ES2593304T3 - Conjugados de transportador derivado de caliqueamicina - Google Patents

Conjugados de transportador derivado de caliqueamicina Download PDF

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John Francis Dijoseph
Mark Edward Ruppen
Nitin Krishnaji Damle
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Abstract

Un procedimiento de preparación de una composición que comprende conjugados de derivado monomérico de caliqueamicina/anticuerpo con una fracción conjugada baja (LCF) inferior al 10 por ciento que tiene la fórmula, Pr(-X-S-S-W)m, en la que: Pr es un anticuerpo, X es un engarce hidrolizable que puede liberar el derivado de caliqueamicina procedente del conjugado tras la unión y la entrada dentro de las células diana, W es una caliqueamicina; m es la carga promedio de un producto de conjugación purificado, de tal manera que el fármaco citotóxico constituye un 4 - 10 % del conjugado en peso; y (-X-S-S-W)m es un derivado de caliqueamicina, comprendiendo dicho procedimiento las etapas de: (1) añadir el caliqueamicina al anticuerpo en el que el derivado de caliqueamicina representa un 4,5-11 % en peso del anticuerpo; (2) incubar el derivado de fármaco citotóxico y un transportador proteínico en una solución tamponada no nucleófila, compatible con proteínas, que tiene un pH en un intervalo de aproximadamente 8 a 9 para producir un conjugado de fármaco/transportador citotóxico monomérico, en el que la solución comprende además (a) etanol, y (b) un aditivo que comprende al menos un ácido carboxílico C6-C18 o su sal, seleccionada entre: decanoato, nanoato 100 mM, undecanoato 20 mM, dodecanoato 5 mM, y en el que la incubación se lleva a cabo a una temperatura que varía entre aproximadamente 30 ºC a aproximadamente 35 ºC durante un periodo de tiempo que varía entre aproximadamente 15 minutos a 24 horas; y (3) someter la composición producida en la etapa (2) a un procedimiento de separación cromatográfica para separar el conjugado monomérico de derivado de caliqueamicina citotóxica / anticuerpo con una carga en el intervalo de 4 - 10 % en peso de fármaco citotóxico y con una fracción conjugada baja (LCF) por debajo del 10 por ciento de anticuerpo no conjugado, derivado de caliqueamicina, y los conjugados agregados.

Description

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SEQ ID NO: 28 y una cadena pesada que tiene la secuencia que se muestra en la SEQ ID NO: 30.
En una realización, el anticuerpo injertado con CDR es una variante de anticuerpo, que tiene especificidad aumentada para CD22 humano, y el anticuerpo se obtiene mediante un protocolo de maduración por afinidad.
En una realización, el fármaco citotóxico monomérico es caliqueamicina y se selecciona entre gamma caliqueamicina
o N-acetil caliqueamicina.
En una realización, la composición puede contener opcionalmente agente bioactivo adicional. Dicho agente bioactivo puede ser un fármaco citotóxico, un factor de crecimiento o una hormona.
Otro aspecto más de la invención se dirige a un procedimiento para tratar un sujeto con un trastorno proliferativo administrando al sujeto una dosis terapéuticamente eficaz de la composición de la invención. La composición se puede administrar por vía subcutánea, intraperitoneal, intravenosa, intraarterial, intramedular, intratecal, transdérmica, transcutánea, intranasal, tópica, entérica, intravaginal, sublingual o rectal. En una realización preferida, la composición de la invención se administra por vía intravenosa.
En una realización, la composición se administra a un sujeto humano que padece un trastorno proliferativo tal como cáncer. En una realización preferida, el cáncer es una neoplasia de linfocitos B. La neoplasia de linfocitos B puede ser una leucemia o linfoma que expresa el antígeno superficial celular CD22.
En otra realización adicional, el cáncer es un carcinoma o un sarcoma.
Otro aspecto de la presente invención se dirige a un procedimiento para tratar una neoplasia de linfocitos B administrando a un paciente con dicha neoplasia una composición terapéuticamente eficaz que comprende un conjugado de un anticuerpo dirigido contra CD22 con un fármaco citotóxico de la invención. En una realización preferida, la neoplasia de linfocitos B es un linfoma, particularmente linfoma no de Hodgkin.
En una realización, el fármaco citotóxico utilizado para preparar los conjugados de la presente invención se selecciona entre el grupo que consiste en caliqueamicinas, de acuerdo con la divulgación; tiotepa, taxanos, vincristina, daunorubicina, doxorubicina, epirubicina, actinomicina, autramicina, azaserinas, bleomicinas, tamoxifeno, idarubicina, dolastatinas/auristatinas, hemiasterlinas, esperamicinas y maitansinoides.
En una realización preferida, el fármaco citotóxico es gamma caliqueamicina o N-acetil caliqueamicina.
En otra realización, el tratamiento comprende administrar el conjugado del fármaco citotóxico de la invención con uno
o más agentes bioactivos seleccionados entre anticuerpos, factores de crecimiento, hormonas, citoquinas, antihormonas, xantinas, interleuquinas, interferones y fármacos citotóxicos.
En una realización preferida, el agente bioactivo es un anticuerpo, y se dirige contra un antígeno superficial celular expresado en neoplasias de linfocitos B. En una realización preferida, el anticuerpo dirigido contra los antígenos superficiales celulares expresados en neoplasias de linfocitos B se selecciona entre un grupo que consiste en anticuerpos dirigidos contra CD19, CD20 y CD33. Dichos anticuerpos incluyen el anticuerpo dirigido contra CD20, rituximab (Rituxan™).
En otra realización, los agentes bioactivos son citoquinas o factores de crecimiento e incluyen, pero sin limitación, interleuquina 2 (IL-2), TNF, CSF, GM-CSF y G-CSF.
En otra realización, los agentes bioactivos son hormonas e incluyen estrógenos (dietilestilbestrol, estradiol), andrógenos (testosterona, Halotestin), progestinas (Megace, Provera), y corticoesteroides (prednisona, dexametasona, hidrocortisona).
En otra realización adicional, el agente bioactivo es un fármaco citotóxico seleccionado entre doxorubicina, daunorubicina, idarubicina, aclarubicina, zorubicina, mitoxantrona, epirubicina, carrubicina, nogalamicina, menogaril, pitarubicina, valrubicina, citarabina, gemcitabina, trifluridina, ancitabina, enocitabina, azacitidina, doxifluridina, pentostatina, broxuridina, capecitabina, cladribina, decitabina, floxuridina, fludarabina, gougerotina, puromicina, tegafur, tiazofurina, adriamicina, cisplatino, carboplatino, ciclofosfamida, dacarbazina, vinblastina, vincristina, mitoxantrona, bleomicina, mecloretamina, prednisona, metotrexato de procarbazina, fluorouracilos, etopósido, taxol, análogos de taxol y mitomicina.
En una realización preferida, la composición terapéuticamente eficaz del conjugado de fármaco citotóxico / anticuerpo dirigido contra CD22 se administra junto con una o más combinaciones de agentes citotóxicos como parte de un régimen de tratamiento, en el que la combinación de agentes citotóxicos se selecciona entre: CHOPP (ciclofosfamida, doxorubicina, vincristina, prednisona y procarbazina); CHOP (ciclofosfamida, doxorubicina, vincristina, y prednisona); COP (ciclofosfamida, vincristina, prednisona); CAP-BOP (ciclofosfamida, doxorubicina, procarbazina, bleomicina, vincristina y prednisona); m-BACOD (metotrexato, bleomicina, doxorubicina, ciclofosfamida, vincristina, dexametasona, y leucovorina; ProMACE-MOPP (prednisona, metotrexato, doxorubicina, ciclofosfamida, etopósido, leucovorina, mecloetamina, vincristina, prednisona y procarbazina); ProMACE-CytaBOM (prednisona, metotrexato, doxorubicina, ciclofosfamida, etopósido, leucovorina, citarabina, bleomicina y vincristina); MACOP-B (metotrexato,
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(mecloetamina, vincristina, prednisona y procarbazina) alternando con ABV (adriamicina/doxorubicina, bleomicina, vinblastina); MOPP (mecloetamina, vincristina, prednisona y procarbazina) alternando con ABVD (adriamicina/doxorubicina, bleomicina, vinblastina y dacarbazina); ChIVPP (clorambucilo, vinblastina, procarbazina, prednisona); lMVP-16 (ifosfamida, metotrexato, etopósido,); MlME (metil-gag, ifosfamida, metotrexato, etopósido,); DHAP (dexametasona, citabina en dosis alta y cisplatino); ESHAP (etopósido, metilprednisolona, HD citarabina, y cisplatino); CEPP(B) (ciclofosfamida, etopósido, procarbazina, prednisona y bleomicina); CAMP (lomustina, mitoxantrona, citarabina y prednisona); CVP-1 (ciclofosfamida, vincristina y prednisona); y DHAP (cisplatino, citabina en dosis alta y dexametasona).
En una realización preferida, el conjugado monomérico de derivado de caliqueamicina / anticuerpo dirigido contra CD22 se administra antes de la administración de una o más combinaciones de agentes citotóxicos como parte de un régimen de tratamiento.
En otra realización preferida, la dosis terapéutica eficaz del conjugado monomérico de derivado de caliqueamicina / anticuerpo dirigido contra CD22 se administra posteriormente a la administración de una o más combinaciones de agentes citotóxicos como parte de un régimen de tratamiento.
En otra realización más preferida, la dosis terapéutica eficaz del conjugado monomérico de derivado de caliqueamicina / anticuerpo dirigido contra CD22 se administra junto con un anticuerpo dirigido contra un antígeno superficial celular en neoplasias de linfocitos B, y que comprende opcionalmente una o más combinaciones de agentes citotóxicos como parte de un régimen de tratamiento.
En otro aspecto, la invención se dirige al uso de un conjugado monomérico de derivado de caliqueamicina / anticuerpo dirigido contra CD22 de la presente invención en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un trastorno proliferativo. Se puede usar dicho medicamento para tratar trastornos proliferativos de linfocitos B solos o en combinación con otros agentes bioactivos.
Breve descripción de los dibujos
La Figura 1 muestra la secuencia de aminoácidos de las CDR del anticuerpo monoclonal de ratón 5/44 (SEQ ID NOS:1 a 6);
La Figura 2 muestra la secuencia completa del dominio variable de la cadena ligera del anticuerpo monoclonal de ratón 5/44;
La Figura 3 muestra la secuencia completa del dominio variable de la cadena pesada del anticuerpo monoclonal de ratón 5/44;
la Figura 4 muestra la estrategia para la eliminación del sitio de glicosilación y la lisina reactiva en CDR-H2;
la Figura 5 muestra el diseño del injerto para la secuencia de la cadena ligera 5/44;
la Figura 6 muestra el diseño del injerto para la secuencia de la cadena pesada 5/44;
la Figura 7 muestra los vectores pMRR14 y pMRR10.1;
la Figura 8 muestra los resultados del ensayo Biacore de los mutantes 5/44 quiméricos;
la Figura 9 muestra los oligonucleótidos para los ensamblajes de los genes 5/44 gH1 y gL1;
la Figura 10 muestra los vectores intermedios pCR2.1(544gH1) y pCR2.1(544gL1);
la Figura 11 muestra los casetes de oligonucleótidos utilizados para preparar injertos adicionales;
la Figura 12 muestra el ensayo de competición entre el anticuerpo 5/44 de ratón marcado fluorescentemente y las variantes injertadas;
la Figura 13 muestra la secuencia completa de ADN y las proteínas de las cadenas pesada y ligera injertadas;
la Figura 14 es una representación esquemática de un conjugado de anticuerpo dirigido contra NAc-gamma caliqueamicina DMH;
la Figura 15 muestra el efecto de CMC 544 sobre el crecimiento del linfoma de linfocitos B RAMOS. CMC-544 preparado mediante el procedimiento de conjugación CMC se evaluó en xenoinjertos de linfoma de linfocitos B en ratones lampiños. Los animales con xenoinjertos de tumor recibieron una inyección por vía intraperitoneal (ip) con dosis variables de CMC-544 o su correspondiente anticuerpo murino preparado mediante el procedimiento de conjugación CMC en los días 1, 5 y 9. En este estudio, mostrado en la Figura 5, CMC-544 y su homólogo de anticuerpo de murino mostraron ser eficaces en la inhibición, de una manera dependiente de la dosis, del crecimiento del linfoma de linfocitos B RAMOS;
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Se han ensayado otras proteínas como marcos y se han utilizado para expresar restos aleatorizados sobre superficies de alfa hélice (Nord y col., Nat. Biotechnol. 15:772, 1997; Nord y col., Protein Eng. 8:601, 1995), en los bucles entre las hélices alfa y los haces de hélices alfa (Ku y Schultz, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92:6552, 1995), y bucles constreñidos por puentes disulfuro, tales como los de los inhibidores de las proteasas pequeñas (Markland y col., Biochemistry 35:8045, 1996; Markland y col., Biochemistry 35:8058, 1996; Rottgen y Collins, Gene 164;243, 1995; Wang y col., J. Biol. Chem. 270:12250, 1995).
Los ejemplos de transportadores de anticuerpos que se pueden usar en la presente invención incluyen anticuerpos monoclonales, anticuerpos quiméricos, anticuerpos humanizados, anticuerpos humanos y sus fragmentos biológicamente activos. Preferentemente, dichos anticuerpos se dirigen contra antígenos superficiales celulares expresados en células y/o tejidos diana en trastornos proliferativos tales como cáncer. Los ejemplos de anticuerpos específicos dirigidos contra antígenos superficiales celulares en células diana incluyen sin limitación anticuerpos dirigidos contra el antígeno CD22 que se expresan en exceso en la mayoría de linfomas de linfocitos B; G5/44, una forma humanizada de un anticuerpo monoclonal de murino dirigido contra CD22; anticuerpos contra el antígeno superficial celular CD33, que es prevalente en determinados tumores mieloides humanos, especialmente, leucemia mieloide aguda; hP67.6, una forma humanizada del anticuerpo de murino dirigido contra CD33 (véase la patente de los Estados Unidos N.º 5.773.001); un anticuerpo contra el antígeno PEM que se encuentra en muchos tumores de origen epitelial designados mP67.6 (véase I.D. Bernstein y col., J. Clin. Invest. 79:1153 (1987) e I.D. Bernstein y col., J. Immunol. 128:867-881 (1992)); y un anticuerpo humanizado contra el antígeno del carbohidrato Y de Lewis expresado en exceso en muchos tumores sólidos designados hu3S193, (véase la patente de los Estados Unidos n.º 6.310.185 B1). Además, existen algunos anticuerpos comercialmente disponibles tales como rituximab (Rituxan™) y trastuzumab (Herceptin™), que se pueden utilizar también como agentes transportadores/de direccionamiento. Rituximab (Rituxan™) es un anticuerpo quimérico dirigido contra CD20 utilizado para tratar diversos linfomas de linfocitos B y trastuzumab (Herceptin™) es un anticuerpo humanizado dirigido contra Her2 utilizado para tratar el cáncer de mama.
Se ilustra en el presente documento el uso como transportador de la presente invención una molécula de anticuerpo humanizado injertada con CDR dirigida contra el antígeno superficial celular CD22, designada G5/44. Este anticuerpo es una forma humanizada de un anticuerpo monoclonal de murino dirigido contra CD22 que se dirige contra el antígeno superficial celular CD22, que es prevalente en determinados linfomas humanos. El término "una molécula de anticuerpo injertada con CDR" como se usa en el presente documento se refiere a una molécula de anticuerpo en la que la cadena pesada y/o ligera contiene una o más regiones determinantes de la complementariedad (CDR) (a partir de ahora en el presente documento, CDR) (que incluyen, si se desea, una CDR modificada) de un anticuerpo donante (por ejemplo, un anticuerpo monoclonal de murino) injertado en un marco de la región variable de la cadena pesada y/o ligera de un anticuerpo aceptor (por ejemplo, un anticuerpo humano). Preferentemente, tal anticuerpo injertado con CDR tiene un dominio variable que comprende regiones marco aceptoras humanas, así como una o más de las CDR citadas anteriormente.
Cuando se injertan las CDR, se puede usar cualquier secuencia marco de región variable aceptora adecuada teniendo en cuenta la clase/tipo del anticuerpo donante a partir del cual se deriva la CDR, incluyendo regiones marco de ratón, primate y ser humano. Ejemplos de regiones marco humanas que se pueden usar en la presente invención son KOL, NEWM, REI, EU, TUR, TEI, LAY y POM (Kabat y col. Seq. of Proteins of Immunol. Interest, 1:310-334 (1994)). Por ejemplo, se pueden usar KOL y NEWM para la cadena pesada, se puede usar REl para la cadena ligera y EU, LAY y POM se pueden usar para la cadena pesada y la cadena ligera.
En un anticuerpo injertado con CDR de la presente invención, se prefiere usar como anticuerpo aceptor uno que tenga cadenas que sean homólogas a las cadenas del anticuerpo donante. Las cadenas pesada y ligera aceptoras no necesitan derivarse necesariamente del mismo anticuerpo y pueden, si se desea, comprender cadenas de materiales compuestos que tienen regiones marco derivadas de diferentes cadenas.
Asimismo, en un anticuerpo injertado con CDR de la presente invención, las regiones marco no necesitan tener exactamente la misma secuencia que las del anticuerpo aceptor. Por ejemplo, se pueden cambiar restos inusuales por restos más frecuentes de la clase o tipo de la cadena aceptora. Como alternativa, los restos seleccionados en las regiones marco aceptoras se pueden cambiar de tal manera que correspondan al resto que se encuentra en la misma posición en el anticuerpo donante. Dichos cambios deben mantenerse en el mínimo necesario para recuperar la afinidad del anticuerpo donante. Se muestra un protocolo para seleccionar restos en las regiones marco aceptoras que se pueden necesitar cambiar en la Publicación PCT N.º WO 91/09967.
Los restos donantes son restos procedentes del anticuerpo donante, es decir, el anticuerpo a partir del cual se derivaron originalmente las CDR.
El anticuerpo de la presente divulgación puede comprender una cadena pesada en la que el dominio variable comprende como CDR-H2 (tal como se ha definido por Kabat y col., (más arriba)) un H2' en el que se ha eliminado una secuencia del sitio de glicosilación potencial a fin de aumentar la afinidad del anticuerpo para el antígeno.
De manera alternativa o adicional, el anticuerpo de la presente divulgación puede comprender una cadena pesada en la que el dominio variable comprende como CDR-H2 (como se ha definido por Kabat y col., (más arriba)) una H2'' en la
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que un resto de lisina está en la posición 60. Este resto de lisina, que se localiza en la posición expuesta en CDR-H2, y se considera que tiene el potencial de reaccionar con los agentes de conjugación resultantes en una reducción de la afinidad de la unión a antígeno, se sustituye con un aminoácido alternativo.
Además, el anticuerpo de la presente divulgación puede comprender una cadena pesada en la que el dominio variable comprende como CDR-H2 (como se ha definido por Kabat y col., (más arriba)) una H2"' en la que la secuencia del sitio de glicosilación potencial y el resto de lisina en la posición 60, se sustituyen con aminoácidos alternativos.
La molécula de anticuerpo de la presente invención puede comprender: una molécula de anticuerpo completo, que tiene las cadenas pesada y ligera de longitud completa; uno de sus fragmentos biológicamente activos, tales como Fab, Fab modificado, Fab’, F(ab')2 o un fragmento Fv; un monómero o un dímero de cadena ligera o de cadena pesada; un anticuerpo monocatenario, por ejemplo, un Fv monocatenario en el que los dominios variables de la cadena pesada y la cadena ligera se unen mediante un péptido engarce. De manera similar, tal como se ha divulgado, las regiones variables de la cadena pesada y ligera pueden combinarse con otros dominios de anticuerpos según sea adecuado.
La molécula de anticuerpo de la presente divulgación puede incluir también un fragmento Fab modificado en el que la modificación es la adición de uno o más aminoácidos para permitir la unión de una molécula efectora o indicadora al extremo terminal C de su cadena pesada. Preferentemente, los aminoácidos adicionales forman una región bisagra modificada que contiene uno a dos restos de cisteína a los cuales se puede unir el efector o la molécula indicadora.
Los dominios de la región constante de la molécula de anticuerpo de la presente divulgación, si están presentes, se pueden seleccionar con respecto a la función propuesta de la molécula de anticuerpo, y en particular para las funciones efectoras que puedan requerirse o no. Por ejemplo, los dominios de la región constante pueden ser dominios de IgA, IgD, IgE, IgG o IgM. En particular, se pueden usar dominios de la región constante de la IgG humana, especialmente de los isotipos IgG1 e IgG3 cuando se prevé que la molécula de anticuerpo tenga usos terapéuticos y se requieren funciones efectoras del anticuerpo. Como alternativa, se pueden usar los isotipos IgG2 e IgG4 la molécula de anticuerpo está prevista para fines terapéuticos y no se requieren o se desean funciones efectoras del anticuerpo.
La molécula de anticuerpo de la presente divulgación tiene una afinidad de unión de al menos 5x10-8 M, preferentemente al menos 1x10-9 M, más preferentemente al menos 0,75x10-10 M, y lo más preferentemente al menos 0,5x10-10 M.
En una realización, la presente divulgación se refiere a conjugados de inmunotoxinas y a procedimientos para preparar estos conjugando usando variantes de anticuerpos o miméticos de anticuerpos. En una realización preferida, las variantes de la molécula de anticuerpo de la presente divulgación se dirigen contra CD22 y expresan una afinidad aumentada para CD22. Se pueden obtener dichas variantes mediante numerosos protocolos de maduración por afinidad incluyendo mutaciones en las CDR (Yang y col., J. Mol. Biol., 254, 392-403, 1995), búsqueda de cadenas (Marks y col., Bio/Technology, 10, 779-783, 1992), uso de cepas mutantes de E. coli (Low y col., J. Mol. Biol., 250, 359-368, 1996), Intercambio de ADN (Patten y col., Curr. Opin. Biotechnol., 8, 724-733, 1997), expresión en fagos (Thompson y col., J. Mol. Biol., 256, 77-88, 1996) y PCR sexual (Crameri y col., Nature, 391, 288-291, 1998).
Puede utilizarse cualquier sistema de célula/vector hospedador para la expresión de las secuencias ADN que codifican las moléculas del transportador, incluyendo los anticuerpos de la presente divulgación. Se pueden usar sistemas bacterianos, Por ejemplo, E. coli, y otros sistemas microbianos, en parte, para la expresión de fragmentos de anticuerpos tales como fragmentos Fab y F(ab')2, y especialmente fragmentos Fv y fragmentos de anticuerpos monocatenarios, por ejemplo, Fv monocatenarios. Se pueden usar sistemas de expresión de células hospedadoras eucariotas, por ejemplo, de mamíferos para la producción de moléculas de anticuerpo más grandes, incluyendo moléculas de anticuerpos completas. Las células hospedadoras de mamíferos adecuadas incluyen células CHO, células de mieloma, células de levadura, células de insectos, células de hibridoma, células NSO, células VERO o células PER C6. Los sistemas de expresión adecuados incluyen también animales y plantas transgénicas.
II. AGENTES TERAPÉUTICOS
Los agentes terapéuticos adecuados para su uso en la presente invención son fármacos citotóxicos que inhiben o perturban la polimerización de la tubulina, Agentes alquilantes que se unen y perturban el ADN, y agentes que inhiben la síntesis de proteínas o de las proteínas celulares esenciales tales como las proteínas quinasas, enzimas y ciclinas. Los ejemplos de dichos fármacos citotóxicos incluyen, pero no se limitan a tiotepa, taxanos, vincristina, daunorubicina, doxorubicina, epirubicina, actinomicina, autramicina, azaserinas, bleomicinas, tamoxifeno, idarubicina, dolastatinas/auristatinas, hemiasterlinas, esperamicinas y maitansinoides. Los fármacos citotóxicos preferidos son las caliqueamicinas, que son un ejemplo de los antibióticos antitumorales de trisulfuro de metilo. Se describen los ejemplos de caliqueamicinas adecuados para el uso en la presente invención, por ejemplo, en la patente de los Estados Unidos n.º 4.671.958; patente de los Estados Unidos N.º 4.970.198, patente de los Estados Unidos N.º 5.053.394, patente de los Estados Unidos N.º 5.037.651; y la patente de los Estados Unidos N.º 5.079.233. Las caliqueamicinas preferidas son los derivados de las gamma caliqueamicinas o los derivados de la N-acetil gamma-caliqueamicina.
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III. CONJUGADOS DE DERIVADOS DE FÁRMACO CITOTÓXICO/TRANSPORTADOR
Los conjugados de la presente invención tienen la fórmula Pr(-X-S-S-W)m en la que:
Pr es un transportador proteínico, X es un engarce que comprende un producto de cualquier grupo reactivo que pueda reaccionar con un transportador proteínico, W es el fármaco citotóxico; m es la carga promedio de un producto de conjugación purificado, de tal manera que la caliqueamicina constituye un 4 -10%del conjugado en peso; y (-X-W)m es un derivado de fármaco citotóxico.
Preferentemente, X tiene la fórmula
(CO -Alq1-Sp1-Ar -Sp2-Alq2-C(Z1) = Q -Sp)
en la que
Alq1 y Alq2 son independientemente un enlace o una cadena de alquileno (C1-C10) ramificada o no ramificada; Sp1 es un enlace, -S-, -O-, -CONH-, -NHCO-, -NR'-, -N(CH2CH2)2N-, o -X-Ar'-Y-(CH2)n-Z en la que X, Y, y Z son independientemente un enlace, -NR'-, -S-, u -O-, con la condición de que cuando n = 0, entonces al menos uno de Y y Z debe ser un enlace y Ar' es 1,2-, 1,3-, o 1,4-fenileno opcionalmente sustituido con uno, dos, o tres grupos de alquilo (C1-C5), alcoxi (C1-C4), tioalcoxi (C1-C4), halógeno, nitro, -COOR', -CONHR', -(CH2)nCOOR',-S(CH2)nCOOR', -O(CH2)nCONHR', o -S(CH2)nCONHR', con la condición de que cuando Alq1 es un enlace, Sp1 es un enlace; n es un número entero de 0 a 5; R' es una cadena (C1-C5) ramificada o no ramificada opcionalmente sustituida con uno o dos grupos de -OH, alcoxi (C1-C4), tioalcoxi (C1-C4), halógeno, nitro, dialquilamino (C1-C3), o trialquil (C1-C3) amonio -A-en el que A-es un anión farmacéuticamente aceptable que completa una sal; Ar es 1,2-, 1,3-, o 1,4-fenileno opcionalmente sustituido con uno, dos, o tres grupos de alquilo (C1-C6), alcoxi (C1-C5), tioalcoxi (C1-C4), halógeno, nitro, -COOR', -CONHR', -O(CH2)nCOOR', -S(CH2)nCOOR', -O(CH2)nCONHR', o -S(CH2)nCONHR' en el que n y R' son como se ha definido anteriormente en el presente documento o un 1,2-, 1,3-, 1,4-, 1,5-, 1,6-, 1,7-, 1,8-, 2,3-, 2,6-, o 2,7-naftilideno o
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con cada naftilideno o fenotiazina opcionalmente sustituida con uno, dos, tres, o cuatro grupos de alquilo (C1-C6), alcoxi (C1-C5), tioalcoxi (C1-C4), halógeno, nitro, -COOR', -CONHR', -O(CH2)nCOOR', -S(CH2)nCOOR', o -S(CH2)nCONHR' en el que n y R' son como se ha definido anteriormente, con la condición de que cuando Ar es fenotiazina, Sp1 es un enlace vinculado solo a nitrógeno; Sp2 es un enlace, -S-, u -O-, con la condición de que cuando Alq2 es un enlace, Sp2 es un enlace; Z1 es H, alquilo (C1-C5), o fenilo opcionalmente sustituido con uno, dos, o tres grupos de alquilo (C1-C5), alcoxi (C1-C5), tioalcoxi (C1-C4), halógeno, nitro, -COOR', -ONHR', -O(CH2)nCOOR', -S(CH2)nCOOR', -O(CH2)nCONHR', o -S(CH2)nCONHR' en el que n y R' son como se ha definido anteriormente; Sp es un radical (C1-C18) divalente o trivalente de cadena lineal o ramificada, un radical arilo o heteroarilo divalente
o trivalente, un radical cicloalquilo o heterocicloalquilo (C3-C18) divalente o trivalente, un radical arilo o heteroaril (C1-C18) arilo divalente o trivalente, un radical cicloalquilo o heterocicloalquil (C1-C18) alquilo divalente o trivalente o un radical alquilo (C2-C18) divalente o trivalente insaturado, en el que heteroarilo es preferentemente furilo, tienilo, N-metilpirrolilo, piridinilo, N-metilimidazolilo, oxazolilo, pirimidinilo, quinolilo, isoquinolilo, N-metilcarbazoílo, aminocourmarinilo, o fenazinilo y en el que si Sp es un radical trivalente, Sp puede sustituirse adicionalmente por grupos dialquil (C1-C5) lamino inferior, alcoxi (C1-C5) inferior, hidroxi, o alquiltio (C1-C5) inferior; y Q es =NHNCO-, =NHNCS-, =NHNCONH-, =NHNCSNH-, o =NHO-.
Preferentemente, Alq1 es una cadena de alquileno (C1-C10) ramificado o no ramificado; Sp' es un enlace, -S-, -O-, -CONH-, -NHCO-, o -NR' en el que R' es como se ha definido anteriormente en el presente documento, con la condición de que cuando Alq1 es un enlace, Sp1 es un enlace;
Ar es 1,2-, 1,3-, o 1,4-fenileno opcionalmente sustituido con uno, dos, o tres grupos de alquilo (C1-C6), alcoxi (C1-C5), tioalcoxi (C1-C4), halógeno, nitro, -COOR', -CONHR', -O(CH2)nCOOR', -S(CH2)nCOOR', -O(CH2)nCONHR', o -S(CH2)nCONHR' en la que n y R' son como se ha definido anteriormente, o Ar es un 1,2-, 1,3-, 1,4-, 1,5-, 1,6-, 1,7-,
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TABLA 1: COMPARACIÓN DE LAS CONDICIONES DE PROCEDIMIENTO CMA-676 (GEMTUZUMAB OZOGAMICINA) Y CMC-544
CONDICIONES/RESULTADOS
CONDICIONES DEL PROCEDIMIENTO CMA-676 CONDICIONES DEL PROCEDIMIENTO CMC-544
Entrada de caliqueamicina Identidad del aditivo y concentración Temperatura
3,0 % (en p/p sobre la base del peso de polvo)Ácido octanoico/Sodio octanoico; 200 mM 26 ºC 8,5 % (p/p) Ácido decanoico/Decanoato de sodio; 37,5 mM 31-35 ºC
pH
7,8 8,2-8,7
Carga de caliqueamicina (porcentaje en peso; mediante el ensayo de UV)
2,4-3,5 7,0-9,0
Fracción conjugada baja (LCF)
45-65 % del área de HPLC <10 %
(LCF) (antes de la purificación) Agregación (antes
~ 5 % <5 %
de la purificación) Agregación (después de la purificación)
≤ 2 % <2 %
El aumento en la entrada de caliqueamicina aumentó la carga del fármaco de 2,5-3,0 en porcentaje en peso a 7,0-9,0 (más normalmente 7,5-8,5) en porcentaje en peso, y dio como resultado un nulo aumento en la agregación de proteínas en la reacción. Debido a la reducción del agregado y la LCF, las condiciones del procedimiento CMC-544 dieron como resultado un producto más homogéneo. CMC-544 se preparó de manera reproducible mediante este nuevo procedimiento de conjugación a escala multigramo de anticuerpo.
En las anteriores reacciones, la concentración del anticuerpo puede variar de 1 a 15 mg/ml, y la concentración del derivado de caliqueamicina, por ejemplo, el éster de N-acetil gamma-caliqueamicina DMH AcBut OSu (usado para preparar los conjugados que se muestran en la Figura 14), varía entre aproximadamente 4,5-11 % en peso del anticuerpo. El cosolvente era etanol, para el cual se han demostrado buenos resultados a concentraciones que variaban entre 6 y 11,4 % (en base volumétrica). Las reacciones se realizaron en PBS, HEPES, ácido N-(2-Hidroxietil)piperazina-N'-(4-etanosulfónico) (HEPBS), u otro tampón compatible a un pH de 8 a 9, a una temperatura que varía de 30 ºC a aproximadamente 35 ºC, y para tiempos que varían de 15 minutos a 24 horas. Los que sean expertos en la materia pueden determinar fácilmente intervalos de pH aceptables para otros tipos de conjugados. Se ha descubierto que para diversos anticuerpos, el uso de ligeras variaciones en las combinaciones de los aditivos anteriormente mencionados mejora la carga del fármaco y el rendimiento del conjugado monomérico, y debe entenderse que cualquier transportador de proteínas concreto puede requerir algunas alteraciones menores en las condiciones exactas de selección de los aditivos para conseguir los resultados óptimos.
V. PURIFICACIÓN Y SEPARACIÓN DEL CONJUGADO
Tras la conjugación, los conjugados monoméricos se pueden separar de los reactivos sin conjugar (tales como las moléculas proteínicas de transportador/anticuerpo y el fármaco citotóxico/caliqueamicina libre) y/o la forma agregada de los conjugados mediante procedimientos convencionales, por ejemplo, la cromatografía de exclusión molecular (SEC), cromatografía de interacción hidrófoba (HIC), cromatografía de intercambio iónico (IEC), o cromatocentrado (CF). Los conjugados purificados son monoméricos, y contienen usualmente de un 4 aun 10 % en peso de fármaco citotóxico/caliqueamicina. En una realización preferida, los conjugados se purifican usando cromatografía de interacción hidrófoba (HIC). En los procedimientos anteriormente utilizados para la producción a escala de fabricación de los conjugados de fármacos citotóxicos/caliqueamicina de anticuerpos (procedimiento CMA-676), la única etapa de separación posterior a la conjugación empleada fue la cromatografía de exclusión por tamaño (SEC). Aunque esta etapa es muy eficaz en la eliminación de conjugados de agregados y para realizar el intercambio de tampones para la formulación, es ineficaz en la reducción del contenido de LCF. En consecuencia, el procedimiento basado en SEC se basa completamente en la química de la reacción de conjugación para controlar el contenido de LCF del producto final. Otra desventaja de SEC es la limitación del volumen de la mezcla de reacción conjugada aplicada a la columna (que no excede normalmente del 5 por ciento del volumen del lecho de la columna de procedimiento). Esto limita gravemente el tamaño del lote (y por tanto la capacidad de producción) que se puede soportar en un espacio de producción dado. Finalmente, el procedimiento de purificación SEC da como resultado también una dilución significativa de la solución conjugada, que supone restricciones a la concentración de proteínas que se puede conseguir de manera dependiente en la formulación.
Cuando un fármaco citotóxico tiene una naturaleza muy hidrófoba, tal como un derivado de caliqueamicina, y se usa en un conjugado, la cromatografía de interacción hidrófoba (HIC) es un candidato preferido para proporcionar una separación eficaz del anticuerpo conjugado y no conjugado. HIC presenta tres ventajas clave sobre SEC: (1) tiene la capacidad de reducir eficazmente el contenido de LCF, así como el agregado; (2) la capacidad de carga de la columna para HIC es mucho mayor; y (3) HIC evita la excesiva dilución del producto.
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Numerosos medios de HIC de alta capacidad adecuados para el uso a escala de producción, tales como Butyl, Phenyl y Octyl Sepharose 4 Fast Flow (Amersham Biosciences, Piscataway, NJ) pueden separar eficazmente los no conjugados y los agregados del conjugado de los componentes conjugados monoméricos tras el procedimiento de la conjugación.
VI. COMPOSICIONES Y FORMULACIONES
La presente invención proporciona también un procedimiento para la preparación de una composición/formulación de un conjugado monomérico de un derivado de fármaco citotóxico/transportador de la presente invención junto con un excipiente, diluyente o transportador farmacéuticamente aceptable.
El conjugado monomérico de derivado de fármaco citotóxico / transportador puede ser un único principio activo en la composición/formulación terapéutica o diagnóstica o puede ir acompañado de mediante otros principios activos que incluyen ingredientes de anticuerpos diferentes, por ejemplo, anticuerpos dirigidos contra CD19, dirigidos contra CD20, dirigidos contra CD33, dirigidos contra linfocitos T, dirigidos contra IFNγ o dirigidos contra LPS, o ingredientes no de anticuerpos tales como citoquinas, factores de crecimiento, hormonas, antihormonas, fármacos citotóxicos y xantinas.
Las citoquinas y factores de crecimiento que se pueden usar para tratar trastornos proliferativos tales como el cáncer y que se pueden usar junto con los conjugados de derivados de fármaco citotóxico / transportador de la presente invención incluyen interferones, interleuquinas tales como interleuquina 2 (IL-2), TNF, CSF, GM-CSF y G-CSF.
Las hormonas comúnmente usadas para tratar trastornos proliferativos tales como el cáncer y que se pueden usar junto con el conjugado de derivado de fármaco citotóxico / transportador de la presente invención incluyen estrógenos (dietilestilbestrol, estradiol), andrógenos (testosterona, Halotestin), progestinas (Megace, Provera), y corticoesteroides (prednisona, dexametasona, hidrocortisona).
Se usan comúnmente antihormonas tales como antiestrógenos (tamoxifeno), antiandrógenos (flutamida) y agentes antiadrenales para tratar trastornos proliferativos tales como el cáncer, y se pueden usar junto con el conjugado del derivado / transportador del fármaco citotóxico de la presente invención.
Los agentes quimioterapéuticos/antineoplásicos usados habitualmente para tratar trastornos proliferativos tales como el cáncer, y que se pueden usar junto con el conjugado de derivado de fármaco citotóxico / transportador de la presente invención incluyen, pero no se limitan a adriamicina, cisplatino, carboplatino, vinblastina, vincristina, bleomicina, metotrexato, doxorubicina, fluorouracilos, etopósido, taxol y sus diversos análogos, y mitomicina.
Las formulaciones o composiciones farmacéuticas deben comprender preferentemente una cantidad terapéuticamente eficaz del conjugado de la invención. El término "cantidad terapéuticamente eficaz" como se usa en el presente documento se refiere a una cantidad de un agente terapéutico necesaria para tratar, mejorar o prevenir una enfermedad o dolencia diana, o para presentar un efecto terapéutico o preventivo detectable. Para cualquier conjugado, se puede estimar la dosis terapéuticamente eficaz inicialmente tanto en ensayos de cultivos celulares como en modelos animales, usualmente en roedores, conejos, perros, cerdos o primates. El modelo animal también puede usarse para determinar el intervalo de concentración adecuado y la pauta de administración. Dicha información puede usarse seguidamente para determinar dosis útiles y rutas para la administración en seres humanos.
La cantidad eficaz precisa para un sujeto humano dependerá de la gravedad de la patología, la salud general del sujeto, la edad, el peso y el sexo del sujeto, la dieta, el tiempo y la frecuencia de administración, combinaciones de fármacos), las sensibilidades a la reacción y la tolerancia/respuesta al tratamiento. Esta cantidad se puede determinar mediante experimentación rutinaria y está comprendida en el criterio del especialista clínico. En general, una dosis eficaz estará entre 0,01 mg/m2 y 50 mg/m2, preferentemente 0,1 mg/m2 a 20 mg/m2, más preferiblemente de aproximadamente 15 mg/m2, cuya dosis se calcula sobre la base del transportador proteínico.
Las composiciones se pueden administrar individualmente a un paciente o se pueden administrar en combinación con otros agentes, fármacos u hormonas. La dosis a la que se administra el conjugado de derivado / anticuerpo de fármaco citotóxico monomérico depende de la naturaleza de la dolencia que se va a tratar, el grado del linfoma o de la leucemia maligna y si el conjugado se está usando profilácticamente o para tratar una dolencia existente.
La frecuencia de a dosis dependerá de la vida media del conjugado y de la duración de su efecto. Si el conjugado tiene una vida corta media (por ejemplo, 2 a 10 horas) puede ser necesario proporcionar una o más dosis por día. Como alternativa, si la molécula del conjugado tiene una vida media larga (por ejemplo, 2 a 15 días) puede ser necesario solo proporcionar una dosificación una vez por día, una vez por semana o incluso una vez cada 1 o 2 meses.
Una composición puede contener también un transportador farmacéuticamente aceptable para la administración del conjugado del anticuerpo. El transportador no debe inducir por sí mismo la producción de anticuerpos perjudiciales para el individuo que recibe la composición y no debe ser tóxico. Los transportadores adecuados pueden ser grandes macromoléculas metabolizadas lentamente tales como proteínas, polipéptidos, liposomas, polisacáridos, poli(ácidos lácticos), poli (ácidos glicólicos), aminoácidos poliméricos, copolímeros de aminoácidos y partículas de virus inactivas.
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Se pueden usar sales farmacéuticamente aceptables, por ejemplo, sales de ácidos minerales, tales como clorhidratos, bromhidratos, fosfatos y sulfatos, o las sales de ácidos orgánicos, tales como acetatos, propionatos, malonatos y benzoatos.
Los transportadores farmacéuticamente aceptables de estas composiciones/formulaciones terapéuticas pueden contener adicionalmente líquidos tales como agua, suero salino, glicerol, y etanol. Además, pueden estar presentes en dichas composiciones sustancias auxiliares, tales como agentes humectantes o emulsionantes o sustancias tamponantes del pH. Dichos transportadores permiten que las composiciones se formulen como comprimidos, píldoras, grageas, cápsulas, líquidos, geles, jarabes, lechadas y suspensiones, para la ingestión por el paciente.
Las formas preferidas para la administración incluyen formas adecuadas para la administración parenteral, por ejemplo, mediante inyección o infusión, por ejemplo, mediante inyección en bolo o infusión continua. Cuando el producto es para inyección o la infusión, puede tomar la forma de una suspensión, solución o emulsión en un vehículo oleoso o acuoso y puede contener agentes formuladores, tales como agentes suspensores, conservantes, estabilizantes y/o dispersantes.
Aunque la estabilidad de las soluciones conjugadas tamponadas es adecuada para la estabilidad a corto plazo, la estabilidad a largo plazo es mala. Para potenciar la estabilidad del conjugado y para aumentar su vida media, el conjugado de anticuerpo-fármaco puede liofilizarse hasta una forma seca, para la reconstitución antes del uso con un líquido estéril adecuado. Los problemas asociados con la liofilización de una solución de proteínas están bien documentados. Se puede producir la pérdida de la estructura secundaria, teciaria y cuaternaria durante los procedimientos de congelación y secado. En consecuencia, pueden incluirse crioconservantes para actuar como estabilizantes amorfos del conjugado y para mantener la integridad estructural de la proteína durante el procedimiento de liofilización. En una realización, el crioconservante útil en la presente divulgación es un alcohol azucarado, tal como alditol, manitol, sorbitol, inositol, polietilenglicol y combinaciones de los mismos. En otra realización, el crioconservante es un ácido azucarado, incluyendo un ácido aldónico, un ácido urónico, un ácido aldárico, y sus combinaciones.
El crioconservante de esta divulgación puede ser también un hidrato de carbono. Los hidratos de carbono adecuados son compuestos de aldehídos o cetonas que contienen dos o más grupos hidroxilo. Los hidratos de carbono pueden ser cíclicos o lineales e incluyen, por ejemplo, aldosas, cetosas, aminoazúcares, alditoles, inositoles, ácidos aldónicos, ácidos urónicos, o ácidos aldáricos, o sus combinaciones. El hidrato de carbono puede ser también un mono, un di, o policarbohidrato, tal como por ejemplo, un disacárido o polisacárido. Los hidratos de carbono adecuados incluyen por ejemplo, gliceraldehídos, arabinosa, lixosa, pentosa, ribosa, xilosa, galactosa, glucosa, hexosa, idosa, manosa, talosa, heptosa, glucosa, fructosa, ácido glucónico, sorbitol, lactosa, manitol, metil a-glucopiranósido, maltosa, ácido isoascórbico, ácido ascórbico, lactona, sorbosa, ácido glutámico, eritrosa, treosa, arabinosa, alosa, altrosa, gulosa, idosa, talosa, eritrulosa, ribulosa, xilulosa, psicosa, tagatosa, ácido glucourónico, ácido glucónico, ácido glutámico, ácido galacturónico, ácido mannurónico, glucosamina, galactosamina, sacarosa, trehalosa o ácido neuramínico, o derivados del mismo. Los polihidratos de carbono adecuados incluyen por ejemplo arabinanos, fructanos, fucanos, galactanos, galacturonanos, glucanos, mananos, xilanos (tales como, por ejemplo, inulina), levano, fucoidano, carragenato, galactocarolosa, pectinas, ácidos pécticos, amilosa, pululano, glucógeno, amilopectina, celulosa, dextrano, pustulano, quitina, agarosas, queratina, condroitina, dermatano, ácido hialurónico, ácido algínico, goma xantana, o almidón. Entre los hidratos de carbono útiles están la sacarosa, glucosa, lactosa, trehalosa, y sus combinaciones. La sacarosa es un crioconservante particularmente útil.
Preferentemente, el crioconservante de la presente divulgación es un hidrato de carbono o alcohol "azucarado", que puede ser un alcohol polihídrico. Los compuestos polihídricos son compuestos que contienen más de un grupo hidroxilo. Preferentemente, los
compuestos polihídricos son lineales. Los compuestos polihídricos adecuados incluyen, por ejemplo, glicoles tales como etilenglicol, polietilenglicol, y polipropilenglicol, glicerol, o pentaeritritol; o sus combinaciones.
En algunas realizaciones preferidas, el agente crioconservante es sacarosa, trehalosa, manitol, o sorbitol.
Una vez formuladas, las composiciones de la invención se pueden administrar directamente al sujeto. Los sujetos que se van a tratar pueden ser animales. Sin embargo, se prefiere que las composiciones se adapten para la administración a sujetos humanos.
Las composiciones de la presente invención pueden administrarse mediante cualquiera de numerosas rutas incluyendo, pero no se limitan a, rutas oral, intravenosa, intramuscular, intra-arterial, intramedular, intratecal, intraventricular, transdérmica, transcutánea (véase Publicación PCT N.º WO 98/20734), subcutánea, intraperitoneal, intranasal, enteral, tópica, sublingual, intravaginal o rectal. Se pueden usar también hipopulverizadores para administrar las composiciones de la invención. Normalmente, las composiciones pueden prepararse como inyectables, tanto como soluciones o suspensiones líquidas. Se pueden preparar también formas sólidas adecuadas para disolución en, o suspensión en, vehículos líquidos antes de la inyección.
La administración directa de las composiciones se llevará a cabo generalmente mediante inyección, por vía subcutánea, intraperitoneal, intravenosa o intramuscular, o administrarse en el espacio intersticial de un tejido. Las composiciones se pueden administrar también en una lesión. El tratamiento de dosificación puede ser un calendario de
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Tabla 7: Unión de mAb dirigido contra CD22 de murino con especificidades definidas de Fc-CD22 pretratado con G544. Respuesta a la unión expresada como unidades de resonancia medianteplasmón superficial (RU).
Columna 1
Columna 2 Columna 3 Columna 4 Columna 5 Columna 6
Anticuerpo
Epítopo Dominio Ig de CD22 Respuesta 1 con G544 Respuesta 2 después del 2º mAb Dirigido contra CD22 Respuesta 3 (respuesta 2 – 1) Respuesta 3 ajustada para la velocidad de la "reacción inversa" de G544 Unión del 2º mAb sin G544 adjustada para el fondo Inhibición mediante G544 (%)
SHCL-1 Leu 14 dirigido contra CD22
A 1,2 654,3 579,8 -74,5 9 29,3 69
HD239 dirigido contra CD22
A 1 710,5 628,7 -81,8 1,7 19,3 91
M 6/13 dirigido contra CD22
? ? 710,0 652,7 -57,3 26,2 152,4 83
RFB-4 dirigido contra CD22
B 3 703,5 1108,5 405 488,5 534 9
4KB128 dirigido contra CD22
? 2 691,0 1343,5 652,5 736,0 738,8 0
To15 dirigido contra CD22
C 4 676,9 1163,6 486,7 570,2 614,6 7
M 5/44 dirigido contra CD22
Control positivo 725,1 679,3 -45,8 37,7 613,9 94
BU12 dirigido contra CD19
Control negativao 686,2 602,7 -83,5 0 0 0
Tabla 8: Medidas descriptivas de tiempos de supervivencia
Estudio
Compuesto Promedio del tiempo desupervivencia Mediana del tiempo de supervivenci a Desviación estándar Tiempo de supervivencia mínimo Tiempo de supervivencia máximo Número de animales
Modelo de desarrollo
CMA-676 32,9 34,0 3,9 28,0 36,0 7
CMC-544
41,0 38,0 10,1 32,0 60,0 7
Rituximab
128,4 > 130,0 4,7 119,0 > 130,0 7
Vehículo
27,1 28,0 1.A 25,0 28,0 8
Modelo establecido
CMA-676 33,7 31,0 4,6 30,0 42,0 7
CMC-544
83,5 76,5 41,6 34,0 > 130,0 8
Rituximab
62,6 37,0 46,2 31,0 > 130,0 7
Vehículo
30,5 29,0 3,6 27,0 36,0 8
Tabla 9: Descriptive Measures of Survival Times for Initial Combination Study
Compuesto
Tiempo de supervivencia promedio Mediana del tiempo de supervivencia Desviación estándar Tiempo de supervivencia mínimo Tiempo de supervivencia máximo Número de animales
CMC MD+Ritux MD
92,4 > 100,0 16,0 62,0 > 100,0 10
CMC MD+Ritux HD
64,4 58,5 26,7 29,0 > 100,0 10
CMC-544
58,5 34,5 35,8 27,0 > 100,0 10
Rituximab
50,5 41,0 26,4 30,0 > 100,0 10
Vehículo
31,0 27,0 9,7 27,0 56,0 9
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(continuación)
Compuesto
Tiempo de supervivencia promedio Mediana del tiempo de supervivencia Desviación estándar Tiempo de supervivencia mínimo Tiempo de supervivencia máximo Número de animales
CMC MD = dosis media de CMC-544, 80 μg/kg CMC HD = CMC-544 dosis alta de 160 μg/kg Ritux MD = Dosis media de rituximab 10 μg/kg Ritux HD = Dosis alta de rituximab 20 μg/kg
Tabla 10: Medidas descriptivas del tiempo de supervivencia para estudios combinados
Tratamiento
Tiempo de supervivencia promedio Mediana del tiempo de supervivencia Desviación estándar Tiempo de supervivencia mínimo Tiempo de supervivencia máximo Número de animales
CMC-544 40 μg/kg
118,90 125,00 19,29 64,00 125,00 10
CMC LD + Ritux LD
125,00 125,00 0,00 125,00 125,00 10
CMC-544 80 μg/kg
118,22 125,00 17,86 71,00 125,00 9
CMC MD + Ritux MD
125,00 125,00 0,00 125,00 125,00 10
CMC-544 160 μg/kg
85,22 82,00 40,37 35,00 125,00 9
CMC HD + Ritux HD
91,30 100,00 36,31 44,00 125,00 10
Rituxiamb 5 μg/kg
40,70 36,50 9,57 34,00 64,00 10
Rituximab 10 mg/kg
33,80 34,00 3,26 29,00 41,00 10
Rituximab 20 mg/kg
40,50 34,00 15,45 31,00 82,00 10
Vehículo
25,80 25,00 3,12 22,00 34,00 10
CMC LD = CMC-544 baja dosis, Ritux HD 40 mg/kg = dosis alta de rituximab, 5 mg/kg CMC MD = dosis media de CMC-544, 80 mg/kg de Ritux MD = dosis media de Rituximab, 10 mg/kg CMC HD = dosis alta de CMC-544, 160 mg/kg de Ritux HD = dosis alta de Rituximab, 20 mg/kg
Ejemplo 9
5 FORMULACIONES ESTABLES DE CMC-544
Se prepararon formulaciones estables de CMC-544 para la administración in vivo añadiendo diluyentes, excipientes, vehículos y estabilizantes. Tras la cromatografía HIC, se evaluaron fracciones cromatográficas mediante SEC-HPLC y análisis UV multilongitud de onda. Se seleccionan las fracciones adecuadas para la combinación sobre la base de los análisis anteriores, que proporcionan información sobre el contenido de agregados, la concentración de proteínas, y la 10 carga de caliqueamicina. Se añaden excipientes, estabilizantes, agentes de volumen y agentes tamponantes para estabilizar la solución. Como CMC-544 puede experimentar degradación mediante numerosas rutas de degradación, necesitan tenerse en cuenta las inestabilidades físicas en el desarrollo de las formulaciones. Una de las principales consideraciones en el desarrollo de las formulaciones es que debe de minimizarse la velocidad de hidrólisis de la caliqueamicina procedente del anticuerpo mientras que debe mantenerse la integridad física y química del anticuerpo
15 dirigido contra CD-22. Además, debe minimizarse la precipitación del conjugado de caliqueamicina-anticuerpo, que se puede producir en determinadas condiciones de pH y concentración.
En el desarrollo de una formulación de un conjugado de anticuerpo-caliqueamicina, el pH de la formulación es crítico, ya que minimiza la degradación y la inestabilidad física. Se seleccionó un pH de 8,0 para minimizar la hidrólisis de la caliqueamicina y mantener la solubilidad adecuada del conjugado. Datos adicionales obtenidos utilizando SDS-PAGE
20 y el ELISA de unión a antígeno indicaron que la integridad y especificidad estructural del anticuerpo se mantienen a un pH de 8,0. En consecuencia, se seleccionó trometamina como agente tamponante para mantener un pH de 8,0. Un tampón alternativo podría incluir sodio dibásico o fosfato de potasio. El intervalo de concentración tampón puede ser de 5 a 50 mM. Se ha sugerido un intervalo de pH preferido de 7,5 a 8,5 para una estabilidad/solubilidad óptima. La especificación de pH actual para el producto acabado es de 7,0-9,0.
25 Aunque la estabilidad de las soluciones conjugadas tamponadas es adecuada para la estabilidad a corto plazo, la estabilidad a largo plazo es mala. Se usa la liofilización para aumentar la vida media de los conjugados. Los problemas asociados con la liofilización de una solución de proteínas están bien documentados, y se puede producir la pérdida de
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Claims (26)

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    Y. P/DOCE (epirubicina o doxorubicina, vincristina, ciclofosfamida, y prednisona).
  2. 62. El medicamento para su uso de acuerdo con la reivindicación 51, en el que la composición se administra junto con un anticuerpo dirigido contra un antígeno superficial celular expresado en neoplasias malignas de linfocitos B, y que comprende opcionalmente una o más combinaciones de agentes citotóxicos como parte de un régimen de tratamiento, en el que la combinación de agentes citotóxicos se selecciona entre:
    A. CHOPP (ciclofosfamida, doxorubicina, vincristina, prednisona, y procarbazina);
    B. CHOP (ciclofosfamida, doxorubicina, vincristina, y prednisona);
    C. COP (ciclofosfamida, vincristina, y prednisona);
    D. CAP-BOP (ciclofosfamida, doxorubicina, procarbazina, bleomicina, vincristina, y prednisona);
    E. m-BACOD (metotrexato, bleomicina, doxorubicina, ciclofosfamida, vincristina, dexametasona, y leucovorina;
    F. ProMACE-MOPP (prednisona, metotrexato, doxorubicina, ciclofosfamida, etopósido, leucovorina, mecloetamina, vincristina, prednisona, y procarbazina);
    G. ProMACE-CytaBOM (prednisona, metotrexato, doxorubicina, ciclofosfamida, etopósido, leucovorina, citarabina, bleomicina, y vincristina);
    H. MACOP-B (metotrexato, doxorubicina, ciclofosfamida, vincristina, prednisona, bleomicina, y leucovorina);
    I. MOPP (mecloetamina, vincristina, prednisona, y procarbazina);
    J. ABVD (adriamicina/doxorubicina, bleomicina, vinblastina, y dacarbazina);
    K. MOPP (mecloetamina, vincristina, prednisona, y procarbazina) alternando con ABV (adriamicina/doxorubicina, bleomicina, y vinblastina);
    L. MOPP (mecloetamina, vincristina, prednisona, y procarbazina) alternando con ABVD (adriamicina/doxorubicina, bleomicina, vinblastina, y dacarbazina);
    M. ChlVPP (clorambucilo, vinblastina, procarbazina, y prednisona);
    N. lMVP-16 (ifosfamida, metotrexato, y etopósido);
    O. MlME (metil-gag, ifosfamida, metotrexato, y etopósido);
    P. DHAP (dexametasona, citarabina a dosis elevada, y cisplatino);
    Q. ESHAP (etopósido, metilprednisolona, citarabina a dosis elevada, y cisplatino);
    R. CEPP(B) (ciclofosfamida, etopósido, procarbazina, prednisona, y bleomicina);
    S. CAMP (lomustina, mitoxantrona, citarabina, y prednisona);
    T. CVP-1 (ciclofosfamida, vincristina, y prednisona);
    U. ESHOP (etopósido, metilprednisolona, citarabina a dosis elevada, vincristina y cisplatino);
    V. EPOCH (etopósido, vincristina, y doxorubicina durante 96 horas con dosis de bolos de ciclofosfamida y prednisona oral);
    W. ICE (ifosfamida, ciclofosfamida, y etopósido);
    X. CHOP-B (ciclofosfamida, doxorubicina, vincristina, prednisona, y bleomicina); y
    Y. P/DOCE (epirubicina o doxorubicina, vincristina, ciclofosfamida, y prednisona).
  3. 63.
    El medicamento para su uso de acuerdo con la reivindicación 62, en el que el anticuerpo dirigido contra los antígenos superficiales celulares expresados en neoplasias de linfocitos B se selecciona entre un grupo que consiste en anticuerpos dirigidos contra CD19, CD20 y CD33.
  4. 64.
    El medicamento para su uso de acuerdo con la reivindicación 63, en el que el anticuerpo dirigido contra CD20 es rituximab.
  5. 65.
    El medicamento para su uso de acuerdo con la reivindicación 37, en el que el anticuerpo dirigido contra CD22 comprende una región variable de la cadena ligera que comprende la SEQ ID NO: 19 y una región variable de la cadena pesada que comprende la SEQ ID NO: 27.
  6. 66.
    El medicamento para su uso de acuerdo con la reivindicación 37, en el que el anticuerpo dirigido contra CD22 es un anticuerpo humanizado y comprende una cadena ligera que tiene una secuencia que se muestra en la SEQ ID NO: 28.
  7. 67.
    El medicamento para su uso de acuerdo con la reivindicación 37, en el que anticuerpo dirigido contra CD22 es un anticuerpo humanizado y comprende una cadena pesada que tiene la secuencia que se muestra en la SEQ ID NO: 30.
  8. 68.
    El medicamento para su uso de acuerdo con la reivindicación 37, en el que el anticuerpo dirigido contra CD22 comprende una cadena ligera que comprende la SEQ ID NO: 28 y una cadena pesada que comprende la SEQ ID NO:
  9. 30.
  10. 69. El medicamento para su uso de acuerdo con la reivindicación 37, en el que el anticuerpo dirigido contra CD22 comprende una cadena pesada en la que el dominio variable comprende una CDR que tiene al menos una de las secuencias proporcionadas en la SEQ ID NO: 1 para CDR-H1, la SEQ ID NO: 2 o la SEQ ID NO: 13 o la SEQ ID NO: 15 o la SEQ ID NO: 16 o los restos 50-66 de la SEQ ID NO: 23 o los restos 50-66 de la SEQ ID NO: 27 para CDR-H2,
    o la SEQ ID NO: 3 para CDR-H3, y comprende una cadena ligera en la que el dominio variable comprende una CDR que tiene al menos una de las secuencias proporcionadas en la SEQ ID NO: 4 para CDR-L1, la SEQ ID NO: 5 para
    63
    CDR-L2, o la SEQ ID NO: 6 para CDR-L3.
  11. 70.
    El medicamento para su uso de acuerdo con la reivindicación 37, en el que el anticuerpo dirigido contra CD22 comprende la SEQ ID NO: 1 par CDR-H1, la SEQ ID NO: 2 o la SEQ ID NO: 13 o la SEQ ID NO: 15 o la SEQ ID NO: 16 o los restos 50-66 de la SEQ ID NO: 23 o los restos 50-66 de la SEQ ID NO: 27 para CDR-H2, la SEQ ID NO: 3 para CDR-H3, la SEQ ID NO: 4 para CDR-L1, la SEQ ID NO: 5 para CDR-L2, y la SEQ ID NO: 6 para CDR-L3.
  12. 71.
    El medicamento para su uso de acuerdo con la reivindicación 70, en el que el anticuerpo dirigido contra CD22 comprende los restos 50-66 de la SEQ ID NO: 27.
  13. 72.
    El medicamento de la reivindicación 18 con uno o más agentes bioactivos para su uso en el tratamiento de linfomas agresivos.
  14. 73.
    El medicamento para su uso de acuerdo con la reivindicación 72, en el que el conjugado monomérico de derivado de caliqueamicina / anticuerpo dirigido contra CD22 es CMC-544.
  15. 74.
    El procedimiento de la reivindicación 1, en el que el anticuerpo que comprende una secuencia de CDR-H2 que comprende un resto de aminoácido en la posición de Kabat 55 diferente a asparagina.
  16. 75.
    El procedimiento de la reivindicación 74, en el que aminoácido en la posición de Kabat 55 es glutamina.
  17. 76.
    El procedimiento de la reivindicación 1, en el que el anticuerpo comprende una secuencia de CDR-H2 que comprende un resto de aminoácido en la posición de Kabat 57 diferente a treonina.
  18. 77.
    El procedimiento de la reivindicación 76, en el que aminoácido en la posición de Kabat 57 es alanina o valina.
  19. 78.
    El procedimiento de la reivindicación 1, en el que el anticuerpo comprende una secuencia de CDR-H2 que comprende un resto de aminoácido en la posición de Kabat 60 diferente a lisina.
  20. 79.
    El procedimiento de la reivindicación 78, en el que el resto de aminoácido es arginina.
  21. 80.
    La composición de la reivindicación 18, en el que el anticuerpo que comprende una secuencia de CDR-H2 que comprende un resto de aminoácido en la posición de Kabat 55 diferente a asparagina.
  22. 81.
    La composición de la reivindicación 80, en el que aminoácido en la posición de Kabat 55 es glutamina.
  23. 82.
    La composición de la reivindicación 18, en el que el anticuerpo comprende una secuencia de CDR-H2 que comprende un resto de aminoácido en la posición de Kabat 57 diferente a treonina.
  24. 83.
    La composición de la reivindicación 82, en el que aminoácido en la posición de Kabat 57 es alanina o valina.
  25. 84.
    La composición de la reivindicación 18, en el que el anticuerpo comprende una secuencia de CDR-H2 que comprende un resto de aminoácido en la posición de Kabat 60 diferente a lisina.
  26. 85.
    La composición de la reivindicación 84, en el que el resto de aminoácido es arginina.
    64
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Families Citing this family (131)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6905669B2 (en) 2001-04-24 2005-06-14 Supergen, Inc. Compositions and methods for reestablishing gene transcription through inhibition of DNA methylation and histone deacetylase
US20110045005A1 (en) * 2001-10-19 2011-02-24 Craig Crowley Compositions and methods for the treatment of tumor of hematopoietic origin
GB0210121D0 (en) * 2002-05-02 2002-06-12 Celltech R&D Ltd Biological products
PL224001B1 (pl) * 2002-05-02 2016-11-30 Wyeth Corp Sposób wytwarzania stabilnej liofilizowanej kompozycji obejmującej monomeryczne koniugaty pochodna kalicheamycyny/przeciwciało anty-CD22, kompozycja otrzymana tym sposobem oraz jej zastosowanie
TW200539855A (en) * 2004-03-15 2005-12-16 Wyeth Corp Calicheamicin conjugates
US9237744B2 (en) * 2004-05-26 2016-01-19 National University Corporation Kagawa University Preservative solution for cells, tissues and organs containing rare sugar and preservative method thereof
TW200621282A (en) * 2004-08-13 2006-07-01 Wyeth Corp Stabilizing formulations
US7300773B2 (en) 2004-08-27 2007-11-27 Wyeth Research Ireland Limited Production of TNFR-Ig
US7335491B2 (en) 2004-08-27 2008-02-26 Wyeth Research Ireland Limited Production of anti-abeta
TWI384069B (zh) 2004-08-27 2013-02-01 Pfizer Ireland Pharmaceuticals 多胜肽之製法
US20060045877A1 (en) * 2004-08-30 2006-03-02 Goldmakher Viktor S Immunoconjugates targeting syndecan-1 expressing cells and use thereof
AR050642A1 (es) * 2004-09-10 2006-11-08 Wyeth Corp Anticuerpos anti-5t4 humanizados y conjugados anticuerpo anti-5t4/ calicheamicina
EP1661584A1 (en) * 2004-11-26 2006-05-31 Heinz Dr. Faulstich Use of conjugates of amatoxins and phallotoxins with macromolecules for cancer and inflammation therapy
US20110166319A1 (en) * 2005-02-11 2011-07-07 Immunogen, Inc. Process for preparing purified drug conjugates
US7250416B2 (en) 2005-03-11 2007-07-31 Supergen, Inc. Azacytosine analogs and derivatives
US20070003559A1 (en) * 2005-07-01 2007-01-04 Wyeth Methods of determining pharmacokinetics of targeted therapies
JP2009504740A (ja) 2005-08-16 2009-02-05 シンタ ファーマシューティカルズ コーポレーション ビス（チオ−ヒドラジドアミド）製剤
RS52470B (en) 2005-08-24 2013-02-28 Immunogen Inc. PROCEDURE FOR PREPARATION OF PURE CONJUGATED MEDICINES
US7700567B2 (en) 2005-09-29 2010-04-20 Supergen, Inc. Oligonucleotide analogues incorporating 5-aza-cytosine therein
US9393215B2 (en) 2005-12-02 2016-07-19 Novartis Ag Nanoparticles for use in immunogenic compositions
WO2007067602A1 (en) * 2005-12-06 2007-06-14 Wyeth Interleukin-11 compositions and methods of use
PL1994055T3 (pl) 2006-03-10 2015-02-27 Wyeth Llc Przeciwciała anty-5T4 i ich zastosowanie
EP1859811B1 (en) * 2006-05-27 2011-08-24 Faulstich, Heinz, Dr. Use of conjugates of amatoxins or phallotoxins with macromolecules for tumor and inflammation therapy
CA2657248C (en) 2006-07-13 2018-10-30 Wyeth Production of glycoproteins
US8609720B2 (en) 2006-08-21 2013-12-17 Synta Pharmaceuticals Corp. Compounds for treating proliferative disorders
RU2009111138A (ru) * 2006-10-12 2010-11-20 Вайет (Us) Способы и композиции с уменьшенной опалесценцией
CA2666317C (en) 2006-11-03 2013-08-06 Wyeth Glycolysis-inhibiting substances in cell culture
CN101626782B (zh) 2006-12-01 2013-03-27 梅达雷克斯公司 结合cd22的人抗体及其用途
US8552067B2 (en) * 2006-12-22 2013-10-08 The Regents Of The University Of California Macromolecular conjugates of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator protein inhibitors and uses therefor
CA2675583A1 (en) * 2007-01-16 2008-07-24 Wyeth Inflammation treatment, detection and monitoring via trem-1
DK2115126T3 (en) 2007-03-02 2015-05-04 Wyeth Llc Use of copper and glutamate in cell culture for the preparation of polypeptides
CN102558001B (zh) * 2007-05-22 2015-09-23 惠氏有限责任公司 制造酰肼的改良方法
PE20090309A1 (es) * 2007-06-04 2009-04-18 Wyeth Corp Conjugado portador-caliqueamicina y un metodo de deteccion de caliqueamicina
PT2211904T (pt) * 2007-10-19 2016-11-02 Seattle Genetics Inc Agentes de ligação a cd19 e seus usos
US20090169550A1 (en) * 2007-12-21 2009-07-02 Genentech, Inc. Therapy of rituximab-refractory rheumatoid arthritis patients
PT2242772E (pt) * 2007-12-26 2015-02-09 Biotest Ag Imunoconjugados dirigidos contra cd138 e as suas utilizações
EP2238168B8 (en) 2007-12-26 2014-07-23 Biotest AG Agents targeting cd138 and uses thereof
BRPI0821417A2 (pt) * 2007-12-26 2015-06-16 Biotest Ag Método para diminuir a adesão de células de estroma a células tumorais que expressam cd138 em células tumorais de um indivíduo em necessidade do mesmo
EP2238169A1 (en) * 2007-12-26 2010-10-13 Biotest AG Method of decreasing cytotoxic side-effects and improving efficacy of immunoconjugates
US20090186026A1 (en) * 2008-01-18 2009-07-23 Wyeth Ephrin and eph receptor agonists for modulation of bone formation and resorption
US8591889B2 (en) 2008-04-04 2013-11-26 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Human monoclonal antibodies specific for CD22
FR2930443B1 (fr) 2008-04-29 2010-06-25 Oreal Produit extemporane de soin a base d'un lyophilisat de microorganisme et de tensioactif(s) de hlb superieur ou egal a 12
SG189811A1 (en) 2008-04-30 2013-05-31 Immunogen Inc Cross-linkers and their uses
CN102448500A (zh) * 2009-06-03 2012-05-09 免疫基因公司 轭合方法
WO2011098518A2 (en) * 2010-02-11 2011-08-18 Ablynx Nv Delivery of immunoglobulin variable domains and constructs thereof
US8822663B2 (en) 2010-08-06 2014-09-02 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
CA2807607A1 (en) 2010-08-20 2012-02-23 Wyeth Llc Cell culture of growth factor-free adapted cells
CA3162352A1 (en) 2010-10-01 2012-04-05 Modernatx, Inc. Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof
WO2012065161A2 (en) 2010-11-12 2012-05-18 Scott & White Healthcare Antibodies to tumor endothelial marker 8
US20120222979A1 (en) * 2011-03-04 2012-09-06 Elwha LLC, a limited liability company of the State of Delaware Glassy compositions
EA201991268A3 (ru) 2011-03-29 2020-01-31 Иммуноджен, Инк. Получение конъюгатов "майтансиноид-антитело" одностадийным способом
AU2012236099A1 (en) 2011-03-31 2013-10-03 Moderna Therapeutics, Inc. Delivery and formulation of engineered nucleic acids
PT2750768T (pt) 2011-08-30 2018-12-19 Astex Pharmaceuticals Inc Formulações de derivados de decitabina
US9464124B2 (en) 2011-09-12 2016-10-11 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
US9428535B2 (en) 2011-10-03 2016-08-30 Moderna Therapeutics, Inc. Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof
SG11201401220SA (en) 2011-10-21 2014-07-30 Pfizer Addition of iron to improve cell culture
US10117932B2 (en) 2011-12-08 2018-11-06 Biotest Ag Uses of immunoconjugates targeting CD138
EP2791160B1 (en) 2011-12-16 2022-03-02 ModernaTX, Inc. Modified mrna compositions
US9303079B2 (en) 2012-04-02 2016-04-05 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins
US9283287B2 (en) 2012-04-02 2016-03-15 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins
US9572897B2 (en) 2012-04-02 2017-02-21 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins
AU2013243946A1 (en) 2012-04-02 2014-10-30 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of membrane proteins
WO2014008404A1 (en) 2012-07-03 2014-01-09 Washington University Antibodies to tau
US8883979B2 (en) 2012-08-31 2014-11-11 Bayer Healthcare Llc Anti-prolactin receptor antibody formulations
RU2018122734A (ru) 2012-10-04 2018-07-24 Иммуноджен, Инк. Использование пвдф-мембраны для очистки конъюгатов клеточно-связывающий агент-цитотоксический агент
ES2701076T3 (es) 2012-11-24 2019-02-20 Hangzhou Dac Biotech Co Ltd Enlazadores hidrofílicos y sus usos para la conjugación de fármacos a las moléculas que se unen a las células
LT2922554T (lt) 2012-11-26 2022-06-27 Modernatx, Inc. Terminaliai modifikuota rnr
SG11201504887TA (en) 2012-12-21 2015-07-30 Bioalliance Cv Hydrophilic self-immolative linkers and conjugates thereof
US8980864B2 (en) 2013-03-15 2015-03-17 Moderna Therapeutics, Inc. Compositions and methods of altering cholesterol levels
KR101817409B1 (ko) * 2013-05-02 2018-01-10 에프. 호프만-라 로슈 아게 어푸코실화된 cd20 항체와 cd22 항체-약물 컨주게이트의 복합 요법
US10023626B2 (en) 2013-09-30 2018-07-17 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides
CA2926218A1 (en) 2013-10-03 2015-04-09 Moderna Therapeutics, Inc. Polynucleotides encoding low density lipoprotein receptor
ES2768611T3 (es) * 2013-11-04 2020-06-23 Pfizer Intermedios y procedimientos para sintetizar derivados de calicheamicina
TW201605480A (zh) 2013-11-04 2016-02-16 輝瑞大藥廠 抗ｅｆｎａ４抗體－藥物結合物
US10464955B2 (en) 2014-02-28 2019-11-05 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd. Charged linkers and their uses for conjugation
EP3119876A1 (en) 2014-03-19 2017-01-25 Pfizer Inc. Method of cell culture
JP2017528418A (ja) 2014-06-20 2017-09-28 バイオアライアンス コマンディテール フェンノートシャップ 抗葉酸受容体アルファ（ｆｒａ）抗体−薬物コンジュゲート及びその使用方法
TW202136296A (zh) 2014-06-27 2021-10-01 美商Ｃ２Ｎ醫療診斷有限責任公司 人類化抗-tau抗體
GB201412658D0 (en) 2014-07-16 2014-08-27 Ucb Biopharma Sprl Molecules
US9925281B2 (en) 2014-08-05 2018-03-27 Case Western Reserve University Coated plant virus imaging agents
WO2016073972A1 (en) 2014-11-07 2016-05-12 Case Western Reserve University Cancer immunotherapy using virus particles
CN113876962A (zh) 2015-04-07 2022-01-04 纪念斯隆-凯特琳癌症中心 纳米粒子免疫偶联物
SG11201708629VA (en) * 2015-04-21 2017-11-29 Abbvie Stemcentrx Llc Calicheamicin constructs and methods of use
GB201506870D0 (en) 2015-04-22 2015-06-03 Ucb Biopharma Sprl Method
EP3313527B1 (en) 2015-06-29 2021-02-24 Case Western Reserve University Anticancer drug-containing plant virus particles
BR112018000054A2 (pt) 2015-07-02 2018-09-04 Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. composições farmacêuticas liofilizadas
CA2991973C (en) 2015-07-12 2021-12-07 Suzhou M-Conj Biotech Co., Ltd. Bridge linkers for conjugation of a cell-binding molecule
US9839687B2 (en) 2015-07-15 2017-12-12 Suzhou M-Conj Biotech Co., Ltd. Acetylenedicarboxyl linkers and their uses in specific conjugation of a cell-binding molecule
US10478510B2 (en) * 2015-07-16 2019-11-19 Case Western Resrve University Plant virus particles for delivery of antimitotic agents
GB201601077D0 (en) 2016-01-20 2016-03-02 Ucb Biopharma Sprl Antibody molecule
GB201601073D0 (en) 2016-01-20 2016-03-02 Ucb Biopharma Sprl Antibodies
GB201601075D0 (en) 2016-01-20 2016-03-02 Ucb Biopharma Sprl Antibodies molecules
WO2017051347A2 (en) 2015-09-23 2017-03-30 Pfizer Inc. Cells and method of cell culture
WO2017083224A1 (en) 2015-11-09 2017-05-18 Bristol-Myers Squibb Company Methods to manipulate quality attributes of polypeptides produced in cho cells
CN108713026B (zh) 2016-01-08 2023-01-06 美国全心医药生技股份有限公司 四价抗psgl-1抗体及其用途
US20170281758A1 (en) * 2016-03-29 2017-10-05 Sorrento Therapeutics, Inc. Calicheamicin antibody drug conjugates linking an amidoacetyl group to a sugar moiety on calicheamicin
EP3440190A1 (en) 2016-04-05 2019-02-13 Pfizer Inc Cell culture process
US11623958B2 (en) 2016-05-20 2023-04-11 Harpoon Therapeutics, Inc. Single chain variable fragment CD3 binding proteins
GB201610512D0 (en) 2016-06-16 2016-08-03 Autolus Ltd Chimeric antigen receptor
WO2018017985A1 (en) 2016-07-21 2018-01-25 Case Western Reserve University Plant virus or virus-like particle constructs
EP3535283A4 (en) 2016-11-03 2020-08-12 Case Western Reserve University CONSTRUCTIONS OF FUSION TREATED VIRAL NANOPARTICLES
KR20220150408A (ko) 2016-11-14 2022-11-10 항저우 디에이씨 바이오테크 씨오, 엘티디 결합 링커, 그러한 결합 링커를 함유하는 세포 결합 분자-약물 결합체, 링커를 갖는 그러한 결합체의 제조 및 사용
US11590183B2 (en) 2017-03-10 2023-02-28 Case Western Reserve University Cancer immunotherapy using virus particles
JP7177076B2 (ja) 2017-03-16 2022-11-22 ファイザー・インク チロシン原栄養性
JP7090347B2 (ja) 2017-05-12 2022-06-24 ハープーン セラピューティクス，インク． メソテリン結合タンパク質
US11672840B2 (en) 2017-05-17 2023-06-13 Case Western Reserve University Anticancer trail-targeted plant virus particles
WO2019025863A2 (en) 2017-08-03 2019-02-07 Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. MEDICAMENT COMPOUND AND METHODS OF PURIFICATION
KR20200047702A (ko) 2017-09-15 2020-05-07 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 관심 폴리펩티드 대규모 생산 동안의 온라인 바이오매스 정전용량 모니터링
AU2018346955A1 (en) 2017-10-13 2020-04-30 Harpoon Therapeutics, Inc. B cell maturation antigen binding proteins
WO2019084555A1 (en) 2017-10-27 2019-05-02 Case Western Reserve University TYMOVIRUS VIRUSES AND VIRAL TYPE PARTICLES USEFUL AS NANOVECTORS FOR IMAGING AND THERAPEUTIC AGENTS
US20210010055A1 (en) 2018-03-16 2021-01-14 Bristol-Myers Squibb Company Metabolic enzyme activity and disulfide bond reduction during protein production
CN110507824A (zh) * 2018-05-21 2019-11-29 荣昌生物制药（烟台）有限公司 一种抗间皮素抗体及其抗体药物缀合物
WO2019232241A1 (en) * 2018-05-30 2019-12-05 Abbvie Stemcentrx Llc Anti-sez6 antibody drug conjugates and methods of use
JP7425049B2 (ja) 2018-09-25 2024-01-30 ハープーン セラピューティクス，インク． Ｄｌｌ３結合タンパク質および使用方法
KR20210116437A (ko) 2018-11-20 2021-09-27 코넬 유니버시티 방사성핵종의 마크로사이클릭 복합체 및 암의 방사선 요법에서의 이의 용도
WO2020115655A1 (en) 2018-12-06 2020-06-11 Pfizer Inc. Cells with reduced inhibitor production and methods of use thereof
AU2020242284A1 (en) 2019-03-19 2021-09-16 Fundació Privada Institut D'investigació Oncològica De Vall Hebron Combination therapy for the treatment of cancer
US11390853B2 (en) 2019-04-26 2022-07-19 Case Western Reserve University Freeze dried viral nanoparticle constructs
WO2021024020A1 (en) 2019-08-06 2021-02-11 Astellas Pharma Inc. Combination therapy involving antibodies against claudin 18.2 and immune checkpoint inhibitors for treatment of cancer
US11896676B2 (en) 2019-08-07 2024-02-13 Case Western Reserve University Targeting cancer cells and tissue using filamentous plant virus particles
EP4069312A4 (en) * 2019-12-04 2024-03-27 Univ New York State Res Found COMPOSITIONS AND METHODS FOR REDUCING OFF-TARGET TOXICITY OF ANTIBODY-DRUG CONJUGATES
JP2023532768A (ja) 2020-07-07 2023-07-31 バイオエヌテック エスエー Ｈｐｖ陽性癌の治療用ｒｎａ
WO2022135667A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 BioNTech SE Therapeutic rna for treating cancer
WO2022135666A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 BioNTech SE Treatment schedule for cytokine proteins
TW202245808A (zh) 2020-12-21 2022-12-01 德商拜恩迪克公司 用於治療癌症之治療性ｒｎａ
CN112724263B (zh) * 2021-04-02 2021-08-03 上海偌妥生物科技有限公司 改造抗cd20单克隆抗体以提高其药物疗效的方法及其应用
EP4370552A1 (en) 2021-07-13 2024-05-22 BioNTech SE Multispecific binding agents against cd40 and cd137 in combination therapy for cancer
TW202333802A (zh) 2021-10-11 2023-09-01 德商拜恩迪克公司 用於肺癌之治療性rna(二)
WO2023148598A1 (en) 2022-02-02 2023-08-10 Pfizer Inc. Cysteine prototrophy
WO2024058201A1 (ja) * 2022-09-16 2024-03-21 国立研究開発法人量子科学技術研究開発機構 放射性医薬組成物の中間体の製造方法、放射性医薬組成物の中間体の精製用キット
WO2024089013A1 (en) 2022-10-25 2024-05-02 Peptomyc, S.L. Combination therapy for the treatment of cancer

Family Cites Families (43)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4671958A (en) 1982-03-09 1987-06-09 Cytogen Corporation Antibody conjugates for the delivery of compounds to target sites
US4970198A (en) 1985-10-17 1990-11-13 American Cyanamid Company Antitumor antibiotics (LL-E33288 complex)
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
US4771128A (en) * 1986-10-10 1988-09-13 Cetus Corporation Method of purifying toxin conjugates using hydrophobic interaction chromatography
US5079233A (en) 1987-01-30 1992-01-07 American Cyanamid Company N-acyl derivatives of the LL-E33288 antitumor antibiotics, composition and methods for using the same
US5037651A (en) 1987-01-30 1991-08-06 American Cyanamid Company Dihydro derivatives of LL-E33288 antibiotics
US5053394A (en) 1988-09-21 1991-10-01 American Cyanamid Company Targeted forms of methyltrithio antitumor agents
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US5134075A (en) 1989-02-17 1992-07-28 Oncogen Limited Partnership Monoclonal antibody to novel antigen associated with human tumors
GB8928874D0 (en) 1989-12-21 1990-02-28 Celltech Ltd Humanised antibodies
ES2264239T3 (es) 1990-06-27 2006-12-16 Princeton University Complejo de proteinas p53/p90'.
HU219537B (hu) 1991-03-06 2001-05-28 Merck Patent Gmbh. Humanizált és kiméra monoklonális antitestek, azokat tartalmazó gyógyászati készítmények, az antitesteket kódoló szekvenciát tartalmazó expressziós vektorok, valamint eljárás az antitestek előállítására
US5714350A (en) 1992-03-09 1998-02-03 Protein Design Labs, Inc. Increasing antibody affinity by altering glycosylation in the immunoglobulin variable region
US5686072A (en) 1992-06-17 1997-11-11 Board Of Regents, The University Of Texas Epitope-specific monoclonal antibodies and immunotoxins and uses thereof
US5484892A (en) * 1993-05-21 1996-01-16 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Monoclonal antibodies that block ligand binding to the CD22 receptor in mature B cells
US6180377B1 (en) 1993-06-16 2001-01-30 Celltech Therapeutics Limited Humanized antibodies
US5436265A (en) 1993-11-12 1995-07-25 Merck Frosst Canada, Inc. 1-aroyl-3-indolyl alkanoic acids and derivatives thereof useful as anti-inflammatory agents
US6310185B1 (en) 1994-03-08 2001-10-30 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Recombinant human anti-Lewis Y antibodies
US5773001A (en) 1994-06-03 1998-06-30 American Cyanamid Company Conjugates of methyltrithio antitumor agents and intermediates for their synthesis
ATE201445T1 (de) 1994-08-12 2001-06-15 Myriad Genetics Inc Mutationen des mit 17q verbundenen ovarial- und brustkrebs empfindlichkeitsgens
AU3272695A (en) 1994-08-12 1996-03-07 Immunomedics Inc. Immunoconjugates and humanized antibodies specific for b-cell lymphoma and leukemia cells
US5712374A (en) * 1995-06-07 1998-01-27 American Cyanamid Company Method for the preparation of substantiallly monomeric calicheamicin derivative/carrier conjugates
US5714586A (en) 1995-06-07 1998-02-03 American Cyanamid Company Methods for the preparation of monomeric calicheamicin derivative/carrier conjugates
US6267958B1 (en) 1995-07-27 2001-07-31 Genentech, Inc. Protein formulation
US7147851B1 (en) 1996-08-15 2006-12-12 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Humanized immunoglobulin reactive with α4β7 integrin
US20020141990A1 (en) 1996-11-01 2002-10-03 Smithkline Beecham Corporation Anti-RSV human monoclonal antibodies
US5980898A (en) 1996-11-14 1999-11-09 The United States Of America As Represented By The U.S. Army Medical Research & Material Command Adjuvant for transcutaneous immunization
AU740904B2 (en) 1997-03-20 2001-11-15 Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services, The Recombinant antibodies and immunoconjugates targeted to CD-22 bearing cells and tumors
US6306393B1 (en) 1997-03-24 2001-10-23 Immunomedics, Inc. Immunotherapy of B-cell malignancies using anti-CD22 antibodies
US6183744B1 (en) 1997-03-24 2001-02-06 Immunomedics, Inc. Immunotherapy of B-cell malignancies using anti-CD22 antibodies
ES2190087T3 (es) * 1997-06-13 2003-07-16 Genentech Inc Formulacion estabilizada de un anticuerpo.
AT408613B (de) 1998-06-17 2002-01-25 Immuno Ag Pharmazeutisches faktor vii-präparat
US6183477B1 (en) * 1998-09-04 2001-02-06 Smith & Nephew, Inc. Attachment tool for drill guide
KR100345463B1 (ko) 1998-11-19 2003-01-08 주)녹십자 B형간염바이러스의표면항원프리-s1에대한인간화항체및이의제조방법
JP2000226336A (ja) * 1998-11-30 2000-08-15 Sankyo Co Ltd 免疫グロブリン製剤
AU775076B2 (en) 1998-12-10 2004-07-15 Bristol-Myers Squibb Company Protein scaffolds for antibody mimics and other binding proteins
EP1194167B1 (en) 1999-06-09 2009-08-19 Immunomedics, Inc. Immunotherapy of autoimmune disorders using antibodies which target b-cells
WO2001012653A1 (en) * 1999-08-17 2001-02-22 Novo Nordisk A/S Stabilisation of freeze-dried cake
DK1232392T3 (da) 1999-10-12 2003-07-28 Connex Ges Zur Optimierung Von Forbedret fremgangsmåde til påvisning af syreresistente bakterier af slægten Helicobacter i afføring
US20010046496A1 (en) 2000-04-14 2001-11-29 Brettman Lee R. Method of administering an antibody
GB0013810D0 (en) 2000-06-06 2000-07-26 Celltech Chiroscience Ltd Biological products
PL224001B1 (pl) 2002-05-02 2016-11-30 Wyeth Corp Sposób wytwarzania stabilnej liofilizowanej kompozycji obejmującej monomeryczne koniugaty pochodna kalicheamycyny/przeciwciało anty-CD22, kompozycja otrzymana tym sposobem oraz jej zastosowanie
GB0210121D0 (en) * 2002-05-02 2002-06-12 Celltech R&D Ltd Biological products

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Publication number Publication date
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CN1665532A (zh) 2005-09-07
PT2371392E (pt) 2015-10-07
JP2013163678A (ja) 2013-08-22
US20140235835A1 (en) 2014-08-21
WO2003092623A2 (en) 2003-11-13
TWI438010B (zh) 2014-05-21
PT3127553T (pt) 2022-01-24
US8153768B2 (en) 2012-04-10
HUS1700038I1 (hu) 2017-11-28
DK1507556T3 (en) 2016-09-12
CY2017035I2 (el) 2018-04-04
CR7557A (es) 2008-10-03
KR20050006220A (ko) 2005-01-15
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ES2545745T3 (es) 2015-09-15
KR20110050753A (ko) 2011-05-16
PL410219A1 (pl) 2015-03-30
EP1507556A4 (en) 2009-01-07
US9351986B2 (en) 2016-05-31
PL413302A1 (pl) 2016-05-23
PL411824A1 (pl) 2015-08-17
BR122019027974B1 (pt) 2022-06-14
JP5441971B2 (ja) 2014-03-12
SI2371392T1 (sl) 2015-10-30
HK1162926A1 (en) 2012-09-07
BRPI0309868B1 (pt) 2020-04-28
PH12013501158B1 (en) 2015-11-09
JP5153057B2 (ja) 2013-02-27
PH12013501159B1 (en) 2015-12-02
MXPA04010792A (es) 2005-03-07
JP6872376B2 (ja) 2021-05-19
NZ586071A (en) 2012-02-24
ES2916174T3 (es) 2022-06-28
NL300903I2 (nl) 2018-02-08
HK1070825A1 (zh) 2005-06-30
RU2016141576A (ru) 2018-05-03
SG165158A1 (en) 2010-10-28
PL224001B1 (pl) 2016-11-30
AU2003231293A1 (en) 2003-11-17
RU2004135101A (ru) 2005-06-27
NZ573563A (en) 2010-10-29
NO20044663L (no) 2005-01-25
CY2017035I1 (el) 2018-04-04
CR20130390A (es) 2013-11-08
LT3127553T (lt) 2022-04-11
CA2871117A1 (en) 2003-11-13
NO344509B1 (no) 2020-01-20
EP2371392B1 (en) 2015-07-08
CR20120364A (es) 2012-10-05
HUE057124T2 (hu) 2022-04-28
CY1124900T1 (el) 2023-01-05
SI3127553T1 (sl) 2022-02-28
US8747857B2 (en) 2014-06-10
IL164946A (en) 2015-06-30
US20040192900A1 (en) 2004-09-30
IL164946A0 (en) 2005-12-18
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US20180339058A1 (en) 2018-11-29
IL230659A (en) 2016-02-29
CY1117973T1 (el) 2017-05-17
IL230659A0 (en) 2014-03-31
DK2371392T3 (en) 2015-08-31
WO2003092623A3 (en) 2004-03-18
US20040082764A1 (en) 2004-04-29
NO2017061I1 (no) 2017-11-21
TW201231089A (en) 2012-08-01
US8835611B2 (en) 2014-09-16

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