FI75174C - Foerfarande foer framstaellning av morfolinyl-daunorubicin och morfolinyl-doxorubicin. - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av morfolinyl-daunorubicin och morfolinyl-doxorubicin. Download PDFInfo
- Publication number
- FI75174C FI75174C FI832637A FI832637A FI75174C FI 75174 C FI75174 C FI 75174C FI 832637 A FI832637 A FI 832637A FI 832637 A FI832637 A FI 832637A FI 75174 C FI75174 C FI 75174C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- morpholinyl
- deamino
- cyano
- choh
- formula
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D309/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings
- C07D309/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D309/08—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D309/14—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/20—Carbocyclic rings
- C07H15/24—Condensed ring systems having three or more rings
- C07H15/252—Naphthacene radicals, e.g. daunomycins, adriamycins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Description
75174
MENETELMÄ MORFOLINYYLI-DAUNORUBISIINIEN JA MORFOLINYYLI-DOKSORUBISIINIEN VALMISTAMISEKSI - FÖRFARANDE FÖR FRAMSTÄLLNING AV MORFOLINYL-DAUNORUBICIN OCH MORFOLINYL-DOXORUBICIN
Tämän keksinnön kohteen on menetelmä terapeuttisesti vaikuttavien morfolinyyli-daunorubisiinien ja morfolinyylidokso-rubisiinien valmistamiseksi. Mainitut yhdisteet ovat antrasykliinisten doksorubisiinin ja daunorubisiinin analogeja, jotka ovat hyödyllisiä kasvainlääkkeitä.
Doksorubisiini (adriamysiini), jota on kuvattu US-patentti-julkaisussa no. 3 590 028 (F. Arcamone et ai.), on ehkä tämän hetken hyödyllisin uusi syöpälääke. Se (yhdessä daunorubisiinin kanssa) on pääaine tavattoman monien kiinteiden kasvainten ja leukemian hoidossa. Ikävä kyllä, monet näitä kasvaimia sairastavat potilaat eivät reagoi eivätkä käytännöllisesti katsoen ketkään eräitä vakavia kasvain-tyyppejä (paksusuolensyöpä, melanoma) sairastavat potilaat reagoi. Lisäksi eräissä potilaissa pitkäaikainen hoito aiheuttaa irreversiibelejä sydänvaurioita, jotka voivat olla kohtalokkaita hoitoa jatkettaessa. Näin ollen on olemassa suuri tarve löytää analogeja, joilla on parempi vaste, laajemi vastespektri ja pienempi sydämeen kohdistuva myrkkyvaikutus. Tehokkaampia ja vähemmän myrkyllisiä aineita etsitään useilla suunnilla ja ne ovat tämän keksinnön pääkohteena. Tähän mennessä aktiivisimpia analogeja, kun arvioinnissa käytetään hiiren leukemiaan P388 kohdistetussa kolmen annoksen kokeessa (q4d 5, 9, 13) saatuja seulontatuloksia, ovat kaksi lipofiilista johdannaista (AD32 ja Ν,Ν-dibentsyylidaunorubiisini), jotka vaativat huomattavasti suurempia annoksia eivätkä reagoi DNA:n kanssa in vitro, vaikka DNA:n uskotaan olevan pääasiallinen biologinen antrasykliinisarjän vaikutuskohde. Useimmat N-alkyylijohdannaiset ovat olleet aktiivisia kas-vainlääkeseulonnassa hiiren P388-leukemian suhteen, mutta ne eivät eroa oleellisesti doksorubisiinista tai daunorubi-siinista. Muutamat tällaiset johdannaiset ovat olleet inaktiivisia.
2 75174
Suuri osa doksorubisiinin ja sen antrasykliinianalo-gien historiasta ja ennestään tunnetusta tiedosta on löydettävissä David W. Henryn artikkelista "Adriamycin", ACS Symposium Series, No. 30, Cancer Chemotherapy, American |
Chemical Society, ss. 15-57 (1976) ja Federico Arcamonen ! kirjasta Doxorubicin, Academic Press, 1981. Yhdistettä ) AD32 on selostettu US-patenttijulkaisussa no. 4 035 566, päivätty 12. heinäkuuta, 1977. j 3'-deamino-3'-(4-morfolinyyli)daunorubisiini, jota on selostettu US-patenttijulkaisussa no. 4 301 277, jul- ; kaistu 17. marraskuuta, 1981, henkilöille Edward M. !
Acton ja Carol W. Mosher ja siirretty nyt käsillä olevan keksinnön oikeudenomistajalle, oli aktiivinen annoksena, jonka suuruus oli yksi neljäskymmenesosa doksorubisiinin annoksesta, mutta antoi käytännöllisesti katsoen identtisen T/C-arvon (166% vs 160% P388:n suhteen). Tätä yhdistettä ja sen valmistusta ovat myös Carol W. Mosher, Helen Y. Wu, Allan N. Fujiwara ja Edward M. Acton selostaneet julkaisussa "Enhanced Antitumor Properties of 3 *-(4-Morpho-linyl) and 3'- (4-Methoxy-1-piperidinyl) Derivatives of 3' -Deaminodaunorubicin", J. Medicinal Chem. , 2j>, ss.
18-24 (1982).
G.L. Tong, H.Y. Wu, T.H. Smith ja D.W. Henry ovat selostaneet yleistä pelkistävää alkylointimenetelmää uusien puolisynteettisten antrasykliinijohdannaisten valmistamiseksi julkaisussa "Adriamycin Analogs. 2. Synthesis of N-Alkylated Antrhacyclines With Enhanced Efficacy and Reduced Cardiotoxicity", J. Medicinal Chem., 22^, ss.
912-918 (1979).
Tämä ennestään tunnettu aineisto sisällytetään näillä viittauksilla osaksi tätä selitystä.
Nyt on löydetty uusi daunorubisiinien ja doksorubi-siinien joukko. Nämä yhdisteet voidaan esittää yleisellä kaavalla I
II
3 751 74
O j>H
f \ Il Γ'°Η (I)
H3CO o OH O
jpi
¢/ N\r CN
jossa R on CO-CH3 tai CHOH-CH3, kun daunorubisiinijohdannaiset ovat kyseessä, tai 00-ΟΗ3ΟΗ tai CHOH-CH2OH, kun doksorubisiinijohdannaiset ovat kyseessä.
Keksinnön mukaiselle menetelmälle mainittujen yhdisteiden valmistamiseksi on tunnusomaista se, että ennestään tunnettu daunorubisiini tai doksorubisiini, jonka kaava on seuraava H CO O OH ; 3 o ΗΟΪ-f NH . HC1 4 75174 jossa kaavassa R on -C0-CH3 tai -C0-CH20H, saatetaan polaarisen orgaanisen väliaineen ja veden seoksessa reagoimaan 2,2'-oksidiaseta 1dehydin,jonka kaava on seuraava
- CHO
\
CH2 - CHO
ylimäärän (18 moo 1iekviva1 enttia) kanssa, joka on valmistettu "in situ" halkaisemalla 1,4-anhydroerytri toii natriumper-jodaatilla vesiliuoksessa huoneenlämpötilassa, reaktion tapahtuessa huoneenlämpötilassa lähtöaineesen nähden kahden aikaiimetal1isyanoborohydridin , kuten natrium- tai kalium-syanoborohydridin, mooliekviValentin läsnäollessa, ja että raaka reaktiotuote, joka saadaan lähtöaineiden emäksisten morfoiinojohdannais ten ja niiden 13-dihydroanalogien ja vastaavien neutraalien 3''-syano-morfo1inoana1ogien seoksena, jaetaan emäksisiin ja neutraa1 eihin jakeisiin ja neutraaleille jakeille suoritetaan kromatografinen erotuskäsittely si1ikagee1ipy1väässä käyttäen eluenttina CH Cl -CH OH-seosta
L· C O
(9:1 til./til.), jossa CH OH:n määrää kasvatetaan, jolloin halutut kaavan 1 mukaiset 3' '-syanomorfolinojohdannaiset (R=-C0-CH3 tai -C0-CH20H) saadaan ensimmäisessä eluaatissa ja vastaavat kaavan I mukaiset 3 ' '-syano-13-dihydrojohdan-naiset (FU-CHOH-CH^ tai CH0H-CH20H) jatketussa eluoinnissa ja nämä puhdistetaan lopuksi sinänsä tunnetuin menetelmin.
Keksinnön mukaisesti valmistetut yhdisteet ovat sukua dauno-rubisiinille ja doksorubisiinille (adriamysiini), jotka ovat todettuja syöpälääkkeitä, ja ne valmistetaan niistä kemiallisilla synteeseillä ja johdannaistenmuodostusmenetelmillä ja ovat vaikuttavia aineita syövän suhteen. Niissä näyttää yhdistyvän kaksi edullista ja tavoiteltua ominaisuutta -suuri kasvaintenvastainen tehokkuus ja annosten pienuus.
Il 5 751 74 Näin ollen ne lupaavat suurta tehol1isuutta liittyneenä aikaisempaa vähäisempiin annostukseen liittyviin sivuvaikutuksiin, kuten kardiotoksisuuteen, verrattuna edellä-selostettuihin aineisiin.
Lisäksi tämä keksintö tarjoaa farmaseuttisia valmisteita, jotka sisältävät näitä uusia johdannaisia.
Tämä keksintö tarjoaa daunorubisiinin ja doksorubisiinin syanomorfolinyylijohdannaisia. Nämä yhdisteet on lueteltu taulukossa I.
Taulukko I
Keksinnön mukaisia yhdisteitä (Kaava I) R Yhdisteen nimi CO-CH3 3'-deamino-3'-(3"-syano-4"-morfoli- nyyli)daunorubisiini CHOH-CH^ 3'-deamino-3'-(3"-syano-4"-morfoli- nyyli)-13-dihydrodaunorubisiini CO-CH2OH 3'-deamino-3'-(3"-svano-4"-morfoli- nyyli)doksorubisiini CHOH-CH2OH 3 ' -deamino-3'-(3"-syano-4"- morfolinyyli)-13-dihydrodokso-rubisiini
Neljä näistä yhdisteistä on erityisen edullisia, koska niillä on erinomainen aktiivisuus kasvainlääkkeinä. Nämä ovat 3'-deamino-3'-(3"-syano-4"-morfolinyyli)-doksorubisiini; 3'-deamino-3'-(3"-syano-4”-morfolinyyli)-13-dihydrodokso-rubisiini; 31-deamino-31 -(3"-syano-4"-morfolinyyli)daunorubisiini; ja 31-deamino-3'-(3"-syano-4"-morfolinyyli)-13-dihydrodauno-rubisiini·
Ensimmäinen näistä neljästä yhdisteestä on kaikkein edullisin.
6 751 74
Eräät tämän keksinnön mukaisesti saatavat edulliset yhdisteet voidaan valmistaa yleisesti ottaen seuraavalla tavalla:
Ensin kaupallisesti saatavissa oleva daunorubisii-ni tai doksorubisiini (happoadditiosuolana) saatetaan pelkistävissä alkylointiolosuhteissa reagoimaan 2,2'-oksidiasetaldehydin 0=CH CH=0
I I
ch2-o-ch2 kanssa. Tällä alkyloinnilla saadaan tuoteseos, jossa on neljä pääkomponenttia. Daunorubisiinin tapauksessa nämä komponentit ovat: 3 ' -deamino-3 ' - (4 ’’-morfolinyyli) daunorubisiini; 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyyli)-13-dihydrodaunorubisiini; 3'-deamino-3'-(3"-syano-4"-morfolinyyli)daunorubisiini ja 3'-deamino-3'-(3"-syano-4"-morfolinyyli)-13-dihydrodaunorubisiini .
Doksorubisiinin tapauksessa reaktiotuotteen sisältämät komponentit ovat: 3'-deamino-31 -(4"-morfolinyyli)doksorubisiini; 3'-deamino-31 -(4"-morfolinyyli)-13-dihydrodoksorubisiini; 3'-deamino-31 -(3"-syano-4"-morfolinyyli)doksorubisiini ja 3'-deamino-31 -(3"-syano-4"-morfolinyyli)-13-dihydrodoksorubisiini.
2,21-oksidiasetaldehydi voidaan valmistaa suorittamalla happohydrolyysi 2,2'-oksidiasetaldehydi-bis(dietyyli- asetaalille) (Et.0) CH CH-(o-Et), 2 1 I 2 CH2-0-tH2
HO-CH-CH-OH
I I
CH2-0-CH2
II
menetelmällä, jota on selostettu belgialaisessa patentti julkaisussa no. 655 436 (Field et ai.), tai katkaisemal la 1,4-anhydroerytritoli 7 75174 käyttämällä menetelmiä Barry et ai.. Carbohydrate Research 1.· 299 (1968) ja Greenberg et ai., Carbohydrate Research 35, 195 (1974).
Pelkistävä alkylointi voidaan suorittaa käyttämällä dialdehydiylimäärää liuotinseoksessa, jossa on vettä ja polaarista orgaanista liuotinta, kuten vettä ja asetonit-riiliä, yleensä pH:ssa noin 7 pelkistimen läsnäollessa, jona voidaan käyttää esim. alkalimetallisyanoboorihydridiä, kuten natrium- tai kaliumsyanoboorihydridiä. Tämä on suhteellisen helposti tapahtuva reaktio, joka saadaan päätökseen tunnissa tai sitäkin lyhyemmässä ajassa huoneenlämpö-tilassa. Pelkistävää alkylointia on selostettu esimerkeissä ja se tunnetaan myös USA:n patenttijulkaisusta no. 4 301 277 ja julkaisusta J. Medicinal Chem., Z5, ss. 18-24 (1982), joihin on viitattu edellä.
Reaktiotuoteseoksen jatkokäsittely voidaan suorittaa millä tahansa sellaisella menetelmällä, jolla saavutetaan haluttu erottuminen. Reaktiotuotteen happouutolla voidaan erottaa happoon uuttuvat ei-syanosubstituoituneet materiaalit happoonliukenemattomista syanosubstituoituneista materiaaleista. Näin saadut yhdisteparit voidaan sen jälkeen erottaa yksittäisiksi yhdisteiksi erilaisilla kromatografisilla menetelmillä, kuten preparatiivisen mittakaavan ker-roskromatografiällä, pylväskromatografiällä tai prepara-tiivisella suuren suorituskyvyn nestekromatografiällä.
Keksintöä valaistaan tarkemmin seuraavilla esimerkeillä. Ne on tarkoitettu selventämään keksintöä eikä rajoittamaan sitä.
8 7 517 4
Esimerkki 1 1 ° 1 ' * 3'-deamino-3 L( 3"-syano-4"-morfolinyyli)daunorubisiinin valmistus, eristäminen ja identifiointi A. Noudattamalla menetelmää 3'-deamino-3'-morfo-linodaunorubisiinihydrobromidin valmistamiseksi, joka on esitetty julkaisussa Mosher et ai., J. Medicinal Chem., 25, ss. 18-24 (1982), saatiin epäpuhdas reaktiotuote, jossa oli 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyyli)daunorubisiinia, 3-deamino-3'-(4"-morfolinyyli)-13-dihydrodaunorubisiinia, 3’-deamino-3'-(3"-syano-4"-morfolinyyli)daunorubisiinia ja 3'-deamino-3'-(3"-syano-4"-morfolinyyli)-13-dihydro-daunorubisiinia. (Tämä artikkeli sisällytetään viitteeksi.) Epäpuhdas tuote uutettiin CHCl^lla maininnan mukaan niin, että primääriset tuotteet siirtyivät CHCl^-faasiin. Kun CHCl^-faasi uutettiin perusteellisesti 0,01N suolahapolla, poistuivat molemmat emäksiset morfolinotuot-teet, kuten viitejulkaisussa on selostettu. Neutraalin tuotteen suhteen rikastettu CHCl^ pestiin NaHCO^-liuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin. Näytteet liuotettiin CHCl^: CH^OH-seokseen (4:1) ja sijoitettiin suuren suorituskyvyn nestekromatografiapylvääseen (Waters Radial Pak C-18) ja eluoitiin nopeudella 2 ml/min käyttämällä eluenttina seosta, jossa oli 0,05M sitraattipuskuria pH 4 ja CH^CN (65 : 35) . Yksi yhdiste (tavallisesti 19-24 % koko määrästä) eluoitui 6,1-6,8 minuutin kohdalla, kun taas toinen yhdiste (tavallisesti 26-27 %) eluoitui 11,9 minuutin kohdalla. Ilmaisin oli UV aallonpituudella 254 nm. Kuten jäljempänä osoitetaan 6,1-6,8 minuutin yhdiste oli 3'-deamino-3'-(3"-syano-4"-morfolinyyli)-13-dihydrodaunorubisiini ja 11,9 minuutin yhdiste oli 3'-deamino-3'(3"-syano-4"-morfolinyyli)dauno-rubisiini.
B. Suuremmassa mittakaavassa 5,41 g kiinteätä sivutuotetta liuotettiin 500 ml:aan CHCl^CH^OH-seosta
II
9 75174 (9:1). Tämä liuos pestiin 0,01 N HCl:lla (3 x 100 ml), vedellä (1 x 100 ml) ja laimealla NaHCO^lla (1 x 100 ml). Orgaaninen faasi kuivattiin, haihdutettiin kuiviin ja jäännös kuivattiin vakuumissa (0,1 mm) huoneenlämpötilassa, jolloin saatiin 5,10 g lasimaista jäännöstä. Vesifaasi säilytettiin myös.
C. Kohdassa B saatu lasimainen jäännös, 5,09 g, liuotettiin 50 ml:aan Cf^C^tCH^OH-seosta (4:1). Liuosta sekoitettiin samalla, kun lisättiin 30 ml CH^CN tipoittain. Samea liuos, joka syntyi, haihdutettiin kuiviin niin, että saatiin puolikiinteä jäännös, joka hierrettiin 200 ml:aan CH^CN pimeässä. Liukenematon kiinteä aine otettiin talteen ja hierrettiin toisen kerran 100 ml:aan CH^CN. Molemmissa hiertämisissä saadut nestemäiset faasit sisälsivät halutun tuotteen. Ne haihdutettiin, jolloin saatiin 2,23 g puoli-kiinteätä jäännöstä.
D. Kohdassa C saatu puolikiinteä jäännös liuotettiin 5 ml:aan ja sijoitettiin pylvääseen (ulkohalkaisija 3,1 cm x 59 cm), jossa oli CHjCljilla pestyä Mallinckrodt Silic AR CC-7-silikageeliä (200-325 mesh). Pylväs eluoi-tiin Cf^C^illa (500 ml) ja sen jälkeen Cf^C^-CH-jOH-seoksella (99:1, 1500 ml; 98:2, 1000 ml; 97:3, 1500 ml; 90:10, 500 ml). Kun oli kerätty (10 ml:n jakeissa, seurattiin TLC:llä) 2550 ml alkueluaattia, 190 ml:n jae haihdutettiin, jolloin saatiin 0,48 g tuotetta. Primäärinen komponentti määritettiin vertailevalla suuren suorituskyvyn nestekromatografiällä ja ohutkerroskromatografi-alla ja todettiin olevan identtinen yhdisteen kanssa, jonka myöhemmin todettiin olevan 31-deamino-3'-(3"-synao- 4"-morfolinyyli)daunorubisiini.
E. Kohdassa D saadusta yhdisteestä puhdistettiin vielä 0,35 g näyte ensin pimeässä viidellä silikageeli-levyllä (2 mm x 20 x 20 cm) käyttämällä kahta kehitystä Ci^C^-CH^OH-seoksella (29:1). Keskikaista, jossa oli 65 % käytetyn näytteen painosta, leikattiin irti, eluoi-tiin, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin.
10 75174 F. Kohdassa E saatu tuote yhdessä muiden samalla tavalla puhdistettujen yhdisteiden kanssa, jotka oli saatu kromatografisesti viereisistä vyöhykkeistä (0,18 g), puhdistettiin lopullisesti silikageelipylväässä (200 -400 mesh; 1,1 cm (ulkohalkaisija) x 27 cm. Pylväs elu-oitiin ensin CH2Cl2-Et0Ac-seoksella (80:20, 30 ml; 60:40; 30 ml; 40:60, 30 ml; 20:80, 30 ml) ja sitten EtOAc:lla (175 ml). Kun oli kerätty (2 ml jakeissa, joita seurattiin TLC:llä) 162 ml alkueluaattia, otettiin talteen 88 ml:n jae ja haihdutettiin, jolloin saatiin 0,15 g tuotetta.
Alkuaineanalyysi, NMR (360 MHz), UV, IR ja massa-spektroskopia varmistivat, että tämä puhdas yhdiste oli nimeltään 3'-deamino-3'-(3"-syaho -4"-morfolinyyli)daunoru-bisiini.
Tämän tuotteen esiintyminen diastereomeerisenä seoksena todettiin HPLC- ja NMR-analyysillä (360 MHz). HPLC-analyysi (Waters Radial-Pak C-18-pylväs) käyttämällä o,05M sit-raattipuskurin (pH 4) ja CH3CN:n seosta (60:40) nopeudella 2 ml/min osoitti kaksi lähekkäsitä piikkiä (kohdissa 9,6 minuuttia ja 10,2 minuuttia) suhteessa 53:44. Tämän materiaalin NMR-spektri (360 MHz) osoitti kahta resonanssia protoneille 6-OH, 11-OH, 1-H, 2-H, 3-H, 1'-H, 7-H, 9-OH, 10A-H, 14-H3 ja 6-H3.
360 MHz NMR CDCl3 /13,99, 13,98 (2s, 6-OH), 13,25, 13,24 (2s, 11-OH), 8,02, 8,00 (2d, 1-H), 7,79, 7,77 (2t, 2-H), 7,40, 7,38 (2d, 3-H), 5,59, 5,56 (2d, 1’-H), 5,29, 5,26 (2bs, 7-H), 4,47*·, 2,34« (2s, 9-OH), 4,08, (s, OCH3), 3,97-4,07 (m, 2" B-H, 5'-H), 3,92 (t, J=12Hz 3"-H) , 3,74 (m, 2"A-H, 6"B-H) , 3,68 (bs, 4Ή), 3,58 (t, J=12Hz, 6"A-H), 3,20 (d, J=19Hz, 10B-H), 2,91, 2,90 (2d, J=19Hz, 10A-H), 2,75-2,95 (m, 3'-H), 2,68 (m, 5"-H2), 2,43, 2,42 (2s, 14-H3), 2,35 (m, 8B-H), 2,13 (m, 8A-H), 1,70-2,0 (m, 2'-H2), 1,86* (s, 4'-OH, H20), 1,37, 1,36 (2d, J=6,4 Hz, 6-H3) ♦vaihdettavissa D20:n kanssa
II
11 75174
Massaspektri: /trimetyylisilyylijohdannaisina (TMS^7 m/e 910 /M(TMS)4_7, 895 /~M (TMS)4-Me7, 883 /M(TMS)4”HCn7, 838 /M(TMS>3 J, 823 /M(TMS)3»M§7, 811 /M(TMS)3-HCN7, MS kohdassa 70 ev näytti peruspiikin (HCN) m/e 27.
Esimerkki 2 3'-deamino-3'-(3"-syano-4"-morfolinyyli)-13-dihydrodauno-rubisiinin eristäminen
Esimerkin 1 osan D mukaisesti kromatografoitiin seos, jossa oli 3 '-deamino-3 ,-(3”-syano-4,'-morfolinyyli)daunoru-bisiinia ja 3'-deamino-3'-(3"-syano-4"-morfolinyyli)-13-dihydrodaunorubisiinia ja otettiin sarja jakeita. Kun oli kerätty 3460 ml eluenttia, otettiin 430 ml:n jae, jossa oli 12,5 % alussa lisätystä materiaalista käytännöllisesti katsoen yhtenä yhdisteenä, ja jae haihdutettiin. Tämän jakeen sisältämän yhdisteen todettiin HPLC-analyysin avulla olevan identtinen sen materiaalin kanssa, joka aikaisemmin todettiin NMR:n ja massaspektroskopian avulla 3'-deamino-3'-(3"-syano-4"-morfolinyyli)-13-dihydrodaunorubisiiniksi . Tämä materiaali voitiin puhdistaa oleellisesti ottaen esimerkin 1 kohdissa E ja F kuvatuilla menetelmillä niin, että saatiin oleellisesti ottaen puhdas 3'-deamino-3'-(3"-syano-4"-morfolinyyli)-13-dihydrodaunorubisiini.
Esimerkki 3 3,-deamino-3'-(4"-morfolinyyli)daunorubisiinin ja 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyyli)-13-dihydrodaunorubisiinin eristäminen
Esimerkin 1 osissa A ja B eristettiin 0,01N-HCl-faa-si, joka sisälsi 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyyli)daunorubi-siinin ja 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyyli)-13-dihydrodaunorubisiinin. Tämä vesifaasi sisälsi noin 40% käytetystä materiaalista. Sitten tämä vesifaasi käsiteltiin käyttämällä menetelmää, jota on selostettu edellämainitussa viitteessä J. Medicinal Chem., 25, jolloin saatiin 3'-deamino- 12 751 74 3'-(4"-morfolinyyli)daunorubisiini ja 31-deamino-3'-(4’’-morfolinyyli)-13-dihydrodaunorubisiini erillisinä yhdisteinä.
Esimerkki 4 3'-deamino-3'-(3"-syano-4"-morfolinyyli)doksorubi-siinin ja 3 '-deamino-3'-(3"-syano-4’’-morfolinyyli)-1 3-di-hydrodoksorubisiinin valmistus A. Reaktiossa, joka oli analoginen artikkelissa J. Medicinal Chem., _25 kuvatun kanssa, lisättiin vesihauteella lämpötilassa 15-20°C sekoitettuun liuokseen , jossa oli 6,25 g (60,0 mmol) 1,4-anhydroerytritolia
OH OH
75 ml:ssa vettä, 6,42 g (30,0 mmol) natriummetaperjodaat-tia. Saatua kirkasta liuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 17 tuntia. Liuoksen pH säädettiin välille 4,0 - 7,3 lisäämällä NaHCO^ ja sen jälkeen se laimennettiin sekoittamalla mukaan 75 ml CH^CN. Muodostui sakka. Seosta sekoitettiin samalla, kun siihen lisättiin 0,126 g (2,0 mmol) NaBH^CN 5 ml:ssa CH^CN-H20-seosta (1:1 tilavuuksina). Sitten tähän seokseen lisättiin 1,16 g (2,0 mmol) dokso-rubisiinihydrokloridia 30 ml:ssa CH2CN-H20-seosta (1:1).
10 minuutin kuluttua reaktioseos laimennettiin 50 ml :11a laimeata natriumvetykarbonaattia ja uutettiin kolmesti 50 ml:n erillä CHCl^a. Tämä epäpuhdas uute sisälsi 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyyli)doksorubisiinin, 3'-deamino-3 ' - (4 ’’-morfolinyyli) -1 3-dihydrodoksorubisiinin, 3' -deamino-3'-(3"-syano-4"-morfolinyyli)doksorubisiinin ja 3'-deamino-3'-(3"-syano-4"-morfolinyyli)-13-dihydrodoksorubisiinin. Yhdistetyt uutteet uutettiin 0,1N etikkaha-polla (5 x 25 ml) ja sen jälkeen vedellä ja pestiin lai- li 13 751 74 mealla natriumvetykarbonaatilla ja natriumkloridin kyllästetyllä vesiliuoksella. Happo-vesifaasi säilytettiin. Kloroformifaasi kuivattiin NaSO^rllä, suodatettiin piimään läpi (Celite) ja väkevöitiin niin, että saatiin jäännös. Tämä jäännös liuotettiin 25 ml:aan kloroformia ja liuotin haihdutettiin uudestaan vakuumissa huoneenlämpö-tilassa. Näin saatiin 0,518 g (40 %) tummanpunaista vaah-tomaista lasia.
B. Osa kohdassa A saatua vaahtoutunutta lasia liuotettiin CH3CN:iin ja injektoitiin suuren suorituskyvyn nes-tekromatografiapylvääseen (Waters RadLal-Pak C-18) ja elu-oitiin nopeudella 2 ml/min 0,05M sitraattipuskuriin (pH 4,0) ia CH^CNin seoksella (55:45). Yhdisteiden eluoituminen havaittiin aallonpituudella 254 nm. 2,3 minuutin kohdalla saatiin materiaali, joka identifioitiin 3'-deamino-3'- (3"-syano-4’’-morfolinvyli) -1 3-dihydrodoksorubisiiniksi 13 % saannolla (injektoidun seoksen perusteella laskettuna) ja 3,8 minuutin kohdalla saatiin 3'-deamino-3'-(3"-syano-4"-morfolinyyli)doksorubisiini 69 % saannolla. Muut samanlaiset tuotteet kerättiin yhteen ja erotettiin HPLC:llä.
C. 3' -deamino-3' - (3"-syano-4 "-morfolinyyli) doksorubisiinin ja 3'-deamino-3'-(3"-syano-4"-morfolinyyli)-13-dihydro-rubisiinin eristäminen toistettiin seuraavalla tavalla: 0,424 g:n erä osassa A saatua vaahtoutunutta lasia liuotettiin 1,5 ml:aan CH2C12 ja sijoitettiin Bio-Sil A Silica gel-pylvääseen (200-400 mesh), jonka koko oli 1,5 x 35,5 cm, ja joka oli pesty CH2Cl2:lla. Pylväs eluoitiin CH2Cl2:lla (50 ml) ja sen jälkeen CH2C12~ CH30H-seoksella (99: 1 , 150 ml; 98:2, 150 ml; 97:3, 300 ml; 95:5, 100 ml ja 90:10, 300 ml). Kun oli kerätty 445 ml alkueluaattia, otettiin 80 ml:n jae, joka haihdutettiin ja saatiin 0,217 g tuotetta. Tämä materiaali yhdistettiin 0,039 g:aan aikaisemmin valmistettua tuotetta ja 14 75174 liuotettiin 2 ml:aan metyleenikloridia, laimennettiin 10 ml:11a CH^OH ja haihdutettiin kuiviin. Kun tämä jäännös hierrettiin 5 ml:n kanssa metanolia, saatiin 0,218 g 3'-deamino-3'-(3"-syano-4"-morfolinyyli)doksorubisiinia.
HPLC ja 400 MHz:n NMR-analyysi indikoivat, että tämä oli diastereomeerinen seos. HPLC-analyysi Waters Radial-Pak C-18-pylväässä käyttämällä 0,05 M sitraatti-puskurin (pH 4) ja CH3CN:n seosta (65:35) nopeudella 2 ml/min, osoitti kaksi lähekkäistä piikkiä (kohdissa 14,4 min ja 15,7 min) suhteessa 58:39. 400 MHz:n spektri osoitti kaksi resonanssia protoneille 1-H, 2-H, 3-H, 1'-H, 7-H, 14-H2, 9-OH, OCH3, 10Α-Η ja δ'-Η^ 400 MHz NMR CDClgS 14,02 (s, 6-OH), 33,26 (s, 11-OH), 8,05, 8,04 (2d, 1-H), 7,80, 7,70 (2t, 2-H), 7,41, 7,40 (2d, 3-H), 5,61, 5,57 (2d, 3 '-H), 5,34, 5,30 (2m, 7-H), 4,79, 4,76 (2 s, 14-H2), 4,54, 4,42 (2s, 9-OH) , 4,11, 4,10 (2 s, 0CH3), 4,05 (m, 5'-H), 3,97 (m, 2"N-H, 3"-H, 6"N-H), 3,71 (m, 41-H, 6"A-H), 3,58 (t, 2"A-H), 3,30 (d, J = 19 Hz, 10B-H), 3,07, 3,06 (2d, 10A-H), 3,03 (m, 3’-H), 2,69 (m, 5" . H 2 ) , 2,38 (m, 8B-H) , 2,22 (m, 8A-H), 1,84 (m, 2'H2), 1,61 (s, H 2 = , 1,40, 1,39 (2d, J = 6,5 Hz, 6 '-H3) .
UV-näkyvä (CH^OH) max 234 nm (ε40,100), 252 (27,700), 289 (9,420), 478 (13,000), 495 (12,900), 530 (7,190). Massaspektri /trimetyylisilyylijohdannaisena (TMS)7m/e 899 M (TMS).-HCN.
4 C H N
Laskettu C32H34N2°12 2H2° 56,97 5,68 4,15 Löydetty 57,07 5,37 4,17
Eluoitaessa edellämainittua pylvästä edelleen, saatiin 0,041 g 3 '-deamino-3'-(3"-syano-4’’-morfolinyyli) - 13-dihydrodoksorubisiinia. UV-näkyvä (CH^OH) max 234 (ε 37,400), 252 (28,000), 289 (9,390), 475 (12,700), 496 (12,800), 530 (7,410). Massaspektri ^trimetyylisi-
II
751 74 15 lyylijohdannainen (TMS]ym/e 985 M(TMS)^-CH3, 973 M(TMS)^-HCN.
C H N
Laskettu Ο,.Η,,Ν,Ο. ‘1,5 H.O 57,57 5,89 4,20 0Z JO z i z z Löydetty 57,35 5,94 3,82
Esimerkki 5 3 1 -deamino-3 ,-(4,'-morfolinyyli) doksorubisiinin ja 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyyli)-13-dihydrodoksorubisiinin eristäminen A. Esimerkin 4 kohdassa A saatu happo-vesifaasi tehtiin emäksiseksi natriumvetykarbonaatilla ja uutettiin CHCl3:lla. Kloroformifaasi pestiin kyllästetyllä natrium-kloridiliuoksella, kuivattiin Na2SO^:lla, suodatettiin "Celiten" läpi, väkevöitiin ja kuivattiin, jolloin saatiin 0,828 g punaista vaahtoa, joka sisälsi kaksi pääkom-ponenttia, jotka olivat 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyyli)dok-sorubisiini ja 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyyli)-13-dihydro-doksorubisiini, kun suoritettiin analyysi HPLCrllä, 90 MHz NMR:llä, 300 MHz NMR:llä ja UV-näkyvä-spektrosko-pialla ja massaspektroskopialla.
B. Kerättiin 0,99 g vaahtolasia, jollaista valmistettiin osassa A. Tämä materiaali liuotettiin 3 ml:aan kloroformia ja kromatografoitiin silikageelipylväässä (2,2 x 33 cm). Pylväs eluoitiin metyleenikloridilla (50 ml) ja sen jälkeen CH2Cl2-CH3OH-seoksella (99:1, 300 ml; 98:2, 300 ml; 97:3, 900 ml ja 90:10, 700 ml). Kun oli aluksi kerätty 1170 ml eluenttia, otettiin talteen 490 ml:n jae, joka haihdutettiin jäännökseksi. Jäännös sisälsi 45 % käytetyn näytteen määrästä ja HPLC osoitti, että se oli käytännöllisesti katsoen puhdasta (99+%) 3 '-deamino-3'-(4"-morfolinyyli)doksorubisiinia.
16 751 74 90 MHz NMR CDC13 6j3,88 (s, 6-OH), 13,07 (s, 11-0H), 7,90 (d, J = 8 Hz, 1-H), 7,72 (t, J= 8 Hz, 2-H), 7,38 (d, J = 8 Hz, 3-H) , 5,51 (bs, 1 ' -H) , 5,20 (bs, 7-H), 4,75 (s, 14-1^), 4.68 (s, 9-OH), 4,07 (s, 0CH3), 3,98 (m, 5'-H), 3,67 (m, 4 1 -H, 2"-H2, 6”-H2), 3,09 (d, J = 19 Hz, 10B-H), 2,83 (d, J=19 Hz, 10A-H), 2,80-3,20 (m, 3'-H), 2,50-3,00 (bs, 4'-OH, 14-OH), 1,95-2,65 (m, 8-H2, 3"-H2, 5"-H2), (m, 2'-H2) , 1,38 (d, J = 6,5 Hz, 6'-Hg ) .
Massaspektri /trimetyylisilyylijohdannaisina (TMSjy, m/e 973 M(TMS)5, 901 M(TMS)4·
Vapaa emäs suspendoitiin veteen ja tehtiin happamaksi (pH 4,4) 0,1 N suolahapolla. Saatu liuos lyofilisoitiin ja tuote liuotettiin metanoliin ja saostettiin 10 tilavuudella eetteriä, jolloin saatiin hydrokloridi^
C H Cl N
Laskettu C^H^NO., 2 *HC1 * 2H20 54,27 5,88 5,17 2,04 Löydetty 54,08 5,35 4,78 2,00 UV-näkyvä (CH3OH) max 234 nm ( ε 39 000), 252 (26 300), 290 (8 990), 480 (12 600), 495 (12 500), 530 (6 700).
Otettiin 190 ml:n jae ja sen jälkeen 160 ml:n jae. Viimeksimainittu jae haihdutettiin ja sen havaittiin sisältävän 19,5 % lisätyn materiaalin määrästä puhtaana (97 %) 3'-deamino-31 -(4"-morfolinyyli)-13-dihydrodokso-rubisiinina.
300 MHz NMR CDC13 & 1.98, 13,96 (2s, 6,-OH), 13,34, 13,32 (2s, 11-OH = , 8,03 (d, 1-H) , 7,79 (t, 2-H), 7,40 (d, 3-H), 5,56 (bs, 1 '-H) , 5,29 (bs, 7-H), 4,64, 4,59 (2s, 9-0H) , 4,09 (s, 0CH3), 4,03 (m, 5'-H), 3,82-4,05 (m, 4'-H, 13-H), 3.68 (m, 2"-H2, 6"-H , 14B-H), 3,54 (bs, 14A-H), 3,30 (m, 10B-H), 2,98 (bs, OH), 2,87 (bs, OH), 2,77 (m, 10A-H, 3'-H) , 2,30-2,70 (m, 8B-H), 3"-H2, 5"-H.J, 1,99 (m, 8A-H) , 1,78 (m, 2'Hg) , 1,41 (d, β'-Η^ .
Massaspektri /trimetyylisilyylijohdannaisena (TMS)y. m/e 975 M(TMS)5· li 17 751 74 Tämän keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää kasvainlääkkeinä nisäkkäillä. Vaikutus voidaan todeta in vivo- ja in vitro-kokeissa. Eräässä in vivo-kokees-sa, joka suoritettiin julkaisussa Cancer Chemotherapy Reports, National Cancer Institute, 3, No. 2, Part 3, September, 1972, terveisiin hiiriin siirrostettiin i.p. lymfosyyttileukemia P-388 askitesnestettä. Näin käsitellyille hiirille annettiin sen jälkeen 5., 9. ja 13. päivänä eri määrät tämän keksinnön mukaisia yhdisteitä. Vertailukokeissa käytettiin käsittelemättömiä hiiriä ja lisäksi hiiriä, joille oli annettu daunorubi-siinia tai doksorubisiinia; 31-deamino-3'-(4"-morfoli- nyyli) daunorubisiinia tai 3'-deamino-3 '-(4,'-morfolinyyli) -13-dihydrodaunorubisiinia (USA:n patenttijulkaisu no.
4 301 277) tai 3'-deamino-3'-(4-metoksi-1-piperidinyyli)-daunorubisiinia tai sen 13-dihydroekvivalenttia (USA:n patenttijulkaisu no. 4 314 054).
Erilaisten käsiteltyjen hiirten keskimääräinen elos-sapysymisaika määritettiin ja sitä verrattiin sellaisten leukemia-askitesnestettä saaneiden hiirten elossapysy-misaikaan, joille ai annettu koeyhdisteitä. Seuraavassa taulukossa A on esitetty näin saadut tulokset. Tulokset on ilmoitettu prosentuaalisina T/C-arvoina, joilla tarkoitetaan käsiteltyjen hiirten elossapysymisaikaa jaettuna kontrollihiirten elossapysymisaikaan kerrottuna sadalla. Taulukossa A on myös esitetty ne eri yhdisteiden annostukset, joilla saavutettiin parhaat elossa-pysymisajan pitenemiset.
18 751 74
TAULUKKO A
Vaikutus P-388-leuke- L-1210-leuke- miaan hiirillä_ miasolut_
Optimaali- Synteesin
Elossapy- nen annos estyminen symisaika (q4d 5,9,13) ED,_„, μΜ -50-
Yhdiste NSC No.1 % T/C mg/kg DNA RNA
3'-diamino-3'-(3"-syano-4"-morfolinyy- li)daunorubisiini 332,304 197 0,4 0,012 0,002 31-deamino-31(3"-syano-4"-morfoii-nyyli)-13-dihydro- daunorubisiini 332,305 143 0,1 0,019 0,002 3'-deamino-3'-(3"-syano-4"-morfoiinyy- li)-doksorubisiini 357,704 187 0,075 0,003 0,0005 3'-deamino-3'-(3"-syano-4"-morfolinyy-li)-13-dihydrodokso- rubisiini 360,291 150 0,2 0,021 0,0030
Vertailu:
Daunorubisiini 82,151 130 8 0,66 0,33
Doksorubisiini 123,127 160 8 1,5 0,58
Il
NSC No. = National Service Center of US
National Cancer Institute, rekiteröintinumero.
75174 19 TAULUKKO A (jatkoa)
Vaikutus P-388-leuk·;·· L-)Z10-leuke- miaan hiirillä_miasolut
Optimaali- Synteesin
Elosi.r;; y- nen annos estyminen symisaika (q4d 5,9,13)_ED^Q, μΜ *
Yhdiste NSC No. % T/C mg/kg DNA RNA
3’-deamino-31-(4"-morfolinyyli)- daunorubisiini 327,451 166 0,2 0,76 0,10 3'-deamino-31 -(4M-morfolinyyli)-13-di- hydrodaunorubisiini 327,450 132 0,2 2,2 0,67 3'-deamino-3'-(4"-metoksi-l"-piperidi- nyylidaunorubisiini 334,353 199 6,25 0,63 0,12 3'-deamino-3'-(4-metok-si-l-piperidinyyli-13- dihydrodaunorubisiini 334,354 199 12,5 0,58 0,08 Nämä tulokset osoittavat, että tämän keksinnön mukaisilla yhdisteillä on hyvän ja erinomaisen välillä oleva anti- tumorivaikutus in vivo matalina optimaalisina annoksina.
751 74 20
Yhdisteen NSC 357704 optimaalinen annostaso oli noin 1/150 siitä, joka tarvittiin kantayhdistettä käytettäessä. Muilla tämän keksinnön mukaisilla yhdisteillä on optimaaliset annostasot, jotka ovat paljon matalammat kuin daunorubisiinin ja doksorubisiinin vastaavat. Tämä viittaa lupaavalla tavalla siihen, että löytyy aktiivinen kasvainlääke, jolla on oleellisesti vähentynyt kardiotoksisuus.
3 ' -deamino-3 1 - (3"-syano-4 "-morfolinyyli) daunorubi-siinilla ja 3'-deamino-3'-(3"-syano-4"-morfolinyyli)-13-dihydrodaunorubisiinilla tehdyt in vitro-kokeet osoittivat myös, että tämän ryhmän yhdisteillä oli kohonnut aktiivisuus. Kun näitä yhdisteitä testattiin DNA:n ja RNA:n synteesin inhibiittoreina L 1210-soluilla menetelmällä, jota on kuvattu julkaisussa G. Tong, W.W.
Lee, D.R. Black and D.W. Henry, J. Medicinal Chem., 19, 395 (1976), ne olivat aktiivisia annoksina, jotka olivat jopa 600 kertaa pienempiä kuin daunorubisiinin, doksorubisiinin tai ennestään tunnettujen analogien annokset. Niiden havaittiin myös olevan enemmän inhiboivia RNA-synteesin suhteen kuin DNA-synteesin suhteen (ED 50-suhde DNA/RNA = 10-11). S.T. Crooke, et ai., Mol. Pharmacol., V4, 290 (1978) ovat esittäneet arvion, että tällainen suhde ilmentää luokan II antrasykliinejä, joilla on aikaisempia paremmat terapeuttiset ominaisuudet.
Nämä tulokset on esitetty taulukossa A.
Taulukossa A annetut tulokset, joista ilmenee kohonnut antitumorivaikutus morfolinorakenteen kanssa ja edelleen kohonnut tehokkuus syanomorfolinorakenteen kanssa, ovat tyypillisiä tälle yhdistejoukolle.
Tämän keksinnön mukaisten yhdisteiden biologisen aktiivisuuden toteamiseksi suoritettiin lisäkokeita. Nämä olivat in vivo-kokeita, jotka suoritettiin hiirille P-388-ja L1210-leukemian suhteen ja B-16 melanoman suhteen oleel-
II
21 751 74 lisesti ottaen sillä menetelmällä, jota on kuvattu edellämainitussa julkaisussa Cancer Chemotherapy Reports, 1972. Kokeiltiin erisuuruisia annoksia ja eri antotapoja, i.p., i.v. ja suun kautta. Nämä tulokset on esitetty taulukossa B.
22 75174 8 88 8 8 8 8 8 £ do £ co o* o o 8 S g
* i-H Λ rH OJ rH rH
/\
SSI S? 58 IS
S O* °- S °. S m S £ O
s ^ °* £ °* E?i ™ °* o* o 8 SS$ Ag gg
Λ AA
M - ~~ ~ ~ ~ ~ £ S K
€ £ SS 88888 § £ cΓ £ o" ° £ ° 888 a S8^8q§8£ * ^ * H· ^ H ^ H ^ N H g ^ 888
5? A Λ jC *} <D CM
^ jjj ΐί jj '.p ^ g a 1 II |
S | ffl -H
fc ·Η
CD -h W
| -ro | S d W I
^ .¾ s s ® s I 11 I
1 - s il 1
S g g s ij | vl I
t φ ·ιΗ ·Η Ή
. ‘ 3 ^ i—H i—I r-H
S? in ίπ in o <? cm 8 S $ Jj -j]
UJ H-* «H "—·" N—- ·> f-H —" ^ ' tO OJ 4-5 Γ-H Γ-H r-H
gss $ p £ϊηίη 8 ® % aa & β CQ rH rH rH OJ 00 OJ OJ rH Ό in L m . 8^aa>^. i |ξ f
b^H
Isa 8 | j j j
O CQ CO rH 5 CO CO CO
α αΛ -9“ ccc -rH ‘H 8. - I 1 1 1 d -S" <S cd -S* S ‘-P -S -¾ -¾
ω · Sain - cd a > ie in - Ό o. d „ a S TT T
F o c\J -h -σι m ri -h e - oi (Z5-H- m -h e - - a
R 2 H rH I CO ^ Λ rH Ί rH lO rH __ ft COCO CO
.9· £ 3· & -9· ^ S .9· ^ * SS S
II
23 751 74 Tämän keksinnön mukaiset yhdisteet voidaan antaa mitä tahansa tarjolla olevaa tietä käyttäen, oraalinen ja parenteraalinen mukaanluettuina (intravenoosisesti, intraperitoneaalisesti, subkutaanisti tai intramuskulaarisesti). Parenteraalinen antotapa, erityisesti intravenoosinen antotapa, ovat perinteisesti käytettyjä ja tämä on etusijalle asetettava. Annostuksen tulee olla sellainen, että se riittää parantamaan leukemian tai muuntyyppisen syövän, joiden suhteen yhdisteet ovat tehokkaita. Esimerkiksi hoidettaessa alempia koe-eläimiä tämän keksinnön mukaisen yhdisteen annostuksen, joka on välillä noin 0,0010 mg/kg - noin 25 mg/kg vuorokaudessa , pitäisi olla riittävä leukemian parantamiseksi. Ylempi annosraja on se, jossa alkaa ilmetä myrkyllisiä sivuvaikutuksia, ja se voidaan määrittää yrityksen ja erehdyksen menetelmällä eläintä hoidettaessa. Yleensä ottaen on tämän keksinnön mukaisten yhdisteiden annostus pienempi (esim. 1/20 - 1/200 kertaa) kuin kantayhdistettä käytettäessä vaadittava. Annostuksessa tehoaa yksi annos 2-7 vuorokauden välein, vaikka lyhempiäkin välejä, kuten vuorokausi tai vähemmän, voidaan käyttää yhtä hyvin.
Antamisen helpottamiseksi voidaan tämän keksinnön mukaiset yhdisteet sijoittaa farmaseuttisen seoksen muotoon, erityisesti yksikköan- nosmuotoon. Vaikka yhdisteet voidaan antaa per se, on tavallisempaa antaa ne yhdessä farmaseuttisesti hyväksyttävän kantoaineen kanssa, joka laimentaa yhdisteen ja helpottaa käsittelyä. Termi "farmaseuttisesti hyväksyttävä" tarkoittaa sitä, että kantoaine (samoin kuin näin saatu seos) on steriili ja myrkkyvaikutukseton.
Suun kautta tapahtuvaa antoa varten kantoaine tai laimennin voi olla kiinteä, puolikiinteä tai nestemäin-nen ja se voi toimia apuaineena, laimennusaineena tai väliaineena vaikuttavalle aineelle, kuten farmakologi- 751 74 24 sessa kirjallisuudessa on kuvattu. Parenteraalista antoa varten yhdiste liuotetaan tai suspendoidaan sopivaan injektoitavaan nestemäiseen väliaineeseen, kuten alaan perehtyneet tietävät.
Näiden annösmuotojen valmistamiseksi voidaan käyttää alalla hyväksyttyjä menetelmiä vesiliukoisten farmaseuttisten aineiden formuloimiseksi (suolojen ollessa kyseessä) ja veteenliukenemattomien aineiden formuloimi-seiksi (vapaiden emästen ollessa kyseessä). Esimerkiksi ruiskeina annettavat yhdisteet voidaan formuloida seu-raavalla tavalla:
Formulaatio A:
Steriili suspensio vesipitoisessa apuaineessa ruiskeita varten mg
Esimerkkien 1, 2, 3, 4 tai 5 mukainen yhdiste suspendoitavana jauheena 3
Natriumsitraatti 5,7
Natriumkarboksimetyyliselluloosa (matalan viskositeetin laatuna) 2,0
Metyyli-para-hydroksibentsoaatti 1,5
Propyyli-para-hydroksibentsoaatti 0,2
Vesi ruiskeita varten 1,0 mlrksi
Formulaatio A':
Steriili suspensio vesipitoisessa apuaineessa ruiskeita varten mg 3'-deamino-3'-(3"-syano-4"-morfolinyyli)-doksorubisiini (esimerkki 4) 0,5
Natriumsitraatti 5,7
Natriumkarboksimetyyliselluloosa (matalan viskositeetin laatu) 2,0
Metyyli-para-hydroksibentsoaatti 1,5
Propyyli-para-hydroksibentsoaatti 0,2
Vesi ruiskeita varten 1,0 ml:ksi li 75174 25
Formulaatio D1:
Kapseliformulaatio mg 3 ' -deamino-3' - (3 "-syano-4 ’’-morfolinyyli) -doksorubisiini (esimerkki 4 (C) 1
Laktoosi 199
Esimerkin 4(C) mukainen yhdiste ja laktoosi lasketaan seulan läpi ja sekoitetaan keskenään, ennenkuin niillä täytetään sopivankokoiset liivatekapselit niin, että kuhunkin kapseliin tulee 200 mg jauheseosta.
Claims (1)
- 26 PATENTTIVAATIMUS ^ _ 751 74 Analogiamenetelmä kaavan I mukaisen terapeuttisesti vaikuttavan yhdisteen valmistamiseksi H CO 0 OH ; J 9 (I ) <5/ HO |-* s,·^ jossa kaavassa R on -CO-CH^, -CHOH-CH^» -CO-CH^OH tai -CHOH-CH^OH, tunnettu siitä, että yhdiste, jonka kaava on h co o oh ; HO |-f NH2 . HC1 jossa kaavassa R on -CO-CHg tai -C0-CH20H, saatetaan polaarisen orgaanisen väliaineen ja veden seoksessa reagoimaan 2,2'-oksidiasetaldehydin,jonka kaava on seuraava ^ch2 - CHO \ CH2 - CHO II 751 74 27 [ ylimäärän (18 mooliekvivaienttia ) kanssa, joka on valmistettu "in situ" halkaisemalla 1,4-anhydroerytritoii natriumper-jodaatilla vesiliuoksessa huoneenlämpötilassa, reaktion tapahtuessa huoneenlämpötilassa 1ähtöaineesen nähden kahden aikaiimetal 1isyanoborohydridin, kuten natrium- tai kalium-syanoborohydridin, mooliekviValentin läsnäollessa, ja että raaka reaktiotuote, joka saadaan lähtöaineiden emäksisten morfolinojohdannaisten ja niiden 13-dihydroanalogien ja vastaavien neutraalien 31'-syano-morfoiinoanalogien seoksena, jaetaan emäksisiin ja neutraaleihin jakeisiin ja neutraaleille jakeille suoritetaan kromatografinen erotuskäsittely si1ikagee1ipy1väässä käyttäen eluenttina CH^Cl^-CHgOH-seosta (9:1 til./til.), jossa CHgOHrn määrää kasvatetaan, jolloin halutut kaavan I mukaiset 3 ' '-syanomorfo1inojohdannaiset (R=-CO-CH^ tai -CO-CH^OH) saadaan ensimmäisessä eluaatissa ja vastaavat kaavan I mukaiset 3''-syano-13-dihydrojohdan-naiset (R=-CHOH-CHg tai CH0H-CH20H) jatketussa eluoinnissa ja nämä puhdistetaan lopuksi sinänsä tunnetuin menetelmin. 28 patentkrav 7 517 4 Analogförfarande för framställning av en terapeutiskt ver-kande förening enligt formeln I H CO 0 OH j A~° m K V ηΛ——/ i vilken formel R avser -CO-CH», CHOH_CHa, -CO-CHaOH eller -CHOH-CHaOH, kännetecknat därav, att en förening, vars formel är h3co o oh ; el ΗΟΪ-f NH2 . HC1 i vilken formel R avser -CO-CH», eller -CO-CHaOH, bringas att i en blandning av ett polärt organiskt medium och vatten att reagera med ett överskott (18 molekvivalent) av 2,2'-oxidiacetaldehyd, vars formel är följande, .CHa - CHO °\ CHa - CHO il
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US40012082A | 1982-07-20 | 1982-07-20 | |
| US40012082 | 1982-07-20 | ||
| US49612283 | 1983-05-24 | ||
| US06/496,122 US4464529A (en) | 1982-07-20 | 1983-05-24 | Analogues of morpholinyl daunorubicin and morpholinyl doxorubicin |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI832637A0 FI832637A0 (fi) | 1983-07-19 |
| FI832637A FI832637A (fi) | 1984-01-21 |
| FI75174B FI75174B (fi) | 1988-01-29 |
| FI75174C true FI75174C (fi) | 1988-05-09 |
Family
ID=27016900
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI832637A FI75174C (fi) | 1982-07-20 | 1983-07-19 | Foerfarande foer framstaellning av morfolinyl-daunorubicin och morfolinyl-doxorubicin. |
Country Status (24)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4464529A (fi) |
| KR (1) | KR880002461B1 (fi) |
| AT (1) | AT381319B (fi) |
| AU (1) | AU555902B2 (fi) |
| BE (1) | BE897312A (fi) |
| CA (1) | CA1239396A (fi) |
| CH (1) | CH655729A5 (fi) |
| DE (1) | DE3325816A1 (fi) |
| DK (1) | DK158269C (fi) |
| ES (2) | ES8501415A1 (fi) |
| FI (1) | FI75174C (fi) |
| FR (1) | FR2530640B1 (fi) |
| GB (1) | GB2124224B (fi) |
| GR (1) | GR78885B (fi) |
| IE (1) | IE55795B1 (fi) |
| IL (1) | IL69260A (fi) |
| IT (1) | IT1163818B (fi) |
| NL (1) | NL188905C (fi) |
| NO (1) | NO157146C (fi) |
| NZ (1) | NZ204911A (fi) |
| PH (1) | PH21860A (fi) |
| PT (1) | PT77060B (fi) |
| SE (1) | SE459921B (fi) |
| YU (2) | YU155083A (fi) |
Families Citing this family (24)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4826964A (en) * | 1982-07-20 | 1989-05-02 | Sri International | Bridged oxygen analogs of daunorubcin and doxorubicin |
| JPS59212499A (ja) * | 1983-05-13 | 1984-12-01 | アドリヤ・ラボラトリ−ズ・インコ−ポレ−テツド | 抗腫瘍性抗生物質アントラサイクリンの４−デメトキシ−３′−デアミノ−３′（４−モリホリニル）誘導体 |
| GB2140006A (en) * | 1983-05-17 | 1984-11-21 | Erba Farmitalia | Anthracycline derivatives |
| US4585859A (en) * | 1983-05-24 | 1986-04-29 | Sri International | Analogues of morpholinyl daunorubicin and morpholinyl doxorubicin |
| FR2560876B1 (fr) * | 1984-03-09 | 1987-01-16 | Hoechst Lab | Nouvelles anthracyclinones, leur procede de preparation, nouveaux glycosides (anthracyclines) obtenus a partir de ces anthracyclinones, utilisation de ces glycosides en tant que medicaments |
| FR2565982B1 (fr) * | 1984-06-15 | 1988-01-15 | Hoechst Lab | Nouveaux amino-3-tridesoxy-3,4,6-glycals, leurs procedes de preparation et anthracyclines obtenues a l'aide de ces glycals |
| GB8426672D0 (en) * | 1984-10-22 | 1984-11-28 | Erba Farmitalia | Pharmaceutical compositions |
| US4705850A (en) * | 1984-10-25 | 1987-11-10 | Sri International | C-glycosidic adriamycin analogs |
| US4591637A (en) * | 1985-01-17 | 1986-05-27 | Sri International | Open chain-morpholino adriamycins |
| US4710564A (en) * | 1985-01-18 | 1987-12-01 | Microbial Chemistry Research Foundation | Anthracycline compounds |
| GB2172594B (en) * | 1985-03-22 | 1988-06-08 | Erba Farmitalia | New morpholino derivatives of daunorubicin and doxorubicin |
| GB8519452D0 (en) * | 1985-08-02 | 1985-09-11 | Erba Farmitalia | Injectable solutions |
| US5124317A (en) * | 1985-08-02 | 1992-06-23 | Farmitalia Carlo Erba S.P.A. | Injectable ready-to-use solutions containing an antitumor anthracycline glycoside |
| US5137877B1 (en) * | 1990-05-14 | 1996-01-30 | Bristol Myers Squibb Co | Bifunctional linking compounds conjugates and methods for their production |
| GB9019933D0 (en) * | 1990-09-12 | 1990-10-24 | Erba Carlo Spa | 13-dihydro-3'-(2-alkoxy-4-morphlinyl)anthracyclines |
| US5196522A (en) * | 1990-11-01 | 1993-03-23 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Anthracycline analogues bearing latent alkylating substituents |
| US5843903A (en) * | 1995-11-27 | 1998-12-01 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Targeted cytotoxic anthracycline analogs |
| WO2001049698A1 (en) * | 1999-12-29 | 2001-07-12 | Immunogen, Inc. | Cytotoxic agents comprising modified doxorubicins and daunorubicins and their therapeutic use |
| US20080132458A1 (en) * | 2004-03-10 | 2008-06-05 | Threshold Pharmaceuticals, Inc. | Hypoxia-Activated Anti-Cancer Agents |
| US20070060534A1 (en) * | 2005-06-30 | 2007-03-15 | Threshold Pharmaceuticals, Inc. | Anthracycline analogs |
| CA2721140C (en) * | 2008-04-11 | 2016-02-09 | Tianjin Hemay Bio-Tech Co. Ltd. | Tetracyclic anthraquinone antibiotic derivatives with high activity, process for preparing the same and use thereof |
| RU2013103763A (ru) | 2010-07-02 | 2014-08-10 | Ангиохем Инк. | Короткие и содержащие d-аминокислоты полипептиды для терапевтических конъюгатов и их применения |
| EP3191134B1 (en) | 2014-09-12 | 2019-11-20 | Genentech, Inc. | Anthracycline disulfide intermediates, antibody-drug conjugates and methods |
| EP4180061A1 (en) | 2021-11-10 | 2023-05-17 | Nerviano Medical Sciences S.r.l. | Anthracycline derivative linker reagents, antibody-drug conjugates and methods |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4109076A (en) * | 1977-09-08 | 1978-08-22 | Sri International | 5-iminodaunomycin |
| US4202967A (en) * | 1978-10-02 | 1980-05-13 | Sri International | N,N-pentamethylene derivatives of daunomycin and adriamycin |
| US4301277A (en) * | 1980-10-20 | 1981-11-17 | Sri International | 3-Deamino-3-(4-morpholinyl) derivatives of daunorubicin and doxorubicin |
| US4314054A (en) * | 1981-03-23 | 1982-02-02 | Sri International | 3'-Deamino-3'-(4-methoxy-1-piperidinyl) derivatives of daunorubicin and doxorubicin |
-
1983
- 1983-05-24 US US06/496,122 patent/US4464529A/en not_active Expired - Lifetime
- 1983-07-15 NZ NZ204911A patent/NZ204911A/en unknown
- 1983-07-15 AT AT0260883A patent/AT381319B/de not_active IP Right Cessation
- 1983-07-15 GB GB08319165A patent/GB2124224B/en not_active Expired
- 1983-07-18 AU AU16946/83A patent/AU555902B2/en not_active Ceased
- 1983-07-18 PH PH29236A patent/PH21860A/en unknown
- 1983-07-18 BE BE0/211190A patent/BE897312A/fr not_active IP Right Cessation
- 1983-07-18 IL IL69260A patent/IL69260A/xx unknown
- 1983-07-18 YU YU01550/83A patent/YU155083A/xx unknown
- 1983-07-18 DE DE19833325816 patent/DE3325816A1/de active Granted
- 1983-07-18 NO NO832610A patent/NO157146C/no unknown
- 1983-07-18 FR FR8311803A patent/FR2530640B1/fr not_active Expired
- 1983-07-19 SE SE8304045A patent/SE459921B/sv not_active IP Right Cessation
- 1983-07-19 PT PT77060A patent/PT77060B/pt not_active IP Right Cessation
- 1983-07-19 IE IE1680/83A patent/IE55795B1/en not_active IP Right Cessation
- 1983-07-19 ES ES524271A patent/ES8501415A1/es not_active Expired
- 1983-07-19 GR GR71976A patent/GR78885B/el unknown
- 1983-07-19 CH CH3949/83A patent/CH655729A5/de not_active IP Right Cessation
- 1983-07-19 NL NLAANVRAGE8302586,A patent/NL188905C/xx not_active IP Right Cessation
- 1983-07-19 DK DK332983A patent/DK158269C/da not_active IP Right Cessation
- 1983-07-19 KR KR1019830003323A patent/KR880002461B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1983-07-19 CA CA000432737A patent/CA1239396A/en not_active Expired
- 1983-07-19 FI FI832637A patent/FI75174C/fi not_active IP Right Cessation
- 1983-07-20 IT IT22143/83A patent/IT1163818B/it active
-
1984
- 1984-03-14 ES ES530593A patent/ES530593A0/es active Granted
-
1985
- 1985-09-09 YU YU01405/85A patent/YU140585A/xx unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI75174C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av morfolinyl-daunorubicin och morfolinyl-doxorubicin. | |
| Acton et al. | Intensely potent morpholinyl anthracyclines | |
| US4585859A (en) | Analogues of morpholinyl daunorubicin and morpholinyl doxorubicin | |
| Acton et al. | Synthesis and preliminary antitumor evaluation of 5-iminodoxorubicin | |
| US5304687A (en) | Morpholinyl derivatives of doxorubicin and process for their preparation | |
| US5625043A (en) | Anthracyclines with unusually high activity against cells resistant to doxorubicin and its analogs | |
| US6437105B1 (en) | Methods and compositions for the manufacture of highly potent anthracycline-based antitumor agents | |
| Mosher et al. | Enhanced antitumor properties of 3'-(4-morpholinyl) and 3'-(4-methoxy-1-piperidinyl) derivatives of 3'-deaminodaunorubicin | |
| WO2000056267A2 (en) | Methods and compositions for the manufacture of c-3' and c-4' anthracycline antibiotics | |
| Smith et al. | Adriamycin analogs. 2. Synthesis of 13-deoxyanthracyclines | |
| US4254110A (en) | Pentofuranosyl anthracyclines, intermediates in and method for their preparation and compositions and use thereof | |
| CA2528223C (en) | Colchicoside analogues | |
| AU7304096A (en) | Novel amine derivatives of epipodophyllotoxin 2", 3"-dideoxyglycosides, preparation method therefor and use thereof as a drug and for treating cancer | |
| Acton et al. | New cyanomorpholinyl byproduct of doxorubicin reductive alkylation | |
| FI96693B (fi) | Menetelmä uusien, kasvaimia estävinä aineina käyttökelpoisten 3'-(4-morfolinyyli)- ja 3'-(2-metoksi-4-morfolinyyli)-antrasykliinijohdannaisten valmistamiseksi | |
| JPH0232260B2 (fi) | ||
| SU1402257A3 (ru) | Способ получени 3 @ -цианоморфолинопроизводного доксорубицина | |
| DE3913759A1 (de) | Zytostatisch wirksame rhodomycin-dimere | |
| KR20010013772A (ko) | 13-디하이드로-3' 아지리디노 안트라사이클린 | |
| CS268512B2 (en) | Method of daunorubicine's and doxorubicine's new morpholine derivatives production | |
| US4604381A (en) | 4-demethoxy-13-dihydrodaunorubicin and use thereof | |
| FI70414B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av nya 4'-jododerivater av antracyklinglykosider | |
| HU195518B (en) | Process for production of derivatives of morphinildaunorubicin and morphinil-doxorubicin and their analogues | |
| FI89496C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av 4-demetoxi-4-aminoantracykliner | |
| Hermentin et al. | Synthesis and Structure Elucidation of p-Methoxybenzoyl Derivatives of Rhodomycins1 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: SRI INTERNATIONAL |