HUT53279A - Process for producing few-lamellar lipid vesicles - Google Patents

Process for producing few-lamellar lipid vesicles Download PDF

Info

Publication number
HUT53279A
HUT53279A HU882558A HU255888A HUT53279A HU T53279 A HUT53279 A HU T53279A HU 882558 A HU882558 A HU 882558A HU 255888 A HU255888 A HU 255888A HU T53279 A HUT53279 A HU T53279A
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
lipid
derivatives
lipid vesicles
vesicles
formula
Prior art date
Application number
HU882558A
Other languages
English (en)
Inventor
Donald F H Wallach
Original Assignee
Micro Vesicular Systems
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=26699867&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=HUT53279(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Micro Vesicular Systems filed Critical Micro Vesicular Systems
Publication of HUT53279A publication Critical patent/HUT53279A/hu

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Liposomes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Liposomes
    • A61K9/1271—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes, liposomes coated with polymers
    • A61K9/1272—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes, liposomes coated with polymers with substantial amounts of non-phosphatidyl, i.e. non-acylglycerophosphate, surfactants as bilayer-forming substances, e.g. cationic lipids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Liposomes
    • A61K9/1277—Processes for preparing; Proliposomes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D17/00—Detergent materials or soaps characterised by their shape or physical properties
    • C11D17/0008—Detergent materials or soaps characterised by their shape or physical properties aqueous liquid non soap compositions
    • C11D17/0017—Multi-phase liquid compositions
    • C11D17/0021—Aqueous microemulsions
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D17/00—Detergent materials or soaps characterised by their shape or physical properties
    • C11D17/0008—Detergent materials or soaps characterised by their shape or physical properties aqueous liquid non soap compositions
    • C11D17/0026—Structured liquid compositions, e.g. liquid crystalline phases or network containing non-Newtonian phase
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S424/00—Drug, bio-affecting and body treating compositions
    • Y10S424/10—Insect repellent
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S424/00—Drug, bio-affecting and body treating compositions
    • Y10S424/812—Liposome comprising an antibody, antibody fragment, antigen, or other specific or nonspecific immunoeffector
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10S436/829—Liposomes, e.g. encapsulation
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S525/00—Synthetic resins or natural rubbers -- part of the class 520 series
    • Y10S525/936—Encapsulated chemical agent
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
    • Y10T428/00—Stock material or miscellaneous articles
    • Y10T428/29—Coated or structually defined flake, particle, cell, strand, strand portion, rod, filament, macroscopic fiber or mass thereof
    • Y10T428/2982—Particulate matter [e.g., sphere, flake, etc.]
    • Y10T428/2984—Microcapsule with fluid core [includes liposome]

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Manufacturing Of Micro-Capsules (AREA)
  • Fats And Perfumes (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Road Signs Or Road Markings (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Excavating Of Shafts Or Tunnels (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Description

A találmány tárgyát kevés-lamellás /paucilamellar/ lipid-vezikulák előállítása képezi.
Közelebbről, a találmány tárgya eljárás kevés-lamellás lipid-vezikulák előállítására, amelyek vizes vagy szerves, amorf, cseppfolyós vagy szilárd központi üreggel rendelkeznek. Ezeknek a kevés-lamellás lipid-vezikuláknak elsődleges szerkezeti anyagát a nem-foszfolipid felületaktív anyagoknak széles skálája képezi, kívánt esetben hozzáadva kis mennyiségű foszfolipidet.
A lipid-vezikulák lényegileg gömbszerkezetüek, nagy lipidtartalmu anyagokból, például felületaktív anyagokból vagy foszfolipidekből előállítva. Ezeknek a gömbalaku vezikuláknak a lipidjei lipid-kettősréteg formájuak. A lipid-kettősrétegek magukba zárnak egy vizes térfogatrészt, amely a lipid kettősrétegek számos hagymaszerű héja közé van beépítve /multilamellás lipid-vezikulákat MLV képezve/ vagy a vizes térfogatrészt, az amorf központi üreg tartalmazza. A leginkább ismert lipid vezikulák, amelyek vizes közeggel töltött amorf központi üreggel rendelkeznek, az egylamellás, un. unilamellás lipid-vezikulák.
A nagy unilamellás vezikulák /LUV/ átmérője általában nagyobb, mint körülbelül l^u, mig a kis unilamellás lipid-vezikulák /SUV/ átmérője általában kisebb mint 0,2^u.
A lipid-vezikulák felhasználása változatos, beleértve alkalmazásukat mint adjuvánsokat vagy mint hordozóanyagokat nagyszámú különböző anyaghoz.
Az utóbbi években ugyan a lipid-vezikulák kutatása lényegileg a multilamellás és a két tipusu unilamellás lipid-vezikulákra összpontosult, de létezik egy negyedik típusa is a lipid-vezikuláknak, ez a kevés-lamellás /paucilamellar/ lipid-vezikula. Ezt a lipid-vezikulát ez ideig alig tanulmányozták, és ezelőtt csak foszfolipidekkel állították elő. A kevés-lamellás lipid-vezikulák körülbelül 2-8 periférikus kettősrétegből állnak, amelyek egy nagy amorf központi üreget vesznek körül. Valemennyi előzetesen ismertetett kevés-lamellás lipid-vezikulában ez a központi üreg vizes oldattal volt töltve /Callo and McGrath, Cryobiology 22/3/, 251-267 /1985/7.
Ügy látszik, hogy valamennyi tipusu lipid-vezikulának megvan az alkalmazási területe, amelyhez a legjobban használható. így például a multilamellás lipid-vezikulák nagyobb lipid-tartalmuak, mint bármely más lipid-vezikula, annyira, hogy egy ilyen lipid-vezikula bezárhat vagy hordozhat egy lipofil anyagot a kettősrétegekben, anélkül, hogy az elbomlana; a multilamellás lipid-ezikulákat tartották a legelőnyösebbnek lipofil anyagok hordozására. Ezzel ellentétben a vízmennyiség, amely a multilamellás lipid-vezikulák lipid kettősrétegei között lévő vizes héjakba van bezárva, sokkal kisebb, mint az a vízmennyiség, amely a nagy unilamellás vezikulák központi üregében foglalhat helyet, s igy a nagy unilamellás vezikulákat tartották előnyösnek vizes anyagok hordozására. A nagy unilamellás vezikulák azonban az egyetlen lipid kettősrétegből álló szerkezetük
- 4 miatt fizikailag nem annyira állandóak, mint a multilamellás lipid-vezikulák, és sokkal inkább ki vannak téve enzimatikus degradációnak. A kis unilamellás vezikulák nem rendelkeznek a multilamellás lipid vezikulák vagy a nagy unilamellás vezikulák lipid vagy vizes térfogataival, de kis méretük miatt a legkönnyebben jutnak be a szövetek sejtjeibe.
A kevés-lamellás lipid-vezikulák, amelyek felfoghatók úgy, mint a multilamellás lipid-vezikulák egy alosztálya, hibridek, mind a multilamellás lipid-vezikulák, mind a nagy unilamellás vezikulák jellegzetességeivel, ügy látszik, hogy a kevés-lamellás lipid-vezikulák előnyösebbek mint hordozóközegek számos felhasználásra, mint a lipid-vezikulák többi típusa. Elsősorban nagy amorf központi üregük következtében a kevés-lamellás lipid-vezikulák könynyen alkalmazhatók nagymennyiségű vizes alapú anyagok hordozására. A kevés-lamellás lipid-vezikulák többszörös lipid kettős-rétege olyan kevés-lamellás lipid-vezikulákat eredményez , amelyek kettős rétegükben nagyobb mennyiségű lipofil anyag befogadására és szállítására képesek, valamint ez a többszörös lipid-kettősréteg a degradálódással szemben jobb fizikai erővel és ellenállással rendelkeznek, mint a nagy unilamellás vezikulák egyetlen lipid kettősrétege. Amint azt a leírás szemlélteti, a kevés-lamellás lipid-vezikulák vizes ürege teljesen vagy részben megtölthető apoláris olajjal vagy viasszal és ezután mint hidrofób anyagok szállító vagy tároló közege használható. A hidrofób anyagok mennyisége, amelyek az apoláris maggal rendelkező kevés-lamellás lipid vezikulákkal szállíthatók, sokkal nagyobb, mint az, ami a multilamellás lipid-vezikulákkal szállítható.
A hagyományos multilamellás lipid-vezikulák előállítási eljárása szerint először a lipideket valamely lipofil adalékkal együtt szerves oldószerben feloldják. Ezután a szerves oldószert eltávolítják hővel elpárologtatva vagy az oldott lipideken iners gázáramot /például nitrogént/ vezetve át. A maradékot ezután vizes fázissal, amely általában elektroliteket és adalékokat, igy biológiailag aktív hidrofil anyagokat tartalmaz, hidratálják, s igy nagy multilamellás lipid memránszerkezeteket képeznek. Az eljárás egyes változataiban különböző tipusu szemcsés anyagot vagy struktúrákat használtak az elpárologtatási művelet alatt, hogy a lipid-maradék képződését elősegítsék. Ezen a téren bebizonyosodott, hogy a lipid-maradék fizikai szerkezetének a megváltoztatása a hidratáláskor jobb vezikulákat eredményez. A multilamellás lipid-vezikulák előállítására használt eljárásokat az utóbbi időkben az alábbi közlemények foglalták össze: Gregoriadis, G., ed. Liposome Technology /CRC, Boca Raton Fi./, Vols. 1-3.
/1984/; és Dousset and Douste-Blazy /in Les Liposomes, Puisieux and Delattre, Editors, Techniques et Documentation Lavoisier, Paris, 41-43 /1985/.
A kevés-lamellás foszfolipid lipid-vezikulákat ezeknek az eljárásoknak csekély változtatásaival .készítették .
Függetlenül attól, hogy hogyan készülnek a multilamellás lipid-vezikulák és a kevés-lamellás lipid-vezikulák, ha egyszer elkészültek, meg kell állapítani az eljárás hatásosságát. Általában két mértéket használnak annak meghatározására, hogy milyen hatásfokkal épültek be az anyagok a lipid-vezikulákba, s ez a bezárt tömeg és az elfoglalt térfogat. A bezárt tömeg a bezárt anyag tömege /a lipid tömegének egysége, ezt gyakran százalékban adják meg. Az elfoglalt térfogat úgy definiálható, mint a vizes fázisnak az a mennyisége, amely a vezikula belsejében foglal helyet/ /a vezikula szerkezetében lévő lipid mennyisége , ezt általában a folyadék ml/g lipid kifejezéssel adják meg.
Valamennyi régebbi lipid-vezikulára vagy liposzómára vonatkozó tanulmány szerint a kettős rétegek lipid forrásaiként foszfolipideket használtak. Ennek a választásnak az oka az volt, hogy a foszfolipidek a fő szerkezeti komponensei a természetes membránoknak. A foszfolipideknek mint mesterséges membránoknak a használata azonban számos problémával jár. Először is, az izolált foszfolipideket nagyszámú enzim degradálja. Másodszor, a legtöbb könnyen hozzáférhető foszfolipid természetes forrásokból származik, például a tojássárga lecitin, amely pólitelitetlen acilláncokat tartalmaz, s ezek autokatalizált peroxidációnak vannak kitéve. Ha peroxidáció megy végbe, akkor a lipid szerkezete törést szenved, s ez a bezárt anyag idő előtti kiszabadulását és toxikus peroxidációs melléktermékek képződését okozza. Ez a probléma hidrogénezéssel elkerülhető, de a hidrogénezés költséges művelet, s ez növeli a kiindulási anyag árát. A költség a harmadik probléma, amely a foszfolipidek széles skálájának használatával kapcsolatos. Egy kilogramm tojássárga lecitin, amely elég tiszta farmakológia! liposzóma gyártáshoz, jelenleg több mint 1000 dollárba kerül. Ez a legtöbb felhasználás céljára túl nagy ár egy kiindulási anyagért.
Az utóbbi időben történtek jelzések, elsősorban az L'Oreal csoport részéről, hogy a kereskedelemben kapható felületaktív anyagok használhatók a liposzóma-szerü multilamellás lipid-vezikulákban a lipid-kettősrétegek képzéséhez. A felületaktív anyagok és a foszfolipidek, amfifilek, amelyekben legalább egy lipofil acil- vagy alkilcsoport kapcsolódik a hidrofil főcsoporthoz. A főcsoport egy vagy több lipofil lánchoz észter- vagy éterkötéssel kapcsolódik. A kereskedelemben kapható felületaktív anyagok a BRIJ családba tartozó polioxietilén-acil-éterek, a SPAN családba tartozó szorbitán-alkil-észterek és a TWEEN-ek csoportjába tartozó polioxietilén-szorbitán-zsirsavészterek. Valamennyi beszerezhető az ICI Americas, Inc. of Wilmington, Delaware cégnél.
A kevés-lamellás lipid-vezikulák előállítására itt ismertetett módszerek és anyagok, mindegyike nagy vizes vagy olajos térfogattal rendelkező vezikulákat eredményez. Az elektron-mikrográfok igazolják, hogy a kevés-lamellás lipid-vezikulák eltérnek a nagy unilamellás vezikuláktól és a klasszikus multilamellás lipid-vezikuláktól.
A találmány célja eljárás kidolgozása kevés-lamellás lipid-vezikulák előállítására nem-foszfolipid anyagokból· • · ·
- 8 A találmány másik célja olyan eljárás kidolgozása kevés-lamellás lipid-vezikulák előállítására, amely gyors és viszonylag nem költséges anyagokat használ.
A találmány egy további célja eljárás kidolgozása vezikulák előállítására.., amelyeknek membránszerü külső szerkezete olaj- vagy zsircseppet vesz körül.
A találmány még egy további célja olyan vezikulák előállitása , amelyek olajban oldódó anyagok szállítására alkalmasak.
A találmánynak ezek és egyéb céljai és jellemzői a részletes leírásból és az igénypontokból kitűnnek.
A találmány kevés-lamellás lipid-vezikulákra vonatkozik, amelyek mint hidrofil vagy hidrofób anyagok hordozói használhatók, és eljárás ezek előállítására. A találmány tárgyát képezi továbbá ezeknek a kevés-lamellás
I lipid-vezikuláknak a felhasználása az anyagok széles spektrumának befogadására és szállítására.
A kevés-lamellás lipid-vezikulák találmány szerinti előállítására először egy felületaktív anyagból és egy másik lipid-oldható, a lipid-vezikulába beépítendő, a felületaktív anyagban oldódó anyagból lipofil fázist képezünk, úgy, hogy ezt a másik anyagot a felületaktív anyagban feloldjuk. A felületaktív anyagot a következő csoportokból választjuk:
az R^-COO(c2H4ö)nH általános képletű polióxietilén-zsirsav-észterek, a képletben R^ lauril-, mirisztil-, cetil-, sztearil- vagy oleil-csoport vagy ezek származékai és n = 2-10;
- 9 az R2-C0(C2H^0)mH általános képletű polioxietilénzsirsav-éterek, a képletben R2 lauril-, mirisztil- vagy cetilcsoport vagy ezek származékai, egyszer vagy kétszer telítetlen oktadecil-savcsoportok vagy származékaik vagy kétszer telítetlen ejkodiénsavcsoportok vagy származékaik és m = 2-4;
a 2NCO“R3 általános képletű dietanol-aminok, a képletben R^ kapril-, lauril-, mirisztil- vagy linoloilcsoport és származékaik;
az R^-NOCO- általános képletű hosszú láncú acil-hexózamidok, a képletben b=10-18 és cukormolekula, igy glükózamin, galaktózamin vagy N-metil-glükamin;
az Rg-CHCOOH-NOC-(CH2^c-CH3 általános képletű hosszú láncú acil-amino-savamidok, a képletben c = 10-18 és Rc aminosav oldallánc; ' □
a HOOC-(CH2)d-N (CH3)2-(CH2)3-NCO-R6 általános képletű hosszú láncú acil-amidok, a képletben Rg 12-20 szénatomos és legfeljebb kétszer telítetlen acillánc és d =1-3;
polioxietilén / 20|-szorbitán-mono-vagy -trioleát;
plioxietilén-gliceril-monoszteárát, 1-10 polioxietilén csoporttal;
és glicerin-monosztearátok.
A lipofil fázist elkeverjük egy vizes fázissal, amely egy vizes pufferből és a beépítendő, vízben oldódó anyagból áll, a keverést nyiróerővel végezve, s igy
- 10 képezzük a kevés-lamellás lipid-vezikulákat. A nyiróerővel keverve kifejezés azt jelenti, hogy a lipofil fázis és a vizes fázis keverését örvénylő vagy nyíró körülmények között végezzük, ami megfelelő keverést biztosit ahhoz, hogy a lipidet hidratáljuk és lipid-vezikulákat képezzünk. A szivattyú sebességét módosítjuk az anyag viszkozitásától és a választott üreg méretétől függően.
A nyirókeverést folyadék nyiróerővel érjük el, ami lényegileg ekvivalens a kombinált fázisra körülbelül 5-30 m/sec relatív áramkási sebességgel, egy 1 mm rádiuszu keresztül.
Az eljárás vonatkozik továbbá olajban oldódó vagy olajban szuszpendálható anyagok beépítésére kevés-lamellán lipid-vezikulákba. Ezt a műveletet azzal kezdjük, hogy a beépítendő anyagot olajban vagy viaszban diszpergáljuk, s igy olajos fázist képezünk. Az olaj vagy viasz vízzel nem elegyedő olajos oldat, igy olajok, viaszok, természetes vagy szintetikus trigliceridek, acil-észterek és ásványolaj-származékok, ezek analógjai és származékai. A diszperz vagy diszperzió kifejezés oldásra, szuszpenzió vagy kolloid képzésére utal, amely folyékony fázist eredményez. Az olajban diszpergálható anyagot tartalmazó olajos fázist a lipid fázissal keverjük, és az egyesített olaj-lipid fázist nyiróerőt alkalmazva keverjük a vizes fázissal A műveletnél használható felületaktív anyagok ugyanazok, mint amelyeket a vizes maggal rendelkező kevés-lamellás lipid-vezikulák készítéséhez használtunk.
A találmány szerinti eljárás előnyös kiviteli módozatánál a kevés-lamellás lipid-vezikulák képzéséhez töltést adó anyagokat és szteroidokat is használunk, igy koleszterint vagy hidrokortizont vagy ezek analógjait és származékait. Előnyös töltést adó anyagok a negatív töltést adó anyagok, igy a dicetil-foszfát, cetil-szulfát, foszfatidsav, foszfatidil-szerin, olajsav, palmitinsav vagy ezek keverékei.
Abból a célból, hogy a kevés-lamellás lipid-vezikulák képzéséhez szükséges keverést megvalósítsuk, általában valamennyi anyag folyékony állapotú. A találmány szerinti eljárásban azonban oldószer használata a felületaktív anyaghoz /ami a multilamellás lipid vezikulák előállításának klasszikus módja/ nemcsak, hogy nem szükséges, de egyenesen hátrányos. A találmány szerinti eljárásban alkalmazott számos felületaktív anyag szobahőmérsékleten vagy ennél kissé magasabb hőmérsékleten cseppfolyós, igy csupán enyhe melegítés szükséges a megfelelő folyékonyság eléréséhez. Még a használatos felületaktív anyagok legnehezebben kezelhetőjgi, a glicerin-monosztearátok is könnyen kezelhetők körülbelül 70°C-on. Ezért a találmány szerinti eljárás szokásos művelete szerint a lipofil fázis hőmérsékletét megnöveljük, hogy elég folyékony legyen, majd nyiróerőt alkalmazva elvégezzük a lipofil fázis és a vizes fázis keverését olyan hőmérsékleten, amelyen mindkét fázis folyékony. Gyakran kívánatos ugyan a két fázishoz ugyanazt a hőmérsékletet használni/ de nem mindig szükséges.
Az ábrák ismertetése
Az 1. ábra a találmány szerinti kevés-lamellás lipid-vezikulák vázlatos szemléltetése; és a 2. ábra görbéje a százalékos vizfelvétel az olaj-felületaktív anyagra a vizfelvételhez indikátorként a kalcein színezéket használva.
A találmány szerinti eljárás előnyös kiviteli módjai a következők.
A találmány kevés-lamellás lipid-vezikulák előállítására és magukra a kevés-lamellás lipid-vezikulákra vonatkozik. Ezek a lipid-vezikulák, amelyeket nem-foszfolipid felületaktív anyagokból képezünk, 2-8 lipid-kettősréteget tartalmaznak, s ezeket a lényegileg gömbalaku lipid héjakat kis vizes terek választják el egymástól. A lipid-kettősrétegek amorf központi üreget vesznek kqrül. Az üreg lehet olajjal /beleértve a viaszokat/ töltve vagy vizes alapú oldattal vagy ezek keverékeivel. Ezek a kevés-lamellás lipid-vezikulák mint gyógyszer vagy vakcina-szállító eszközök, mint adjuvánsok vagy mint más tipusu szerves vagy nem-szerves anyag hordozói használhatók. Ezek a lipid-vezikulák lényegeben ott használhatók, ahol mikrokapszulákat vagy más tipusu nem-lipid hordozókat alkalmaztak azelőtt, például mint festék- vagy szinezékhordozók.
Bizonyos alkalmazásoknál hasznos lehet töltést adó amfifilek bekeverése, amelyek tiszta pozitív vagy negatív töltést adnak a lipid-vezikuláknak. Az előnyös negatív töltést adó anyagok az olajsav, dicetil-foszfát, palmitinsav, ···· ···· ···· ···; · . ·: / .:· r cetil-szulfát, retinsav, fosztalidsav, fosztalidil-szérin, és ezek keverékei. Ahhoz, hogy a vezikuláknak tiszta pozitív töltést adjunk, hosszú láncú aminok, például sztearil-aminok vagy oleoi1-aminok, hosszú láncú piridinium-vegyületek, például cetil-piridinium-klorid, kvaterner ammónium-vegyületek vagy ezek keverékei használhatók. Egy előnyös pozitív töltést adó anyag a hexadecil-trimetil-ammónium-bromid, amely hatásos fertőtlenítőszer. Ennek a fertőtlenítőszernek a használata pozitív töltést adó anyagként a vezikulákban egy másik előnnyel is jár, amikor a vezikulák elbomlanak, úgy viselkednek mint késleltetett hatású csiraölő hordozók.
A vezikulák tartalmazhatnak célmolekulákat is, hidrofil vagy amfifil anyagokat, amelyek arra használhatók, hogy a vezikulákat egy speciális célra irányítsák, hogy azok a vezikulákba zárt anyagot egy bizonyos meghatározott biológiai helyen szabadítsák fel. Ha hidrofil célmolekulákat használunk, akkor ezeket közvetlenül vagy egy hídelem segítségével kapcsolhatjuk a felületaktív anyag polioxietilén-részének egy hidroxicsoportjához; vagy ezeket - a szakirodalomból ismert eljárásokat használva - bizonyos molekulákhoz, igy palmitinsavhoz, hosszú láncú aminokhoz vagy foszfatidil-etanol-aminhoz kapcsolhatjuk. Ha hídelemeket használunk, akkor a célmolekulák beépülhetnek a kettőprétegü membránok hidrofil magjába, ezeknek a vegyületeknek az acilláncai segítségével. Előnyös hidrofil célmolekulák a • ·
- 14 monoklonális antitestek, más immunglobulinok, lektinek és peptid-hormonok.
A hidrofil célmolekulákon kivül használhatunk amfifil célmolekulákat is. Az amfifil célmolekulák általában nem kémiai utón kapcsolódnak a felületaktív molekulákhoz, hanem inkább a lipid-vezikulák kettős lamelláit alkotó molekulák lipofil vagy hidrofob részeivel lépnek kölcsönhatásba. Előnyös amfifil célmolekulák a semleges glikolipidek, galaktocerebrozidok /például a máj galaktozil-receptoraihoz/ vagy a töltéssel bíró glikolipidek, igy a gangliozidok.
A találmány szerinti eljárással előállított vezikulák használhatók diagnosztikai vizsgálatokban, például immunológiai rendszerek agglutinációs vizsgálataiban.
A vezikulák használhatók továbbá mint markerek vagy jelzőanyagok a reakciók vizuálissá tételében, például duzzadással vagy zsugorodással egy immunreakció esetében vagy radiografikus vagy MMR vizsgálatban.
Hidrofil anyagok amelyek a vezikulákba építhetők a makromolekulák, vírusok, immunológiai adjuvánsok, igy muramil-dipeptidek·, peptid-hormonok, igy az inzulin, kalcitonin és glükagon, hipotalamikus peptidek, pitűitér hormonok, növekedési faktorok, igy angiogén, epiteXiális és epidermáüs növekedéel faktorok, limfokinek, igy az interleukin-2 és az interferon, vérproteinek igy a hemoglobin és a faktor Vili, vizoXdható növényi hormonok és kártevőirtószerek, rádiónukleotidek, kontrasztanyagok radiológiai • ·
- 15 és MMR diagnózishoz, rák-citosztatikumok és antibiotikumok. A beépíthető lipofil anyagok például a szteroid hormonok, feromonok, porfirinek, szerves kártevőirtószerek, gombaölőszerek, rovarriasztók és lipofil vitaminok és származékaik. Az olajalapu anyagok magukba foglalnak még más lipofil anyagokat és olajban kolloidokat vagy szuszpenziókat képező anyagokat. A lipid-vezikulákba beépíthető gyógyszertípusok sokkal tökéletesebb összefoglalását adja a következő irodalmi hely: Gregoriadis, G., ed.: Liposome Technology /CRC, Boca Raton, FI./ Vols. 1-3 /1984/.
A kevés-lamellás lipid-vezikulák előállithatók különböző eszközökkel, amelyek a nyiróerővel végzett keveréshez elég nagy nyiróerőt biztosítanak. A kereskedelemben ezek az eszközök sok változatban kaphatók, ilyenek például a mikrofluidizálók /Biotechnology Development Corporation/, a french-press vagy más berendezések, amelyek elég nagy nyiróerőt biztosítanak és alkalmasak melegített, szemiviszkózus lipidek kezelésére. Ha igen nagy nyiróerejü berendezést használunk, akkor a porított lipideket nyomás alatt mikroemulgeálhatjuk, normál olvadáspontjuk alatti hőmérsékleten, és mégis találmány szerinti lipid-vezikulákat képezve.
A találmány szerinti lipid-vezikulák előállításához kiváltképpen alkalmas berendezést a Micro Vesicnlar Systems, Inc., Vineland, New Yersey cég fejlesztett ki • ·
- 16 A berendezés egy lényegileg hengeralaku keverőkamrából áll, legalább egy, tangensirányuan elhelyezett bevezető nyílással. Egy vagy több nyilás vezet egy tartályhoz a lipofil fázis részére, amely olaj fázissal van keverve, ha lipidmagu kevés-lamellás lipid-vezikulákat akarunk képezni, és a többi nyilás közül legalább egy a vizes fázist tartalmazó tartályhoz csatlakozik. A különböző fázisokat a hengeres kamrába szivattyúkkal juttatjuk be, például nyomószivattyukkal, oly módon végezve a szivattyúzást és a különböző fázisokat oly módon keresztezzük, hogy a kamrában turbulens áramlás jöjjön létre. A kevés-lamellás lipid-vezikulák gyorsan képződnek, például 1 másodpercnél rövidebb idő alatt, és ezeket a kamrából tengelyirányú kiömlőnyiláson távolitjuk el. A találmány szerinti eljárás egy előnyös kiviteli módja szerint négy tangensirányuan elhelyezett bevezető nyilás van, és a lipid és vizes fázisokat a tartályokból nyomószivattyukkal vezetjük a különböző nyílásokhoz. A tangensirányu nyílásokon bevezetett folyadékáramot spirál áramlással vezetjük az egyes bevezető vagy injektáló nyílásoktól a kiömlőnyiláshoz. Az áramlások útját, szabályozzuk, úgy, hogy a bevezető vagy injektáló nyílásokat oly módon irányítjuk vagy helyezzük el, hogy a folyadékáramok keresztezésével keverőzónát hozzunk létre. A szivattyúk sebességét, valamint a nyilasok és tápvezetékek átmérőit úgy választjuk meg, hogy a lipid-vezikulák képzéséhez megfelelő nyirókeverést érjünk el.
- 17 Amint azt már említettük, a legtöbbször a turbulens áramlást választjuk a megfelelő keverés biztosítására.
Nem lényeges, hogy a kevés-lamellás lipid-vezikulák képzéséhez milyen berendezést használunk, ha a megfelelő nyirókeverést biztosítjuk, a vezikulák az 1. ábrán feltüntetetthez hasonló szerkezetűek. A 10 jelzésű, nagy amorf központi üreget több 20 jelzésű lipid-kettősréteg veszi körül, amelyek között 30 jelzésű vizes rétegek foglalnak helyet. Általában négy lipid-kettősréteg a szabványos, de 2-8 lehetséges. A 10 amorf központ teljesen töltve lehet egy vizes anyaggal, például egy pufferral és egy beépítendő vizes anyaggal, vagy részben vagy teljesen töltve lehet egy olajos anyaggal, lipidmaggal rendelkező kevés-lamellás lipid-vezikulákat képezve. Ha vizes központi részt alkalmazunk, akkor a kevés-lamellás lipid-vezikulák általában körülbelül 0,5-2/^u átmérőjüek, míg ha a központi rész olajos, akkor a használt olaj mennyiségétől függően
a nagysága nőhet, s elérheti a körülbelül 15-20^u-t.
A 2. ábra azt a jelenséget mutatja, amikor az olaj
kiszorítja a vizet a vezikulából. Körülbelül 2 ml felület-
aktív anyag-keverék képezi a lipofil fázist, specifikusan polioxietilén/2/-cetil-éter/koleszterin/olaj sav 33:11:5 (M/M/M) arányú keverékét, amely keverve van különböző kőolaj
-térfogatokkal, majd elzárócsappal összekötött két fecskendőt használva, összekeverjük 3,0 ml foszfáttal pufferolt sóoldat/ kalcein-oldattal. Az olajtérfogatok nagysága 0-10 ml, amely
0-50 térf./térf. keverési arányú olaj/felületaktív anyagot • · « 4 • » · · · · eredményez. A kalceint, amit a vizfelvétel meghatározásához alkalmazunk, indikátorként, 485 nm-en abszorpció méréssel mérjük, és egy térfogatkorrekcióval, ami függ az olaj mennyiségétől. A 2. ábra világosan mutatja, hogy ahogy az olaj-felületaktiv anyag arány nő, a bekevert kalcein mennyisége lényegileg konstans marad, amig az arány eléri a körülbelül 4:1 értéket. Ahogy az arány nő, a lipid-vezikulák - összehasonlítva a kontroll /nem-olajos/ vezikulákkal - nagysága növekszik. Az arányt 4:1 fölé növelve, az eredmény a bekevert kalcein mennyiségének a csökkenése, ami azt mutatja, hogy a felületaktív kettős rétegek expanziós képességük határához értek, és az olaj most kiszorította a vizes fázist a lipid-vezikulából. Amint egyre több olajat viszünk be, a kalcein-koncentráció gyorsan csökken, jelezve a vizes fázis távozását a vezikula belsejéből. Ebben a helyzetben, az egész vizes fázis a lipid-kettősrétegek között helyet foglaló vizes rétegekbe épül be, és belőle semmi nem marad a központi térfogatban. Ha elég olajat vittünk be ahhoz, hogy a központi térfogat már tovább nem képes tartani, akkor a lipid vezikula elkezd felbomlani.
A találmány megértéséhez ugyan nem szükséges, de az elmélet az, hogy a felületaktív anyag igen kis mennyisége stabilizátorként hat, stabilizálva a vizes térfogat és olajtérfogat közötti határt, lehetővé téve, hogy olajcsepp képződjék. A különböző felületaktív anyagok kis mennyiségei használhatók arra, hogy segítsék a kevés-lamellás lipid-vezikulák képződését, de ez nem szükséges, mivel a kettős rétegeket alkotó felületaktív anyag elegendő a stabilitáshoz.
A találmány szerinti olajmagu vezikuláknak az az előnye, hogy a nagy központi olajtérfogat lehetővé teszi nagy részecskék beépülését, amelyek az olajban nem oldódnak, hanem inkább szuszpenzió vagy kolloid alakjában vannak jelen. Festékpigment szemcsék ilyen módon építhetők be.
A találmányt és számos alkalmazási lehetőségét nem korlátozó jelleggel a példák szemléltetik.
1. példa
A példa szerinti kevés-lamellás lipid-vezikulákat az egyik legelőnyösebb anyagból, polioxietilén/2/-cetil-éterből' állítottuk elő. Bár ebben a példában és a legtöbb következő példában is fecskendőket használtunk a nyirókeverés biztosításához, bármely, kielégítő nyirókeverést biztositó, nagy nyiróerejü berendezés használható.
1. táblázat
Polioxietilén/2/-cetil-éter 0,696 g
Koleszterin 0,073 g
Dicetil-főszfát 0,055 g
5 mM foszfát, 150 mM NaCl, pH=7,4 10,0 ml
A fenti 1. táblázatban felsoroljuk azokat az anyagokat és mennyiségi arányaikat, amelyeket a példa szerinti lipid-vezikulák készítéséhez használtunk. A polioxietilén/2/-cetil-étert, a koleszterint és a dicetil-foszfátot 5 ml-es • · · · · • · · · · · · • · · · ♦ · ♦ • · · ··· ·· ·
- 20 fecskendőbe tesszük és 40°C-ra, a lipid olvadáspontja feletti hőmérsékletre felmelegitjük. A dicetil-foszfát tiszta negatív töltést ad a végső membránszerkezetnek. A lipofil fázist, amelyet a lipofil komponensek felmelegítése és összekeverése után kapunk, háromágú zárócsap segítségével erőteljesen egy vizes fázisba fecskendezzük, amely 150 mM NaCl-ot tartalmazó 10 ml 5 mM főszfát-pufferból áll, a pH-érték 7,4. A foszfát-puffer, ami 25 ml-es fecskendőben van, ugyancsak 40°C hőmérsékletű. A lipofil fázis befecskendezését a vizes fázisba 5 mp-nél rövidebb idő alatt végezzük. Az igy kapott keveréket ezután 8-12 m/sec lineáris áramlási sebességgel, körülbelül 1 mm átmérőjű nyíláson át egy második, 25 ml-es fecskendőbe nyomjuk. A keveréket folyamatosan előre és hátra járatjuk a két 25 ml-es fecskendő között körülbelül 2 percig, igy a nagy térfogatú, kevés-lamellás lipid-vezikulák előállifásához szükséges nyirókeverést biztosítva. Ily módon a kevés-lamellás lipid-vezikulákat tartalmazó tej szerű szuszpenziót kapunk. A lipid vezikulákat 15 percig 10.000 fordulat/ perc sebességgel centrifugálva elkülönítjük /Beckman Instrumental Co. J-21 centrifuga/, ezek a vizes oldat tetején kis fajsúlyú fázist alkotnak.
Az előállított kevés-lamellás lipid-vezikulák 0,4 ^umes szűrőn nem mennek át. A vezikulákat 6 percig Branson ultrahang készülékben kezelve, a lipid membrán-szerkezetek elérik a normál multilamellás vezikulák méretét, 0,45 yum-es szűrőn átmennek. A vezikulákat további 6 percig ultrahanggal kezelve, a membránszerkezetek mérete eléggé csökken ahhoz, hogy 0,2yum-es szűrőn átmenjenek.
• · · · • ·· · · • · · · • · · · · ·
2. példa
Ebben a példában nagyobb méretben végezzük az előállítást, ugyanazokat az anyagokat használva, mint az 1. példában, de 3 g lipidet alkalmazva. A használt anyagok mólarányait, valamint a vizes fázis térfogatát a 2. táblázat szemlélteti.
2. táblázat
Polioxietilén/2/-cetil-éter
Koleszterin
Dicetil-foszfát mM foszfát, 150 mM NaCl, pH=7,4 mM mM
1,5 mM ml
A polioxietilén/2/-cetil-étert, a koleszterint és a dicetil-foszfátot 25 ml-es fecskendőbe tesszük és 40°C-ra felmelegitjük. A keveréket háromágú zárócsap segítségével 60 ml-es fecskendőben lévő, ugyancsak 40°C-os, 50 ml foszfát-pufferba fecskendezzük erőteljesen. Ezt a műveletet 10 mpnél rövidebb idő alatt végezzük el. Az igy kapott keveréket 8-12 m/sec áramlási sebességgel, körülbelül 1 mm átmérőjű nyíláson egy másik 60 ml-es fecskendőbe nyojuk. A keveréket a két 60 ml-es fecskendő között körülbelül 2 percig hajtjuk folyamatosan ide-oda, ekkor krémet kapunk. Ezt a krémet 15 percig 10.000 fordulat/perc sebességgel centrifugáljuk, ekkor a lipid-membránszerkezet külön réteget alkot a be nem épült vizes fázis tetején. A beépült vizes térfogat a különböző kísérletekben 7-20,8 ml volt 1 g lipidre, ez sokkal na,gyobb mennyiség, mint az a 2-4 ml/g lipid, amit a multilamellás lipid membránszerkezeteknél általában megfigyeltek.
• · · · · • ♦ ··· · · • · · · · · · ·· * ··· ·· ·
A vezikulákat 1:100 arányban hígítva, azt találtuk, hogy azok szobahőmérsékleten 8 hónapig stabilak aggregációval szemben.
3. példa
Ebben a példában lényegileg ugyanúgy járunk el, mint a 2. példában, kivéve, hogy a polioxietilén/2/-cetil-éter helyett polioxietilén/4/-lauril-étert használunk. Mivel a lauril-éter szobahőmérsékleten folyadék, nem szükséges felmelegiteni. összesen 3 g lipidet alkalmazunk, a 3. táblázatban megadott arányban.
3. táblázat
Polioxietilén/4/-lauril-éter
Koleszterin
Diceti1-foszfát mM foszfát, 150 mM NaCl, pH=7,4 mM mM
1,5 mM ml
A kevés-lamellás lipid-vezikulák képzése és centrifugálással végzett elkülönítése után, a beépült térfogatot megmértük és· azt találtuk, hogy ez 8 ml/g lipid. Ez valóban meglepő, mivel az ebben a kísérletben képződött lipid-vezikulák ultrahang kezelés nélkül is szabadon áthaladnak a 0,2 méretű szűrőn. E kis méretük miatt, a lauril-vezikulák hasonlóképpen jutnak el a szervekhez, mint a kis unilamellás vezikulák, s emellett mégis nagy a befogadó térfogatuk és a beépítés hatásfoka.
4. p é 1 d a
Ebben a példában egy makromolekulát, specifikusan hemoglobint használunk a találmány szerinti kevés-lamellás lipid-vezikulákhoz a beépülés hatásfokának szemléltetésére. A lipid membránszerkezetek készítéséhez polioxietilén/2/-cetil-étert használunk. A 4. táblázatban felsoroljuk az alkalmazott anyagokat és mennyiségeiket.
4. táblázat
Polioxietilén/2/-cetil-éter
Koleszterin
Dicetil-főszfát
3,1 g
0,7 g
0,13 g
Vörösvérsejt-hemolizátum /10 mg hemog./ml/ 50 ml
A vörösvérsejt-hemolizátumot úgy állítottuk elő, hogy friss, mosott humán vörösvérsejteket hipotóniás foszfát-pufferban lizáltunk, igy a hemoglobin-koncentráció 10 mg/ml. A lipidet, a koleszterint és a dicetil-foszfátot 10 ml-es fecskendőbe tesszük és 40°C-ra felmelegitjük. Ezután a keveréket háromágú csap segítségével erélyesen egy 60 ml-es fecskendőben lévő 50 ml vörösvérsejt-hemolizátumba fecskendezzük. Ezt a műveletet 5 mp-nél rövidebb idő alatt végezzük el.
Az igy kapott keveréket ezután körülbelül 1 mm-es nyíláson át, 8-12 m/sec áramlási sebességgel egy másik 60 ml-es fecskendőbe nyomjuk át. A keveréket folyamatosan ide-oda hajtjuk a két fecskendő között körülbelül 2 percig, igy sötét rózsaszín krémet kapunk.
Az igy kapott krém 7 ml mennyiségét 3 ml Ficoll Hypaque density barrier-ral /sürüség-grádiens/ /Pharmacia/ keverjük és 15 percig 10.000 fordulat/perc sebességgel centrifugáljuk. A be nem épült hemoglobin a Ficoll-Hypaque sürüséggrádiensben marad, mig a lipid-vezikulákkal összeépült hemoglobin a lipofil fázissal a vizes fázis tetején úszik. A vezikulákat tartalmazó lipofil fázis rózsaszín és elkülönül a sürüséggrádiens tetején. A két frakció /a lipid fázis és a sürüséggrádiens/ 1-1 ml alikvot mennyiségét feloldjuk 4 ml Soluene-ben /0,5 n kvaterner ammónium-hidroxid toluolban, Packard cég/, és a hemoglobin-tartalmát meghatározzuk, az abszorpciót 420 nm-en /Sorét bánd/ mérve. A Ficoll-Hypaque optikai sűrűsége 0,42, mig a lipid membránszerkezetek optikai sűrűsége 1,46, ami azt mutatja, hogy a lipid membránszerkezetekkel körülbelül 22 mg hemoglobin/g lipid kapcsolódott össze. A megfelelő vizes térfogat-felvétel körülbelül 8 ml/g lipid.
A nedves nitrogéngázzal végzett kezelés jellegzetes spektrális változást idézett elő a lipid membránszerkezetekkel összekapcsolódott hemoglobinban, mutatva, hogy az oxihemoglobin dezoxihemoglobinná alakult át. Amint a dezoxihemoglobint ismét kitettük légköri oxigénnek, spektrális változás állt be, mutatva, hogy oxihemoglobinná alakult vissza. Ez azt szemlélteti, hogy a hemoglobin a beépítési eljárás során nem károsodik.
A hemoglobint tartalmazó szerkezeteket 11 napig 40°C hőmérsékletű pufferban tartjuk, majd Ficoll-Hypaque • · ··· · • · · · · · ·« · · · · ·· · density barrier-en újra tisztítjuk. Azt találtuk, hogy a beépült hemoglobin 70%-a még megtalálható a lipid fázisban. Ezenkívül, a hemoglobin-tartalmú lipid membránszerkezetek még mutatják a dezoxigénezési-reoxigénezési reakciót. Egy hasonló, 17 napos kísérlet azt mutatja, hogy az eredetileg beépült hemoglobin 62%-a még megmaradt és még mutatja a normál dezoxigénezési-reoxigénezési reakciót.
Hasonló kísérletet végeztünk, 30 mg hemoglobin/ml koncentrációt alkalmazva, vagyis a koncentrációt háromszorosára növelve. A hemoglobin beépülésének várt növekedése: 58 mg/g lipid, volt megfigyelhető.
5. példa
Ebben a példában egy lipofil molekulát, specifikusan az all-transz-retinsavat használtuk annak igazolására, hogy a találmány szerinti vezikulák képesqk lipofil molekulákat beépíteni. A vezikulák lipid szerkezeti anyagául polioxietilén/2/-cetil-étert alkalmaztunk. 2,5 g összes lipidet használtunk fel az 5. táblázatban megadott mennyiségekben. A 2. példa szerinti eljárást alkalmaztuk.
5.táblázat
Polioxietilén/2/-cetil-éter 33 mM
Koleszterin 6 mM
Dicetil-foszfát 1,5 mM
All-transz-retinsav O,67mM
5 mM foszfát, 150 mM NaCl, pH=7,4 40 ml
>»
- 26 A találmány szerinti eljárást alkalmazva, a polioxietilén/2/-cetil-étert, a koleszterint, a dicetil-foszfátot és az all-transz-retinsavat 40°C-on 10 ml-es fecskendőben összekeverjük, majd a keveréket erőteljesen 60 ml-es fecskendőben lévő, ugyancsak 40°C-os 40 ml 5 mM foszfát, 150 mM NaCl /pH=7,4/ pufferba fecskendezzük. A keveréket ezután nyirókeverésnek vetjük alá két percig, 1 mm-es nyíláson át egy másik 60 ml-es fecskendőbe fecskendezve. így sárga szinü krémet kapunk.
Ezt a krémet 15 percig 15.000 fordulat/perc sebességgel centrifugáljuk, ekkor a lipid-vezikulák sárga rétegként elkülönülnek a be nem épült vizes fázis tetején. Az izolált lipid-vezikulákat további térfogatfelvétel nélkül higithatjuk, stabil homogén szuszpenziót képeznek. A vizes fázis beépülését mérve a lipid membránszerkezetekbe, az 18 ml/g lipid volt. Ez az igen magas érték az alkalmazott körülmények között valószínűleg a bevitt tiszta negatív töltés következménye, amit az all-transz-retinsav képvisel. Az all-transz-retinsav beépülése 8 mg/g lipid /> 99%/ volt.
6. példa
Ebben a példában a polioxietilén/2/-cetil-éterrel és koleszterinnel készített lipid-vezikulákhoz a negativ töltés biztosítására a dicetil-foszfátot all-transz-retinsavval helyettesítjük. 2,5 g lipid-keveréket használunk a 6. táblázatban megadott mólarányok szerint. Az eljárást a 2. példa szerint végezzük.
• · • · · • · · • · · • · • · · <
- 27 -
6. táblázat
Polioxietilén/2/-cetil-éter 33 mM
Koleszterin 6 mM
All-transz-retinsav 1, 5 mM
5 mM foszfát, 150 mM NaCl, pH=7,4 40 ml
A kevés-lamellás vezikulák képzése és centrifugálással végzett elkülönítése után a felvett vizes térfogatot megmérjük, ez 12 ml/g lipid. Az all-transz-retinsav beépülés 17,5 mg/g lipid.
7. példa
Ez a példa azt mutatja be, hogy a polioxietilén/2/-cetil-éterből készült lipid-vezikulák képesek beépíteni egy másik lipofil anyagot is, a rovarriasztó N,N-dietil-meta-toluamidot.2,5 g lipidet használunk a 7. táblázatban megadott mólarányokban. Az eljárást az 5. példa szerint végezzük, az all-transz-retinsavat Ν,Ν-dietil-meta-toluamiddal helyettesítve.
7. táblázat
Polioxietilén/2/-cetil-éter 33 mM
N,N-dletil-meta-toluamid 11 mM
Koleszterin 5 mM
Dicetil-főszfát 1,5 mM
5 mM foszfát, 150 mM NaCl, pH=7,4 40 ml
A lipid membránszerkezetek 15 percig 15.000 fordulat /perc sebességgel centrifugálva mint fehér réteg válnak ki a be nem épült vizes fázis tetején. A membránszerkezetek könynyen újra diszpergáIhatok és egyenletes szuszpenzióvá higithatók, anélkül, hogy az N,N-dietil-meta-toluamid kissürüségü fázisa különválna. A felvett térfogat 10 ml/g lipid, és az Ν,Ν-dietil-meta-toluamidnak több mint 99%-a épült be a lipid membrán-vezikulákba. Külön kísérletek azt mutatják, hogy ha koleszterint eliminálunk a rendszerből, akkor a liposzómák Ν,Ν-dietil-meta-toluamid tartalma gyorsan csökken.
8. p é 1 d a
Ez a példa azt igazolja, hogy a találmány szerinti eljárással készült lipid-vezikulák képesek szupramakromolekuláris szerkezeteket is befogadni, specifikusan az avian encephalitis /AE/ vírust, egy 17 nm-es viriont. A mennyiségi arányok és az eljárás azonosak a 4. példában alkalmazottakkal, kivéve, hogy a vörösvérsejt-lizátumot az AE vírus oldatával helyettesítjük. Az eredményeket a 8. táblázat szemlélteti.
8. táblázat
Szérumhigitás 1:00 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32
AE vírusminta 1.47 0.75 0.48 0.24 0.21 . 0.17
Vizes maradék 0.08 0.08 0.10 0.08 0.12 0.99
Standard-kontrol 1.39 0.67 0.40 0.16 0.13 0.09
Maradék-kontrol 0.00 0.00 0.02 0.00 0.04 0.02
·♦ * ··· ·» ·
- 29 Amint az a 8. táblázat eredményeiből nyilvánvaló, az AE vírusnak legalább 75%-át felveszik a találmány szerinti kevés-lamellás vezikulák, amig a vírus mennyisége túl kicsi lesz, jelezve ezeknek a vezikuláknak a potenciális használhatóságát vírusok és plazmidok szállításában. A hagyományos multilamellás lipid—vezikulák vagy a nagy unilamellás vezikulák nem voltak használhatók ennek a nagy molekulának a stabil beépítésére. Hasonló kísérleteket végeztünk egy
Herpes vírussal /Marek-féle kór/ is amelynek átmérője 0,017 helyett körülbelül 0,15jU.
Az ismertetett eljárás itt is nagy beépülési hatásfokot mutatott.
9. példa
Ez a példa a gliceril-monosztearát mint felületaktív anyag /lipid/ alkalmazásán alapszik kevés-lamellás lipid-vezikulák előállítására. A gliceril-monosztearátot a koleszterinnel összekeverjük, és a keverékhez olaj savat adunk, mint negatív töltést biztosító anyagot. A gliceril-monosztearát, a koleszterin és az olajsav mólaránya 1:0,2:0,09. A 2. példa szerinti módszereket használjuk. Az alkalmazott pontos arányokat a 9. táblázat szemlélteti. A lipid fázist körülbelül 75°C-ra melegítve oldatot képezünk. Egyszerre 60 ml-es adagokat végzünk, összekeverve a felmelegitett gliceril-monosztearát /koleszterin/ olaj sav lipofil fázist a háromszor nagyobb térfogatú Dulbecco-féle foszfáttal pufferolt sóoldattal.
9. táblázat
Gliceril-monos ztearát 50,2 g 139 mmól
Koleszterin 10,2 g 28 mmól
Olaj sav 5,4 g 12 mmól
A lipid-vezikulákat centrifugálással elkülönítjük, a vezikulák átmérője körülbelül 1-3 ji. Az elkészítette lipid-vezikulákat hatszoros térfogatú puffpr-feleslegben körülbelül 16 órán át tároljuk, majd még 16 óra tárolás után a vezikulákat újra hígítjuk a pufferral 1,050 ml összes térfogatra. Ez a hígítás viszonylag nem viszkózus oldatot eredményez/ ami gradiens-centrifugálással körülbelül 65 térfogat % vezikulát tartalmaz. A térfogatfelvétel 8,9 ml/g lipid.
Az előállított lipid-vezikulák lényegileg stabil» nak mutatkoztak 0,5 mólos sósavban, ami azt jelzi, hogy a vezikulák enterális alkalmazásra használhatók. Ezenkívül a gliceril-monosztearát az FDA által jóváhagyott anyagok listáján van, az olaj sav elfogadott élelmiszeradalék és a koleszterin elkerülhetetlen tápanyag.
Ha az olajsavat dicetil-foszfáttal vagy palmitinsavval helyettesítjük, akkor ez még nagyobb vizfelvételt eredményezhet. A dicetil-foszfátot használva a vezikulák előállításához /a keverék koleszterint nem tartalmaz/ 11,0 ml/g lipid vizfelvételt kapunk, míg a lipofil fázisban pálmitinsavat és koleszterint alkalmazva, a vizfelvétel még nagyobb, 15 ml/g lipid. A gliceril-monosztearáttal végzett valamennyi kísérletben a vizfelvétel több óra alatt ment végbe.
10. p é 1 d a
Ez a példa azt szemlélteti, hogy a polioxietilén/9/-gliceril-monosztearát is használható a találmány szerinti kevés-lamellás lipid-vezikulák előállításával. A 10. táblázatban felsoroljuk az ebben a példában készített vezikulák lipofil fázisának előállítására használt komponenseket és ezek mennyiségeit. Mint a gliceril-monosztearátnál, ezt a keveréket is körülbelül 70°C-ra kellett felmelegiteni, hogy tiszta oldatot kapjunk. Miután a koleszterin és az olajsav feloldódott az észterben, az oldatot felhasználásához körülbelül 45°C-ra lehűtjük.
10. táblázat
Polioxietilén/9/-gliceril-sztearát 62,5 g 70 mmól
Koleszterin 5,0 g 14 mmól
Olaj sav 0,9 g 3 mmól
ml lipidkeveréket 50 ml foszfát-sóoldat-pufferral elegyítünk, a 2. példában ismertetett fecskendő-módszert használva, Így a lipid-vezikulákból egyenletes krémet kapunk. Ebből a krémből körülbelül 5 ml-t keverünk 5 ml Ficoll-Hypaque grádienssel, és az elegyet körülbelül 1 órán át 1500 fordulat/perc sebességgel centrifugáljuk. A vizfelvétel körülbelül 6 ml/g lipid. A mikroszkópos vizsgálat azt mutatja, hogy a lipid-vezikulák 1-3 u mértékűek.
11. p é 1 d a
Ebben a példában két másik polioxietilén-észtert, a polioxietilén/3/-sztearátot és a polioxietilén/9/-sztearátot vizsgáljuk meg, hogy lássuk, képeznek-e találmány szerinti kevés-lamellás lipid-vezikulákat. Az 1. példában leirt eljárásokat használva a polioxietilén/3/-sztearátot keverjük a dicetil-foszfáttal és a koleszterinnel, s igy lipid fázist képezünk. Az igy kapott lipid keveréket nyirókeverésnek vetjük alá foszfátpufferral} a lipid-vezikulákat képezve. Az észter/koleszterin/dicetil-foszfát arány 1:0,33:0,01. A polioxietilén/3/-sztearátot használva a lipid-vezikulák készítéséhez, a vizfelvétel 6,5 ml/g lipid. Ha dicetil-foszfátot és koleszterint nem alkalmazunk, akkor a lipid-vezikulák inkább granulált szuszpenzió, mint diszperzió alakjában képződnek.
Hasonló kísérleteket végeztünk, a polioxietilén/3/-sztearát helyett polioxietilén/9/-sztearátot használva. A dicetil-foszfát és koleszterin nélkül, polioxietilén/9/-sztearáttal heterogén lipid-vezikulák képződnek, de sürüség-grádiens centrifugálást alkalmazva a lipid-vezikulákat nem lehet elkülöníteni. Ha a lipidhez koleszterint és dicetil-foszfátot adunk, akkor jól definiált lipid-vezikulák egyenletes szuszpenzióját kapjuk. A vizfelVétel, polimer-sürüséggrá diens centrifugálással mérve 6,5 ml/g lipid volt.
12. példa
Ebben a példában^különböző polioxietiién-szorbitán-észtert vizsgáltunk meg, hogy megállapítsuk, képeznek-e találmány szerinti kevés-lamellás lipid-vezikulákat. A polioxietilén /POE/-szorbitán-észterek az ICI Americas, Wilmington, Delaware cégnél szerezhetők be TWEEN márkanéven. Amint az nyilvánvaló, ezek közül a szorbitán-észterek közül csak egyesek képeznek lipid-vezikulákat. Ezzel a megállapítással kapcsolatos egyik elmélet az, hogy a találmány szerinti vezikulák képzéséhez bizonyos hidrofób/hidrofil jelleg vagy egyensúly szükséges.
öt különböző polioxietilén-szorbitán-észtert vizsgáltunk meg, ezek a következők:
polioxietilén/20/-szorbitán-monoolát, polioxietilén/20/-szorbitán-trioleát, polioxietilén/20/-szorbitán-monopalmitát, polioxietilén/20/-szorbitán-monosztearát, polioxietilén/5/-szorbitán-monooleát.
Valamennyi fenti felületaktív anyagot két különböző készítményben használtuk: az első készítményben éppen 1 mól% dicetil-foszfáttal /DP/ és egy másódik készítményben 1 mól% dicetil-foszfáttal és 33 mól% koleszterinnel /DPC/.
A 11. táblázat ezeknek a kísérleteknek az eredményeit szemlélteti. A vezikula képződés oszlopban a pozitív /+/ jel azt jelenti, hogy különálló lipid vezikulák képződtek, mig a negatív /-/ jel azt, hogy lipid-vezikulák nem voltak észlelhetők.
- 34 11. tábla
Felületaktív anyag
Adalékok
Vezikula képződés
P0E/20/-szorbitán-monooleátDP
P0E/20/-szorbitán-monooleátDPC
P0E/20/-szorbitán-trioleátDP
P0E/20/-szorbitán-trioleátDPC
P0E/20/-szorbitán-monopalinitátDP
POE/20/-szorbitán-monopalmitátDPC
P0E/20/-szorbitán-moiDsztearátDP
POE /20 / -szorbitán-morosztearátDPC
POE/ 5/-szorbitán-monooleátDP
POE/5/-szorbitán-monooleátDPC
A polioxíetilén/20/-szorbitán-nonooleát 5,0 ml/g lipid vizfelvételt adott /polimer-sürüséggrádiens centrifugálással mérve/, mig a polioxietilén-szorbitán-trioleát dicetil-foszfáttal és koleszterinnel látható liposzómákat eredményezett, amelyek 0,2 jjl méretű szűrőkön átmentek, és a vizfelvételük 8,0 ml/g lipid volt. Az, hogy a többi anyag nem képez lipid-vezikulákat, jelzi, hogy különbségek vannak a molekulák főcsoportjaiban és a hidrofób láncrészekben.
*
13. példa
Ez a példa azt szemlélteti, hogy bizonyos dietanol-aminok használhatók a találmány szerinti kevés-lamellás lipid-vezikulák előállítására. Három különböző dietaanol-amint vizsgáltunk meg: a dietanol-amin-lauramidot · a dietanol-amin-mirisztamidot /C^/ és a dietanoi-amin-linolamidot /C^g, két telitetlenség/. Valamennyi kísérletet a 2. példában leirt módon végeztük, azzal az eltéréssel, hogy a polioxietilén/2/-cetil-éter helyett a dietanol-aminokat használtuk.
A 12. táblázat ezeknek a kísérleteknek az eredményeit szemlélteti. A -C,-DCP jelzésű oszlop azokat a kísérleti eredményeket mutatja, amikor a felületaktív anyagot magában használtuk, a C jelű oszlop azokat az eredményeket szemlélteti, amikor a felületaktív anyagot koleszterinnel kevertük 4:1 arányban és a DCP jelzésű oszlop azoknak a kísérleteknek az eredményeit mutatja be, amikor a koleszterin és felületaktív anyag keverékéhez 1 mól% dicetil-foszfátot adtunk.
12. táblázat
Felületaktív anyag Vizfelvétel /ml/g/
Dietanol-amin-lauramid -C, -PCP 2.0 C 4.5 PCP 5.5
Dietanol-amin-mirisztamid 3.0 5.5 5.5
Dietanol-amin-linolamid 3.5 8.0 8.5
Amint az a 12. táblázatból kitűnik, valamennyi felületaktív anyag nagy vizfelvételi szintet ad koleszterinnel, főképpen a negatív töltést biztositó dicetil-foszfáttal együtt, kevés-lamellás lipid-vezikulákat képezve. Más dietanol-aminok, amelyeket megvizsgáltunk, például a sztearil-dietanol-amin, ilyen tipusu vizfelvételt nem mutattak.
14. példa
Ebben a példában egy lipofil fotoszenzibilizátor, a hematoprotoporfirin-nátriumsó beépülését vizsgáltuk dietanol-amin-linolamid lipid-vezikulákba, 5 mg porfirint feloldottunk 0,5 g meleg dietanol-amin-linolamidban. Az oldathoz koleszterint és dicetil-foszfátot adtunk, és a 2. példa szerinti fecskendős eljárást használtuk, vizes fázisként 2 ml 0,02 M trisz-hidroklorid pufferral. Az igy kapott lipid-yezikulákat Ficoll-Hypaque sürüséggrádierissel 10 percig centrifugálva elkülönítettük, és a portirintartalmat az abszorpciót 420 nm-en /Sorét region/ mérve meghatároztuk.
A 13. táblázat a pufferfelvételt adja meg 1 g lipidre, a hematoprotoporfirin mennyiségét és a bevitt hematoprotoporfirin felhasznált százalékos mennyiségét. Ez a példa azt szemlélteti, hogy a találmány szerinti kevés-lamellás lipid-vezikulák használhatók lipofil porfirin-vegyületek beépítésére is.
Puffer Hematoprotoporfirin /ml/ /mg/ a bevittnek
5,6 4,3 86%-a
13. táblázat g dietanol-amin-linolamid felvesz . p é 1 d a
Ez a példa nagy molekulák vagy kolloidok, például olajalapu pigmentek beépülését szemlélteti kevés-lamellás lipid-vezikulák központi üregébe. Négy különböző pigmentet vizsgáltunk meg: kadmium-szulfát és bárium-szulfát sárga koncent rátumát, vas/III/- vas/III/-cianid kék koncentrátumát, aluminium-hidrátra vitt dihidricíntrakinon vörös koncentrátumát és króm/III/-hidroxid zöld koncentrátumát. Minden egyes koncentrátumnak körülbelül 100 mg mennyiségét 0,2 ml lenmagolajban diszpergáltuk és 40°C-on 0,2 ml 1:0,33:0,01 arányú polioxietilén/2/-cetil-éter/koleszterin/ dicetil-foszfát lipid-fázissal kevertük. Az olaj/felületaktív anyag keveréket körülbelül 15 másodpercig ultrahanggal kezelve,az olajat a felületaktív anyagban tökéletesen diszpergáltuk, és az igy kapott keveréket fecskendőbe töltöttük. A lipid-vezikulákat az 1. példa szerinti fecskendős eljárással állítottuk elő, az olaj/felületaktív anyag diszperzióját 1,0 ml vízzel nyirókeverésnek alávetve. Az igy centrifugáltuk és Ficoll-Hypaque kapott lipid-vezikulákat grádiensen elkülönítettük.
A sárga koncentrátum 5-15 /U átmérőjű lipid-vezikulák heterogén tömegét eredményezte, némelyek belső része
határozottan sárga volt, ügy látszott, hogy sok lipid-vezikula belső üregébe 1-2 bad olajat nem vettünk /U méretű testek vannak bezárva. Szaészre.
Hasonló módon a kék koncentrátum 2-15átmérőjű, olajjal töltött lipid-vezikulák heterogén tömegét eredményez te. Szabad olaj itt sem volt észlelhető. A nagyobb lipid-vezikulák ugyancsak mutattak körülbelül 1^u átmérőjű bezárt testeket. A fenti sárga koncentrátumból sárga üledék vált ki, de nem vált ki üledék a kék koncentrátumból.
A zöld koncentrátum zöldszinü lipid-vezikulákat eredményezett, de üledék nem volt található, ügy látszott, hogy egyes lipid-vezikulák hálószerű rácsos belső formájuak. Itt is találtunk az üregbe zárt testeket 5nagyságig.
A vörös szinü koncentrátum szintén üledék és olaj nélküli lipid-vezikulákat eredményezett. A lipid-vezikulák központi üregében a hálós rácsszerkezet igen feltűnő volt.
Ezek a kísérletek világosan szemléltetik, hogy nagy szemcsék, valójában a klasszikus lipid-vezikulák nagyságával biró szemcsék beépülhetnek a találmány szerinti kevés-lamel lás lipid-vezikulák olajjal töltött üregébe.
16. példa
Ebben a példában több különböző polioxietilén felületaktív anyagot vizsgáltunk olaj felvételre és kevés-lamellás lipid-vezikulák képzésére. Az 1. példa szerinti fecskendős módszert használtuk, 0,4 g felületaktív anyagot keverve 1,5 g ásványolajjal, és az igy kapott lipid fázist keverve 1,5 g • · ♦ · • ··· · · • · · · · vízzel. A polioxietilén/4/-sztearil-étert két készítményben vizsgáltuk, az egyik tartalmazott koleszterint, a másik nem. Koleszterin nélkül a felületaktív anyagból szilárd aggregátum képződött, mig koleszterinnel heterogén lipid-vezikulák képződtek. Ezek a lipid-vezikulák nem kevés-lamellás, hanem multilamellás lipid-vezikuláknak mutatkoztak. Valójában, a vezikulák az ásványolajnak kevesebb mint 1/3 részét vették fel.
Ezzel ellentétben, ha polioxietilén/2/-sztearil-étert használtunk, akkor a vezikulák az olajnak több mint 90%-át vették fel koleszterin használata nélkül. Hasonló pozitív eredményeket kaptunk dietanol-amin-lauramiddal és dietanol-amin-mirisztamiddal is.
Amint az a fenti példák eredményeiből láthatój nagy viz- és olaj felvevőképességgel rendelkező kevés-lamellás lipid-vezikulák állíthatók elő a találmány szerinti anyagokkal és eljárásokkal. Más kísérletek azt mutatták, hogy ha más eljárásokat, például a Bangham módszert használjuk lipid-vezikulák előállítására, kevés-lamellás lipid-vezikulák nem képződnek ugyanazokat az anyagokat használva, hanem inkább klasszikus multilamellás lipid-vezikulák jönnek létre. A multilamellás lipid-vezikulák vizfelvétele legalább 30%kal kisebb, összehasonlítva a kevés-lamellás lipid-vezikulákéval, és olaj felvételt lényegileg nem mutatnak·
A fenti leírás csupán illusztráló jellegű, á szakember találhat más anyagokat és módszereket is, amelyekkel ugyanilyen eredményekre jut. Az ilyen egyéb anyagok; és módszerek ugyancsak a találmány oltalmi körébe tartoznak.

Claims (26)

1. Eljárás kevés-lamellás lipid-vezikulák előállí- tására, azzal jellemezve, hogy a következő műveleteket vé gezzük :
A. lipofil fázist képezünk egy felületaktív anyagból és egy lipid-oldható, a lipid-vezikulákba beépítendő anyagból, a felületaktív anyagot a következő csoportokból választva:
az R-^-COO (C2H^o)nH általános képletű polioxietilén-zsirsav-észterek, a képletben R^ lauril-, mirisztil-, cetil-, SJtearil- vagy oleil-csoport vagy ezek származékai és n=2-10;
az R2~COfC2Hi|O)mH általános képletű polioxietilén-zsirsav-éterek, a képletben R2 lauril-, mirisztil- vagy cetil-csoport vagy ezek származékai, egyszer vagy kétszer telítetlen oktadecil-savcsoportok vagy származékaik vagy kétszer telítetlen ejkodiénsavcsoportok vagy származékaik és m=2-4;
a(hOCH2-CH2)2NCO-R3 általános képletű dietanol-aminok,, a képletben R3 kapril-, lauril-, mirisztil- vagy linoloil csoport és származékaik;
az R4-N0C0-(θΗ2)^“ΟΗ3 általános képletű hosszú láncú acil-hexózamidok, a képletben b - 10-18, és R4 cukormolekula, igy glükózamin, galaktózamin vagy N-metil-glükamin;
- 41 az R^-CHCOOH-NOC-(ct^)c -CHg általános képletű hosszú láncú acil-amino-savamidok, a képletben c=10-18 és aminosav oldallánc;
a HOOC-(ch2)d-N(CH3)2-(CH2)3-NCO-R6 általános képletü hosszú láncú acil-amidok, a képletben Rg 12-20 szénatomos és legfeljebb kétszer telítetlen acillánc és d=l-3;
polioxietilén/20/-szorbitán-mono-vagy -trioleát;
polioxietilén-gliceril-monosztearát, 1-10 polioxietilén csoporttal;
és gélicerin-monosztearátok.
B. vizes fázist képezünk egy vizes oldatból és a lipid vezikulákba beépítendő vízben oldódó anyagból;
C. a lipofil fázist és a vizes fázist nyirókeveréssel összekeverjük;
s igy kevés-lamellás lipid-vezikulákat képezünk, amelyek több külső lipid-kettős-rétegből állnak, s ezek egy lényegileg amorf üreget vesznek körül.
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a lipofil fázishoz egy szteroidot is keverünk,.
3. A 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy szteroidként egy szterint.alkalmazunk, igy koleszterint, hidrokortizont vagy ezek analógjait vagy származékait.
4. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a lipofil fázishoz töltést adó anyagot is keverünk·
5. A 4. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy töltést adó anyagként negativ töltést adó anyagot keverünk be, igy olaj savat, dicetil-foszfátot, cetil-szulfátot, foszfatid-savat, foszfatidil-szerint vagy ezek keverékeit.
6. Az 1. igénypont szerinti eljárás, amikor egy vizzel nem elegyedő olajos anyagot épitünk be a kevés-lamellás lipid-vezikula amorf központi üregébe, azzal jellemezve, hogy a lipofil fázis és a vizes fázis nyirókeveréssel végzett összekeverése előtt az olajos anyagot a lipofil fázisban diszpergáljuk.
7. A 6. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az olajos anyagban diszpergálunk egy olajban szuszpendálható vagy olajban oldódó, a lipid vezikulákba beépítendő anyagot.
8. Kevés-lamellás lipid-vezikulák, azzal jellemezve, hogy több lipid-kettősrétegből állnak,amelyek lényegileg gömbalaku héjak vizes rétegekkel elválasztva, és ez a lipid-kettősrétegü és vizes rétegű szerkezet nagy, lényegileg amorf központi üreget vesz körül, emellett a lipid-kettősrétegek a következő csoportokból választott felületaktív anyagot tartalmaznak:
az R^-COO (c 2H4o)nH általános képletű polioxietilén-zsirsav-észterek, a képletben R^ lauril-, mirisztil-, cetil-, Stearil- vagy oleil-csoport vagy ezek származékai és n=2-10;
az R2~CO (C^H^O^H általános képletű polioxietilén-zsirsav-éterek, a képletben R2 lauril-, mirisztil- vagy • · · » · • · · · · · · • · · · · · · ·· · ··· ·· ·
- 43 cetilcsoport vagy ezek származékai, egyszer vagy kétszer telítetlen oktadecil-savcsoportok vagy származékaik vagy kétszer telítetlen ejkodiénsavcsoportok vagy származékaik és m=2-4;
a (HOCH^-Cf^)2NCO-R3 általános képletű dietanolaminok, a képletben Rg kapril-, lauril-, mirisztil- vagy linoloilcsoport és származékaik;
az R^-NOCO-fCHg) fc-CHg általános képletű hosszú láncg acil-hexózamidok, a képletbe^ b = 10-18 és R^ cukormolekula, igy glükózamin, galaktózamin vagy N-metil-glükamin;
az R^-CHC00H-N0C-(CHg)c“CHg általános képletű hosszú láncú acil-amino-savamidok, a képletben c=10-18 és Rg aminosav oldalíánc;
a HOOC-(CH2)d~N (CHg)2-(CH2)3-NC0-R6 általános képletű hosszú láncú acil-amidok, a képletben Rg 12-20 szénatomos és legfeljebb kétszer telítetlen acillánc és d=l-3;
polioxietilén/20/-szorbitán-mono- vagy -trioleát;
plioxietilén-gliceril-monosztearát, 1-10 polioxietilén csoporttal;
és glicerin-monosztearátok.
9. A 8. igénypont szerinti kevés-lamellás lipid-vezikulák, azzal jellemezve, hogy a lipid-kettősrétegek egy szteroidot is tartalmaznak.
10. A 9. igénypont szerinti kevés-lamellás lipid-vezikulák, azzal jellemezve, hogy a szteroid koleszterin, hidrokortlzon vagy ezek analógjai és származékai.
11. A 8. igénypont szerinti kevés-lamellás lipid-vezikulák, azzal jellemezve, hogy a lipid-kettősrétegek töltést adó anyagot is tartalmaznak.
12. A 11. igénypont szerinti kevés-lamellás lipid-vezikulák, azzal jellemezve, hogy a töltést adó anyag olajsav, dicetil-foszfát, cetil-szulfát, foszfatidsav, foszfatidil-szerin vagy ezek keverékei.
13. A 8. igénypont szerinti kevés-lamellás lipid-vezikulák, azzal jellemezve, hogy tartalmaznak még egy olajban szuszpendálható vagy olajban oldódó anyagot, ezt az olajban szuszpendálható anyagot egy vízzel nem elegyedő olajos oldat tartalmazza, amely az amorf központi üreget legalább részben megtölti.
14. A 13. igénypont szerinti kevés-lamellás lipid-vezikulák,azzal jellemezve, hogy az olajos oldat olajokból, viaszokból, természetes vagy szintetikus trigliceridekből, acil-észterekből, ásványolaj-származékokból vagy analógjaikból vagy származékaiból áll.
15. Eljárás vízben oldódó anyagok beépítésére kevés-lamellás lipid-vezikulákba, azzal jellemezve, hogy a következő műveleteket végezzük:
lipofil fázist képezünk egy felületaktív anyagból és a felületaktív anyagban oldódó másik anyagból, ezt a másik anyagot a felületaktív anyagban feloldva, a felületaktív anyagot a következő csoportokból választva:
···: ·*::......:
• · ·«· · · • · · · · · · ·· · ··· ·· ·
- 45 az R^-COOfC2H^o)nH általános képletű polioxietilén-zsirsav-észterek, a képletben R^ lauril-, mirisztil-, cetil-, stearil- vagy oleil-csoport vagy ezek származékai és n=2-10;
az R2~C0(C2H^o)mH általános képletű polioxietilén-zsirsav-éterek, a képletben R2 lauril-, mirisztil- vagy cetilcsoport vagy ezek származékai, egyszer vagy kétszer telítetlen oktadecil-savcsoportok vagy származékaik vagy kétszer telítetlen ejkodiénsavcsoportok vagy származékaik és m=2-4;
a (HOCH2-CH2)2NCO”R3 általános képletű dietanol-aminok, a képletben R^ kapril-, lauril-, mirisztil- vagy linoloilcsoport és származékaik;
az R^-NOCO-(CH2) általános képletű hosszú láncú acil-hexózamidok, a képletben b=10-18 és R^ cukormolekula, igy glükózamin, galaktózamin vagy N-metil^glükamin;
az R5-CHCOOH-NOC-(CH2)c-CH3 általános képletű hosszú láncú acil-amino-savamidok, a képletben c=10-18 és R^ aminosav oldallánc;
a HOOC-(CH2) d~N (CH3) 2 _(CH^NCOtR6 általános képletű hosszú láncú acil-amidok, a képletben Rg 12-20 szénatomos és legfeljebb kétszer telítetlen acillánc és d=l-3;
polioxietilén/20/-szorbitán-mono- vagy -trioleát;
polioxietilén-gliceril-monosztearát, 1-10 polioxietilén csoporttal;
és glicerin-monosztearátok.
♦ ··
.... ...J • 4 • · · • ♦ ·
- 46 vizes fázist képezünk úgy, hogy a beépítendő anyagokat és bármely más vízben oldódó anyagot vizes oldószerben feloldunk;
a vizes fázist és a lipofil fázist nyirókeveréssel összekeverve kevés-lamellás lipid-vezikulákat képezünk; és a kevés-lamellás lipid-vezikulákat a reagensektől elkülönítjük.
16. A 15. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a lipofil fázishoz egy szteroidot adunk.
17. A 16. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy szteroidként koleszterint, hidrokortizont vagy ezek analógjait vagy származékait alkalmazzuk.
18. A 15. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a lipofil fázishoz töltést adó anyagot adunk.
19. A 18. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy töltést adó anyagként az olaj savat, dicetil-foszfátot, cetil-szulfátot, foszfatidsavat, foszfatidil-szerint vagy keverékeiket alkalmazzuk.
20. Eljárás olajban diszpergálható anyagok beépítésére lipld-vezikulákba, azzal jellemezve, hogy a következő műveleteket végezzük:
lipid fázist képezünk egy felületaktív anyagból és a vezikulák lipid szerkezetébe beépítendő lipid-oldható anyagból;
olajos fázist képezünk, úgy, hogy a beépítendő^olajban diszpergáIható anyagot diszpergáÍjuk vizzel nem elegyedő olajos oldatban, igy olajokban, viaszokban, természetes vagy szintetikus trigliceridekben, acil-észterekben, ásványolaj-származékokban, ezek analógjaiban vagy származékaiban;
a lipid fázist és az olajos fázist összekeverve lipid-oldatot képezünk;
vizes fázist képezünk egy vizes alapú oldatból és a vezikulákba beépítendő vízben oldódó anyagból;
a lipid-oldatot és a vizes fázist nyirókeveréssel összekeverjük;
s igy az olajban diszpergálható anyagot beépülve tartalmazó lipid-vezikulákat képezünk.
21. A 20. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a felületaktív anyagot a következő csoportokból választjuk:
az R^-COO(c2H4O)nH általános képletű polioxietilén-zsirsav-észterek, a képletben R. lauril-, mirisztil-, cetil-, stearil- vagy oleil-csoport vagy ezek származékai és n=2-10;
-zsirsav-éterek, a képletben R2 lauril-, mirisztil- vagy cetilcsoport vagy ezek származékai, egyszer vagy kétszer telítetlen oktadecil-savcsoportok vagy származékaik vagy kétszer telítetlen ejkodiénsavcsoportok vagy származékaik és m=2-4;
a (HOCH2-CH2)2NCO-R3 általános képletű dietanol-aminok, • · ··· · · • « · 9 « · · ·· · ··· ·· ·
- 48 a képletben Rg kapril-, lauril-, mirisztil- vagy linoloilcsoport és származékaik;
az R^-NOCO- (CH2) általános képletű hosszú láncú acil-hexózamidok, a képletben b=10-18 és R^ o.ukormolekula, igy glükózamin, galaktózamin vagy N-metil-glükamin;
az Rg-CHCOOH-NOC-(Ct^) c“CHg általános képletű hosszú láncú acil-amino-savamidok, a képletben c =10-18 és R^ aminosav oldallánc;
a HOOC-(CH2)d-N(CH3) 2-(CH2)3-NCO-R6 általános képletü hosszú láncú acil-amidok, a képletben Rg 12-20 szénatomos és legfeljebb kétszer telítetlen acillánc és d = 1-3;
polioxietilén/20/-szorbitán-mono- vagy -trioleát;
polioxietilén-gliceril-monosztearát, 1-10 polioxietilén csoporttal;
és glicerin-monosztearátok.
22. A 21. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olajos anyagként hosszú láncú zsírsav-észtereket vagy ásványolajokat alkalmazunk.
23. A 21. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a lipofil fázishoz szteroidot adunk.
24. A 23. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy sztetőidként a koleszterint, hidrokortizont, analógjaikat vagy származékaikat alkalmazzuk.
25. A 21. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a lipofil fázishoz töltést adó anyagot adunk.
26. A 25. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy töltést adó anyagként negatív töltést adó anyagot alkalmazunk, igy olaj savat, diceti1-foszfátot, cetil-szulfátot, foszfatidsavat, foszfatidil-szerint vagy keverékeiket.
HU882558A 1987-03-13 1988-03-08 Process for producing few-lamellar lipid vesicles HUT53279A (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US2552587A 1987-03-13 1987-03-13
US07/157,571 US4911928A (en) 1987-03-13 1988-03-03 Paucilamellar lipid vesicles

Publications (1)

Publication Number Publication Date
HUT53279A true HUT53279A (en) 1990-10-28

Family

ID=26699867

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU882558A HUT53279A (en) 1987-03-13 1988-03-08 Process for producing few-lamellar lipid vesicles

Country Status (14)

Country Link
US (1) US4911928A (hu)
EP (1) EP0352282B1 (hu)
JP (1) JP2589173B2 (hu)
KR (1) KR960009647B1 (hu)
AT (1) ATE71289T1 (hu)
AU (1) AU605581B2 (hu)
BR (1) BR8807410A (hu)
CA (1) CA1289419C (hu)
DE (1) DE3867637D1 (hu)
DK (1) DK633388D0 (hu)
HU (1) HUT53279A (hu)
NO (1) NO885032L (hu)
NZ (1) NZ223843A (hu)
WO (1) WO1988006883A1 (hu)

Families Citing this family (260)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5628936A (en) * 1987-03-13 1997-05-13 Micro-Pak, Inc. Hybrid paucilamellar lipid vesicles
US5147723A (en) * 1987-07-28 1992-09-15 Micro-Pak, Inc. Paucilamellar lipid vesicles
US5474848A (en) * 1987-03-13 1995-12-12 Micro-Pak, Inc. Paucilamellar lipid vesicles
US5219538A (en) * 1987-03-13 1993-06-15 Micro-Pak, Inc. Gas and oxygen carrying lipid vesicles
JP2617346B2 (ja) * 1987-03-13 1997-06-04 マイクロ ベシキュラー システムズ，インコーポレイテッド 表面活性剤とステロイドから形成される脂質小胞
US5234767A (en) * 1987-03-13 1993-08-10 Micro-Pak, Inc. Hybrid paucilamellar lipid vesicles
US5023086A (en) * 1987-03-13 1991-06-11 Micro-Pak, Inc. Encapsulated ionophore growth factors
US5811119A (en) * 1987-05-19 1998-09-22 Board Of Regents, The University Of Texas Formulation and use of carotenoids in treatment of cancer
EP0324455A3 (en) * 1988-01-15 1991-03-27 Hans O. Ribi Novel polymeric immunological adjuvants
US4895452A (en) * 1988-03-03 1990-01-23 Micro-Pak, Inc. Method and apparatus for producing lipid vesicles
US5019392A (en) * 1988-03-03 1991-05-28 Micro-Pak, Inc. Encapsulation of parasiticides
US5013497A (en) * 1988-03-03 1991-05-07 Micro-Pak, Inc. Method and apparatus for producing lipid vesicles
US5032457A (en) * 1988-03-03 1991-07-16 Micro Vesicular Systems, Inc. Paucilamellar lipid vesicles using charge-localized, single chain, nonphospholipid surfactants
US5160669A (en) * 1988-03-03 1992-11-03 Micro Vesicular Systems, Inc. Method of making oil filled paucilamellar lipid vesicles
US5019174A (en) * 1988-03-03 1991-05-28 Micro Vesicular Systems, Inc. Removing oil from surfaces with liposomal cleaner
US5104736A (en) * 1988-03-03 1992-04-14 Micro-Pak, Inc. Reinforced paucilamellar lipid vesicles
US4906476A (en) * 1988-12-14 1990-03-06 Liposome Technology, Inc. Novel liposome composition for sustained release of steroidal drugs in lungs
US5510117A (en) * 1989-03-09 1996-04-23 Micro-Pak, Inc. Entrapment vehicle and method
GB8906234D0 (en) * 1989-03-17 1989-05-04 Albright & Wilson Agrochemical suspensions
AU6524990A (en) * 1989-09-21 1991-04-18 Micro Vesicular Systems, Inc. Hybrid paucilamellar lipid vesicles
IE904098A1 (en) * 1989-11-13 1991-05-22 Nova Pharm Corp Lipospheres for controlled delivery of substances
US5188837A (en) * 1989-11-13 1993-02-23 Nova Pharmaceutical Corporation Lipsopheres for controlled delivery of substances
US5227165A (en) * 1989-11-13 1993-07-13 Nova Pharmaceutical Corporation Liposphere delivery systems for local anesthetics
FR2657607B1 (fr) * 1990-01-30 1992-04-30 Durand Muriel Procede de protection de la dihydroxyacetone, dihydroxyacetone protegee par ce procede et produit cosmetique contenant une telle dihydroxyacetone protegee.
US5213810A (en) * 1990-03-30 1993-05-25 American Cyanamid Company Stable compositions for parenteral administration and method of making same
US5165994A (en) * 1990-06-05 1992-11-24 University Of Delaware Spontaneous equilbrium surfactant vesicles
CA2046830C (en) 1990-07-19 1999-12-14 Patrick P. Deluca Drug delivery system involving inter-action between protein or polypeptide and hydrophobic biodegradable polymer
US6165500A (en) * 1990-08-24 2000-12-26 Idea Ag Preparation for the application of agents in mini-droplets
WO1992003123A1 (en) * 1990-08-28 1992-03-05 Liposome Technology, Inc. Liposome alternative bilayer formulations
EP0550463B1 (en) * 1990-09-06 1996-06-26 S.C. Johnson & Son, Inc. Stabilized liposome process and compositions containing them
US5145604A (en) * 1990-09-19 1992-09-08 S. C. Johnson & Son, Inc. Aqueous emulsion and aerosol delivery system using same
US5091111A (en) * 1990-09-19 1992-02-25 S. C. Johnson & Son, Inc. Aqueous emulsion and aersol delivery system using same
US5256422A (en) * 1991-03-28 1993-10-26 Micro Vesicular Systems, Inc. Lipid vesicle containing water-in-oil emulsions
CA2108039C (en) * 1991-03-28 2003-06-10 Elizabeth C. Albert Lipid vesicle containing water-in-oil emulsions
DE4121945C2 (de) * 1991-07-03 1993-11-04 Merz & Co Gmbh & Co Verfahren zur herstellung von stabilen, hydrophilen oder ambiphilen creme-zubereitungen, enthaltend vesikulaere bestandteile, stabile creme-zubereitungen mit vesikulaeren bestandteilen und deren verwendung
US5213805A (en) * 1991-07-25 1993-05-25 Micro Vesicular Systems, Inc. Lipid vesicles having n,n-dimethylamide derivatives as their primary lipid
US5405615A (en) * 1991-09-17 1995-04-11 Micro Vesicular Systems, Inc. Sucrose distearate lipid vesicles
US5643600A (en) * 1991-09-17 1997-07-01 Micro-Pak, Inc. Lipid vesicles containing avocado oil unsaponifiables
US5260065A (en) * 1991-09-17 1993-11-09 Micro Vesicular Systems, Inc. Blended lipid vesicles
US5439967A (en) * 1991-09-17 1995-08-08 Micro Vesicular Systems, Inc. Propylene glycol stearate vesicles
EP0683673A4 (en) * 1992-12-02 1996-06-26 Micro Vesicular Systems ANTACIDUM WITH EXTENDED EFFECT.
US5393527A (en) * 1993-01-04 1995-02-28 Becton, Dickinson And Company Stabilized microspheres and methods of preparation
AU6018894A (en) * 1993-01-15 1994-08-15 Micro Vesicular Systems, Inc. Method of inhibiting viral reproduction
US5853755A (en) * 1993-07-28 1998-12-29 Pharmaderm Laboratories Ltd. Biphasic multilamellar lipid vesicles
JPH09510433A (ja) 1993-12-17 1997-10-21 マイクロパック インコーポレイテッド 生物学的に活性な物質を細胞に送達する方法
BR9506885A (pt) * 1994-02-24 1997-08-19 Micro Pak Inc Vacinas contendo vesículas de lipidio paucilamelares como adjuvantes imunológicos
US20020048596A1 (en) * 1994-12-30 2002-04-25 Gregor Cevc Preparation for the transport of an active substance across barriers
US5629021A (en) * 1995-01-31 1997-05-13 Novavax, Inc. Micellar nanoparticles
FR2730928B1 (fr) * 1995-02-23 1997-04-04 Oreal Composition a base de vesicules lipidiques a ph acide et son utilisation en application topique
US5599548A (en) * 1995-05-08 1997-02-04 Elizabeth Arden Co., Division Of Conopco, Inc. Skin care compositions containing fatty acid amides and retinol or retinyl ester
US5954998A (en) * 1995-05-25 1999-09-21 The Clorox Company Liquid peracid precursor colloidal dispersions: oil-core vesicles
US5902604A (en) * 1995-06-06 1999-05-11 Board Of Regents, The University Of Texas System Submicron liposome suspensions obtained from preliposome lyophilizates
US5834014A (en) * 1995-10-06 1998-11-10 The Regents Of The University Of Michigan Stimulation of hair follicles
US5874105A (en) * 1996-01-31 1999-02-23 Collaborative Laboratories, Inc. Lipid vesicles formed with alkylammonium fatty acid salts
US6183774B1 (en) 1996-01-31 2001-02-06 Collaborative Laboratories, Inc. Stabilizing vitamin A derivatives by encapsulation in lipid vesicles formed with alkylammonium fatty acid salts
US6071535A (en) * 1996-01-31 2000-06-06 Collaborative Laboratories, Inc. Lipid vesicles formed with alkylammonium fatty acid salts
US5662957A (en) * 1996-05-03 1997-09-02 Novavax, Inc. Oil containing lipid vesicles with marine applications
US5700679A (en) * 1996-06-07 1997-12-23 Novavax, Inc. Lipid vesicles having a bilayer containing a surfactant with anti-viral and spermicidal activity
US5846551A (en) * 1996-06-10 1998-12-08 E-L Management Corp. Water-based makeup compositions and methods for their preparation
US5955092A (en) * 1996-09-27 1999-09-21 Elizabeth Arden Co., Division Of Conopco, Inc. Skin care compositions containing an n-substituted fatty acid amide and retinol or retinyl ester
US5747051A (en) * 1996-09-27 1998-05-05 Elizabeth Arden Co., Division Of Conopco, Inc. Skin care compositions containing an amide of a hydroxy fatty acid and a retinoid
US5935572A (en) * 1997-01-10 1999-08-10 Collaborative Laboratories, Inc. Composition containing protease separate from glycosidase for removing nits in treating lice infestation
US6039960A (en) * 1997-05-28 2000-03-21 E-L Management Corp. Water containing wax-based product
IS4518A (is) * 1997-07-09 1999-01-10 Lyfjathroun Hf, The Icelandic Bio Pharmaceutical Group Nýtt lyfjaform fyrir bóluefni
US5993852A (en) * 1997-08-29 1999-11-30 Pharmaderm Laboratories Ltd. Biphasic lipid vesicle composition for transdermal administration of an immunogen
TW476788B (en) 1998-04-08 2002-02-21 Kimberly Clark Co A cleanser and the making process thereof
GB9824024D0 (en) * 1998-11-03 1998-12-30 Unilever Plc Shampoo compositions
AU770803B2 (en) * 1998-12-23 2004-03-04 Idea Ag Improved formulation for topical non-invasive application in vivo
PT1031346E (pt) 1999-01-27 2002-09-30 Idea Ag Vacinacao nao invasiva atraves da pele
DK1031347T3 (da) 1999-01-27 2002-07-08 Idea Ag Transnasal transport/immunisering med meget tilpasselige bærere
US6080211A (en) * 1999-02-19 2000-06-27 Igen, Inc. Lipid vesicle-based fuel additives and liquid energy sources containing same
CA2309373A1 (en) * 1999-05-27 2000-11-27 Johnson & Johnson Consumer Companies, Inc. Novel topical formulations
WO2001001962A1 (en) * 1999-07-05 2001-01-11 Idea Ag. A method for the improvement of transport across adaptable semi-permeable barriers
US6309664B1 (en) 1999-09-15 2001-10-30 Igen, Incorporated Methods, uses and compositions of fluid petrolatum
US6534078B1 (en) * 1999-10-18 2003-03-18 Natural Pest Fx, Inc. Micro-encapsulated pepper-mustard composition and methods of using the same
US6375968B1 (en) 1999-10-22 2002-04-23 3M Innovative Properties Company Encapsulated active material immobilized in hydrogel microbeads
US6376514B1 (en) 2000-10-17 2002-04-23 The Procter & Gamble Co. Substituted six-membered heterocyclic compounds useful for treating multidrug resistance and compositions and methods thereof
US6540991B2 (en) 2001-04-06 2003-04-01 3M Innovative Properties Company Stabilized active materials
US6562361B2 (en) 2001-05-02 2003-05-13 3M Innovative Properties Company Pheromone immobilized in stable hydrogel microbeads
AU2002353774A1 (en) * 2001-08-01 2003-03-24 The Procter And Gamble Company Products and methods for treating microbial infections
EP1423430A1 (en) * 2001-08-16 2004-06-02 Lyfjathroun H.F., Biopharmaceuticals A method of producing antibodies ex-vivo
US6709663B2 (en) * 2001-08-31 2004-03-23 Healthpoint, Ltd. Multivesicular emulsion drug delivery systems
DE60137229D1 (de) * 2001-10-22 2009-02-12 Viroblock Sa Non-phospholipid Vesikel (npLV) und ihre Verwendung in kosmetischen, therapeutischen und prophylaktischen Anwendungen
US20030129213A1 (en) * 2001-12-26 2003-07-10 Gonzalez Anthony D. Meta-stable insect repellent emulsion composition and method of use
US20030219465A1 (en) * 2002-05-23 2003-11-27 Suresh Kumar Gidwani Composition for delivery of dithranol
US20030232091A1 (en) * 2002-06-17 2003-12-18 Adi Shefer Stabilized retinol for cosmetic dermatological, and pharmaceutical compositions, and use thereof
US20040105881A1 (en) * 2002-10-11 2004-06-03 Gregor Cevc Aggregates with increased deformability, comprising at least three amphipats, for improved transport through semi-permeable barriers and for the non-invasive drug application in vivo, especially through the skin
US20040087564A1 (en) * 2002-10-31 2004-05-06 Wright D. Craig Delivery composition and method
US8592197B2 (en) 2003-07-11 2013-11-26 Novavax, Inc. Functional influenza virus-like particles (VLPs)
CN1918175A (zh) 2003-09-29 2007-02-21 托皮根药品公司 治疗包括炎症状况的疾病的寡核苷酸组合物和方法
CA2708440C (en) 2004-04-05 2013-05-14 Kanagawa University Emulsification dispersants, a method for emulsification and dispersion using the emulsification dispersants, emulsions, and emulsion fuels
US8034796B2 (en) * 2004-04-07 2011-10-11 The University Of Georgia Research Foundation, Inc. Glucosamine and glucosamine/anti-inflammatory mutual prodrugs, compositions, and methods
EA200601648A1 (ru) 2004-04-07 2007-04-27 Зе Юниверсити Оф Джорджия Рисерч Фаундейшн, Инк. Глюкозамин и общие пролекарства глюкозамин/противовоспалительный агент, композиции и способы
JP4616602B2 (ja) * 2004-09-16 2011-01-19 大日本塗料株式会社 単分散粒子の製造方法
US8119790B2 (en) 2004-10-29 2012-02-21 Topigen Pharmaceuticals Inc. Antisense oligonucleotides for treating allergy and neoplastic cell proliferation
US20080095722A1 (en) * 2004-11-12 2008-04-24 Idea Ag Extended Surface Aggregates in the Treatment of Skin Conditions
US20120269886A1 (en) 2004-12-22 2012-10-25 Nitto Denko Corporation Therapeutic agent for pulmonary fibrosis
JP4533420B2 (ja) * 2004-12-22 2010-09-01 日東電工株式会社 線維化抑制のための薬物担体および薬物担体キット
HUE056941T2 (hu) * 2004-12-22 2022-04-28 Nitto Denko Corp Gyógyszerhordozó és gyógyszerhordozó kit fibrózis gátlására
US20080045575A1 (en) * 2004-12-29 2008-02-21 Van Dyke Thomas E Delivery of H2 Antagonists
CN101111306B (zh) 2005-01-28 2010-09-29 独立行政法人科学技术振兴机构 经脱水缩合反应可发生相转移的分子集合体及其相转移方法
EP1910297B1 (en) 2005-07-11 2016-05-25 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Isoquinoline compounds
US20070077292A1 (en) 2005-10-03 2007-04-05 Pinsky Mark A Compositions and methods for improved skin care
HUE026136T2 (hu) 2005-10-18 2016-05-30 Novavax Inc Funkcionális influenzavírus-szerû részecskék (VLP-K)
US9572886B2 (en) 2005-12-22 2017-02-21 Nitto Denko Corporation Agent for treating myelofibrosis
AU2007252192B2 (en) * 2006-05-19 2013-10-17 Topigen Pharmaceuticals Inc. Oligonucleotides affecting expression of phosphodiesterases
BRPI0712074A2 (pt) * 2006-05-19 2012-01-17 Viroblock S A composição para desativar um vìrus envelopado
WO2008036540A2 (en) 2006-09-20 2008-03-27 Boehringer Ingelheim International Gmbh Rho kinase inhibitors
WO2008083275A2 (en) * 2006-12-28 2008-07-10 3M Innovative Properties Company Dental filler and methods
US8455513B2 (en) 2007-01-10 2013-06-04 Aerie Pharmaceuticals, Inc. 6-aminoisoquinoline compounds
US20100098752A1 (en) * 2007-01-18 2010-04-22 Pinsky Mark A Materials and Methods for Delivering Antioxidants into the Skin
TWI407971B (zh) 2007-03-30 2013-09-11 Nitto Denko Corp Cancer cells and tumor-related fibroblasts
CA2692171C (en) 2007-06-22 2019-10-22 Randolph Watnick Methods and uses thereof of prosaposin
FR2917976B1 (fr) * 2007-06-29 2010-05-28 Galderma Sa Composition dermatologique comprenant des vehicules lipidiques de calcitriol, son procede de preparation et son utilisation
EP2175883A4 (en) 2007-07-19 2011-11-30 Novavax Inc CHIMERIC VARICELLA ZOSTER VIRUS-VIRUSUAL PARTICLES
ES2710498T3 (es) * 2007-12-26 2019-04-25 Mark A Pinsky Formulaciones de colágeno para la mejora del cuidado de la piel
US8455514B2 (en) * 2008-01-17 2013-06-04 Aerie Pharmaceuticals, Inc. 6-and 7-amino isoquinoline compounds and methods for making and using the same
US10251839B2 (en) * 2008-01-22 2019-04-09 Igi Laboratories, Inc. Lipid vesicles derived from olive oil fatty acids
CA2724179A1 (en) 2008-05-15 2009-11-19 Topigen Pharmaceuticals Inc. Oligonucleotides for treating inflammation and neoplastic cell proliferation
RU2553225C2 (ru) * 2008-05-23 2015-06-10 Сива Корпорейшн Способ облегчения регенерации
US8450344B2 (en) 2008-07-25 2013-05-28 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Beta- and gamma-amino-isoquinoline amide compounds and substituted benzamide compounds
US20110229544A1 (en) * 2008-11-26 2011-09-22 Viroblock S.A. Methods for Inhibiting Gram-Postive Bacteria Using Non-Phospholipid Lipid Vesicules
SG172022A1 (en) 2008-12-09 2011-07-28 Novavax Inc Modified rsv f proteins and methods of their use
JP2012525386A (ja) 2009-05-01 2012-10-22 アエリエ・ファーマシューティカルズ・インコーポレーテッド 疾患の治療のための二重機構阻害剤
EP2459187B1 (en) 2009-07-29 2021-01-06 Olsen, Elise Compositions and methods for inhibiting hair growth
WO2011038073A1 (en) * 2009-09-23 2011-03-31 Formatech, Inc. Methods for the preparation of liposomes comprising docetaxel
US10143652B2 (en) 2009-09-23 2018-12-04 Curirx Inc. Methods for the preparation of liposomes
EP3366695B1 (en) 2009-12-17 2021-07-07 Children's Medical Center Corporation Saposin-a derived peptides and uses thereof
EP3511017A1 (en) 2010-09-27 2019-07-17 Siwa Corporation Selective removal of age-modified cells for treatment of atherosclerosis
CA2817005C (en) 2010-11-05 2018-09-11 Novavax Inc. Rabies glycoprotein virus-like particles (vlps)
US8721571B2 (en) 2010-11-22 2014-05-13 Siwa Corporation Selective removal of cells having accumulated agents
EP2646107A2 (en) 2010-12-01 2013-10-09 Spinal Modulation Inc. Agent delivery systems for selective neuromodulation
JP6081995B2 (ja) 2011-06-17 2017-02-15 プレジデント・アンド・フェロウズ・オブ・ハーバード・カレッジ 癌の処置における治療抗体の標的としてのＦｒｉｚｚｌｅｄ２
WO2013003803A1 (en) 2011-06-29 2013-01-03 Avidas Pharmaceuticals Llc Topical formulations including lipid microcapsule delivery vehicles and their uses
EP2734621B1 (en) 2011-07-22 2019-09-04 President and Fellows of Harvard College Evaluation and improvement of nuclease cleavage specificity
EP3560509B1 (en) 2011-12-22 2024-01-31 Children's Medical Center Corporation Saposin-a derived peptides and uses thereof
WO2013119602A1 (en) 2012-02-06 2013-08-15 President And Fellows Of Harvard College Arrdc1-mediated microvesicles (armms) and uses thereof
AU2013202595B2 (en) 2012-03-30 2016-04-21 Biogen Ma Inc. Methods for modulating Tau expression for reducing seizure and modifying a neurodegenerative syndrome
CN111254145A (zh) 2013-03-14 2020-06-09 Ionis制药公司 用于调节tau表达的组合物和方法
US10376562B2 (en) 2013-03-15 2019-08-13 The Jackson Laboratory Methods for promoting wound healing and hair growth comprising GDNF administration
US20140275160A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy
US20140325490A1 (en) * 2013-04-25 2014-10-30 Hewlett-Packard Development Company, L.P. Classifying Source Code Using an Expertise Model
TWI772856B (zh) 2013-07-19 2022-08-01 美商百健Ｍａ公司 用於調節τ蛋白表現之組合物
US9163284B2 (en) 2013-08-09 2015-10-20 President And Fellows Of Harvard College Methods for identifying a target site of a Cas9 nuclease
US9359599B2 (en) 2013-08-22 2016-06-07 President And Fellows Of Harvard College Engineered transcription activator-like effector (TALE) domains and uses thereof
US9526784B2 (en) 2013-09-06 2016-12-27 President And Fellows Of Harvard College Delivery system for functional nucleases
US9340799B2 (en) 2013-09-06 2016-05-17 President And Fellows Of Harvard College MRNA-sensing switchable gRNAs
US9388430B2 (en) 2013-09-06 2016-07-12 President And Fellows Of Harvard College Cas9-recombinase fusion proteins and uses thereof
MX2016003419A (es) 2013-09-19 2016-10-10 Novavax Inc Metodos y composiciones para sindrome respiratorio coronavirus de oriente medio (mers-cov) inmunogenico.
US9840699B2 (en) 2013-12-12 2017-12-12 President And Fellows Of Harvard College Methods for nucleic acid editing
RU2016122918A (ru) * 2013-12-23 2018-01-30 Дэрмопартнерс, С.Л. Способ получения липосом ретинальдегида или других предшественников ретиноевой кислоты и образующийся таким образом продукт
CA2956224A1 (en) 2014-07-30 2016-02-11 President And Fellows Of Harvard College Cas9 proteins including ligand-dependent inteins
UA123624C2 (uk) 2014-09-03 2021-05-05 Бьорінґер Інґельхайм Інтернаціональ Ґмбх Сполука, специфічна до іл-23а та фнп-альфа, та її застосування
CA2961603C (en) 2014-09-19 2021-07-13 Siwa Corporation Anti-age antibodies for treating inflammation and auto-immune disorders
US9816080B2 (en) 2014-10-31 2017-11-14 President And Fellows Of Harvard College Delivery of CAS9 via ARRDC1-mediated microvesicles (ARMMs)
US10358502B2 (en) 2014-12-18 2019-07-23 Siwa Corporation Product and method for treating sarcopenia
US9993535B2 (en) 2014-12-18 2018-06-12 Siwa Corporation Method and composition for treating sarcopenia
WO2016138287A1 (en) 2015-02-25 2016-09-01 Washington University METHODS TO DETECT MOTOR NEURON DISEASE COMPRISING MICRO-RNAs
JP6866345B2 (ja) 2015-07-23 2021-04-28 ベーリンガー・インゲルハイム・インターナショナル・ゲーエムベーハー Ｉｌ−２３ａ及びｂ細胞活性化因子（ｂａｆｆ）を標的とする化合物及びその使用
RU2730625C2 (ru) 2015-09-03 2020-08-24 Новавакс, Инк. Вакцинные композиции, характеризующиеся улучшенной стабильностью и иммуногенностью
BR112018007422A2 (pt) 2015-10-13 2018-10-30 Siwa Corp anticorpos anti-age e métodos de uso dos mesmos
US10167457B2 (en) 2015-10-23 2019-01-01 President And Fellows Of Harvard College Nucleobase editors and uses thereof
KR102579582B1 (ko) 2015-11-17 2023-09-15 에어리 파마슈티컬즈, 인코포레이티드 키나아제 억제제 및 이의 중간체의 제조 방법
US9643927B1 (en) 2015-11-17 2017-05-09 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Process for the preparation of kinase inhibitors and intermediates thereof
US10435682B2 (en) 2016-02-19 2019-10-08 University Of South Florida Arginine deiminase gene therapy for disordered proteins
EP3337829B1 (en) 2016-02-19 2020-01-08 Siwa Corporation Method and composition for treating cancer, killing metastatic cancer cells and preventing cancer metastasis using antibody to advanced glycation end products (age)
KR20180133452A (ko) 2016-04-15 2018-12-14 시와 코퍼레이션 신경퇴행성 질환을 치료하기 위한 항-노화 항체
JP7152392B2 (ja) 2016-06-08 2022-10-12 ザ チルドレンズ メディカル センター コーポレーション 操作されたボツリヌスニューロトキシン
EP3475306A1 (en) 2016-06-23 2019-05-01 Siwa Corporation Vaccines for use in treating various diseases and disorders
AU2017292922B9 (en) 2016-07-08 2022-05-12 Children's Medical Center Corporation A novel botulinum neurotoxin and its derivatives
SG11201900907YA (en) 2016-08-03 2019-02-27 Harvard College Adenosine nucleobase editors and uses thereof
CN109804066A (zh) 2016-08-09 2019-05-24 哈佛大学的校长及成员们 可编程cas9-重组酶融合蛋白及其用途
CN106268551B (zh) * 2016-08-09 2018-11-20 中国石油大学(华东) 一种具有光捕获功能的多级复合微胶囊的制备方法
US11542509B2 (en) 2016-08-24 2023-01-03 President And Fellows Of Harvard College Incorporation of unnatural amino acids into proteins using base editing
CA3035566A1 (en) 2016-08-31 2018-03-08 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Ophthalmic compositions
JOP20190065A1 (ar) 2016-09-29 2019-03-28 Ionis Pharmaceuticals Inc مركبات وطرق لتقليل التعبير عن tau
WO2018067546A1 (en) 2016-10-03 2018-04-12 President And Fellows Of Harvard College Delivery of therapeutic rnas via arrdc1-mediated microvesicles
SG11201903089RA (en) 2016-10-14 2019-05-30 Harvard College Aav delivery of nucleobase editors
CA3048479A1 (en) 2016-12-23 2018-06-28 President And Fellows Of Harvard College Gene editing of pcsk9
US10745677B2 (en) 2016-12-23 2020-08-18 President And Fellows Of Harvard College Editing of CCR5 receptor gene to protect against HIV infection
US10858449B1 (en) 2017-01-06 2020-12-08 Siwa Corporation Methods and compositions for treating osteoarthritis
US10995151B1 (en) 2017-01-06 2021-05-04 Siwa Corporation Methods and compositions for treating disease-related cachexia
US10925937B1 (en) 2017-01-06 2021-02-23 Siwa Corporation Vaccines for use in treating juvenile disorders associated with inflammation
US10961321B1 (en) 2017-01-06 2021-03-30 Siwa Corporation Methods and compositions for treating pain associated with inflammation
WO2018165504A1 (en) 2017-03-09 2018-09-13 President And Fellows Of Harvard College Suppression of pain by gene editing
JP2020510038A (ja) 2017-03-09 2020-04-02 プレジデント アンド フェローズ オブ ハーバード カレッジ がんワクチン
WO2018165629A1 (en) 2017-03-10 2018-09-13 President And Fellows Of Harvard College Cytosine to guanine base editor
US11268082B2 (en) 2017-03-23 2022-03-08 President And Fellows Of Harvard College Nucleobase editors comprising nucleic acid programmable DNA binding proteins
KR20190135027A (ko) 2017-03-31 2019-12-05 에어리 파마슈티컬즈, 인코포레이티드 아릴 시클로프로필-아미노-이소퀴놀리닐 아미드 화합물
EP3609923A1 (en) 2017-04-13 2020-02-19 Siwa Corporation Humanized monoclonal advanced glycation end-product antibody
WO2018209320A1 (en) 2017-05-12 2018-11-15 President And Fellows Of Harvard College Aptazyme-embedded guide rnas for use with crispr-cas9 in genome editing and transcriptional activation
CN111148509A (zh) 2017-07-24 2020-05-12 诺瓦瓦克斯股份有限公司 治疗呼吸系统疾病的方法和组合物
EP3658573A1 (en) 2017-07-28 2020-06-03 President and Fellows of Harvard College Methods and compositions for evolving base editors using phage-assisted continuous evolution (pace)
WO2019139645A2 (en) 2017-08-30 2019-07-18 President And Fellows Of Harvard College High efficiency base editors comprising gam
JP2021500871A (ja) 2017-09-29 2021-01-14 ザ チルドレンズ メディカル センター コーポレーション ニューロトキシン様トキシンおよびそれらの使用
CN111757937A (zh) 2017-10-16 2020-10-09 布罗德研究所股份有限公司 腺苷碱基编辑器的用途
US11541120B2 (en) 2017-12-05 2023-01-03 Anthos Partners, Lp Phosphonium-based ionic drug conjugates
US11518801B1 (en) 2017-12-22 2022-12-06 Siwa Corporation Methods and compositions for treating diabetes and diabetic complications
US11254704B2 (en) 2018-01-05 2022-02-22 University Of South Florida Compounds and methods for reducing or inhibiting aggregation of proteins in a subject
US20220307001A1 (en) 2018-02-27 2022-09-29 President And Fellows Of Harvard College Evolved cas9 variants and uses thereof
US10507226B1 (en) 2018-05-02 2019-12-17 University Of South Florida N-amino peptide beta-sheet mimics for the treatment of Alzheimer's disease
KR20210023832A (ko) 2018-05-11 2021-03-04 빔 테라퓨틱스, 인크. 프로그래밍가능한 염기 편집기 시스템을 이용하여 단일염기다형성을 편집하는 방법
EP3797160A1 (en) 2018-05-23 2021-03-31 The Broad Institute Inc. Base editors and uses thereof
WO2020023532A1 (en) 2018-07-23 2020-01-30 Siwa Corporation Methods and compositions for treating chronic effects of radiation and chemical exposure
US20240173430A1 (en) 2018-09-05 2024-05-30 The Broad Institute, Inc. Base editing for treating hutchinson-gilford progeria syndrome
US11427563B2 (en) 2018-09-14 2022-08-30 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Aryl cyclopropyl-amino-isoquinolinyl amide compounds
WO2020092453A1 (en) 2018-10-29 2020-05-07 The Broad Institute, Inc. Nucleobase editors comprising geocas9 and uses thereof
US20220282275A1 (en) 2018-11-15 2022-09-08 The Broad Institute, Inc. G-to-t base editors and uses thereof
WO2020181202A1 (en) 2019-03-06 2020-09-10 The Broad Institute, Inc. A:t to t:a base editing through adenine deamination and oxidation
WO2020181180A1 (en) 2019-03-06 2020-09-10 The Broad Institute, Inc. A:t to c:g base editors and uses thereof
WO2020181195A1 (en) 2019-03-06 2020-09-10 The Broad Institute, Inc. T:a to a:t base editing through adenine excision
US20220170013A1 (en) 2019-03-06 2022-06-02 The Broad Institute, Inc. T:a to a:t base editing through adenosine methylation
WO2020181178A1 (en) 2019-03-06 2020-09-10 The Broad Institute, Inc. T:a to a:t base editing through thymine alkylation
BR112021018607A2 (pt) 2019-03-19 2021-11-23 Massachusetts Inst Technology Métodos e composições para editar sequências de nucleotídeos
WO2020210751A1 (en) 2019-04-12 2020-10-15 The Broad Institute, Inc. System for genome editing
US20220307003A1 (en) 2019-04-17 2022-09-29 The Broad Institute, Inc. Adenine base editors with reduced off-target effects
EP3973054A1 (en) 2019-05-20 2022-03-30 The Broad Institute Inc. Aav delivery of nucleobase editors
EP4010474A1 (en) 2019-08-08 2022-06-15 The Broad Institute, Inc. Base editors with diversified targeting scope
WO2021030666A1 (en) 2019-08-15 2021-02-18 The Broad Institute, Inc. Base editing by transglycosylation
CA3153563A1 (en) 2019-09-09 2021-03-18 Beam Therapeutics Inc. Novel crispr enzymes, methods, systems and uses thereof
WO2021072328A1 (en) 2019-10-10 2021-04-15 The Broad Institute, Inc. Methods and compositions for prime editing rna
US20230086199A1 (en) 2019-11-26 2023-03-23 The Broad Institute, Inc. Systems and methods for evaluating cas9-independent off-target editing of nucleic acids
CN114981426A (zh) 2019-12-03 2022-08-30 比姆医疗股份有限公司 合成向导rna、其组合物、方法和用途
CA3166153A1 (en) 2020-01-28 2021-08-05 The Broad Institute, Inc. Base editors, compositions, and methods for modifying the mitochondrial genome
US20230108687A1 (en) 2020-02-05 2023-04-06 The Broad Institute, Inc. Gene editing methods for treating spinal muscular atrophy
US20230235309A1 (en) 2020-02-05 2023-07-27 The Broad Institute, Inc. Adenine base editors and uses thereof
US20230159913A1 (en) 2020-04-28 2023-05-25 The Broad Institute, Inc. Targeted base editing of the ush2a gene
AU2021264007A1 (en) 2020-05-01 2022-12-08 Siwa Corporation Methods of treating infections
JP2023525304A (ja) 2020-05-08 2023-06-15 ザ ブロード インスティテュート，インコーポレーテッド 標的二本鎖ヌクレオチド配列の両鎖同時編集のための方法および組成物
WO2022093195A1 (en) 2020-10-27 2022-05-05 Siwa Corporation Methods and compositions for treating osteoarthritis using anti-age antibodies or age antigens
EP4237556A2 (en) 2020-10-28 2023-09-06 Children's Medical Center Corporation Truncated modified recombinant adamts13 and uses thereof
WO2022125776A2 (en) 2020-12-09 2022-06-16 Siwa Corporation Methods and compositions for treating kidney diseases
JP2024507533A (ja) 2021-02-19 2024-02-20 ビーム・セラピューティクス・インコーポレイテッド 遺伝子治療のための組み換え狂犬病ウイルス
EP4314265A2 (en) 2021-03-23 2024-02-07 Beam Therapeutics Inc. Novel crispr enzymes, methods, systems and uses thereof
AU2022256513A1 (en) 2021-04-16 2023-11-02 Beam Therapeutics Inc. Genetic modification of hepatocytes
WO2022256578A2 (en) 2021-06-02 2022-12-08 Beam Therapeutics Inc. Circular guide rnas for crispr/cas editing systems
US20240287487A1 (en) 2021-06-11 2024-08-29 The Broad Institute, Inc. Improved cytosine to guanine base editors
EP4373931A1 (en) 2021-07-23 2024-05-29 Beam Therapeutics Inc. Guide rnas for crispr/cas editing systems
WO2023023654A1 (en) 2021-08-20 2023-02-23 Siwa Corporation Methods and compositions for treating fibrotic diseases
CN118369429A (zh) 2021-09-08 2024-07-19 比姆医疗股份有限公司 病毒引导rna递送
WO2023076898A1 (en) 2021-10-25 2023-05-04 The Broad Institute, Inc. Methods and compositions for editing a genome with prime editing and a recombinase
KR20240110844A (ko) 2021-11-23 2024-07-16 셀렉티스 에스.에이. 개선된 온-타겟/오프-타겟 활성 비율을 갖는 신규 tale 단백질 스캐폴드
WO2023102538A1 (en) 2021-12-03 2023-06-08 The Broad Institute, Inc. Self-assembling virus-like particles for delivery of prime editors and methods of making and using same
EP4441073A2 (en) 2021-12-03 2024-10-09 The Broad Institute, Inc. Self-assembling virus-like particles for delivery of nucleic acid programmable fusion proteins and methods of making and using same
AU2022413670A1 (en) 2021-12-17 2024-07-04 Beam Therapeutics Inc. Crispr enzymes, methzods, systems and uses thereof
AU2023248451A1 (en) 2022-04-04 2024-10-17 President And Fellows Of Harvard College Cas9 variants having non-canonical pam specificities and uses thereof
WO2023196772A1 (en) 2022-04-04 2023-10-12 Beam Therapeutics Inc. Novel rna base editing compositions, systems, methods and uses thereof
WO2023205687A1 (en) 2022-04-20 2023-10-26 The Broad Institute, Inc. Improved prime editing methods and compositions
WO2023212715A1 (en) 2022-04-28 2023-11-02 The Broad Institute, Inc. Aav vectors encoding base editors and uses thereof
WO2023230613A1 (en) 2022-05-27 2023-11-30 The Broad Institute, Inc. Improved mitochondrial base editors and methods for editing mitochondrial dna
WO2023240137A1 (en) 2022-06-08 2023-12-14 The Board Institute, Inc. Evolved cas14a1 variants, compositions, and methods of making and using same in genome editing
WO2024040083A1 (en) 2022-08-16 2024-02-22 The Broad Institute, Inc. Evolved cytosine deaminases and methods of editing dna using same
WO2024059791A1 (en) 2022-09-16 2024-03-21 Beam Therapeutics Inc. Large serine recombinases, systems and uses thereof
WO2024077267A1 (en) 2022-10-07 2024-04-11 The Broad Institute, Inc. Prime editing methods and compositions for treating triplet repeat disorders
WO2024102157A1 (en) 2022-11-09 2024-05-16 Siwa Corporation Methods and compositions for treating diabetes and diabetic complications
WO2024138087A2 (en) 2022-12-23 2024-06-27 The Broad Institute, Inc. Methods and compositions for modulating cellular factors to increase prime editing efficiencies
WO2024155745A1 (en) 2023-01-18 2024-07-25 The Broad Institute, Inc. Base editing-mediated readthrough of premature termination codons (bert)
WO2024155741A1 (en) 2023-01-18 2024-07-25 The Broad Institute, Inc. Prime editing-mediated readthrough of premature termination codons (pert)
WO2024168147A2 (en) 2023-02-09 2024-08-15 The Broad Institute, Inc. Evolved recombinases for editing a genome in combination with prime editing
WO2024206125A1 (en) 2023-03-24 2024-10-03 The Broad Institute, Inc. Use of prime editing for treating sickle cell disease

Family Cites Families (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3957971A (en) * 1974-07-29 1976-05-18 Lever Brothers Company Moisturizing units and moisturizing compositions containing the same
FR2315991A1 (fr) * 1975-06-30 1977-01-28 Oreal Procede de fabrication de dispersions aqueuses de spherules lipidiques et nouvelles compositions correspondantes
FR2408387A2 (fr) * 1975-06-30 1979-06-08 Oreal Compositions a base de dispersions aqueuses de spherules lipidiques
GB1578776A (en) * 1976-06-10 1980-11-12 Univ Illinois Hemoglobin liposome and method of making the same
US4217344A (en) * 1976-06-23 1980-08-12 L'oreal Compositions containing aqueous dispersions of lipid spheres
US4356167A (en) * 1978-01-27 1982-10-26 Sandoz, Inc. Liposome drug delivery systems
FR2416008A1 (fr) * 1978-02-02 1979-08-31 Oreal Lyophilisats de liposomes
US4377567A (en) * 1978-10-02 1983-03-22 The Procter & Gamble Company Lipid membrane drug delivery
US4241046A (en) * 1978-11-30 1980-12-23 Papahadjopoulos Demetrios P Method of encapsulating biologically active materials in lipid vesicles
FR2465780A1 (fr) * 1979-09-18 1981-03-27 Oreal Nouveaux tensio-actifs non ioniques, leur procede de preparation et composition les contenant
DE3070993D1 (en) * 1979-12-20 1985-09-19 Dennis Chapman Polymerisable phospholipids and polymers thereof, methods for their preparation, methods for their use in coating substrates and forming liposomes and the resulting coated substrates and liposome compositions
EP0032578B1 (de) * 1980-01-16 1984-07-25 Hans Georg Prof. Dr. Weder Verfahren und Dialysiereinrichtung zur Herstellung von Bilayer-Vesikeln und Verwendung der Bilayer-Vesikel
FR2485921A1 (fr) * 1980-07-01 1982-01-08 Oreal Composition cosmetique a base d'une dispersion aqueuse de spherules lipidiques
EP0043327B1 (fr) * 1980-07-01 1984-01-18 L'oreal Procédé d'obtention de dispersions stables dans une phase aqueuse d'au moins une phase liquide non miscible à l'eau et dispersions correspondantes
US4564599A (en) * 1982-08-23 1986-01-14 The Liposome Company, Inc. Liposome composition for lupus assay
JPS5916534A (ja) * 1982-07-19 1984-01-27 Lion Corp 非イオン性界面活性剤系ベシクル分散液
US4551288A (en) * 1982-08-16 1985-11-05 Sandoz, Inc. Processes for the preparation of liposome drug delivery systems
US4485054A (en) * 1982-10-04 1984-11-27 Lipoderm Pharmaceuticals Limited Method of encapsulating biologically active materials in multilamellar lipid vesicles (MLV)
JPS59106423A (ja) * 1982-12-08 1984-06-20 Hiroshi Kiwada リポソ−ム
FR2543018B1 (fr) * 1983-03-22 1985-07-26 Oreal Procede de preparation de vesicules lipidiques par vaporisation de solvants
JPS6072831A (ja) * 1983-09-29 1985-04-24 Kao Corp ベシクル用組成物
JPS6072830A (ja) * 1983-09-29 1985-04-24 Kao Corp ベシクル用組成物
FR2553002B1 (fr) * 1983-10-06 1992-03-27 Centre Nat Rech Scient Procede perfectionne d'obtention de liposomes unilamellaires de diametres eleves, leur application pharmacologique pour l'encapsulage d'un principe actif en vue de son administration extemporanee et dispositif correspondant
US4692433A (en) * 1983-10-12 1987-09-08 The Regents Of The University Of California Method and composition for regulating serum calcium levels of mammals
US4695554A (en) * 1984-02-14 1987-09-22 Becton Dickinson And Company Sac or liposome containing dye (sulforhodamine) for immunoassay
US4610868A (en) * 1984-03-20 1986-09-09 The Liposome Company, Inc. Lipid matrix carriers for use in drug delivery systems
US4619913A (en) * 1984-05-29 1986-10-28 Matrix Pharmaceuticals, Inc. Treatments employing drug-containing matrices for introduction into cellular lesion areas
FR2571963B1 (fr) * 1984-10-24 1987-07-10 Oreal Composition a usage cosmetique ou pharmaceutique contenant des niosomes et au moins un polyamide hydrosoluble et procede de preparation de cette composition.
JPS61207324A (ja) * 1985-03-11 1986-09-13 Agency Of Ind Science & Technol リポソ−ム

Also Published As

Publication number Publication date
NO885032D0 (no) 1988-11-11
KR960009647B1 (en) 1996-07-23
DE3867637D1 (de) 1992-02-20
NO885032L (no) 1988-11-11
JP2589173B2 (ja) 1997-03-12
CA1289419C (en) 1991-09-24
NZ223843A (en) 1990-04-26
BR8807410A (pt) 1990-04-10
JPH02502094A (ja) 1990-07-12
AU1541688A (en) 1988-10-10
US4911928A (en) 1990-03-27
WO1988006883A1 (en) 1988-09-22
EP0352282A1 (en) 1990-01-31
DK633388A (da) 1988-11-11
ATE71289T1 (de) 1992-01-15
AU605581B2 (en) 1991-01-17
DK633388D0 (da) 1988-11-11
KR890700339A (ko) 1989-04-24
EP0352282B1 (en) 1992-01-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HUT53279A (en) Process for producing few-lamellar lipid vesicles
US5474848A (en) Paucilamellar lipid vesicles
US5147723A (en) Paucilamellar lipid vesicles
US5234767A (en) Hybrid paucilamellar lipid vesicles
US4917951A (en) Lipid vesicles formed of surfactants and steroids
JP2756526B2 (ja) リポソーム懸濁液の安定化法及びリポソーム懸濁液
US4855090A (en) Method of producing high aqueous volume multilamellar vesicles
JP2617346B2 (ja) 表面活性剤とステロイドから形成される脂質小胞
JP3825468B2 (ja) ジアシルグリセロール、リン脂質、極性液体および生物活性物質を含有する脂質をベースとした組成物
AU633631B2 (en) Paucilamellar lipid vesicles using charge-localized, single chain, nonphospholipid surfactants
US5188837A (en) Lipsopheres for controlled delivery of substances
KR100203223B1 (ko) 이종소포 리포좀 및 이를 제조하는 방법
US20040099976A1 (en) Process for producing liposome and apparatus therefor
GB2134869A (en) Method of preparing liposomes and products produced thereby
JPH02167218A (ja) リポソーム調製用脂質粉末の製造法及びリポソームの製造法
US5023086A (en) Encapsulated ionophore growth factors
WO1991004013A1 (en) Hybrid paucilamellar lipid vesicles
JPH02103A (ja) 新規リポソーム及びその製造方法
JPS63119847A (ja) リポソ−ムの製造方法
JPS62201815A (ja) リポソ−ム製剤
NZ247547A (en) Process for preparing heterovesicular lipid vesicles or liposomes; vesicles containing a chloride and an active agent

Legal Events

Date Code Title Description
DFC9 Refusal of application