ES2879329T3 - Dipéptido imidazol para el tratamiento de la demencia debida al envejecimiento o la atrofia cerebral - Google Patents

Dipéptido imidazol para el tratamiento de la demencia debida al envejecimiento o la atrofia cerebral Download PDF

Info

Publication number
ES2879329T3
ES2879329T3 ES15768816T ES15768816T ES2879329T3 ES 2879329 T3 ES2879329 T3 ES 2879329T3 ES 15768816 T ES15768816 T ES 15768816T ES 15768816 T ES15768816 T ES 15768816T ES 2879329 T3 ES2879329 T3 ES 2879329T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
agent
test
present disclosure
aging
group
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES15768816T
Other languages
English (en)
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Kyushu University NUC
National Center of Neurology and Psychiatry
University of Tokyo NUC
NH Foods Ltd
Original Assignee
Kyushu University NUC
National Center of Neurology and Psychiatry
University of Tokyo NUC
NH Foods Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Kyushu University NUC, National Center of Neurology and Psychiatry, University of Tokyo NUC, NH Foods Ltd filed Critical Kyushu University NUC
Application granted granted Critical
Publication of ES2879329T3 publication Critical patent/ES2879329T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/05—Dipeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
    • A23L33/18—Peptides; Protein hydrolysates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/30—Dietetic or nutritional methods, e.g. for losing weight
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
    • A61K31/198—Alpha-amino acids, e.g. alanine or edetic acid [EDTA]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4172—Imidazole-alkanecarboxylic acids, e.g. histidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/22—Anxiolytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
    • C12Q1/37—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase involving peptidase or proteinase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
    • C12Y304/13—Dipeptidases (3.4.13)
    • C12Y304/1302—Beta-Ala-His dipeptidase (3.4.13.20)
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
    • G01N33/6896—Neurological disorders, e.g. Alzheimer's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/158—Expression markers
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/81—Protease inhibitors
    • G01N2333/8103—Exopeptidase (E.C. 3.4.11-19) inhibitors
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
    • G01N2333/914—Hydrolases (3)
    • G01N2333/948—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value
    • G01N2500/20—Screening for compounds of potential therapeutic value cell-free systems
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/28—Neurological disorders
    • G01N2800/2814—Dementia; Cognitive disorders
    • G01N2800/2821—Alzheimer
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/52—Predicting or monitoring the response to treatment, e.g. for selection of therapy based on assay results in personalised medicine; Prognosis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Pathology (AREA)

Abstract

Un agente para su uso en la prevención de la aparición de la demencia debida al envejecimiento, que contiene al menos un dipéptido imidazol.

Description

DESCRIPCIÓN
Dipéptido imidazol para el tratamiento de la demencia debida al envejecimiento o la atrofia cerebral
Campo técnico
La presente invención queda definida por las reivindicaciones. La presente divulgación se refiere, en general, a un agente que utiliza como principio activo al menos uno seleccionado del grupo que consiste en un dipéptido imidazol y un metabolito del mismo. El agente de la presente divulgación puede utilizarse para la mejora de la función cognitiva, la mejora de la función mental, contra el envejecimiento y para el mantenimiento de la salud. La presente divulgación es útil en los campos de la alimentación común, los alimentos saludables, los fármacos, la belleza, la salud y la medicina.
Antecedentes de la técnica
La carnosina es un dipéptido que consiste en p-alanina e histidina, y la anserina es un dipéptido que consiste en palanina e histidina metilada. Se sabe que ambas están contenidas en el pollo, etc. La carnosina y la anserina se han investigado por sus acciones para el estímulo del metabolismo de la piel (Documento de patente 1), el control de los nervios autónomos (Documento de patente 2) y el alivio del estrés (Documento de patente 3), así como la mejora del aprendizaje y contra la ansiedad (Documento de patente 4).
En los últimos años, los factores para vivir mucho tiempo manteniendo la salud, tales como la prevención de enfermedades que acompañan al envejecimiento y el fortalecimiento de la actividad inmunitaria, han generado un creciente interés. En muchos casos, el envejecimiento va acompañado en cierta medida por una disminución de la función cognitiva. La disminución de la función cognitiva también está provocada por la aparición o la progresión de la enfermedad de Alzheimer.
Referencias de la técnica anterior
Documentos de patente
Documento de patente 1: Publicación de patente japonesa no examinada (Kokai) N.° 2000-201649
Documento de patente 2: Documento W02002/076455
Documento de patente 3: Publicación de patente japonesa no examinada (Kokai) N.° 2007-70316
Documento de patente 4: Publicación de patente japonesa no examinada (Kokai) N.° 2000-116987
Sumario de la invención
Objeto a lograr mediante la invención
Es conveniente retrasar la progresión del envejecimiento en la vida diaria con alimentos adecuados, ejercicios, psicoterapias, etc., y tratar las enfermedades que acompañan al envejecimiento en una fase temprana.
Los alimentos son fuentes de energía y fuentes de nutrientes esenciales (nutrición) y, además, también proporcionan el placer de comer (preferencia) y contribuyen a una vida sana (funcionalidad). Se espera que los alimentos y los productos que contienen ingredientes funcionales procedentes de alimentos sean útiles para la salud o la belleza, y son general y ampliamente aceptados como alimentos saludables, etc. Se considera que se prefiere el uso de productos naturales ya consumidos habitualmente también desde el punto de vista de seguridad y no ansiedad.
Medios para lograr el objeto
Los inventores de la presente invención han trabajado en la investigación y en desarrollos de alimentos y materiales útiles para la salud utilizando productos naturales. En este proceso, descubrieron recientemente que la carnosina y la anserina procedentes del pollo tenían una acción de mejora de la función mental, etc., y consiguieron la presente invención. La presente invención proporciona lo siguiente.
[1] Un agente para su uso en la prevención de la aparición de la demencia debida al envejecimiento, que contiene al menos un dipéptido imidazol.
[2] Un agente para su uso en la supresión de una atrofia cerebral, que contiene al menos un dipéptido imidazol.
[3] El agente para el uso de acuerdo con [1] o [2], en donde el agente es para la ingestión de 200 mg o más, como dosis diaria, del al menos un dipéptido imidazol.
[4] El agente para el uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones [1] a [3], en donde al menos un tipo del dipéptido imidazol procede del pollo.
[5] El agente para el uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones [1] a [4], que además contiene creatina y un ácido nucleico.
[6] El agente para el uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones [1] a [5], que es para un anciano o una persona con un ligero trastorno del estado de ánimo.
Breve descripción de los dibujos
[Fig. 1] Resultados de una prueba de función mental (prueba BDI (forma siglada de The Beck Depression Inventory, El inventario de depresión de Beck)
[Fig. 2] Resultados de una prueba de función mental (prueba ADAS-cog para la evaluación del envejecimiento del cerebro): se indican las proporciones de con mejora, sin cambios y con degradación.
[Fig. 3-1] Partes del cerebro (sustancia gris) en las que se mejoró la atrofia mediante la ingestión de un dipéptido imidazol: las partes que mostraron p < 0,005 se indican como partes coloreadas.
[Fig. 3-2] Partes del cerebro (sustancia blanca) en las que se mejoró la atrofia mediante la ingestión de un dipéptido imidazol
[Fig. 4] Mejora de la función de los circuitos neuronales proporcionada por la ingestión de un dipéptido imidazol: aunque la función de los circuitos neurales del hipocampo y la circunvolución del cíngulo posterior disminuye en relación con el envejecimiento (izquierda), esta disminución de la función mejoró en el grupo de ingestión de la dieta de prueba después de la ingestión (parte derecha).
[Fig. 5] Genes cuya expresión cambió por la ingestión de un dipéptido imidazol: los niveles de expresión génica de 6 genes pertenecientes a SLC (forma siglada de solute carrier) (transportador) cambiaron significativamente con la ingestión de la dieta de prueba en comparación con los observados con la ingestión de alimento de placebo. Además, también se descubrió que los niveles de expresión de los otros genes mostrados en el gráfico, que incluyen genes de quimiocinas, también cambiaron.
[Fig. 6] Citocinas y quimiocinas en sangre cuyas expresiones cambiaron por la ingestión de un dipéptido imidazol: los resultados se muestran con el promedio ± DT, los resultados del grupo de ingestión de la dieta de prueba se indican con líneas continuas, los resultados del grupo de ingestión de la dieta de placebo se indican con líneas discontinuas, y los resultados de la prueba de la t para datos emparejados se indican con * (p <0,05) y ** (p < 0,01).
[Fig. 7] Disminución de la glucemia proporcionada por la ingestión de un dipéptido imidazol
[Fig. 8-1] Disminución de las citocinas en sangre en el modelo de ratón con demencia: en un grupo de dieta que contiene carnosina, las citocinas disminuyeron y se sugiere que se suprimió la inflamación. El símbolo ts significa tipo silvestre, tg significa transgénico, * para p < 0,05, ** para p < 0,01 (prueba de Dunnett frente a tgDAG), # para p <0,05 y ## para p <0,01 (prueba de la t de Student).
[Fig. 8-2] Supresión de la reacción inflamatoria intracerebral en un modelo de ratón con demencia (imágenes de RMN de ratón): se observó la supresión de la inflamación proporcionada por la ingestión de un dipéptido imidazol.
[Fig. 8-3] Supresión de la expresión de genes transportadores de g AbA en gliocitos proporcionada por la ingestión de dipéptidos altamente funcionales: Slc6A13 es el Transportador de GABA 2 (GAT-2) que se expresa en astrocitos, y Slc6A12 es el Transportador de Betaína/GABA 1 que se expresa en astrocitos (BGT-1).
[Fig. 8-4] Niveles de insulina en sangre en ratones: entre los valores del grupo de dieta alta en grasa de enfermedad de Alzheimer (EA) y el grupo de dieta alta en grasas carnosina de EA, se observó una diferencia significativa (prueba de la t de Student, p <0,05).
[Fig. 9] Análisis MEA (en inglés: ASL: arterial spin labelling, marcaje de espín arterial)
[Fig. 10] Partes para las que se observaron diferencias entre ambos grupos en el análisis de MEA (circunvolución del cíngulo posterior)
[Fig. 11] Puntuaciones de memoria lógica II (resultados de subanálisis de personas de 60 años o mayores): hubo diferencia significativa entre ambos grupos (p < 0,01). La dificultad de la prueba realizada después de la ingestión fue mucho mayor que la de la prueba realizada antes de la ingestión.
[Fig. 12] Puntuaciones de memoria lógica II (resultados de subanálisis de personas de 60 años o mayores): en el grupo de dieta de prueba, la función no se degradó en ninguna de las edades, mientras que hubo una tendencia a que se observara una hipofunción más fuerte para la edad más alta en el grupo de la dieta de placebo.
Modos para llevar a cabo la divulgación
[Principio activo]
La presente divulgación se refiere a un agente que utiliza como principio activo al menos uno seleccionado del grupo que consiste en un dipéptido imidazol y un metabolito del mismo. La expresión dipéptido imidazol utilizada en la presente memoria descriptiva se refiere a un dipéptido que consiste en un aminoácido que tiene un anillo de imidazol, y otro aminoácido, unidos entre sí, a menos que se mencione especialmente.
El dipéptido imidazol como se usa en el presente documento se puede representar mediante la siguiente fórmula I o II.
[Fórmula 3]
Figure imgf000004_0001
Fórmula I
[Fórmula 4]
Figure imgf000004_0002
En las fórmulas I y II, R1, R2 y R3 son independientemente H o alquilo C1-6, y X es H o -COR4, en donde R4 es H, un alquilo C1-6, bencilo que puede estar sustituido, o H2C=CH-.
En la Fórmula I, se prefiere que uno de R1 y R2 sea un alquilo C1-6, y el otro sea H. En la fórmula II, se prefiere que uno de R2 y R3 sea un alquilo C1-6, y el otro sea H. Uno de los ejemplos preferidos de alquilo C1-6 es metilo.
Los ejemplos específicos de -COR4 como X incluye formilo, acetilo, propionilo, benzoílo y acriloílo.
En cuanto a los métodos para la producción de los compuestos representados por la fórmula I o II, se puede hacer referencia a la Publicación de patente japonesa no examinada (Kohyo) N.° 2003-520221, la Publicación de patente japonesa no examinada (Kokai) N.° 2006-232686, la Publicación de patente japonesa no examinada (Kohyo) N.° 2006­ 504701,2008-517911,2009-512459, la Publicación de patente japonesa no examinada (Kokai) N.° 2010-31004, 2011­ 37891,2011-37892,2013-165728, 2014-12735.
La carnosina, la balenina y la homocarnosina, están incluidas en el alcance del dipéptido imidazol. La carnosina es un dipéptido que consiste en p-alanina e histidina. Dependiendo de la conformación de la histidina constituyente, la carnosina existe como isómero L o isómero D. En la presente divulgación y en sus explicaciones, cuando solo se utiliza el término "carnosina", se refiere a L-carnosina, a D-carnosina, o a una mezcla de ellas, a menos que se indique especialmente. Se sabe que la L-carnosina existe en el tejido muscular y nervioso de mamíferos, tales como seres humanos, a concentraciones comparativamente altas.
La estructura de la L-carnosina (nomenclatura de la IUPAC: (ácido (2S)-2-[(3-amino-1-oxopropil)amino]-3-3H-imidazol-4-il)propanoico) se muestra a continuación.
[Fórmula 5]
Figure imgf000005_0001
La L-Anserina, que consiste en p-alanina e histidina metilada, se observa abundantemente en algunos animales. En la presente divulgación y en sus explicaciones, cuando solo se utiliza el término "anserina", se refiere a L-anserina, a D-anserina, o a una mezcla de ellas, a menos que se indique especialmente. La estructura de la L-anserina (nomenclatura de la IUPAC: ácido (2S)-2-[(3-amino-1-oxopropil)amino]-3-(3-metil-4-imidazolil)propanoico) se muestra a continuación.
[Fórmula 6]
Figure imgf000005_0002
Tanto la carnosina como la anserina son solubles en agua (1 g/3,1 ml a 25 °C para la carnosina).
La expresión metabolito de dipéptido imidazol utilizada en la presente memoria descriptiva, se refiere a un tipo de metabolito seleccionado del grupo que consiste en metabolitos de carnosina, anserina, balenina y homocarnosina, a menos que se indique especialmente. La p-alanina, la histidina, la histidina metilada y el ácido Y-aminobutírico (GABA), están incluidos en el alcance del metabolito de dipéptido imidazol.
La expresión "al menos uno seleccionado del grupo que consiste en un dipéptido imidazol y un metabolito del mismo" utilizada en la presente divulgación, se usa para referirse a uno o dos o más tipos de dipéptidos imidazol, metabolitos de los mismos, o ambos, a menos que se indique especialmente. Por ejemplo, la expresión "contener al menos uno seleccionado del grupo que consiste en un dipéptido imidazol y un metabolito del mismo como principio activo" significa, por ejemplo, contener carnosina como principio activo, pero no contener ningún otro de los dipéptidos imidazol, contener carnosina y anserina como principios activos, o similares. Cuando se hace referencia a la cantidad o concentración para "al menos uno seleccionado del grupo que consiste en un dipéptido imidazol y un metabolito del mismo", y hay dos o más tipos de dipéptidos imidazol, metabolitos de los mismos, o ambos, la cantidad o concentración se refiere a la cantidad o concentración total de todos los dipéptidos imidazol, metabolitos de los mismos, o ambos. Aunque en la presente memoria descriptiva puede hacerse una explicación para una realización que utilice un péptido imidazol, o carnosina o anserina entre los dipéptidos imidazol y metabolitos de los mismos, tal explicación también se aplica a implementaciones que utilizan otro dipéptido imidazol o un metabolito del mismo.
En la presente divulgación, el dipéptido imidazol y un metabolito del mismo usados como principio activo pueden ser uno sintetizado o uno producido por fermentación, o uno obtenido a partir de un producto natural. Pueden ser uno aislado o uno purificado. Más concretamente, el dipéptido imidazol y un metabolito del mismo pueden ser uno procedente de cualquiera de diversos animales tales como bovinos, equinos, porcinos, aves de corral, ballena y pez (tal como bonito, atún y anguila). Uno de los ejemplos preferidos es uno procedente del pollo. El dipéptido imidazol o un metabolito del mismo puede estar contenido en el agente como extracto, concentrado, producto poco purificado, o similar, de un producto natural.
[Uso y función]
El agente de la presente divulgación puede utilizarse para la mejora de una función neurofisiológica. La mejora de una función neuropsicológica incluye la antidepresiva (mejora de la función mental) y la mejora de la función cognitiva. La mejora de una función neuropsicológica también incluye la supresión de la atrofia cerebral, la supresión de la hipofunción cerebral (potenciación de la conectividad funcional con el hipocampo) y la mejora del daño de las neuronas provocado por inflamación, lo que se relaciona con una función neuropsicológica. La función neuropsicológica puede ser una relacionada con la enfermedad de Alzheimer o el envejecimiento. La mejora de una función neuropsicológica también incluye un tratamiento del envejecimiento de la función cerebral y/o demencia.
El efecto antidepresivo (mejora de la función mental) proporcionado por el agente de la presente divulgación puede estimarse utilizando el cuestionario BDI (http://www.chibatc.co.jp/catalogue/04/l/67.html). Dado que una puntuación alta del cuestionario BDI representa una tendencia a la depresión, el grado de mejora de una función neuropsicológica puede estimarse, por ejemplo, realizando la consulta antes y después de la ingestión del agente de la presente divulgación y comparando las puntuaciones obtenidas antes y después de la ingestión. Puede esperarse un efecto del agente de la presente divulgación para mejorar una función mental, especialmente para un sujeto que tiene un ligero trastorno del estado de ánimo.
El efecto del agente de la presente divulgación para mejorar la función cognitiva puede estimarse mediante el método ADAS-cog (forma siglada de Alzheimer's Disease Assessment Scale-cognitive subscale, Escala de evaluación de la enfermedad de Alzheimer-subescala cognitiva). El efecto del agente de la presente divulgación para mejorar la función cognitiva, incluye aquéllos para mejorar la función degradada a tal grado que la memoria empeora con el envejecimiento, y a tal grado que la capacidad cognitiva se degrada patológicamente (demencia). El efecto mejorador del agente de la presente divulgación puede esperarse especialmente para la degradación de la función cognitiva relacionada con la enfermedad de Alzheimer o el envejecimiento.
El agente de la presente divulgación puede utilizarse para la supresión de la atrofia cerebral, la supresión de la hipofunción cerebral (potenciación de la conectividad funcional con el hipocampo) o la mejora del daño de las neuronas provocado por inflamación. Los efectos sobre ellos pueden evaluarse mediante los métodos bien conocidos por los expertos en la materia, tal como diagnóstico por la imagen. De acuerdo con el examen de los inventores de la presente divulgación, en un grupo de sujetos que incluía ancianos, las partes donde se suprimió la progresión de la atrofia se observaron tanto en la sustancia gris como en la sustancia blanca cerebrales. No se observó tal efecto en un grupo al que se le administró un placebo que no contenía anserina ni carnosina.
El agente de la presente divulgación puede utilizarse para el tratamiento del envejecimiento de la función cerebral y la aparición de la demencia, más concretamente, para la prevención, el retraso o la inhibición del envejecimiento de la función cerebral y la aparición de la demencia, o la prevención de su agravamiento. Dicho efecto puede confirmarse mediante la evaluación del cambio de la circulación sanguínea en la circunvolución del cíngulo posterior del sujeto o la evaluación de la memoria lógica (tarea de recuerdo diferido de palabras) en el caso de un sujeto de 60 años o mayor. De acuerdo con la investigación de los inventores de la presente divulgación, se descubrió que, en el caso de sujetos de 60 años o mayores, la circulación sanguínea se mantuvo en la circunvolución del cíngulo posterior en el grupo de ingestión de la dieta de prueba que contenía dipéptido imidazol en un grado significativamente distinto del observado para el grupo de la dieta de placebo. Además, se descubrió que, en el caso de sujetos de 60 años o mayores, las puntuaciones de la memoria lógica se mantuvieron en el grupo de sujetos que ingirieron la dieta de prueba durante 3 meses en un grado significativamente distinto al observado para el grupo de la dieta de placebo.
El agente de la presente divulgación puede utilizarse para cambiar la expresión de un transportador. Los transportadores son proteínas de membrana que existen en la membrana celular junto con un canal o receptor. Sin embargo, a diferencia del canal, los transportadores no solo reconocen una sustancia endógena, sino también muchas sustancias exógenas, incluidos fármacos y sustancias químicas ambientales, como sustrato de transporte. Los transportadores se clasifican en dos grupos, la familia ABC (forma siglada de ATP binding cassette, casete de unión a ATP), cuyos miembros llevan a cabo el transporte utilizando energía por hidrólisis de ATP, y la familia SLC (portador de solutos), cuyos miembros llevan a cabo el transporte sin utilizar la energía del ATP, y se han identificado 48 tipos de genes de transportadores ABC y 319 tipos de genes de transportadores SLC para el ser humano. Las enfermedades provocadas por anomalías de los transportadores aumentan con el envejecimiento, y se supone que los transportadores se relacionan con aproximadamente el 10% de los genes relacionados con las enfermedades asociadas al envejecimiento que se observan después de los 50 años.
El agente de la presente divulgación puede utilizarse especialmente para cambiar la expresión de al menos un, preferentemente tres o más, más preferentemente 5 o más, transportador(es) seleccionado(s) del grupo que consiste en SLC23A2, SLC43A2, SLC29A3, SLC35C1, SLC25A33, SLC25A23, SLC6A12 y SLC6A13, además, preferentemente, todos ellos. El cambio de la expresión incluye expresión creciente y expresión decreciente.
El agente de la presente divulgación puede utilizarse para cambiar la expresión de una quimiocina. Las quimiocinas son proteínas básicas que presentan sus acciones a través de un receptor acoplado a proteína G y constituyen un grupo de citocinas. Inducen la migración de leucocitos, etc., y participan en la formación de la inflamación. Hasta ahora se han descubierto muchas quimiocinas. De acuerdo con una diferencia estructural, se clasifican en quimiocinas CC, quimiocinas CXC, quimiocinas C y quimiocinas CX3C. Hasta ahora se han identificado no menos de 50 tipos de quimiocinas.
El agente de la presente divulgación puede utilizarse especialmente para cambiar la expresión de una quimiocina seleccionada del grupo que consiste en CXCL12 y CCL17, preferentemente ambas quimiocinas. El cambio de la expresión incluye expresión creciente y expresión decreciente.
El agente de la presente divulgación puede utilizarse para cambiar la expresión de un gen relacionado con el envejecimiento. Los genes relacionados con el envejecimiento se han identificado como genes implicados en el envejecimiento individual o el envejecimiento celular, y hasta ahora se han identificado muchos genes relacionados con el envejecimiento.
El agente de la presente divulgación puede utilizarse especialmente para cambiar la expresión de un gen seleccionado del grupo que consiste en TSPO y P2RY1, preferentemente ambos genes relacionados con el envejecimiento. El cambio de la expresión incluye expresión creciente y expresión decreciente.
El agente de la presente divulgación puede utilizarse para cambiar la expresión de un gen del sistema nervioso. Los genes del sistema nervioso son genes implicados en la neurogénesis, la diferenciación nerviosa, etc., y hasta ahora se han identificado muchos genes del sistema nervioso.
El agente de la presente divulgación puede utilizarse especialmente para cambiar la expresión del gen del sistema nervioso, CAMK1. El cambio de la expresión incluye expresión creciente y expresión decreciente.
El agente de la presente divulgación puede utilizarse para cambiar la expresión de un gen mitocondrial. Los genes mitocondriales son genes implicados en la biosíntesis, la fusión, el ciclo de los ATC y la respiración mitocondrial, y hasta ahora se han identificado muchos genes mitocondriales.
El agente de la presente divulgación puede utilizarse especialmente para cambiar la expresión de al menos un, preferentemente 3 o más, más preferentemente 5 o más, gen(es) mitocondrial(es) seleccionado(s) del grupo que consiste en ACO2, ATP7A, POLG, IDH3G, UCP2, BCKDHA y TAP2, además, preferentemente, todos ellos. El cambio de la expresión incluye expresión creciente y expresión decreciente.
El agente de la presente divulgación puede utilizarse para cambiar la expresión de un gen antienvejecimiento. Los genes antienvejecimiento son genes que realizan la supresión del envejecimiento celular y antienvejecimiento, y se han identificado muchos de estos genes.
El agente de la presente divulgación puede utilizarse especialmente para cambiar la expresión de uno seleccionado del grupo que consiste en SMARCD1 y SIRT6, preferentemente ambos. El cambio de la expresión incluye expresión creciente y expresión decreciente.
El agente de la presente divulgación también puede utilizarse para controlar al menos un tipo de citocina seleccionada del grupo que consiste en IP-10 (CXCL10), IL-2, IL-5, IL-7, IL-8 (CXCL8), IL-13, G-CSF y MCP-1 (CCL2). El control incluye aumentar el nivel y disminuir el nivel.
El agente de la presente divulgación también puede utilizarse como un agente antinflamatorio o para suprimir el aumento de la glucemia, o disminuirla.
La "mejora" o "tratamiento" para una enfermedad o afección al que se hace referencia en la presente divulgación, incluye reducir el riesgo de aparición, retrasar, prevenir o tratar la aparición y detener o retrasar su progresión. Las prácticas para la mejora o el tratamiento incluyen las prácticas médicas destinadas al tratamiento de enfermedades realizadas por médicos de cabecera y las prácticas no médicas realizadas por personas que no sean médicos, tales como un especialista en dietética (especialista en dietética titulado), un sanitarista, personal de enfermería de maternidad, personal de enfermería, un titulado superior en análisis clínicos, un asesor de estética, un esteticista, un fabricante de alimentos y un comerciante de alimentos. El tratamiento incluye recomendaciones sobre la administración o ingestión de alimentos específicos, orientación sobre el método de ingestión de los alimentos, orientación sobre la salud, orientación sobre la nutrición (incluida la orientación sobre la nutrición necesaria para el tratamiento médico de personas enfermas y la orientación sobre la nutrición para el mantenimiento y estímulo de la salud), servicios de alimentación y orientación necesaria sobre la mejora nutricional relacionada con la distribución de alimentos. Los objetos del tratamiento de acuerdo con la presente divulgación incluyen seres humanos (individuos), preferentemente seres humanos que deseen someterse a uno cualquiera de los tratamientos mencionados anteriormente, o que necesiten someterse a uno cualquiera de los tratamientos mencionados anteriormente.
Los inventores de la presente invención midieron la actividad de la enzima que cataliza la descomposición de la carnosina en suero (en lo sucesivo denominada CNDP1) de sujetos, con el fin de verificar las diferencias individuales que afectan a la eficacia del dipéptido imidazol. Como resultado de la medición de la actividad, se confirmó que existían diferencias individuales significativas entre los sujetos. La CNDP1 existe en la sangre y descompone un dipéptido imidazol. Por lo tanto, la CNDP1 puede afectar a la concentración de dipéptidos imidazol en sangre después de la ingestión del dipéptido imidazol y, por lo tanto, afectar a la eficacia del dipéptido imidazol. Por lo tanto, se cree que la información sobre la actividad de CNDP1 en un sujeto es útil para determinar de antemano si el tratamiento por ingestión de un dipéptido imidazol es eficaz o no. Por lo tanto, la presente divulgación proporciona un método para determinar una función neuropsicológica de un sujeto basado en la actividad de la enzima que cataliza la descomposición de la carnosina (CNDP1) del sujeto, y un método para predecir un efecto de mejora de la función neuropsicológica proporcionado a un sujeto al hacer que el sujeto ingiera el agente o la composición nutricional de la presente divulgación, basado en la actividad de la CNDP1 del objeto. Estos métodos pueden ser un método en el que se define de antemano un valor patrón de determinación y la determinación o predicción se realiza mecánicamente utilizando dicho valor.
[Agente]
El término "agente" utilizado en la presente divulgación puede referirse al principio activo en sí mismo, o a uno que contenga el principio activo y otro ingrediente, a menos que se indique especialmente. Sin embargo, no incluye alimentos existentes que contengan al menos uno seleccionado del grupo que consiste en un dipéptido imidazol y un metabolito del mismo, tal como el propio pollo.
El agente de la presente divulgación puede contener un ingrediente distinto del principio activo, siempre que pueda presentar el efecto objetivo. El otro ingrediente puede ser cualquiera de diversos aditivos aceptables para alimentos y diversos aditivos aceptables para fármacos. Los ejemplos de tal ingrediente incluyen excipientes, antioxidantes (agentes antioxidantes), perfumes, condimentos, edulcorantes, agentes colorantes, estabilizantes espesantes, agentes reveladores de color, agentes blanqueadores, agentes antifúngicos, bases de goma, agentes de sabor amargo, enzimas, abrillantadores, acidulantes, emulsionantes, potenciadores, agentes para la fabricación, aglutinantes, agentes tensores (agentes isotónicos), agentes tamponantes, auxiliares de disolución, conservantes, estabilizantes, coagulantes, etc.
El otro ingrediente puede ser un ingrediente funcional distinto del principio activo. Los ejemplos de tal ingrediente funcional incluyen aminoácidos (por ejemplo, aminoácidos de cadena ramificada, ornitina), ácidos grasos insaturados (por ejemplo, EPA, DHA), vitaminas, oligoelementos metálicos, glucosamina y condroitinas.
Cuando el agente de la presente divulgación consiste en el principio activo y otro ingrediente que no sea el principio activo, los expertos en la materia pueden determinar apropiadamente el contenido del principio activo desde el punto de vista de la facilidad de fabricación, facilidad de uso, etc., y puede ser, por ejemplo, del 0,1 al 99,9 %, 1 al 95 %, 10 a 90 % o 51 a 90 %. El contenido de carnosina puede ser del 21% o más, y el contenido de anserina puede ser del 31 % o más.
Como se describe anteriormente, la forma del agente de la presente divulgación puede ser cualquiera de diversas formas distintas de las de los alimentos existentes. Por ejemplo, puede ser una composición farmacéutica, tal como un fármaco oral o una composición nutricional. El agente de la presente divulgación puede utilizarse añadiéndolo a una composición farmacéutica tal como un fármaco oral o una composición nutricional. La "composición nutricional" a la que se hace referencia en la presente divulgación incluye no solo una sólida, sino también una en forma de líquido, tal como una bebida, a menos que se indique especialmente. La "composición nutricional" a la que se hace referencia en la presente divulgación también incluye alimentos saludables, suplementos y alimentos con especificaciones de propiedades saludables (incluidos alimentos con especificaciones de funciones nutricionales y alimentos para usos saludables específicos), así como alimentos dietéticos (uno que logra el fin del tratamiento, que se cocina de acuerdo con un menú preparado por un dietista o similar, de acuerdo con una ficha dietética preparada por un médico), alimentos para terapia alimentaria, alimentos homogeneizados, dieta baja en sal, asistencia alimentaria, dieta reducida en calorías, alimentos dietéticos y materiales para estos, a menos que se indique especialmente.
Los ejemplos de la forma del agente de la presente divulgación, la composición farmacéutica y la composición nutricional, incluyen polvos, gránulos subtilizados, gránulos, comprimidos, cápsulas, preparaciones líquidas (incluidos elixires, limonadas, jarabes, emulsiones, suspensiones, soluciones y preparaciones bebibles), formulaciones gelatinosas, alimentos dietéticos, bebidas, productos de confitería, productos cárnicos, productos preparados con productos marinos, productos preparados con vegetales, platos del día, composiciones de condimentos y aditivos alimentarios.
Los expertos en la materia pueden determinar apropiadamente la cantidad de ingestión del principio activo de la presente divulgación de acuerdo con la edad, el peso, el sexo, la enfermedad o afección a la que se aplica el agente, etc. del sujeto que lo ingiere. La cantidad de ingestión del principio activo puede ser, por ejemplo, de 200 mg/día o mayor, preferentemente de 400 mg/día o mayor, más preferentemente de 500 mg/día o mayor, preferentemente además de 750 mg/día o mayor. Además, puede ser de 1.000 mg/día o mayor, de 2.000 mg/día o mayor, de 5.000 mg/día o mayor o de 7.500 mg/día o mayor. En cualquier caso, puede ser de 10.000 mg/día o menor. Independientemente de cómo se defina la cantidad mínima, puede ser de 50.000 mg/día o menor, preferentemente de 30.000 mg/día o menor, más preferentemente de 20.000 mg/día o menor, más preferentemente de 10.000 mg/día o menor. El principio activo de la cantidad de ingestión diaria mencionada anteriormente, puede ingerirse de una vez o en varias veces como partes divididas.
Aunque los expertos en la materia pueden determinar apropiadamente la cantidad de principio activo contenida en el agente, en la composición farmacéutica o en la composición nutricional de la presente divulgación, esta puede ser, por ejemplo, de 1.000 mg/100g o mayor, preferentemente de 1.500 mg/100g o mayor, más preferentemente de 2.000 mg/100g o mayor, aún más preferentemente de 2.500 mg/100g o mayor, preferentemente además de 3.000 mg/100g o mayor, aún además preferentemente de 3.500 mg/100g o mayor. Independientemente de la cantidad mínima, esta puede ser de 50.000 mg/100 g o menor, preferentemente de 40.000 mg/100 g o menor, más preferentemente de 30.000 mg/100 g o menor, preferentemente además de 20.000 mg/100 g o menor.
El agente, la composición farmacéutica o la composición nutricional de la presente divulgación, también puede contener un ingrediente distinto del principio activo. El ingrediente distinto del principio activo es, por ejemplo, creatina o un ácido nucleico. El contenido de creatina puede ser, por ejemplo, de 10 mg o mayor, preferentemente de 20 mg o mayor, más preferentemente de 30 mg o mayor, aún más preferentemente de 60 mg o mayor, preferentemente además de 100 mg o mayor, aún además preferentemente de 200 mg o mayor, en la dosis diaria. Independientemente de la cantidad mínima, esta puede ser de 2.000 mg o menor, preferentemente de 1.000 mg o menor, más preferentemente de 750 mg o menor, preferentemente además de 500 mg o menor. El contenido de un ácido nucleico puede ser, por ejemplo, de 0,15 mg o mayor, preferentemente de 0,30 mg o mayor, más preferentemente de 0,50 mg o mayor, aún más preferentemente de 1,0 mg o mayor, preferentemente además de 2,0 mg o mayor, aún además preferentemente de 3,0 mg o mayor, en la dosis diaria. Independientemente de la cantidad mínima, puede ser de 50 mg o menor, preferentemente de 40 mg o menor, más preferentemente de 20 mg o menor, preferentemente además de 10 mg o menor.
Cuando el agente, la composición farmacéutica o la composición nutricional de la presente divulgación, se utiliza como alimento dietético (uno que logra el fin del tratamiento, que se cocina de acuerdo con un menú preparado por un dietista o similar, de acuerdo con una ficha dietética preparada por un médico), alimento para terapia alimentaria, alimento homogeneizado, dieta baja en sal, asistencia alimentaria, dieta reducida en calorías, alimento dietético o alimento deportivo (incluido alimento destinado a potenciar la capacidad de ejercicio aeróbico, alimento destinado a potenciar la resistencia en el ejercicio aeróbico, alimento para acumular la nutrición en el cuerpo el día de una competición deportiva, alimento para complementar la nutrición durante una competición deportiva y alimento destinado a recuperarse del agotamiento después de finalizar una competición deportiva), el contenido del principio activo puede determinarse considerando la cantidad ingerida en una comida.
Un sujeto puede ingerir el agente, la composición farmacéutica o la composición nutricional de la presente divulgación reiteradamente o durante un largo período de tiempo. Especialmente, cuando se pretende potenciar la capacidad de ejercicio, será preferible hacer que el sujeto lo ingiera antes del ejercicio, o que lo ingiera a diario.
Para el agente, la composición farmacéutica o la composición nutricional de la presente divulgación, puede indicarse que puede utilizarse para mejorar una función neuropsicológica, para la supresión de la atrofia cerebral, la supresión de la hipofunción cerebral, y para mejorar el daño de las neuronas provocado por inflamación, y también puede indicarse que se recomienda la ingestión del mismo a, por ejemplo, ancianos de 65 años o mayores, o personas que tengan un ligero trastorno del estado de ánimo. La indicación puede ser una indicación directa o indirecta. Los ejemplos de indicación directa incluyen un informe sobre artículos tales como el propio producto, el envase, el recipiente, la etiqueta y el etiquetado, y los ejemplos de la indicación indirecta incluyen publicidad y propaganda en lugares tales, o por medios tales, como una página web, un escaparate, una exposición, un panel publicitario, un tablón de anuncios, un periódico, una revista, una televisión, una radio, correo postal y correo electrónico.
[Método de producción]
El agente, la composición farmacéutica o la composición nutricional de la presente divulgación, pueden producirse utilizando diversas técnicas conocidas. La etapa de ajuste de la concentración del principio activo a una concentración predeterminada puede realizarse en diversas fases del proceso de fabricación. Los expertos en la materia pueden diseñar apropiadamente las etapas para la producción del agente de la presente divulgación considerando la solubilidad, la estabilidad, la volatilidad, etc. del principio activo. De acuerdo con las investigaciones de los inventores de la presente divulgación, se confirmó que la anserina y la carnosina son suficientemente estables a una temperatura normal, y que también son suficientemente estables en condiciones de cocción a una temperatura de 180 °C o menor. Además, se confirmó que pueden almacenarse de manera estable durante al menos 2 años y 9 meses en estado de solución.
Cuando el principio activo de la presente divulgación está constituido como un extracto de pollo, un ejemplo del método para producir tal extracto de pollo comprende específicamente triturar pollo, añadir agua tibia al pollo, ajustar el pH de la mezcla si es necesario y permitir la extracción durante varios minutos a varios días con calentamiento según sea necesario. En cuanto a las condiciones de extracción, el tratamiento se realiza, por ejemplo, a una temperatura de 50 a 100 °C durante 1 a 10 horas. El extracto obtenido puede purificarse o fraccionarse mediante filtración con tierra de diatomeas, ultrafiltración o similares, según sea necesario. El producto puede someterse a un tratamiento de desmineralización y a un tratamiento con proteasa según sea necesario. Aunque la parte de la que se obtiene el pollo como materia prima no está particularmente limitada, preferentemente contiene carne de pechuga, ya que contiene carnosina y/o anserina en abundancia. El extracto obtenido puede secarse a un producto seco mediante secado con aire caliente, secado por pulverización, liofilización o similares. Además, puede granularse en gránulos.
[Análisis de expresión]
La presente divulgación también proporciona un método para la detección de la mejora o la degradación de una función neuropsicológica, que se basa en el análisis de la expresión de al menos un tipo de gen seleccionado del grupo que consiste en los genes de transportadores SLC23A2, SLC43A2, SLC29A3, SLC35C1, SLC25A33, SLC25A23, SLC6A12 y SLC6A13; genes de las quimiocinas CXCL12 y CCL17; genes TSPO y P2RY1 relacionados con el envejecimiento; gen del sistema nervioso CAMK1; genes mitocondriales ACO2, a Tp7A, POLG, IDH3G, UCP2, BCKDHA y TAP2; así como genes antienvejecimiento SMARCD1 y SIRT6, y un kit para la detección de la mejora o la degradación de una función neuropsicológica, que comprende un ácido nucleico que comprende al menos un tipo de secuencia de nucleótidos seleccionada de una secuencia completa o parcial de una cualquiera de las secuencias de nucleótidos de las SEQ ID NO: 1 a 20, y una secuencia completa o parcial de una secuencia de nucleótidos complementaria a una cualquiera de las secuencias de nucleótidos de las SEQ ID NO: 1 a 20.
El análisis de expresión se realiza preferentemente analizando la expresión de al menos un tipo de gen de transportador seleccionado del grupo que consiste en SLC23 A2, SLC43A2, SLC29A3, SLC35C1, SLC25A33, SLC25A23, SLC6A12 y SLC6A13, al menos un tipo de gen de quimiocina seleccionado del grupo que consiste en CXCL12 y CCL17, al menos un tipo de gen relacionado con el envejecimiento seleccionado del grupo que consiste en TSPO y P2RY1, un gen del sistema nervioso seleccionado de CAMK1, al menos un tipo de gen mitocondrial seleccionado del grupo que consiste en ACO2, ATP7A, POLG, IDH3G, UCP2, BCKDHA y TAP2, y al menos un tipo de gen antienvejecimiento seleccionado del grupo que consiste en SMARCD1 y SIRT6. Más preferentemente, el análisis de expresión se realiza analizando la expresión de todos estos genes.
En el desarrollo de ingredientes de nuevos fármacos, composiciones alimenticias funcionales, etc., las acciones de los fármacos o ingredientes candidatos se controlan a nivel celular para evaluar la eficacia y seguridad de los mismos, y atrae la atención una técnica para cuantificar los genes expresados en las células antes y después de la administración de un fármaco o ingrediente para toda la región genómica y la determinación cuantitativa de la acción del fármaco o ingrediente como un cambio de las cantidades de expresión de los genes. Al analizar las expresiones de una combinación de genes definidos en la presente divulgación utilizando un método como el mencionado anteriormente, pueden analizarse los efectos de un fármaco candidato sobre una función neuropsicológica.
En los aspectos de la presente divulgación relacionados con el análisis de expresión, el ácido nucleico que comprende al menos un tipo de secuencia de nucleótidos seleccionada de una secuencia completa o parcial de una cualquiera de las secuencias de nucleótidos de las SEQ ID NO: 1 a 20, y una secuencia completa o parcial de una secuencia de nucleótidos complementaria a una cualquiera de las secuencias de nucleótidos de las SEQ ID NO: 1 a 20, puede ser una sonda que puede hibridar específicamente con un transcrito en una muestra como objeto de detección, o una pareja de cebadores que pueden actuar como cebadores para la amplificación de toda o una parte de tal transcrito como se menciona anteriormente. El ácido nucleico puede ser ADN o ARN.
En los aspectos de la presente divulgación relacionados con el análisis de expresión, la longitud del ácido nucleico que comprende al menos un tipo de secuencia de nucleótidos seleccionada de una secuencia completa o parcial de una cualquiera de las secuencias de nucleótidos de las SEQ ID NO: 1 a 20, y una secuencia completa o parcial de una secuencia de nucleótidos complementaria a una cualquiera de las secuencias de nucleótidos de las SEQ ID NO: 1 a 20, utilizado como sonda es, por ejemplo, de 15 nucleótidos de longitud o más larga, preferentemente de 20 nucleótidos de longitud o más larga, más preferentemente de 25 nucleótidos de longitud o más larga. Para permitir la detección y cuantificación de un ácido nucleico diana, el ácido nucleico de la sonda puede marcarse, por ejemplo, con un radioisótopo, una enzima, una sustancia fluorescente o una sustancia luminiscente.
El ácido nucleico utilizado como sonda puede inmovilizarse en una fase sólida.
La longitud de los ácidos nucleicos utilizados como cebadores es, por ejemplo, de 15 a aproximadamente 100 nucleótidos de longitud, preferentemente de 15 a 50 nucleótidos de longitud, y preferentemente consisten en una pareja de secuencias de nucleótidos diseñadas para que puedan amplificar un fragmento de ADN de 100 pb a varios kpb.
Se puede preparar un ácido nucleico a utilizar mediante síntesis química, utilizando un sintetizador automático de ADN/ARN comercial o similar. Además, se puede preparar un chip (matriz) en el que se inmoviliza un ácido nucleico, sintetizando el ácido nucleico directamente sobre una fase sólida de silicio, vidrio o similar. Los ejemplos preferidos de implementación en los que la sonda de ácido nucleico se inmoviliza sobre un sustrato incluyen una micromatriz de ADN.
Para analizar cuantitativamente la expresión de genes predeterminados utilizando una pequeña cantidad de muestra, puede utilizarse RT-PCR competitiva o RT-PCR en tiempo real. La muestra objeto de análisis puede ser sangre extraída de un ser humano.
[Uso como compuesto principal]
La presente divulgación proporciona un método para la búsqueda de un principio activo o similar para la mejora de una función neuropsicológica, especialmente un tratamiento del envejecimiento de una función cerebral y/o de la demencia, etc. (método de cribado) utilizando el dipéptido imidazol mencionado anteriormente o un metabolito del mismo como compuesto principal.
La expresión compuesto principal se refiere en general a un compuesto cuyos perfiles de actividades farmacológicas se han dilucidado y para el que se espera una mejora de la actividad o una reducción de la toxicidad como resultado de la modificación química del mismo. El dipéptido imidazol y un metabolito del mismo tienen actividades farmacológicas para la mejora de una función neuropsicológica, especialmente un tratamiento del envejecimiento de una función cerebral y/o la demencia como se describe anteriormente, y se espera que la mejora de la actividad o la reducción de la toxicidad se proporcione mediante la modificación química de los mismos.
La modificación química significa, por ejemplo, la optimización de un compuesto principal mediante la modificación química del compuesto principal. La modificación química puede ser, por ejemplo, la sustitución o la deleción de una parte de aminoácidos, o la adición o la inserción de al menos un aminoácido. También se contempla la adición, sustitución o eliminación de un grupo funcional en un aminoácido, y la sustitución de un D-aminoácido o un aminoácido artificial por un aminoácido.
Al realizar la optimización utilizando el dipéptido imidazol o un metabolito del mismo como compuesto principal de acuerdo con la presente divulgación, puede buscarse un principio activo que muestre propiedades fisicoquímicas, una farmacocinética, toxicidad, etc. superiores.
En lo sucesivo, la presente invención se explicará con referencia a los ejemplos. Sin embargo, el alcance de la presente invención no está limitado por los siguientes ejemplos.
Ejemplos
[Evaluación 1 con voluntarios sanos]
Se proporcionaron dietas de prueba que contenían dipéptidos imidazol procedentes de pollo (1000 mg como dosis diaria de carnosina y anserina) a los sujetos de prueba (28 hombres o mujeres voluntarios sanos de 40 años o mayores, divididos en dos grupos de grupo de dieta de prueba y grupo de la dieta de placebo) durante 3 meses, y se evaluaron los cambios en la función cerebral, etc., antes, durante y después del período de prueba. Las composiciones de la dieta de prueba y la dieta de placebo se muestran en las siguientes tablas (como cantidades diarias).
[Tabla 1]
Figure imgf000011_0001
Figure imgf000011_0002
1. Efecto antidepresivo (evaluación mediante el cuestionario BDI)
Antes y después del período de ingestión, se evaluó la tendencia a la depresión con el cuestionario BDI (http://www.chibatc.co.jp/catalogue/04/l/67.html). Una puntuación más alta del cuestionario BDI indica una mayor tendencia a la depresión.
Los resultados se muestran en la Fig. 1. Los grados de mejora se compararon basándose en el cambio de la puntuación del BDI, es decir, puntuación obtenida antes de la ingestión (prueba 1) - puntuación obtenida después de la ingestión (prueba 2). Como resultado, se observó una tendencia a la mejora para el grupo de la dieta de prueba, mientras que apenas se observó mejora para el grupo de placebo. Además, se clasificaron los cambios antes y después de la ingestión (un número más alto en la clasificación indica una mayor mejora). Como resultado, se observó una tendencia a que el grupo de dieta de prueba mostrara un cambio mayor. Incluso los sujetos sanos pueden tener una ligera tendencia a la depresión, y se considera que el dipéptido imidazol mejoró tal tendencia haciendo que las funciones del sistema nervioso por GABA sean completas.
2. Efecto de mejora de la función cognitiva (Evaluación utilizando la ADAS-cog)
Las funciones cognitivas se evaluaron antes y después del período de ingestión utilizando la ADAS-cog (Escala de evaluación de la enfermedad de Alzheimer-subescala cognitiva).
Los resultados se muestran en la Fig. 2. Se muestran las proporciones de sujetos cuyas puntuaciones mejoraron o se degradaron en 3 puntos o más. La proporción de sujetos del grupo de dieta de prueba cuyas puntuaciones mejoraron, fue mayor que la del grupo de placebo.
3. Efecto sobre la atrofia cerebral, etc.
Se realizó un análisis de la estructura cerebral basado en un análisis de imagen tridimensional ponderada en T1 y de conectividad funcional basado en RMN funcional en estado de reposo. Como resultado del análisis longitudinal para la situación inicial y el cambio estructural después de tres meses realizado para 15 sujetos del grupo de dieta de prueba y 13 sujetos del grupo de la dieta de placebo, se descubrió que, la progresión de la atrofia se suprimió en mayor grado en el grupo de dieta de prueba en comparación con el grupo de la dieta de placebo en la circunvolución frontal inferior derecha y la circunvolución temporal inferior izquierda para la sustancia gris (Fig. 3-1), y en la circunvolución del cíngulo posterior derecha para la sustancia blanca (Fig. 3-2).
En el análisis de conectividad funcional basado en RMN funcional en estado de reposo, se descubrió que, para la situación inicial, la conectividad funcional con el hipocampo se redujo en la circunvolución del cíngulo posterior con el envejecimiento (Fig. 4). Se sabe que la circunvolución del cíngulo posterior participa en la reproducción de la memoria, y su función se reduce primero en la enfermedad de Alzheimer. En el grupo de dieta de prueba, la conectividad funcional con el hipocampo de esta parte, se potenció tres meses después en comparación con la del grupo de la dieta placebo. Esta parte coincidía con la parte de la sustancia blanca donde se observó el efecto de supresión de la atrofia en el grupo de dieta de prueba (Fig. 3-2).
4. Análisis de la expresión génica
Se extrajeron muestras de sangre de 13 sujetos del grupo de dieta de prueba (no se pudieron preparar muestras para 2 sujetos) y de los 13 sujetos del grupo de placebo (aquellos presentes en el momento de la primera prueba y la prueba intermedia) utilizando tubos de extracción de sangre para ARN PAXgene (Nippon Becton Dickinson Company, Ltd., Tokio), se preparó ARN de alta calidad utilizando el kit PAXgene Blood RNA (Qiagen) y se analizó el cambio de la expresión génica utilizando una micromatriz.
Métodos
Como matriz se utilizó la micromatriz Oligo ADN hologenómica humana (4x44K) v2 (Agilent, CA, EE.UU.).
(1) Marcaje
En primer lugar, se extrajo el ARN total de cada muestra de sangre del sujeto de prueba utilizando el kit PAXgene Blood RNA (Qiagen) y se marcaron 200 ng de cada ARN total utilizando el kit de marcaje Low-Input QuickAmp, Onecolor de Agilent. En primer lugar, a 2 pl de solución madre One-Color Spike Mix preparada de antemano, se añadieron 200 ng del ARN total en un volumen de 2,5 pl. A continuación, se añadieron 0,8 pl de cebador de promotor de T7, la mezcla se incubó a 65 °C durante 10 minutos en un bloque térmico y a continuación se desactivó en hielo durante 5 minutos. A continuación, se añadieron adicionalmente 4,7 pl de Mezcla Maestra de ADNc preparada de antemano y la mezcla se incubó en un bloque térmico a 40 °C durante 2 horas, y se trasladó a un bloque térmico a 70 °C para una incubación adicional durante 15 minutos. A continuación, la mezcla se desactivó durante 5 minutos en hielo y se añadieron a la mezcla 6 pl de Mezcla Maestra de Transcripción preparada de antemano. La mezcla se incubó durante 2 horas en un bloque térmico a 40 °C con protección contra la luz, a continuación, se llevó el volumen total de la mezcla a 100 |jl mediante la adición de 84 |jl de agua sin nucleasas, adicionalmente, a la mezcla se añadieron 350 |jl de tampón RLT y también se añadieron 250 j l de etanol. A continuación, el volumen total de la mezcla se aplicó a una columna RNeasy, durante 30 segundos se centrifugó a 4 °C y a 13000 rpm, se lavó dos veces con 500 j l de un tampón RPE y finalmente se eluyó con 30 j l de agua sin ARNasa.
(2) Hibridación
A continuación, se realizó la hibridación de acuerdo con el protocolo recomendado por Agilent. En primer lugar, se fragmentó el ARN eluido anteriormente mezclándolo con mezcla de fragmentación, se incubó durante 30 minutos en un bloque térmico a 60 °C y se enfrió inmediatamente en hielo durante 1 minuto. A continuación, el ARNc de la mezcla de fragmentación se mezcló con 2 x tampón de hibridación GE x HI-RPM para preparar una mezcla de hibridación. La mezcla de hibridación se aplicó al portaobjetos de la micromatriz, el portaobjetos se dispuso en una cámara de hibridación y a continuación se dispuso en un horno de hibridación, y se permitió la hibridación a 65 °C y a 10 rpm durante 17 horas.
(3) Lavado y exploración del portaobjetos de la micromatriz
El portaobjetos de la micromatriz se lavó utilizando el tampón de lavado para expresión génica preparado de antemano. En primer lugar, antes del final de la hibridación, el tampón de lavado para expresión génica 1, se rellenó en dos recipientes de vidrio para lavado, y el tampón de lavado para expresión génica 2, se rellenó a 37 °C en otro recipiente de vidrio (en total, tres recipientes de vidrio para lavado). Una vez finalizada la hibridación, la cámara de hibridación se desmontó en el primer recipiente de vidrio para lavado, y se sacó el portaobjetos de la micromatriz y se lavó en el segundo recipiente de vidrio para lavado. El portaobjetos de la micromatriz se lavó adicionalmente en el tercer recipiente de vidrio para lavado, a continuación, se sacó lentamente de la superficie del agua para que se secara y finalmente se montó en un explorador de uso exclusivo, y se exploró el portaobjetos de la micromatriz.
(4) Análisis de los datos
Los datos se convirtieron en números con el programa informático Feature Extraction de Agilent. La normalización se realizó de acuerdo con el método de cuantiles utilizando el programa informático de análisis estadístico R. Se calcularon las puntuaciones Z y las proporciones de los valores de las señales normalizados, y se extrajeron los valores de las señales que mostraron una variación de ± 2 o más. Los datos obtenidos se analizaron utilizando la base de datos de anotaciones DAVID
(http://david.abcc.ncifcrf.gov/).
En primer lugar, los números de referencia de GenBank de los genes para los que se confirmó un cambio, se introdujeron en la base de datos, y a continuación se realizó la agrupación para cada función para la que se produjo el cambio genético mediante la realización de agrupaciones de anotaciones funcionales. El análisis de rutas de KEGG (forma siglada de Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, Enciclopedia de genes y genomas de Kioto), se realizó de manera similar utilizando DAVID.
Resultados
En la Fig. 5 se muestran los genes que mostraron un cambio significativo debido a la ingestión de la dieta de prueba en comparación con el grupo de la dieta de placebo, que se determinaron basándose en el nivel de diferencia significativa p < 0,05. A partir de los resultados de este análisis de la expresión génica, se descubrió que las expresiones de diversos tipos de moléculas transportadoras existentes en las células sanguíneas cambiaron significativamente. Se descubrió que, en particular, la cantidad de expresión del transportador de vitamina C, presente en la superficie de la membrana de los linfocitos, aumentó significativamente con la ingestión del dipéptido imidazol (SLC23A2 en la Fig. 5). Las expresiones de una pluralidad de genes relacionados con el metabolismo energético de las mitocondrias (ACO2 (aconidasa) e IDH3G (isocitrato deshidrogenasa), que son enzimas del ciclo de los ATC) aumentaron. El dipéptido imidazol puede presentar la acción de estímulo de la salud utilizando tal mecanismo.
En cuanto a las quimiocinas, se observaron disminuciones de las expresiones de las quimiocinas CXC y las quimiocinas CC. Se sugiere que la dieta de prueba tiende a suprimir la inflamación.
Además, se observó una potenciación de las expresiones de los genes relacionados con el envejecimiento. Se sugiere la supresión del envejecimiento mediante la dieta de prueba.
Además, se observó una potenciación de las expresiones de los genes antienvejecimiento. Se sugiere la acción antienvejecimiento de la dieta de prueba.
Se conoce el efecto de recuperación de la fatiga muscular de la carnosina y se ha considerado que la recuperación de la fatiga es un efecto de neutralización del pH muscular. Sin embargo, dado que en las pruebas anteriores se observó una potenciación de los genes del sistema mitocondrial con la ingestión de la dieta de prueba, también se sugiere una nueva función de la misma, ejercida para los músculos de potenciación de las funciones mitocondriales a través del sistema de glucólisis. Además, a través de las pruebas anteriores, se aclaró que la expresión de SIRT6, conocido como gen de la longevidad, se potenciaba. Se sabe que, si este gen se sobreexpresa en un ratón, su vida se prolonga. Por lo tanto, también puede esperarse que pueda proporcionarse la prolongación de la vida mediante el uso de un dipéptido imidazol. Además, con respecto al cambio de las expresiones de diversos genes SLC proporcionado por la ingestión del péptido imidazol, también puede esperarse un denominado efecto de combinación de alimentos, es decir, puede esperarse que, si se ingiere junto con carnosina, cambien las respuestas de ellos a diversas sustancias e ingredientes alimentarios fisiológicamente activos.
5. Cambio de la concentración de citocinas en suero
Se realizaron pruebas bioquímicas, pruebas de hemogramas, pruebas de glucemia y pruebas de coagulación en muestras de sangre obtenidas de los sujetos de prueba antes, durante (seis semanas después del inicio de la ingestión) e inmediatamente después del período de ingestión de alimentos de tres meses. Cuando se proporcionó la dieta de prueba, se observó una tendencia de disminución de la glucemia. Los otros índices no cambiaron antes ni después de la ingestión y, por lo tanto, se reconfirmó la seguridad de la ingestión de la dieta de prueba y la dieta de placebo.
Se llevó a cabo un análisis cuantitativo de 27 tipos de citocinas y quimiocinas de las mismas muestras de sangre. El análisis cuantitativo de las concentraciones de citocinas en sueros de sangre periférica de sujetos de prueba, se realizó mediante el análisis múltiple basado en perlas utilizando la tecnología xMAP (Luminex). En este método, las citocinas se analizan cuantitativamente de forma simultánea utilizando anticuerpos específicos unidos a perlas marcadas con distintas sustancias fluorescentes, de acuerdo con el principio de citometría de flujo. A continuación, se explican las ideas generales del método de análisis que utiliza el kit Bio-Plex Pro™ Human Cytokine Grp I Panel 27-pLex (Bio-Rad). Se colocaron perlas de anticuerpos de distintos tipos en pocillos de una placa de ensayo de 96 pocillos y se lavaron dos veces con el tampón de lavado Bio-Plex. A continuación, se añadieron suero y una solución patrón a cada pocillo, y la placa se incubó en un agitador a temperatura ambiente durante 1 hora protegida de la luz. Las perlas se lavaron 3 veces con el tampón de lavado, a continuación, se añadieron soluciones de anticuerpo de detección y la placa se incubó en un agitador a temperatura ambiente durante 30 minutos protegida de la luz. Las perlas se lavaron 3 veces con el tampón de lavado, a continuación, se añadió una solución de estreptavidina marcada con PE y la placa se incubó en un agitador a temperatura ambiente durante 10 minutos protegida de la luz. Las perlas se lavaron 3 veces con el tampón de lavado, a continuación, se añadió el tampón de ensayo y la placa se agitó durante 10 segundos protegida de la luz. La intensidad de la fluorescencia de la PE de cada tipo de perlas se midió utilizando Bio-Plex 200 System (Bio-Rad), y la concentración de cada citocina en el suero se obtuvo utilizando una curva patrón creada con muestras de cantidades conocidas. Se realizó un análisis estadístico mediante la prueba de la t para datos emparejados para los datos obtenidos antes y después de la ingestión, para cada sujeto de prueba, y las citocinas para las cuales el grupo de dieta de prueba mostró diferencias se muestran en la Fig. 6.
Se descubrió que el nivel en sangre de muchos tipos de moléculas de citocinas y quimiocinas, incluidas IL-8 (CXCL8) así como IL-5, IL-7, factor estimulante de colonias de granulocitos (G-CSF), MCP-1 (CCL2), etc., se redujo significativamente con la ingestión de la dieta de prueba. Además, se descubrió que, por otro lado, el nivel en sangre de IP-10 (CXCL10) aumentó significativamente con la ingestión de la dieta de prueba. La dieta de placebo utilizada en esta prueba contenía histidina, por lo que contenía la misma cantidad de aminoácidos esenciales que la dieta de prueba, y se sabe que la histidina tiene actividad antinflamatoria. Por lo tanto, entre las moléculas anteriormente mencionadas, las concentraciones en sangre de IL-5, IL-7 y MCP-1 (CCL2), también se redujeron significativamente con la ingestión de la dieta de placebo.
Se midieron las glucemias. Los resultados se muestran en la Fig. 7. El grupo de placebo mostró una tendencia creciente y el grupo de dieta de prueba mostró una tendencia decreciente. Por tanto, el grupo de dieta de prueba mostró una tendencia de mejora de la glucemia en comparación con el grupo de placebo. Dado que esta prueba piloto se realizó con personas sanas de mediana edad y ancianas como sujetos, las concentraciones de HbA1c (hemoglobina sacarificada), que se utiliza como molécula marcadora de la diabetes, estaban dentro de un intervalo normal en la mayoría de los sujetos de prueba, y las concentraciones no cambiaron con la ingestión de la dieta de prueba.
[Evaluación con ratones patológicos]
Se proporcionó una dieta alta en grasas (DAG) a ratones transgénicos (ratones modelo para la enfermedad de Alzheimer) para inducir hipofunción cerebral. Se administró carnosina (L-histidina-p-alanina) a los ratones y se evaluó la influencia de la carnosina.
Los resultados se muestran en las Fig. 8-1, 8-2, 8-3 y 8-4. En el grupo de dieta que contiene carnosina, las citocinas disminuyeron y se sugirió la supresión de la inflamación (Fig. 8-1). La supresión de la inflamación cerebral en el grupo al que se administró carnosina, también se demostró a través de los resultados de la prueba de RMN (Fig. 8-2, partes de color rojo). Los resultados del análisis por micromatriz indicaron que en el grupo con administración de carnosina se suprimió el aumento de las expresiones de los transportadores de GABA, tales como 7Slc6a12 y slc6a13, observado en el modelo de la enfermedad de Alzheimer (Fig. 8-3). La cantidad de GABA que puede actuar como transmisor disminuye por el aumento de las expresiones de los transportadores en los ratones modelo de la enfermedad de Alzheimer, y se sugirió la posibilidad de que la carnosina suprima tal disminución de la cantidad de GABA.
Se extrajo sangre de ratones que estuvieron en ayunas durante la noche y se determinó la concentración de insulina en sangre con un kit (Morinaga). Como resultado del análisis de sangre, se descubrió que en el grupo con administración de carnosina se suprimió el aumento de la concentración de insulina en sangre observado en la enfermedad de Alzheimer inducida por una dieta alta en grasas (Fig. 8-4).
[Evaluación 2 con voluntarios sanos]
La misma dieta de prueba que contenía dipéptidos imidazol procedentes de pollo, como se menciona anteriormente, se administró a sujetos de prueba (voluntarios sanos de 40 años o mayores, divididos en un grupo de dieta de prueba y un grupo de la dieta de placebo) durante tres meses, y antes, durante y después del período de ingestión, se evaluó el cambio de las funciones cerebrales, etc. Las composiciones de la dieta de prueba y la dieta de placebo (como cantidades diarias) se muestran en la Tabla 1. Se realizaron una primera y una segunda prueba piloto.
El número total de los sujetos de prueba sometidos a la primera y segunda prueba, fue de 30 sujetos para el grupo de dieta de prueba y de 30 sujetos para el grupo de dieta de control (grupo de la dieta de placebo) (consultar las siguientes tablas).
[Tabla 2]
Figure imgf000015_0001
[Tabla 3]
Figure imgf000015_0002
1. Análisis por imágenes de RMN
En la segunda prueba piloto, se realizó una prueba de imágenes de RMN para medir directamente la circulación sanguínea cerebral, la cual cambia con la progresión de la demencia.
El cambio de la circulación sanguínea cerebral puede medirse mediante el método de marcaje de espín arterial, que es un método de medición del cambio de la circulación sanguínea con un aparato de RMN, utilizando magnetismo sin usar un compuesto de marcaje, o similar.
Los resultados se muestran en las Fig. 9 y 10. Se descubrió que la circulación sanguínea en la circunvolución del cíngulo posterior, donde la circulación sanguínea cambia con la progresión y la aparición de una fase de predemencia, se mantuvo en el grupo de ingestión de la dieta de prueba con una diferencia significativa (p < 0,005) en comparación con el grupo de la dieta de placebo.
2. Análisis de los subgrupos
Para los subgrupos de sujetos de prueba (60 años o mayores) que participaron en la primera y segunda pruebas piloto, se evaluó la memoria lógica, que se degrada con la progresión y la aparición de una fase de predemencia (tarea de recuerdo diferido de palabras).
Los resultados se muestran en las Fig. 11 y 12. En esta prueba, la dificultad de la segunda prueba fue mayor que la de la primera prueba, y, por lo tanto, las puntuaciones tendieron a empeorar en la segunda prueba en comparación con la primera prueba. Sin embargo, se descubrió que la degradación de las puntuaciones se suprimió en el grupo de ingestión de la dieta de prueba en comparación con el grupo de la dieta de placebo con una fuerte significación estadística (p < 0,01).
Los resultados de estos dos experimentos sugieren que el agente que contiene los dipéptidos imidazol procedentes de pollo, tiene una acción de prevención del envejecimiento de las funciones cerebrales y de la aparición de la demencia.
[Ejemplos de preparación]
(1) Preparación de extracto de pollo
La dieta de prueba que contenía dipéptidos imidazol procedentes de pollo se preparó de acuerdo con el siguiente procedimiento.
Con una picadora de carne, se trituró carne de pechuga de pollo y se añadió agua tibia a la carne de pechuga de pollo en un peso de 1,5 veces el peso de la carne. La mezcla se calentó a 90 °C durante 4 horas, de ese modo se concentró hasta que el Brix fue del 20 % o mayor, y se sometió a filtración con tierra de diatomeas y ultrafiltración, de modo que finalmente tuvo una concentración de carnosina anserina de aproximadamente el 10 % (% p/v).
(2) Cápsulas
Se mezcló carnosina (1,0 partes en peso), extracto de placenta (polvo, 0,2 partes en peso) y lactosa (1,3 partes en peso en una mezcla uniforme, y se rellenó en cápsulas duras de manera convencional para preparar cápsulas de 250 mg de peso neto (100 mg de carnosina/cápsula).
(3) Comprimidos
Se prepararon comprimidos que contenían 60 mg de una mezcla de carnosina y anserina para un comprimido (300 mg) junto con maltosa, dextrina, almidón, aceite vegetal que contenía vitamina E, isomalto oligosacáridos, dextrina difícilmente digerible, calcio procedente marisco, trehalosa, éster de sacarosa, vitamina C, ácido cítrico, fosfato de calcio, perfume, goma laca, niacina, vitamina K, edulcorante, cloruro de potasio, vitamina A, pantotenato de calcio, biotina, pirofosfato de hierro, vitaminas B, vitamina D, carbonato de magnesio y ácido fólico.
Texto independiente del listado de secuencias
SEQ ID NO: 1 -- SLC23A2, NM_203327
SEQ ID NO: 2 -- SLC43A2, NM_152346
SEQ ID NO: 3 -- SLC29A3, NM_018344
SEQ ID NO: 4 -- SLC35C1, NM_018389
SEQ ID NO: 5 -- SLC25A33, NM_032315
SEQ ID NO: 6 -- SLC22A23, NM_015482
SEQ ID NO: 7 -- CXCL12, NM_199168
SEQ ID NO: 8 -- COL17, NM_002987
SEQ ID NO: 9 -- TSPO, NM_000714
SEQ ID NO: 10 -- P2RY1, NM_002563

Claims (6)

REIVINDICACIONES
1. Un agente para su uso en la prevención de la aparición de la demencia debida al envejecimiento, que contiene al menos un dipéptido imidazol.
2. Un agente para su uso en la supresión de una atrofia cerebral, que contiene al menos un dipéptido imidazol.
3. El agente para su uso de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, en donde el agente es para la ingestión de 200 mg o más, como dosis diaria, del al menos un dipéptido imidazol.
4. El agente para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde al menos un tipo del dipéptido imidazol procede del pollo.
5. El agente para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, que además contiene creatina y un ácido nucleico.
6. El agente para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, que es para un anciano o una persona con un ligero trastorno del estado de ánimo.
ES15768816T 2014-03-28 2015-03-04 Dipéptido imidazol para el tratamiento de la demencia debida al envejecimiento o la atrofia cerebral Active ES2879329T3 (es)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2014069103 2014-03-28
JP2014142910A JP2015193582A (ja) 2014-03-28 2014-07-11 イミダゾールジペプチドを含む剤
PCT/JP2015/056412 WO2015146522A1 (ja) 2014-03-28 2015-03-04 イミダゾールジペプチドを含む剤

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2879329T3 true ES2879329T3 (es) 2021-11-22

Family

ID=54195052

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES15768816T Active ES2879329T3 (es) 2014-03-28 2015-03-04 Dipéptido imidazol para el tratamiento de la demencia debida al envejecimiento o la atrofia cerebral

Country Status (8)

Country Link
US (2) US20170165314A1 (es)
EP (1) EP3124034B1 (es)
JP (1) JP2015193582A (es)
KR (2) KR20220164079A (es)
CN (1) CN106413733A (es)
ES (1) ES2879329T3 (es)
SG (2) SG10201808208PA (es)
WO (1) WO2015146522A1 (es)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP6401028B2 (ja) * 2014-11-27 2018-10-03 Ｓｈｉｏｄａライフサイエンス株式会社 鯨筋肉抽出物からなる中長期記憶障害予防改善剤
JP6550357B2 (ja) * 2016-08-24 2019-07-24 日本ハム株式会社 イミダゾールジペプチドを含有する、グリア細胞における神経栄養因子等の遺伝子の発現誘導剤
JP7134607B2 (ja) * 2016-08-25 2022-09-12 大正製薬株式会社 錠剤
JP6510004B2 (ja) * 2016-11-15 2019-05-08 日本ハム株式会社 イミダゾールジペプチドを含有するエクソソーム調節剤、およびエクソソームを含有する神経細胞活性化剤
US11498048B2 (en) * 2017-10-13 2022-11-15 W.M. Barr & Company, Inc. Composition containing urea for use in brine formation
JP7251036B2 (ja) * 2018-06-28 2023-04-04 ポーラ化成工業株式会社 皮膚老化改善剤のスクリーニング方法
WO2020085459A1 (ja) * 2018-10-26 2020-04-30 国立大学法人東京大学 抗酸化剤、抗糖化剤又は抗炎症剤
JP7321017B2 (ja) * 2019-07-17 2023-08-04 東海物産株式会社 機能性食品
AU2020412909A1 (en) * 2019-12-27 2022-07-14 Suntory Holdings Limited Composition containing cyclic dipeptide, purine nucleoside and/or amino acid, and chicken extract, production method thereof, and use of cyclic dipeptide, purine nucleoside and/or amino acid, and chicken extract
JP2024518665A (ja) * 2021-05-14 2024-05-01 ユニバーシティ オブ ロチェスター 加齢に伴う疾患を防止および／または処置することにおける使用のためのｓｉｒｔ６のバリアント

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR960010020A (ko) * 1994-09-09 1996-04-20 도리이 신이치로 조혈 기능 항진제
EP1719510A1 (en) * 1994-11-08 2006-11-08 Avicenda Group, Inc. Use of creatine or creatine analogs for the tratment of diseases of the nervous system
JP2000116987A (ja) 1998-10-15 2000-04-25 Sanyo Electric Co Ltd 洗剤溶かし装置およびこれを備えた洗濯機ならびに静止型溶解装置
JP4023648B2 (ja) 1999-01-13 2007-12-19 日本ハム株式会社 皮膚代謝促進物及び機能性食品
JP2003513039A (ja) * 1999-11-03 2003-04-08 ジュヴェノン インコーポレイテッド 良性の健忘症を治療する方法
KR20020044740A (ko) * 2000-12-06 2002-06-19 강경선 카노신을 유효성분으로 하는 세포예정사 관련 질환의 예방및 치료제
AU2002238931B2 (en) 2001-03-16 2007-05-31 Cerebos Pacific Limited Autonomic controlling agents and health drinks and foods
US6498498B1 (en) * 2001-06-27 2002-12-24 Intel Corporation Apparatus and method for applying reciprocity to frequency-domain noise analysis
WO2003013514A1 (en) * 2001-08-08 2003-02-20 Carn-Aware Llc Improving neurological functions
US20060257502A1 (en) * 2005-05-11 2006-11-16 Jiankang Liu A combination of mitochondrial nutrients for relieving stress, preventing and improving stress-related disorders
JP2007070316A (ja) 2005-09-09 2007-03-22 Nippon Meat Packers Inc 経口用組成物及び栄養補助食品
WO2007116987A1 (ja) * 2006-03-31 2007-10-18 Nippon Meat Packers, Inc. 学習機能向上効果及び抗不安効果を有する機能性食品及び薬剤

Also Published As

Publication number Publication date
SG10201808208PA (en) 2018-10-30
CN106413733A (zh) 2017-02-15
WO2015146522A1 (ja) 2015-10-01
JP2015193582A (ja) 2015-11-05
US20170165314A1 (en) 2017-06-15
EP3124034A4 (en) 2018-03-21
US20180140655A1 (en) 2018-05-24
EP3124034A1 (en) 2017-02-01
EP3124034B1 (en) 2021-04-21
SG11201608027RA (en) 2016-11-29
KR20220164079A (ko) 2022-12-12
KR20160146760A (ko) 2016-12-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2879329T3 (es) Dipéptido imidazol para el tratamiento de la demencia debida al envejecimiento o la atrofia cerebral
Logan et al. Nutritional psychiatry research: an emerging discipline and its intersection with global urbanization, environmental challenges and the evolutionary mismatch
JP6403039B2 (ja) Ｓｉｒｔ３およびｓｉｒｔ６の活性化剤
Chung et al. Improved cognitive performance following supplementation with a mixed-grain diet in high school students: a randomized controlled trial
JP2009528028A (ja) 哺乳類における健康状態を促進するためのレスベラトロールおよびその誘導体の使用
CN113398144B (zh) 核苷酸混合物在制备预防或缓解老年肌少症制剂中的应用
JP2021531738A (ja) ケトン曝露を増加させるためのｍｃｔ製剤、並びにかかる製剤の製造及び使用方法
Cordeiro et al. Effects of fish protein hydrolysate ingestion on postexercise aminoacidemia compared with whey protein hydrolysate in young individuals
CN101389321A (zh) 白藜芦醇及其衍生物用于改善哺乳动物健壮状态的用途
JP6510004B2 (ja) イミダゾールジペプチドを含有するエクソソーム調節剤、およびエクソソームを含有する神経細胞活性化剤
Karlic et al. Vegetarian diet affects genes of oxidative metabolism and collagen synthesis
JP7101372B2 (ja) イミダゾールジペプチドを含む剤
JP2018030809A (ja) イミダゾールジペプチドを含有する、グリア細胞における神経栄養因子等の遺伝子の発現誘導剤
WO2023188173A1 (ja) 脳内のｇａｂａ増加剤
US20230310360A1 (en) Mct formulations for improving cognitive functions
Doyle Case Report: Utilization of Urinary Neurotransmitter Metabolite Testing and Natural Supplements in the Management of Disordered Eating.
Ahsan A Brief Overview and History of Human Nutrition and Health
Seimetz et al. Effects of omnivorous and vegetarian diets in neuromuscular adaptations to physical exercise: A systematic review
Günther Iron and Special Diets
Sawhney et al. Childhood Obesity: Reason behind this health crisis