ES2831900T3 - Composición que comprende bacterias del ácido láctico para su uso en el tratamiento preventivo y/o curativo de infecciones y/o inflamaciones de las vías urinarias y/o la vejiga - Google Patents

Composición que comprende bacterias del ácido láctico para su uso en el tratamiento preventivo y/o curativo de infecciones y/o inflamaciones de las vías urinarias y/o la vejiga Download PDF

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Abstract

Composición que comprende una mezcla de bacterias, que comprende o, alternativamente, consiste en: - al menos una cepa de bacterias seleccionada del grupo que comprende la cepa de Lactobacillus plantarum LMG P-21021 (LP01) y la cepa de Lactobacillus plantarum LMG P-21020 (LP02), combinada con la cepa de Lactobacillus paracasei DSM 24243 (LPC09), para su uso en el tratamiento preventivo y/o curativo de infecciones y/o inflamaciones de las vías urinarias y/o la vejiga.

Description

DESCRIPCIÓN
Composición que comprende bacterias del ácido láctico para su uso en el tratamiento preventivo y/o curativo de infecciones y/o inflamaciones de las vías urinarias y/o la vejiga
La presente invención se refiere a una composición que comprende una mezcla de bacterias que comprende o, alternativamente, consiste en al menos una cepa de bacterias seleccionada del grupo que comprende la cepa de Lactobacillus plantarum LMG P-21021 (LP01) y la cepa de Lactobacillus plantarum LMG P-21020 (LP02), combinada con la cepa de Lactobacillus paracasei DSM 24243 (LPC09), para su uso en el tratamiento preventivo y/o curativo de infecciones y/o inflamaciones de las vías urinarias y/o la vejiga.
Se sabe que las bacterias patógenas pertenecientes a la especie Escherichia coli son capaces de adherirse a la superficie de las células epiteliales de la vejiga urinaria (urotelio). Por este y por otros motivos, se sabe que las bacterias patógenas pertenecientes a la especie Escherichia coli son responsables de más del 80% de los casos de infecciones bacterianas, que provocan inflamaciones de la vejiga (cistitis). La cistitis, en particular la cistitis recurrente, provoca molestias y dolor, a veces incluso de forma aguda.
En vista de lo anterior, existe la necesidad de intervenir tanto contra infecciones bacterianas provocadas por E. coli como contra inflamaciones relacionadas de las vías urinarias y/o la vejiga.
Por tanto, existe la necesidad de intervenir eficazmente contra patógenos pertenecientes a la especie Escherichia coli tanto a través del efecto de barrera, con el fin de reducir la adhesión del propio patógeno a las células epiteliales de la vejiga urinaria, como a través de una actividad contra E. coli, para impedir el desarrollo y la proliferación del propio patógeno. En particular, existe la necesidad de tener un tratamiento para prevenir y/o curar la cistitis, en particular la cistitis recurrente, mediante la adopción de un tratamiento compatible con el entorno fisiológico y que se tolere bien, de modo que se administre para un uso continuo sin efectos secundarios. Finalmente, existe la necesidad de tener un efecto de barrera natural y eficaz, tanto en el caso de un episodio agudo como de posibles recaídas, que continúe a lo largo del tiempo para garantizar una protección a largo plazo y asegurar un tratamiento preventivo y/o curativo eficaz de larga duración.
El solicitante, tras una larga e intensa actividad de investigación, proporcionó una respuesta a las necesidades mencionadas anteriormente. De hecho, el solicitante, después de someter a prueba y estudiar muchas cepas de bacterias lácticas, logró seleccionar sólo unas de ellas. Las cepas seleccionadas tienen, al mismo tiempo, una actividad contra las bacterias patógenas E. coli que provocan infecciones y una alta actividad antiinflamatoria dado que son cepas de bacterias que producen interleucina 4 (IL-4) e interleucina 10 (IL-10).
Es un objeto de la presente invención proporcionar una composición para su uso en el tratamiento preventivo y/o curativo de infecciones bacterianas e inflamaciones relacionadas de las vías urinarias y/o la vejiga, que tiene las características tal como se divulgan en la reivindicación adjunta.
Dicha composición es preferiblemente para su uso en el tratamiento preventivo y/o curativo de cistitis, en particular de cistitis recurrente.
Se pretende que tratamiento preventivo y/o curativo también incluya circunstancias en las que se limita, reduce o atenúa la inflamación de las vías urinarias y/o la vejiga, lo que mejora las condiciones de salud del sujeto que está tratándose.
En la siguiente descripción detallada se contemplan realizaciones preferidas.
En el contexto de la presente invención, se pretende que composición incluya una composición farmacéutica, o un producto de suplemento o un dispositivo médico o una composición alimenticia.
Es un objeto de la presente divulgación una composición que comprende una mezcla de bacterias que comprende o, alternativamente, consiste en: cepas de bacterias que tienen tanto una actividad antibacteriana específica contra E. coli como una actividad antiinflamatoria con estimulación de la producción de interleucina IL-4 e interleucina IL-10, y cepas de bacterias que tienen una actividad de degradación de oxalatos.
Es un objeto de la presente divulgación una composición en la que dicha mezcla comprende o, alternativamente, consiste en: al menos una cepa de bacterias que tiene tanto una actividad antibacteriana específica contra E. coli como una actividad antiinflamatoria con estimulación de la producción de interleucina IL-4 e interleucina IL-10, combinada con al menos una cepa de bacterias que tiene una actividad de degradación de oxalatos.
En el presente documento se divulga además una composición que comprende o, alternativamente, que consiste en una mezcla de bacterias que comprende o, alternativamente, consiste en al menos una cepa de bacterias seleccionada del grupo que comprende la cepa de Lactobacillus plantarum LMG P-21021 (LP01) y la cepa de Lactobacillus plantarum LMG P-21020 (LP02), combinada con al menos una cepa de bacterias seleccionada del grupo que comprende la cepa de Lactobacillus paracasei DSM 24243 (LPC09), la cepa de Lactobacillus gasseri DSM 18299 (LGSoi), la cepa de Lactobacillus gasseri DSM 18300 (LGS02), la cepa de Lactobacillus acidophilus DSM 24303 (LA07) y la cepa de Lactobacillus acidophilus DSM 21717 (LA02), para su uso en el tratamiento preventivo y/o curativo de infecciones bacterianas e inflamaciones relacionadas de las vías urinarias y/o la vejiga.
La cepa de Lactobacillus plantarum LMG P-21021 (LP01) la depositó la empresa Mofin SrI el 16.10.2001 en el centro BCCM LMG.
La cepa de Lactobacillus plantarum LMG P-21020 (LP02) la depositó la empresa Mofin SrI el 16.10.2001 en el centro BCCM LMG.
La cepa de Lactobacillus paracasei DSM 24243 (LPC09) la depositó la empresa Probiotical S.p.A. el 23.11.2010 en el centro DSMZ.
La cepa de Lactobacillus gasseri DSM 18299 (LGS01) la depositó la empresa Anidral Srl, ahora Probiotical S.p.A., el 24.05.2006 en el centro DSMZ.
La cepa de Lactobacillus gasseri DSM 18300 (LGS02) la depositó la empresa Anidral Srl, ahora Probiotical S.p.A., el 24.05.2006 en el centro DSMZ.
La cepa de Lactobacillus acidophilus DSM 24303 (LA07) la depositó la empresa Probiotical S.p.A. el 23.11.2010 en el centro DSMZ.
La cepa de Lactobacillus acidophilus DSM 21717 (LA02) la depositó la empresa Probiotical S.p.A. el 06.08.2008 en el centro DSMZ.
La composición puede comprender o, alternativamente, consistir en una mezcla de bacterias que comprende o, alternativamente, consiste en Lactobacillus plantarum LMG P-21021 (LP01) combinada con al menos una cepa de bacterias seleccionada del grupo que comprende la cepa de Lactobacillus paracasei DSM 24243 (LPC09), la cepa de Lactobacillus gasseri DSM 18299 (LGS01), la cepa de Lactobacillus gasseri DSM 18300 (LGS02), la cepa de Lactobacillus acidophilus DSM 24303 (LA07) y la cepa de Lactobacillus acidophilus Ds M 21717 (La 02); preferiblemente en una razón en peso comprendida desde 4:1 hasta 3:1; incluso más preferiblemente de 1:1. Dichas composiciones son para su uso en el tratamiento preventivo y/o curativo de cistitis, en particular de cistitis recurrente.
Además, la composición puede comprender o, alternativamente, consistir en una mezcla de bacterias que comprende o, alternativamente, consiste en Lactobacillus plantarum LMG P-21020 (LP02) combinada con al menos una cepa de bacterias seleccionada del grupo que comprende la cepa de Lactobacillus paracasei DSM 24243 (LPC09), la cepa de Lactobacillus gasseri DSM 18299 (LGS01), la cepa de Lactobacillus gasseri DSM 18300 (LGS02), la cepa de Lactobacillus acidophilus DSM 24303 (LA07) y la cepa de Lactobacillus acidophilus Ds M 21717 (La 02); preferiblemente en una razón en peso comprendida desde 4:1 hasta 3:1; incluso más preferiblemente de 1:1. Preferiblemente, dichas composiciones son para su uso en el tratamiento preventivo y/o curativo de cistitis, en particular de cistitis recurrente.
Dichas composiciones pueden comprender además un extracto de arándano, preferiblemente un extracto de arándano seco, y/o pueden comprender además una D-manosa.
Dichas composiciones pueden comprender, además de las cepas de bacterias descritas anteriormente y las cantidades divulgadas anteriormente, un extracto de arándano, preferiblemente un extracto de arándano seco; y/o pueden comprender una D-manosa; y/o pueden comprender una goma vegetal y/o una gelatina vegetal. La goma vegetal y/o la gelatina vegetal se selecciona preferiblemente del grupo que comprende un tanato o un tanato de gelatina, un alginato, un xiloglucano o xilogel, una goma guar, una goma tara, una goma arábiga, algarroba, avena, fibra de bambú, fibras de frutas cítricas y glucomananos. Preferiblemente es una goma guar. La goma vegetal y/o gelatina vegetal seleccionada reduce la translocación bacteriana de E. coli desde el intestino hasta la vejiga.
Preferiblemente, todas las composiciones descritas anteriormente pueden comprender además una fibra con actividad prebiótica seleccionada de inulina, fructooligosacáridos (FOS), galactooligosacáridos y trans-galactooligosacáridos (GOS y TOS), glucooligosacáridos (GOSa), xilooligosacáridos, (XOS), oligosacáridos de quitosano (COS), oligosacáridos de soja (SOS), isomaltooligosacáridos (IMOS), almidón resistente, pectinas, psilio, arabinogalactanos, glucomananos y galactomananos.
La composición también puede comprender o, alternativamente, consistir en:
(i) una mezcla de bacterias que comprende o, alternativamente, consiste en Lactobacillus plantarum LMG P-21021 (LP01) y Lactobacillus paracasei DSM 24243 (LPC09); preferiblemente en una razón en peso comprendida desde 4:1 hasta 3:1; incluso más preferiblemente de 1:1,
(ii) un extracto de arándano, preferiblemente un extracto de arándano seco, una D-manosa y una goma guar; preferiblemente en una razón en peso de 1:1:1, y
(ii) un fructooligosacárido (FOS); preferiblemente en una razón en peso de 5:1 con respecto al peso de extracto de arándano.
Alternativamente, la composición puede comprender o, alternativamente, consistir en:
(i) una mezcla de bacterias que comprende o, alternativamente, consiste en Lactobacillus plantarum LMG P-21020 (LP02) y Lactobacillus acidophilus DSM 21717 (LA02); preferiblemente en una razón en peso comprendida desde 4:1 hasta 3:1; incluso más preferiblemente de 1:1,
(ii) un extracto de arándano, preferiblemente un extracto de arándano seco, una D-manosa y una goma guar; preferiblemente en una razón en peso de 1:1:1, y
(iii) un fructooligosacárido (FOS); preferiblemente en una razón en peso de 5:1 con respecto al peso de extracto de arándano.
La composición de la presente invención, debido a la presencia de un extracto de arándano, preferiblemente un extracto seco (nombre comercial PACran®, un extracto seco de arándano estadounidense (extracto de arándano Vaccinium macrocarpon), es capaz de establecer un impedimento fisicomecánico contra la adhesión de Escherichia coli a la superficie de las células epiteliales de la vejiga urinaria (urotelio).
La actividad de dicho extracto de arándano está mediada, en particular, por la subfracción de proantocianidina con los trímeros y tetrámeros caracterizados por enlaces de tipo A que compiten con las adhesinas ubicadas en las fimbrias de tipo P (FimH, sensibles a manosa), que usa E. coli para mediar en su anclaje a las células epiteliales a través de receptores específicos, impidiendo de ese modo de manera fisicomecánica su adhesión y posterior colonización de la vejiga.
Ventajosamente, la cepa de bacterias Lactobacillus plantarum LMG P-21021 (LP01) y/o la cepa de bacterias Lactobacillus plantarum LMG P-21020 (LP02), en presencia del extracto de arándano, son capaces de complementar y potenciar el impedimento fisicomecánico ejercido por el extracto de arándano tal como se describió anteriormente, a través de una acción de tipo barrera incluso a nivel intestinal contra E. coli. Estas dos cepas de bacterias Lactobacillus plantarum LMG P-21021 (LP01) y Lactobacillus plantarum LMG P-21020 (LP02) tienen una actividad contra E. coli probada y una alta actividad antiinflamatoria dado que producen interleucina 4 (IL-4) e interleucina 10 (IL-10).
Preferiblemente, la cepa de bacterias Lactobacillus plantarum LMG P-21021 (LP01) y/o la cepa de bacterias Lactobacillus plantarum LMG P-21020 (LP02) están en una cantidad comprendida desde 1 hasta 3 miles de millones de células viables/dosis, incluso más preferiblemente desde 2 hasta 2,5 miles de millones de células viables/dosis.
Las cepas de bacterias de la presente invención ejercen una acción de tipo barrera marcada contra potenciales patógenos Gram-negativos, con particular referencia a la especie Escherichia coli, y una alta actividad antiinflamatoria dado que producen interleucina 4 (IL-4) e interleucina 10 (IL-10).
Ventajosamente, las cepas de bacterias Lactobacillus paracasei DSM 24243 (LPC09), Lactobacillus gasseri DSM 18299 (LGS01), Lactobacillus gasseri DSM 18300 (LGS02), Lactobacillus acidophilus DSM 24303 (LA07) y Lactobacillus acidophilus DSM 21717 (LA02) son capaces de llevar a cabo una acción protectora dado que ejercen un efecto de barrera frente a los oxalatos contenidos en el extracto de arándano, preferiblemente en forma de extracto seco. La metabolización de estas moléculas de oxalato previene la acumulación intestinal y la absorción sistémica de las mismas, evitando de ese modo el establecimiento y el mantenimiento de un estado inflamatorio del intestino particularmente desventajoso en la aparición de divertículos.
Las cepas de bacterias Lactobacillus paracasei DSM 24243 (LPC09), Lactobacillus gasseri DSM 18299 (LGS01), Lactobacillus gasseri DSM 18300 (LGS02), Lactobacillus acidophilus Ds M 24303 (LA07) y Lactobacillus acidophilus DSM 21717 (LA02) metabolizan los oxalatos y, por tanto, tienen una actividad antiformación de cálculos renales probada. Estas cepas de bacterias previenen la acumulación renal de oxalatos, evitando de ese modo la formación de cálculos renales y, por tanto, impidiendo el establecimiento y el mantenimiento de un estado inflamatorio de las vías urinarias particularmente desventajoso para el estado de salud de una vejiga sometida a cistitis recurrente.
El porcentaje de degradación de oxalatos es el siguiente:
- Lactobacillus paracasei DSM 24243 (LPC09), mayor del 68%;
- Lactobacillus gasseri DSM 18299 (LGS01), mayor del 68%;
- Lactobacillus gasseri DSM 18300 (LGS02), mayor del 66%;
- Lactobacillus acidophilus DSM 24303 (LA07), mayor del 54%;
- Lactobacillus acidophilus DSM 21717 (LA02), mayor del 50%.
La presencia de cepas de bacterias que degradan oxalatos en la composición de la presente invención también es importante por el siguiente motivo. El extracto de arándano contiene una razonable cantidad de oxalato. Un uso prolongado de extracto de arándano podría conducir a la formación de cálculos renales, que puede forzar al sujeto a suspender el uso del mismo. El uso de cepas que degradan oxalatos de la presente invención previene este inconveniente, permitiendo una administración prolongada de extracto de arándano.
Preferiblemente, las cepas de bacterias Lactobacillus paracasei DSM 24243 (LPC09), Lactobacillus gasseri DSM 18299 (LGS01), Lactobacillus gasseri DSM 18300 (LGS02), Lactobacillus acidophilus DSM 24303 (LA07) y Lactobacillus acidophilus DSM 21717 (LA02) están en una cantidad comprendida desde 0,5 hasta 2 miles de millones de células viables/dosis, incluso más preferiblemente desde 1 hasta 1,5 miles de millones de células viables/dosis.
La composición comprende además D-manosa, que potencia el efecto de barrera ejercido por el extracto de arándano. En particular, la D-manosa en un azúcar simple, concretamente un monosacárido que, una vez absorbido en la circulación sanguínea, ni se transforma en glucógeno ni se explota por el organismo, con una posterior retirada por el riñón y una obtención de altas concentraciones en las vías urinarias en las que ejercerá sus efectos impedientes contra las bacterias que están presentes. De hecho, la D-manosa tiene una alta afinidad por lectinas sensibles a manosa, proteínas típicas de membranas celulares del organismo humano usadas por muchas bacterias para su adhesión a las mucosas urinarias. Además, la D-manosa también ejerce una acción mecánica, que inhibe la formación de biopelículas que muchas bacterias son capaces de producir con el doble propósito de proteger frente a los elementos del sistema inmunitario humano y frente a los antibióticos, así como de adherirse de manera más eficaz a la superficie de mucosa.
La composición puede comprender además al menos una goma, entre aquellas descritas anteriormente, que disminuye la translocación bacteriana de E. coli desde el intestino hasta la vejiga. La goma puede ser una goma vegetal y/o una gelatina vegetal. La goma vegetal y/o la gelatina vegetal se selecciona preferiblemente del grupo que comprende un tanato o un tanato de gelatina, un alginato, un xiloglucano o xilogel, una goma guar, una goma tara, una goma arábiga, algarroba, avena, fibra de bambú, fibras de frutas cítricas y glucomananos. Preferiblemente es una goma guar. La goma vegetal y/o gelatina vegetal seleccionada reduce la translocación bacteriana de E. coli desde el intestino hasta la vejiga. Preferiblemente es una goma guar. La goma guar ejerce una acción mecánica a nivel intestinal, impidiendo la adhesión de Escherichia coli y otros patógenos a la mucosa del órgano, reduciendo de ese modo su translocación a través de la pared intestinal y el posterior riesgo de infección de órganos adyacentes. En particular, la goma actúa formando un gel hidrófilo, que se distribuye de manera uniforme a lo largo de la superficie de mucosa, restaurando el efecto de barrera fisiológica de este órgano, que normalmente resulta deteriorado en el acontecimiento de infecciones intestinales por Escherichia coli u otros patógenos.
Además, la composición comprende además una fibra con actividad prebiótica (fibra prebiótica) que puede seleccionarse de inulina, fructooligosacáridos (FOS), galactooligosacáridos y trans-galactooligosacáridos (GOS y TOS), glucooligosacáridos (GOSa), xilooligosacáridos, (XOS), oligosacáridos de quitosano (COS), oligosacáridos de soja (SOS), isomaltooligosacáridos (MOS), almidón resistente, pectinas, psilio, arabinogalactanos, glucomananos y galactomananos. Preferiblemente, se selecciona de fructooligosacáridos de cadena corta (FOSsc) o galactooligosacáridos (GOS), que contribuye al crecimiento y a la replicación de las cepas bacterianas existentes en la composición.
La composición puede comprender además excipientes seleccionados de aromas naturales, antiaglomerantes tales como dióxido de silicio, antocianinas de zanahoria negra, sucralosa.
La mezcla de bacterias tiene una carga bacteriana comprendida desde 1x108 hasta 1x1012 UFC/g de mezcla. La composición que contiene dicha mezcla de bacterias tiene una carga bacteriana de aproximadamente 5x107-5x109 UFC/composición.
Además, se divulga una composición que comprende una mezcla que comprende o, alternativamente, consiste en:
-(a) una cepa de bacteria Lactobacillus plantarum LP01 (LMG P-21021) y/o
-(b) una cepa de bacteria Lactobacillus paracasei LPC09 (DSM 24243); dicha composición comprende además:
-(c) un complejo gelificante mucoadhesivo específico, que se compone de EPS, exopolisacáridos de origen bacteriano (producidos por Streptococcus thermophilus ST10, DSM 25246) y goma tara, un polisacárido de origen vegetal. Dicho complejo gelificante es capaz de establecer un efecto de barrera mecánica en todo el tracto gastrointestinal. Dicha composición contiene además (d) un extracto seco específico de arándano estadounidense (arándano - PACran®) y (e) una cantidad adecuada de D-manosa (composición).
Debido a la presencia de arándano y D-manosa, la composición es capaz de establecer una acción impediente de tipo fisicomecánico contra la adhesión de Escherichia coli a la superficie de las células epiteliales de la vejiga urinaria, responsable de la mayoría de los casos de infecciones bacterianas que provocan inflamaciones de este órgano (cistitis).
Debido a la presencia del componente específico PACran®, un extracto seco de arándano estadounidense (arándano, Vaccinium macrocarpon), la composición es capaz de establecer un impedimento fisicomecánico natural contra la adhesión de Escherichia coli a la superficie de las células epiteliales de la vejiga y las vías urinarias. Su principal actividad está relacionada con la subfracción de proantocianidinas (componentes fitoquímicos de frutas) que contiene oligoelementos que compiten con las adhesinas ubicadas en las fimbrias de tipo P (FimH, sensibles a manosa), que usa E. coli para mediar en su anclaje a las células epiteliales, impidiendo de ese modo de manera fisicomecánica su adhesión y posterior colonización de las vías urinarias y la vejiga.
Una barrera de este tipo se potencia adicionalmente debido a la presencia de D-manosa, un azúcar simple. Las bacterias UPEC, al unirse a las moléculas de D-manosa a través de las fimbrias de tipo P, permanecen en forma libre en la orina y, por tanto, se retiran más fácilmente mediante la micción. Finalmente, la D-manosa ejerce una acción mecánica que inhibe la formación de biopelículas que muchas bacterias son capaces de producir. Después de ejercer su efecto impediente, la D-manosa es capaz de unirse a las células de la mucosa de la vejiga (de la que forma una parte constitutiva), restaurando una capa protectora similar a la fisiológica que se compone de glicosaminoglicanos, que se daña habitualmente por inflamaciones recurrentes.
La composición comprende además una cantidad adecuada de goma tara que, debido a sus propiedades gelificantes y mucoadhesivas, es capaz de formar un hidrogel en el plazo de unos pocos minutos tras la ingestión, en virtud de sus características tixotrópicas, creando de ese modo, en la primera parte del tracto gastrointestinal, una acción de barrera mecánica contra la adhesión de Escherichia coli y otros patógenos a la mucosa del órgano, reduciendo de ese modo la translocación de los mismos a través de la pared intestinal y el posterior riesgo de infección de órganos adyacentes, entre los que principalmente se encuentra la vejiga. Un efecto de barrera de este tipo se completa y extiende por todo el tracto gastrointestinal por la presencia de exopolisacáridos (EPS), producidos in situ por el microorganismo Streptococcus thermophilus ST10, que potencian de ese modo la viscosidad del entorno circundante a través de un mecanismo autorregulado y exclusivamente mecánico. La ingestión de la bacteria mencionada anteriormente aporta en el intestino humano una fuente de moléculas con actividad gelificante, ejerciendo de ese modo una acción totalmente complementaria a la de la goma tara.
El complejo gelificante mucoadhesivo mencionado anteriormente tiene una propiedad innovadora que ha de tenerse en cuenta: la goma tara, al igual que todas las gomas de origen vegetal, se degrada progresivamente por la microbiota residente durante su tránsito intestinal, reduciendo progresivamente de ese modo su poder gelificante de impedimento mecánico. La reducción gradual de la acción de la goma vegetal se contrarresta eficazmente por el aumento gradual de la liberación de exopolisacáridos (EPS) en la luz intestinal por la cepa bacteriana ST10, que ejerce su propiedad principalmente en el íleo y el colon. Por tanto, la combinación sinérgica de goma tara y exopolisacáridos (EPS) garantiza la presencia de moléculas gelificantes en todo el tracto gastrointestinal, maximizando y optimizando la acción de barrera mecánica del producto. Por tanto, la presencia, la producción y la retención del gel hidrófilo en la luz del órgano pueden considerarse por primera vez realmente completas, con una primera área en la que la acción de la goma vegetal es máxima y una segunda área en la que la acción de los exopolisacáridos (EPS) es máxima.
Los dos microorganismos, Lactobacillus plantarum LP01 (LMG P-21021) (por ejemplo 2,5 miles de millones/dosis diaria) y Lactobacillus paracasei LPC09 (DSM 24243) (por ejemplo 1 miles de millones/dosis diaria), median en la potenciación del efecto de barrera establecido por el complejo gelificante mucoadhesivo que se compone de goma tara y exopolisacáridos (EPS), mediante una acción de tipo barrera contra E. coli incluso a nivel intestinal. El solicitante llevó a cabo una selección de microorganismos con una acción de tipo barrera marcada contra potenciales patógenos Gram-negativos, con particular referencia a la especie Escherichia coli, cuyo principal papel en la cistitis se ha demostrado bien. Además de las 4 cepas de E. coli que se derivan de la colección ATCC, la acción de barrera también se cuantificó contra el serotipo enterohemorrágico O157:H7, capaz de producir una o más toxinas Shiga, y Klebsiella spp., solas o en combinación con E. coli. Tras esta actividad de investigación, se seleccionó positivamente la cepa de Lactobacillus plantarum LP01 mencionada anteriormente, que es capaz de establecer una acción de tipo barrera contra tanto E. coli como Klebsiella. Además, el microorganismo Lactobacillus paracasei LPC09 es capaz de crear un efecto de barrera frente a los oxalatos, garantizando la completa tolerabilidad del extracto de arándano incluso en sujetos particularmente sensibles a pequeñas concentraciones de estos potenciales agentes inflamatorios de las mucosas intestinal y urinaria.
Por tanto, puede concluirse que la composición actúa principalmente estableciendo un impedimento fisicomecánico capaz de reducir la adhesión al urotelio de Escherichia coli, que es la principal causa de infecciones e inflamaciones (cistitis) de la vejiga. Además, la presencia del complejo gelificante mucoadhesivo específico que se compone de goma tara y exopolisacáridos (EPS) producido in situ por S. thermophilus ST10, así como de los dos microorganismos L. plantarum LP01 y L. paracasei LPC09, media en la potenciación del impedimento fisicomecánico mediado al combinar arándano y D-manosa, con una acción de tipo barrera incluso a nivel intestinal contra E. coli y de la posible translocación de microorganismos patógenos a través de la pared intestinal.
Se sabe que las infecciones de las vías urinarias (UTI, Urinary Tract Infections) son las infecciones bacterianas más comunes en las mujeres. La mayoría de las UTI son cistitis aguda sin complicaciones provocada por Escherichia coli (86%). El presente estudio in vivo llevado a cabo por el solicitante se realizó para evaluar la eficacia de una composición que comprendía un extracto de arándano seco, D-manosa, un complejo gelificante que se componía de exopolisacáridos (EPS) producidos por Streptococcus thermophilus ST10 (DSM 25246) y goma tara, así como los dos microorganismos Lactobacillus plantarum LP01 (LMG P-21021) y Lactobacillus paracasei LPC09 (DSM 24243), en mujeres con cistitis aguda sin complicaciones.
Se sometió a prueba la siguiente composición: 2,5x109 de células viables de la cepa de bacteria Lactobacillus plantarum LMG P-21021 (LP01), 1x109 de células viables de la cepa de bacteria Lactobacillus paracasei DSM 24243 (LPC09) y 1x109 de células viables de la cepa de bacteria S. thermophilus DSM 25246 (ST10) junto con 250 mg de goma tara, 500 mg de un extracto de arándano PACs (Naturex SA, Avignon, Francia) y 250 mg de D-manosa (Hebei Huaxu Pharmaceutical Co., Shijiazhuang, China).
Métodos. Se reclutaron 33 mujeres premenopáusicas y no gestantes diagnosticadas con cistitis aguda sin complicaciones en un estudio piloto prospectivo y completaron el protocolo del tratamiento. A los sujetos se les dio instrucciones de tomar dos dosis al día durante el primer mes, luego continuar con 1 sobre al día hasta el sexagésimo día. Se usaron nitritos y esterasa leucocitaria para la evaluación con tiras reactivas de orina como marcadores de cistitis, llevando a cabo un análisis al principio, después de 30 y 60 días, y después de un mes de seguimiento. Se puntuaron los síntomas típicos de UTI, concretamente disuria, vaciado frecuente de pequeños volúmenes, necesidad imperiosa de orinar, dolor suprapúbico y hematuria macroscópica, como 0-3 y se evaluaron durante cada examen médico.
Resultados. Se detectaron resultados positivos para la presencia de nitritos y esterasa leucocitaria, respectivamente, en 14 y 20 sujetos después de 30 días y en 9 y 14 mujeres después de 60 días (p < 0,001). Al final del periodo de seguimiento, se registraron resultados positivos para nitritos y esterasa leucocitaria sólo en 4 y 3 de los 24 y 19 sujetos (respectivamente, el 16,7%, p = 0,103; el 15,8%, p = 0,325) con resultados negativos después de 60 días. También se mejoraron significativamente los síntomas típicos de la cistitis, específicamente, disuria, vaciado frecuente, necesidad imperiosa y dolor suprapúbico. No se registraron diferencias significativas para la incidencia y gravedad de hematuria en ningún examen médico. El presente estudio demuestra la eficacia de la composición sometida a prueba basada en arándano, D-manosa, un complejo gelificante innovador y los dos microorganismos en la mejora significativa de los síntomas molestos notificados por mujeres con cistitis aguda.
El presente estudio piloto demuestra la capacidad a largo plazo de una combinación de extracto de arándano seco, D-manosa, un complejo gelificante que se compone de exopolisacáridos (EPS) producidos por S. thermophilus ST10 y goma tara, así como los dos microorganismos L. plantarum LP01 y L. paracasei LPC09, de mejorar significativamente los síntomas molestos notificados por mujeres con cistitis aguda. Según el conocimiento del solicitante, este es el primer estudio que evalúa la eficacia de una combinación de lactobacilos con un extracto de arándano seco en mujeres con cistitis aguda sin complicaciones. Se registró un número de recaídas relativamente bajo durante el primer mes de seguimiento según los parámetros considerados, sugiriendo de ese modo el efecto de barrera a largo plazo ejercido por el producto. La aceptación y el perfil de tolerabilidad global fueron muy buenos, ya que sólo se registraron dos exclusiones durante los meses primero y segundo de tratamiento debido a una desviación del protocolo y no se produjo ningún acontecimiento negativo significativo. El arándano (extracto de Vaccinium macrocarpon) y la D-manosa tienen ambos eficacia en impedir, también de manera mecánica, la adhesión de cepas de E. coli al urotelio, el epitelio que recubre la mayor parte de las vías urinarias. Esta prueba puede representar una herramienta natural destinada a reducir progresivamente la gravedad de una cistitis, contribuyendo de ese modo al alivio de los síntomas relacionados. En cualquier caso, los arándanos tienen un contenido relativamente alto de ácido oxálico, una sustancia que debe evitarse por los individuos con tendencia a formar piedras renales de oxalato de calcio. La cepa de L. paracasei LPC09 es capaz de metabolizar eficazmente los oxalatos in vitro, proporcionando de ese modo una potencial protección contra el riesgo de inflamación intestinal que se deriva de una suplementación prolongada con un extracto de arándano seco. El complejo gelificante que comprende goma tara y S. thermophilus ST10 es capaz de prolongar el efecto de barrera mecánica garantizado habitualmente por la goma en todo el intestino, protegiendo de ese modo al organismo contra una posible aparición o mantenimiento de un estado inflamatorio crónico de nivel bajo.
En el presente estudio, se usó una prueba con una tira reactiva de orina junto con la evaluación de los síntomas para diagnosticar UTI y cuantificar la eficacia de la composición sometida a prueba. La comodidad y el bajo coste de la evaluación con una tira reactiva de orina le permite ser una herramienta de diagnóstico común y representa una opción adecuada para el análisis de orina y la microscopía de orina para diagnosticar cistitis aguda sin complicaciones. Además, se sabe que la combinación de los resultados positivos obtenidos con la tira reactiva, en particular la prueba de nitritos, con los síntomas aumenta la probabilidad de UTI después de la prueba. En particular, la presencia de nitritos y esterasa leucocitaria en muestras de orina se consideró como factores prominentes para confirmar (ambos positivos) y excluir (ambos negativos) una UTI. De hecho, una tira reactiva positiva para esterasa leucocitaria o nitrito y negativa para el otro proporciona una información de diagnóstico no definitiva y, por tanto, en estos pacientes es necesaria una evaluación adicional.
Habitualmente, el nitrito no es detectable en la orina. Muchas bacterias Gram-negativas entéricas, tales como coliformes, son capaces de sintetizar nitrito, permitiendo de ese modo la detección de su presencia por medio de una prueba sencilla. Por el contrario, un aumento de leucocitos indica piuria y se detecta en casi todas las enfermedades renales y de las vías urinarias. La esterasa leucocitaria es un marcador fiable para los leucocitos en la orina. Los cultivos de orina se recomiendan sólo para pacientes que se sospecha que tienen pielonefritis aguda, pacientes con síntomas sin resolución o con recaída en un plazo de desde dos hasta cuatro semanas después de la finalización del tratamiento y pacientes con síntomas atípicos.
Se registró una reducción simultánea de la incidencia de resultados positivos para nitritos y esterasa leucocitaria y la gravedad de los síntomas de UTI, con particular referencia a disuria, vaciado frecuente, necesidad imperiosa y dolor suprapúbico. Cabe destacar que la hematuria se mantuvo sin apenas cambios durante todo el estudio, probablemente debido a que se requiere un periodo más largo para obtener la cicatrización del urotelio y que se vuelva clínicamente obvio.
En cualquier caso, los resultados obtenidos a partir del presente estudio son positivos y prometedores.
Ejemplo de composición n.° 1 (dosis de 2325 mg) en gránulos de sobre:
Componentes
- Extracto de arándano (arándano PACran®), 250 mg/dosis
- D-Manosa, 250 mg
- Lactobacillus plantarum LP01 (LMG P-21021), 125 mg (2,5x109 UFC/dosis)
- Lactobacillus paracasei LPC09 (DSM 24243), 50 mg (1x109 UFC/dosis)
- Fructooligosacáridos de cadena corta (FOSsc), 1250 mg/dosis
Excipientes (400 mg/dosis)
Aroma natural de arándano; antiaglomerante: dióxido de silicio; antocianinas de zanahoria negra; sucralosa.
Ejemplo de composición n.° 2 (dosis de 2575 mg) en gránulos de sobre:
Componentes
- Extracto de arándano (arándano PACran®), 250 mg/dosis
- D-Manosa, 250 mg
- Lactobacillus plantarum LP01 (LMG P-21021), 125 mg (2,5x109 UFC/dosis)
- Lactobacillus paracasei LPC09 (DSM 24243), 50 mg (1x109 UFC/dosis)
- Fructooligosacáridos de cadena corta (FOSsc), 1250 mg/dosis
- Goma guar, 250 mg/dosis
Excipientes (400 mg/dosis)
Aroma natural de arándano; antiaglomerante: dióxido de silicio; antocianinas de zanahoria negra; sucralosa.
Ejemplo de composición n.° 3 (dosis de 2575 mg) en gránulos de sobre:
Componentes
- Extracto de arándano (arándano PACran®), 500 mg/dosis
- D-Manosa, 250 mg
- Lactobacillus plantarum LP01 (LMG P-21021), 125 mg (2,5x109 UFC/dosis)
- Lactobacillus paracasei LPC09 (DSM 24243), 50 mg (1x109 UFC/dosis)
- Fructooligosacáridos de cadena corta (FOSsc), 1250 mg/dosis
Excipientes (400 mg/dosis)
Aroma natural de arándano; antiaglomerante: dióxido de silicio; antocianinas de zanahoria negra; sucralosa.
Ejemplo de composición n.° 4 (dosis de 2825 mg) en gránulos de sobre:
Componentes
- Extracto de arándano (arándano PACran®), 500 mg/dosis
- D-Manosa, 250 mg
- Lactobacillus plantarum LP01 (LMG P-21021), 125 mg (2,5x109 UFC/dosis)
- Lactobacillus paracasei LPC09 (DSM 24243), 50 mg (1x109 UFC/dosis)
- Fructooligosacáridos de cadena corta (FOSsc), 1250 mg/dosis
- Goma guar, 250 mg/dosis
Excipientes (400 mg/dosis)
Aroma natural de arándano; antiaglomerante: dióxido de silicio; antocianinas de zanahoria negra; sucralosa.
Los ejemplos de composición (5-8) corresponden a las composiciones (1-4) en las que la cepa de bacterias Lactobacillus plantarum LP01 (LMG P-21021) se reemplaza por la cepa de bacterias Lactobacillus plantarum LP02 (LMG P-21020) y la cepa de bacterias Lactobacillus paracasei LPC09 (DSM 24243) se reemplaza por la cepa de bacterias Lactobacillus acidophilus DSM 21717 (LA02).
La composición puede estar en forma sólida, para uso oral, como comprimido, cápsula, gránulos o polvo.
Las composiciones divulgadas pueden estar, por ejemplo, en forma de gránulos para uso oral en sobre, tener una vida útil de almacenamiento de al menos 3,5x109 células viables a los 24 meses y a 25°C. Se recomienda tomar 2 sobres al día durante las primeras 4 semanas, luego continuar, con fines de mantenimiento, con 1 sobre al día a lo largo de incluso largos periodos. Las composiciones se toleran bien por el organismo y, por tanto, permiten un uso continuo y prolongado a lo largo del tiempo sin efectos secundarios.
Citocinas con acción inmunorreguladora
Este estudio evaluó la inducción de citocinas IL-4 y IL-10, que representan las principales citocinas con acción inmunorreguladora. Tal como puede observarse en la figura A, las cepas de bacterias Lactobacillus plantarum LMG P-21021 (LP01) y Lactobacillus plantarum LMG P-21020 (LP02) sometidas a prueba son capaces de inducir un crecimiento estadísticamente significativo en relación con las condiciones iniciales en ambas citocinas.
Figura A. Perfil de citocinas. Media E.E.M. de 10 experimentos independientes. La significación estadística se calcula usando la prueba de la t de Student. Cuando se calculó en relación con las condiciones iniciales (PBMC sin estimular), los valores p<0,05 se consideran estadísticamente significativos. La producción de IL-10 se evaluó en el sobrenadante de cultivo después de un día de estimulación. La producción de IL-4 se evaluó en el sobrenadante de cultivo después de cinco días de estimulación. Se obtuvieron resultados similares con la cepa de Lactobacillus plantarum LMG P-21020 (LP02).
La figura 1 se refiere a la cuantificación de la inhibición de E. coli (ATCC 8739, ATCC 10536, ATCC 35218, ATCC 25922) por la cepa de Lactobacillus plantarum LMG P-21021 (LP01).
La figura B se refiere a la cuantificación de la inhibición de E. coli (ATCC 8739, ATCC 10536, ATCC 35218, ATCC 25922) por la cepa de Lactobacillus plantarum LMG P-21020 (LP02).

Claims (11)

  1. REIVINDICACIONES
    i. Composición que comprende una mezcla de bacterias, que comprende o, alternativamente, consiste en:
    - al menos una cepa de bacterias seleccionada del grupo que comprende la cepa de Lactobacillus plantarum LMG P-21021 (LP01) y la cepa de Lactobacillus plantarum LMG P-21020 (LP02), combinada con la cepa de Lactobacillus paracasei DSM 24243 (LPC09),
    para su uso en el tratamiento preventivo y/o curativo de infecciones y/o inflamaciones de las vías urinarias y/o la vejiga.
  2. 2. Composición para su uso según la reivindicación 1, en la que dicha mezcla de bacterias comprende o, alternativamente, consiste en Lactobacillus plantarum LMG P-21021 (LP01) combinada con Lactobacillus paracasei DSM 24243 (LPC09); preferiblemente en una razón en peso comprendida desde 4:1 hasta 3:1; incluso más preferiblemente de 1:1.
  3. 3. Composición para su uso según la reivindicación 1, en la que dicha mezcla de bacterias comprende o, alternativamente, consiste en Lactobacillus plantarum LMG P-21020 (LP02) combinada con Lactobacillus paracasei DSM 24243 (LPC09); preferiblemente en una razón en peso comprendida desde 4:1 hasta 3:1; incluso más preferiblemente de 1:1.
  4. 4. Composición para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que dicha composición es para su uso en el tratamiento preventivo y/o curativo de cistitis.
  5. 5. Composición para su uso según la reivindicación 4, en el tratamiento de cistitis recurrente.
  6. 6. Composición para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que dicha composición comprende además un extracto de arándano, preferiblemente un extracto de arándano seco, y/o dicha composición comprende además una D-manosa.
  7. 7. Composición para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que dicha composición comprende además una goma vegetal y/o una gelatina vegetal seleccionada preferiblemente del grupo que comprende un tanato o un tanato de gelatina, un alginato, un xiloglucano o xilogel, una goma guar, una goma tara, una goma arábiga, algarroba, avena, fibra de bambú, fibras de frutas cítricas y glucomananos; preferiblemente es una goma guar.
  8. 8. Composición para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que dicha composición comprende además una fibra con actividad prebiótica seleccionada de inulina, fructooligosacáridos (FOS), galactooligosacáridos y trans-galactooligosacáridos (GOS y TOS), glucooligosacáridos (GOSa), xilooligosacáridos, (XOS), oligosacáridos de quitosano (COS), oligosacáridos de soja (SOS), isomaltooligosacáridos (IMOS), almidón resistente, pectinas, psilio, arabinogalactanos, glucomananos y galactomananos; preferiblemente es un fructooligosacárido (FOS), preferiblemente de cadena corta.
  9. 9. Composición para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que dicha composición comprende o, alternativamente, consiste en:
    (i) una mezcla de bacterias que comprende o, alternativamente, consiste en Lactobacillus plantarum LMG P-21021 (LP01) y Lactobacillus paracasei DSM 24243 (LPC09); preferiblemente en una razón en peso comprendida desde 4:1 hasta 3:1; incluso más preferiblemente de 1:1,
    (ii) un extracto de arándano, preferiblemente un extracto de arándano seco, una D-manosa y una goma guar; preferiblemente en una razón en peso de 1:1:1, y
    (iii) un fructooligosacárido (FOS); preferiblemente en una razón en peso de 5:1 con respecto al peso de extracto de arándano.
  10. 10. Composición para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que dicha composición comprende una mezcla que comprende o, alternativamente, que consiste en:
    -(a) una cepa de bacteria Lactobacillus plantarum LP01 (LMGP-21021) y/o
    - (b) una cepa de bacteria Lactobacillus paracasei LPC09 (DSM 24243); dicha composición comprende además
    -(c) un complejo gelificante mucoadhesivo específico, que se compone de EPS, exopolisacáridos de origen bacteriano (producidos por Streptococcus thermophilus ST10, DSM 25246) y goma tara, y
    -(d) un extracto seco de arándano estadounidense (arándano - PACran®) y
    -(f) una cantidad de D-manosa.
  11. 11. Al menos una cepa de bacterias seleccionada del grupo que comprende la cepa de Lactobacillus plantarum LMG P-21021 (LP01) y la cepa de Lactobacillus plantarum LMG P-21020 (LP02), combinada con la cepa de Lactobacillus paracasei DSM 24243 (LPC09),
    para su uso en el tratamiento preventivo y/o curativo de infecciones y/o inflamaciones de las vías urinarias y/o la vejiga.
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