FI94911C - Menetelmä immunologisesti aktiivisen aineen määrittämiseksi ja menetelmässä käyttökelpoinen reagenssi - Google Patents
Menetelmä immunologisesti aktiivisen aineen määrittämiseksi ja menetelmässä käyttökelpoinen reagenssi Download PDFInfo
- Publication number
- FI94911C FI94911C FI911750A FI911750A FI94911C FI 94911 C FI94911 C FI 94911C FI 911750 A FI911750 A FI 911750A FI 911750 A FI911750 A FI 911750A FI 94911 C FI94911 C FI 94911C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- antigen
- antibody
- reagent
- reaction
- groups
- Prior art date
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/5306—Improving reaction conditions, e.g. reduction of non-specific binding, promotion of specific binding
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/531—Production of immunochemical test materials
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54393—Improving reaction conditions or stability, e.g. by coating or irradiation of surface, by reduction of non-specific binding, by promotion of specific binding
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/962—Prevention or removal of interfering materials or reactants or other treatment to enhance results, e.g. determining or preventing nonspecific binding
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/826—Additives, e.g. buffers, diluents, preservatives
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Compositions Of Macromolecular Compounds (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Description
94911
Menetelmä immunologisesti aktiivisen aineen määrittämiseksi ja menetelmässä käyttökelpoinen reagenssi
Tekninen tausta 5 Tämä keksintö koskee immunologisesti aktiivisen aineen määritysmenetelmää, jossa käytetään kliinisissä testeissä laajalti käytössä olevaa antigeeni-vasta-aine-reaktiota, ja tässä menetelmässä käyttökelpoista reagens-sia. Erityisemmin tämä keksintö koskee immunologisesti 10 aktiivisen aineen määritysmenetelmää, joka käsittää spesifisen polyeetteriyhdisteen lisäämisen nesteeseen, jossa tällainen antigeeni-vasta-aine-reaktio toteutetaan, ja reagenssia, joka muodostuu spesifisestä polyeetteriyhdis-teestä, joka pystyy edistämään menetelmän mukaista anti-15 geeni-vasta-aine-reaktiota.
Taustatietoa alalta
Viime vuosina on laajalti toteutettu tekniikkaa, jonka mukaan spesifinen immunologisesti aktiivinen aine, kuten tietty proteiini tms., joka esiintyy elävän ruumiin 20 nesteessä tautitilojen yhteydessä, määritetään käyttämäl lä antigeeni-vasta-aine-reaktiota, ja saatua tulosta käytetään diagnoosia varten. Biokemiallisia määrityksiä varten on kehitetty lukuisia, tällaisia antigeeni-vasta-ai-ne-reaktioita käyttäviä menetelmiä. Valaisevia esimerk-25 kejä menetelmistä ovat RlA (radioimmunoanalyysi, radioim munoassay), EIA (entsyymi-immunoanalyysi, enzyme immunoassay), ELISA (enzyme-labelled immunosolvent assay), va-lonsirontafotometria ja nefelometria. Näistä Rl A, EIA ja ELISA edellyttävät jokaisessa tapauksessa reaktiotuotteen 30 eristämisen tutkittavan nesteen reaktion jälkeen. Vastaavasti nämä menetelmät yleensä vaativat paljon aikaa ja työtä määritystä varten, mutta niitä käytetään nykyisin paljon siitä syystä, että nämä menetelmät ovat erinomaisia kvantitatiivisilta määritystuloksiltaan.
2 94911
Aivan viime aikoina ovat fotometriset määritysmenetelmät, kuten valonsirontafotometria, nefelometrinen menetelmä ynnä muut menetelmät, joilla pystytään mittaamaan immuunireaktion seurauksena tapahtuneita optisia 5 muutoksia testiliuoksessa (antigeeni-vasta-aine-reaktio), herättäneet yleistä huomiota immunologisesti aktiivisten aineiden määritysmenetelminä. Nämä menetelmät perustuvat siihen periaatteeseen, että koska nesteen sameuden muutos tapahtuu enemmän tai vähemmän ennen ja jälkeen antigeenin 10 ja vasta-aineen välisen reaktion tapahtumista nesteessä, reaktioasteen mukaisesti, tarkoitetun immunologisesti aktiivisen aineen määritys voidaan tehdä mittaamalla muutos millä tahansa sopivalla fotometrisellä tavalla. Niinpä valonsirontamenetelmä ja nefelometria tunnetaan helppou-15 destaan ja määritystä varten tehtävien toimenpiteiden mukavuudesta verrattuna RIA:an, EIA:an ja ELISA:an.
Immunologisesti aktiivisten aineiden määrityksessä, jossa käytetään tällaista antigeeni-vasta-aine-reak-tiota, on myös tutkittu erityisen lisäaineen käyttöä an-20 tigeeni-vasta-aine-reaktion edistäjänä. JP-patenttijulkaisussa nro Sho. 60-4938, on esimerkiksi esitetty poly-etyleeniglykolista ja kopolykondensaatista (block copoly-condensate) muodostuvan ei-ionisen pinta-aktiivisen aineen käyttö, jolla on rakennekaava H0(CH2CH20)e(CH3CH-25 CH20)b(CH2CH20)cH tai muu samankaltainen. Julkiseksi tul- • · leessa JP-patenttihakemuksessa nro Sho. 59-43362 on esitetty seuraavan yleisen kaavan mukaisen yhdisteen käyttö tällaisena lisäaineena: CH, (CH* )ηχ^
30 ^ CH-0—(—CH* -CH, -O—) s—H
CH* (CH*
Edelleen, julkiseksi tulleessa JP-patenttihakemuksessa nro Sho. 58-47256 esitetään, että polyetyleeniglykolia voidaan 35 käyttää lisäaineena systeemissä, jossa antigeeni tai vas- 3 94911 ta-aine kuljetetaan liukenemattomissa hienoissa partikkeleissa ja saatetaan antigeeni-vasta-aine-reaktioon liuoksessa.
Tyydyttävää tulosta ei ole kuitenkaan aina saatu 5 käytettäessä tällaista tunnettua lisäainetta. Esimerkiksi käytettäessä tällaista tunnettua lisäainetta reaktioseok-sen, joka on saatu antamalla antigeenin reagoida vasta-aineen kanssa liuoksessa, fotometrisissä määrityksissä, esim. nefelometriassa tai turbidometriassa, liuoksessa 10 esiintyvät muut kuin määrityksen kohteena olevat aineet, kuten rasva ja öljy tai proteiini, saavat aikaan sameuden, niin sanotun epäspesifisen reaktion, joka voi aiheuttaa virheen määritykseen. Edelleen, niin sanottu esi-vyöhykeilmiö (prozone phenomenon) voi esiintyä silloin, 15 kun määrityksen tulos pikemminkin viittaa määritettävän aineen alhaiseen konsentraatioon huolimatta siitä, että todellisuudessa sen konsentraatio on suuri, tai vaihtoehtoisesti määritystulos voi olla epätarkka hyvin alhaisessa konsentraatiossa. Lisäaineet voivat aiheuttaa epäspe-20 sifisen reaktion tai esivyöhykeilmiön myös EIA:a tai RIA: a käytettäessä. Siten tällaisten lisäaineiden käyttö pikemminkin aiheuttaa hankalia ongelmia, vaikkakin se edistää reaktiota tietyssä määrin.
Yllä mainituissa tapauksissa on suuri tarve kehit-25 tää uusi menetelmä immunologisesti aktiivisen aineen määrittämiseksi suurella tarkkuudella, käyttämällä antigeeni -vasta-aine-reaktiota nesteessä niin, että tässä menetelmässä on voitettu kaikki epäkohdat, jotka on havaittu alan aikaisemmissa menetelmissä, ja tarve antaa käyttöön 30 uusi reagenssi, jota voidaan käyttää tällaisessa uudessa : : menetelmässä.
• · »
Keksinnön kuvaus
Vastaavasti tämän keksinnön päämäärä on tarjota uusi menetelmä immunologisesti aktiivisen aineen määrit-35 tämiseksi käyttämällä antigeeni-vasta-aine-reaktiota niin.
4 94911 että alan aikaisempien menetelmien epäkohdat on täysin voitettu.
Tämän kekeinnön toinen päämäärä on tarjota uusi immunologisesti aktiivisen aineen määritysmenetelmä, joka 5 käsittää spesifisen polyeetteriyhdisteen lisäämisen nesteeseen, jossa tällainen antigeeni-vasta-aine-reaktio tapahtuu, tällä tavalla saavuttaen helposti ja yksinkertaisesti suuren tarkkuuden määritystuloksille.
Vielä yksi tämän keksinnön päämääristä on antaa 10 käyttöön reagenssi, joka käsittää spesifisen polyeetteriyhdisteen, immunologista määritystä varten yllä mainitulla menetelmällä.
Tämän keksinnön muut päämäärät, piirteet ja edut tulevat täydellisemmin esille seuraavassa kuvauksessa.
15 Tämän keksinnön tekijöiden laajan tutkimustyön tu loksena, jonka tarkoituksena oli voittaa alan aikaisemmissa menetelmissä nähdyt epäkohdat, on nyt yllättävästi havaittu, että immunologisesti aktiivisen aineen määrityksessä voidaan saavuttaa suuri tarkkuus nefelometrial-20 la, valonsirontamenetelmällä, tai muilla sen kaltaisilla optisilla määritysmenetelmillä, aiheuttamatta minkäänlaista epäspesifistä reaktiota tai esivyöhykeilmiötä, lisäämällä spesifinen polyeetteriyhdiste nesteeseen, jossa an-tigeeni-vasta-aine-reaktio toteutetaan määritystä varten.
.. 25 Tämän keksinnön yhden suoritusmuodon mukaisesti tarjotaan immunologisesti aktiivisen aineen määritysmenetelmä, jossa käytetään antigeeni-vasta-aine-reaktiota nesteessä, jolloin määritysmenetelmälle on tunnusomaista, että nesteeseen lisätään seuraavan yleisen kaavan mukai-30 nen yhdiste: « h'O- [ (CH2CH20 )b( AO )„] -R2 (I) jossa R1 ja R2 ovat kumpikin vetyatomi tai hiilivetyryhmä, 35 jossa on 1 - 5 hiiliatomia, AO on oksialkyleeniryhmä, jos- 5 94911 sa on 3 - 4 hiiliatomia, m ja n edustavat oksietyleeni- ja vastaavasti oksialkyleeniryhmien määriä, oksietyleeniryh-mät ja oksialkyleeniryhmät on kopolykondensoitu satunnaisesti niin, että niiden molekyylipaino on 1 000 - 20 000 5 ja m/n-suhde on alueella 60/40 - 90/10.
Tämän keksinnön toisen suoritusmuodon mukaisesti annetaan käyttöön immunologisesti aktiivisen aineen immunologista määritystä varten reagenssi, joka käsittää seuraavan yleisen kaavan mukaisen yhdisteen: 10 tfO-CfCHjCHjOMAOJJ-R2 (I) jossa R1 ja R2 ovat kumpikin vetyatomi tai hiilivetyryhmä, jossa on 1 - 5 hiiliatomia, AO on oksialkyleeniryhmä, jos- 15 sa on 3 - 4 hiiliatomia, m ja n edustavat oksietyleeni- ja vastaavasti oksialkyleeniryhmien määriä, oksietyleeniryh-mät ja oksialkyleeniryhmät on kopolykondensoitu satunnaisesti niin, että niiden molekyylipaino on 1 000 - 20 000 ja m/n-suhde on alueella 60/40 - 90/10.
20 Kuvioiden sisältö lyhyesti
Kuvio 1 on kaavio, joka esittää tämän keksinnön mukaisella menetelmällä tehdyn CRP-määrityksen tuloksen, kaaviossa suora A kuvaa näytettä, jossa on suuri konsent-raatio, kun taas suora B kuvaa näytettä, jossa on alhai-.. 25 nen konsentraatio.
Kuvio 2 on kaavio, joka esittää tuloksen määritykselle, jossa tutkittiin, tapahtuuko epäspesifistä reaktiota vai ei, silloin kun näyte sisältää rasvoja.
Paras tapa toteuttaa keksintöä 30 Yleisen kaavan (I) mukainen yhdiste on silloin, kun : jompikumpi tai kumpikin Rx:sta ja R2:sta on/ovat vetyato- * · 4 mi/-atomeja, poly(oksietyleenioksialkyleeni)etanoli tai -alkanoli tai poly(oksietyleenioksialkyleeni)glykoli. Kun sekä R1 että R2 ovat hiilivetyryhmiä, R1 voi olla identti- 35 nen R2:n kanssa tai erota siitä, ja se valitaan tavaili- β 94911 sesti alifaattisesta tai sykloalifaattisesta ryhmästä, jossa on 1 - 5 hiiliatomia. R1 ja R2 valitaan mieluiten suora- tai haaroittuvaketjuisista alkyyliryhmistä, joissa on 1-5 hiiliatomia. Esimerkkejä hiilivetyryhmistä ovat 5 metyyli, etyyli, allyyli, propyyli, isopropyyli, n-butyy-li, tert-butyyli, n-amyyli ja isoamyyli. Esimerkkejä ryhmä -AO-:sta oksialkyleeniryhmänä, jossa on 3 - 4 hiiliatomia, ovat oksipropyleeni, oksibutyleeni ja oksitetrametyleeni.
Tässä keksinnössä oksietyleeniryhmien -CH2-CH20- ja 10 oksialkyleeniryhmien -AO-määrä on spesifisesti rajoitettu alueelle 60/40 - 90/10 ilmoitettuna m/n-suhteena. Oksietyleeniryhmien ja oksialkyleeniryhmien polykondensaatin molekyylipaino on myös spesifisesti rajoitettu 1 000 -20 000. Jos molekyylipaino on vähemmän kuin 1 000, tullaan 15 tämän keksinnön tavoitetta tuskin saavuttamaan. Toisaalta, jos molekyylipaino ylittää 20 000, kopolykondensaatin synteesi tulee vaikeaksi. Jos m/n-suhteen arvo on määritetyn alueen ulkopuolella, tullaan tämän keksinnön tavoitetta tuskin saavuttamaan.
20 Yleisen kaavan (I) mukaiset yhdisteet ovat alalla tunnettuja, ja menetelmät näiden yhdisteiden valmistamiseksi on kuvattu JP-patenttijulkaisuissa numerot 35-7594 ja 57-17008. Osa näistä yhdisteistä on jo kaupallisesti saatavilla, esimerkiksi Nihon Yushi:sta Japanista tuote-.. 25 nimen UNILUB sarjana, ja laajalti käytössä öljyn proses soinnissa metalleja varten tai perusmateriaalina kosmetiikkaa varten. Yleisen kaavan (I) mukaiset yhdisteet ovat satunnaisia kopolykondensaatteja ja ne eroavat seuraavan kaavan mukaisista (block-) kopolykondensaateista: 30
; ; H0(CH2CH20)a(CH3CHCH20)b(CH2CH20)cH
jotka on kuvattu JP-patenttijulkaisussa nro 60-4938. Siten yleisen kaavan (I) mukaisilla yhdisteillä ei ole pin-35 ta-aktiivisuutta, ja niillä on fysikaalisia ominaisuuk- 7 94911 siä, jotka eroavat täysin yllä mainitussa julkaisussa kuvattujen yhdisteiden ominaisuuksista.
Kuvaavia esimerkkejä immunologisesti aktiivisista aineista (antigeeni tai vasta-aine), jotka voidaan mää-5 rittää tämän keksinnön mukaisella menetelmällä, ovat plasman proteiinit, kuten C-reaktiivinen proteiini (CRP), reu-mafaktori (RF), antistreptolysiini O (ASO) ja trans-ferriini, hormonit, kuten kilpirauhasta stimuloiva proteiini (THS), trijodityroniini (T3), seerumin totaality-10 roksiini (T4), tyroksiinia sitova proteiini (TBG), tyro-globuliini, insuliini, trypsiini, elastaasi, estrioli (E3), ihmisen koriongonadotropiini (HC6) ja ihmisen istukan lak-togeeni (HPL), onkologiset aineet, kuten karsinoembryonaa-linen antigeeni (CEA), β2-mikroglobuliini ja a-fetoproteii-15 ni, virushepatiitin antigeeni ja vasta-aine, kuten HBs- antigeeni, HBs-vasta-aine, HBe-antigeeni ja HBe-vasta-ai-ne, virus, kuten sikotautivirus, herpesvirus, tuhkarokko-virus, rubellavirus ja sytomegalovirus, anti-AIDS-vasta-aine (HIV) ja muut erilaiset elävän ruumiin komponentit.
20 Tämän keksinnön mukainen reagenssi immunologisia määrityksiä varten käsittää kaavan (I) mukaisen yhdisteen, ja sitä voidaan käyttää minkä tahansa tyyppisissä reaktioissa, joissa (1) käytetään antigeeniä ja vasta-ainetta, jotka eivät ole kantajassa kiinni, kuten lateksipartikke-.. 25 leissa, (2) käytetään antigeeniä ja vasta-ainetta, jotka ovat kiinni kantajassa, kuten lateksipartikkeleissa, (3) käytetään antigeeniä ja vasta-ainetta, jotka ovat kiinni kantajassa, kuten putkessa, helmissä tai levyllä. Käytettäessä antigeeniä tai vasta-ainetta, joka kannetaan tai ei 30 kanneta lateksipartikkeleissa, antigeenin tai vasta-aineen annetaan reagoida vasta-aineen tai antigeenin kanssa tut-kittavassa nesteessä, ja reaktionesteestä tehdään sitten optinen määritys, esim. valonsirontamenetelmällä tai spektrofotometriällä, jotta määritetään jokainen sameuden 35 muutos reaktioseoksessa. Käytettäessä antigeeniä tai vas- 94911 8 ta-ainetta, joka on kiinni kantajassa, kuten putkessa, helmissä tai levyssä, sen annetaan reagoida vasta-aineen tai antigeenin kanssa määritettävässä nesteessä. Sen jälkeen määritettävä neste poistetaan, ja sekundaarinen vas-5 ta-aine tai muu vastaava aine, joka on leimattu entsyymillä tai radioisotoopilla lisätään aloittamaan sekundaarinen antigeeni-vasta-aine-reaktio. Lopuksi mitataan yhtyneen entsyymin tai säteilyannoksen määrä, tai vaihtoehtoisesti ei-yhtyneen entsyymin tai säteilyannoksen määrä.
10 Tämän keksinnön mukaista reagenssia voidaan käyttää sekä reaktiossa, jossa on määritettävä neste että reaktiossa, jossa on sekundaarinen antigeeni tai vasta-aine, joka on leimattu entsyymillä tai radioisotoopilla. Tämän keksinnön periaate, menetelmä ja laitteisto ovat samanlaiset kuin 15 tavanomaisissa ElA:ssa, RIA:ssa, ELISA:ssa, valonsironta-menetelmässä ja spektrofotometriassa. Yleensä käytetään seerumia määritettävänä nesteenä. Kuitenkin muita ruumiinnesteitä, esimerkiksi selkäydinnestettä, virtsaa ynnä muita voidaan myös käyttää vastaavasti.
20 Reagenssi antigeeni-vasta-aine-reaktion määrittämiseksi käsittää reagenssin, joka sisältää antiseerumin, reagenssin, joka sisältää määritettävää antigeeniä spesi fisesti vastaavan vasta-aineen, reagenssin, joka sisältää määritettävää vasta-ainetta spesifisesti vastaavan anti-.· 25 geenin, puskurireagenssin reaktiota varten ja laimennus- aineen näytteelle. Yleisen kaavan (I) mukainen yhdiste voidaan lisätä mihin tahansa yllä mainituista reagensseis-ta saman vaikutuksen aikaansaamiseksi. Kuitenkin on toivottavaa liuottaa yleisen kaavan (I) mukainen yhdiste suo-30 laliuokseen, fosfaattipuskurisuolaliuokseen, tris-puskuri- : suolaliuokseen tai johonkin muuhun puskurisuolaliuokseen, tai tavanomaiseen puskuriliuokseen. Tämä puskuriliuos voidaan lisätä reagenssiin, joka sisältää antiseerumin. Puskuriliuoksen pH-arvo on alueella 5-10, mieluiten 6,5 -35 8,5.
9 94911
Yleisen kaavan (1) mukaisen yhdisteen konsentraa-tio reagenssissa voi vaihdella analyysimenetelmän mukaan, mutta se on yleensä alueella 0,01 - 10 % (paino/tilavuus), mieluiten 0,05 - 5 % (w/v), kun se lisätään reagenssiin, 5 joka sisältää tai ei sisällä antiseerumin, vasta-aineen tai antigeenin. Yleisen kaavan (I) mukaisen yhdisteen kon-sentraatio lopullisessa reaktioseoksessa on alueella 0,01 - 2 %, mieluiten 0,05 - 1 %.
Tämän keksinnön mukainen reagenssi, joka sisältää 10 yleisen kaavan (I) mukaisen yhdisteen, voidaan sisällyttää proteiiniin, kuten vasikan seerumin albumiiniin, gelatiiniin tai gelatiinin repolymeeriin, tai sakkaridiin, kuten glukoosi tai sakkaroosi, jotta eliminoidaan minkä tahansa, elävän ruumiinnesteen näytteen sisältämän häi-15 ritsevän aineen vaikutus.
Yleisen kaavan (I) mukaista yhdistettä voidaan käyttää yhdessä polyetyleeniglykolin tai polyoksameerin kanssa, joita on aikaisemmin käytetty tavanomaisissa rea-gensseissa.
20 Tämän keksinnön mukainen menetelmä voidaan toteut taa seuraavalla yleisellä tavalla: reagenssi, joka sisältää määritettävän vasta-aineen tai antigeenin kanssa spesifisesti reagoimaan pystyvän antigeenin tai vasta-aineen, sekoitetaan määrättynä annoksena puskuriliuoksen kanssa, 25 joka sisältää yleisen kaavan (I) mukaisen yhdisteen ja näytteen (tämä näyte voidaan liuottaa puskuriliuokseen, joka sisältää yleisen kaavan (I) mukaisen yhdisteen tai tavanomaiseen puskuriliuokseen määritettävän antigeenin tai vasta-aineen konsentraation mukaan). Seoksen annetaan 30 reagoida määrätyssä lämpötilassa (mieluiten 25 - 37 °C) ja ·. siitä tehdään sen jälkeen optinen määritys, kuten nefelo- metria. Tehtäessä nefelometria, nefelometristä saatavia tuloksia verrataan kontrollinäytteiden antamiin tuloksiin, jotta saadaan määritettyä konsentraatio. Yleisen kaavan 35 (I) mukaisen yhdisteen sisältävä puskuriliuos voidaan se- 10 94911 kolttaa aiemmin reagenssiin, joka sisältää antigeenin tai vasta-aineen, tai määritettävään näytteeseen.
Tämän keksinnön mukaisessa immunologisessa menetelmässä, jossa käytetään tällaista antigeeni-vasta-aine-5 reaktiota, estetään ei-toivottavat sivureaktiot, se on niin sanotut epäspesifiset reaktiot, jotka yleensä aiheutuvat kontaminoivista proteiineista, rasvoista jne. Edelleen, niin sanotun esivyöhykeilmiön esiintyminen mitattavan aineen suurissa konsentraatioissa, voidaan myöskin 10 estää. Tämän keksinnön lisäetuna on, että inununologisesti aktiivinen immunologinen aine voidaan määrittää suurella tarkkuudella myöskin alhaisista konsentraatioista.
Esimerkit Tämä keksintö kuvataan nyt yksityiskohtaisemmin 15 esimerkeillä.
Esimerkki 1:
Immunoanalyysireagenssina käytettiin seuraavan kaavan (II) mukaisen yhdisteen liuosta (0,075 % w/v) fosfaat-tipuskuriliuoksessa (pH 7,2): 20 ho{(ch2ch2o)240(ch2-ch-o)60}H (II) CH3 Tällä yhdisteellä on m/n molaarinen suhde 80/20, koska m - 25 on 240 ja n on 60 ja molekyylipaino on 14 058. Valmistet tua immunoanalyysireagenssia käytettiin tehtäessä turbi-dometrinen määritys CRP:lie, transferriinille, al-happa-malle glykoproteiinille, haptoglobiinille ja al-antitryp-siinille. Immunoanalyysi tehtiin seuraavalla tavalla.
30 Immunoanalyysireagenssi sekoitettiin yllä mainit- *. tujen proteiinien antiseerumin kanssa edellisen ja jäl kimmäisen suhteessa 2/1. Tätä seosta kutsuttiin toiseksi reagenssiksi. Immunoanalyysireagenssia käytettiin ensimmäisenä reagenssina reaktiopuskuriliuoksena.
11 94911
Jotta varmistettaisiin lineaarisuus pienillä ja suurilla konsentraatioalueilla, suuren konsentraation sisältävä näyte ja pienen konsentraation sisältävä näyte laimennettiin 5-%:isella ihmisen seerumin albumiinilla 5 niin, että saatiin 10 eri konsentraatiota kumpaakin näytettä kohti.
Laimennettua näytettä laitettiin 5 μΐ koeputkeen, ja siihen lisättiin 350 μΐ ensimmäistä reagenssia. Seoksen annettiin reagoida 5 minuuttia, ja sen jälkeen tämän 10 näytteen absorptio mitattiin pääaallonpituudella 340 nm ja toisella aallonpituudella 700 nm käyttäen biokemiallista automaattista analysaattoria (malli "705 tyyppi"; Hitachi, Ltd.), jotta saatiin määritettyä nolla. Näytteeseen lisättiin 100 μΐ antiseerumiseosta, ja saadun seoksen annettiin 15 reagoida 5 minuuttia, jotta saatiin reaktioseos, joka vuorostaan mitattiin samoilla aallonpituuksilla kuin yllä. Nollanäytteen arvo vähennettiin tämän reaktioseoksen arvosta, jotta saatiin reaktiota vastaava arvo. Kontrolli-seerumina muodostamaan kalibraatiokäyrä käytettiin N-CRP-20 standardiseerumia (Behring-Werke). Kuvio 1 on kaavio, jossa esitetään määritystulokset CRPille. Kuviossa 1 ordinaa-tan numerot ilmaisevat CRP:n konsentraation (mg/dl) kun taas abskissan numerot ilmaisevat näytteen laimennussuhdetta. Suora A kuvaa suuren konsentraation sisältävää näy-.. 25 tettä (konsentraatio ennen laimennusta 36 mg/dl) kun taas suora B kuvaa pienen konsentraation sisältävää näytettä (konsentraatio ennen laimennusta 3 mg/dl).
Havaittiin, että tämän keksinnön mukainen immuno-analyysireagenssi, jota käytettiin tässä esimerkissä, an-30 toi suuremman lineaarisuuden oleellisesti laajalla alueel-v la antigeeni-vasta-aine-reaktiossa, ja että se osoitti suurta herkkyyttä erityisesti pienten konsentraatioiden alueella.
Transferriini (konsentraatio ennen laimennusta oli 35 750 mg/dl suuren konsentraation sisältävässä näytteessä, 12 94911 kun taas konsentraatio ennen laimennusta oli 10 mg/dl pienen konsentraatlon sisältävässä näytteessä), ai-hapan gly-koproteiini (220 mg/dl ja vastaavasti 70 mg/dl), haptoglo-biini (650 mg/dl ja vastaavasti 50 mg/dl) ja al-antitryp-5 siini (340 mg/dl ja vastaavasti 40 mg/dl) osoittivat lineaarisuuden laajalla alueella oleennaisesti samalla tavalla kuin CRP.
Esimerkki 2:
Tutkittiin, tapahtuuko epäspesifinen puskuriliuok-10 sen reaktio näytteessä olevan rasvan kanssa vaiko ei, kun käytettiin immunoanalyysireagenssia, joka valmistettiin liuottamalla kaavan (II) mukaista yhdistettä (0,075 % w/v) fosfaattipuskuriliuokseen (pH 7,2). 1,0 ml:aan immunoanalyysireagenssia lisättiin 20 μΐ "Intrafat":ia (rasvaemul-15 sio laskimonsisäiseen injektioon), ja seosta sekoitettiin hyvin.
Muutos seoksessa ajan kuluessa 37 °C:ssa 10 minuutin aikana havainnoitiin aallonpituudella 340 nm.
Kontrollina käytettiin fosfaattipuskuriliuosta, 20 jossa polyetyleeniglykoli 6 000 korvasi yllä mainitun testin kaavan (II) mukaisen yhdisteen. Tulokset esitetään kuviossa 2. Tässä kuviossa ordinaatta ilmaisee absorbans-sia, kun taas abskissa ilmaisee aikaa minuuteissa. Kun käytettiin polyetyleeniglykoli 6 000:ta, absorbanssi kas-.. 25 voi ajan kuluessa, minkä avulla havaittiin epäspesifinen , reaktio rasvan kanssa. Sitä vastoin tämän keksinnön mu kainen immunoanalyysireagenssi ei osoittanut minkäänlaista epäspesifistä reaktiota. Vastaavasti, kun tuntematon näyte määritetään käyttäen tämän keksinnön mukaista immu-30 noanalyysireagenssia, näytteen nolla-arvo voidaan vähen-'. tää tarkasti niin, että kliinisellä testillä, jossa käy tetään keksinnön mukaista reagenssia, voidaan tarkasti kvantitoida proteiinien konsentraatio jopa hyperlipemia-tapauksessa veriplasmasta.
' ' IM I «IKI liljat . . : 13 94911
Esimerkki 3:
Immunoanalyysireagensseina käytettävien yhdisteiden käyttöalojen tutkimiseksi testattiin lineaarisuus, kun taulukon 1 mukaisia yhdisteitä käytettiin esimerkissä 1 5 kuvatulla tavalla. Havaittiin, että yhdisteet nro 1-6 taulukossa 1 osoittivat yhtä hyvää lineaarisuutta kuin kaavan (II) mukainen yhdiste, kun taas yhdisteet nro 7 -9 eivät osoittaneet tällaista riittävää lineaarisuutta. Tämän tuloksen perusteella on päätelty, että molekyyli-10 painon alue on 1 000 - 20 000, ja että m/n-suhde vaihtelee 60/40 - 90/10.
t „ 4 i4 94911
O
0 4J
C-Pcsl CS <Z2 CZ> O O C? tO ·—* •H -H eM c© co cm en to o© «o rd flj O c"> oo to o© oo to σ> to 04 > ♦H id 0¾ o© h- *—* ^5- >> *___ - - ______ ^ - " 3
0) +J C3 O O ^j“ esi esi >«r 'a* CO
HP — — 00 to er> to — 00 oi OQ)C5 oocnoit— cm to ® to 2 Λί 03 — «wo>-«roo oo esise· (¾ ·—1 ’—1 *—· PJ________ <·>>* 0) Ό Ä
3 C=> !— OO O O O O lO
03 -*r esi esi csj 1—i — -a· 10 C ,· \ \ N. \ \ \ V N \ \ P O CO CD <0 CD O <35 coirs e ti co t·— oooooi en to to en
O
S
coo t— 000 O -ar o to 3 CM CO *«* CM j
<M______ - _ _____ - -___ - - - 1—I
oe p ) CM CO O O Ö cz? CO otos
. E f-co-^co CO
, C —* CM C© CO
0·_____________— -------- G
2 < OO O CJ
Π '—' NN N n, 3 e 1 1 3: o ,3 —* cj o o jO O NN N 3
5 «o 3: a: x -H
S X CJ CJ ui CJ H
^ CJ ^<· O n O n n n O X O n O ci O ci n +j n << X XX XXXX NX XX XX XX (0 X CJ - O CJ - CJ CJ CJ CJ - CJ CJ - CJ CJ - CJ CJ - CJ CJ <a
CJ N N N N N N CM N NM
s— x x XXX X X X X
- CJ O CJ CJ CJ CJ CJ CJ CJ P
1 ___;_______________ o O------- c
N en co co *H
OS ~J X XXXX X X X X <0 o- CJ CJ CJ Pa
_____^»H
_ ΙΓ_ ““““— ,—{ ~t n* 0Ϊ • · ,-* ~ Cl C- O- *-* — rs rs 1-, * _ rv X XXXX X X X X A! CC C_> CO CO UI UI CM CO 0 '—' CJ CJ CJ CJ CJ CJ i—| _________o --- s —c n n Tf in to t" oo oi ^ _ 3
P
•H
ftJ
2 o ia S -p i -P aa
c ö 3 -H
. $ m p ί * • tn 03 0) .3 «a <u u e
rrt § ^ PH
y ·ία <u m g H >0)
Claims (3)
1. Menetelmä immunologisesti aktiivisen aineen määrittämiseksi, jossa käytetään antigeeni-vasta-aine- 5 reaktiota liuoksessa, tunnettu sitä, että liuokseen lisätään seuraavan yleisen kaavan mukainen yhdiste: R'O- {(CH2CH20) m (AO) n } -R2 10 jossa R1 ja R2 ovat kumpikin vetyatomi tai hiilivetyryhmä, jossa on 1 - 5 hiiliatomia, AO on oksialkyleeniryhmä, jossa on 3 - 4 hiiliatomia, m ja n edustavat oksietyleeni-ryhmien ja vastaavasti oksialkyleeniryhmien lukumäärää, oksietyleeniryhmät ja oksialkyleeniryhmät on kopolykon-15 densoitu satunnaisesti niin, että niiden molekyylipaino on 1 000 - 20 000 ja m/n-suhde on alueella 60/40 - 90/10.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että määritys tehdään optisesti.
3. Reagenssi immunologisesta aktiivisen aineen im-20 munologiseen määritykseen, tunnettu siitä, että se käsittää yleisen kaavan mukaisen yhdisteen: R10-{(CH2CH20)B(A0)n}-R2 (I) .. 25 jossa R1 ja R2 ovat kumpikin vetyatomi tai hiilivetyryhmä, jossa on 1 - 5 hiiliatomia, AO on oksialkyleeniryhmä, jossa on 3 - 4 hiiliatomia, m ja n edustavat oksietyleeni-ryhmien ja vastaavasti oksialkyleeniryhmmien lukumäärää, oksietyleeniryhmät ja oksialkyleeniryhmät on kopolykonden-30 soitu satunnaisesti niin, että niiden molekyylipaino on ·. 1 000 - 20 000 ja m/n-suhde on alueella 60/40 - 90/10. 16 94911
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63257846A JP2684069B2 (ja) | 1988-10-13 | 1988-10-13 | 免疫学的活性物質の測定方法及びそのための試薬 |
| JP25784688 | 1988-10-13 | ||
| PCT/JP1989/001051 WO1990004179A1 (en) | 1988-10-13 | 1989-10-12 | Method for assaying immunologically active substance and reagent therefor |
| JP8901051 | 1989-10-12 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI911750A0 FI911750A0 (fi) | 1991-04-11 |
| FI94911B FI94911B (fi) | 1995-07-31 |
| FI94911C true FI94911C (fi) | 1995-11-10 |
Family
ID=17311964
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI911750A FI94911C (fi) | 1988-10-13 | 1991-04-11 | Menetelmä immunologisesti aktiivisen aineen määrittämiseksi ja menetelmässä käyttökelpoinen reagenssi |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5296355A (fi) |
| EP (1) | EP0439611B1 (fi) |
| JP (1) | JP2684069B2 (fi) |
| KR (1) | KR0160103B1 (fi) |
| AT (1) | ATE111603T1 (fi) |
| AU (1) | AU630376B2 (fi) |
| DE (1) | DE68918286T2 (fi) |
| DK (1) | DK66491A (fi) |
| FI (1) | FI94911C (fi) |
| NO (1) | NO301615B1 (fi) |
| WO (1) | WO1990004179A1 (fi) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE4023671A1 (de) * | 1990-07-25 | 1992-01-30 | Boehringer Mannheim Gmbh | Nichtionische blockcopolymere aus propylenoxid und ethylenoxid |
| US5627080A (en) * | 1994-07-29 | 1997-05-06 | Beckman Instruments, Inc. | Detergent-facilitated immunoassay for the rapid and quantitative assay of pharmacological agents |
| DE4439348A1 (de) * | 1994-11-04 | 1996-05-09 | Boehringer Mannheim Gmbh | Weiße Trigger-Präparationen zur Verbesserung der Signaldetektion bei bio- und chemilumineszenten Reaktionen |
| JP2001514737A (ja) * | 1996-07-03 | 2001-09-11 | サイバ、カンパニー | 前処理試薬およびそれを使用する方法 |
| JP4219491B2 (ja) * | 1999-06-18 | 2009-02-04 | 富士フイルム株式会社 | 乾式分析方法及び乾式分析要素 |
| JP6242068B2 (ja) * | 2013-04-10 | 2017-12-06 | 積水メディカル株式会社 | ラテックス免疫凝集測定試薬 |
Family Cites Families (19)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS357594B1 (fi) * | 1958-05-20 | 1960-06-21 | ||
| BE787398A (fr) * | 1971-08-10 | 1973-02-12 | Basf Ag | Alcools oxalcoyles et preparations detergentes les contenant comme anti-mousses |
| US3862243A (en) * | 1972-02-17 | 1975-01-21 | Int Flavors & Fragrances Inc | Mixed oxyalkylates employed as antifoamers |
| US3853465A (en) * | 1972-06-09 | 1974-12-10 | Technicon Instr | Turbidity reduction in serum and plasma samples using polyoxyethylated lauric acid compounds |
| US3880989A (en) * | 1973-01-30 | 1975-04-29 | Baxter Laboratories Inc | Production of antisera comprising fractionating plasma or serum with an ethylene oxide-polyoxypropylene block copolymer |
| US4148869A (en) * | 1975-03-06 | 1979-04-10 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Immunological reagent and method of using same |
| IL48804A (en) * | 1975-01-29 | 1979-05-31 | Baxter Travenol Lab | Imminological reagent comprising a mixture of polyethyleneglycol and a nonionic surfactant |
| JPS5311997A (en) * | 1976-07-20 | 1978-02-02 | Kuraray Co Ltd | Preparation of etherified polyoxyalkylene |
| DE2927170C2 (de) * | 1979-07-05 | 1984-01-19 | Schill & Seilacher GmbH & Co, 7030 Böblingen | Präparationsmittel zur Herstellung von synthetischen Filamenten |
| DE2918826A1 (de) * | 1979-05-10 | 1980-11-27 | Basf Ag | Verwendung von alkoxylierten alkoholen als biologisch abbaubare, schaumarme tenside in wasch- und reinigungsmitteln |
| JPS6331448Y2 (fi) * | 1980-07-01 | 1988-08-23 | ||
| US4452903A (en) * | 1981-02-17 | 1984-06-05 | Lee Jin P | Assay method and reagent kit means for lipid-containing body fluid |
| US4454232A (en) * | 1982-06-07 | 1984-06-12 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Estriol assay |
| JPS5943362A (ja) * | 1982-09-06 | 1984-03-10 | Kainosu:Kk | 免疫学的測定試薬 |
| JPS604938U (ja) * | 1983-06-23 | 1985-01-14 | 三井造船株式会社 | 自動採水装置 |
| DE3327642A1 (de) * | 1983-07-30 | 1985-02-14 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Verfahren zur bestimmung eines partners einer immunreaktion sowie reagens zur durchfuehrung dieses verfahrens |
| GB2145726A (en) * | 1983-08-26 | 1985-04-03 | Diversey Corp | Surface active agents |
| DE3532626A1 (de) * | 1985-09-12 | 1987-03-19 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren zur bestimmung eines partners einer immunreaktion |
| US4810630A (en) * | 1987-03-30 | 1989-03-07 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Use of polyoxyethylene ethers to improve the performance of immunoassays employing peroxidase conjugates |
-
1988
- 1988-10-13 JP JP63257846A patent/JP2684069B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
1989
- 1989-10-12 WO PCT/JP1989/001051 patent/WO1990004179A1/ja active IP Right Grant
- 1989-10-12 AT AT89911400T patent/ATE111603T1/de not_active IP Right Cessation
- 1989-10-12 DE DE68918286T patent/DE68918286T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1989-10-12 US US07/678,326 patent/US5296355A/en not_active Expired - Fee Related
- 1989-10-12 KR KR1019900701249A patent/KR0160103B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1989-10-12 AU AU43489/89A patent/AU630376B2/en not_active Ceased
- 1989-10-12 EP EP89911400A patent/EP0439611B1/en not_active Expired - Lifetime
-
1991
- 1991-04-11 FI FI911750A patent/FI94911C/fi active
- 1991-04-12 NO NO911444A patent/NO301615B1/no not_active IP Right Cessation
- 1991-04-12 DK DK066491A patent/DK66491A/da not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FI94911B (fi) | 1995-07-31 |
| DE68918286T2 (de) | 1995-02-23 |
| DK66491D0 (da) | 1991-04-12 |
| US5296355A (en) | 1994-03-22 |
| EP0439611B1 (en) | 1994-09-14 |
| KR0160103B1 (ko) | 1999-03-30 |
| WO1990004179A1 (en) | 1990-04-19 |
| DK66491A (da) | 1991-04-12 |
| AU4348989A (en) | 1990-05-01 |
| DE68918286D1 (de) | 1994-10-20 |
| NO911444L (no) | 1991-05-16 |
| JP2684069B2 (ja) | 1997-12-03 |
| NO911444D0 (no) | 1991-04-12 |
| FI911750A0 (fi) | 1991-04-11 |
| JPH02103466A (ja) | 1990-04-16 |
| NO301615B1 (no) | 1997-11-17 |
| EP0439611A1 (en) | 1991-08-07 |
| AU630376B2 (en) | 1992-10-29 |
| ATE111603T1 (de) | 1994-09-15 |
| EP0439611A4 (en) | 1992-03-11 |
| KR900702369A (ko) | 1990-12-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5296347A (en) | Bridge immunoassay | |
| US8124359B2 (en) | Use of additives for the reduction of non-specific binding in assays | |
| TWI588487B (zh) | Bubble adsorption inhibition method | |
| JPH08240590A (ja) | 特異的結合アッセイ用試薬およびそのキット | |
| CN101310186A (zh) | 测定抗原的方法和用于其的试剂盒 | |
| FI94911C (fi) | Menetelmä immunologisesti aktiivisen aineen määrittämiseksi ja menetelmässä käyttökelpoinen reagenssi | |
| KR102075949B1 (ko) | 면역분석 방법 및 시약 | |
| CN104535761B (zh) | 超支化聚缩水甘油醚修饰胶乳微球增强免疫比浊法及其应用 | |
| KR890002941B1 (ko) | 면역 반응 성분의 정량 방법 및 제제 | |
| JP4086266B2 (ja) | 免疫測定方法 | |
| KR101675412B1 (ko) | 면역 분석 방법 및 그것을 위한 시약 | |
| WO1993017335A1 (en) | Bridge immunoassay | |
| JPH11248706A (ja) | 非特異的吸着防止剤 | |
| US20030143758A1 (en) | Insoluble carrier particle nephelometric immunoassay reagent | |
| JP2001255325A (ja) | 免疫学的測定法及び試薬 | |
| JP2004325414A (ja) | 免疫測定方法及び免疫測定キット | |
| JP3228791B2 (ja) | 検体中の抗原又は抗体の測定法 | |
| JP3746381B2 (ja) | 化学発光酵素免疫測定方法 | |
| JPH0889291A (ja) | 過酸化物分解性物質測定用指示薬および試薬キット | |
| JP2022161884A (ja) | 自動分析装置の測定値の正確性を向上させる方法 | |
| JPH0511788B2 (fi) | ||
| JPH07114712B2 (ja) | 過酸化物分解性物質測定用指示薬および試薬キット | |
| KR20190043594A (ko) | 면역학적 측정 방법 및 측정 시약 | |
| JP2018066636A (ja) | 免疫学的測定方法および測定試薬 | |
| JPH0989889A (ja) | 遊離ハプテンの免疫学的測定法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| BB | Publication of examined application |