JPS59231053A - 医薬用ペプチド化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はヒトおよび動物医療に有用なペプチド化合物、
これらの化合物の製造、これらの化合物を含有する医薬
製剤およびこれらの製剤の製造、これらの化合物のヒト
および動物医療における使用、並びにこれらの化合物の
ための中間体およびその製造に関する。

本発明はさらに特に下記に定義するとおりの式■の新規
なペプチド化合物に関する： ３ 式Ｉの化合物はヒトおよび動物医療で、痛みの防止およ
び軽減に価値がある、すなわちこれらの化合物は鎮痛剤
であるたとが見い出された。

痛みの安全で効果的な防止および軽減は長く研究および
調査の対象であった。多くの鎮痛剤を医師および獣医師
は入手できる。これらの鎮痛剤は、これがどちらもまだ
十分に解明されていない２種の異なるメカニズムのどち
らかまたは両方により作用するものと認識されている。

このようなメカニズムの１つは中枢性鎮痛剤と称されて
おり、中枢神経系（脳および背髄）におけるレセプター
を含むものと信じられており、他方もう１つは末梢性鎮
痛剤の現象を生じるものであって、これらの構造の外の
事象と組合されている。

少なくとも実質的に中枢媒介要素をともなう効果を有す
る鎮痛剤としてはモルヒネ、ヘロインおよびその他のア
ニン剤（ｏｐｉｏｉｄｓ　）を包含する〔たとえば、Ｇ
ｏｏｄｍａｎおよびＧｉ　１ｍａｎのｒ　ＴｈｅＰｈａ
ｒｍａｃｍｌｏｇｉｃａｌ　Ｂａ５ｉｓ　ｏｆ　Ｔｈｅ
ｒａｐｅｕｔｉｃｓ　Ｊ　、　６版（１９８０年）、Ｍ
ａｃｍｉｌｌｉａｎ　Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ　Ｃｏ、。

Ｉｎｃ、、特に２２章、４９４〜５６４頁を参照できる
〕。このような化合物は重篤なそしてしばしば他の点で
難治性の捕み、たとえば癌、手術後および分娩の痛みの
ような発熱性病気の痛みにそれらの効力が評価されてい
る。しかしながら、よく知られているように〔前記文献
の２３章、５３５〜５８４頁〕、モルヒネ等の反復投与
は薬物に対する精神的依存性およびその作用に対する耐
性を導くことができ、投与を中止すると禁断症状を導く
ことができる。研究は全てが中枢神経系の現象であるこ
れらの点およびさらにまた呼吸低下の副作用が鎮痛効力
と密接に結び付いていることを示した。

しかしながら、最近の認められている末梢性鎮痛剤は性
質上で非アニン剤である。

１９７５年に、Ｈｕｇｈｅｓ等は強方なアヘン作用性活
性を有する脳からの２種の構造上で関連しているペンタ
ペプチドの同定を報告した（　Ｎａｔｕｒｅ。

１９７５年、２５５．５７７〜５７９）。これらはそれ
ぞれメチオニン・エンケファリンおよびロイシンーエン
チファリンと命名されている。それらのプロペプチドお
よび多数のそれらの同族体が以来、詳細に研究され、写
真はアニン剤と非常に類似した薬理学的スペクトルを有
する１群の化合物を明らかにした。特に、それらの鎮痛
作用と結び付いて、エンケファリンが精神依存性／耐性
潜在能力を有しくＷｅｉのＪ、　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、
　Ｅｘｐ、　Ｔｈｅｒ、　２１６　：　１２〜１８．１
９８１年）、アニン剤との交差耐性を有しく　Ｗａｔｅ
ｒｆｉｅｌｄ等のＮａｔｕｒｅ　、　　１９７６年、２
６ｏ１６２４〜６２５）、および呼吸低下作用を有する
（　ｌ５ｏｎ等のＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｓｔ　、　
　２１／？）　、　　１９８　（１９７９年）〕ことが
見い出された。

これに対して、式（１）のペプチド化合物により生じる
鎮痛作用は格別に、器管の末梢に対するだけである。こ
れらの化合物はいずれの重大な程度の中枢性鎮痛活性に
欠けており、呼吸低下作用がないことおよび非常に低い
精神依存性／耐性潜在能力を有する点で特に有利である
。これらの利点および作用の特殊性は脳／血液障壁を横
切ることが成る明白な程度までできないこれらの化合物
の能力と一緒に組合されているものと信じられる。

前記式（１）において、 Ｒ１は水素、１または２個の炭素原子を有するアルキル
またはアミジノ基であり； Ｒ２は１または２個の炭素原子を有するアルキルであり
； Ｒ３は水素またはカルバミルであり； Ｘ２は構造式 ％式％ を有するＤ−基であり； ＺｌおよびＺ２は同一または異なっており、それぞれ水
素、ハロゲン、ニトロまたはトリフルオロメチルであっ
て、その少なくとも１つは水素以外であり； ｍは２．６または４であり；そして ｎは０．１または２であるが、但しＲ３がカルバミルで
ある場合には、ｎは常に１であり；そして その塩を包含する。

ｘ２に関する特定の基には次のＤ基がある＝２−アミノ
−４−グアニジノブチリル（ｒｎ＝２）、アルギニル（
ｍ＝３）およびホモアルギニル（ｍ＝４）。

ＺｌおよびＺ２を表わすハ０デンはフルオロ、り四ル、
ブロモおよびヨードから選ばれる。

式（１）の範囲内の狭い群゛のペプチド化合物としては
次の化合物をあげることができる：（１）　　Ｒ１がア
ミジノ基である； （１）　　Ｒ２がエチルである； （明　Ｒ３が尿素である； （ｌｖｌ　　Ｘ２がＤ−アルギニルである；（ｖ）　　
Ｚｌおよびｚ２の１つが水素でありそして他の１つが好
ましくは４位置にある、ニトロまたはフルオロである； （Ｖｉ）　　ｎか１である。

式（１１の範囲内のもう１群のペプチド化合物はＲ１が
アミジノ基でありそしてＲ３がカルバミルである化合物
である。

式（１）ｇｐｉ囲内の好ましいペプチド化合物には次の
化合物およびその塩がある： Ｈ２ＮＣ（：ＨＮ）、Ｔｙｒ、Ｄ−Ａｒｇ、（）ＩＹ、
Ｎ（Ｃ２Ｈ，）、ＣＨ２，ＣＨ２（トｏ２Ｈ２ＮＣ（：
ＨＮ）、Ｔｙｒ、Ｄ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ、ＥｔＰｈｅ（４
ＮＯ２）　、ＮＨ２およびＨ２ＮＣ（：　ＨＮ）、Ｔｙ
ｒ　、Ｄ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ、ＥｔＰｈｅ（４Ｆ）−ＮＨ
２本明細書でアミノ酸およびそれらの基について使用し
た略語は当技術で慣用のものであり、たとえば阻ｏｃｈ
ｅｍ、　Ｊ、　（１９７２年）１２６，７７３〜７８０
に見い出すことができる。水門細別全体を通じて、別記
しないかぎり、以下の全ての記載はキラルアミノ酸およ
びそれらの基のし一配位に関するものである。

ペプチドの塩において、生物学的活性はペプチド分子に
あり、配の種類は重要ではないが、治療目的には摂取者
に対して医薬上で許容されうろことが好ましい。医薬上
で許容されうる酸の例としては、塩酸、臭化水素酸、リ
ン酸、メタリン酸、硝酸および詠酸のような鉱酸並びに
酒石酸、酢酸、クエン酸、マレイン酸、ＫＬ　フマール
酸、安息香酸、ダリコール酸、ダルコン酸、コハク酸お
よび１）−）ルエンスルホン酸のよウナアリールスルホ
ン酸のような有機酸が包含される。これらの塩とともに
、医薬上で許容されない塩も遊離のペプチドの精製およ
び（または）単＊Ｉ＃　Ｋ有用であり、許容されない塩
をまた当技術でよく知られている技法により許容されう
る塩に変換できることは勿論のことである。

式（Ｉ）のペプチド化合物の鎮痛性および特にその作用
の選択的末梢部位は次の研究忙より証明されている。

（１）熱板試験（ＷｏｏｌｆｅおよびＭａｃＤｏｎａｌ
ｄのＪ。

Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、　Ｅｘｐ、　Ｔｈｅｒ、８０二３
００１９４４年〕および刺戟訪発もかき（伸張）試験（
Ｖａｎｄｅｒ　ＷｅｎｄｅおよびＭａｒｇｏｌｉｎのＦ
ｅｄ、　Ｐｒｏｃ、　１５　：　４９４．１９５６年〕
はともに、鎮痛活性の研究にとって当技術で積率的方法
である。もがき試験の痛みは中枢的にかまたは末梢的に
か分割できないものと考えられるが、熱板試験で誘発さ
れる痛みは中枢レベルによってだけ作用されるものと考
えられる。これらの文献の方法の変法により試験した場
合に、本発明のペプチド化合物は非経口（すなわち末梢
〕投与において、もがき試験で熱板試験よりも著しくさ
らに強力である。すなわち作用の末梢部位を示す試験部
位忙対する反応に一定の減少を生じさせるに要する化合
物の投与量は低い。

（２）末梢（非経口）投与において、熱板試験およびも
がき試験における本発明のペプチド化合物により誘発さ
れる鎮痛作用の各時間経過はこ・れらの化合物が比較的
ゆっくりと、非常に制限された程度にだけ血液／脳障壁
を通過することを示す。

（３）末梢（非経口）投与において、もがき試験で本発
明のペプチドにより発生する鎮痛作用は第４級アヘン剤
拮抗体であるＮ−アリル−ノルモルヒネ、メチオダイド
（Ｎ−メチルナロルクィン；Ｋｏ　ｃ　ｚｋａ等のＡｃ
ｔａ　Ｃｈｉｍ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　Ｈｕｎｇ−
５Ｌ３９３　（１９６７年）〕の末梢投与釦より拮抗さ
れる；すなわち同じ効果を得るために１アヘン剤の不存
在下におけるよりも存在下ではさらに高い投与量のペプ
チド化合物が要求される。第４級化合物により血液／脳
障壁の浸透が最小になるので、ペプチド化合物線光鎮痛
作用およびその拮抗性は末梢レベルで生じる。

前記の鎮痛性に加えて、式（１１のペプチドおよびその
塩は標準的薬理学的方法で研究した場合に、（ａ）下痢
止め活性および（ｂ）鎮咳作用を示すことが見い出され
た。

式（１）のペプチドおよびその塩は類似構造の化合物の
合成について浩技術で既知の方法により製造でき、この
点に関して、例示するだけの目的で、次の文献をあげる
ことができる。

ａ）　５ｃｈｒｏｄｅｒおよびＬｕｅｂｋｅ　：　Ｔｈ
ｅ　Ｐｅｐｔｉｄｅｓ（Ａｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ
、　１９６５年）。

ｂ）　　ＳｔｅｗａｒｔおよびＹｏｕｎｇ　：　５ｏｌ
ｉｄ　ＰｈａｇｅＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ　
（Ｗ、Ｈ，Ｉ＋’ｒｅｅｎｗｎ　ａｎｄ　Ｃｏ、　ｅ　
１９６９年）。

ｃ）　　Ｂｅ１ｌａｎおよびＭｅｌｅｋ　：　Ｊ、　Ａ
ｍ、　Ｃｈｅｍ、　Ｓｏｃ、、　９０　：１６５、１９
６８年。

ｄ）　　Ｔｉ１ａｋ　：　Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌ
ｅｔｔｅｒｓ、　１３４９　（１９７０年）。

ｆ）　　Ｍｅｔｈｏｄｅｎ　ｄｅｒ　Ｏｒｇａｎｉｓｃ
ｈｅｎ　Ｃｈｅｍｉｅ　（Ｈｏｕｂｅｍ−Ｗｅｙｅ）、
１５巻「５ｙｎｔｈｅｓｅ　ｖｏｎ　Ｐｅｐｔｉｄｅｎ
　Ｊ、第１および２章（Ｇｅｏｒｇ　Ｔｈｉｅｍｅ出版
社、１９７４年）。

ｇ）　　Ｔｈｅ　Ｐｅｐｔｉｄｅｓ　：　Ａｎａｌｙｓ
ｉｓ、　５７ｎｔｂｅＳＩＳ＋Ｂｉｏｌｏｇｙ、　Ｇｒ
ｏｓｓ、　ＬおよびＭｅｉｅｎｂｏｆｅｒ、　Ｊ。

等、１〜４巻（Ａｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ、　１９
７９年）。

ｈ）　　Ｐｅｐｔｉｄｅｓ　：　５ｙｎｔｈｅｓｅＳｅ
　Ｐｈｙｓｉｃａｌ　Ｄａｔａ。

Ｖｏｅｌｔｅｒ、　Ｗ、およびＳｃｈｍｉｄ　−Ｓｉｅ
ｇｍａｎｎ、　Ｅ、。

１〜６巻（ＧｅｏｒｇＴｈｉｅｍｅ出版社、１９８３年
）。

ｉ）　　Ａｔｈｅｒｔｏｎ、　Ｅ、等、’　Ｂｉｏｏｒ
ｇａｎｉＣＣｈｅｍ、　ｌ　５１６５１〜３７０　（１
９７９年〕。

ｊ）　　５ｌｌｌｅｐｐａｒｄ＋　、Ｒ，Ｃ，：　Ｃｈ
ｅｍｉｓｔｒｙ　ｉｎ　Ｂｒ１ｔａｉｎ。

４０２〜４１４　（１９８３年）。

ｋ）　Ａｔｈｅｒｔｏｎ、　Ｅ、等：　Ｊ、Ｃ，Ｓ、　
Ｃｈｅｍ、　Ｃｏｍｍ、＊１１５１〜１１５２　（１９
８１年）。

前記および後記の文献の全てをここに引用して本明細書
に組入れる。

１）これらの製造手段において、ペプチド化合物および
その塩は伝統的なペプチド合成法または固体相法のどち
らかを使用して、適当なアミノ酸の／［次的カプリング
により、または初めに製造し、次いでペプチド　サブ単
位をカプリングすることにより生成する。これらの反応
は、たとえば反応に関与するアミノ酸の反応性カルボキ
シル基を活性化しおよび反応に関与しないアミンおよび
カルボキシル基を保穫することＫより実施でき、ラセミ
化を最小にするに適当な反応条件（カプリング反応およ
び保護基の除去の両方）および適当な活性化基および保
腰基（マスキング基）の詳細は前記で引用した文献中に
見い出すことができる。

従って、本発明のペプチド化合物および塩は反応剤（Ｉ
Ｉ） Ｒ−Ｙ　−ＯＨ（Ｉｆ） 〔式中Ｒ１は式■について前記した意味を有し、そして
Ｙｌは式Ｉの相当するＮ−末端部分基配列と同一の部分
基配列である〕を反応剤（１）Ｈ−Ｙ２（１） （式中Ｙ２は前記で定義した生成物ペプチドの残部と同
一であって、その相当するＣ−末端部分基配列を包含す
る）と反応させることにより製造でき、この場合に反応
剤（Ｉｔ）および（組は所望の場所および時点で任意に
保護および（または）活性化でき、後で、場合により生
成物の脱保護を行なうことができる。

２）もう１つの合成手段は、最終工程として、相当する
Ｃ末端ペプチドカルボン酸または適当なその反応性誘導
体のアミド化を包含する。

すなわち、Ｒ３がカルバミルであるペプチド化合物は、
たとえばペプチドエステル（Ｉ％’）〔式中Ｒ１、Ｂ２
、Ｘ２、ｚｌおよびｚ２は式■について前記した意味を
有し、そしてＯＲ’は適当な置換可能なアルコキシ、ア
ラルコキシまたはアリールオキシ基、たとえば１〜４個
の炭素原子を有するアルコキシ（すなわち、メトキシ、
エトキシ、プロポキシまたはブトキシ）またはベンジル
オキシである。このような反応性基の多くはペプチｒ技
術で既知である。

Ｒ３が水素であるペプチド化合物は、たとえばペプチド
カルボン酸（ｖ）またはその反応性誘導体とアミン（■
）との反応により同様に製造できる＝（ｖ）（ｖＩ） 〔各式中Ｒ１、Ｒ２、Ｘ２、ｚｌ、ｚ２およびｎ　ハ式
（１）について前記した意味を有する〕。この反応は、
所望により、ペプチドカプリング技法（前記引用文献１
））に適当な条件下におよび適当な反応剤および方法〔
（Ｖ）のＮ−末端の保護を含む〕を使用して、実施でき
ることは明白である。

３）式（１）のペプチド化合物および塩はまたＸ２が構
造式 ％式％ （式中ｍは式■にづいて前記した意味を有し、そしてＲ
５は水素またはアミジノ基である）を有する基であり、
Ｒ１およびＲ５の少なくとも１つは水素である相当する
ペプチドを、１−アミジノ−６，５−ジメチルピラゾー
ルまたはその化学的均郷化合物を使用して、アミジノ化
することより製造できる。

従って、Ｄ−アルギニルおよびＤ−ホモアルギニルペプ
チド化合物は相当するＤ−オルニチルおよびＤ−リジル
化合物からそれぞれ製造でき、他方り一〔２−アミノ−
４−グアニジ人ゾチリル〕ペプチド化合物は相当するＤ
−（２，４−ジアミノゾチリル）化合物から得られる。

相当するペプチド反応体で　ＢｌおよびＲ５の両方が水
素であって　Ｒ１で表わされている水素が式（Ｉ）の最
終生成物に保持されるべき場合には、アミジノ化工程中
にペプチドＮ−末端の保護が必要であることが認められ
る。適当な保藤基およびアミジノ化が生じた後のそれら
の除去条件の詳細は前記引用文献に見出される。

エステル化合物ＣＩＶ）　、カルボン酸化合物ｆｆ）お
よび相当するＤ−オルニテル、Ｄ−リジルおよびＤ−（
２１４−ジアミノゾチリル）ペプチドそれら自体は前Ｌ
ピ引用文献１）に記載の技法と同様の標準的技法により
製造できる。

式（Ｉ）のペプチド化合物は遊離ペプチドとして、また
はその塩として単離でき、よく知られており、当技術で
慣用の技法忙より式（１）のペプチドをその塩に変換で
き、およびその反対に１塩を遊離ペプ霊ドに変換でき、
さらにまた塩を別の塩に変換できることが認められる。

式（１）のペプチド化合物およびその医薬上で許容され
うる塩はヒトおよび動物医療で下痢および赤痢の処置に
、咳の抑止に、および痛みの防止および軽減に使用でき
る。痛みの防止および軽減における特定の例としては、
例示だけの目的で、軟組織損傷からの痛み、手術後期間
における痛み、分娩および分娩後の痛み、月経困難症の
痛み、神経痛、筋肉痛、関節炎およびリウマチ症状の痛
みおよび一般に筋骨格状態の痛みを包含する。

本発明のペプチド化合物および塩は経口、非経口（皮下
、皮肉、筋肉内および静脈内を含む）、直腸および局所
（皮膚、舌下および口腔内を、含む）からの選ばれた経
路によりヒトまたはヒト以外の摂取者に投与できる。化
合物の有効投与量の大きさは摂取者の種類、含まれる症
状およびその重篤度並びに投与経路を包含する多くの因
子により変わり、最終的には使用する医師または獣医師
の決定にあるが、所望の最終結果の主観性の観点から、
ヒト摂取者による自己投与も成る状態下では許容されう
る。

しかしながら、前記適応症の各々に対して、ヒトについ
ての有効投与量は０．５〜５０〜の範囲、さらに一般的
に１〜２５ｍ２の範囲、多くの場合に２〜１２．５ｍｙ
の範囲であり、特に適当な投与量は５雫である。（これ
ら全ての投与ｔ、は遊離ペプチドとして計算した；塩に
ついての数値は適当に調節する）。このような投与量の
投与は一日を通じて必要に応じて繰返すことができ、た
とえば−日に３回または４回繰返す。動物用には、たと
えばネコ、犬、牛、羊、豚および馬のようなヒト以外の
哺乳動物の処置には、前記投与量を受容動物の体重およ
び種類に関して獣医師の指示により増減される。

本発明の化合物はそのままの化学物質として投与できる
が、これらを医薬処方製剤として提供すると好ましい。

本発明の製剤は前記定義のとおりの式ｉｌ＋のペプチド
またはその医薬上で許容されうる塩を、１種または２１
ｆ１以上の許容されうる製剤用担体および場合によりそ
の他の治療成分とともに含有する。担体は製剤のその他
の成分と適合でき、およびその受容者にとって有害でな
いという点で「許容されうる」ものであるべきである。

製剤は経口、非経口（皮下、皮肉、筋肉内および静脈内
を含む）、直腸および局所（皮膚、舌下および口腔内を
含む）投与に適する製剤を包含するが、最適の投与経路
は、たとえば受容者の状態および種類によって変わる。

製剤は単位投与形で提供すると便利であり、調剤技術で
よ（知られている方法のいづれかにより製造できる。全
ての方法はペプチド化合物または塩（活性成分）を１種
または２種以上の補助成分を構成する担体と配合する工
程を包含する。一般に、製剤は活性成分と液体担体また
は微細固体担体もしくはその両方とを均一にそして密に
配合し、次いで必要に応じて、生成物を所望の製剤に成
形することにより製造する。

経口投与に適する本発明の製剤は、それぞれが既定量の
活性成分を含有するカプセル、カシェまたは錠剤のよ５
な分離した単位として：粉末または顆粒として；水性液
体または非水性液体中の溶液または懸濁液として：もし
くは水中油型液体エマルジョンまたは油中水型液体エマ
ルジョンとして；提供できる。活性成分はまた塊剤、舐
剤またはペーストとしても提供できる。

錠剤は、場合により、１稽または２種以上の補助成分と
圧縮または成型することにより形成できる。圧縮錠剤は
粉末または顆粒のよう１よ自由流動性形の活性成分を結
合剤、潤滑剤、不活性稀釈剤、潤滑性表面活性剤または
分散剤と混合して、適当な機械で圧縮することにより製
造できる。成型錠剤は不活性稀釈剤で湿潤させた粉末状
化合物の混合物を適当な機械で成型することにより形成
できる。錠剤は場合により被覆するか、または刻み目を
入れることができ、その中の活性成分のゆつ（すした、
または制御されている放出が得られるように処方するこ
ともできる。

非経口投与用の製剤としては水性および非水性殺菌注射
溶液（これは酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤および製剤を
対象受容者の血液と等張にする溶質を含有できる）並び
に水性および非水性殺菌懸濁液（これは懸濁化剤および
増粘剤を含有できる）を包含する。製剤は単位投与量ま
たは多回投与量容器、たとえば密封アンフ０ルおよびバ
イアルの形で提供でき、また使用の直前に注射用水のよ
うな殺菌液体担体の添加だけを要する凍結乾燥（真空凍
結乾燥）状態で貯蔵することもできる。すぐに使用でき
る注射溶液および懸濁液は前記した種類の殺菌粉末、顆
粒および錠剤から製造できる。

直腸投与用製剤はカカオ脂、ポリエチレングリコールま
たは硬質脂肪のような慣用の担体とともに座薬として提
供できる。

口の中、たとえば頬側または舌下に局所投与するための
製剤としてはショ糖およびアラビヤゴムまたはトラガカ
ントゴムのような風味付けした基材中に活性成分を含む
トローチ剤およびゼラチンおよびグリセリンまたはショ
糖およびアラビヤゴムのような基材中に活性成分を含む
ペストリイを包含する。

好適な単位投与量製剤は活性成分の前記したとおりの有
効投与量またはその適当な１部分を含有するものである
。

皮膚、すなわち真皮に局所投与するための製剤は軟膏、
ローション、ペースト、シェリー、スプレィ、エアゾー
ルおよび浴用油のような無水の形で提供できる。軟膏な
る用語には、たとえはパラフィン、ラノリン、ポリエチ
レングリコールおよびその混合物のような油性、吸収性
、水溶性およびエマルジョン形の基材を有する製剤（ク
リームを含む）が包含される。このような製剤は局所的
な痛゛み、たとえば関節炎およびリウマチ症状で生じる
痛みの防止および軽減に使用すると特に価値があり、必
要に応じて一日一回または二回以上、所望の区域に適用
できる。これらは本化合物な遊離ペプチドとして計算し
て、０．０５〜２（重量／重量）チの範囲、好ましくは
０．１〜１（重量／重量）チの範囲、最も好ましくは０
．２〜０．５（重量／重量）％の範囲の濃度で含有する
と都合がよい。

特に前記己だ成分に加えて、本発明の製剤が問題の製剤
の種類に関連して当技術で慣用のその他の助剤を含有で
きることは理解されるべきであり、たとえば経口投与に
適する製剤は風味剤を含有できる。

前記記載から、本発明が原則的にこれに限定されないが
、たとえば以下に示すような本明細書に記載されている
いずれかの特徴を含むものであることが理解される： （ａｌ　　前記定義のとおりの式（１１のペプチド化合
物およびその塩。

（旬　上記（ａｌによる化合物の製造について本明細書
に記載されている方法およびかくして製造された化合物
。

（ｃｌ　　ｊ＊乳動物、たとえばヒトの医療処置に使用
するための、前記定義のとおりの式＋１１の化合物およ
び七の医薬上で許容されうる塩。

（ｄｌ　　鎮痛剤として使用するための、前記定義のと
おりの式＋１１のペプチドおよびその医薬上で許容され
うる塩。

＋１３１　　下痢止め、抗赤痢および鎮咳剤として使用
するための、前記定義のとおりの式ｆＩｌのベプチＰお
よびその医薬上で許容されうる塩。

（ｆｌ　　許容されうる製剤用担体とともに、前記定義
のとおりの式（Ｉｌのペプチドまたはその医薬として許
容されうる塩を含有する医薬製剤。

（ｇｌ　　前記定義のとおりの式＋１１のペプチドまた
はその医薬上で許容されつる塩の非毒性有効量を哺乳動
物に投与することを含む、ヒトのよりな哺乳動物におけ
る痛みを軽減または防止する方法。

（ｈｌ　　前記定義のとおりの式（ＩＩのペプチドまた
はその医薬上で許容され５る塩の非毒性有効量を哺乳動
物に投与することを含むヒトのような哺乳動物における
下痢または赤痢の処置方法または咳の抑止方法。

（ｉ＋　　前記定義のとおりの式（Ｉｌｌ〜（ｖｌ）の
新規化合物、前記記載のようなそれらの製造方法および
かくして製造された化合物。

次側は本発明を説明するために示すものであって、本発
明をいずれの点でも制限するものと解釈されるべきもの
ではない。全ての温度は摂氏度である。

実施例 略語： ＤＭＦ　ニジメチルホルムアミド ＴＨＦ　：テトラヒドロフラン ＤＣＣＩ　ニジシクロへキシルカルがジイミｒＨＯＢＴ
　：　１−ヒ「ロキシペンデトリアゾールＨＭＭ　：　
Ｎ−メチルモルホリン ＤＣＨＡ　ニジシクロヘキシルアミン ＤＣＵ　ニジシクロヘキシル尿素 ＴＬＣ（メルクシリカゾルプレート）；次の溶剤系を使
用する： ８Ｉ　二ｎ−ブタノール／酢酸／水（３：１：１）（容
量による） ＳＩにメチルエチルケトン Ｓｌ：クロロホルム／メタノール／６２％酉Ｙ酸水沼−
１（１２０：９０：５）（容量による） Ｓ■：クロロホルム／メタノール（８：１）（容量によ
る） Ｓ■：クロロホルム／メタノール１０．８８０アンモニ
ア（１２０：９０：５）（容−緻による） Ｓ■：クロロホルム／メタノール／［２１西Ｙ酸水溶液
（１２〇二９０：４０）（容量による） Ｓ■ユニクロロホルムメタノール１０．８８［１７ンモ
ニア（１２０：９０：４０）（容量による） ＰＬＣ カラム：ｆ−パックス（ＺｏｒｂＰＬｘ　）　Ｃ−８；
４．６７１１１１　ｉ、ａ、　　Ｘ　２５ｃｍ移動相ニ
アセトニトリル１０．１ＭＩＮ’ｕ酸アンモニウム、ｐ
ｌ（４，０ 流速：２−７分 検　出：　２５４　ｎｍ 共通の中間体である保護されているジペプチドＢＯＣ−
Ｔｙｒ　−Ｄ　−Ａｒｇ　−ＨＣｌは配列■に示されて
いるとおりにして合成した。

配列■ ＴＨＦ　（２０ｔｔｔｌ　）中のＢＯＣ−Ｔｙｒｌ（１
，１８４ｆｉ　）に、ＴＨＦ　（５ｍ　）中のＮＭＭ　
（０，４２６ｇ）を加える。混合物を一２５℃に冷却し
、ＴＨＦ’　（５ｍｌ　）中のイソブチルクロロホルム
（，０，５４９Ｎ）で処理し、−１５℃で２分間反応さ
せるａ　ＤＭＦ（２０ｍｌ）および水（２プ）中のＤ−
Ａｒｇ−ＯＭｅ−２ＨＣ１”　（１，０ｊ？　）および
ＮＭＭ（０，３８７ｇ）の予め冷却した浴液を加え、混
合物を一１５°Ｃで２．５時間攪拌する。２Ｍ　ＫＨＣ
Ｏ３（４，６ｍｌ　＞を加え、０℃で３０分間攪拌する
。溶剤を減圧で除去し、残留物を酢酸エチルと水とに分
配する。有機相を水で２回洗浄する。

集めた水性抽出液のＰＨを酢酸の添加により７に調整し
、塩で飽和した後に、クロロホルム／ブタノール５二１
で、次いでクロロホルムで２回、抽出する。集めた有機
層を飽和塩類溶液で２回洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４
）　、次いで減圧で濃縮する。残留物を乾燥エーテルと
すりまぜる。収ｔ：１．２８ｇ（７４チ）。

（ＢＩ　ＢＯＣ−Ｔｙｒ　−Ｄ−Ａｒｇ　−ＨＣｌ保護
されているジペプチド（１，２８，Ｖ）をメタノール（
４０ｍｌ）および水（１０１ｎ！りに溶解する。

Ｍ　ＮａＯＨ（５，７ｍｌ　）を加え、混合物を室温で
６．５時間攪拌し、次いでＭ　ＨＣＩ　（５，７ｍｌ　
）の添加により中和する。メタノールを減圧で除去し、
残留水溶液を凍結乾燥させる。

粗生成物の水浴液をゾルパックスＣ−８カラム　□上に
吸着することにまり脱塩し、次いでメタノール勾配を用
いて浴出する。単離されたジペプチドを水に溶解し、１
当量のＭＨＣＩで処理し、次いで凍結乾燥させる。収量
：　０．７８　ＩＩ（５８％　）。

元素分析：Ｃ２ｏＨ３１Ｎ、０６・ＨＣｌ・２Ｈ２０に
ついて、計算値：　Ｃ４８，８３；　Ｈ６，９１；　Ｎ
　１４．２４実測値二Ｃ４９，０６；　Ｈ６，７９：　
Ｎ　１３．７３％ＴＬＣ上でｓ　Ｉ　％”　ｓ　Ｉ、ｓ
ｖによりシングルスポット　。

酸塩（例１） 配列２＝ （Ａｌ　　２−（４−ニトロフェニル）エチルエチルア
１−プロモー２−（４−ニトロフェニル）エタン〔アル
ｒリッチ（Ａ’１ｄｒｉｃｈ　）　：　１０９　＋　５
０ミリモル）をエタノール中エチルアミンの溶液（６６
％；２５ｄ；〜１８０ミリモル）とともに室温で一夜に
わたり攪拌する。この有機溶液を蒸発させて、結晶残留
物を得る。固体物質をエタノール（１０＋＋ｙＡ’）を
用いて採取する。濾液を濃縮するとＴＬＣで同一の生成
物の２次収穫が得られる。最初の生成物と一緒にする。

収量：５ｇ（３６％）；融点；２１１〜２１６℃。

生成物はエタノール−エーテルから再結晶により精製す
る。収量：　４．２５　ｇ；融点二２１２〜２１４°Ｃ
０ ＴＬＣテ均一（ｓｉ、ＳＶ）。

元素分析：　Ｃ４ＱＨ１５Ｎ２０２Ｂｒについて計算値
：　Ｃ４６−６５：　Ｈ５−５０；　Ｎ　１０．１８　
；　Ｂｒ　２９２９−０４Ｄ　（５０ｔｅｌ　）中のＢ
ＯＣ−ＧＩＹｌ（３，８９、！ｉ’　）およびＨＯＢＴ
　（６，００ｇ）の溶液を一１０°Ｃに冷却し、ＤＣＣ
Ｉ　（４，５８ｇ）で処理する。反応混合物を一５℃で
３０分間攪拌し、その後４−ニトロ７エネチルエチルア
ミン臭化水素酸塩（４，０８、Ｆ　）およびＮＭＭ（１
，５０ｇ）を加える。混合物を５°Ｃで７２時間攪拌す
る。ジシクロヘキシル尿素を濾去し、濾液を濃縮する。

残留物を酢酸エチル中に取り入れ、次いで５　％　Ｎａ
２ＣＯ３溶液で６回、水で１回、５チ酢酸溶液で２回、
次いで水で２回、洗浄する。酢酸エチル抽出液を乾燥さ
せ（Ｍｇ５Ｏ４）、次いで減圧下に蒸発させる。かくし
て得られた油状物をエーテルに溶解し、若干のジシクロ
ヘキシル尿素から濾取し、再蒸発させ、油状物（４，７
６１）を得る。生成物はベトロールとすりまぜることに
より固化できない。

室温で４５分間処理する。減圧下に濃縮し、乾燥エーテ
ルとすりまぜ、固体生成物を得る。収ｔ：３．６６．９
（９４チ）；融点＝１９１〜１９４’Ｏ。

元素分析：　Ｃｌ２ＨＩＢＮ３０３Ｃ’ｌについて、計
算値：　ｃ　５０．０９　；　Ｈ６，２６；　Ｎ　１４
．６１実測値：　Ｃ４９，８５；　Ｈ６，３８；　Ｎ　
１４．５６％ＤＭＦ　（２０ｍｌ）中のＢＯＣ，Ｔｙｒ
、Ｄ−Ａｒｇ、ＨＣｌ　（１，９７ｇ）の溶液に、ＨＯ
ＢＴ　（１，１３，Ｆ　）を加える。溶液を一１０℃に
冷却し、ＤＣＣＩ　（０，８６ｇ）を加える。混合物を
一５℃に６０分間保持し、次いで（１，２，！ｌｉ’）
およびＮＭＭ　（０，４２ｊｊ　）の浴液を加える。反
応混合物を５℃で７２時間攪拌する。ジシクロヘキシル
尿素を濾去し、濾液を減圧で濃縮する。粗生成物を酢酸
エチル（１５０罰）および水（２５ｍｌ）とに分配する
。有機相を水で５回抽出し、集めた水抽出液を酢酸エチ
ル／ｎ−ブタノ−”（５：１）２００ｍｌと６回振りま
ぜる。酢酸工チル／ブタノール抽出液を５％Ｎａ２ＣＯ
３１５０ｒｕｇで６回、５％クエン酸１００ｍｅで２回
、次いで水１００罰で２回、洗浄し、減圧で濃縮し、水
から２回、次いでエタノールから２回、再蒸発させる。

生成する泡状′物をエーテルとすりまぜる。

ＴＬＣ：ポーリイ（Ｐａｕｌｙ　）試薬（チロシン）お
よびサカグチ試薬（アルギニン）と反応する主スポット
。

酢酸塩 保護されたトリペプチドアミド（１，９０，Ｆ）を氷酢
酸（１５ＩＬｅ）および７＝：／−、＃Ｃ７，５ｄ）の
混合物に溶解する。この溶液を２　Ｍ　ＭＣＩ　／酢酸
（２２，５ｍｌ　）で室温で６０分間処理する。減圧で
濃縮し、乾燥エーテルとすりまぜ、得られた粗生成物を
水（２０ｄ）に浴解し、次いでエーテルで２回洗浄して
、残留アニソールを除去する。水性溶液をカルボキシメ
チルセルロースの５Ｘ５０ｃｉＩＬに適用し、直線状勾
配の酢酸アンモニア（ｐＨ５，１）で溶出する。主ピー
クをＣ−１８シリカカラムで脱塩し、ペゾチド生成物を
生成する。分析的ＨＰＬＣオヨヒＴＬＣテ純粋（ｓ　Ｉ
、　ｓ　Ｖｌ、　５Ｖｌｌ　）。

元素分析二〇２．Ｈ３８Ｎ８０６．２ＣＨ３Ｃｏ２Ｈ，
Ｎ２０について、計算値：　Ｃ５２，５４；　Ｈ６，７
８；　Ｎ　１５．８２実測値：　Ｃ５２，７４；　Ｈ７
，０６；　Ｎ　１５．５８チ２酢酸塩（例２） 酸塩＜７０８ｍ９）をエタノール（４罰）とＤＭＦ（Ｉ
　Ｍｇ　）との混合物に溶解する。１−アミジノ−６，
５−ジメチルピラゾール酢酸塩（２４６ｍｇ）およびト
リエチルアミン（０，２ｍ１）を加える。混合物を５５
℃で７時間、次いで室温で一夜にわたり攪拌する。溶剤
を減圧で除去し、酢酸エチルとすりまぜ、得られた粗生
成物をカルボキシメチルセルロースのカラムでクロマト
グラフィにより精製する。ＰＨ５，１で直線勾配（０，
００５Ｍ→０．５　Ｍ　）の酢酸アンモニウムにより溶
出する。生成物を含有する留分を集め、３回凍結乾燥さ
せ、揮発性緩衝剤を除去す゛る。

ＴＬＣ（ＳｔＸＳＭ、Ｓ　■ｌ　）は１つの主成分を示
した。ＨＰＬＣ（３０％アセトニトリル）はシングルビ
ークの存在を示した。

元素分析：　Ｃ２８Ｈ，ｎＮ１ｏＯ６，２Ｃ！Ｈ３Ｃｏ
２Ｈ，１，５Ｈ２０について計算（直：　Ｃ５０，５９
；　Ｈ６，７２；　Ｎ　１８．４４実測値：　ｃ　５０
．５２　；　Ｈ６，７２；　Ｎ　１８．３６％塩（例３
） 配列６： ＥＯＣ−Ｐｈｅ（４Ｎ０２）”　（１９，３３ｇ）をＤ
ＭＦ　ｉｃ　＃解し、−１５°Ｃに冷却する。ＮＭＭ　
（６，３０ｇ）およびインブチルクロルホーメート（８
，５１、Ｆ　）を加え、混合物を一１５℃で５分間攪拌
する。この溶液にアンモニアを１時間泡立てて通し、温
度をさらに１時間、−１５℃に保持する。反応混合物に
窒素を泡立てて通して過剰のアンモニアを除去し、次い
で溶剤を減圧で除去して、得られた固形物を酢酸エチル
と水とに分配する。有機相を５％クエン酸浴液、水、５
％ＮａＨＣＯ３、最後に水で洗浄する。

無水ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、残留する固形物を酢酸エ
チル／ベトロールとすりまぜ、１６．９４．９　（８８
％）を得る。

ＴＬＣ（８１，８１Ｆ３Ｖ）により純粋。

元素分析：　Ｃ４４Ｈ１Ｃ４４Ｈ１について、計算値：
　ｃ　５４．３７　：　Ｈ６，１５；　Ｎ　１３．５９
実測値：　ｃ　５４．４４　；　Ｈ６，１２；　Ｎ　１
３．５５％。

（ＢＩ　Ｈ，Ｐｈｅ（４Ｎ０２）、ＮＨ２，ＨＣＩＢＯ
Ｃ−Ｐｈｅ（４Ｎ０２）、ＮＨ２（１６，９ｇ）をアニ
ソ−＃（１５０ｍ／？）に懸濁し、Ｍ　ＨＣＩ　／酢酸
（５００ｄ）で処理する。室温で６ｏ分後に、混合物を
減圧下に６５゛Ｃで濃縮し、残留物を乾燥エーテルとす
りまぜる。

収量：１３．６Ｎ。

ＴＬＣ（Ｓ　ｌ、８Ｎ、ＳＶ）により純粋。

（ＣＩ　　ＨｏＥｔ　ｐｈθ（４Ｎｏ２）、ＮＨ２Ｈ，
Ｐｈｅ（４Ｎ０２）−ＮＨ２，ＨＣｌ　（１５−６ｇ　
）をエタノール（２００ｍｌ）に懸濁し、Ｎａｕｃｏ３
（１８，７ｇ　）で処理する。攪拌した懸濁液を加熱還
流し、ヨウ化エチル（４，４５ｄ）を加える。５時間還
流した後に、混合物を冷却し、次いで濾過する。濾液を
濃縮し、ベトロールとすりまぜると固化する油状物を得
る。この生成物はシリカデル上の乾式カラムクロマトグ
ラフィにより、ジクロルメタン中の５チメタノールで溶
出して精製する。精製生成物の収量：　２．７５　ｇ。

ＢＣ）Ｃ−Ｇｌｙｌ（２，０３、！ｉ’　）およびＨＯ
ＢＴ　（３，１３、！ｉ’）をＤＭＦ　（２０ｍｌ　）
に溶解し、溶液を一１０℃に冷却する。ＤＣＣＩ　（２
，３９１）を加え、混合物を一１０℃で３０分間反応さ
せ、その後ＤＭＦ中のＨ，Ｅｔ　Ｐｈｅ　（４Ｎ０２）
、ＮＨ２の溶液を加える。反応混合物を５℃で一夜にわ
たり攪拌し、追加量のＢＯＣ−ＧＩＹ　（２−０３７！
　）およびＤＣＣＩ　（２，５９ｇ）を加える。反応は
室温で４８時時間桁させる。ジシクロヘキシル尿素を濾
去し、濾液を減圧で濃縮し、′得られた油状物を酢酸エ
チルに溶解し、ジシクロヘキシル尿素から濾取し、５チ
ＮａＨｃＯ３で２回、次いで水で１回洗浄する。乾燥さ
せ、浴剤を除去した後に、無定形固形物４．４１　＆　
（９６％）を得る。

ＴＬＣ（８１，８Ｎ、ＳＶ）は生成物中に若干のジシク
ロヘキシル尿素が存在することを示した。

（ＥＩ　　Ｈ，Ｇｌｙ、ＥｔＰｈｅ（４ＮＯ２）、ＮＨ
２，ＨＣ１保護されたレペノチＰアミド（４，４Ｆ　）
をアニソール（２０ｄ）に浴解し、Ｍ　ＨＣＩ　／酢酸
（６０ｄ）で処理する。室温で３０分後に、混合物を濃
縮し、残留物を乾燥エーテルとずりまぜる。収量：３．
６９．！ｉ’（１００％）。

（ＦＩ　　ＢＯＣ−Ｔｙｒ、Ｄ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ、Ｅｊ
ＰｈＥｌ（４ＮＯ２）、ＮＨ２ＢＯＣ−Ｔｙｒ、Ｄ−Ａ
ｒｇ、ＨＣｌ　（ｉ、７７　ｊｉ　）、ＨＯＢＴ　（０
，９８Ｉ）およびＧｌｙ、Ｅｔ　Ｐｈｅ（４Ｎ０２）−
ＮＨ２，ＨＣｌ　（１，２０ｇ）ヲＤＭＦ　（３０ｍＪ
　）Ｋ溶解し、溶液を一１０’Ｃに冷却する。ＤＣ（Ｊ
　（０，７５、！ｉ’　）およびＨＭＭ　（０，３７ｙ
）を加え、混合物を５℃で７２時間攪拌する。

濾過し、蒸発させた後に１残留する油状物を酢酸エチル
／ｎ−ブタノール（５：１）とＮａＣ１で飽和した５チ
ＮａＨＣＯ３溶液とに分配する。有機相を上記混合物で
１回洗浄し、次いで減圧で凝縮する。

水から（２回）、次いでエタノールから（２回）再蒸発
させ、粗生成物を得る。生成物はさらに精製することな
く、次の工程に移す。

（ＧＩ　　Ｈ，Ｔｙｒ、Ｄ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ、Ｆｉｔ　
Ｐｈｅ（４Ｎ０２）、ＮＨ２，２酢酸塩 保護されたテトラペノチドアミド（２，１３，９）を室
温でアニソール（１０ｍＪ）およびＭＨＣＩ／酢酸（１
００ｍＪ）で４０分間処理する。蒸発させ、乾燥エーテ
ルとすりまぜると、粗生成物が得られる。これをカルボ
キシメチルセルロースの５×５゜αカラムに適用し、ｐ
）（５，１で直線状勾配の酢酸アンモニウムを用いて溶
出する。純粋生成物を含有する留分を東め、６回凍結乾
燥させる。

ＴＬＣ’　（Ｓ　Ｉ、　ｓＶＩ、８　■ｌ　）および分
析的ＨＰＬＣ’　Ｋ：より純粋。

元素分析：　Ｃ３２Ｈ４７Ｎ９０１１．２Ｈ２０ＶＣツ
いて、計算値：　ｃ　４９．９３　；　Ｈ６，６３；　
Ｎ　１６．３８実測値：　Ｃ５０，１８；　Ｈ６，３５
；　Ｎ　１６．３３％参考文献 １、　　　、Ｔ、Ａ、Ｃ，Ｓ、、７９．　６１８０（１
９５７）−２、Ｈｅ１ｖ、Ｃｈｉｍ、Ａｃｔａ、　　４
１．１８６７（１９５８）３、　　　Ｊ、　　Ｃｈｅｍ
、　　Ｓｏｃ、　　Ｊａｐａｎ、　　６２＋　　３１　
（１９４１）Ｋｈｉｍ、Ｐｒ１ｒ、５ｏｅｄｉｎ＋　　
（１９７９）＋　　５４３゜Ｈ，Ｔｙｒ、Ｄ−Ａｒｇ、
Ｇｌｙ、Ｅｔ　Ｐｈｅ（４Ｎ０２）、ＮＨ２２酢酸塩（
３２１〜）をエタノール（２ｆｉｌ）およびＤＭＦ（［
）、５ｍ１）に溶解する。１−アミジノ−６，５−ジメ
チルピラゾール酢酸塩（１０８ｍｌ）およびトリエチル
アミン（０，０９ｄ）を加え、混合物を５５℃で５時間
、次いで室温で一夜にわたり攪拌する。溶剤を除去した
後に得られた粗生成物をカルボキシメチルセルロースの
カラムに適用し、…５．１で直線状勾配（０，００５Ｍ
→０．５　Ｍ　）の酢酸アンモニウムを用いて溶出する
。精製したペプチドを反復凍結乾燥により単離し、ＴＬ
Ｃ（Ｓ　Ｉ　％８ＶＩ）およびＨＰＬＣ（３０％ア七ト
二トリル）により純粋な生成物を得る。

元素分析：　Ｃ２ｏＨ＋ｌＮ１１０フ−２ＣＨ３Ｃｏ　
２Ｈ−２−５Ｈ２０について、計算値：　ｃ　４８．２
９　；　Ｈ６，５８；　Ｎ　１８．７８実測値：　ｃ　
４７．９２　；　Ｈ６，２８；　Ｎ　１８．６１％次の
さらに別のペプチドをペプチド化学で標準的方法により
、前記例に記載の方法と同様にして製造する。全ての化
合物は別記しないかぎり、２酢酸付加塩として単離し、
確認した。

光学旋光値が示されていない化合物についての元素分析
値は次のとおりであった： 例６　計算値：　−ｃ、５３．１７　；　Ｈ，６，９７
；　Ｎ、１５．５０実測値：　−ｃ、５３．０３　；　
Ｈ，６，８９；　Ｎ、１５．５８例７　計算値ニーＣ，
５１，８１：　Ｈ，７，０６：　Ｎ、１６．９９実測値
：　−Ｃ，５２，００；　Ｈ，６，７６；　Ｎ、１７．
０＜５例１９　　計算値：　−ｃ、５１．８８　；　Ｈ
，６，８３；　Ｎ、１５．３４実測値：　−ｃ、５１．
５０　；　Ｈ，６，６９：　Ｎ、１５．７５例２０　　
計算値：　−ｃ、５４．６２　；　Ｈ，７，０５：　Ｎ
、１４．３９実測値：　−ｃ、５４．８０　；　Ｈ，６
，９９；　Ｎ、１４．５０例２８　計算値：　−ｃ、４
７．８８　；　Ｈ，６，４０；　Ｎ、１３．９６実測値
：　−Ｃ’、４７．６８　；　Ｈ，６，４８；　Ｎ、１
４．０８例番号　　　ＲＩ　　　　　Ｘ２　　　　　Ｒ
２Ｒ３５ＨＤ−ＡｒｇＣ２Ｈ５Ｈ ６ＨＤ−ＡｒｇＣ２Ｈ５Ｈ ７Ｈ２ＮＧ（：ＨＮ）　　　　Ｄ−Ａｒｇ　　　　Ｃ２
Ｉ（、ＨＢ　　　　　　ＨＤ−Ａｒｇ　　　　Ｃ２Ｈ５
Ｈ９Ｈ２ＮＣ（：ＨＮ）　　　　Ｄ−ＡｒｇＣ２Ｈ５Ｈ
１０ＨＤ−Ａｒｇｃ２）（５Ｈ １１ＨＤ−ＡｒＦＪ　　　　Ｃ２Ｈ５ＣＯＮＨ２１２Ｈ
Ｄ−Ａｒｇｃ）（３ＣＯＮＨ２ １３ＨＤ−Ａｒｇ　　　　Ｃ２Ｈ３Ｃ’０ＮＨ２１４Ｈ
Ｄ−Ａｒｇ　　　　Ｃ２Ｈ５ＣＯＮＨ２１５ＨＤ−Ａｒ
ｇ　　　　Ｃ２Ｈ，ＣＯＮＨ２１６ＨＤ−Ａｒｇ　　　
　ｃ、）（、、ＣＯＮＨ２１７ＨＤ−Ａｒｇｃ２Ｉ（５
Ｈ １８ＨＤ−ＡｒｇＣ２Ｈ５Ｈ ｎｚＩＺ２〔α〕Ｄ（α、〕２５ ４６ （ｃ＝１．メタノール） １　　　４−Ｆ　　　　　　Ｈ＋３５．０°　　　　＋
４０．６゜２　　　　　４−Ｎｏ２　　　　　Ｈ ｌ　　　　　　４−Ｆ　　　　　　　　Ｈｏ　　　　　
４−Ｎｏｚ　　　　Ｈ＋３４．８°　　　　　＋４１．
１　。

Ｑ　　　４−Ｎｏ２Ｈ＋２６．４°　　　＋３１．７゜
０　　　４−Ｆ　　　　　Ｈ４３７，４°　　　＋４４
．３　ｕｌ　　　　４−ＣＦ３Ｈ−２７，７°　　　−
３２，７゜１　　　４−Ｎｏ２Ｈ＋３２．０°　　　＋
３７．６８１　　　４−Ｆ　　　　Ｈ−７，５°　　　
−９，０８１２−Ｆ　　　　　Ｈ−１１，１°　　　−
１３，７゜１　　　３−Ｆ　　　　　Ｈ−３，９°　　
　−４，６゜１　　　４−ＣＩ　　　　Ｈ−３１，１°
　　　−３８，１゜０　　　２−Ｎｏ２Ｈ＋３６．３°
　　　＋４４．２゜０　　　　２−Ｆ　　　　　　Ｈ＋
３８．７°　　　　＋４２．７６例番号　　　　Ｒｘ　
　　　　Ｘ２　　　　　Ｒ２Ｒ３’１９　　　　　　、
　ＨＤ−Ａｒｇ　　　　Ｃ２Ｈ５Ｈ２０ＨＤ−Ａｒｇ　
　　Ｃ２Ｈ，Ｈ ２１Ｈ２ＮＣ（：ＨＮ）　　　　Ｄ−Ａｒｇ　　　　Ｃ
２Ｈ５Ｈ２２Ｈ２ＮＣ（：ＨＮ）　　　　Ｄ−Ａｒｇ　
　　　Ｃ２Ｈ，Ｈ２３Ｈ２ＮＣ（二ＨＮ）　　　　　　
　Ｄ−Ａｒｇ　　　　　　　Ｃ２Ｈ５Ｈ２４Ｈ２ＮＣ（
：ＨＮ）　　　　Ｄ−ＡｒｇＣ２Ｈ５Ｈ２５ＣＨ３Ｄ−
Ａｒｇ　　　　Ｃ２Ｈ５Ｈ２６ＨＤ−ＡｒｇＣ２Ｈ５Ｈ ２７Ｈ２ＮＣ（：ＨＮ）　　　　Ｄ−Ａｒｇ　　　Ｃ２
Ｈ５Ｈ２８ＨＤ−Ａｒｇ　　　　Ｃ２Ｈ５ＣＯＮＨ２２
９ＨＤ−Ａｒｇ　　　　　ｃ２Ｈ５Ｈ３０Ｈ２ＮＣ（：
ＨＮ　）　　　　Ｄ−ＡｒｇＣ２Ｈ５Ｈ３１ＨＤＡｒｇ
　　　　　Ｃ２Ｈ５Ｈ ５２Ｈ２ＮＣ（：ＨＮ）　　　　　　Ｄ−八ｒ［ｌ！、
　　　　　Ｃ２Ｈ５Ｈ３！ｌ　　　　Ｈ２ＮＣ（：ＨＮ
）　　　　Ｄ−Ａｒｇ　　　Ｃ２Ｈ５Ｃ０ＮＨ２ｎ　　
　ＺＩ　　　Ｚ２　　〔α〕も５　　〔α〕ハ：６（０
＝１．メタノール） １　　　　　　２−ＮＯ２Ｈ ｌ　　　　　　　２−Ｆ　　　　　　　　　Ｈｏ　　　
　２−Ｎｏ２Ｈ＋２６．６°　　　＋３３．０゜０　　
　２−Ｆ　　　　　Ｈ＋２５．８°　　　＋３０．６’
１　　　２−Ｎｏ２Ｈ＋１７．０°　　　＋２４．６゜
１　　　２−Ｆ　　　　　Ｈ＋２０．７°　　　＋２７
．６゜１　　　　４−Ｎｏ２　　　　Ｈ＋３２．８°　
　　　−１−５９，１゜１　　　４−Ｎｏ２２−Ｎ０２
＋２７．１°　　　＋３１．８゜１　　　４−ＮＯ２２
−Ｎｏ２＋２２．２°　　　＋２６　、２゜１　　　　
　４−Ｃ１３−Ｃ１ １４−ａｘ　　　５−０１＋５５．”ｒｏ　　　−１−
３９、２０１４−Ｃ１３−Ｃ１＋２３．７°　　　＋２
６．９゜１　　　　４−Ｂｒ　　　　　　Ｈ＋３１．４
°　　　　＋３８．８６１　　　　　　４−Ｂｒ　　　
　　　　　Ｈ＋２２．９　°　　　　　　＋５１．２’
１　　　　　　４−Ｆ　　　　　　　　　Ｈ−１２，８
°　　　　　　−１４，３６体）　　　　　　ＴＦＡ １ Ｄ−リジン塩酸頃（１０，９）’＆ＭＮａＯＨｉ液（５
５酩）にｆａ　ｄし、Ｓ−エチルトリフルオロチオアセ
テート（１１ｍｌ　）で処理する。混合物を室温で７時
間、ゆるやかな窒素流下にイ放しく攪拌する。室温で一
夜にわたり放置した後に、混合物暑氷中で冷却し、生成
物を濾取し、少量の冷水で、次いでエタノールで洗浄す
る。Ｐ２Ｏ３上で乾燥させる。

収量：４．５．＠。

ＴＬＣ（ｓ　１、’８１１１　）上でシングルスポット
。

元素分析：　Ｃ３Ｈ１３Ｎ２０３Ｆ３について、Ｉｔｌ
ｌｌｌＥ：Ｃ３９，６７；Ｎ５．４１　　；Ｎ１　１．
ｄ７実聞ｊ１直　：　　Ｃ３９，６９；　　Ｈ５，５５
；　　Ｎ　　１　１．４　３註）　　ＴＦＡはトリフル
オロアセチル基を表わす。

（Ｂ’　　　　　　　　ＴＦＡ ＢＯＣ−’Ｉ’ｙｒ、　Ｄ−Ｌｙｓ−ＯＨＢＯＣ−Ｔｙ
ｒ−ＯＨ（５，１１１）　ＭよびＮ−ヒドロキシ丈りシ
ンイミド（２，ＬＩ　９．９　）　’２ジオキサン（２
０ｍｌ）　、酢ｅ：ｒ−ｆル（５ｍｌ）ＭよびＤＭＦ（
Ｉｏｍｌ）の混合物に溶解する。溶ｉを一５″Ｃに冷却
し、＋ＤＣＣＩ　（３，７５ｊ？　）で処理する。混合
物を一５′Ｃで１時間攪拌し、次いで１時間の間に呈縣
Ｋまで温める。ＤＣＵを濾去し、酢酸エチルで洗浄する
。

集めた濾液を水で冷却し、Ｎ２０　（９ＣＪｍｌ）ｊぜ
よび物を室温で一夜にわたり攪拌し、濾過し、減圧ドに
濃縮して、揮発性ｆｒ機溶剤を除去する。生成するＤＭ
Ｆ水浴液？水で稲沢し、固形クエンばの姫加によりｐ）
１３．５に調整する。生成物を酢ばエチル（ＩＸ１５０
ｍ１ｇよび２×７５ｍ１）で抽出し、集めた有機抽出液
？：５％り！７１！ｌｌ！（５０１ｎｌ）で１回、次い
で水（谷５０１ｎｌ）で２回洗浄し、次いで無水ＭｇＳ
　Ｏ４上で乾燥させ、濃縮して、油状ｖＩＪヲ得る（　
１０．６．９　）。生成物は確認しない。

前記工程からの生成物をメタノール（５６ＪＩＬｌ）に
溶解し、ＭＮａＯＨ（５６Ｍ）で処理する。室温で２０
時間後に、鎧をＭ　ＨＣＩの険〃ｕにより７．０に調整
し、次いでメタノールを減圧で除去する。生成するｍ液
を水で２５０１ｄに稀釈し、Ｍ　ＨＣ’ｌでＰＨ４，０
に酸性化する。未反応原料物質を酢酸エチル（６×１Ｄ
Ｏ１ｎｌ）で洗出し、生ＫｅｌＪｋ　Ｃ１８−シリカの
２．５×５０ｃｍカラム上に吸庸させ、水で溶出して塩
ヲ除去し、次いでメタノールで溶出することにより単離
する。メタノール浴出Ｍ’ｌ譲ｍし、生成する残留物を
水に浴解し、次いで凍結乾燥させる０収漬：５．２１．
Ｐｏ ＴＬＣ（５）ＩＩ）で純粋。

元素分析’　Ｃ１！０Ｈ３ＩＮ３０ｅｌ°１．５　Ｎ２
０　ｖｃ　ツいテ、計算１直　：　　Ｃ５５，（Ｊ　　
４　　；　　Ｈ７，８０；　　Ｎ　　９．６　３実ｍＩ
ＪＷｉ：Ｃ５５ＡＪ２；　　Ｈ７，６４：　　Ｎ　９．
７　６（Ｄ）　　ＢＯＣ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｈａｒ−ＯＨ−
ＨＣｌ工”　　”　（２０ｒｎｌ　）中Ｋ　ＢＯＣ’−
Ｔｙｒ、Ｄ−Ｌｙｓ−ＯＨ（３−５，９）（’ＪｆＪｉ
’（［を１−７　ミシ）−５，５−ジメチルピラゾール
酢は頃（２，１１１）ｔａよびトリエチルアミン（１，
７ｍ）で処理する。混合物を６５０で７．５時間床持し
、次いで室温で一夜にわたり放置する。溶剤を除去した
後に、残留物を４％酢酸（２５７ｉｌ）と酢酸エチル（
２０／ｎｌ）とに分配する。

水性相を分離採増し、酢酸エチル（２０ｍＬ）で再洗浄
し、カルボキシメチルセルロースの５×４７−カラムに
適用する。０．００５　Ｍから０．１Ｍまでの酢酸アン
モニウムでｐＨ５，１で勾配溶出し、次いで凍結乾探さ
せ、粗生成物６．６１を得る。この生成物を０８−シリ
カ上の逆転相クロマトグラフィによりさらにイ＃製し、
最後に頃酸頃に変懐する。

収置：２．８６．？０ ’Ｉ’ＬＣ：　Ｓ　１、Ｓ　Ｉｌｌで１つの主要成分。

元素分析：　Ｃ２７Ｈ３，Ｎ５０６Ｃ１，Ｎ２０につい
て、肘算埴：　Ｃ４９，８５；　Ｈ７，１２；　Ｎ　１
３．８５実測値：　Ｃ４９，６９；　Ｈ７，Ｃ２；　Ｎ
　１４．０６゜ＢＯＣ−Ｔｙｒ、Ｄ−Ｈａｒ−ＯＨ，Ｈ
Ｃｌ　（４８７，５ｍｙ　）　ＭよびＨＯＢＴ　（２７
０■）　’＜ＤＭＦ　（１（Ｊｄ）　Ｋｇｍｆル。

ｍ　ｌ［Ｙ　−５”ＯＫ冷却し、仄イでＤＣＣＡ　（２
Ｌｌ　６ｍ１）で処理する。混合物ｖ　Ｏ’Ｕに６Ｕ分
間保持し、次いでＧ１ｙＪ丁（Ｅｔ）、ＣＨ２，ＣＨ２
＜甲＝巨り）−Ｎｏ２．Ｈｃｔ　（２８７，５ダ）Ｊｄ
よびＨＭＭ　（１０１〜）で処理し、＋５′Ｃで７２時
間攪拌する。ＤＯＵ　Ｙ除去し、減圧で濃縮した後に、
残留物を５チクエン酸溶液Ｃ７５１１Ｌｌ）と酢酸エチ
ル（５０１１１１）とに分配する。分離した水注相馨酢
咳エチル（２ｘ５０１ｎｌりで洗浄し、ＰＨを固形に２
ＣＯ３の添加により６．０に調整する。生成物を酢酸エ
チル／ｎ−ブタノール４：１（３Ｘ７５廐）中に抽出し
、集めた抽出孜を濃縮乾燥させ、次いで水から１回、仄
いでエタノールから６回再蒸発させ、固体泡状物ン得る
。収量：８００（夕。

ＴＬＣ：　Ｓ　Ｉ、　８１１１で１つの主要成分。

ｄｉａｃｅｔａｔｅ 保膿さ１１．たベプチｌ’（８００η）をアニソール（
５ｄ）と酢酸（１０＋ｍ）との混合物に浴解し、酢酸中
の２ＭＨＣｌ　（１０ｆｎｌ）で処理する。冨温で６０
分後に、浴剤を減圧で除去し、生成する残留物を水に浴
屏し、次いでエーテルで洗浄する。粗生成物ゼカルボキ
シメチルセルロース上でのイオン交換クロマトグラフィ
により精製する。

ＴＬＣ：　Ｓ　ＩＸＳ　Ｖｌテ純粋。

元素分析：　Ｃ２８Ｈ，ｏＮ８０６．２Ｃ’ｆ（３Ｃｏ
、Ｈ，０，５Ｈ８Ｏにつ０て、 計算１１１ｉ　：　Ｃ５３，８６；　Ｈ６，８７；　Ｎ
　１５．７１実測値：　Ｃ５３，５ゾ；　Ｈ６，９８；
　Ｎ　１５．ゾ２゜〔α］　　　＋３６．６°） ）（ｃ＝１．メタノール 〔α）　、６＋　４４．６°） Ｉｎ（２６６ｍ？）０）：ｒ−１／−／しく　２ｍｅ）
中ノｍ　７ｆ、’ｘ１−アミジノ−６，５−ジメチルピ
ラゾール６１ｔ４（ｉｉ　　５　ηｒｙ　　）　　Ｍ　
　よ　び　ト　リ　エ　チ　ル　ア　ミ　ン　（０，１
ｍｌ）で、全体で１０時間６０’Ｕで処理する。エタノ
ールを除去した後、粗生成物をＨ２０と酢１投エチルと
に分配する。水ｍ欣をカルボキシメチルセルロースのカ
ラム（２，５×４５ｃ１ｎ）上で４ぎ装する。

ＴＬＣ：　８１ＸＳ　ＩＩ、　　Ｓ　Ｖｌｌで縄枠。

元素分析’　Ｃ２９ＨｔａＮ１ｏ０６・２ＣＨ３ＣＯ，
Ｈ，２，５Ｈ２０について、 計：ｌ！埴：　Ｃ５０，０６；　Ｈ６，９５；　Ｎ　１
７．７０実測値：Ｃ５０，２１；Ｈ６，７２；Ｎ１７．
６５゜ＤＭＦ　（１５ｍ１）中のＢＯＣ−Ｔｙｒ、Ｄ−
Ａｒｇ、ＯＨ，ＨＣｌ（１，４２、？　）、）ＩＯＢＴ
　（０，８１！？）、Ｈ−Ｇｌｙ−ＯＢｚｌトルエンス
ルホネート（１，０６，９）ＸよびＮＭＭ（０，３０３
、？　）のＩ？Ｈ（ｉ火−５℃に冷却し、ＤＣＣＩ（０
，６１８、Ｐ　）　”Ｃ−処理する。混合’１ｍ’Ｙ４
”Ｏで２４時間撹拌し、次いで濾過し、濾液馨減圧で濃
縮する。残留物を酢酸エチル（１００ｆｆｉｌ）と水冷
Ｍ　ＨＣＩ（１００ＩｒＬｌ）とに分配する。水性Ｗ　
’ｌ酢酢酸チル（１ｏｕ）ｎｌで１回、５０　ｍｌ；−
Ｃ：２　回）　テＪｌｌｊ　Ｌ、集めた有機抽出液を５
％ＮａＨＣＯ３（３ｘ　５０　ｍｌ　）　ｕよび飽オＤ
ＮａＣ１（Ｉ　Ｘ　５　Ｑｒｎｌ　）で洗浄し、乾燥サ
セ、次いでｉＡ元させ、無足形固形物′！ａｌ−得る。

収量：１．４４１／　。

生成物は確認しない。ＴＬＣはＩ）ＣＵの存在を示した
。

（Ｂ）　　　ＢＯＣ−’ｒｙｒ、Ｄ−Ａｒｇ、Ｇ１ｙ−
ＯＨ，ＨＣ１上記ペンツルエーテル（１，４４，？）Ｙ
メタノール＜５０ｍ１）に１１！　ＩＮし、１０　％ハ
ラシ’ｙ　ム−木ｆＲ紳媒（１４０１夕）の存在Ｆに水
素添加する。４時間後に、触媒を濾去し、浴剤を！威圧
で＃発させ、生成物乞エーテルとすりまぜる。収量：１
．１５．９０ＢＯＣ−Ｔｙｒ、Ｄ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ、Ｏ
Ｈ，ＨＣｌ　（５５（Ｊ−５ｒｎｙ　）　。

ｆ（ＯＢＴ　（２７０呼）　、　ＨＮ、（Ｅｔ）、ｃ’
Ｈ２，ＣＨ２＋Ｎｏ２・ＨＢｒ　（２７５η）ｌ／　）
　’：Ｊ６よびＥｌ、３Ｎ　（１０１ｍ９）　ｋＤＭＦ
（ＩＱｍｌ）に俗解する。溶液を−５’Ｃに冷却し、Ｄ
ＣＣＩ　（２０６’Ｗ）で処理する。混合物’ｆ　５　
Ｃで７２時間で攪拌し、前記と同様に仕上げる。収量：
６４０雫。

２酢酸塩 上記の保瞳されたペプチド（６４Ｕ　ｒｒＩ！７）をア
ニソール（１１ｄ）と酢酸（１６ゴ）との混合物に溶解
し、酢酸中の２　Ｍ　ＨＣＩで処理する。室温で６０分
後に、反応混合物を減圧で濃縮し、残留物を水とエーテ
ルとに分配する。粗生成物を凍結乾燥により水性ノーか
ら単離し、カルボキシメチルセルロース上のイオン父換
り巳マドグラフィにより精製する。

ＴＬＣ：　Ｓ　Ｉで純粋。

ＨＰＬＣプロフィールは別の経路により単離した生成物
と同一であった。

元素分析：　Ｃ２７Ｈ３８Ｎ８０６．２ＣＨ３ＣＯ２Ｈ
２Ｎ、Ｈ２Ｏについてｇｆ算１直　：　　Ｃ５２，５４
；　　Ｈ６，７８；　　Ｎ　　１　５．８　２実演１月
直　：　　Ｃ５２，４６；　　Ｈ７，５２；　　Ｎ　　
１　６．０　８（汐り　６７　） ｊＡＪＨ−ｇｔ、　ｐｈ、ｅ（４ＮＯ２）−０Ｈ−ＨＣ
ＩＨ−Ｅｔ　ｐｈｅ（４ＮＣｈ）、ＮＪ　（５，＠）　
？６　Ｍ　ＨＣＩ’　（１００Ｉｎｌ　）中で４時間加
熱還流する。淡醒色Ｍｉｄ冷却させ、−夜の間冷蔵して
、生成＊　４．６　ｇ　ｗオフ−ホワイト針状物として
得る。生成物（工２７２〜２７５”υで分解をともない
溶融した。

元素分析二〇〇、Ｈ工５Ｎ２０４Ｃ１について、計算値
：　Ｃ’　４８．０９　；　Ｈ５，４６；　Ｎ　１０．
２０実測値：　Ｃ４８，２２：　Ｈ５，４７；　Ｎ　１
０．２０（Ｂ）　　　Ｈ−ｇも　ｐＨｅ　（４ＮＯ２）
−０Ｍｅ、ＨＣｌメタノール（５ｏｉｇ）を塩化チオニ
ル（２ｙ）で−１５”Ｃで処理し、次（ＸでＨ−Ｅｔ　
Ｐｂｅ　（４ＮＯ２）−０Ｈ。

ＨＣＩ　（４，１２，９）を加える。混合物を２０′Ｃ
で２時間攪拌し、次いで全部で２４時間、Ｎ　ｄｌＦ、
させる。

溶剤を減圧で除去し、粗生成物をＭｅＯＨ（４０ｍｌ；
）ぢよびエーテル（４Ｑ　ｍｌ；　）から結晶化する。

収量：３．１０ ＢＯＣ−Ｇｇｒ　（３，０１１）　ＭよびＨＯＢＴ　（
３，５１）をＤＭＦ　（２０ｍｌ　）に溶解する。溶液
を水中で冷却し、ＤＣＣＩ　（３，３ｇ）で処理する。

３０分後に、ＤＭＦ（３０Ｍ）ｊ＝ｆよび水（ｌ　ｍｌ
　）中υ）　Ｈ−Ｅ、ｔ、　Ｐｈｅ　Ｃ４Ｃ４Ｎ０２）
−Ｏ，ＨＣｌ　（５，３１）　ＭよびＮＭＭ　（１，２
７、？　）の１け加え、反応混合物をＯＣで１時間、次
いで室温で一夜にわた９（１を拌する。ＴＬＣは反応が
完りしていないことを示す。追加の墳のＤＣＣＩ　（１
，１８１）を加え、混合物をさらに２４時間攪拌する。

ＤＣＵを濾去し、ＤＭＦを減圧で蒸発させる。残留物を
酢酸エチル中に取り入れ、２時間冷蔵する。

ＤＣＵを濾去し、酢酸エチル溶液を５％ＮａＨＣＯ３で
４回、１０％クエン離で２回、水で２回、次いでプライ
ンで１回、洗浄する。浴放を乾媚させ、濃縮して、油状
物２．６９１を得る。この生成物はさらにイａ製するこ
となく次の工程で使用する。ＴＬＣに若干のＤＣ’Ｕの
存在を示した。　　　゛（Ｄ）　　Ｈ−Ｇｌｙ、ＥｔＰ
ｈｅ　（４ＮＯ２）−０Ｍｅ、ＨＣ１上記の保護された
シペゾチド（２，３、＠　）　’２酢戚中のＩ　ＭＨＣ
Ｉ　（３３ＩｎＩ３）で’ｊｊＬｆｔＡで１時間処理す
る。

減圧で濃縮後に得られた残留物乞水に溶解し・　エーテ
ルで６回洗庁し、次いで凍結乾燥させ金。収量：１．４
２．Ｐａ ＤＭＦ　（１７ｔｒｌ　）中のＢＯＣ−Ｔｙｒ、Ｄ−Ａ
ｒｇ、ＨＣｌ　（１，’７’６、Ｓ’）ｊ＝ｉよびＨＯ
ＢＴ　（１，１１ｇ　）の溶液を水中で冷却し、ＤＣＣ
Ｉ　（０，９３１）で処理１−る０混合物を０　”Ｃで
１時間攪拌し、次いでＤＭＦ　（１７ゴ）中のＨ−Ｇｌ
ｙ、ＥｔＰｈｅ　（４ＮＯ２）　−０Ｍｅ、ＨＣｌ　（
１，４２、Ｐ）１６よびＮＭＭ　（０，４２１）の溶液
で処理する。室温で２４時間後に、追加の量のＤＣＣＩ
　（０，４２１１）を加え、混合物乞さらに２４時間攪
拌する。常法により仕上げて、生成物６，６ｊを得る。

（ 上記の保鰭されたナト２ベノチげメチルエステル（３，
６，９）を慣用のやり方で脱保護基化し、カルボキシメ
チルセルロース上のクロマトグラフィにより精義する。

収量：１．５５＃。

元素分析：　Ｃ２７Ｈ３８Ｎ８０６．２ＣＨ８Ｃｏ、）
１．１．５Ｈ３Ｏについて＼ 目し７４．１直　：　　　Ｃ５１，０９；　　　）Ｉ　
　６．６　２　　；　　　Ｎ　　１　　４．４　４夷御
Ｈ直　：　　Ｃ５１，１５；　　Ｈ６，４４；　　Ｎ　
　１　４．７　　Ｕテトラペプチ１メチルエステル（０
，５１！　）　ＹメタノールＣ２５１ｒｌｌ）中に浴解
する。溶液を水中で冷却し、無水アンモニアで飽和する
。フラスコを密封し、室温で２４時間保持する。ＴＬＣ
’は反応の完了２示した。過剰のアンモニアゴロよびメ
タノールを蒸発により除去し、得られた粗生成物をカル
ボキシメチルセルロース上のイオン交換クロマトグラフ
ィにより精製する。生成物はＴＬＣｊ６よびＨＰＬＣに
より、別の経路により＃造された生成物と同一であった
。

元素分析：　Ｃ２８Ｈ３，Ｎ、Ｏ，，２ＣＨ３Ｃｏ２Ｈ
，ｌＨ２Ｏについて、計算値：　Ｃ５１，１ろ；　Ｈ６
，５２；　Ｎ　１６．７８実測値：Ｃ５１，２１；Ｈ６
，４３；Ｎ１７．０６楽理学的実験結果 （Ｎ　熱板試験 雄のマウスＣＣＦＬＰ　ａ　；バッキングｇよびクルチ
Ａ／　（Ｈａｃｋｉｎｇ　ａｎｄ　Ｃｈｕｒｃｈｉｌｌ
　）　］　’（５５”ＣＥの水浴中につり下げた鋼板底
パースペックス（ｐｅｒｓｐｅｘ）稍［１匹づつ入れ、
肢を振るかまたはなめるようｌ工不快のぎざしについて
視察する。反応時間（瑣高６０秒まで）を記録する。次
に、１群５匹の動物に被験化合物または塩類溶液（０，
８５％）対照のどちらかを皮下注射により与える；試験
は処理後の１５分に繰返す。被験化合物についてのＥＤ
５゜値を既定の数値の２倍である処置後反応時間を有す
る動物の数から計算する。

（１）酢酸：　１　／＃　５匹の雌のＣＤＩマウス〔チ
ャールス　リバー（Ｃｈａｒｌｅｓ　Ｒ，１ｖｅｒ　）
　］に被験化合物または塩類溶孜（０，８５優）対照の
どちらかを西下注射により与え、１５分後に０．６％酢
酸を２５ｍ９　／　ｋｇの投与量で腹腔内に注射する。

さらに２０分仮に、刺戟により＠発された引っかき動作
またはもがき動作を２．５分間の間、数える。もがき／
引っかきは腹部の収縮にともなう後肢の伸張として確認
する。

（１１）　　フェニルベンゾキノン（ＰＢＱ　）　：こ
の試験は酢酸ン使用する試験と同様の方法で行なうが、
もがき／伸張動作を数える期間はＰＢＱ刺戟の投与後１
０分で始める。ＰＢＱ刺戟に２．５　ｍ９　／ゆ投与量
Ｓよび１Ｑｒｎｌ／ｋｇの服用量で与える。

被験化合物のＥ０５０１直は直線回帰分析（ｌｉｎｅａ
ｒｒｅｇｒｅｓｓｌｏｎ　ａｎａｌｙｓｉｓ　）　Ｙ使
用して、対照に比較して半分の数のもがき／伸張を示１
−投与量として６Ｆ舅する。

１群６匹のｊｒｉのＴＦＷ　マウス〔タック（Ｔｕｃｋ
））にＮ−メチルナロルフイネ（１６ＺＩＩ＆／ｋｇ）
または塩３Ａ溶液（０，８５％）対照のどちらか？腹腔
内注射し、２０分後に被験化合物の＠傾浴液（１０ダ／
に１；皮下投与）乞、さらに６０分後に、０．６倦酢ｅ
　（２５１ｎｌ／に９　：腹腔内投与）を投与する。１
＃Ｐ当りのもがき／伸張の総数を酢酸の投与後の１５分
から始めで５分間の間、側だする。直線回帰分析法を使
用して、被験化合物のＥＤ５ｏ　ｆｉをそのための投与
比率、すなわち＃！４級化合物の存在Ｓよび不存在下に
Ｓいてそれぞ２”Ｌ均等な抗侵害受Ｇｔ占注作用（ａｎ
ｔ、１ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔ、　）　
Ｙつるに要する化合物の投与量比率、とともに計算する
（＠記（Ｂ）に定義したとぢりに計算する）。

の）　埴咳活注 この試験方法はＢｏｕｒａ等により　Ｂｒ、　Ｊ　、　
Ｐｈａｒｍａｃ、。

３’？／１（１９７０年）２２５に記載の方法の変法で
あり、モルモットに被験化合物を０．８５係（Ｍ量／垂
量）塩類ｍ液中の溶液として皮下投与した後の３０分に
、６０％クエン酸含何エアデルを与え、１２．５分間さ
らした間の咳の数を数える。

ＥＤ５　ｏ値（塩類溶液処置対照と比較して咳の数を５
０係減じるに要する投与量）を直線回帰分析法を用いて
計涛−する。

結果を次表に、雫化合物／ゆ体重として、ぢよび場合に
より遊離ペプチドとして示す。表中で、ＭＥ　＆工効果
がないことを示し；　ｐ、ｏは経口である。

畳は被験化合？＋を酢酸／　ＰＢＱの投与前、６０分に
投与したことを示し：養臀は試験を処置後の６０分に繰
返したことを示す。

（Ｂ）も 被験イし、物　　　　（Ｎ熱板　　　　酢酸デキストロ
ゾロホキシフエン　　　　２５．９４・２インドメタシ
ン　　　　ＨＥ　＠　１００モルフイネ　　　　　　　
　１．３　　　　　Ｕ、４５蒼ペンタゾシン　　　　　
　ＮＥ　＠　１００　　　　２−３例　　Ｉ　　　　　
　　　　　　ＮＥ　＠１００　　　　　１４．０ｐ−ｏ
、３０．６十 汐！Ｉ　　　　２　　　　　　　　　　　　　　　　Ｎ
ｇ　　＠　５ｇ例　４１・５　　　　０．ＯＵ９ボ ＠　ＩＬＩＯ蒼 がき　　　　　　　　　（Ｑもかき ２．６　　　　６−９　　　６．８　　　１．０［Ｊ、
９ ６．２　　　　１２．５　　　２．８　　　４．５　　
　３．０ｐ、ｏ、４５．５蒼 ０．１８　　　　１．２　　　０．１２　　　９．６　
　　　Ｌｌ、０６＝ｐ、ｏ、　　１０．０蒼 ０．０２　　　　　Ｕ、０８　　　０．０３　　　３．
４　　　　［Ｊ、ＵＬｌｌｐ、ｏ、１４−ｔＪ＋ ０、ＬｉＯ２Ｕ、ＬｉＯ７Ｕ、Ｏ［Ｊｌ　　　５．Ｉ　
　　　Ｏ，Ｕｌｐ・ｏ、１．９＋ ［］、Ｌ１８　　　　０．ｔＪｌ　　　　０．Ｏ［Ｊ２
　　６．５　　　０．［Ｊ（Ｊ４ｐ・０．２５．６昇 （Ｅ）　　下痢止め活性 雌のコブス　ウィスター（Ｃｏｂｓ　Ｗ４ｓもａｒ　）
ラット［テヤールス　リバー（Ｃｈａｒｌｅｓ　Ｒｉｖ
ｅｒ　）　］を２４時間断食させた後に、被験化合物を
水溶液として１０ｍ１３／ｋｇの容量で経口投与する。

化合物の投与後の７５分で、谷ラットに１　ｖｒｌヒマ
シ油を経口で与え、次いで動物を下痢の出現について観
察する。動物の５０％に下痢を抑止するに要する投与量
（遊離ペプチドのη／体重ｋｇ）として計算した各被験
化合物のＥＤ５ｏ値をヒマシ油投与後の植種の間隔で得
られた結果から誘尋する。

例１　８．５　３０，３　４０．５ 例２　　１．９　　　３．２　　１６，７　　２８．６
例３　　　　　　　０．１１　　０，３１　　０．４６
例３３　０．０２　　Ｕ、０３　０．０２　０．０５脣
ヒマシ油投与後の時間 雄のウィスター　ラットｉｏｏ〜４００．Ｓｔ）に、例
２の化合物を０．８５％（重量／重置）塩類溶液中の溶
液として、０．１ｍｌ／体重１００ｇの投与量で静脈内
塊状注射（ｂｏｌｕｓ　ｉｎｊ　ｅｃ　ｔ、ｉｏｎ　）
することにより投与する。０．０１〜１．０ｍ９７Ｋｇ
Ｃ遊離ペプチドとして計算する）の投与量範囲にわたり
、投与量依存性血圧降下が徐脈ゲ付随してみもれた。

（Ｇｌ　　毒性 マウスにおいて、例２の化合物は次の程度の毒ｔ！＋、
を示した： ５００−ｎｙ　（塩基）／ｋｇ経ロ：＠物の５匹中−匹
が死亡； ２００ｍｙ（塩基）／ゆ皮下：＠物の５匹中五匹が死亡
。

医薬製剤 法例に２いて、「化合物」は前記定糀のとおりの式（１
）のペプチドの頃であり、そのＭ量は遊離塩基として計
算されている。

（Ｎ　カプセル剤 化合物　　　　　　　　　　　　　５．０ｒｎ９ステア
リン酸マグネシウム　　　　０．７５’Ｖ乳糖局方級（
ＢＰ）　　　全量を２００．０雫にする量諸成分を混合
し、硬質ゼラチンカプセル中に各カシセルが遊離ペノチ
ドとして計算して、化合物５、ＩＪ％”ｒ言付するよう
に充Ｊ抗する。

ｆＢ）　　錠剤 化合物　　　　　　　　　　　　　５．０　ｍｇアビセ
ル（Ａｖｉｃａｌ　）　ｐＨ１０１２２，５Ｍｙ低低置
−ヒドロキシグロビルセルロース　　　９．０ｍ？ポリ
ビニルピロリドンに３０　　　６．０ηステアリン酸マ
グネシウム　　　　０．７跨乳糖、局方級（ＢＰ）　　
　　全域を１５（Ｊ、０ηにする量化合９勿　　　　　
　　　　　　　　５．Ｕｌｎｙマニトール　　　　　　
　　　　６２．５　ｍｇ注射用水　　　　　　　　全組
’ｔ　２　、５　ｍｔｔにする墳マニトールおよび化合
物を水の全数の’／ｌ　Ｏ中に浴解し、溶解が完ｒした
時点で水７ａ′谷漬まで加える。無菌条件ド（ｔＬ、Ｍ
液を過当な無菌の無閑化級のフィルターに通して濾過す
ることにより殺菌し、清明な無菌バイアルに、２．５１
１１７パイアルの充填量で充填する。バイアルの頚部に
凍結乾燥用の栓を部分的に挿入し、凍結乾燥させる。バ
イアルを不活性気体雰囲気で閉鎖し、アルミニウムカラ
ーで固定する。

（Ｄ）　　座薬 化合物　　　　　　　　　　　　　５．０ｍ？硬質脂肪
、局方級（ＢＰ）　　全量を１ｏｏｏ、ｏｍｙにする量
化合物　　　　　　　　　　　　　０．４Ｉソルビタン
モノラウレート　　　　０．６．９ポリソルベー）　２
０　　　　　　　　０．６　ｇセトステアリルアルコー
ル　　　　１．２．９グリセリン　　　　　　　　　　
６．０．９メチルｐ−ヒ１０キシベンゾエート０．２．
９硝製氷、局方級（ＢＰ）　　全ｉｔ’（ｒ　１００．
０ｍ１Ｋする墳メチルｐ−ヒドロキシベンゾエートおよ
びグリセリンを水７（ＩｇＫ７５℃で溶解する：ソルビ
タ／モノラウレー１・、ポリソルベート２０ぢよＯ・セ
トステアリルアルコールを７５℃で一緒に耐融し、上記
水／ｍＭに加える。生成するエマルジョン乞均質化し、
連続攪拌しながら冷却させ、化合物を残りの水中のｍ液
とし又加える。生成ｖｉＪを均質にな７）まで攪拌する
。

代理人　　浅　　村　　　　皓 第１頁の続き ０発　明　者　ローレンス・アルフレッド・口・−ウニ イギリス国ケント・スワンリイ ・マンス・ウェイ３８ ０発　明　者　テレンス・ウィリアム・スミスイギリス
国ゲント・オーピント ン・マックスウェル・カードウ ンズ６８

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）式（Ｉ） ３ 〔式中Ｒ１は水素、１または２個の炭素原子を有するア
   ルキルまたはアミジノ基であり；Ｒ２は１または２個の
   炭素原子を有するアルキル基であり；Ｒ３は水素または
   カルバミル基であり；Ｘ２は構造式％式％ ） を有するＤ−基であり；Ｚｌおよびｚ２は同一または異
   なり、それぞれ水素、ハロゲン、ニトロまたはトリフル
   オロメチル基であって、その少なくとも１つは水素以外
   であり；ｍは２．６または４であり；そしてｎは０．１
   または２であるが、但しＲ３がカルバミルである場合に
   は、ｎは常に１である〕で示されるペプチド化合物およ
   びその塩。 （２）　　Ｒ”がアミジノ基である特許請求の範囲第１
   項の化小物。 （３）　　Ｘ２がＤ−アルギニルである特許請求の範囲
   第１項または第２項の化合物。 （４）　　Ｒ２がエチルである特許請求の範囲第１項〜
   第６項のいずれか１つに記載の化合物。 （５）　　Ｒ３が水素である特許請求の範囲！’　１項
   〜第４項のいずれか１つ傾記載の化合物。 （６）　　Ｒ３がカルバミルである特許請求の範囲第１
   項〜第４項のいずれか１つに記載の化合物。 （力　ｎが１である特許請求の範囲第１項〜第５項のい
   ずれか１つに記載の化合物。 （８１Ｚ”およびＺ２の１方が水素であり、そして他方
   カニトロまたはフルオロである特許請求の範囲第１項〜
   第゛７項のいずれか１つに記載の化合物。 （９）　　Ｚｌおよびｚ２の１方が水素であり、そして
   他方が４−位置にある特許請求の範囲第１項〜第８項の
   いずれか１つに記載の化合物。 （ＩＩ　　構造式 ％式％ を有するペプチドおよびその塩である特許請求の範囲第
   １項の化合物。 ａυ　構造式 ％式％） を有するペプチドおよびその塩である特許請求の範囲第
   １項の化合物。 αり　構造式 ％式％） を有するペプチドおよびその塩である特許請求の範囲第
   １項の化合物。 （１３）　　特許請求の範囲第１項〜第１２項のいずれ
   か１つに記載のペプチドの塩である特許請求の範囲第１
   項の化合物。 Ｑ４）　　特許請求の範囲第１項〜第１２項のいずれか
   １つに記載のペプチドの医薬上で許容されうる塩である
   特許請求の範囲第１項の化合物。 （１５）　　ヒトまたは動物医療に使用するための特許
   請求の範囲第１項〜第１２項のいずれか１つに記載のペ
   プチド化合物またはその医薬上で許容されうる塩。 （Ｉ６）鎮痛剤として使用するための特許請求の範囲第
   １項〜第１２項のいずれか１つに記載のペプチド化合物
   またはその医薬上で許容されうる塩。 ａη　下痢止めまたは抗赤痢剤として使用するための特
   許請求の範囲第１項〜第１２項のいずれか１つに記載の
   ペプチド化合物またはその医薬上で許容されうる塩。 ０８　　鎮咳剤として使用するための特許請求の範囲第
   １項〜第“１２項のいずれか１つに記載のペプチド化合
   物またはその医薬上で許容されうる塩。 ０９式（１） 〔式中Ｒ１は水素、１または２個の炭素原子を有するア
   ルキルまたはアミジノ基であり；Ｒ２は１または２個の
   炭素原子を有するアルキル基であり；Ｒ３は水素または
   カルバミル基であり；Ｘ２は構造式 ％式％ ） を有するＤ−基であり；Ｚｌおよびｚ２は同一または異
   なり、それぞれ水素、へロケ９ン、ニトロまたはトリフ
   ルオロメチル基であって、その少なくとも１つは水素以
   外であり：ｍは２．３または４であり；そしてｎは０，
   １または２であるが、但しＲ３がカルバミルである場合
   にはｎは常に１である〕で示されるペプチド化合物また
   はその医薬上で許容されうる塩を、許容され５る製剤用
   担体とともに含有する医薬層剤。 （至）経口投与に適する特許請求の範囲第１９項の製剤
   。 （２１）　　非経口投与に適する特許請求の範囲第１９
   項の製剤。 （２２１直腸投与に適する特許請求の範囲第１９項の製
   剤。 （ハ）局所投与に適する特許請求の範囲第１９項の製剤
   。 （２４）水性媒質中に溶液の形のベゾチド塩を含有する
   特許請求の範囲第１９項の製剤。 （２５１ペプチド化合物または塩の非毒性量を含有する
   単位投与形である特許請求の範囲第１９項〜第２４項の
   いずれが１つに記載の製剤。 弼　経口投与に適する錠剤の形である特許請求の範囲第
   ２５項の製剤。 （２η　経口投与に適するカプセルの形である特許請求
   の範囲第２５項の製剤。 （２〜　非経口投与に適する殺菌注射用溶液の形である
   特許請求の範囲第２５項の製剤。 翰　直腸投与に適する座薬の形である特許請求の範囲第
   ２５項の製剤。 （ト）ペプチド化合物またはその塩を、遊離ペプチドと
   して計算′して、０．５〜５０　Ｆｌ＆含有する特許請
   求の範囲第２５項の単位投与製剤。 Ｇυ　活性成分を混和することを含む特許請求の範囲第
   １９項〜第６０項のいずれか１つに記載の製剤の製造方
   法。 ０４式（１） 〔式中Ｒ１は水素、１または２個の炭素原子を有するア
   ルキルまたはアミジノ基であり１１．　Ｒ２は１または
   ２個の炭素原子を有するアルキル基であり；Ｒ３は水素
   またはカルバミル基であり；Ｘ２は構造式 ％式％ ） を有するＤ−基であり；ｚｌおよびｚ２は同一または異
   なり、それぞれ水素、ノ・ロデン、ニトロまたはトリフ
   ルオロメチル基であって、その少なくとも１つは水素以
   外であり；ｍは２．６また【ま４であり；そしてｎは０
   ．１または２であるが、但しＲ３がカルバミルである場
   合には、ｎは常に１である〕で示されるペプチド化合物
   およびその塩の製造方法であって、 ａ〕　反応剤（Ｉｔ） Ｒ’−Ｙ”−ＯＨ（ＩＩ　） 〔式中Ｒ１は前＠Ｌ足義のとおりの意味を有し、そして
   ｙｌは式（Ｉ）中の相当するＮ−末端部分基配列と同一
   の部分基配列を表わす〕を反応剤（薯）□−ｙ”　　　
   　　　　　　　　（１）（式中Ｙ２は前記に定義した生
   成物ペプチドの残りの基と同一であって、その相当する
   Ｃ−末端部分基配列を包含する）と反応させ；楊合忙よ
   り反応剤（…）および（１）は必要な場合および時に、
   保護および（または）活性化し、次いで必要に応じて、
   生成物を脱係膣する；または ｂ）相当す’ｂｃ−末端ペノチドカルボン酸またはその
   適当な反応性銹導体をアミド化する；または ｃ）　　Ｘ”が構造式 ％式％） （式中ｍは前記定義と同じ意味を有し、そしてＲ５は水
   素またはアミジノ基である）を有する基であり、但しＲ
   １およびＲ５の少なくとも１つが水素である相当するペ
   プチドを１−アミジノ−６，５−ジメチルピラゾールま
   たはその化学的均等反応剤を用いてアミジノ化する； 次いで場合により、得られた生成物を遊離のペプチドま
   たはその塩に変換する； ことを含む方法。 ０３）　　Ｒ１が水素である式（１）の各相当するペプ
   チドをアミジノ化し、次いで場合により得られた生成物
   を遊離のペプチドまたはその塩に変換することを含む式 ％式％） ） で示されるペプチド化合物から選ばれるペプチドを製造
   する特許請求の範囲第６２項の方法。 ０１　　特許請求の範囲第３２項または第３６項の方法
   により製造した特許請求の範囲第１項〜第１４項のい゛
   ずれか１つに記載の化合物。 鉋　例を％圧用用して本明細書に実質的に記載されてい
   る式（１）のペプチド化合物およびその塩。 （至）式（１）のペプチド化合物またはその医薬上で許
   容されうる塩を活性成分として含有する、例を特に引用
   して本明細書に実質的に記載されているとおりの医薬製
   剤。 ｃ３７）式（Ｉ）のペプチド化合物およびその塩の製造
   について、例を特に引用して本明細書に実質的に記載さ
   れているとおりの方法。 （２）特許請求の範囲第１項〜第１２項のいずれか１つ
   に記載のペプチド化合物またはその医薬上で許容されう
   る塩の非毒性鎮痛量を哺乳動物に投与することを含む哺
   乳動物における痛みの軽減または防止方法。 ０１　　特許請求の範囲第１項〜第１２項のいずれか１
   つに記載のペプチド化合物またはその医薬上で許容され
   うる塩の非毒性有効量を哺乳動物に投与することを含む
   哺乳動物における下痢または赤痢の処置方法。 （４１特許請求の範囲第１項〜第１２項のいずれか１つ
   に記載のペプチド化合物またはその医薬上で許容されう
   る塩の非毒性有効量を哺乳動物に投与することを含む哺
   乳動物における咳の抑止方法。 （４１）哺乳動物がヒトである特許請求の範囲第６８項
   〜第４０項のいずれか１つに記載の方法。