal. A második tisztítással a termelést a következő hidrogénezési lépésben tovább fokozhatjuk. Hasznos, hogyha a Nothapodytes foetida-ból kapott kamptotecinhez a szennyeződéseket abszorbeáló anyagot, például aktív szenet adagolunk a tisztítás közben, melyet előnyösen ecetsavval végzünk. A Camptotheca accuminata fákból kapott kamptotecin esetében előnyösen Ν,Ν-dimetil-formamiddal, különösen forró N,N-dimetil-formamiddal végezzük a tisztítást, egy második tisztítási eljárásnál előnyösen Ν,Ν-dimetil-formamiddal dolgozunk, és így fokozhatjuk a kapott kamptotecin tisztaságát.

Az oldáshoz használt hőmérséklet előnyösen 60 °C-tól az oldószer reflux hőmérsékletéig terjed, és még előnyösebben 100 °C körüli. Az oldás után a tisztítás fokozására hűtést alkalmazhatunk. A kamptotecint vagy 11-alkoxi-kamptotecint például egy második lépésben, például szűréssel különíthetjük el.

Tetrahidro-kamptotecin vagy 11-alkoxi analóg előállítása hidrogénezéssel

A kamptotecin hidrogénezése tetrahidro-kamptotecinné szerepel az 59-5188 számú japán szabadalmi leírásban, mégpedig oly módon, hogy a hidrogénezési reakciót ecetsavban vagy dioxán és ecetsav elegyében atmoszférikus nyomáson és szobahőmérsék ·· »« ··*< 4···

létén platina katalizátor jelenlétében végezzük. Ez a módszer nem teljesen kielégítő annak következtében, hogy a hidrogénezett termék reakcióképes. A hidrogénezés ezért tovább folytatódik, és a kívánt tetrahidro-kamptotecin terméken kívül túlredukált termékek is keletkeznek. Ezenkívül a gyorsabb reakció és/vagy a kamptotecin kiindulási anyag fokozott konverziója elérése céljából kívánatos lenne a szupraatmoszférikus hidrogén-nyomás, ez azonban nem szereple a fenti japán szabadalmi leírásban. Mi azt találtuk, hogy az ilyen nyomás nem volna hatékonyan alkalmazható például a japán szabadalmi leírás szerinti eljárásban, mivel további túlredukált termékek keletkeznének.

A találmány szerint egy olyan módszert dolgoztunk ki kamptotecin vagy 11-alkoxi-analóg tetrahidro-kamptotecinné vagy 11-alkoxi analógjává történő átalakítására, amely módszer abból áll, hogy kamptotecint vagy 11-(1-6 szénatomos)-alkoxikamptotecin-származékát hidrogénnel hozzuk érintkezésbe, továbbá hidrogénező katalizátort alkalmazunk hidrogénező katalizátor moderátor jelenlétében, ahol a moderátor hidrogénező katalizátor mérgekből kerül ki. A használt moderátor elősegíti a reakció lefolyását annak tökéletesítését teszi lehetővé, mialatt minimálisra csökkenti, vagy megszünteti a túlredukált termékek keletkezését. A találmány szerinti eljárással lényegesen javítható a konverzió és a reakció szelektivitása. A tetrahidrotermékek további hidrogénezésnek a reakciókörülmények között ellenállnak, a reakciókörülmények közé tartozhat a szupraatmoszférikus hidrogénnyomás és a magasabb hőmérséklet.

A módszerek bármelyikével kapott kamptotecint vagy 114··· ·« • ·· · · · · ♦ ···· «· · · · *· · ·

- 13 -alkoxi-kamptotecint előnyösen a fenti módszerekkel tisztított formában a találmány szerinti eljárással hidrogénezhetjük. A hidrogénező katalizátor moderátor az irodalomból ismert hidrogénező katalizátor mérgekből kerülhet ki. Lehet például kénvegyület, például dimetil-szulfoxid vagy tiofén. A dimetil-szulfoxidot mint katalizátor moderátor különösen előnyösen használhatjuk. Ha moderátorként kénvegyületet alkalmazunk, akkor a hidrogénező katalizátorba lehet beépítve, ilyenek például a szulfidezett hidrogénező katalizátorok.

A használt katalizátor moderátor mennyisége olyan lehet, hogy a konverzió és/vagy a szelektivitás javuljon ahhoz képest, mintha moderátor nélkül hajtottuk végre a reakciót. Előnyös moderátor mennyiség a 0,2 - 5 térfogat% moderátor, például dimetil-szulfoxid per reakcióközeg térfogat.

A hidrogénező katalizátorok lehetnek az ismert hidrogénező katalizátorok, például nemesfém katalizátorok, például platina, beleértve a platina-oxidot, melyet előre redukálhatunk például hidrogénes kezeléssel ecetsavban, vagy lehet platina vagy ródium.

A katalizátor lehet hordozóanyagon, például szénen vagy alumíniumon. Ha hordozós katalizátort használunk, akkor ez csökkentheti a használt ossz fém mennyiséget, miközben a hidrogénezési sebesség kielégítő, és ezért előnyös. Ilyen katalizátorok lehetnek például a platina csontszén katalizátor, például 5 % platina/szén, platina szulfidezett szénen, például 5 % platina/szulfidézett szén, platina/alumínium-oxid, például 5 % platina/alumínium-oxid. Platina/csontszén, különösen 5 % ·· ·« ···· <·♦· ·* ♦ ···♦ · * · platina/szén különösen előnyös.

A hidrogénező katalizátor mennyiségét úgy választjuk meg, hogy a reakció szempontjából előnyös legyen, például 5 % platina/szén alkalmazható hidrogénező katalizátorként, beleértve a hordozót, amely 20 - 110 %, különösen 50 tömeg % a kamptotecin vagy 11-alkoxi-kamptotecin anyag mennyiségére vonatkoztatva. Különösen előnyös a kiindulási anyag tömegére vonatkoztatott 5 % platina/szén katalizátor, amely 2,5 % platinát tartalmaz.

A tetrahidro-származékok előállítását találmány szerint megfelelő hidrogén nyomáson végezzük, például atmoszférikus hidrogén nyomáson. Előnyösen szupra-atmoszférikus hidrogén nyomást alkalmazunk. A magasabb nyomásnál a reakció gyorsabban megy végbe, és/vagy teljesebb a kiindulási anyag elfogyása szempontjából, miközben elkerüljük a túlredukált termékek képződését, és jó hatékonyság érhető el. A 35 psi-nél nagyobb hidrogénnyomás az előnyös, 50-70 psi különösen előnyös hidrogénnyomás.

Lényegében hidrogénből álló atmoszféra előnyös. A reakcióközeg előnyösen tartalmaz egy oldószer-tartalmú folyadék fázist, amelyben a termék oldódik, és a katalizátor hatékony, és a térfogata a közeg hatékony keverését elősegíti, valamint lehetővé teszi a hidrogén reagens jó diffúzióját. A folyadék fázist képző folyadék lehet például ecetsav, amelyet előnyösen 10-30 térfogat mennyiségben alkalmazunk a kamptotecin vagy 11-alkoxi-kamptotecin térfogatára vonatkoztatva. 30 térfogatnál nagyobb mennyiségű ecetsav is alkalmazható a kiindulási anyag térfogatára vonatkoztatva, bár a folyadék feleslege lassíthatja ·· «4 »·«« ····*4 • H · · · 4 ·· • 4 4 ··« ·· • ·· 4 · 4 ·4 ··«« 4« ··« ·444 a reakciót. Az a hőmérséklet, amelyen a reakciót végezzük, előnyösen szobahőmérséklettől 90 °C-ig változik, még előnyösebben 40 - 80 °C. Fűtés hatására a reakció gyorsabban megy végbe, és teljesebbé válik, ha szobahőmérsékleten végezzük. A reakcióközeg komponenseinek összekeverésének sorrendje kívánság szerint választható meg. A kiindulási anyag hidrogénezésével a terméket négy sztereoizomer formájában kapjuk, melyek abban különböznek egymástól, hogy más a B és C gyűrűk közös hífdfő szénatomjaihoz kapcsolódó hidrogénatomok relatív helyzete. A találmányhoz tartozik valamennyi és bármelyik sztereoizomer előállítása.

A jelen találmány kiterjed az új 11-1-6 szénatomos alkoxi1,2,6,7-tetrahidro-kamptotecin intermedierek előállítására is. Az új intermediereket úgy állíthatjuk elő, hogy egy 11-1-6 szénatomos alkoxi-kamptotecint hidrogénnel vagy hidrogénező katalizátorral hozunk érintkezésbe, előnyösen a fent megadott hidrogénező katalizátor moderátor közbeiktatásával.

A tetrahidro termékeket megfelelő módon, például az 59-5188 számú japán szabadalmi leírásban leírt tisztítási módszerrel izolálhatjuk. Előnyösen leszűrjük a hidrogénező katalizátort, majd közvetlenül ezután alakíthatjuk át a tetrahidro termékeket a leírt módon 10-hidroxi-analógokká.

10-Hidroxi-kamptotecin vagy 10-hidroxi-ll-alkoxi analógjának előállítása oxidációval

Az 1. reakcióvázlatban szemléltetett szintézis 2. lépése a tetrahidro-kamptotecin vagy 11-alkoxi analógjának oxidálása 10-hidroxi-kamptotecinné vagy 10-hidroxi-ll-alkoxi analóggá. Ennek a lépésnek a kiindulási anyagát előnyösen a fent leírt hidro16 génezési módszerrel állítjuk elő.

A tetrahidro-kamptotecin e-lőállítáaáfe· 10-hidroxi-kamptotecinné leírták az 59-5188 számú japán szabadalmi leírásban, ahol leírják az oxidálószer alkalmazását, amely lehet ólom-tetraacetát, CAN (cérium(IV) ammónium-nitrát), vagy Fremy-só (kálium-nitrózó-diszulfonát, ((KSC^^NO), krómsav vagy anhidrid, dikromátsók, kálium-permanganát és vas-klorid. A japán szabadalom szerint az e lépésben használt oldószerek lehetnek például ecetsav, metanol, etanol, kloroform, piridin, benzol, metilén-klorid, dioxán, tetrahidrofurán, víz és trifluor-ecetsav, valamint ezek elegye. A japán szabadalom szerinti eljárás azonban hátrányos abból a szempontból, hogy az oxidáció nem elég szelektív, és a 10-hidroxi-kamptotecinen kívül lényeges mennyiségben keletkezik nemkívánatos kamptotecin, amelyet a végterméktől el kell különíteni. A 10-hidroxi-kamptotecin termék önmaga is reakcióképes és a japán szabadalmi leírásban említett eljárás során hajlamos az elbomlásra. Ezenkívül az oxidálószer például ólom-tetraacetát alkalmazása a végtermék nehézfémes szennyeződését eredményezheti.

A jelen találmány szerint tetrahidro-kamptotecint vagy 11-(1-6 szénatomos)-alkoxi-analógját oxidáljuk 10-hidroxi-kamptotecinné vagy ID-hidroxi-ll-alkoxi-analógjává oly módon, hogy a tetrahidro-kamptotecint vagy 11-(1-6 szénatomos)-alkoxi-kamptotecin analógját oxidálószerrel hozzuk érintkezésbe folyékony közegben, ahol (a) a folyékony közegben legalább egy rész 10-hidroxi-kamptotecin vagy 10-hidroxi-ll-alkoxi-kamptotecin kicsapódik a reakció közben, azzal a megkötéssel, hogyha kiindu lási anyagként tetrahidro-kamptotecint használunk, és oxidálószerként az alább részletezett (b) oxidálószert használjuk, akkor folyadékként használt (a) folyékony reakcióközeg nem tartalmaz metanolt, és/vagy (b) az oxidálószer kálium-perszulfát, jódozó-benzol, jódozó-benzol-észter, nátrium-perjódát vagy kálium-perjodát lehet. Ha kiindulási anyagként tetrahidrokamptotecint alkalmazunk, és nem alkalmazunk (b) oxidálószert, akkor a folyékony (a) reakcióközeg nem tartalmaz metanolt, etanolt, kloroformot, benzolt, metilén-kloridot, dioxánt vagy vizet önmagában.

Az (a) folyékony reakcióközeg alkalmazásának előnye, hogy a

10-hidroxi- vagy 10-hidroxi-ll-alkoxi-kamptotecin termékek kicsapódnak, és így lényegében izolálva vannak, ezáltal csökken vagy eliminálódik a kívánt termékek további reakciója. Ilyen közeg alkalmazásával a kamptotecin vagy 11-alkoxi-kamptotecin képződése mint nemkívánatos mellékterméké minimalizálható vagy elkerülhető. Ezenkívül a kívánt termékeken kívüli túloxidált vegyületek képződése is minimalizálható vagy elkerülhető a reakció utáni közegben, ezáltal lényegesen nő a termék termelése.

Előnyös, ha (a) folyékony reakcióközegként vízből és szerves oldószerből álló elegyet használunk a kicsapás eléréséhez. Az (a) reakcióközeg, amely víz és szerves oldószer elegye, előállítható például úgy, hogy vizet és szerves folyadékot, például ecetsavat, acetont, N,N-dimetil-formamidot vagy rövidszénláncú alkoholt, például metanolt, etanolt, vagy izopropanolt elegyítünk olyan relatív mennyiségekben, hogy a kapott folyékony készítményben legalább egy része a 10-hidroxi-kamptotecinnek • · • · · ···· ·· ··· ·· ··

- 18 vagy 10-hidroxi-ll-alkoxi-analógjának kicsapódjon.

Rövidszénláncú alkoholon olyan folyékony alkoholt értünk, amely a használt hőmérséklet mellett folyékony, előnyösen 1-4 szénatomos alkohol.

A reakcióközegként előnyösen használt készítmények vizet és szerves oldószert tartalmaznak, ahol a víz mennyisége 25 - 75 térfogat% a folyadék össz-térfogatára vonatkoztatva. Különösen előnyös, ha a víz és az oldószer, például ecetsav, aceton, N,N-dimetil-formamid vagy rövidszénláncú alkohol térfogataránya 1:1 körüli.

Előnyösen a termékek lényegében nem oldódnak az (a) folyékony reakcióközegben.

További előny, hogyha folyékony közegként vizet és ecetsavat használunk. Ha önmagában használjuk az ecetsavat, mind a 10-acetoxi-kamptotecin vagy 10-acetoxi-ll-alkoxi-analógja és

10-hidroxi-kamptotecin vagy 10-hidroxi-ll-alkoxi-analógja keletkezik, és a nagyobb mennyiségben az előbbi acetoxi-vegyületek keletkeznek. Víz hozzáadásával csökken vagy teljesen megszűnik az ilyen acetoxi-vegyületek mennyisége a reakció utáni közegben, így nem szükséges ezen vegyületek külön hidrolizálása 10-hidroxi-kamptotecinné vagy IO-hidroxi-11-alkoxi-analóggá.

A (b) oxidálószerek előnye, hogy elég enyhék, amennyiben a 10-hidroxi-ll-alkoxi-kamptotecin termékek további oxidálás során kevéssé, vagy egyáltalán nem bomlanak el. Különösen előnyös (b) oxidálószer a jódozó-benzol-észter, például olyanok, amelyeknek képlete PhI(OR⁷)2» ahol Ph fenilcsoportot jelent; R⁷ az -0R⁷ csoportokban azonos vagy különböző és lehet hidrogénatom, -C(0)• · • · · ·

- 19 -R⁸ vagy -SO2-R⁹, ahol R⁸ és R⁹ szubsztituálatlan vagy szubsztituált szénhidrogéncsoport; és ahol R⁷ legalább az egyik -OR⁷ csoportban hidrogénatomtól eltérő. Ilyen észterek lehetnek például a jód-benzol(bisz)trifluor-acetát, amelyet úgy kapunk, hogy jódozó-benzolt trif luor-ecetsawal észterezünk, vagy jódbenzol-diacetát, amelyet jódozó-benzol ecetsavas észterezésével kapunk, és a hidroxi-(toziloxi)-jódbenzol, amelyet jódozó-benzol toluolszulfonsavas észterezésével képezünk. Ezek közül is a legelőnyösebb a jódbenzol-diacetát [(PhI(0C(0)CH3)2) ] .

Előnyös, ha oxidálószerként a (b) oxidálószerek közül különösen jód-benzol-diacetátot használunk, amikor folyadékközegként az (a)-t alkalmazzuk, ennek a kombinációnak az alkalmazása különösen jó eredményekhez vezet. Az oxidálószer mennyiségét megválasztva befolyásolhatjuk a reakciót.

Ha két ekvivalensnél többet használunk oxidálószerként tetrahidro-kamptotecinhez vagy 11-alkoxi-analóghoz viszonyítva, akkor ez előnyös. Az oxidálószer és a tetrahidro-kamptotecin vagy 11-alkoxi-analógjának arányaként a három (3) ekvivalens a legelőnyösebb. Ha a fenti (b) oxidálószert használjuk, akkor folyadékként legelőnyösebb az Ν,Ν-dimetil-formamid, az aceton, a rövidszénláncú alkohol vagy előnyösen ecetsav, bár a legelőnyösebb a fenti (a) folyadék közeg.

A tetrahidro kiindulási anyagból előnyösen 2-10 %-ot, előnyösen 5-10 tömeg %-ot használunk a folyadék tömegére vonatkoztatva. A reakció megfelelő nyomás és hőmérséklet értékeit megválasztva előnyös az atmoszférikus nyomás és szobahőmérséklet. A reakciót levegőn is elvégezhetjük.

···· ···· • · • · · · • · · · • · · · • · · • · · • · · · · ·

- 20 A jelen találmány kiterjed az új 10-hidroxi-ll-(1-6 szénatomos) -alkoxi-kamptotecin intermedierekre, ezeket az új intermediereket úgy állíthatjuk elő, hogy 11-(1-6 szénatomos)-alkoxi-1,2,6,7-tetrahidro-kamptotecint oxidálószerrel reagáltatunk folyadék közegben, előnyösen a fent leírt módon.

Az (19 általános képletű vegyületek előállítása

Az (IJ) általános képletű vegyületeket az 1. reakcióvázlat szerinti szintézis 3. lépésében állítjuk elő. A 10-hidroxi-kamptotecin vagy 10-hidroxi-ll-alkoxi-kamptotecin kiindulási anyagokat előnyösen a fent leírt oxidációs módszerrel kapjuk. Alkalmazhatunk azonban másképp előállított kiindulási anyagokat is. így például a 10-hidroxi-kamptotecin természetesen képződött vegyület, melyet ugyanabban a növényben találhatunk, mint a kamptotecint. A 10-metoxi-kamptotecint, melyet ugyanabból a növényből izoláltak, mint a kamptotecint, átalakíthatjuk 10-hidroxi-kamptotecinnel, ha a hidrogén-bromiddal forraljuk visszafolyató hűtő alatt. A 10-hdiroxi-kamptotecint előállíthatjuk az 59 5188 számú japán szabadalmi bejelentés szerinti fent leírt módszerrel is, oly módon, hogy a kamptotecin piridin gyűrűjét redukáljuk, majd ólom-tetraacetáttal oxidáljuk. Továbbá a racém 10-hidroxi-kamptotecint előállíthatjuk Wani és munkatársai, J. Med. Chem. 23, 554 (1980) szakirodalmi helyen leírt módszerével is.

A találmány szerint az (Ik) általános képletű vegyületeket előállíthatjuk úgy, hogy a kiindulási anyagot gyorsan reagáltatjuk, és lényegében kiindulási anyag nem marad. Különösen az (Ib) általános képletű vegyületeket vagy gyógyászatilag elfogadható

····

sóit állíthatjuk elő, ahol

R jelentése hidrogénatom vagy 1-6 szénatomos alkoxicsoport, R¹ jelentése -0-R², -S-R³, -N-(R⁴)(R⁵),

R², R³, R⁴ és R5 azonos vagy különböző, és jelentésük hidrogénatom, 1-6 szénatomos alkil-, 3-6 szénatomos hidroxi-alkil-, 1-6 szénatomos dialkilamino-(2-6 szénatomos)alkil-, 1-6 szénatomos alkilamino-(2-6 szénatomos)-alkil-, 2-6 szénatomos amino-alkil- vagy 3-7-tagú szubsztituálatlan vagy szubsztituált karbociklusos gyűrű, vagy ha RÍ -N-^(R⁴)(R⁵), akkor R⁴ és R⁵ a nitrogénatommal együtt, melyhez kapcsolódik, szubsztituált vagy szubsztituálatlan, adott esetben további heteroatomokat tartalmazó heterociklusos gyűrűt is képezhet, és

R⁶ jelentése hidrogénatom, vagy 1-6 szénatomos szubsztituálatlan vagy szubsztituált alifás csoport, vagy az oxigénatommal együtt, melyen keresztül kapcsolódik, gyógyászatilag elfogadható észtercsoportot képezhet, és az eljárás abból áll, hogy (i) egy (Ib) általános képletű vegyületet vagy gyógyászatilag elfogadható sóját állítjuk elő, ahol R¹ jelentése

-N-(R⁴)(R⁵), és r6 jelentése hidrogénatom, oly módon, hogy 10-hidroxi-kamptotecint vagy 10-hidroxi-ll-(1-6 szénatomos) -alkoxi-kamptotecint (II) általános képletű vegyülettel reagáltatunk, ahol R⁴ és R⁵ jelentése a fenti, és (ii) adott esetben (a) az olyan (Ib) általános képletű vegyület és gyógyászatilag elfogadható sója előállítására, ahol R¹ jelentése -O-R² vagy -S-R³, az (i) lépésben előállított ve ·· ·· ··♦· ···· ·· • ••·· ··· ······ · · • · · · · · · · ···· ·· · ·· · · ·· gyület aminocsoportját -O-R² vagy -S-R³ csoporttá alakítjuk, és/vagy (b) az olyan (Ib) általános képletű vegyület vagy gyógyászatilag elfogadható sója előállítására, ahol R^ jelentése hidrogénatomtól eltérő, az (i) pontban kapott vegyület 10-helyzetű hidroxilcsoportját -OR⁶ csoporttá alakítjuk, ahol R⁶ jelentése a hidrogénatomot kivéve a fenti.

A (ii) lépés (a) pontja szerint az R¹ helyén -0-R² vagy -S-R³ csoportot tartalmazó vegyületeket például úgy állíthatjuk elő, hogy az (i) pont szerinti vegyületet HO-R² vagy HS-R³ általános képletű alkohollal, illetve tiollal elegyítjük, ahol R² és R³ jelentése a fenti, inért oldószerben, például N,N-dimetil-formamidban.

Ha az előállítandó vegyület R¹ -0-R² vagy -S-R³, akkor előnyös, hogyha az (i) lépésben egy R¹ helyén -N(CH3)₂ általános képletű vegyületet állítunk elő. Ha az (i) lépés szerint előállított vegyület szabad bázis, akkor a (ii) lépés (a) pontja szerinti eljárásban kis mennyiségű erős savat, például sósavat adagolunk, és a (ii) lépés (a) pontját egyidejűleg vagy az (i) lépés után végezhetjük. A lépéseket egyidejűleg végezhetjük, és ilyenkor R¹ helyén -0-R² vagy -S-R³ képletű csoportot tartalmazó vegyületet kapunk például úgy, hogyha megfelelő alkoholt vagy tiolt alkalmazunk az (i) lépés szerinti reakcióelegyben, és/vagy az erős savat adagoljuk a reakcióelegyhez, vagy az aminsót erős sav sója formájában alkalmazzuk. Az (ii) lépés (b) pontját az i) lépés után végezhetjük.

R⁶ lehet például 1-6 szénatomos telítetlen vagy telített • · * ·« «··· ···· ·· « ♦ · · · · 9 · ··* · · * · · « · · · ·« ··· ·· ·♦

- 23 alifás csoport, amely egyenes vagy elágazó láncú alifás lehet, és előnyösen szubsztituálatlan vagy szubsztituált 1-4 szénatomos alkilcsoport. A gyógyászatilag elfogadható észterek közül előnyösek azok, ahol R⁶ 1 - 6 szénatomos telítetlen vagy telített egyenes vagy elágazó láncú alifás karbonil-csoport, előnyösen 1-4 szénatomos szubsztituálatlan vagy szubsztituált alkil-karbonil-csoport.

A karbociklusos gyűrű kifejezés teljesen telített vagy részletesen telített vagy teljesen telítetlen gyűrűrendszert jelöl.

Az (Ib) általános képletű vegyületek közül előnyösek azok, ahol RÍ jelentése dimetil-amino-, N-morfolino-, N-metil-piperazinil-, (4'-piperidin)-Ν-piperidinil-, ciklohexil-amino-, N-metil-anilino-, etoxi-, ciklopropil-amino-, N,N-dimetil-amino-etoxi-, Ν,Ν-dimetil-amino-etil-tio-, N,N-dimetil-amino-etil-amino- vagy -metil-amino-csoport. Különösen előnyösek azok az (Ib) általános képletű vegyületek, amelyekben R¹ jelentése dimetil-amino- vagy N-morfolino-, különösen dimetil-aminocsoport, és ezen vegyületek hidroklorid és acetát-sói.

Az (i) lépés reagenseinek viszonylagos mennyisége a reakció függvényében alkalmas. Előnyös, hogyha a (II) általános képletű vegyületet feleslegben alkalmazzuk, vagyis a (II) általános képletű vegyület 1,2 ekvivalensét feleslegben vagy egyenlő mennyiségben használjuk a 10-hidroxi- vagy 10-hidroxi-ll-alkoxi-kamptotecin kiindulási anyaghoz viszonyítva.

A (II) általános képletű vegyület reakciójánál a használt hőmérséklet előnyösen 0 ^eC és az oldószer visszafolyatási hőmér ·· ·· ···· ···· ·· ····· ··· * · · · · · · · • ·· ····· ···· ·· ··· ·· ·· séklete, még előnyösebben szobahőmérséklet között változik. Ha szobahőmérsékleten dolgozunk, akkor a viszonylag kevésbé stabil (Hí általános képletű vegyületek például szabad bázis formájában, vagy ha ecetsavat használunk oldószerként, akkor acetátsó formájában kevésbé vannak kitéve hő bomlásnak. Előnyös az atmoszférikus nyomás. A reakciót levegő atmoszférán is végrehajthatjuk.

A találmány szerinti eljárást az (Ib) általános képletű vegyületek előállítására végrehajthatjuk oldószerben, például ecetsavban. A 10-hidroxi- vagy 10-hidroxi-ll-alkoxi kiindulási anyagot előnyösen 4-10 tömeg % mennyiségben alkalmazzuk az oldószer tömegéhez viszonyítva.

A találmány szerinti eljárást, különösen annak (i) lépését előnyösen oldószerben végezzük, amely oldószer lehet acetonitril vagy rövidszénláncú alkohol. Az acetonitrilt vagy a rövidszénláncú alkohol oldószert egy vagy több más szerves folyadékkal is összekeverhetjük. Ha oldószerként acetonitrilt alkalmazunk, akkor például önmagában vagy egy rövidszénláncú alkohollal összekeverve vagy egy inért klórozott szénhidrogénnel, például metilén-kloriddal elegyítve alkalmazhatjuk. Ha oldószerként rövidszénláncú alkoholt használunk, akkor például önmagában vagy egy inért klórozott szénhidrogénnel együtt keverhetjük ősze.

A rövidszénláncú alkohollal és inért klórozott szénhidrogénnel kevert oldószer alkalmazása előnyös. Különösen előnyös, ha egy rövidszénláncú alkoholt, például 1-propanolt és metilénkloridot használunk, még előnyösebben 5 rész alkohol:10 rész metilén-klorid térfogatarányban.

• · · · ·*«· ···· • · · · · • * • ·· ···

Az (Ib) általános képletű vegyületek előállításához használt előnyös oldószer rendszer összevetve a például ecetsav oldószer alkalmazásával, azt tapasztaljuk, hogy a sav nélküli reakció a sav sócsere nélkül történő izolálását teszi lehetővé, és növelhető a visszanyert termék termelése, például úgy, hogy jobban elfogy a kiindulási anyag. Ezen felül a fent említett előnyös oldószer alkalmazásával a szennyeződésként keletkezett kamptotecint például a fent említett oxidálási lépésnél az anyalikőrökben eltávolíthatjuk, és ezáltal az izolált termék tisztaságát fokozhatjuk.

Az (Ib) általános képletű vegyületeket az alábbiakban részletezett átkristályosításban alkalmazhatjuk. Az (Ib) általános képletű vegyületek nem tartalmazzák azon -(I) óltalúnee képletű·vegyületeket, ahol R², R³, R⁴ és R⁵ hidroxi-etilcsoportot jelent. Az utóbbi vegyületeket például a 0321 122 számú európai szabadalmi leírás szerint állíthatjuk elő.

Közismert, hogy az (B) általános képletű vegyületek E gyűrűjében lévő aszimmetrikus szénatom következtében, azaz a 20as szénatom miatt optikai izomerek léteznek. Az előnyös izomer az S-izomer, bár az R-izomer és a racém elegy is a találmányhoz tartozik.

A gyógyászatilag elfogadható sók és előállításukat szolgáló eljárások ismertek a szakember számára. Az előnyös (D) általános képletű gyógyászatilag elfogadható sók közé tartoznak az acetát, metánszulfonát és különösen hidroklorid, például mono- és dihidroklorid. A dihidroklorid-sót előállíthatjuk úgy, hogy sósav felesleget és a B gyűrű kinolin nitrogénatomjának, valamint az ·*·· ··· · ··

- 26 R¹ csoport nitrogénatomjának protonezésével kapott vegyületet reagáltatunk. Gyógyászatilag elfogadható sók például a kvaterner ammóniumsók, melyeket például úgy kapunk, hogy a fent említett (i) lépés szerinti vegyületet alkilezőszerrel kezeljük. Előnyös az (B) általános képletű vegyületnek azon sója, ahol a 9-helyzetű szubsztituens CH2~N(CH3) 3+. Az (B) általános képletű vegyületek kvaterner sóinak gyógyászatilag elfogadható anionjai például a metánszulfonát és klorid.

A találmány kiterjed az R¹ helyén 1-6 szénatomos alkoxicsoportot tartalmazó új (Ii) általános képletű vegyületekre is.

Vízoldékony kamptotecin analógok tisztítás és izolálása

Az (11) általános képletű vegyületeket vagy gyógyászatilag elfogadható sóikat például a fent leírt módon tisztíthatjuk és izoláljuk. Ez történhet például oszlopkromatográfiásan, liofilizálással vagy desztillálással. Az (B) általános képletű vegyületet - a képletben

R jelentése hidrogénatom vagy 1-6 szénatomos alkoxicsoport, RÍ jelentése -0-R², -S-R³, -N-(R⁴)(R⁵),

R², R³, R⁴ és R⁵ azonos vagy különböző, és jelentésük hidrogénatom, 1-6 szénatomos alkil-, 3-6 szénatomos hidroxi-alkil-, 1-6 szénatomos dialkilamino-(2-6 szénatomos)alkil-, 1-6 szénatomos alkilamino-(2-6 szénatomos)-alkil-, 2-6 szénatomos amino-alkil- vagy 3-7-tagú szubsztituálatlan vagy szubsztituált karbociklusos gyűrű, vagy ha R¹ -N-^(R⁴)(R5) , akkor R⁴ és R³ a nitrogénatommal együtt, melyhez kapcsolódik, szubsztituált vagy szubsztituálatlan, adott esetben további heteroatomokat tartalmazó heterocik-

* « ♦ ·« ···♦

- 27 lusos gyűrűt is képezhet, és

R⁶ jelentése hidrogénatom, vagy 1-6 szénatomos szubsztituálatlan vagy szubsztituált alifás csoport, vagy az oxigénatommal együtt, melyen keresztül kapcsolódik, gyógyászatilag elfogadható észtercsoportot képezhet vagy gyógyászatilag elfogadható sóját a következő módon tisztítjuk és izoláljuk.

(a) először a vegyületet oldó folyadékot olyan mennyiségben adagoljuk, hogy legalább egy része a vegyületnek oldatot vagy szuszpenziót képez, (b) majd az (a) lépés után egy második folyadékot adagolunk az (a) lépésben kapott oldathoz vagy szuszpenzióhoz, mely folyadék megkönnyíti a benne feloldott vegyület átkristályosítását, majd a vegyületet átkristályosítjuk, és (c) az (II) általános képletű vegyületet vagy sóját beszűrve izoláljuk.

Az (a) - (c) lépéseket előnyösen olyan hőmérsékleten végezzük, amelyen lényegében az (Ity általános képletű vegyület vagy sója stabil.

A találmány szerinti tisztítási eljárás munkát és költséget kímélő, például a kromatográfiás tisztítással összevetve. A találmány szerinti eljárással kapott termék tisztább is, mint a kromatografálással előállított. Ha szűréssel izoláljuk a terméket, ezzel időt és munkát takarítunk meg, például a liofilizálással összehasonlítva, és a termék könnyebben kezelhető, mint a liofilizált termék. Ezen túlmenően a találmány szerinti eljárással kapott vegyület sótartalma beállítható. A nyerstermék kloridtartalma például 100 - 200 % között változik a monohidroklorid esetében, és ez beállítható körülbelül a monohidroklorid értékére.

Az (a) lépésben használt oldószer lehet bármilyen oldószer, amely megfelelő mennyiségben feloldja legalább egy részét az (Ity általános képletű vegyületnek vagy sójának, és ily módon oldat vagy szuszpenzió keletkezik. Az oldószer természetét és mennyiségét a teljes feloldáshoz választjuk meg. Az (a) lépés során enyhe melegítést alkalmazhatunk, előnyösen olyan hőmérsékleten melegítünk, amely lényegében a vegyület instabilitását elkerüli, ilyen például a 40 °C alatti hőmérséklet. Előnyös, ha az oldást szobahőmérsékleten tudjuk végezni, előnyösen 3-15 térfogat oldószert használunk a tisztítandó vegyület térfogatára számítva.

Az (a) lépésben előnyös oldószer a víz, bár szerves oldószereket vagy víz és elegyedő szerves oldószerek elegyét is használhatjuk. Alkalmazható a híg sósav is.

Az (a) lépés után előnyösen szűrést alkalmazunk a nemkívánatos nem oldódó anyag eltávolítására.

A szűrést önmagában ismert módon végezhetjük. Az (a) lépésben kapott oldatot vagy szuszpenziót vagy szűrletét, ha az (a) lépés után szűrési lépést alkalmazunk, előnyösen bepároljuk, például vákuum segítségével. Előnyös a szobahőmérsékleten történő bepárlás.

A (b) lépésben folyadékot adagolunk, amely az oldat vagy szuszpenzió átkristályosítását könnyíti meg. Előnyös, ha a lépés közben a hőmérsékletet 40 °C alatt tartjuk, még előnyösebben • ·· «···* •«·« «« · ·* ·· · ·

- 29 szobahőmérsékleten.

A (b) lépésben hozzáadott folyadék előnyös mennyisége 15 60 térfogat folyadék/tisztítandó vegyület térfogata. A (b) lépésben adagolt folyadékok lehetnek aceton, acetonitril, rövidszénláncú alkoholok, például metanol, etanol, 1-propanol, 2-propanol vagy tetrahidrofurán, és előnyös az 1-propanol vagy az aceton. Az (a) lépés szerinti oldószer adagolása, majd a (b) lépés szerinti folyadék adagolása előnyökkel jár, például a folyadékok egyidejű adagolásához képest. Az (a) lépésben említett oldást gyorsabban és teljesebben végezhetjük, hogyha a szűrési lépéstt is alkalmazzuk az oldhatatlan szennyeződések eltávolítására. Ezen túlmenően az (a) lépésben fokozott oldást érünk el, ha egymást követően adagolunk, és ilyenkor viszonylag alacsony hőmérsékleten sikerül az oldást végbevinni, minimalizálva vagy elkerülve ezáltal a tisztítandó vegyület lebomlását.

Az átkristályosított elegyet előnyösen keverjük és/vagy hűtjük, hogy a terméket teljesen kicsaphassuk, melyet ezután szűréssel elkülönítünk. A termék szárítható, például vákuumban és/vagy melegítés közben.

Az (II) általános képletű vízoldékony kamptotecin analógok vagy sóik olyan mennyiségben használatosak, amely hatékonyan gátolja az ilyen analógra érzékeny tumorsejtek növekedését, és az ilyen gátlásra alkalmas gyógyászati készítményekben. Az (11) általános képletű citotoxikus vegyületek potenciálisan gátolják a tisztító topoizomeráz I-et. A gyógyászati készítmények tartalmazhatnak hatásos mennyiségű tumorsejt növekedésgátló (II) általános képletű vegyületet vagy sóját, valamint inért gyógyászatilag elfogadható hordozót vagy hígítót.

Az (BJ általános képletű vegyületet ismert dózisban adagolhatjuk. A hatóanyagot megfelelő mennyiségben összekeverjük ismert, gyógyászatilag elfogadható hordozókkal vagy hígítókkal. Ez a keverés lehet keverés formájában, granulálás, préselés vagy oldás formájában. A gyógyszer készítményeket dózisegység formájában állíthatjuk elő, amely parenterális vagy orális adagolásra alkalmas.

A gyógyászatilag elfogadható hordozót használhatjuk például szilárd vagy folyékony formában. Szilárd hordozók például a laktóz, terra alba, szacharóz, talkum, zselatin, agar, pektin, gumiarábikum, magnézium-sztearát, sztearinsav, stb. A folyékony hordozók lehetnek például szirup, mogyoró olaj, oliva olaj, víz stb. Hasonlóképpen a hordozó vagy hígító tartalmazhat retard hatást elősegítő anyagot, például gliceril-monosztearátot vagy gliceril-disztearátot önmagában vagy viasszal, továbbá etil-cellulózt, hidroxi-propil-metil-cellulózt, metil-metakrilátot stb.

A gyógyászati formák tág variációját alkalmazhatjuk. így, ha szilárd hordozót használunk, akkor a készítmény tablettázható, kemény zselatin kapszulába helyezhetőm por vagy pellet formájában vagy ostya vagy pirula formájában. A szilárd hordozó mennyisége tág határokon belül változhat, de előnyösen 25 mg - 1 g között változik. Ha folyékony hordozót alkalmazunk, akkor a készítmény lehet szirup, emulzió, lágy zselatin kapszula, steril injektálható oldat vagy szuszpenzió formájában ampullában vagy fiolában vagy vízmentes folyékony szuszpenzió is lehet.

·· ·* ·«·· ···♦ ·· • · · · · · · · « · · · · • ·« · · · · · ··· · ·· ♦♦· *· · ·

- 31 STabil vízoldékony dózisforma előállítására egy (Ií) általános képletű vegyület gyógyászatilag elfogadható sóját feloldjuk szerves vagy szervetlen sav vizes oldatában, például 0,3 mól borostyánkősav-oldatban vagy előnyösen citromsavban. Ha egy oldékony só forma nem hozzáférhető, akkor az (H) általános képletű vegyületet egy társoldószerben vagy ezek kombinációjában oldjuk fel, ilyen társoldószerek lehetnek például az alkoholok, propilén-glikolok, polietilén-glikol 300, poliszorbát 80, glicerin 0-60 térfogat% koncentrációban az össztérfogatra vonatkoztatva.

A készítmény lehet a hatóanyag só formájának megfelelő vizes közeggel, például vízzel vagy izotóniás sóoldattal vagy dextrózzal készített oldat formájában. Azok az (UJ általános képletű vegyületek, melyek a 9-es helyzetben nem tartalmaznak lúgos oldalláncot, például karboxilát alkálifémsója, például nátriumsója, amely az E-gyűrű lakton lúgos hidrolízisével keletkezik, oldékony sót erwedményez.

Az (Dí általános képletű vegyület előnyös dózisa a készítményben számos tényező függvénye, ilyen maga a kikészített készítmény, az adagolás módja és helye, valamint a kezelt gazda és a betegség. Az optimális dózis ezen körülmények függvényeképpen ismert dózis meghatározási tesztek során alakul ki.

Az (B) általános képletű vegyületek parenterális adagolása esetén az általánosan alkalmazott dózisszint legfeljebb 20 mg/m²/testfelület/nap 1-5 napig. A dózis mennyisége azonban a gyakorlatban ennél magasabb is lehet. Az adagolást előnyösen minden negyedik héten ismételjük meg négy kezelési időszakban.

• · ···· .··.:....... .··.

: : ···.. : . ·· ··· ♦· ··

Az orális adagolásnál a dózisszint általában legfeljebb 20 mg/m²/testfelület/nap 1-5 napig, és a kezelést megfelelő intervallumokban megismételjük. A gyakorlatban itt is nagyobb lehet a dózis mennyisége.

Az (Ih) általános képletű vegyületekre érzékeny állati tumorsejtek növekedését gátló eljárás szerint a tumorsejtekkel rendelkező gazda állatot megfelelő tumornövekedést gátló mennyiséggel kezeljük. A kezelés során a hatóanyagot adagolhatjuk parenterálisan vagy orálisan, napi adagolással legfeljebb 20 mg/m² testfelület dózisban 1-5 napig megfelelő intervallumokban megismételve a kezelést a fent leírt módon. A gyakorlatban a dózis mennyiségek nagyobbak is lehetnek.

Az alábbi példákkal a találmány további részleteit illusztráljuk.

1. Példa

Kamptotecin átkristályosítása (kínai anyag)

31,1 g (20 S) kamptotecint feloldunk 620 ml N,N-dimetilformamidban 155 °C hőmérsékleten, miközben az elegyet intenzíven keverjük. Az oldatot lassan szobahőmérsékletre hűtjük. Addig keverjük, amíg a kristályosodás be nem fejeződik, és a szuszpenziót leszűrve világossárga szilárd anyagot kapunk. HPLC analízis szerint egyenként körülbelül 1 % szennyeződést tartalmazó 98 %os kamptotecint kapunk, melynek retenciós ideje hosszabb, mint a kamptoteciné. A mintát metanollal mossuk és levegőn szárítjuk. A szárított anyag izolállásával 24,9 g terméket kapunk, amely 263

- 265 °C hőmérsékleten olvad (91 % kísérlethez javított érték).

• . . · · · · · • · * ··· _Λ _ · « 4 · · · · ···> ·· ··· ·· *♦

2. Példa

Kamptotecin átkristályosítása (kínai anyag)

301 g nyers kamptotecint keverés közben 3000 ml N,N-dimetil-formamidban szuszpendálunk. Az elegyet 100 °C hőmérsékleten 14 óra hosszat keverjük, majd lassan keverés közben szobahőmérsékletre hűtjük· A szilárd anyagot megfelelően izoláljuk és metanollal mossuk. Szárítás után állandó súlyig 250 g terméket kapunk, melyet >12 óra hosszat szuszpendálunk 2500 ml (10 térfogat/tömeg %) N,N-dimetil-formamiddal 100 °C hőmérsékleten. A szuszpenziót lassan szobahőmérsékletre hűtjük keverés közben, majd izoláljuk, metanollal mossuk, állandó súlyig szárítjuk és 236 g terméket kapunk (86 % teljes termelés kísérlethez javítva) . Olvadáspont: 263 - 265 °C.

3. Példa

Kamptotecin átkristályosítása (Indiai anyag)

291 g (20 S) kamptotecint keverés közben feloldunk 10,2 liter ecetsavban, miközben visszafolyatásig melegítjük. Hozzáadunk 29 g 10 tömeg %-os aktív szenet, és a forró szuszpenziót Celiten keresztül leszűrjük. A kapott elegyet 5,8 liter térfogatra pároljuk be desztilláció útján. Lehűtjük szobahőmérsékletre keverés közben, és a szilárd anyagot elkülönítjük, metanollal mossuk és állandó súlyig szárítjuk. 230 g anyagot kapunk. A minta nagynyomású folyadékkromatográfiás meghatározás szerint 98 % kamptotecint tartalmaz.

23,4 g (20 S) kamptotecin mintát a fenti módon tisztítunk és 234 ml Ν,Ν-dimetil-formamiddal keverünk 100 °C hőmérsékleten 24 óra hosszat. A szuszpenziót lehűtjük keverés közben szobahő- • · · · ···· ···· ·· ····· · · · ·····* *·· • ·· ····· ···· · · ··· ·· ··

- 34 mérsékletre, és a szilárd kamptotecint leszűrjük. Metanollal mossuk, állandó súlyig szárítjuk és a termék több mint 99 %-os kamptotecin tartalmú nagynyomású folyadékkromatográfiás vizsgálat szerint.

4. Példa

Kamptotecin átkristályosítása (kínai anyag)

1500 g kínai minta (20 S) kamptotecint 15 liter N,N-dimetil-formamiddal keverünk 100 °C hőmérsékleten 24 óra hossazt. A szuszpenziót keverés közben lehűtjük szobahőmérsékletre 24 óra alatt, majd leszűrjük és 2 x 7,5 ml metanollal mossuk. Világossárga szilárd anyagot kapunk, melyet vákuumban szárítunk. 1277 g anyagot kapunk.

1277 g (20 S) kamptotecint 12,8 liter N,N-dimetil-formamiddal 100 °C hőmérsékleten 24 óra hosszat keverünk. A szuszpenziót szobahőmérsékletre hűtjük 24 óra alatt keverés közben, majd leszűrjük, és 2 x 6,4 liter metanollal mossuk. A halványsárga szilárd anyagot vákuumban szárítjuk. 1197 g anyagot kapunk, mely HPLC analízis szerint >99 tömeg % kamptotecint tartalmaz a standard mintához képest.

5. Példa

10-Hidroxi-kamptotecin előállítása (a) Tetrahidro-kamptotecin előállítása

Egy 5-gallonos rozsdamentes acél nagynyomású kevert autoklávba betöltünk 1000 g kamptotecint jégecetben szuszpendálva. 500 g 5 %-os platina csontszén katalizátort jégecettel· szuszpendálva adunk a reaktorba úgy, hogy a reakció során összesen 10 liter ecetsavat használunk fel (10 térfogat/tömeg kamptotecinre • · · · ····· ··· ···*·· · · · • ·« ····· ···· ·· ··· · · · ·

- 35 vonatkoztatva) . 75 ml dimetil-szulfoxidot adunk hozzá, és a reaktort lezárjuk. Nitrogénnel öblítjük, majd a kevert reaktorba 70 psi nyomásig hidrogént töltünk. Ezt a hidrogénnyomást az egész redukció során fenntartjuk. A reaktort fokozatosan 65 °Cra melegítjük, és a hidrogén felvételt óvatosan nyomon követjük. Körülbelül 6 óra múlva lényegében megáll a hidrogén-felvétel, bár a reakciót biztonságosan folytathatjuk legalább 24 óra hosszat anélkül, hogy termelés csökkenést lehetne megfigyelni. A reakcióelegyet 30 °C-ra lehűtjük, atmoszféra nyomásra engedjük ki a reaktort, és az elegyet a reaktorból eltávolítjuk. A reaktort 11 liter jégecettel mossuk, az ecetsav össztérfogatát leszűrve a szuszpendált katalizátort eltávolítjuk, és az egyesített térfogatot nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással megvizsgáljuk a tetrahidro-kamptotecin tartalomra. 874 g, 89 % terméket kapunk. A kísérlet befejezése után a terméket ecetsav oldatban közvetlenül a leírt módon oxidáljuk.

(b) 10-Hidroxi-kamptotecin előállítása

A fent leírt tetrahidro-kamptotecin ecetsavas oldatának felét körülbelül 10,4 liter térfogatú 398 g, 1,13 mól tetrahidro-kamptotecint tartalmazó oldatot töltünk egy 22 literes, kevert üvegedénybe. Az oldatot desztillációval bepároljuk az eredeti térfogat 40 %-ára (4 liter). Az oldatot egyforma mennyiségű desztillált vízzel hígítuk és 20 °C hőmérsékleten keverjük. Nehéz fehér csapadék szuszpenziót kapunk. A szuszpenziót gyorsan keverjük, mialatt 728 mg, 2,0 ekvivalens jód-benzol-diacetátot adunk gyorsan hozzá. Körülbelül 35 °C-os, enyhén exoterm reakciót figyelünk meg. További 400 g, 1,1 ekvivalens jód• » ·

- 36 -benzol-diacetátot adunk hozzá óránként három egyforma részletben. A szuszpenziót 14 óra hosszat keverjük, az adagolás befejezése után. A szuszpenziót desztilláljuk, és összesen 6 liter 1:1 arányú ecetsav:víz elegyet adunk hozzá több részletben úgy, hogy a desztilláció kezdeti részletét állandó térfogaton tartjuk. Miután 12 liter oldószert összegyűjtöttünk, a desztillációt leállítjuk és szobahőmérsékleten 16 óra hosszat keverjük. A terméket elkülönítjük és metanollal mossuk. Állandó súlyig szárítjuk. 398 g terméket kapunk 88 %-os termeléssel a vizsgált anyag tartalmára korrigálva. A termék körülbelül 1 % kamptotecint tartalmaz, és 267 - 268 °C hőmérsékleten olvad.

6. Példa

10-Hidroxi-kamptotecin előállítása

1720 ml vizet adunk lassan 172 g (20 S) tetrahidro-kamptotecin 1720 ml ecetsawal készített oldatához. Az adagolás végén sűrű krémszínű szuszpenziót kapunk, mely nehezen keverhető.

314 g, 2 ekvivalens jód-benzol-diacetátot adunk gyors keverés közben hozzá 6 perc alatt. A szuszpenzió sötétzölddé válik, ahogy majdnem az összes csapadék feloldódik. Néhány perc alatt a szuszpenzió színe sárgára halványul, ahogy több csapadék képződik. A hőmérséklet 36 °C-ra emelkedik. További 1 óra hosszat szobahőmérsékleten keverjük, majd még 79 g 0,5 ekvivalens jód-benzol-diacetátot adunk hozzá 1 perc alatt. A szuszpenziót még 1 óra hosszat keverjük, miközben nincs jelentős exoterm reakció. 63 g, 0,4 ekvivalens további jód-benzol-diacetátot adunk hozzá állandó keverés mellett. További 1,5 óra múlva 16 g (0,1 ekvivalens) jód-benzol-diacetátot adunk hozzá összesen 3 ekvivalens oxidálószert.

A szuszpenziót szobahőmérsékleten 18 óra hosszat keverjük, majd melegítjük, és atmoszférikus nyomáson így az oldószert ledesztilláljuk. Összesen 5160 ml 1:1 arányú ecetsav:víz oldatot adunk periodikusan hozzá, hogy a desztilláció alatt körülbelül állandó térfogatot tartsunk fenn. A szuszpenziót 1720 ml végső térfogatra koncentráljuk. A kezdeti desztillátumot, amely zavaros volt, eltávolítjuk, és két fázisra választjuk külön izolálás céljából. A nehezebb desztillátum fázis többnyire jódbenzolból áll. A desztillációt leállítjuk és a sárga szuszpenziót szobahőmérsékleten keverve 24 óra hosszat hűtjük. A szilárd anyagot leszűrjük, kétszer öblítjük 860 ml metanol részlettel, majd a metanolt szűréssel eltávolítjuk. Az elkülönített szilárd anyagot vákuumban szárítjuk. Szárítás után 171 g terméket kapunk (91 % izolált termelés, a termék tisztaságára korrigálva nagynyomású folyadékkromatográfiás analízissel meghatározva a standard mintához képest). Az izolált termék 1 % kamptotecin mellékterméket tartalmaz.

7. Példa (20 S) 9-N,N-Dimetil-amino-metil-io-hidroxi-kamptotecin hidroklorid-só előállítása

Egy 22 literes lombikat 428 g 10-hidroxi-kamptotecinnel töltünk meg. 4280 ml metilén-klorid és 2140 ml 1-propanol hozzáadása után a kevert szuszpenzióhoz hozzáadunk 259 g bisz(dimetil-amino)-metánt körülbelül 5 perc alatt. A szuszpenziót keverjük, miközben periodikusan nagynyomású folyadékkromatográfiás analízissel nyomon követjük a kiindulási anyag jelen• · ···· ··· · ·· • · · · · ·· ···« ·· • ·· ····· ···· ·· ··· · · · ·

- 38 létét. 5 óra múlva kimutatható kiindulási anyag nem marad (<0,l %) . Körülbelül 6 óra reakcióidő után 514 g koncentrált vizes sósavat adunk folyamatosan 2 óra hosszat 2140 ml 1-propanolban hozzá. Még 16 óra hosszat keverjük, majd a terméket leszűrjük és metilén-kloriddal mossuk. A terméket állandó súlyig szárítva 415 g (91 %) cím szerinti vegyületet kapunk.

8. Példa (20 S) 9-N,N-Dimetil-amino-metil-10-hidroxi-kamptotecin acetát-só előállítása

2,60 mmól (20 S) 10-hidroxi-kamptotecint egyesítünk 6,08 mmól bisz(dimetil-amino)-metánnal 15,45 ml ecetsavban. A cím szerinti vegyületet a reakció után izoláljuk.

9. Példa (20 S) 9-Morfolino-metil-10-hidroxi-kamptotecin acetát-só előállítása

A cím szerinti vegyületet a 8. példa szerint állítjuk elő oly módon, hogy bisz (dimetil-amino)-metán helyett bisz(N-morfolino)-metánt használunk.

10. Példa (20 S) 9-N-Metil-piperazinil-metil-io-hidroxi-kamptotecin acetát-só előállítása

A cím szerinti vegyületet a 8. példa szerint állítjuk elő oly módon, hogy bisz(dimetil-amino)-metán helyett bisz(N-metil-piperazinil)-metánt használunk.

·« ·· ···· ··«· ·· «···· ♦ · · ·»···· ·· • · · »···· ···· ·· ··· · · *·

11. Példa (20 S) -9- (4 ' -Piperidino-piperidinil) -metil-10-hidroxi-kamptotecin acetát-só előállítása

A cím szerinti vegyületet a 8. példa szerint állítjuk elő oly módon, hogy bisz(dimetil-amino)-metán helyett bisz(4‘-piperidino-piperidinil) -metánt használunk.

12. Példa (20 S) 9-Trimetil-ammónium-metil-10-hidroxi-kamptotecin metánszulfonát-só előállítása mg 9-N,N-dimetil-amino-metil-10-hidroxi-kamptotecin acetát-sót, melyet a 8. példa szerint állítunk elő, feloldunk 70 ml diklór-metánban és leszűrjük. A szűrletet 1 ml metil-metánszulfonáttal egyesítjük, lehűtjük és argon áramban részben bepároljuk. 4 óra múlva az oldószert fele térfogatra koncentráljuk és lehűtjük. A csapadékot leszűrjük, feloldjuk 10 ml vízben és 3 x 10 ml etil-acetáttal mossuk, majd 10 ml petroléterrel mossuk és liofilizálva a cím szerinti vegyületet kapjuk.

13. Példa (20 S) 9-Ciklopropil-amino-metil-10-hidroxi-kamptotecin hidroklorid-só előállítása

A 8. példa szerint előállítunk 9-ciklopropil-amino-metil-10-hidroxi-kamptotecin acetát-sót, és bisz(dimetil-amino)-metán helyett bisz(ciklopropil-amino)-metánt használunk. Az acetátsót a cím szerinti hidroklorid-sóvá alakítjuk 0,1 N sósavval el dörzsölve .

·· ·· ♦··· ···· ·· • · · · · · · · • · ··· · · • · · · · · · · ·«·· ·· ··· ·· ·*

14. Példa (2 0 S) 9-Etoxi-metil-10-hidroxi-kamptotecin előállítása

A cím szerinti vegyületet úgy állítjuk elő, hogy (20 S) 9-N,N~dimetil-amino-metil-10-hidroxi-kamptotecin hidroklorid-sót, melyet a 7. példa szerint állítunk elő, 95 % etanollal melegítünk visszafolyató hűtő alatt.

15. Példa (20 S) 9-(N-Metil—anilino-metil)-10-hidroxi-kamptotecin előállítása

A cím szerinti vegyületet a 8. példa szerint állítjuk elő, ahol hisz(dimetil-amino)-metán helyett hisz(N-metil-anilino)-metánt használunk.

16. Példa (20 S) 9-Ciklohexil-amino-metil-iO-hidroxi-kamptotecin hidroklorid-só előállítása

A 7. példa szerint állítjuk elő a cím szerinti vegyületet oly módon, hogy hisz(dimetil-amino)-metán helyett hisz(ciklohexil-amino)-metánt használunk.

17. Példa (20 S) 9-N,N-Dimetil-amino-etil-tiometil-10-hidroxi-kamptotecin hidroklorid-só előállítása (20 S) 9-N,N-dimetil-amin-10-hidroxi-kamptotecin hidroklorid-sót (100 mg), melyet a 7. példa szerint állítunk elő, és 13 ml 2-dimetil-amino-etán-tiol elegyét 85 °C hőmérsékleten melegítjük argon áramban 5 óra hosszat. Az oldhatatlan szilárd anyagot (tiol felesleg) szűréssel eltávolítjuk és a szűrletet vákuumban bepároljuk egy olajos maradékká, melyet reverz fázisú • a ·« ♦ ··· ►··· ·♦ *»··· · · * • · · ··» · · • ·· »···* »«·· ·· * · · · · · *

- 41 kromatográfiásan tisztítunk (MPLC). A terméket 5 %-os és 10 %-os vizes metanollal eluáljuk és a cím szerinti vegyületet sárga szilárd anyag formájában kapjuk.

18. Példa (20 S) 9-N,N-Dimetil-amino-etil-oxi-metil-10-hidroxi-kamptotecin hidroklorid-só előállítása

100 mg, a 7. példa első reakciólépése szerintely 9-N,N-dimetil-anino-metil-10-hidroxi-kamptotecin szabad bázis 4 ml 2-dimetil-anino-etanollal készített elegyét, amely 3 csepp 3 n sósavat tartalmaz, argon áramban melegítjük 80 °C hőmérsékleten 24 óra hosszat. A félig szilárd reakcióelegyet 5 ml vízzel és 10 ml izopropanollal keverjük, és leszűrve a cím szerinti vegyületet kapjuk.

19. Példa (20 S) 9-N_zN-Ömetil-amino-etil-amino-metil-10-hidroxi-kamptotecin dihidroklorid-só előállítása

A 8. példa szerint előállított (20 S) 9-N,N-dimetil-amino- etil-amino-metil-10-hidroxi-kamptotecin acetát-sót állítunk elő oly módon, hogy bisz(dimetil-amino)-metán helyett bisz(dimeti-amino-etil-amino)-metánt használunk. A kapott acetát sót 10 ml vízzel és 10 ml izopropanollal kezeljük, amely 3 ml 3 N sósavat tartalmaz. A kivált szilárd anyagot elkülönítjük, izopropanollal mossuk és szárítjuk. A cím szerinti vegyületet kapjuk.

20. Példa (20 R,S) 9-N,N-Dimetil-amino-metil-10-hidroxi-kamptotecin acetát só előállítása

A 8. példa szerint állítjuk elő a cím szerinti vegyületet, ·· ·♦ ···· »«·· ·· ····« · · · • · * ··· · · • · « · · · · ♦ ···· ·· ··♦ ♦· ·· azzal az eltéréssel, hogy a kiindulási anyag Wani és munkatársai, J. Med. Chem. 23, 554 (1980) módszere szerint előállított racém-10-hidroxi-kamptotecin. A racém 10-hidroxi-kamptotecint előállíthatjuk (20 S) 10-hidroxi-kamptotecinből is, az alábbi módon:

(a) 10-Hidroxi-20-klór-20-dehidroxi-kamptotecin előállítása

7,8 g 10-hidroxi-kamptotecint 780 ml metilén-kloridban szobahőmérsékleten szuszpendálunk. Hozzáadunk 16 ml piridint, majd 22 ml tionil-kloridot. Az elegyet nitrogén atmoszférában keverjük, a szilárd anyag gyorsan feloldódik, és így tiszta, világossárga oldatot kapunk, amely 15 óra alatt barnává válik. Az oldatot 0 °C-ra lehűtjük, óvatosan hozzáadunk 780 ml 4 n vizes sósavat, és így sötétpiros szuszpenzió keletkezik. Szobahőmérsékleten 2,5 óra hosszat melegítve a szilárd terméket leszűrjük, vízzel mossuk, levegőn szárítjuk és 6,57 g sárga szilárd anyagot kapunk, amely 215 - 218 °C hőmérsékleten bomlás közben olvad. Még 1,2 g második termelést kapunk, amelyet ülepítéssel izolálunk az anyalúgból.

(b) 10-Hidroxi-20-dehidroxi-kamptotecin előállítása

6,03 g (a) pont szerinti terméket 5,15 g aktivált cinkporral szuszpendálunk 300 ml jégecetben. A kapott sűrű szuszpenziót szobahőmérsékleten intenzíven keverjük. 24 óra múlva 6 ml 4 n vizes sósavat adunk hozzá, és még 7 óra hosszat keverjük. A sárgásnarancs színű szuszpenziót 1200 ml metanol és metilén-klorid 1:1 térfogatarányú elegyével hígítva tiszta barna oldatot kapunk, amely kevés szuszpendált cink részecskét tartalmaz. Az

- 43 oldatot Celiten keresztül leszűrjük, vákuumban bepároljuk, és barna szilárd anyagot kapunk. A szilárd terméket vízzel alaposan mossuk, leszűrjük, levegőn szárítjuk állandó súlyig. így 5,36 g cím szerinti vegyületet kapunk, amely bomllás közben 292 °C hőmérsékleten olvad.

(c) (20 R,S) 10-Hidroxi-kamptotecin előállítása

2,51 g (b) pont szerinti terméket feloldunk 25 ml N,N-dimetil-formamidban, és hozzáadunk 1,6 ml 40 %-os vizes dimetil-amint, és így sötét színű oldatot kapunk. Az elegyet szobahőmérsékleten keverjük, miközben az oldatba levegőt buborékoltatunk. 5,5 óra múlva az elegyet 75 ml vízzel hígítjuk, és így sárgásbarna csapadékot kapunk. A szilárd terméket leszűrjük, vízzel mossuk, levegőn állandó súlyig szárítjuk, és így 1,97 g anyagot kapunk, melyet a racém cím szerinti vegyület előállítására használunk a 8. példa szerint.

21. Példa (20 S) 9-N,N-Dimetil-amino-metil-10-hidroxi-kamptotecin dihidroklorid só előállítása

0,389 g 8. példa szerint előállított 9-N,N-dimetil-amino-metil-10-hidroxi-kamptotecin acetát sót feloldunk 6 ml 0,4 n sósavban, liofilizáljuk, és magas vákuumban szivattyúzva 40 óra hosszat kapjuk a cím szerinti vegyületet.

22. Példa (20 S) 9-N,N-Dimetil-amino-metil-10-hidroxi-kamptotecin hidroklorid-ső átkristályosítása

101 g 84 g szabad bázist tartalmazó cím szerinti vegyület hidroklorid-sót feloldunk keverés közben szobahőmérsékleten 1000 ·· ·♦ ···· ···· ♦· • ••·· ♦ · · * · » ··· ♦ · • · ♦ ····« ml ionmentes vízben. A kapott híg szuszpenziót Celiten keresztül leszűrjük. Még 500 ml vizet használunk a szűrési kalács mosására, és a tiszta folyadékokat egyesítjük. A folyadékokat csökkentett nyomáson körülbelül felére bepároljuk, és sűrű sárga szuszpenziót kapunk. Ezt fokozatosan hígítjuk 3000 ml aceton hozzáadásával keverés közben. A halványsárga szuszpenziót szobahőmérsékleten 16 óra hosszat keverjük. A szilárd terméket leszűrjük, vákuumban szárítjuk állandó súlyig, és 86,8 g terméket kapunk a szabad bázis tartalomra korrigálva 91 %-os kitermeléssel. A termék 229-230 °C hőmérsékleten olvad.

23. Példa (20 S) 9-N,N-Dimetil-amino-metil-10-hidroxi-kamptotecin hidroklorid-só átkristályosítása g szabad bázist tartalmazó 124 g cím szerinti vegyületet szobahőmérsékleten 1240 ml ionmentes vízzel keverünk. A kapott híg szuszpenziót Celiten keresztül leszűrjük. A szűrési kalácsot vízzel mossuk, az egyesített vizes fázisokat fele térfogatra bepároljuk, majd 1860 ml 15 térfogat/tömeg%-os 1-propanollal hígítjuk. Az oldatot vákuum desztillációval bepároljuk, miközben részletekben további 3720 ml 1-propanolt adunk hozzá (30 térfogat/tömeg %) . A desztillálást 1860 ml (15 térfogat/tömeg %) végső térfogatig folytatjuk. A szuszpenziót szobahőmérsékleten több óra hosszat keverjük a kristályosítás befejezéségi. A szilárd terméket elkülönítjük, állandó súlyig szárítjuk. 113 g, 92 % terméket kapunk. Olvadáspont: 229-230 °C.

Claims (34)

1. Eljárás (Ib) általános képletű vegyületek vagy gyógyászatilag elfogadható sói előállítására - ahol R jelentése hidrogénatom vagy 1-6 szénatomos alkoxicsoport,

R¹ jelentése -0-R², -S-R³, -N-(R⁴)(R⁵),

R², R³, R⁴ és R⁵ azonos vagy különböző, és jelentésűk hidrogénatom, 1-6 szénatomos alkil-, 3-6 szénatomos hidroxi-alkil-, 1-6 szénatomos dialkilamino-(2-6 szénatomos)-alkil-, 1-6 szénatomos alkilamino-(2-6 szénatomos)-alkil-, 2-6 szénatomos amino-alkilvagy 3-7-tagú szubsztituálatlan vagy szubsztituált karbociklusos gyűrű, vagy ha

R¹ jelentése -N-(R⁴)(R⁵), akkor R⁴ és R⁵ a nitrogénatommal együtt, melyhez kapcsolódik, szubsztituált vagy szubsztituálatlan, adott esetben további heteroatomokat tartalmazó heterociklusos gyűrűt is képezhet, és

R^ jelentése hidrogénatom, vagy 1-6 szénatomos szubsztituálatlan vagy szubsztituált alifás csoport, vagy az oxigénatommal együtt, melyen keresztül kapcsolódik, gyógyászatilag elfogadható észtercsoportot képezhet, azzal jellemezve, hogy

a) ai) kamptotecin vagy 11-(1-6 szénatomos)-alkoxi-kampto-

- 46 tecin tisztítására, először kamptotecint vagy 11-(1-6 szénatomos)-alkoxi-kamptotecint és ezek szennyeződését tartalmazó elegyet összekeverünk egy oldószerrel, ahol az oldószer elválasztja az elegytől a kamptotecintól és 11-(1-6 szénatomos)alkoxi-kamptotecintől eltérő alkaloidokat, valamint a kamptotecin vagy 11-(1-6 szénatomos)-alkoxi-kamptotecin

1,2,6,7-tetrahidro-analóg-származékká történő hidrogénezését késleltető szennyeződéseket, és a kamptotecin vagy a 11-(1-6 szénatomos) - alkoxikamptotecin legalább egy részét, vagy a szennyeződéseket vagy mindkettőt feloldjuk, és egy második lépésben a kamptotecint vagy 11- (1-6 szénatomos)-alkoxi-kamptotecint elválasztjuk ezektől, majd a2) kamptotecin vagy 11-(1-6 szénatomos)-alkoxi-kamptotecin 1,2,6,7-tetrahidro-kamptotecinné vagy a megfelelő

11-(1-6 szénatomos)-alkoxi-1,2,6,7-tetrahidro-kamptotecinné történő hidrogénezésére kamptotecint vagy 11-(1-6 szénatomos) -alkoxi-kamptotecint hidrogénnel kezelünk és a hidrogénezést hidrogénező katalizátor és katalizátor moderátor jelenlétében végezzük, ahol a moderátor hidrogénező katalizátor méreg, majd a3) 1,2,6,7-tetrahidro-kamptotecin vagy egy 11-(1-6 szénatomos)-alkoxi-1,2,6,7-tetrahidro-kamptotecin 10-hidroxi-kamptotecinné vagy megfelelő 10-hidroxi-ll-(1-6 szénatomos) -alkoxi-kamptotecinné történő oxidálására a tetra47 hidro-kamptotecint vagy a 11-alkoxi-tetrahidro-kamptotecint folyékony reakcióközegben oxidáljuk, ahol (a) a folyékony reakcióközeg egy olyan folyadékból áll, amely révén a 10-hidroxi-kamptotecin vagy a 10-hidroxi-ll-alkoxikamptotecin legalább egy része a reakció közben kicsapódik, azzal a megkötéssel, hogyha kiindulási anyagként tetrahidro-kamptotecint használunk és (b) oxidálószert nem használunk, akkor a folyékony reakcióközegként használt (a) folyadék nem tartalmaz metanolt és/vagy (b) az oxidálőszer lehet kálium-perszulfát, jódozil-benzol, jódozilbenzol-észter, nátrium-perjodát vagy kálium-perjódat, majd a4) (i) egy (Ib) általános képletű vegyület vagy gyógyászatilag elfogadható sója előállítására, ahol R¹ jelentése -N-(R⁴)(R⁵), és r6 jelentése hidrogénatom, 10-hidroxi-kamptotecint vagy 10-hidroxi-ll-(1-6 szénatomos) -alkoxi-kamptotecint (II) általános képletű vegyülettel reagáltatunk, ahol R⁴ és R⁵ jelentése a fenti, és (ii) adott esetben (a) az olyan (Ib) általános képletű vegyület és gyógyászatilag elfogadható sója előállítására, ahol Rí jelentése -0-R² vagy -S-R³, az (i) lépésben előállított vegyület aminocsoportját -0-R² vagy -S-R³ csoporttá alakítjuk, és/vagy (b) az olyan (Ib) általános képletű vegyület vagy gyógyászatilag elfogadható sója előállítására, ahol R^ jelentése hidrogénatomtól eltérő, az (i) pontban kapott vegyület 10-helyzetű hidroxilcsoportját -OR⁶ csoporttá alakítjuk, ahol R^ jelentése a hidrogénatomot kivéve a fenti vagy

b) al) kamptotecin vagy 11-(1-6 szénatomos)-alkoxi-kamptotecin 1,2,6,7-tetrahidro-kamptotecinné vagy a megfelelő

11-(1-6 szénatomos)-alkoxi-1,2,6,7-tetrahidro-kamptotecinné történő hidrogénezésére kamptotecint vagy 11-(1-6 szénatomos) -alkoxi-kamptotecint hidrogénnel kezelünk és a hidrogénezést hidrogénező katalizátor és katalizátor moderátor jelenlétében végezzük, ahol a moderátor hidrogénező katalizátor méreg, majd a2) 1,2,6,7-tetrahidro-kamptotecin vagy egy 11-(1-6 szénatomos)-alkoxi-1,2,6,7-tetrahidro-kamptotecin 10-hidroxi-kamptotecinné vagy megfelelő 10-hidroxi-ll-(1-6 szénatomos) -alkoxi-kamptotecinné történő oxidálására tetrahidro-kamptotecint vagy a 11-alkoxi-tetrahidro-kamptotecint folyékony reakcióközegben oxidáljuk, ahol (a) a folyékony reakcióközeg egy olyan folyadékból áll, amely révén a 10-hidroxi-kamptotecin vagy a 10-hidroxi-ll-alkoxi-kamptotecin legalább egy része a reakció közben kicsapódik, azzal a megkötéssel, hogyha kiindulási anyagként tetrahidrokamptotecint használunk és (b) oxidálószert nem használunk, akkor a folyékony reakcióközegként használt (a) folyadék nem tartalmaz metanolt és/vagy (b) az oxidálószer lehet kálium-perszulfát, jódozil-benzol, jódozil-benzolészter, nátrium-perjodát vagy kálium-perjódát, majd a3) (i) egy (Ib) általános képletű vegyület vagy gyógyászatilag elfogadható sója előállítására, ahol R¹ jelentése -N-(R⁴)(R⁵), és r6 jelentése hidrogénatom, 10-hidroxi-kamptotecint vagy 10-hidroxi-ll-(1-6 szénatomos) -alkoxi-kamptotecint (II) általános képletű vegyülettel reagáltatunk, ahol R⁴ és R³ jelentése a fenti, és (ii) adott esetben (a) az olyan (Ib) általános képletű vegyület és gyógyászatilag elfogadható sója előállítására, ahol R¹ jelentése -0-R² vagy -S-R³, az (i) lépésben előállított vegyület aminocsoportját -0-R² vagy -S-R³ csoporttá alakítjuk, és/vagy (b) az olyan (Ib) általános képletű vegyület vagy gyógyászatilag elfogadható sója előállítására, ahol R⁶ jelentése hidrogénatomtól eltérő, az (i) pontban kapott vegyület 10-helyzetű hidroxilcsoportját -0R⁶ csoporttá alakítjuk, ahol R⁶ jelentése a hidrogénatomot kivéve a fenti vagy

c) al) 1,2,6,7-tetrahidro-kamptotecin vagy egy 11-(1-6 szénatomos)-alkoxi-1,2,6,7-tetrahidro-kamptotecin 10-hidroxi-kamptotecinné vagy megfelelő 10-hidroxi-ll-(1-6 szénatomos) -alkoxi-kamptotecinné történő oxidálására a tetra hidro-kamptotecint vagy a 11-alkoxi-tetrahidro-kamptotecint folyékony reakcióközegben oxidáljuk, ahol (a) a folyékony reakcióközeg egy olyan folyadékból áll, amely révén a 10-hidroxi-kamptotecin vagy a 10-hidroxi-ll-alkoxi-kamptotecin legalább egy része a reakció közben kicsapódik, azzal a megkötéssel, hogyha kiindulási anyagként tetrahidro-kamptotecint használunk és (b) oxidálószert nem használunk, akkor a folyékony reakcióközegként használt (a) folyadék nem tartalmaz metanolt és/vagy (b) az oxidálószer lehet kálium-perszulfát, jódozil-benzol, jódozil-benzol-észter, nátrium-perjódát vagy kálium-perjodát, majd a2) (i) egy (Ib) általános képletű vegyület vagy gyógyászatilag elfogadható sója előállítására, ahol R¹ jelentése -N-(R⁴)(R⁵), és r6 jelentése hidrogénatom, 10-hidroxi-kamptotecint vagy 10-hidroxi-ll-(1-6 szénatomos)alkoxi-kamptotecint (II) általános képletű vegyülettel reagáltatunk, ahol R⁴ és R⁵ jelentése a fenti, és (ii) adott esetben (a) az olyan (Ib) általános képletű vegyület és gyógyászatilag elfogadható sója előállítására, ahol R¹ jelentése -0-R² vagy -S- R³, az (i) lépésben előállított vegyület aminocsoportját -O-R² vagy -S-R³ csoporttá alakítjuk, és/vagy (b) az olyan (Ib) általános képletű vegyület vagy gyógyászatilag elfogadható sója előállítására, ahol jelentése hidrogénatomtól eltérő, az (i) pontban kapott vegyü • · « * let 10-helyzetű hidroxilcsoportját -OR^ csoporttá alakítjuk, ahol R^ jelentése a hidrogénatomot kivéve a fenti vagy

d) (i) egy (Ib) általános képletű vegyület vagy gyógyászatilag elfogadható sója előállítására, ahol R¹ jelentése -N-(R⁴)(R⁵), és R⁶ jelentése hidrogénatom, 10-hidroxi-kamptotecint vagy 10-hidroxi-ll-(1-6 szénatomos)alkoxi-kamptotecint (II) általános képletű vegyülettel reagáltatunk, ahol R⁴ és R^ jelentése a fenti, és (ii) adott esetben (a) az olyan (Ib) általános képletű vegyület és gyógyászatilag elfogadható sója előállítására, ahol RÍ jelentése -O-R² vagy -S-R³, az (i) lépésben előállított vegyület aminocsoportját -O-R² vagy -S- R³ csoporttá alakítjuk, és/vagy (b) az olyan (Ib) általános képletű vegyület vagy gyógyászatilag elfogadható sója előállítására, ahol R⁶ jelentése hidrogénatomtól eltérő, az (i) pontban kapott vegyület 10-helyzetű hidroxilcsoportját -OR^ csoporttá alakítjuk, ahol R⁶ jelentése a hidrogénatomot kivéve a fenti.

2. Az 1. igénypont a) pontja szerinti eljárás kamptotecin vagy 11-(1-6 szénatomos)-alkoxi-kamptotecin tisztítására, azzal jellemezve, hogy először kamptotecint vagy 11-(1-6 szénatomos)-alkoxi• · ·

- 52 -kamptotecint és ezek szennyeződését tartalmazó elegyet összekeverünk egy oldószerrel, ahol az oldószer elválasztja az elegytől a kamptotecintól és 11-(1-6 szénatomos)alkoxi-kamptotecintől eltérő alkaloidokat, valamint a kamptotecin vagy 11-(1-6 szénatomos)-alkoxi-kamptotecin

1,2,6,7-tetrahidro-analóg származékává történő hidrogénezését késleltető szennyeződésektől, és a kamptotecin vagy a 11-(1-6 szénatomos)-alkoxi-kamptotecin legalább egy részét, vagy a szennyeződéseket vagy mindkettőt feloldjuk, és egy második lépésben a kamptotecint vagy 11-(1-6 szénatomos)-alkoxi-kamptotecint elválasztjuk ezektől.

3. A 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a második lépésben elválasztott kamptotecin vagy 11- (1-6 szénatomos)-alkoxi-kamptotecin nem tartalmaz olyan szennyeződéseket, amelyek késleltetik a kamptotecin vagy 11-(1-6 szénatomos)-alkoxi-kamptotecin hidrogénezését megfelelő 1,2,6,7-tetrahidro-analóggá.

4. Az 1. igénypont a) pontja szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy oldószerként N,N-dimetil-formamidot, Nmetil-pirrolidont, ecetsavat, trifluor-ecetsavat, dimetilszulfoxidot vagy ecetsav és dimetil-szulfoxid elegyét vagy etanol és dimetil-szulfoxid elegyét vagy ecetsav és sósav elegyét használjuk.

5. Az 1. igénypont a) pontja szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az első lépésben természetes előállítású kamptotecint használunk.

6. Az 1. igénypont a) pontja szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a kamptotecint a Nothapodytes foetida növény termeli, és az első lépésben oldószerként ecetsavat használunk.

7. Az 1. igénypont a) pontja szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a kamptotecin az ecetsavban történő tisztítás után legalább részben N, N-dimetil-formamidban van feloldva, vagy attól el van választva.

8. Az 1. igénypont a) pontja szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a szennyeződéseket felszívó anyagot használunk .

9. A 8. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a szennyeződések abszorbeálására aktívszenet használunk.

10. Az 5.igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a kamptotecint Camptotheca accuminata species fa termeli, és az oldószer az első lépésben N,N-dimetil-formamid .

11. Az 1. igénypont b) pontja szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a hidrogénező katalizátor moderátor kén vegyület.

12. Az 1. igénypont b) pontja szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy hidrogénező katalizátorként moderátor dimetil-szulfoxidot használunk.

13. Az 1. igénypont b) pontja szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy hidrogénező katalizátorként nemesfémet alkalmazunk.

14. Az 1. igénypont b) pontja szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy hidrogénező katalizátorként platinát használunk.

15. A 14. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a platina szénhordozón vagy alumínium-oxid hordozón van.

16. Az 1. igénypont b) pontja szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a hidrogénezést szupraatmoszférikus hidrogén nyomáson végezzük.

17. A 16. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy 241,15 x 10^-3 Pa-nál nagyobb nyomáson dolgozunk.

18. Az 1. igénypont b) pontja szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy folyadék közegként olyan médiumot használunk, amelyben a tetrahidro-kamptotecin vagy a 11-(1-6 szénatomos)-alkoxi-tetrahidro-kamptotecin oldódik.

19. A 18. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy folyékony reakcióközegként ecetsavat használunk.

20. Az 1.igénypont c) pontja szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy kiindulási anyagként tetrahidro-kamptotecint alkalmazunk és (b) oxidálószert nem használunk, a használt folyékony (a) reakcióközeg nem tartalmaz etanolt, kloroformot, benzolt, metilén-kloridot, dioxánt vagy vizet önmagában.

21. Az 1. igénypont c) pontja szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a termék lényegében nem oldódik az (a) folyékony reakcióközegben.

22. Az 1. igénypont c) pontja szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az (a) folyékony reakcióközeg vízből és szerves oldószerből áll.

23. A 22. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy szerves oldószerként ecetsavat, acetont, N,N-dimetil-formamidot vagy rövidszénláncú alkoholt használunk.

24. Az 1. igénypont c) pontja szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy folyékony reakcióközegként (a) folyékony reakcióközeget és oxidálószerként (b) oxidálószert használunk.

25. Az 1. igénypont c) pontja szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy oxidálószerként jódozil-benzol-észtert használunk.

26. A 25. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy észterként PhII(OR⁷)2 képletű észtert használunk, ahol PH jelentése fenilcsoport, R⁷ jelentése -0R⁷, amely azonos vagy különböző lehet, és jelenthet hidrogént, -C(O)-R⁸-at, -SC>2-R⁹-et és R⁸ és R⁹ szubsztituálatlan vagy szénhidrogénnel szubsztituált és ahol R⁷ legalább az egyik -0R⁷ csoportban hidrogéntől eltérő.

27. A 26. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy észterként jód-benzol(bisz)-trifluor-acetátot, jód-benzol-diacetátot vagy hidroxi (toziloxi)-jód-benzolt használunk.

28. Az 1. igénypont d) pontja szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a (ii) lépésben az -N-(R⁴)(R⁵) amint -0-R² -vé alakítjuk úgy, hogy az (i) lépésben kapott vegyületet HO-R² általános képletű alkohollal melegítjük, ahol R² jelentése a fenti.

29. Az 1. igénypont d) pontja szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a (ii) lépésben az -N-(R⁴)(R⁵) képletű amint -S-R³-má alakítjuk, oly módon, hogy az (i) lépésben kapott vegyületet HS--R³ általános képletű tiollal melegítjük, ahol R³ jelentése a fenti.

30. Az 1. igénypont d) pontja szerinti eljárás, olyan (Ib) általános képletű vegyületek előállítására - ahol az általános képletben R¹ jelentése dimetil-amino-, N-morfolino-, N-metil-piperazinil-, (4'-piperidin)N-piperidinil-, ciklohexil-amino-, N-metil-anilino-, etoxi-, ciklopropilamino-, N,N-dimetil-amino-etoxi-, N,N-dimetil-amino-etiltio, N,N-dimetil-amino-etil-amino- vagy metil-amino-csoport - azzal jellemezve, hogy a megfelelő kiindulási anyagokat reagáltatjuk.

31. A 30. igénypont szerinti eljárás, olyan (Ib) általános képletű vegyületek előállítására - ahol R¹ jelentése dimetil-amino- vagy N-morfolino-csoport azzal jellemezve, hogy a megfelelő kiindulási anyagokat reagáltatjuk.

32. Az 1. igénypont d) pontja szerinti eljárás, ahol az (i) lépést acetonitrilből vagy rövidszénláncú alkohol- ból álló folyadék közegben végezzük.

33. A 32. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a folyadék közeg rövidszénláncú alkoholból és inért klórozott szénhidrogénből áll.

34. A 33. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a folyadék közeg rövidszénláncú 1-4 szénatomos alkoholból és metilén-kloridból áll.