ES2213043T3

ES2213043T3 - Nuevos compuestos de tiazolo(4,5-d)pirimidina.

Info

Publication number: ES2213043T3
Application number: ES00960891T
Authority: ES
Inventors: Paul Andrew Willis; Roger Victor Bonnert; Simon Fraser Hunt; Iain Alistair Stewart Walters
Original assignee: AstraZeneca UK Ltd
Current assignee: AstraZeneca UK Ltd
Priority date: 1999-10-01
Filing date: 2000-09-26
Publication date: 2004-08-16
Anticipated expiration: 2020-09-26
Also published as: JP4824889B2; UA73521C2; ATE384068T1; NO20021448D0; US20090281123A1; EE200200174A; US6790850B1; EP1348709B1; KR20020032635A; NZ517880A; CA2385269A1; ES2298451T3; EP1222195B1; DE60037836T2; CN1402730A; KR100765051B1; EE05037B1; DK1222195T3; ZA200202380B; EP1348709A3

Abstract

¿ Un compuesto de fórmula (I) o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo en la cual R1 representa un grupo C3-C7 carbocíclico, C1-C8 alquilo, C2-C6 alquenilo o C2-C6 alquinilo, estando cada uno de los grupos sustituido opcionalmente con uno o más grupos sustituyentes seleccionados independientemente de átomos de halógeno, -OR4, -NR5R6, -CONR5R6, -COOR7, -NR8COR9, -SR10, -SO2R10, -SO2NR5R6, -NR8SO2R9, fenilo, naftilo o un anillo aromático de 5 ó 6 miembros que contiene uno o más heteroátomos seleccionados de N, S y O, estando los anillos fenilo, naftilo y aromático sustituidos opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente de átomos de halógeno, grupos ciano, nitro, -OR4, NR5R6, -CONR5R6, -COOR7, -NR8COR9, -SR10, -SO2R10, -SO2NR5R6, -NR8SO2R9, C1-C6 alquilo o trifluorometilo; R2 y R3 representan cada uno independientemente un átomo de hidrógeno, o un grupo C3-C7 carbocíclico, C1-C8 alquilo, C2-C6 alquenilo o C2-C6 alquinilo, pudiendo estar los cuatro últimos grupos sustituidos opcionalmente con uno o más grupos sustituyentes seleccionados independientemente de: (a) átomos de halógeno, -OR4, -NR5R6, -CONR5R6, -COOR7, -NR8COR9, -SR10, -SO2R10, -SO2NR5R6, -NR8SO2R9; (b) un anillo de 3¿8 miembros que contiene opcionalmente uno o más átomos seleccionados de O, S, NR8 y el mismo opcionalmente sustituido con C1-C3¿alquilo o halógeno; (c) un grupo arilo o heteroarilo, cada uno de los cuales puede estar sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente de átomos de halógeno, grupos ciano, nitro, -OR4, -NR5R6, -CONR5R6, -NR8COR9, -SO2NR5R6, -NR8SO2R9, C1-C6 alquilo y trifluorometilo; R4 representa hidrógeno, C1-C6 alquilo o un grupo fenilo, pudiendo estar sustituidos opcionalmente los dos últimos de los cuales con uno o más grupos sustituyentes seleccionados independientemente de átomos de halógeno, fenilo, -OR11 y -NR12R13; R5 y R6 representan independientemente un átomo de hidrógeno o un grupo C1-C6 alquilo o fenilo, pudiendo estar sustituidos opcionalmente los dos últimos de los cuales con uno o más grupos sustituyentes seleccionados independientemente de átomos de halógeno, fenilo, -OR14 y -NR15R16, -CONR15R16, -NR15COR16, -SONR15R16, -NR15SO2R16 o R5 y R6, junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos ambos, forman un sistema de anillos heterocíclico saturado de 4 a 7 miembros que contiene opcionalmente un heteroátomo adicional seleccionado de átomos de oxígeno y nitrógeno, pudiendo estar dicho sistema de anillos sustituido opcionalmente con uno o más grupos sustituyentes seleccionados independientemente de fenilo, -OR14, -COOR14, -NR15R16, -CONR15R16, -NR15COR16, -SONR15R16, -NR15SO2R16 o C1-C6 alquilo, sustituido opcionalmente el mismo con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente de átomos de halógeno y grupos -NR15R16 y -OR17; R10 representa un átomo de hidrógeno o un grupo C1-C6 alquilo o fenilo, pudiendo estar sustituidos opcionalmente los dos últimos de los cuales con uno o más grupos sustituyentes seleccionados independientemente de átomos de halógeno, fenilo, -OR17 y -NR15R16; y cada uno de R7, R8, R9, R11, R12, R13, R14, R15, R16 y R17 representa independientemente un átomo de hidrógeno o un grupo C1-C6 alquilo o fenilo.

Description

Nuevos compuestos de tiazolo(4,5-d)pirimidina.

La presente invención se refiere a ciertos compuestos de tiazolopirimidinona, procesos y compuestos intermedios utilizados en su preparación, composiciones farmacéuticas que los contienen y su uso en terapia.

Los documentos WO 98/08847 y EP 0778277 exponen cada uno una serie de compuestos 6,5-heterobicíclicos que se dice son útiles como antagonistas del CRF.

Las quimioquinas juegan un papel importante en las respuestas inmune e inflamatoria en diversas enfermedades y trastornos, que incluyen asma y enfermedades alérgicas, así como patologías autoinmunes tales como artritis reumatoide y ateroesclerosis. Estas pequeñas moléculas secretadas son una superfamilia creciente de proteínas de 8-14 kDa caracterizadas por un motivo conservado de cuatro cisteínas. La superfamilia de las quimioquinas puede dividirse en dos grupos principales que exhiben motivos estructurales característicos, las familias Cys-X-Cys (C-X-C) y Cys-Cys (C-C). Éstas se distinguen sobre la base de la inserción de un solo aminoácido entre el par proximal a NH de residuos cisteína y la semejanza de secuencia.

Las quimioquinas C-X-C incluyen varios quimioatrayentes y activadores potentes de los neutrófilos tales como interleuquina-8 (IL-8) y el péptido 2 activador de los neutrófilos (NAP-2).

Las quimioquinas C-C incluyen quimioatrayentes potentes de monocitos y linfocitos, pero no de los neutrófilos tales como las proteínas quimiotácticas 1-3 de los monocitos humanos (MCP-1, MCP-2 y MCP-3), RANTES (Regulated on Activation, Normal T Expressed and Secreted), eotaxina y las proteínas 1\alpha y 1\beta inflamatorias de los macrófagos (MIP-1\alpha y MIP-1\beta).

Estudios realizados han demostrado que las acciones de las quimioquinas están mediadas por subfamilias de receptores acoplados a proteínas G, entre los cuales se encuentran los receptores designados CCR1, CCR2, CCR2A, CCR2B, CCR3, CCR4, CCR5, CCR6, CCR7, CCR8, CCR9, CCR10, CXCR1, CXCR2, CXCR3, CXCR4, y CX3CR1. Estos receptores representan dianas satisfactorias para desarrollo de fármacos, dado que los agentes que modulan estos receptores podrían ser útiles en el tratamiento de trastornos y enfermedades tales como los arriba mencionados.

De acuerdo con la presente invención, se proporciona por tanto un compuesto de fórmula (I) o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo:

1

en la cual

R^{1} representa un grupo C_{3}-C_{7} carbocíclico, C_{1}-C_{8} alquilo, C_{2}-C_{6} alquenilo o C_{2}-C_{6} alquinilo, estando cada uno de los grupos sustituido opcionalmente con uno o más grupos sustituyentes seleccionados independientemente de átomos de halógeno, -OR^{4}, -NR^{5}R^{6}, -CONR^{5}R^{6}, -COOR^{7}, -NR^{8}COR^{9}, -SR^{10}, -SO_{2}R^{10}, -SO_{2}NR^{5}R^{6}, -NR^{8}SO_{2}R^{9} o un grupo arilo o heteroarilo, los dos cuales pueden estar sustituidos opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente de átomos de halógeno, grupos ciano, nitro, -OR^{4}, -NR^{5}R^{6}, -CONR^{5}R^{6}, -COOR^{7}, -NR^{8}COR^{9}, -SR^{10}, -SO_{2}R^{10}, -SO_{2}NR^{5}R^{6}, -NR^{8}SO_{2}R^{9}, C_{1}-C_{6} alquilo o trifluorometilo;

R^{2} y R^{3} representan cada uno independientemente un átomo de hidrógeno, o un grupo C_{3}-C_{7} carbocíclico, C_{1}-C_{8} alquilo, C_{2}-C_{6} alquenilo o C_{2}-C_{6} alquinilo, pudiendo estar los cuatro últimos grupos sustituidos opcionalmente con uno o más grupos sustituyentes seleccionados independientemente de:

(a): átomos de halógeno, -OR^{4}, -NR^{5}R^{6}, CONR^{5}R^{6}, -COOR^{7}, -NR^{8}COR^{9}, -SR^{10}, -SO_{2}R^{10}, -SO_{2}NR^{5}R^{6}, -NR^{8}SO_{2}R^{9};

(b): un anillo de 3-8 miembros que contiene opcionalmente uno o más átomos seleccionados de O, S, NR^{8} y el mismo opcionalmente sustituido con C_{1}-C_{3}-alquilo o halógeno; o

(c): un grupo arilo o heteroarilo, cada uno de los cuales puede estar sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente de átomos de halógeno, y grupos ciano, nitro, -OR^{4}, -NR^{5}R^{6}, -CONR^{5}R^{6}, -NR^{8}COR^{9}, -SO_{2}NR^{5}R^{6}, -NR^{8}SO_{2}R^{9}, C_{1}-C_{6} alquilo y trifluorometilo;

R^{4} representa hidrógeno, C_{1}-C_{6} alquilo o un grupo fenilo, pudiendo estar sustituidos opcionalmente los dos últimos de los cuales con uno o más grupos sustituyentes seleccionados independientemente de átomos de halógeno, fenilo, -OR^{11} y -NR^{12}R^{13};

R^{5} y R^{6} representan independientemente un átomo de hidrógeno o un grupo C_{1}-C_{6} alquilo o fenilo, pudiendo estar sustituidos opcionalmente los dos últimos de los cuales con uno o más grupos sustituyentes seleccionados independientemente de átomos de halógeno, fenilo, -OR^{14} y -NR^{15}R^{16}, -CONR^{15}R^{16}, -NR^{15}COR^{16}, -SONR^{15}R^{16}, -NR^{15}SO_{2}R^{16}

o

R^{5} y R^{6}, junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos ambos, forman un sistema de anillos heterocíclico saturado de 4 a 7 miembros que contiene opcionalmente un heteroátomo adicional seleccionado de átomos de oxígeno y nitrógeno, pudiendo estar dicho sistema de anillos sustituido opcionalmente con uno o más grupos sustituyentes seleccionados independientemente de fenilo, -OR^{14}, -COOR^{14}, -NR^{15}R^{16}, -CONR^{15}R^{16}, -NR^{15}COR^{16}, -SONR^{15}R^{16}, -NR^{15}SO_{2}R^{16} o C_{1}-C_{6} alquilo, sustituido opcionalmente el mismo con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente de átomos de halógeno y grupos -NR^{15}R^{16} y -OR^{17};

R^{10} representa un átomo de hidrógeno o un grupo C_{1}-C_{6} alquilo o fenilo, pudiendo estar sustituidos opcionalmente los dos últimos de los cuales con uno o más grupos sustituyentes seleccionados independientemente de átomos de halógeno, fenilo, -OR^{17} y -NR^{15}R^{16}; y

cada uno de R^{7}, R^{8}, R^{9}, R^{11}, R^{12}, R^{13}, R^{14}, R^{15}, R^{16} y R^{17} representa independientemente un átomo de hidrógeno o un grupo C_{1}-C_{6} alquilo, o fenilo.

En el contexto de la presente memoria descriptiva, a no ser que se indique otra cosa, un grupo alquilo o alquenilo o un resto alquilo o alquenilo en un grupo sustituyente puede ser lineal o ramificado. Los grupos arilo incluyen fenilo y naftilo. Los grupos heteroarilo incluyen anillos aromáticos de 5 ó 6 miembros que contienen uno o más heteroátomos seleccionados de N, S, O. Ejemplos incluyen piridina, pirimidina, tiazol, oxazol, pirazol, imidazol y furano.

Ciertos compuestos de fórmula (I) pueden existir en formas estereoisómeras. Se entenderá que la invención abarca todos los isómeros geométricos y ópticos de los compuestos de fórmula (I) y sus mezclas, con inclusión de racematos. Los tautómeros y mezclas de los mismos forman también un aspecto de la presente invención.

En la fórmula (I) anterior, el grupo R^{1} representa un grupo C_{3}-C_{7} carbocíclico, C_{1}-C_{8} alquilo, C_{2}-C_{6} alquenilo o C_{2}-C_{6} alquinilo, pudiendo estar cada uno de los grupos sustituido opcionalmente con uno o más grupos sustituyentes seleccionados independientemente de átomos de halógeno, -OR^{4}, -NR^{5}R^{6}, -CONR^{5}R^{6}, -COOR^{7}, -NR^{8}COR^{9}, -SR^{10}, -SO_{2}R^{10}, -SO_{2}NR^{5}R^{6}, -NR^{8}SO_{2}R^{9} o un grupo arilo o heteroarilo, los dos cuales pueden estar sustituidos opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente de átomos de halógeno, grupos ciano, nitro, -OR^{4}, -NR^{5}R^{6}, -CONR^{5}R^{6}, -COOR^{7}, -NR^{8}COR^{9}, -SR^{10}, -SO_{2}R^{10}, -SO_{2}NR^{5}R^{6}, -NR^{8}SO_{2}R^{9}, C_{1}-C_{6} alquilo o trifluorometilo. Compuestos particularmente ventajosos de fórmula (I) son aquéllos en los cuales R^{1} representa un grupo bencilo opcionalmente sustituido. Más preferiblemente, R^{1} representa bencilo o bencilo sustituido con uno o más C_{1}-C_{6} alquilo, C_{1}-C_{6} alcoxi o átomos de halógeno.

Cuando R^{2} y R^{3} representan un grupo sustituido con uno o más anillos de 3-8 miembros que contienen opcionalmente uno o más átomos seleccionados de O, S o NR^{8}, ejemplos de tales grupos incluyen piperidina, pirrolidina, piperazina y morfolina.

Preferiblemente, uno de R^{2} y R^{3} es hidrógeno y el otro es C_{1}-C_{8} alquilo sustituido con hidroxi. Más preferiblemente, uno de R^{2} y R^{3} es hidrógeno y el otro es CH(CH_{3})CH_{2}OH, CH(Et)CH_{2}OH, C(CH_{3})_{2}CH_{2}OH o CH(CH_{2}OH)_{2}. Cuando uno de R^{2} y R^{3} es hidrógeno y el otro es CH(CH_{3})CH_{2}OH o CH(Et)CH_{2}OH, los compuestos resultantes de fórmula (I) se encuentran preferiblemente en la forma del isómero (R).

Compuestos particularmente preferidos de la invención incluyen:

7-[(2-hidroxi-1,1-dimetiletil)amino]-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

(R)-7-[[1-(hidroximetil)propil]amino]-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

(R)-7-[(2-hidroxi-1-metiletil)amino]-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[(2-hidroxi-1,1-dimetiletil)amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[[2-(hidroxietoxi)etil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[[2-hidroxi-1-(hidroximetil)etil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

7-[(2-aminoetil)amino]-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[(2-hidroxietil)amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

N-[2-[[5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-2,3-dihidro-2-oxotiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]etil]metanosulfona-
mida,

(\pm)-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[[2-(2-hidroxi-etoxi)-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

7-[[(1R)-2-amino-1-metiletil]amino]-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-[(2-hidroxi-etil)amino]-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-
2(3H)-ona,

5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-(dimetil-amino)-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

5-[[[4-(2-aminoetoxi)-3-clorofenil]metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

5-[[3-cloro-4-metoxifenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

5-[[3-cloro-2-fluorofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[[(3R,4R)-4-hidroxi-pirrolidin-3-il]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[(3R)-pirrolidin-3-ilamino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]-5-[[(2-metil-4-tiazolil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

7-[[2-hidroxi-1-(hidroximetil)etil]amino]-5-[[(2-metil-4-tiazolil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

7-[(2-hidroxi-1,1-dimetiletil)amino]-5-[[(2-metil-4-tiazolil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

7-[(2-hidroxi-1,1-dimetiletil)amino]-5-[[(2-metilfenil)metil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

5-[(2-furanilmetil)tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]-amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

7-[[(1R)-2-amino-1-metiletil]amino]-5-[[(3-cloro-2-fluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

(2S)-2-[[5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-2,3-dihidro-2-oxotiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-3-hidroxipropanamida,

7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]-5-[(2-tienilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]-5-[[[3-metil-4-(metilsulfonil)fenil]metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

5-[[[3-cloro-4-(trifluorometoxi)fenil]metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]-pirimidin-2
(3H)-ona,

5-[[[2-fluoro-3-(trifluorometil)fenil]metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]-pirimidin-2
(3H)-ona,

5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[2-[(dimetilamino)etil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

5-[[(2-fluorofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]-5-[[(2-metoxi-fenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]-5-[(2-fenoxietil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]-5-[[(3-metilfenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

5-[[(2-fluoro-3-metilfenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

5-[[(3-clorofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

5-[[(3-bromofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

5-[[[4-(difluorometoxi)fenil]metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

(\pm)-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[[2-hidroxi-1-(metoximetil)etil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

7-[[2-hidroxi-1-(hidroximetil)etil]amino]-5-[(fenil-metil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

5-[[(2-bromofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

5-[(5-cloro-1,2,3-tiadiazol-4-il)tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

y sus sales y solvatos farmacéuticamente aceptables.

Sales particulares de compuestos de fórmula (I) incluyen:

sal de sodio de 5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]-pirimidin-2
(3H)-ona,

sal de sodio de 5-[[3-cloro-2-fluorofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]-pirimidin-2(3H)-ona,

sal de sodio de (\pm)-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[[2-hidroxi-1-(metoximetil)etil]amino]tiazolo[4,5-d]-pirimidin 2(3H)-ona,

sal de sodio de 7-[[2-hidroxi-1-(hidroximetil)etil]-amino]-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona, o

sal de sodio de 7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona.

Sales particulares adicionales de compuestos de fórmula (I) incluyen:

: trifluoroacetato de 7-[[(1R)-2-amino-1-metiletil]amino]-5-[[(2,3-difluorofenil)metil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

: trifluoroacetato de 5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-[(2-hidroxietil)amino]-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

: 5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-(di-metilamino)-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)- ona,

: trifluoroacetato de 5-[[[4-(2-aminoetoxi)-3-cloro-fenil]metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

: monohidrocloruro de 5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[2-[(dimetilamino)etil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona, o

: dihidrocloruro de 5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[(3R)-pirrolidin-3-ilamino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona.

De acuerdo con la invención, se proporciona también un proceso para la preparación de un compuesto de fórmula (I) que comprende, o bien: tratamiento de un compuesto de fórmula (IIA)

2

donde R^{1}, R^{2} y R^{3} son como se define en la fórmula (I) con un tiol R^{1}SH en presencia de una base adecuada y formación opcional de una sal farmacéuticamente aceptable. La reacción puede llevarse a cabo en un disolvente mixto de DMSO y etanol a una temperatura comprendida entre 0ºC y 100ºC utilizando borohidruro de sodio como la base.

Los compuestos de fórmula (IIA) donde R^{1}, R^{2} y R^{3} son como se define en la fórmula (I) se pueden preparar por tratamiento de compuestos de fórmula (I) con un agente oxidante adecuado tal como oxona. La reacción puede llevarse a cabo en un disolvente tal como acetonitrilo a una temperatura comprendida entre 0ºC y 100ºC.

O tratamiento de un compuesto de fórmula (IIB):

3

donde R^{1}, R^{2}, y R^{3} son como se define en la fórmula (I) y X es un grupo lábil con un alcóxido metálico, seguido por tratamiento con un ácido o base y formación opcional de una sal farmacéuticamente aceptable.

X es cualquier grupo lábil adecuado tal como halógeno. La reacción puede llevarse a cabo en un disolvente alcohólico tal como metanol y la desprotección puede realizarse en un disolvente tal como 1,4-dioxano. Ejemplos de alcóxidos metálicos incluyen metóxido de potasio. Ejemplos de ácidos adecuados incluyen ácido clorhídrico. Preferiblemente, el compuesto de fórmula (IIB) se trata con un alcóxido metálico tal como metóxido de potasio seguido por un ácido tal como HCl conc. en un disolvente tal como 1,4-dioxano.

Los compuestos de fórmula (IIB) donde R^{1}, R^{2} y R^{3} son como se define en la fórmula (I) y X es un halógeno, se pueden preparar a partir de compuestos (IIB) correspondientes donde R^{1}, R^{2} y R^{3} son como se define en la fórmula (I) y X es NH_{2} por tratamiento con un agente de diazotación tal como nitrito de isoamilo y un agente de halogenación tal como bromoformo.

Los compuestos de fórmula (IIB) donde R^{1}, R^{2}, y R^{3} son como se define en la fórmula (I) y X es NH_{2} se pueden preparar, o bien por tratamiento de un compuesto de fórmula (IIIA):

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donde R^{2} y R^{3} son como se define en la fórmula (I) y X es NH_{2} con un compuesto de fórmula R^{1}X donde R^{1} es como se define arriba y X es un grupo lábil tal como bromuro en presencia de una base tal como diisopropiletilamina en un disolvente inerte tal como DMSO/N-metilpirrolidinona a una temperatura comprendida entre 0ºC y 100ºC.

Los compuestos de fórmula (IIIA) donde R^{2} y R^{3} son como se define en la fórmula (I) y X es NH_{2} se pueden preparar por tratamiento de un compuesto de fórmula (IIB) donde R^{2} y R^{3} son como se define en la fórmula (I), X es NH_{2} y R^{1} es un grupo bencilo adecuado tal como bencilo o 2,3-difluorobencilo con un medio de reducción tal como sodio metálico en amoniaco líquido, o por tratamiento de un compuesto de fórmula (IIIB):

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donde R^{1} es como se define en la fórmula (I) y L es un grupo lábil tal como cloro con una amina HNR^{2}R^{3} donde R^{2} y R^{3} son como se define en la fórmula (I). La reacción puede llevarse a cabo en un disolvente tal como N-metil-pirrolidina a una temperatura comprendida entre 0ºC y 150ºC.

Los compuestos de fórmula (IIIB) donde R^{1} es como se define en la fórmula (I) y L es un halógeno se pueden preparar por tratamiento de un compuesto de fórmula (IIIB) donde R^{1} es como se define en la fórmula (I) y L es un grupo hidroxilo con un agente de halogenación tal como oxicloruro de fósforo. La reacción puede llevarse a cabo en presencia de dimetilanilina a reflujo.

Los compuestos de fórmula (IIIB) donde R^{1} es como se define en la fórmula (I) y L es un grupo hidroxilo se pueden formar sea por tratamiento de un compuesto de fórmula (IVA) con un compuesto de fórmula R^{1}X donde R^{1} es como se define arriba y X es un grupo lábil tal como bromuro en presencia de una base tal como terc-butóxido de potasio en un disolvente inerte tal como DMSO a la temperatura ambiente.

6

o por tratamiento de un compuesto de fórmula (IVB) donde R^{1} es como se define arriba.

7

La reacción se lleva a cabo preferiblemente en un disolvente adecuado tal como DMF a temperatura elevada, por ejemplo a aproximadamente 120ºC.

Los compuestos de fórmula (IVB) se pueden preparar fácilmente por reacción de un compuesto de fórmula general (V) en donde R^{1} es como se define arriba, con tiocianato de potasio y bromo en un disolvente inerte tal como dimetilformamida/piridina.

8

Los compuestos de fórmula (V) se preparan convenientemente por reacción de un compuesto de fórmula (VI):

9

con un compuesto de fórmula R^{1}X donde R^{1} es como se define arriba y X es un grupo lábil tal como bromuro en presencia de una base tal como hidruro de sodio en un disolvente inerte tal como DMF a la temperatura ambiente.

Los compuestos de fórmula (IVA) y (VI), o bien están disponibles comercialmente o son bien conocidos en la bibliografía.

Será apreciado por los expertos en la técnica que en los procesos arriba descritos los grupos funcionales (v.g. grupos hidroxilo) de compuestos intermedios pueden necesitar ser protegidos por grupos protectores. La etapa final en la preparación de los compuestos de la invención puede implicar la eliminación de uno o más grupos protectores. La protección y desprotección de grupos funcionales se describe con todo detalle en "Protective Groups in Organic Chemistry", compilado por J.W.F. McOmie, Plenum Press (1973), y "Protective Groups in Organic Synthesis", segunda edición, T.W. Greene & P.G.M. Wuts, Wiley-Interscience (1991).

Compuestos intermedios nuevos forman un aspecto adicional de la invención. En particular, los compuestos de fórmula (IIA), (IIB) y (IIIA) son nuevos y forman un aspecto de la invención.

Los compuestos de la fórmula (I) anterior se pueden convertir en una sal o solvato farmacéuticamente aceptable de los mismos, preferiblemente una sal de adición básica tal como sal de sodio, potasio, calcio, aluminio, litio, magnesio, cinc, benzatina, cloroprocaína, colina, dietanolamina, etanolamina, etildiamina, meglumina, trometamina o procaína, o una sal de adición de ácido tal como un hidrocloruro, hidrobromuro, fosfato, acetato, fumarato, maleato, tartrato, citrato, oxalato, metanosulfonato o p-toluenosulfonato.

Los compuestos de fórmula (I) tienen actividad como productos farmacéuticos, en particular como moduladores de los receptores de quimioquinas, y pueden utilizarse en el tratamiento (terapéutico o profiláctico) de afecciones/enfermedades en animales humanos y no humanos que son exacerbadas o causadas por una producción excesiva o incontrolada de quimioquinas. Ejemplos de tales afecciones/ enfermedades incluyen:

(1): (tracto respiratorio) enfermedades obstructivas de las vías aéreas que incluyen enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD); asma, tal como asma bronquial, alérgica, intrínseca, extrínseca y por polvo, particularmente asma crónica o inveterada (v.g. asma tardía e hiper-sensibilidad de las vías aéreas); bronquitis; rinitis aguda, alérgica y atrófica y rinitis crónica con inclusión de rinitis caseosa, rinitis hipertrófica, rinitis purulenta, rinitis seca y rinitis medicamentosa; rinitis membranosa, con inclusión de rinitis cruposa, fibrinosa y pseudomembranosa y rinitis escrofulosa; rinitis estacional con inclusión de rinitis nerviosa (fiebre del heno) y rinitis vasomotora; sarcoidosis, pulmón de granjero y enfermedades afines, pulmón fibroide y neumonía intersticial idiopática;

(2): (huesos y articulaciones) artritis reumatoide, espondiloartropatías seronegativas (con inclusión de espondilitis anquilosante, artritis psoriásica y enfermedad de Reiter), enfermedad de Behcet, síndrome de Sjogren y esclerosis sistémica;

(3): (piel) psoriasis, dermatitis atópica, dermatitis de contacto y otras dermatitis eczematosas, dermatitis seborreica, liquen plano, pénfigo, pénfigo buloso, epidermólisis bulosa, urticaria, angiodermas, vasculitis, eritemas, eosinofilias cutáneas, uveítis, alopecia areata y conjuntivitis vernal;

(4): (tracto gastrointestinal) enfermedad celíaca, proctitis, gastroenteritis eosinofílica, mastocitosis, enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa, alergias relacionadas con los alimentos que tienen efectos alejados del intestino, v.g. migraña, rinitis y eczema;

(5): (otros tejidos y enfermedad sistémica) esclerosis múltiple, ateroesclerosis, síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA), lupus eritematoso, lupus eritematoso sistémico, tiroiditis de Hashimoto, miastenia grave, diabetes tipo I, síndrome nefrótico, fasciítis por eosinofilia, síndrome de hiper-IgE, lepra lepromatosa, síndrome de Sézary y púrpura trombocitopénica idiopática; adhesiones post-Operativas, y sepsis;

(6): (rechazo de aloinjertos) agudo y crónico subsiguiente, por ejemplo, a trasplante de riñón, corazón, hígado, pulmón, médula ósea, piel y cornea; y síndrome crónico de rechazo inverso;

(7): cánceres, especialmente cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC), melanoma maligno, cáncer de próstata y sarcoma escamoso, así como metástasis de tumores;

(8): enfermedades en las cuales la angiogénesis está asociada con niveles elevados de la quimioquina CXCR2 (v.g. NSCLC, retinopatía diabética);

(9): fibrosis quística, accidente cerebrovascular agudo, lesión de reperfusión en el corazón, cerebro, los miembros periféricos y otros órganos;

(10): heridas por quemaduras y úlceras crónicas de la piel;

(11): enfermedades de la reproducción (v.g. trastornos de la ovulación, menstruación e implantación, parto antes de término, endometriosis).

Así pues, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula (I), o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define anteriormente en esta memoria para uso en terapia.

Preferiblemente, los compuestos de la invención se utilizan para tratar enfermedades en las cuales el receptor de quimioquinas pertenece a la subfamilia de receptores de quimioquinas CXC, y más preferiblemente el receptor de quimioquinas diana es el receptor CXCR2.

Condiciones particulares que se pueden tratar con los compuestos de la invención son psoriasis, enfermedades en las cuales la angiogénesis está asociada con niveles elevados de la quimioquina CXCR2, y COPD. Se prefiere que los compuestos de la invención se utilicen para tratar la psoriasis.

En un aspecto adicional, la presente invención proporciona el uso de un compuesto de fórmula (I), o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define anteriormente en esta memoria en la fabricación de un medicamento para uso en terapia.

En otro aspecto adicional, la presente invención proporciona el uso de un compuesto de fórmula (I), o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define anteriormente en esta memoria para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades o afecciones humanas en las cuales es beneficiosa la modulación de la actividad de los receptores de quimioquinas.

En el contexto de la presente memoria descriptiva, el término "terapia" incluye también "profilaxis", a no ser que se hagan indicaciones específicas en sentido contrario. Los términos "terapéutico" y "terapéuticamente" deben interpretarse de acuerdo con ello.

La invención proporciona adicionalmente un compuesto de fórmula (I), o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, para uso en el tratamiento de una enfermedad mediada por quimioquinas en el cual la quimioquina se fija a un receptor de quimioquina (especialmente CXCR2).

La invención proporciona también un compuesto de fórmula I, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, para uso en el tratamiento de una enfermedad inflamatoria, especialmente psoriasis, en un paciente que sufre padece dicha enfermedad o corre el riesgo de padecerla.

Para los usos terapéuticos arriba mencionados, la dosis administrada variará, por supuesto, con el compuesto empleado, el modo de administración, el tratamiento deseado y el trastorno de que se trate.

Los compuestos de fórmula (I) y sus sales y solvatos farmacéuticamente aceptables pueden utilizarse por sí mismos, pero generalmente se administrarán en la forma de una composición farmacéutica en la cual el compuesto/sal/solvato de fórmula (I) (ingrediente activo) se encuentra en asociación con un adyuvante, diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable. Dependiendo del modo de administración, la composición farmacéutica comprenderá preferiblemente desde 0,05 a 99% (porcentaje en peso), más preferiblemente desde 0,05 a 80% p, todavía más preferiblemente desde 0,10 a 70%, y aún más preferiblemente desde 0,10 a 50% p, de ingrediente activo, basándose todos los porcentajes en peso en la composición total.

La presente invención proporciona también una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I), o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define anteriormente en esta memoria, en asociación con un adyuvante, diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable.

La invención proporciona además un proceso para la preparación de una composición farmacéutica de la invención que comprende mezclar un compuesto de fórmula (I), o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define anteriormente en esta memoria, con un adyuvante, diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable.

Las composiciones farmacéuticas se pueden administrar tópicamente (v.g. al pulmón y/o las vías aéreas o a la piel) en la forma de soluciones, suspensiones, aerosoles de heptafluoroalcanos y formulaciones de polvo seco; o sistemáticamente, v.g. por administración oral en la forma de tabletas, cápsulas, jarabes, polvos o gránulos, o por administración parenteral en la forma de soluciones o suspensiones, o por administración subcutánea o por administración rectal en la forma de supositorios o transdérmicamente. Con preferencia, los compuestos de la invención se administran por vía oral.

La invención se ilustrará a continuación adicionalmente por referencia a los ejemplos que siguen. En los ejemplos, los espectros de Resonancia Magnética Nuclear (NMR) se midieron en un espectrómetro Varian Unity Inova de 300 ó 400 MHz, y los espectros de Espectrometría de Masas (MS) se midieron en un espectrómetro Finnigan Mat SSQ7000 o Micromass Platform. En caso necesario, las reacciones se efectuaron en una atmósfera inerte de nitrógeno o argón. La cromatografía se realizó generalmente utilizando Matrex Silica 60® (de 35-70 micrómetros) o gel de sílice Prolabo 60® (de 35-70micrómetros) adecuado para cromatografía súbita con gel de sílice. La purificación por cromatografía líquida a alta presión se realizó utilizando un equipo LCZ de Waters Micromass con un controlador de bomba Waters 600, detector Waters 2487 y colector defracciones Gilson FC024 o un equipo Waters Delta Prep 4000. Las abreviaturas p.f. y DMSO utilizadas en los ejemplos significan punto de fusión y dimetil-sulfóxido, respectivamente.

Ejemplo 1 7-[(2-Hidroxi-1,1-dimetiletil)amino]-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) Ácido tiociánico, 6-amino-1,4-dihidro-4-oxo-2-[(fenilmetil)tio]-5-pirimidinil-éster

Se calentaron juntos 6-amino-2-[(fenilmetil)tio]-4(1H)-pirimidinona (10,5 g) [preparación como se describe en el documento WO 9635678] y tiocianato de potasio (25 g) en N,N-dimetilformamida (200 ml) a 65ºC. Se añadió piridina (6,3 ml) y la solución se enfrió a 5ºC. Se añadió lentamente bromo (2,2 ml) y la mezcla de reacción se agitó durante 2 horas a 5-10ºC. La mezcla de reacción se vertió en agua con hielo, se agitó durante 1 hora y el sólido se aisló por filtración. Después de lavado con agua y éter, se obtuvo una muestra pura después de trituración con metanol caliente.

MS (APCI) 291 (M+H, 100%).

(b) 2-Amino-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7(4H)-ona

El producto del ejemplo 1 paso a) (7,35 g) se calentó a 120ºC en N,N-dimetilformamida (40 ml)/agua (10 ml) durante 10 horas. Después de enfriar, el sólido resultante se separó por filtración, se lavó con agua, y a continuación con acetato de etilo para dar el compuesto del subtítulo.

P.f. 325ºC

MS (APCI) 291 (M+H, 100%).

(c) 7-Cloro-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2-amina

El producto del ejemplo 1 paso b) (0,89 g), oxicloruro de fósforo (12 ml) y N,N-dimetilanilina (1,2 ml) se calentaron a reflujo durante 2 horas. La mezcla de reacción enfriada se vertió en agua con hielo y se agitó durante 2 horas. La cromatografía (SiO_{2}, metanol/dicloro-metano como eluyente) dio el compuesto del subtítulo.

P.f. 217-218,5ºC

MS (APCI) 309 (M+H, 100%).

(d) 2-[[2-Amino-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-2-metil-1-propanol

El producto del ejemplo 1 paso c) (0,6 g) y 1-amino-2-metil-propan-2-ol (1,1 g) en tetrahidrofurano (10 ml) se calentó en un recipiente herméticamente cerrado a 100ºC durante 18 horas. La mezcla se evaporó a sequedad y se purificó (SiO_{2}, acetato de etilo como eluyente) para dar el compuesto del subtítulo (0,46 g).

MS (APCI) 362 (M+H^{+}, 100%).

(e) 2-[[2-Bromo-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-2-metil-1-propanol

A una solución del producto del ejemplo 1 paso d) (0,1 g) en bromoformo (5 ml) se añadió nitrito de isoamilo (0,13 ml) y la mezcla se calentó a 60ºC durante 10 min. La mezcla se evaporó a sequedad y se purificó (SiO_{2}, acetato de etilo:diclorometano 1:9 como eluyente) para dar el compuesto del subtítulo como un sólido incoloro (0,043 g).

MS (APCI) 427 (M+H^{+}, 100%).

(f) 2-[[2-Metoxi-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-2-metil-1-propanol

A una solución del producto del ejemplo 1 paso e) (0,36 g) en metanol (5 ml) se añadió hidróxido de potasio (0,095 g) y la mezcla se agitó durante 30 min. La mezcla se neutralizó con ácido clorhídrico concentrado y se evaporó luego a sequedad, después de lo cual se purificó (SiO_{2}, acetato de etilo:diclorometano 1:9 como eluyente) para dar el compuesto del subtítulo como un sólido incoloro (0,245 g).

MS (APCI) 377 (M+H^{+}, 100%).

(g) 7-[(2-Hidroxi-1,1-dimetiletil)amino]-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

A una solución del producto del ejemplo 1 paso f) (0,21 g) en 1,4-dioxano (5 ml) se añadió agua (0,1 ml) y ácido clorhídrico concentrado (1 gota). La mezcla se calentó a 45ºC durante 3 horas y se evaporó luego a sequedad. La recristalización (acetonitrilo) dio el compuesto del título (0,110 g).

P.f. 207-8ºC

MS (APCI) 363 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,37 (1H, s), 7,47-7,23 (5H, m), 6,61 (1H, bs), 4,81 (1H, t), 4,34 (2H, s), 3,55 (2H, bs), 1,32 (6H, s).

Ejemplo 2 (R)-7-[[1-(Hidroximetil)propil]amino]-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) (R)-2-[[2-Amino-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-1-butanol

A una mezcla del producto del ejemplo 1 paso c) (2,5 g) y (R)-(-)-2-amino-1-butanol (5 g) en un disolvente de N-metilpirrolidinona (10 ml) se añadió N,N-diisopropiletilamina (5 ml) y la mezcla resultante se calentó a 100ºC durante 10 horas. La mezcla se vertió en agua y el producto se recogió por filtración para dar el compuesto del subtítulo (2,5 g).

MS (APCI) 362 (M+H^{+}, 100%).

(b) (R)-2-[[2-Bromo-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-1-butanol

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso e) utilizando el producto del ejemplo 2 paso a).

MS (APCI) 427 (M+H^{+}, 100%).

(c) (R)-2-[[2-Metoxi-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-1-butanol

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso f), utilizando el producto el ejemplo 2 paso b).

MS (APCI) 377 (M+H^{+}, 100%).

(d) (R)-7-[[1-(Hidroximetil)propil]amino]-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso g), utilizando el producto del ejemplo 2 paso c).

P.f. 217-8ºC

MS (APCI) 363 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,37 (1H, s), 7,43-7,21 (6H, m), 4,68 (1H, t), 4,32 (2H, q), 4,09 (1H, bs), 3,47-3,32 (2H, m), 1,69-1,59 (1H, m), 1,48-1,41 (1H, m), 0,82 (3H, t).

Ejemplo 3 (R)-7-[(2-Hidroxi-1-metiletil)amino]-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) (R)-2-[[2-Amino-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 2 paso a) utilizando el producto del ejemplo 1 paso c) y (R)-(-)-2-amino-1-propanol.

MS (APCI) 412 (M+H^{+}, 100%)

(b) (R)-2-[[2-Bromo-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso e), utilizando el producto del ejemplo 3 paso a).

MS (APCI) 348 (M+H^{+}, 100%).

(c) (R)-2-[[2-Metoxi-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso f), utilizando el producto del ejemplo 3 paso b).

MS (APCI) 363 (M+H^{+}, 100%).

(d) (R)-7-[(2-Hidroxi-1-metiletil)amino]-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso g), utilizando el producto del ejemplo 3 paso c).

MS (APCI) 349 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,38 (1H, s), 7,44-7,20 (6H, m), 4,72 (1H, t), 4,32 (2H, m), 4,23 (1H, m), 3,49-3,29 (2H, m), 1,11 (3H, d).

Ejemplo 4 5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-7-[(2-hidroxi-1,1-dimetiletil)amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) 2-Amino-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7(4H)-ona

Se añadió solución de t-butóxido de potasio (0,45 ml de solución 1M en tetrahidrofurano) a una solución agitada de 2-amino-5,6-dihidro-5-tioxo-tiazolo[4,5-d]pirimidin-7(4H)-ona (0,09 g) [citado en: Indian J. Chem., Sect. B (1989), 28B (11), 964-5] y bromuro de 2,3-difluorobencilo en dimetil-sulfóxido (2 ml). Después de agitar durante 3 días, la mezcla de reacción se vertió en agua para dar el compuesto del subtítulo, que se aisló por filtración.

MS (APCI) 327 (M+H^{+}, 100%).

(b) 7-Cloro-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2-amina

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso c), utilizando el producto del ejemplo 4 paso a).

MS (APCI) 345 (M+H^{+}, 100%).

(c) 2-[[2-Amino-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-2-metil-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 2 paso a), utilizando el producto del ejemplo 4 paso b) y 2-amino-2-metilpropanol.

MS (APCI) 398 (M+H^{+}, 100%).

(d) 2-[[2-Bromo-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-2-metil-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso e), utilizando el producto del ejemplo 4 paso c).

MS (APCI) 462 (M+H^{+}, 100%).

(e) 2-[[5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-2-metoxi-tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-2-metil-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso f), utilizando el producto del ejemplo 4 paso d).

MS (APCI) 413 (M+H^{+}, 100%).

(f) 5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-7-[(2-hidroxi-1,1-dimetiletil)amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso f), utilizando el producto del ejemplo 4 paso e).

MS (APCI) 399 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,41 (1H, s), 7,41-7,30 (2H, m), 7,21-7,13 (1H, m), 6,64 (1H, bs), 4,79 (1H, t), 4,41 (2H, s), 3,53 (2H, d), 1,29 (6H, s).

Ejemplo 5 5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) (2R)-2-[[2-Amino-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 2 paso a), utilizando el producto del ejemplo 4 paso b), y (R)-(-)-2-amino-1-propanol.

MS (APCI) 384 (M+H^{+}, 100%).

(b) (2R)-2-[[2-Bromo-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso e), utilizando el producto del ejemplo 5 paso a).

MS (APCI) 448 (M+H^{+}, 100%).

(c) (2R)-2-[[5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-2-metoxi-tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso f), utilizando el producto del ejemplo 5 paso b).

MS (APCI) 398 (M+H^{+}, 100%).

(d) 5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso g), utilizando el producto del ejemplo 5 paso c).

MS (APCI) 385 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,41 (1H, s), 7,41-7,11 (4H, m), 4,72 (1H, t), 4,39 (2H, m), 4,21 (1H, m), 3,47-3,29 (2H, m), 1,09 (3H, d).

Ejemplo 6 5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-7-[[2-(hidroxietoxi)etil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) 2-[2-[[2-Amino-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]etoxi]etanol

Se preparó por el método del ejemplo 2 paso a), utilizando el producto del ejemplo 4 paso b) y 2-(2-aminoetoxi)etanol.

MS (APCI) 414 (M+H^{+}, 100%).

(b) 2-[2-[[2-Bromo-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]etoxi]etanol

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso e), utilizando el producto del ejemplo 6 paso a).

MS (APCI) 478 (M+H^{+}, 100%).

(c) 2-[2-[[5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-2-metoxi-tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]etoxi]etanol

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso f), utilizando el producto del ejemplo 6 paso b).

MS (APCI) 429 (M+H^{+}, 100%).

(d) 5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-7-[[2-(2-hidroxi-etoxi)etil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso g), utilizando el producto del ejemplo 6 paso c).

P.f. 213-4ºC.

MS (APCI) 415 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,41 (1H, s), 7,39-7,11 (4H, m), 4,57 (1H, t), 4,39 (2H, s), 3,57-3,38 (8H, m).

Ejemplo 7 5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-7-[[2-hidroxi-1-(hidroximetil)etil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) 2-[[2-Amino-5-[[2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-1,3-propanodiol

Se preparó por el método del ejemplo 2 paso a), utilizando el producto del ejemplo 4 paso b), y 2-amino-1,3-propanodiol.

MS (APCI) 400 (M+H^{+}, 100%).

(b) 2-[[2-Bromo-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-1,3-propanodiol

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso e), utilizando el producto del ejemplo 7 paso a).

MS (APCI) 464 (M+H^{+}, 100%).

(c) 2-[[5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-2-metoxi-tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-1,3-propanodiol

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso f), utilizando el producto del ejemplo 7 paso b).

MS (APCI) 415 (M+H^{+}, 100%).

(d) 5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-7-[[2-hidroxi-1-(hidroximetil)etil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso g), utilizando el producto del ejemplo 7 paso c).

P.f. 178-9ºC

MS (APCI) 401 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,41 (1H, s), 7,42-7,11 (4H, m), 4,66 (2H, s), 4,40 (2H, s), 4,19 (1H, m), 3,49 (4H, m).

Ejemplo 8 7-[(2-Aminoetil)amino]-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) Ácido [2-[[2-amino-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]etil]carbámico, 1,1-di- metiletil-éster

Se preparó por el método del ejemplo 2 paso a), utilizando el producto del ejemplo 4 paso b) y ácido (2-aminoetil)-carbámico, 1,1-dimetiletil-éster.

MS (APCI) 469 (M+H^{+}, 100%).

(b) Ácido [2-[[2-bromo-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]etil]carbámico, 1,1- dimetiletil-éster

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso e), utilizando el producto del ejemplo 8 paso a).

MS (APCI) 533 (M+H^{+}, 100%).

(c) Ácido [2-[[5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-2-metoxitiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]etil]carbámico, 1,1-dimetiletil-éster

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso f), utilizando el producto del ejemplo 8 paso b).

MS (APCI) 489 (M+H^{+}, 100%).

(d) 7-[(2-Aminoetil)amino]-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso g), utilizando el producto del ejemplo 8 paso c).

P.f. 215-6ºC.

MS (APCI) 370 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,00 (1H, s), 7,45-7,11 (3H, m), 6,35 (1H, bs), 4,37 (2H, s), 3,48 (2H, m), 2,92 (2H, t).

Ejemplo 9 5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-7-[(2-hidroxietil)amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) 2-[[2-Amino-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]etanol

Se preparó por el método del ejemplo 2 paso a), utilizando el producto del ejemplo 4 paso b) y etanolamina.

MS (APCI) 370 (M+H^{+}, 100%).

(b) 2-[[2-Bromo-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]etanol

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso e), utilizando el producto del ejemplo 9 paso a).

MS (APCI) 434 (M+H^{+}, 100%).

(c) 2-[[5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-2-metoxi-tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]etanol

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso f), utilizando el producto del ejemplo 9 paso b).

MS (APCI) 385 (M+H^{+}, 100%).

(d) 5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-7-[(2-hidroxietil)amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso g), utilizando el producto del Ejemplo 9 paso c).

P.f. 217-9ºC

MS (APCI) 371 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,43 (1H, s), 7,67-7,64 (1H, m), 7,39-7,33 (2H, m), 7,16-7,12 (1H, m), 4,73 (1H, t), 4,40 (2H, s), 3,52-3,42 (4H, m).

Ejemplo 10 N-[2-[[5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-2,3-dihidro-2-oxotiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]etil]metanosulfonamida (a)N-[2-[[2-Amino-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]etil]metanosulfonamida

Se preparó por el método del ejemplo 2 paso a), utilizando el producto del ejemplo 4 paso b) y N-[2-aminoetil]metanosulfonamida.

MS (APCI) 448 (M+H^{+}, 100%).

(b)N-[2-[[2-Bromo-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]etil]metanosulfonamida

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso e), utilizando el producto del ejemplo 10 paso a).

MS (APCI) 511 (M+H^{+}, 100%).

(c)N-[2-[[5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-2-metoxi-tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]etil]metanosulfonamida

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso f), utilizando el producto del ejemplo 10 paso b).

MS (APCI) 462 (M+H^{+}, 100%).

(d)N-[2-[[5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-2,3-dihidro-2-oxotiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]etil]metanosulfonamida

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso g), utilizando el producto del ejemplo 10 paso c).

P.f. 225-6ºC.

MS (APCI) 448 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,49 (1H, s), 7,72 (1H, t), 7,41-7,13 (4H, m), 4,43 (2H, bs), 3,49 (2H, m), 3,13 (2H, m), 2,89 (3H, s).

Ejemplo 11 (\pm)-5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-7-[(2-(2-hidroxi-etoxi)-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) (\pm)-2-[2-[[2-Amino-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]propoxi]etanol

Se preparó por el método del ejemplo 2 paso a), utilizando el producto del ejemplo 4 paso b) y (\pm)-2-[2-aminopropoxi]etanol.

MS (APCI) 428 (M+H^{+}, 100%).

(b) (\pm)-2-[2-[[2-Bromo-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]propoxi]etanol

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso e), utilizando el producto del ejemplo 11 paso a).

MS (APCI) 492 (M+H^{+}, 100%).

(c) (\pm)-2-[2-[[5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-2-metoxitiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]propoxi]etanol

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso f), utilizando el producto del ejemplo 11 paso b).

MS (APCI) 443 (M+H^{+}, 100%).

(d) (\pm)-5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-7-[[2-(2-hidroxietoxi)-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)- ona

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso g), utilizando el producto del ejemplo 11 paso c).

P.f. 221-2ºC.

MS (APCI) 429 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,43 (1H, s), 7,47-7,30 (3H, m), 7,17-7,13 (1H, m), 4,56 (1H, t), 4,40 (2H, s), 4,35 (1H, m), 3,49-3,32 (6H, m), 1,10 (3H, d).

Ejemplo 12 7-[[(1R)-2-Amino-1-metiletil]amino]-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona, trifluoroacetato (a) (2R)-2-[[2-Amino-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]propanamida

Se preparó por el método del ejemplo 2 paso a), utilizando el producto del ejemplo 4 paso b) e hidrocloruro de (2R)-2-aminopropanamida.

MS (APCI) 397 (M+H^{+}, 100%).

(b)N^{7}-[(1R)-2-Amino-1-metiletil]-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidina-2,7-diamina

A una solución del producto del ejemplo 12 paso a) (0,3 g) en tetrahidrofurano seco (10 ml) se añadió borano 2M en THF (10 ml) y la mezcla se calentó a reflujo durante 6 horas. Se enfrió bruscamente mientras estaba caliente con metanol (30 ml), se evaporó a sequedad y el residuo se recogió en metanol (30 ml) que contenía unas cuantas gotas de ácido clorhídrico concentrado. La mezcla se calentó luego a reflujo durante 1 hora más, y se evaporó a sequedad para dar un sólido amarillo pálido.

MS (APCI) 383 (M+H^{+}, 100%).

(c) Ácido[(2R)-2-[[2-amino-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]propil]carbámico, 1,1-dimetiletil-éster

A una solución del producto del ejemplo 12 paso b) (1,6 g) en THF (50 ml) se añadió di carbonato de diterc-butilo (0,91 g) y la mezcla se agitó durante dos días. Se evaporó a sequedad para dar 2,0 g.

MS (APCI) 483 (M+H^{+}, 100%).

(d) Ácido [(2R)-2-[[2-bromo-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]propil]carbámico, 1,1-dimetiletil-éster

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso e), utilizando el producto del ejemplo 12 paso c).

MS (APCI) 547 (M+H^{+}, 100%).

(e) Ácido [(2R)-2-[[5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-2-metoxitiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]propil]carbámico, 1,1-dimetiletil-éster

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso f), utilizando el producto del ejemplo 12 paso d).

MS (APCI) 498 (M+H^{+}, 100%).

(f) 7-[[(1R)-2-Amino-1-metiletil]amino]-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona, tri- fluoroacetato

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso g), utilizando el producto del ejemplo 12 paso e) y se purificó por el método del ejemplo 15 paso f).

MS (APCI) 384 (M+H^{+}, 100%).

\newpage

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,55 (1H, s), 7,81 (3H, bs), 7,45-7,31 (4H, m), 7,18-7,13 (1H, m), 4,51-4,34 (3H, m), 2,95 (2H, m), 1,14 (3H, d).

Ejemplo 13 5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-[(2-hidroxi-etil)amino]-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona, trifluoroacetato

A una solución del producto del ejemplo 12 paso f) (100 mg) en THF seco (5 ml) se añadió [[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oxi]-acetaldehído (49 mg) seguido por triacetoxiborohidruro de sodio (61 mg) y la mezcla se agitó durante 1 hora. La mezcla se acidificó con ácido clorhídrico concentrado, se agitó a la temperatura ambiente durante 1 hora y se evaporó luego a sequedad. El producto se purificó (HPLC), columna Novapak® C18, TFA acuoso al 0,1%:acetonitrilo, elución en gradiente 75:25 a 5:95 a lo largo de 15 minutos) para proporcionar el compuesto del título (0,021 g).

MS (APCI) 428 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 7,39-7,29 (2H, m), 7,17-12 (1H, m), 6,92 (1H, m), 4,91 (1H, s), 4,48-4,32 (3H, m), 3,54 (2H, m), 2,94-2,82 (4H, m), 1,12 (3H, m).

Ejemplo 14 5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-(dimetil-amino)-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

Se preparó por el método del ejemplo 13, utilizando el producto del ejemplo 12 paso f) y solución acuosa al 40% de formaldehído.

MS (APCI) 412 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,00 (1H, s), 7,39-7,31 (2H, m), 7,18-7,09 (2H, m), 4,39 (2H, q), 4,30 (1H, m), 3,31 (6H, bs), 2,43-2,38 (1H, m), 2,24-20 (1H, m), 1,07 (3H, d).

Ejemplo 15 5-[[[4-(2-Aminoetoxi)-3-clorofenil]metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)- ona, trifluoroacetato (a) 2-(2-Cloro-4-formilfenoxi)acetamida

A una solución de 3-cloro-4-hidroxibenzaldehído (10 g) en metanol (100 ml) se añadió t-butóxido de potasio 1,0M (64 ml). Se añadió a la mezcla 2-cloroacetamida (5,96 g) y la mezcla se calentó a reflujo durante una noche. Se evaporó la mezcla, se trituró el residuo con agua (500 ml) y se recogió el sólido para dar el compuesto del subtítulo (4,4 g).

NMR \deltaH (CDCl_{3}) 9,89 (1H, s), 7,97 (1H, d), 7,82 (1H, dd), 7,04 (1H, d), 6,73 (1H, s), 5,87 (1H, s), 4,63 (2H, s).

(b) 2-[2-Cloro-4-(hidroximetil)fenoxi]acetamida

A una solución del producto del ejemplo 15 paso a) (4,4 g) en etanol (500 ml) se añadió borohidruro de sodio (1,56 g) en la mezcla se dejó en agitación durante 1 hora. Se acidificó con ácido acético glacial, se evaporó a sequedad, se extrajo en acetato de etilo, y se lavó con agua para dar el compuesto del subtítulo (4,3 g).

NMR \deltaH (CDCl_{3}) 7,44 (1H, d), 7,29 (1H, d), 6,90 (1H, d), 6,81 (1H, s), 5,85 (1H, s), 4,63 (2H, s), 4,48 (2H, s), 1,96 (1H, s).

(c) 2-[4-[(Acetiltio)metil]-2-clorofenoxi]acetamida

Se añadió azocarboxilato de diisopropilo (5,5 ml) a una solución agitada de trifenilfosfina (7,31 g) en THF a 0ºC. Una vez completada la adición, se depositó un precipitado incoloro. Se añadió a esta suspensión una mezcla del producto del ejemplo 15 paso b) (3,0 g) y ácido tiolacético (2,00 ml) en THF (30 ml) a 0ºC. Se dejó que la mezcla alcanzara la temperatura ambiente durante una noche, se evaporó a sequedad y el residuo se purificó (SiO_{2}, 10% acetato de etilo:90% éter como eluyente) para dar el compuesto del subtítulo (3,5 g).

NMR \deltaH (CDCl_{3}) 7,35 (1H, d), 7,17 (1H, dd) 6,84 (1H, d), 6,76 (1H, s), 5,81 (1H, s), 4,54 (2H, s), 4,04 (2H, s), 2,35 (3H, s).

(d) 2-(2-Cloro-4-(mercaptometil)fenoxi]acetamida

A una solución del producto del ejemplo 15 paso c) (1,0 g) en metanol (50 ml) se añadieron pelets de hidróxido de sodio (0,15 g) y la mezcla se agitó durante 2 días. La mezcla se diluyó con agua y el compuesto del subtítulo se recogió por filtración (0,7 g).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 7,44 (1H, s), 7,38 (1H, d), 7,21 (1H, dd), 6,98 (1H, d), 4,55 (2H, s), 3,76 (2H, s).

(e) 7-[[(1R)-2-Hidroxi-1-metiletil]amino]-5-[(fenilmetil)sulfonil]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

A una solución del producto del ejemplo 3 paso d) (240 mg) en acetonitrilo (100 ml) y agua (100 ml) se añadió oxona (2,4 g) y la mezcla se calentó a 40ºC durante 2 horas. El acetonitrilo se eliminó por evaporación rotativa y el compuesto del subtítulo se recogió por filtración (235 mg).

MS (APCI) 381 (M+H^{+}, 100%).

(f) 5-[[[4-(2-Aminoetoxi)-3-clorofenil]metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2 (3H)-ona, trifluoroacetato

Una mezcla del producto del ejemplo 15 paso e) (100 mg), el producto del ejemplo 15 paso d) (329 mg) y borohidruro de sodio (50 mg) en una solución de DMSO (1 ml) y etanol (10 ml) se calentó a 55-60ºC durante 12 horas. La mezcla de reacción se evaporó a sequedad y el residuo se purificó (HPLC, columna Novapak® C18, TFA acuoso al 0,1%:acetonitrilo, elución en gradiente 95:5 a 5:95 a lo largo de 15 minutos) para proporcionar el compuesto del título (0,023 g).

MS (APCI) 442 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (D_{2}O) 7,46 (1H, bs), 7,32 (1H, d), 7,00 (1H, d), 4,36-4,20 (5H, m), 3,61 (2H, m), 3,46 (2H, m), 1,20

\hbox{(3H, d).}

Ejemplo 16 5-[[3-Cloro-4-metoxifenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) 3-Cloro-4-metoxibencenometanotiol

Se añadió tiourea (3,04 g, 0,04 mol) a una solución de bromuro de 3-cloro-4-metoxibencilo (4,0 g, 0,02 mol) en etanol (200 ml) y se calentó a reflujo durante 16 horas. La mezcla de reacción se concentró a vacío y el residuo se disolvió subsiguientemente en solución acuosa de hidróxido de sodio (30 g, 0,75 mol en 300 ml de agua) y se calentó a 80ºC durante 1 hora. La mezcla de reacción se enfrió en un baño de hielo y se acidificó por adición de ácido clorhídrico concentrado. El producto se aisló por extracción tres veces en dietil-éter. Las fases orgánicas reunidas se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y se concentraron a vacío, para dar el compuesto del subtítulo como un aceite incoloro con 83% de rendimiento (3,0 g).

NMR \deltaH (CDCl_{3}) 7,34 (1H, m), 7,18 (1H, dd), 6,86 (1H, d), 3,89 (3H, s), 3,68 (2H, d), 1,76 (1H, t).

(b) 5-[[3-Cloro-4-metoxifenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

3-Cloro-4-metoxibencenometanotiol (0,128 g, 0,68 mmol) preparado en el ejemplo 16 paso (a), el producto del ejemplo 15 paso e) (0,130 g, 0,349 mmol) y borohidruro de sodio (0,026 g, 0,68 mmol) se calentaron a reflujo a 50ºC en una mezcla de dimetilsulfóxido (6 ml) y etanol (10 ml). Después de 3 horas, y de nuevo después de 5 horas de tiempo de reacción, se añadieron porciones adicionales de borohidruro de sodio (0,05 g, 1,3 mmol) en etanol (2 ml) a la mezcla de reacción y se continuó el reflujo a 50ºC hasta que la conversión fue completa por hplc ms (15 horas en total). La mezcla de reacción se neutralizó por adición de ácido clorhídrico concentrado y el etanol se eliminó a vacío. El residuo se purificó por cromatografía en fase inversa sobre Symmetry C8, eluyendo con un gradiente de 25% a 95% de acetonitrilo en acetato de amonio acuoso 0,1M a lo largo de 10 minutos. El producto se liofilizó en metanol/agua/acetonitrilo para obtener el compuesto del subtítulo con 33% de rendimiento como un liofilizado blanco (0,046 g).

MS (APCI) 413 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,39 (1H, bs), 7,47 (1H, m), 7,36 (1H, m), 7,25 (1H, d), 7,06 (1H, d), 4,72 (1H, t), 4,32-4,21 (3H, m), 3,82 (3H, s), 3,49- 3,30 (2H, m), 1,11 (3H, d).

Ejemplo 17 5-[[3-Cloro-2-fluorofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) 3-Cloro-2-fluorobencenometanotiol

El compuesto del subtítulo se preparó como un aceite incoloro con rendimiento de 65% (2,51 g) por el método descrito en el ejemplo 16 paso a) a partir de bromuro de 3-cloro-2-fluorobencilo (5,0 g, 0,022 mol).

NMR \deltaH (CDCl_{3}) 7,32-7,21 (2H, m), 7,04 (1H, t), 3,75 (2H, d), 1,90 (1H, t).

(b) 5-[[3-Cloro-2-fluorofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

El compuesto del título se preparó por el método descrito en el ejemplo 16 paso b) a partir de 3-cloro-2-fluorobencenometanotiol, preparado en el ejemplo 17 paso a), y el producto del ejemplo 15 paso e).

El producto se obtuvo con 12% de rendimiento como un liofilizado blanco (0,038 g).

P.f. 234-5ºC.

MS (APCI) 401 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,4 (1H, bs), 7,55 (1H, m), 7,48 (1H, t), 7,26 (1H, d), 7,17 (1H, t), 4,72 (1H, bs), 4,38 (2H, m), 4,19 (1H, m), 3,3 (2H, m), 1,08 (3H, d).

Ejemplo 18 5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-7-[[(3R,4R)-4-hidroxi-pirrolidin-3-il]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) Ácido 3-[[2-amino-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-4-hidroxi-(3R,4R)-1- pirrolidina carboxílico, 1,1-dimetiletil-éster

Ácido (3R,4R)-3-amino-4-hidroxi-1-pirrolidina-carboxílico, 1,1-dimetiletil-éster (0,73 g), diisopropil-etilamina (1,0 ml) y el producto del ejemplo 4 paso b), se agitaron en NMP (10 ml) a 100ºC durante 28 horas. La mezcla enfriada se vertió en agua y el producto sólido se recogió, se lavó con agua y se secó al aire. El material bruto se purificó (SiO_{2}, acetato de etilo como eluyente) para dar el compuesto del subtítulo como un sólido incoloro (0,58 g), p.f. 182-5ºC.

MS (APCI) 511 (M+H, 100%)

(b) Ácido 3-[[2-bromo-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-4-hidroxi(3R,4R)-1- pirrolidina carboxílico, 1,1-dimetiletil-éster

Se preparó por el método del ejemplo paso e), utilizando el producto del ejemplo 18 paso a).

MS (APCI) 572 (M-H^{+}, 100%).

(c) Ácido 3-[[5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-2-metoxi-tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-4-hidroxi-(3R,4R)-1-pirrolidina carboxílico, 1,1-dimetiletil-éster

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso f), utilizando el producto del ejemplo 18 paso b).

MS (APCI) 526 (M+H^{+}, 100%).

(d) 5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-7-[[(3R,4R)-4-hidroxipirrolidin-3-il]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)- ona

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso g), utilizando el producto del Ejemplo 18 paso c).

P.f. 270ºC (descomposición).

MS (APCI) 412 (M+H^{+}, 100%).

NMR (\deltaH (d_{6}-DMSO) 7,32 (2H, m), 7,14 (1H, m), 6,46 (1H, d), 5,57 (1H, s), 4,39 (2H, s), 4,30 (2H, m), 3,39 (2H, m), 3,12 (1H, dd), 2,98 (1H, d).

\newpage

Ejemplo 19 5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-7-[(3R)-pirrolidin-3-ilamino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona, dihidrocloruro (a) Ácido 3-[[2-amino-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(3R)-1-pirrolidina-carboxílico, 1,1-dimetiletil-éster

Se preparó por el método del ejemplo 18 paso a), utilizando ácido (R)-3-amino-1-pirrolidina carboxílico, 1,1-dimetiletil-éster y el producto del ejemplo 4 paso b).

MS (APCI) 495 (M+H^{+}, 100%).

(b) Ácido 3-[[2-bromo-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(3R)-1-pirrolidina-carboxílico, 1,1-dimetiletil-éster

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso e), utilizando el producto del ejemplo 19 paso a).

MS (APCI) 559 (M+H^{+}, 100%).

(c) Ácido 3-[[5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-2-metoxi-tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(3R)-1-pirrolidina- carboxílico, 1,1-dimetiletil-éster

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso f), utilizando el producto del ejemplo 19 paso b).

MS (APCI) 510 (M+H^{+}, 100%).

(d) Dihidrocloruro de 5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[(3R)-pirrolidin-3-ilamino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2 (3H)-ona

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso g), utilizando el producto del ejemplo 19 paso c), y se convirtió después en la sal.

P.f. 178-181ºC.

MS (APCI) 396 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,75 (1H, s), 9,19 (2H, bd), 7,91 (1H, d), 7,37 (2H, m), 7,17 (1H, m), 4,66 (1H, m), 4,43 (2H, dd), 3,10-3,50 (4H, m), 2,17 (1H, m), 1,96 (1H, m).

Ejemplo 20 7-[[(1R)-2-Hidroxi-1-metiletil]amino]-5-[[(2-metil-4-tiazolil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) 6-Amino-2-[[(2-metil-4-tiazolil)metil]tio]-4(3H)-pirimidinona

4-Amino-6-hidroxi-2-mercaptopirimidina hidratada (16,1 g) e hidróxido de sodio pulverizado (8,0 g) se agitaron en DMF seca (100 ml) durante 20 min. Se añadió poco a poco hidrocloruro de 4-clorometil-2-metiltiazol monohidratado (20 g) y la suspensión resultante se agitó durante 18 h. La mezcla se vertió en agua y el producto sólido se recogió, se lavó con agua y se secó para proporcionar el compuesto del subtítulo (24,3 g).

MS (APCI) 255 (M+H^{+}, 100%).

(b) 2-Amino-5-[[(2-metil-4-tiazolil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7(6H)-ona

El producto del ejemplo 20 paso a) (24,3 g) y tiocianato de potasio (37,1 g) se agitaron en DMF seca (400 ml) con piridina (13,1 ml) a 0ºC. Se añadió bromo (4,5 ml) durante 1 hora. Después de agitar por espacio de 2 horas, la mezcla se vertió en agua. La solución resultante se concentró a un volumen pequeño y se añadió luego agua. El sólido resultante se recogió, se puso en ácido clorhídrico 2M y se precipitó por adición de solución saturada de bicarbonato de sodio. Se recogió el sólido, se lavó con agua y se secó para dar el compuesto del subtítulo, (8,7 g).

MS (APCI) 312 (M+H^{+}, 100%).

(c) 7-Cloro-5-[[(2-metil-4-tiazolil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2-amina

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso c), utilizando el producto del ejemplo 20 paso b), (4,3 g).

MS (APCI) 330/332 (M+H^{+}), 330 (100%).

(d) (2R)-2-[[2-Amino-5-[[(2-metil-4-tiazolil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 18 paso a), utilizando el producto del ejemplo 20 paso c).

P.f. 220-2ºC

MS (APCI) 369 (M+H, 100%).

(e) (2R)-2-[[2-Bromo-5-[[(2-metil-4-tiazolil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso e), utilizando el producto del ejemplo 20 paso d).

MS (APCI) 433 (M+H^{+}, 100%).

(f) (2R)-2-[[2-Metoxi-5-[[(2-metil-4-tiazolil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso f), utilizando el producto del ejemplo 20 paso e).

MS (APCI) 384 (M+H^{+}, 100%).

(g) 7-[[(1R)-2-Hidroxi-1-metiletil]amino]-5-[[(2-metil-4-tiazolil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso g), utilizando el producto del ejemplo 20 paso f).

P.f. 208-9ºC.

MS (APCI) 370 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,37 (1H, s), 7,35 (1H, s), 7,32 (1H, d), 4,73 (1H, t), 4,36 (2H, s), 4,21 (1H, m), 3,38 (2H, m), 2,62 (3H, s), 1,10 (3H, d).

Ejemplo 21 7-[[2-Hidroxi-1-(hidroximetil)etil]amino]-5-[[(2-metil-4-tiazolil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) 2-[[2-Amino-5-[[(2-metil-4-tiazolil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-1,3-propanodiol

Se preparó por el método del ejemplo 18 paso a), utilizando el producto del ejemplo 20 paso c) y 2-amino-1,3-propanodiol.

P.f. 158-160ºC.

MS (APCI) 385 (M+H, 100%).

(b) 2-[[2-Bromo-5-[[(2-metil-4-tiazolil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-1,3-propanodiol

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso e), utilizando el producto del ejemplo 21 paso a).

MS (APCI) 448 (M+H^{+}, 100%).

(c) 2-[[2-Metoxi-5-[[(2-metil-4-tiazolil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-1,3-propanodiol

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso f), utilizando el producto del ejemplo 21 paso b).

MS (APCI) 400 (M+H^{+}, 100%).

(d) 7-[[2-Hidroxi-1-(hidroximetil)etil]amino]-5-[[(2-metil-4-tiazolil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso g), utilizando el producto del ejemplo 21 paso c).

P.f. 239-243ºC.

MS (APCI) 386 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,37 (1H, s), 7,38 (1H, s), 7,24 (1H, d), 4,67 (2H, t), 4,36 (2H, s), 4,20 (1H, m), 3,50 (4H, m), 2,62 (3H, s).

Ejemplo 22 7-[(2-Hidroxi-1,1-dimetiletil)amino]-5-[[(2-metil-4-tiazolil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) 2-[[2-Amino-5-[[(2-metil-4-tiazolil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-2-metil-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 18 paso a), utilizando el producto del ejemplo 20 paso c), y 2-amino-2-metilpropanol.

P.f. 250-252ºC.

MS (APCI) 383 (M+H, 100%).

(b) 2-[[2-Bromo-5-[[(2-metil-4-tiazolil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-2-metil-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso e), utilizando el producto del ejemplo 22 paso a).

MS (APCI) 446 (M+H^{+}, 100%).

(c) 2-[[2-Metoxi-5-[[(2-metil-4-tiazolil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-2-metil-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso f), utilizando el producto del ejemplo 22 paso b).

MS (APCI) 398 (M+H^{+}, 100%).

(d) 7-[(2-Hidroxi-1,1-dimetiletil)amino]-5-[[(2-metil-4-tiazolil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso g), utilizando el producto del ejemplo 22 paso c).

P.f. 231-2ºC.

MS (APCI) 384 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,36 (1H, s), 7,37 (1H, s), 6,61 (1H, bs), 4,80 (1H, t), 4,37 (2H, s), 3,55 (2H, d), 2,62 (3H, s), 1,31 (6H, s).

Ejemplo 23 7-[(2-Hidroxi-1,1-dimetiletil)amino]-5-[[(2-metilfenil)metil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) 7-[(2-Hidroxi-1,1-dimetiletil)amino]-5-[(fenilmetil)sulfonil]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

Una solución agitada del producto del ejemplo 1 paso g) (0,14 g) en ácido acético glacial (30 ml) se trató con ácido peracético (36/40% en ácido acético, 2 ml), se agitó durante 2 h, y luego a 50ºC durante 1 h. La solución se extinguió con un exceso de dimetil-sulfuro y se evaporó para dar una goma.

MS (APCI) 395 (M+H^{+}, 100).

(b) 7-[(2-Hidroxi-1,1-dimetiletil)amino]-5-[[(2-metilfenil)metil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

El producto del ejemplo 23 paso a) se recogió en DMSO (1,73 ml), se trató con butóxido de potasio y de dividió en 3 porciones. Una porción se trató con 2-metilfenilmetil-mercaptano (0,053 g), se agitó a 50ºC durante 1 h a 2 h, se neutralizó con ácido acético glacial y se sometió a HPLC preparativa en fase inversa en una columna de 19 x 50 mm Symmetry C8 utilizando 10 a 60% de acetonitrilo en acetato de amonio acuoso al 0,1% durante 6 min a 20 ml/min para dar el compuesto del título.

MS (APCI) 377 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 1,33 (s, 6H); 2,35 (s, 3H); 3,57 (d, 2H); 4,33 (s, 2H); 4,82 (t, 1H); 6,57 (s ancho, 1H); 7,12-7,20 (mult., 3H); 7,41 (d, 1H); 12,37 (s ancho, 1H).

\newpage

Ejemplo 24 5-[(2-Furanilmetil)tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) 7-[[(1R)-2-Hidroxi-1-metiletil]amino]-5-[(fenilmetil)sulfonil]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

El compuesto del subtítulo se preparó a partir del producto del ejemplo 3 paso d), utilizando el método del ejemplo 23 paso a).

MS (ES) 381 (M+H^{+}, 100%).

(b) 5-[(2-Furanilmetil)tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

El compuesto del título se preparó a partir del producto del ejemplo 24 paso a), utilizando el método del ejemplo 23 paso b) utilizando furfuril-mercaptano.

MS (APCI) 339 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{4}-metanol) 1,12 (d, 3H); 3,41-3,45 (mult., 1H); 3,49-3,53 (mult., 1H); 4,24-4,32 (mult., 3H); 6,18-6,22 (mult., 2H); 7,29 (s ancho, 1H).

Ejemplo 25 7-[[(1R)-2-Amino-1-metiletil]amino]-5-[[(3-cloro-2-fluorofenil]metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) Ácido [(1R)-2-amino-1-metil-2-oxoetil]carbámico, 9H-fluoren-9-ilmetil-éster

Una solución de hidrocloruro de D-alaninamida (3 g) en solución de carbonato de sodio al 10% (50 ml) y dioxano (50 ml) se trató con cloruro de FMOC (6,24 g) en dioxano (40 ml) y se dejó en agitación durante una noche. La mezcla se diluyó con agua (500 ml) y el producto se recogió por filtración y se secó a vacío para dar 9,0 g del compuesto del subtítulo.

MS (ESI) BP 311 (+H).

(b) Ácido [(1R)-2-amino-1-metiletil]carbámico, 9H-fluoren-9-ilmetil-éster

A una solución del producto del ejemplo 25 paso a) (6,9 g) en THF (100 ml) se añadió complejo borano-metilsulfuro (4,4 ml) y la mezcla se calentó a reflujo durante 2 horas.

La mezcla se enfrió rápidamente cuidadosamente por adición de metanol (100 ml), se evaporó a sequedad y el residuo se recogió en metanol (100 ml) y se acidificó a pH 1-2 con ácido clorhídrico concentrado. Se calentó a reflujo durante 30 min y se evaporó luego a sequedad. El residuo se trituró con éter para dar un sólido, que se recogió por filtración, se disolvió en agua y precipitó la base libre por adición de solución acuosa de bicarbonato de sodio para dar el compuesto del subtítulo (3,1 g).

MS (ESI) BP 297 (+H).

(c) Ácido (2R)-[2-(9H-fluoren-9-ilmetoxi-carbonilamino)propil]carbámico, 1,1-dimetiletiléster

A una solución agitada del producto del ejemplo 25 paso b) (3,0 g) en THF (100 ml) se añadió di carbonato de di-terc-butilo (2,2 g) y la mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante 30 min. La mezcla se evaporó a sequedad y el producto bruto se purificó (SiO_{2}, diclorometano como eluyente) para dar el compuesto del subtítulo (3,8 g).

NMR \deltaH (CDCl_{3}) 7,76 (2H, m), 7,42 (2H, m), 7,39-26 (4H, s), 5,01 (1H, s), 4,85 (1H, s), 4,38 (2H, d), 4,19 (1H, t), 3,77 (1H, m), 3,18 (2H, m), 1,27 (9H, s).

(d) Ácido [(2R)-2-aminopropil]carbámico, 1,1-dimetiletil-éster

A una solución del producto del ejemplo 25 paso c) (3,8 g) en THF (100 ml) se añadió piperidina (5 ml) y la mezcla se dejó en reposo durante 1 hora a la temperatura ambiente. La mezcla se evaporó a sequedad y el residuo se purificó (SiO_{2}, 5% metanol:diclorometano como eluyente) para dar el compuesto del subtítulo como un aceite incoloro (1,7 g).

NMR \deltaH (CDCl_{3}) 4,95 (1H, s), 3,13 (1H, m), 2,99 (1H, m), 2,87 (1H, m), 1,38 (9H, s), 1,08 (3H, d).

(e) Ácido [(2R)-2-[[2-amino-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]propil]carbámico, 1,1-dimetil- etil-éster

El producto del ejemplo 1 paso c) (2,0 g) y el producto del ejemplo 25 paso d) (1,3 g) en un disolvente de NMP (10 ml) que contenía base de Hunigs (3 ml) se calentaron a 110ºC durante 10 horas. La mezcla se evaporó a sequedad y se purificó (SiO_{2}, (1:1) diclorometano:acetato de etilo como eluyente) para dar el compuesto del subtítulo (1,9 g).

MS (ESI) BP 447 (+H).

(f) Ácido [(2R)-2-[[2-amino-5-[(fenilmetil)sulfonil]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]propil]carbámico, 1,1-di- metiletil-éster

A una solución de OXONA (7,0 g) en agua (400 ml) se añadió hidrogeno carbonato de sodio hasta que el pH se ajustó a 7,4. Se añadió a esta solución una solución del producto del ejemplo 25 paso e) (1,9 g) en acetonitrilo (100 ml) y la mezcla se calentó a 40ºC durante 2 horas. Una vez completada la reacción, el acetonitrilo se separó por evaporación rotativa para dar el compuesto del subtítulo (1,7 g).

MS (ESI) BP 479 (+H)

(g) 3-Cloro-2-fluoro-bencenometanotiol

Una mezcla de bromuro de 3-cloro-2-fluorobencilo (5,0 g) y tiourea (3,4 g) en un disolvente de etanol (200 ml) se calentó a reflujo durante 16 horas. La mezcla se evaporó a sequedad y se añadió al residuo una solución de hidróxido de sodio (30 g) en agua (300 ml) y la mezcla se calentó a reflujo durante 1 hora. Se dejó enfriar a la temperatura ambiente y se acidificó con ácido clorhídrico concentrado, y el producto se extrajo en éter para dar el compuesto del subtítulo como un aceite (2,51 g).

NMR \deltaH (CDCl_{3}) 7,32-21 (2H, m), 7,04 (1H, t), 3,75 (2H, d), 1,90 (1H, t).

(h) Ácido [(2R)-2-[[2-amino-5-[[(3-cloro-2-fluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]propil]carbámico, 1,1-dimetiletil-éster

A una mezcla del producto del ejemplo 25 paso f) (1,2 g), y el producto del ejemplo 25 paso g) (1,6 g) en un disolvente mixto de etanol (30 ml) y DMSO (5 ml) se añadió borohidruro de sodio (100 mg) y la mezcla se calentó a 50ºC durante 2 horas. El etanol se eliminó por evaporación rotativa y el producto bruto se extrajo en acetato de etilo y se lavó con agua. Se obtuvo el compuesto del subtítulo por purificación (SiO_{2}, 1:1) diclorometano:acetato de etilo como eluyente) para dar (1,95 g).

MS (ESI) BP 499 (+H).

(i) Ácido [(2R)-2-[[2-bromo-5-[[(3-cloro-2-fluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]propil]carbámico, 1,1-dimetiletil-éster

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso e), utilizando el producto del ejemplo 25 paso h).

MS (APCI) 562 (M+H^{+}, 100%).

(j) Ácido [(2R)-2-[[5-[[(3-cloro-2-fluorofenil)metil]tio]-2-metoxitiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]propil]carbámico, 1,1-dimetiletil-éster

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso f), utilizando el producto del ejemplo 25 paso i).

MS (APCI) 514 (M+H^{+}, 100%).

(k) 7-[[(1R)-2-Amino-1-metiletil]amino]-5-[[(3-cloro-2-fluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

Se preparó por el método del ejemplo 1 paso g), utilizando el producto del ejemplo 25 paso j).

P.f. 241-3ºC.

MS (APCI) 400 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 7,56 (1H, m), 7,49 (1H, m), 7,17 (1H, m), 7,05 (1H, bs), 4,44 (1H, m), 4,39 (2H, ab), 2,92 (2H, d), 1,13 (3H, d).

Ejemplo 26 (2S)-2-[[5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-2,3-dihidro-2-oxotiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-3-hidroxipropa- namida (a) (2S)-2-[[2-Amino-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-3-hidroxipropanamida

El compuesto del subtítulo se preparó de acuerdo con el ejemplo 2 paso a) utilizando el producto del ejemplo 4 paso b) (2 g, 6 mmol), 1-serinamida (0,66 g, 6 mmol), NMP (80 ml) y diisopropiletilamina (2 ml) para dar el compuesto del subtítulo (1,36 g).

P.f. 145-151ºC

MS (APCI) 413 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 8,10 (2H, br s), 7,40-7,07 (6H, m), 4,57 (1H, q), 4,43 (1H, d), 4,36 (1H, d), 3,71 (2H, d).

(b) (2S)-2-[[5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-2,3-dihidro-2-oxotiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-3-hidroxipropanamida

Se preparó por uso consecutivo de los métodos del ejemplo 1 paso e), f) y g) utilizando el producto del ejemplo 26 paso a). Los compuestos formados durante los pasos separados no se purificaron o caracterizaron.

MS (APCI) 414 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,47 (1H, br), 7,47 (1H, br), 7,42 (1H, s), 7,34 (2H, m), 7,13 (1H, m), 7,09 (1H, s), 4,90 (1H, t), 4,58 (1H, m), 4,39 (2H, m), 3,70 (2H, m).

Ejemplo 27 7-[[(1R)-2-Hidroxi-1-metiletil]amino]-5-[(2-tienilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) 7-[[(1R)-2-Hidroxi-1-metiletil)amino]-5-[(2-tienilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

El compuesto del título se preparó por el método descrito en el ejemplo 16 paso b) a partir del producto del ejemplo 15 paso e) (0,300 g, 0,79 mmol) y 2-tiofenometanotiol (0,32 ml, 3,9 mmol).

El producto se obtuvo con rendimiento bajo del 3% como un liofilizado blanco (0,010 g).

MS (APCI) 355 (M+H^{+}, 100%).

NMR \delta_{H} (d_{6}-DMSO) 12,50 (1H, bs), 7,36 (1H, m), 7,16 (1H, bs), 7,07 (1H, m), 6,92 (1H, m), 4,72 (1H, bs), 4,55 (2H, d), 4,26 (1H, m), 3,44 (2H, m), 1,12 (3H, d).

Ejemplo 28 7-[[(1R)-2-Hidroxi-1-metiletil]amino]-5-[[[3-metil-4-(metilsulfonil)fenil]metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)- ona (a) 3-Metil-4-(metiltio)benzaldehído

Se añadió cloruro de estaño(IV) (13,6 ml, 0,116 mol) a una solución enfriada en baño de hielo de 1-metil-2-(metiltio)benceno (10 g, 0,073 mol) en diclorometano anhidro (200 ml) bajo nitrógeno y se agitó durante 2 horas más a 0ºC. Se introdujo \alpha,\alpha-diclorometil-metil-éter (6,56 ml, 0,073 mol) y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura inferior a 10ºC antes de retirar el enfriamiento. Después de alcanzar la temperatura ambiente, la mezcla de reacción se vertió en hielo/agua (400 ml), se agitó y se extrajo luego con diclorometano (x3). Las capas orgánicas reunidas se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron, se concentraron sobre gel de sílice y se purificaron por cromatografía súbita, eluyendo con dietiléter/isohexano (10:1) para dar el compuesto del subtítulo como un aceite pardo (6,54 g) con rendimiento de 54%.

GCMS 166 (M^{+}, 100%).

NMR \delta_{H} (CDCl_{3}) 9,91 (1H, s), 7,68 (1H, m), 7,62 (1H, s), 7,24 (1H, t), 2,54 (3H, s), 2,36 (3H, s).

(b) 3-Metil-4-(metiltio)bencenometanol

Se añadió borohidruro de sodio (1,40 g, 0,037 mol) a una solución enfriada en baño de hielo del producto del ejemplo 28 paso a) (6,16 g, 0,037 mol) en etanol (50 ml). Después de 1 hora, la mezcla de reacción se neutralizó por adición cuidadosa de ácido clorhídrico acuoso (2 molar) y se concentró a vacío para eliminar el disolvente orgánico. La solución acuosa remanente se extrajo luego con acetato de etilo (x3). Las capas orgánicas reunidas se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron, y se concentraron a vacío para dar el compuesto del subtítulo como un aceite pardo (6 g) con rendimiento cuantitativo.

GCMS 168 (M^{+}, 100%).

NMR \delta_{H} (CDCl_{3}) 7,18 (3H, m), 4,62 (2H, bs), 2,46 (3H, s), 2,33 (3H, s).

(c) 3-Metil-4-(metilsulfonil)bencenometanol

Se agitó ácido 3-cloroperoxibenzoico (grado 57-86%, 20,4 g) en diclorometano (150 ml), se secó sobre sulfato de magnesio anhidro y se filtró luego. El filtrado se añadió gota a gota durante 1 hora a una solución agitada y enfriada en baño de hielo del producto del ejemplo 28 paso b) (5,67 g, 0,034 mol) en diclorometano (50 ml). La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se lavó con solución acuosa de hidrogeno carbonato de sodio seguido por solución acuosa de ditionito de sodio (10 g de Na_{2}O_{4}S_{2} en 150 ml de agua). La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró, y se concentró a vacío antes de purificación por cromatografía súbita, eluyendo con diclorometano/metanol (100:2). El compuesto del subtítulo se obtuvo como un aceite amarillo (5,52 g) con rendimiento de 82%.

MS (APCI) 201,1 (M+H^{+}, 94,3%).

NMR \delta_{H} (CDCl_{3}) 7,87 (1H, d), 7,38 (2H, m), 5,40 (1H, q), 4,56 (2H, d), 3,18 (3H, s), 2,61 (3H, s).

(d) Acetato de 3-metil-4-(metilsulfonil)bencenometanotiol

Se añadió azodicarboxilato de dietilo (4,33 ml, 0,028 mol) a una solución enfriada en baño de hielo de trifenilfosfina (7,20 g, 0,028 mol) en tetrahidrofurano (40 ml). Se añadió a la suspensión resultante una solución del producto del ejemplo 28 paso c) (5,5 g, 0,028 mol) disuelto en tetrahidrofurano (20 ml). Después que se hubo disuelto el precipitado, se añadió ácido tiolacético a la solución de reacción y se retiró el enfriamiento. Después de 16 horas a la temperatura ambiente, la mezcla de reacción se concentró sobre gel de sílice y se purificó por cromatografía súbita, eluyendo con isohexano/acetato de etilo (2:1). El compuesto del subtítulo se obtuvo como un sólido de color rosado (2,46 g) con rendimiento de 35%.

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 7,84 (1H, d), 7,36 (2H, m), 4,16 (2H, s), 3,19 (3H, s), 2,61 (3H, s), 2,37 (3H, s).

(e) Bis[[3-metil-4-(metilsulfonil)fenil]metil]disulfuro

Una mezcla del producto del ejemplo 28 paso d) (1,98 g, 7,66 mmol) y amoniaco metanólico 7 molar (30 ml) se agitó durante 24 horas. El producto precipitó de la solución como un sólido blanco y se aisló por filtración, después de lo cual se secó a vacío. El filtrado se trató análogamente con amoniaco 7 molar en metanol y produjo una segunda cosecha de un producto sólido blanco. En total, el compuesto del subtítulo se obtuvo con 32% de rendimiento (0,534 g).

MS (APCI) 451 (M+NH_{4}^{+}, 98,9%).

NMR \delta_{H} (d_{6}-DMSO) 7,88 (2H, s), 7,38-7,34 (4H, m), 3,88 (4H, s), 3,20 (6H, s), 2,64 (6H, s).

(f) 7-[[(1R)-2-Hidroxi-1-metiletil]amino]-5-[[[3-metil-4-(metilsulfonil)fenil]metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin- 2(3H)-ona

El compuesto del título se preparó por el método descrito en el ejemplo 16 paso b) utilizando el producto del ejemplo 15 paso e) (0,20 g, 0,53 mmol) y el producto del ejemplo 28 paso e) (0,34 g, 0,79 mmol) para dar 11% de producto como un liofilizado blanco (0,025 g).

MS (APCI) 441 (M+H^{+}, 100%).

NMR \delta_{H} (d_{6}-DMSO) 12,40 (1H, s), 7,81 (1H, d), 7,52 (2H, m), 7,33 (1H, d), 4,74 (1H, t), 4,35 (2H, s), 4,19 (1H, m), 3,41 (1H, m), 3,34-3,28 (1H, m), 3,18 (3H, s), 2,61 (3H, s), 1,08 (3H, d).

Ejemplo 29 5-[[[3-Cloro-4-(trifluorometoxi)fenil]metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) 3-Cloro-4-(trifluorometoxi)bencenometanotiol

A una solución de bromuro de 3-cloro-4-(trifluoro-metoxi)bencilo (5 g) en etanol (100 ml) se añadió tiourea (5 g) y la mezcla se calentó a reflujo durante 2 horas. La mezcla se evaporó a sequedad y el residuo se recogió en agua (100 ml). Se añadieron a esta solución pelets de hidróxido de sodio (3 g) y la mezcla se calentó a reflujo durante 1 hora. La mezcla se dejó enfriar a la temperatura ambiente y se acidificó con ácido clorhídrico concentrado, se extrajo la mezcla con éter, se secó y se evaporó para dar el compuesto del subtítulo como un sólido céreo incoloro (3,5 g).

NMR \delta_{H} (CDCl_{3}) 7,35-7,09 (3H, m), 3,58 (2H, s).

(b) 5-[[[3-Cloro-4-(trifluorometoxi)fenil]metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

El compuesto del título se preparó por el método descrito en el ejemplo 16 paso b) utilizando el producto del ejemplo 15 paso e) (0,40 g, 1,05 mmol) y el producto del ejemplo 29 paso a) (0,71 g, 1,5 mmol) para dar 10% de producto como un liofilizado blanco (0,046 g).

MS (APCI) 467 (M+H^{+}, 100%).

NMR \delta_{H} (d_{6}-DMSO) 12,42 (1H, s), 7,75 (1H, m), 7,52 (2H, m), 7,43 (1H, d), 4,72 (1H, t), 4,34 (2H, d), 4,18 (1H, quintete), 3,46-3,27 (2H, m), 1,07 (3H, d).

Ejemplo 30 5-[[[2-Fluoro-3-(trifluorometil)fenil]metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)- ona (a) 2-Fluoro-3-(trifluorometil)bencenometanotiol

El compuesto del subtítulo se preparó a partir de bromuro de 2-fluoro-(3-trifluorometil)bencilo (10 g) utilizando el método del ejemplo 29 paso a).

NMR \delta_{H} (CDCl_{3}) 7,68-7,18 (3H, m), 3,74 (2H, s), 1,98 (1H, s).

(b) 5-[[[2-Fluoro-3-(trifluorometil)fenil]metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

El compuesto del título se preparó por el método descrito en el ejemplo 16 paso b) utilizando el producto del ejemplo 15 paso e) (0,47 g, 1,23 mmol) y el producto del Ejemplo 30 paso a) (0,775 g, 3,7 mmol) para dar 5% de producto como un liofilizado blanco (0,025 g).

MS (APCI) 435 (M+H^{+}, 100%).

NMR \delta_{H} (d_{6}-DMSO) 12,42 (1H, s), 7,92 (1H, t), 7,68 (1H, t), 7,35 (2H, m), 4,71 (1H, bs), 4,42 (2H, m), 4,16 (1H, quintete), 3,40-3,30 (2H, m), 1,07 (3H, d).

Ejemplo 31 Monohidrocloruro de 5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[2-[(dimetilamino)etil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) 2-Bromo-7-cloro-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidina

El producto del ejemplo 4 paso b) (8,0 g) se suspendió en bromoformo (200 ml) seguido por adición de nitrito de terc-butilo (8 ml) y se calentó el todo a 60ºC durante 30 minutos. Se eliminaron los disolventes a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en columna (sílice - 1:1 diclorometano/isohexano) para dar un sólido amarillo (5,6 g).

MS (APCI) 409/411 (M+H, 100%).

(b) 7-Cloro-5-[(2,3-difluorofenilmetil)tio]-2-metoxi-tiazolo[4,5-d]pirimidina

El producto del ejemplo 31 paso a) (5,6 g) se suspendió en metanol (150 ml) y se añadió hidróxido de potasio en polvo (0,77 g). Se agitó el todo a la temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla se ajustó a pH 7 con unas cuantas gotas de ácido clorhídrico concentrado antes de evaporarla a sequedad. Se purificó por cromatografía en columna (sílice - 3:2 a 1:1 isohexano/diclorometano) para dar un sólido blanco (2,0 g).

MS (APCI) 360/362 (M+H, 100%).

(c) 7-Cloro-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

El producto del ejemplo 31 paso b) (2,0 g) se disolvió en dioxano (150 ml) seguido por la adición de ácido clorhídrico concentrado (1 ml) y agua (1 ml), y el todo se calentó a 40ºC durante 67 horas. La mezcla se evaporó a sequedad y se purificó por cromatografía en columna (sílice - diclorometano) para dar un sólido blanco (1,4 g).

MS (APCI) 346/348 (M+H, 100%).

(d) Monohidrocloruro de 5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[2-[(dimetilamino)etil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

El producto del ejemplo 31 paso c) (1,4 g) se disolvió en tetrahidrofurano seco (5 ml) y se añadió a la solución N,N-dimetiletilenodiamina (0,25 g) en una bomba de dedos que se calentó a 80ºC durante 24 horas. Se eliminaron los disolventes a presión reducida y el residuo se repartió entre acetato de etilo y salmuera. Los extractos orgánicos reunidos se secaron (sulfato de sodio) y se evaporaron a presión reducida para purificar el residuo resultante por cromatografía en columna (sílice - 5:1 acetato de etilo/metanol) para dar la base libre como un sólido pegajoso (0,095 g). Se convirtió éste en el monohidrocloruro por suspensión del sólido en metanol (10 ml) seguido por adición de ácido clorhídrico concentrado (3 gotas) para asegurar la disolución, y luego agua (100 ml) para la liofilización del compuesto, obteniéndose un polvo pardo (0,080 g).

P.f. 263ºC (descomposición)

MS (APCI) 398 (M+H, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,57 (1H, s), 10,22 (1H, s), 7,94 (1H, t), 7,40 (1H, m), 7,34 (1H, m), 7,16 (1H, m), 4,43 (2H, s), 3,78 (2H, s), 3,21 (2H, m), 2,78 (6H, d).

Ejemplo 32 5-[[(2-Fluorofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) 2-[[2-Amino-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

El producto del ejemplo 1 paso c) (25,0 g), D-alaninol (12,3 g) y diisopropiletilamina (26,0 g) se diluyeron en
N-metilpirrolidinona (250 ml) y se agitaron a 100ºC durante 24 h antes de enfriar y verter la mezcla de reacción en H_{2}O (2,5 l). El precipitado se filtró y se secó a vacío antes de preabsorberlo sobre gel de sílice. La cromatografía utilizando EtOAc, y 4% MeOH/EtOAc como eluyentes proporcionó el producto deseado como un sólido amarillo (9,0 g, 32%).

MS (APCI) 347 (M+H, 100%).

(b) 2-[(2-Amino-5-mercaptotiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il)amino]-(2R)-1-propanol

Se añadió poco a poco sodio metálico a una solución del producto del ejemplo 32 paso a) (5,0 g) en amoniaco (150 ml) hasta que persistió una coloración azul. Se añadió luego cloruro de amonio y se dejó evaporar el disolvente. El residuo se disolvió en H_{2}O (200 ml) y se filtró antes de neutralizar con solución 2M de HCl. El precipitado gris se filtró, se lavó con H_{2}O (200 ml) y se secó a vacío durante 48 h para dar el compuesto del subtítulo como un sólido pardo (3,0 g).

MS (APCI) 258 (M+H, 100%).

(c) 2-[[2-Amino-5-[[(2-fluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

Se añadió poco a poco bromuro de 2-fluorobencilo (0,369 g) a una solución del producto del ejemplo 32 paso b) (0,5 g) y diisopropiletilamina (0,26 g) en DMSO/N-metilpirrolidinona (4 ml/0,5 ml) a 50ºC y se mantuvo en agitación durante 1 h. La mezcla se repartió entre H_{2}O (200 ml) y EtOAc (120 ml). Las materias orgánicas se recuperaron y se lavaron ulteriormente con H_{2}O (200 ml), se secaron sobre MgSO_{4} y se concentraron sobre gel de sílice. El compuesto del subtítulo se purificó por cromatografía súbita utilizando DCM y luego EtOAc como eluyentes para dar un sólido blanco (245 mg, 35%).

MS (APCI) 366 (M+H, 100%).

(d) 2-[[2-Bromo-5-[[(2-fluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

Se añadió nitrito de isoamilo (0,3 ml) a una suspensión del producto del ejemplo 32 paso c) (0,23 g) en bromoformo (15 ml) y acetonitrilo (15 ml) a 50ºC. Se mantuvo la agitación durante 10 min antes de concentrarla a aproximadamente 3 ml. El residuo se purificó por cromatografía en columna utilizando 20% EtOAc/DCM como eluyente para dar el compuesto del subtítulo como un sólido amarillo (102 mg, 38%).

MS (APCI) 429 (M+H, 100%).

(e) 2-[[5-[[(2-Fluorofenil)metil]tio]-2-metoxitiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

Se añadió hidróxido de potasio (27 mg) a una solución del producto del ejemplo 32 paso d) (0,1 g) en MeOH (10 ml). La mezcla se agitó durante 24 h antes de neutralizar a pH 7 con solución 2M de HCl. Las materias volátiles se eliminaron a vacío y el producto se utilizó directamente en el paso siguiente.

MS (APCI) 381 (M+H, 100%).

(f) 5-[[(2-Fluorofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

El producto del ejemplo 32 paso e) se disolvió en 1,4-dioxano (50 ml), H_{2}O (1 ml) y solución concentrada de HCl (0,5 ml) y se agitó durante 20 h a 40ºC. Se eliminaron las materias volátiles a presión reducida y el producto bruto se purificó por HPLC preparativa para proporcionar el compuesto del subtítulo como un sólido blanco (21 mg).

MS (APCI) 367 (M+H, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,40 (1H, s), 8,14-7,11 (5H, m), 4,72 (1H, t), 4,35 (2H, m), 4,22 (1H, m), 3,47-3,29 (2H, m), 1,10 (3H, d).

Ejemplo 33 7-[(1R)-2-Hidroxi-1-metiletil]amino]-5-[[(2-metoxifenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) 2-[[2-Amino-5-[[(2-metoxifenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 32 paso c), utilizando el producto del ejemplo 32 paso b).

MS (APCI) 378 (M+H^{+}, 100%).

(b) 2-[[2-Bromo-5-[[(2-metoxifenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 32 paso d), utilizando el producto del ejemplo 33 paso a).

MS (APCI) 441 (M+H^{+}, 100%).

(c) 2-[[2-Metoxi-5-[[(2-metoxifenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 32 paso e), utilizando el producto del ejemplo 33 paso b).

MS (APCI) 393 (M+H^{+}, 100%).

(d) 7-[[(1R)-2-Hidroxi-1-metiletil]amino]-5-[[(2-metoxifenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

Se preparó por el método del ejemplo 32 paso f), utilizando el producto del ejemplo 33 paso c).

MS (APCI) 379 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 7,40 (1H, dd), 7,22 (1H, dt), 6,97 (1H, d), 6,84 (1H, dt), 6,00 (1H, d), 4,25 (2H, m), 4,15 (1H, m), 3,83 (3H, s), 3,48-3,31 (2H, m), 1,10 (3H, d).

Ejemplo 34 7-[[(1R)-2-Hidroxi-1-metiletil]amino]-5-[(2-fenoxietil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) 2-[[2-Amino-5-[(2-fenoxietil)tiol]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

MS (APCI) 378 (M+H^{+}, 100%).

(b) 2-[[2-Bromo-5-[(2-fenoxietil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 32 paso d), utilizando el producto del ejemplo 34 paso a).

MS (APCI) 441 (M+H^{+}, 100%).

(c) 2-[[2-Metoxi-5-[(2-fenoxietil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 32 paso e), utilizando el producto del ejemplo 34 paso b).

MS (APCI) 393 (M+H^{+}, 100%).

(d) 7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]-5-[(2-fenoxietil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

Se preparó por el método del ejemplo 32 paso f), utilizando el producto del ejemplo 34 paso c).

MS (APCI) 379 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,37 (1H, s), 7,30-7,26 (3H, m), 6,96-6,91 (3H, m), 4,71 (1H, t), 4,23-4,14 (3H, m), 3,46-3,28 (4H, m), 1,08 (3H, d).

Ejemplo 35 7-[[(1R)-2-Hidroxi-1-metiletil]amino]-5-[[(3-metilfenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) 2-[[2-Amino-5-[[(3-metilfenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

MS (APCI) 362 (M+H^{+}, 100%).

(b) 2-[[2-Bromo-5-[[(3-metilfenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 32 paso d), utilizando el producto del ejemplo 35 paso a).

MS (APCI) 425 (M+H^{+}, 100%).

(c) 2-[[2-Metoxi-5-[[(3-metilfenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 32 paso e), utilizando el producto del ejemplo 35 paso b).

MS (APCI) 377 (M+H^{+}, 100%).

(d) 7-[[(1R)-2-Hidroxi-1-metiletil]amino]-5-[[(3-metilfenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

Se preparó por el método del ejemplo 32 paso f), utilizando el producto del ejemplo 35 paso c).

MS (APCI) 363 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,37 (1H, s), 7,23-7,16 (4H, m), 7,04 (1H, d), 4,73 (1H, t), 4,28 (2H, m), 4,24 (1H, m); 3,48-3,30 (2H, m), 2,28 (3H, s), 1,11 (3H, d).

Ejemplo 36 5-[[(2-Fluoro-3-metilfenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) 2-[[2-Amino-5-[[(2-fluoro-3-metilfenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

MS (APCI) 380 (M+H^{+}, 100%).

(b) 2-[[2-Bromo-5-[[(2-fluoro-3-metilfenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 32 paso d), utilizando el producto del ejemplo 36 paso a).

MS (APCI) 443 (M+H^{+}, 100%).

(c) 2-[[5-[[(2-Fluoro-3-metilfenil)metil]tio]-2-metoxi-tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 32 paso e), utilizando el producto del ejemplo 36 paso b).

MS (APCI) 395 (M+H^{+}, 100%).

(d) 5-[[(2-Fluoro-3-metilfenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

Se preparó por el método del ejemplo 32 paso f), utilizando el producto del ejemplo 36 paso c).

MS (APCI) 381 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,39 (1H, s), 7,37-7,00 (4H, m), 4,72 (1H, t), 4,33 (2H, m), 4,22 (1H, m), 3,47-3,30 (2H, m), 2,23 (3H, s), 1,11 (3H, d).

Ejemplo 37 5-[[(3-Clorofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) 2-[[2-Amino-5-[[(3-Clorofenil)metil]tio]tiazolo][4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

MS (APCI) 382 (M+H^{+}, 100%).

(b) 2-[[2-Bromo-5-[[(3-clorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 32 paso d), utilizando el producto del ejemplo 37 paso a).

MS (APCI) 445 (M+H^{+}, 100%).

(c) 2-[[5-[[(3-Clorofenil)metil]tio]-2-metoxitiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 32 paso e), utilizando el producto del ejemplo 37 paso b).

MS (APCI) 397 (M+H^{+}, 100%).

(d) 5-[[(3-Clorofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

Se preparó por el método del ejemplo 32 paso f), utilizando el producto del ejemplo 37, paso c).

MS(APCI) 383 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,40 (1H, s), 7,49 (1H, d), 7,43-7,30 (4H, m), 4,72 (1H, t), 4,32 (2H, m), 4,21 (1H, m), 3,48-3,26 (2H, m), 1,09 (3H, d).

Ejemplo 38 5-[[(3-Bromofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) 2-[[2-amino-5-[[(3-bromofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 32 paso c), utilizando el producto del ejemplo 32, paso b).

MS(APCI) 426 (M+H^{+}, 100%).

(b) 2-[[2-bromo-5-[[(3-bromofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 32 paso d), utilizando el producto del ejemplo 38, paso a).

MS(APCI) 491 (M+H^{+}, 100%).

(c) 2-[[5-[[(3-bromofenil)metil]tio]-2-metoxitiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 32 paso e), utilizando el producto del ejemplo 38, paso b).

MS(APCI) 243 (M+H^{+}, 100%).

(d) 5-[[(3-bromofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

Se preparó por el método del ejemplo 32 paso f), utilizando el producto del ejemplo 38, paso c).

MS(APCI) 427 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,40 (1H, s), 7,63 (1H, t), 7,46-7,24 (4H, m), 4,72 (1H, t), 4,31 (2H, m), 4,21 (1H, m), 3,48-3,26 (2H, m), 1,10 (3H, d).

Ejemplo 39 5-[[[4-(Difluorometoxi)fenil]metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) 2-[[2-Amino-5-[[[4-(difluorometoxi)fenil]metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 32, paso c), utilizando el producto del ejemplo 32 paso b).

MS(APCI) 414 (M+H^{+}, 100%).

(b) 2-[[2-Bromo-5-[[[4-(difluorometoxi)fenil]metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 32, paso d), utilizando el producto del ejemplo 39 paso a).

MS(APCI) 477 (M+H^{+}, 100%).

(c) 2-[[5-[[[4-(Difluorometoxi)fenil]metil]tio]-2-metoxi-tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 32, paso e), utilizando el producto del ejemplo 39 paso b).

MS(APCI) 429 (M+H^{+}, 100%).

(d) 5-[[[4-(Difluorometoxi)fenil]metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)- ona

Se preparó por el método del ejemplo 32, paso f), utilizando el producto del ejemplo 39 paso c).

MS(APCI) 415 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,38 (1H, s), 7,48 (2H, dt), 7,26 (1H, d), 7,19 (1H, t), 7,11 (2H, dd), 4,73 (1H, t), 4,31 (2H, m), 4,21 (1H, m), 3,47-3,30 (2H, m), 1,10 (3H, d).

Ejemplo 40 (\pm)-5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-7-[[2-hidroxi-1-(metoximetil)etil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) Hidrocloruro de (\pm) 2-amino-3-metoxi-1-propanol

A una suspensión de DL-3-metoxi-alanina (1,0 g) en THF seco (100 ml) se añadió complejo borano-metilsulfuro (10 ml) y la mezcla se calentó a reflujo durante 16 horas. La mezcla se enfrió luego rápidamente con metanol mientras se encontraba a reflujo, se evaporó a sequedad y el residuo se recogió en cloruro de hidrógeno metanólico (100 ml) y se calentó a reflujo durante 2 horas más, después de lo cual se evaporó a sequedad para dar el compuesto del subtítulo como una goma incolora (1,0 g).

NMR \deltaH (D_{2}O) 3,40 (3H, s), 3,53-3,74 (4H, m), 3,81 (1H, m).

(b) (\pm)-2-[[2-Amino-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-3-metoxi-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 12, paso a), utilizando el producto del ejemplo 4, paso b) y el producto del ejemplo 40, paso a).

MS(APCI) 414 (M+H^{+}, 100%).

(c) (\pm)-2-[[2-Cloro-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-3-metoxi-1-propanol

A una solución del producto del ejemplo 40, paso b) (1,0 g) en una mezcla de ácido clorhídrico concentrado (40 ml) y agua (32 ml) enfriada en agua con hielo se añadió una solución de nitrito de sodio (0,4 g) en agua (5 ml), y se agitó a esta temperatura durante 2 horas. La mezcla se extrajo luego en acetato de etilo, se secó y se evaporó para dar el compuesto del subtítulo (0,6 g).

MS(APCI) 434 (M+H^{+}, 100%).

(d) (\pm)-2-[[5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-2-metoxi-tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-3-metoxi-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 1, paso f), utilizando el producto del ejemplo 40, paso c).

MS(APCI) 429 (M+H^{+}, 100%).

(e) (\pm)-5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-7-[[2-hidroxi-1-(metoximetil)etil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)- ona

Se preparó por el método del ejemplo 1, paso g), utilizando el producto del ejemplo 40, paso d).

MS(APCI) 415 (M+H^{+}, 100%).

Ejemplo 41 7-[[2-Hidroxi-1-(hidroximetil)etil]amino]-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) 2-[[2-Amino-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-1,3-propanodiol

Se preparó por el método del ejemplo 12, paso a), utilizando el producto del ejemplo 1, paso c) y 2-amino-1,3-propanodiol.

MS(APCI) 364 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 7,42-7,38 (1H, m), 7,28 (1H, t), 7,22 (1H, t), 5,30 (1H, d), 4,63 (1H, bs), 4,28 (2H, s), 4,03 (1H, m), 3,54-3,40 (4H, m).

(b) 2-[[2-Cloro-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-1,3-propanodiol

Se preparó por el método del ejemplo 40, paso c) y el producto del ejemplo 41, paso a).

MS(APCI) 384 (M+H^{+}, 100%).

(c) 2-[[2-Metoxi-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-1,3-propanodiol

Se preparó por el método del ejemplo 1, paso f) y el producto del ejemplo 41, paso b).

MS(APCI) 379 (M+H^{+}, 100%).

(d) 7-[[2-Hidroxi-1-(hidroximetil)etil]amino]-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

Se preparó por el método del ejemplo 1, paso g) y el producto del ejemplo 41, paso c).

MS(APCI) 365 (M+H^{+}, 100%).

Ejemplo 42 5-[[(2-Bromofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) 2-[[2-Amino-5-[[(2-bromofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 32, paso c), utilizando el producto del ejemplo 32, paso b).

MS(APCI) 428 (M+H^{+}, 100%).

(b) 2-[[2-Bromo-5-[[(2-bromofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 1, paso e), utilizando el producto del ejemplo 42, paso a).

MS(APCI) 491 (M+H^{+}, 100%).

(c) 2-[[5-[[(2-Bromofenil)metil]tio]-2-metoxitiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-(2R)-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 1, paso f), utilizando el producto del ejemplo 42, paso b).

MS(APCI) 443 (M+H^{+}, 100%).

(d) 5[[(2-Bromofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

Se preparó por el método del ejemplo 1, paso g), utilizando el producto del ejemplo 42, paso c).

MS(APCI) 427 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,41 (1H, s), 7,65-7,14 (5H, m), 4,72 (1H, t), 4,42 (2H, s), 4,21 (1H, m), 3,47-3,30 (2H, m), 1,10 (3H, d).

Ejemplo 43 5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona, sal de sodio

El producto del ejemplo 5, paso d) se suspendió en agua y se añadió a esta suspensión 1 equivalente de solución 0,1 N de hidróxido de sodio, seguido por la adición de una pequeña parte alícuota de tetrahidrofurano para ayudar a la disolución. La solución resultante se liofilizó luego para dar el compuesto del título como un sólido incoloro.

Pf. 218-220ºC.

MS(APCI) 385 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 7,39-7,09 (3H, m), 5,60 (1H, d), 4,65 (1H, m), 4,34 (2H, q), 4,09 (1H, m), 3,44-3,27 (2H, m), 1,06 (3H, d).

Ejemplo 44 5-[[3-Cloro-2-fluorofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona, sal de sodio

Se preparó como en el ejemplo 43 utilizando el producto del ejemplo 17, paso b).

MS(APCI) 401 (M+H^{+}, 100%).

Ejemplo 45 (\pm)-5-[[(2,3-Difluorofenil)metil]tio]-7-[[2-hidroxi-1-(metoximetil)etil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona, sal de sodio

Se preparó por el método del ejemplo 43, utilizando el producto del ejemplo 40, paso e).

PF >250ºC.

MS(APCI) 415 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 7,39-7,04 (3H, m), 5,51 (1H, d), 4,68 (1H, t), 4,34 (2H, q), 4,22 (1H, m), 3,51-3,35 (4H, m), 3,32 (3H, s).

Ejemplo 46 7-[[2-Hidroxi-1-(hidroximetil)etil]amino]-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona, sal de sodio

Se preparó por el método del ejemplo 43, utilizando el producto del ejemplo 41, paso d).

Pf. 231-2ºC

MS(APCI) 365 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 7,41-7,18 (5H, m), 5,30 (1H, d), 4,63 (2H, s), 4,28 (2H, s), 4,06 (1H, m), 3,50 (4H, m).

Ejemplo 47 7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona, sal de sodio

Se preparó por el método del ejemplo 43, utilizando el producto del ejemplo 3, paso d).

Pf. (se contrae a 110) funde a 221-225ºC

MS(APCI) 349 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 7,41-7,18 (5H, m), 5,58 (1H, d), 4,65 (1H, t), 4,28 (2H, q), 4,11 (1H, m), 3,49-3,31 (2H, m), 1,08 (3H, d).

Ejemplo 48 5-[(5-Cloro-1,2,3-tiadiazol-4-il)tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (a) (2R)-2-[[2-Amino-5-[(5-cloro-1,2,3-tiadiazol-4-il)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 32, paso c), utilizando el producto del ejemplo 32, paso b) y 5-cloro-4-(clorometil)-1,2,3-tiadiazol.

MS(APCI) 390 (M+H^{+}, 100%).

(b) (2R)-2-[[2-Cloro-5-[[(5-cloro-1,2,3-tiadiazol-4-il)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 40, paso c) y utilizando el producto del ejemplo 48, paso a).

MS(APCI) 409 (M+H^{+}, 100%).

(c) (2R)-2-[[5-[[(5-Cloro-1,2,3-tiadiazol-4-il)metil]tio]-2-metoxitiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-1-propanol

Se preparó por el método del ejemplo 1, paso f) y utilizando el producto del ejemplo 48, paso b).

MS(APCI) 405 (M+H^{+}, 100%).

(d) 5-[(5-Cloro-1,2,3-tiadiazol-4-il)tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona

Se preparó por el método del ejemplo 1, paso g) y utilizando el producto del ejemplo 48, paso c).

MS(APCI) 391 (M+H^{+}, 100%).

NMR \deltaH (d_{6}-DMSO) 12,39 (1H, s), 7,39 (1H, d), 4,76 (2H, AB), 4,70 (1H, t), 4,24 (1H, m), 3,48-3,30 (2H, m), 1,11 (3H, d).

Datos farmacológicos Ensayo de fijación de ligandos

Se adquirió [^{125}I]IL-8 (humana, recombinante) de Amersham, Reino Unido, con una actividad específica de 2.000 Ci/mmol. Todos los restantes productos químicos eran de calidad analítica. Se expresaron niveles altos de hrCXCR2 en células HEK293 (células 293 de riñón de embrión humano ECACC No. 85120602) (Lee et al. (1992) J. Biol. Chem. 267, pp 16283-16291). Se multiplicó cDNA de hrCXCR2 y se clonó a partir de mRNA de neutrófilos humanos. El DNA se clonó en PCRScript (Stratagene) y los clones se identificaron utilizando DNA. La secuencia codificante se sub-clonó en el vector de expresión eucariota RcCMV (Invitrogen). Se preparó DNA plasmídico utilizando Quiagen Megaprep 2500 y se transfectó en células HEK 293 utilizando el reactivo Lipofectamina (Gibco BRL). Las células del clon que se expresaba al nivel más alto se recogieron en solución salina tamponada con fosfato que contenía 0,2% (p/v) de ácido etilenodiaminatetraacético (EDTA) y se centrifugaron (200 g, 5 min). El sedimento de células se suspendió de nuevo en tampón de homogeneización enfriado en hielo [HEPES 10 mM (pH 7,4), ditiotreitol 1 mM, EDTA 1 mM y un panel de inhibidores de proteasas (fluoruro de fenil-metil-sulfonilo 1 mM, 2 \mug/ml de inhibidor de tripsina de soja, benzamidina 3 mM, 0,5 \mug/ml de leupeptina y 100 \mug/ml de bacitracina)] y se dejó que las células se hincharan durante 10 minutos. La preparación de células se disgregó utilizando un mortero manual de vidrio/homogeneizador con mano de PTFE y las membranas celulares se recogieron por centrifugación (45 minutos, 100.000 g, 4ºC). La preparación de membrana se guardó a -70ºC en tampón de homogeneización complementado con solución salina de Tyrode (NaCl 137 mM, KCl 2,7 mM, NaH_{2}PO_{4} 0,4 mM), 0,1% (p/v) de gelatina y 10% (v/v) de glicerol.

Todos los ensayos se realizaron en placas de filtración de 96 pocillos MultiScreen de 0,45 \mum (Millipore, Reino Unido). Cada ensayo contenía \sim50 pM de [^{125}I]IL-8 y membranas (equivalentes a \sim200.000 células) en tampón de ensayo (solución salina de Tyrode complementada con HEPES 10 mM (pH 7,4), CaCl_{2} 1,8 mM, MgCl_{2} 1 mM, 0,125 mg/ml de bacitracina y 0,1% (p/v) de gelatina]. Adicionalmente, se pre-disolvió en DMSO un compuesto de fórmula (I) de acuerdo con los ejemplos y se añadió hasta alcanzar una concentración final de 1% (v/v) DMSO. El ensayo se inició con la adición de membranas y, después de 1,5 horas a la temperatura ambiente, las membranas se recogieron por filtración utilizando un distribuidor de vacío Millipore MultiScreen y se lavaron dos veces con tampón de ensayo (sin bacitracina). La placa de respaldo se retiró del ensamblaje de placas MultiScreen, se secaron los filtros a la temperatura ambiente, se cortaron a punzón y se contaron luego en un contador \gamma Cobra.

Se encontró que los compuestos de fórmula (I) de acuerdo con los ejemplos tenían valores CI_{50} menores que (<) 10 \muM.

Ensayo de movilización intracelular del calcio

Se prepararon neutrófilos humanos a partir de sangre periférica tratada con EDTA, como se ha descrito previamente (Baly et al. (1997) Methods in Enzymology 287, pp 70-72), en tampón de almacenamiento [solución salina de Tyrode (NaCl 137 mM, KCl 2,7 mM, NaH_{2}PO_{4} 0,4 mM) complementado con glucosa 5,7 mM y HEPES 10 mM (pH 7,4)].

La quimioquina GRO\alpha (humana, recombinante) se adquirió de R&D Systems (Abingdon, Reino Unido). Todos los restantes productos químicos eran de calidad analítica. Los cambios en el calcio intracelular libre se midieron fluorométricamente cargando neutrófilos con el colorante fluorescente sensible al calcio, fluo-3, como se ha descrito previamente (Merritt et al. (1990) Biochem. J. 269, pp 513-519). Las células se cargaron durante una hora a 37ºC en tampón de carga (tampón de almacenamiento con 0,1% (p/v) de gelatina) que contenía fluo-3 AM éster 5 \muM, se lavaron con tampón de carga y se suspendieron nuevamente después en solución salina de Tyrode complementada con glucosa 5,7 mM, 0,1% (p/v) de seroalbúmina bovina (BSA), CaCl_{2} 1,8 mM y MgCl_{2} 1 mM. Las células se pipetearon en microplacas de 96 pocillos con paredes negras y fondo claro (Costar, Boston, EE.UU.) y se centrifugaron (200 g, 5 minutos, temperatura ambiente).

Un compuesto de fórmula (I) de acuerdo con los ejemplos se pre-disolvió en DMSO y se añadió hasta una concentración final de 0,1% (v/v) DMSO. Los ensayos se iniciaron por la adición de una concentración A_{50} de GRO\alpha y se observó el aumento transitorio en la fluorescencia de fluo-3 (\lambda_{Ex} = 490 nm y \lambda_{Em}= 520 nm) utilizando un equipo FLIPR (Lector de Placas de Imagen Fluorométrico, Molecular Devices, Sunnyvale, EE.UU.).

Se ensayaron los compuestos de fórmula (I) de acuerdo con los ejemplos y se encontró que eran antagonistas del receptor CXCR2 en los neutrófilos humanos.

Claims

1. Un compuesto de fórmula (I) o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo

10

en la cual

R^{1} representa un grupo C_{3}-C_{7} carbocíclico, C_{1}-C_{8} alquilo, C_{2}-C_{6} alquenilo o C_{2}-C_{6} alquinilo, estando cada uno de los grupos sustituido opcionalmente con uno o más grupos sustituyentes seleccionados independientemente de átomos de halógeno, -OR^{4}, -NR^{5}R^{6}, -CONR^{5}R^{6}, -COOR^{7}, -NR^{8}COR^{9}, -SR^{10}, -SO_{2}R^{10}, -SO_{2}NR^{5}R^{6}, -NR^{8}SO_{2}R^{9}, fenilo, naftilo o un anillo aromático de 5 ó 6 miembros que contiene uno o más heteroátomos seleccionados de N, S y O, estando los anillos fenilo, naftilo y aromático sustituidos opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente de átomos de halógeno, grupos ciano, nitro, -OR^{4}, NR^{5}R^{6}, -CONR^{5}R^{6}, -COOR^{7}, -NR^{8}COR^{9}, -SR^{10}, -SO_{2}R^{10}, -SO_{2}NR^{5}R^{6}, -NR^{8}SO_{2}R^{9}, C_{1}-C_{6} alquilo o trifluorometilo;

(b): un anillo de 3-8 miembros que contiene opcionalmente uno o más átomos seleccionados de O, S, NR^{8} y el mismo opcionalmente sustituido con C_{1}-C_{3}-alquilo o halógeno;

(c): un grupo arilo o heteroarilo, cada uno de los cuales puede estar sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente de átomos de halógeno, grupos ciano, nitro, -OR^{4}, -NR^{5}R^{6}, -CONR^{5}R^{6}, -NR^{8}COR^{9}, -SO_{2}NR^{5}R^{6}, -NR^{8}SO_{2}R^{9}, C_{1}-C_{6} alquilo y trifluorometilo;

o

R^{10} representa un átomo de hidrógeno o un grupo C_{1}-C_{6} alquilo o fenilo, pudiendo estar sustituidos opcionalmente los dos últimos de los cuales con uno o más grupos sustituyentes seleccionados independientemente de átomos de halógeno, fenilo, -OR^{17} y -NR^{15}R^{16}; y cada uno de R^{7}, R^{8}, R^{9}, R^{11}, R^{12}, R^{13}, R^{14}, R^{15}, R^{16} y R^{17} representa independientemente un átomo de hidrógeno o un grupo C_{1}-C_{6} alquilo o fenilo.

2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el cual R^{1} representa un grupo bencilo opcionalmente sustituido.

3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en el cual uno de R^{2} y R^{3} es hidrógeno y el otro es C_{1}-C_{6} alquilo sustituido con hidroxi.

4. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, seleccionado de:

(\pm)-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[[2-(2-hidroxietoxi)-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-[(2-hidroxietil)amino]-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2
(3H)-ona,

5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

5-[[[4-(2-aminoetoxi)-3-clorofenil]metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2
(3H)-ona,

5-[(2-furanilmetil)tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

7-[[(1R)-2-amino-1-metiletil]amino]-5-[[(3-cloro-2- fluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

5-[[[3-cloro-4-(trifluorometoxi)fenil]metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2
(3H)-ona,

5-[[[2-fluoro-3-(trifluorometil)fenil]metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2
(3H)-ona,

5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[2-[(dimetil-amino)etil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]-5-[[(2-metoxifenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

7-[[2-hidroxi-1-(hidroximetil)etil]amino]-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

y sus sales y solvatos farmacéuticamente aceptables.

5. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, seleccionado de:

sal de sodio de 5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2
(3H)-ona,

sal de sodio de 5-[[3-cloro-2-fluorofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

sal de sodio de (\pm)-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[[2-hidroxi-1-(metoximetil)etil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2((3H)-ona,

sal de sodio de 7-[[2-hidroxi-1-(hidroximetil)etil]amino]-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona, o

6. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, seleccionado de:

trifluoroacetato de 7-[[(1R)-2-amino-1-metiletil]-amino]-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

trifluoroacetato de 3-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[[(1R)-2-[(2-hidroxietil)amino]-1-metiletil]amino]tiazolo
[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

trifluoroacetato de 5-[[[4-(2-aminoetoxi)-3-cloro-fenil]metil]tio]-7-[[(1R)-2-hidroxi-1-metiletil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona,

monohidrocloruro de 5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[2-[(dimetilamino)etil]amino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2
(3H)-ona, o

dihidrocloruro de 5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]-7-[(3R)-pirrolidin-3-ilamino]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona.

7. Un proceso para la preparación de un compuesto de fórmula (I) como se define en la reivindicación 1, que comprende:

(a) tratar un compuesto de fórmula (IIA):

11

donde R^{1}, R^{2} y R^{3} son como se define en la fórmula (I) con un tiol R^{1}SH en presencia de una base adecuada, o

(b) tratar un compuesto de fórmula (IIB):

12

donde R^{1}, R^{2} y R^{3} son como se define en la fórmula (I) y X es un grupo lábil con un alcóxido metálico, seguido por tratamiento con un ácido o base,

y opcionalmente, después de (a) o (b), formar una sal farmacéuticamente aceptable.

8. Un compuesto de fórmula (IIA) o (IIB) como se define en la reivindicación 7, con la salvedad de que la fórmula (IIB) no puede representar los compuestos:

i): 2-[[2-bromo-5-[(fenilmetil)tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-2-metil-1-propanol;

ii): 2-[[2-bromo-5-[[(2,3-difluorofenil)metil]tio]tiazolo[4,5-d]pirimidin-7-il]amino]-2-metil-1-propanol;

9. Un compuesto de fórmula (IIIA):

13

donde R^{2} y R^{3} son como se define en la fórmula (I) y X es NH_{2}.

10. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I); o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable de la misma, de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 en asociación con un adyuvante, diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable.

11. Un proceso para la preparación de una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 10, que comprende mezclar un compuesto de fórmula (I), o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 con un adyuvante, diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable.

12. Un compuesto de fórmula (I), o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 para uso en terapia.

13. Uso de un compuesto de fórmula (I), o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 en la fabricación de un medicamento para uso en terapia.

14. Un compuesto, sal o solvato de acuerdo con la reivindicación 12 para uso en el tratamiento de una enfermedad mediada por quimioquinas, en la cual la quimioquina se fija a uno o más receptores de quimioquinas.

15. Un compuesto, sal o solvato de acuerdo con la reivindicación 14, en el cual el receptor de quimioquinas pertenece a la subfamilia de receptores de quimioquinas CXC.

16. Un compuesto, sal o solvato de acuerdo con la reivindicación 14 y 15, en el cual el receptor de quimioquinas es el receptor CXCR2.

17. Un compuesto, sal o solvato de acuerdo con la reivindicación 12, para uso en el tratamiento de una enfermedad inflamatoria en un paciente que padece dicha enfermedad o corre el riesgo de padecerla.

18. Un compuesto, sal o solvato de acuerdo con la reivindicación 12, en el cual la enfermedad es una enfermedad en la cual está asociada angiogénesis con niveles elevados de la quimioquina CXCR2.

19. Un compuesto, sal o solvato de acuerdo con la reivindicación 12, en el cual la enfermedad es psoriasis.

20. Un compuesto, sal o solvato de acuerdo con la reivindicación 12, en el cual la enfermedad es COPD.

21. Un compuesto, sal o solvato de acuerdo con la reivindicación 12, en el cual la enfermedad es cáncer.

22. Un compuesto, sal o solvato de acuerdo con la reivindicación 12, en el cual la enfermedad es del tracto gastrointestinal.