ES2334635T3

ES2334635T3 - Polihidroxiestilbeno y oxidos de estilbeno como agentes antipsoriasicos e inhibidores de la proteina quinasa.

Info

Publication number: ES2334635T3
Application number: ES00984681T
Authority: ES
Inventors: Genhui Chen; John M. Webster; Jianxiong Li; Kaiji Hu; Jiang Zhu
Original assignee: Welichem Biotech Inc
Current assignee: Welichem Biotech Inc
Priority date: 1999-12-06
Filing date: 2000-12-06
Publication date: 2010-03-15
Anticipated expiration: 2020-12-06
Also published as: WO2001042231A2; CA2393297C; ATE444960T1; KR20020070310A; AU2133001A; HK1051691A1; KR100805907B1; CN1319959C; DE60043120D1; EP1248774B1; JP4880847B2; EP1248774A2; CN1407978A; WO2001042231A3; US20030171429A1; CA2393297A1; JP2003516400A; AU780700B2

Abstract

Compuesto con la fórmula **(Ver fórmula)** donde: R Se selecciona en el grupo consistente en: hidrógeno; halógeno; alquilo con entre 1 y 18 carbonos; alquenilo con entre 1 y 18 carbonos; alcoxi con entre 1 y 18 carbonos; R1 y R2 se seleccionan independientemente en el grupo consistente en: hidrógeno; alquilo con entre 1 y 18 carbonos; acilo con entre 1 y 18 carbonos; o las sales farmacológicamente aceptables de los mismos.

Description

Polihidroxiestilbeno y óxidos de estilbeno como agentes antipsoriásicos e inhibidores de la proteína quinasa.

Antecedentes de la invención

Es bien conocido que los estilbenos aislados a partir de las bacterias de la especie Photorhabdus manifiestan una actividad antibiótica. Véase V. J. Paul, S. Frautschv, W. Fenical, y K. H. Nealson, Journal of Chemical Ecology, 7: 589-597 (1981), y K. Hu, J. Li, W. Wang, H. Wu, H. Lin y J. M. Webster, Canadian Journal of Microbiology. 44: 1072-1077 (1998).

Sin embargo, no se ha demostrado que estos compuestos desarrollen otras actividades biológicas. Se ha revelado que un compuesto similar, el resveratrol, desarrolla actividades de prevención del cáncer (Jang y otros, 1997) y de inhibidor de la proteína quinasa C (García-García et. al., 1999).

Existen muchas enfermedades comunes que no pueden tratarse satisfactoriamente mediante antibióticos, entre las que se encuentran las enfermedades inflamatorias. Los compuestos de la invención poseen propiedades específicas anti-inflamatorias.

Las enfermedades inflamatorias, tanto crónicas como agudas, representan un problema sustancial para la industria sanitaria. Se considera que la inflamación crónica es una inflamación con una duración prolongada (semanas o meses) durante la cual se producen simultáneamente una inflamación activa, una destrucción de tejidos e intentos de curación (Robbins Pathological Basis of Disease por R. S. Cotran, v. Kumar, y S. L. Robbins, W. B, Saunders Co., p. 75,1989). A pesar de que la inflamación crónica puede seguir a un episodio inflamatorio agudo, también puede comenzar como un proceso insidioso que evoluciona con el paso del tiempo, por ejemplo, como resultado de una infección persistente (por ejemplo, tuberculosis, sífilis, infección por hongos) que provoca una reacción demorada de hipersensibilidad, o de una exposición prolongada a toxinas endógenas (por ejemplo, una elevada cantidad de lípidos en el plasma) o exógenas (por ejemplo, sílice, amianto, alquitrán del tabaco, suturas quirúrgicas) o de una reacción autoinmune a los tejidos del propio cuerpo (por ejemplo, artritis reumatoide, lupus eritematoso sistémico, esclerosis múltiple, psoriasis). Por lo tanto, las enfermedades inflamatorias crónicas incluyen muchas situaciones médicas comunes, como artritis reumatoide, restenosis, psoriasis, esclerosis múltiple, adhesiones quirúrgicas, tuberculosis y enfermedades inflamatorias crónicas del pulmón y las vías respiratorias (por ejemplo, asma, neumoconiosis, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, pólipos nasales y fibrosis pulmonar).

La psoriasis es una enfermedad inflamatoria crónica de la piel, caracterizada por la rápida multiplicación y renovación de las células epiteliales, con el consiguiente engrosamiento de la epidermis, así por como lesiones de piel hinchada e inflamada, cubiertas por parches escamosos de color blanco plateado, y lesiones inflamadas, escamosas e hinchadas, que pican, provocan quemazón, pinchazos y que sangran con facilidad. Por tanto, se trata de una enfermedad que no sólo se caracteriza por la inflamación, sino también por la proliferación celular. Por lo tanto, en lo que respecta a la proliferación, presenta similitudes con los cánceres, y tanto la psoriasis como los cánceres se han descrito como enfermedades proliferativas. En aproximadamente un 10% de los pacientes, la psoriasis se presenta acompañada de unos síntomas artropáticos agudos que son similares a los cambios presenciados en la artritis reumatoide. Aproximadamente de un 2 a un 3% de la población estadounidense padece psoriasis, diagnosticándose 250.000 nuevos casos cada año. Los compuestos de la invención poseen una actividad específica contra la psoriasis.

La actividad antibiótica tampoco es un predictor que resulte útil como inhibidor de la quinasa proteínica. La quinasa proteínica está presente en muchas enfermedades, incluyendo cánceres, además de ser un factor presente en la diabetes, la placa ateromatosa, y la proliferación epidérmica (incluyendo psoriasis). Los compuestos de la invención poseen una actividad específica de inhibición de la quinasa proteínica.

Se cree que los inhibidores de la quinasa proteínica pueden tener una gran importancia para el control de la reproducción celular incontrolada, es decir, en desórdenes de reproducción celular. Por ejemplo, la ADN-PK es una quinasa proteínica compuesta por un polipéptido catalítico de grandes dimensiones, y una unidad reguladora de enlace del ADN (autoantígeno Ku). El Ku se reconoció por primera vez como una fosfoproteína nuclear heterodimérica (p70/p80) al reaccionar con sueros procedentes de pacientes que padecían enfermedades autoinmunes, como el lupus eritematoso y la polimiositis esclerodérmica. La Caseína quinasa II (Ck2) es una quinasa de serina/treonina que produce la fosforilación de las proteínas acídicas como la caseína. Se ha demostrado que la Ck2 desempeña múltiples funciones en el interior de la célula y que puede activarse mediante numerosos factores de crecimiento, hormonas y citoquinas. La Ck2 tiene múltiples substratos objetivo en el interior de la célula, que en último término participan en la regulación del ADN, del ARN y de la síntesis de las proteínas.

La Ck2 desempeña una función en el control de la señalización mitogénica y la neuritogenesis. Se ha demostrado que la Ck2 se encuentra presente en numerosos cuadros de enfermedad. También se ha demostrado la presencia de unos elevados niveles de Ck2 en los tumores humanos sólidos y en tejidos no neoplásicos de rápida proliferación, como la mucosa colorectal. La actividad de la Ck2 era mucho mayor en el caso del melanoma metastático y en células transformadas por el citomegalovirus humano. La infección de animales con el parásito protoxoan tuvo como resultado un síndrome mortal linfoproliferativo asociado a la expresión de la Ck2. También se ha demostrado una elevada actividad de la Ck2 en el caso de la enfermedad de Alzheimer.

Amson y otros (1989) han demostrado que el producto 33-kD del gen PIM tiene una elevada expresión en el hígado y el bazo durante la hematopoyesis fetal. Por el contrario, su expresión es muy reducida en los granulocitos en circulación en los adultos. Su expresión es muy elevada en malignidades hematopoyéticas, y especialmente en leucemias mieloides y leucemias linfoides agudas. Los resultados implican una función fisiológica del oncogen Pim 1 durante el desarrollo hematopoyético, y una desregulación del gen en diversas leucemias. Saris y otros (1991) han aportado pruebas de que los productos presentes en el gen Pim 1, tanto en humanos como en ratones, son quinasas de serina/treonina. En el ratón, a cualquier concentración, demostraron que el gen codifica tanto una proteína kD 34 y una 44, siendo la última una extensión aminoterminal de la primera, sintetizada iniciando la traslación de forma alternativa en un codón CUG situado con anterioridad. Ark y otros (1991) han facilitado una situación más exacta del emplazamiento del Pim-1 en el ratón, utilizando el gen Pim-1 como marcador para un análisis genético posterior de haplotipos t en el cromosoma 17 del ratón. Para comprender el funcionamiento del Pim-1 y su función en el desarrollo hematopoyético, Laird y otros (1993) generaron ratones con deficiencias en la función del Pim-1. Los ratones con deficiencias de Pim-1 se mostraban ostensiblemente normales, sanos y fértiles; no obstante, un análisis más detallado demostró una correlación entre la deficiencia del Pim-1 y la microcitosis eritrocitaria, mientras que la abundancia de Pim-1 en ratones transgénicos tenía como resultado una microcitosis eritrocitaria.

El documento WO 99/59561 A describe el resveratrol y sus derivados como unos potentes inhibidores de los mieloperóxidos, una enzima liberada por los neutrófilos, que provoca daños en los tejidos en enfermedades que implican una inflamación crónica. Dichas enfermedades incluyen, sin limitación, la arteroesclerosis, la artritis, la enfermedad de Alzheimer, la sepsis (shock endotóxico), las enfermedades inflamatorias de la dermis (psoriasis) la enfermedad inflamatoria de las encías (gingivitis) y la enfermedad inflamatoria intestinal.

El documento JP 07053359 A describe el piceatanol y sus derivados para su utilización como un componente activo, formado por un excipiente y que adopta la forma de una preparación farmacéutica para la obtención la preparación objetivo de un agente anti-inflamatorio, un agente antialérgico, etc. con una excelente acción inhibidora de la lipoxigenasa.

Cushman y otros (1992) sintetizaron y evaluaron una serie de estilbenos, es decir, análogos de (Z)-1-(4-Metoxifenil-2-(3,4,5-trimetoxifenil)eteno como agentes potenciales citotóxicos y antimióticos potenciales mediante la utilización de cinco líneas de células cancerosas humanas Una célula pulmonar no pequeña A-549, una célula mamaria MCF-7, una célula del colon HT-29, de un melanoma SKME-5 y de melanoma MLM.

El documento WO 99/40056 A se refiere a los pro medicamentos enzimáticos aromáticos activados por hidroxilación, especialmente a los pro medicamentos antitumorales y aquellos que son activados específicamente por la actividad de hidroxilación de la enzima CYP1B1. La hidroxilación intratumoral de los pro medicamentos les aporta una sorprendente e inesperada eficacia, con lo que su subestructura de estireno o calchona resulta esencial.

Los recientes estudios relativos a la base molecular o transformación neoplásica han identificado una familia de genes, designados con el nombre de oncogenes, cuya expresión aberrante provoca tumorogénesis. Por ejemplo, los virus tumorales de ARN poseen dicha secuencia de oncogen cuya expresión determina la conversión neoplásica de las células infectadas. La quinasa de tirosina Lck se expresa básicamente en diferentes tipos de células hematopoyéticas.

La proteína Lck se encuentra en timocitos y células T maduras y se ha comunicado su expresión en células B del bazo de ratones maduros. Campbell y otros (1992). Los inhibidores de la Lck son válidos para el tratamiento de una serie de dichos desórdenes (por ejemplo, el tratamiento de las enfermedades autoinmunes), ya que la inhibición de la Lck bloquea la activación de las células T. El tratamiento de las enfermedades inducidas por células T, incluyendo la inhibición de la activación y la proliferación de la célula T es una realización preferida de la presente invención. Se prefieren los compuestos que bloquean de forma selectiva la activación y la proliferación de la célula T.

De este modo, un inhibidor específico de estas quinasas puede resultar útil a la hora de investigar el mecanismo de la cancerogénesis, de la proliferación celular, las diferenciaciones y la autoinmunología, pudiendo ser eficaz para la prevención y la quimioterapia del cáncer y otras enfermedades patológicas proliferativas. Por lo tanto, los compuestos acordes con la presente invención pueden resultar útiles para el tratamiento de la proliferación patológica y de los desórdenes autoinmunes en mamíferos, incluyendo los seres humanos. Un ser humano o animal, por ejemplo, un mamífero, puede tratarse por tanto mediante un método que incluya la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de uno de los compuestos de la invención. Puede conseguirse una mejoría en el estado de la enfermedad padecida por el animal o el ser humano. Entre los ejemplos típicos de dichos desórdenes se encuentran los tumores benignos y malignos, incluyendo la leucemia, como la leucemia mieloblástica, el linfoma, sarcoma, neuroblastoma, el tumor de Wilm, la neoplasia maligna de la vesícula, mama, pulmón o tiroides, y las neoplasias de origen epitelial, como el carcinoma de mama. Además, pueden resultar útiles en el tratamiento de la hiperproliferación epidérmica, como en el caso de la psoriasis. Los compuestos de la invención también pueden resultar útiles a la hora de inhibir el desarrollo de la placa ateromatosa y la restenosis, para el control de la angiogénesis, como agentes anti-metastáticos y para el tratamiento de complicaciones diabéticas. También resultan útiles para el control de las enfermedades del sistema inmunológico, por ejemplo, como inmunosupresores, en la medida en que en dichas enfermedades se encuentren presentes las quinasas proteínicas de tirosina.

El rechazo del transplante (injerto frente a enfermedad adquirida) y las adherencias quirúrgicas también se ven afectadas por las quinasas proteínicas. La inhibición de la quinasa proteínica y las propiedades antiinflamatorias de los compuestos de la presente invención tienen su utilidad en cirugía para reducir el rechazo del transplante y las adherencias quirúrgicas.

En una realización particular, los compuestos de la presente invención resultan útiles para el tratamiento de los ejemplos de desórdenes mencionados anteriormente independientemente de su etiología, por ejemplo, para el tratamiento del rechazo de los transplantes, la artritis reumatoide, la esclerosis múltiple, enfermedad pulmonar obstructiva, enfermedad inflamatoria intestinal, lupus, hipersensibilidad, psoriasis, tiroiditis de Hashimoto, síndrome de Guillain-Barre, cáncer, dermatitis de contacto, enfermedades alérgicas, como rinitis alérgica, asma, lesiones isquémicas o por reperfusión, o dermatitis atópica.

Resumen de la invención

La presente invención se refiere a compuestos que contienen los estilbenos hidroxilados y sus derivados y análogos, que resultan útiles para el tratamiento de las enfermedades inflamatorias, para el tratamiento de la psoriasis y para la inhibición de las quinasas proteínicas.

La invención también incluye los nuevos métodos de síntesis utilizados para la fabricación de los compuestos. Estos métodos posibilitan la fabricación comercial y no requieren la recuperación a partir de los insectos.

La presente invención también comprende nuevos compuestos, de acuerdo con la fórmula II facilitada más adelante.

Descripción detallada de la invención

En una realización preferida, esta invención se refiere a compuestos que contienen una cantidad antiinflamatoria de un compuesto de fórmula (Fórmula I):

1

Donde

R se selecciona en el grupo consistente en:

: Halógenos

: Alquilo con un número de carbonos entre 1 y 18;

: Alquenilo con un número de carbonos entre 1 y 18;

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R1 y R2 se seleccionan independientemente en el grupo consistente en:

: Hidrógeno;

: Alquilo con un número de carbonos entre 1 y 18;

: Acilo con un número de carbonos entre 1 y 18;

Y las sales farmacológicamente aceptables de los mismos.

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Los compuestos de la invención resultan especialmente útiles contra la psoriasis, y en una realización preferida, el compuesto se encuentra presente en una cantidad anti-psoriásica.

Los compuestos de la invención también resultan útiles como inhibidores de la quinasa proteínica, y en una realización preferida, el compuesto se encuentra presente en una cantidad que inhibe la actividad de la quinasa proteínica.

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Las invenciones también incluyen métodos para el tratamiento de la inflamación, o psoriasis, o de tratar aquellas condiciones que pueden tratarse mediante la inhibición de la quinasa proteínica, administrando una cantidad farmacológicamente efectiva de los compuestos de la invención.

Los compuestos preferidos para su utilización con los compuestos de la presente invención son aquellos compuestos en los que R es un grupo alquilo, y R1 y R2 son hidrógeno. Se prefieren particularmente aquellos compuestos en los que R es un grupo alquilo con una cadena de enlace corto, y R1 y R2 son hidrógeno. Un compuesto especialmente preferido es 3,5-dihidroxi-4-isopropilestilbeno.

En otra realización preferida, R se selecciona a partir del grupo consistente en alquilo sustituido y no sustituido con entre 1 y 18 átomos de carbono, alquenilo sustituido y no sustituido con entre 1 y 18 átomos de carbono, y alquilo cíclico con entre 1 y 18 átomos de carbono.

R1 y R2 se seleccionan en el grupo de acilos con entre 1 y 18 átomos de carbono, y los grupos hidrógeno y alquilo con entre 1 y 18 átomos de carbono,

Y las sales farmacológicamente aceptables de los mismos.

En otra realización preferida, R se selecciona en el grupo consistente en alquilo sustituido y no sustituido con entre 1 y 18 átomos de carbono, alquenilo sustituido y no sustituido con entre 1 y 18 átomos de carbono, y haluros, y

R1 y R2 se seleccionan a partir del grupo acilo con entre 1 y 18 átomos de carbono, y grupo hidrógeno y metilo,

Y las sales farmacológicamente aceptables de los mismos.

En una realización preferida, el compuesto contiene 3,5-dihidroxi-4-isopropilestilbeno.

Esta invención también se refiere a nuevos compuestos y composiciones que contienen una cantidad antiinflamatoria de un compuesto de acuerdo con la fórmula II:

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2

Donde:

R se selecciona en el grupo consistente en:

: Hidrógeno;

: Halógeno;

: Alquilo, con entre 1 y 18 átomos de carbono;

: Alquenilo, con entre 1 y 18 átomos de carbono;

: Alkoxi, con entre 1 y 18 átomos de carbono;

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R1 y R2 se seleccionan independientemente en el grupo consistente en:

: Hidrógeno;

: Alquilo, con entre 1 y 18 átomos de carbono;

: Acilo, con entre 1 y 18 átomos de carbono;

O las sales farmacológicamente aceptables de los mismos.

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Además de las bases libres de las fórmulas I y II, las sales farmacológicamente aceptables y similares se consideran incluidas dentro del alcance de la presente invención.

Los compuestos de esta invención y las composiciones de la invención incluyen las formas estereoquímicas trans y cis de los compuestos y las mezclas de las formas trans y cis.

Breve descripción de las figuras

La figura 1 es un gráfico que muestra el efecto del 3, 5-dihidroxi-4-isopropilestilbeno sobre la activación del neutrófilo mediada por cristal.

La figura 2 es un gráfico que muestra el efecto del 3, 5-dihidroxi-4-isopropilestilbeno en la activación del neutrófilo mediada por el fMLP.

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Ejemplo 1 Síntesis de los compuestos de la invención

Los compuestos útiles para las composiciones de la presente invención pueden prepararse a partir del 3,4-ácido dihidroxibenzoico y del 4-bromo-3,4-ácido dihidroxibenzoico de la fórmula

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3

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El proceso de síntesis incluye la metilación del hidroxilo, la reducción de los ésteres, la oxidación del alcohol, la reacción de Wittig (o reacción de Horner, o reacción de Horner-Emmons-Wadsworth) y la desmetilación. Las rutas de síntesis están perfectamente establecidas y se encuentran disponibles en la técnica.

Pueden obtenerse derivados adicionales de estilbenos mediante una esterificación estándar a través de la reacción de derivados hidroxilados de estilbenos y un ácido o su derivado, como la correspondiente sal, cloruro y anhídrido. Esta reacción es muy conocida en la técnica. Por ejemplo, se ha añadido un alcohol a una mezcla de anhídrido y piridina a baja temperatura, y la mezcla se dejó a temperatura ambiente durante el tiempo suficiente para completar la reacción. Tras la reacción, el proceso general de tratamiento conocido en la técnica arrojó los derivados correspondientes.

Los compuestos de la invención que siguen la fórmula II pueden producirse con un oxidante adecuado, como el ácido m-cloroperbenzoico y la hidrólisis de los correspondientes compuestos de la fórmula I. Por ejemplo, el 3,5-Dihidroxi-4-isopropil-trans-estilbeno epóxido puede sintetizarse a partir del compuesto 3,5-dihidroxi-4-isopropil-trans-estilbeno (9) del esquema 1 de la página siguiente, mediante la reacción con el ácido m-cloroperbenzoico (1,2 eq.) en CH_{2}Cl_{2} a 0ºC. Tras la reacción, el proceso general de desarrollo es conocido por la técnica. Los compuestos de la presente invención pueden prepararse de forma alternativa a partir de distintas rutas conocidas por la técnica, y que se incorporan por referencia al presente documento (Eicher, T.; Tiefensee, K.; Donig, R. y Pick, R. Synthesis 1991,98-102; Krow, G. R.; Miles, W. H.; Smiley, P. M.; Lester, W. S. y Kim, Y. J. J. Org. Chem. 1992, 57, 4040-4043; Seguineru, P. y Villieras Tetrahedron Letters 1988, 29, 477-480; Thakkar, K.; Geahlen, R. L. y Cushman M. J. Med. Chem. 1993, 36, 2950-2955; Bezou, P.; Hilberer, A. y Hadziioannou, G. Synthesis 1996, 449-451). Estos métodos utilizan un catalizador complejo (Krow, G. R.; Miles, W. H.; Smiley, P. M.; Lester, W. S. y Kim, Y. J. J. Org. Chem. 1992, 57, 4040-4043) o requieren muchas etapas (Eicher, T.; Tiefensee, K.; Donig, R. y Pick, R. Synthesis 1991,
98-102).

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(a) Esquemas de la síntesis

Los compuestos de la presente invención se sintetizaron a partir del ácido 3,4-dihidroxibenzoico (1) y del 4-bromo-3,4- ácido dihidroxibenzoico comercialmente disponible (10), siguiendo la ruta descrita en el Esquema 1 o 2:

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Esquema 1

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i. (CH_{3})_{2}SO_{4}, CH_{3}COCH_{3}, K_{2}CO_{3}, reflujo, 24 h; ii. BrCH (CH_{3})_{2}, AlCl_{3}, CS_{2}, reflujo, 7d; iii. LiAlH_{4}, Et_{2}O, 0ºC, 2 h,; iv. Py^{+}Cl^{-}CrO_{3}, 1,5 h; v. PO (OEt)_{3}, (But)_{4}N^{+}I^{-}, 110-130ºC, 10 h; vi. NaH, cpd 5, THF, 60ºC, 3 h; vii. BBr_{3}, CH_{2}Cl_{2},-78ºC, posteriormente 0ºC, 24 h.

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Esquema 2

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i. (CH_{3})_{2}SO_{4}, CH_{3}COCH_{3}, K_{2}CO_{3}, reflujo, 24 h; ii. LiAlH_{4}, Et_{2}O, 0ºC, 2 h,; iii. Py^{+}CI^{-}CrO_{3}, 1.5 h; iv. NaH, 7, THF, 60ºC, 3 h; v. a. t-butil Li, THF,-78ºC y posteriormente a rt, 2 h, b. RBr en THF, vi. BBr_{3}, CH_{2}Cl_{2},-78ºC y posteriormente a 0ºC, 24 h. R-Grupos alquilo primarios, (-CH_{2}CH_{3},-(CH_{2})_{13}CH_{3}.

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Procedimiento A

Metilación

Se añadió alcohol o ácido (1 g, 1 eq) a una solución de acetona bien agitada (100 ml) que contenía dimetil sulfato (2 eq. por cada grupo hidroxilo o carboxílico) y K_{2}CO_{3} (5 eq. por cada grupo hidroxilo o carboxílico). Esta solución se sometió a reflujo durante 12 horas. Tras el filtrado, el disolvente a base de acetona se evaporó a baja presión, y el residuo se disolvió en EtOAc (50 mL). La solución de EtOAc se lavó con agua (50 mL x 2), con NaCl acuoso saturado (50 mL), secándose sobre Na_{2}SO_{4}, evaporándose a baja presión para conseguir un jarabe, purificado mediante cromatografía de columna de sílice (Hexanos/EtOAc = 4:1). Cuando PO (OEt)_{3} se sustituye por trifenilfosfato, se sintetizan derivados cis.

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Procedimiento B

Reducción de éster metílico a alcohol

Se añadió agitando lentamente LiAlH_{4} (1,5 eq.) al éster metílico (1 g, 1 eq) dietil éter anhidro (100 mL) a 0ºC. Al cabo de 30 min, se añadió agua (5 mL) lentamente a la mezcla, para eliminar el exceso de LiAlH_{4}, y la mezcla se acidificó con HCl al 10% (aq). La capa orgánica se lavó con agua (50 mL x 2), NaHCO_{3} saturado (50 mL), secándose sobre Na_{2}SO_{4} y el disolvente se evaporó a baja presión para conseguir un jarabe, cristalizado a partir de
EtOH/hexanos.

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Procedimiento C

Oxidación del alcohol primario en aldehído

Se añadió alcohol (1 g, 1 eq) en diclorometano a una solución bien agitada de diclorometano anhídrido (50 mL) que contenía clorocromato de piridinio (1,5 eq. a cada grupo hidroxilo). Al cabo de 90 min, se añadió éter dietilo (100 mL), y se decantó el sobrenadado, lavándose el jarabe gomoso negro con éter seco (20 mL x 3), convirtiéndose en un sólido negro. Se hizo pasar la solución orgánica combinada a través de un short pad de Florisol y el disolvente se eliminó mediante evaporación giratoria, obteniéndose un jarabe que a continuación se cristalizó a partir de EtOH/
hexano.

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Procedimiento D

Reacción de Wittig

Se añadió NaH (2 eq.) a un éster de dietilo bencilfosfonato bien agitado (7) (1,5 eq.) en THE seco (25 mL) durante 60 min a 0ºC.

Se añadió lentamente aldehído (1 g, 1 eq) en THE (2 mL) a la mezcla, y se permitió reaccionar a la mezcla de reacción durante 3 horas a 50ºC. Tras enfriarse a la temperatura ambiente, se vertió la mezcla sobre hielo, a lo que siguió la adición de 2M HCl (5 mL).

Se extrajo la mezcla con EtOAc (20 mL x 3), y la capa orgánica combinada se lavó a continuación con agua (25 mL x 2), NaCl saturado (25 mL) y se secó sobre sulfato de magnesio anhidro. Tras el filtrado, el disolvente se evaporó a presión reducida, y el jarabe resultante se purificó mediante cromatografía de columna de sílice (Pet éter/éter= 8:1).

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Procedimiento E

Desmetilación

Se añadió gota a gota BBr_{3} (4 mL, 1 M en CH_{2}Cl_{2}) en 10 mL de CH_{2}Cl_{2} seco en estilbeno metilado (1 g, 1 eq) en CH_{2}Cl_{2} seco (5 mL) a -78ºC, dejándose a temperatura ambiente hasta el día siguiente. A continuación, la mezcla se vertió sobre el hielo, y se separó la capa orgánica, extrayéndose la capa acuosa con CH_{2}Cl_{2} (20 mL x 2). La capa orgánica combinada se lavó con NaCl, secándose sobre sulfato sódico anhídrido y evaporándose a baja presión hasta la sequedad.

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Procedimiento F

Acetilación

Se añadió alcohol (1 g, 1 eq) a una mezcla enfriada en hielo de anhídrido acético/piridina = 1:1 (v/v) (5 mL), y la mezcla se dejó a temperatura ambiente durante la noche. Tras la reacción, se añadió EtOAc (25 mL) a la mezcla, el EtOAc se lavó con agua enfriada en hielo (25 mL), HCl al 10% (25 mL x 2) enfriado en hielo, agua (25 mL x 2), NaHCO_{3} acuoso (25 mL), y se secó sobre Na_{2}SO_{4} anhídrido. Tras la eliminación del disolvente, el producto se purificó mediante cromatografía de columna de sílice (Hexanos/EtOAc = 8:1).

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(c) Utilización del esquema de síntesis 1 parta conseguir 3,5-Dihidroxi-4-isopropil-trans-estilbeno y sus derivados.

(i): Metil 3,5-dimetoxi-benzoato (compuesto 2 del esquema 1) (Procedimiento A): el producto crudo (jarabe) se cristalizó a partir de EtOH/Hexanos para conseguir el compuesto puro 2 (Esquema 1) (-90%). Mp: 110-113ºC. NMR (100 MHz, CDCl_{3}) 6 4,20 (s, 6 H, OCH_{3}), 4,60 (s, 3 H, COOCH_{3}), 6,30 (t, 1 H, J_{4,2} = 2,2 Hz, H-4), 7,20 (d, 2H, H-2,6).

(ii): Metil 3,5-dimetoxi-4-isopropil-benzoato (compuesto 3 del esquema 1): Se añadió AlCl_{3} anhídrido (0,85 g) a CS_{2} seco (100 mL) que contenía metil 3,5 dimetoxi-benzoato (compuesto 2 del esquema 1) (0,86 g) y 2-bromopropano (0,61 mL, 1,1 eq.). Esta solución se calentó a reflujo durante 7 días. La mezcla se filtró, se lavó con agua (100 mL x 2), NaHCO_{3} saturado (100 mL) y NaCl saturado (100 mL), secándose sobre Na_{2}SO_{4}. Tras el filtrado y la eliminación del disolvente, el producto crudo se purificó mediante cromatografía de columna (EtOAc/Hexanos = 4:1) para conseguir metil 3,5 dimetoxi-4-isopropil-benzoato (compuesto 3) (0,69 g, 66%) que se cristalizó a partir de EtOH/Hexanos. NMR (100 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,61 (d, 6 H, J_{\nu 2'} = 7,1 Hz, H-2'), 3,66 (hept, 1 H, H-1'), 3,88 (s, 6 H, OCH_{3}), 3,94 (s, 3 H, COOCH_{3}), 7,25 (s, 2 H, H-2, 6).

(iii): alcohol 3,5-Dimetoxi-4-isopropil-bencilo (compuesto 4 del esquema 1) (procedimiento B): El producto en bruto (jarabe) se cristalizó a partir de EtOAc/Hexanos para conseguir el compuesto 4 (rendimiento del 85%). NMR (100 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,31 (d, 6 J_{\nu 2'}- = 7,1 Hz, H-2'), 3,61 (hept, 1 H, H-1'), 3,84 (s, 6 H, OCH_{3}), 4,68 (s, 1 H, H-OH), 6,60 (s, 2 H, H-2, 6).

(iv): 3,5-Dimetoxi-4-isopropil-benzaldehído (compuesto 5 del esquema 1) (procedimiento C): El residuo resultante se cristalizó a partir de EtOH para conseguir el compuesto puro 5 (rendimiento del 80%). NMR (100 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,31 (d, 6 H, J_{\nu 2'} = 7,1 Hz, H-2'), 3,61 (hept, 1 H, H-1'), 3,84 (s, 6 H, OCH_{3}), 4,68 (s, 1 H, H-OH), 6,60 (s, 2 H, H-2,6).

(v): Ester de dietil benzilfosfonato (compuesto 7 del esquema 1): Se añadió trietil fosfito (3,2 mL, 1,5 eq.) al bromuro de bencilo (2,11 g) que contenía una cantidad catalítica de yoduro de butilamonio, y la mezcla se calentó a 110-130ºC durante una noche. El exceso de trietil fosfito se eliminó calentando la solución durante 1 hora a 100ºC en vacío (15 mm Hg) para obtener el compuesto 7 cuantitativamente. NMR (100 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,21 (t, 6 H, J_{2'1'} = 7.1 Hz, H-2'), 3,02 (s, 1 H, H-\alpha), 3,24 (s, 1 H, H-\beta), 3,98 (quint, 2 H, H-1'), 7,27 (s, 5 H, H-ArH).

(vi): 3,5-Dimetoxi-4-isopropil-trans-estilbeno (compuesto 8 del esquema 1) (procedimiento D): 1 producto se purificó mediante cromatografía de columna (Et_{2}O/Hexanos = 1:8) y se cristalizó a partir de éter/hexanos para obtener el compuesto puro 8 (70% de rendimiento). Mp: 64-66ºC. NMR (400 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,28 (d, 6 H, J_{Me,CH} = 7,0 Hz, CH_{3}), 3,58 (hept, 1 H,-CH-), 3,85 (s, 6 H, H-OCH_{3}), 6,69 (s, 2 H, H-2,6), 7,05 (s, 2 H, = CH), 7,25 (m, 1 H, H-4'), 7,35 (m, 2 H, H-3', 5'), 7,25 (m, H-2',6').

(vii): 3,5-Dihidroxi-4-isopropil-trans-estilbeno (compuesto 9 del esquema 1) (procedimiento E): El producto se purificó mediante cromatografía de columna (EtOAc/Hexanos) y se obtuvo el compuesto deseado 9 (95% de rendimiento). Mp: 140-142ºC. NMR (400 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,38 (d, 6 H, J_{\alpha , \beta} = 7,3 Hz, CH_{3}), 3,46 (hept, 1 H,-CH-), 4,80 (s, 2 H, H-OH), 6,50 (s, 2 H, H-2,6), 6,92 (d, 1 H, J_{A,B} = 16,2 Hz, H-=CH_{A}), 6,97 (d, 1 H, H-=CH_{B}), 7,25 (m, 1 H, H-4'), 7,34 (m, 2 H, H-3', 5'), 7,52 (m, 2 H, H-2', 6').

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(d) Utilización del esquema 2 para formar 3,5-dihidroxi-trans-estilbenos 4-sustituidos adicionales y sus derivados.

(viii): Metil 3,5-Dimetoxi-4-bromo-benzoato (compuesto 11 del esquema 2) (procedimiento A). El producto en bruto (95%) se cristalizó a partir de EtOH/Hexanos. Mp: 119-124ºC. NMR (100 MHz, CDCl_{3}) \delta 3,96 (s, 3 H, COOCH_{3}), 3,99 (s, 6 H, OCH_{3}), 7,28 (s, 2 H, H-2,6).

(ix): 3,5-Dimetoxi-4-bromo-bencil alcohol (compuesto 12 del esquema 2) (procedimiento B). El producto en bruto (85% de rendimiento) se cristalizó a partir de EtOH/Hexanos. Mp: 84-95ºC. NMR (100 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,95 (s, 1 H, OH), 3,93 (s, 6 H, OCH_{3}), 4,69 (s, 1 H, CH_{2}), 6,61 (s, 2H, H-2,6).

(x): 3,5-Dimetoxi-4-bromo-benzaldehído (compuesto 13 del esquema 2) (procedimiento C). El producto en bruto (75%) se cristalizó a partir de EtOH/Hexanos. Mp: 110-113ºC. NMR (100 MHz, CDCl_{3}) \delta 4,02 (s, 6 H, OCH_{3}). 7,11 (s, 2H, H-2,6), 9,97 (s, 1 H, CHO).

(xi): 3,5-Dimetoxi-4-bromo-trans-estilbeno (compuesto 14 del esquema 2) (procedimiento D). El Producto en bruto se purificó mediante cromatografía de columna (Pet éter/Éter = 8:1) en 70% y se cristalizó a partir de éter/hexanos. Mp: 149-152ºC. NMR (400 MHz, CDCl_{3}) \delta 3,96 (s, 6 H, 2 x OCH_{3}), 6,72 (s, 2 H, H-2,6), 7,06 (d, 1 H, J_{A,B} = 16,2 Hz, H-=CH_{A}), 7,11 (d, 1 H, H-= CH_{B}), 7,28 (m, 1 H, H-4'), 7,37 (m, 2 H, H-3',5'), 7,55 (m, 2 H, H-2', 6').

(xii): 4-Bromo-3,5-Hidroxi--trans-estilbeno (compuesto 16 del esquema 2) (procedimiento E): El producto en bruto se purificó mediante cromatografía de columna (Pet éter/Éter = 4:1) in 90% y se cristalizó a partir de Éter/Hexanos. Mp: 150-152ºC. NMR (100 MHz, CDCl_{3}) \delta 5,39 (s, 2 H, 2 x OH), 6,81 (s, 2 H, ArH-2,6), 7,06 (d, 1 H, J_{A,B} = 16,2 Hz, H-=CH_{A}), 7,11 (d, 1 H, H-=CH_{B}), 7,28 (m, 1 H, H-4'), 7,37 (m, 2 H, H-3', 5'), 7,55 (m, 2 H, H-2', 6').

(xiii): 3,5-Dimetoxi-4-etil-trans-estilbeno (compuesto 15a del esquema 2): se añadió t-butil Li (1,1 mL, 1M en THF) a -78ºC a una solución de THF (10 mL) que contiene 3,5-Dimetoxi-4-bromo-trans-estilbeno (0,53 g). Tras añadir dicho producto, la solución se calentó lentamente hasta el reflujo durante 30 minutos, y posteriormente se enfrío hasta -78ºC. Se añadió yoduro de etilo (1,2 eq, 0,265 mL) a la solución a -78ºC. Una vez finalizada la reacción, se añadió agua gota a gota (10 mL) a la mezcla, evaporándose el THF a presión reducida. La mezcla se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (5 mL x 3), y la capa orgánica combinada se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, retirándose a presión reducida. La mezcla de productos se purificó mediante cromatografía de columna (éter/pet éter = 1:8) y se obtuvo 3,5-Dimetoxi-4-etil-trans-estilbeno (14a) (70%) y 3,5-Dimetoxitrans-estilbeno (30%) debido a la humedad. Mp: 70-73ºC. NMR (400 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,12 (t, 6 H, J_{MeHcH}= 7,2 Hz, CH3), 2,70 (q, 2 H, -CH_{2}-), 3,91 (s, 6 H, OCH_{3}), 6,74 (s, 2 H, H-2,6), 7,07 (s, 2 H, 2 x =CH-), 7,26 (m, 1 H, H-4'), 7,36 (m, 2 H, H-3', 5'), 7,52 (m, 2 H, H-2', 6').

(xiv): 3,5-Dihidroxi-4-etil-trans-estilbeno (compuesto 16a del esquema 2) (procedimiento E): Tras una cromatografía de columna (éter/pet éter = 8:1) se obtuvo el producto con un rendimiento del 91% y se cristalizó a partir de éter/hexanos. Mp: 143-146ºC. NMR (100 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,22 (t, 6 H, J_{\alpha , \beta} 7,5 Hz, 2 x CH_{3}), 2,70 (q, 2 H, CH_{2}), 4,81 (s, 2 H, 2 x OH), 6,60 (s, 2 H, H-2,6), 7,00 (s, 2 H, 2 x =CH-), 7,26 (m, 1 H, H-4'), 7,36 (m, 2 H, H-3', 5'), 7,52 (m, 2 H, H-2', 6').

(xv): 3,5-Dimetoxi-4-miristil-trans-estilbeno (compuesto 15b del esquema 2). El procedimiento y su desarrollo son los mismos que los del compuesto 14 [véase el punto (xi) anterior]. Mp: 68-70ºC. NMR (100 MHz, CDCl_{3}) \delta 0,91 (m, 6 H, 2 x CH_{3}), 1,29 (m, 22 H, 10 x CH_{2}), 2,65 (m, 2 H, CH_{2}), 3,90 (s, 6 H, 2 x OCH_{3}), 6,73 (s, 2 H, H-2,6), 7,10 (s, 2 H, H-=CH), 7,26 (m, 1 H, H-4'), 7,36 (m, 2 H, H-3', 5'), 7,52 (m, 2 H, H-2', 6').

(xvi): 3,5-Dihidroxi-4-miristil-trans-estilbeno (compuesto 16b del esquema 2) (procedimiento E): Tras efectuar una cromatografía de columna (éter/pet éter = 8 : 1) se obtuvo el producto con un rendimiento del 91% y se cristalizó a partir de éter/hexanos: Mp: 125-128ºC. NMR (100 MHz, CDCl_{3}) \delta 0,95 (m, 6 H, 2 x CH_{3}), 1,30 (m, 22 H, 10 x CH_{2}), 2,65 (m, 2 H, CH_{2}), 4,80 (s, 2H, 2 x OH), 6,60 (s, 2 H, H-2,6), 7,00 (s, 2H, 2x =CH-), 7,26 (m, 1 H, H-4'), 7,36 (m, 2 H, H-3',5'), 7,52 (m, 2 H, H-2' 6').

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(e) Ejemplos de derivados adicionales de hidroxi-trans-estilbenos.

(xvii): 3,5-Di-acetoxi-4-isopropil-trans-estilbeno (procedimiento E): Se obtuvo el producto deseado con un rendimiento cuantitativo a partir de 3,5-Dihidroxi-4-isopropil-transestilbeno siguiendo el procedimiento F y cristalizándolo a partir de éter/hexanos. Mp: 125-128ºC. NMR (400 MHz, CDCl_{3}) \delta 1, 25, 1,27 (s, 6 H, 2 x CH_{3}), 2,35 (s, 6 H, 2 x COCH_{3}), 3,08 (hepteto, 1H, CH), 6,99, 7,02 (s, 2 H, H-2,6), 7,06 (s, 2 H, CH=CH), 7,26 (m, 1 H, H-4'), 7.36 (m, 2 H, H-3', 5'), 7,52 (m, 2 H, H-2', 6').

(xviii): 3,5-Di-cloroacetoxi-4-isopropil-trans-estilbeno: Se añadió trietil amina (2 eq. por cada grupo OH) a la mezcla de 3, 5-Dihidroxi-4-isopropil-transestilbeno (143 mg) y anhídrido cloroacético (4 eq.) en éter (5 mL) a temperatura ambiente, dejándose hasta el día siguiente. Tras la evaporación del disolvente, se purificó el producto mediante cromatografía de columna de sílice (EtOAc/Hexanos = 1:8) para obtener el producto puro, cristalizado a partir de éter/hexanos (167 mg, 72%). Mp: 83-85ºC. NMR (400 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,26, 1,33 (s, 6 H, 2 x CH_{3}), 3,08 (hept, 1H, CH), 4,39 (s, 4 H, ClCH_{2}CO), 6,99, 7,02 (s, 2 H, H-2,6), 7,06 (s, 2 H, CH=CH), 7,26 (m, 1 H, H-4'), 7,36 (m, 2 H, H-3',5'), 7,52 (m, 2 H, H-2',6').

(xix): 3,4',5-Tri-acetoxi-trans-estilbeno (procedimiento E): Siguiendo el procedimiento F, se obtuvo cuantitativamente el producto deseado a partir de 3,4'-5-trihidroxi-trans-estilbeno (100% de rendimiento). Mp: 113-116ºC. NMR (400 MHz, CDCl_{3}) \delta 2,30-2,35 (s, 9 H, 3 x COCH_{3}), 6,82 (t, 1 H, J_{4,2} = J_{4,6} =2,5 Hz, H-4), 6,99 (d, 1 H, J_{A,B} = 16,2 Hz, =CH_{A}), 7,04 (d, 1 H, =CH_{B}), 7,09 (m, 1 H, HAA-3', 5'), 7,12 (d, 1 H, H-2,6), 7,49 (m, 1H, H_{BB}- 2',6').

(xx): 3,4',5-Tri-acetoxi-trans-estilbeno epóxido: se añadió ácido m-cloroperbenzoico (1,2 eq.) a CH_{2}Cl_{2} (1 mL) conteniendo 3,4',5-tri-acetoxi-trans-estilbeno (24 mg) a 0ºC, hasta que la cromatografía en capa fina mostró la desaparición del material inicial (\sim3 horas). A continuación esta solución se lavó con agua (1 mL x 2), NaHCO3 saturado (1 mL), NaCl saturado (mL) y se secó sobre MgSO_{4}. Tras el filtrado y la eliminación del disolvente, el jarabe se purificó mediante cromatografía de columna de sílice (Hexanos/Éter = 8:1) para obtener el compuesto puro, que se cristalizó a partir de éter/hexanos (16 mg, 64%). Mp: 133-137ºC. NMR (400 MHz, CDCl_{3}) \delta 2,29-2,31 (s, 9 H, 3 x COCH_{3}), 3,82 (q, 2 H, J_{A,B} = 1,8 Hz, CH_{A}-CH_{B}), 6,89 (t, 1 H, J_{4,2} = J_{4,6} = 2,1 Hz, H-4), 6,97 (dd. 2 H, H-2,6), 7,10 (AA' de AA'BB', I H, H-3',5'),7,34 (BB' de AA' BB', IH, H_{BB},-2',6').

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(xxi): 3,4',5-Trimetoxi-trans-estilbeno (procedimiento A): El producto se purificó mediante cromatografía de columna de silicio (EtOAc/Hexanes = 1:8) para conseguir un producto puro (\sim100% de rendimiento) que se cristalizó a partir de éter/hexanos. Mp: 51-54ºC. NMR (400 MHz, CDCl_{3}) \delta 3,83 (s, 9 H, 3 x OCH_{3}), 6,38 (t, 1 H, J_{4,3} = J_{4,5} = 4,6 Hz, H-4), 6,65 (d, 2 H, H-3,5), 6,88-6,91 (AA' de AA'BB', 2 H, H-2',6'), 6,91 (d, 1 H, J_{A,B} = 16,1 Hz, =CH_{A}), 7,04 (d, 1 H, H-=CH_{B}), 7,43-7,46 (BB' de AA'BB', 2 H, H-3',5').

(xxii): 3,4-Metilenoxi-trans-estilbeno (procedimiento D): Se utilizó el procedimiento D para sintetizar el compuesto a partir de 3,4-methilenoxinezaldehído. El jarabe resultante se purificó mediante cromatografía de columna de silicio (Éter/Hexanos = 1:8) para obtener el producto puro, que se cristalizó a partir de éter/hexanos (75%). Mp: 89-91º C. NMR (400 MHz, CDCl_{3}) \delta 5,99 (s, 2H, -CH_{2}-), 6,80 (d, 1 H, J_{5,6} = 8.1 Hz, H-5), 6,94 (d, 1 H, J_{AB} = 16,3 Hz, =CH_{A}), 6,95 (dd, 1 H, J6.2 = 0,4 Hz. H-6), 7,03 (d, 1 H, =CH_{B}), 7,08 (d, 1 H, H-2), 7,24 (m, 1 H, H-4'), 7,34 (m, 2 H, H-3', 5'), 7,48 (m, 2 H, H-2', 6').

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Ejemplo 2 Formulaciones de los compuestos de la invención a. Formulación en pomada

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Procedimiento

Se calentó una cantidad pesada de aceite mineral a 65ºC y se mezcló de forma uniforme. La mezcla se enfrió a 50-55ºC agitándola. El ingrediente activo mencionado, que se ha disuelto en etanol y se ha pulverizado, se añadió al producto anterior agitándolo. Se dejó enfriar la pomada a temperatura ambiente.

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b. Formulación en loción

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Procedimiento

Calentar aproximadamente un 90% del miristalato de isopropil requerido a 60ºC. Se añade monoestearato de aluminio agitando, y se mantiene el calor para que se disuelva el monoestearato de aluminio. Añadir el ingrediente activo disuelto en etanol en la cantidad restante de miristarato de isopropil. Añadir agitando la solución del ingrediente activo a la solución concentrada de monoestearato de aluminio en isopropilmistirato calentado previamente a 45ºC. La loción se enfrió a temperatura ambiente agitándola.

c. Formulación en Gel

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Procedimiento

Añadir una porción de aceite mineral (en torno al 90%) en un recipiente adecuado. Calentar a unos 80ºC. Añadir polietileno (A-C8) al aceite mineral. La mezcla se agita lentamente mientras está caliente, hasta que se haya disuelto todo el polietileno. Calentar rápidamente la mezcla anterior colocando el recipiente en un baño enfriador de 10-15ºC y reanudar la agitación a velocidad normal. Una vez que el contenido del recipiente alcance una temperatura aproximada de 45ºC, añadir una mezcla del ingrediente activo disuelto en etanol a la solución de polímero anterior. Dejar que la mezcla se enfríe al aire agitando lentamente. De este modo se obtendrá un gel.

d. Crema

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Procedimiento

Se mezcló concienzudamente una cantidad pesada del ingrediente activo, que se había disuelto en 100 \mul de etanol, con la crema Glaxal base a temperatura ambiente.

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Ejemplo 3 Utilización como agente anti-psoriasis

La actividad anti-psoriasis de los compuestos de esta invención puede determinarse midiendo el efecto del compuesto de prueba in vivo, ya que no se dispone de ningún modelo animal adecuado para la enfermedad. Los compuestos se testaron en voluntarios. En estas pruebas, el compuesto representativo de esta invención, es decir, el 3,5-dihidroxi-4-isopropilestilbeno se mostró activo a la hora de reducir o eliminar los síntomas de psoriasis.

Las composiciones de la presente invención incluyen un compuesto con la fórmula I o la fórmula II en una cantidad apta contra la psoriasis, junto con un excipiente farmacéutico adecuado. Una cantidad apta contra la psoriasis se define como la cantidad de compuesto necesaria para hacer que remitan los síntomas de la psoriasis, es decir, las lesiones psoriásicas. En el curso habitual de la terapia, el compuesto activo se incorpora en un vehículo aceptable para formar un compuesto para su administración tópica en el área afectada, o en una forma adecuada para su administración oral, como tabletas, cápsulas o píldoras. Las composiciones para su administración tópica pueden ser, por ejemplo, pomadas, cremas, lociones, soluciones, suspensiones, aerosoles, geles, champús o polvos. Normalmente, dichos compuestos estarán basados en excipientes estándar, como aceites vegetales farmacológicamente aceptables y gelatinas, gomas y petrolato. Otros ingredientes que entran a formar parte de las composiciones de la presente invención pueden ser conservantes, colorantes, aromatizantes, endulzantes, espesantes, agentes de suspensión, dispersión, emulsificación, inflado, estabilización y tampón, de acuerdo con lo exigido por la fórmula concreta. Está previsto que dichas composiciones contengan el ingrediente activo en una proporción de 0,01-10% en peso.

Las composiciones para su administración oral, exceptuando las dosis unitarias mencionadas anteriormente, pueden ejemplificarse mediante pastillas, polvos, granulados, suspensiones o elixires.

La dosis diaria necesaria puede administrarse en dosis únicas o divididas. La dosis exacta que ha de administrarse, por supuesto, dependerá del compuesto específico utilizado, de la edad y del peso del sujeto, así como de la respuesta individual del paciente. En función de las pruebas realizadas en animales, y en las comparaciones con agentes activos conocidos, las dosis típicas de los compuestos de la fórmula 1 contempladas para su administración tópica para el tratamiento de la psoriasis, la micosis fungoides y el vitíligo se encuentran dentro de la gama de 0,01-5 mg/kg diario. Esta cantidad diaria puede administrarse en una única dosis o en varias dosis.

Los siguientes ejemplos describen en detalle compuestos y composiciones que ilustran la presente invención, así como los métodos diseñados para su preparación. Será evidente para todos aquellos versados en la materia que pueden llevarse a cabo muchas modificaciones, tanto de los materiales como de los métodos, sin alejarse de la finalidad y la intención de lo descrito.

Se preparó una crema de 3,5-dihidroxi-4-isopropilestilbeno al 1% para las pruebas realizadas en voluntarios. Se reclutaron dos voluntarios, cada uno de ellos con un largo historial de psoriasis, para realizar las pruebas. Ninguno de ellos estaba sometido a ningún tipo de medicación un mes antes de iniciar las pruebas.

El voluntario 1, un varón de 48 años de edad, padecía psoriasis del cuero cabelludo durante más de 15 años. Había recurrido a diversas medicinas y tratamientos, incluyendo esteroides, fototerapia y otras medicinas a lo largo de su enfermedad. Todos estos tratamientos no habían producido efectos sobre su psoriasis, o dichos efectos habían sido muy limitados.

El voluntario 2, una mujer de 24 años de edad, tenía placas en su espalda. Había recurrido a la hidrocortisona con anterioridad, y la había dejado de utilizar a causa de sus efectos secundarios.

Los voluntarios recibieron tratamiento una vez al día, aplicando las cremas una vez al día sobre el área afectada, utilizando la crema básica como control. Se seleccionaron dos áreas comparables del cuerpo, y una de ellas se trató con la crema de control y la otra con la crema que contenía el compuesto de la invención. La crema de la invención contenía 3,5-dihidroxi-4-isopropilestilbeno al 1%, y los otros componentes de la crema descrita en el ejemplo 2(d). La crema de control era idéntica, salvo que no contenía el 3,5-dihidroxi-4-isopropilestilbeno.

Ambas cremas se frotaron por la piel en el área a tratar hasta que no se pudo absorber más.

Resultados: El compuesto de la invención mostró una gran eficacia en los voluntarios tratados, en comparación con las áreas sin tratar, antes y después del tratamiento.

En el caso del voluntario 1, el área a la que se aplicó el compuesto de la invención comenzó a mostrar mejoría en la inflamación y un descenso en la proliferación celular tres días después del tratamiento, con una mejoría total al cabo de 7 días. No se produjeron cambios en las condiciones del área tratada con la crema de control.

En el caso del voluntario 2, se produjo una mejoría visible en la inflamación y en la reducción de la proliferación celular al cabo de tres días de tratamiento, observándose una mejoría significativa de la psoriasis en los siete días siguientes al tratamiento.

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Ejemplo 4 Utilización como inhibidor de la quinasa proteínica

La actividad específica de la quinasa proteínica de los compuestos den la invención se demuestra mediante el hecho de que demostraron su actividad en la prueba in vitro descrita a continuación.

Prueba de la inhibición de la quinasa proteínica

Se purificó ADN-PK procedente de placenta humana, de acuerdo con Chan y otros (1996) y se efectuó el ensayo in vitro de la actividad inhibitoria de acuerdo con lo descrito a continuación.

Como protocolo estándar, se preparó cada uno de los productos en DMSO al 100%, realizándose la prueba en las condiciones siguientes:

Se mezclaron 5 \mul de solución de quinasa proteínica, 5 \mul de la solución del compuesto de prueba, 5 \mul de la solución del sustrato y 5 \mul de la disolución tampón de prueba (20 mM MOPS, pH 7,2, 25 mM glicerofosfato, 20 mM MgCl_{2} 5 mM EGTA, 2 mM EDTA, 1 mM DTT, 1 mM de vanadato de sodio) en una placa pocillo de microvaloración 96. La reacción se inició añadiendo 5 Vtl de solución ATP radioetiquetada, (250 tlM ATP con 1 \muCi de [\gamma^{32}P] ATP) a la mezcla de la reacción, incubándose la placa a temperatura ambiente durante 15 minutos. La reacción se detuvo esparciendo 10 \mul de la mezcla de la reacción en una placa pocillo de microvaloración 96 que contenía discos de papel de filtro. Tras lavar la placa de papel de filtro seis veces con ácido fosfórico al 1%, la placa se secó mediante soplado y se añadió en cada pocillo fluido de centelleo. A continuación se efectuó el recuento de la placa en un contador de centelleo. Se calcularon los valores IC_{50} a partir de muestras por triplicado. La tabla 1 muestra la actividad inhibitoria de tres compuestos representativos: epóxido de 3,5-dihidroxi-4-isopropilestilbeno (EP), 3,5-dihidroxi-4-isopropiltransestilbeno (CST) y 3,4', 5-Tri-acetoxi-trans-estilbeno (STA).

TABLA 1 Actividad inhibitoria de la quinasa proteínica

10

Como puede apreciarse a partir de los datos de actividad mostrados en la Tabla 1, los compuestos de acuerdo con la invención están dotados de unas valiosas propiedades de inhibición de las quinasas proteínicas.

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Ejemplo 5 Utilización como anti-inflamatorio

Se probó la actividad inhibitoria del 3,5-dihidroxi-4-isopropilestilbeno frente a la activación del neutrófilo mediada por cristal y atractivos químicos. La activación del neutrófilo desempeña un papel principal en la inflamación.

La prueba se llevó a cabo utilizando un protocolo establecido (Tudan. C. 1999. Bichem Pharmacol 58: 1869-1880). Los resultados se muestran en las figuras 1 y 2.

La figura 1 nuestra que este compuesto presenta una inhibición significativa de la activación del neutrófilo mediada por cristales.

La figura 2 muestra que este compuesto presenta una inhibición significativa de la activación del neutrófilo mediada por fMLP.

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Referencias

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Referencias citadas en la descripción

La lista de referencias citada por el solicitante lo es solamente para utilidad del lector, no formando parte de los documentos de patente europeos. Aún cuando las referencias han sido cuidadosamente recopiladas, no pueden excluirse errores u omisiones y la OEP rechaza toda responsabilidad a este respecto.

Documentos de patente citado en la descripción

\bullet WO 9959561 A [0008]: \bullet WO 9940056 A [0011]

\bullet JP 07053359 A [0009]

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Claims

1. Compuesto con la fórmula

11

donde:

R Se selecciona en el grupo consistente en:

: hidrógeno;

: halógeno;

: alquilo con entre 1 y 18 carbonos;

: alquenilo con entre 1 y 18 carbonos;

: alcoxi con entre 1 y 18 carbonos;

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R1 y R2 se seleccionan independientemente en el grupo consistente en:

: hidrógeno;

: alquilo con entre 1 y 18 carbonos;

: acilo con entre 1 y 18 carbonos;

o las sales farmacológicamente aceptables de los mismos.

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2. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, consistente en 3,5-dihidroxi-4-isopropilestilbeno-epóxido.

3. Composición farmacéutica que comprende un compuesto con fórmula I o II:

fórmula I:

12

fórmula II:

13

donde:

R se selecciona en el grupo consistente en:

: hidrógeno (solamente en el caso de la Fórmula II);

: halógeno;

: alquilo con entre 1 y 18 carbonos;

: alquenilo con entre 1 y 18 carbonos;

: alcoxi con entre 1 y 18 carbonos;

\vskip1.000000\baselineskip

R1 y R2 se seleccionan independientemente en el grupo consistente en:

: hidrógeno;

: alquilo con entre 1 y 18 carbonos;

: acilo con entre 1 y 18 carbonos;

o las sales farmacológicamente aceptables de los mismos.

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4. Composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 3, en la que en la fórmula I, R1 y R2 son hidrógenos y R es un grupo alquilo.

5. Composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 3 o 4, que comprende 3,5-dihidroxi-4-isopropiles-
tilbeno o 3,5-diacetoxi-4-isopropilestilbeno.

6. Composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 3 o 4, que comprende 3,5-dihidroxi-4-isopropil-trans-estilbeno-epóxido.

7. Composición farmacéutica de cualquiera de las reivindicaciones 3 a 6, que resulta útil en la inhibición de la quinasa proteínica.

8. Composición farmacéutica de cualquiera de las reivindicaciones 3 a 6, en la que los compuestos con fórmula I resultan útiles para el tratamiento de la psoriasis.

9. Composición farmacéutica de cualquiera de las reivindicaciones 3 a 6, en la que los compuestos con fórmula I resultan útiles para el tratamiento de la inflamación.

10. Composición farmacéutica de la reivindicación 7, en la que la quinasa proteínica es Lck, ADN-Pk, Pim-1 o Ck2.