ES2305096T3 - Composicion farmaceutico que comprende un peptido analgesico. - Google Patents
Composicion farmaceutico que comprende un peptido analgesico. Download PDFInfo
- Publication number
- ES2305096T3 ES2305096T3 ES01958334T ES01958334T ES2305096T3 ES 2305096 T3 ES2305096 T3 ES 2305096T3 ES 01958334 T ES01958334 T ES 01958334T ES 01958334 T ES01958334 T ES 01958334T ES 2305096 T3 ES2305096 T3 ES 2305096T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- peptide
- trp
- amino acid
- asn
- pglu
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/08—Tripeptides
- C07K5/0821—Tripeptides with the first amino acid being heterocyclic, e.g. His, Pro, Trp
- C07K5/0825—Tripeptides with the first amino acid being heterocyclic, e.g. His, Pro, Trp and Glp-amino acid; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
- A61P29/02—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID] without antiinflammatory effect
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/10—Tetrapeptides
- C07K5/1024—Tetrapeptides with the first amino acid being heterocyclic
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Neurology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Una composición farmacéutica para administración tópica que comprende una cantidad analgésica eficaz de un péptido que comprende aminoácidos L de fórmula (I): pGLU - X - Y - Z (I) en donde X es un aminoácido seleccionado del grupo que consiste en GLY, VAL, GLU, ASP, SER, ALA, ASN, GLN, ILE, LEU, PRO, LYS y ARG, Y es TRP o THR, y Z es cualquier aminoácido L, o Z es cero, y en donde cuando Z es cualquier aminoácido L, uno de Y y Z, pero no ambos, es TRP, y cuando Z es cero, Y=TRP, o una cantidad analgésica eficaz de un derivado de péptido en el que se une un grupo alquilo a un aminoácido de dicho péptido, en donde dicho alquilo se selecciona del grupo que consiste en C4-C30. y un excipiente farmacéuticamente aceptable.
Description
Composición farmacéutica que comprende un
péptido analgésico.
La invención se refiere a péptidos analgésicos y
a sus derivados.
Aunque el dolor es una respuesta fisiológica de
crucial importancia, también genera un sufrimiento y una agonía
innecesarios. El control y el alivio del dolor es una rama
importante de la medicina. El dolor puede surgir como resultado de
una enfermedad o como resultado de un tratamiento médico tal como la
quimioterapia. En cualquier caso, es importante aliviar el dolor
tanto como sea posible para permitir que el paciente desarrolle su
actividad con normalidad.
En el cuerpo actúan simultáneamente dos
mecanismos neuronales relacionados con el dolor: (1) un mecanismo
sensorial que siente el daño en un tejido y que como consecuencia
produce una sensación de dolor; (2) un mecanismo anestésico que
reduce la sensación de dolor y evita el flujo de información de
dolor hacia el sistema nervioso central (SNC), permitiendo con ello
que el organismo mantenga su actividad normal a pesar de sufrir una
lesión. La anestesia puede realizarse mediante el uso de un fármaco
que inhibe los nervios periféricos que actúan como sensores del
dolor o mediante un potenciamiento del sistema analgésico natural.
Puesto que existen diferentes mecanismos, éstos se ven afectados
por diferentes sustancias. Por ejemplo, la aspirina y la lidocaína
son activas en el mecanismo sensorial periférico, mientras que la
morfina y las sustancias relacionadas son activas en el sistema
analgésico.
Los analgésicos más eficaces actualmente en uso
son las sustancias relacionadas con la morfina de origen opiáceo.
Es bien conocido que el cerebro sintetiza una serie de opiáceos
endógenos, y esto explica el poderoso efecto de dichas sustancias.
Su acción sobre las neuronas está mediada por receptores
especializados. Las señales reguladas por dichos receptores
previenen el flujo de información entre las neuronas de dolor
periférico y el SNC. Estas neuronas del SNC también son sensibles a
una serie de otras sustancias químicas que incluyen las
catecolaminas (serotonina, noradrenalina, etc.), péptidos
neuroactivos (neurotensina), y aminoácidos inhibidores (glicina y
GABA).
La Patente de EE.UU. Nº 4.619.916, a nombre de
Di Stazio, describe 13 nuevos tripéptidos de fórmula
pGLU-X-TRP, en donde pGLU es ácido
glutámico ciclado (ácido piroglutámico) y X puede ser GLY, VAL, GLU,
ASP, SER, ALA, ASN, GLN, ILE, LEU, PRO, LYS y ARG. También se
describe un proceso para su preparación, formulaciones farmacéuticas
que los contienen para administración oral o parenteral, y su uso
como agentes hipotensivos y analgésicos. Además se describen
ésteres de alquilos inferiores del residuo triptófano, en particular
ésteres de metilo y de etilo, para su uso como grupos protectores
en la producción de los péptidos. Los grupos protectores se
eliminan al finalizar el proceso de síntesis. No hay ninguna
descripción de una formulación tópica.
El documento WO 92/19254 describe mono, di, tri,
tetra y pentapéptidos \alpha-sustituidos que son
útiles en el tratamiento de la obesidad, de la ansiedad, de las
úlceras gastrointestinales, del dolor, de la apoplejía y de la
inflamación. No se describen péptidos de fórmula
pGLU-X-TRP.
Los siguientes tetrapéptidos de fórmula
pGLU-X-TRP-Z
aparecen en bibliografía:
X = L-Ala; Z =
L-LeuOH, L-LeuOCH_{3},
L-LeuNH_{2}, L-MetOH,
L-MetOCH_{3}, o L-MetNH_{2} (DE
3.340.208);
X = Lys; Z = L-AlaOH o
L-ProOH (Freer, R.J. y Stewart, J.M. (1971) Cienc.
Cult. 23 (4): 539-42; Francis, B. y Kaiser, I.I.
(1993) Toxicon 31 (7): 339-899);
X = L-Pro; Z =
L-ValNH_{2}, L-MetOH,
L-MetOCH_{3}, L-MetNH_{2},
L-MetsulfóxidoOH,
L-MetsulfóxidoOCH_{3}, o
L-MetsulfóxidoNH_{2} (DE 3.340.208).
El documento
EP-A-O 148 133 describe compuestos
tripéptidos que contienen ácido piroglutámico y triptófano, un
proceso para su producción y su aplicación terapéutica.
Un objetivo de la presente invención es
proporcionar una composición farmacéutica analgésica para su
administración tópica.
Otro objetivo de la invención es proporcionar
nuevos derivados peptídicos.
En un primer aspecto, la presente invención
proporciona una composición farmacéutica para administración tópica
que comprende una cantidad analgésica eficaz de un péptido que
comprende aminoácidos L de fórmula (I):
(I)pGLU-X-Y-Z
en
donde
X es un aminoácido seleccionado del grupo que
consiste en GLY, VAL, GLU, ASP, SER, ALA, ASN, GLN, ILE, LEU, PRO,
LYS y ARG,
Y es TRP o THR,
y Z es cualquier aminoácido L, o Z es cero,
y en donde cuando Z es cualquier aminoácido L,
uno de Y y Z, pero no ambos, es TRP, y cuando Z es cero, Y =
TRP,
o una cantidad analgésica eficaz de un derivado
de péptido en el que un grupo alquilo
C_{4}-C_{30} está unido a un aminoácido del
péptido, y un excipiente farmacéuticamente aceptable.
Se ha descubierto ahora que determinados
péptidos pueden ser usados como ingrediente activo de composiciones
analgésicas tópicas.
El ingrediente activo de la composición de la
invención es un péptido de fórmula (I). Ejemplos de péptidos de
acuerdo con la invención son los tripéptidos y los tetrapéptidos en
los que pGLU es el aminoácido terminal NH_{2} y TRP se encuentra
en la tercera (Y) o cuarta (Z) posición de aminoácido. Ejemplos de
péptidos preferidos son
pGLU-ASN-TRP-OH
(pENW),
pGLU-GLU-TRP-OH
(pEEW),
pGLU-ASN-TRP-THR-OH
(pENWT),
pGLU-ASN-THR-TRP-OH
(pENTW), y
pGLU-ASN-TRP-LYS-OH
(pENWK).
Un derivado de péptido de acuerdo con la
invención es aquel en el que se ha añadido una cadena alquílica al
péptido. Esto puede realizarse uniendo un ácido graso a un grupo
amino, por ejemplo al grupo s-amino de un residuo
de lisina o de arginina, obteniendo de este modo una amida alquílica
del péptido, o a un grupo hidroxilo, obteniendo así un éster
alquílico del péptido. La cadena alquílica puede unirse a cualquiera
de los aminoácidos del péptido que sea capaz de reaccionar con la
cadena alquílica, tal como lo haría el especialista en la técnica.
La cadena alquílica puede tener cualquier longitud, pero
preferiblemente tiene una longitud de cadena de media a larga, por
ejemplo, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19,
20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 ó 30 carbonos. Ejemplos de
derivados de péptido son
pGLU-ASN-TRP-LYS
(octanoil)-OH (pENWK-C8) y
pGlu-Asn-Trp-O-octilo
(pENW-C8).
Una "cantidad analgésica eficaz" es una
cantidad de ingrediente activo capaz de lograr el efecto
farmacológico deseado, es decir, la reducción o la prevención del
dolor. Dicha cantidad depende de una serie de parámetros tales como
la composición exacta del ingrediente activo y del vehículo, la
localización de la administración, la fuente del dolor, etc. El
especialista medio en la técnica puede determinar fácilmente la
cantidad llevando a cabo una cantidad limitada de experimentos
dosis-respuesta, por ejemplo aplicando un intervalo
de concentraciones de una formulación dada a una localización
específica del cuerpo. Ejemplos de concentraciones que se ha
demostrado que son eficaces incluyen, aunque sin limitación,
0,0015-0,02 mg/g de vehículo.
La composición farmacéutica de la invención está
formulada para administración tópica. Dicha composición también
comprendería uno o más vehículos o excipientes farmacéuticamente
aceptables, tal como una mezcla de Lanolina y Vaselina para uso
tópico en un ungüento, crema o pomada. El especialista en la técnica
conoce otros vehículos para uso tópico y también se incluyen en el
alcance de la invención. En la composición se pueden incluir agentes
emisores de fragancia, estabilizantes, colorantes, espesantes y
otras sustancias convencionales.
La invención también proporciona un uso de una
cantidad analgésica eficaz de un péptido que comprende aminoácidos L
de fórmula (I):
(I)pGLU-X-Y-Z
en
donde
X es un aminoácido seleccionado del grupo que
consiste en GLY, VAL, GLU, ASP, SER, ALA, ASN, GLN, ILE, LEU, PRO,
LYS y ARG,
Y es TRP o THR,
y Z es cualquier aminoácido L, o Z es cero,
y en donde cuando Z es cualquier aminoácido L,
uno de Y y Z, pero no ambos, es TRP, y cuando Z es cero, Y =
TRP,
o una cantidad analgésica eficaz de un derivado
de péptido en el que un grupo alquilo está unido a un aminoácido
del péptido, en la preparación de una composición farmacéutica
tópica para el tratamiento o prevención del dolor.
La administración tópica del péptido puede
realizarse de un modo convencional para composiciones tópicas.
Puesto que la composición de la invención a
veces actúa después de un lapso de tiempo, es de esperar que sea
especialmente efectiva en lo relativo al dolor crónico, aunque puede
usarse para tratar cualquier tipo de dolor.
En un aspecto adicional se proporciona un
péptido que comprende aminoácidos L de fórmula (I):
(I)pGLU-X-Y-Z
en
donde
X es un aminoácido seleccionado del grupo que
consiste en GLY, VAL, GLU, ASP, SER, ALA, ASN, GLN, ILE, LEU, PRO,
LYS y ARG,
Y es TRP o THR,
y Z es cualquier aminoácido L, o Z es cero,
y en donde cuando Z es cualquier aminoácido L,
uno de Y y Z, pero no ambos, es TRP, y cuando Z es cero, Y =
TRP,
o un derivado del péptido en el que un grupo
alquilo está unido a un aminoácido, en donde la longitud del alquilo
es C_{5}-C_{30}.
con la condición de que cuando Z es cualquier
aminoácido L, si X=ALA, Z no es LEU ó MET, si X=LYS, Z no es ALA ó
PRO, y si X=PRO, Z no es VAL ó MET,
y con la condición de que cuando Z es cero, el
péptido tiene el grupo alquílico unido a un aminoácido del
mismo.
Estos péptidos son desconocidos en la
bibliografía.
Una realización adicional de este aspecto de la
invención es una composición farmacéutica para el tratamiento o
prevención del dolor, que comprende una cantidad analgésica eficaz
del péptido de la invención o de un éster o amida de alquilo del
mismo. La composición farmacéutica puede ser administrada oral,
parenteral o tópicamente.
En una realización de la invención, la síntesis
del péptido se llevó a cabo manualmente mediante un procedimiento
por etapas de síntesis de péptido en fase sólida (SPPS, del inglés
"Solid Phase Peptide Synthesis") de
9-fluorenilmetoxicarbonilo (Fmoc) sobre resina
Fmoc-Lys(Mtt)-Wang (carga de
0,25 mmoles sobre 1 g de resina precargada).
En la primera etapa se eliminó selectivamente el
grupo protector Mtt (4-metiltritilo) mediante
tratamiento con TFA al 1% en DCM. Se unió ácido octanoico al grupo
amino libre (a través de un enlace amida) mediante un procedimiento
de acoplamiento regular aplicando reactivo de hexafluorofosfato de
2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio
(HBTU) en presencia de N-hidroxibenzotriazol
(HOBt). Asimismo, se aplicó el mismo método de acoplamiento para la
unión de otros aminoácidos. La finalización de la etapa de
acoplamiento se detectó mediante el ensayo Kaiser (unas pocas
partículas de resina procedentes de la reacción fueron lavadas con
etanol y transferidas a un pequeño tubo de vidrio; se añadieron 2
gotas de las siguientes disoluciones: ninhidrina al 5% en etanol,
fenol al 80% en etanol, cianuro potásico 0,00002 M en piridina; se
mezcló la muestra y se calentó hasta 120ºC durante
4-6 minutos. Partículas de resina de color azul son
indicativas de un test positivo). A continuación se eliminó el
grupo Fmoc con piperidina al 20%, y después de lavar la resina se
introdujo el segundo aminoácido
(Fmoc-Trp(Boc)) para volver a iniciar otra
etapa de acoplamiento.
Estas etapas se repitieron cada vez con un
aminoácido adicional según la secuencia de péptidos. Los aminoácidos
usados fueron protegidos con Fmoc-N^{\alpha}. Los
aminoácidos trifuncionales fueron protegidos en sus cadenas
laterales como se indica a continuación: Trp(Boc),
Asn(Trt). Cada amino Fmoc fue activado in situ usando
HBTU/HOBt y posteriormente fue acoplado a la resina durante 50
minutos. Se usó diisopropiletilamina (DIEA) durante el acoplamiento
como base orgánica. El grupo protector Fmoc de la amina \alpha fue
eliminado a continuación con piperidina al 20% en
n-metilpirrolidona (NMP) durante 20 minutos. Se
emplearon tres equivalentes de los aminoácidos activados en las
reacciones de acoplamiento. Las etapas de desprotección y
acoplamiento fueron repetidas con la adición de cada aminoácido
posterior hasta que se hubo completado la síntesis del péptido. La
resina-péptido se lavó entonces con NMP, seguido de
DCM, y se secó a vacío.
Este péptido, preparado como se acaba de
describir, fue separado de la resina usando una disolución con un
95% de TFA y un 5% de triisopropilsilano (TIS) durante 2 horas a
temperatura ambiente. El producto fue precipitado mediante adición
de 10 volúmenes de éter, fue filtrado y secado a vacío. Normalmente,
se obtienen 150 mg del péptido por cada 1 g de
resina-péptido. Se identificó mediante CL/MS
(M^{+1} = 684,7).
El péptido bruto se purificó en una columna de
RP-HLPC preparativo (columna C_{18} Phenomenex
Luna de 5 \mum, D.I. 10 mm x 25 cm). La cromatografía se llevó a
cabo en las siguientes condiciones: A=H_{2}O/TFA 0,05%; B=ACN/TFA
0,05%; \lambda=214 nm; caudal = 5 mL/min. Se cargaron 50 mg de
péptido en la columna. Se usó un gradiente de 15% a 50% de B a 45
minutos. Las fracciones del pico principal fueron recogidas y
caracterizadas mediante HPLC analítico. Las mejores fracciones se
combinaron y se liofilizaron para obtener el producto requerido, que
presentó una pureza >95%.
La preparación de este péptido también puede
llevarse a cabo a través de un protocolo de síntesis de disolución
que contiene las siguientes etapas:
Se introduce Boc-Trp (6,1 mmol),
octanol (6,8 mmol), DMAP (0,74 g, 6,1 mmol), y
diciclohexilcarbodiimida (DCC) (1,4 g, 6,8 mmol) en DCM (40 mL) a
0ºC. La mezcla se agita y se retira el baño de enfriamiento de tal
modo que la temperatura se eleva lentamente hasta temperatura
ambiente. La reacción se agita durante una noche y a continuación
se filtra para eliminar la diciclohexilurea (DCU). El sólido se lava
con DCM y el licor madre combinado se ajusta a pH =
4-5 con HCl (0,1 N). La fase orgánica se lava con
agua (3X30 mL), se seca sobre MgSO_{4}, se filtra y se evapora
para obtener el producto bruto.
Se disuelve el
Boc-Trp-O-octilo en
éter a temperatura ambiente. Se introduce HCl (4 N) en dioxano
(exceso molar 4:1) y la mezcla de reacción se agita durante
aproximadamente 1 h. El producto no protegido precipita como sal de
HCl. Se filtra, se lava con éter y se seca.
El aminoácido protegido con Boc (14,2 mmol) en
DCM (35 mL) se enfría hasta 0ºC. Se añade HOBt\cdotH_{2}O (12,9
mmol, 1,75 g) y DCC (15,5 mmol, 3,2 g) a la mezcla de reacción y se
agita vigorosamente durante 1 h. Se introduce el péptido
desprotegido (tras eliminación del grupo Boc) disuelto en DCM (20
mL) y TEA (18,1 mmol) y la mezcla se agita durante otros 30 minutos
a 0ºC. Se retira el baño de enfriamiento y la reacción se deja toda
la noche a temperatura ambiente.
La mezcla de productos se evapora hasta sequedad
a presión reducida y se añade EtOAc (150 mL). Se eliminan las
partículas insolubles (DCU) mediante filtración y se lava el licor
madre con salmuera (2x35 mL), NaHCO_{3} (5%; 2x35 mL), y agua
(2x35 mL). La fase orgánica se seca sobre MgSO_{4}, y se evapora a
presión reducida.
Al final de la síntesis del péptido (siendo la
última etapa el acoplamiento de pGlu) se obtiene un péptido como
producto bruto. Se identifica mediante CL/MS y se purifica de forma
similar al primer péptido
(pGlu-Asu-Trp-Lys
(octanoil)-OH).
Algunos de los péptidos de la invención también
pueden aislarse a partir de veneno de serpiente, que incluye veneno
obtenido de serpientes de las familias Viperidae,
Elapidae y Crotalidae. Por ejemplo, el pENW se puede
purificar a partir de veneno de Naja melanoleuca en una
columna Mono Q usando tampón Tris-HCl 20 mM, pH
7,0. La fracción que eluye de la columna Mono Q a
12-18 minutos (con un pico a 14,3 minutos) se
purifica adicionalmente con HPLC tal como se indica a continuación.
La fracción se carga en una columna de HPLC Spherisorb 5, 5 \mum,
250 x 4,6 mm, fase Sep. S/N 142110, y se eluye usando un gradiente
de NH_{4}Ac 20 mM (pH 5,5) y AcN. En una purificación
alternativa, el veneno puede purificarse en la columna Mono Q usando
un tampón de acetato amónico 20 mM, pH 6,9. La fracción con un pico
a 17 minutos se purifica adicionalmente mediante HPLC tal como se
ha descrito antes. Los análisis de RMN, HPLC y CL/MS revelaron la
identidad de los péptidos sintéticos y naturales.
De forma similar, los péptidos pENW, pEEW y
pENTW ó pENWT han sido purificados a partir de veneno de Crotalus
adamanteus, y el pENW ha sido purificado a partir de veneno de
V. palestinae.
En cada ensayo se usaron unas pocas decenas de
hámsters de similar peso y edad. Los hámsters se dividieron en
grupos según el número de muestras que fueran a evaluarse. Se aplicó
ungüento (50% de Lanolina y 50% de Vaselina) que contenía la
sustancia a evaluar a la piel del animal en la región del lomo. No
se eliminó el pelo con el fin de asegurar que no se producía daño a
la piel. Un grupo de control de hámsters fue tratado con ungüento
sin la fracción de la invención. Los hámsters fueron tratados
mediante aplicación tópica durante 6, 14, 21 ó 28 días
consecutivos. El ensayo de efecto analgésico se llevó a cabo después
de la última aplicación del ungüento. En un protocolo alternativo,
el efecto analgésico se evaluó después de una única aplicación del
ungüento.
Posteriormente a la aplicación del ungüento, los
hámsters se "limpian" a sí mismos dispersando el ungüento por
todo su cuerpo con su lengua y sus patas. Por tanto, parte del
ungüento se introduce en la cavidad oral y, posiblemente, también
en los intestinos de los hámsters.
En un ensayo típico, se aplica una cantidad
constante de ungüento con o sin sustancia analgésica a cada animal
durante un periodo de tiempo predeterminado de uno o más días.
Después de este periodo, se induce dolor mediante inyección
subcutánea de 0,5 mL de HCl 1 N por cada 0,1 kg de peso corporal en
la región del fémur. Los hámsters responden a la inyección de HCl
tocándose el área de inyección con la lengua, denominándose este
gesto un "lamido". 20 minutos después de la inyección se
observa al hámster durante 60 minutos y se contabiliza el número de
"lamidos". El número de "lamidos" sirve como indicación
cuantitativa del dolor inducido por HCl.
El efecto analgésico se determina comparando el
número medio de "lamidos" en los animales de control con el
número en los animales tratados. La significancia de la diferencia
se determinó usando estadística de ensayo t.
Se disolvieron 0,6 mg de pENW,
pENWK-C8 o pENWGAT (un dímero de pENW) en 5 mL de
DDW, mezclado con un mezclador de ultrasonidos durante 2 minutos, y
a continuación se disolvió en 315 g de ungüento. La concentración
final de péptido fue de 0,002 mg/g.
Se practicaron 6 aplicaciones en un periodo de
tiempo de 4 semanas. El ensayo del efecto analgésico se llevó a
cabo 10 días después de la última aplicación del ungüento. Los
resultados se presentan en la siguiente tabla:
Se puede observar claramente que la aplicación
tópica del tripéptido tuvo un efecto significativo en la reducción
de dolor en los animales, y que el derivado de tetrapéptido fue
incluso más efectivo. La adición de 3 aminoácidos al extremo C del
tripéptido eliminó por completo su actividad.
Se prepararon composiciones a una concentración
de 0,020 mg/g como en el Ejemplo 1, que contenían los siguientes
ingredientes activos: pENW, pEEW o pENTW o pENWT. Se practicaron 6
aplicaciones en un periodo de tiempo de 5 semanas. Los resultados se
presentan a continuación:
Puede observarse que todos los péptidos
evaluados presentan una actividad analgésica significativa.
Se preparó una composición que contenía
pENW-C8 con una concentración de 0,002 mg/g de
ungüento como en el Ejemplo 1. Se practicó una única aplicación a
los animales, y se determinó el efecto analgésico a los 11, 23 y 48
días después de la aplicación. A los animales de control se les
aplicó ungüento sin sustancia activa. Los resultados se muestran a
continuación:
Los resultados indican que el efecto analgésico
aumenta con el tiempo, alcanzando un máximo después de
aproximadamente 23 días, para posteriormente declinar.
Claims (24)
1. Una composición farmacéutica para
administración tópica que comprende una cantidad analgésica eficaz
de un péptido que comprende aminoácidos L de fórmula (I):
(I)pGLU-X-Y-Z
en
donde
X es un aminoácido seleccionado del grupo que
consiste en GLY, VAL, GLU, ASP, SER, ALA, ASN, GLN, ILE, LEU, PRO,
LYS y ARG,
Y es TRP o THR,
y Z es cualquier aminoácido L, o Z es cero,
y en donde cuando Z es cualquier aminoácido L,
uno de Y y Z, pero no ambos, es TRP, y cuando Z es cero, Y=TRP,
o una cantidad analgésica eficaz de un derivado
de péptido en el que se une un grupo alquilo a un aminoácido de
dicho péptido, en donde dicho alquilo se selecciona del grupo que
consiste en C_{4}-C_{30}.
y un excipiente farmacéuticamente aceptable.
2. Una composición farmacéutica de acuerdo con
la Reivindicación 1, en la que dicho grupo alquilo está unido
mediante un enlace amida.
3. Una composición farmacéutica de acuerdo con
la Reivindicación 1, en la que dicho grupo alquilo está unido
mediante un enlace éster.
4. Una composición farmacéutica de acuerdo con
la Reivindicación 1, en la que X es ASN.
5. Una composición farmacéutica de acuerdo con
la Reivindicación 1, en la que dicho alquilo se selecciona del grupo
que consiste en C_{4}-C_{30}.
6, Una composición farmacéutica de acuerdo con
la Reivindicación 5, en la que dicho alquilo es un grupo octilo
(C_{8}).
7. Una composición farmacéutica de acuerdo con
la Reivindicación 1, en la que dicho péptido es un tetrapéptido.
8. Una composición farmacéutica de acuerdo con
la Reivindicación 1, en la que dicho péptido es un tripéptido y Z en
cero.
9. El uso de una cantidad analgésica eficaz de
un péptido que comprende aminoácidos L de fórmula (I):
(I)pGLU-X-Y-Z
en
donde
X es un aminoácido seleccionado del grupo que
consiste en GLY, VAL, GLU, ASP, SER, ALA, ASN, GLN, ILE, LEU, PRO,
LYS y ARG,
Y es TRP o THR,
y Z es cualquier aminoácido L, o Z es cero,
y en donde cuando Z es cualquier aminoácido L,
uno de Y y Z, pero no ambos, es TRP, y cuando Z es cero, Y=TRP,
o una cantidad analgésica eficaz de un derivado
de péptido en el que se une un grupo alquilo a un aminoácido de
dicho péptido,
en la preparación de una composición
farmacéutica tópica para el tratamiento o la prevención del
dolor.
10. Un uso de acuerdo con la Reivindicación 9,
en el que dicho grupo alquilo está unido mediante un enlace
amida.
11. Un uso de acuerdo con la Reivindicación 9,
en el que dicho grupo alquilo está unido mediante un enlace
éster.
12. Un uso de acuerdo con la Reivindicación 9,
en el que X es ASN.
13. Un uso de acuerdo con la Reivindicación 9,
en el que dicho alquilo se selecciona del grupo que consiste en
C_{4}-C_{30}.
14. Un uso de acuerdo con la Reivindicación 13,
en el que dicho alquilo es un grupo octilo (C_{8}).
15. Un uso de acuerdo con la Reivindicación 9,
en el que dicho péptido es un tetrapéptido.
16. Un uso de acuerdo con la Reivindicación 9,
en el que dicho péptido es un tripéptido y Z es cero.
17. Un péptido que comprende aminoácido L de
fórmula (I):
(I)pGLU-X-Y-Z
en
donde
X es un aminoácido seleccionado del grupo que
consiste en GLY, VAL, GLU, ASP, SER, ALA, ASN, GLN, ILE, LEU, PRO,
LYS y ARG,
Y es TRP o THR,
y Z es cualquier aminoácido L, o Z es cero,
y en donde cuando Z es cualquier aminoácido L,
uno de Y y Z, pero no ambos, es TRP, y cuando Z es cero, Y=TRP,
o un derivado de dicho péptido en el que está
unido un grupo alquilo a un aminoácido, en donde la longitud de
dicho alquilo es C_{5}-C_{30}
con la condición de que cuando Z es cualquier
aminoácido L, si X=ALA, Z no es LEU o MET, si X=LYS, Z no es ALA o
PRO, y si X=PRO, Z no es VAL o MET,
y con la condición adicional de que cuando Z es
cero, dicho péptido tiene dicho grupo alquilo unido a un aminoácido
del mismo.
18. Un éster de alquilo de acuerdo con la
Reivindicación 17, en el que dicho alquilo es un grupo octilo
(C_{8}).
19. Un tetrapéptido de acuerdo con cualquiera de
las Reivindicaciones 17-18.
20. Un tripéptido de acuerdo con cualquiera de
las Reivindicaciones 17-18.
21. Una composición farmacéutica para el
tratamiento o la prevención del dolor, que comprende una cantidad
analgésica eficaz de un péptido de acuerdo con la Reivindicación
17.
22. Una composición farmacéutica para el
tratamiento o la prevención del dolor, que comprende una cantidad
analgésica eficaz de un éster o amida de alquilo de un péptido de
acuerdo con la Reivindicación 17.
23. Un uso de acuerdo con la Reivindicación 9,
en el que dicho péptido es
pGlu-Asn-Trp-Thr,
pGlu-Asn-Thr-Trp, ó
pGlu-Asn-Trp-Lys-C8.
24. Una composición farmacéutica de acuerdo con
la Reivindicación 1, en la que dicho péptido es
pGlu-Asn-Trp-Thr,
pGlu-Asn-Thr-Trp, ó
pGlu-Asn-Trp-Lys-C8.
25. Un péptido de acuerdo con la Reivindicación
17, que es
pGlu-Asn-Trp-Thr,
pGlu-Asn-Thr-Trp, ó
pGlu-Asn-Trp-Lys-C8.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IL137820A IL137820A (en) | 2000-08-10 | 2000-08-10 | Pharmaceutical composition for topical administration comprising an analgesic peptide |
| IL137820 | 2000-08-10 | ||
| PCT/IL2001/000724 WO2002012269A2 (en) | 2000-08-10 | 2001-08-06 | Pharmaceutical composition comprising an analgesic peptide |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2305096T3 true ES2305096T3 (es) | 2008-11-01 |
Family
ID=11074512
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES01958334T Expired - Lifetime ES2305096T3 (es) | 2000-08-10 | 2001-08-06 | Composicion farmaceutico que comprende un peptido analgesico. |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US7220725B2 (es) |
| EP (1) | EP1309613B1 (es) |
| JP (1) | JP4860096B2 (es) |
| CN (2) | CN1462277A (es) |
| AT (1) | ATE392428T1 (es) |
| AU (2) | AU8005201A (es) |
| CA (1) | CA2418793C (es) |
| DE (1) | DE60133654T2 (es) |
| DK (1) | DK1309613T3 (es) |
| ES (1) | ES2305096T3 (es) |
| HK (1) | HK1160778A1 (es) |
| IL (1) | IL137820A (es) |
| WO (1) | WO2002012269A2 (es) |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IL137820A (en) * | 2000-08-10 | 2009-06-15 | S I S Shulov Inst For Science | Pharmaceutical composition for topical administration comprising an analgesic peptide |
| JP2008537739A (ja) * | 2005-03-21 | 2008-09-25 | ザ トラスティース オブ コロンビア ユニバーシティ イン ザ シティ オブ ニューヨーク | 新規神経疼痛経路 |
| KR101566036B1 (ko) * | 2007-03-23 | 2015-11-04 | 닛신 파마 가부시키가이샤 | 간질환의 예방 또는 치료용 조성물 |
| US20110183925A1 (en) * | 2008-09-22 | 2011-07-28 | Nisshin Pharma Inc. | Anti-inflammatory peptide |
| JP5863650B2 (ja) | 2009-07-27 | 2016-02-16 | ノシセプタ エルエルシー | 疼痛を処置するための方法 |
| FR2948809B1 (fr) * | 2009-07-31 | 2012-08-17 | St Microelectronics Rousset | Amplificateur de lecture faible puissance auto-minute |
| HUE030152T2 (en) * | 2011-03-28 | 2017-04-28 | S I S Shulov Innovative Science Ltd | A method for treating skin diseases |
| CA2972975A1 (en) | 2015-01-07 | 2016-07-14 | Trigemina, Inc. | Magnesium-containing oxytocin formulations and methods of use |
| RU2669386C1 (ru) * | 2017-08-11 | 2018-10-11 | Закрытое акционерное общество "Институт экспериментальной фармакологии" | Состав и способ получения анальгетического средства пептидной структуры |
| CN112203674A (zh) | 2018-03-29 | 2021-01-08 | S.I.S舒洛夫创新科学有限公司 | 用于抑制炎性细胞因子的药物组合物 |
| US11644463B2 (en) | 2019-08-30 | 2023-05-09 | Euroimmun Medizinische Labordiagnostika Ag | Detection of an autoantibody |
| US20220362325A1 (en) * | 2019-09-26 | 2022-11-17 | S.I.S Shulov Innovative Science Ltd. | Compositions and methods for treating degenerative, age-related and trauma-induced disorders |
| WO2021059266A1 (en) * | 2019-09-26 | 2021-04-01 | S.I.S. Shulov Innovative Science Ltd. | Anti-aging compositions and methods of use thereof |
Family Cites Families (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4491541A (en) * | 1982-11-10 | 1985-01-01 | Farmitalia Carlo Erba | Peptides |
| IT1172391B (it) | 1983-12-23 | 1987-06-18 | Polifarma Spa | Composti tirpeptidici contenenti acido piroglutaminico e triptofano,procedimentio di produzione ed applicazioni terapeutiche |
| JPH0680079B2 (ja) * | 1984-11-09 | 1994-10-12 | エーザイ株式会社 | ポリペプチド |
| IT1242002B (it) * | 1990-10-03 | 1994-02-02 | Polifarma Spa | Composti con attivita' farmacologica antiipertensiva, analgesica, immunomodulante e antiinfiammatoria, che presentano nella molecola una sequenza di tre radicali, essendo alfa-amminoacido quello centrale |
| EP0668770A1 (en) | 1991-04-24 | 1995-08-30 | Warner-Lambert Company | $g(a)-SUBSTITUTED POLYPEPTIDES HAVING THERAPEUTIC ACTIVITY |
| AUPM489194A0 (en) * | 1994-04-07 | 1994-04-28 | Luminis Pty Limited | Peptides |
| RU2107691C1 (ru) * | 1995-03-02 | 1998-03-27 | Дейгин Владислав Исакович | Пептид и способ его получения |
| US5776896A (en) * | 1996-01-03 | 1998-07-07 | Zeneca Limited | Analgesic peptides from venom of grammostola spatulata and use thereof |
| JP2000513336A (ja) * | 1996-05-22 | 2000-10-10 | ディバーシファイド ファーマシューティカルズ，インコーポレーテッド | 薬物の経皮送達のための組成物、方法及びデバイス |
| US6126939A (en) * | 1996-09-03 | 2000-10-03 | Yeda Research And Development Co. Ltd. | Anti-inflammatory dipeptide and pharmaceutical composition thereof |
| IL123001A (en) * | 1998-01-20 | 1998-12-06 | Shulov Inst For Venom Research | Analgesic fraction from snake March and pharmacy preparations containing it |
| CN1324367A (zh) * | 1998-08-28 | 2001-11-28 | 迈洛斯公司 | 环状前塞波素衍生肽及其应用 |
| IL137820A (en) * | 2000-08-10 | 2009-06-15 | S I S Shulov Inst For Science | Pharmaceutical composition for topical administration comprising an analgesic peptide |
-
2000
- 2000-08-10 IL IL137820A patent/IL137820A/en active IP Right Grant
-
2001
- 2001-08-06 DK DK01958334T patent/DK1309613T3/da active
- 2001-08-06 CN CN01816060A patent/CN1462277A/zh active Pending
- 2001-08-06 JP JP2002518242A patent/JP4860096B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2001-08-06 CA CA2418793A patent/CA2418793C/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-08-06 WO PCT/IL2001/000724 patent/WO2002012269A2/en active IP Right Grant
- 2001-08-06 ES ES01958334T patent/ES2305096T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-08-06 AU AU8005201A patent/AU8005201A/xx active Pending
- 2001-08-06 AU AU2001280052A patent/AU2001280052B2/en not_active Expired
- 2001-08-06 US US10/344,129 patent/US7220725B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-08-06 CN CN2011100520229A patent/CN102160890B/zh not_active Expired - Lifetime
- 2001-08-06 AT AT01958334T patent/ATE392428T1/de not_active IP Right Cessation
- 2001-08-06 EP EP01958334A patent/EP1309613B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-08-06 DE DE60133654T patent/DE60133654T2/de not_active Expired - Lifetime
-
2012
- 2012-02-08 HK HK12101216.2A patent/HK1160778A1/xx not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE60133654T2 (de) | 2009-06-04 |
| CA2418793A1 (en) | 2002-02-14 |
| HK1160778A1 (en) | 2012-08-17 |
| EP1309613B1 (en) | 2008-04-16 |
| CN102160890A (zh) | 2011-08-24 |
| US7220725B2 (en) | 2007-05-22 |
| CN1462277A (zh) | 2003-12-17 |
| IL137820A (en) | 2009-06-15 |
| CA2418793C (en) | 2011-11-15 |
| EP1309613A2 (en) | 2003-05-14 |
| DK1309613T3 (da) | 2008-08-11 |
| US20040014673A1 (en) | 2004-01-22 |
| IL137820A0 (en) | 2001-10-31 |
| DE60133654D1 (de) | 2008-05-29 |
| AU8005201A (en) | 2002-02-18 |
| AU2001280052B2 (en) | 2007-11-29 |
| CN102160890B (zh) | 2013-02-06 |
| WO2002012269A3 (en) | 2002-12-19 |
| JP4860096B2 (ja) | 2012-01-25 |
| JP2004513079A (ja) | 2004-04-30 |
| ATE392428T1 (de) | 2008-05-15 |
| WO2002012269A2 (en) | 2002-02-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2304345T3 (es) | Ligandos del receptor de melanocortina. | |
| JP2682702B2 (ja) | Ｖｉｐまたはその活性フラグメントと疎水性部分とのコンジュゲート及び男性のインポテンツのための局所投与用組成物 | |
| ES2305096T3 (es) | Composicion farmaceutico que comprende un peptido analgesico. | |
| US4619916A (en) | Tripeptide compounds containing pyroglutamic acid and tryptophan, process for their production and therapeutic applications | |
| JPH0680079B2 (ja) | ポリペプチド | |
| JP2000501382A (ja) | 新規アミノ酸誘導体、それらの調製方法及びこれらの化合物を含む医薬組成物 | |
| HU224073B1 (hu) | Biológiai aktivitással rendelkező peptidek, ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények és eljárás ezek előállítására | |
| AU2001280052A1 (en) | Pharmaceutical composition comprising an analgesic peptide | |
| JPS59231053A (ja) | 医薬用ペプチド化合物 | |
| JPS58116443A (ja) | 新規ペプチドおよびその製法 | |
| EP0333071A2 (en) | Polypeptides, methods for their preparation, pharmaceutical compositions comprising them and use | |
| JPH075632B2 (ja) | 新規なペプチド類 | |
| JP2949129B2 (ja) | 胃腸運動刺激活性を有するモチリン類似ポリペプチド | |
| JPS62123198A (ja) | デカペプチド | |
| JPH0631314B2 (ja) | 新規なゴナドリベリン誘導体 | |
| JP3662926B2 (ja) | Ｌｈｒｈのｎ末端改変類似体 | |
| AU718320B2 (en) | Peptide derivatives | |
| JPH02258798A (ja) | 競合的ゴナドリベリン拮抗物質 | |
| TWI237029B (en) | Vasoactive intestinal peptide analogs | |
| JP3109835B2 (ja) | ペプシンの放出を抑制するためのペプチド | |
| AU2014203176B2 (en) | Transdermal delivery systems of peptides and related compounds | |
| JP2553506B2 (ja) | ポリペプチド | |
| JP2513439B2 (ja) | 新規ペプチド | |
| JP2513440B2 (ja) | 新規ペプチド | |
| US20010007016A1 (en) | Peptide derivatives |