JPH02167218A

JPH02167218A - リポソーム調製用脂質粉末の製造法及びリポソームの製造法

Info

Publication number: JPH02167218A
Application number: JP1222291A
Authority: JP
Inventors: Yukihiro Nanba; 難波　幸弘; Toshiya Ueno; 敏哉上野; Toshiyuki Sakakibara; 榊原　敏之
Original assignee: Nippon Fine Chemical Co Ltd
Current assignee: Nippon Fine Chemical Co Ltd
Priority date: 1988-08-29
Filing date: 1989-08-29
Publication date: 1990-06-27
Anticipated expiration: 2009-09-21
Also published as: EP0357005B1; JPH0674205B2; EP0357005A1; DE68905113T2; US5096629A; DE68905113D1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】産業上の利用分野本発明は、リポソーム調製用脂質粉末の製造法及びリポ
ソームの製造法に関する。

従来の技術とその問題点主として脂質２重膜からなる閉鎖小胞であるリポソーム
は、その内水層や脂質膜間に各種物質を保持させること
ができる。そのため、医療分野において、生理活性物質
等の脂溶性及び／又は両親媒性物質を保持させたリポソ
ームを物質運搬システムとして利用する研究が進められ
ている。例えば、制癌剤を保持させたリポソームにガン
表面特異抗体を結合させたリポソーム製剤を用いる、ガ
ン部位を選択的に攻撃するミサイル療法が開発されてい
る。

脂溶性及び、／又は両親媒性物質例えば生理活性物質を
保持させたリポソームは、通常、リン脂質、コレステロ
ール、酸性リン脂質等のリボソー１１膜形成能を有する
脂質を有機溶媒に溶解し、この脂質溶液からある程度溶
媒を留去して得られる脂質混合物に、生理活性物質の水
溶液を加えて激しく攪拌することにより製造されている
。この方法では、脂質混合物は密な固体となり、生理活
性物質の水溶液を加えて攪拌しても充分に水和しない。

脂質混合物中の脂質濃度が高くなる程、水和は困難にな
る。そのため、生成するリポソームの脂質膜間の間隔が
非常に密になって生理活性物質の内封効率が低下したり
、リポソームの内封容積が小さくなったり、脂質のロス
が多くなったり（使用した全脂質量に占める、リポソー
ムを形成した脂質量の割合が低下したり）、脂質膜に欠
陥が発生してその安定性が悪くなり、保持させた物質が
漏れ出すというような問題点が生じる。ここで内封効率
とは、リポソームに保持された物質量／全使用物質ｍ　
（Ｖ／Ｖ）を意味する。内封容積とは、１モル量の脂質
で形成されるリポソームの内水層の容量の総計を意味す
る。

更に上記方法でリポソームを工業的に大量に製造すると
、上述の問題点が一層顕著になるとともに、溶媒留去の
条件設定が困難となったり、強力な攪拌を行なうために
特殊な装置が必要となって、コストアップを招き、リポ
ソーム製剤の実用化の大きな障害となっている。

上述の問題点を解消するため、種々の方法が提案されて
いる。例えば、特開昭６０−７９３２号によれば、リポ
ソーム調製操作を従来よりも高温下に行なっている。し
かし、この方法では、熱に不安定な生理活性物質をリポ
ソームに保持させることはできない。特開昭６０−７９
３３号では、リポソーム膜形成能を有する脂質とともに
ポリオールを用いてリポソームを調製している。しかし
ながら、ポリオールを用いると、リポソームの脂質膜の
重要成分であるコレステロールを均一に分散させ難くな
り、その結果リポソーム膜が不安定になって、保持させ
た生理活性物質が漏れ出すので好ましくない。特開昭６
２−１５２５３１号には、リポソーム膜形成能を有する
脂質の溶液をスプレードラ、イヤーによって噴霧乾燥し
て粉末とし、この粉末を生理活性物質の水溶液と混合し
てリポソームを得る方法が開示されている。ところが、
この粉末は凝集し易く、水和し難いという欠点を有して
いる。従って、この粉末を水に溶解して得られるリポソ
ームの生理活性物質保持能は低い。

加えて、脂質ロスも多くなる。さらに特公昭６２−５２
７２４号には、リポソーム膜形成能を有する脂質と生理
活性物質を含む溶液を凍結乾燥して粉末化し、この粉末
を水に溶解して生理活性物質を保持したリポソームを得
る方法が開示されている。しかしながら、この方法では
、凍結乾燥法を採用するため、設備が高価であり、しか
も溶媒除去に時間がかかるため、製造コストが著しく高
くなる。

上記以外に、リポソーム膜形成能を有する脂質の溶液に
薬物水溶液を加え、超、音波乳化してリポソームを形成
した後、溶媒を留去する方法（逆相蒸発法）も知られて
いる。この方法によれば、溶媒を完全に留去するのが困
難であり、残存した溶媒が、リポソームを医薬などに用
いる時に毒性を発したり或いはリポソーム膜の形成を阻
害する恐れがある。しかも、脂質のロスも多く、工業的
には好ましくない。

問題点を解決するための手段本発明者は、上記従来技術の問題点に鑑みて鋭意研究を
重ねた結果、工業的に有用な、リポソーム調製用の脂質
粉末の製造法を見出し、本発明を完成した。

すなわち本発明は、下記リポソーム調製用粉末の製造法
及びリポソームの調製法を提供するものである。

■リポソーム膜形成能を有する脂質の有機溶媒溶液を外
部から加熱された管状加熱器に一定速度で供給し、該加
熱器内で肴機溶媒を蒸発させて実質的に固形分と有機溶
媒の蒸気との混合物とし、この混合物を高速で３００ｍ
ｍＨｇ以下の真空室に導入し、瞬間的に有機溶媒を揮散
させて固形分を乾燥することを特徴とするリポソーム調
製用脂質粉末の製造法。

■上記（１）の製造法によって得られるリポソーム調製
用脂質粉末を、水性溶媒に分散させることを特徴とする
リポソームの調製法。

本発明者の研究によれば、リポソーム膜形成能を有する
脂質の有機溶媒溶液を、外部から加熱された管状加熱器
に一定速度で供給して、該加熱器内で有機溶媒を蒸発さ
せて実質的に固形分と有機溶媒の蒸気との混合物とし、
この混合物を高速で３００ｍｍＨｇ以下の真空室に導入
し、瞬間的に有機溶媒を揮散させて固形分を真空乾燥し
て得られる脂質粉末は水和性に優れ、工業的規模の量で
も短時間で容易に水和させることができ、加えて該粉末
を水和させて得られるリポソームは、生理活性物質等の
脂溶性及び／又は両親媒性物質の内封効率が高く、内封
容積が大きく、且っ腸溶外及び、／又は両親媒性物質の
漏れ出しも極めて少ないため、該粉末を用いれば、原料
として使用する脂質を実質的にロスすることなく、高水
準の品質を有するリポソームを工業的規模で大量に製造
することができることを見出した。

上記（１）の本発明方法は、例えば、第１図に示すフロ
ーシートに従って実施できる。

まず、リポソーム膜形成能を有する脂質の有機溶媒溶液
を調製する。例えば、原液タンク（１）に該脂質及び有
機溶媒を投入し、該脂質を有機溶媒に溶解すればよい。

溶解時に、必要に応じて加熱してもよい。

リポソーム膜形成能を有する脂質としては、従来からリ
ポソームの調製に用いられているものをいずれも使用で
きる。その具体例としては、例えば、リン脂質、糖脂質
、コレステロール及びその誘導体等を挙げることができ
る。リン脂質の具体例としては、糾えば、大豆レシチン
、卵黄レシチン等の天然リン脂質、ジミリ入トイルホス
ファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリ
ン、ジステアロイルホスファチジルコリン、ジオレイル
ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミ
ン、ホスファチジルグリセロール、スフィンゴミエリン
、ホスファチジルイノシトール等の合成リン脂質、水素
添加レシチン等の天然リン脂質に水素添加を行な−）た
もの等を挙げることができる。また糖脂質としては、例
えば、パルミチルグリコシド、ステアリルグルコシド、
ミリスチルグルコシド、コレステリルマルトシド、コレ
ステリルグルコシド、ガングリオシドＧＭＧＭ２、ＧＴ
３、スルファチド等を挙げることができる。コレステロ
ールの誘導体としては、例えば、コレステロール、コレ
ステロールアセテート、ジヒドロコレステロールフィト
ステロール、シトステロール、スチグマステロール、カ
ンペステロール等を挙げることができる。

上記脂質の中でも、ジパルミトイルホスファチジルコリ
ン、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール、水添
卵黄レシチン、水添大豆レシチン、コレステロール、フ
ィトステロール、シトステロール等が好ましい。

上記の脂質は単独で或いは２種以上を併用して使用でき
るが、２種以上を併用するのが普通である。併用の際の
組み合わせは特に制限されないが、例えば、モル比で、
ジパルミトイルホスファチジルニリン／ジパルミトイル
ホスファチジルグリセロール／コレステロール＝１１０
．００１〜０゜５１０．０１〜１、水添卵黄レシチン／
コレステロール＝］、１０．０１〜１、水添大豆レシチ
ン／コレステロール＝１１０．０１〜１１卵黄ホスファ
チジルコリン／卵黄ホスファチシリグリセロール／コレ
ステロール＝１１０．００１〜０．５１０．０１〜１、
シミリストイルホスファチジルコリン／シミリストイル
ホスファチジン酸／コレステロール＝１１０．０１〜０
．５１０．０１〜■等が好ましい。

上記脂質と共に荷電を有する物質を用いることにより、
リポソーム同士の融合及び内封物の漏れ出しが一層防止
される。該物質としては、例えば、ホスファチジン酸、
ホスファチジルセリン、ホスファチジルグリセロール、
カルジオピリン等の荷電を有するリン脂質、ミリスチン
酸、パルミチン酸、ステアリン酸等の脂肪酸及びそのナ
トリウム、カリウム塩類等をあげることができる。

有機溶媒としては、脂質を溶解し得るものであれば特に
制限されない。具体的には、例えば、ペンタン、ヘキサ
ン、ヘプタン、シクロヘキサン等の炭化水素類、塩化メ
チレン、クロロホルム等のハロゲン化炭化水素類、ベン
ゼン、トルエン等の芳香族炭化水素類、メタノール、エ
タノール等の低級アルコール類、酢酸メチル、酢酸エチ
ル等のエステル類等を挙げることができる。有機溶媒は
単独で或いは２種以上を併用して使用できる。有機溶媒
の使用量は特に制限されず、脂質の有機溶媒への溶解度
に応じて広い範囲から適宜選択すればよいが、工業的規
模への適用性等を考慮すると、通常使用する脂質量の１
〜１００重量倍程度、好ましくは５〜５０重量倍程度と
するのがよい。

次いで、原液タンク（１）中の脂質溶液は、必要に応じ
予熱器（図示せず）で予熱された後、加熱管（２）に一
定速度で供給される。供給方法は特に制限されないが、
例えば、ポンプ等を使用して一定速度で供給すればよい
。供給速度は、後記する過熱された蒸気と固形分の混合
物の流速や加熱管（２）の径に応じて広い範囲から適宜
選択できるが、通常１〜１００　ｌ／　ｈ程度、好まし
くは５〜５０７／ｈ程度とすればよい。加熱管（２）は
、図示しないが、例えばスチームによる加熱、温水加熱
、電熱加熱等により外部から加熱できるようにされてい
る。加熱温度は、使用する有機溶媒の沸点よりも高い温
度であれば特に制限されないが、通常該有機溶媒の沸点
よりも５〜１００°Ｃ程度、好ましくは５〜５０℃程度
高くすればよい。

加熱により、加熱管（２）内に供給される脂質溶液中の
有機溶媒は過熱されて蒸発し、従って該脂質溶液は過熱
された蒸気と脂質（以下「固形分」という）とのｌ昆合
物になる。この時固形分には、有機溶媒が僅かに残存し
ている。

次いで、過熱された蒸気と固形分の混合物は、加熱管（
２）の出口から減圧状態の真空室（３）へ導入される。

導入により、固形分中に残存している僅かな有機溶媒も
瞬間的に蒸発し、固形分中には、有機溶媒が実質的に残
存しなくなる。

真空室（３）の真空度は、通常３００ｍｍｌＴｇ以下程
度、好ましくは５〜３００ｍｍＨｇ程度、より好ましく
は５〜１００ｍｍＨｇ程度とするのがよい。これにより
、過熱された蒸気と固形分との混合物は、通常音速の１
／１０以上程度、好ましくは１００ｍ／ｓｅｅ以上、よ
り好ましくは音速以上程度の速度で真空室（３）内へ導
入される。

真空度が３００ｍｍＨｇより低くなると、加熱管（２）
内部が詰まったり、得られる粉末中の有機溶媒の残存量
が多くなるか或いは粉末の粒径が大きくなって、その水
和性が低下したり、原料ロスが多くなったりする。真空
室（３）を真空状態とするための真空ポンプ（７）は、
例えば、凝縮器（４）を介して真空室（３）に接続すれ
ばよい。

上記のようにして瞬間真空乾燥された固形分は、例えば
真空室（３）下部の容器（６）に回収される。このよう
にして、本発明リポソーム調製用脂質粉末を得ることが
できる。該粉末の粒径は、通常１００〜２０００μｍ程
度である。得られる扮末を、粉砕機にかけてさらに粒度
の小さいものにしてもよい。一方、揮散した有機溶媒の
蒸気は凝縮器（４）中で液化されて回収タンク（５）に
貯蔵され、回収される。

本発明では、第１図に示すような、脂質溶液を瞬間真空
乾燥させる装置として、例えば「フラックス」なる商標
名で市販されている瞬間真空乾燥システム〔オリエント
化学工業■製〕を使用できる。この装置によれば、成分
が加熱される時間が３０秒〜２分程度と非常に短いため
、熱に不安定な脂質を用いても差支えない。

本発明のリポソーム調製用脂質粉末を水性溶媒と混合す
ることにより、容易にリポソームを製造できる。リポソ
ーム調製用粉末とともに所望の脂溶性及び／又は両親媒
性物質を水性溶媒と混合すれば、生理活性物質が保持さ
れたリポソームを製造できる。脂質粉末と混合する水性
溶媒としては特に制限されないが、例えば、塩化ナトリ
ウム、塩化カリウム等の無機塩の水溶液、グルコース、
マルトース、シュークロース、トレハロース等の糖の水
溶液、蒸留水等を挙げることができる。脂溶性及び／又
は両親媒性物質としては特に制限されず、公知のものが
使用でき、例えば、薬物、タンパク質、酵素、ホルモン
、ビタミン、エキス、動植物抽出物等の生理活性物質、
放射性物質、蛍光物質、標識化合物、色素等の標記化合
物等を挙げることができる。脂質粉末の使用量は特に制
限されないが、通常該粉末と水性溶媒の合計量の０゜１
〜３０重量％程度、好ましくは０．１〜１０重量％程度
とすればよい。混合には通常の攪拌機が使用できる。混
合の際必要に応じて、グルコース、ＮａＣ１等の公知の
浸透圧調節剤を添加してもよい。

引き続く本発明者の研究によれば、上記（１）の方法に
従って本発明の粉末を製造する際、リポソーム膜形成能
を有する脂質の有機溶媒溶液に脂溶性及び／又は両親媒
性物質を加えて溶解させ、真空乾燥して粉末化し、得ら
れる粉末を水性溶媒に溶解させると、脂溶性及び／又は
両親媒性物質がリポソーム内に極めて高い効率で保持さ
れることが判明した。ここで使用し得る脂溶性及び両親
媒性物質は、上記と同様のものが使用できる。上記有機
溶媒溶液に加える脂溶性及び両親媒性物質の量は特に制
限されず広い範囲から適宜選択すればよい。

発明の効果本発明方法により得られる脂質粉末は水和性に優れ、工
業的規模の量でも短時間で容易に水和させることができ
、加えて該粉末を水和させて得られるリポソームは、脂
溶性及び／又は両親媒性物質の内封効率が高く、内封容
積が大きく、且つ内封した物質の漏れ出しも極めて少な
いため、該粉末を用いれば、原料として使用する脂質を
実質的にロスすることなく、高水準の品質を有するリポ
ソームを工業的規模で大量に製造することができる。ま
た本発明方法により脂質と脂溶性及び／又は両親媒性物
質を同時に真空乾燥して粉末化し、得られる粉末を水性
溶媒に溶解させると、該物質がリポソーム内に極めて高
い割合で保持される。

実施例以下に実施例及び比較例を挙げ、本発明をより一層明瞭
なものとする。

実施例１第１図に示す瞬間真空乾燥装置として、「ＣＲＵＸ　　
ｇＢ型」なる商品名で市販されている装置〔オリエント
化学工業■製、以下「クラックスジステム」という〕を
用い、本発明のリポソーム調製用粉末を製造した。

完全水添精製卵黄レシチン６００　ｇ、コレステロール
３００ｇ及び完全水添卵黄ホスファチジルグリセロール
９０ｇをクロロホルム１０１に溶解した。この脂質溶液
を、クラックスジステムの原液タンク（１）に投入し、
送液４５１：１２１／ｈで加熱管（２）へ供給した。こ
の時、加熱管（２）の外部に設けられた熱交換器の温度
７０℃、及び加熱管（２）出口に接続された真空室（３
）の真空度を６０〜７０ｍｍＨｇに設定した。加熱管（
２）内で形成されたクロロホルム蒸気と脂質との混合物
は、音速の１／１０以上の速度で真空室（３）へ流出し
た。脂質溶液を加熱管（２）へ供給し始めてから４０分
後、白色微粉末９５０ｇを得た（原料回収率９５％）。

得られた粉末の一部を、０．ｌｍｍＨｇ以下の高真空下
に室温下６時間乾燥して乾燥減量を測定したところ、０
．１％以下であった。フラックスによる瞬間真空乾燥で
、有機溶媒が殆ど留去されていることがわかった。

上記白色微粉末のリポソーム形成能を調べるために以下
の方法でリポソームを作成した。

該粉末１ｇを適当な大きさのマヨネーズ瓶に入れ、この
中へ０．１５Ｍ　ＮａＣ１水溶液９５１１及び２００　
　ｍＭカルボキシフルオレッセン（以下ＣＦという）水
溶液２１／を加えて脂質濃度を１６５ｍＭとし、ホモジ
ナイザーにて２０分間攪拌しく攪拌速度１１００００ｒ
ｐ、温度４５°Ｃ）、均一なリポソーム懸濁液を得た。

セファデックスＧ−５０カラム、０．１５ＭＮａＣｌ水
溶液を用いてリポソームとリポソームに内封されなかっ
たＣＦとを分離し、得られたリポソームの内封効率及び
内封容積を求めた。内封効率は５５％、内封容積は３．
５１７モルであった。

単離したリポソームの安定性を調べるために、リポソー
ムの一部を０．１５Ｍ　　ＮａＣｌ水溶液中にて３７℃
でインキュベーションし、インキュベーション液の上澄
みの蛍光強度を測定することにより、内封したＣＦの漏
出を経時的に追跡した。

漏出率（％）は次式により算出した。

上記計算式中、全蛍光強度は、インキュベーションした
サンプルに１０％トライトンｘ−ｉｏ。

ＣＰＩＥＲＣＥ社製〕を加えてリポソームを完全に破壊
した時の蛍光強度であり、その値は８．０であった。結
果を下記第１表に示す。

比較例１実施例１の１／１００量の各成分を、１００ｚ／のクロ
ロホルムに溶解した。ロータリーエバポレーターにてク
ロロホルムを留去し、高真空下（１ｍｒｎＨｇ）３時間
放置し、クロロホルムを十分に留去した。回収率は１０
０％であった。

得られた残渣を実施例１と同様に処理して求めた乾燥減
量は３％であった。この残渣を適当な大きさのマヨネー
ズ瓶に入れ、この中へ０．１５ＭＮ　ａ　ＣＡ’水溶液
　９５１Ａ’及び２００ｍＭ　　ＣＦ水溶ｉｒｌ　５　
ｔｌを加え、ホモジナイザーにて２０分間攪拌した（攪
拌速度１１００００ｒｐ、温度４５℃）。２０分間の攪
拌ではまだ固体状のものが存在しており、更に１５分間
の攪拌後均−なリポソーム懸濁液を得た。

得られたリポソームの内封効率は１８％、内封容積は１
．３／１モルであった。実施例１と同様にしてリポソー
ムの漏出率（％）を算出し′た。結果を第１表に示す。

されたリポソームは、従来法で得られたリポソームに比
し、内封効率に優れ、内封容積も多く、安定性の面にお
いてもはるかに優れている。また、実施例１と比較例１
における原料の量的な関係から、本発明方法がリポソー
ムの大屋生産に適していることも判る。

比較例２実施例１の１／１００量の各成分をクロロホルムＬｏｏ
１／に溶解し、得られた溶液をスプレードライヤー〔商
品名：　ＥＹＥＬＡ　　卓上型スプレードライヤー５Ｄ
−１、東京理化機械■製〕を用い、空気圧カニ　１．　
　ＯＫｇ／ｃｎＩ２、送液速度：約９ｇ／ｍｉｎ　、チ
ェンバー人口温度＝６５℃、出口温度：５０℃の条件下
に噴霧乾燥し、白色粉末５．９ｇを得た（回収率は６０
％）。この粉末の乾燥減量は１．３％であった。

リポソーム化能を調べるため、この粉末１ｇに０．１５
Ｍ　　ＮａＣ／水溶液９７Ａ’及び２００ｍＭＣＦ水溶
液２　ｘｔｌを加えて脂質濃度を１６５ｍＭとし、実施
例１と同様にしてリポソーム懸濁液を得た。得られたリ
ポソームの内封効率は２０％、内封容積は０．６１１モ
ル、４８時間後の漏出率は３％であった。

実施例２シミリストイルホスファチジルコリン６００ｇ。

コレステロール２００ｇ及びシミリストイルホスファチ
ジルグリセロール６０ｇをベンゼン９１に溶解した。以
下、熱交換器温度を８０℃に変更する以外は実施例１と
同様にして処理しくこの時、ベンゼン蒸気と脂質混合物
の加熱管から真空室への流出速度は、音速の１／１０以
上であった）、白色粉末８１０．１ｇを得た（回収率９
４．２％、乾燥減量０．　１％以下）。

得られた粉末のリポソーム形成能を調べた。この粉末を
実施例１と同様にして処理し、リポソーム懸濁液を得た
。得られたリポソームの内封率は３３％、内封容積は２
．１１１モルであった。このリポソームにつき、実施例
１と同様にして漏出率（％）を算出した。結果を第２表
に示す。

比較例３実施例２の１／１００量の各成分をベンゼン８ＣＪＩｌ
に溶解した。この溶液を、スプレードライヤー〔商品名
：　ＥＹＥＬＡ　　卓上型スプレードライヤー５Ｄ−１
、東京理化機械■製〕で噴霧乾燥しく空気圧カニ　１．
　０ｋｇ７０ｍ２、送液速度：約８ｇ／ｍｉｎ、チェン
バー人口温度：約７５℃、出口温度二６０℃）、白色粉
末５．１ｇを得た。一部は凝集し粒状となっていた。回
収率は６５％、乾燥減量は１，５％であった。

得られた粉末のリポソーム化能を調べた。この粉末１ｇ
に、０．１５Ｍ　　ＮａＣ１水溶液９５１／及び２００
ｍＭ　　ＣＦ水溶液５　ｚｌを加え、ホモジナイザーに
て１７分間攪拌しく１１００００ｒｐ。

４５°Ｃ）、リポソーム懸濁液を得た。得られたリポソ
ームの内封率は２２％、内封容積は１．５Ａ’１モルで
あった。このリポソームにつき、実施例１と同様にして
安定性を測定した。結果を第２表に示す。

第２表第２表から明らかなように、本発明方法で製造されたリ
ポソームは、従来法で得られたリポソー卆に比し、内封
効率に優れ、内封容積も多く、安定性の面においてもは
るかに優れている。

実施例３リポソーム形成用脂質として、シミリストイルホスファ
チジルコリン５２２ｇ　（７５０ミリモル）、コレステ
ロール２．９ｇ　（７５０ミリモル）、シミリストイル
ホスファチジルグリセロール５３ｇ（７５ミリモル）を
用いる以外は、実施例２と同様に処理して（この時、ベ
ンゼン蒸気と脂質混合物の加熱管から真空室への流出速
度は、音速の１／１０以上であった）、白色粉末を得た
。　この粉末３ｇに、Ｑ、３Ｍグルコース水溶液９７Ａ
’及び２００ｍＭ　　ＣＦ水溶液１．１ｘｉを加えて脂
質濃度を４９５ｍＭとし、実施ＶＡＩ　２と同様に処理
してリポソーム液を得た。得られたリポソームの内封効
率は５５％、内封容積は１．１１１モルであった。

比較例４比較例３と同様にして得られたリポソーム調製用粉末３
ｇに、０．３Ｍグルコース水溶液１９ｚＡ’及び２００
ｍＭ　　ＣＦ水溶液１　ｘｉを加えて脂質濃度を４９５
ｍＭとし、実施例１と同様に処理してリポソーム懸濁液
を得た。得られたリポソームの内封効率は３６％、内封
容積は０．７８１１モルであ、った。

実施例４完全水添大豆レシチン６００　ｇ、コレステロール３０
０ｇ及びビタミンＥアセテート（酢酸トコフェロール）
３００ｇをクロロホルム１０／に溶解した。これを、実
施例１と同様にして真空乾燥した。得られた粉末１ｇを
適当な大きさのマヨネーズ瓶に入れ、この中に０．１５
Ｍ　　ＮａＣ１水溶液９１１！を加え、ホモジナイザー
にて２０分間撹拌しく撹拌速度１１００００ｒｐ、４５
℃）、均一なリポソーム懸濁液を得た。

これを、遠心分離機にてリポソームとリポソーム以外の
層に分離しく１５０００ｒｐｍｘ６０分）リポソーム以
外の層に遊離したビタミンアセテートＥが存在しないこ
とを確認した。リポソーム中に加えた全量のビタミンＥ
アセテートが存在していた。

以上の結果から、本発明のリポソーム調製用粉末によっ
て作られたリポソームは、内封率、内封容積及び安定性
（漏出率）のいずれにおいても、従来技術で作られたリ
ポソームよりもはるかに優れていることが判る。また、
高脂質濃度においても、本発明リポソーム調製用粉末の
リポソーム形成能がほとんど低下しないことが判る。よ
って本発明によれば、リポソームを容易に大量生産でき
ることが判る。

【図面の簡単な説明】

第１図は、本発明方法の一例を示すフローシートである
。（１）・・・原液タンク　　（２）・・・加熱管（３）
・・・真空室　　　　（４）・・・凝集器（５）・・・
溶剤回収タンク（６）・・・粉体回収容器　（７）・・・真空ポンプ第
１図〒二ｆ６手続打１ｊ正書（自発）平成１年１０月２５日事件の表示平成１年特許廓第２２２２９１、発明の名称リポソーム調製用脂質粉末の製造法及び日本精化株式会
社

Claims

【特許請求の範囲】

（１）リポソーム膜形成能を有する脂質の有機溶媒溶液
を管状加熱器内に一定速度で供給し、該加熱器内で加熱
して有機溶媒を蒸発させて実質的に固形分と有機溶媒の
蒸気との混合物とし、この混合物を高速で３００ｍｍＨ
ｇ以下の真空室に導入し、瞬間的に有機溶媒を揮散させ
て固形分を乾燥することを特徴とするリポソーム調製用
粉末の製造法。
（２）リポソーム膜形成能を有する脂質の有機溶媒溶液
に脂溶性及び／又は両親媒性物質を加える請求項（１）
の方法。
（３）請求項（１）の製造法によって得られるリポソー
ム調製用粉末を、水性溶媒に分散させることを特徴とす
るリポソームの製造法。