DE2331223C2

DE2331223C2 - S-substituierte-2-Thioadenosine, deren 5'-Monophosphate, Verfahren zu deren Herstellung und Arzneimittel, welche diese enthalten

Info

Publication number: DE2331223C2
Application number: DE19732331223
Authority: DE
Inventors: Motonobu Ichino; Kazuhiro Iizuka; Kiyomi Kikugawa; Tokuro Saiki Oita Nakamura; Hideo Suehiro; Leiko Sugata
Original assignee: Kohjin Holdings Co Ltd
Current assignee: Kohjin Holdings Co Ltd
Priority date: 1972-06-19
Filing date: 1973-06-19
Publication date: 1984-11-22
Also published as: DE2331223A1

Description

Es 1st aus G. V. R. Born und M. J. Cross, Proc. Physlol. Soc. 29 (1962) bekannt, daß Adenosln ein starker Inhibitor für die ADP-Induzlerte Blutplätlchen-Aggrcgatlon (Thrombozylen) Ist. Es ist ebenfalls bekannt, daß Adenosln-5'-monophosphat ein Inhibitor Ist. Auch 2-Mcthylthlo-adenosln-5'-monophosphat Ist nach der GB-PS 12 26 699 ein Inhibitor.

Aus G. V. R. Born, Nature 202 (1964) Ist es weiterhin bekannt, daß 2-Chloradenosln eine starke und lang andauernde Inhlblerungswlrkung aufweist, wobei jedoch recht schwerwiegende unerwünschte Nebenwirkungen auftreten. Dosen von 1 bis 100 mg/kg verursachten bei Intravenöser Verabreichung einen kardiovaskulären Kollaps bei Mausen, und bei anderen Tieren verlangsamte sich der Herzschlag merklich (R. H. Thorp und L. B. Cobbln, Arch. Int. pharmacodyn. 118 [1959]). Deshalb Ist 2-Chloradcnosln für pharmazeutische Zwecke nicht geeignet.

Nach der US-PS 37 52 805 wirken auch 2-Nlcderalkyl-thioadcnuslne, wie 2-Methylthloadenosln und 2-Propylthioadenosln als Inhibitoren, doch Ist I hire Wirkung als Inhibitor nur schwach.

Obwohl zahlreiche Medikamente bekannt sind, die eine Plattchenaggrcgatlon Inhibieren, sind zur Zelt keine Arzneimittel auf dem Markt, die (a) eine selektive Plilttchcnaggrcgatlon-Inhlblerungsaktlvltat zeigen, (b) eine hohe Aktivität aufweisen, (c) eine langanhaltcnde Aktivität haben und (d) eine niedrige Toxlzltat haben.

Aufgabe der Erfindung ist es, neue S-substltulerte-2-Thloadcno.slne, deren 5'-Monophosphate und deren Salze, ein Verfahren zur Herstellung der Verbindungen In hoher Ausbeute und Aggregalionslnhlbltorcn für Blutplättchen zu schaffen, die die oben genannten Merkmale (a) bis (d) zeigen. Diese Aufgabe wird durch den Gegenstand der Patentansprüche gelöst.

Die erfindungsgemäßen S-substltulericn-2-Thloadenoslne haben die allgemeine Formel

OH

worin R die Im Anspruch I angegebene Bedeutung hai. Die erfindungsgemäßen .S-substltulerlcn-2-Thloadcnosln-5'-monophosphatc haben die allitcmclnc Formel

	h	23 31223	Erfindung sind auch die pharmazeu-	ADP Induzierten Blut-	. Die ermittelten ID₅₀-Werte sind In	2-trans-Croiylthloadenosln-5'-monophosphat	Lösungsmittel	menschliches	Kaninchen-	>	10
	RS j		tisch annehmbaren Salze, z. B. Lithium-, Natrium-, Kalium- oder Ammoniumsalze.	plättchen-Aggregatlon in Human- und Kanlnchen-Pii«sma mit den bekannten 2-Nlederaikylthloadenoslnderiva-			Plasma	Plasma
	H₂O₃POCH_{2 ο}		Die erfindungsgemäßen Verbindungen wurden hinsichtlich der Inhibierung der durch	ten sowie mit Adenosln und Adenosln-5'-monophosphat (AMP) verglichen			ID₁₁₁ 3 χ IO *	M ADP ID«, 10-5 M ADP
	OH OH			Tabelle 1 zusammengefaßt.						15
	worin R die vorstehend angegebene Bedeutung		Tabelle 1 (Verglelchsvcrsuche)		physlol. Kochsalzlösung	15,0 χ 10-'	13,5 χ lfr⁵
	hat. Eingeschlossen In die		Die Inhlblcrung von ADP-Induzlerter Blutplüttchen-Aggregatlon durch S-substliulerte-2-Thloadenoslne	DMSO	8,Ox 10*	3,0 χ lfr⁵
			Verbindung	physlol. Kochsalzlösung	7,8 χ 10-'	3,3 χ lfr⁵
			physiol. Kochsalzlösung	200,0 χ lfr*	121,0χ lfr⁵
			physlol. Kochsalzlösung	108,0 χ 10*	45,0 χ lfr⁵
		Vergleich:	physlol. Kochsalzlösung	34,5 χ 10-"	42.5 χ lfr⁵
		2-Methylthlo AMP (NH₄)					ZJ
		Adenosln	physlol. Kochsalzlösung	0,8 χ ΙΟ"*
			physlol. Kochsalzlösung	1,1 χ ία⁶
		AMP (NH₄)	physlol. Kochsalzlösung	12,0x10*
		2-Methylthlo AR	physlol. Kochsalzlösung	6,0 χ 10*
		2-n-Propylthlo AR	physlol. Kochsalzlösung	2,2 χ 10"
	erfindungsgemäße Verbindungen:
	2-n-Amylthio AMP (NH₄)	physlol. Kochsalzlösung	0,7 χ lfr"
	2-Allylthlo AMP (NH₄)	physlol. Kochsalzlösung	0,2 χ 10*		35
	2-Benzylthlo AMP (NH₄)
	2-(p-Fluorobenzyl)thlo AMP (NH₄)	physlol. Kochsalzlösung	2,3 χ 10"
	2-n-Hexylthloadenosln-5'-monophosphat				40
	(NH₄)	physlol. Kochsalzlösung	5,2 χ 1&"
	2-Heptylthloadenosln-5'-monophosphat (NH₄)
	2-n-Octylthloadenosln-5'-monophosphai	physlol. Kochsalzlösung	3,5 χ 10"
	(NH₄)			45
	2-n-Nonylthloadenosln-5'-monophosphat	physlol. Kochsalzlösung	0.7 χ 10*
	(NH₄)
	2-n-Decylthloadenosln-5'-monophosphai	physlol. Kochsalzlösung	0,4 χ 10-"
	(NH₄)	physlol. Kochsalzlösung	1,2 χ 10"
	2-(2-Äthyl-n-hexyl)thloadenosln-5'-mono-			50
	phosphat (NH₄)	physlol. Kochsalzlösung	3,0 χ 10-"
	2-Cyclopentylthloadcnosln-5'-monophosphat
	(NH₄)	physlol. Kochsalzlösung	1,8 χ 10"
	2-Cyclohexylthioadenosln-5'-monophosphat			55
	2-Cyclohexylmethylthloadenosln-5'-mono-	physlol. Kochsalzlösung	8,2 χ 10"
	phosphat (NH₄)
	2-p-Chlorbcnzylthloadcnosln-5'-monopho.sphal
	(NH₄)
	ψ, 2-p-Nltroben/.ylthloadeno.sln-5'-monophosphat	60
	fc (NH₄)
	\: ί

	65



Nr Λ N ι

Fortsetzung Verbindung Losungsmittel

menschliches
Plasma
ID,„3xlO'· M ADP

Kaninchen-Plasma
ID,„ IO 5 M ADP

2-/?-Methallylthioadenosln-5'-monophosphat physlol. Kochsalzlösung 3.1 χ 10''

2-Benzy!thloadenosln	physlol. Kochsalzlösung
2-(p-Chlorbenzyl)-thloadenosln	physlol. Kochsalzlösung
2-(p-Nltrobenzyl)-thloadenosln	physlol. Kochsalzlösung
2-Allylthloadenc3ln	physlol. Kochsalzlösung
2-(trans-Crotyl)-thloadenosln	DMSO
2-(/?-MethalIyl)-thIoadenosln	DMSO
2-Diathylaminoathylthloadenosln	physlol. Kochsalzlösung
2-(p-Fluorbenzyl)-thloadenosln	physlol. Kochsalzlösung
2-n-Amylthloadenosln	physlol. Kochsalzlösung
2-lso-Amylthloadenosln	physlol. Kochsalzlösung
2-n-Hexylthioadenosln	DMSO
2-n-Heptylthioadenosln	DMSO
2-n-Ociylthloadenosln	DMSO
2-n-Nonylthloadenosln	DMSO
2-n-Decyllhloadenosln	DMSO
2-(2-Äthyl-n-hexyl)-thloadenosln	DMSO
2-Cyclopentylthloadenosln	physlol. Kochsalzlösung
2-Cyclohexylthioadenosln	DMSO
2-CyclohexyImethylthloadenosln	DMSO
AMP: Adenosln-5'-monophosphal
AR: Adenosln
DMSO: Dlmethylsulfoxld
ID<₀: gibt die Konzentration (M) an.	bei welcher die Piaitchcnaggn

2,0 χ 10' 4,0 χ 10 ' 2.5 χ 10' 4,3 χ 10 ⁵

8.0 χ ΙΟ"' 4,2 χ 10'

12,OxIO⁵ 3,5 χ 10' 1,8x10' 2,5 χ Ι0-' 3,2 χ 10 ' 4,2 χ 10' 4,8 χ 10' 11,Ox 10' 12,Ox 10 ⁵ 0,9 χ 10 ⁵ 0,5 χ IO ' 0,2 χ 10'

2.1 χ 10'

Aus dem Vergleich der IDn geht hervor, daß von den erflndungsgemaßen Verbindungen niedrigere Konzentrationen benötigt werden, um eine Inhibierung von 50* zu erzielen, als von 2-Mcthyl-lhloadcnosln-5'-monophosphat oder 2-Nledrlgalkylthloadenoslnen oder von AMP. Adcnosln hat eine zwar starke Inhlblcrungsaktlvltät, es wird jedoch im Blutplasma durch Adcnosln-Dcamlnasc zu einer inaktiven Verbindung deamlnieri. Die erflndungsgemäßen Verbindungen haben eine viel langer anhaltende Inhiblerungsaktlvltai, die selbst dann erhalten bleibt, wenn eine Behandlung Im Plasma bei 37" C wahrend 120 Minuten erfolgt Ist (vgl. J. Med Chcm 16 [1973] S. 1381 bis 1388).

Die erflndungsgcmäilen S-substltuicrten-2-Thloadenoslndcrlvatc zeigen eine niedrige Toxlzltai, wie In Tabelle 2 gezeigt wird.

Tabelle 2 Akute Toxlzltat von S-substltulerten-2-Thloadcnoslnen

	Dosis	Verbindungen	2-Cyclohexyl-	2-Cyclnhcptyl-	2-n-Aniyl-	2-AIIyIIhIo-
Verabrelchu ngsrate	(mg/kg)	2-Cyclopcntyl-	thloadcnosln	ihloadenosln	thlüiidcnosln	ΛΜΡ
	thloadenosln

I. p.")
χ 5

p.o.«
x5

iOO 200 400 150 300 600

0/6·)

0/6

2/6

0/24

1/24

2/24

1/6

2/6

0/24

1/24

0/6

1/6

0/24

0/6
0/6
1/6

0/24
0/24

2/24

*) Zahl der «t>ten Tlerc/gcprUflc Tiere nach 21 Tagen (Mause. dd-Stamm, DurchschnlUsgcwlchl 19 23 g).
**) Die Dosl.* wurde an 5 aufeinanderfolgenden Tagen verabreicht.

Bei den Toxlzltätsuniersuchungcn zeigten die erflndungsgemäßen Verbindungen keine wesentlichen Nebenwirkungen, wie einen kardiovaskulären Kollaps oder eine Beschleunigung des Pulsschlages, Im Gegensatz zu 2-Chloradenosln.

Die erflndungsgemäßcn .S-substliulcrien^-Thloadenoslndcrlvate sind deshalb Piatichenaggregatlonslnhlbltoren mit einer verhältnismäßig niedrigen Toxlzltät und einer stärkeren und/oder einer länger anhaltenden Inhlblerungsaktlvltät als die bekannten Adenosln- oder 2-Nledrlgalkylthloadenoslnderlvate.

Die neuen S-subsiltulerten-2-Thloadenoslne können erflndungsgcmäß durch Umsetzung von 2-Thloadenosln der allgemeinen Formel

IO

OH OH

... 20

mit einem Halogenid der allgemeinen Formel
RX

worin X ein Chlor-, Brom- oder Jodatom und R die vorher angegebene Bedeutung hat, In Gegenwart von Alkall hergestellt werden.

Geeignete Halogenide der Formel RX sind beispielsweise Benzylbromld, p-Chlorbenzylchlorld, p-Nitrobenzylbromid, Allylbromld, Dläthylamlnoäthylchlorld, /J-Mcthylallylchlorld, n-Amylbromld, Isoamylbromld, n-Hexylbromid, n-Octylbromld, n-Nonylbromld, n-Decylbromld, n-Heptylbromld, Cyclopentylchlorld, Cyclohexylbromld, Cyclohexylmethylbromld und 2-Äthyl-n-hexylbromld.

Die Umsetzung erfolgt bei einer Temperatur von 0 bis 100° C In Wasser oder einem organischen Lösungsmittel In Gegenwart von Alkall bzw. eines Amins.

Als Lösungsmittel werden Wasser oder Alkohol bevorzugt.

Als Aikaii werden ein Alkalimetall, ein Alkalihydroxid, wie Natriumhydroxid oder Kaliumhydroxid, als organische Amine, z. B. Pyridln oder Triethylamin, verwendet.

Das Halogenid wird In äqulmolaren Mengen bis zu einem zehnfachen molaren Überschuß, bezogen auf 2-Thloadenosln, angewandt. Das Alkall bzw. das AmIn wird In einer äqulmolaren bis zehnfach molaren überschüssigen Menge, bezogen auf 2-Thloadenosln, verwendet, wobei die Anwendung einer äqulmolaren Menge bevorzugt Ist.

Die Reaktionszeit beträgt 30 Minuten bis 100 Stunden. Das Reaktionsprodukt wird normalerweise als Niederschlag aus der Reakilonslösung gewonnen. Wenn kein Niederschlag gebildet wird, kann das Produkt leicht durch übliche Verfahren abgetrennt und gereinigt werden, beispielsweise durch Säulenchromatographie oder Paplerchromatographlc. Das Produkt kann jedoch auch als kristallines Material durch Neutralisation und Konzentration der Reaktionslösung und Behandlung mit einem geeigneten Lösungsmittel erhalten werden.

Das Ausgangsmaterial 2-Thloadenosin kann beispielsweise durch Umsetzung von 2-Chloradenosln mit einem sauren Alkallmetallsalz von H₂S, wie es In der JP-PA 86 773/71 beschrieben Ist, erzeugt werden.

Die neuen S-subsiltulerten^-Thloadcnosln-S'-monophosphaie werden durch Phosphorylierung einer Hydroxygruppe erzeugt, die In 5'-Stellung eines entsprechenden S-subsiitulerten 2-ThIoadenosins befindlich 1st.

Bei dem erfindungsgemäßen Verfahren kann ein Phosphoryllerungsmltiel mit dem Ausgangsmaterial umgesetzt werden, worin dessen Hydroxygruppen In den 2'- und 3'-Stellungen durch übliche Schutzgruppen wie Acetyl-, Benzoyl-, Isopropylldengruppen geschützt sind. Alternativ kann eine Hydroxygruppe in 5'-Stellung selektiv unter geeigneten Reaktionsbedingungen phosphoryliert werden, das heißt, daß man ein Phosphoryllerungsmlttel mit dem Ausgangsmaterial umsetzt, worin die Hydroxygruppen In den 2'- und 3'-Stellungen nicht geschützt sind.

Als Phosphoryllerungsmltiel werden Phosphoroxychlorld, Phosphorpentachlorld, partiell hydratlslertes Phosphoroxychloiid, Pyrophosphorychlorld In Gegenwart oder Abwesenheit eines geeigneten organischen Lösungsmittels gemäß den Phosphoryllerungsverfahren, die üblicherweise für Nukleoslde angewendet werden, eingesetzt.

In der Frflndung wird das Phosphoryllerungsmlttel in einer äqulmolaren Menge oder einem molaren Überschuß bezüglich des Ausgangsmaterials und vorzugsweise In einer Menge verwendet, die das zwei- bis zehnfache der äqulmolaren Menge beträgt. Die Umsetzung wird Im allgemeinen bei einer Temperatur von etwa -25° C bis etwa +30° C während eines Zeltraums von einer bis zehn Stunden durchgeführt. Das derart erhaltene Umsetzungsprodukt wird In ein 5'-Phosphatderlvat durch Zugabe von Eiswasser zur Hydrolyse übergeführt. Wenn das derart hydrolyslerte Produkt ein 2', 3'-Isopropylldenderivat darstellt, kann die Isopropylldengruppe durch z. B. Hydrolyse bei 60° C während einer Stunde bei pH 2 entfernt werden, während, wenn das hydrolyslerte Produkt ein 2', 3'-Dl-O-Acetylderlvat darstellt, die Acetylgruppen durch z.B. Hydrolyse bei 37°C während 24 Stunden bei pH 10 entfernt werden können. Das derart erhaltene S-substltulerte 2-ThJoadenosln-5'-monophosphat kann als eine Verbindung des H-Typus oder als ein pharmakologisch geeignetes Salz, z. B. des

Ll-Salz-Typus, 2-Ll-Salz-Typus, Na-Salz-Typus, 2Na-Salz-Typus. K-Salz-Typus, 2K-Salz-Typus, NH₄-Salz-Typus, 2NH₄-Salz-Typus, Ba-Salz-Typus oder dergleichen, gewonnen werden.

> Beispiel I

2-l)en/.ylthloadcnosln

mg 2-Thloadenosln wurden In 1,26 ml Wasser, das 0,315 mMol Natriumhydroxid enthielt, aufgelöst und i^(| es wurden 54,0 mg (0,315 mMol) Bcn/.ylbromld hinzugegeben und das Gemisch über Nachl bei Raumtemperatur zur Bewirkung der Umsetzung gerührt. Der gebildete Niederschlag wurde abflltriert und aus Wasser/Äthanol umkrlstalilslert. Hierdurch wurden 99,7 mg (68% Ausbeute) des gewünschten Produktes mit einem Schmelzpunkt von 151 bis 155° C erhallen.

R_rWert bei der Papierchromatographie: (Lösungsmittel: n-Butanol-Wasser; 84 : 16) 0.73

UV: A„,„, (pH 1) 272,5 Γημ (r.: 16 400) A_mov (pH 7) 235 Γημ (c : 23 900) 278 πιμ(ε:15 9ΟΟ) A_mov(pH 13) 234 Γημ (c : 24 600) 278 im« U: 15 900) Elementaranalyse:
Berechnet: für C_I7H„O₄N,S · '/,H₂O · ViC₂H₅OH:

C: 51,29; H: 5,49; N: 16,61; S: 7.60% Gefunden: C: 51,28; H: 5.66; N: 16,81; S: 7,25%

Beispiel 2-Allylthloadcnosln:

mg (0,315 mMol) 2-Thloadenosln wurden In 1,26 ml Wasser aufgelöst, welches 0,315 mMol Natriumhydroxid enthielt, und hierzu wurden 3.8 ml (0.315 mMol) Allylbromld gegeben und das Gemisch über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Der hierdurch gebildete Niederschlag wurde abflllrlert und aus Äthanol unter Erhalt von 90 mg (76* Ausbeute) des gewünschten Produktes mit einem Schmelzpunkt von 161 bis 163'C umkrlstalllslerl.

R_rWert bei der Papierchromatographie: (Lösungsmittel: n-Butanol - Wasser, M: 16) 0,61 UV: A_m0V(pH I) 272 Γημ (ε: 16 100) 4« A_m„(pH 7) 235 Γημ (c : 21 400)

278 Γημ (ε: 15 000) A_m0Jt(pH 13) 234 Γημ (c : 21 700) 278 ιτιμ (e : 14 900) Elementaranalyse:
■»< Berechnet: Tür C_nH₁₇O₄N₅S · 3/4C₂H₅OH:

Gefunden: C: 46,57; H: 5,79; N: 18,73; S: 8,57'Λ, C: 46,26; H: 6,08; N: 18,79; S: 8,15'ic

Beispiel 2-DU!ihy!am!nc5.thy!th!oädcnns!r!hydroch!cr!d

mg (0,135 mMol) 2-Thloadenosln wurdem In 1,26 ml Wasser aufgelöst, welches 0.630 mMol Natriumhydroxid enthielt. Hierzu wurden 54,2 mg (0,315 mMol) Dläthylamlnoathylchlorldhydrochlorld zugegeben und das Gemisch Ober Nacht bei Raumtemperatur zur Umsetzung gerührt. Sodann wurde die Reaktionslösung mit Chlorwasserstoffsäurc neutralisiert und eine preparative Paplerchromalographle und anschließend eine Extraktion des Produktflecks durchgeführt. Hiernach wurde der Extrakt durch eine Dowex 1 (Cl )-Säule geführt und das gewünschte Produkt aus Isopropanol umkrlstalilslert. Die Umkrlstalllsalion aus Äthanol ergab 66 mg (50%lge Ausbeute) des gewünschten Produktes, das einen Schmelzpunkt von 217 bis 218" C (d) aufwies.

Ry-Wert bei der Paplerchromalographle: (Lösungsmittel: n-Butanol - Wasser, 84: 16) 0,18 (Lösungsmittel: n-Butanol - Essigsäure - Wasser, 2:1:1) 0,62 UV: λ_ηακ (pH 1) 270.5 ιημ (ε : 15 400) W X_ma, (pH 7) 232 Γημ (ε : 24 200)

275 Γημ (ε : 15 800)

A_mflV(pH 13) 235 ιτιμ (ε : 21 500)

278 Γημ (ε: 15 400)

Elemeniaranalyse: Berechnet: für C₁₆H₂₁₁O₄N₁₁S · HCI

C: 44,18; H: 6,25; N: 19,32% Gefunden: C: 44,28; H: 6,21; N: 19,58%

Beispiel 4
2-(Trans-Crotyl)-thloadenosln

IO

200 mg (0,63 mMol) 2-Thloadenosln wurden In 2,52 ml (0,63 mMol) 0,25 η NaOH aufgelöst und hierzu 57 mg (0,63 mMol) Trans-1 -Chlor-2-buten hinzugegeben und das Gemisch über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Der gebildete Niederschlag wurde aus Wasser unter Erhalt von 141,5 mg (64*. Ausbeute) des gewünschten Produktes umkrlstalllslert. Schmelzpunkt 90 bis 93° C.

15

UV: /„„„(pH i) 272 ηιμ A_mo> (pH 7) 235 mn, 278 ηιμ

X_11111x (pH 13) 234 ιημ, 278 mn
Elementaranalyse:
Berechnet: für C₄H₁₉O₄NiS:

C: 47,58; H: 5,42; N: 19,82% Gefunden: C: 47,42; H: 5,36; N: 19,91*

Beispiel 5

25

2-(/i-Mclhallyl)thloadenosln

200 mg (0,63 mMol) 2-Thloadenosln wurden In 2,52 ml (0,63 mMol) 0,25 η NaOH aufgelöst und hierzu 57 mg (0,63 mMol) /J-Metallylchlorld hinzugegeben. Sodann wurden 5,0 ml Äthanol hinzugefügt und das Gemisch über Nacht bei Raumtemperatur zur Umsetzung gerührt. Nach Konzentration der Reaktionslösung wurde der resul- .in tierende Rückstand mit Pelrolälher gewaschen und mit Wasser kristallisiert. Die Umkrlstalllsatlon aus Wasser ergab 159,3 mg (70%lge Ausbeute) des gewünschten Produktes mit einem Schmelzpunkt von 116 bis 12P C.

UV: A„_mx(pH 1)	272	ιτιμ	, 278	5,42;	mn	19,82",,
λ™, <PH 7)	235	Γημ	,278	5,44;	mn	19,95%
A_mo, (pH 13)	234	Γημ				Beispiel 6
Elementaranalyse:			O₄N₅S:
Berechnet: für Ci	«Hu		H:	N:
C: 47,	58;	H:	N:
Gefunden: C: 47,	,45;

40

2-<n-Amylthlo)adenosln

45

200 mg (0,63 mMol) 2-Thloadenosln wurden In 8 ,ill Wasser aufgelöst, welches 2,1 mMol Natriumhydroxid enthielt, und 952 mg (6,3 mMol) n-Amylbromld hinzugefügt. Das Gemisch wurde sodann während 4 Tagen bei 25° C zur Umsetzung gerührt. Der gebildete Niederschlag wurde abfiltriert und aus Wasser unter Erhalt von 211,5 mg (91% Ausbeule) des gewünschten Produktes, Schmelzpunkt 179 bis 181°C, umkrlstalllslert.

50

UV: A_mar(pH 1) 272 mti

k„„ (pH 7) 237 πιμ, 278 Γημ

X_max (pH 13) 236 πιμ, 279 ηιμ
Elementaranalyse:
Berechnet: TUrCi₅H₂₃O₄N₅S:

C: 48,76; H: 6,27; N: 18,95% Gefunden: C: 48,65; H: 6,21; N: 19,08%

Beispiel 7

60

2-( lso-A my I ihlo)adenosln

200 mg (0,63 mMol) 2-Thloadenosln wurden In einem Gemisch von 8,1 ml Wasser und 18 ml Äthanol, das 2,1 mMol Natriumhydroxid enthielt, aufgelöst und 952 mg (6,3 mMol) lsoamylbromid hinzugefügt. Das Gemisch wurde sodann wahrend 2 Tagen bei Raumtemperatur gerührt. Nach Neutralisation der Reaktlonslösung mit HCI und nachfolgender Konzentration wurde das Konzentrat mit Pctroläther gewaschen und aus Äthanol/Wasser kristallisiert. Die Umkrlsialllsallon aus Äthanol/Wasser ergab 174 mg (73% Ausbeute) des Il

gewünschten Produktes mit einem Schmelzpunkt von 125,5 bis 127.5° C. H

UV: A_1n,,, (pH 1) 273 ιημ

λ_ηαχ (pH 7) 237 mn. 278 ηιμ
A_mo,(pH 13) 237 Γημ, 279ηιμ

Elementaranalyse: Berechnet: für C,sH₂,O₄N,S ■ l/4EtoH:

C: 49,11; H: 5,99; N: 18,49%

Gefunden: C: 49,02; H: 6,26; N: 18,59%

Beispiel 8
2-(n-Hexylthlo)udcnosln

200 mg (0,63 mMol) 2-Thloadenosln wurden In einem Gemisch von 8,1 ml Wasser und 16 ml Äthanol aufgelöst, welches 2,1 mMol Natriumhydroxid enthielt und 1040 mg (6.3 mMol) n-Mcxylbromld hinzugefügt. Das Gemisch wurde sodann zur Umsetzung über Nacht bei 25° C gerührt. Die Reaktionslösung wurde mit HCI neutralisiert und konzentriert. Das resultierende Konzentrat wurde mit Petroläther gewaschen und aus Äthanol/Wasser kristallisiert. Durch Umkrlslalllsatlon aus Äthanol/Wasser (10 : 170) wurden 99 mg (83% Ausbeute) des gewünschten Produktes mit einem Schmelzpunkt von 166 bis 169" C erhalten.

2(1

40

UV: A_mox(pH I) 273	Γημ	,278	ιημ	18	,26%
A„„ (pH 7) 237	Γημ	, 279	πιμ	17	,79%
A_m„(pH 13) 237	Γημ				Beispiel 9
Elementaranalyse:		I₅S:
Berechnet: für CisH₂s	O₄N	6,57;	N:
C: 50,11;	H:	6,42;	N:
Gefunden: C: 50,25;	H:

2-(n-Heptylthlo)adcnosln

200 mg (0,63 mMol) 2-Thloadenosln wurden In einem Gemisch von 8,1 ml Wasser und 25 ml Äthanol aufgelöst, welches 2,1 mMol Natriumhydroxid enthielt, und 1128 mg (6,3 mMol) n-Hcptylbromld hinzugefügt. Das Gemisch wurde sodann über Nacht bei 25" C umgesetzt. Die Reaktionslösung wurde mit HCi neutralisiert. Nach erfolgter Konzentration wurde das Konzentrat mit Pcirolilthcr gewaschen und aus Äthanol/Wasser kristallisiert. Durch Umkrlstalllsatlon aus Äthanol/Wasser wurden 134 mg (54% Ausbeute) des gewünschten Produktes mit einem Schmelzpunkt von 155 bis 157,5" C erhalten.

UV: A„,_0<(pH 1) 272 ιημ

k„._x (pH 7) 237 πιμ, 278 mp

A_mo,(pC 13) 237 πιμ, 279 ιημ
Elementaranalyse:
Berechnet: für C₁₇H₂₇O₄NsS:

C: 51,37; H: 6,85; N: 17.62%
Gefunden: C: 51,86; H: 6,87; N: 17,24%

60

(.5

Beispiel 10 2-(n-Octylthlo)adenosin

200 mg (0,63 mMol) 2-Thloadenosln wurden In einem Gemisch von 8,1 ml Wasser und 30 ml Äthanol, welches 2,1 mMol Natriumhydroxid enthielt, aufgelöst und 1217 mg (6,3 mMol) n-Oclylbromld hinzugefügt. Das Gemisch wurde sodann bei 25° C über Nacht umgesetzt. Die Reaktionslösung wurde konzentriert und das Konzentrat ml". Petrolather gewaschen. Der Rückstand wurde aus Äthanol/Wasser kristallisiert. Durch Umkrlstalllsatlon aus Äthanol/Wasser wurden 206,5 mg (80% Ausbeute) des gewünschten Produktes mit einem Schmelzpunkt von 155 bis 158° C erhalten.

UV: A_m„(pH 1) 272 πιμ A_m„ (PH 7) 237 πιμ. 278 πιμ

A_m„ (pH 13) 237 ιημ, 279 ηιμ
Elementaranalyse:
Berechnet: für C„H„O₄N,S:

C: 52,53; H: 7,10; N: 17,02%
Gefunden: C: 52,87; H: 7,10; N: 16,62%

Beispiel 2-(n-Nonylihlo)adenosin

200 mg (0,63 mMol) 2-Thioadenosln wurden In einem Gemisch von 8,1 ml Wasser und 40 ml Äthanol, welches 2,1 mMol Natriumhydroxid enthielt aufgelöst, und 1305 mg (6,3 mMol) n-Nonylbromid hinzugefügt. Die resultierende homogene Lösung wurde wahrend 2 Tagen bei 25" C umgesetzt, die Reaktionslosung zur Trockene konzentriert, mit Pelroläther gewaschen und aus Äthanol/Wasser kristallisiert. Die Umkrlstalllsatlon aus Äthanol/Wasser ergab 250,5 mg (93* Ausbeute) des gewünschten Produktes mit einem Schmelzpunkt von 146 bis 151° C.

UV: X_mu (pH 1) 272 πιμ

^„«ίρΗ ⁷> 237ΐημ,278π»μ ^««(PH 13) 237 πιμ, 279 mμ

Elementaranalysc: Berechnet: für C₁JIi₁O₄N₅S:

C: 53,63; H: 7,34; N:

Gefunden: C: 54,04; H: 7,28; N:

16,46% 16,04%

I i

Beispiel 2-(n-Decylthlo)adenosln

200 mg (0,63 mMol) 2-Thioadenosln wurden In einem Gemisch von 8,1ml Wasser und 50 ml Äthanol, welches 2,1 mMol Natriumhydroxid enthielt, aufgelöst und 1394 mg (6,3 mMol) n-Decylbromld hinzugefügt. Das Gemisch wurde sodann wahrend 2 Tagen bei 25° C umgesetzt. Nach Konzentration wurde das Konzentrat mit Petroiather gewaschen und aus Äthanol/Wasser kristallisiert. Durch Umkrlstalllsatlon aus Äthanol/Wasser wurden 247,8 mg (89,5% Ausbeute) des gewünschten Produktes mit einem Schmelzpunkt von 145 bis 150° C erhalten.

25

UV: A_mox(pri 1) 273 ηιμ

*max^lP^u ⁷> 237 ηιμ, 278 ηιμ A_mllI(pH13) 236 ηιμ, 279 πιμ

Elcmentaranalyse: Berechnet: für C₂₀H₁₁O₄N₅S:

C: 54,65; H: 7,57; N: 15,93%

Gefunden: C: 54,85; H: 7,68; N: 16,06·»,

35

Beispiel 2-(Cyclopeniylthlo)adenosln

200 mg (0,63 mMol) 2-Thloadenosln wurden In 8,1 ml Wasser, welches 2,1 mMol Natriumhydroxid enthielt, aufgelost und 659 mg (6,3 mMol) Cyclopentylchlorld hinzugefügt. Das Gemisch wurde sodann wahrend 4 Tagen bei 25° C /ur Umsetzung gerührt. Der gebildete Niederschlag wurde filtriert und aus Äthanol unter Erhalt von 185 mg (80% Ausbeute) des gewünschten Produktes mit einem Schmelzpunkt von 223 bis 224,5° C umkrtstalllslert.

UV: X_nax (pH 1) 273 ΐημ

λ-rnax <PH 7) 237 ιτιμ, 278 ιτιμ

X„_ax (pH 13) 236 πιμ, 279 ηιμ Klementaranalyse:
Berechnet: für C,₅H₂iO₄N₅S:

C: 49,03; H: 5,76; N: Ι9,0ό% Gefunden: C: 48,79; H: 5,72; N: 19,15%

40 45 50 55

Beispiel 2-(C'yclohexylthlo)adenosln

200 mg (0,63 mMol) 2-Thloadenosln wurden In einem Gemisch von 8,1ml Wasser und 20 ml Äthanol, welches 2,1 mMol Natriumhydroxid enthielt, aufgelöst und 1027 mg (6,3 mMol) Cyclohexylbromld hinzugefügt und während 2 Tagen bei 50" C umgesetzt. Nach Konzentration zu Trockene wurde der Rückstand mit Petroiather gewaschen und aus Äthanol kristallisiert. Durch Unikrlsialllsatlon aus Äthanol/Wasser wurden 99,4 mg (41,4% Ausbeute) des gewünschten Produktes erhallen, das einen Schmelzpunkt von 225 bis 227,5° C aufwies.

UV: A„„ (pH 1) 273 ΐημ

(pH 7) 237 ΐημ, 278 ηιμ
(pH 13) 236 ΐημ, 279 ηιμ

Elementaranalyss: Berechnet: für C„H₂,O«NjS.l/4H,O:

C: 49,79; H: 6.14; N: 18.15«

Gefunden: C: 49.73; H: 5.97; N: 18,19«

IO is

25

Beispiel 15 2-(Cyclohexy!methylthlo)adenosln

200 mg (0,63 mMol) 2-Thloadenosln wurde In 8,1 ml Wasser, das 2,1 mMol Natriumhydroxid enthielt, aufgelöst, 1116 mg (6,3 mMol) Cyclohexylmethylbromld wurden hinzugefügt, und es wurde wahrend 4 Tagen bet 25° C zur Umsetzung gerührt. Der gebildete Niederschlag wurde filtriert und aus Wasser/Äthanol unter Erhalt von 178 mg (71% Ausbeute) des gewünschten Produktes mit einem Schmelzpunkt 226,5 bis 228,5° C umkristallisiert:

UV: A_m„ (pH 1) 273 ηιμ

>L« (pH 7) 237 ηιμ, 278 ηιμ

λ_ηα (pH 13) 236 ηιμ, 279 ιημ
Elementaranalyse:
Berechnet: für Ci₇J
C: 51,62;
Gefunden: C: 51,71;

₄NsS
H: 6,37;
H 6,34;

N: 17,70*
N: 17,81%

35

40

50

55

61)

f>5

Beispiel 16 2-(2-Äthyl-n-hexyl)thloadenosin

200 mg (0,63 mMol) 2-Thloadenosln wurden In 8,1ml (2,1 mMol) 0,25 n-NaOH aufgelöst und 1217 mg (6,3 mMol) 2-Äthyl-n-hexylbromld hinzugefügt. Darüber hinaus wurden 30 ml Äthanol hinzugefügt und über Nacht bei Raumtemperatur umgesetzt. Nach Konzentration wurde das Konzentrat mit Pctfolather gewitschen und aus Äthanol/Wasser kristallisiert. Durch UmkrlstalllsaUon aus Äthanol/Wasser wurden 150 mg (58% Ausbeute) des gewünschten Produktes erhalten, das einen Schmelzpunkt von 151,5 bis 153,5° C aufwies.

UV: A_M„ (pH 1) 272 ιημ

Ku, (pH 7) 235 πιμ, 278 η\μ

X_max (pH 13) 234 πιμ, 278 ιτημ
Elementaranal yse:
Berechnet: für Ci,H₂,O₄N,S:

C: 52,83; H: 7.10; N: 17,02%
Gefunden: C: 52,71; H: 7,23; N: 17,23%

Beispiel 17

0,739 g (2 mMol) 2-Isoamylthloadenosln wurden In einem Gemisch von 2 ml Acetonitril und 0,78 ml Pyrldln aufgelöst und 0,816 ml (8,8 mMol) Phosphoroxychlorld wurden unter Kühlung hinzugegeben. Darüber hinaus wurden 0,072 Mol (4 mMol) Wasser hinzugefügt und die Reaktion wahrend 6 Stunden durchgeführt. Sodann wurde die Reaktion durch Zugabe von Eiswasser unterbrochen, und nach Hydrolyse wurde die hydrolyslerte Lösung auf 20 g Aktivkohle adsorbiert. Nach Waschen mit Wasser wurde die Aktivkohlesaule einer Elutlon mit 800 ml von 10%igem Ammoniak/Äthanol (1:1) unterworfen. Das resultierende Eluat wurde zur Trockene konzentriert und der Rückstand fraktioniert und auf einer Zellulosesaule (1,7 χ 40 cm) durch Elutlon mit einem Lösungsmittel aus n-Propanol-Ammonlak-Wasser (20:10: 3) gereinigt. Der durch Zugabe einer äthanolischen Bariumjodldlösung gebildete Niederschlag wurde durch Zentrifugieren gewonnen. Nach wiederholter Reinigung aus Wasser/Äthanol wurden 2-lsoamylthloadenosln-5'-monophosphat-bariumsalz In 95%lger Ausbeute erhalten.

UV:A_m„(pH 1)273ιημ(£: 14 000)

Ry-Wert bei der Papierchromatographie (Lösungsmittel: n-Propanol/Ammonlak/Wasser = 20:10: 3) Einzelfleck 0,72

Wanderung bei der Elektrophorese (pH 7,5; 0,05 m Phosphatpuffer; 1000 V; 1 Stunde Kontrolle 5'-AMP: +4,7 cm) Einzelfleck +3,2 cm

Anorganische Phosphorsaure wurde In 100%lger Ausbeute In Freiheit gesetzt, wenn das Produkt mit 5'-Nucleotldase von Crotalus Atrox Venom oder mit Phosphormonoesterase der Intestlnalschlelmhaut von Kühen behandelt wurde.

Beispiel 18

0,779 g (2 mMol) 2',3'-0-Isopropyllden-2-lsoamylthloadenosln wurden In einem Trockenels-Aceton-Bad gekohlt und 1,5 g (6 mMol) Pyrophosphorylchlorld hinzugefügt. Das resultierende Gemisch wurde auf 2O⁰C erwärmt und die Rührung während 4 Stunden fortgesetzt. Hiernach wurde das Gemisch erneut In dem Trockeneis-Aceton-Bad gekühlt und 1,5 ml Wasser hinzugefügt. Sodann wurde das Gemisch erneut auf 20° C erwärmt und 50 ml Wasser hinzugegeben, wnnach wahrend 5 Stunden bsi 20" C gerührt wurde. Zu der Lösung wurde sodann eine 1 m Ammonlumhydroxldlösung zur Einstellung des pH-Wertes auf pH 8,5 hinzugegeben. Der gebildete Niederschlag wurde filtriert und das Filtrat konzentriert. Das resultierende Konzentrat wurde auf eine Zellulosesaule aufgebracht und mit einem Lösungsmittel aus n-PropanoI-Ammonlak-Wasser (20:10: 3) elulert. to Die das gewünschte Produkt enthaltenden Fraktionen wurden gesammelt und zur Trockene eingedampft. Nach Zugabe von Aceton zu dem Gemisch wurde ein rohes Pulver erhalten, welches aus Methanol-Aceton unter Erhalt von 2-lsoamylthloadenosln-5'-monophosphatammonlumsalz In 60%iger Ausbeute umgefällt wurde.

Das derart erhaltene Pulver zeigte die vollständig gleiche Aktivität gegenüber einem Enzym wie die des In Beispiel 2 erhaltenen Produktes. ι J

Beispiel 19

370 mg (1 mMol) 2-n-Amylthloadenosln wurden in einem Gemisch von 1 ml Acetonitril und 0,39 ml Pyridin suspendiert und 0,408 ml (4,4 mMol) Phosphoroxychlorld wurden unter Kühlung hinzugegeben. Darüber hinaus wurden 0,036 ml (2 mMol) Wasser hinzugefügt und die Reaktion während 6 Stunden durchgeführt. Sodann wurde Eiswasser zur Unterbrechung der Reaktion hinzugegeben und der gebildete Niederschlag durch Zentrifugleren gewonnen. Es wurde eine präparatlve Papierchromatographie unter Verwendung des Lösungsmittels Isopropanol-Ammonlak-Wasser (7:1:2) durchgeführt und die Fraktionen, deren R,-Wert 0,50 betrug, gesammelt ₂s und konzentriert. Das resultierende Konzenirat wurde in I ml Wasser aufgelöst und hierzu Chlorwasserstoffsäure zur Bildung des Niederschlags hinzugegeben. Der hierdurch gebildete Niederschlag wurde durch Zentrifugleren gesammelt, mit Wasser gewaschen und unter Erhalt von 2-r-Arijylthlo-5'-adenylsäure In 90%iger Ausbeute getrocknet.

.in UV: A„_1<a (pH 1) 273 ιτιμ (ep: 14 000)

Imax <PH 7) 236 ιημ (ep: 20 000)
278 ιημ(ερ: 14 000)

A_mDJt(pH13) 236 ιημ (ep: 20 500)

278 ιημ (ep: 13 900)

R,-Wert bei der Papierchromatographie:

(Lösungsmittel: Isopropanol/Ammonlak/Wasser = 7:1:2) Elnzelflcck 0,50

Wanderung bei der Elektrophorese:

(pH 7,5; 0,05 m Phosphatpuffer; 1000 V; 1 Stunde Kontrolle: 5'-AMP, +4,7 cm +3,2 cm

Freisetzung von anorganischer Phosphorsäure durch 5'-Nucleotldase

von Crotalus Atrox-Glft 98 Mol-%

Gehalt an anorganischer Phosphorsäure 0,3 Mol-%

Elementaranalyse:
Berechnet: für C₁₅Hj₂O₇SP · Ba · 2H₂O:

C: 29,02; H: 4,22; N: 11,28; P: 4,98%
Gefunden: C: 29,08; H: 3,84; N: 11,27; P: 5,19%

Beispiel 20

0,752 g (2 mMol) 2-Allylthloadenosln wurden In einem Gemisch von 2 ml Acetonitril und 0,78 ml Pyrldln so suspendier! und 0,816 ml (8,8 mMol) Phosphoroxychlorld unter Kühlung hinzugefügt. Welter wurden 0,072 ml (4 mMol) Wasser hinzugegeben und die Reaktion während 6 Stunden durchgeführt. Hiernach wurde Eiswasser zur Unterbrechung der Reaktion und Hydrolyse zugegeben. Die derart hydrolysate Lösung wurde sodann auf 20 g Aktivkohle adsorbiert und mit Wasser gewaschen. Die Akllvkohlesüule wurde einer Elutlon mit 800 ml 10%igem wäßrigen Ammoniak/Äthanol (1:1) unterworfen und das Eluat zur Trockene konzentriert. Der resultierende Rückstand wurde sodann auf eine Zellulosesäule (1,7 χ 40 cm) aufgebracht und mit einem Lösungsmittel aus Isopropanol-Ammoniak-Wasser (7:1:2) elulert. Die Fraktionen, deren R,-Wert, bestimmt durch Paplerchromatographle. In dem gleichen Lösungsmlttclsystem 3,2 betrug, wurden gesammelt und konzentriert. Dem Konzentral wurde eine äthanolische Barlumjodldlösung zugefügt und der gebildete Niederschlag durch Zentrifugleren gewonnen. Nach wiederholter Ausfällung mit Wasser-Äthanol wurden 1,00 g (etwa 90% Ausbeute) &° Barium 2-allylthlo-5'-adenylat gewonnen.

UV: A_ra„ (pH 1) 272 ηιμ (ep: 16 000)

k_max (H₂O) 234 ηιμ (κρ: 20400)

277 ηιμ(ερ: 14 400)

A_m„, (pH 13) 278 ιημ (ep: 15 000)
R,-Wert bei der Paplerchromalographle:
(Lösungsmittel: Isopropanol/Ammonlak/Wusscr = 7:1:2) 0,32

Wanderung bei Elektrophorese:

(pH 7,5; 0,05 Phosphatpurfer; 1000 V, 1 Stunde, Konirolle: 5'-Adeny!säure +«.0 cm) +6,7 cm

Freisetzung von anorganischer Phosphorsäure durch S'-Nucleotldase

von Crotalus Atrox-Glft 104 Mol-%

Gehalt an anorganischer Phosphorsäure: 0 Mol-'*·

Elementaranalyse:
Berechnet: für C,,H„,O,N,SP · 2U₂O:

C: 26,43; H: 3,41; N: U,86'«
Gefunden: C: 26,69; H: 3,23; N: 11,70%

Beispiel 21

0,844 g 2-Benzylthloadenosln wurden in einem Gemisch von 2 ml Acetonitril und 0,78 ml Pyrklln suspendlert. Sodann wurden 0,816 g (8,8 mMol) Phosphoroxychlorld allmählich unter Rührung In einem Eiswasserbad hinzugegeben. Hiernach wurde 0,072 ml (4 mMol) Wasser hinzugefügt und die Reaktion wahrend 6 Stunden durchgeführt. Dann wurde zur Unterbrechung der Reaktion Eiswasser hinzugegeben und der durch Hydrolyse gebildete Niederschlag durch Zentrifugieren gewonnen. Der Niederschlag wurde auf eine Zellulosesaule (1.7 χ 40 cm) aufgebracht und mit e~iem Isopropanol/Ammonlak/Wasser (7: 1 :2)-Lösungsmlttel clulert. Die 2" einen Ry-Wert von 0,34, bestimmt durch Papierchromatographie In dem gleichen LOsungsmfUefsystem, aufweisenden Fraktionen wurden gesammelt und kenzentriert. Dem Konzentrat wurde eine älhunologlsche Bariumjodldlösung zugegeben, und der gebildete Niederschlag durch Zentrifugleren gesammelt. Nach dem Waschen mit Äthanol wurden 1,08 g (etwa 90% Ausbeute) Barium 2-Benzylthloadenylat erhalten.

25 UV: X_max (pH 1) 273 πψ (ep: 13 900)

Ka, (H₂O) 234 mn (ep: 20 100)

2nm\iUp: 13 400)

A_m„ (pH 13) 278 Γημ (ep: 13 700) Ry-Wert bei der Papierchromatographie:

3<) (Lösungsmittel: Isopropanol/Ammonlek/Wasser =7:1:2) 0,34

Wanderung bei Elektrophorese:

(pH 7,5, 0,05 m Phosphatpuffer; 1000 V; 1 Stunde Konirolle: 5'-Adenylsäure +2.0 cm) +1,5 cm Freisetzung von anorganischer Phosphorsaure durch 5'-Nucleolldase

von Crotalus Atrox-Girt 96 MoI-*

Gehalt an anorganischer Phosphorsäure: 2,5 MoMi

Elementaranalyse:
Berechnet: für C,,H„O,N,SP ■ Ba · 2H₂O:

C: 31.86; H: 3.46; N: 10.83; P: 4,83%
Gefunden: C: 31,88; 11:3,11; N: 11.00; P: 4.97'*.

Die In der Tabelle 1 zusammengefaßten Verbindungen wurden nach dem In den Beispielen 17 oder 18 beschriebenen Verfahren unter Verwendung der entsprechenden S-substltulerten 2-Thloadenoslne synthetisiert. Die Ergebnisse sind In Tabelle 3 tabelllcn.

⁴- Tabelle 3

Produkt Ausbeute UV Ι™¹;,, pH I, χ 10-') R,·) Wanderung")

5Ii 2-n-Hexylthloadenosln-5'-monophosphat (Ba) 2-n-Heptylthloadenosln-5'-monophosphat (Ll₂) 2-n-Octylthloadenosln-5'-monophosphat (Ba)

2-n-Nonylthloadenosln-5'-monophosphal (Ba) i<; 2-n-Decylth!oadenosln-5'-monophosphat (H) 2-(2-Äthyl-n-hexyl)thioadenosln-5'-monophosphat (Ba)

2-Cyclopentylthloadenosln-5'-monophosphat 69 273 14,8 0,82 0,69

(Ba)
⁶" 2-Cyclohexylthloadenosin-5'-monophosphat 70 273 15,1 0,82 ' 0,70

(Ba)

2-Cyclohexylmethyllhloadcnosln-5'-moiio- 68 272 14.8 0,83 0,72

phosphat (Ba)
(,< 2-p-Chlorbenzylthloadcnosln-5'-monophosphat 72 272 13,6 0,92 0,65

(Ba)

2-p-NltrObenzylthloadenosln-5'-monophosphat 78 273 22.0 0.8fi π fts

82	273	13.8	0,74	0.69
78	273	14.6	0,75	0.69
85	272	13,9	0,78	0,69
85	273	14.8	0,84	0,68
75	272	13,6	0,85	0,67
68	273	13,9	0,79	0,68

lortset/.ung

Produkt	Ausbeute	UV C	;„ pH l,x 10-·')	R_t')	Wanderung")
2-trans-Crotylthloadenosln-5 (Ba) 2-/^Methallyllhloadenosln-5' (Na₂)	69 53	273 273	14.2 13.8	0.70 0.69	0,72 0.72

'-monophüsphat -monophosphat

*) R,-Wert bei der I'aplcrchromatogruphlc (Lösungsmittel: n-l'ropanol/Ammonlak/Wasser = 20 : 10 : 3).
**) Wanderung bei Elektrophorese (pH 7,5, Phosphatpuffer, relative Wanderung, bezogen auf Adenosln-5'-monophosphal).
Die durch Elemeniaranalyse der vorstehenden Verbindungen erhaltenen C, H, N und P-Werte stimmten vollständig mit
den berechneten Werten überein.

13

Claims

Patentansprüche:

1. S-substitulerte-2-Thloadenoslnc und deren 5'-Monophosphate. der allgemeinen Formel
NH₂

OH

und deren pharmazeutisch annehmbare Salze, in der R einen n-Amyl, Isoamyl-, n-Hexyl, n-Heptyl-, n-Octyl-, n-Nonyl-, n-Decyl-, 2-Ethylhexyl-, Cyclopentyl-, Cyclohexyl-, CycloheptyJ, Cyclohexyl methyl-. Allyl-, /J-Methylallyl-, Crotyl-, Benzyl-, p-Nlirobenzyl-, p-Halogenbcnzyl- oder Dlcthylamlnoethyl-Rest bedeutet und R¹ ein Wasserstoffatom oder einen Phosphorüäurcrcst bedeuten.

2. Verfahren zur Herstellung S-substltulerier-2-Thloadcnoslnc nach Anspruch I, dadurch gekennzeichnet, daß man auf übliche Welse 2-Thinadenosln mit einem Halogenid der allgemeinen Formel R-X umsetzt. In der R die vorstehend angegebene Bedeutung besitzt und X ein Chlor-, Brom- oder Jodatom bedeutet und gegebenenfalls das erhaltene S-substltuicrlc^-Thloadcnosin In üblicher Welse phosphoryllcrt.

3. Arzneimittel enthaltend eine Verbindung gemäß Anspruch I und übliche Trägcrstol'fc.