FI71748B - Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt aktiva softsteroider - Google Patents

Description

71 748

Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten softsteroidien valmistamiseksi Tämä keksintö kohdistuu menetelmään uusien softsteroidien valmistamiseksi/ joilla on tulehduksenvastainen vaikutus.

Lääketeollisuuden pääasiallisena päämääränä on rationaaliselta pohjalta menestyksellisesti ennustaa sellaisten yhdisteiden biologinen aktiivisuus, jotka johtavat uusiin lääkkeisiin. Tavallisesti nämä on aikaansaatu modifioimalla rakenteellisesti tunnettua bioaktiivista molekyyliä, lähestymällä sitä joko ryhmänä tai biofunktionaalisina ryhminä tai muuttamalla molekyylin kokonaisfysikaaliskemiallisia ominaisuuksia. Pääasiallisena tarkoituksena on näin ollen ollut kehittää, syntetisoida, testata uusia yhdisteitä, jotka ovat rakenteellisesti analogisia bioaktiivisen perusmole-kyylin kanssa, mutta joilla kuitenkin on paremmat terapeuttiset ja/tai farmakokineettiset ominaisuudet. Joskin "haavoittuviksi" ryhmiksi on indentifioitu sellaiset, joiden tehtävä on bioinaktivoida tai metabolisesti eliminoida lääke sen jälkeen kun se on suorittanut tehtävänä, ei lääkkeen suunnitteluprosessissa ole kiinnitetty yhtään tai ainoastaan vähän huomiota lääkkeiden aineenvaihdunnallisen käyttäytymisen järkiperäiseen suunnitteluun. Näin on ollut siitä huolimatta, että monen bioaktiivisen molekyylin myrkyllisyys johtuu tekijöistä, jotka on lisätty sen aktiviteetin kohottamiseksi, kuten korotetusta eliminointipuoliintumisajasta, stabiliteetista tai muista tekijöistä. Lääkkeet ja erityisesti niiden metaboliset prosessit edistävät erilaisia myrkyllisiä prosesseja muodostamalla aktiivisia hajoamistuotteita. Ilmiö,jossa metabolinen aktivointi johtaa reaktiivisiin välituotteisiin, jotka kovalenttisesti sitoutuvat kudoksen mak-romolekyyleihin, on alkuvaihe solun tuhoutumisessa. On myös selvää, että kaikkein myrkyllisimmät hajoamistuotteet eivät säily niin kauan, että ne tulisivat 71748 eritetyiksi ja identifioiduksi, ja siten pysyvien hajoamistuotteiden tutkimus voi johtaa harhaanjohtaviin tietoihin.

On selvää, että lääkkeisiin liittyvien myrkytysongelmien ehkäisemiseksi ja/tai vähentämiseksi on lääkkeiden metaboli-nen käyttäytyminen otettava huomioon jo aikaisessa vaiheessa lääkkeen suunnitteluprosessissa. Tämä pitää erityisesti paikkansa, kun otetaan huomioon, että keho voi kemiallisesti muuttaa ja käydä hyvin pysyvienkin rakenteiden kimppuun, ja että vaikka lääke erittyy 95 %:sesti muuttumattomana voi huomiotta jäänyt pieni osa ja todennäköisesti tuleekin aiheuttamaan myrkytyksen.

"Softlääkkeiksi" voidaan määritellä biologisesti aktiiviset kemialliset yhdisteet (lääkkeet), jotka voivat rakenteellisesti muistuttaa tunnettuja aktiivisia lääkkeitä (softanalogeja) tai ne voivat olla täysin uusia rakennetyyppejä, mutta niille on kaikille luonteenomaista, että ne ennustettavasti hajoavat elävässä elimistössä (metabo-lismi) myrkyttömiksi ryhmiksi, kun ne ovat aikaansaaneet terapeuttisen vaikutuksensa. Softlääkkeiden hajoaminen tapahtuu määrätyllä nopeudella etukäteen ennustettavalla tavalla.

Nyt on löydetty viisi softlääkkeiden pääluokkaa. Eräs kaikkein käyttökelpoisimmista luokista on nimitetty "inaktiiviseksi metaboliitiksi", jota voidaan edullisesti käyttää suunniteltaessa erityisen arvokkaita "softlääkkeitä". Tässä lähdetään lääkkeen tai lääkeryhmän tunnetusta inaktiivisesta metaboliitista, minkä jälkeen metaboliitti modifioidaan, niin että se rakenteellisesti (isosteerisesti ja/tai iso-elektronisesti) muistuttaa aktiivista lääkettä (so. aktivointi) ja aktiivisten lajien metabolismi suunnitellaan siten, että se johtaa inaktiiviseen lähtöainemetaboliittiin, kun se on aikaansaanut halutun terapeuttisen vaikutuksensa, muodostamatta toksisia välituotteita (so. ennustettavissa 3 71748 oleva metabolismi). "Inaktiivinen metaboliitti" sallii myös metabolismin nopeuden ja farmakokineettisten ominaisuuksien säätämisen molekulaarisen manipuloinnin avulla aktivointivaiheessa. Mikäli mitään inaktiivista metabo-liittia ei tunneta, voidaan sellainen myös valmistaa lisäämällä siirtoryhmiä ei-kriittisiin rakenteellisiin osiin.

Esillä olevassa keksinnössä on tätä inaktiivista metabo-liittitapaa nyt sovellettu luonnollisiin ja synteettisiin glukokortikosteroideihin ja siten valmistettu uusia tulehduksenvastaisia softsteroidiainei- ta lähtien glukokortikosteroidien tunnetuista inaktiivisista luonnollisista metaboliiteista. Näin ollen esimerkiksi hydrokortisonin ollessa kysymyksessä on lähtökohtana käytetty erästä sen inaktiivista päämetaboliittia, kotieniini-happoa, so. 11β, 17a-dihydroksiandrost-4-eeni-3-oni-17f5-karboksyylihappoa, joka on aktivoitu liittämällä siihen sopivia myrkyttömiä 17a- ja 173-substituentteja, jotka aktivoidut johdannaiset pilkkoutuvat elävässä elimistössä inaktiiviseksi lähtöainemetaboliitiksi ja muiksi myrkyttömiksi ryhmiksi, kun ne ovat suorittaneet terapeuttisen tehtävänsä.

Esillä olevan keksinnön tarkoituksena on näin ollen edellä olevan mukaisesti aikaansaada uusia softsteroideja, joilla on tulehduksenvastainen vaikutus- Keksintö kohdistuu näin ollen menetelmään uusien softsteroidien valmistamiseksi, joilla on kaava ^R1

C=0 O H c I II

^^3 ^^--OCOR2 H3c I I_ R3 (I) R5

^ I

4 71748 jossa on C.j -Cg-alkyyli, yhdellä tai useammalla halogeenilla substituoitu -Cg-alkyyli tai -CH2COORg, jossa Rg on -Cg-alkyyli, tai R^ on -CH2-Y-(C1-Cg-alkyyli), jossa Y on S, SO, so_ o ^ Il tai 0, tai R^ on -CH2-OCRg, jossa Rg on -Cg-alkyyli; R2 on -Cg-alkyyli, Cg-Cg-sykloalkyyli, bentsyyli tai yhdellä tai useammalla halogeenilla substituoitu C^-Cg-alkyyli; 0

II

Rg on vety, a-metyyli, 3-metyyli tai a- tai B-OCOR2, jossa R2 tarkoittaa samaa kuin edellä; R^ on vety, fluori tai kloori;

Rg on vety, fluori tai kloori; Z on karbonyyli tai β-hydroksimetyleeni; ja katkoviiva renkaassa A tarkoittaa, että 1,2-sidos on tyydyttynyt tai tyydyttymätön; ja sellaisten kaavan I mukaisten yhdisteiden kvaternääristen ammoniumsuolojen valmistamiseksi, joissa ainakin yksi ryhmistä R.j ja R2 on halogeenisubstituoitu alkyyliryhmä.

Edullisen kaavan (I) mukaisen yhdisteryhmän muodostavat yhdisteet, joissa R^ ja R2 tarkoittavat samaa kuin edellä;

Rg on vety, α-metyyli, 3-metyyli tai a-0C0R2, jossa R2 tarkoittaa samaa kuin edellä; R^ on vety tai fluori; R5 on vety tai fluori; Z on β-hydroksimetyleeni; ja katkoviiva renkaassa A tarkoittaa samaa kuin edellä.

Kaavan (I) mukaiset softsteroidit ja niiden kvaternääriset ammoniumsuolat ovat erittäin tehokkaita paikallisesti vaikuttavia tulehduksenvastaisia aineita, mutta koska ne niin helposti hajoavat elävässä elimistössä päätyen ainoastaan inak-tiivisesti steroidiseksi metaboliitiksi, on keksinnön mukaisilla yhdisteillä paljon alhaisempi systeeminen aktiivisuus kuin niillä tunnetuilla glukokortikosteroideilla, joiden inaktiivisista metaboliiteista ne on johdettu. Monilta keksinnön mukaisilta yhdisteiltä puuttuu itse asiassa systeemi- 5 71748 nen aktiviteetti. Tällainen minimaalinen tai täysin poissa oleva systeeminen aktiivisuus tarkoittaa/ että keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää tulehdustilojen paikalliseen (so. ulkonaiseen) hoitoon ilman niitä vakavia systeemisiä sivuvaikutuksia, joita tunnettuihin glukokorti-kosteroideihin on liittynyt.

Edellä mainitut C^Cg-alkyyliryhmät voivat olla suoria tai haarautuneita.

Erityisiä esimerkkejä kaavan (I) -Cg-alkyyliryhmistä, joko erikseen Reille tai R2tlle tai osana ryhmistä R^ , R2 tai R^, ovat metyyli, etyyli, propyyli, butyyli, pentyyli ja heksyyli sekä näiden haarautuneet isomeerit.

Sanonta "C^-Cg-alkyyli" viittaa edullisesti metyyliin, etyyliin, n-propyyliin, isopropyyliin, n-butyyliin, isobutyyliin, sek.-butyyliin, tert.-butyyliin, n-pentyyliin ja n-heksyy-liin. Lisäksi sanonta "yhdellä tai useammalla halogeenilla substituoitu -Cg-alkyyli" viittaa suoraan tai haarautuneeseen alkyyliryhmään, jossa on 1-6 hiiliatomia substituoituna 1-3 halogeeniatomilla, jolloin sanonnalla "halogeeni" tarkoitetaan tässä klooriatomia, bromiatomia, jodiatomia tai fluo-riatomia. Erityisiä esimerkkejä näistä halogeenialkyyliryh-mistä ovat kloorimetyyli, dikloorimetyyli, trikloorimetyyli, bromimetyyli, fluorimetyyli, difluorimetyyli, trifluorime-tyyli, 1-fluorietyyli, 1-kloorietyyli, 2-kloorietyyli, 2,2,2-trikloorietyyli, 2,2,2-trifluorietyyli, 1,2-dikloori-etyyli, 1-klooripropyyli, 3-klooripropyyli, 1-klooributyyli, 1-klooripentyyli, 1-klooriheksyyli ja 4-klooributyyli.

Sanonta "Cg-Cg-sykloalkyyli" viittaa edullisesti syklopro-pyyliin, syklobutyyliin, syklopentyyliin, sykloheksyyliin, sykloheptyyliin ja syklo-oktyyliin.

Sellaiset kaavan (I) mukaiset yhdisteet, joissa R^ on a-halogeenialkyyli, muodostavat helposti vastaavia softkva-ternäärisiä ammoniumsuoloja, jotka myös ovat käyttökelpoisia tulehduksenvastaisia aineita. Siten esimerkiksi kaavan (I) mukainen halogeenialkyylijohdannainen voidaan yksinker- 71748 taisesti saattaa reagoimaan tertiäärisen amiinin N) tai tyydyttymättömän amiinin (^N) vastaavan kvaternääri-sen ammoniumsuolan aikaansaamiseksi. Reagensseja käytetään suurin piirtein ekvimolaarisissa suhteissa ja reaktio suoritetaan inertin liuottimen (esim. eetterin, asetonit-riilin, tai sentapaisen) läsnäollessa lämpötilas sa, joka on huoneen lämpötilan ja liuottimen refluksointi-lämpötilan välillä noin 2-24 tunnin aikana. Vaihtoehtoisesti voidaan reaktio suorittaa ilman liuotinta sekoittamalla reagenssit toisiinsa ja pitämällä ne huoneen lämpötilassa tai 20-70°C:ssa 2-24 tuntia. Kummassakin tapauksessa voidaan muodostunut kiteinen suola puhdistaa kiteyttämällä eetteri-etanoliseoksesta tai sen tapaisesta.

Yllä käytetty ilmaisu "tyydyttymätön amiini" tarkoittaa N-heterosyklisiä tyydyttymättömiä järjestelmiä, joiden renkaassa on 3-10 jäsentä ja niiden substituoituja johdannaisia, joissa tyydyttymättömyys vastaa ei-kumulatiivisten ti 7 71 748 kaksoissidosten suurinta lukumäärää, edellyttäen että typpiatomi ei sisällä vetyatomia substituenttina. Alla olevat esimerkit havainnollistavat riittävästi tätä määritelmää: CH-, I 3 1-metyyliatsiriini / \ f3 /N \ 1-metyylipyrroli ^ ^ f 3 /N\ 1-metyyli-imidatsoli \\ //

\—N

Γ3 1- metyylipyratsoli ^ ^

Pyridiini

Pyratsiini

Pyrimidiini f| )

Pyridatsuni | j 2- metyyli-isoindoli β " CH_ 3 8 71748 ^Vj, 3Η-indoli ν\ k/

Kinoliini vAy

Isokinoliini I

γγΑ

Ftalatsiini l

Kinoksaliini II

Kinatsoliini N

r^Y"Ai

Fenatsiini

/"S

Isotiatsoli >\ // CH -j I 3 10-metyylifenotiat- I ,1

silni AAS AY

/A

Isoksatsoli w N

Furatsaani N N

II

9 71 748

Tyydyttymättömien amiinien substituoidut johdannaiset sisältävät yllä esitettyjä ryhmiä, jotka sisältävät yhtä tai useampaa alkyyliä, -C00(alkyyliä) tai -0C0(alkyyliä) substituentteina.

Mitä sanontaan "tertiäärinen amiini" tulee, tarkoittaa tämä sanonta amiineja, joihin ei ole sitoutunut mitään vetyatomeja ja jotka eivät kuulu yllä määritellyn sanonnan "tyydyttymätön amiini" N-heterosyklisiin tyydyttymättömiin järjestelmiin. Sanonta "tertiäärinen amiini" käsittää tyypillisesti trialkyyliamiineja, joissa alkyyliryhmät, jotka voivat olla samanlaisia tai erilaisia, jokainen edullisesti sisältää 1-8 hiiliatomia, trialkoksiamiineja joissa alkok-siosat voivat kukin sisältää 1-8 hiiliatomia, tertiäärisiä tyydyttymättömiä syklisiä amiineja, kuten kinuklidiini tai substituoitu kinuklidiini (esim. 3-asetoksikinukli-diini); ja sekundääristen tyydyttyneiden syklisten amiinien N-substituoidut johdannaiset /esim. morfoliinin, pyrroli-diinin, imidatsolidiinin, pyratsolidiinin, piperidiinin tai piperatsiinin N-substituoitu johdannainen, jossa N-substituentti voi olla sellainen ryhmä kuin (cl~Cg)alkyyli/, joka mahdollisesti sisältää lisäsubstituentteja kuten metyyliä.

Edullisia kvaternäärisiä airanoniumsuoloja ovat sellaiset, jotka on johdettu 1,2-dimetyylipyrrolidiinista, 3-asetok-sikinuklidiinista, 1-metyylipyrrolidiinista, trietyyli-amiinista ja N-metyyli-imidatsolista. Erityisen edullisia ovat sellaiset kvaternääriset ammoniumsuolat, jotka on saatu edellä mainittujen amiinien reaktiosta kaaavan (I) yhdisteiden kanssa, joissa on β-hydroksimetyleeni ja R-^ on kloorimetyyli, erityisesti kun R2 on alempi alkyyli.

Joskin kaikki kaavan (I) mukaiset yhdisteet olennaisesti täyttävät esillä olevan keksinnön tarkoitusperät, ovat kuitenkin määrätyt ryhmät erityisen edullisia. Tällainen 71748 1 o erityisen edullinen kaavan (I) yhdisteiden ryhmä on jo esitetty yllä.

Toinen edullinen yhdisteryhmä muodostuu sellaisista kaavan (I) yhdisteistä, joissa Z, ja R2 tarkoittavat samaa kuin edellä ja muut muuttuvat ryhmät ovat identtisiä hydrokortisonin kanssa (so. R3, R4 ja Rg tarkoittavat kukin vetyatomia ja 1 ,2-sidos on tyydyttynyt) tai prednisolonin kanssa (so.

R^, R^ ja Rc- tarkoittavat kukin vetyatomia ja 1,2-sidos on tyydyttymätön).

Toinen edullinen ryhmä muodostuu sellaisista yhdisteistä, jotka ovat samantapaisia kuin edellisessä kappaleessa mainittujen yhdisteiden 6a- ja/tai 9a-fluori- ja 16a- tai 160-metyyli-johdannaiset. Tämän ryhmän sisällä yhdisteet, joissa Z, ja R2 tarkoittavat samaa kuin edellä ja muut vaihtuva-merkitykselliset ryhmät ovat identtisiä fluorikortisonin, 0-metasonin ja deksametasonin kanssa, ovat erityisen edullisia. Muita tämän ryhmän mukaisia erityisen mielenkiintoisia yhdisteitä ovat ne, joissa Z, R^ ja R2 tarkoittavat samaa kuin edellä ja muut vaihtuvamerkitykselliset ryhmät ovat identtisiä triamkinoIonin, flumetasonin, fluprednisolonin tai parameta-sonin kanssa. Muita mielenkiintoisia yhdisteitä ovat ne, joissa Z, R. ja R_ tarkoittavat samaa kuin edellä, R_ on 0 i ^ i 1« a-OCOR2, ja muut vaihtuvamerkitykselliset ryhmät ovat identtisiä triamkinolonin kanssa.

Kolmessa edellisessä kappaleessa mainittujen yhdisteiden kussakin ryhmässä ovat ne yhdisteet erityisen edullisia, joissa Z on β-hydroksimetyleeni, R2 on -Cg-alkyyli (erityisesti metyyli, etyyli, propyyli tai isopropyyli), ja R^ on C^-Cg-alkyyli, yhdellä halogeenilla substituoitu -Cg-alkyyli (erityisesti kloorimetyyli) tai -CH2-Y-(C^-Cg-alkyyli), jolloin Y tarkoittaa samaa kuin yllä (erityisesti kun C^-Cg-alkyyliryhmä on metyyli).

11 71748

Kaavan (I) mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa tunnetuilla menetelmillä siten, että a) yhdiste, jolla on kaava Ä;- ““· H3C Γ J_I ^3 (IV) R5 jossa R2, , R^, Z ja katkoviiva renkaassa A tarkoitta vat samaa kuin kaavassa I, ja M on alkalimetalli, naa-alkali-metalli/2, tallium tai NH^, saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava R.,W, jossa R^ tarkoittaa samaa kuin kaavassa I ja W on halogeeni, ja haluttaessa hapetetaan saatu yhdiste, jossa R^ on rikkiä sisältävä ryhmä, vastaavaksi yhdisteeksi, jossa R^ on sulfi-nyyliä tai sulfonyyliä sisältävä ryhmä, ja haluttaessa pelkistetään saatu yhdiste, jossa Z on karbonyyli, vastaavaksi yhdisteeksi, jossa Z on 11-hydroksimetyleeni, tai b) yhdiste, jolla on kaava

XjArT" _ *3 R5 12 71 748 jossa R^, R^, R^, Z ja katkoviiva renkaassa A tarkoittavat samaa kuin kaavassa I ja P on -C0C1 ja Q on -OCOOR2 tai P on -COOR^ ja Q on -OCOC1, saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava r7om' jossa M' on vety, alkalimetalli, maa-alkalimetalli/2, tal-lium tai NH^, ja R7 on , kun P on -C0C1 ja Q on -OCOOR2t tai on R2, kun P on -COOR^ ja Q on -0C0C1, ja haluttaessa hapetetaan saatu yhdiste, jossa R^ on rikkiä sisältävä ryhmä, vastaavaksi yhdisteeksi, jossa R1 on sulfinyyliä tai sulfonyyliä sisältävä ryhmä, ja haluttaessa pelkistetään saatu yhdiste, jossa Z on karbonyyli, vastaavaksi yhdisteeksi, jossa Z on 11g-hydroksimetyleeni, tai OR1 c) yhdiste, jolla on kaava [ C=0 2^£\λ--0Η >3 (VI) i R5 jossa R^, R^, R^, Z ja katkoviiva renkaassa A tarkoittavat samaa kuin kaavassa I, ja R^' on vety, α-metyyli, β-metyyli, a-OH tai B-OH, saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava 0 R2OCOX' tai R2OCOR2 joissa R2 tarkoittaa samaa kuin kaavassa I ja X' on kloori tai bromi, ja haluttaessa hapetetaan saatu yhdiste, jossa R.j on rikkiä sisältävä ryhmä, vastaavaksi yhdisteeksi, jossa R^ on sulfinyyliä tai sulfonyyliä sisältävä ryhmä, ja haluttaessa pelkistetään saatu yhdiste, jossa Z on karbonyyli, vastaavaksi yhdisteeksi, jossa Z on 11β-hydroksimetyleeni, 71 748 13 ja haluttaessa saatetaan menetelmällä a), b) tai c) saatu yhdiste, jossa ainakin toinen ryhmistä ja on halogee-nisubstituoitu alkyyliryhmä, reagoimaan tertiäärisen amiinin tai tyydyttymättömän amiinin kanssa.

Valmistettaessa menetelmällä a) sellaisia kaavan (I) mukaisia yhdisteitä, joissa Z on β-hydroksimetyleeni, käytetään kaavan (IV) mukaisten lähtöaineiden valmistamiseksi sellaisia steroidaalisia lähtöaineita, joilla on kaava

OH

c=0

*“ 0H

I_Γ3' (II) J . r' ^ R5 jossa R^, Rc- ja katkoviiva renkaassa A tarkoittavat samaa kuin yllä ja R^1 on vety, ot -metyyli, β-metyyli, a-OH tai 3-0H (ja joka edullisesti valmistetaan käsittelemällä vastaavia 21-hydroksipregnelononeja, joilla on kaava

CH-OH

i2 c=o

HO “0H

^5 jossa R^, , R-j* ja katkoviiva renkaassa A tarkoittavat samaa kuin yllä, NaIO^:llä sopivassa orgaanisessa liuotti-messa huoneen- tai korotetussa lämpötilassa). Kaavan (II) mukainen lähtöaine saatetaan reagoimaan R20C0Cl:n tai 14 71 748

R2OCOBr:n (muodostettu saattamalla R2OH reagoimaan COCl2:n tai COBr2:n kanssa, jossa R2 on sama kuin yllä) kanssa vedettömissä olosuhteissa sopivassa inertissä orgaanisessa liuottimessa kuten dikloorimetaanissa, kloroformissa tai tetrahydrofuraanissa, edullisesti sopivan happoa sitovan aineen (kuten trietyyliamiinin, pyridiinin, kalsiumkarbonaatin tai muun sopivan emäksen) läsnäollessa. Aika ja lämpötila eivät ole kriittisiä tekijöitä joskin reaktio sopivasti suoritetaan 0°C:n ja huoneen lämpötilan välillä 1-6 tunnissa. Saadulla uudella 17ρ-karboksyylihappo-l7a-karbonaa-tilla on kaava OH

«u - - ocoor2 H3cT T rR 3 (III)

O

jossa R2, R^ , Rj. ja katkoviiva A-renkaassa tarkoittavat samaa kuin yllä ja R^ on H, a-CH^, a-OCOOR2 tai £S- OCOOR2. Kun R^1 kaavan (II) lähtöaineessa on a-OH tai β-ΟΗ, käytetään riittävästi R20C0C1 tai R2OCOBr sen varmistamiseksi, että muodostuu karbonaattiryhmä 16-asemassa kuten myös 17-asemassa /so. kun R^' kaavassa (II) on OH, on R^ saadussa kaavan (III) välituotteessa a- tai 3-OCOOR2_7 · 17a-substituentin yllä selostetun liittämisen jälkeen saatu kaavan (III) mukainen uusi välituote muunnetaan vastaavaksi metallisuolaksi, jolla on kaava 15 71 748

OM

H0 __°coor2 TS uv) ^5 jossa R2 , R^ / / r5 ja katkoviiva renkaassa A tarkoitta vat samaa kuin yllä, ja M on alkalimetalli (kuten natrium tai kalium), maa-alkalimetalli/2 tai tallium tai NH^. Kaavan (IV) mukainen uusi suola muodostetaan tavallisesti saattamalla kaavan (III) mukainen steroidi reagoimaan hydroksidin (MOH) tai alkoksidin (MOR) kanssa sopivassa orgaanisessa liuottimessa, kuten etyylieetterissä tai tetrahydrofuraanis-sa, lämpötilassa, joka on 0°C:n ja huoneen lämpötilan välissä 0,5-4 tunnissa. Menetelmässä a) kaavan (IV) mukainen suola saatetaan reagoimaan kaavan R^-W mukaisen yhdisteen kanssa, jossa R^ tarkoittaa samaa kuin yllä ja W on halogeeni halutun kaavan (I) mukaisen lopputuotteen aikaansaamiseksi. Reaktiosekvenssin tämä vaihe suoritetaan edullisesti huoneen lämpötilassa 1-24 tunnissa tai liuottimen (so. asetonitrii-lin, THF:n jne.) kiehumislämpötilassa. Kun halutaan liittää halogeenisubstituoitu R^-ryhmä steroidiin, esim. kun halutaan kaavan (I) yhdiste, jossa R^ on kloorimetyyli, on havaittu, että reaktio sujuu hyvin käytettäessä heksametyyli-fosforamidia liuottimena alemmissa lämpötiloissa (0,10°C) ja käyttäen R^-W-reagenssia, jossa W on jodi (esim. jodi-kloorimetaani). Kun ei haluta halogeenia sisältävää ryhmää (esim. kun R^ on alkyyli tai -CH2COORg) ei tällaisia rajoituksia tarvitse asettaa R^-W-reagenssille tai liuottimelle; ja siten W voi olla mikä tahansa halogeeni, edullisesti kloori tai bromi ja, kun niin halutaan, voidaan käyttää tavanomaisia orgaanisia liuottimia, kuten dimetyyliformamidia, dikloorimetaania, asetonitriiliä, tetrahydrofuraania tai 16 71 748 kloroformia heksametyylifosforamidin sijasta. Kun halutaan kaavan (I) mukainen yhdiste, jossa sisältää sulfinyyli-tai sulfonyyliryhmän, tätä ryhmää ei yleensä lisätä R^-W-reaktiolla, vaan valmistetaan jälkeenpäin vastaavasta tiosteroidista, kuten alla on selostettu.

Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä, joissa on sulfinyyli-tai sulfonyylipitoinen ryhmä voidaan valmistaa hapettamalla vastaavia tiosteroideja. Siten voidaan esimerkiksi kaavan (I) mukainen yhdiste, jossa R^ on -CH2S-C.j-Cg-alkyyli, saattaa reagoimaan yhden ekvivalentin kanssa m-klooriperoksi-bentsoehappoa 0-25°C:ssa 1-24 tuntia sopivassa liuottimessa, kuten kloroformissa, vastaavan kaavan (I) mukaisen yhdisteen muodostamiseksi, jossa R^ on -CH2SO-C1-Cg-alkyyli, tai kahden ekvivalentin kanssa m-klooriperoksibentsoehappoa vastaavan kaavan (I) mukaisen yhdisteen muodostamiseksi, jossa R^ on -CH2S02"C1-Cg-alkyyli.

Valmistettaessa menetelmällä c) sellaisia kaavan (I) mukaisia yhdisteitä, joissa Z on β-hydroksimetyleeni, käytetään kaavan (IV) mukaisten lähtöaineiden valmistamiseksi samoja kaavan (II) mukaisia 17oc-hydroksi-17g-karboksyylihappoläh-töaineita kuin edellä selostetussa synteettisessä kaaviossa. Tällöin käytetään olennaisesti samoja ei-steroidisia reagensseja, reaktio-olosuhteita jne. kuin yllä on selostettu. Siten kaavan (II) lähtöaine saatetaan ensin reagoimaan MOH:n tai MOR:n kanssa vastaavan välituotteen muodostamiseksi, jolla on kaava

OM

H3C f=°

γ\Λ;-0H

hcT T rv <v> R5 71 748 17 jossa R^, R^ ja M ja katkoviiva renkaassa A tarkoitta vat samaa kuin yllä, joka sen jälkeen saatetaan reagoimaan R^W:n kanssa, jossa R^ ja W tarkoittavat samaa kuin yllä, vastaavan 17β-karboksylaatin muodostamiseksi, jolla on kaava OR, i1 H C C=0 H0 V4V' ΓΒ3' (VI) R5 jossa R^, R^', R^, R^ ja katkoviiva renkaassa A tarkoittavat samaa kuin yllä. Menetelmässä c) kaavan (VI) mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan Κ20(]001:η tai R20C0Br:n kanssa, jossa R^ tarkoittaa samaa kuin yllä, vastaavan kaavan (I) mukaisen 17a-karbonaatin aikaansaamiseksi. Yhdisteen (II) muuntoreaktion yhdisteeksi (V) erilaiset parametrit ovat samoja kuin yllä on selostettu yhdisteen (III) muuntoreaktion yhteydessä yhdisteeksi (IV). Samoin yhdisteen (V) muunto-reaktion yhdisteeksi (VI) parametrit ovat samoja kuin yllä on yksityiskohtaisesti selostettu yhdisteen (IV) muunto-reaktion yhteydessä yhdisteeksi (I). Samoin prosessipara-metrit yhdisteen (VI) saattamiseksi reagoimaan yhdisteeksi (I) ovat olennaisesti samat kuin yllä on selostettu reaktiolle, jossa yhdiste (II) reagoi yhdisteeksi (III). Siten, kun lähtöaine sisältää 16-hydroksiryhmän,muodostuu kaavan (I) 16,17-dikarbonaatti, joka sen jälkeen voidaan selektiivisesti hydrolysoida, mikäli niin halutaan, vastaavaksi kaavan (I) 16-hydroksi-17-karbonaatiksi. Kaavan (I) yhdisteet, joissa on sulfinyyli- tai sulfonyylipitoinen ryhmä voidaan taas sopivasti valmistaa hapettamalla vastaava kaavan (I) tio-pitoinen yhdiste, kuten yllä on yksityiskohtaisesti selostettu. Vaihtoehtoisesti voidaan kaavan (I) yhdisteet, joissa R^ on sulfinyyli- tai sulfonyylipitoinen ryhmä /esim. kun R1 on -CH2SO-C1-Cg-alkyyli tai 71 748 18 -CH2S02_C^-Cg-alkyyli/, valmistaa hapettamalla, edullisesti m-klooriperoksibentsoehapolla, vastaavia kaavan (VI) yhdisteitä, joissa on tio-pitoinen ryhmä, minkä jälkeen 17a-OCOOR2_substituentti lisätään saatuun sulfinyyli- tai sulfonyyliyhdisteeseen.

Menetelmään b) liittyen voidaan sellaisten kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistuksessa, joissa Z on 6-hydroksi-metyleeni, käyttää yllä olevan kaavan (III) mukaisia 17 6-karboksyylihappo-17a-karbonaattivälituotteita. Tällöin käsitellään kaavan (III) mukaisia välituotetta järjestyksessä ensin hellävaraisella asyylikloridia muodostavalla aineella, esim. dietyylikloorifosfaatilla tai oksalyylikloridillä, vastaavan uuden happokloridin muodostamiseksi, jolla on kaava f

HoC c=o HO * L___0C00R~ 2 1 3 (VIII) 1 R5 jossa R2, R^r R4/ ja katkoviiva renkaassa A tarkoittavat samaa kuin yllä, ja sen jälkeen yhdisteellä R^OM', jossa R^ tarkoittaa samaa kuin yllä, M' on vety tai M (M on määritelty yllä) inertissä liuottimessa (esimerkiksi CHCl-j, THF, asetonitriili tai DMF), lämpötilassa, joka on välillä noin 0°C ja liuottimen kiehumispiste, 1-6 tuntia vastaavan kaavan (I) yhdisteen aikaansaamiseksi. Käytettäessä kaavan R^OM' yhdistettä, jossa M' on vety, on reaktiojärjestelmäs-sä edullisesti läsnä happoa poistava aine, kuten trietyyli-amiinia. Tämän prosessin molemmat vaiheet voidaan edullisesti ajaa samassa liuottimessa, eristämättä ensimmäisessä vaiheessa muodostunutta kaavan (VIII) happokloridia.

19 71 748

Vielä menetelmään b) liittyen voidaan sellaisten kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistuksessa, joissa Z on β-hydrok-simetyleeni käyttää yllä olevan kaavan (VI) mukaisia 17a-hydroksi-178-karboksylaatteja. Tämän menetelmän mukaan saatetaan kaavan (VI) mukainen välituote reagoimaan fosgeenin kanssa orgaanisessa liuottimessa (esim. tolueenissa, bentsee-nissä, CHjCl-sssa tai asetonitriilissä) alhaisessa lämpötilassa (-20öC:n ja huoneen lämpötilan välillä, esim.0°C:ssa) noin 2 tuntia (tai kunnes reaktio on loppunut). Haihduttamalla liuotin ja fosgeeniylimäärä saadaan haluttu uusi 17a-kloorikarbonyylioksi-17β-karboksylaattivälituote, jolla on kaava OR, h r 9=0 °C0C1 _T l R3 ! f (VII) o ( jossa , R3, R4, R5 ja katkoviiva renkaassa A tarkoittavat samaa kuin yllä. Kun R3 1 kaavan (VI) lähtöaineessa on hyd-roksi, käytetään yleensä riittävästi fosgeenia kloorikarbo-nyylioksiryhmän muodostamiseksi riittävällä varmuudella 16-asemassa kuten myös 17-asemassa ^so. kun R3' kaavassa (VI) on a-OH tai β-ΟΗ, on R3 saadussa kaavan (VIII) mukaisessa välituotteessa a- tai B-OCOCiy. Kaavan (VII) välituote saatetaan sen jälkeen reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava R^OM', jossa R3 ja M' tarkoittavat samaa kuin yllä, inertissä liuottimessa, edullisesti happoa sitovan aineen läsnäollessa (esim. trietyyliamiini) vastaavan kaavan (I) mukaisen yhdisteen aikaansaamiseksi. Kun R2OM' on alkoholi, jolla on kaava R2OH, suoritetaan reaktio samoissa olosuhteissa kuin yhdisteen (II). muuntoreaktiossa yhdisteeksi (III). Toisaalta, jos kaavan R20M yhdistettä käytetään 71 748 20 I^OM':inä, ovat reaktio-olosuhteet sellaiset kun on selostettu yhdisteen (VIII) muuntoreaktiossa yhdisteeksi (I).

Kun kaavassa (VII) on 0C0C1/ käytetään edullisesti riittävästi yhdistettä 16- että 1 7a-subtituentt.ien saattamiseksi varmasti reagoimaan OCOOR^-ryhmiksi lopputuotteessa. Kaavan (I) 16-hydroksi- ja sulfinyyli- ja sul-fonyylipitoiset yhdisteet muodostetaan kaikkein edullisimmin synteettisen reaktiokaavan loppuvaiheessa.

Eräässä toisessa menetelmän b) muunnelmassa kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa Z on β-hydrok-simetyleeni, käytetään yllä olevan kaavan (VI) 17a-hydroksi-17β-karboksylaatteja. Tämän menetelmän mukaisesti saatetaan kaavan (VI) mukainen välituote reagoimaan karbonaattiyli-määrän kanssa, jolla on kaava O

n R2OCOR2 (joka edullisesti valmistetaan saattamalla fosgeeni reagoimaan 2 ekvivalentin kanssa R2OH) happokatalyytin läsnäollessa, vastaavan (I) mukaisen yhdisteen aikaansaamiseksi.

0

II

R2-ryhmän luonteesta riippuen voi R20COR2~reagenssi myös toimia liuottimena karbonaattireagenssin kiehumispisteessä tai vastaavan yhdisteen R2OH kiehumispisteessä (joka edullisesti voidaan poistaa tällä tavoin reaktioseoksesta, reaktion saattamiseksi loppuun), tai reagenssit voidaan yhdistää sopivassa inertissä orgaanisessa liuottimessa (esim. aromaattisessa liuottimessa, kuten bentseenissä tai to-lueenissa tai halogenoidussa hiilivedyssä kuten dikloori-metaanissa tai kloroformissa). Kaavan (I) sulfinyyli- ja sulfonyyliyhdisteet voidaan jälleen edullisesti valmistaa prosessin loppuvaiheessa, joskin kaavan (VI) välituote, jossa R^ sisältää rikkiatomin, voidaan ensin hapettaa ja saatu kaavan (VI) sulfinyyli tai sulfonyyliryhmä sen jälkeen saattaa reagoimaan yhdisteen R2OCOR2 kanssa.

21-hydroksipregnenolonit, joista kaavan (II) steroidiset lähtöaineet valmistetaan, voidaan kaupallisesti aikaansaada 21 71 748 tai valmistaa tunnetuille menetelmillä. Samoin yllä selostetuissa erilaisissa prosesseissa käytetyt ei-steroidiset lähtöaineet ovat kaupallisesti saatavia tai voidaan valmistaa tunnetuilla kemiallisilla menetelmillä.

Kaavan (II) lähtöaine voidaan myös saattaa reagoimaan kaavan R2OCOCI tai I^OCOBr kanssa, joissa tarkoittaa samaa kuin yllä, välituotteen valmistamiseksi, jolla on kaava 9

OpOR 2 H C Cr ^ H° -r^<P^0C00R2 (χι) R5 jossa R2, R^, R^, R^ ja katkoviiva renkaassa A tarkoittavat samaa kuin yllä, joka voidaan muuttaa vastaavaksi kaavan (III) välituotteeksi osittaisella hydrolyysillä eristämällä kaavan (XI) yhdiste tai ilman tätä. Tämä kaavan (II) lähtö-ainereaktio R20C0Cl:n tai R20C0Br:n kanssa voidaan suorittaa samoissa olosuhteissa kuin kaavan (II) yhdisteen reaktio R20C0Cl:n tai R20C0Br:n kanssa, kuten yllä on selostettu, paitsi että R20COCl:ää ja R20COBr:ää käytetään kahta moolia tai enemmän yhtä moolia kohti kaavan (I) yhdistettä. Saadun kaavan (XI) yhdisteen osittainen hydrolyysi voidaan suorittaa inertissä liuottimessa katalyytin läsnäollessa. Esimerkkejä sopivista katalyyteistä ovat tertiääriset al-kyyliamiinit, kuten trietyyliamiini, trimetyyliamiini tai sentapaiset, aromaattiset amiinit, kuten 71 748 22 pyridiini, 4,4-dimetyyliaminopyridiini, kinoliini tai sentapaiset, sekundääriset alkyyliamiinit kuten dietyyli-amiini, dimetyyliamiini tai sentapaiset, ja epäorgaaniset emäkset, kuten natriumhydroksidi, kaliumhvdroksidi, ka-liumbikarbonaatti tai sentapaiset. Edullisesti käytetään pyridiiniä ja kaliumbikarbonaattia. Esimerkkejä sopivista inerteistä liuottimista hydrolyysissä ovat vesi, alempi alkoholi, kuten etanoli, metanolia ja sentapaiset? eetterit, kuten dimetyylieetteri, dietyylieetteri, dimetoksi-etaani, dioksaani, tetrahydrofuraani tai sentapainen; halogenoidut hiilivedyt, kuten dikloorimetaani, kloroformi tai sentapainen; tertiääriset amiinit, kuten pyridiini, trietyyliamiini tai sentapainen; tai yhden tai useamman yllä mainitun liuottimen seos. Reaktio suoritetaan tavallisesti noin 0-100°C:ssa, edullisesti lämpötilassa, joka on huoneen lämpötilan ja 50°C:n välissä, 1-48 tuntia, edullisesti 2-5 tuntia.

Yleiseen kaavaan I sisältyy myöskin yhdisteitä, joilla on kaava 0R1 H,c <f° ° °V^/Tt_OCOR2 h3'·^ __R3 (IX) R5 jossa Rjy R2, R3, R^, R^ ja katkoviiva renkaassa A tarkoittavat samaa kuin kaavassa (I) yllä. Kaavan (IX) 11-keto-yhdisteet voidaan valmistaa menetelmillä, joita edellä on selistettu vastaavan kaavan (II) 118-hydroksi-yhdisteiden valmistuksen yhteydessä. Siten kaavaa (II) vastaava lähtöaine, mutta jossa on 11-keto-ryhmä, saatetaan reagoimaan R2OCOCl:n tai R2OCOBr:n kanssa vastaavan kaavan (III) uuden välituotteen aikaansaamiseksi, jossa 71 748 23 kuitenkin on 11-keto-ryhmä; tämä välituote saatetaan sen jälkeen reagoimaan metallisuolakseen, joka vastaa kaavaa (IV) paitsi, että siinä on 11-keto-ryhmä 11β-hydroksiryhmän sijasta ja metallisuola saatetaan sen jälkeen reagoimaan R^W:n kanssa kaavan (IX) vastaavan yhdisteen muodostamiseksi. Kaikki reaktio-olosuhteet ovat samoja kuin edellä on selostettu vastaavien menetelmien yhteydessä vastaavan kaavan (I) yhdisteen valmistamiseksi. Kaavan (IX) yhdisteiden, joissa R^ on sulfinyyli- tai sulfonyylipitoinen ryhmä, valmistus etenee yleensä myös syntetisointireaktiokaavion loppuvaiheena analogisesti kaavan (I) vastaavien yhdisteiden kanssa. Kaikki edellä mainitut vaihtoehtoiset prosessit kaavan (I) yhdisteiden valmistamiseksi soveltuvat lisäksi yhtä hyvin kaavan (IX) yhdisteiden valmistukseen yksinkertaisesti korvaamalla niissä käytetty vastaava 11β-hydroksi-steroidi 11-okso-lähtöaineella, esim. korvaamalla 11-hyd-roksiryhmä kaavoissa (V), (VI), (VII), (VIII), (X) ja (XI) 11-oksoryhmällä ja muutoin toimimalla kuten yllä on selostettu reaktioille (II)->(V)-XVI)-XI); (III)-> (VIII) ->(I); (VI)-XVII)-XI); (II)-XX)--XI); (VI)-XI) .

Kaavan (IX) uudet yhdisteet ovat käyttökelpoisia soft-steroidisia tulehduksenvastaisia aineita ja myös in vivo-tai in vitro-esiasteita vastaavista 113-hydroksiyhdisteistä. Siten kaavan (IX) yhdisteitä voidaan pelkistää koelasissa vastaaviksi kaavan (I) yhdisteiksi käyttäen pelkistysainet-ta, joka tunnetusti kykenee pelkistämään 11-oksoryhmän Ιΐβ-hydroksiryhmäksi modifioimatta jäljellä olevaa osaa steroidisesta lähtöaineesta. Mikrobiologinen pelkistys on tavallisesti edullinen halutun konversion aikaansaamiseksi, joskin kemiallinen pelkistys myös on mahdollinen. Kaavan (IX) yhdisteet voidaan lisäksi myös muodostaa sopiviksi an-nosyksiköiksi (esim. hitaasti vaikuttaviksi peräruiskeiksi) sellaisten tilojen hoitamiseksi kuten haavainen paksunsuolentulehdus. Oletetaan, että tällaisissa annosyksikkömuo-doissa kaavan (IX) yhdisteet pelkistyvät mikrobiologisesti 71748 24 kehossa (esim. paksusuolessa) olevien bakteerien toimesta hyvin aktiivisiksi Ιΐβ-hydroksisteroideiksi, jotka tuovat esiin halutut tulehduksenvastaiset vaikutukset.

Edullisia kaavan (IX) yhdisteitä ovat ne, jotka ovat niiden kaavan (I) edullisten yhdisteiden esiasteita, joissa Z on β-hydroksimetyleeni, nimittäin vastaavat kaavan (IX) 11-keto-yhdisteet. Erityisen edullinen ryhmä kaavan (IX) yhdisteitä ovat ne, joissa ja R2 tarkoittavat samaa kuin yllä kaavassa (I) ja jäljellä olevat rakenteelliset variaatiot ovat identtisiä kortisonin kanssa (so. R3# R4 ja Rg tarkoittavat kukin vetyatomia ja 1,2-sidos on tyydyttynyt), predni-solin kanssa (so. R^, R^ ja Rg tarkoittavat kukin vetyä ja 1,2-sidos tyydyttymätön) tai niiden kanssa yhteensopivien 16a- ja/tai 9a-fluoriyhdisteiden ja 16a- tai 16β-metyyliyh-disteiden kanssa. Kaikkein edullisimpia näistä johdannaisista ovat ne, joissa R3 on C^-Cg-alkyyli ja R^ on C^-Cg-alkyyli, C^-Cg-(monohalogeeni)alkyyli (erityisesti kloorimetyyli) tai -CI^-Y- (C^-Cg-alkyyli) (erityisesti -Cl^-Y-CHg) .

Keksinnön edustavien yhdisteiden erilaisten aktiviteetti-tutkimusten tulokset, joita alla on selostettu yksityiskohtaisesti, osoittavat selvästi kaavan (I) softsteroidien tehokkaan tulehduksenvastaisen vaikutuksen ja erittäin alhaisen systeemisen aktiviteetti/myrkyllisyyden. Tästä halutusta paikallisen ja systeemisen aktiviteetin erottumisesta johtuen voidaan keksinnön mukaisia yhdisteitä käyttää ulkoisten tai muiden paikallisten tulehdustilojen hoitoon aiheuttamatta niitä vakavia systeemisiä sivuvaikutuksia, joita tavallisesti ilmenee tunnetuissa luonnollisissa ja synteettisissä glykokortikosteroideissa, kuten kortisonissa, hydrokortisonissa, hydrokortisoni-17a-butyraatissa, betametasoni- 17-valeraatissa, triamkinolonissa, betametasonidipropionaa-tissa ja sentapaisessa.

71 748 25

Kateenkorvan surkastumistesti

Koe-eläimet olivat naaraspuolisia Sprague/Dawley-rottia , jotka painoivat suunnilleen 40-45 g kukin. Kunkin rotan kummankin korvan toinen puoli käsiteltiin kokonaisuudessaan 25 mikrolitralla liuosta (etanoli/isopropyylimyristaatti tai asetoni/isopropyylimyristaatti, 90/10) jossa oli testi-yhdistettä alla annetussa määrässä. Samalla tavoin käsiteltyjä eläimiä käytettiin vertailuna, joskin niille ei ollut annettu testiyhdistettä. 24 tunnin jälkeen kaikki rotat tapettiin ja punnittiin ja niiden kateenkorva poistettiin ja punnittiin. Tulokset on annettu alla olevassa taulukossa I, jossa kateenkorvan painot on ilmaistu mg/100 g rottaa.

“ 71748 26 + 1 tn I >1 ro :rO ιο r~~ in io (0 tn c 3 -h +i +i +i +i

O 4-1 rH

O C r·* ^ σ\ ro G ^ 0) G (N cm cn ro •h σι tn ti)

ro ^ O G

ϋ G -A

O C di i—I

e e <u (0 -A Ό > <0 -G ro >-i di O tn (N ld o o O tn a: tn 'j' ,h r-ι io a; -a e G ro rfl cu D .-4 cm o <D G Π3 O ^ 143 >-D M3

<1) O 4-> D

4J Ai 4-1

<0 O O

X «M

tn ns rr ie r~~

3 U) -rf 'O' o LO

4J tn * * * ^ 3 3 oo σ> oo m a: i—i «a· •«τ *j> ^ < <0 >

Q

C CO

Φ z! +1

TO

•H rO

O (0

G t 4J

H W G 4-> <Xi m .H »5·

Tn 0) o tN Tj< Γ0 (N

O .¾ tl) G

«en 4-i ro +I-H +l +i «tn (0 ro tri DG Ai > i" σι

Dg G o id f» υ- o

Dg tPOorocN ro ro

S i SJ<H

>4 * S ® 5 -H | :t0 D 4-* 3 >4 S 4-> AI :tö oo oo oo o O 3 :tc G KH £ Φ 4-> tn ^ +J r0 |44 i ·+ in uo in SC Dl C r4 r-' n- r-

3 >i 0) o I

4-> -H (U :rC O o o o G O 4J +» M e tu C tn tn :to 3 ; •n C tli -i—l :ct3 \

3 <4J3 £- Il I

+> en Ai I I ö I I

D H | O ro >i -H | ^

tu H OJ -4 | tn r4 rA AI | O

G -H|gr4CAI I >iOCJ3

G G -A I >i 0). 0 -A >i G <D G

to O h O >, | J H CO I ie

— tn >iC" e -j* G >1 o >i^r AI

•A -A Ά >iH 0 I O >ιΛ Λ I I

+ C A + 4J I Λ 4-1 A 4J ^ I 4J CQ

tn :t0r4 >4 φ -A M 111 I 0) <0 00. tn r- -A

<D <0 (D :t0 O O £ in (0 O an £AIH O H 4J

Wtn 14-1 4-> >4 Ai A A ρϋ tr Is ·Α ·Α-ΑΗΐ4|4-> •A tn ·Αω -A 4-1 o G O ·Α 3 A 4J G CO I T3 -A t0

O -A G -A £ G G O G tn β | +> O AI Ή β e O

4-> tn Π3 O T3 O TO AI (0 -A to O O tn r0 O D

DO 0)£ -AAI >i D >i O -A C tO H 4-> AI -A I >, dg Ε4>ι ω ^ x «40+tnoD «tuotnrotn 27 71 74 8

Kateenkorvan painonmuutos on mitta systeemisestä aktiviteetista ja siten myrkyllisyydestä. Mitä alhaisempi kateenkorvan paino on, sitä suurempi systeeminen aktiivisuus. Kuten yllä olevista arvoista nähdään,aiheuttaa jopa hydroklortisoni, luonnollinen glukokortikoidi, huomattavan alenemisen kateenkorvan painossa vertailuun nähden. Keksinnön mukaisten edustavien yhdisteiden yhtä suurten annosten aiheuttamat menetykset olivat paljon vähemmän merkittäviä, mikä viittaa siihen, että näillä yhdisteillä oli paljon alhaisempi systeeminen vaikutus kuin hydrokortisonilla .

Valkaisututkimuksia

McKenzie-tyyppisiä valkaisututkimuksia suoritettiin ihmisille keksinnön mukaisen edustavan testiyhdisteen, kloo-rimetyyli-17a-etoksikarbonyylioksi-ll3-hydroksiandrost- 4-eeni-3-oni-17 -karboksylaatin valkaisevien ominaisuuksien tutkimiseksi. On todettu, että yhdisteen kyky valkaista ihmisiä korreloi läheisesti sen tulehduksenvas-taisen vaikutuksen kanssa.

Testiyhdistettä liuotettiin etanoli/isopropyylimyristaat-tiin (90/10 tai 70/30) pitoisuuksissa 0,03, 0,01, 0,003, 0,001 ja 0,0003 M. Kunkin liuoksen 50 mikrolitraa ali-kvootteja levitettiin allergiatesteissä tavallisesti käytettyä tyyppiä oleville erillisille sideharso-osille ja siteet pantiin käsivarrelle. Kuuden tunnin puristuksen jälkeen poistettiin side. 1-5 tuntia siteen poistamisen jälkeen havaittiin vaalenemista jopa testiyhdisteen al-haisimmissa pitoisuuksissa.

Testattaessa hydrokortisonia yllä olevan menetelmän mukaisesti verraten sitä suoraan testpyhdisteeseen, ei mitään vaalenemista havaittu hydrokortisonipitoisuuksissa alle 0,03 M. Lisäksi todettiin, että 0,03 M hydrokortisonia aiheutti suurin piirtein saman vaaleusasteen kuin oli tuloksena käytettäessä 0,001 M kloorimetyyli-17a- 28 71 748 etoksikarbonyylioksi-118-hydroksiandrost-4-eeni-3-oni-176-karboksylaattia.

Korvan turvotustesti

Koe-eläimet olivat Sprague/Dawley-rottia, jotka painoivat noin 150 g kukin. Käsittelyryhmissä liuotettiin testiyh-disteen valittuja määriä asetoniin, jossa oli 5 % kroto-niöljyä ja 50 mikrolitraa liuosta levitettiin rottien oikeanpuolisen korvan sisäpinnalle. Vertailuryhmää käsiteltiin samalla tavoin ainoastaan apuaineella, so. 5 %:lla krotoniöljyä asetonissa. Kuusi tuntia krotoniöljyn levityksestä poistettiin vakioalue kustakin korvasta nukutuksen alaisena. Sen jälkeen, 48 tuntia steroidikäsittelyn jälkeen, tapettiin eläimet ja kateenkorva sekä lisämunuaiset poistettiin ja punnittiin. Testitulokset, jotka osoittavat paikallisesti annettujen steroidien ehkäisevää vaikutusta krotoniöljyn aiheuttamalle korvan turpoamiselle, on koottu yhteen alla olevaan taulukkoon II.

(I

71748 29 c >i ro

•n en I

rH w -h •O *H £> •H Cd) C o '—i O · 4-> 4J -p <u e o o tn <u P C *r n* o <n m o > (0 en A :0 vj_i -h

4-> f—I CM rH m (M (N 1C >i H

tn :ed -n i—i 3 g +1 +1 +1 +l +1 +1 -P rH ro

PtD P -Ό λ;

P Γ-l KO 03 KO O tJ" -p -P -P

A D ·.*.«.·.«. « li e id •H £) -P ID O 00 H (N O A O Cij

(0 .p to ti· tn lti tn tn tn-P

> en -h > ro o m g tn ρ i—i ρ -p G ^ :t0 o a; -p tu « a ro e · -H O KKK rH ro 2 rö

Ό G KK K K * rH -P 4-i -P

-P -p -p tn o eo oo m in ui in en O ro p τ » ** ^ v ^ cu ·· ko *p

P Dj G τ* m CN rH (N rH -p <*> rH

<U P tn C rP

4-> e -P +1 +1 +1 +1 +1 +1 p m -p o tn ro .e m p -P p

•P > <U > (N (NO KO O ττ φ :»Ö -P 4J

tn P rH p - - - - v - Dj -Ρ -P e

m en o 3 o tn tN m <N o tn -pro O

hC iij ^a: h to m LO tn m e <U -Ρ a

<U 0) A -P

O P tn A g ro «CU A :rö g A MH >i :rö O fö

D <U 4-> rH C CU

PI P -P -p A

D > ro m A

<d (0 CU -n Di -P

Eh -o :co rH o cp ro e Dj G CU ITO G -P ro •p i-p-.ro ui e > m -pcs tn tn m m tn tn cnOP > •P 4-1 -P 3 A -P O rtö

0 tn :(0 A O <U A A

PCcUrHd p tn A

CU CU Eh CU f—I -P ro · -P

4-> CL) <P \ C A

en tn -p >, ro p

1 -p Ό -r-i <0 CU

-P g -p -H > s

4H it nj O :0 P

o o tn tr> p -p o

tn Q OA CO rH ΓΟ H rH (U G A rH

p G \ A o o CP Gtji o en -P G ~

>i 4J «< g O to O

4-1 e p m . / cu e CU A CU ’ 4-i fö tn a · a •P > -p ro -p e > p i p -P o <u ai o i i «o. i p en <u

rH A O -pr- I Γ' P ·· e A K

I Λ I en rH -p -p rH P OP -P rH K

•P .p p ca o I 4-i C -P t en -p :ro -PC p m p p -p p O-P-P in 4-1 -m

tnC >ιΑ H Ό β ij ω 4J C C -P

CU (ö -P >ι·Ρ I e O C -P (0 o -p ·· rH 0) e m en g CrH4-itn-P<cirH .pro en-p ih^-pcu •pro :rorH a> a tn -p m >, pp ro-P g \ -p tn o rH-P <u:roo E o A e» i en 0>i -Pro \ >a .

rH 4-1 I 4-1 4-1 P -P4-10A-PA A-P euro O O CU >-( V

<ö 3 -p tn-P 4-i PtU-POCO 0 3 g P ininrH4-i Dj AC CU 4-1 -P g G O M P ΦΛ P43 rotu •p -C en Ό o O ö >,T3 cu p Ό i +>h ro-p n)£ -pa i-ir^^^iro >ιΓ- turo ·· ··

&j<0 Eh>n(w— «rHCXC-^A K rH m > ro .q K

71 748 30 •4-» O <1) β ωΐ'-υ'ίττοοί'' o •rH y—^ *#Η * % ^ ^ *

(Ο <0 <0 rH CM ι-ΙΟ O rH

cu o d β β +1+1 +1 +1 +1 +1 β ·Η β Φ Φ e η ο Γ'· m cm σ β CU ·β w * k. h. *.

•h en m νο οο ο ο οο rH β ·Η CM CM ι—I CN CN γΗ

H O J

φ χΐ Φ 0) +> α: (ΰ Λ > χ β !τ> Ci m m ι-ΐι—ι ι—ι σ

W θ'—I CM CM CM CM rH

ο λ; β Ο β +| +| +1+1 +1 +1 eu ι-t ο) 6 \ α) m ο m οο m r-~ •h oi +> m o σοο o o

h g (0 m cm cm cm m CM

w ^ X

<0 +l en

o—N »H

eo ι—ι

O β iH

Ai 0) O

+> β (M

<0 -H -P

m -H β

~ (0 O

β Ai

H β Γ-l CM O O CM

H +1 >1 - - (0 β tn CMt-'^VO CM e O o -h or-~oo oo fo

X en :d .h O

Ui O Λ: Ai d ci £ a: β) ^ a) -a 9 0 < cu C XXX £$ '*<0 <D XXX X X > G σ> M h in m :<fl •H h. «k «. W th

«H CO VO CO ΓΟ VO 4J

-H

β +1 +1 +1 +1 +1 +1 Ai d ci +i •μ’γοογ'-ο σ ci) β en - * * *· «· v. 5^ (D^rHm^m m o

en :rd o cn rH l rH

0 en ι—ι

Cl -H O

CU ι—I *

O

1 1 \y ~ I >i I v

-h -h ι en 0) CU

rH en +> a: h ι—I I pii (A O I (0 O ö 0 O Λ r* >

Cl -H Cl U iH I K

+i h rl Ό (j I r-~ x

β I >1 fi Ai -H rH

O -H >, m | β |

Ai Ή β -H CO. o -H ·- ^ >i o tn r·- en β en

>iJ3A!H -H -H O O

β +> Ci 0 ι +>+) en

:<0 0) (0 Ci -H Ci +1 β O

<D :(0 g Ai T? β 0(0 -P . .

1 +4 +> -H -H >i O -H Ai (0 O) -H V

-h en -h u ιοβ ι 4J oc g +> CU

+> -H g o Ai I m 4J Cl >1 (Ö+> en n3 o O ca ι m Ό+» +>i0 <υ a=: -h rH +j h β ro >id o (0

tl H W « <1)H ΦΗ £C A3 CQ Cl K

31 71748

Kuten yllä olevasta taulukosta II nähdään, ehkäisivät esillä olevat edustettuna olleet yhdisteet, nimittäin kloori-metyyli-17 -etoksikarbonyylioksi-11 -hydroksiandrost-4-eeni-3-oni-17 -karboksylaatti krotoniöljyn aiheuttamaa korvan turpoamista (ja sen seurauksena olevaa painonli-säystä), so. yhdisteellä oli olennainen tulehduksenvas-tainen vaikutus. Toisaalta, päinvastoin kuin betameta-soni-17-valeraatin aiheuttama vaikutus, ei esillä olevan keksinnön edustama yhdiste merkittävästi alentanut kateen-korvan painoa kontrolliin verrattuna, so. siinä ei ilmennyt merkittävässä määrin systeemistä aktiviteettia.

Granulooman muodostumistesti

Testiyhdiste liuotettiin asetoniin ja vaihtelevien pitoisuuksien alikvootteja ruiskutettiin puuvillapelletteihin. Pelletit kuivattiin ja sen jälkeen yksi pelletti sovitettiin kunkin testirotan nahan alle. 6 päivää jälkeenpäin eläimet tapettiin ja sovitettuun pellettiin sekä sen ympärille muodostunut jyväiskudos (granulooma) poistettiin, kuivattiin ja punnittiin. Kateenkorva ja lisämunuaiset poistettiin ja punnittiin myös- Yhdisteen kyky inhiboida granulooman muodostumista tässä testissä on suora osoitus paikallisesta tulehduksenvastaisesta vaikutuksesta. Siten, mitä alhaisempi jyväiskudospaino sitä parempi tulehduksen-vastainen vaikutus. Merkittävä lisäys kateenkorvan painossa on toisaalta osoitus merkittävästä systeemisestä vaikutuksesta ja päinvastoin, kun testiyhdiste ei merkittävästi alenna kateenkorvan painoa kontrolliin verrattuna, on tämä osoitus systeemisten sivuvaikutusten puuttumisesta (tai hyvin pienestä vaikutuksesta).

Tulokset on esitetty taulukoissa III, IV ja V-a sekä V-b alla.

i 71748 32 » co

G O

O Ό 0 3 _ 3 Hd •H CO ry G -H .

Cu :fd U3

, KKK* X X X X X X

g >1 I «KK# X X X X X X +1

o -n C K Sd Id x. X X X X X X

S-, O oo oo n σ> in ro ^^τοοίι^η o cu G G —> ».«.»»k v «·»«**«. j> (β ·Ρ Ql O CNi—CO rH rp i—| r—I rH i—il—| CS p G fO Π3

G g Dj +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +| +| -H

G G CO X

Ρ P G >i io o o oo r-' rr <τ> <r< o tr> o co 3 P 0 CG - ~ ^ ~ ^ Q) nd 3 ,c co o >x> ro <n o ro rom^o^r^ •H ai CU -P ro ro ro ro oo oOrH ,-h i-h .-h —

G ,G « .H

> -H

G G

<U G

-P CU :G

G3 ·Ρ M

•Ρ P | :G

OP G '-G

G CU -PE

0 i—I :G 3 Ρ P I—I id O 00 00 00 Γ-- t" 00 CO 00 00 00 00

CO G CU 3 |H

H Qi -Hi—I

CO to p

H CO r—I CO G

H G rH CU CU

H CU -H -P

P > O G 3 « P 3 « i) Q, C p *—»

CC -H

D G <U -P

<C -n -ro -P

Eo 3 CU

G -P i-t

CU -P rH

•H (U CU

<ϋ P CO Dj H ro •P 3 O \ * v 0-P GtT> OOrHro rH rHroOr-Hroo

p G e E rH rH

(D -rl < —

-P

CO G

1 -H

Ρ ·Η

CP P -P

OP I I HP

GO I Ö1 -H| -p -rl

P I X. r-~ en -P i g P

G -POP Λ! ffl G (0 p O G G P | O Ad r- p (0

Π -ro XflH POP >i G

3 .— O >i G Ό -P | P p

PC -Ρ P .G O >iPP 3 CU

•PO r-H CU I I G >,G Λ H

CU O P | ai ro 1>ι0 I G

CC O ö Ρ I oq C I r- >

C-P Ρ Γ- Ρ -p rl O ro rH I

GG Ρ Ρ I G rH ja I I r~

Dj C | ·Ρ CU ·Ρ I P ·Ρ Ρ Ρ Ρ ·

•p G Ο ·Ρ CO CU Ρ -P G G P G I P

P G CU M PM I P P ,¾ <U P O -P O

G G CU ^ ^ΟΊ1 G >vP<UGG G O

<U>cn >ιΡ I G >, W I G P O · *

GPX G Ρ Ρ Ρ P P AC *3· Ρ p G O

•P O 3 I :G (U >i G >i CU O I >i P G

P Hd P JC :G g >i 0 G gPPGO P ^ p e g to p ·ρ e p jc p cj w .* λ: cu cu GCUO-PCU-P Ρ O Ό O p g O O O g

ACCUTUPPEO^GXl ΟΙΡΛΡ G

•PPOGG OPGP OöOPO Ρ X

G G 3 CU ·Ρ -P P G P G Ρ Γ" G G >i 0 Sd IME E"OW «HG^dK ta Jd 71748 33

OP

I CO

* cn -η +> x x x x x co ε o x x x x x x

Ο fl O CO K X X X X X X

0 3 c -H rH cd o ro rH .H n· cn in ro σ σ 3 Ai 0 3*-»·**· v -

•Η ϋϊ > 3 I—I CN rH rH r—I rH I—I I—| I—| I—I o O

3 -H O O 3 — a :(0 G Λ! 3 +1 +1 +l +1 + 1^ +1— + iro +1— +1— + 1—- +1— +1 — > -H '—· £ r-» CO rf rH CD CD 00 C >1 3 :3 γ~ σ noocoooo cd - H * rt^in «αι ' in >.io vie » O-r-i a 3 cn - ^ σ » η * o « cn ~ ^ * cn ^ co jG ο -η ro cn rocNroi—ιοο w H σ rH r- i « n vo ^ m ro ro n1 cn n· 0 3 3 C 1—1 CN CN ’—HN'r^CN'-^ rH v—' rH '—· CN -—' r-H ·—' rH "— rH '— i—I ' r—I ^ A! 3 O -H · 3 3 3 ω « E ή Oh * 3 3 H w O -0 Ή 3 , .

3 -P O O +l X 3 O x •H O +1 O 3 5 3 ,3 .3 Ai > K x x x x x x ζ >·Η3ο x x x x x x x £ 3 cntnocNrocoorHm κχκ x x x ^ 3 Ai cn h rH rH cn rH uo.— ro—-ro,-^cNr-,ro^H· —"r.

03 303 ^ cd co cn cd ro oo·* — -H O O O 0+1 +M1+»-+*~ + ΙΓ" +1rH + 1 - +1 * +1 ' +1 - + *+l -J” 3 33 ·η 6Ή0) ·> co « - γ-- m o uo oo co ~ O Ή +> -H \ +> CO (N rOOO -'T - 00 T oo ro ro 00 CN σ C^ 00 00 00 ro 00 ^

Ai O -P i—ien 3 cn co ^πσοο oco t'- h -H ro [---^-00-^-00--3-- +> P <D ωεί^ΟΟΓΜ '—C-J-—ΓΟ CN — CN '—

3 O (—I

•ro +J r-H

— wo •H Oj H CO 3

M CO r-H

M 3 ι-H O

O -H -H

O SH > +1

«03 -H

«<4h3 -h.— co h o cn p- ro co cn o σ JOO&i Xi OP «.».v» «* ^ ·. v - - - iJSh -h— o cn oo r- ro vo o ro σ t-~ co

05 3 ,3 (N TT VD Id <T CN LTO 00 rH CN

<C 3 O 3

£h ·γο *ro H

3 Ή

3+1 O

o +> o

HO r-. KK

Ό +> 3 X X X X K O

•H 3 CO O X K K X XX X W

O -P OOOcNroroooro cd o cn r—i ro h co

Shcq ΌβΟ^Ή *.«»*·*«· - * * r - * - a 0 -H 3-33^^0^1-icn cn uocNro r-· cn cn +> λ; 3 o &

CO 3 CO CUO +1 +| +1 +1 +1 +| +| +1 +1 +1 +1 +1 X

1 -H -H 3 rH 3 X

+> -H :3 > \ O Ι"~ Γ- ro O Γ- CD CN CD CN N- CO [^ X

mhh-i >·Ηζη,3-'~-~ - - -

O +1 >ι3ΕΦΌ Cfiocfto N> CN i—I σ U0 H O

COO H|« — Ai N- ro CN rH rH CN ro CN CN ro ro «3- -

3 rH

3 O

0 3 III

•ro -ro A! -H 3 | | O

3 — 0 13 Ό O .* v

+>3 H Head) >ιΛ I O

PO rHOrHOI .3 P -3- £1 a

00 r-H | rH | >i I 3 I P I

3 3 O a I ^ cn oaX +> 3 r- 3 -H P Is H | JC rH -H cn λ; rH |

33 +5 rH tn +> 0 rHenoi I r- X

a 3 I Ai cn .Q I^Pca-H rH x

-H 3 Ο -HOOP -ΗΟΌΓ" 3 I

-P30 Λί H H p S H+J 3H O -H

cn 3 O — >irH Ό X >1 O 3 I cn 3

O > CO >o >o 3 I >1 ε I -H -H -H O -H uO

cnp,M 3-3^03(21 -PI-H3 +>-P CO+J O

H 03 :3 03-H(^ Oacno-HP+) 3+>

r-t X 4J O COgOCOrH ε^-ΛίΙ-Ρ03 +13 O

rH3cn |+) -P -H λ .X I -H -H rH O CH -P « 3 03 .

300 -H CO -HPPO-H+I P i -H I 3 OP gp v ^03! +>·Η H03P3-P O H H -H 3 P >h 30 a

•H +50 C0T3 O Λί Ό O 3 O C0 >1 3 Ή Ό -P +>rH

333 O J3 ·ΗγΗ·Η>,|3 rHGi4>iO>i>i3 03

CL, X £ H>h W«cnx:rOrH « O 3 O cn K -Q CQ > X

I 71748 34 - m C 0 ο τι op _ ζ * ' x x x x x · “ S xxxxxxxw x xxxxxxxx· Ο*·® c — \d \d m fN m h m h ui h h ^ h h in r- cm cn ^ cm o c/3

*· ·* ·- ^ ** *» >* ». *. «-«*<*.·**. V V >. *. ·*«.«.··» «. ·. K S

C (Ö H CM I—I CM CM H H rl H rl r-1 H H r-1 H H rl r—1 rHrHCMCM H rl H H +1 0 *m Cu ·£ „ _ 01-H + l + l + l + l +I+I+I+I +I + I + I + I + I +I+I+I+I + I+I+I-H +I+I+I-H 0 o R r >, > a: <0 O »0 σ> o ·ί o<f τί rnwrifo ovoco (Νγμγ^ο σ m m U3 Vi d £!/)»>.»>.» -«·*» ·.»·.·. *·>·.«. «.·.»*. d ME a) η nh< n^roj cm σ ^ σ cm cd h o o o h is yj vo n ^ n iruo -h

3 nj X Ή no co m en m en m cv en en m en en en en en en cmin i cm cn A

p +j w p p cu x p « •HO) c.

ro A

> -H

<0 c G 0)

(DR -P

•HO) R

T> -H -H :d

•H -P :d P

0 -p H :d PO d) :rö 300 oooooo oo r-~ oo oo oococooooo oo oo co to co ko cd γ- oo h oo

0) r—I -H g -I

P H PR

w D ma: h cu o d

Md H Ή

> M H

H G Ή CU -H O M > X cu d —

X 4-1 d -H

D ω G. P

au p a G Q) en

< d O H

En ·Γ-|·η Ml—I OOOO O O O O O H O O O h o o o o o o o o o o o d OCLioooo oooo ho ho oooo oooo G P R CU H O O O hoo o o o o h o o o

D P R Χ. HO O H M O HÖH

H 1) < m HO

Ό -p d o H d \ OP — Il o u w X -H . .

(UH I O I c v •p >1 u h o a

MG I I >1 I OMI

1 h ai ai Rio >ia:o

-PH Γ~ Ό I Γ' Ό OHI £ o I X

Η-p HR>iHR J3 m c IHR X

O -P I (0 M Id p A! O CQ H O X

« o h ia: hi d o h h >,h U MH o MH| ΧΡΌ H iPT) G ΧΜΛΧΜοαΗΌΐ IRl h O d O Ai P O A! Γ" M >iH HO·^· o •0-0 P O d ΡΟΗ ΑίΛ'Η ΡΛ»

p —Tl HA! ohi O I H 4-) OPH O

-PR P>iHI >iHH 4JCQI4-I d d I

-p O —I.R >100. il >iR O H d d HXd V

DO H I >11" I >0 I H P d HH-PHI di

R R Oco RH CO R | oi MH | M M P H

G H PH OI HOO Γ-~· H O >1 0Α:θ-ΡΗ I

(¾ d PH J3 H H Λ I H p p M O O P d I r~ X

CU Rl PR IPR-H 10 TIX I CUO d H H X

H R OH do H d O P H d R O HOGH R I

-P R D D XH X I H A! H p HH dXl H P d >1 0 H

M d D -P —’>1H O >ιΗ Ό d ίΠΗ H P >i QjH M M R

D > M M >ι M I >iM|d >ί | H d >i O H ,X H -H OH LO

M U X H RP a: R P A! *3" H -PO >X P M >i O HP MP o

H 03 'ddOOD Ο O * >i O σ> >i | ä) H P P dP

H A! P Λ dg G. I g CU H M g I P co g | P P Od Pd o H R M >1 PH O H1 H H o I X H H <DP~ H Ö O d A!d Od

doo H HP p | p PPdO PM gH PHgX OP gp V

ΑΟΌ PE0O.PP O α,ΡΛ OAII OHII p>i dO a

H PO M O O M d O O M P OOÖH O I cq en x)p pH

d d d O HH MOd H M O d HHCOR HHCOH >, d Od

CU X g E-ifcqxJHPH X H P a: Xhho XMHH CQ> X

35 he 71748

CD CD CD CD

-PM-' -- g a: o c*> · A: G G I w -P -P (0 Γ- 00 Ο Γ- CN Γ- r-oo - CU G -P *..»**»»* U) G O a g or-t—oc coocnuo Ο Ό <D CM I^OOOO arroooo + O O G G ---- ———— Λ G 3 CO CD 0 g ^ > G en P (D KKK IK IK IK ^ ftO o Si KKKKKK3 Τ3 A!j ~ KKK K K KKKK kkkk -rj G 3 G| Ο 0ΜΓ)Ο<ν CO a 00 CO CO CN CO UO VO O OUOCO t— -iW At

Ο Λί (Dl (N CMCNOOCN CN 00 CM (N CN (N a CO CN 00 (NCMCN 00 f- UO Γ— (N CM LCOOO W

C M CD + I+W-H-H -H -H -H +1 -HHH-H-H-H -H-H-H-H -H-H-H-H -H-H-H-H ® CD -H -P LT) (NOV'S· CTC OOt—UOOO CNOOCNi—I IT) VDa’iTO'i 00 CC 00 VO '»rf r^OO >*< a: :G (0 tji a uovocouo ομοοομγμ (tihoojo cmγόόο uocjcuo-p· cdoi-co ' > « g »a· aaaa UOUOUOa a UO a UO UO IT) Ti oo OO 04 cn >, 3 -ro

-P I

G G -P -—.

A! (0 -P <*>

•H (0 A'-' 0000 00 O CNaaCN a CN OO CO CTi OOOOCNUO r-H UO UO UO <»OrlO

(OS -P -««« *-*»- ^ V Ί ·. * s « s ^ » V V V

> (0 x: Ο ooe-ouo r^oooor^ oiuocoeNa KO cd oo LO oo cd uo co σοσοοοι-·- P G -Η Ι-ΗΟΟΙ-Ί" maUOt— (NUOCCt-t'' aCDCOr^ KOKO CO CD aUOUOa

e -P H -P

CD G •H CD

~ 'G jG —

CCS -H-H CT> KK KKK KKKK KKKK KKKK KKKK

00(0 g KKK KKKK KKKK KKKK KKKK KKKK

ASP KKK KKKK K K K K K KKKK KKKK KKKK

P (D G I ocot—oo oooooo a o a σι vo a aaoooo oocni—a r—coooa (O-PCD G O irT " ' - « « « - « « « « « * ^ * - - - - - - - - ro en-H cn > G ^ co(Ncni—i cnl/ouocn uocncnoocn uoaoocN uo a cm om cNooaa

'-'•P-P o-H -H -H+H-l-H-H -H -H +1 -H -H-H-H-H-H -H +ΙΉ-Η -H -H -H -f) -H-H-H-H

cn-P G G (0 N oocaoo onnin ooaaaa aooooc oooocn hooho > en cd 3 « a _? ^ ^ ~ « « « « « « ' - - - ' « — « « « « h G a a! G? oocfo i—i »H oo oo O'Cor^cNo a coocoo «sunoot^ a oooooo CD »h >en 00 (--1/0 (N cm uoaooa uo ro CM CN CN acNCNa oooocncn acoooa O p CD -Hl «(Da .-m -h —

« MH G > -H OP

O (DH >. X! — oocrcaa i oo oo oo coauor-co oooooo CNoooca oor^ococ J p H b ·Η **** - - - - - - - - - - - - - - - - - «·*** D -H XI O aoOCDOO CO CO a 00 CDaaaCO UO 00 CD'S* i—t L/0 i—I uo ocoouooo < (O > G-P aoMaa OM (N ro tt hcom"»^ CNooroa aroa a cm oooooo

EH TO G H -P

G

G a -—' rH

CD O1 O

-P G g KK KK KKK KKK KKKK KKKK o

Ό CD — KKK KKKK KKK KKKK KKKK KKKK

•H το I _ KKK KKKK KKKK KKKK KKKK KKKK o 0 G :G O'5c coo co uor-oo<N oohhooo ercoc on aa a oouooouo

P -P AC G ^ OOCNnHr^ rHCMiHiH CN 00 rH iH iH rHrHOOrH CN CN i—I (-- i—I iH CNr—I V

CD -P P -H +I+I+HI-H -H+I+IPI -H-H-H-H-H -H-H-H-H -H-H-H-H -H-H+HH a •P CD :G G co 1/OiH UO CN CN e~- OC OO CNOOrHOOO COrHCNUO OOCOCTu-l ΟΓ^ΟΟ·ΓΤ en -P S a co ooooooc oorHcooo r^oooorHOi cnuocoi-h oococn>h o^^0^- - 1 G uo τί"<3·οο<Ν •«a’^oocN ^οοοοοοον •efoooooo oooooooo ^oooooo κ

-P -P K

a en K

O -H II II

en >i -h i a: >i G i >11 cn-P i i i i o >i

G -P Ai G -P AirP oo -P -p -P | | a-P rP

CD-P O O G O >1 I enPH-P-POCDl o

TO+J ΡΛΟ P>iC-Pa:oSoG ppg co-P

G-P — G P I T3GCD-P OGJPO Oail-P O

-PO -P >|GOO >iO-P -P -ΡΉ+J 1 G O Cd fi-P ..

-p p a x; a: i xxi ogcdcpcdoo rHtncocDG v CD rH l-PG-H IPIG I lg|-P HH-PrP-PG I a G G O cq en <D -P cans rP ö ö I G -P III OrP r-

G TO P HAI I D rPAi ->ir^a>ö<D-POÖ-P|>irH I

G -P r-ι oG --Μp en p i cop g o'c- ίο ω i K

e g i a i G i cn i a: ihhgci μλ ^ h ^ κ

•PO O -p O -P rH -P« GO -Pin I IH -P I OHO G I

-PO (Da: PPen>i ηο-ΡΛ hm-hm1 >1 hhh i O -p tn G -P -r >,ao tn >,a WP >iO tn «en >iinp GP in G - (D-P en >iOPAI «OG >i*P A! rH« >ιΑί >i -P G -P -P O -P ^ tn G -PG-PtnOO -PPPAi -P P O I O -P O >1 ma: -p +j cn +J o

P a G :« o-p firQ (DOtG I 0>iPGJ2 CD P G O I P-P G-P

Ή X3:G gIGP gOGoot g >/0 -PPgOOPcdOG -PG O

H G >1-P-Pa-PG -P CO G t'- -P C >itn G -P >iXI Or- a: G CD G

G G -p -p h r- en x p-p ia pox:oa: Px:p gp op g p v a:> -PgOaAil OI-PI ΟΛΙΡΙ O I G G I p >1 G CD a •pp en OIOcaOöcn-Ρ O PoQGca O cd a: IH DD -P a

GO (Da ap-pt- ar- a:c aGacr^aa-Pac >iG (DG

λα: EHW«cnaa «a oo«AJaGa«atnaoacxi 0Q> K

71748 36

K

G _

O

O I rj G CO .

K KKK CO

$ , X X X X X

α , X X X X X +l >1 G o rH σ> ro r-- οοοσννο <uO o cn cnoohho

G -Γ-» O ^ * V V ^ k s ^ *. s s ^ V K Q

Q G Ή rH O rH rH »H O pH »H rH 00 iH H rl (N rl H £>

»G G *H

SS 5 ^ +l +i +i +i +i +i +i +i +i +i +i +i +i +i +i +i +i m 44 3 CU -h E com m ro oo rH ® o\ h h oo oo > o ® o oo σ\ x w G C >i » «·«** ». ». * ».».«. v v to 3 -P 0 :3 ro cn vo en rH mH^rm i-iom ro m n· m φ

-P -P G ifl to ro ro ro ro ro ro ro ro ro ro cn ro n (N oi h tG

3 G ClI -h

44 O Ui P

•H Λ

rO -H

> G

CG G

CD CU CD

•H -H 4-1

T3 -P G

H 4-4 Ή :t0 Ό Φ :3 P o oooooooo co no o co vovovo oo r-» oo oo oo

H rH rH CIO rH

Φ i-H 0) :t0 4-i Φ -Hg CO CU 4-1 3 -H tO CO Λ! <0 co i—i φ 3

I CO rH Eh rH

> G -H

Φ > O P 3

Ui Φ 3

Ui Uh CU

D Φ —

μ-l iH G -H

D φ 44 <3·ι—ι 4-> E-* ·(—i 3 Φ

-P rH

G -P rH ΓΟ ro p

Φ Φ CO Φ r» W Q

•H-P OCU Oi-nroo OrHroo ooo t-π ro o o o o Ό 3 G \ rH P P fO O rH ro o - •p -P G tr> p rH o 0 CO < 3

P -P v s V

Cl) — CU

-PC CO -H 1 2 3

'H X

-P -P V

uh -P I 5

OO I <n -H

2 to P -H Γ" -H 4-1 3 I CO P 4-> 4->

C _ -H -H -H | I -H 44 I -P 3 rH

O 3 COPi—l-H H H O rl 3 3 O

>-> ·-> 44 O >i G P >i -H G 3 G

3 ^ — O 3 >i O O >iP O P O O

-PC -P -p P 4-> | 3 -P >1 I Φ -H - - -PO H ΦΡ ΦΠ i-H φ >1 ro rH CU v

OOG rHiigi-Hmgci 3 O CU

C G Φ OöölG-P IIOG > P

G -h φ ΡΓ-σίοαφ-Ρ a g g Φ I CU «.

33C0 -P rH | VO -H 3 CTiVOp-H C" | K

CU44 G I -H i-H Ό 3 I P 3 Ό -P P i" K

•H cl O -h CO | | H -H | x | -p | rH

4-IC-P Φ 44 H λ: H >, P P P -3« -p -H | co 3 to -P^>i0cn-co >i cn co «. 3 G -h «.

o > O CO >1·Η Λ H >i ,14 44 rH 3 O rH m

C0PT3 P G -P rH O I O 4->OOIrHC0 O O

P O O Ό:3Φ>ιΡ343 Φ P ä 3 >i 3 CO *

rH 44 3 .G :3 g >ιΌ 4-> P g T3 O -P CO -P 3 O

rH G g rH 4-* -P G >i CO 3 -P >i p CO 44 Φ -P

3 Φ CO -P-PPOX3044 U G Φ O O g Φ v

44 Φ O -P g O 43 I P I O I I P 43 3 Λ CU

•H-PTS to 0 M m3 cq O ca a 3 P -P O

333 Φ *P i—I 3 P G C P P G 3 Φ rH -

1¾ 44 44 Eh W !4 44 H 3 H Ui P P 3 44 CQ X, X

71748 37 (#> G βω cm c\i vo γγ η σι ® o O -H-H vvwvvvvvpi^ 0 3 g fONm

Cl pi il <M ro VO 00 CO

-H ω β — — — 3 -H £ Q) +1

Dj :3 3 > O

> > 0) >

G >1 M X X K P

Q -n O K X K 3 ,Γ( y 0> G β VO σι H ΓΌ 00 rH CM VO 1/1 (1 O (M rH (M VO 44 44 3 d) Π (N ΓΟ (N ΓΟ (N (M <i (N (M CM ΓΟ (N !N (M (N m ω 3 0) +1 +I+I+I+I +I + M-I+I +I+I-H -H+1+1+1+1 0) tn g +j in rH vo o H ro ro ^ η-· en oo to σι n ^ t4 3 3 3 tn σι o vo o cm n m o o* r'- oo r- ^ n co ^ -P 4) g ^ in in in tn m m ^’'»ro >t m h

D -P

44 3 •H Q) | /0 4/1 ·Η —.

> -H -H oip

3 X) -- CO 00 r» ID (M M1 OI Μ· oorooo ΙΟ ΓΜ l·· (N fN

β ·Η V V K V ».VW*. WWW V V v V v

^ 0) β 44 O (M CO O ID H ID N <t H (N 00 Γ- VO CM 00 O

3 -h d) β-H cm cm m· tn en m* vo vo m jf <» <» in d Ο Ό Ή H +j 44 -H +) 4-1 0 4-1 3 P 0) KK KKK κκκκκκ

ntUr-l — KK K K K K KKK K K K K K

~ -P r<, en K K K K K K K K KKK K K K K K

g rH r-CNOLO (N H (S 00 (N^fiN 00 CO H ΓΟ

ίϋ *H £L< "w' ·» V ^ S S *» * «. *t SK». s V S S

1 w π3 I lo in vp m m vomrocN in co cn ro > en rH tn m o +1 +1+1+1+1 +1+1 + 1 + 1 +1 + 1 + 1 +1 + 1 + 1 + 1+1 G h o > G ή oo o m oo h σίΜη m cm o οπσιίησι O Φ *H Ή Ή V V V V V V V V V WWW w w «. w οι*; P > 33/00 h r- in cm σι oo oo 10 r-t cm en r-' m m ¢4 0) 3 44t40joo id in n in ·*τ cm cm m «a· *}· <· ό· n <n m D mh 3 ω 1-4 0) Dj -Hl ►3 P 1(0 -H r-v < G > -H t#>

En 3 tn > 43 o 00 vo in in o »+ m iDin n vo «a· t"· o rH

*n *n *H v » s» v. s s s s s, k s. ^ ^ ^ 3 440 in vo en en pöh H ro ooho en en o en oo ·

G -P e -H H H (N H (M ro n CM CM CM (MCMOOrOPO rH

CU +> H -P O

•HO o

Ό -P

•H 3 O

0+J en K KKK KKK v.

ft “ e K KKK K K K K K K K w Φ ^ KKK K K K K KKK K K K K K Dj -P I σι vo m· (M rH r*o 00 n σι (M o en o m o cm ωβ :3 0 Ή ro cm ro cm (M n h h .h *3· cm cm m· ni h h -

1 -H 44 G +1 -H-H-H+l +I + I-H + I + 1+1+1 +1-H-H-H-H K

4J-H P -h m en r- cm o rr m o o in cm σι rHCM^om κ tp-P m Λ n oi ro cm r in h ίο in γ^γΗγΗ oovdcmcm k O-P SCcm M1 m· m· n M1 M1 ro ro en ^ «a· m1 m· (O n io ω o

P

I I I -H rH

tn 3 i -d i >i β 4J o

rvn 44 P > > O -P

3 „ r— O I O ί>ι G ·Η (0 I O

-PC -H -P I I 3 34J 03 li tn V

440 i—I Q)ö*H44| i—Id) 43 I Ή i—1 tn o G rH i σι ω ω oo w g pm· >, m Dj g g di o ö i ϋ on i i m ^tn >

C-Hd) P (H -H O Ρ rH 8 ö 44 H 44 I

3 3 ω -P rH en p Ό ι ον vo -h I o r- I K

Ojr* G I44T3G-H-H ι .h ω 3 43 Ή n- K

"1 Λ 3 0-H0>iCÖC-P-H|4444P I rH

44 G -P d) 44 rH -H 44 I O-P iH-HOtnm -H | -H

ω (0 ω -P "— >ιΗ Ι-ΗΙΠ3 >ι ω Dj 0 44 G -h 44 <n > o ω >i>joqh(o «j >i44opi o h p m tnPO -Ηβ 4J>irH>,i>H -POPoaca m 0« o •noo Τ3:(β 1ΙβΗ>ιβ>ι dlCftfir· (0 ω 3 ·“ -K 3 xJ:(t) g o i n tn tn g *σ i 3 -h +j 3 g o -h g e >44 -h λ -a tn -h 44 -h >1 a -h i tn -h -p o v

3 O tn -H-H PPPgOO P 44 ω -H 644 d) -H

440)0 +> g 0 (3 0 I I 43 0 1 H44 G 3 +> .Ω Dj Dj -H44P0 ω 0 44 3 cQ ίγ P 0 tn I O 0 +> 3 00 3 3 3 d) *H rH -Hr—t VO ^ 3 i—IrH-H-HI 0)3 >—IP -

Dj 44 44 Eh W « td P H H M «ΗΗΗΠ CQP W Dj K

71 748 38 i I -Η :3

M O — X M

O G · tn :3 G ai -H jy φ :cö O C (d O' M <i H m iT H H H Ί* · ai g 0 0) ag (N CN CO CO CN t (N Π (N CO 3 c φ -h +1 + 1 + 1 + 1 -h + i + i + i c ai •h -PC un ri σ' co σΐΓ"ί m -H o 3 3 G 3 3 O Ν' H N* CO un to n· co aa rl ä 11 ^ > un m in in n· n· in ^ O Φ φ > λ; g c tn p 0) io ai tn o 3 -p

> 3 O n -h en G

P+JT3-P Hinoio r^cNjrMVD ai -h o tn 3 -h - - - -- -------. tn cj' irc aioai-H cn to *ι· σι r> tn ο o φ co -h G Ό ι»Λ rl cn cn co Htsm^ jy rl φ (1) O P Ή # '—Il Φ 3 :3 aa K K* ΓΗ Φ P g > C3 KK K K uno G en >- H KKK K K K K rH ai aio-m v tor-toic to σι r- to —-

m3 - - - - - - - - - 4J

'3G to un co un ro cn un tj> co fltji G ai > +1 + 1+1 + 1-H + I+1+1 + 1 > b

Otn-H cn ι-h ^ r—t co i*uo in tn -h O -H 3 tT* ' - - - - ^ ^ o no G :3 g t"- ot at rl o indHUi G' •H> to un un n< un un ro -ho 3 >1 3

Oc -rn a +

K

G G -H — X 3 rH

Xl O 3 h o n πσιοοσι m cn m σι ai' I aa 3 e — ' - - - - -Po > Φ g G O rH rH O O O rl rH CN O O 00 ai 3 o G cn -H +I+I+I + I +I+I+I+I -m O -P aa -H >1 o en oo -¾1 o· t·" to un <0 -h

ϋ ei a d m :u ' - - - - '*** ^ rH

ϋ 3 3 X aw m co un co r- flinmo 30

ID P Φ CN CN CN CN CN (N CN CN CN -H

P 3 aa PO

D ai -h 1 pc

C -H 3 G I O -H

Eh 3 -H 3 H 3 > G :3 ai ia d> —13 o 00 oo 00 r' 00 00 00 >i

G -H φ rH :3 rH (1) G

Φ P I P · 1—I -H

-H P φ G =3 rl 5 P

ΌΦ0Φ:3 o 3 Φ H rH x p g O Q rl 0 1—I ' I rl H φ O φ Φ

Φ a 3 CU

P 3 -H a en 3 tn rl p G rl 1 rl P ' 3 rl P -h tn \ φ 1 rimoo ri m o o K p-h p > O On rH rl m rl m X a > O G G 3 rH K CO 3 tn 3 G \φ 3 a < — a 3 a

G III -H ' -H

φ e *h >i o 1 P h tn ·

•m φ P >1 I -H ai I P O -H

G -rn ^ O C 'Ό V -H o 'O 3 » rl Cn PG -H 3 0 G I P P I G I 3 O 0 PP rl rl aa 3 rl P Φ a 3 rl rl 3 rl Φ P rl P P -H rl 3 I WHH ^ a 0<r-~ G Φ o 1 3 ri -3 a 1 h »tn tn p G p p a ai >ion a -h >,<0 ai '3

33 P σι r» >i | >, rl w >, | o K PO

p g icnpctn laipcaa κ -h e •h tn o -h ai φ φ ai -Η0ΦΦΡ o -h p-Η Φ ai H φ g -H O H -H g -H 3 ai3 tn p '— >1 a 1 ό aa >ih 1 td a: ' a φ G tn >1 o aa 1 p >h >1 a 1 1 m e

en -H -h G P p CO N* 3 P >1 tO i» CQ O -H G

•H -H Ό:3 Φ QiH *ai Φ G rl - Γ" ' -H Φ · HP aa:3 g o 1 h 1 g o 1 h ri o p e —

rl P >1 P H MH I CQ H Λ -H 1 1 P -H O

3 0 -H -H p -H tn 3 C'' P P p 3 -H Φ :3 m aip pg oiaiPH 030pg app •h en o a ο m I o ai 3 en o >1 :3 h 3 3 Φ -H rl f -H o Ή I—I -H rl O ·Η ' !3 t3 rl

en -ml E-IW «rirlPG K tnp P3 K «gO

71 748 39

Taulukoissa III, IV ja V-a sekä V-b olevat koetulokset osoittavat selvästi, että keksinnön mukaisilla edustettuna olevilla yhdisteillä oli merkittävä tulehduksenvastainen vaikutus alhaisemmilla annoksilla kuin ennestään tunnetuilla steroideilla, hydrokortisoni-17-butyraatilla ja betametasoni-17-valeraatilla. Kaikki ennestään tunnetut steroidit alensivat toisaalta dramaattisesti kateenkorvan painoa ja osoittivat siten hyvin voimakasta systeemistä aktiviteettia, kun sen sijaan keksinnön mukaiset yhdisteet joko eivät selvästi alentaneet kateenkorvan painoa tai tekivät sitä ainoastaan erittäin vähän. Keksinnön yhdisteillä on siten paljon korkeampi terapeuttinen indeksi, so. paikallisen tulehduksenvastaisen vaikutuksen erottuminen systeemisestä vaikutuksesta, kuin ennestään tunnetuilla steroidisilla tulehduksenvastaisilla aineilla.

Yllä olevassa taulukossa V-b olevat koetulokset osoittavat, että keksinnön mukaisilla edustettuina olleilla yhdisteillä oli merkittävä paikallinen tulehduksenvastainen vaikutus.

Taulukoiden IV ja V-b tuloksesta laskettiin edustettuna olleiden keksinnön mukaisten yhdisteiden ED40~, ED^q- ja EDgQ-arvot sekä suhteelliset vaikutukset ja ne on esitetty alla olevassa taulukossa VI. Yhdelle keksinnön mukaisista yhdisteistä, nimittäin kloorimetyyli-ll-hydroksi-17-isopro-poksikarbonyylioksiandrost-4-eeni-3-oni-17-karboksylaatiile on annettu aktiiviteettiarvot 1 kullakin ED-tasolla ja muiden yhdisteiden aktiviteetit on ilmaistu suhteessa siihen. ED4of ED50' ED60 ovat annoksia, jotka tarvitaan jyväiskudoksen painon alentamiseksi 40 %, 50 % ja vast.

60 %.

71 748 40 I cn Ή 3

Φ P

Φ G 3 co co Tj« P Φ A! r—I ' 00 oo 3 -G G -H 04 04 ,-( cn 3 -η ίο cn co -η > φ ^ _ CD -- vo oo AC .—.co _ oo vo Ο -P 04 O- * - AC 4-> O 04 00 [--

Oi 4-) I-I VO I LO I

0 eo φ ο t rH i tt in v ld T3 Osh ON 00 0 00 «· VO v 04 3 VOOVr-4 VO CN 00 04 -oo -

AC D 3 Φ in H H rH

cn w να — — — — H -—’ :3 > I cn V rH 3 •i—i c; 4-) 1 CD G 3 ON O T* •P P Φ AC rH ' 00 P 43 G *P CO ^ H 4-· 3 -P 3 > <L) CO rH > i—I ___ ___

Ο Η ON rH

W Φ — --- r- in co AC CD *H CO ON] ^ ^ D 3 P 04 o rH 04

PI rH 4-) VO 04 O' I O' I

D H IN dl O I ON IO VOON 00

‘P Οχ rHVOOrH O ' VO' O

EH > intri rH N< VO rH VO rH ' O '

3 Q 3 Φ co O O

3 W Nft — — — a - -p I cn •H rH 3 4-) 0) 4-) in CO oo Φ Φ G 3 ' m 04 φ P φ X rH VO VO 04

P Ä C -H rH

•H 3 Ή 3 1,0 > CO rH > 00 p in oo -P — t" '

AC -- 'T ' O

3 *h on m o I

4-· oo oo θ' I in -P -P n- I o- I rr oo 04 o Φ rH <1)000^ in·· 04' o cn CN.H co m rH ο ' o

•H NON rH 04 O O

rH Q 3 Φ -- — I — — rH W VCD I <3

O'- -P AC VO I I I -H

CD I I 4-) 0 Ή 43 0 Ή -P

P Il -H | | COP p | | | p 3 I rH | p

-G o-Η d OH I n Φ Ö-PN1 3 rHÖ>iloonJ

3 ι p in ο -p I )4 cn-Ηπι ionM'a; p v >i g i 3

3 CCL QAC I -P CO. CDAC d rH ÖlACrHI I rH d 3 HH

H 0 0 m P HOOO)>1 ΓΉ0 I m 8 1 OHO, d r-π cn-H i3 rHcn-Hcucn p w ρ 3 r— on p 43 p φ in dl I -Hr-H P 3 | -rl p -r| 4< | TJ P P | W P >1 φ Λί "P -H I >, d rH -rH I >-fC o -H o >i cn I -H AC 3 >i P 0 T3 0) H BtHll) >i P 3 >ι I Λ P P ,C 0 P rH 0 Al 4) fl Λ •h 4-> is-i" d a) cn g n< p >rH i p g >i P -h φ i p 0 cn >HO I AC >irH 0 '3 >1 >ica.O 0-H >i3 cn E-r n)

P -H P I 42 Ν' Ο P I -QrH AC P >iP d I P P >ιΑί I 'AC

CD Ό CD ·Η p I 43 1)H p I I φ d rH 3 oo 4-) Φ ,G 0 cn P I

P xl gtn«U)p g(03P<ngoi'HI3 E I avo I ai cn >1 P A! AC cn3 -HACACcnc- -hx-hh-h 3 h m o h m r' 1 -p po-poa: ρο-POrH ppp>,dH ρ p p 1 .p p p POPcnpi opcnpi 030>i«i>, oh an n 1 p cn o T3AC t3 co. ο T3 AC T3 p o AC 3 Ρ Φ cn OI o in oh 0 0) rH >,0 cc- H>iOdd H-HH J)H4C H H ID A! P d cn Eh ^ -G Oi 3 P AC 42 04 3 0 X WP £Ό0 « P ·Ρ Ο Ό 0 71 748 41 4-) Φ i tn p rH 3 t"- 0 Φ P '13

Φ C 3 Γ' O r-tfO

4J Φ X co Γ' ·η -3 C -H cm 3 3 3 Ή (0 0) 3 WH > 3 ω "3 00 CM r— övo 3 ^ co m > •η η ·· m m3 Ρ .-η σι σ ro οο σ> ρ 3 Ρ Ο co ^ >Η mo

Mood)' I - I mrMrH II

tn o \ -h oo r·' (N r- ι—ι ι λ d) m tT"H rH "a· co o

φ Ω 3 3 ' ** rH CM

X W Mi m ι—ι i ^

X

tn Ο ι in 33 rH 3 3 3 3 Φ P 3 tn tn X Φ 3 3 ι—ι co cnmtn cnmiD^r' oo ι I tnoo •H X 3 -H CO o 3 3

:3 3 -H 3 3 -Η -H

— > WP > r- -H33 3 >i 00 in ft ft O to m oo Oj X I — oo 3 3 P -H -H - 3 Φ Φ 3 4-> 4-) -¾1 cm φ tn tn το 4-) 4-) m ι ο ι w λ: λ: Φ cm Φ m cm t" I co X 0 0 ή o \ h ' oo «· m /\ 0 3i 33 h rH m ctkh m ' r-t ' 33 3 3 > 0) Q 3 ft) CM Ο 3 Λί At ti w Mi — — λ: tn tn 0 3^ tn -h -h X r-t -H :3 :3 X --H I tn :3 > > D -H rH 3 > >1 >1 i_4 > φ p >1 -ro -ro D 3 Φ 3 3 co σ το < 3 P Φ Ai co (N I I -33

Eh !i jC 3 -Η -H m Soo

3 Ή 3 -rH ·Η -H

P CO ι—I > P P P

•Η ·Η ·Η -H

P -H -H -H

O) 00 r-4 Λ Λ X

Φ 00 O -H -H -H

P -H - - XX XX XX

•H P d) rH 3 3 3

^ P ι-H I 00 I ·Η -H -H

h ι—ι φ co Γ' m o ι I

p O m f—I »O - CM 3 3 3 X tjl rH CM - o φ φ Φ 3 Q 3 3 ι-H o tntntn W \p, —- — ......

P ^ JP dP dP

Φ tn o o o •H II rr m m

-H | φ | -H

Ή ΙΟΟ,φ -H ι—I | | 333 Φ Atm-r-ll p >i ·Η | | >i | 333

3 O rl Ό >i O >i rH Φ >i P O P P P

P Pillin 3P >iHM0 3 -h P P P

x φο-η^λ: γηφ>ι·ηλ: xx ϋ 333 3 I O tn * Ο P g S 33 O I O ΦΦΦ tn s I At p λ 110 1 jQ r- ρ .3 ,£ Λ f" -H o I M ö ö Λ Sh -h Oi -h -h -h 3 <-ninp33 ΟΙΌ P -3 I I 333 φ ι a: 33 p a; i h uh 4«; -h r~ H Ρ O >1 tfl I H I At I I 3 H 333 33 (I) H H J3 o CU H H H 3 CQ O I A! ϋ Λ

•h P ή ι p Is >, tn tn P t" tn -h OOO

0 tn >1>1(Ϊ13Η >iA! A! M rH -H rH το το to p -HP >i rH SI P O 0 O I p o φ τ3 φ 3 rH 3 -h φρΟιΡ-ρ P tn in tn m p ,0 g O I -H β 63 03 3 O 3 000 tn >ι ·Η n H H O ·Η -H >1 P 3 O ·Η X ·Η P -H 3 3 3 1 -H p p p >, | ρ P £ li 3 | P OP Φ P 333 P P O 3 O >i00 p 0II-HC0P PP ΛΡ 333 P tn O Λί 3 P I 3 o cd δ tn I 3 333 03 O Φ rH -H ι—| φ *H 3 H H C- AI rl 3 >i3 rH3

W Eh A5 tn P g 3 P IiIHH o SH KP &c;3 i—I CM CO

71 748 42

Kateenkorvainhibiitiotesti

Useita lisätutkimuksia suoritettiin keksinnön mukaisten valittujen yhdisteiden vaikutuksien määrittämiseksi kateen-korvan painoon rotissa, kun lääkkeitä annettiin systeemises-ti. Kussakin näistä tutkimuksista käytettiin urospuolisia Spraque-Dawley-rottia. (Mitä tulee kussakin tutkimuksessa käytettyjen rottien keskimääräiseen painoon, katso alla olevia taulukoita). Testoyhdisteet suspendoitiin 0,5 %:n CMC (karboksimetyyliselluloosaa) ja ruiskutettiin ihon alle kerran päivässä kolmen päivän ajan. Viidentenä päivänä (48 tuntia viimeisen käsittelyn jälkeen) eläimet tapettiin ja kateenkorvan painot merkittiin muistiin. Ruumiinpainon lisäyksiä mitattiin 24 tuntia viimeisen käsittelyn jälkeen. Testotulokset on annettu taulukoissa VII, VIII ja IX alla. Alla olevassa taulukossa X on esitetty kyseessä olevien keksinnön mukaisten yhdisteiden ja referenssisteroidien TED4q- ja TED50-arvot (tymolyyttiset tehokkaat annokset tai annokset, jotka tarvitaan aikaansaamaan 40- ja 50-%:nen inhibiitio kateenkorvan painossa.) ja suhteellinen vaikutus. Taulukossa X on kunkin referenssisteroidi-betametasoni-17-valeraatin TED^q- ja TED^-arvo merkitty l:llä.ja muiden yhdisteiden aktiviteetit on ilmaistu suhteessa tähän. On ilmeistä, että mitä korkeampi kateenkorvan aktiviteetin estyminen on määrätyllä annoksella, sitä myrkyllisempi on yhdiste.

43 7174 8

O (O

•P -P

G -P Φ

Φ -H -H

•P -P CO O (N h O 00 OO f—( LO O O rtf OO CN H 'i in rH

P ,Q (JP r ^ V W «. ^ "V * % * ^ ^ ^ h. ^ 0 P -P ^ in 00 co o Ofomm o> m co no ,-h -tf no en h n- q 0 .G Hima cn en n1 10 rH h n n wd oo (N nun 1^ d >-1 C en Λ H 0 in ρ G g +> (0 G > —ro -v p x»: x x x x χχχχχχχ··ρ •h O XXX XXXX K XXXXXXX«cn λ a — x x x x x x x x»: χχχχχχχ··ρ > G On Ή 00 rr γη Γ' ίο rn rr σ\ o o rH m i"- no ιοη»» w ο

J) £ (Μ Η Η ΓΗ Η Η ΓΗ ΓΗ ι—I (Ν ΓΗ ΓΗ ,—I ml rH ITI LT) Η Η Η O' C

C Φ — +1 +Ι + Ι + Ι + Ι +Ι+Ι+Ι+Ι +Ι+Ι+Ι+Ι +Ι+Ι+Ι+Ι + Ι + Ι + Ι+Ι+Ι-Ρ Ο) -Ρ ιΗ on no ι—ι un r·· cn ι ιΗ οο cm tn mi η η ίο in cn ho o on ro •H ro r-~ rn oo m oo r·' rH in no γη h o σι n· γη ό φ no r- o .—1 O d Ό A *tf h· γηηη ro co mi rH «tf *tf -tf <n n1 o h rn γη γη h > H PC· 0 <Ö ·· ro P I -P Dn -h

Φ C Ai 4J

•P O XXX XXXX XXX XXX ΧΧχΦοο-Ρ M G ~ XXXX XXXX XXXX XXX XXX W ho o •P -P tn XXXX XXXX XXXX XXX ΧΧΧΧ^,ΗΡ in ro ^ r·' ho > h 00 <+1 rr no o tt co γ~ 00 00 m rH σι οηη Γν-" ι 1 CO dl *- r r v v V ^ ^ ^ ν v *·.*«.·. r.

C tn O O O CN rH O O H rl rl H H O O O O rH O O rH rH rtf φ

Φ e >i +1 +1 +1 + 1 +1 +I+I + I+I +I + I+I+I +I + I + I+I +1 + 1 +1 +1 rH rH

Sh o ® rn i^-cnoooo onton h t' o ro n o infoon 5

Φ +J tn " v r < s ^ ^ v k s « k r r ^ v ·> «. V ». s ChO

MH Φ-Η00 + O HO (N On nO "tf O Γ0 CN On >tf Γ^γ-ΗΓ^ΙΠ m ΓΗ n σ -HQ

Φ I—I <—I 1—I 1—I 1—I 1—1 1—I 1—l|rHi—I ι—I -rH I

H P 4-> Φ H 4-S 3 > to :t0 Φ Cn

•n P -P rO

O I ho >1 Sh A C G :nJ :rc d « φ -H P « ΙΛ !D -P rro 3 +5¾ ή a on on ο ο ο σησηοο oonoo oooo oooo

►G ‘p Φ G ι—I rH rH rH rH rH rH rH rH rH rH rH rH rH rH rH

41 0 H H

EH p +)

Φ tn C rH

+» φ Φ 0 in EH -p o

1 G

+J 0 O

+4 0 —

O G ;r0 V

tn -H > d ro -rt — d :Φ ΓΟ rH ro -

• d - - - X

UG \ COOOO ΓΟΟΟΟ rHfOOO OrHCOO ΟΟΗΠ K

• to tn On rH CO O rH CO O rH CO rH M

W > 0 A rH rH

P C \ 0 G Cn

G A < B rH

Φ G ~ 11 0

•Π Φ P I A

G Φ — I Ό Ό I O I 0 +J +> -P I I H >1 G -H +>111 Φ w -P G rH 0 -P G G (0 β Φ 8 -P Π! I rH v ΦΑ rH IP ill O P I -P0-P |onin+>co. I rO d G 0cndrX|+>cn'ini+> « I ϋ Mr· >

G(0 PrHOOfO+SrHdAifO+ir'-POOrH rH I

id-m +>rHin-P|(OrHooitOrHtnpp| I X

q 1 -p rH -p ro 1 p -P e ro 1 x Ό Ό -P -P -ρ ·ρ x

•pc 0 P| in G Η -P d rH ΦγΗ-POSoGG+J e I

+>o φ a h g >ιφ>ι h o ^iP i>i 1—ι *p c (0 0+ 0 -p tn 0 +> —· tpr-" G Φ in >1 cn >ifl cn tprH 1 -p 1 ro en G * Φ G in tp rH 0 I A >ι·Ρ e I A tP >1 <n rH ^ G ·Ρ·Ρ 0 m ιη·Ρ -PC -Ρ l +3 -<r 0 +>10-^0 +s >iP tn 1 h +>+> tn o •PrO ΌιΐΟ Φ-ΡΡΙΛ Φ0Λ-Λ Φ G rH tp G tP p+J ro §d +::(0 ginro+lp gr^PrHP gOI-ΡΦΐη O G -p o >+> -P A A CO (0 -PH (0 I (0 -Ρ+3-ΡΦ-ΡΑ A(0 Φ-Ρ

Φ G ·ρ·ρ Ρ0-Ρ0Α PlArOA PPPgTOO OP g-P V

+* o +> g opcnpi o-p-p+>i o g o ι ι +3 p :p ra+> a in £! in OOAOcq. o en in cn ca o A G p "3· p tJ-P -pro tp Φ φ-P H>1 O en rHAAOr- rH-PrHVD*ro toG Φ <0

MA EhW «XdrOrH A OOP rH (4 tn + HH A CC +3 ffl P X

44 71 748 (#> c — cu •H o -P Ή 4-> -P rH in Γ' KO ΚΩ Ν' in Ο σιο Ο Ή - " *· «. - -«.«.·» G -G ΓΟ Γ" CN r—1 CT, (N Οι >t CN30 43 in m m ^ m γόο

0) -H

G 43 ~

-P G

g h ω λ;

•h X X X X X XX CO

<0 X x χ χ χ κχ >1 X X X x X XX +1 G rH γΗ κω o m οο m ν G O G CN m n CN (N CN (Ν η Ν o>m Ο <ϋ <u > +ι +1 +1 41 +1 +1 + i + i + i-f+'> •G 4-) c &> o m n· o id r-~ γ^οογο σ\Γ0 Μ TD G o S on m m κω κω γ» m σι νο -^ό g •G ;* 4* --- in m CN CM CN CN U1 <ί η η Ή

Ο -X

G 0) Ο) χΧ Q) 44 — χ χ χ χ χ χχ « wen χ χ χ χ χχ χχ — •Η'— X χ χ χ iDrHm mm 05 I ΙΟ σ> CT, Q0 Γ-

0) G 0) - » *· ·. *. » Οι—I ί—I ι—1<—I

1 IGCO^Oi ) ι—( ι—I ι—ι ,—ι +1 +1 +1 -Η Ή η οι ο CW +ι +ι +1 +1 +1 +1 cm m m m h χ; -h οι ο\ n r— m rr r- » ^ ^ *

3> CU CU G ’G ^ " *. ·» ·. CO lii (N O

0-1 fci ClirH CO ’T «N m (N CN -Hi—ti—II*—I

O O i—l ι—l I

S* G

*

D G

P3 -m :iQ

3 G G

< G <15 :<0 <0

E-i 05 I -P cco -H

•h -g e g o e— r~ r~- t~- r— oo oo oo oc· oo 03

Ό -P H 3 H -H

H 03 C(0 4* O

0 <13 ι—I G G

G gi CU Ή -H

CU m G

-P o m m CU

w ι \ o o O rH m 1 G en-.

4-> O 0) 4* CG O O O O O O O O O G> G

Ή O 0\> H -H -I rH -I ··· O G e tn -h en co 0) -h e g cco -H -h

co <C ^ a 4J σ> 4J

— a 4J 0 4-3 • I | (0 CN o

0 G O I I -H O I I -h I G I G

•CO 43 G -a· 4-> I I II ι 43 G τ 4-> I O I P cni 03 > G T3 * 4-> CQ G | oa^co. GO-+>aiGG>i-H vo >, G G >11—1 G P G TD P G Γ- G>|PGPa4->0)4-» -H O) o 4*: -G ι g —ι e ι hjc h xg i m h ι μλ u '-'p G -X -H | G rH I H HCI1 | -H I | -G | G P I Ö O O G £

<UG ω <a p >1 -h ra -h n· -h m -h -h -hi^gg n 1-1 G G

•m CU 4*1-1030) G4CHH G JCH G XH 01 01 G H G G G O · Q

G CU — O rH o -X O O >1 I O O >1 O O P O 4* OIGGO - Cni

-P -P ·Η 4-* I G O Ga>i-H G a >1 I U l U O 3 -G G -X -G o CU

-PG rH OJHGG m O 4-1 G rHO-Pm J) H G Λ p p p | a \, m G

CU -X rH I G G G C4HGCU0 P G CU I | G G G G >,0)01 o OOCJ1

G O Ö O G G I a g I I a g G Ö O G G I >,4* r- G a rH CO

CG cr-G-HiX β o l en 3 o I 0) r- 3 -G 4* au OH a G

G -m 4-3 ι—I ι—I rH | σι 0) 3 | en tn Oil-Η ,—| ,—I I—| I 01 ® H I I - ca

e I ΊΗ >,00. | -H ID G -H I H CO G Ή | l»_| >, CO I g rH -H Γ- X Ή CO

•PG O -H | >,n *G I —H CU 4-1 -G | —I | 4-> H | >,> -G I >, G ι—I X P O

4->0 Φ 4* H aun rH 0 | P 4-1 H 8 | if U —( Ö 4J P G Ö >, O I O G G

oio 4-J >icr> <u ι >,n hg G >,r-~ p >. g >,cncui >,ui e l -g -o -g •CUC 03 >» I g -G >,H 01 I n >,H 01H n >llg-G >,H O O H in~G03

01 -G -G e 4-» -G 1C U I ϋ >i H 4-> | 4* I P 4J -G | G 4-> I 43 I O OO-G-G

•G G Ό :G CU 0) Q O (D -G O * > <U P O G >, CU 0) co o CU P G G 0) * .P P

ga 43 CG g X ID | g 03 P ι—I 0) g 0) P 4-3 01 g ID | g 0) G CU G O v4-> O

CU >,4-3 -G O -H m -G 4* -G | 4* -G 4* Ή 03 4* P O P m P 4* 4* P 4-> V ^44 3 (UG -G -G G P I I G O >i G 0 G O >i O 0 M-H II GO-g TD 0) <ua 4J0 43 g O P P G O G >, 4-> 43 O G >, G jQ O 1—I *G C O G 03 | 43 a-4403 W43 03 O >i 03 0) OT3C03G Ofl Gfl G 0>i030) O T) X O X>,0

>, CU CU -G rH >,4* -G rH >, O O G rH>,0CG rH >, 4* *G G >, O ‘ H >-X:GG

C04* EhW«COTD W4343G4* W4343G4* i<C0T3 X jC aG X XXXG

It 71 748 45

OP

in •H O O CO CN ID IN ^ rö g v ^ ^ ^ ^

•Γ-Ι Q) O VO O'"! rH O' CO Ό rH

C nnm h h in c o 0 >

O 0) X X

P X XXX XX

•H | XXX XXX

to C c ο 1—i ιΓ) πιλνγ'

Pj O t0 i—I I—t 00 i—I I—I (N i—I (N I—I

o > — +i +1+1+1+1 +1+1+1+1 c P P O' Ό VO *1« (N 10 Γ^Γ^Γ'ΐΛ O m ο ε (N IN m 00 Ο ΟΟ^ιΠΓΟ X χ χ ^ Tr n> ro cn cn ro ro oo ro Q) X (0

XXX X -H

P — XXX XX P

o O' xxx xxx p

•h ^ ui vuonon uo ro m o O

-P I » p

-P | C M O rH rH O rH H P H H I

O P O >· +1 +I+I+I+I +I+I + 1 + I >1 M opipincoooooo o p n· uo o

£ ·Η [Il ·* ^ ^ < s rH

X W OnJ-HrHOOrOCNO' CO Lfl [^ M £ I—Ip X Pji—I CNrHrHrH 1—li—li—li—I (3

P Q

O P I

« X :d O

X -H G P p p P Q) :rö O1

p > I -P :P P

p -H G g o P

< P Ρ-ΗΟγΗΓ'-Γ'Ι-'Γ- I t~~- Γ^- Γ— Pj fn (D 10 W X Ui H UH 3 Ό £h 0) rH m

•H «H

0 in

P —V -H

Φ tp 1—I

P > o in -H rH p 1 :P o Pj -P Pj o tn P \ ro O O O rH ro O O - o

O O' rH 00 O H M OP

in in x r-π x/ p O \ v

^ C O' Pj P

• B £ -H

O <c - -Ui

• X -H

10 IXO

^ -H X C

Il I Ή ·Ρ C I P >1 I P >1 I *03 O iH [fl -H rH CO γ-HPj

o P P I -P P >1 C I -H O

P ^00«^P0>i0PP - c

PC -H PPglP ΡΡΛΟΡ O

PO rH H u I β nl H J) p ·Η m w O' 00 rH h £ s ui n! m £ m ό m

PC 0 I I Ό rl H I I X I rH Qj CN

P -H P ΟΟΡΌΪηΟΟ-ηττϊη i-H

P P P σι h 1 1 tn o vo in * m - rH

a e 1 H H Tf X I HXHX X I

-H O H I ID ‘ O Ή I O I O X p

PC Φ X H H X H Λ rH-H-Hl0X3 O

into p —- >iinoiP ϊηιπρρρ *.

o > tn >iX h m m shx >1 in p m p inp -h c ^ohpx P o >1 o x o -h

•HO Ό :t0 (U P >1 in 1 O P P P l * -H

S X X :t0 £ p >1 O <n g Ό C Ό aa o P

OP >1 P -H >1 C P i'' h >, u fi r- v P

<D O -H -H P x! 0 Ό rH PXPjtOrH <D

PO P g O I Λ C I Oli -Hl Pj +j inp in o ® P to -h o 01 3 m h >1 P O *H 1—I rH (0 *H C H H I X c * lp

10 X EH M XHXH o XrHrHOO X X

71 748 46 c 3 3 C Ό •H Γ-H ΙΟ

H W H (N H 0Ί rO

H 3 O O O CN ™ Vi

CL> -t-J * - - - * C

<1)30 o o o.—i"-1 <0 •h +) λ; .. ^ ro p» .C -h v x;

P> 3 3 -H

¢) !Λ > ^ tO

3 σi

+J — -—- ^—. LO *H

•H H LD CTi O W

> - - vo ·· Xi

•H Γ" r» (Ό - CN O O

P oo vnrO - oo o m ( co x; o m i n i in o <Ν vn i o vo -h 3 LO -—. r—( ^ VO " ·». | ^ ,—)

QlJiOO -m - H CNr-'-O'S’OO r—I

Cfclgu-iroro^m - - - O

QJEh^ -n· CN ^ H O O Ό C - — A ~ — x: •H 3 P> g pj c

X >1 <U PJ

>1 C 00 >( O H -H m q

XJ O H W H CN O Γ0 X

X g i—l 3 O O O CN 0) d >; o+j « - - - ^ h iJ PJ 1) 3 O O O O <H " ID P> XC 00 :3 <C C X -H >

E-· <D 3 3 -H

•h ui > ^ <n :3 T3 — — o ro a, · •H <J\ CN * VO O \ 3 0 - - O—»ro-Di<fl

P H ro 0V LT) ». ΙΓ> O XI W

<1) Ί* CN CN - O O CO I 0 p> o o I cn im i ro h ro | o o cr> c <fi o· — - eri - cn - m - | «. «.co g -h IQCPr-1 - VO -H «. H I—I O CN O O 3 P>Wgro ro (-h h m vo - - - o ft

P Eh ^ CN H CN H O O O

0 — ^ ^ ,H c tn 3 „ c >

C I I I HP

3 I X I X P I -H 3 0

•m -HO -HOI 3 I W P» X X

3 tn -Hl W -H H Xi 0Q 0 P> C

PJ XH CQ ϋΗ G -H H P 3 M3

P> 0 ίΡΐ''· o >i0 tn H ro 3 o <D

3 p >1 rH P >1 I X I C I C C pj C Ό C I Ό C ro OH 3CQ 0 C3

C >i 0 -H >i 0 I P> P •HP' -H 3 X

3 X X C X X C i) OHH 04

I P 0 I P 3 -H I 3 >ι I I O CC

Cl) co. 3 I oao-HP OH >(H t" p CD (D

H H X ro HXOP >PDG Η | CP CC

i—I H Ή | rH -H | 3 Ή | 3 0 I H- | Ή H

3 I tn C H | tn Ν' fl lÖgl-H-H H Γ~ 3g •H X 3 pJ -H Xi ·» H -Hovirop) c I H H 3

C H o I p) H0H>, Hlöl-p O -H I HC

O >iftN (d >1 Or I tn >ι·Η vo C 3 M C -H 33

X >1 0 I 3 >10 3X >1 M H 3 3 -H -H 0-H H tn H

•H PJ P PJ H P> P P) 0 Ρ) X I *H H pJp) M P> 0 3

3 O4 W >1 3 CP W X 3 0 ·Η Ό >1 PP> 3P> 3 M

C 3 g 0 0 M gOOP g-Htnitn 03 pJ3 3 3 C

3 pJ-HcnPx: -H M P 3 H H X <f X X (6 33 PJ Ό ·· H tnp-HTJO Ρ -H Ό X P >1 0 "O OP gp 3 3 c#>

p) -H 0 I C X 0ICI 0 >1 Ρ H Λ P>1 33 X

Ρ» Ό033Ρ O S 3CQ 0 C Ό I P OIpJ P>H 0 -HO

O X H *h 3 H C" -H r~ H o >1 3 3 >i3 33 H wm « >< PS h M X « H M H PX K X CQ> X 3 71 748 47

Puuvillapellettijyväiskudos-sokkokoe

Suoritettiin lisätesti keksinnön raukaisten edustavien yhdisteiden tymolyyttisen aktiviteetin määrittämiseksi beta-metasoni-17-valeraatin suhteen. Tässä testissä annettiin lääkkeet intravenööttisesti rotille käyttäen puuvillapelletti jyväiskudos-sokkokoetta . Käytettiin urospuolisia Spraque-Dowley-rottia, joista kukin painoi noin 185 g (166-196 g) . Kaksi puuvillapellettia, joista kumpikin painoi 30 mg ja jotka eivät sisältäneet mitään testiyhdistettä, steriloitiin ja sovitettiin kunkin testieläimen selän ihon alle.

Tätä päivää pidettiin istutuksen 0-päivänä. 0,8 %:sen polysorbaattiin 80 suspendoituja testiyhdisteitä annettiin intravenööttisesti kerran päivässä kolmena peräkkäisenä päivänä päivästä 1 lähtien. Viidentenä päivänä eläimet tapettiin ja molemmat pelletit kyseisine jyväiskasvannaisi-neen poistettiin, kuivattiin yön yli 50°C:ssa uunissa ja punnittiin (kuiva granuloomapaino). Kateenkorvan ja kehon loppupaino merkittiin myös muistiin. Tulokset on annettu alla olevassa taulukossa XI.

Edellisissä testeissä määritettiin rotille intravenööttisesti annettujen esillä olevien soft-steroidien edustavien lajien deaktivoituminen. Testisteroidien ja betametasoni- 17-valeraatin aktiviteettisuhde paikallistulehdusta vastaan oli 283:0,7, kuten taulukosta VI nähdään. Tämä tarkoittaa sitä, että testiyhdisteillä oli paikallista tulehdusta vastustava vaikutus, joka on suurin piirtein 400 kertaa korkeampi kuin betametasoni-17-valeraatin vaikutus. Testi-yhdisteet annettiin intravenööttisesti rotille myös testi-yhdisteiden systeemisen tulehduksenvastaisen vaikutuksen testaamiseksi betametasoni-17-valeraatin suhteen. Havaittiin, että testiyhdisteellä oli alhaisempi jyväiskudoksen muodostumista ehkäisevä vaikutus ja myös kateenkorvaa surkastuttava vaikutus kuin betametasoni-17-valeraatilla. Testitulosten perusteella oletetaan, että yhdisteet, jotka eivät helposti metabolisoidu (deaktivoidu) on systeeminen tulehduksenvastainen vaikutus, kuten betametasoni-17-vale-raatilla.

48 c 71748 Φ l C ό σι m <n r'coco·^ I φ P cfc> - *> - * X - - - .

<0 x; g ^ I—i σι o n r> η ^ o W

I—l :oS φ P P in oo cn co ry vo ·

Ή > C CD

> +1

0 I

ο ρ ο x x x x o a o c x x x x x x >

Pi p x x x x x x x P

P C (0 tn r~ mop in cn (0

P HI ft£ (N (V (M M -i rl(NWN P

-p φ ·— + i +i +i +i +i +1+1+1+1 λ; Φ -PC (N m co o P m oo m > cn φ (0(0 <N t'' (Ό Ο Γ- O 00 MID φ -P ^J> >ί n m (s m (m m h x Ή —- > •H o

-p | P H ^ H 00 O' N m ID

Pi P P ' ' ' ' - ' > -

(0 £ -rl *1 O P [-- Γ~ H OMD

G P — (N (N CN Ν' CN (N CN CN

-P Η Λ Φ tn

•H I λ X

-P I (0 tn X XX

-P o > g p σν p vo o OKOmr· >i o *P — * 11 ** s

>1 rl 3 VO ID lil Π M (N <ί (N

r-t C Pi 0 +1 +1 +1 +1 +1 +I+I+I-H

O C c r- p m r- r~ m n· P cn g to c ή **>»* ^ ^ >i p co Φ cn ο σι in m οι ^tid n- -P u g ft id in u η Ν' Ν' Ν' n·

C

Φ ~ XX XX

H-H tn XXXX XXX

X Ό — XXXX XXXX

•H I μ ί n n> M IDH h m OO CM > ---- «»».«.

X P C O >1 Ή P P P CN P P P CN

X Φ O C :(0 -H +1+1 +1 +1 +1+1 +1 + »

p-p XC-HWH P CN m m (N OI O

Pen Φ(0*η * -- — - - - - — P-H X 0<P N* n* n< o oo ^ (N m m

rtj p CN P f~“I P i—I P p r—I

E-> cn i I

<D C I

P P 0

:(0 Pi r-H

CPC o φ φ ρ :nj r- i'- vo vo vo r- m r- r-~ o •n I P v

C Φ C :(0 O

P 0 0 :(0 +> X +> g ^ Φ <0 Q< C « C M \ *.

(0 Φ tn -— X

Φ in Pi :(0 P η χ

P Pi 0 \ > - - X

POCCn-H prooo o o p ro cn Pi C S :(0 pro v

Φ O O. P

ω pi o P Pi — I I -

P O P S I I CO O

P cn p T p (0 r- :0 (d P l-iilllpp v :0 g 0 a (Ιΐϋ I» I Q,

CO Pr-PiOOP I

Φ0 P p Q p p c r- «.

>p c I 3 o'd o p p x

CC o p ^ >1 C I P I X

PC Φ Pi P >|C «MP P

P(0 +1^ >ifi I p I in C v cp en >,Qoo.p-H(0 op m P O' PC +>ijP>iGP en P o

P Ό :(0 Φ rrt P >1 Φ >i (OP

Φ P £ :ιΐ g X I 4J CJ M P(0 O

P p >i P P P P φ P Pi φ (0 v, p Φ pp PcnpgOO g ρ pp +> g ο * ο ι ι λ (ο φ a pp en o Ö e ö n· p pp OO ΦΡΡΡΡνονίΟ φ (0 ^ osaj E-iwxajppppi pq> x 71 748 49

Paikalliselle puuvillapellettigranuloomakokeelle lasketut EDj-Q-arvot (kuten ilmenee esimerkiksi yllä olevasta taulukosta VI) ja kateenkorvainhibiitiotestin perusteella lasketut TED^Q-arvot (kuten ilmenee esimerkiksi yllä olevasta taulukosta X) käytettiin laskettaessa keksinnön mukaisten yhdisteiden suhteellista aktiviteettia ja terapeuttista indeksiä verrattuna ennestään tunnettuihin ste-roideihin. Katso alla olevaa taulukkoa XII, josta selvästi ilmenee esillä olevan keksinnön mukaisten yhdisteiden tehokas tulehduksenvastainen vaikutus ja minimaalinen systeeminen myrkyllisyys.

50 7 1 7 4 8 I § ft υ tn 3 ft 44 O) tn a O. G 44 *1· 00 O O 4-1 G G 0) 0) cn h* o r- ,η ft a :G M G t3 o γμ χ :<0 (!) -H G oo t— -h

4-4 E-1 44 -H ft G

tQ _ >

1) -H

C -r4 4-> G

Gift PO) 0)14444-31 ΓΜ O 0 0)0) <—1(00) 04 i—) h< m i—i -h G 0) 0) \ \ \ \ ft ,η G 0) G ft ft ft i—I H ft 0) ft G 44 0) -H ft 0) 44 p G > \ 0) -P G-H -H en 44

G COft 44 a P

u ~ \ Dl G

P — — O — — — 44 tn 0) 07 04 - rH 0 \

> - -o - — m G (7> C

r-4 Γ0 07 O) m ‘[»go ftp -3· oi 04 ιχ) - o tn --'g ft o o. i oi i in i οι ππ n i m -h

en -o- »on -(n -in -o -i - g 0) -P

44 Q /H - KO — <H- 0 - ft ft O CN O ft (0 · 0) w mm rH <H in 0 -a· 0 - - O ft G ft 73 E-ι m ft 04 rn ftOft0)>tn G ^ — —· G tn 44 ft G X G >i

•H ro G

-P I 44 p 44 O o HO) I 44 -P a> a ft* >

HtnftiOO) ft 44 Q P

X ft (DO) O O) 4J ft w 10

44 0) G 44 ft ft in O ftin 44 rO H

O 44 44 0) ft ft 04 0)>G

►4 G -G G k' ft O (0 44 X 0) G ft ft ft ft ·η -|4 oQjtnft-p o) p 0)

jJG — ft ft C G

DP σκ co (OftOJG

*£ <D — --- in r- . <h p tn G

E-M P on οι - - 04 ft ft 44

(0 04 o ft rn <j\ -h p a G

C O ID 04 r— I ooi oo > g ft O

0) n e I σι I oio mo oio GftG

73 Q ίσο I—I Ο -140 -10 CO m O G(044<!) ft w ft!0 ft 0 ft- 04 - -3· ft ft & > ft ft U) m —' o ft m PrOft ft — · 0) 0 > ft

cn ft 44 P

ft ft G C (0 'O I Q) 0) <D (0 ft I π) ft I I tn o) tn p >1 p P P >i P 44 ft ft in I tnft itnp>ii Ό I I G g ft ft

C Ö0P a O G G l m >iftm P44HG

0) r-ppr-ptoo-Pi ft tn i G a) p P ft 73 G fttlft Λ tn C I 44 G 44 0) 0)1 > I G (0 I C >i P 44 0) CQ 0 0) ft ft ft ft (0 ft (0 ft ft m to (0 Ο -P ft ft ft ft (0 ft P ft PG tn ft in to ft 44 44 P 73 ft ft 73 P >(0Gl cn -h 44tntn 44 en o ft 73 i i>ii P >tnft

G -C 04444 0 44 P cn >irr ft in^r (0 0)(0 G

Oft POO POP 44 ft - ft PC -ft (0 ftPCO

Φ 0) 73 ft ft 73 ft G Olftp OOftP P ft P e W

73 >iftP in ft 44 P co. I P 3 ft I ft 0) (1) ft g ft

G ft ft in G Pi >ι I 0) ft G G ftPiOrO ft tn>ftP

Q)0 I in 44 I tnoa | ft ft G ft G ft G I G ft H ft P

PP oo e I cacr- ö I tn ft I 44 tn ft r- > g G G 0 WO) ft O CQ ft O I—I Γ-·Η0>1 a ft O >1 ft I PPG44 ftp ft ΛI ft Λ I ftpptncj)inpcni r- tn >o

G tn I P ft IP ft I 0 73 44 I 44 73 44 ft ft Gft P

44 ft G I ft G G ft G G O ft O G O C I > U C G

GG ft 44 ft ft 44 O ft ft G ft ft ft G ft O ft C tn ·· in

gft >i ft C >i ft I in ft ft P >i 0) ft P tn G 0)0) OP

p >i tn o in tn m >, ι ft g >igftGftftO entn m c-Η P 44 I P 44 I P B >i44 ft I in 44 ft ft in 44 ft Q -

:0 G 0) O m 0)OG 0) 07 in I 0) a in I PPG 3 G W :G

CP 0) g Oj I g fti 0) g|PcQ gr-pcciOGP 73ft ft CP P ft Oft ft Oft ft ft ¢) Γ- ftftO)r-44G0) P G 0) ft •HO) tn PPG P P 73 P tn gft PlgftOPg 0) C 73 ft tn G ft O CU Φ 00<l 04411 Oft II P >1 G ft O P Ή

44 G 73 ΟΟΦ 0 0-3· O O a -H Otna-H73PP G P G :G

(DG P ft tn I fttn - ft ft id C ft 44 |0 C in G 0) ft ft cn > X ft in ¢4 ft -3" X ft ft X ft ft O « 0 ft O K Ρ « GPU

71 748 51

Vertailukoe A

Suoritettiin vertailukoe, jossa koeyhdisteinä käytettiin: a) keksinnön mukaista yhdistettä kloorimetyyli-17a-etoksi-karbonyylioksi-9a-fluori-116-hydroksi-16a-metyyliandrosta- 1,4-dien-3-oni-176-karboksylaattia (esimerkki 7A-3), jolla on kaava OCHuCl

CO

o

HO II

---0C0Et iTT l CH3 ! ja jota seuraavassa kutsutaan "Näyte 1":ksi; b) US-patenttijulkaisusta 3 856 828 (esimerkki 12) tunnettua yhdistettä kloorimetyyli-17a-etyylikarbonyylioksi-9a- fluori-11β-hydroksi-16 a-metyyliandrosta-1,4-dien-3-oni-17 6-karboksylaattia, jolla on kaava OCH Cl

CO

HO 0C0Et I T''CH3 ja jota seuraavassa kutsutaan "Vertailunäyte 1":ksi.

Terapeuttinen indeksi laskettiin samalla tavoin kuin on esitetty sivulla 53 ja taulukossa XII. Tulokset on esitetty alla olevassa taulukossa XIII.

52 c 71748

G

G

(Ο Ή P P ~ tn p υ

Q) G -G

tn (D tn o i- A Dj A ** »* to G GO) T- T- (0 Ρ Ρ Τ3 (N Dj

G O G G

A H -G P

-G__O

G -P

> G G

O G

:G G

-P -H (0 tn rH tn co p o mg *- tn tn o P T- «. -h :g

H Q) G O G rH

G -P A rH H

G XI -G g -g

G G G G rH

-P CO > —. · O :G

ω o g X > >i — - tn -h g — oo o tn e

Λ - σν -H G O

0 -g oo (n -P tu tn •G tn cn o :G a

-p >1 O l p P G

G >< H> (Niin p p

G rH O O"1 - in G >1 G

g OWE eri in »— *. g :G A

tn G ^ - m vo g λ; -g

O >i in cn G G

hgeh s— ^ o G >

MG OMI

H -G rH G G

X -o ----—. G -G > r* i_> Lj

O G G O O

A τι G P P A

Ai G tr C

G G e I -G G

M G -G -H p Q) G -P M tn p p p

GG MG OO P G G

eh a gp r- - g g a

g G G ro MP

g p a; m -g g > Xl -G G > -ΓΊ

G G Dj -G

G CO > G P C

G G M Ai G

G -ro m G tn G G -G Ai

G P > C G

P G G G P

G —. G G G G

G ^ -G -- — G Dj -G A

> G P σ' cn>p-H

G P ro in G G P G

G G G p G >j > G E M O r— O'- P P >i |

A OOM - - GGmG

G O <n G rr I T-I P A O E

-ÖMQOj O -GEO

il G W \ H- vo GGSoO

G G tn co vo M>PM

m g G - G

P P ^ nJ o G G G G

P O'— — G G G G

G -G -G p G--·· Ό Ό tn

G dP -H -G

G I O O G

•G · G m p P X! MG G M r— r— <Ti G G Xl

M tn P -H PPG

Gin tn GG G licococo

AG I -G P P P

G P GO P —- ·· ·· ·· GO O XI G :G :G ^ — ~

WP K >i >G Z G .D O

71 748 53

Ylläolevasta taulukosta XIII ilmenee, että keksinnön mukainen edustava yhdiste (Näyte 1) osoittaa huomattavaa tuleh-duksenvastaista vaikutusta pienemmällä annoksella kuin US-patenttijulkaisusta 3 856 828 tunnettu yhdiste (Vertailu- näyte 1) ja lisäksi että sen sivuvaikutukset (tymolyysi) ovat minimaaliset ja että sen terapeuttinen indeksi näin ollen on huomattavasti suurempi kuin ennestään tunnetun ver-tailuyhdisteen.

Vertailukoe B

Suoritettiin vertailukoe, jossa koeyhdisteinä käytetiin: a) vertailukokeessa A mainittua, keksinnön mukaista yhdistettä "Näyte 1"; b) EP-patenttihakemusjulkaisuun 0 004 975 sisältyvää yhdistettä, jolla on kaava CH Cl

CO

o ™ 11 HO^ OCOEt _I''' ch3

0jSty~J

ja jota seuraavassa kutsutaan "Vertailunäyte 2":ksi.

Kokeet suoritettiin samalla tavoin kuin on kuvattu sivulla 35 esitetyssä "Granulooman muodostustestissä”. Tulokset on esitetty alla olevissa taulukoissa XIV ja XV.

54 § - 71748 •H <x> vo vo t— t— in rö ' * - *· *. « di o vo vo r~ n G P + + + + + to ω c >

0) M

HO *

-U M O VO (N VO LTl VO

-P G CN CN (N r- CO CN

0) Φ &> +1+1+1 +1 +1 +1 rH o E m cn σ cn r- m h -P σ ·<— Γ" cm o <D tO -i rt m fl· in in

Oi «

tO

rH Ή

rH H

•H O

> -p

3 -P

p -H ·σ· (N ro co σ p | ·Η(#Ρ * — ^. * X3 σι lti vo tN ^ G tn -h cn m vo h r- Φ op:

•n O C

P P M

-p m +> oi o * * * * Φ ·Η G * * * * -P :t0 -H * * * * -k p > to ro o ·*τ σ vo +-> >i ex O"1

01 P) <0 E VO LO (N (N CO tN

•H > +1+1 +1+1 +1+1 •H (N CO r— Tr £3 %.·*«*·* ^ *,

H -H X r— Γ' VO <N O

X -H 00 LO CO tN CM (N

+J

O +J

X! O I

Xi P G

PO*

HOI G — r^r-tOr-r-TT

P P -H CP * ~ ~ ~ ^ (0-P tO ^ r r— r— r— r— v— EH P Cu +1 +1 +1 +1 +1 +1

MG 01 rJ'TjirOrOr-rO

-HO) G >r ---*** (0Q) O:t0 CN fN t VO r— r— >01 £ 01 cococorocoro o M d) -H o

r- P M H

-P O

G 01 V

00 2 O CO 00 CO 00 00 CX

0) Ό r- +J o +1 P * >1 E — * »0 01 H *

2 0 -P

Ό -P

C P Cl) r-

P M 01 H O

+) 01 o H CO

a) -h e a) - o G «0 G CX Or-cooo v e > < \ r- CO ex

(0 >1 P

ro \ - •H ' * -pc * 01 to ai to o oi g +» h m

•H to 01 H O

i—I +) *H H r—

H -P Ό O O

(0 3 M P ai V

x; ai >,+>+) cp •H Λ Φ G >1 to H O O ;t0 *· CX (0 X X 2 * 55 c - -- - 71748 •H c)P ΓΟ Οι ΙΟ ' ' ' “ u HJ w · *> * ά t— Ol in o I I —

G P I

(βω ~ — > I u to o

ι-Η x ^ I^· t— LD

r-H c 04 Ol 04 04 -H <D tj> +1 +1 +1 +1 > a) E ^ oo T- m 3 +J m rr co 3 to -31 co a, x c a) π 0

3 *H

-P +J

44 -H CTi 00 <D -H dP " - ' +J ,jQ 04 04 τ— 3 in -h 04 «a* id 4-) Ο Λ in 'U c

•h 3 H

Λ! c m o * * Η -H c * * r4 :<X3 -H * 4c * 4-) > (0 oo ro rj< 4-) >i CL Οϊ - » O 1-3 tö g in c- ro 04

>H >4-14-1 4-1 -H

-Η O' CO O O' in 3 - --- >3 G X r- in C- ΟΧ -P a) O' m rr 04 3 Q) Ο Λί in

X -Η x I

a: (0 3 G

3 > 4-) 0 r-H in c —

3 04 0 -w &I

tO T3 to ^ o os co m E-ico CL - - - a) 3 in 04 in t— τα) £ C >1 4-1 4-1 4-1 4-1 4-» tn 0«t5 ο- σι τ— o *— 440 43 tn * --- o >i t3 a)-h oo oo σ o o 4(0 3 ^ H 04 04 04 00 ' G X o 3 tn v

H -H 2 O O' O' O' CL

•H :to — 3 > - 44 >, 4c J-l -I—I —. 4c 0) -H 41

> C -P

(0 -P ' C HS 0) —

3 e CO rH O

-P 10 0 rH ro a) -M c o ' o

C -P G CL o ro O V

G 3 < \ no CL

<0 0) 3 43 \ •rl -H 4c 44 Π3 4c in a) q <d s in a) 44 -h i m •H -H tn rH 3 o H +) -H iH i—t 04

rH -P Ό 0 -H O

tO 0) A P (0 0) V

4! H >1 44 44 44 a •H rH a) C n >1 toa) o o a) ho (¾ a. x x > a * 56 71748

Taulukoista XIV ja XV ilmenee, että keksinnön mukainen yhdiste (Näyte 1, Taulukko XIV) ei alenna kateenkorvan painoa, kun taas EP-patenttihakemusjulkaisu 0 004 975 mukainen yhdiste (Vertailunäyte 2, Taulukko XV) alentaa kateenkorvan painoa. Jos koeyhdiste alentaa merkittävästi kateenkorvan painoa, se on osoitus huomattavista systeemisistä sivuvaikutuksista. Näin ollen keksinnön mukaisen yhdisteen aiheuttamat sivuvaikutukset ovat huomattavasti pienemmät kuin vertailuyhdisteen.

11 71748

Kaavan (I) voidaan yhdistää sopivien myrkyttömien farmaseuttisesti hyväksyttävien kantajien kanssa sellaisten farmaseuttisten seosten aikaansaamiseksi, joita voidaan käyttää hoidettaessa ulkonaista tai muuta paikallista tulehdusta. Johtuen systeemisen aktiviteetin puuttumisesta eivät keksinnön mukaiset yhdisteet ilmeisesti ole tarkoitettuja sellaisten tilojen hoitoon, joiden aiheena on systeeminen lisämunuaiskuoriterapia, esimerkiksi lisämunuaiskuoren vajaatoiminta. Esimerkkejä tulehdustiloista, joita voidaan hoitaa farmaseuttisilla seoksilla, jotka sisältävät vähintään yhtä keksinnön yhdistettä ja yhtä tai useampaa farmaseuttista kantajaa, voidaan mainita seuraavat: dermatologiset sairaudet kuten luontainen liikaherkkyys ihotulehduksille, akne, psoriasis tai kosketustulehdus, allergiset tilat kuten keuhkoastma, silmätulehdukset ja korvatulehdukset, joihin liittyvät akuuttiset ja krooniset allergiset sekä tulehdukselliset reaktiot, hengityssairaudet, haavainen paksunsuolentulehdus ja anorektaalinen tulehdus, kutina ja peräpukamiin, peräsuolen tulehdukseen, rauhastulehdukseen ja rakoilemiseen liittyvät tuskat, leikkauksen jälkeiseen tuskaan ja peräkutka. Tällaiset seokset voidaan myös antaa paikallisesti profylaktisena toimenpiteenä kudossiirroissa syntyvää tulehdusta ja kudoksen hylkimistä vastaan.

Esimerkkejä erilaisista ulkonaisesti/paikallisesti annettavista valmistetyypeistä ovat voiteet, pesunesteet, salvat, jauheet, tipat, (esim. silmä- tai korvatipat), suihkeet (esim. nenää tai kurkkua varten), peräpuikot, pitkävaikutteiset peräruiskeet, pureskeltavat tai imeskeltävät tabletitta! pelletit (esim. sammastulehduksen hoitoon) ja aerosolit. Voiteet ja salvat, esim. voidaan muodostaa vesipitoisen tai öljymäisen perusaineen kanssa lisäämällä sopivaa sakeutus- ja/tai geeliytymisainetta ja/tai glykoleja. Tällainen perusaine voi esim. sisältää vettä ja/tai öljyä, kuten nestemäistä paraffiinia tai kasvisöljyä kuten arra-kisöljyä tai risiiniöljyä tai glykolipitoista liuotinta 58 71 748 kuten propyleeniglykolia tai 1,3-butaanidiolia. Sellaisia sakeutusaineita, joita perusaineen luonteen mukaisesti voidaan käyttää, ovat pehmeä paraffiini, aluminiumstearaatti, setostearyylialkoholi, polyetyleeniglykolit, villarasva, hydrattu lanoliini ja mehiläisvaha ja/tai glyseryylimono-stearaatti ja/tai ei-ioniset emulgointiaineet.

Steroidin liukoisuutta voiteeseen tai salvaan voidaan lisätä lisäämällä aromaattista alkoholia kuten bentsyylialko-holia, fenyylietyylialkoholia tai fenoksietyylialkoholia.

Pesunesteitä voidaan muodostaa vesipitoisen tai öljymäi-sen perusaineen kanssa ja ne sisältävät myös yleensä yhden tai useamman seuraavista, nimittäin emulgointiaineita, dispergointiaineita, suspendointiaineita, sakeutusaineita, liuottimia, väriaineita ja hajusteita. Jauheita voidaan muodostaa minkä tahansa sopivan jauhemaisen perusaineen, esim. talkin, laktoosin tai tärkkelyksen kanssa. Tippoja voidaan muodostaa vesipitoisen perusaineen kanssa, joka myös sisältää yhtä tai useampaa dispergointiainetta, sus-pendointiainetta tai solubilisointiainetta jne. Suihkeseok-set voivat esim. olla aerosoleja käyttäen sopivaa ponneainetta, esim. diklooridifluorimetaania tai trikloori-fluorimetaania.

Aktiivisen ainesosan osuus farmaseuttisissa seoksissa vaihtelee käytetyn yhdisteen, valmistetun formulointityypin ja sen erityisen tilan mukaan, johon seos on tarkoitus käyttää. Seos sisältää yleensä noin 0,0001 - 5,0 paino-% kaavan (I) yhdistettä. Ulkonaisesti käytettävät valmisteet sisältävät yleensä 0,0001 - 2,5, edullisesti 0,01 - 0,5 % ja annetaan kerran päivässä tarpeen mukaan. Yleissesti ottaen voidaan keksinnön mukaisia yhdisteitä myös lisätä ulkonaisesti annettaviin tai muihin paikallisesti käytettäviin seoksiin, jotka on valmistettu olennaisesti samalla tavoin kuin nykyisin saatavana olevat tunnettuja glukokor-tikosteroideja sisältävät seostyypit suurin piirtein samoil- ti 59 71748 la (tai kaikkein tehokkaimpien keksinnön mukaisten yhdisteiden ollessa kysymyksessä, suhteessa alemmilla) annosmäärillä verrattuna tunnettuihin hyvin aktiivisiin aineisiin, kuten metyyliprednisoloniasetaattiin ja beklometasonidi-propionaattiin tai huomattavasti pienempinä annosmäärinä kuin vähemmän aktiiviset tunnetut aineet kuten hydrokortisoni .

Siten voidaan esimerkiksi astman hoidossa käyttökelpoinen sisäänhengitettävä seos valmistaa mitta-annosaerosoliyk-sikkönä, joka sisältää keksinnön edustavaa yhdistettä, kuten kloorimetyyli-17a-etoksikarbohyylioksi-llB-hydroksi-androsta-4-eeni-3-oni-17|3-karboksylaattia, farmaseuttisten valmisteiden valmistukseen perehtyneelle sinänsä tunnetuilla menetelmillä. Tällainen aerosoliyksikkö voi sisältää edellä mainitun yhdisteen mikrokiteistä suspensiota sopviissa ponneaineisa (esim. trikloorifluorimetaanissa ja diklooridifluorimetaanissa), oleiinihapon ja muun sopivan dispergointiaineen kanssa. Kukin yksikkö sisältää tavallisesti 10 mg edellä mainittua aktiivista ainesosaa, josta suurin piirtein 50 mikrogrammaa vapautuu kullakin käyttökerralla. Kun erästä keksinnön aktiivisempaa lajia, esim. kloorimetyyli-17a-etoksikarbonyvlioksi-9a-fluori-113-hydroksi-16a-metyyliandrosta-l,4-dieeni-3-oni-176-karboksylaa-tia käytetään, sisältää kukin yksikkö tavallisesti 1 milligramman aktiivista ainesosaa ja vapauttaa suurin piirtein 5 mikrogrammaa kullakin käyttökerralla.

Eräs toinen esimerkki farmaseuttisista seoksista on vaahto, joka sopii ' hyvin 'erilaisten ano-rektaalisten tulehdussairauksien hoitoon, joka annetaan peräaukkoon täisen ympärille ja joka sisältää 0,1 % kaavan (I) yhdistettä kuten kloorimetyyli-17a-etoksikarbonyyliok-si-llg-hydroksiandrost-4-eeni-3-oni-17g-karboksylaattia ja 1 %:n paikallispuudutusainetta kuten pramoksiinihydro-kloridia limaan tarttuvassa vaahtoperusaineessa, joka sisältää propyleeniglykolia, etoksyloitua stearyylialkoholia, polyoksietyleeni-10-stearyyylieetteriä, setyylialkoholia, 71 748 60 metyyliparabeeniä, propyyliparabeeniä, trietanoliamiinia ja vettä inerttien ponneaineiden kanssa. Käytettäessä aktiivisempaa keksinnön mukaista yhdistettä, käytetään tavallisesti vähemmän aktiivista ainesosaa, esim. 0,05 % kloorimetyyli-9a-fluori-11S-hydroksi-17a-metoksikarbonyy-lioksi-16a-metyyliandrosta-l,4-dieeni-3-oni-17 β-karbok-sylaattia.

Vielä eräs farmaseuttinen seos on liuos tai suspensio, joka soveltuu käytettäväksi retentioperä-ruiskeena, jonka yksinkertainen annos tavallisesti sisältää 40 mg keksinnön yhdistettä, kuten kloorimetyyli-17a-etoksikarbonyylioksi-116-hydroksiandrosta-4-eeni-3-oni-17β-karboksylaattia (tai 20 mg aktiivisempaa keksinnön yhdistettä kuten kloorimetyyli-9a-fluori-11β-hydroksi-17a-isopropoksikarbonyylioksi-16 β-metyyliandrosta-l,4-dieeni-3-oni,17β-karboksylaattia tai kloorimetyyli-9a-fluori-11β-hydroksi-16a-metyyli-17a-propoksikarbonyyli-oksiandrosta-1,4-dieeni-3-oni-17 β-karboksylaattia) yhdessä natriumkloridin, polysorbaatin 80 ja 30-180 g:an kanssa vettä (joka vesi lisätään juuri ennen käyttöä). Suspensio voidaan antaa joko retentioperäruiskeena tai jatkuvasti tiputtaen useita kertoja viikossa haavaisen paksunsuolentulehduksen hoidossa.

Alan ammattimies kykenee käyttämään keksintöä täydellisesti hyväkseen yllä olevan selostuksen perusteella joten alla olevat esimerkit edustavat ainoastaan edullisia suoritusmuotoja esillä olevasta keksinnöstä.

Esimerkki I (lähtöaine, kaava II)

Liuokseen, jossa oli hydrokortisonia (15 g, 0,04 moolia) 120 ml:ssa tetrahydrofuraania ja 30 mlrssa metanolia huoneen lämpötilassa, lisättiin lämmintä (noin 50°C:sta) 61 71 748 natriummetaperjodaatin (25,7 g, 0,12 moolia) liuosta 100 ml:ssa vettä. Reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 2 tuntia, väkevöitiin sen jälkeen alennetussa paineessa tetrahydrofuraanin ja metanolin poistamiseksi. Kiintoaine trituroitiin 50 ml:11a vettä, erotettiin suodattamalla, pestiin vedellä ja kuivattiin tyhjössä 50°C:ssa 3 tuntia. Tuote, 118,17a-dihydroksiandrosta-4-eeni-3-oni- 178-karboksyylihappo (so. kortieniinihappo), sulaa 231-234°C!ssa ja saadaan noin 96 %:sena saantona (13,76 g) ja voidaan kuvata alla olevalla rakennekaavalla

OH

H3C f=°

HO. J~<r--OH

Esimerkki 2 (lähtöaine, kaava III)

Kylmään liuokseen, jossa oli 118,17a-dihydroksiandrosta-4-eeni-3-oni-173~karboksyylihappoa (5 % paino/tilavuus; 1 mooli) ja trietyyliamiinia (4 moolia) dikloorimetaanissa, lisättiin 50 % (paino/tilavuus) metyylikloroformiaatin (3,9 moolia) liuosta dikloorimetaanissa. Reaktioseoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan 2 tunnin aikana. Muodostuva trietyyliamiinihydrokloridisakka poistettiin suodattamalla ja suodate pestiin peräkkäin 3 %:sella natriumbikarbonaatilla, laimealla (noin 1 %) suolahapolla ja vedellä. Orgaaninen kerros erotettiin, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja suodatettiin. Suodate väkevöitiin tyhjössä vaahdoksi. Vaahtoa käytettiin seuraavassa vaiheessa (esim. alla olevassa esimerkissä 3) tai kromatografoitiin ja kiteytettiin analyysiä varten. Tuote, ll(3-hydroksi-17a-metoksikarbonyylioksiandrosta-4-eeni-3-oni-17(3-karbok-syylihappo sulaa 198-204°C:ssa kromatografoinnin ja kiteytyksen jälkeen; IR (KBr) 300-2800 (C-K), 1750, 1735, 71 748 62 1720 (C=0), 1650, 1640 (C=C-C=Q) cm ^. Tuote voidaan esittää rakennekaavalla

OH

H r C=0 H3C j H0N^^S“'0"0CH3 h3?T x_]

Korvaamalla yhtä suuri määrä edellä käytettyä metyylikloro-formiaattia etyylikloroformiaatilla ja olennaisesti toistamalla edellä oleva menettelytapa saadaan 17a~etoksikarbonyy-lioksi-11g-hydroksiandrost-4-eeni-3-oni-17 β-karboksyyli-happoa, joka sulaa 192-195°C:ssa kromatografoinnin ja kiteytyksen jälkeen; IR (KBr) 3500 (ΙΙβ-0-Η), 300-2800 (C-H), 1740 (C=0), 1630 (C=C~C=0) crrT1; NMR (CDCl3) 66,4 (1, b, COOH), 5,67 (1, s, C=CH), 4,43 (1, b, CHOH), 4,13 (2, q, J = 7,5 Hz, OCI^CH^) ; analyysi laskettu yhdisteelle C23H32°7: C 65'69* H 7,67. Todettu: C, 65,76; H 7,74.

Saimoin korvaamalla tämän esimerkin ensimmäisessä kappaleessa käytetty metyylikloroformiaatti yhtä suurella määrällä butyylikloroformiaattia ja toistamalla olennaisesti menettelytapa saadaan 17a-butoksikarbonyylioksi-11β-hydroksi-androsta-4-eeni-3-oni-17 β-karboksyylihappoa. Lopputuote sulaa tetrahydrofuraani-heksaanista suoritetun kiteytyksen jälkeen 164-166°C:ssa.

Samoin korvaamalla tämän esimerkin ensimmäisessä kappaleessa käytetty metyylikloroformiaatti yhtä suurella määrällä isopropyylikloroformiaattia ja toistamalla menettely, saadaan 11 (3-hydroksi-17a-isopropoksikarbonyylioksiandrost-4-eeni-3-oni-17B~karboksyylihappoa. Lopputuote sulaa tetrahydrofuraani-heksaanista suoritetun kiteytyksen jälkeen 144,5-146,5°C:ssa.

63

717 ά R

Esimerkki 3 ° 118-hydroksi-17a-metoksikarbonyylioksiandrost-4-eeni-3-oni-17$-karboksyylihappo yhdistettiin yhtä suuren määrän kanssa 1-N natriumhydroksidia metanolissa ja tämä liuos laimennettiin alkuperäistilavuuteen nähden 100-kertaisella määrällä etyylieetteriä. Saatu suspensio pakastettiin tunnin ajan. Muodostuneet kiteet poistettiin sen jälkeen suodattamalla, kuivattiin alipaineisessa desikaattorissa ja liuotettiin heksametyylifosforiamidiin (10 % paino/ti-lavuus). Osa saadusta liuoksesta, jossa oli 1 mooli hapanta suolaa, so. natrium-118-hydroksi-17a-metoksikarbonyyli-oksiandrost-4-eeni-3-oni-17B-karboksylaattia, yhdistettiin 4 moolin kanssa kloorimetyylijodidia. Reaktioseosta pidettiin huoneen lämpötilassa 3 tuntia, ja laimennettiin sen jälkeen alkuperäistilavuuteen nähden 10-kertaisella määrällä etyyliasetaattia. Laimennettu reaktioseos pestiin peräkkäin 5 %:sella natriumtiosulfaatilla, 3 %:sella natriumbikarbonaatilla ja vedellä. Orgaaninenkerros erotettiin, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja suodatettiin. Suodate väkevöitiin tyhjössä vaahdoksi. Vaahto puhdistettiin kiteyttämällä sopivasta liuottimesta (etyylieetteri tai tet-rahydrofuraani/heksaani). Näin saatiin kloorimetyyli-ΙΙβ-hydroksi-17a-metoksikarbonyylioksiandrost-4-eeni-3-oni- 170-karboksylaattia, joka suli 171-173°C:ssa kiteytyksen jälkeen, IR (KBr) 300-2800 (C^H), 1760, 1748 (C=0), 1650 (C=C-C=0) cm-1; NMR (CDCI3) 65,67 (s, 1, C=CH), 5,82, 5,62 (ABq, J = 5,5 Hz, 2, OCH2Cl), 4,47 (b, 1, CHOH); analyysi laskettu yhdisteelle ^βΗ^ΰΐΟ: C 60,72; H 6,87;

Cl 7,79. Todettu: C 60,50; H 7,06; Cl 7,50. Tuotteella on rakennekaava 71 748 64 0CH2C1 H C <j=0 --OCOCK3 h3c ° J __ 0

Korvaamalla yllä käytetty steroidinen happo yhtä suurella määrällä 17a-etoksikarbonyylioksi-ll3~hydroksiandrost-4-eeni-3-oni-173~karboksyylihappo ja toistamalla edellä oleva menettelytapa, saadaan välituote suolana natrium-17a-etoksikarbonyylioksi-ll$-hydroksiandrosta-4-eeni-3-oni-178-karboksylaatti, ja lopputuotteena kloorimetyyli-17a-etoksikarbonyylioksi-llB-hydroksiandrost-4-eeni-3-oni-17B- karboksylaatti, joka sulaa kiteytyksen jälkeen 197-200° C:ssa; IR (KBr) 3600-3200 (OzH), 3000-2800 (C-H), 1763, 1740 (C=0), 1650 (C=C-C=0) cm'1; NMR (CDCI3) 65,7 (s, 1, C=CH), 5,81, 5,62 (ABq, J = 5 Hz, 2, -0CH2C1); analyysi laskettu yhdisteelle C24H33C107: C 61,46; H 7,09. Todettu C 61,58; H 7,08.

Samalla tavoin korvaamalla tämän esimerkin ensimmäisessä kappaleessa käytetty steroidinen happo yhtä suurella määrällä 17a-butoksikarbonyylioksi-llB-hydroksiandrost-4-eeni-3-oni-17B-karboksyylihappoa ja toistamalla edellinen menettely, saadaan välituote suolana, natrium-17a-butoksi-karbonyylioksi-HB-hydroksiandrost-4-eeni-3-oni-17B-karboksylaattia ja lopputuotteena kloorimetyyli-17a-butok-sikarbonyylioksi-llB-hvdroksiandrosta-4-eeni-3-oni-17B-karboksylaattia, joka sulaa kiteytyksen jälkeen 98-100° C:ssa, IR (KBr) 3600-3300 (O-H), 3000-2800 (C-H), 1765 (02C=0), 1735 (0C=0), 1650 (C=C-C=0) cm"1; NMR (CDCI3) 65,80, 65,60 (2, ABq, J = 4,5 Hz, -OCH2Cl), 5,67 (1, s, C=CH), 4,45 (1, b, CHOH), 4,08 (2, t, J = 6 Hz, 0200€Η2-ΟΗ2) ; analyysi laskettu yhdisteelle C26H37Cl07: 65 71 748 C 62,77; H 7,44; Cl 7,14. Todettu: C 62,88; H 7,23; Cl 7,30.

Samalla tavoin korvaamalla tämän esimerkin ensimmäisessä kappaleessa käytetty steroidinen happo yhtä suurella määrällä ll8-hydroksi-17a-isopropoksikarbonyylioksiandrost- 4-eeni-3-oni 178-karboksyylihappoa toistamalla edellinen menettely, saadaan välituote suolana,natrium-llg-hydroksi-17a-isopropoksikarbonyylioksiandrost-4-eeni-3-oni-178-karboksylaattina, ja lopputuotteena kloorimetyyli-llg-hydrok-si-17a-isopropoksikarbonyylioksiandrost-4-eeni-3-oni-17g-karboksylaattia, joka tetrahydrofuraani-heksaanista suoritetun uudelleenkiteytyksen jälkeen sulaa 183,5-184,5°C:ssa.

Samalla tavalla korvaamalla steroidinen happo yhtä suurella määrällä 17a~etoksikarbonyylioksi-llg-hydroksiandrost- 4-eeni-3-oni-17g-karboksyylihappoa ja tämän esimerkin ensimmäisessä kappaleessa käytetty kloorimetyylijodidi yhtä suurella määrällä butyylikloridia ja toistamalla olennaisin osin siinä esitetty menettely, lukuunottamatta että pesu 5 %:sella natriumtiosulfaatilla eliminoidaan, saadaan välituote suolana natrium-17a~etoksikarbonyylioksi-llg-hydroksiandrost-4-eeni-3-oni-178-karboksylaattia ja lopputuotteena butyyli-17a-etoksikarbonyylioksi-ll8~hydroksi-androst-4-eeni-3-oni-17|3-karboksylaattia. Lopputuote sulaa asetonista suoritetun kiteytyksen jäljeen 148-149°C:ssa ja kromatografoinnin ja kiteytyksen jälkeen saadaan IR (KBr) 3600-3200 (O-H), 3000-2800 (CZH), 1750 (2 C=0) , 1670 (C=C-C=0) cm*1; NMR (CDC13) 65,64 (s, 1, -C=CH), 4,46 (b, 1, CHOH), 4,32-4,95 (m, 4, COOCH2CH3+, COOCH2CH2-); analyysi laskettu yhdisteelle C^H^O^: C 67,99; H 8,39; todettu: C 67,76; H 7,74.

Esimerkki 4 17a~etoksikarbonyylioksi-ll8-hydroksiandrost-4-eeni-3-oni-17$-karboksyylihappoa (3 g, 7,13 mmoolia) käsiteltiin 7,13 ml:11a 1-M metanolipitoista natriumhydroksidiliuosta ja 500 ml etyylieetteriä lisättiin sen jälkeen saostuksen 71748 66 aikaansaamiseksi. Sakka erotettiin suodattamalla ja kuivattiin ilmatyhjössä desikaattorissa yön yli, jolloin saatiin 2,71 g (6,12 mmoolia) haluttua suolaa, so. natrium-17a-etoksikarbonyylioksi-118-hydroksiandrost-4-eeni-3-oni-176-karboksylaattia keltaisena jauheena. Suola liuotettiin 40 ml:aan heksametyylifosforiamidia ja kloorimetyylimetyy-lisulfidia (2,36 g, 24,5 mmoolia) lisättiin hitaasti. Nat-riumkloridisakka muodostui reaktioseoksessa minuutin sisällä. Reaktiosesta sekoitettiin huoneen lämpötilassa tunnin ajan, laimennettiin sen jälkeen etyyliasetaatilla kokonaistilavuuteen 200 ml ja pestiin peräkkäin 3 %:sella natriumbikarbonaatilla ja vedellä. Orgaaninen kerros erotettiin, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja suodatettiin. Suodate väkevöitiin tyhjössä öljyksi ja öljy kromatografoi-tiin piigeelistä käyttäen etyyliasetaattia, kloroformia ja etikkahappoa eluointiaineina. Kromatografoitu tuote kiteytettiin etyylieetterin ja heksaanin seoksesta, jolloin saatiin metvylitiometyyli-17a-etoksikarbonyylioksi-llf3-hydroksiandrost-4-eeni-3-oni-173-karboksylaatin valkoisia jauhemaisia kiteitä, jotka sulivat 133-136°C:ssa. Tällä tuotteella on rakennekaava och2sch3 H C ?=° “°nOC2H5

H3cMi I_J

0'

Liuokseen, jossa oli metyylitiometyyli-17a-etoksikarbo-nyylioksi-llB-hydroksiandrost-4-eeni-3-oni-176-karboksy-laattia (0,48 g, 1 mmooli) 2 mlrssa dikloorimetaania, lisättiin m-klooriperoksibentsoehappoa (0,4 g = 0,34 g per-happoa, 2 mmoolia). Syntyy eksoterminen reaktio, joka nopeasti vaimenee. Reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa tunnin ajan. Muodostunut sakka poistettiin suodat 71 748 67 tamalla ja suodate väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin valkoisen vaahdon muodossa metyylisulfonyylimetyyli-17a-etoksikarbonyylioksi-113-hydroksiandrost-4-eeni-3-oni 17 3-karboksylaattia. Tällä tuotteella on rakennekaava och2so2ch3

C=0 H C I

HO. --OCOC2H5 »3C Yj 1 s NMR (CDCI3): 65,07 (s, 2, 0CH2S02), 2,97 (s, 3, S02CH3) .

Toistamalla edellisessä kappaleessa selostettu menetelmä, mutta käyttäen ainoastaan yhtä mmoolia m-klooriperoksiben-soehappoa, saatiin metyylisulfinyylimetyyli-17a-etoksi-karbonyylioksi-118-hydroksiandrost-4-eeni-3-oni-178~karb-oksylaattia.

Esimerkki 5A

Korvaamalla esimerkissä 1 käytetty hydrokortisoni yhtä suurella määrällä jotakin alla luetelluista aineista ja toistamalla olennaisesti siinä esitetty menettelytapa, saatiin seuraavat tuotteet: Lähtöaine Tuote fludrokortisoni 9o-fluori-116,17a-dihydroksiand-

rost-4-eeni-3-oni-178-karboksvyli-happo, sp. 250-253°C

betametasoni 9a-fluori-llg,17a-dihydroksi-168~

metyyliandrosta-1,4-dieeni-3-oni-17 β-karboksyy1ihappo, sp. 248-249 C

dekametasoni 9a-fluori-llB,17a-dihydroksi-16a- metyyliandrosta-l,4-dien-3-oni-176-karboksyylihappo, sp. 275-278,5bC.

68 71 748

Esimerkki 6A

Seuraamalla esimerkin 2 yleistä menetelmää ja korvaamalla siinä sopivilla reagensseilla saatiin seuraavat uudet välituotteet :

OH

ocoor2 _j R3 i

K

II

71748 69 •H -H | .—. —- ___ -—- ^ ; ___ ^ C -P )

-H Ή -H Ή <H CJ -H -.H 'H «3 -P

C C. c G C°c c ' C : «3 «3 (O «3 CJ (Ö U «3 ιβ m (ö ' . £ «3 005 «3

(0 Π3 o ro o «3 ro · (q ,r «5. o χ -P

O— U tn θ“3»ηο) vo « o» n m U m O « m <u 0<D| o -H o X o X · X in X οχ Γ*· χ °X o λ; »,c o It «ΓΗ f—I CJ CT\CJ "T φ rp GJ VO <U H J) r»0) CO (ΰ r- \ tN «5 . ω o c\ s: n£ <» £ is: tN s: i s: m s: m s: m ρ ω h!

CU H C rp \ rp \ »—I LO \ »—I \ ΙΓ) N*. r—! \ »—! \ H H) rp N

•1 I*0 I L· I b I b «Cl, Ib »6a I 6 Ib 1X3 I £| co( ro -p or: ω 6 m 6 ττ κ in 6: hs vo “ t- κ vo .o o p| co 03 cnE-i m e-4 o· in ^ m £-t r^s-i mx in χ into cooj rp ' rp ' »H ""—' iH rp «H * ' «H rp ' ' rp r-P "—" rp '—' <· ti· ts· «* ·** «s· τ- -¾1 ττ ^ | ^ ^ · ·» ^ rp *-p rP rp rp rp O KOKO KO KO KO KO Ka K O KO kB, k

\/ \/ \/ \/ \/ \/ \/\/ \/ \/ V

N|OU O U O U U O O O o /\ /\ /\ /\ /' /\ / \ /\ /\ /\ 'x tn _

KIK KKKKKKKKKK

«ΐ K b b b b K b K b K b ro ro ro ro ro ro .

rf). K K K K K K K K K K K

«t u u u o u u

III I I I

ea. Ö O ca a a in r- ov r~

K K K K

vo n Tr m r--

rt O in m in U O U K K

«Γ N KK K I I l.co rof^Jro K m in in o o o o u k k

O UO O n O m i I L J U

-P -h ή c e « o

C o rP

- rp CMrO^inVOr^COCyVrprP

5 I l I l I I I I I I l &< *£< < < < < < < < < .p VO VO VO VO VO VO VO VO VO VO vo s 71748 70 id td o ____ -ni

U Ή ' |S ‘H -H -H

o C -Se e e.

m «o io <d td • <d id to <o cv tn rj en n m tn . n M o M o>; o·^ n H 1) OOH) CO 0) 0(1) . i x: m ä x: -ο· k: m in\ t-A \ <N \ CJV \ • fe I I fc I Cu coin s vo k ns <n E-· inE-i »a· E-ι ovE-i ι-l ^ i—) — CM —·

Tf <1 - ·* ' iH r-i r-i

S S K CC

OK OK OK OK

' U U O O

/ \ / \ / \ /N

«p K Cu K K

Kp Cu fc Ρμ

M M M M

(V) K K K K

κι o o o u ϋ o e o

iH

ιΗ V

CN

ra Ec 10 ms

KI m K K O

1 r, (N VO CN

I O O K

C U

O

»· e cm M tp m <U _J H «H r-t +) v i i i tn g* <C < <

•H 2 VO VO VO

Ό

S

>l •rv ·· 71 748 71

Yllä olevat yhdisteet 6A-1 - 6A-15 voidaan nimittää seuraavasti: 6A-1: 17a-bentsyyl'ioksikattoonyylioksi-lle-hydroksiandrost- 4-eeni-3-oni-173-karboksyylihappo 6A-2: 17a-etoksikarbonyylioksi-9a-fluori-ll3-hydroksiand- rost-4-eeni-3-oni-17B“karboksyylihappo 6A-3: 17a-etoksikarbonyylioksi-9a-fluori-ll3-hydroksi-163- metyyliandrosta-l,4-dieeni-3-oni-17g-karboksyyli-happo 6A-4: 17a-etoksikarbonyylioksi-9a-fluori-ll$-hydroksi-16a- metyyliandrosta-1,4-dieeni-3-oni-173-karboksyyli-happo 6A-5: 9a-fluori-113-hydroksi-17a-isopropoksikarbonyyliok- si-16a-metyyliandrosta-1,4-dieeni-3-oni-17B-karb-oksyylihappo 6A-6 : llB-hydroksi-17a-isobutoksikarbonyvlioksiandrost.-4- eeni-3-oni-17B-karboksyylihappo 6A-7: 9a - fluori-HB-hydroksi-17a-isopropoksikarbonyyli- oksi-163-metyyliandrosta-l,4-dieeni~3-oni-17f'-karboksyylihappo 6A-8: 116-hydroksi-17a-propoksikarbonyyliandrost-4-eeni- 3-ono-17B-karboksyylihappo 6A-9: 9a-f luori-ll|3-hydroksi-16a-metyyli-17a-propoksikar- bonyylioksiandrosta-1,4-dieeni-3-oni-17$-karbok-syylihappo 6A-10: 17a-sykloheksyylioksikarbonyylioksi-ll!?-hydroksi- androsta-4-eeni-3-oni-176-karboksyylihappo 6A-11: 9a-fluori-113-hydroksi-17a-metoksikarbonyylioksi- 16a-metyyliandrosta-1,4-dieeni-3-oni-17B-karboksyy-1ihappo 6A-12: 17a-n-petnyylioksikarbonyylioksi-9a-fluori-11B- hydroksi-16 -metyyliandrosta-1,4-dieeni-3-oni-176-karboksyy1ihappo 6A-13: 17a-etoksikarbonyylioksi-6u,9a-difluori-11B-hydrok- si-16a-metyyliandrosta-l, 4-dieeni-3-oni-17 P>-karboksyyl ihappo 6A-16: 17a-fenoksikarbonyylioksi-9a-fiuor.i-llB-hydroksi- 16a-metyyliandrosta-l,4-dieeni-3-oni-17g-karbcksyy-1ihappo 6A-15: 17a-(2-kloorietoksikarbonyylioksi)-9u-fluori-11β- hydroksi-16a-metyyliandrosta-l, 4-dieeni-3-oni-].7r-karboksyylihappo 72 71 748

Esimerkki 6B

Seuraamalla esimerkin 2 yleismääritelmää ja korvaamalla siinä sopivilla reagensseilla aikaansaatiin seuraavat uudet välituotteet:

OH

C=0

H G

----OCOOR^

^ ' I

Rs

II

73 717 4 8

(O

o

•H -n -H -H

C <0 CO M

U ui -CO) Q> ° nj "" > > C\ CO \ CJ \ CM M O ° 'i • CM Cl) o Ή CTi 1—1

Oi K m o m o

• i \ m G i—i C

CO Cu ,—i tri 1*0 (v. K -U I-" N tH I tl) m tl) CM ' ^ i—l '

CO

MC

pH

<r mj- mj· <

i-H t»H rH

KE EK EE

O .· C> . o CM N \ ' \ ' O CJ o / \ / \ / \ m e e e

E

<)· E Ui E

E

en co en pp<

en O CJ O

El I I

e ö e cm en

E E

O O

CM H cm en en

EE E KE

CJ CJ CJ CJ

CM CM M. /

Pr» Py- *—I

• p—· p<u »M —

CJ CJ CJ

I I I

0 c O)

4J

CO

•H r-ι cm en E « ά ci >Ί VO Ό 71 748 74

-—-. ---- *"· id -H -H

•H -H -H -H -H 03 G C

G G G G G ζ O 03 G

Oj (O G 03 (O G -f—i o3 03 03 G 03 03 03 <ti 05 n U n O en On On O n o tn O <λ g 44 o 44 o x 044 »44 o44 »44 o 44 '-'d) in φ . ooqj cm ti) rv φ OQ) n ® vdqj χ -,c ϋ o g mx: cm x 00 x 00 λ m x: 001 1

. r-ll r-Il I I i—I I -H I r-l I OOG M< G

tn IG ie IG l G |G |G M \ x \ m\ O \ <t\ co \ cm \ en \ ifc tfc otu m [n cm En r^Cn co m (h co χ cox ι—I X . ι—I X rH X 1—4 X —H EC rH EC 00 E"1 M1 E-1 EH EH H H E-t E-· r-t —- x . „ >w, x_x «S_i» N·*- »-H i-H r~i rH rH r—1 i—I i—\

EC X X

EC X CC XXX X XX XO X O X O X

°\ / °\ °\/ °\ / °\ / \ / \ / \ /

CM O^ O Ov O O O O U

/ ^ ^ x x / \ / \ / N^ m

X Cti X X XCbXXX

MT

XX XX xxxt,t, co en m <m co ^ en x x x X xx

X O O O XOXOO

III I II

a a a a ca ca en X.

CJ CO

cm en en X

eM --- X X U

x m cm o o m cm

X X \ / en enx COX

CM o \x/ XX CM X O

0^0 O O O U CM

lii i i i I X

u

O I

G

a)

-P

n o i—i

•H m VO I— OO 0\ I-1 |H

S « ά Λ eifAffliJi

>H Ό vO \0 vOvOvO^OVD

11 71 748 75

Yllä olevat yhdisteet voidaan nimittää seuraavasti: 6B-1: 17a-allyylioksikarbonyylioksi-9ot-fluori-llB-hydroksi- 16α-metyyliandrosta-1,4-dieeni-3-oni-17β-karboksyyli-happo 6B-2: 17a-n-propoksikarbonyylioksi-6a-9a-difluori-113- hydroksi-16a-metyyliandrosta-1,4-dieeni-3-oni-17 β-karboksyy1ihappo 6B-3: 17a-isopropoksikarbonyylioksi-6ot-9a-difluori-ll3- hydroksi-16a-metyyliandrosta-1,4-dieeni-3-oni-176-karboksyylihappo 6B-4: 17a-etoksikarbonyylioksi-6a-fluori-llB-hydroksi-16a- metyyliandrosta-1,4-dieeni-3-oni-17 β-karboksyylihappo 6B-5: 17a-n-propoksikarbonyylioks.i-6a-f luori-llB-hydroksi-16a- metyyliandrosta-1,4-dieeni-3-oni-176-karboksyylihappo 6B-6: 17a-isopropoksikarbonyylioksi-6a-fluori-llS-hydroksi- 16c*-metyy liandrosta-1, 4-dieeni-3-oni-17 β-karboksyylihappo 6B-7: l7a-metoksikarbonyylioksi-HB-hydroksiandrosta-1,4- dieeni-3-oni-17β-karboksyylihappo 6ö-8: 17a-metoksikarbonyylioksi-6a-fluori-11B-hydroksi-16a- metyyliandrosta-1,4-dieeni-3-oni-17 β-karboksyylihappo 6B-9: I7a-etoksikarbonyylioksi-ll6-hydroksiandrosta-1,4- dieeni-3-oni-17 β-karboksyylihappo 6B-10: 17a-metoksikarbonyylioksi-9a-fluori-llB-hydroksi-166- metyyliandrosta-1,4-dieeni-3-oni-17β-karboksyylihappo 6B-11: 17a-n-propoksikarbonyylioksi-9a-fluori-ll6-hydroksi- 16 β-metyyliandrosta-1,4-dieeni-3-oni-17 β-karboksyylihappo

Esimerkki 7A

Seuraamalla esimerkin 3 yleismenetelmää ja korvaamalla siinä sopivilla reagensseilla aikaansaatiin seuraavat yhdisteet:

OR, l L

C=0 .^3^.--OCOOR2 HP ^ R o H3C I 3 1 R5 76 717 4 8 1 Yhdiste n:o B- ' ' ^2 ~^~3 ^4 ^5 %' f Δ S ,ρ,_ CH3

7&-1 CH^Cl C_H_ E F E 'c/" 4 223-229 °C

......... ..... ....... . (IKF/fieksaani)

7A-2 Gi-.CH C*L ' S-G!. F K I 1 i\ 22 0-221°C

* -2^ ^ \ 'n (IHF/iieksäani) ' CH 1

7A-3 G Q C^H_ a-CH. F E V/* 1 4· 220-225 °C

_ _ ^ 3 J ’ I (THF/heksaani)

7A-4 CH Cl Cl E EH 1,41 220.5-223.5°C

_ λ 1 s__nh } (ΊΕ;/heksaani) _

7A-5 CHjCl iso-C.^ H HE 1,4 197-19S°C

_'__'______E___(lEl/hek saan i)

CH

7A-6 Cl·Cl C-H- E . F E 1,4 245-24SeC

__' ' , 3 ~ _ 'H (THF/heksaani)

CH

7A-7 CnCl iso-C-JL. c-CH-, H H 1,4 1S4.5-156°C

____f__**______(m /heksaani) CEj

7A-3 GL,C1 iso-C-iL- β-CH, F E 'cf 1,4 174-175.5°C

_ ^ -3 ' 3__"H 1 (IE?)

• 7A-9 C-UC1 iso-C .Ha E EE 4 140-141°C

z 4 ' Ή (3HF/ isopro- .......... ...... .....f · - · pyyl ieetteri) —

7A-10 'PS01 _A7\ H HE 4 142-150°C

/ Ή ( isopropyyli- ............ ......... ν' ... - .... eetterihek- . .· ’______ saani)_;_

CH

7A-11 CH-Cl . . jK-E- .....H.. -H H .^CC 4 181-182'°C ....

·.· ·. ----. .....H./. .........*£· (3HF/heksaani)

“CH

-7A-12......cnci......n-CJEL a-CH_J γ H 1,4 -176-176.5°C, • ' ..... . z......J * - J ’ ' ’ (3EF/ heksaani)

7A-13.....CH isoC n H EH 4 211.5-213.5°C

.......-· · -.-.-0.........J ' ........ 'H (SH?/heksaani) Γ Txh]

7A-14 CECCnL iso-C-n. H HE VT 4 137-128°C

.. ".7:.;v//; .. z //° /..// /xl // 'cm?/heksaani) λ-\ ^ch

7A-15 eno. en// \> H EH 'cf 4 132-183°C

/......'—' .....'H (etanoli)_ 11 77 7174 8

Yhdiste n:o | R~ F „ .R/ I R I P Z | Δ | S.D.

— ---ST——2——3—4‘—™--

7A-161 i 3 iso-C^H- H HE 4 181-182.5°C

n (THF/heksaani) a

I 3 H··· E E 4 199-200°C

' ' ~ ' C3CI_. J j ·· 3 I (THF/heksaani) __ __

7A-17 CL.CC/CJL. iso-CJ_ H H H C,X 4 73-74 eC

• 2 ^ 2 ° ..........^ n (isopropyyli- _. · · · ............eetteri) — ^

7A-181 | 3 isc-C^E^ p-CSj F H 'c;' 1,4 167.5-153°C

L 73 (THF/heksaani) 9¾ . '—f3

J iso-C-H-j β-Ο, F E cf 1,4 163-164°C

' r"-'CSCl · · J ' · ''B (THF/heksaani)

7A-19 GLC1 iso-CJL β-Ci-. F H )c=0 1,4 200-201 °C

J 7 (TEF/isopro- ' _ ' · '___ .....pyylieetteri)

7A-20 CH-Cl C H a-Oi F H >X> 1,4 133-140°C

(TEF/isopro- pwlieetteri) --1-1-]-j-p---- ck

7A-21 Gi-Cl CH α-CH F H 'Cf 1,4 26G-263°C

_ 2__1 ' 'H (THF/heksaani)

7A-22 Cii^F iso-C-E-, H H H 4 207.5-210°C

___U__I 13_(THP/he.ksnnm)

Ci

7A-23 CL. Cl n-Cj-Ητ, a-CE- F H cf 1,4 176-177 °C

..............2 - ·· - · 5 11 .....-5 _ Ή (THF/heksaani) - _ 7A-24 CH-C1 CJE1 S H F 'cf 1,4 153-154 ^ ^ j ' V.

α~(-γ H (THF/heksaani) ................... cc^ __

• 7A-25 ca^F C-R- e-CL, F H 'cf 1,4 239-240.5°C

’ ............Z· ····} 2 ° · ---- 1 ' Έ } (THF/heksaani 7A-25 CH2CCOCH3 C2E_ H E E 'cf 4 'E o5.76(s,2, CCE20), 2.01 - - · . . .................... ...........(s,3, ccqu diastereciaeereja 71748 78

Yhdiste r r r R r. Z Λ S-d.

n:o 1 2 3 4 d

\ /0H

7A-27 CH Cl C H α-CH F F C 1,4 195-197°C

_2 2 b__J / '-H (TKF/heksaani)

\ /OK

7A-28 CH-CH.C1 C_H α-CH F H C 1,4 243-245°C

_1 Δ__Z b J [ [/ ''H (THF/heksaani) . : \ /oh

7A-29 CH C9H α-CH-. F H C 1,4 258.5-262.5°C

_ J_______ I_/ \H I (THF/heksaani)

\ /OH

7A-30 CH~CH-Cl iso-C H H H H C 4 188.5-189.5°C

_1 1____/ '>H 1 -[ (THF/heksaani) 71 748 79

Edellä olevia yhdisteitä voidaan nimittää seuraavasti: 7A-1: kloorimetyyli-17a-etoksikarbonyylioksi-9a-fluori- 11β-hydroksiandrost-4-eeni-3-oni-17β-karboksylaatti 7A-2: kloorimetyyli-17a-etoksikarbonyylioksi-9a-fluori- HB-hydroksi-16B*-metyyliandrosta-l,4-dieeni-3-oni-17β-karboksylaatti 7A-3: kloorimetvyli-17a-etoksikarbonyylioksi-9a-fluori- 113-hydroksi-16a-metyyliandrosta-l,4-dieeni-3-oni-17β-karboksylaatti 7A-4: kloorimetyyli-17a'-etoksikarbonyylioksi-113-hydrok- siandrosta-1,4-dieeni-3-oni-173-karboksylaatti 7A-5: kloorimetyyli-113-hydroksi-17a- isopropoksikarbonyy- lioksi-androsta-1,4-dieeni-3-oni-17 β-karboksylaatti 7A-6: kloorimetyyli-17a-etoksikarbonyylioksi-9a-fluori- 11β-hydroksiandrosta-l,4-dieeni-3-oni-17 β-karboksylaatti 7A-7: kloorimetyyli-9a-fluori-ll3-hy-roksi-17a-isopropok- sikarbonyylioksi-16 a-metyyliandrosta-1,4-dieeni-3-oni-17 β-karboksylaatti 7A-8: kloorimetyyli-9 α-fluori-11 B-hydroksi-17 a-isopropok- sikarbonyylioksi-16B-metyyliandrosta-l,4pdieeni-3-oni-17 β-karboksylaatti 7A-9: kloorimetyyli-11 B-hydroksi-17a-isobutoksikarbonyyli- oksi-androst-4-eeni-3-oni-17 β-karboksylaatti 7A-10: kloorimetyyli-17a-sykloheksyylioksikarbonyylioksi- 113-hydroksiandrost-4-eeni-3-oni-17β-karboksylaatti 7A-11: kloorimetyyli-ll3-hydroksi-17a-propoksikarbonyyli- oksiandrost-4-eeni-3-oni-17β-karboksylaatti 7A-12: kloorimetyyli-9a-fluori-llB-hydroksi-l6a-metyyli- 17a~propooskikarbonyylioksiandrosta-l,4-dieeni-3-oni-17β-karboksylaatti 7A-13: metyyli-ll3-hydroksi-17a-isopropoksikarbonyylioksi- androst-4-eeni-3-oni-17 β-karboksykaatti 7A-14: etoksimetyyli-11B-hydroksi-17a-isopropoksikarbonyy- lioksiandrost-4-eeni-3-oni-17 β-karboksylaatti 7A-15: kloorimetyyli-17a-bentsyylioksikarbonyylioksi-ll3- hydroksiandrost-4-eeni-3-oni-17 β-karboksylaatti 7A-16: l-kloorietyvli-llg-hydroksi-17a-isopropoksikarbo- nyylioksiandrost-4-eeni-3-oni-17 β-karboksylaatti 7A-17: etoksikarbonyylimetyyli-llg-hydroksi-17a-isopropok- si-karbonyyloksiandrost-4-eeni-3-oni-17β-karboksylaatti 7A-18: l-kloorietyyli-9a-fluori-llB-hydroksi-17a- isopro- poksikarbonyylioksi-16 β-metyyliandrosta-l,4-dieeni- 3-oni-17B-karboksylaatti 80 71 748 7A-19: kloorimetyyli-9ci-f luori-17a-isopropoksikarbonyyli- oksi-166-metyyliandrosta-l,4-dieeni-3,ll-dioni-17B~ karboksylaatti 7A-20: kloorimetyy1i-9a-fluori-17a-isopropoksikarbonyyli- oksi-16a-metyyliandrosta-l,4-dieeni-3,ll-dioni-17S-karboksylaatti 7A-21: kloorimetyyli-9a-fluori-llB-hydroksi-17a-metoksi- karbonyylioksi-16a-metyyliandrosta-l,4-dieeni-3-oni-178-karboksylaatti 7A-22: fluorimetyyli-HB-hydroksi-17a-isopropoksikarbonyy- lioksiandrost-4-eeni-3-oni-17B-karboksylaatti 7A-23: kloorimetyyli-9a-fluori-118-hydroksi-16a-metyyli- 17a-pentyylioksikarbonyylioksiandrosta-l,4-dieeni- 3-oni-17B-karboksylaatti 7A-24: kloorimetyyli-16a,17a-di(etoksikarbonyylioksi)-6a- fluori-llB-hydroksiandrosta-l,4-dieeni-3-oni-17B-karboksylaatti 7A-25: fluorimetyyli-17α-etoksikarbonyylioksi-9α-fluori- llB-hydroksi-16a-metyyliandrosta-l,4-dieeni-3-oni-17B_karboksylaatti 7A-26: asetoksimetyyli-17a-etoksikarbonyylioksi-llB_hydrok- siandrost-4-eeni-3-oni-17B-karboksylaatti 7A-27: kloorimetyyli-17a-etoksikarbonyylioksi-6a,9a-difluo- ri-HB-hydroksi-16a-metyyliandrosta-l, 4-dieeni-3-oni-17B_karboksylaatti 7A-28: 2-kloorietyyli-17a-etoksikarbonyylioksi-9a-fluori- llB-hydroksi-16a-metyyliandrosta-l,4-dieeni-3-oni-17B~karboksylaatti 7A-29: metyyli-17a-etoksikarbonyylioksi-9a-fluori-llB- hydroksi-16a-metyyliandrosta-l,4-dieeni-3-oni-17B~ karboksylaatti 7A-30: 2-kloorietyyli-17a-isopropoksikarbonyylioksi-llB~ hydroksiandrost-4-eeni-3-oni-17B-karboksylaatti

II

ei 7174 8

Esimerkki 7B

Seuraamalla esimerkin 3 yleismenetelmää ja korvaamalla siinä sopivilla reagensseilla aikaansaatiin seuraavat yhdisteet: OR,

c=o H3C I

/-U - - - OCOOR-R5 71748 82 5 o° 5 o° 5 o° 5 Ξ ο Φ m 4) m u® ο Φ .0) . <U . CL· O c ^3-(/3 ,—i w no 03 <y\ 03 r- £ CM 00 X SO 00 (M w ^ jg Ji ^ ϋ Λ I \ I \ I \ I \ I O' • fn pL| Cn |Χ( 0 (Λ N « uo ;? UO ►? I/O £ CO ^3

CM Eh . Eh vO Eh . Eh CM

CM ^ O""' t—l "" CO CM ~ 00 00

r-H I—I

j : <t Mf- <t <t -ΐ I r-1 „ _ „ „ «

j r-H I—i r—t I—i r-H

! *τ* τ- ιτί τ- τ-* it* o O y O. ^ Ov ,K O ,ffl U o c_> o o / \ / \ / \ / \ / \

U0 U, U. X k K

OS

<J" Clj fcj [il X fci

OS

co co PO co

co X X X X

es o u u u

I I I X I

a a o a

CO CO

XX r-H

O O o

CO CO CM CM CO CO CM

r /— *7— ►*·< e»-* *t-» **7— cm u G o G u G u OS \ / CM CM \ / Csl

X X X X X

o cj υ ο a

I III I

t-Η u

CM

r—I i H X

i—I O CJ Cti CJ CO

OS CM CM CM CM X

X XXX o

o O O U I

I I I I

Q)

P

CO

r-H CM CO UO

Ό 1 III i X « cq m cq cq >h i— r- r-.

I! 71748 83

•Η -H

G G

rtJ aj ra ra

CO CO I

X Λί a) 0)

-G -G

I I

G G

\ \ -—n. -H Ή e'--' Ή -P -P Ή ' * , .

G -M 4J G -G ice

o° G G G 0° G S PS ^ S

^ J2 0UG S “1 « o° JS 0°^ ’ <J- <H m ^ VO W --1¾ oO 0> M- CL· (¾ to ^ 5 cm3 oo-f’ ° g O- ~ »χ: ω £ * -—i * σν ^ .—e "n r~i L cm-t co i *—ii w '-r ov 'T i T. i en L ' r ro e ic vn I >1 m m ,> CM n1 cm \ lo \ . ^ -£li · > i in ^ t, G g · % sf ti °S ^ fc <ffe COK roi !Λ ^ CO ® N ® CO ill eng Mf g ro Eh CO 9^ >-H ' σ> r—I i—I CM £j, CM (Ν'— i—* ' ' viMfMj· O" Mf Sf M· M· r*M i—( f~H 1—i r—( r—4 .—I (—l

XXX EC EC EC EC ECEC EC EC EC EC EC

CM O ' O O O / O <0/0 EC o \ * \ / \ ' \ - \ ' V - e) u cj o o o u o κ x / x / \ / \ / \ / \

in El, El, El, X X k< EC EC

OS

G" EC K CC EC EC EC Cu b,

OS

en co en en m co

en K K EC EC EC EC

os cj a o x ec ouu

III III

ö a a a οα aa en <n X EC ro

CJ CJ X

CM en en <N O

CM r-v X X r-' CM

os m cm u o cm aa

X x \ / X en en COU

CM o \ec/ CJ X X X cm

CJ — CJ — CJ CJ CJ EC

III I I I I CJ

r-H pH j—H rH r*H rH r-* ·—>

*—i CJ O CJ CJ O CJ U CJ

0C cm CM cm cMcmcMcmcm

XXX X X X EC X

_ cj a cj ucjcjuu

g I I I I I III

G

<u G O H (M ro ^ vO i— ao ers «—f ·—* —I —1

OcäcQfi fflcimmci r—- r~- r~~ γ-.γ-^γ-'Γ^Γ' 84 717 4 8

Yllä olevat yhdisteet voidaan nimittää seuraavasti: 7B-1: kloorimetyyli-17a-isopropoksikarbonyylioksi-6« ,·9α- difluori-ll8-hydroksi-16a-metyyliandrosta-l,4-dieeni- 3-oni-l7β-karboksylaatti 7B-2 : kloorimetyyli-17a-n-propoksikarbonyylioksi-6a, 9a- difluori-11g-hydroksi-16a-metyyliandrosta-1,4-dieeni- 3-oni-l7 g-karboksylaatti 7B-3: fluorimetyyli-17a~n-propoksikarbonyylioksi-9a-fluori- llg-hydroksi-16a-metyyliandrosta-1,4-dieeni-3-oni-17 g-karboksylaatti 7B-4: 2-kloorietyyli-17a-isopropoksikarbonyylioksi-ll8- hydroksi-androsta-1,4-dieeni-3-oni-l7 3-karboksylaatti 7B-5: metyyli-17 a-(2-kloorietoksi)karbonyylioksi-9a-fluori- Ιΐβ-hydroksi-16 a-metyyliandrosta-1,4-dieeni-3-oni-17 β-karboksylaatti 7b-6: kloorimetyyli-17 a-etoksikarbonyylioksi-G a-fluori-113- hydroksi-16 a-metyyliandrosta-1,4-dieeni-3-oni-17 β-karboksylaatti 7B-7: kloorimetyyli-17 a-n-propoksikarbonyylioksi-6 a-fluori- 11 g-hydroksi-16 a-metyyliandrosta-1,4-dieeni-3-oni-173 -karboksylaatti 7b-8: kloorimetyyli-17 a-isopropoksikarbonyylioksi-6 a-f luori- 11B-hydroksi-16α-metyyliandrosta-l,4-dieeni-3-oni-17 8-karboksylaatti 7B-9: kloorimetyyli-17a-n-propoksikarbonyylioksi-118-hydroksi- androsta-1,4-dieeni-3-oni-l7β-karboksylaatti 7B-10: kloorimetyyli-17a-metoksikarbonyylioksi-118-hydroksi- androsta-1,4-dieeni-3-oni-l7 β-karboksylaatti 7B-11: kloorimetyyli-17a-metoksikarbonyylioksi-6a-fluori-113- hydroksi-16a-metyyliandrosta-1,4-dieeni-3-oni-l7 3-karboksylaatti 7b-12: kloorimetyyli-17a-metoksikarbonyylioksi-9a-fluori-113- hydroksi-16 β-metyyliandrosta-l,4-dieeni-4-oni-17 β-karboksylaatti 7B-13: kloorimetyyli-17a-n-Dropoksikarbonyylioksi-9a-fluori-ΙΙβ- hydroksi-16 β-metyyliandrosta-l,4-dieeni-3-oni-l7β-karboksylaatti 71 748 85

Esimerkki 8

Esimerkissä 3 lähtöaineena käytetty llg-hydroksi-17a-metoksi-karbonyylioksiandrosta-4-eeni-3-oni-17B-karboksyylihappo korvattiin yhtä suurella määrällä 11β,17a-dihydroksiandrosta-4-eeni- 3-oni-173-karboksyylihappoa ja tämän esimerkin ensimmäisessä kappaleessa selostettu menetelmä toistettiin olennaisesti. Tällöin saatiin välituote suolana natrium-ΙΙβ, 17'i-dihydroksi-androsta-4-eeni-3-oni-173-karboksylaattia ja lopputuotteena kloorimetyyli-ΙΙβ,17a-dihydroksiandrosta-4-eeni-3-oni-17p-karboksylaattia, joka suli 184-186°C:ssa (uudelleenkiteytet-tiin tetrahydrofuraani-eetteri-heksaanista).

86 7 1 7 4 8

Esimerkki 9

Esimerkin 2 kunkin kappaleen menetelmä toistettiin olennaisesti korvaamalla siinä käytetyt steroidit: kloorimetyyli-11β,17a-dihydroksiandrost-4-eeni-3-oni-176-karboksylaattia metyylitiometyyli-113,17a-dihydroksinadrost-4-eeni-3-oni-178-karboksylaatti yhtä suurella määrällä jotakin alla olevista aineista: Saatiin seuraavat tulehduksenvastaiset kaavan (I) soft-aineet: 0R1 H-C C=0 HO ~ _ °^0R2 h3c N °

Yhdiste n:o ! R, R~ Sp. j ------±----z-----------—-----—-------j 9 A-l CH2C1 CH3 171-17 3°C ? ! o 9 A-2 CH2C1 C2H5 197-200 C (THF/heksaani) t 9 A-3 CH2SCH3 C2H5 137,5-138°C (eetteri/heksaani) 9 A-4 CH2C1 C4Hg 99,5-102°C (THF/heksaani) 9 A-5 CH2C1 iso-C3H7 183,5-184,5°C (THF/heksaani) 9 A-6* CH2CI iso-C4Hg 140-141°C (THF/isopropyyli- eetteri) -- -,------- - 1 __ . _____________ .____„____________ käyttäen isobutyylikloroformiaattia alkyylikloroformiaat-tireagenssina 71 748 87

Esimerkki 10

Kloorimetyyli-118,17a-dihydroksiandrost-4-eeni-3-oni-17B-karboksylaattia (0,01 moolia) liuotettiin tolueeniin (100 ml) ja liuos jäähdytettiin noin 0°C:een. Fosgeenia kupli-tettiin sen jälkeen liuokseen samalla kun reaktioseoksen lämpötila pidettiin alhaisena, kunnes reaktio oli täydellinen (suurin piirtein 2 tuntia). Liuotin ja fosgeeniylimäärä poistettiin haihduttamalla, jolloin saatiin raaka 17:»-kloorikarbonyylioksiyhdiste, jolla on kaava 0CHoCl i 2 H3C j=° HO -0CC1 . I!.f^ 5 f'

..! J

O '

Edellä saatu välituote (0,01 moolia) yhdistettiin sen jälkeen etanolin (0,02 moolia) kanssa, jossa oli 2,6-dimetyyli-pyridiiniä (0,01 moolia) ja annettiin reagoida huoneen lämpötilassa 6 tuntia. Tämän ajan päättyessä eristettiin haluttu kloorimetyyli-17a-etoksikarbonyylioksi-11β-hydroksiand-rost-4-eeni-3-oni-17R-karboksvlaatti reaktioseoksesta. Yhdiste sulaa 197-200°C:ssa kiteytyksen jälkeen.

Korvaamalla edellä käytetty kloorimetyyli-11β,17a-di-hydroksiandrost-4-eeni-3-oni-1 7P-karboksylaatti ekvivalentti-sella määrällä metyylitiometyyli-11β,17«-dihydroksiandrost- 4-eeni-3-oni-1 7 p,-karboksylaattia ja toistamalla olennaisesti edellä oleva menettely, saatiin 1 33-136°C: ssa sulava metyy-litiometyyli-17a-etoksikarbonyylioksi-11β-hydroksiandrost- 4-eeni-3-oni-17β-karboksylaatti kiteytyksen jälkeen. Tämä yhdiste voidaan sen jälkeen haluttaessa muuntaa vastaavaksi sulfonyyli- tai sulfinyyliyhdisteeksi, kuten esimerkissä 4 on selostettu.

88

Esimerkki 11 71748

Esimerkin 10 ensimmäisen kappaleen menettely toistettiin, paitsi että kloorimetyyli-118,17a-dihydroksinadrost-4-eeni- 3-oni-178-karboksylaatin sijasta käytettiin ekvivalenttinen määrä 118,17a-dihydroksiandrost-4-eeni-3-oni-17B-karboksyy-lihappoa. Siten saadulla raa'alla välituotteella oli kaava

OH

C=0 Välituote saatettiin sen jälkeen alttiiksi esimerkin 12 toisessa kappaleessa selostetulle menettelylle, jolloin saatiin 17a-etoksikarbonyylioksi-118-hydroksiandrost-4-eeni-3-oni-17(3-karboksyylihappoa, joka oli identtinen esimerkin 2, kappaleen 2 tuotteen kanssa.

Esimerkki 12

Kloorimetyyli-118,17a-dihydroksiandrost-4-eeni-3-oni-l78-karboksylaattia (0,02 moolia) yhdistettiin dietyylikarbo-naatin (0,2 moolia) kanssa, jossa oli 20 mg p-tolueenisulfo-nihappoa. Reaktioseostapidettiin huoneen lämpötilassa 4 tuntia, kuumennettiin sen jälkeen noin 80-85°C:een ja muodostunut jäljellä oleva etanoli poistettiin tislaamalla alennetussa paineessa. Jäännöksenä saatiin raakaa kloorime-tyyli-17a-etoksikarbonyylioksi-HB-hydroksiandrost-4~eeni- 3-oni-178-karboksylaattia, joka kiteytyksen jälkeen suli 197-200°C:ssa.

Korvaamalla yllä käytetty kloorimetyyli-ΙΙβ,17a-dihydroksi- 39 71 74 8 androst-4-eeni-3-oni-17[3-karboksylaatti ekvivalentti se 11a määrällä metyylitiometyyli-ΙΙβ,17a-dihydroksiandrost-4-eeni-3-oni-173-karboksylaattia ja toistamalla olennaisesti edellä oleva menettelytapa, saatiin metyyliotiometyyli-17a-etoksikarbonyylioksi-113“hydroksiandrost-4-eeni-3-oni-173-karboksylaattia, joka suli 133-136°C:ssa. Tämä yhdiste voidaan sen jälkeen haluttaessa muuttaa vastaavaksi sulfo-nyyli- tai sulfinyyliyhdisteeksi, kuten esimerkissä 4 on selostettu.

Muita edustavia yhdisteitä, esim. esimerkin 3, kappaleiden 1, 3, 4 ja 5 yhdisteet ja esimerkin 7A yhdisteet voidaan valmistaa seuraavalla tavalla saattamalla vastaava 17a-hydroksi-173~karboksylaatti reagoimaan sopivien karbonaattien kanssa, jotka ovat tyyppiä R^OCOR- (ja liittäen ^11 * o tähän sopivassa tapauksessa jälkikäsittely m-klooriperoksi-bentsoehapolla kuten esimerkissä 4).

Esimerkki 13

Liuokseen, jossa oli 8,7 g 11$,17a-dihydroksinadrost-4-eeni-3-oni-178~karboksyylihappoa ja 9,6 ml trietyyliamii-nia 100 ml:ssa kuivaa dikloorimetaania, lisättiin 10 g etyylikloroformiaattia tipottain 0-5°C:ssa. Reaktioseoksen annettiin asteettaan lämmetä huoneen lämpötilaan ja liukenematon jäännös poistettiin suodattamalla. Suodate pestiin peräkkäin 3 %:sella natriumbikarbonaatin vesiliuoksella, 1 %:sella suolahapolla ja vedellä sekä kuivattiin sen jälkeen vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Liuotin väkevöi-tiin alennetussa paineessa ja jäännös kiteytettiin, jolloin saatiin 10,5 g etoksikarbonyyli-17a-etoksikarbonyylioksi-118-hydroksiandrost-4-eeni-3-oni-173-karboksylaattia, sp. 158-159°C.

Esimerkki 14

Seuraamalla esimerkissä 13 selostettua yleismenetelmää ja korvaamalla siinä sopivilla reagensseilla, saadaan seuraa-vat lisäyhdisteet: 90 g 71748 o-c-or2 H-C f=0 n HO -OCOR2 H3C __J R3 T *4 R5

Yhdiste R~ r, rT r" Γδ sTp~.

n: o z J 4 -5 14 -A -CH2CH3 H F H 4 110-111°C (THF/ isopropyy1ieet-teri)

14 -B iso-C3H7 H H H 4 200-203°C

! -------------—, 14 -c -CH2CH2CH3 H H H 4 142-143°C (THF) |

Esimerkki 1 5

Liuokseen, jossa oli 9,8 g etoksikarbonyyli-17a-etoksikar-bonyylioksi-ΙΙβ-hydroksiandrost-4-eeni-3-oni-178-karboksy-laattia 100 ml:ssa tetrahydrofuraania ja 120 ml:ssa etanolia, lisättiin 42 ml natriumbikarbonaatin 5 %:sta vesiliuosta. Seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa noin 30 tuntia ja pH säädettiin arvoon 2-3 lisäämällä 1-N suolahappoa. Liukenematon aine erotettiin suodattamalla. Uudelleenkiteyt-tämällä tetrahydrofuraanin ja npheksaanin seoksesta saatiin 6 g 17a-etoksikarbonyylioksi-118-hydroksiandrosta-4-eeni- 3-οηί-17β-karboksyylihappoa, jonka sp. oli 192-195°C.

Esimerkin 2 ensimmäisessä kappaleessa saatua yhdistettä ja esimerkin 6A yhdisteitä voidaan valmistaa samalla tavalla kuin yllä on selostettu ja korvaamalla siinä sopivilla rea-gensseilla.

Esimerkki 16

Seuraamalla esimerkissä 15 selostettua yleistä menetelmää, 91 71748 ja korvaamalla siinä sopivilla reagensseilla saatiin seu-raavat yhdisteet:

COOH HoC I

- - OCOR \ | O

^3^1_

Yhdiste n:o R Sulamispiste -A ^ CH, 144,5-146,5°C (THF/heksaani)

-CH J

^ch3 16-B -(CH2)3CH3j 164-166°C (THF/heksaani) __L_____i_______________

Esimerkki 17

Liuokseen, jossa oli 8,7 g 11β,17a-dihydroksiandrost-4-eeni-3-oni-178-karboksyylihappoa ja 10 g trietyyliamiinia 100 mlzssa dikloorimetaania, lisättiin liuosta, jossa oli 13,2 g n-propyylikloroformiaattia 20 ml:ssa dikloorimetaania tipottain 1-1,5 tunnin aikana jäähdyttäen jäillä. Reak-tioseoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan 2 tunnin aikana ja pestiin sen jälkeen peräkkäin natriumbikarbonaatin 3 %:sella vesiliuoksella, 1-N suolahapolla ja vedellä ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin vä-kevöitiin alennetussa paineessa. Kiteyttämällä eeterin ja n-heksaanin seoksesta saatiin 10,5 g propoksikarbonyyli-116-hydroksi-17a-propoksikarbonyylioksiandrost-4-eeni-3-oni-17$-karboksylaattia, joka liuotettiin 40 ml:aan pyri-diiniä. Tähän liuokseen lisättiin 300 ml vettä tipottain 1-1,5 tunnin aikana. Seosta sekoitettiin tunnin ajan ja pH säädettiin arvoon 2-2,5 lisäämällä väkevöityä suolahappoa ja jäähdyttäen jäillä. Seos uutettiin sen jälkeen kloro- 92 71748 formilla, pestiin peräkkäin 1-N suolahapolla ja vedellä ja kuivattiin natriumsulfaatilla. Liuotin väkevöitiin alennetussa paineessa ja jäännös uudelleenkityetettiin asetonin ja tetrahydrofuraanin seoksesta, jolloin saatiin 7,7 g llg-hydroksi-17a-propoksikarbonyylioksiandrost-4-eeni-3-oni-17g-karboksyylihappoa, sp. 156-157°C.

Esimerkki 18

Kloorimetyyli-17a-etoksik.arbonyylioksi-9a-f luori-llg -hydroksi-16a-metyyliandrosta-l,4-dieeni-3-oni-176-karbok-sylaattia (2 g) liuotettiin vedettömään dikloorimetaaniin (200 ml) ja pyridiniumklorokromaattia (3,5 g) lisättiin huoneen lämpötilassa sekoittaen. Saatua seosta sekoitettiin 24 tuntia ja sen jälkeen liuotin väkevöitiin alennetussa paineessa noin 10-20°C:ssa. Jäännös saatettiin alttiiksi kolonnikromatovrafiälle piigeelillä (Kieselgeeli 60) käyttäen kloroformia eluoivana liuottimena, minkä jälkeen uudelleenkiteytettiin tetrahydrofuraanin ja isopropyylieet-terin seoksesta kloorimetyyli-17a-etoksikarbonyylioksi-9a-fluori-16a-metyyliandrosta-l,4-dieeni-3,ll-dioni-17g-karboksylaatin aikaansaamiseksi 1,7 g:an saantona, sp. 138-140°C.

Esimerkki 1 9

Samalla tavoin kuin esimerkissä 18 saatiin kloorimetyyli-9a-fluori-17a-isopropoksikarbonyylioksi-16g-metyyliandros-ta l,4-dieeni-3,ll-dioni-17g-karboksylaattia, sp. 200-201°C.

Esimerkki 20

Esimerkin 3 yleisellä menetelmällä, mutta korvaamalla sopivilla reagensseilla, saatiin metyyli-17u-(2-kloorietok-si)karbonyylioksi-9a-fluori-llg-hydroksi-16a-metyyliandrosta- 93 71748 1.4- dieeni-3-oni-17B-karboksylaattia. Tämä tuote sulaa iso-propanolista suoritetun uudelleenkiteyttämisen jälkeen 223-227°C:ssa.

Esimerkki 21

Samoin kuin esimerkissä 3 saadaan 2-kloorietyyli-17a-etok-sikarbonyylioksi-9a-f luori-llB-hydroksi-16ot-metyyliandrosta- 1.4- dieeni-3-oni-17B-karboksylaattia. Tämä tuote sulaa uudelleenkiteytyksen jälkeen tetrahydrofuraani-heksaanista 24 3-24 5°C:ssa.

Esimerkki 22

Kloorimetyyli-17a-etoksikarbonyylioksi-llB-hydroksiandrost- 4-eeni-3-oni-17B-karboksylaattia (0,01 moolia) ja 1,2-di-metyylipyrrolidiinia (0,01 moolia) liuotettiin asetonitrii-liin (80 ml) ja kuumennettiin refluksointilämpötilaan. Reak-tioseosta pidettiin tässä lämpötilassa sekoittaen noin 4 tuntia. Noin 65 ml asetonitriiliä poistettiin, sen jälkeen seos jäähdytettiin huoneen lämpötilaan ja ylimäärä etyyli-eetteriä lisättiin saostuksen aikaansaamiseksi. Sakka erotettiin suodattamalla, pestiin ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin haluttu kvaternäärinen ammoniumsuola, jolla on kaava

H,C

3\ /—I

OCH-,N+ Cl-

V

h3c f ° ch3 HO - ' °?OC2H5 0

Samalla tavoin saatiin käyttämällä sopivia steroidisia ja amiinilähtöaineita edellä olevissa yleisissä menettelytavoissa, seuraavat keksinnön mukaiset kvaternääriset ammonium-suolat 94 + ^ 7174 8 QCH„N Cl- I 2 ^ h c --°^0R2 I o *3?L J[_ N ~ CH^ H0C( 7 3 3 nn -/ CH3 i-C3H7 N(C2H5)3 C4H9 H3Cx/“ C2H5 H3Cs^ c2h5 Ny/ z 3 N-<^OCOCH3 c2h5 N(C2H5)3 C H H C ^ vn y u 95 71 748

Esimerkki 23

Liuokseen, jossa oli 3 g kloorimetyyli-ll0-hydroksi-17c<-isopropoksikarbonyylioksiandrost-4-eeni-3-oni-17 t3-karboksy-laattia 100 ml:ssa asetonitriiliä, lisättiin 7,9 g (10-ker-tainen mooliylimäärä) AgF ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 12 päivän aikana samalla kun reaktiosysteemi suojattiin valolta. Tämän jälkeen reaktioseos suodatettiin ja suodattimena oleva kiinteä aine pestiin huolellisesti etyyliasetaatilla. Suodate ja etyyliasetaattiliuos yhdistettiin ja seos pestiin vedellä ja kyllästetyllä natriumklori-din vesiliuoksella sekä kuivattiin vedettömällä natriumsul-faatilla. Liuottimet poistettiin tislaamalla, jolloin saatiin 2 g raakaa kiteistä tuotetta. Tuotteelle suoritettiin preparatiivinen ohutkerroskromatografointi (Silica Gel 60F254, Merck) käyttäen eluointiliuottimena kloroformin ja metanolin seosta (15:1). Tämän jälkeen tuote uudelleenki-teytettiin tetrahydrofuraanin ja n-heksaanin seoksesta, jolloin saatiin 180 mg fluorimetyyli-ll£5-hydroksi-17a-iso-propoksikarbonyylioksiandrost-4-eeni-3-oni-176-karboksy-laattia värittöminä neulasina, sp. 207,5-210°C.

Esimerkki 24

Seuraamalla esimerkin 23 yleistä menetelmää ja korvaamalla siinä sopivilla reagensseilla saatiin seuraavat yhdisteet: C=0 h3c

Jv----OCOOR

» R5 96 717 4 8

Yhdiste R. R~ R-, R. Rr Z Δ s.p.

n:o 1_2___4 5__

s /0H

24-1 -CH0F -C~H,- α-CH, F H C. 1,4 239-240,5°C

2 2 b 3 / M (THF/heksaani)

24-2 -CH_F -CH-CH^CH^ α-CH- F H cC 1,4 165-165,5°C

2 2 2 J 3 ' 'h (THF/heksaani)

Yllä olevat yhdisteet voidaan nimittää seuraavasti: 24-1: fluorimetyyli-17a-etoksikarbonyylioksi-9a-fluori-llB-hydroksi-16a-metyyliandrosta-l,4-dieeni-3-oni-173~ karboksylaatti 24-2: fluorimetyyli-17a-n-propoksikarbonyylioksi-9a-fluori-116-hydroksi-16a-metyy.liandrosta-l, 4-dieeni-3-oni-173-karboksylaatti

(I

97 71 748

Esimerkki 25

Seuraamalla esimerkin 3 yleistä menetelmää ja korvaamalla siinä sopivilla reagensseilla saatiin seuraavat yhdisteet: 0R1 I 1 H3cc=0 R5

Yhdiste R2 R^ R4 R^ Z Λ s.p.

n:o

“OH

\ / o

25-1 -CH0C1 -CH. α-CH, H Cl C 1 ,4 240-243 C

2 3 3 / \

H

- ^ x /

25-2 -CH0C1 -CH_ a-CH, Cl H Cv 1 ,4 254,257 C

2 3 3 / \

H

Ylläolevat yhdisteet voidaan nimittää seuraavasti: 25—1; Kloorimetyyli-6a-kloori-116-hydroksi-16a-metyyli-17 α-metyy1ioks ikarbonyy1ioks i-3-oksoandrosta-1,4-dieeni-17 B-karboksylaatti 25-2: Kloorimetyyli-9a-kloori-116-hydroksi-16a-metyyli- 17α-metyylioksikarbonyy1ioksi-3-oksoandrosta-1,4-dieeni-17 B-karboksylaatti

Claims (2)

7 Λ 7 Λ ft Patenttivaatimukset ' ' ^ υ

1. Menetelmä terapeuttisesti aktiivisen yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava 0R1 c=o P ?3c JL__OCOR «td·. XXy i k5 jossa R. j on -Cg-alkyyli, yhdellä tai useammalla halogeenilla substituoitu C1-C^-alkyyli tai -CH2COOR6, jossa R^ on -Cg-alkyyli, tai R^ on -CH2~Y-(C^-C^-alkyyli), jossa Y on S, SO, S09 0 tai 0, tai R^ on -CH2-0CRg, jossa R^ on -C^-alkyyli; R2 on -Cg-alkyyli, C^-Cg-sykloalkyyli, bentsyyli tai yhdellä tai useammalla halogeenilla substituoitu C^-C^-alkyyli; g Rg on vety, a-metyyli, β-metyyli tai a- tai 3-OCOR2, jossa R2 tarkoittaa samaa kuin edellä; R^ on vety, fluori tai kloori; Rg on vety, fluori tai kloori; Z on karbonyyli tai β-hydroksimetyleeni; ja katkoviiva renkaassa A tarkoittaa, että 1,2-sidos on tyydyttynyt tai tyydyttämätön; ja sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen kvaternäärisen ammoniumsuolan valmistamiseksi, jossa ainakin yksi ryhmistä R^ ja R2 on halogeenisubstituoitu alkyyliryhmä, tunnet-t u siitä, että a) yhdiste, jolla on kaava li 71748 OM C=0 U u p M ~ - OCOR2 H,C j __I κ3 (IV) ^ ^ I R5 jossa R2/ · ^4' ^5' 2 ja katkoviiva renkaassa A tarkoit tavat samaa kuin kaavassa I, ja M on alkalimetalli, maa-alkalimetalli/2, tallium tai NH^ , saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava R.,Wf jossa R^ tarkoittaa samaa kuin kaavassa I ja W on halogeeni, ja haluttaessa hapetetaan saatu yhdiste, jossa R^ on rikkiä sisältävä ryhmä, vastaavaksi yhdisteeksi, jossa R^ on sulfinyyliä tai sulfonyyliä sisältävä ryhmä, ja haluttaessa pelkistetään saatu yhdiste, jossa Z on karbonyyli, vastaavaksi yhdisteeksi, jossa Z on 11-hydroksimetyleeni, tai b) yhdiste, jolla on kaava P H3C I H3C J, R3 ^' i t R5 71 748 jossa R^/ R^, R5, Z ja katkoviiva renkaassa A tarkoittavat samaa kuin kaavassa I ja P on -COC1 ja Q on -OCOOR2 tai P on -COOR.J ja Q on -OCOC1, saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava R7OM' jossa M' on vety, alkalimetalli, maa-alkalimetalli/2, tal-lium tai NH^, ja R^ on R.| , kun P on -COC1 ja Q on -OCOOR2, tai R^ on R2, kun P on -COOR^ ja Q on -OCOC1, ja haluttaessa hapetetaan saatu yhdiste, jossa R^ on rikkiä sisältävä ryhmä, vastaavaksi yhdisteeksi, jossa R^ on sulfinyyliä tai sulfonyyliä sisältävä ryhmä, ja haluttaessa pelkistetään saatu yhdiste, jossa Z on karbonyyli, vastaavaksi yhdisteeksi, jossa Z on 11β-hydroksimetyleeni, tai c) yhdiste, jolla on kaava H,C =-° --0H z IYR ' (VI) R„ i R5 jossa R^, R^, R^, Z ja katkoviiva renkaassa A tarkoittavat samaa kuin kaavassa I, ja R^' on vety, a-metyyli, β-metyyli, a-OH tai β-ΟΗ, saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava O li R20C0X' tai R2OCOR2 I! joissa R2 tarkoittaa samaa kuin kaavassa I ja X' on kloori 71748 tai bromi, ja haluttaessa hapetetaan saatu yhdiste, jossa on rikkiä sisältävä ryhmä, vastaavaksi yhdisteeksi, jossa on sulfinyyliä tai sulfonyyliä sisältävä ryhmä, ja haluttaessa pelkistetään saatu yhdiste, jossa Z on karbonyyli, vastaavaksi yhdisteeksi, jossa Z on 11β-hydr-oksimetyleeni, ja haluttaessa saatetaan menetelmällä a), b) tai c) saatu yhdiste, jossa ainakin toinen ryhmistä R^ ja R2 on halogeenisubstituoitu alkyyliryhmä, reagoimaan tertiäärisen amiinin tai tyydyttymättömän amiinin kanssa.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kloorimetyyli-17a-etoksikarbonyylioksi-9a-fluori-113-hydroksi-16a-metyyli-androsta-1,4-dien-3-oni-17 β-karboksylaatti. 71 748