FI92486C - Menetelmä terapeuttisesti vaikuttavien 3-asyyliamino-2-okso-1H-2,3-dihydro-1,4-bentsodiatsepiiniyhdisteiden valmistamiseksi - Google Patents

Description

92486

Menetelmå terapeuttisesti vaikuttavien 3-asyyliamino-2-okso-1H-2, 3-dihydro-1,4-bentsodiatsepiiniyhdisteiden valmistamisek-si

Forfarande for framstållning av terapeutiskt verksamma 3-acyl-amino-2-oxo-1H-2,3-dihydro-l, 4-bensodiazepinforeningar

Keksinnon kohteena on uusien 3-asyyliamino-2-okso-1H-2,3-dihydro-l, 4-bentsodiatsepiinijohdannaisten ja niiden suolojen valmistus. Nåmå amidit valmistetaan 5-asemassa syklisellå jåånnoksellå substituoiduista 3-amino-2-okso-l, 4-bentsodiatse-piinijohdannaisista ja tri-syklisistå karboksyylihapoista, jotka ovat 1,7-anelloituja l-H-indoli-2-karboksyylihappojohdan-naisia. Yhdisteillå on kolekystokiniini (CCK) vastainen vaiku-tus ja niitå voidaan kåyttåå farmaseuttisissa valmisteissa.

Eurooppalaisten patenttihakemusten, joiden julkaisunumerot ovat EP 0 167 919 ja 0 284 256, perusteella tunnetaan 3- ja 5-asemastaan substituoituja 2-okso-l, 4-bentsodiatsepiinijohdan-naisia, joilla on CCK-antagonistista vaikutusta. Julkaisussa J. Med. Chem. 31, (1988), s. 2235-2246 esitetåån 3-amido-l,4- bentsodiatsepiinijohdannaisia, joilla on CCK-antagonistista vaikutusta. Keksinnon mukaiset yhdisteet eroavat aikaisemmin tunnetuista bentsodiatsepiiniyhdisteistå kemiallisen rakenteen-sa suhteen, koska niisså on 3-asyyli-amino-substituentti, jonka asyylijåånnos on peråisin trisyklisistå karboksyylihapoista, jotka ovat 1,7-anelloituja indoli-karboksyylihappojohdannaisia. Suomalaisesta patenttijulkaisusta FI 76800 tunnetaan 2-imidatsolyyli-pyrrolokinoliini- ja 2-imidatsolyyli-atse-pinoindoliyhdisteiden valmistus ja EP patenttihakemuksesta 0 322 016 tunnetaan 1,7-anelloitujen indolikarboksyylihappo-jen, mm. pyrrol oki nol i i ni karboksyylihappoj en estereitå ja amideja. Ei kuitenkaan ole esitetty, ettå nåillå karboksyylihappoj ohdannaisilla olisi minkåånlaista CCK-antagonistista vaikutusta.

Kolekystokiniini (CCK) on ruuansulatuskanavan kudoksissa ja keskushermostossa esiintyvå peptidi, jonka vaikutusspektri on hyvin laaja. Sillå on mm. paksusuolen liikkuvuuteen, sappira- 92486 2 kon supistumiseen ja haiman eksokriiniseen eritykseen kohdistu-vaa stimuloivaa vaikutusta ja mahan tyhjenemiseen kohdistuvaa estovaikutusta. Lisåksi se vaikuttaa ruokahalun sååtelyyn. CCK-antagonistit ovat farmakologisesti vaikuttavia aineita, jotka kykenevåt sitoutumaan CCK-reseptoreihin, ja jotka nåin olien kykenevat eståmåån CCK:n indusoimia tapahtumia.

Oheisen keksinnon tehtåvånå on kehittåå uusia, CCK-antagonis-tien tavoin vaikuttavia yhdisteitå, joiden vaikutusprofiili on parantunut. Keksinnon tehtåvånå on lisåksi esittåå 1,7-anelloi-tujen lH-indoli-2-karboksyylihappojen johdannaisten, joilla on arvokkaita farmakologisia ominaisuuksia, valmistusmenetelmiå.

Keksinnon puitteissa todettiin, ettå keksinnon mukaisilla 1, 7-anelloiduilla lH-indoli-2-karboksyylihappo-N-(1, 4-bentso-diatsepin-3-yyli)amideilla on CCK-antagonistisia ominaisuuksia ja ettå niiden tunnusomaisena piirteenå on uudenlainen farma-kologinen vaikutusprofiili. Niillå on erinomaista, mahan tyh-jenemistå ediståvåå vaikutusta hoitovaikutuksen ollessa laaja ja toksisuuden pieni.

Nåin olien keksinnon kohteena on menetelmå yleisen kaavan I mukaisten terapeuttisesti vaikuttavien 3-asyyliamino-2-okso-1H-2, 3-dihydro-l, 4-bentsodiatsepiiniyhdisteiden ♦ * · : · ^ i* misså R1 tarkoittaa Ci-Cs-alkyyliå tai syklopropyylimetyyliå, R2 tarkoittaa vetyå, halogeenia, Ci-C«-alkyyliå tai Ci-Ca-alkoksia ja « ·' R3 tarkoittaa vetyå, li 92486 3 R·4 tarkoittaa 5-6 hiiliatomia kåsittåvåå sykloalkyyliå, tienyy-liå tai mahdollisesti substituoitunutta fenyyliryhmåå a R7 mis så

Rr tarkoittaa vetyå, halogeenia tai Ci-C4-alkyyliå, Ci-C*-al koks i a ja

Re tarkoittaa vetyå tai halogeenia,

Rs tarkoittaa vetyå tai halogeenia,

Re tarkoittaa vetyå, halogeenia tai Ci-C^-alkoksia ja Z tarkoittaa 2-4 hiiliatomia kåsittåvåå alkyleeniketjua, joka voi mahdollisesti olla substituoitunut yhdellå tai kahdella alemmalla alkyylillå, tai se tarkoittaa fen-l-yy-li-2-etyleeniryhmåå tai -X-CHa-CHa-ketjua, jossa X on si-toutunut indolirungon fenyylirenkaaseen ja tarkoittaa hap-pea tai rikkiå, mukaisten yhdisteiden sekå niiden happoadditiosuolojen valmis-tamiseksi.

Keksinnon mukainen menetelmå tunnetaan siitå, ettå yleisen kaavan II

« % rZ-—r~ Il )— m2

R

misså R1, Ra, R3 ja R·* ovat edellå esitettyjen mååritelmien mukais i a, mukaiset aminoyhdisteet asyloidaan yleisen kaavan III

=5 R6-(— [i \_C-y (III) 4 92486 misså Rs, R6 ja Z ovat edellå esitettyjen mååritelmien mukai-sia ja Y on hydroksi tai reaktiivinen ryhmå, mukaisilla hapoil-la tai reaktiokykyisillå happojohdannaisilla ja mahdollisesti vapaat kaavan I mukaiset yhdisteet muunnetaan happoadditiosuo-loikseen tai happoadditiosuolat muunnetaan vapaiksi kaavan I mukaisiksi yhdisteiksi, ja/tai raseemiset seokset erotetaan optisiksi isomeereikseen.

Kaavan I mukaisissa yhdisteisså R1 tarkoittaa edullisesti alem-paa alkyyliryhmåå. Se voi olla suora- tai haaraketjuinen ja se kåsittåå edullisesti 1-4 hiiliatomia. Erityisen edullisiksi jåånnoksiksi R1 ovat osoittautuneet suora- ja haaraketjuiset alkyyliryhmåt, joissa on 1-3 hiiliatomia, erityisesti metyyli.

Mikåli kaavan I mukaisissa yhdisteisså substituentti R2 tarkoittaa alempaa alkyyliryhmåå niin tåmå ryhmå voi olla suora-tai haaraketjuinen alkyyliryhmå, jossa on 1-5, edullisesti 1-4 hiiliatomia, erityisesti metyyli tai etyyli. Nåin olien alem-mat alkyylisubstituentit tarkoittavat edullisesti metyyliå ja alemmat alkoksisubstituentit tarkoittavat edullisesti metok-sia. Halogeenisubstituentit R2, R5 ja R6 tarkoittavat erityisesti fluoria, klooria tai bromia.

Substituentti R2 sijaitsee bentsodiatsepiinirungossa edullises- : ti 7- ja 8-asemassa ja se tarkoittaa edullisesti vetyå, alem paa alkoksia, erityisesti metoksia, tai alempaa alkyyliå, erityisesti metyyliå, tai myoskin klooria. Edulliseksi on osoit-tautunut erityisesti 8-asemassa sijaitseva metoksisubstituent-ti.

, Substituentti R* tarkoittaa edullisesti mahdollisesti substi-tuoitunutta fenyyliryhmåå. 5-fenyyliryhmån substituentit R7 ja R8 tarkoittavat edullisesti vetyå, alempaa alkyyliå, erityisesti metyyliå, tai halogeenia, erityisesti fluoria tai klooria, tai myoskin 1-5 hiiliatomia kåsittåvåå alempaa alkoksia, esimerkiksi isopentyylioksia. Erityisen sopiva on substituoi- ♦ « ·’ tumaton tai fluorilla substituoitunut fenyyliryhmå R*.

I! 5 92486

Mikali substituentti R“ tarkoittaa sykloalkyyliryhmåå, niin se on edullisesti sykloheksyyli.

Substituentti Re tarkoittaa edullisesti vetyå tai myoskin halogeenia, erityisesti fluoria, tai alempaa alkoksia, erityi-sesti metoksia. Substituentti R5 tarkoittaa edullisesti vetyå. Mikali Rs on halogeeni, niin se on edullisesti kloori.

Z tarkoittaa ketjua, jossa on 2-4 ketjun jåsentå, edullisesti 2-4 hiiliatomia kåsittåvåå alkyleeniketjua. Tåten Z muodostaa sen aminoetyleeniryhmån, johon se on sitoutunut, kanssa 5-7-jå-senisen heterosyklin. Z tarkoittaa edullisesti propyleeniketjua ja nåin olien se muodostaa yhdesså indolirungon, johon se on sitoutunut, kanssa 4H-pyrrolo-[3,2, 1-ij]-5, 6-dihydrokino-liinirungon. Mikali alkyleeniketju Z on substituoitunut alem-malla alkyylillå, se voi sisåltåå 1-4 hiiliatomia ja se on erityisesti metyyli. Mikali alkyleeniketjuun Z on anelloitunut hiilisyklinen rengas, se voi olla tyydyttymåton tai tyydytty-nyt ja se on edullisesti bentseenirengas.

Kaavan I mukaiset yhdisteet sisåltåvåt kiraalisen hiiliatomin bentsodiatsepiinirungon 3-asemassa ja ne voivat esiintyå D-tai L-muodossa tai rasemaattina. Oheinen keksinto kattaa sekå kaavan I mukaisten yhdisteiden raseemiset seokset etta niiden : puhtaat optiset isomeerit.

Kaavan II mukaisten aminoyhdisteiden asylointi voidaan toteut-taa menetelmillå, joita kåytetåån tavallisesti amidiryhmitty-mien muodostamiseksi aminoasyloimalla. Asylointiaineena voidaan kåyttåa kaavan IIIa J? , IIIa

R--L. I -C-CH

Vv i « 92486 6 misså Re, R7 ja Z ovat edellå esitettyjen mååritelmien mukai-sia, mukaisia happoja tai niiden reaktiokykyisiå johdannaisia. Reaktiokykyisinå johdannaisina voidaan kåyttåå erityisesti seka-happoanhydridejå, estereitå ja happohalogenideja. Reak-tiiviset ryhmåt Y voivat tarkoittaa esimerkiksi alempaa alkok-sia, halogeeneja kuten klooria tai bromia tai edullisesti orgaanisia sulfonihappojåånnoksiå. Tållaisia jåånnoksiå ovat esimerkiksi (alempi alkaani)-sulfonihappojen kuten metaanisul-fonihapon jåånnokset tai aromaattisten sulfonihappojen kuten bentseenisulfonihapon jåånnokset tai alemmalla alkyylillå tai halogeenilla substituoituneiden bentseenisulfonihappojen kuten tolueenisulfonihappojen tai bromisulfonihappojen jåånnokset. Asylointi voidaan toteuttaa reaktio-olosuhtei6sa inertisså orgaanisessa liuottimessa, edullisesti låmpotilassa, joka on -20 * C: n ja huoneen lmåmpotilan vålisså. Sopivia liuottimia ovat erityisesti halogenoidut hiilivedyt kuten dikloorimetaani tai aromaattiset hiilivedyt kuten bentseeni tai tolueeni tai sykliset eetterit kuten tetrahydrofuraani tai dioksaani tai nåiden liuottimien seokst.

Asylointi voidaan toteuttaa tarkoituksenmukaisesti happoa sitovan reagenssin låsnåollessa, erityisesti silloin, kun asylointiaineena kåytetåån kaavan Illa mukaisen hapon ja sul-fonihapon vålistå seka-anhydridiå. Happoa sitovana aineena voidaan kåyttåå reaktioseokseen liukoisia emåksiå, erityisesti orgaanisia emåksiå kuten tertiåårisiå (alempi alkyyli)amiineja ja pyridiinejå kuten esimerkiksi trietyyliamiinia, tripropyy-liamiinia, pyridiiniå, 4-dimetyyliaminopyridiiniå, 4-dietyyli-aminopyridiiniå tai 4-pyrrolidinopyridiiniå. Ylimåårinå kåyte-tyt orgaaniset emåkset voivat toimia samanaikaisesti liuotti-mena.

I ·

Kaavan Illa ja orgaanisten sulfonihappojen vålisiå seka-hap-poanhydridejå voidaan edullisesti valmistaa in situ saattamal-la happo IIIa reagoimaan happohalogenidin, erityisesti orgaani-sen sulfonihapon happokloridin kanssa, minkå jålkeen ne voidaan saattaa edelleen reagoimaan, niitå eriståmåttå, kaavan II

II

7 92486 mukaisen aminoyhdisteen kanssa.

Mikali asylointiaineena kåytetåån itse happoa tai myos este-riå, niin kaavan II mukaisen aminoyhdisteen reaktio kaavan Illa mukaisen hapon tai sen esterin kanssa voidaan toteuttaa tarkoituksenmukaisesti myos peptidikemiasta tunnetun, amidin muodostukseen sopivan kytkentåreagenssin låsnåollessa. Esi-merkkeinå kytkentåreagensseista, jotka ediståvåt amidin muo-dostumista vapaiden happojen kanssa siten, ettå ne reagoivat hapon kanssa in situ ja muodostavat reaktiokykyisen happojoh-dannaisen, voidaan mainita erityisesti alkyylikarbodi-imidi, esimerkiksi sykloalkyylikarbodi-imidi, kuten disykloheksyyli-karbodi-imidi, tai l-etyyli-3-[3-(dimetyyliamino)-propyyli]-karbodi-imidi, karbonyylidi-imidatsoli ja N-(alempi alkyyli)- 2-halogeenipyridiniumsuolat, erityisesti halogenidit tai tosy-laatit, edullisesti N-metyyli-2-klooripyridiniumjodidi (katso esim. julkaisu Mukaiyama, Anqew. Chemie, 91 789-812). Reaktio kytkentåreagenssin låsnåollessa voidaan toteuttaa tarkoituksenmukaisesti alueella -30 - +50 *C olevissa låmpotiloissa kåyttåen esimerkiksi sellaisia liuottimia kuten halogenoituja hiilivetyjå ja/tai aromaattisia liuottimia, mahdollisesti happoa sitovan amiinin låsnåollessa.

Kaavan I mukaiset yhdisteet voidaan eriståå ja puhdistaa reak-tioseoksesta sinånså tunnetulla tavalla. Happoadditiosuolat voidaan muuntaa tavalliseen tapaan vapaiksi emåksiksi ja nåmå emåkset voidaan muuntaa toivottaessa tunnetulla tavalla farmakologisesti siedettåviksi happoadditiosuoloiksi. Kaavan I mukaisten yhdisteiden farmakologisesti hyvåksyttåviksi suo-loiksi sopivat esimerkiksi niiden suolat epåorgaanisten happojen, kuten esimerkiksi halogeenivetyhappojen, erityisesti kloorivetyhapon, rikkihapon tai fosforihappojen kanssa tai niiden suolat orgaanisten happojen, esimerkiksi alempien ali-faattisten mono- tai dikarboksyylihappojen kuten maitohapon, maleiinihapon, fumaarihapon, viinihapon tai etikkahapon tai sulfonihappojen kuten (alempi alkyyli)-sulfonihappojen, esimerkiksi metaanisulfonihapon tai bentseenirenkaastaan mahdol- 92486 lisesti halogeenilla tai alemmalla alkyylillå substituoitunei-den bentseenisulfonihappojen kuten p-tolueenisulfonihapon tai sykloheksyyliaminosulfonihapon kanssa.

Mikåli synteesisså kåytetåån kaavan II mukaisten yhdisteiden rasemaatteja, niin kaavan I mukaiset yhdisteet saadaan rase-maatteina. Mikåli låhtoaineena kåytetåån kaavan II mukaisten yhdisteiden optisesti aktiivisia muotoja, niin tålloin voidaan saada kaavan I mukaisia, optisesti aktiivisia yhdisteitå. Kaavan I mukaisia, optisesti aktiivisia yhdisteitå voidaan saada raseemisista seoksista sinånså tunnetulla tavalla, esi-merkiksi kromatografisella erotuksella kåyttåen kiraalisia erotusmateriaaleja tai antamalla yhdisteiden reagoida sopi-vien, optisesti aktiivisten happojen, esimerkiksi viinihapon tai 10-kamferisulfonihapon kanssa, minkå jålkeen saadut suolat erotetaan optisesti aktiivisiksi antipodeikseen fraktioivalla kiteytyksellå.

Kaavan II mukaiset amiiniyhdisteet ovat tunnettuja tai ne voidaan valmistaa sinånså tunnetuilla menetelmilla tai analogisesti sinånså tunnettujen menetelmien kanssa. Tåten, kaavan II mukaisia amiiniyhdisteitå voidaan saada sinånså tunnetulla tavalla pelkiståmållå ettå kaavan IV

R1 ,3/ [» .. misså R1, R2, Rs ja R* ovat edellå esitettyjen mååritelmien mukaisia, mukainen oksiimiyhdiste. Kaavan IV mukaisten oksii-mien pelkiståminen kaavan II mukaisiksi amiineiksi voidaan toteuttaa tavallisilla menetelmillå, esimerkiksi katalyytti-sesti hydraamalla edullisesti Raney-nikkeli-katalyytin låsnå-ollessa tai kåyttåen pelkistimenå sinkki/jååetikka-seosta. Sinkki/jååetikka-seoksella pelkistettåesså saattaa olla edul-

II

92486 g lista lisåtå halogenoitunutta orgaanista karboksyylihappoa sinkin aktivoimiseksi.

Kaavan II mukaiset yhdisteet sisåltåvåt bentsodiatsepiinirun-gon 3-asemassa kiraalisen hiiliatomin. Niitå saadaan syntee-sistå rasemaatteina. Optisesti aktiiviset yhdisteet voidaan saada raseemisista seoksista sinånså tunnetulla tavalla, esi-merkiksi kromatografisella erotuksella kåyttåen kiraalisia erotusmateriaaleja tai antamalla yhdisteiden reagoida sopi-vien, optisesti aktiivisten happojen, esimerkiksi viinihapon tai 10-kamferisulfonihapon kanssa, minkå jålkeen saadut suolat erotetaan optisesti aktiivisiksi antipodeikseen fraktioivalla kiteytyksellå. Erotusta vårten kaavan II mukaisten amiinien raseemiset seokset voidaan ensin saattaa reagoimaan optisesti aktiivisen aminohapon, esimerkiksi fenyylialaniinin kanssa peptidikemiassa tavanomaisilla menetelmillå, jolloin saadaan tåmån optisesti aktiivisen aminohapon vastaavia amideja. Niin-på kaavan II mukaiset raseemiset yhdisteet voidaan esimerkiksi saattaa reagoimaan sellaisen aminohapon kanssa, jonka NHa-ryh-måå suojaa peptidikemiasta tuttu suojaava ryhmå, esimerkiksi tert. -butoksikarbonyyli (BOC-ryhmå), minka jålkeen suojaava ryhmå irroitetaan uudestaan sinånså tunnetulla tavalla. Tållå tavalla syntyvå diastereomeerinen amidipari voidaan erottaa tunnetulla tavalla, esimerkiksi fraktioivalla kiteytyksellå tai kromatografisesti, minkå jålkeen kaavan II mukainen amino-yhdiste vapautetaan amideista sinånså tunnetulla tavalla.

Kaavan IV mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa sinånså tunnetulla tavalla nitrosoimalla kaavan V mukaiset yhdisteet R1 i-/'0 r2—CXJ/ v R^/ I i.

:· misså R1, R2, R3 ja R4 ovat edellå esitettyjen mååritelmien 10 92486 mukaisia. Tarkoituksenmukaisesti kaavan V mukaisia, 3-asemas-taan substituoitumattomia yhdisteitå kåsitellåån ensin reak-tio-olosuhteissa inertisså orgaanisessa liuottimessa, esimer-kiksi aromaattisessa hiilivedysså kuten bentseenisså tai tolu-eenissa tai syklisesså eetterisså kuten tetrahydrofuraanissa, vahvalla emåksellå, esimerkiksi alkalimetallialkoholaatilla kuten kalium-tert. -butylaatilla, minkå jålkeen ne saatetaan reagoimaan nitrosointiaineen, esimerkiksi (alempi alkyyli)-nitriitin kuten isoamyylinitriitin tai tert. -butyylinitriitin kanssa.

Yleisen kaavan Va R1' I o H2-Va r3// i*

misså R1' on R1: Ile esitetyn mååritelmån mukainen vetyå lukuu-nottamatta, ja R2, R3 ja R4 ovat edellå esitettyjen mååritel-mien mukaisia, yhdisteitå voidaan saada sinånså tunnetulla tavalla hapettamalla kaavan VI

R1’ .... *j ch2ci

,!-pcT

R? R4 misså R1', R2, R3 ja R4 ovat edellå esitettyjen mååritelmien mukaisia, mukaisia 2-kloorimetyyli-l, 4-bentsodiatsepiiniyhdisteitå sinånså tunnetulla tavalla. Hapettaminen voidaan toteut-taa esimerkiksi kåsittelemållå kaavan VI mukaisia yhdisteitå sopivalla hapettimella reaktio-olosuhteissa inertisså liuotti-messa. Hapettimena voidaan kåyttåå esimerkiksi kaliumpermanga-naattia, kromitrioksidia tai dikromaattisuoloja. Nåiden hapet-

II

92486 11 timien suhteen inertteinå liuottimina voidaan kåyttåå esimer-kiksi halogenoituja hiilivetyjå kuten dikloorimetaania, vettå tai etikkahappoa tai niiden seoksia.

Kaavan VI mukaiset låhtoyhdisteet ovat tunnettuja tai niitå voidaan valmistaa sinånså tunnetuilla menetelmillå tai analogisesti nåiden menetelmien kanssa. Nåitå yhdisteitå voidaan saada esimerkiksi tunnetulla tavalla, saksalaisissa patentti-julkaisuissa DE 22 21 558 ja DE 25 20 937 kuvattujen menetel-mien mukaisesti kåyttåen låhtoaineena 2-hydroksi-l, 3-diaminop-ropaaniyhdisteitå, joilla on yleinen kaava VIII

Ϊ

/N-CK^-CH-CK^-NH-C-A

.,2 2 | 2 || vin Γ· -OH 0 misså R1' , R2, R* ja R* ovat edellå esitettyjen mååritelmien mukaisia. Kaavan VIII mukaiset yhdisteet syklisoidaan kåsitte-lemållå niitå fosforioksiditrikloridilla. Tåtå tarkoitusta vårten kaavan VIII mukaisia yhdisteitå tai niiden happoaddi-tiosuoloja kåsitellåån fosforioksiditrikloridilla alueella 100-150 ‘C olevassa låmpotilassa, edullisesti reaktioseoksen .. kiehumi s låmpotilassa. Tållå tavalla saadaan kaavan VI mukaisen

2-kloorimetyyli-l,4-bentsodiateepiiniyhdisteen ja sen kanssa isomeerisen, kaavan VII

Λ '-fO" misså R1' , R2, R3 ja R4* ovat edellå esitettyjen mååritelmien mukaisia, mukaisen 3-kloori-l, 5-bentsodiatsosiiniyhdisteen .. vålinen seos. Seoksessa låsnåoleva, kaavan VII mukainen bentso- 12 92486 diatsosiiniyhdiste voidaan muuntaa sinånså tunnetulla toisiin-tumisreaktiolla, esimerkiksi kuumentamalla seosta reaktio-olo-suhteissa inertisså orgaanisessa liuottimessa, esimerkiksi korkeassa låmpotilassa kiehuvassa halogeenihiilivedysså kuten tetrakloorietaanissa, kaavan VI mukaiseksi, mainitun yhdisteen kanssa isomeeriseksi yhdisteeksi.

Kaavan VIII mukaisten 2-hydroksi-1, 3-diaminopropaaniyhdistei-den valmistuksessa voidaan låhtoyhdisteinå kåyttåå aniliineja, joilla on kaava IX

R2_lif'V'’ 2 p

misså R2 ja R3 ovat edellå esitettyjen mååritelmien mukaisia. Ensin nåisså aniliineissa aminoryhmå substituoidaan sinånså tunnetulla tavalla yhdellå R1' -ryhmållå, minkå jålkeen ne saatetaan reagoimaan analogisesti patenttijulkaisussa DE-OS 28 10 349 kuvatulla menetelmållå 1,2-epoksipropyyliftaali-imi-din tai ensin epikloorihydriinin ja sitten ftaali-imidin kanssa. Tåmån jålkeen ftaali-imidiryhmå irroitetaan sinånså tunnetulla tavalla ja saadut kaavan X

RV

«’-pr .

misså R1' , R2 ja R3 ovat edellå esitettyjen mååritelmien mukaisia, mukaiset yhdisteet asyloidaan happohalogenideilla, • · 1

joilla on kaava XI

R« - CO - Cl XI

misså R* on edellå esitetyn mååritelmån mukainen.

• ·

II

92486 13

Kaava V mukaisia yhdisteitå voidaan saada myos sinånså tunne- tulla tavalla låhtemållå ketoneista, joilla on yleinen kaava XII -

R

NK

. “ misså R1, R2, R3 ja R4 ovat edellå esitettyjen mååritelmien

mukaisia, siten, ettå nåmå ketonit saatetaan reagoimaan halo-geenietikkahappohalogenidin kanssa yhdisteiksi, joilla on kaava XIII

R1 N-CO-CK-Hal a5 b misså R1, R2, R3 ja R·4 ovat edellå esitettyjen mååritelmien mukaisia ja Hal tarkoittaa klooria tai bromia, minkå jålkeen nåmå yhdisteet kondensoidaan ammoniakin kanssa kaavan V mukai-. siksi yhdisteiksi.

«

Kaavan XII mukaiset ketonit ovat tunnettuja tai ne voidaan valmistaa sinånså tunnetuilla menetelmillå tai analogisesti nåiden menetelmien kanssa, esimerkiksi siten, ettå kaavan IX mukaiset p-substituoituneet aniliinit saatetaan reagoimaan kaavan XI mukaisten happohalogenidien kanssa esimerkiksi Frie- « ·

del-Kraft-reaktiossa, mitå seuraa hydrolyysi, tai låhtemållå antraniilihapoista, jotka kondensoidaan ensin etikkahappoan-hydridin kanssa, tåmå kondensaatiotuote saatetaan reagoimaan Grignardin reaktiossa yleisen kaavan XIV

R·4 - MgBr XIV

14 92486 misså R* on edellå esitetyn mååritelmån mukainen, mukaisten yhdisteiden kanssa, jolloin saadaan kaavan XII mukaisten yhdis-teiden N-asetyylijohdannaisia, jotka hydrolysoidaan.

Kaavan V, misså R1 tarkoittaa vetyå, mukaiset yhdisteet voi-daan alkyloida sinånså tunnetulla tavalla toisiksi kaavan V mukaisiksi yhdisteiksi, esimerkiksi saattamalla ne reagoimaan yleisen kaavan XV mukaisten yhdisteiden kanssa

R1' - Hal XV

misså R1' on edellå esitetyn mååritelmån mukainen ja Hal tarkoittaa klooria, bromia tai jodia.

Kaavan Hib R--C ΤΛ—C-OR9 Hib ζ-Α/Ί

misså R® ja Z ovat edellå esitettyjen mååritelmien mukaisia ja R* tarkoittaa alempaa alkyyliå, mukaisia estereitå voidaan saada sinånså tunnetulla tavalla låhtemållå yhdisteistå, joil-la on kaava XVI

rS—O

X>

misså R® ja Z ovat edellå esitettyjen mååritelmien mukaisia, siten, ettå kaavan XVI mukaiset yhdisteet muunnetaan natrium-nitriitillå kåsittelemållå vastaaviksi N-nitrosoyhdisteiksi, jotka pelkistetåån hydratsiiniyhdisteiksi, joilla on yleinen kaava XVII

XVII

misså R® ja Z ovat edellå esitettyjen mååritelmien mukaisia, minkå jålkeen kaavan XVII mukaiset hydratsiiniyhdisteet saa-• tetaan edelleen reagoimaan yleisen kaavan XVIII

II

,5 92486

CHa - C - CO - OR® XVIII

O

misså R® on edellå esitetyn mååritelmån mukainen, mukaisten palorypålehapon (alempien alkyyli)estereiden kanssa sinånså tunnetulla tavalla Fischer:in indolisynteesin olosuhteissa, jolloin vålituotteena muodostuu hydratsoniyhdisteitå, joilla on kaava XIX

?-5 -Ol /c:- ^0"N=C\ 9

XC-OFT

II

o misså Re, R® ja Z ovat edellå esitettyjen mååritelmien mukai- sia, ja jotka yhdisteet kondensoituvat edelleen kaavan Hib mu- kaisiksi estereiksi. Nitrosoyhdisteitå pelkistettåesså pelkis- timenå voidaan kåyttåå esimerkiksi litiumalumiinihydridiå tetrahydrofuraanissa tai metallista sinkkijauhetta hapon lås- nåollessa. Mahdollista on myos nitrosoyhdisteiden katalyytti- nen hydraaminen kaavan XVII mukaisiksi hydratsiineiksi. Kaavan

Hib mukaisten estereiden valmistus voidaan toteuttaa edulli- sesti kaavan XVI mukaisista yhdisteistå låhtemållå sekoitusme- netelmåå kåyttåen, yksittåisiå vålivaiheita eriståmåttå. Tåsså . menetelmåsså N-nitrosoyhdisteen pelkiståmisen jålkeen saatua, « « kaavan XVII mukaista hydratsiiniyhdistettå sisåltåvåå, sinkki-suolapitoista reaktioseosta tehdåån edelleen happamammaksi suo-lahappoa lisååmållå, minkå jålkeen reaktioseokseen lisåtåån kaavan XVIII mukaista palorypålehapon esteriå. Kun reaktioseokseen lisåtåån kaavan XVIII mukaista palorypålehapon esteriå, .. ni in vålituotteena saadaan kaavan XIX mukainen hydrats oniyh- diste, joka kondensoituu edelleen kaavan Hib mukaiseksi este-riksi vallitsevissa reaktio-olosuhteissa.

Kaavan Hib mukaiset esterit voidaan hydrolysoida sinånså tunnetulla tavalla vastaaviksi hapoiksi ja/tai muuntaa nåiden . happojen reaktiiviseksi happojohdannaiseksi.

16 92486

Happohalogenidiksi muunnettaessa yhdisteeseen sisållytetåån samalla halogeenisubstituentti Rs.

Keksinnon mukaisilla 1,7-anelloiduilla lH-indoli-2-karboksyy-lihappo-N-(1,4-bentsodiatsepin-3-yyli)-amidi-johdannaisilla ja niiden farmakologisesti hyvåksyttåvillå happoadditiosuoloilla on arvokkaita farmakologisia ominaisuuksia, erityisesti CCK-antagonistista vaikutusta, ja niiden tunnusomaisena piirteenå on uudenlainen edullinen vaikutusprofiili. Niinpå keksinnon kohteena olevilla, kaavan I mukaisilla, CCK-antagonistien tavoin vaikuttavilla yhdisteillå on erinomaista mahan tyhje-nemistå ediståvåå vaikutusta sekå myos CCK-indusoituun ekso-kriiniseen haimaeritykseen kohdistuvaa estovaikutusta. Nåillå yhdisteillå on mahan tyhjenemistå ediståvållå annosalueella vain våhåistå sappirakon supistumieta eståvåå sivuvaikutusta, ja niiden tunnusomaisena piirteenå on pieni toksisuus ja laaja hoitovaikutus. Edullisen vaikutusprofiilinsa ansiosta nåitå yhdisteitå voidaan kåyttåå CCK-indusoitujen mahan tyhjenemis-håirioiden kåsittelyyn.

CCK kåsittåå ketjuiltaan eripituisia peptidejå ja se toimii hormonina sekå neuropeptidinå. CCK-peptideistå oktapeptidi CCK-8 on pienin yksikko, jolla on tåydellinen CCK-vaikutus- spektri. Tåstå syystå seuraavat farmakologiset kokeet toteutet- . tiin CCK-8-peptidillå.

• ·

Koemenetelmien kuvaus 1. Menetelmå, jolla måaritettiin testattavien aineiden kyky sitoutua CCK-ååreisreseptoreihin

Kaavan I mukaisten yhdisteiden affiniteetti CCK-ååreisreseptoreihin mååritetåån in vitro rotan haiman homogenaatilla. Mene-telmållå mååritetåån testattavien aineiden kyky eståå fysiologisesti vastaavan oktapeptidin CCK-8 sitoutuminen CKR-ååreisre-septoreihin.

II

92486 17

Reseptoreihin sitoutumiseen kohdistuneet tutkimukset toteutet-tiin julkaisussa van Dijk et al, J. Neuroscience £ ( 1984), 1021-1033 kuvatun menetelmån muunnoksella, jossa proteaasin inhibiittorina kaytettiin soijapapujen trypsiinin inhibiitto-ria (SBTI). Tritiumilla merkittyna CCK-8-peptidinå kaytettiin yhtion Amersham Int. tuotetta 3[H]-CCK-8, koodi TRK 775, jonka ominaisaktiivisuus oli 60-90 Ci/mmol.

Urospuoliset Wistar-rotat, joiden ruumiinpaino oli 150-300 g, tapettiin poistamalla niiden paå, minkå jålkeen koko haimarau-hasista poistettiin rasvakudos, ja haimoja homogenoitiin 15 sekuntia Kinematica Polytron-tyypin homogenisaattorilla 50-ker-taisessa tilavuudessa jååkylmåå koepuskuriliuosta (10 mmol 2-[4-(2-hydroksietyyli)-piperatsin-1-yyli Jetaanisulfonihappoa (=HEPES), 130 mmol natriumkloridia, 5 mmol magnesiumkloridia, 0,02 % basitrasiinia, 0,01 %SBTI, pH 7,4]. Sitten homogenaat-teja sentrifugoitiin 10 minuutin ajan nopeudella 48 000 x g. Tåmå pesutoimenpide toistettiin. Viimeisen sentrifugoinnin jålkeen kulloinkin kasaumana saatu jåånnos suspendoitiin 500-kertaiseen tilavuuteen koepuskuriliuosta ja kaytettiin vålit-tomåsti mittauksen toteuttamiseen.

Sitoutumiskoetta vårten inkuboitiin seosta, joka sisalsi 500 μΐ kudoshomogenaattia ja 50 μΐ koepuskuriliuosta tai 50 μΐ tutkittavan yhdisteen liuosta seka 50 μΐ *[H]-CCK-8-liuosta (lopullinen pitoisuus 0,3 nM). Epaspesifiseksi sitoutumiseksi oletettiin 0, 1 μ mol CCK-8: aa. Inkubointi kesti 90 minuuttia 25 *C:ssa. Kaikki yhdisteet mååritettiin useina pitoisuuksina 3 kertaan.

.. Testattavien aineiden liuoksina kaytettiin vesiliuoksia, jotka valmistettiin veteen tehdyistå 60 x 10-“-molaarisista kanta-liuoksista sopivasti laimentamalla. Veteen niukkaliukoiset testattavat aineet liuotettiin ensin 96 % etanoliin, ja tåtå liuosta liuotettiin sitten niin suurella måårållå vettå, ettå etanolipitoisuus testattavassa liuokeessa oli korkeintaan 1,6 i til. -%.

18 92486

Sitoutunut ja vapaa 3[H]-CCK-8 erotettiin toisistaan lasikuitu-suodattimen låpi suodattamalla. Suodattimet pestiin kahdesti kulloinkin 3 ml: 11a HEPES-liuosta, minkå jålkeen ne laitettiin yoksi tuikeliuokseen (yhtion Packard tuikeliuos SAVE) pimeåån paikkaan ja laskettiin yhtion Packard nestetuikelaskurilla (tyyppi tri-carb 1500 C). Kunkin testatun aineen ICso-arvoksi mååritettiin se pitoisuus, joka esti 50-prosenttisesti tritiu-milla merkityn CCK-8: n spesifisen sitoutumisen reseptoreihin. Tåmån arvon avulla vastaava pKi-arvo laskettiin Cheng-Prusoff-yhtålostå.

Seuraavassa taulukossa A on esitetty edellå kuvatulla koemene-telmållå saadut pKi-arvot, jotka kuvaavat testattujen aineiden affiniteettia CCK-ååreisreseptoreihin. Kaavan I mukaisiin yhdisteisiin liitetyt esimerkkinumerot viittaavat jåljempånå esitettyihin valmistusesimerkkeihin.

2. Pienimmån toksisen annoksen måårittåminen

Uroshiirille, jotka painoivat 20-25 g, annettiin suun kautta suuri annos (300 mg/kg) testattavia aineita. Elåimiå tarkkail-tiin 3 tunnin ajan huolellisesti toksisuusoireiden havaitse-miseksi. Lisåksi kaikki oireet ja kuolemantapaukset merkittiin muistiin 24 tunnin pituisen ajanjakson ajan antamisen jålkeen.

• »

Samoin oheisoireiden esiintymistå tarkkailtiin ja ne merkittiin muistiin. Mikåli elåin kuoli tai mikåli sillå todettiin voimakkaita myrkytysoireita, niin muille elåimille annettiin testattavia aineita jatkuvasti pienempinå annoksina. Se pienin annos, joka vielå aiheutti kuoleman tai voimakkaita myrkytysoi-·· reita, on esitetty pienimpånå toksisena annoksena seuraavassa taulukossa A.

II

92486 19

Taulukko A

esi- sitoutuminen in vitro pienin toksinen annos merkki CCK-ååreisreseptoreihin hiiriBså (p.o.), _(haima), pKi-arvot_mq/kq_ 1 8,87 >300 2a 9, 59 2b 7,71 4 8,60 >300 5 8, 84 >300 6 8, 49 8 8, 04 9 9, 10 >300 10 8, 75 300 11 8, 62 300 13 9,00 >300 15 8,91 17 8,00 18 8,93 >300 20 9, 07 >300 22 9, 04 >300 23 8, 00 >300 25 7, 62 >300 26 8, 21 30 8, 63 300 33 8, 43 >300 37 9, 19 38 9, 01 3. Menetelmå, jolla mååritettiin testattavien yhdisteiden vaikutus CCK-indueoituihin mahan tyhjenemishairioihin CCK: n antaminen johti siihen, ettå ravintomassan kulkeutuminen mahaportin låpi mahasta pohjukkaiseuoleen salpautui suureksi osaksi. Menetelmållå mååritettiin teetattavien aineiden kyky eståa CCK: n tåtå salpaamisvaikutusta.

20 92486

Menetelmåsså kåytettiin NMRI-kantaan kuuluvia naarashiiriå, jotka painoivat 20-25 g, ja joista oli muodostettu kulloinkin 10 elåintå kåsittåviå ryhmiå. Sen jålkeen, kun elåimiå oli pidetty ravinnotta 24 tuntia (juomavettå vapaasti), niille annettiin testattavaa ainetta suun kautta 10 ml painokiloa kohden 1 % TyloosiR-liuokseen (metyyliselluloosaa) suspendoitu-na tai 10 ml painokiloa kohden liukenemista ediståvån aineen liuoksena, joka sisålsi 5 % glyseriiniå, 87 % polyetyleenigly-koli 400:aa sekå 8 % vetta. Vertailuryhmålle annettiin kul loinkin vain TyloosiR-1iuosta tai liukenemisen ediståjånå toimivaa polyetyleeniglykolia sisåltåvåå liuosta. 60 minuutin kuluttua elåimiin injektoitiin ihon alaisesti 80 μg/kg CCK-8: aa. Edelleen 5 minuutin kuluttua elåimille annettiin suun kautta kulloinkin 0, 3 ml hiilimassaa (5 % hiiltå 2-pro-senttisessa tyloosiliuoksessa). Elåimet tapettiin 5 minuutin kuluttua ja ne avattiin sen selvittåmiseksi, oliko hiilimassa edennyt pohjukkaissuoleen.

Vertailuolosuhteissa, jossa ei annettu CCK: ta, kaikkien hiir-ten pohjukkaissuolesta voitiin loytåå hiilimassaa, kun taas vertailuelåinryhmåsså, jossa annettiin CCK: ta, ravintomassan kulkeutuminen pohjukkaissuoleen oli estynyt ja vain 5 %: 11a elåimistå pohjukkaissuolesta voitiin havaita jålkiå hiilimas-sasta. Sitten testattavien aineiden antamisen jålkeen selvitet-tiin, kuinka monen elåimen (prosentteina) tapauksessa CCK-vaikutus oli estynyt siten, ettå pohjukkaisuolesta loytyi hiilimassaa.

Seuraavassa taulukossa B on esitetty edellå kuvatulla menetel-mållå saadut, testattavien aineiden siihen annoskokoon liitty- .. våt tulokset, joka annos esti CCK-vaikutuksen våhintåån • · 40 %: ssa elåimistå. Kuten taulukosta voidaan todeta, testattu-jen aineiden vaikutusta voidaan usein tehostaa olennaisesti antamalla niitå liukenemisen ediståjånå toimivaa PEG 400: aa sisåltavåsså liuoksesea.

II

92486 21

Taulukko B

CCK-indusoituihin mahan tyhj enemi s håi ri oi hin kohdistuva CCK-antagonistinen vaikutus Esi- p. o. -annos, hiiri, CCK-vaikutuksen estyminen merkki umol/kg_elaimissa , %_ 1 0,215 50 2a 0,1 100 2b 10 70 4 1,0 45 5 10 75 6 0, 681 40 9 0, 215 50 10 0, 1 40 13 10 83 1,0* 100 15 1,0 57 0, 10* 90 17 1,0* 50 20 1, 0 50 27 1, 0 40 33 1, 0 50 * annettu liukenemisen ediståjåå sisåltåvåsså liuoksessa.

4. Menetelma, jolla mååritettiin aineiden estovaikutus CCK-in-dusoituun sappirakon tyhjenemiseen CCK aiheuttaa sappirakon lihasten supistumista ja saa nåin olien aikaan sappirakon tyhjenemisen. Tåma johtaa sappirakon painon pienenemiseen verrattuna elåimiin, joita ei olia kasi- • · « telty CCK: 11a. Kun CCK-8: aa annetaan vatsaontelon sisåisesti 0, 1 ug/kg, voi sappirakon paino pudota jopa kymmenenteen osaan alkuperåisestå painosta.

Kokeessa kåytettiin NMRI-kantaan kuuluvia naarashiiriå, joiden paino oli 20-25 g, ja joista oli muodostettu kulloinkin 10 22 92486 elåimen ryhmiå. Sen jålkeen, kun elåimiå oli pidetty ravinnot-ta 24 tuntia (juomavettå vapaasti), niille annettiin testatta-vaa ainetta suun kautta 10 ml painokiloa kohden 1 % TyloosiR- liuokseen (metyyliselluloosaa) suspendoituna tai 10 ml painokiloa kohden liukenemista ediståvån aineen liuoksena, joka sisal-si 5 % glyseriiniå, 87 % polyetyleeniglykoli 400: aa sekå 8 % vettå. Kahdelle vertailuryhmålle annettiin kulloinkin vain TyloosiR-1iuosta tai liukenemisen ediståjånå toimivaa polyety-leeniglykolia sisåltåvåå liuosta. 60 minuutin kuluttua yhden vertailuryhmån elåimiin ja kaikkiin testattavalla aineella kå-siteltyihin elåimiin injektoitiin vatsaontelon sisåisesti 0, 1 μg/kg CCK-8:aa. Elåimet tapettiin 5 minuutin kuluttua ja sappi-rakot poistettiin ja punnittiin.

Seuraavassa taulukossa C on esitetty prosentteina testattujen aineiden kyky eståå sappirakon painoon kohdistuva CCK-8-vaiku- tus.

Taulukko C

Sappirakkoon kohdistuva CCK-antagonistinen vaikutus Esi- p. o.-annos, hiiri CCK-indusoidun sappirakon merkki_umol/kg _tyhjenemisen estyminen, % 1 10 66 1 <25 2a 0,46 16 2b 46 8,3 6 10 73 9 100 99 4,6 <25 15 100 100 10 <25 0,1* <25 20 10 25 33 10 19 li > · · 92486 23

Taulukoissa B ja C esitettyjå tuloksia vertaamalla todetaan, ettå testattujen aineiden CCK-antagonistiset vaikutukset sap-pirakkoon voidaan todeta vasta annoksilla, jotka ovat monta kertaa suurempia kuin ne annokset, jotka vaikuttavat CCK-indu-soituja mahan tyhjenemishåirioitå vastaan.

Kåytetyt annokset voivat vaihdella yksilostå toiseen sekå luonnollisestikin kåsiteltåvåstå tilasta, kåytetystå aineesta sekå antotavasta riippuen. Esimerkiksi ruuansulatuskanavan ulkopuolisesti annettavat valmisteet sisåltåvåt yleisesti våhemmån vaikuttavaa ainetta kuin suun kautta annettavat valmisteet. Yleisesti, suurille nisåkkåille, kuten ihmiselle, voidaan antaa lååkemuotoja, joiden yksikkoannos sisåltåå 5-50 mg vaikuttavaa ainetta.

Lååkkeinå kåytettåvistå kaavan I mukaisista yhdisteistå sekå niiden fysiologisesti siedettåvistå happoadditiosuoloista ja tavallisista farmaseuttisista apuaineista voidaan tehdå galee-nisia valmisteita kuten tabletteja, kapseleita, peråpuikkoja tai liuoksia. Kaavan I mukaiset yhdisteet liukenevat hyvin far-maseutiikassa tavallisia apuaineita sisåltåviin liuoksiin ja ne imeytyvåt hyvin. Galeenisia valmisteita voidaan tehdå si-nånså tunnetuilla menetelmillå kåyttåen tavallisia kiinteitå kantajia kuten esimerkiksi maitosokeria, tårkkelystå tai talk-... kia, tai nestemåisiå laimentimia, kuten esimerkiksi vettå, ras-vaisia oljyjå tai nestemåisiå paraffiineja, sekå kåyttåmållå tavallisia farmaseuttisia apuaineita, esimerkiksi tablettien hajoamista ediståviå aineita tai såilontåaineita.

Seuraavien esimerkkien tehtåvånå on havainnollistaa keksintoå edelleen, sitå kuitenkaan millåån tavalla rajoittamatta.

Esimerkki 1 3-[(4H-pyrrolo[3,2, 1-ij]-5, 6-dihydrokinoliini-2-karbonyyli)-amino]-8-metoksi-l-metyyli-2-okso-5-fenyyli-lH-2, 3-dihydro-1, 4-bentsodiatsepiini 24 92486 A) 43 g Ni-metyyli-Ni-(3-metoksifenyyli)-2-hydroksi-l, 3-diami- nopropaania ja 31 ml trietyyliamiinia liuotettiin 280 ml: aan dikloorimetaania. Tåmå liuos lisåttiin hltaasti pisaroittain jåisså jååhdytettyyn liuokseen, joka sisålsi 24,4 ml bentsoyy-likloridia 20 ml: ssa dikloorimetaania. Reaktioseosta sekoitet-tiin 1, 5 tuntia huoneen låmpotilassa. Tåmån jålkeen, reaktio-liuoksen jatkokåsittelemiseksi, se pestiin vedellå ja natrium-kloridiliuoksella ja liuotin poistettiin haihduttamalla. Jåån-noksenå saatiin 70,0 g raakaa Ni-metyyli-Ni-(3-metoksifenyyli ) -N2-bentsoyyli-2-hydroksi-l, 3-diaminopropaania. Jåånnds kiteytettiin uudestaan tolueenin ja isopropanolin seoksesta, jolloin saadun puhtaan tuotteen sulamispiste oli 87-89 *C.

B) Edellå saadun tuotteen (64 g) annettiin reagoida 64 ml: ssa fosforioksidi-trikloridia 1,5 tunnin ajan oljyhauteessa, jonka lampotila oli 130 * C. Seoksen annettiin jååhtyå, se laimennet-tiin dikloorimetaanilla ja liuokseen lisåttiin jååvettå. Or-gaaninen faasi erotettiin, se pestiin useaan kertaan vedellå, kåsiteltiin sitten laimealla natriumhydroksidiliuoksella ja pestiin uudestaan vedellå, kuivattiin natriumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Jåånnokseksi saatiin 56, 7 g oljymåistå raakatuotetta, joka oli seos, joka sisålsi noin 60 % 2-kloori-metyyli-l-metyyli-8-metoksi-5-fenyyli-2, 3-dihydro-lH-l, 4-bent-sodiatsepiinia ja noin 40 % 3-kloori-l-metyyli-9-metoksi-6- .. fenyyli-1, 2, 3, 4-tetrahydro-l, 5-bentsodiatsosiinia. Bentsodiat- sosiiniosan isomeroimiseksi raakaa seosta kuumennettiin palau-tusjååhdyttåen 222 ml: ssa tetrakloorietaania 30 minuutin ajan. Sitten tetrakloorietaani haihdutettiin ja jåljellå jåånyttå 2-kloorimetyyli-l-metyyli-8-metoksi-5-fenyyli-2, 3-dihydro-1H- 1,4-bentsodiatsepiinia kåytettiin tåmån enempåå puhdistamatta seuraavassa reaktiovaiheessa.

C) 56, 7 g edellå saatua tuotetta liuotettiin 285 ml: aan dikloorimetaania. Tåhån liuokseen lisåttiin 322 ml suolahapon 32-%: sta vesiliuosta, 2481 ml vettå ja 255 ml dikloorimetaania. Sitten siihen lisåttiin pisaroittain liuoe, joka sisalsi :· 32, 4 g kaliumpermanganaattia 660 ml: ssa vettå siten, ettå siså- li 92486 25 låmpotila pidettiin jåisså jååhdyttåmållå alle 15 ’C:ssa. Sitten reaktioseosta sekoitettiin vielå puoli tuntia huoneen låmpotilassa. Reaktioseoksen jatkokåsittelyå vårten siihen lisåttiin annoksittain kiinteåta natriumbikarbonaattia neutra-loitumiseen saakka. Sitten liuos erotettiin muodostuneesta sakasta asbestilietteen (kauppatuote TheoritR) låpi suodatta-malla, dikloorimetaanifaasi erotettiin ja vesifaasi uutettiin vielå kertaalleen dikloorimetaanilla. Yhdistetyt dikloorime-taaniuutteet pestiin laimealla natriumhydroksidilla ja sitten vedellå, ne kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Tållå tavalla saatiin 55 g raakatuotetta. Puhdas 1-me-tyyli-8-metoksi-2-okso-5-fenyyli-2, 3-dihydro-lH-1# 4-bentsodiat-sepiini eristettiin raakatuotteesta pylvåskromatografisesti si-likageelillå hieman korotetussa paineessa (pikakromatografia) kåyttåen eluenttina sykloheksaanin ja etikkahapon etyylieste-rin 4: 6-seosta. Tållå tavalla saatiin 15, 5 g oljymåistå puh-dasta tuotetta.

D) 15,5 g edellå saatua tuotetta suspendoitiin 293 ml: aan tolu-eenia. Suspensio jååhdytettiin -20 * C: n låmpotilaan, minkå jålkeen siihen lisåttiin 16,4 g kalium-tert.-butylaattia sa-malla sekoittaen ja seosta sekoitettiin vielå edelleen 15 minuuttia. Sitten seokseen lisåttiin, samalla jååhdyttåen, 9,4 ml isoamyylinitriittiå niin hitaasti, ettå reaktioseoksen låmpotila pysyi 0 * C: n alapuolella. Sitten seosta sekoitettiin vielå 30 minuuttia 0 *C:ssa. Reakti oseoksen jatkokåsittelemi-seksi se kaadettiin sekoitettuun seokseen, joka sisålsi 586 ml jååkylmåå vettå, 29 ml jååetikkaa ja 586 ml etikkahapon etyy-liesteriå. Seosta eekoitettiin voimakkaasti, minkå jålkeen orgaaninen faasi erotettiin ja vesifaasi uutettiin vielå ker-ran etikkahapon etyyliesterillå. Yhdistetyt orgaaniset faasit pestiin vedellå ja haihdutettiin. Tålloin saatiin 21 g raakatuotetta. Se kiteytettiin tolueenin ja etanolin seoksesta. Kiteet erotettiin ja emåliuos puhdistettiin vielå kerran pi-kakromatografisesti 100 g: 11a silikageeliå kåyttåen eluenttina sykloheksaanin ja etikkahapon etyyliesterin 4: 6-liuosta, minkå jålkeen se haihdutettiin. Jåånnos kiteytettiin etanolista ja 26 92486 yhdistettiin edellå saatuihin kiteisiin. Yhteenså saatiin 9,5 g 3-hydroksi-i mi no-1-metyy1i-8-metoks i-2-okso-5-fenyyli-2,3-di-hydro-lH-1,4-bentsodiatsepiinia, jonka sulamispiste oli 206-207 'C.

E) 9, 5 g edellå kuvatulla tavalla saatua tuotetta lisåttiin seokseen, joka sisålsi 700 ml jååetikkaa ja 80 ml trifluorie-tikkahappoa. Reaktioseoksen sisålåmpotila nostettiin 40 * C:een ja siihen lisåttiin annoksittain yhteenså 6, 9 g sinkkipolyå samalla sekoittaen, minkå jålkeen seosta sekoitettiin vielå 2 tuntia 40 *C:ssa ja siihen lisåttiin sitten vielå 1 g sinkkipolyå ja sitå sekoitettiin edelleen 1,5 tuntia 40 ’ C: n låmpo-tilassa. Seoksen jatkokåsittelemiseksi se laimennettiin tolu-eenilla, sen annettiin jååhtyå ja se haihdutettiin. Jåljelle jåånyt jåånnos liuotettiin dikloorimetaaniin ja pestiin natri umkarbonaatin vesiliuoksella ja vedellå. Kiintoaineet ero-tettiin TheoritR-kerroksen låpi imemållå, liuos kuivattiin ja haihdutettiin. Tållå tavalla saatiin 8, 1 g raakaa 3-amino-l-metyyli-8-metoksi-2-okso-5-fenyyli-2, 3-dihydro-lH-l, 4-bentso-diatsepiinia, jota kåytettiin seuraavassa reaktiovaiheessa H tåmån enempåå puhdistamatta.

F) 150 g 1, 2, 3, 4-tetrahydrokinoliinia liuotettiin 1,25 1: aan jååetikkaa. Tåhån liuokseen, joka jååhdytettiin jååhauteessa noin 15 ’ C: n sisålåmpotilaan, lisåttiin liuos, joka sisålsi 80 g natriumnitriittiå 300 ml: ssa vettå, minkå jålkeen reaktiose-osta sekoitettiin edelleen 45 minuutin ajan. Muodostunutta N-nitroso-1, 2, 3, 4-tetrahydrokinoliinia sisåltåvåån reaktio-liuokseen lisåttiin 1,5 tunnin aikana annoksittain 300 g sinkkipolyå pitåen reaktioseoksen sisålåmpotila alueella 15-20 *C

·· jååhauteessa jååhdyttåmållå. Sitten tåhån seokseen lisåttiin 1,75 1 vettå ja 1,25 1 suolahapon 32 %: sta vesiliuosta ja sitå sekoitettiin edelleen 1,5 tunnin ajan. Muodostunutta N-ami-no-1, 2, 3,4-tetrahydrokinoliinia ja sinkkisuolaa sisaltåneeseen happamaan reaktioseokseen lisåttiin 130 g palorypålehapon etyyliesteriå ja seo6ta kuumennettiin 1,5 tunnin ajan palau- .. tusjååhdyttåen ja se jåtettiin sitten seisomaan edelleen 16 tunniksi. Tålloin vålituotteena muodostunut hydratsoni konden-

II

27 92486 soitui in situ 4H-pyrrolo [ 3, 2, 1-i j ] - 5, 6-dihydrokinoliini-2-karboksyylihapon etyyliesteriksi. Reaktioseoksen jatkokåsitte-lemiseksi se uutettiin kahdesti yhteenså 5 litralla dikloori-metaania, dikloorimetaaniuutteet yhdistettiin, ne pestiin yhteensa 1 litralla vettå, kuivattiin natriumsulfaatilla ja haihdutettiin. Tållå tavalla saatiin 280 g raakaa 4H-pyrrolo-[3, 2, 1-ij)-5,6-dihydrokinoliini-2-karboksyylihapon etyylieste-riå, joka puhdistettiin kromatografisesti silikageelillå kåyt-tåen eluenttina dikloorimetaania. Tålloin saatiin 151,8 g puh-distettua tuotetta, jonka sulamispiste oli 70-72 * C.

G) 39 g 4H-pyrrolo[3, 2, 1-ij]-5, 6-dihydrokinoliini-2-karboksyy-lihapon etyyliesteriå liuotettiin 40 ml: aan etanolia ja tamå liuos lisåttiin huoneen låmpotilassa liuokseen, joka sisålsi 11,3 g kaliumhydroksidia veden (20 ml) ja etanolin (145 ml) seoksessa. Reaktioseosta sekoitettiin 90 minuuttia huoneen låmpotilassa, minkå jålkeen sen annettiin jååhtyå 10 * C:n låmpotilaan. Saostunut kiintoaine erotettiin imulla ja pestiin kolmasti kulloinkin 30 ml: 11a etanolia. Emåliuos haihdutettiin puoleen ja tålloin saostunut kiintoaine erotettiin samoin ja pestiin etanolilla.

Koko kiintoaine liuotettiin sitten 150 ml: aan vettå ja tåstå liuoksesta saostettiin happo tekemållå liuos happamaksi alu-eella 1-2 olevaan pH-arvoon våkevållå suolahapolla. Saostunut happo erotettiin, se pestiin kolmasti kulloinkin 40 ml:11a vettå ja se kuivattiin 60 * C: n låmpotilassa. Tållå tavalla saatiin 32,4 g 4H-pyrrolo[3, 2, 1-ij ]-5, 6-dihydrokinoliini-2-karboksyylihappoa, jonka sulamispiste oli 212-213 *C (Z).

(H) 5,4 g 4H-pyrrolo[3,2,1-ij]-5, 6-dihydrokinoliini-2-karbok- syylihappoa ja 3,67 ml trietyyliamiinia liuotettiin 119 ml: aan dikloorimetaania. Liuos jååhdytettiin -20 ’ C: n låmpotilaan ja siihen lisåttiin hitaasti pisaroittain, samalla sekoittaen, 2,08 ml metaanieulfonihappokloridia, minkå jålkeen reaktioseosta sekoitettiin edelleen 15 minuuttia -20 ’ C: n låmpotilassa. Metaanisulfonihaposta ja 4H-pyrrolo[3, 2, 1-ij]-5, 6-dihydrokino- 28 92486 liini-2-karboksyylihaposta muodostunutta seka-anhydridiå si-såltåvåån reaktioliuokseen lisåttiin alueella -15...-20 'C olevassa låmpotilassa pisaroittain, samalla sekoittaen, liuos, joka sisålsi 8 g vaiheessa E) saatua 3-amino-l-metyyli-8-metok-si-2-okso-5-fenyyli-2/ 3-dihydro-lH-l, 4-bentsodiatsepiinia ja 3, 67 ml trietyyliamiinia 100 ml: esa dikloorimetaania, reak-tioseosta sekoitettiin edelleen 30 minuuttia -15 ' C: n låmpoti-lassa ja sen annettiin låmmetå hitaasti (tunnin aikana) huo-neen låmpotilaan. Reaktioseoksen jatkokåsittelemiseksi se laimennettiin vedellå, dikloorimetaanifaasi erotettiin, pes-tiin natriumbikarbonaattiliuoksella ja sitten vedellå, kuivat-tiin natriumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin. Jåån-noksenå saatiin 14,3 g raakaa otsikon mukaista yhdistettå. Raakatuote puhdistettiin pylvåskromatografisesti 700 g:11a silikageeliå hieman korotetussa paineessa (pikakromatografia) kåyttåen eluenttina sykloheksaanin ja etikkahapon etyylieste-rin 1: 1-seosta. Tålloin saatiin 6, 1 g puhdistettua tuotetta. Se kiteytettiin 25 ml: sta etanolia, johon oli lisåtty våhån dikloorimetaania, ja kiteitå kuivattiin 2 vuorokautta 80 *C:ssa. Tålloin saatiin 3, 3 g raseemista 3-[ (4H-pyrrolo[3, -2, 1—i j]-5,6-dihydrokinoliini-2-karbonyyli)-amino]-8-metoksi-l-metyyli-2-okso-5-fenyyli-lH-2,3-dihydro-l, 4-bentsodiatsepiinia, jonka sulamispiste oli 175-178 * C.

Esimerkki 2 3-[(4H-pyrrolo[3,2,1—ij]-5,6-dihydrokinoliini-2-karbonyyli)-amino]-8-metoksi-l-metyyli-2-okso-5-fenyyli-lH-2, 3-dihydro-1, 4-bentsodiatsepiinin optisten isomeerien valmistaminen 2a: ( - )-isomeerin optinen kiertoarvo [a]aoD = -88,2* (c = 0,5 dikloorimetaanissa).

• « A) 30, 5 g raseemista 3-amino-l-metyyli-8-metoksi-2-okso-5-fe-nyyli-2,3-dihydro-lH-l,4-bentsodiatsepiinia (valmistettu analogisesti esimerkin 1E kanssa) liuotettiin 190 ml: aan dimetyy-liformamidia. Kosteuden pååsy tåhån liuokseen estettiin ja .. siihen lisåttiin peråkkåin 28,8 g N-tert. -butoksikarbonyyli- 92486 29 D-fenyylialaniinia (= BOC-D-fenyylialaniinia), 15 g 1-hydrok- sibentsotriatsolia, 20,7 g l-etyyli-3-[3-(dimetyyliamino)-pro-pyyli ] -karbodi-imidi-hydrokloridia ja 15 ml trietyyliamiinia. Reaktioseosta sekoitettiin 30 minuuttia huoneen låmpotilassa. Seoksen jatkokåsittelemiseksi dimetyyliformamidi poistettiin tislaamalla alennetussa paineessa ja jåånnos liuotettiin etik-kahapon etyyliesteriin. Liuosta ravisteltiin yhdesså sitruuna-hapon 10 % vesiliuoksen kanssa, faasit erotettiin toisistaan, vesifaasi uutettiin vielå kerran etikkahapon etyyliesterillå ja sitten yhdistetyt orgaaniset faasit pestiin natriumhydrok-sidin 10 % vesiliuoksella, vedellå ja keittosuolan vesiliuok- sella, kuivattiin natriumsulfaatilla ja suodatettiin. Liuotin poistettiin tislaamalla, jolloin saatiin 66 g raakatuotetta, joka puhdistettiin vielå kerran pikakromatografisesti 700 g: 11a silikageeliå kåyttåen eluenttina sykloheksaanin ja etikkahapon etyyliesterin 1: 1-seosta. Liuottimen haihduttamisen jålkeen saatiin 60 g 1,1-dimetyylietyyli-N-{(R)-2-[(2, 3-dihyd-ro-l-metyyli-2-okso-5-fenyyli-8-metoksi-lH-l, 4-bentsodiatse-pin-3-yyli)-amino]-2-okso-l-bentsyylietyyli)-karbamaattia diastereomeerien 1: l-seoksena.

B) 60 g edellå saatua diaetereomeeristå amidiseosta liuotettiin 480 ml: aan etikkahapon etyyliesteriå. Suojaavien BOC-ryhmien irroittamiseksi amideista liuos kyllåstettiin kaasu-maisella kloorivedyllå ja reaktioseosta sekoitettiin 30 minuuttia. Tålloin saostui vapautuneiden amiinien hydrokloridi-kiteitå, joihin oli rikastunut (-)-kiertåvåå diastereomeeria. Kiteet erotettiin imulla ja ne kiteytettiin kolmasti uudestaan etanolista, jolloin saatiin dikloorimetaaniliuoksessa (-)-kier-tåvån 3-fenyyli-2-amino-N-(2, 3-dihydro-l-metyyli-2-okso-5-fe-*· nyyli-8-metoksi-lH-l,4-bentsodiatsepin-3-yyli)-propionihappo- amidin diastereomeerisesti puhdasta hydrokloridia. Emåksen va-pauttamiseksi hydrokloridiin lisåttiin 10 %: sta natriumhydrok-sidia ja emås uutettiin vesifaasista etikkahapon etyyliesterillå. Orgaanisen faasin pesun, kuivaamisen ja haihduttamisen jålkeen saatiin 18,4 g diastereomeerisesti puhdasta 3-fenyyli- 2-amino-N-(2,3-dihydro-l-metyyli-2-okso-5-fenyyli-8-metoksi- 30 92486 IH-1, 4-bentsodiatsepin-3-yyli)propionihappoamidia.

Kiertoarvo [α]2°ο = -30,6’ (c = 0,5 dikloorimetaanissa).

C) 18,4 g edellå saatua, dikloorimetaaniliuoksessa (-)-kiertå-våå, diastereomeerisesti puhdaeta amidia liuotettiin 100 ml: aan dikloorimetaania. Kosteuden pååsy liuokseen estettiin ja siihen lisåttiin 5, 4 ml fenyyli-isotiosyanaattia ja reaktio-seosta sekoitettiin 10 minuuttia huoneen låmpotilassa. Sitten dikloorimetaani polstettiin tislaamalla alennetussa paineessa ja saatu jåånnos puhdistettiin pikakromatografisesti 500 g: 11a silikageeliå kåyttåen eluenttina sykloheksaanin ja etikkahapon etyyliesterin 1: 1-seosta. Liuottimen haihduttamisen jålkeen saatiin vaahtohartsia, joka kiteytettiin etanolista. Tålloin saatiin 20,1 g Ni-fenyyli-Na-{2-[(2, 3-dihydro-l-metyyli-2-ok-so-5-fenyyli-8-metoksi-lH-l,4-bentsodiatsepin-3-yyli)-amino]-2- okso-1-(bentsyyli)-etyyli}-tioureaa, jonka sulamiepiste oli 138-160 ’C.

Optinen kiertoarvo: [a]aoD = -11,2’ (c = 0,5 metanolissa).

D) 20 g: aan edellå saatua tioureatuotetta lisåttiin 30,7 ml trifluorietikkahappoa ja reaktioseosta låmmitettiin 20 minuuttia 50 ' C: ssa. Sitten trifluorietikkahappo poietettiin tislaa-malla alennetussa paineessa, jåånnds haihdutettiin kuiviin kahdesti dikloorimetaanieta, se liuotettiin uudestaan dikloorimetaani in ja se puhdistettiin pikakromatografisesti 500 g:11a silikageeliå, jolloin eluenttina kåytettiin ensin sykloheksaanin ja etikkahapon etyyliesterin 1:1-seosta ja sitten dikloori-metaanin, metanolin, etikkahapon ja veden vålistå seosta suh-teessa 90:10:1:1. Saatu (-)-3-amino-2, 3-dihydro-l-metyyli-2-ok-so-5-fenyyli-8-metoksi-lH-l,4-bentsodiatsepiinin hydrotrifluo- .. riasetaatti liuotettiin dikloorimetaani in, liuokseen lisåttiin amiinin vapauttamiseksi natriumbikarbonaatin vesiliuosta ja reaktioseos uutettiin dikloorimetaanilla. Dikloorimetaanifaasi erotettiin, kuivattiin natriumsulfaatilla, suodatettiin, liuo-tin poietettiin tislaamalla alennetussa paineessa ja jåljelle jåånyt emås kuivattiin. Tålloin saatiin 8,5 g vaahtomaista (-)-3-amino-2,3-dihydro-l-metyyli-2-okso-5-fenyyli-8-metoksi- ii IH-1, 4-bentsodiatsepiinia. Optinen kiertoarvo [a]aot> = -171,2* (c = 0,5 dikloorimetaanissa).

31 92486 E) Analogisesti kohdassa IH) kuvatun menetelmån kanssa 7, 0 g edellå saatua (-)-3-amino-l-metyyli-8-metoksi-2-okso-5-fenyy-li-2, 3-dihydro-lH-l, 4-bentsodiatsepiinia saatettiin reagoimaan 4,9 g: sta 4H-pyrrolo(3,2,1-ij]-5,6-dihydrokinoliini-2-karbok-syylihappoa ja 1,85 ml: sta metaanisulfonihappokloridia muodos-tuneen seka-anhydridin kanssa dikloorimetaanin sisåltåvåsså reaktioliuoksessa. Reaktioseos jatkokåsiteltiin esimerkisså IH) kuvatulla tavalla. Pikakromatografisen puhdistuksen jål-keen saatiin 9,0 g puhdistettua kiteistå tuotetta. Se kitey-tettiin vielå kaksi kertaa uudestaan metanolista ja kerran etanolista mahdollisten enantiomeeristen epåpuhtauksien pois-tamiseksi. Tålloin saatiin 6, 7 g enantiomeerisesti puhdasta (-)-3-((4H-pyrrolo(3, 2, 1-ij]-5, 6-dihydrokinoliini-2-karbonyy-li)-amino]-8-metoksi-l-metyyli-2-okso-5-fenyyli-lH-2, 3-dihyd-ro-1, 4-bentsodiatsepiinia, jonka sulamispiste oli 201-205 1C ja optinen kiertoarvo (a]2°o -88,21 (c = 0,5 dikloorimetaanis sa).

2b: Dikloorimetaanissa ( + )-kiertåvå 3-[ (4H-pyrrolo( 3, 2, 1-ij ]- 5, 6-dihydrokinoliini-2-karbonyyli)-amino]-8-metoksi-l-metyyli-2-okso-5-fenyyli-lH-2, 3-dihydro-l, 4-bentsodiatsepiini •' · A) Diastereomeerisesti puhtaan hydrokloridin valmistuksessa 2a B) muodostuvat emåliuokset haihdutettiin toisen diastereo-meerisen hydrokloridin talteensaamiseksi. Saostunut hydroklo-ridi kiteytettiin 4 kertaan uudestaan asetonitriilin ja isopro-pyyliasetaatin seoksesta. Tåstå hydrokloridista saatiin analogisesti edellå kuvatun menetelmån kanssa 14,5 g diastereomeerisesti puhdasta, metanoliliuoksessa (+)-kiertåvåå 3-fenyyli-2-amino-N-(2,3-dihydro-l-metyyli-2-okso-5-fenyyli-8-metoksi-lH-1, 4-bentsodiatsepin-3-yyli)-propionihappoamidia, jonka optinen kiertoarvo [a]20D = +162,61 (C = 0,5 metanolissa).

B) 14,5 g edellå saatua, metanoliliuoksessa (+)-kiertåvåå 32 92486 amidia saatettiin reagoimaan esimerkisså 2a C) kuvatulla ta-valla fenyyli-isotiosyanaatin (4,3 ml) kanssa dikloorimetaanis-sa. Reaktioseos jatkokåsiteltiin esimerkisså 2a C) kuvatulla tavalla. Tålloin saatiin 18,6 g Ni-fenyyli-Na-{2-[(2, 3-dihyd-ro-1-metyyli-2-okso-5-fenyyli-8-metoksi-lH-l, 4-bentsodiatsepin- 3-yyli)-amino]-2-okso-l-(bentsyyli)-etyyli}-tioureaa.

Optinen kiertoarvo (a]2°o = +60,2* (c = 0,5 metanolissa).

C) 18, 5 g edellå saatua tioureatuotetta saatettiin reagoimaan esimerkisså 2a D) kuvatulla tavalla trifluorietikkahapon (28,4 ml) kanssa. Amiini vapautettiin esimerkin 2a D) mukaisesti saa-dusta ( + )-3-amino-2, 3-dihydro-l-metyyli-2-okso-5-fenyyli-8-me-toksi-lH-1,4-bentsodiatsepiinin hydrotrifluoriasetaatista.

Tålloin saatiin 7, 7 g ( + )-3-amino-2, 3-dihydro-l-metyyli-2-ok-so-5-fenyyli-8-metoksi-lH-l,4-bentsodiatsepiinia. Optinen kiertoarvo [a]2°r> = +143,8* (c = 0,5 dikloorimetaanissa).

D) Analogisesti esimerkisså IH) kuvatulla tavalla 5,0 g edellå saatua (+)-3-amino-l-metyyli-8-metoksi-2-okso-5-fenyyli-2,3-di-hydro-lH-1, 4-bentsodiatsepiinia saatettiin reagoimaan 3,49 g: sta 3- [ (4H-pyrrolo[ 3, 2, 1-ij ] -5, 6-dihydrokinoliini-2-karbok-syylihappoa ja 1,32 ml:sta metaanisulfonihappokloridia muodos-tuneen seka-anhydridin kanssa dikloorimetaania sisåltåneesså reaktioliuoksessa. Reaktioseos jatkokåsiteltiin esimerkisså IH) kuvatulla tavalla. Tålloin saatiin 10 g raakatuotetta.

*

Pikakromatografisen puhdistuksen jålkeen tuote kiteytettiin . kolmeen kertaan uudestaan metanolista mahdollisten enantiomee-risten epåpuhtauksien poistamiseksi. Tålloin saatiin 3,4 g enantiomeerisesti puhdasta ( +)-3-[(4H-pyrrolo[3,2, 1-ij]-5,6-di-hydrokinoliini-2-karbonyyli)-amino]-8-metoksi-l-metyyli-2-ok-so-5-fenyyli-lH-2, 3-dihydro-l, 4-bentsodiatsepiinia, jonka sula-mispiste oli 201-205 * C. Optinen kiertoarvo [a]aoD = +88,4* (c = 0,5 dikloorimetaanissa).

Esimerkki 3 3-[(4H-pyrrolo[3, 2, 1-ij]-5,6-dihydrokinoliini-2-karbonyyli)-a-·' mino]-l-n-pentyyli-2-okso-5-fenyyli-lH-2, 3-dihydro-l, 4-bentso-diatsepiini

II

33 92486 10 g 2-okso-5-fenyyli-2, 3-dihydro-lH-l, 4-bentsodiatsepiinia liuotettiin 100 ml: aan tetrahydrofuraania typpi-ilmakehåsså. Tåhån liuokseen lisåttiin typpi-ilmakehåsså annoksittain 1,4 g natriumhydridiå, joka oli 80-prosenttisena 61 jysuspensiona, ja reaktioseosta sekoitettiin 30 minuuttia palautusjååhdyttåen. Siihen lisåttiin hitaasti pisaroittain 9, 2 g (5,5 ml) jodipen-taania, seosta sekoitettiin edelleen 1, 5 tuntia samalla kuu-mentaen ja palautusjååhdyttåen, minkå jålkeen siihen lisåttiin vielå 0, 3 g 61jysuspensiona olevaa natriumhydridiå ja edelleen 10 minuutin kuluttua taas pisaroittain 5,5 ml jodipentaania, ja seosta kuumennettiin vielå tunnin ajan palautusjååhdyttåen. Reaktioseoksen jatkokåsittelemiseksi siihen lisåttiin jååvet-tå, se laimennettiin dikloorimetaanilla, vesifaasi erotettiin, organinen faasi pestiin vedellå neutraaliksi, kuivattiin natri umsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin. Tålloin saa-tiin 13,5 g raakatuotetta, joka puhdistettiin pikakromatogra-fisesti noin 300 g:11a silikageeliå kåyttåen eluenttina syklo-heksaanin ja etikkahapon etyyliesterin vålistå 1:1-seosta. Puhdistettu tuote kiteytettiin sykloheksaanista ja se kuivattiin. Tålloin saatiin 6,2 g puhdasta 2-okso-l-n-pentyyli-5-fenyyli-2,3-dihydro-lH-l, 4-bentsodiatsepiinia, jonka sulamis-piste oli 93-95 'C.

B) 6, 5 g edellå saatua tuotetta suspendoitiin 122 ml: aan tolu-eenia. Suspensio jååhdytettiin -20 * C: n låmp6tilaan ja sitten siihen lisåttiin 5, 88 g kalium-tert. -butylaattia samalla se-koittaen ja Beos saatettiin reagoimaan esimerkisså ID) kuva-tulla tavalla tert.-butyylinitriitin (2,84 ml) kanssa. Reaktio-seos jatkokåsiteltiin esimerkisså ID) kuvatulla tavalla. Tålloin saatiin 4,7 g 3-hydroksi-imino-2-okso-l-n-pentyyli-5- .. fenyyli-2, 3-dihydro-IH-1, 4-bentsodiatsepiinia, jonka sulamis- piste oli 188-191 ’C.

C) 4,6 g edellå saatua tuotetta liuotettiin seokseen, joka sisålsi 328 ml jååetikkaa ja 37,6 ml trifluorietikkahappoa, ja se pelkistettiin esimerkisså 1E) kuvatulla tavalla yhteenså 3,1 g: 11a sinkkipolyå. Reaktioseos jatkokåsiteltiin esimerkis- 34 92486 så 1E) kuvatulla tavalla. Tållå tavalla saatiin 4, 2 g raakaa 3-amino-2-okso-l-n-pentyyli-5-fenyyli-2, 3-dihydro-lH-l, 4-bent-sodiatsepiinia, jota kåytettiin myohemmisså valheissa tåmån enempåå puhdistamatta.

D) Reaktioseokseen, joka sisålsi metaanisulfonihaposta ja 2,6 g: sta 4H-pyrrolo-[ 3, 2, 1-ij ]-5, 6-dihydrokinoliini-2-karboksyyli-happoa muodostunutta seka-anhydridiå 60 ml: ssa dikloorimetaa-nia, lisåttiin esimerkisså IH) kuvatulla tavalla, alueella -15...-20 ‘C olevassa låmpotilassa pisaroittain liuos, joka sisålsi 4,2 g edellå saatua tuotetta ja 1,77 ml trietyyliamii-nia 50 ml: ssa dikloorimetaania. Reaktioseos jatkokåsiteltiin esimerkisså IH) kuvatulla tavalla. Tålloin saatiin 3,9 g 3-[(4H-pyrrolo[3,2,1-ij]-5,6-dihydrokinoliini-2-karbonyyli)-amino] -2-okso-l-n-pentyyli-5-fenyyli-lH-2, 3-dihydro-l, 4-bentsodi-atsepiinia valkoisena vaahtohartsina.

IR-spektri: 1862 cm-1, 1662 cm-1, 1524 cm-1, 1499 cm-1.

Esimerkki 4 3-[(4H-pyrrolo(3,2,1-ij]-5,6-dihydrokinoliini-2-karbonyyli)-amino]-l-metyyli-2-okso-5-sykloheksyyli-lH-2, 3-dihydro-l, 4- be nt s odi ats epi i ni A) 75,6 g Ni-metyyli-Ni-fenyyli-2-hydroksi-l, 3-diaminopropaa-nia ja 65 ml trietyyliamiinia liuotettiin 600 ml: aan dikloorimetaania. Tåhån liuokseen lisåttiin hitaasti pisaroittain, samalla jåisså jååhdyttåen, liuos, joka sisålsi 61 ml syklo-heksyylikarboksyylihappokloridia 50 ml: ssa dikloorimetaania. Reaktioseosta sekoitettiin 1, 5 tuntia huoneen låmpotilassa. Sitten reaktioseoksen jatkokåsittelemisekei se pestiin vedellå ja natriumkloridiliuoksella ja liuotin haihdutettiin. Jåånnok-senå saatiin 131 g raakaa Ni etyyli-Ni-fenyyli-Na-syklohek-syylikarbonyyli-2-hydroksi-l,3-diaminopropaania. Raakatuote kiteytettiin uudestaan tolueenista, se pestiin eetterillå ja kuivattiin. Tålloin saatiin 113,8 g puhdasta tuotetta, jonka sulamispiste oli 86-88 * C.

II

92486 35 B) Edellå saadun tuotteen (87 g) annettiin reagoida 174 ml: ssa f os f orioksiditrikloridia 2 tunnin ajan oljyhauteessa, jonka låmpotila oli 130 'C. Sitten seoksen annettiin jååhtyå, se laimennettiin dikloorimetaanilla ja liuokseen lisåttiin jåå-vettå. Orgaaninen faasi erotettiin, se pestiin moneen kertaan vedellå, sitten sitå kåsiteltiin laimealla natriumhydroksidi-liuoksella, pestiin uudestaan vedellå, kuivattiin natriumsul-faatilla ja haihdutettiin kuiviin. Jåånndksenå saatiin 76,1 g oljymåistå raakatuotetta, joka oli seos, joka sisålsi noin 40 % 2-kloorimetyyli-l-metyyli-5-sykloheksyyli-2, 3-dihydro-lH-1, 4-bentsodiatsepiinia ja noin 60 % 3-kloori-l-metyyli-6-syklo-heksyyli-1, 2, 3, 4-tetrahydro-l, 5-bentsodiatsosiinia. Bentso- diatsosiiniosan isomeroimiseksi tåtå raakaseosta kuumennettiin palautusjååhdyttåen 300 ml: ssa tetrakloorietaania 30 minuutin ajan. Sitten tetrakloorietaani haihdutettiin ja jåljelle jåå-nyttå 2-kloorimetyyli-l-metyyli-5-sykloheksyyli-2, 3-dihydro-lH-bentsodiatsepiinia kåytettiin seuraavassa reaktiovaiheessa puhdi s tamatta.

C) 19,0 g edellå saatua tuotetta liuotettiin 103 ml: aan di-kloorimetaania. Tåhån liuokseen lisåttiin 116 ml suolahapon 32 %: sta vesiliuosta, .882 ml vettå ja 91 ml dikloorimetaania. Sitten siihen lisåttiin pisaroittain liuos, joka sisålsi 11,65 g kaliumpermanganaattia 238 ml: ssa vettå, pitåen sisålåmpotila alle 15 'C:ssa jåisså jååhdyttåmållå. Reaktioseosta sekoitet-tiin 1, 5 tuntia huoneen låmpotilassa. Sitten jålleen 2 g kaliumpermanganaattia liuotettiin 50 ml: aan vettå, lisåttiin pisaroittain ja seosta sekoitettiin vielå tunnin ajan huoneen låmpotilassa. Reaktioseoksen jatkokåsittelemisek6i siihen lisåttiin kiinteåtå natriumbikarbonaattia annoksittain neutra-loitumiseen saakka. Sitten dikloorimetaanifaasi erotettiin ja vesifaasi uutettiin vielå kerran dikloorimetaanilla. Yhdiste-tyt dikloorimetaaniuutteet pestiin laimealla natriumhydroksi-dilla ja sitten vedellå, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin. Tållå tavalla saatiin 55 g raakatuotetta. Raa-katuotteesta eristettiin pylvåskromatografisesti, kåyttåen 1 kg silikageeliå ja hieman korotettua painetta (pikakroma- 36 92486 tografia) sekå eluenttina sykloheksaanin ja etikkahapon etyy-liesterin vålista 1: l-seosta, puhdas l-metyyli-2-okso-5-syklo-heksyyli-2,3-dihydro-lH-l,4-bentsodiatsepiini, joka kiteytet-tiin eetteristå ja kuivattiin. Tålloin saatiin 2, 3 g puhdasta tuotetta, jonka sulamispiste oli 98-100 "C.

D) 8,9 g edellå saatua tuotetta suspendoitiin 201 ml:aan tolu- eenia. Suspensio jååhdytettiin -20 * C: n låmpotilaan ja sitten siihen lisåttiin 9, 63 g kalium-tert. -butylaattia samalla sekoittaen, minkå jålkeen seosta sekoitettiin vielå 15 minuut-tia. Sitten siihen lisåttiin 5,5 ml isoamyylinitriittiå niin hitaasti, samalla jååhdyttåen, ettå reaktioseoksen låmpotila pysyi alle 0 ‘C:ssa. Sitten seosta sekoitettiin vielå 30 mi-nuuttia 0 ’C: ssa. Reaktioliuoksen jatkokåsittelemiseksi se kaadettiin sitten, samalla sekoittaen, seokseen, joka sisålsi 347 ml jååkylmåå vettå, 16,7 ml jååetikkaa ja 347 ml etikkahapon etyyliesteriå. Seosta sekoitettiin voimakkaasti, minkå jålkeen orgaaninen faasi erotettiin ja vesifaasi uutettiin vielå etikkahapon etyyliesterillå. Yhdistetyt orgaaniset faa-sit pestiin vedellå ja haihdutettiin. Jåånnos liuotettiin tolueeniin ja kiteytettiin uudestaan tolueenin ja etanolin seoksesta. Tålloin saatiin 12, 4 g raakatuotetta. Se puhdistet-tiin edelleen pikakromatografisesti 500 g:11a silikageeliå kåyttåen eluenttina ensin sykloheksaanin ja etikkahapon etyy- • liesterin vålistå 1: l-seosta, sitten niiden 4: 6-seosta. Saatu • · .

tuote kiteytettiin etanolista, minkå jålkeen saatiin 4,4 g 3-hydroks i -i mi no-1-metyy1i-2-oks o-5-s ykloheksyyli-2,3-di hydro-1H-1, 4-bentsodiatsepiinia, jonka sulamispiste oli 205-210 * C.

E) 4, 4 g edellå saatua tuotetta lisåttiin seokseen, joka si- .. sålsi 375 ml jååetikkaa ja 42, 3 ml trifluorietikkahappoa.

Reaktioseosta låmmitettiin siten, ettå sen sisålåmpotilaksi saatiin 40 * C, ja siihen lisåttiin annoksittain yhteenså 2,36 g sinkkipolyå samalla sekoittaen, seosta sekoitettiin edelleen 2 tuntia 40 * C: n låmpotilassa ja sitten siihen lisåttiin veilå 1, 1 g sinkkipolyå ja sitå sekoitettiin edelleen 1,5 tuntia 40 ' C: n låmpotilassa. Seoksen jatkokåsittelemiseksi se laimennet-

II

92486 37 tiin tolueenilla, sen annettiin jååhtyå ja se haihdutettiin. Saatu jåånnos liuotettiin dikloorimetaaniin, pestiin natrium-karbonaatin vesiliuoksella ja vedellå, kuivattiin ja haihdutettiin. Tålloin saatiin 4,0 g raakaa 3-amino-l-metyyli-2-ok-so-5-sykloheksyyli-2,3-dihydro-lH-l, 4-bentsodiatsepiinia, jota kåytettiin seuraavassa reaktiovaiheessa puhdistamatta.

F) 2,92 g 4H-pyrrolo[3,2,1-ij]-5, 6-dihydrokinoliini-2-karbok-syylihappoa (saatu esimerkkien 1F-1G mukaisesti) ja 1,99 ml trietyyliamiinia liuotettiin 64 ml: aan dikloorimetaania. Liuos jååhdytettiin -20 ‘C:n låmpotilaan ja siihen lisåttiin hitaas-ti pisaroittain, samalla sekoittaen, 1, 13 ml metaanisulfonihap-pokloridia ja reaktioseosta sekoitettiin edelleen 15 minuuttia -20 *C:ssa. Reaktioliuokseen, joka sisålsi metaanisulfonihapon ja 4H-pyrrolo[3,2,1-ij]-5,6-dihydro-kinoliini-2-karboksyyliha-pon vålistå seka-anhydridiå, lisåttiin pisaroittain, samalla sekoittaen, alueella -15...-20 *C olevassa låmpotilassa, liuos, joka sisålsi 4,0 g vaiheessa E) saatua 3-amino-l-metyy-li-2-okso-5-sykloheksyyli-2, 3-dihydro-lH-l, 4-bentsodiatsepiinia ja 1,99 ml trietyyliamiinia 54 ml: ssa dikloorimetaania. Reaktioseosta sekoitettiin edelleen 30 minuuttia -15 ’C: n låmpotilassa ja sen annettiin låmmetå hitaasti huoneen låmpotilaan (yhden tunnin aikana). Reaktioseoksen jatkokåsittelemi-seksi se laimennettiin vedellå, dikloorimetaanifaasi erotet-• tiin, pestiin natriumbikarbonaattiliuoksella ja sitten vedel lå, kuivattiin natriumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin. Jåånnoksenå saatiin 7,6 g raakaa otsikon mukaista yhdis-tettå. Raakatuote puhdistettiin pylvåskromatografisesti 400 g: 11a silikageeliå hieman korotetussa paineessa (pikakromato-grafia) kåyttåen eluenttina sykloheksaanin ja etikkahapon etyyliesterin vålistå 1:1-seosta. Puhdistettu tuote kiteytet-tiin etanolista ja kuivattiin. Tålldin saatiin 1, 5 g 3-[(4H-pyrrolo[3,2, 1-ij]-5,6-dihydrokinoliini-2-karbonyyli)-amino]-1-metyyli-2-okso-5-sykloheksyyli-lH-2, 3-dihydro-l, 4-bentsodiatsepiinia, jonka sulamispiste oli 147-152 * C.

38 92486

Esimerkki 5 3-[(8-fluori-4H-pyrrolo[3,2,1-ij)-5, 6-dihydrokinoliini-2-kar-bonyyli)-amino]-2-okso-l-metyyli-5-fenyyli-lH-2, 3-dihydro-1, 4-bentsodiatsepiini 0,99 g 8-fluori-4H-pyrrolo[3, 2, 1-ij]-5, 6-dihydrokinoliini-2-karboksyylihappoa, 1, 4 g 2-kloori-l-metyylipyridiniumjodidia, 1,1 ml trietyyliamiinia ja 1,2 g 3-amino-2-okso-l-metyyli-5-fenyyli-2, 3-dihydro-1H-1,4-bentsodiatsepiinia liuotettiin 120 ml: aan dikloorimetaania ja reaktioseosta keitettiin palautus-jååhdyttåen 1 tunnin ajan. Reaktioseoksen jatkokåsittelemisek-si sen annettiin jååhtyå, siihen lisåttiin 5 %:sta natriumbi -karbonaattiliuosta, orgaaninen faasi erotettiin ja vesifaasi uutettiin vielå kerran dikloorimetaanilla. Yhdistetyt dikloo-rimetaaniuutteet kuivattiin natriumsulfaatilla ja liuotin poistettiin tislaamalla alennetussa paineessa. Jåånnoksenå saatu raaka otsikon mukainen yhdiste puhdistettiin pylvaskro-matografisesti silikageelillå kåyttåen eluenttina dikloorime-taanin ja metanolin 99: 1-seosta. Tål loin saatiin 1,5 g 3-[(8-fluori-4H-pyrrolo[3,2,1-ij]-5, 6-dihydrokinoliini-2-karbo-nyyli)-amino]-2-okso-l-metyyli-5-fenyyli-lH-2, 3-dihydro-l, 4-bentsodiatsepiinia, jonka sulamispiste oli 181-182 * C.

Esimerkki 6 . 3-[(4H-pyrrolo[3,2,1-ij]-5,6-dihydrokinoliini-2-karbonyyli)- amino]-l-metyyli-2-okso-5-fenyyli-lH-2, 3-dihydro-l, 4-bentsodiatsepiini A) 98, 6 g 2-aminobentsofenonia liuotettiin seokseen, joka sisålsi 650 ml dikloorimetaania ja 50 ml vettå. Tåhån seokseen .. lisåttiin pisaroittain -10 ’ C: n låmpotilassa liuos, joka si sålsi 116,1 g bromiasetyylibromidia 150 ml: ssa dikloorimetaania. Sitten reaktioseosta sekoitettiin edelleen 2 tuntia huo-neen låmpotilassa. Reaktioseoksen jatkokåsittelemiseksi siihen lisåttiin vettå, orgaaninen faasi erotettiin, pestiin vielå kerran vedellå, kuivattiin ja haihdutettiin alennetussa paineessa. Jåånnoksenå saatu raakatuote kiteytettiin eetterin ja ii 92486 39 petroolieetterin seoksesta. Tålloin saatiin 142 g 2-[(2-bromi-asetyyli)-amino]-bentsofenonia, jonka sulamispiste oli 96-98 # C.

B) 71 g edellå saatua 2-[(2-bromiasetyyli)-amino]-bentsofenonia liuotettiin 500 ml: aan metanolia. Tåhån liuokseen lisåt-tiin pisaroittain 10 ’ C: n låmpotilassa liuos, joka sisålsi 75 g ammoniakkia 1,2 1 metanolia. Sitten reaktioseosta sekoitet-tiin ensin 1,5 tunnin ajan huoneen låmpotilassa ja sitten 2 tuntia palautusjååhdyttåen. Seoksen jatkokåsittelemiseksi metanoli haihdutettiin alennetussa paineessa, jåånnos liuotettiin dikloorimetaaniin, tåmå liuos pestiin natriumhydroksidin 10 % vesiliuoksella ja vedellå, kuivattiin ja haihdutettiin alennetussa paineessa. Jåånnoksenå saatu raakatuote kiteytet-tiin metanolista. Tållå tavalla saatiin 20 g 2-okso-5-fenyy-li-lH-2, 3-dihydro-l,4-bentsodiatsepiinia, jonka sulamispiste 011 178-180 ‘C.

C) 60 g edellå saatua tuotetta liuotettiin 1,2 litraan kuivat-tua tetrahydrofuraania. Kosteuden pååsy liuokseen estettiin ja siihen lisåttiin 34, 2 g kalium-tert. -butylaattia. Sitten sii-hen lisåttiin pisaroittain liuos, joka sisålsi 20,6 ml metyy-lijodidia 75 ml: ssa tetrahydrofuraania, ja reaktioseosta se-koitettiin vielå tunnin ajan huoneen låmpotilassa. Reaktiose-oksen jatkokåsittelemiseksi siihen lisåttiin jååkylmåå natri umkl ori di li uos ta, se laimennettiin dikloorimetaanilla, vesi-faasi erotettiin, orgaaninen faasi pestiin vedellå neutraalik-si, kuivattiin natriumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin. Jåånnoksenå saatu raakatuote kiteytettiin uudestaan etanolista. Tålloin saatiin 56 g l-metyyli-2-okso-5-fenyyli- ., 1H-2, 3-dihydro-l, 4-bentsodiatsepiinia, jonka sulamispiste oli 154-155 *C.

D) 50, 4 g edellå eaatua tuotetta lisåttiin 987 ml: aan toluee- nia, jååhdytettiin -20 * C: n låmpotilaan ja saatettiin reagoi- maan esimerkisså ID) kuvatulla tavalla kalium-tert. -butylaatin (56,1 g) ja isoamyylinitriitin (32,3 ml) kanssa. Reaktioseos 40 92486 jatkokåsiteltiin esimerkisså ID) kuvatulla tavalla ja saatu raakatuote kiteytettiin etanolista. Tålloin saatiin 47,2 g 3-hydroksi-imino-l-metyyli-2-okso-5-fenyyli-2, 3-dihydro-1H-1, 4-bentsodiatsepiinia, jonka sulamispiste oli 239-242 * C.

E) 6, 8 g edellå saatua tuotetta liuotettiin 500 ml: aan metano-lia. Tåhån liuokseen lisåttiin 12 g Raney-nikkeliå, minkå jålkeen sitå hydrattiin 12 tunnin ajan 6 baarin vetypaineessa, huoneen låmpotilassa. Reaktioseoksen jatkokåsittelemiseksi katalyytti erotettiin suodattamalla ja liuotin poistettiin tislaamalla alennetussa paineessa. Tålloin saatiin 6 g raakaa raseemista 3-amino-l-metyyli-2-okso-5-fenyyli-2,3-dihydro- 1H-1, 4-bentsodiatsepiinia. Jotta se voitaisiin puhdistaa edel-leen muuttamalla se bentsosulfonaattisuolakseen, se liuotettiin 50 ml: aan asetonitriiliå. Tåhån liuokseen lisåttiin liuos, joka sisålsi 3,6 g bentseenisulfonihappoa 22 ml: ssa asetonitriiliå, minkå jålkeen reaktioseosta sekoitettiin tunnin ajan huoneen låmpotilassa. Muodostunut kiteinen sakka erotettiin imulla, pestiin asetonitriilillå ja sitten heksaa-nilla ja se kuivattiin sitten alennetussa paineessa. Tålloin saatiin 5,9 g 3-amino-yhdisteen bentseenisulfonaattia, jonka sulamispiste oli 224-227 * C. Amiinin vapauttamiseksi 5 g edel-lå saatua bentseenisulfonaattisuolaa liuotettiin dikloorime-taaniin ja liuosta ravisteltiin natriumkarbonaatin vesiliuok-sen kanssa. Vapautunutta amiiniyhdistettå sisåltåvå dikloori-' * ' metaanifaasi erotettiin, kuivattiin ja haihdutettiin. Tålloin saatiin 3,1 g 3-amino-l-metyyli-2-okso-5-fenyyli-2, 3-dihyd-ro-lH-1,4-bentsodiatsepiinia.

f) 0,38 g 4H-pyrrolo[ 3, 2, 1-ij ]-5, 6-dihydrokinoliini-2-karbok-.. syylihappoa, 0,50 g 3-amino-l-metyyli-2-okso-5-fenyyli-2, 3-di- hydro-IH-1, 4-bentsodiatsepiinia ja 0,46 g trietyyliamiinia liuotettiin 50 ml: aan dikloorimetaania. Tåhån liuokseen lisåttiin 0, 58 g 2-kloori-l-metyylipyridiniumjodidia ja reaktioseosta keitettiin tunnin ajan palautusjååhdyttåen. Sitten reak-tioseos jatkokåsiteltiin esimerkisså 5 kuvatulla tavalla. Tållå tavalla saatiin 0,69 g 3-[ (4H-pyrrolo[3, 2, 1-ij ]-5, 6-di-

II

92486 41 hydrokinoliini-2-karbonyyli)-amino]-l-metyyli-2-okso-5-fenyy-li-lH-2, 3-dihydro-l,4-bentBodiatsepiinia vaahtohartsina.

13C-NMR-spektri: [yksikosea ppm, (signaalin moninkerta)]: 167, 88 (s), 167,51 (s), 162, 32 (s), 142,91 (s), 138,17 (s), 136,40 (s), 131,93 (d), 130, 72 (d), 130, 69 (d), 130, 23 (s), 129, 83 (d), 129, 83 (d) 129, 22 (s), 128, 28 (d), 128, 28 (d), 124, 58 (d), 124,40 (s), 123, 09 (s), 121,60 (d), 120, 90 (d), 120, 66 (d), 119,34 (d), 104,24 (d), 67,40 (d), 44, 38 (t), 35, 36 (q), 24,89 (t), 23,13 (t).

Esimerkki 7 3-[(4-H-pyrrolo[3,2,1-ij]-5,6-dihydrokinoliini-2-karbonyyli)-amino)-1-metyyli-2-okso-5-fenyyli-lH-2, 3-dihydro-l, 4-bentsodi-atsepiinin optisten isomeerien valmistus 7a: (-) — (3S)—3—[(4-H-pyrrolo[3, 2, 1-ij]-5, 6-dihydrokinoliini-2- karbonyyli)-amino]-l-metyyli-2-okso-5-fenyyli-lH-2, 3-dihydro-1, 4-bentsodiatsepiini A) Raseemisesta 3-amino-l-metyyli-2-okso-5-fenyyli-2, 3-dihydro- 1H-1, 4-bentsodiatsepiinista (valmistus kuvattu esimerkissa 6E) saatiin analogisesti esimerkissa 2a A-D kuvatulla tavalla (- ) - (3S)-3-amino-l-metyyli-2-okso-5-fenyyli-lH-2, 3-dihydro- 1, 4- bentsodiatsepiinia, jonka optinen kiertoarvo [a]aoi> on -230,8' (c * 1 asetonitriilisså).

B) Analogisesti esimerkissa 1H kuvatulla tavalla 1,7 g edellå saatua (-)-(3S)-3-amino-l-metyyli-2-okso-5-fenyyli-2, 3-dihydro- 1H-1, 4-bentsodiatsepiinia saatettiin reagoimaan dikloorime-taanissa, 1,36 g: sta 4H-pyrrolo[ 3, 2, 1-ij ]-5, 6-dihydrokinolii-ni-2-karboksyylihappoa ja 0,52 ml: sta metaanisulfonihappoklori-dia muodostunutta seka-anhydridiå sisaltåvån reaktioliuoksen kanssa. Reaktioseos jatkokasiteltiin esimerkissa 1H) kuvatulla tavalla. Tålloin saatiin 2, 6 g pikakromatografisesti puhdis-tettua kiteistå tuotetta. Se kiteytettiin uudestaan metanolis- 42 92486 ta enantiomeeristen epåpuhtauksien poistamiseksi. Tålloin saatiin 1,4 g enantiomeerisesti puhdasta ( —) — (3S)—3—[(4—H— pyrrolot 3,2,1-ij]-5,6-dihydrokinoliini-2-karbonyyli)-amino]-1-metyyli-2-okso-5-fenyyli-lH-2,3-dihydro-l, 4-bentsodiatsepii-nia, jonka sulamispiste oli 151-158 'C ja optinen kiertoarvo [a]aoD oli -61,6* (c = 0,5 metanolissa).

7b: (-*-) — ( 3R) —3— [ (4-H-pyrrolot 3, 2, 1-ij ]-5, 6-dihydrokinoliini-2- karbonyyli)-amino]-l-metyyli-2-okso-5-fenyyli-lH-2, 3-dihydro-1, 4-bentsodiatsepiini A) Analogisesti esimerkisså 2b A-C kuvatulla tavalla saatiin ( + ) - (3R)-3-amino-l-metyyli-2-okso-5-fenyyli-2, 3-dihydro-1H- 1, 4-bentsodiatsepiinia, jonka optinen kiertoarvo [a]2°D oli + 259, 1* (c = 1 asetonitriilisså).

B) Analogisesti esimerkisså IH kuvatulla tavalla 0,65 g edellå saatua ( +)-(3R)-3-amino-l-metyyli-2-okso-5-fenyyli-2, 3-dihyd-ro-IH-1, 4-bentsodiatsepiinia saatettiin reagoimaan dikloorime-taanissa 0,52 g: sta 4H-pyrrolo [ 3, 2, 1-i j ]-5, 6-dihydrokinolii-ni-2-karboksyylihappoa ja 0,2 ml: sta metaanisulfonihappoklori-dia muodostunutta . seka-anhydridiå sisåltåvån reaktioliuoksen kanssa. Reaktioseos jatkokåsiteltiin esimerkisså IH) kuvatulla tavalla. Raakatuote kåsiteltiin pikakromatografisesti ja se kiteytettiin etanolista, jolloin saatiin 596 mg enantiomeerisesti puhdasta ( + )-(3R)-3-[(4-H-pyrrolo[3, 2, 1-ij]-5, 6-dihydro-kinoliini-2-karbonyyli)-amino]-l-metyyli-2-okso-5-fenyyli-lH- 2, 3-dihydro-l,4-bentsodiatsepiinia, jonka sulamispiste oli 147-156 *C ja optinen kiertoarvo [a]aot> oli +61,0' (c = 0,5 metanolissa).

Esimerkki 8 3-[(4H-pyrrolo[3,2,1-ij]-5,6-dihydrokinoliini-2-karbonyyli)-amino]-1, 7-dimetyyli-2-okso-5-(2-tienyyli)-1H-2, 3-dihydro-l, 4-bents odi ats epii ni

II

92486 43 A) 30 g Ni-metyyli-Ni-(4-metyylifenyyli)-2-hydroksi-l, 3-diami- nopropaania ja 24,2 ml trietyyliamiinia liuotettiin 225 ml: aan dikloorimetaania. Tåhån liuokseen lisåttiin hitaasti pisaroit-tain, sitå samalla jåisså jååhdyttåen, liuos, joka sisålsi 16,5 ml tiofeeni-2-karboksyylihappokloridia 50 ml: ssa dikloorimetaania. Reaktioseoksen annettiin seisoa 12 tuntia huoneen lampotilassa. Sitten reaktioseoksen jatkokasittelemiseksi se pestiin vedellå ja keittosuolan vesiliuoksella, orgaaninen faasi erotettiin, kuivattiin ja liuotin poistettiin tislaamal-la alennetussa paineessa. Jåånnoksenå saatiin 52,2 g raakaa 61j ymåistå Ni-metyyli-Ni-(4-metyylifenyyli)-N»-(2-tienoyyli)- 2-hydroksi-l,3-diaminopropaania, jota kåytettiin puhdistamatta seuraavassa reaktiovaiheessa.

B) 50, 2 g edellå saatua tuotetta lisåttiin 150 ml: aan fosfori- oksikloridia ja reaktioseosta keitettiin 90 minuuttia palau-tusjååhdyttåen. Sitten sen annettiin jååhtyå ja se jatkokåsi-teltiin esimerkisså IB) kuvatulla tavalla. Tållå tavalla saatiin 48,5 g oljymåistå raakatuotetta, joka sisalsi 2-kloorime-tyyli-1,7-dimetyyli-5-(2-tienyyli)-2, 3-dihydro-lH-l, 4-bentsodi-atsepiinin ja 3-kloori-l, 8-dimetyyli-6-(2-tienyyli }-1, 2, 3, 4-tetrahydro-1,5-bentsodiatsosiinin vålistå seosta. Bentsodiatso-siiniosan isomeroimiseksi raaka seos liuostettiin 280 ml: aan tetrakloorietaania ja liuosta keitettiin tunnin ajan palautus-jååhdyttåen. Sitten tetrakloorietaani poistettiin haihduttamal-la, jåånnos liuotettiin dikloorimetaaniin, liuos pestiin 10 % natriumhydroksidilla ja sitten vedellå sekå keittosuolan vesiliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin alennetussa paineessa. Saatu jåånnos liuotettiin metyleenikloridin ja metanolin seok-seen, liuos suodatettiin magnesiumsilikaatin (= Florisil*) låpi ja haihdutettiin. Tållå tavalla saatiin 32,4 g 2-kloorime-tyyli-1, 7-dimetyyli-5-(2-tienyyli)-2, 3-dihydro-lH-l, 4-bentsodi-atsepiinia oljymåisenå aineena, jota kåytettiin seuraavassa reaktiovaiheessa puhdistamatta.

C) 13,6 g edellå saatua ainetta hapetettiin esimerkisså 1C kuvatun menetelmån mukaisesti 8,2 g:11a kaliumpermanganaattia.

44 92486 44

Reaktioseos jatkokåsiteltiin esimerkisså 1C) kuvatulla taval-la. Saatu raakatuote liuotettiin dikloorimetaaniin ja se puh-distettiin pikakromatografisesti silikageelillå kayttåen elu-enttina dikloorimetaanin ja metanolin 95: 5-seosta. Tållå ta-valla saatiin 3,8 g oljymåistå 1,7-dimetyyli-2-okso-5-(2-tie-nyyli)-2,3-dihydro-lH-l,4-bentsodiatsepiinia.

D) 7, 7 g edellå saatua tuotetta liuotettiin 210 ml: aan toluee-nia. Li uos j ååhdytettiin -20 1 C: n låmpotilaan, minkå jålkeen siihen lisåttiin Na-ilmakehåsså 8, 1 g kalium-tert. -butylaattia ja seosta sekoitettiin edelleen 15 minuuttia. Sitten siihen lisåttiin, samalla jååhdyttåen, 4,6 ml isoamyylinitriittiå niin hitaasti, ettå reaktioseoksen låmpotila pysyi alle 0 1 C: ssa. Sitten seosta sekoitettiin vielå 30 minuuttia 0 ‘C: ssa. Reaktioseoksen jatkokåsittelemiseksi siihen lisåttiin, samalla sekoittaen, seos, joka sisålsi 300 ml jååkylmåå vettå, 300 ml etikkahapon etyyliesteriå ja 15 ml jååetikkaa. Orgaaninen faasi erotettiin ja vesifaasi uutettiin vielå ker-ran etikkahapon etyyliesterillå. Orgaaniset faasit yhdistet-tiin, pestiin vedellå ja keittosuolan vesiliuoksella, kuivat-tiin natriumsulfaatilla ja haihdutettiin alennetussa painees-sa. Tålloin saatiin 6, 5 g 3-hydroksi-imino-l, 7-dimetyyli-2-ok-so-5-(2-tienyyli)-2,3-dihydro-lH-l,4-bentsodiatsepiinia vaah-tohartsina.

E) 2, 0 g edellå saatua tuotetta liuotettiin 150 ml: aan metano-lia. Liuokseen lisåttiin 8 g Raney-nikkeliå ja sitten sitå hydrattiin 7,5 tuntia 4 baarin vetypaineessa. Jatkokåsittelyå vårten katalyytti erotettiin suodattamalla ja liuotin poistet-tiin tislaamalla alennetussa paineessa. Jåånnoksenå saatiin 1, 4 g raakatuotetta. Se liuotettivn dikloorimetaaniin ja uutettiin suolahapon laimealla vesiliuoksella. Suolahappofaasi erotettiin, se tehtiin alkaliseksi lisååmållå siihen natrium-hydroksidin laimeata vesiliuosta ja se uutettiin dikloorime-taanilla. Dikloorimetaaniuutteen haihduttamisen jålkeen saatiin 0,7 g 3-amino-l,7-dimetyyli-2-okso-5-(2-tienyyli)-2, 3-di-hydro-IH-1,4-bentsodiatsepiinia vaahtohartsina, jota kåytet-

II

45 92466 tiin seuraavassa reaktiovaiheessa puhdistamatta.

F) Analogisesti esimerkisså IH) kuvatulla tavalla 1, 15 g edel-lå saatua 3-amino-l, 7-dimetyyli-2-okso-(2-tienyyli)-2, 3-dihyd-ro-lH-1, 4-bentsodiatsepiinia saatettiin reagoimaan dikloorime-taanissa 0,81 g: sta 4H-pyrrolo[ 3, 2, 1-i j ]-5, 6-dihydrokinoliini- 2-karboksyylihappoa ja 0,32 ml: sta metaanisulfonihappokloridia muodostunutta seka-anhydridiå sisåltåvån reaktioliuoksen kans-sa. Reaktioseos jatkokåsiteltiin esimerkisså 1H) kuvatulla tavalla. Tålloin saatiin 2,3 g raakatuotetta, joka liuotettiin dikloorimetaaniin ja joka puhdistettiin pikakromatografisesti silikageelilla kåyttåen eluenttina dikloorimetaanin ja metano-lin 96: 4-seosta. Sen jålkeen, kun liuotin oli poistettu tis-laamalla, saatiin 0, 7 g jåånnostå, joka kiteytettiin syklohek-saanin ja etikkahapon etyyliesterin seoksesta. Tållå tavalla saatiin 0,4 g kiteistå 3-((4H-pyrrolo[3, 2, 1-ij]-5, 6-dihydroki-noliini-2-karbonyyli)amino]-1,7-dimetyyli-2-okso-5-(2-tienyyli )-1H-2, 3-dihydro-1, 4-bentsodiatsepiinia, jonka sulamispiste oli 204-207 ’C.

Edellå esitetyisså esimerkeisså kuvattujen menetelmien mukai-sesti saatiin seuraavassa taulukossa luetellut, kaavan I mukai-set yhdisteet asetyloimalla kaavan II mukaisia vastaavia 3-ami-nobentsodi ate epii nij ohdannai si a.

• · 1 · 46 92486 in ™ γμ ^ o(Niir>(r>aoooiv.(^Ln'>-i(vr>ja‘vo^eocM\o<r'(N.

' inn ^-•c'CMOi^nrvmoLnTrer'Troooooomvrir^cr' w »-I CM NrtNNHNNNNNnHHlMNHrtrtNnri "Ζ ιι ι ι ι ι ι ι ι ι ι ι ι ι ι ι ι ι ι ι ι ι ι 'Γ *- σ'Μ(ΜΙ^νΰ«-Π<»Η\Οι/10ΊηΠΠΟΟ'»ΟΟΝ>ΛΠ "ζ ui π oooNoisntsinov^convotvt^ajvcnr'O'

_ · r-· CM

2 j= jz fc £ .. .. £..........................................

S uac. DCLQ.c.a.a.aQ.aQ.a.o.acL.D.aa.CLa.c.a.a .£ t/lfc-fc.tnfc.fc-fc.fc.fc_fc.fc_u.u.fc.fc.U-fc.fc.li-fc.fc.fc.fc.fc-fc.

n k χχχχχχχχχχχχχχχχχΐι.χχχχυ-ΗΧ I o u oo i i oo σ' r. i ·“1 c: jxxxuxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx

T

j i I : · : I i I i t i 1 ; t ! I i i i I I t I I i I /“'l ^ ^ ^ Λ y*"\ rs Λ s /-«V ^ ^-\ o Λ ^ rN Λ

Ν I JS Jfw JJI JN J«( JN Jfti JJI Nfihhft NNM NNNflN N N

I υυϋυυϋυΰϋϋϋΰϋϋϋΰυϋϋϋυυϋϋΰ ! >_S >»( W w w w w w W W W w w w w w w w w w w w w w

I I i I I I I ! I i I i I I I > I t I I I I I ! I I

-----T----------—-----—-------—- i il 3 ·Η J ·—i .—I —( ra-u-i t klkbUb. Utfc U fc- fc.

>>e t ι ι ι ι i : ι i iii

4-> >sCC ! X x X o 'Γ v o £ 'T vj vfl XX XXX^rv£>^*XXXX

:co co c ; *—> .Q (D i

—I 3 <·- I

·· CO

'"L. _ t! ; C C c c cc cc co 3 | Q) m cj o mo a a a a aa 1 ’ ^ I *·-4 *H -Μ ·ι-4 ··-« *^4 føy

·* *^ ! I I ^ } I

æ fc.fc.fci fc.Ob.UO U fc. O t- O UOOU

Kc Og , ι ι X I I I t X I I i IX 1 x X I I I I X X X J NMN NNNOCM Ο CM (NI CM CM O Ν (Μ T

" i *·· i I — — — — — — — i i r» -i e* -ι n -> • — — ·— — — X ri r. ^ r· -i

<· :ux UUUUUX X —(XXXXXXX

Ci IOUXXOOOOOUXXXXXUXUUUU

I ; I . -Ill· I I I ι I

• CO 00 oo 00 «3 00 [· - fM CM (v. r^- CM

____i_________________________ Λ* 1 , = = u u *· I ! Λ» c; ;!··'·* ' I · i ' a ' ' ·!· r·-. riTi.^-iri-ir.-.ri-ir'U r* — — “iri-iri-iri-i ι.ιΰυυυυυϋΰΰϋΰΰΰυϋ'-·ϋϋϋΰΰϋϋΰ s ! '"J · σ· o h r : n r uo o r, 03 σ< o rj π nr· o n oo r o »-< Γ4 n W ° i ^ ^ ^ rH ^ rH -Η rH M rj CJ f J Γ-J TJ Γ4 CJ <M Γ4 Π O Γ“» C“i UJ c. 1

II

92486 47 to ο θ' «"σ' η on <"ΐ/ι

ϋ) C'J f'J 04 CSJ

I I I I

3 vO vO ΓΟ ΙΛ tl_! jj O' η «* i/) (- 3 «Ν MN £ CO 03 E ........ _ Ο Ο. Ο. Ή Cl Q.

D II II :θ C· b j_j X Oi ----------- 1

(SI

Λ ·Η 3 C

OC XXXXX -H 3 D

>. Jj c >> 3 Ή I CD :C0 ----------- u £ 1 J-> >.

•i C C "3 a x x x x x aj .η <*- co :o

I II II II

1 *3 X 03

u I I C

w I O CO Q)

U I X I I .c -H

I -P 01 r. Q. to D

„ .-. 0) <-* ^ N ^ n f η n „ X 0) X X X U X u u U W ftw ^ '-III!

I -H

3 -H <—I ‘H

co *j >, co >s x

t! x x x x x o. U

.co w c. O CO

.£3 (D ¢. r~ ·· cn o*j

-Η X

°= " = ^ CO

^ c i >. CO

Π -1 3 ; CO 3.

.. *J j

·** ®, ί * [ '1 II

QOCTOq. (eexxx I u · ___________ g- -g ··' *1 >. u O ! c-> m a I x x x x x

CL · “ "* O

‘ 03 -----1------ *3

. CO

( ·Η ·Η : —ι a.

>. co

- ^ -H

cx ! ε b

CO CO

! -* ri -» r* -» O

- υυϋυυ -η cn ----j,-----— ii μ

H · ! C

_ : r ΙΟ Ο MO 03 · ,", “ i ο η n r-t n CL Q.

u c -H U.

Claims (2)

1. 48 92486