ES2317579T3 - Productos aireados de ph bajo. - Google Patents
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Abstract
Una composición aireada que tiene un pH inferior a 5,5, cuya composición comprende al menos 0,001% en peso de hidrofobina.
Description
Productos aireados de pH bajo.
La presente invención se refiere a composiciones
aireadas de pH bajo, tales como productos alimenticios, que incluyen
hidrofobinas.
Una amplia diversidad de productos alimenticios
contienen gas introducido, tal como aire, nitrógeno y/o dióxido de
carbono. Típicamente, los productos alimenticios aireados tienden a
ser de un pH relativamente neutro, con un pH de aproximadamente 6,0
hasta 7,5. Los ejemplos de tales productos incluyen helados,
coberturas batidas y nata batida.
La mayoría de los productos alimenticios
comprenden proteínas y éstas son esenciales para la incorporación
de burbujas de aire y su posterior estabilidad. Sin embargo, las
proteínas lácteas en particular tienden a ser sensibles al pH. Es
decir, su carga, sus interacciones y su conformación, pueden
alterarse en función del pH. Esto afecta de manera adversa la
capacidad de formar espuma y la estabilidad resultante de las
espumas producidas usando proteínas, en particular para productos
aireados de pH 5,4 e inferior. Esto es porque tanto la actividad de
superficie como la solubilidad de muchas proteínas se reducen a
medida que desciende el pH. Por ejemplo, el caseinato de sodio
precipita a un pH de aproximadamente 4,6 hasta 4,8. Esto da como
resultado una baja incorporación de aire y la inestabilidad
resultante de los productos aireados.
Este hecho se ha descrito extensamente en la
bibliografía y la producción de espumas estables a pH bajo es un
problema conocido. Sin embargo, aunque existen rutas descritas en la
técnica que facilitan la formación de productos alimenticios
aireado a bajo pH, éstas tienden a tener limitaciones. Tales
limitaciones se solucionan por medio de la presente invención. Por
ejemplo, frecuentemente se adiciona gelatina como estabilizador, que
espesa el producto y también ayuda en la estabilidad del aire. La
mayoría de los productos de "crema aireada" se beneficia del
uso de la gelatina. Sin embargo, la gelatina es un estabilizador de
origen animal que muchos consumidores no consideran un ingrediente
adecuado. Además, el uso de gelatina usualmente significa que el
producto será "asentado", es decir, no fluirá. Esto significa
hay una limitación con relación al tipo de productos que pueden
producirse usando esta tecnología de formulación.
Otros procedimientos se benefician de otros
sistemas emulsivos químicos tales como ésteres de sacarosa y/o
variantes de mono-/di-glicéridos de ácidos grasos
saturados. Aunque estas tecnologías de formulación no basadas en
lácteos formarán productos aireables a pH bajo, con frecuencia se
necesitan cantidades significativas de emulsivo para obtener una
estabilidad prolongada (más de 3 semanas). Esto puede influir de
manera indeseable en el sabor y en la textura. Además, las
cantidades significativas de emulsivos químicos en los alimentos no
son aceptables para los consumidores.
Idealmente, un agente de aireado adecuado será
insensible al pH (en términos de su comportamiento de
espumabilidad), será funcional a concentraciones bajas, de manera
que no será evidente un impacto indeseable en el sabor ni en la
textura, y podrá usarse para formar alimentos aireados en los que la
espuma sea estable durante más de 3 semanas a baja temperatura o a
temperatura ambiente.
En la solicitud WO 06/010425 en trámite, del
solicitante, los inventores han identificado proteínas fúngicas,
denominadas hidrofobinas, que son muy eficaces para estabilizar
productos alimenticios aireados. Los inventores han encontrado
ahora sorprendentemente que pueden mezclarse bajas concentraciones
de proteína hidrofobina (<0,5% en peso) con ácidos para formar
disoluciones a pH bajo que pueden formar espuma fácilmente y que
formarán espumas a bajas temperaturas y a temperatura ambiente que
son estables durante más de 3 semanas. Como la hidrofobina no da
lugar a la gelificación de la fase continua o a texturas indeseadas
en la boca, esto significa que pueden prepararse espumas estables a
pH bajo independientemente de la reología de la fase continua. Por
consiguiente, los tipos de oportunidades de productos aireados son
amplios, por ejemplo, batidos ácidos aireados y bebidas de té
aireadas.
Estas oportunidades no están limitadas a
productos alimenticios sino que pueden aplicarse a otras
composiciones aireadas que tienen pH bajo.
Por consiguiente, la presente invención
proporciona una composición aireada que tiene un pH inferior a 5,5,
cuya composición comprende hidrofobina.
En una forma de realización, la hidrofobina está
en una forma sustancialmente aislada.
En una forma de realización de preferencia, la
hidrofobina está presente en una cantidad de al menos 0,001% en
peso, de más preferencia al menos 0,01% en peso.
De preferencia la hidrofobina es una hidrofobina
de clase II.
La presente invención proporciona también el uso
de una hidrofobina en un procedimiento para inhibir el engrosamiento
de las burbujas en una composición aireada que tiene un pH inferior
a 5,5.
En un aspecto relacionado la presente invención
proporciona un procedimiento para inhibir el engrosamiento de las
burbujas en una composición aireada que tiene un pH inferior a 5,5
cuyo procedimiento comprende añadir hidrofobina a la composición
antes y/o durante la aireación en la composición.
La presente invención también proporciona el uso
de una hidrofobina en un procedimiento para estabilizar una espuma
en una composición aireada que tiene un pH inferior a 5,5.
En un aspecto relacionado la presente invención
proporciona un procedimiento para estabilizar una espuma en una
composición aireada que tiene un pH inferior a 5,5 cuyo
procedimiento comprende añadir hidrofobina a la composición antes
y/o durante la aireación en la composición.
A menos que se defina de otra manera, todos los
términos técnicos y científicos usados en este documento tienen el
mismo significado que el usualmente reconocido por un experto en la
técnica (por ejemplo, en la fabricación, química y biotecnología de
confitería refrigerada/confitería congelada). Las definiciones y
descripciones de diversos términos y técnicas usados en la
fabricación de confitería refrigerada/congelada se encuentran en
Ice Cream, 4º Edición, Arbuckle (1986), Van Nostrand Reinhold
Company Nueva York, NY. Las técnicas convencionales usadas para los
procedimientos moleculares y bioquímicos pueden encontrarse en
Sambrook, y col., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3º ed.
(2001), Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor,
N.Y., y en Ausubel y col., Short Protocols in Molecular Biology,
(1999), 4º Ed., John Wiley & Sons, Inc., (y la versión completa
titulada Current Protocols in Molecular Biology).
Las hidrofobinas son una clase bien definida de
proteínas (Wessels, 1997, Adv. Microb. Physio. 38:
1-45; Wosten, Annu. Rev. Microbiol. 55:
625-646) capaces de autoensamblarse a una interfase
hidrófoba/hidrófila, y que tienen una secuencia conservada:
X_{n}-C-X_{5-9}-C-C-X_{11-39}-C-X_{8-23}-C-X_{5-9}-C-C-X_{6-18}-C-X_{m} | (SEC. ID Nº 1) |
en la que X representa cualquier
aminoácido, y n y m representan independientemente un número entero.
Típicamente, una hidrofobina tiene una longitud de hasta 125
aminoácidos. Los restos cisteína (C) en la secuencia conservada son
parte de puentes disulfuro. En el contexto de la presente invención,
el término hidrofobina tiene un significado más amplio para incluir
proteínas funcionalmente equivalentes que muestran aún la
característica de autoensamble en una interfase
hidrófoba-hidrófila que da como resultado una
película de proteína, tal como proteínas que comprenden la
secuencia:
X_{n}-C-X_{1-50}-C-X_{0-5}-C-X_{1-100}-C-X_{1-100}-C-X_{1-50}-C-X_{0-5}-C-X_{1-50}-C-X_{m} | (SEC. ID Nº 2) |
o partes de las mismas que muestren aún la
característica de autoensamble en una interfase
hidrófoba-hidrófila que da como resultado una
película de proteína. De acuerdo con la definición de la presente
invención, el autoensamble puede detectarse por medio de la
adsorción de la proteína a Teflón y usando el Dicroísmo Circular
para establecer la presencia de una estructura secundaria (en
general, una hélice \alpha) (De Vocht y col., 1998, Biophys. J.
74: 2059-68).
La formación de una película puede establecerse
incubando una lámina de Teflón en la disolución de proteína seguido
por al menos tres lavados con agua o tampón (Wosten y col., 1994,
Embo. J. 13: 5848-5854). La película de proteína
puede visualizarse por cualquier procedimiento adecuado, tal como
marcado con un marcador fluorescente o por medio del uso de
anticuerpos fluorescentes, tal como está bien establecido en la
técnica. m y n típicamente tienen valores que varían desde 0 hasta
2000, pero más usualmente m y n en total son inferiores a 100 ó 200.
La definición de hidrofobina en el contexto de la presente invención
incluye proteínas de fusión de una hidrofobina y otro polipéptido
así como conjugados de hidrofobina y otras moléculas tales como
polisacáridos.
Las hidrofobinas identificadas hasta la fecha se
clasifican generalmente como de clase I o de clase II. Ambos tipos
han sido identificados en hongos como proteínas secretadas que se
autoensamblan en interfases hidrófobas dentro de películas
anfipáticas. Los ensamblajes de hidrofobinas de clase I son
relativamente insolubles, mientras que los de hidrofobinas de clase
II se disuelven fácilmente en una diversidad de disolventes.
Se han identificado también proteínas análogas a
hidrofobinas en bacterias filamentosas, tales como
Actinomycete y Streptomyces sp. (documento WO
01/74864). Estas proteínas bacterianas, en contraste con las
hidrofobinas fúngicas, forman únicamente hasta un solo puente
disulfuro dado que tienen únicamente dos residuos cisteína. Tales
proteínas son un ejemplo de equivalentes funcionales a las
hidrofobinas que tienen las secuencias de consenso mostradas en las
SEC. ID Nº 1 y 2, y que están dentro del ámbito de la presente
invención.
Las hidrofobinas pueden obtenerse mediante
extracción a partir de fuentes nativas, tales como hongos
filamentosos, por medio de cualquier procedimiento adecuado. Por
ejemplo, las hidrofobinas pueden obtenerse mediante el cultivo de
hongos filamentosos que secretan la hidrofobina dentro del medio de
crecimiento o mediante extracción a partir de micelios fúngicos con
etanol al 60%. Resulta particularmente de preferencia aislar
hidrofobinas a partir de organismos huéspedes que secretan
hidrofobinas de manera natural. Los huéspedes de preferencia son
hifomicetos (por ejemplo Trichoderma), basidiomicetos y ascomicetos.
Los huéspedes particularmente de preferencia son organismos de
calidad alimenticia, tales como Cryphonectria parasitica, que
secreta una hidrofobina denominada criparina (MacCabe y Van Alfen,
1999, App. Environ. Microbiol 65: 5431-5435).
Como alternativa, las hidrofobinas pueden
obtenerse mediante el uso de tecnología recombinante. Por ejemplo,
pueden modificarse células huésped, típicamente microorganismos,
para expresar hidrofobinas y, a continuación, las hidrofobinas
pueden aislarse y usarse de acuerdo con la presente invención. Las
técnicas para introducir las construcciones de ácido nucleico que
codifican las hidrofobinas dentro de células huéspedes son bien
conocidas en la técnica. Se han clonado más de 34 genes que
codifican hidrofobinas, a partir de más de 16 especies fúngicas
(véase, por ejemplo, el documento WO 96/41882, que proporciona la
secuencia de hidrofobinas identificadas en Agaricus bisporus;
y Wosten, 2001, Annu Rev. Microbiol. 55: 625-646).
La tecnología recombinante puede usarse también para modificar
secuencias de hidrofobina o para sintetizar nuevas hidrofobinas que
tengan las propiedades deseadas/mejoradas.
Típicamente, una célula huésped u organismo
adecuado se transforma mediante una construcción de ácido nucleico
que codifica la hidrofobina deseada. La secuencia de nucleótidos que
codifica el polipéptido puede insertarse dentro de un vector de
expresión adecuado que codifica los elementos necesarios para la
transcripción y traducción y de una manera tal que se expresarán
bajo las condiciones adecuadas (por ejemplo, en la orientación
adecuada y el marco de lectura correcto y con las secuencias de
identificación y expresión adecuadas). Los procedimientos requeridos
para construir estos vectores de expresión son bien conocidos para
los expertos en la técnica.
Para expresar la secuencia que codifica el
polipéptido puede usarse una serie de sistemas de expresión. Estos
incluyen, pero no se limitan a, bacterias, hongos (incluidas
levaduras), sistemas de células de insectos, sistemas de cultivo de
células de plantas y plantas, todos ellos transformados con los
vectores de expresión adecuados. Los huéspedes de preferencia son
aquellos considerados como de calidad alimenticia - "generalmente
considerados como seguros" (GRAS).
Las especies fúngicas adecuadas, incluyen
levaduras tales como (pero no limitado a) las de los géneros
Saccharomyces, Kluyveromyces, Pichia,
Hansenula, Candida, Schizo saccharomyces
y similares, y especies filamentosas tales como (pero no limitado a)
las de los géneros Aspergillus, Trichoderma,
Mucor, Neurospora, Fusarium y similares.
Las secuencias que codifican las hidrofobinas
son de preferencia al menos 80% idénticas a nivel de aminoácidos a
una hidrofobina identificada en la naturaleza, de más preferencia al
menos 95% o 100% idénticas. Sin embargo, las personas expertas en la
técnica pueden hacer sustituciones conservadoras u otros cambios de
aminoácidos que no reduzcan la actividad biológica de la
hidrofobina. Para el objeto de la invención, estas hidrofobinas que
poseen este alto nivel de identidad con una hidrofobina que se
produce de manera natural, están también incluidas dentro del
término "hidrofobinas".
Las hidrofobinas pueden purificarse a partir de
medios de cultivo o de extractos celulares mediante, por ejemplo, el
procedimiento descrito en el documento WO 01/57076 que implica
adsorber de la hidrofobina presente en una disolución que contiene
hidrofobina a la superficie y, a continuación, poner en contacto la
superficie con un tensioactivo, tal como Tween 20, para eluir la
hidrofobina de la superficie. Véase también, Colle y col., 2002,
Biochim. Biophys Acta. 1569: 139-150; Calonje y
col., 2002, Can. J. Microbiol. 48: 1030-1034;
Askolin y col., 2001, Appl. Microbiol. Biotechnol. 57:
124-130; y De Vries y col., 1999, Eur. J. Biochem.
262: 377-385.
Por el término "composición de pH bajo", se
entiende cualquier composición en la que el pH de la fase acuosa es
inferior a 5,5 durante parte o toda la vida útil del producto. De
preferencia el pH es inferior a 5,4, 5,2 ó 5,0. Típicamente, el pH
es igual o superior a 1,0, de preferencia 3,0 o más, tal como 4,0 o
más. Típicamente, para un alimento aireado, un producto de pH bajo
podría exhibir un pH de desde 3,0 hasta 5,4.
El término "aireado" significa que se ha
incorporado gas intencionadamente dentro del producto, tal como por
medios mecánicos. El gas puede ser cualquier gas, pero resulta de
preferencia, en particular en el contexto de productos alimenticios,
un gas de calidad alimenticia tal como aire, nitrógeno o dióxido de
carbono. El grado de aireación se define típicamente en términos de
"esponjamiento". En el contexto de la presente invención, el %
de esponjamiento se define en términos de volumen como:
((volumen del
producto final aireado - volumen de la mezcla) / volumen de la
mezcla) x
100
La cantidad de esponjamiento presente en el
producto variará dependiendo de las características del producto
deseadas. Por ejemplo, el nivel de esponjamiento en un yogur
congelado es típicamente desde aproximadamente 70 hasta 100%, y en
productos de confitería tales como cremas aireadas el esponjamiento
puede ser tan elevado como del 200 hasta el 250% en peso. El nivel
de esponjamiento en algunos productos refrigerados, productos de
ambiente y productos calientes puede ser menor, pero generalmente
superior al 10%, por ejemplo el nivel de esponjamiento en batidos
lácteos es típicamente desde un 10 hasta un 40% en peso.
El nivel de esponjamiento en otros productos es
de preferencia desde 100 hasta 800%.
No es necesario que la espuma sea homogénea
dentro del producto. Sin embargo, en una forma de realización, la
espuma es sustancialmente homogénea.
Las composiciones aireadas de la invención
incluyen productos alimenticios aireados. Otras composiciones
incluyen aquellas donde se requiere la espuma dentro de una fase
continua de pH bajo que puede mantener su estabilidad durante todo
el tiempo necesario de uso del producto.
De preferencia, una composición aireada de la
invención retendrá al menos el 50% de su volumen de fase de aire
original, de más preferencia el 75%, durante un período de al menos
3 semanas (típicamente medido tras el almacenamiento a temperaturas
de refrigeración (ca. 5ºC)). El esponjamiento no tiene que
dispersarse de manera homogénea a través del producto.
De preferencia, el diámetro promedio de burbuja
en la composición no cambiará apreciablemente durante un período de
3 semanas (típicamente medido tras el almacenamiento a temperaturas
de refrigeración (ca. 5ºC)) del tamaño promedio cuando se preparó
inicialmente en el tiempo t=0. De preferencia, el diámetro promedio
relativo de burbuja (d_{r}) cambiará menos que un factor de 2,5
durante un período de 3 semanas, y de más preferencia menos que un
factor de 2. El diámetro relativo de burbuja (d_{r}) en el tiempo
= t es como se determina en los ejemplos a través de la
ecuación:
d_{r} =
\frac{d_{t}}{d_{0}}
Donde d_{0} es el diámetro
promedio inmediatamente después de la preparación, es decir t = 0, y
d_{t} es el diámetro promedio de burbuja en el tiempo =
t.
Un procedimiento adecuado para medir cambios en
el tamaño de burbuja y el volumen de espuma es usando una técnica de
dispersión de luz. El sistema de medición Turbiscan TLab
(Formulaction, Francia) puede usarse convenientemente, que analiza
tanto la luz retrodispersada como la luz transmitida de la muestra
aireada de interés.
La espuma a analizar está contenida dentro de
una celda de muestra cilíndrica (por ejemplo, con un diámetro de 25
mm, rellena con 20 ml de espuma). Se usa una fuente de luz de
longitud de onda \lambda = 880 nm para suministrar la luz
incidente, y dos sensores ópticos reciben la luz transmitida a
través de la muestra (180º de la luz incidente) y la luz
retrodispersada (45º de la luz incidente) de la muestra. En el modo
de barrido, los sensores ópticos exploran la altura del tubo
adquiriendo ambos datos, luz transmitida y retrodispersada, como
una función de la altura de la muestra y del tiempo. Por
consiguiente, el fenómeno de migración (tal como la formación de
crema) y los cambios en el tamaño de partícula (tal como el tamaño
de burbuja) pueden controlarse en el transcurso del tiempo. Pueden
encontrarse teorías relevantes y ejemplos del uso del sistema de
medición Turbiscan en: Mengual y col., Colloids and Surfaces A,
1999, 152, 112-123; Rouimi y col., Food
Hydrocolloids, 2005, 19, 467-478. También pueden
obtenerse notas sobre la aplicación e información útil de la página
web del fabricante: www.turbiscan.com.
Experimentalmente, los cambios de tamaño
promedio de burbuja se observan mejor por las variaciones en la
retrodispersión de la luz a través de un área de la muestra donde no
se presentan otros cambios (tales como el colapso de espuma o la
formación de crema de las burbujas). Aquí, se usaron las áreas
centrales de la espuma. El nivel de retrodispersión (BS) está
relacionado con el paso libre medio de transporte de fotones,
\lambda*, a través de la espuma por la relación:
BS =
\frac{1}{(\lambda
\text{*})^{1/2}}
\lambda* depende de la fracción
de volumen del gas, \phi, y el diámetro medio de burbuja d a
través
de:
\lambda
\text{*} = \frac{2d}{3\phi
(1-g)Q}
Q y g son ambos parámetros ópticos de la teoría
de Mie, donde Q es el factor de eficacia de dispersión y g es un
factor de asimetría. Para una espuma de volumen conocido de fracción
de aire, el cambio en el diámetro promedio de burbuja puede
controlarse en el transcurso del tiempo. Esto se calcula
automáticamente a través del programa informático de Turbiscan.
Los parámetros exactos de medición que pueden
usarse se establecen en los Ejemplos.
La estabilidad de la espuma (volumen de espuma
en función del tiempo) y la extensión de formación de crema pueden
también determinarse por medio de un procedimiento visual observando
estos fenómenos en muestras de espumas en cilindros de medición. La
formación de crema (por la flotabilidad de las burbujas de aire) es
un proceso que da lugar a separación de fase vertical en el
recipiente que da como resultado una gran proporción de burbujas
cerca de la superficie superior y la depleción de burbujas en la
parte inferior.
Los productos alimenticios aireados de la
invención típicamente están incluidos dentro de uno de cuatro grupos
- calientes, ambiente (es decir, productos almacenados y/o servidos
a temperatura ambiente sin necesidad de refrigeración/congelación),
refrigerados o congelados. El término "alimento" incluye
bebidas. Los productos alimenticios aireados refrigerados incluyen
batidos y té. Los productos alimenticios aireados congelados
incluyen productos de confitería congelados tales como yogur
congelado.
Los ácidos adecuados para uso en productos
alimenticios de pH bajo de la invención incluyen, pero no se limitan
a, ácido ascórbico, ácido cítrico, ácido láctico, ácido tartárico,
ácido carbónico, ácido succínico, ácido málico, ácido glucónico y
sus mezclas.
Los productos alimenticios pueden contener
opcionalmente otros ingredientes tales como uno o más de los
siguientes: otras proteínas tales como proteínas lácteas, ya sea
como ingredientes puros o como ingredientes líquidos, por ejemplo,
leche o crema; aceite o grasa, notablemente en la forma de una fase
emulsionada; azúcares; sales; colorantes y aromas; emulsivos
químicos, tales como monoglicéridos, té o café;
purés/extractos/zumos de frutas o vegetales; estabilizadores o
espesantes, tales como polisacáridos; conservantes; inclusiones,
tales como nueces, frutas, caramelos. De preferencia, los productos
alimenticios de la invención no contienen gelatina.
A continuación se presentan algunos ejemplos
particulares de formas de realización de la presente invención:
En una forma de realización, el producto es una
bebida aireada tal como un batido lácteo, un batido, una bebida
carbonatada, cerveza o té donde se requiere una espuma a pH bajo y
que mantiene la estabilidad a lo largo de la vida útil. En este
caso, el esponjamiento del producto aireado puede ser de entre 5 y
300%, y de mayor preferencia entre 10 y 200%. No es necesario que el
gas se disperse de manera homogénea en todo el producto.
En una segunda forma de realización, el producto
es un alimento firme aireado tal como una crema aireada, tarta de
queso, mermelada, coberturas o nata batida, donde se requiere una
espuma a pH bajo y que mantiene la estabilidad a lo largo de la vida
útil. En este caso, el esponjamiento de preferencia es de entre 50 y
400%.
En una tercera forma de realización, el producto
es un postre congelado aireado tal como un sorbete, crema helada o
yogur congelado, donde se requiere una espuma a pH bajo y que
mantiene la estabilidad a lo largo de la vida útil. El esponjamiento
de preferencia es de entre 50 y 300%.
De preferencia, el producto alimenticio aireado
es un producto de confitería aireado.
La cantidad de hidrofobina presente en el
producto variará generalmente dependiendo de la formulación del
producto y del volumen de la fase de aire. Típicamente, el producto
contendrá al menos 0,001% en peso de hidrofobina, de más preferencia
al menos 0,005 ó 0,01% en peso. Típicamente el producto contendrá
menos de 1% en peso de hidrofobina. La hidrofobina puede ser de una
fuente única o de una pluralidad de fuentes, por ejemplo la
hidrofobina puede ser una mezcla de dos o más polipéptidos de
hidrofobina diferentes.
De preferencia la hidrofobina es una hidrofobina
de clase II.
La presente invención también abarca
composiciones para producir un producto alimenticio aireado de la
invención, cuya composición comprende una hidrofobina. Tales
composiciones incluyen premezclas líquidas, por ejemplo premezclas
usadas en la producción de productos de confitería congelados, y
mezclas secas, por ejemplo polvos, a los que se añade un líquido
acuoso tal como leche o agua, antes o durante la aireación.
Las composiciones para producir un producto
alimenticio aireado de la invención, comprenderán otros
ingredientes, además de la hidrofobina, que normalmente se incluyen
en el producto alimenticio, por ejemplo, azúcar, grasa, emulsivos,
aromatizantes, etc.. Las composiciones pueden incluir todos los
ingredientes restantes requeridos para obtener el producto
alimenticio tal que la composición pueda procesarse fácilmente, es
decir aireada, para formar un producto alimenticio aireado de la
invención.
Las composiciones secas para producir un
producto alimenticio aireado de la invención también comprenderán
otros ingredientes, además de la hidrofobina, que se incluyen
normalmente en el producto alimenticio, por ejemplo, azúcar, grasa,
emulsivos, aromatizantes, etc. Las composiciones pueden incluir
todos los ingredientes no líquidos restantes requeridos para obtener
el producto alimenticio tal que el usuario necesite únicamente
añadir un líquido acuoso, tal como agua o leche y la composición
esté lista para procesarse para formar un producto alimenticio
aireado de la invención. Estas composiciones secas, cuyos ejemplos
incluyen polvos y gránulos, pueden diseñarse tanto para uso
industrial como para uso al por menor, y pueden beneficiarse de una
masa reducida y una caducidad más prolongada.
Las composiciones para producir un producto
alimenticio aireado de la invención tendrán típicamente un pH
inferior a 5,5, o en el caso de composiciones secas, formarán una
composición que tendrá un pH inferior a 5,5 cuando se añada agua o
leche para reconstituir el producto a su forma final usual.
La hidrofobina se añade en una forma y en una
cantidad tal que esté disponible para estabilizar la fase de aire.
Por el término "añadida", se entiende que la hidrofobina se
introduce deliberadamente dentro del producto con el objeto de
aprovechar sus propiedades estabilizadoras de espuma. Por
consiguiente, donde están presentes o se añaden ingredientes que
contienen contaminantes fúngicos, que pueden contener polipéptidos
de hidrofobina, esto no constituye la adición de hidrofobina dentro
del contexto de la presente invención.
Típicamente, la hidrofobina se añade al producto
en una forma tal que es capaz de autoensamblarse en una superficie
aire-líquido.
Típicamente, la hidrofobina se añade a los
productos o composiciones de la invención en una forma aislada,
típicamente al menos parcialmente purificada, tal como al menos 10%
pura, en base al peso de los sólidos. Por "añadida en forma
aislada", los autores dan a entender que la hidrofobina no se
añade como parte de un organismo que se presenta de manera natural,
tal como un champiñón, que expresa hidrofobinas de manera natural.
En su lugar, la hidrofobina típicamente se habrá extraído de una
fuente que se presenta de manera natural o bien se obtendrá mediante
la expresión recombinante en un organismo huésped.
En una forma de realización, la hidrofobina se
añade al producto en forma de monómero, dímero y/u oligómero (es
decir constituida por 10 unidades monómericas o menos). De
preferencia, al menos el 50% en peso de la hidrofobina añadida está
en al menos una de estas formas, de más preferencia al menos 75, 80,
85 ó 90% en peso. Una vez añadida, la hidrofobina típicamente
experimentará el ensamble en la interfase aire/líquido y, por
consiguiente, sería de esperar la disminución de la cantidad de
monómero, dímero y oligómero.
En una forma de realización, la hidrofobina se
añade a las composiciones aireadas de la invención en una forma
asilada, típicamente al menos parcialmente purificada.
La hidrofobina añadida puede usarse para
estabilizar la fase de aire en una composición aireada, generalmente
al inhibir el engrosamiento de la burbuja, es decir, se ha
encontrado que las hidrofobinas no solamente estabilizan el volumen
de espuma sino también el tamaño de las burbujas dentro de la
espuma.
La presente invención se describirá ahora además
con referencia a los siguientes ejemplos que son sólo ilustrativos y
no limitantes.
Figura 1: Diámetro promedio de las burbujas con
relación a las del tiempo t=0 como una función del tiempo.
Figura 2: Espumas creadas usando HFBII al 0,1% y
xantano al 0,5% a pH 3,5 y 5,2 (izquierda y derecha,
respectivamente) y almacenadas a 5ºC durante 3 semanas. Tras este
período de tiempo, no se produjo pérdida de volumen de la espuma ni
crecimiento visible de las burbujas.
Figura 3: Espumas creadas a pH 3,5 que contienen
xantano al 0,5% y (izquierda) HFBII al 0,1% - 3 semanas de
almacenamiento, (centro) LACTEM al 1,5% - 2 semanas de
almacenamiento, y (derecha) hyfoama al 0,5% - 3 semanas de
almacenamiento. Todas almacenadas a 5ºC.
Figura 4: Foto de primer plano de espumas
creadas a pH 3,5 que contienen xantano al 0,5% y (izquierda) HFBII
al 0,1% - 3 semanas de almacenamiento, (derecha) LACTEM al 1,5% - 2
semanas de almacenamiento. Nótese que el ejemplo con HFBII muestra
una espuma donde las burbujas no son visibles mientras que la espuma
con LACTEM muestra burbujas visibles que han crecido durante el
almacenamiento.
Figura 5: Diámetro promedio de las burbujas con
relación a las del tiempo t=0 como una función del tiempo para
espuma que contiene té verde.
Figura 6: Imágenes de SEM de la microestructura
de sorbetes creados usando hygel al 0,2% y HFBII al 0,1%, frescos y
tras almacenamiento a temperatura baja.
Figura 7: Imágenes de SEM de mayor aumento de la
microestructura de sorbetes creados usando hygel al 0,2% y HFBII al
0,1%, tras almacenamiento a temperatura baja.
Figura 8: Fotografías de sorbetes creados usando
hygel al 0,2% y HFBII al 0,1% tras someterlos 2 semanas a
almacenamiento a temperatura baja.
Figura 9: Fotografías de un producto de batido
de fruta aireado que contiene HFBII al 0,1% y xantano al 0,41% de
preparación reciente (izquierda) y tras 3 semanas de almacenamiento
a 5ºC (derecha) que muestra ligera formación de crema o crecimiento
de burbujas.
Figura 10: Fotografías de un producto de
vinagreta aireado que contiene HFBII al 0,1% y xantano al 0,25% de
preparación reciente (izquierda) y tras 3 semanas de almacenamiento
a 5ºC (derecha) que muestra ligera formación de crema o crecimiento
de burbujas.
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Se prepararon productos aireados que comprenden
disoluciones que contienen un ácido, goma de xantano y uno de tres
agentes de aireado (A-C) que se presentan a
continuación.
A: Hyfoama DS
B: Éster de ácido láctico de monoglicérido
(Grinsted Lactem P 22, LACTEM)
C: Hidrofobina (HFBII) de Trichoderma
reesei (HFBII se obtuvo de VTT Biotechnology, Finlandia,
purificada de Trichoderma reesei esencialmente como se
describe en el documento WO00/58342 y en Linder y col., 2001,
Biomacromolecules 2: 511-517).
Los detalles de los materiales usados se resumen
en la Tabla 1 y las formulaciones a partir de las cuales se preparó
cada una de las muestras de espuma se muestran en la Tabla 2
(Mezclas A a C).
Se añadió xantano a cada mezcla para evitar la
formación de crema de la espuma. Esto permite el análisis completo
del tamaño de burbujas como una función del tiempo sin la
complicación de otros factores desestabilizadores tales como la
formación de crema. En otras palabras, se está midiendo la
estabilidad de las espumas para los mecanismos desestabilizadores
tales como la desproporción y la coalescencia.
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Para la Mezcla A se combinaron las proteínas y
la goma de xantano y se añadió lentamente la mezcla en agua agitada
a temperatura ambiente. Posteriormente se calentaron las
disoluciones hasta 40ºC para asegurar la disolución adecuada de las
proteínas, con un tiempo de mezclado total de 30 minutos. Las
mezclas se enfriaron y se almacenaron a 5ºC hasta otro uso.
Para la Mezcla B se dispersaron Lactem y xantano
en agua agitada a temperatura ambiente. Posteriormente se calentó
esta dispersión hasta 60ºC para asegurar la adecuada dispersión del
Lactem, con un tiempo de mezclado total de 30 minutos. Las mezclas
se enfriaron y se almacenaron a 5ºC hasta otro uso.
Para la Mezcla C se añadió el xantano lentamente
a agua fría con agitación y se agitó durante al menos 30 minutos
para asegurar la completa hidratación del polímero. A continuación,
se añadió la concentración requerida de HFBII como una alícuota.
Posteriormente se sometió la disolución a sonicación en un baño
sónico durante 30 segundos para disolver completamente la HFBII. La
mezcla se enfrió y se almacenó a 5ºC hasta otro uso.
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Antes de la aireación se acidificaron las
muestras hasta el pH deseado de 5,4 ó 3,5 usando una disolución de
ácido cítrico al 10%. Éstas se resumen en la Tabla 3.
Se cizallaron 80 ml de la mezcla acidificada
usando un aparato de contenedor agitado durante un espacio de tiempo
determinado correspondiente con la obtención de un 100% de
esponjamiento. Este equipo está constituido por un recipiente de
acero inoxidable encamisado, montado verticalmente, cilíndrico con
proporciones internas de 105 mm de altura y 72 mm de diámetro.
El rotor usado para cizallar la muestra está
constituido por un impulsor rectangular de las proporciones
correctas para raspar la superficie interna del contenedor al girar
(dimensiones: 72 mm x 41,5 mm). Además, unidas al rotor existen dos
cuchillas semicirculares de alto cizallado (60 mm de diámetro)
posicionadas a un ángulo de 45º con respecto a la unión rectangular.
La velocidad fue de 1200 rpm y el recipiente de acero que contiene
el rotor se enfrió hasta 5ºC durante la aireación.
Tras la aireación, las muestras se almacenaron a
5ºC en viales Turbiscan o en cilindros de medición de 100 ml antes
de otro análisis.
Se midió la estabilidad de la espuma y de las
burbujas en la misma usando el Turbiscan TLab, cuyos detalles de
operación se analizaron anteriormente. Esto permite la determinación
de lo siguiente como una función del tiempo: (1) El volumen de
espuma (es decir, medición de la pérdida total de fase de aire). (2)
El tamaño promedio de las burbujas.
La espuma producida se dosificó en un tubo de
muestra de vidrio Turbiscan hasta una altura de aproximadamente 42
mm, correspondiente a aproximadamente 20 ml de espuma. A
continuación, el equipo explora y mide tanto la luz retrodispersada
como la transmitida entre la altura de 2 y 55 mm. Las mediciones se
realizaron durante un período de varias semanas, dependiendo de la
estabilidad de la espuma. Como los datos se recogen a través de toda
la altura de la muestra, a partir de esto, los valores medios de los
perfiles de retrodispersión entre límites definidos (altura inferior
y superior) dan información específica con respecto a los cambios en
la muestra en ese área, por ejemplo el tamaño de burbuja.
Tamaño de burbuja: A partir de los datos de
retrodispersión medidos entre 20 y 30 mm, se calculó el tamaño
promedio de burbuja automáticamente a partir de la luz
retrodispersada. Se tomaron como índices refractivos los del agua y
del aire. La fracción de volumen de la fase de aire de la espuma fue
0,5 (equivalente a 100% de esponjamiento). Aunque la fracción de
volumen de la fase de aire de la espuma puede cambiar con el tiempo,
particularmente si no es estable y tiene lugar la formación de
crema, se encontró al tomar mediciones entre las alturas de la
muestra de 20 y 30 mm se obtuvieron datos de tamaño fiables a menos
que la espuma fuera inestable. Si la espuma era muy inestable,
entonces era necesario tratar los datos de tamaño con precaución en
un sentido cuantitativo pero podían compararse con los de otras
espumas.
En la Figura 1 se muestra el tamaño promedio de
burbuja (con relación al medido en t = 0 minutos) medido para cada
una de las mezclas espumadas en función del tiempo. Tanto a pH 3,5
como 5,2, HFBII forma una espuma en la que las burbujas permanecen
mucho más estables que las espumas aireadas usando Hyfoama o Lactem.
La espuma estabilizada por HFBII permaneció estable durante más de 3
semanas.
Además de significativo crecimiento de burbuja,
las espumas creadas usando Hyfoama y Lactem colapsaron (perdieron
volumen de fase de aire) en etapas tardías de su corta vida útil. En
el caso de HFBII, no se perdió volumen de fase de aire medido del
producto.
Las Figuras 2 y 3 muestran imágenes de espumas
creadas usando HFBII, Lactem o Hyfoama como agente de incorporación
de aire. La Figura 2 demuestra claramente que la espuma creada
usando HFBII es muy estable tanto a pH 3,5 como a pH 5,4. Incluso
tras 3 semanas de almacenamiento, no se observó colapso de la espuma
ni crecimiento visible de burbuja.
Las Figuras 3 y 4 demuestran nuevamente la
estabilidad de la espuma creada usando HFBII. La espuma producida
usando Lactem a pH 3,4 muestra estabilidad razonable en términos de
retención de volumen de la fase de aire, pero resulta claro que se
ha producido significativo crecimiento de burbuja, como puede
observarse en la foto de primer plano en la Figura 4 que muestra
burbujas de aire visibles. En el caso de Hyfoama, se ha producido
significativo crecimiento de burbuja, pero también se ha perdido
volumen de la fase de aire.
Por consiguiente, resulta claro que la
hidrofobina puede usarse para formar espumas muy estables en
presencia de ácidos. Estas espumas retienen su volumen de fase de
aire durante un período de 3 semanas refrigeradas, y el tamaño de
burbuja no cambia significativamente durante ese tiempo.
Se preparó una mezcla que contenía extracto de
té de la siguiente formulación. HFBII al 0,1%, xantano al 0,5%,
polvo de té verde al 0,16%, y el agua restante. La mezcla se preparó
de la siguiente manera: Se añadió el xantano y el polvo de té verde
lentamente al agua fría con agitación y se agitó durante al menos 30
minutos para asegurar que la hidratación completa del polímero. A
continuación, se añadió la concentración requerida de HFB II como
una alícuota. Posteriormente se sonicó ligeramente la disolución en
un baño sónico durante 30 segundos para disolver totalmente la HFB
II. Se enfrió la mezcla y se almacenó a 5ºC hasta uso posterior.
Antes de la incorporación de aire se acidificó
la disolución hasta el pH deseado de 5,4 usando una disolución de
ácido cítrico al 10% en peso. Posteriormente se incorporó aire a la
mezcla hasta el 100% de esponjamiento usando el contenedor agitado
de la misma manera como se describió para las mezclas en el Ejemplo
1. A continuación se almacenó la mezcla aireada a 5ºC y se realizó
el análisis de tamaño de burbuja y volumen de espuma en función del
tiempo usando el Turbiscan con la misma configuración experimental
descrita en el Ejemplo 1.
En la Figura 5 se muestra la estabilidad de la
espuma en términos de diámetro promedio de burbuja. Claramente,
durante un período de tiempo existe un cambio mínimo en el tamaño de
burbuja que indica que las burbujas son estables frente al cambio
significativo. Además, el volumen total de espuma permaneció
constante durante este período de tiempo.
Se produjeron dos sorbetes usando los
ingredientes que se presentan en la Tabla 4. El Producto J se obtuvo
usando la formulación de la Mezcla J, descrita en la Tabla 5. El
agente estabilizador de aire en este producto era un agente de
incorporación de aire disponible comercialmente llamado Hygel, una
proteína hidrolizada de leche. El Producto K se obtuvo usando la
formulación mostrada para la Mezcla K. La proteína estabilizadora de
aire en este producto era hidrofobina, HFBII.
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Para la Mezcla J se añadieron todos los
ingredientes al agua fría, se dispersaron usando un agitador
magnético y se calentó hasta 80ºC con mezclado continuo. La
disolución se enfrió rápidamente hasta 5ºC usando un baño de
enfriamiento a -18ºC. Para la Mezcla K, que comprende hidrofobina,
se siguió el mismo procedimiento excepto que se añadió la HFB II a
la disolución fría como una alícuota. Las mezclas se almacenaron a
5ºC antes de otro procesamiento. La medición del pH de la mezcla sin
airear fue de pH 4.
Se transfirieron 80 ml de mezcla fría al
contenedor agitado (descrito en el Ejemplo 1) para airear y
congelar. La congelación se alcanzó haciendo circular refrigerante a
través de la camisa que rodea el contenedor agitado. La mezcla se
aireó y se congeló para producir un producto de sorbete usando el
siguiente régimen de cizallado y temperatura: 100 rpm durante 1
minuto, encendido de la circulación de refrigerante (a -18ºC), a
continuación 1000 rpm durante 2 minutos, posteriormente 300 rpm
hasta que el torque alcanzó 1 Nm (esto se produjo a una temperatura
del producto de -5ºC). Se recogieron los sorbetes en recipientes
adecuados que se habían enfriado hasta -20ºC. Se midió el
esponjamiento del Producto J que resultó de 113% y el esponjamiento
del Producto K fue de 101%.
Los productos de sorbete se almacenaron
posteriormente bajo dos regímenes de temperatura:
(a) Las muestras "recientes" se almacenaron
a -80ºC hasta su análisis (aproximadamente 1 semana). A -80ºC no se
presentaron cambios estructurales, de manera que la microestructura
es esencialmente la misma que para una muestra reciente.
(b) Las muestras "almacenadas a temperatura
baja" se almacenaron a -10ºC durante 1 semana. Algunas muestras
se almacenaron también durante otra semana a -10ºC.
Tras el almacenamiento, los productos se
analizaron por medio de Microscopía Electrónica de Barrido (SEM) así
como por medio de inspección visual de la calidad general del
producto.
La microestructura de cada producto se visualizó
usando Microscopia Electrónica de Barrido (SEM) de Baja Temperatura.
Para preparar las muestras para microscopía, se enfrió la muestra a
-80ºC sobre hielo seco y se cortó una sección. Esta sección, de
aproximadamente 6 mm x 6 mm x 10 mm de tamaño, se montó en un
soporte de muestras usando un compuesto Tissue Tek: OCT^{TM} (11%
de PVA, 5% de Carbowax y 85% de componentes no reactivos). La
muestra, incluido el soporte, se sumergió dentro del aguanieve de
nitrógeno líquido y se transfirió a una cámara de preparación de
baja temperatura (Oxford Instrument CT 1500HF) mantenida bajo vacío
de, aproximadamente, 10^{-4} milibares. La muestra se fracturó
dentro de la cámara usando una hoja de bisturí. La muestra se
calentó posteriormente hasta -90ºC durante aproximadamente 60 a 90
segundos para provocar la lenta sublimación del hielo para revelar
detalles de la superficie. A continuación la muestra se enfrió hasta
-110ºC para finalizar la sublimación. La muestra se recubrió a
continuación con oro usando plasma de argón. Este procedimiento
también se llevó a cabo bajo vacío con una presión aplicada de
10^{-1} milibares y una corriente de 6 miliamperios durante 45
segundos. A continuación se transfirió la muestra a un Microscopio
Electrónico de Barrido convencional (JSM 5600), provisto de un
portaobjetos frío de Oxford Instruments a una temperatura de -150ºC.
La muestra se examinó y las áreas de interés se capturaron mediante
un programa informático de adquisición de imágenes digitales.
La Figura 6 muestra imágenes de SEM de las
microestructuras de: (izquierda) producto J, el producto
comparativo; y (derecha) producto K, según la invención. Las
imágenes superiores muestran los productos recientes y las
inferiores muestran los productos almacenados a temperatura
baja.
Los productos recientes tienen microestructuras
similares con burbujas de aire pequeñas, esféricas. Sin embargo,
tras almacenar a temperatura baja el producto comparativo J muestra
grandes canales de aire y muy pocas celdas de aire diferenciadas,
indicando que ha tenido lugar importante coalescencia de burbujas.
El producto K según la invención (es decir, que contiene
hidrofobina) muestra mucho menos coalescencia y formación de canales
de la fase de aire y retiene un mayor número de burbujas pequeñas
diferenciadas.
La Figura 7 muestra la microestructura de las
muestras sometidas a exceso de temperatura a un aumento mayor. El
Sorbete K muestra la presencia de pequeñas burbujas de aire (con un
diámetro inferior a 100 \mum) donde el Sorbete J no las
presenta.
La Figura 8 muestra una fotografía de un
producto de sorbete comparativo (J) y el producto de sorbete que
comprende hidrofobina (K) tras el almacenamiento a temperatura baja
durante 2 semanas. El Sorbete J es más oscuro que el Sorbete K por
el aumento en el tamaño de burbuja en la muestra. Además, el Sorbete
J ha disminuido en volumen por pérdida de aire, donde el Sorbete K
no lo ha hecho.
De estas imágenes resulta evidente que un
sorbete de pH bajo que contiene hidrofobina (K) tiene una fase de
aire sustancialmente más estable que un sorbete comparativo (J) que
contiene una proteína de leche estabilizadora de aire
convencional.
Se preparó un batido de frutas aireado usando
una bebida Vie Shots^{TM}, producida por Unilever RU como una base
de puré de frutas. El Vie Shot^{TM} contenía: puré de plátano
(28%), concentrado de zumo de naranja (26%), concentrado de zumo de
zanahoria (23%), concentrado de zumo de calabaza (14%), pulpa de
naranja (4%), concentrado de zumo de limón, concentrado de acerola
(1,5%) y pectina de manzana. La medición del pH (a temperatura
ambiente) fue de pH 4,17. Se añadió goma de xantano lentamente al
puré de frutas con agitación, hasta una concentración de 0,5% en
peso. Esto se mezcló a continuación durante 20 minutos para permitir
la completa hidratación de la goma de xantano. Se incorporó aire a
un volumen conocido de una disolución de hidrofobina al 0,5% en peso
hasta el 400% de esponjamiento usando un dispositivo
aerolatte^{TM} manual. Esto se añadió al puré de frutas para dar
un producto de batido de frutas aireado con esponjamiento de
aproximadamente 100%, una concentración total de hidrofobina de
0,1% en peso y una concentración total de xantano de aproximadamente
0,41% en peso. El producto de batido de frutas aireado se almacenó a
continuación a 5ºC y se controló su estabilidad durante un período
de tres semanas. La Figura 9 muestra que tras 3 semanas el producto
de batido de frutas aireado mantuvo una fase de aire estable y que
no se presentó significativo crecimiento de burbuja ni formación de
crema.
Se preparó un aliño aireado usando Vinagreta
Light Hellman's^{TM} como base. La base contenía: agua, vinagre de
alcohol, azúcar, almidón de patata modificado, ajo, sal, pimienta
roja, conservante, perejil, pimienta negra, tomillo y colorante. La
medición del pH (a temperatura ambiente) fue de pH 3,58. Se añadió
lentamente goma de xantano a la vinagreta con agitación, hasta una
concentración de 0,3% en peso. A continuación se mezcló durante 20
minutos para permitir la hidratación completa de la goma de xantano.
Se incorporó aire a un volumen conocido de una disolución de
hidrofobina al 0,5% en peso hasta el 400% de esponjamiento usando un
dispositivo aerolatte^{TM} manual. Esto se añadió al aliño de
vinagreta para dar un producto de aliño de vinagreta aireado con
esponjamiento de aproximadamente 100%, una concentración total de
hidrofobina de 0,1% en peso y una concentración total de xantano de
aproximadamente 0,25% en peso. El producto se almacenó a
continuación a 5ºC y se controló su estabilidad durante un período
de tres semanas. La Figura 10 muestra que tras 3 semanas no hubo
significativo colapso de espuma ni crecimiento de burbuja. Tampoco
hubo aumento significativo de formación de crema. Por consiguiente,
la hidrofobina es capaz de estabilizar una espuma de manera adecuada
en un aliño de pH bajo para verter durante al menos 3 semanas.
Las diversas características y formas de
realización de la presente invención, a las que se hace referencia
en secciones individuales anteriormente se aplican, según resulte
adecuado, a otras secciones, mutatis mutandis. Por
consiguiente, las características especificadas en una sección
pueden combinarse con las características especificadas en otras
secciones, según resulte adecuado.
Todas las publicaciones mencionadas en la
memoria descriptiva anterior se incorporan en este documento por
referencia. Diversas modificaciones y variaciones de los
procedimientos y productos descritos serán evidentes para los
expertos en la técnica sin apartarse del ámbito de la invención.
Aunque la invención se ha descrito en conexión con formas de
realización de preferencia específicas, debe entenderse que la
invención según se reivindica no debe limitarse excesivamente a
tales formas de realización específicas. Por cierto, se pretende que
diversas modificaciones de los modos descritos para llevar a cabo la
invención, que resultan evidentes para los expertos en la técnica en
los campos relevantes, estén dentro del alcance de las siguientes
reivindicaciones.
Claims (10)
1. Una composición aireada que tiene un pH
inferior a 5,5, cuya composición comprende al menos 0,001% en peso
de hidrofobina.
2. Una composición aireada según la
reivindicación 1 que comprende menos de 1% en peso de
hidrofobina.
3. Una composición aireada según la
reivindicación 1 o reivindicación 2 en la que la hidrofobina está en
forma aislada.
4. Una composición aireada según una cualquiera
de las reivindicaciones 1 a 3 en la que la hidrofobina es una
hidrofobina de clase II.
5. Una composición aireada según una cualquiera
de las reivindicaciones precedentes que es un producto alimenticio
aireado.
6. Un producto alimenticio aireado según la
reivindicación 5 que es un producto alimenticio refrigerado.
7. Una composición aireada según una cualquiera
de las reivindicaciones precedentes que tiene un pH de 3,0 a
5,4.
8. Una composición aireada según una cualquiera
de las reivindicaciones precedentes que tiene un pH de 3,0 a
5,0.
9. El uso de una hidrofobina en un procedimiento
para inhibir el engrosamiento de las burbujas en una composición
aireada que tiene un pH inferior a 5,5.
10. El uso de una hidrofobina en un
procedimiento para estabilizar una espuma en una composición aireada
que tiene un pH inferior a 5,5.
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