EA023888B1 - Репликационно-дефектные вакцины и вакцинные векторы против флавивирусов - Google Patents

Репликационно-дефектные вакцины и вакцинные векторы против флавивирусов Download PDF

Info

Publication number
EA023888B1
EA023888B1 EA201001491A EA201001491A EA023888B1 EA 023888 B1 EA023888 B1 EA 023888B1 EA 201001491 A EA201001491 A EA 201001491A EA 201001491 A EA201001491 A EA 201001491A EA 023888 B1 EA023888 B1 EA 023888B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
protein
virus
flavivirus
replication
genome
Prior art date
Application number
EA201001491A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201001491A1 (ru
Inventor
Константин В. Пугачев
Александр А. Румянцев
Мэриэнн Гил-Молони
Харольд Клеантус
Original Assignee
Санофи Пастер Байолоджикс, Ллс
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Санофи Пастер Байолоджикс, Ллс filed Critical Санофи Пастер Байолоджикс, Ллс
Publication of EA201001491A1 publication Critical patent/EA201001491A1/ru
Publication of EA023888B1 publication Critical patent/EA023888B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/86—Viral vectors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/155—Paramyxoviridae, e.g. parainfluenza virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/205—Rhabdoviridae, e.g. rabies virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/295—Polyvalent viral antigens; Mixtures of viral and bacterial antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A61P31/06—Antibacterial agents for tuberculosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A61P33/06—Antimalarials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5254—Virus avirulent or attenuated
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5256—Virus expressing foreign proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/70—Multivalent vaccine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18511—Pneumovirus, e.g. human respiratory syncytial virus
    • C12N2760/18534—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/20011—Rhabdoviridae
    • C12N2760/20111—Lyssavirus, e.g. rabies virus
    • C12N2760/20134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/24011—Flaviviridae
    • C12N2770/24111—Flavivirus, e.g. yellow fever virus, dengue, JEV
    • C12N2770/24121—Viruses as such, e.g. new isolates, mutants or their genomic sequences
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/24011—Flaviviridae
    • C12N2770/24111—Flavivirus, e.g. yellow fever virus, dengue, JEV
    • C12N2770/24122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/24011—Flaviviridae
    • C12N2770/24111—Flavivirus, e.g. yellow fever virus, dengue, JEV
    • C12N2770/24134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/24011—Flaviviridae
    • C12N2770/24111—Flavivirus, e.g. yellow fever virus, dengue, JEV
    • C12N2770/24141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2770/24143—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/24011—Flaviviridae
    • C12N2770/24111—Flavivirus, e.g. yellow fever virus, dengue, JEV
    • C12N2770/24161—Methods of inactivation or attenuation
    • C12N2770/24162—Methods of inactivation or attenuation by genetic engineering
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Abstract

Изобретение относится к репликационно-дефектным вакцинам и вакцинным векторам против флавивирусов, а также к соответствующим композициям и методам.

Description

Настоящее изобретение относится к репликационно-дефектным вакцинам и вакцинным векторам против флавивирусов, а также к соответствующим композициям и методам.
Предпосылки создания изобретения
Флавивирусы распространены по всему миру и представляют собой глобальную проблему для здоровья людей. Кроме того, флавивирусы являются значимыми патогенами в ветеринарии. К патогенным флавивирусам относятся вирус жёлтой лихорадки (ВЖЛ), вирус лихорадки денге типов 1-4 (ДЕН 1-4), вирус японского энцефалита (ВЯЭ), вирус лихорадки Западного Нила (ВЛЗН), вирус клещевого энцефалита (ВКЭ) и другие вирусы из серокомплекса ВКЭ, такие как вирус лихорадки кьясанурского леса (ВЛКЛ) и вирус омской геморрагической лихорадки. Разработаны вакцины против жёлтой лихорадки (ЖЛ) [живая аттенуированная вакцина (ЖАВ), вакцинный штамм 17Ό], японского энцефалита (ЯЭ) [инактивированные вакцины (ИНВ) и ЖАВ] и клещевого энцефалита (ИНВ). В настоящее время лицензированных вакцин для применения у человека против лихорадки денге (ДЕН) и лихорадки Западного Нила (ЛЗН) не существует. Некоторые вакцины применяются в ветеринарии. К таким вакцинам относятся вакцины против ЛЗН у лошадей (ИНВ, рекомбинантные и химерические вакцины) и ЯЭ (ИНВ и ЖАВ), которая используется для профилактики энцефалита у лошадей и мертворождения у свиней в Азии, шотландского энцефаломиелита овец (ИНВ), которая используется для профилактики неврологического заболевания у овец в Соединенном Королевстве, а также вакцина против КЭ (ИНВ), которая используется у сельскохозяйственных животных в Чешской Республике (ИНВ) (Мопа1б аиб Нет/. Р1ау1У1ги8е8, т Р1е1б8 е! а1. Еб§., Р1е1б8 Уио1оду, 3гб Ебйои, РЫ1абе1рЫа, №ν Уогк, Ырртсоб-Кауеи РиЬб5бег5, 1996, р. 961-1034).
Самым важным из вирусных заболеваний человека, передающихся клещами, является клещевой энцефалит. Это заболевание эндемично для некоторых районов Европы и Северной Америки. Оно обусловливает более 10000 госпитализаций ежегодно; смертность в Европе составляет 0,5-1,5%, а в Сибири и на Дальнем Востоке достигает 6-40%. Значительная часть пациентов страдает от длительных неврологических и психиатрических последствий этой инфекции. Доказана эффективность профилактики этого заболевания с помощью инактивированных вакцин, создаваемых на клеточных культурах куриных эмбрионов. Например, вакцинация 86% населения Австрии (самый высокий показатель в Европе) привела к снижению частоты госпитализаций, примерно на 90% (Неи1/ аиб Кип/, Агсб. Убо1. 8ирр1. 18:201-205, 2004). Инактивированные вакцины дороги и требуют трёхкратного введения для первичной иммунизации. Для поддержания иммунитета требуется периодическая ревакцинация (каждые 2 года - 5 лет). Поэтому необходима менее дорогая вакцина против КЭ, которая была бы эффективной после одного-двух введений и создавала бы длительный, желательно пожизненный, иммунитет (такой как создаётся при иммунизации против ЖЛ 17Ό). Эта необходимость признаётся ВОЗ в качестве основного приоритета. При разработке кандидатов на звание ЖАВ против КЭ в последние несколько десятилетий посредством эмпирического или рационального ослабления родительского вируса КЭ, как такового, или путём химеризации ВКЭ или вируса Лангат (естественно ослабленного (аттенуированного) флавивируса, который серологически тесно связан с вирусом КЭ) с вирусом Денге 4 возникли определённые трудности. Они были связаны с проблемой остаточной вирулентности кандидатов и/или низкой иммуногенностью либо с чрезмерным ослаблением вируса (\Упд1ц е! а1., Уассше, 26:882-890, 2008; Махипоуа е! а1., 1. Убо1. 82:5255-5268, 2008; КишуаШзеу е! а1., Уассше, 24:133-143, 2006; Койег е! а1., Агсб. Убо1. 8ирр1. 18:191200, 2004; а также ссылки, указанные в этих источниках).
Флавивирусы - это мелкие оболочечные вирусы с РНК плюс-цепь, которые передаются естественным хозяевам через членистоногих (комаров или клещей). Естественными хозяевами, главным образом, являются позвоночные животные, например различные млекопитающие, включая человека, а также птицы. Молекула РНК, составляющая геном флавивируса, содержит около 11000 нуклеотидов и включает в себя длинную открытую рамку считывания (ОРС). Нетранслируемые конечные области генома (3'конец и 5'-конец) включают 120 и 500 нуклеотидов соответственно. ОРС кодирует предшественник полипротеина, который расщепляется во время и после трансляции на отдельные протеины вируса. Протеины закодированы в следующем порядке: С-ргМ/М-Е-№1-№2А/2В^83^84А/4В-№5, где С (нуклеокапсидный белок), ргМ/М (предшественник мембранного белка и мембранный белок) и Е (капсульный, или оболочечный, белок) являются структурными белками, т.е. компонентами вирусных частиц, а белки N8 представляют собой неструктурные белки, которые участвуют во внутриклеточной репликации вируса. Репликация флавивирусов проходит в цитоплазме клеток хозяина. После инфицирования клеток и трансляции РНК генома вируса начинается процессинг полипротеина. Происходит транслокация (перемещение) участка полипротеина ргМ в просвет эндоплазматической сети (ЭПС) инфицированных клеток, а затем - транслокация участков Е и N8, которая направляется гидрофобными сигналами для белков ргМ, Е и N81. Ν-концевые участки белков ргМ, Е и N81 образуются в результате расщепления клеточной сигналазой, которая располагается в мембране ЭПС со стороны просвета. Получающиеся в результате расщепления отдельные белки остаются заякоренными в мембрану ЭПС своими С-концевыми участками. Большая часть других реакций расщепления, затрагивающих неструктурную область, осуществляется вирусной сериновой протеазой №2В/№3. Вирусная протеаза также отвечает за
- 1 023888 формирование С-концевых участков зрелого белка С, который входит в состав вирионов потомства. Синтезированные молекулы РНК генома вируса и белок С образуют плотный нуклеокапсид сферической формы, который окружается клеточной мембраной, в которую погружены белки Е и ргМ. Зрелый белок М образуется в результате расщепления белка ргМ незадолго до высвобождения вирусов с помощью клеточного фермента фурина или аналогичной протеазы. Основной белок оболочки вируса, белок Е, является главной мишенью нейтрализующих антител - основного коррелята иммунитета против флавивирусной инфекции. Другим важным элементом иммунитета является ответ со стороны вирусспецифичных цитотоксичных Т-лимфоцитов (ЦТЛ). Для различных структурных и неструктурных белков флавивирусов описано большое число эпитопов для СЭ8+ и 004+ ЦТЛ. Кроме того, ответ со стороны системы врождённого иммунитета также приводит к расщеплению вирусных частиц и участвует в регуляции развития приобретённого иммунитета и иммунологической памяти.
В дополнение к инактивированным (ИНВ) и живым аттенуированным вакцинами (ЖАВ) против флавивирусов, которые упоминались выше, разработаны и другие платформы для вакцин. Один из примеров таких платформ основан на химерических флавивирусах, которые включают нуклеокапсид вируса жёлтой лихорадки и неструктурные последовательности и белки ргМЕ других флавивирусов, к которым предполагается развитие иммунитета. Эта технология использовалась для разработки вакцины против вирусов лихорадки денге (ДЕН), японского энцефалита (ЯЭ), лихорадки Западного Нила (ЛЗН) и энцефалита Сент-Луис (ЭСЛ) (см., например, патенты США № 6962708 и 6696281). Клинические исследования химерических флавивирусов, основанных на вирусе жёлтой лихорадки, дали многообещающие результаты.
Другая платформа для создания вакцин основана на использовании технологии псевдоинфекционных вирусов (ПИВ) (Макоп е! а1., У1то1о§у, 351:432-443, 2006; 8йи51оу е! а1., 1. Уио1. 21:11737-11748, 2007; \νίώη;·ιη е! а1., Αάν. Уилк. Кек. 72:77-126, 2008; διιζιιΚί е! а1., 1. Уио1. 82:6942-6951, 2008; διιζιιΐά е! а1., 1. У1то1. 83:1870-1880, 2009; 1к1ика\\а е! а1., Уаееше, 26:2772-2781, 2008; νίάιηηη е! а1., Уаееше 26:2762-2771, 2008). ПИВ - это репликационно-дефектные вирусы, ослабленные делециями генома. В отличие от живых вакцин против флавивирусов, эти вирусы осуществляют только один цикл репликации в живом организме (или как вариант - ограниченное число репликационных циклов; это касается двухкомпонентных конструкций, см. далее), что предоставляет определённые преимущества в плане безопасности. ПИВ также не приводят к развитию виремии и системной инфекции. Более того, в отличие от инактивированных вакцин, ПИВ имитируют инфекцию, вызванную интактными вирусными частицами, что может привести к повышению эффективности вакцины вследствие индукции выраженного ответа со стороны Т- и В-клеток, большей длительности иммунитета, а также к снижению необходимой дозы вакцины. Как и в случае интактных вирусов, вакцины на основе ПИВ являются мишенью для антигенпрезентирующих клеток, таких как дендритные клетки, стимулируют колоколоподобные рецепторы (КПР) и вызывают развитие сбалансированного ответа со стороны Т-хелперов-1/Т-хелперов-2 (Тх-1/Тх-2). Кроме того, было показано, что конструкции ПИВ в клетках субстрата культивируются в большем титре, обладают слабым цитопатическим эффектом (ЦПЭ) или вообще лишены его, что позволяет организовать их производство с высоким выходом, возможностью нескольких сборов и/или размножения инфицированных клеток субстрата.
Принципы технологии ПИВ представлены на фиг. 1 и 2. Существует два варианта этой технологии. В первом варианте создаётся однокомпонентный псевдоинфекционный вирус (о-ПИВ), который характеризуется большой делецией в гене нуклеокапсидного белка С. Этот мутантный вирус не способен к образованию инфекционных вирусных частиц в здоровых клетках. Делеция не затрагивает первые ~20 кодонов белка С, которые содержат последовательность циклизации РНК, а также аналогичное число кодонов в конце белка С, которые кодируют сайт расщепления вирусной протеазой и сигнальный пептид для ргМ. Число о-ПИВ может увеличиваться, например, во время производства в клеточных культурах субстрата (во вспомогательных культурах), в которых происходит транскрипция белка С, например, в стабильно трансфицированных клетках, образующих белок С (или более крупные кассеты вспомогательных молекул, включающие белок С), или в клетках, содержащих репликоны альфа-вируса [например, репликон венесуэльского лошадиного энцефалита (ВЛЭ)], которые экспрессируют белок С, или другие внутриклеточные векторы экспрессии, которые экспрессируют белок С. После введения ПИВ в живой организм, например после иммунизации, эти вирусы осуществляют один цикл репликации в отсутствие транскомплементации делеции и не распространяются в окружающие клетки. В инфицированных клетках образуются пустые вирусоподобные частицы (ВПЧ), являющиеся продуктом генов ргМЕ ПИВ. Эти частицы приводят к индукции ответа со стороны нейтрализующих антител. Индукция ответа со стороны Т-клеток происходит через презентацию вирусных эпитопов с молекулами главного комплекса гистосовместимости класса Т. Этот подход был применён к вирусу ЖЛ 17Ό, вирусам ЛЗН, а также химерическим вирусам ЛЗН/ЯЭ и ЛЗН/ДЕН2 (Макоп е! а1., УиЫоду, 351:432-443, 2006; διιζιιΐά е! а1., 1. Уио1. 83:1870-1880, 2009; НЫката е! а1., Уаееше, 26:2772-2781, 2008; νΊάιικιιι е! а1., Уаееше, 26:2762-2771, 2008; νθ 2007/098267; νθ 2008/137163).
Во втором варианте создаётся двухкомпонентный ПИВ (д-ПИВ) (фиг. 2). Клетки субстрата трансфицируются двумя дефектными вирусными РНК: одной - с делецией в гене С и другой - с делецией ге- 2 023888 нов оболочечных белков ргМ и Е. Два дефектных генома дополняют друг друга, что приводит к накоплению двух типов ПИВ в клеточной культуральной среде (δΐηικίον е! а1., 1. νίτοί. 21:11737-11748, 2007; διι/ιιΚί е! а1., 1. νίτοί. 82:6942-6951, 2008). Как вариант, возможно раздельное производство двух ПИВ в соответствующих вспомогательных клеточных линиях и последующее смешивание с получением двухкомпонентного состава. Последний вариант обладает некоторым преимуществом: существует возможность корректировки относительных концентраций двух компонентов, что приводит к увеличению иммуногенности и эффективности вакцины. Этот вид вакцины на основе ПИВ должен характеризоваться ограниченным распространением в живом организме, вследствие коинфицирования некоторых клеток в месте заражения обоими компонентами. Считается, что распространение вирусов будет самоограничивающимся, так как число клеток в тканях превышает число вирусных частиц, выделяемых первоначально коинфицированными клетками. Кроме того, для достаточного коинфицирования необходимо относительное высокое содержание частиц инфицирования (ЧИ) и считается, что клетки вне места введения вакцины не подвергаются коинфицированию (например, клетки дренирующих лимфатических узлов). Клетки, инфицированные только ПИВ ЛС, выделяют высокоиммуногенные ВПЧ. Коинфцированные клетки выделяют два вида упакованных дефектных вирусных частиц, которые также стимулируют образование нейтрализующих антител. Считается, что ограниченная инфекция проводит к более выраженному ответу со стороны нейтрализующих антител и Т-клеток, чем о-ПИВ. Для снижения вероятности рекомбинации во время производства вакцины или в живом организме, включая рекомбинацию с циркулирующими флавивирусами, вирусные последовательности в о-ПИВ и д-ПИВ могут быть модифицированы с помощью, например, замещений синонимичных кодонов, что позволит снизить гомологию нуклеотидных последовательностей, а также мутаций комплементарной циклизации 5'-концевых и З'-концевых элементов.
Сущность изобретения
В изобретении представлены репликационно-дефектные или дефектные псевдоинфекционные флавивирусы, в том числе геном флавивируса, который включает (ί) одну или большее число делеций или мутаций в последовательности нуклеотидов, которые кодируют один или большее число белков из следующей группы: нуклеокапсидный белок С, предшественник мембранного белка (ргМ), оболочечный, или капсульный, белок (Е), неструктурный белок 1 (N81), неструктурный белок 3 (N83) и неструктурный белок 5 (N85), а также (ίί) последовательности, которые кодируют один или большее число гетерологичных патогенов или иммуногенов, имеющих отношение к раку или аллергии. Например, делеция/мутация может затрагивать последовательности гена нуклеокапсидного белка С; последовательности генов предшественника мембранного белка (ргМ) и/или оболочечного белка (Е); последовательности генов предшественника мембранного белка (ргМ) и оболочечного белка (Е); последовательности неструктурного белка 1 (N81).
Гетерологичный иммуноген может быть получен, например, из следующих патогенов: вируса бешенства (например, эпитопа белка О вируса бешенства), Вотгейа ЪщдДогГеп (например, иммуногена ОкрА или иммуногенного фрагмента этого патогена), клеща (например, белка слюны клеща, представленного одним из следующих белков: 64ТКР, Пас и 8а1р20 - или иммуногенными фрагментами этих белков), вируса гриппа (например, вируса гриппа М2, эпитопов гемагглютинина (ГА), или нейраминидазы (НА), или иммуногенного фрагмента этих патогенов), вируса иммунодефицита человека (например, кодон-оптимизированного белка ВИЧ дад, !а!/пеГ и др120 или иммуногенных фрагментов этих белков), вируса папилломы человека (например, нуклеокапсидных белков ВПЧ16 или ВПЧ18 Ь1, Ь2 или иммуногенных фрагментов этих белков), респираторно-синцитиального вируса (например, гликопротеина Р или О респираторно-синцитиального вируса), паразита малярии и МусоЪас1етшт 1иЬегси1о515 (см. также ниже).
К репликационно-дефектным псевдоинфекционным флавивирусам могут относиться последовательности, кодирующие предшественника мембранного белка (ргМ) и/или оболочечный белок (Е). Кроме того, геном репликационно-дефектного псевдоинфекционного флавивируса может быть представлен геномом вируса жёлтой лихорадки, вируса Западного Нила, вируса клещевого энцефалита, вируса Лангат, вируса японского энцефалита, вируса лихорадки денге, вируса энцефалита Сент-Луиса, аттенуированными штаммами этих вирусов, а также химерами этих вирусов (также см. ниже). К примерам химер относятся последовательности генов предшественника мембранного белка (ргМ) и оболочечного белка (Е) первого флавивируса (например, вируса клещевого энцефалита или вируса Лангат) и последовательности генов нуклеокапсидного белка (С) и неструктурных белков второго флавивируса, отличающегося от первого (например, вируса жёлтой лихорадки, вируса лихорадки Западного Нила или вируса Лангат).
Геном репликационно-дефектного псевдоинфекционного флавивируса может быть упакован в частицы, включающие последовательности предшественника мембранного белка (ргМ) и оболочечного белка (Е) этого же или другого флавивируса. Кроме того, последовательности, кодирующие гетерологичные иммуногены, могут быть вставлены в геном вместо делеций или мутаций в генах одного или большего числа белков, а также включаться в геном в сочетании с такими мутациями или делециями.
Последовательности, кодирующие гетерологичные иммуногены, могут быть вставлены в геномы флавивирусов в последовательности, кодирующие оболочечный белок (Е), в последовательности, коди- 3 023888 рующие неструктурный белок 1 (N81), в последовательности, кодирующие предшественника мембранного белка (ргМ), между последовательностями, кодирующими оболочечный белок (Е) и неструктурный белок 1 (N81), между последовательностями, кодирующими неструктурный белок 2В (Ν82Β) и неструктурный белок 3 (N83) и/или иметь вид бицистронной инсерции в нетранслируемой З'-концевой области генома флавивируса.
В изобретении также представлены составы, включающие первый репликационно-дефектный псевдоинфекционный флавивирус, как это описано выше, и второй (третий, четвёртый, ...) репликационнодефектный псевдоинфекционный флавивирус, отличающийся от первого, геном которого включает одну или большее число делеций или мутаций в последовательностях нуклеотидов, которые кодируют один или большее число белков из следующей группы: нуклеокапсидный белок С, предшественник мембранного белка (ргМ), оболочечный, или капсульный, белок (Е), неструктурный белок 1 (N81), неструктурный белок 3 (N83) и неструктурный белок 5 (N85). В этих составах один или большее число белков, кодируемых последовательностями, в которых произошли мутации или делеции, второго репликационнодефектного псевдоинфекционного флавивируса, отличаются от одного или большего числа белков, кодируемых последовательностями, в которых произошли делеции, первого репликационно-дефектного псевдоинфекционного флавивируса, отличающегося от второго вируса.
В изобретении также представлены методы индукции иммунного ответа на иммуноген со стороны субъекта, которые включают введение субъекту одного или большего числа репликационно-дефектных псевдоинфекционных флавивирусов и/или составов, как это описано в настоящем изобретении. В различных примерах реализации изобретения субъект подвержен риску, однако у него нет инфекции, вызванной этим патогеном, а также заболевания или состояния, связанного с иммуногеном, имеющим отношение к раку или аллергии. В других примерах реализации изобретения у субъекта имеется инфекция, вызванная этим патогеном, или заболевание или состояние, связанное с иммуногеном, имеющим отношение к раку или аллергии. Таким образом, изобретение включает профилактические и лечебные методы. В этих методах иммуноген может быть получен из одного из следующих патогенов: вируса бешенства, ВогтеНа ЪигдйогГеп. клеща, вируса гриппа, вируса иммунодефицита человека, вируса иммунодефицита обезьян, вируса папилломы человека, респираторно-синцитиального вируса, паразита малярии и МусоЪас1егннп 1иЪегси1о818 (также см. ниже). Кроме того, эти методы могут быть использованы для индукции иммунного ответа на белок, закодированный в геноме флавивируса, в дополнение к источнику иммуногена. В различных реализациях изобретения субъект подвержен риску, однако у него нет инфекции, вызванной флавивирусом, который соответствует геному псевдоинфекционного флавивируса, который включает последовательности, кодирующие предшественника мембранного белка и/или оболочечный белок флавивируса. В других примерах реализации изобретения у субъекта имеется инфекция, вызванная флавивирусом, который соответствует геному псевдоинфекционного флавивируса, который включает последовательности, кодирующие предшественника мембранного белка и/или оболочечный белок флавивируса.
В настоящем изобретении также представлены живые, аттенуированные химерические флавивирусы, в том числе вирус жёлтой лихорадки, в котором последовательности, кодирующие предшественника мембранного белка и оболочечный белок, замещены последовательностями, кодирующими предшественник мембранного белка и оболочечный белок вируса клещевого энцефалита или вируса Лангат, и сигнальная последовательность между генами нуклеокапсидного белка и предшественника мембранного белка химерического флавивируса включает гибрид сигнальных последовательностей нуклеокапсидного белка и предшественника мембранного белка вируса жёлтой лихорадки и вируса клещевого энцефалита или вируса Лангат, а также варианты этих последовательностей. В различных примерах реализации изобретения сигнальная последовательность нуклеокапсидного белка/предшественника мембранного белка химерического флавивируса включает последовательности Оконечной области вируса жёлтой лихорадки и последовательности С-концевой области вирусов клещевого энцефалита или вируса Лангат (см. ниже).
В настоящем изобретении также представлены живые, аттенуированные химерические флавивирусы, в том числе вирус лихорадки Западного Нила, в котором последовательности, кодирующие предшественника мембранного белка и оболочечный белок, замещены последовательностями, кодирующими предшественника мембранного белка и оболочечный белок вируса клещевого энцефалита или вируса Лангат, и сигнальная последовательность между генами нуклеокапсидного белка и предшественника мембранного белка химерического флавивируса включает гибрид сигнальных последовательностей нуклеокапсидного белка и предшественника мембранного белка вируса жёлтой лихорадки и вируса клещевого энцефалита или вируса Лангат, а также варианты этих последовательностей. В изобретении также представлены фармацевтические составы, включающие один или большее число флавивирусов, составов или живых аттенуированных флавивирусов, описанных в настоящем изобретении, и фармакологически приемлемый носитель или растворитель. Кроме того, составы могут включать адъюванты, или вспомогательные вещества.
В изобретении также представлены репликационно-дефектные псевдоинфекционные флавивирусы с геномом, включающим одну или большее число делеций или мутаций в последовательностях нуклео- 4 023888 тидов, кодирующих неструктурный белок 1 (N81), неструктурный белок 3 (N83) или неструктурный белок 5 (N85).
Кроме того, в изобретении представлены молекулы нуклеиновых кислот, соответствующих геному псевдоинфекционных флавивирусов или геному живых аттенуированных флавивирусов, описанных в настоящем изобретении, а также комплементарные молекулы.
В изобретении также представлены методы получения репликационно-дефектных псевдоинфекционных флавивирусов (описаны ниже), включающие введение одной или большего числа молекул нуклеиновых кислот, упомянутых выше, в клетку, которая экспрессирует белки, соответствующие последовательностям, удалённым из генома флавивирусов репликационно-дефектных псевдоинфекционных вирусов. Согласно этим методам белок может экспрессироваться клеткой из генома второго (третьего, четвёртого, ...) репликационно-дефектного флавивируса, отличающегося от первого вируса. В других примерах реализации изобретения белок экспрессируется из репликона (например, репликона альфа-вируса, такого как репликон вируса венесуэльского лошадиного энцефалита; см. ниже).
В настоящем изобретении также представлены составы из двух или большего числа репликационно-дефектных псевдоинфекционных флавивирусов, в которых два репликационно-дефектных псевдоинфекционных флавивируса - это вирусы из следующей группы: (а) репликационно-дефектные псевдоинфекционные флавивирусы с геномом, содержащим последовательности вируса японского энцефалита, и репликационно-дефектные псевдоинфекционные флавивирусы с геномом, содержащим последовательности вируса лихорадки денге; (Ь) репликационно-дефектные псевдоинфекционные флавивирусы с геномом, содержащим последовательности вируса жёлтой лихорадки, и репликационно-дефектные псевдоинфекционные флавивирусы с геномом, содержащим последовательности вируса лихорадки денге; (с) репликационно-дефектные псевдоинфекционные флавивирусы с геномом, содержащим последовательности вируса клещевого энцефалита или вируса Лангат и вставленные в этот геном последовательности, кодирующие иммуноген Вотгейа ЬигдбогГсп. и репликационно-дефектные псевдоинфекционные флавивирусы с геномом, содержащим последовательности вируса клещевого энцефалита или вируса Лангат и вставленные в этот геном последовательности, кодирующие иммуноген белка слюны клеща, или репликационно-дефектные псевдоинфекционные флавивирусы с геномом, содержащим последовательности вируса клещевого энцефалита или вируса Лангат со вставленными в этот геном последовательностями, кодирующими иммуноген Вотгейа ЬигдбогГсп и иммуноген белка слюны клеща.
В настоящем изобретении также представлены фармацевтические композиции, включающие описанные здесь живые аттенуированные химерические флавивирусы. Кроме того, в изобретении представлены методы индукции иммунного ответа на вирус клещевого энцефалита или вирус Лангат со стороны субъекта, включающие введение этому субъекту такой фармацевтической композиции. В различных примерах реализации изобретения субъект подвержен риску заражения, однако у него нет инфекции, вызванной вирусом клещевого энцефалита или вируса Лангат. В других примерах реализации изобретения субъект инфицирован вирусом клещевого энцефалита или вирусом Лангат.
В настоящем изобретении, кроме того, представлены репликационно-дефектные псевдоинфекционные флавивирусы с геномом флавивируса, включающего одну или большее число делеций или мутаций в последовательностях нуклеотидов, кодирующих один или большее число белков из следующей группы: нуклеокапсидный белок С, предшественник мембранного белка (ргМ), оболочечный, или капсульный, белок (Е), неструктурный белок 1 (N81), неструктурный белок 3 (N83) и неструктурный белок 5 (N85). Геном флавивируса в этих случаях включает последовательности вируса жёлтой лихорадки, причём последовательности, кодирующие предшественника мембранного белка и оболочечный белок, замещены последовательностями, кодирующими предшественника мембранного белка и оболочечный белок вируса клещевого энцефалита или вируса Лангат, и последовательности, кодирующие сигнальную последовательность между белками нуклеокапсида и предшественником мембранного белка генома флавивируса, включают гибрид последовательностей, кодирующих сигнальные последовательности белков нуклеокапсида/предшественника мембранного белка вируса жёлтой лихорадки и вируса клещевого энцефалита или вируса Лангат или варианты этих последовательностей. В различных примерах последовательности, кодирующие сигнальную последовательность нуклеокапсидного белка/предшественника мембранного белка генома флавивируса, включают последовательности 5'-конечной области вируса жёлтой лихорадки и последовательности 3'-конечной области вирусов клещевого энцефалита или вируса Лангат.
Кроме того, в настоящем изобретении представлены репликационно-дефектные псевдоинфекционные флавивирусы с геномом флавивируса, включающего одну или большее число делеций или мутаций в последовательностях нуклеотидов, кодирующих один или большее число белков из следующей группы: нуклеокапсидный белок С, предшественник мембранного белка (ргМ), оболочечный, или капсульный, белок (Е), неструктурный белок 1 (N81), неструктурный белок 3 (N83) и неструктурный белок 5 (N85). Геном флавивируса в этих случаях включает последовательности вируса лихорадки Западного Нила, причём последовательности, кодирующие предшественника мембранного белка и оболочечный белок, замещены последовательностями, кодирующими предшественника мембранного белка и оболочечный белок вируса клещевого энцефалита или вируса Лангат, и последовательности, кодирующие сиг- 5 023888 нальную последовательность между белками нуклеокапсида и предшественником мембранного белка генома флавивируса, включают последовательности, кодирующие сигнальную последовательность белков нулеокапсида/предшественника мембранного белка вируса клещевого энцефалита или вируса Лангат, или варианты этих последовательностей.
Кроме того, в изобретении представлены репликационно-дефектные псевдоинфекционные флавивирусы, в том числе геном флавивируса, который включает одну или большее число делеций или мутаций в последовательности нуклеотидов, которые кодируют один или большее число белков из следующей группы: нуклеокапсидный белок С, предшественник мембранного белка (ргМ), оболочечный, или капсульный, белок (Е), неструктурный белок 1 (N81), неструктурный белок 3 (N83) и неструктурный белок 5 (N85), где любой белок из группы, состоящей из нуклеокапсидного белка (С) и неструктурных белков (N8), в геноме флавивируса принадлежит вирусу Лангат, а любой из предшественников мембранного белка (ргМ) или оболочечный белок (Е) принадлежит вирусу клещевого энцефалита.
Под термином репликационно-дефектный псевдоинфекционный флавивирус, или ПИВ, подразумевается флавивирус с недостаточностью репликации вследствие делеции или мутации в геноме флавивируса. Эта делеция или мутация может являться, например, делецией большой последовательности, такой как большая часть гена нуклеокапсидного белка, что описано в настоящем изобретении (с циклизацией оставшейся последовательности; см. ниже). В других примерах делеции подвержены последовательности, кодирующие различные белки (например, ргМ, Е, N81, N83, и/или N85; см. ниже) или комбинации белков (например, ргМЕ или СргМЕ). Этот вид делеции может предоставлять некоторые преимущества, если ПИВ используется в качестве вектора для введения гетерологичного иммуногена, так как делеция создаёт условия для инсерции последовательности, которая может, например, достигать размера последовательности, затронутой делецией. В других примерах реализации изобретения мутация может быть, например, точечной мутацией, что может приводить к недостаточности репликации, как это указывалось выше. Вследствие делеции или мутации геном не кодирует все белки, необходимые для создания полноценных вирусных частиц. Отсутствующие последовательности могут транскрибироваться в комплементарных клеточных линиях, созданных методами генной инженерии для экспрессии отсутствующих последовательностей (например, с помощью репликона; о-ПИВ; см. ниже), или путём коэкспрессии двух репликационно-дефектных геномов в одной клетке, когда два репликационно-дефектных генома вместе взятых кодируют все белки, необходимые для создания вирусных частиц (система д-ПИВ; см. ниже).
После введения в клетки, которые не экспрессируют комплементарные белки, геномы реплицируются и в определённых условиях образуют вирусоподобные частицы, которые высвобождаются из клеток. Эти частицы способны покинуть клетку, обладают иммуногенностью, но не могут инфицировать другие клетки и приводить к образованию потомства. Например, в случае ПИВ с делецией последовательности, кодирующей нуклеокапсидный белок, после инфицирования клеток нуклеокапсид не экспрессируется, и из клеток выделяются ВПЧ, содержащие белки ргМЕ. По причине отсутствия белка нуклеокапсида ВПЧ лишены нуклеокапсида и не имеют генома (нуклеиновой кислоты). В случае д-ПИВ возможно образование ПИВ в клетках, инфицированных двумя видами ПИВ, являющимися комплементарными друг к другу в отношении образования всех необходимых белков (см. ниже).
Настоящее изобретение обладает определёнными преимуществами. Например, векторы ПИВ и ПИВ, представленные в настоящем изобретении, - сильно ослабленные вирусы, которые после введения одной-двух доз эффективно обеспечивают развитие длительного иммунитета. Более того, в отличие от инактивированных вакцин, ПИВ имитируют инфекцию, вызванную интактными вирусными частицами, что может привести к повышению эффективности вакцины вследствие индукции выраженного ответа со стороны Т- и В-клеток, большей длительности иммунитета, а также к снижению необходимой дозы вакцины. Кроме того, как и в случае интактных вирусов, вакцины на основе ПИВ являются мишенью для антигенпрезентирующих клеток, таких как дендритные клетки, стимулируют колоколоподобные рецепторы (КПР) и вызывают развитие сбалансированного ответа со стороны Т-хелперов-1/Т-хелперов-2 (Тх-1/Тх-2). Было показано, что конструкции ПИВ в клетках субстрата культивируются в большем титре, обладают слабым цитопатическим эффектом (ЦПЭ) или вообще лишены его, что позволяет организовать их производство с высоким выходом, возможностью нескольких сборов и/или размножения инфицированных клеток субстрата. Кроме того, векторы ПИВ, представленные в настоящем изобретении, предоставляют возможность разработки вакцин к патогенам, не являющимся флавивирусами, для которых вакцин в настоящее время не существует.
Другие свойства и преимущества настоящего изобретения будут раскрыты далее при более подробном описании изобретения, в пунктах формулы изобретения и фигурах.
- 6 023888
Краткое описание чертежей
Фиг. 1 - схематическое изображение технологии однокомпонентных ПИВ (о-ПИВ).
Фиг. 2 - схематическое изображение технологии двухкомпонентных ПИВ (Д-ПИВ).
Фиг. 3 - схематическое изображение общего дизайна эксперимента исследования иммуногенности и эффективности ПИВ у мышей.
Фиг. 4 - схема, на которой показано сравнение иммунного ответа, вызываемого ПИВ ЛЗН (ВБ-ЛЗН - вакциной на основе вируса бешенства против лихорадки Западного Нила), и иммунного ответа, вызываемого ЖАВ против ЖЛ/ЛЗН (ХВ-ЛЗН - химерической вакциной против жёлтой лихорадки и лихорадки Западного Нила) у мышей.
Фиг. 5 - схемы, на которых представлены результаты инфицирования хомяков, иммунизированных ПИВ-ЖЛ (ВБ-ЖЛ), ЖЛ17И, ПИВ-ЛЗН (ВБ-ЛЗН) и ЖАВ ЖЛ/ЛЗН (ХВ-ЛЗН), адаптированным к хомякам штаммом Λδίόί (вакцины ПИВ-ЖЛ и ЖЛ17И) и диким типом вируса ЛЗН (штамм ΝΥ99) (вакцины ПИВЛЗН и ЖАВ ЖЛ/ЛЗН).
Фиг. 6 - таблица, в которой приведены титры вирусов ЖЛ/КЭ и ЖЛ/ЛГТ (Лангат) и описана морфология бляшек, которые получаются с указанными химерическими флавивирусами.
Фиг. 7 - таблица, в которой приведены титры ПИВ ЛЗН/КЭ и показаны примеры иммунофлуоресценции клеток, содержащих указанные ПИВ.
Фиг. 8 - схемы, на которых показана кинетика репликации ЖАВ ЖЛ/КЭ и ПИВ-ЛЗН/КЭ в клеточных линиях Уего и ПДХ (почек детёнышей хомяков) (ХВ-Нург = ЖАВ ЖЛ/Нург; ХВ-ЛГТ = ЖАВ ЖЛ/ЛГТ; ВБ-ЛЗН/ВКЭ = ПИВ-ЛЗН/ВКЭ).
Фиг. 9 - схемы, на которых показана выживаемость мышей, инфицированных внутрикожно ПИВКЭ и ЖАВ ЖЛ/КЭ в тесте нейровирулентности (мыши 1СК в возрасте 3,5 недели; ВБ-ЛЗН/Нург = ПИВЛЗН/КЭ(Нург); ХВ-Нург = ЖАВ ЖЛ/КЭ(Нург); ХВ-ЛГТ = ЖАВ ЖЛ/ЛГТ).
Фиг. 10 - схемы, на которых показана выживаемость мышей, инфицированных внутрибрюшинно конструкциями ПИВ-ЛЗН/КЭ(Нург) (ВБ-ЛЗН/Нург), ЖАВ ЖЛ/КЭ(Нург) (ХВ-Нург) и ЖАВ ЖЛ/ЛГТ (ХВ-ЛГТ) и ЖЛ17И в тесте нейровирулентности (мыши 1СК в возрасте 3,5 недели).
Фиг. 11 - схемы, на которых показана заболеваемость у мышей, которую отражает динамика потери массы тела после инфицирования вирусом КЭ. Показаны результаты для групп, иммунизированных оПИВ-КЭ (верхняя левая часть фигуры), химерическими вирусами ЖЛ/КЭ и ЖЛ/ЛГТ (верхняя правая часть фигуры) и контрольной группы (ЖЛ 17Ό, человеческой убитой вакциной против КЭ и имитацией вакцины; нижняя часть фигуры).
Фиг. 12 - схематическое изображение конструкций ПИВ, которые экспрессируют белок С вируса бешенства, а также изображение упаковки конструкций с образованием псевдоинфекционного вируса и иммунизации.
Фиг. 13 - схематическое изображение инсерций, провидящих к получению жизнеспособных/экспрессирующих конструкций (на примере белка С вируса бешенства).
Фиг. 14 - изображения, показывающие результат иммунофлуоресцентного анализа, и схемы, показывающие кривые роста клеток, трансфицированных указанными конструкциями ПИВ-ЛЗН(ДС-С вируса бешенства, ДргМ-Е-С вируса бешенства и ДСргМЕ-С вируса бешенства).
Фиг. 15 - изображения, показывающие результат иммунофлуоресцентного анализа КаЬС, который экпрессируется в клетках культуры Уего, трансфицированных конструкциями ПИВ (ДС-С вируса бешенства, ДргМ-Е-С вируса бешенства и ДС-РгМ-Е-С вируса бешенства).
Фиг. 16 - схематическое изображение конструкции ПИВ-ЛЗН-С вируса бешенства и изображения, на которых показано, что эта конструкция распространяется во вспомогательных клетках, но не в обычных клетках.
Фиг. 17 - схемы, на которых показана стабильность гена белка С вируса бешенства в векторах ПИВ-ЛЗН.
Фиг. 18 - изображения, показывающих распространение однокомпонентных и двухкомпонентных вариантов ПИВ-ЛЗН-С вируса в клетках культуры Уего.
Фиг. 19 - изображения анализа иммунофлуоресценции, который показывает экспрессию полномерного белка Р респираторно-синцитиального вируса (РСВ) (штамм А2) компонентом ДргМЕ д-ПИВ-ЛЗН во вспомогательных клетках после трансфекции.
- 7 023888
Подробное описание изобретения
В настоящем изобретении представлены векторы на основе репликационно-дефектных или дефектных псевдоинфекционных вирусов (ПИВ), включающие последовательности флавивирусов, которые могут быть использованы для индукции иммунитета против гетерологичных патогенов и иммуногенов, имеющих отношение к раку или аллергии, которые вставляются в векторы, а также, возможно, против самих векторов. В изобретении также представлены составы, включающие сочетание ПИВ и/или векторов на основе ПИВ, как это описано ниже, а также методов использования таких составов для индукции иммунного ответа против вставленных последовательностей иммуногенов и/или последовательностей самих
ПИВ. Кроме того, в изобретении представлены конкретные ПИВ и живые аттенуированные химерические флавивирусы, включающие последовательности вируса клещевого энцефалита, и связанные с этими вирусами векторы, составы и методы их использования. Описание векторов на основе ПИВ, ПИВ и живых аттенуированных химерических флавивирусов, составов и методов настоящего изобретения приводится ниже.
Векторы на основе ПИВ и ПИВ.
Векторы на основе ПИВ и ПИВ, представленные в настоящем изобретении, могут основываться на одно- и двухкомпонентных ПИВ, описанные выше (см. также изобретения \УО 2007/098267 и \УО 2008/137163). Например, в случае однокомпонентных ПИВ, векторы на основе ПИВ и ПИВ могут включать геном, имеющий большую делецию в последовательности, кодирующей белок нуклеокапсида, и образовываться в комплементарной клеточной линии, в которой также образуется нуклеокапсидный белок (однокомпонентный ПИВ, фиг. 1 и 12). В соответствии с этим подходом делеции подвергается большая часть области генома, кодирующей нуклеокапсидный белок, что не допускает образования инфекционного потомства в обычных здоровых клеточных линиях (т.е. клеточных линиях, не экспрессирующих последовательность нуклеокапсида) и у вакцинированных субъектов. Делеция гена нуклеокапсида обычно не нарушает целостность последовательности РНК, необходимой для циклизации генома (т.е. последовательности, кодирующей аминокислоты в области позиций 1-26) и/или последовательности ргМ (предшественника мембранного белка), необходимой для созревания ргМ в М (мембранный белок). В определённых примерах реализации изобретения удалённые последовательности соответствуют последовательностям, кодирующим аминокислоты 26-100, 26-93, 31-100 или 31-93 белка С (нуклеокапсида).
В клеточных линиях, экспрессирующих С или кассету СргМЕ, может происходить размножение векторов на основе однокомпонентных ПИВ или ПИВ, которые реплицируются в таких линиях в большом количестве. Примерами клеточных линий, которые могут быть использованы для экспрессии векторов на основе однокомпонентных ПИВ и ПИВ, могут служить клеточные линии ПДХ-21 (почек детёнышей хомяков) (например, АТСС ССЬ-10), Уето (например, АТСС ССЬ-81), С7/10 и другие клетки позвоночных и комаров. В таких клетках могут экспрессироваться белок С или кассета СргМЕ благодаря применению репликона из вирусного вектора, такого как репликон альфа-вируса (например, репликона, основанного на вирусе венесуэльского лошадиного энцефалита (ВВЛЭ), вирусе лихорадки Синдбис, вирусе леса Семлики (ВСЛ), вирусе восточного лошадиного энцефалита (ВВоЛЭ), вирусе западного лошадиного энцефалита (ВЗЛЭ) или вирусе лихорадки реки Росс). Для снижения вероятности продуктивной рекомбинации между векторами на основе ПИВ/ПИВ и комплементарными последовательностями последовательности в репликонах (кодирующие белки С, ргМ и/или Е) могут включать мутации нуклеотидов. Например, последовательности, кодирующие комплементарный белок С, могут включать ненормальную последовательность циклизации. Мутации могут соответствовать оптимизации кодона, что может предоставить дополнительное преимущество в отношении выхода ПИВ. Кроме того, в случае комплементарных клеток, экспрессирующих последовательности белка С (и кассеты СргМЕ), может оказаться полезным включить якорную последовательность в С-концевую область белка С, включающую, например, около 20 аминокислот ргМ (см., например, изобретение \УО 2007/098267).
Векторы на основе ПИВ и ПИВ, представленные в настоящем изобретении, также могут быть основаны на технологии двухкомпонентного генома, которая описана выше. Эта технология предполагает использование двух частичных конструкций генома, каждая из которых характеризуется дефектом экспрессии по меньшей мере одного белка, необходимого для продуктивной репликации (нуклеокапсидного или ргМ/Е). Однако если эти геномы присутствуют в одной и той же клетке, то это приводит к образованию всех компонентов, необходимых для создания ПИВ. В одном из примеров технологии двухкомпонентного генома первый компонент имеет большую делецию гена С, как это описано выше для однокомпонентных ПИВ, а второй компонент имеет делецию ргМ и Е (фиг. 2 и 12). В другом примере реализации изобретения первый компонент имеет делецию С, ргМ и Е, а второй компонент - делецию N81 (фиг. 12). Оба компонента могут включать цис-элементы промотора, необходимые для репликации РНК, и полный набор неструктурных белков, которые образуют комплекс репликативных ферментов. Таким образом, оба дефектных генома могут включать 5'-концевую нетранслируемую область и по меньшей мере около 60 нуклеотидов (элемент 1) следующей естественной последовательности, кодирующей белок, которая составляет Ν-концевой фрагмент белка нуклеокапсида. За этой последовательностью может
- 8 023888 следовать последовательность расщепления протеазой, такая, как, например, последовательность убихитина или протеазы 2А, специфичной к вирусу ящура, которая может сливаться с последовательностями, кодирующими белок нуклеокапсида или оболочки (ргМЕ). Кроме того, для исключения возможности рекомбинации между двумя дефектными вирусными геномами, что могло бы привести к образованию репликационно-компетентного вируса, могут использоваться искусственные кодон-оптимизированные последовательности (см., например, νθ 2008/137163). Подход с двухкомпонентным геномом не требует создания клеточных линий, экспрессирующих комплементарные геномы, таких как клетки, трансформированные с помощью репликонов, как это описывалось выше для подхода с однокомпонентными ПИВ. Примерами клеточных линий, которые могут быть использованы в подходе с двухкомпонентным геномом, могут служить клеточные линии Уето (например, АТСС ССЬ-81), ПДХ-21 (почек детёнышей хомяков) (например, АТСС ССЬ-10), С7/10 и другие клетки позвоночных и комаров.
Дополнительные примеры подхода с д-ПИВ, которые могут использоваться в настоящем изобретении, основаны на использовании комплементарных геномов, включающих делеции последовательностей N83 или N85. Возможно использование делеции, например, в генах белков N81, N83 или N85. Эта делеция может включать несколько сотен аминокислот в ОРС, всю последовательность определённого белка или затрагивать одну аминокислоту, инактивируя ферментную активность белка (например, активность РНК-полимеразы N85, активность геликазы N83 и т.д.). Кроме того, в последовательности белков N8 может происходить точечное изменение аминокислоты (1 мутация, изменяющая аминокислоту, или, как вариант, большее число мутаций). Эти мутации также будут приводить к инактивации фермента. В дополнение к этому, в одной вспомогательной могут сочетаться несколько делеций АЛ8. Тот же гетерологичный ген, например, экспрессирующийся первым компонентом д-ПИВ, может экспрессироваться вместо или в сочетании с делецией(ями) во втором компоненте, увеличивая количество экспрессированного иммуногена. Следует отметить, что ёмкость вспомогательных клеток для инсерций будет возрастать пропорционально величине делеции(ий) N8. Кроме того, вместо делеции во вспомогательной клетке может вставляться другой чужеродный иммуноген (или иммуногены), что приведет к получению поливалентной вакцины.
Кроме того, для получения векторов на основе ПИВ или ПИВ, использующихся в настоящем изобретении, как это описано выше, могут применяться и другие дополнительные подходы (см., например, изобретения νθ 99/28487, νθ 03/046189, νθ 2004/108936, И8 2004/0265338, И8 2007/0249032 и патент США № 7332322).
Векторы на основе ПИВ и ПИВ, описанные в настоящем изобретении, могут состоять из последовательностей одного из видов флавивирусов (например, вируса клещевого энцефалита (ВКЭ, например штамма Нург), вируса Лангат (ЛГТ), вируса жёлтой лихорадки (ЖЛ17И), вируса лихорадки Западного Нила, вируса японского энцефалита, вируса лихорадки денге (серотипов 1-4), вируса энцефалита СентЛуис, вируса Куньин, вируса энцефалита Росио, вируса Ильеуса, вируса центрально-европейского энцефалита, вируса сибирского энцефалита, вируса русского весеннее-летнего энцефалита, вируса лихорадки Кьясанурского леса, вируса омской геморрагической лихорадки, вируса шотландского энцефаломиелита овец, вируса Повассан, вируса Негиши, вируса Абсерратова, вируса Хансалова, вируса Апои) или могут включать последовательности двух и большего числа вирусов. Последовательности некоторых штаммов этих вирусов легкодоступны в общеизвестных базах данных последовательностей; последовательности других штаммов можно легко установить с помощью методов, известных специалистам в этой области науки. В случае векторов на основе ПИВ и ПИВ, включающих последовательности более чем одного флавивируса, последовательности могут принадлежать химерическим флавиврусам, как это описано выше (также см., например, патенты США № 6962708; 6696281; 6184024). В определённых примерах реализации изобретения химеры включают последовательности генов предшественника мембранного белка и оболочечного белка от одного флавивируса (такого как флавивирус, к которому предполагается развитие иммунитета) и последовательности генов нуклеокапсидного и неструктурных белков от другого вируса, отличающегося от первого. В отдельном примере реализации изобретения вторым вирусом является вирус жёлтой лихорадки, например вакцинным штаммом ЖЛ17И. К другим примерам относятся химеры ЖЛ/КЭ, ЖЛ/ЛГТ, ЛЗН/КЭ и ЛЗН/ЛГТ, описанные ниже. Другим примером является химера ЛГТ/КЭ, основанная на геноме вируса ЛГТ и содержащая белки ргМЕ вируса КЭ. Вакцина на основе ППИВ, основанная на этом генетическом подходе, должна обладать рядом преимуществ, поскольку вирус ЛГТ реплицируется ίη νίίτο очень эффективно и является высокоаттенуированным вирусом, иммуногенным для людей. Таким образом, химерическая вакцина на основе ПИВ ЛГТ/КЭ, как ожидается, будет обеспечивать развитие мощного специфического иммунного ответа у человека против КЭ, в частности, вследствие включения генов ргМЕ КЭ.
Векторы, представленные в настоящем изобретении, могут иметь в своей основе ПИВ или живой аттенуированный химерический флавивирус, как это описано в настоящем изобретении (в частности, ЖЛ/КЭ, ЖЛ/ЛГТ, ЛЗН/КЭ и ЛЗН/ЛГТ; см. ниже). Использование конструкций ПИВ в качестве векторов предоставляет определённые преимущества при определённых обстоятельствах, поскольку эти конструкции при необходимости включают большие делеции, что делает эти конструкции более подходящими для размещения инсерций. Эти инсерции могут достигать размеров удалённых сегментов, не приводя к
- 9 023888 потере репликационной активности. Таким образом, векторы на основе ПИВ могут включать очень маленькие инсерции (например, величиной в 6-10, 11-20, 21-100, 101-500 (или больше) аминокислотных остатков в сочетании с делецией ДС или другими делециями), а также относительно крупные инсерций или инсерций промежуточного размера (например, величиной в 501-1000, 1001-1700, 1701-3000 или 3001-4000 (или больше) остатков). В отличие от этого, в определённых примерах реализации изобретения может оказаться более выгодным экспрессировать относительно короткие последовательности в живых аттенуированных вирусах, особенно если инсерции произошли без соответствующей делеции. Дополнительная информация, касающаяся сайтов инсерций, которые могут быть использованы в рамках настоящего изобретения, приведена ниже. В дополнение к этому, как это будет описано далее, экспрессия иммуногенов, не принадлежащих к флавивирусам, в ПИВ и химерических флавивирусах настоящего изобретения может привести в созданию двойных вакцин, которые будут проявлять защитные иммуногенные свойства против патогена векторного флавивируса и целевого гетерологичного иммуногена (например, патогена (такого как бактериальный, вирусный, паразитарный или грибковый патоген) или иммуногена, имеющего отношение к раку или аллергии).
Как указывалось выше, векторы на основе ПИВ и ПИВ настоящего изобретения могут включать последовательности химерических флавивирусов, например химерического флавивируса, включающего гены предшественника мембранного белка и оболочечного белка первого флавивируса (например, флавивируса, к которому предполагается развитие иммунитета), и гены нуклеокапсидного и неструктурных белков второго флавивируса, отличающегося от первого, такого как вирус жёлтой лихорадки (например, ЖЛ17И; см. ниже, а также патенты США № 6962708; 6696281; 6184024). Кроме того, химерические вирусы, представленные в настоящем изобретении, используемые в качестве источника для создания ПИВ или в качестве вакцины/вакцинного вектора, могут также включать одну или большее число специфичных аттенуирующих мутаций (например, мутации гена белка Е, гена белка ргМ, делецию в гене белка С и/или делецию в З'-концевой нетранслируемой области генома), таких как описанные в изобретении АО 2006/116182. Например, делеция белка С или делеция в З'-концевой нетранслируемой области генома может непосредственно затрагивать химеры ЖЛ/КЭ или ЖЛ/ЛГТ. Аналогичные делеции могут быть разработаны и введены в химерические вирусы-кандидаты на звание ЖАВ, такие как химеры, основанные на геномах ЛГТ/КЭ, ЛЗН/КЭ и ЛЗН/ЛГТ. Что касается мутаций гена белка Е, то следует указать, что могут быть разработаны и использованы аттенуирующие мутации, аналогичные описанным для химеры ЖЛ/ЛЗН в изобретении АО 2006/116182. Эти мутации основаны на кристаллической структуре белка Е (Кеу е! а1., Иа1иге, 375(6529):291-298, 1995). Более того, дополнительные примеры аттенуирующих мутаций гена белка Е, описанные для вируса КЭ и других флавивирусов, представлены в табл. 9. Эти мутации также могут быть введены в вирусы-кандидаты на звание химерической вакцины.
В изобретении также представлены новые, в частности, химерические флавивирусы, которые могут использоваться для создания векторов на основе ПИВ и ПИВ как векторы на основе живых аттенуированных химерических вирусов, а также как вакцины против источника предшественника мембранного белка и оболочечного белка химеры. Эти химеры включают вирус клещевого энцефалита (КЭ) или связанные с этим вирусом последовательности ргМЕ. Таким образом, химеры могут включать последовательности ргМЕ, например, от вируса КЭ штамма Нург или вируса Лангат (ЛТТ). К нуклеокапсидным и неструктурным белкам химеры могут относиться белки вируса жёлтой лихорадки (например, ЖЛ17И) или вируса лихорадки Западного Нила (например, ΝΥ99).
Основным свойством этих химер, приведенных здесь в качестве примеров (ЖЛ/КЭ, ЖЛ/ЛГТ, ЛЗН/КЭ и ЛЗН/ЛГТ), является наличие сигнальной последовательности между генами нуклеокапсидного белка и предшественника мембранного белка. Как показано в примерах (см. ниже), авторами было установлено, что в случае химер ПИВ на основе вируса ЖЛ наиболее выгодно использовать сигнальную последовательность, включающую последовательности вируса жёлтой лихорадки и КЭ. В одном примере реализации изобретения сигнальная последовательность включает последовательность вируса жёлтой лихорадки в Ν-концевой области генома (например, последовательность ЗНИУЕТУррЫЕ) и последовательность вируса С-концевой области генома вируса КЭ (например, СМЬСМТ1А), что приводит к получению последовательности ЗНИУЕТУРРЬГОСМЕОМПА. Нами также было установлено, что в случае химер, основанных на ПИВ ЛЗН, наиболее выгодно использовать сигнальную последовательность, состоящую из сигнальной последовательности вируса КЭ (например, ССТИАМ§АЕЕУ1СМЕСМТ1А). В настоящем изобретении представлены химеры ЖЛ/КЭ, ЖЛ/ЛГТ, ЛЗН/КЭ и ЛЗН/ЛГТ, как ПИВ, так и ЖАВ, которые включают указанные выше сигнальные последовательности или варианты этих последовательностей, включающие замещения, делеции или инсерции 1-8, 2-7 или 4-5 аминокислот, что не оказывает значимого влияния на процессинг сигнальной последовательности. В различных примерах реализации изобретения замещения представлены консервативными замещениями, которые характеризуются замещением одного аминокислотного остатка другим, биологически сходным остатком. К примерам консервативного замещения относятся замещения одного гидрофобного остатка, такого как изолейцин, валин, лейцин или метионин, на другой или замещение полярного остатка на другой, как, например, замена аргинина на лизин (и наоборот), глутаминовой кислоты на аспарагиновую (и наоборот), глутамина на аспарагин (и наоборот) и т.д. Дополнительная информация, касающаяся химер, приведена ниже, в
- 10 023888 разделе Примеры.
Сайты инсерции.
Последовательности, кодирующие иммуногены, могут вставляться в один или большее число различных сайтов векторов, представленных в настоящем изобретении. Относительно короткие пептиды могут получаться на поверхности гликопротеинов ПИВ и ЖАВ (например, белков ргМ, Е и/или белков N81) и/или в контексте других белков (для индукции преимущественного ответа со стороны В-клеток и Т-клеток соответственно). Другие вставки, включая более крупные части чужеродных белков, а также полноценные белки, могут экспрессироваться между генами на Ν- и С-концевых участках полипротеина, а также бицистронно (например, в пределах ОРС под СВВР (сайтом внутреннего входа рибосом) или в пределах З'-концевой нетранслируемой области под СВВР; см., например, изобретения АО 02/102828, АО 2008/036146, АО 2008/094674, АО 2008/100464, АО 2008/115314, а также более подробно далее по тексту). В конструкциях ПИВ имеется дополнительная возможность инсерции чужеродных последовательностей аминокислот непосредственно в место делеции(ий). Инсерции могут происходить, например, в участках ДС, ДргМЕ, ДС-ргМ-Ε, ΔΝ81, ΔΝ83 и ΔΝ85. Таким образом, в одном из примеров реализации изобретения в случае о-ПИВ и делеции компонента С (ΔС) д-ПИВ последовательности, кодирующие иммуноген, могут вставляться в место удалённых последовательностей гена белка нуклеокапсида. Последовательности, кодирующие иммуноген, могут также вставляться в место удалённых последовательностей в компоненте ргМЕ (ΔρτΜΕ) д-ПИВ. В другом примере реализации изобретения последовательности вставляются в место удалённых последовательностей конструкций ΔС-ρ^Μ-Ε или инсерции происходят в комбинации с такими делециями. Примеры таких инсерций представлены в разделе Примеры (см. ниже).
В случае инсерции в место делеции ПИВ они могут происходить с несколькими (например, 1, 2, 3, 4 или 5) дополнительными вектор-специфичными остатками на Ν- и/или С-концевом участке чужеродного иммуногена, если эта последовательность хорошо сочетается внутри рамки считывания (например, ~20 первых аминокислот и несколько последних остатков белка С, если последовательность вставляется вместо делеции ΔС). Эти инсерции также могут происходить без дополнительных остатков, если чужеродный иммуноген на концах содержит широко встречающиеся в природе соответствующие элементы (например, сайты расщепления вирусной протеазой; сайты расщепления клеточной протеазой, такой как сигналаза, фурин и т.д.; аутопротеаза; терминирующий кодон и/или элементы СВВР).
Если белок экспрессируется за пределами непрерывной вирусной открытой рамки считывания (ОРС), например если векторная и невекторная последовательности разделяются сайтом внутреннего входа рибосом (СВВР), то может наблюдаться цитоплазматическая экспрессия продукта или продукт может направляться сразу по секреторному пути благодаря использованию соответствующих сигнальных/якорных сегментов. Если белок экспрессируется в пределах векторной ОРС, то к важным моментам такой экспрессии относятся отщепление чужеродного белка от образующейся полипротеиновой последовательности, а также поддержание правильной топологии чужеродного белка и вирусных белков (для обеспечения жизнеспособности вектора) относительно мембраны ЭПС, например транслокация секретируемых белков в просвет ЭПС, или удерживание цитоплазматических белков или белков, связанных с мембраной, в цитоплазме/в связи с мембраной ЭПС.
Рассмотренный выше подход к образованию инсерций может включать использование, например, соответствующих векторных, инсерционных или не связанных с векторами и инсерциями сигнальных и якорных последовательностей, включённых в Ν- или С-концы гликопротеиновых вставок. Стандартные аутопротеазы, такие как аутопротеаза вируса ящура А2 (~20 аминокислот), или убихитин (ген, содержащий ~500 нуклеотидов), или фланкирующие сайты расщепления вирусной протеазой Ν82Β/Ν83 могут использоваться для прямого отщепления экспрессированного продукта из растущей полипептидной цепочки и для выделения чужеродного белка из полипротеина вектора, а также для обеспечения жизнеспособности конструкции. Кроме того, рост полипротеиновой цепочки может останавливаться терминирующим кодоном, например, следующим за вставкой чужеродного гена, а синтез остальных белков в конструкциях может быть начинаться благодаря включению элемента СВВР, например, СВВР вируса энцефаломиокардита, который часто используется в вирусных векторах на основе РНК. Жизнеспособные рекомбинанты могут получаться во вспомогательных клетках (или в обычных клетках в случае подхода на основе д-ПИВ). Кроме того, основные последовательности ПИВ могут быть перегруппированы, например, если это приведёт к более эффективной экспрессии чужеродного гена. Например, перегруппировка генов была применена к вирусу КЭ, в котором гены ргМЕ были перемещены к 3'-концевой области генома под контролем СВВР (Огйидег е! а1., I. Уио1. 80:12197-12208, 2006). Транслокация генов ргМЕ и любых других генов может применяться у ПИВ - кандидатов на звание вакцины против флавивирусов, а также в векторах экспрессии, в соответствии с изобретением.
Дополнительные подробности, касающиеся различных сайтов экспрессии, которые могут быть использованы в настоящем изобретении, представлены ниже (см. также изобретения АО 02/102828, АО 2008/036146, АО 2008/094674, АО 2008/100464, АО 2008/115314, как указывалось выше). Последовательности, кодирующие пептиды, могут вставляться в ген оболочечного белка, который является ос- 11 023888 новной мишенью для нейтрализующих антител. Последовательность может вставляться в ген оболочечного белка, например, в положениях, соответствующих аминокислотам 59, 207, 231, 277, 287, 340 и/или 436 оболочечного белка вируса японского энцефалита (см., например, изобретения \УО
2008/115314 и \УО 02/102828). Для определения соответствующих локусов в различных флавивирусах последовательности этих флавивирусов необходимо сопоставить с последовательностью вируса японского энцефалита. Поскольку точное соответствие может не наблюдаться, следует учитывать, что в других вирусах сайты инсерции могут отличаться, например, на 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислот в любом направлении. Более того, учитывая определение таких сайтов в качестве допустимых для вируса ЯЭ, они также могут варьировать, например, на 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислот в обе стороны. С помощью других методов, таких как транспозонный мутагенез (см., например, изобретения \УО 02/102828 и \УО 2008/036146), возможно определение и других допустимых сайтов инсерций. Инсерции могут происходить в сайтах указанных аминокислот и иметь вид инсерции у С-концевой части указанных аминокислот (т.е. между аминокислотами 51-52, 207-208, 231-232, 277-278, 287-288, 340-341 и 436-437) или происходить в месте коротких делеций (например, делеций 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 аминокислот), начинающихся с указанных аминокислот (или в пределах 1-5 аминокислот по отношению к указанным позициям в обе стороны).
В дополнение к гену оболочечного белка, инсерции могут происходить в генах других вирусных белков, в том числе, например, в гене предшественника мембранного белка/гене мембранного белка и в гене неструктурного белка N81 (см., например, изобретение 2008/036146). Например, инсерции могут происходить в последовательности, предшествующие сайту расщепления нуклеокапсидного белка/предшественника мембранного белка (например, в позициях -4, -2 или -1), или в пределах первых 50 аминокислот предшественника мембранного белка (например, в позиции 26), и/или между аминокислотами 236 и 237 неструктурного белка N81 (или в областях, окружающих указанные последовательности, как это писано выше). В других примерах реализации изобретения инсерции могут происходить между генами. Например, инсерции могут происходить между генами белков Е и N81 и/или между генами белков Ν82Β и N83 (см., например, изобретение \УО 2008/100464). В одном из примеров межгенной инсерции вставленная последовательность может соединяться с С-концевой частью белка Е вектора, находиться после С-концевого участка сигнальной/якорной последовательности белка Е. Также инсерция может включать С-концевую якорную/сигнальную последовательность, которая соединяется с последовательностью N81 вектора. В другом примере межгенной инсерции вставленные последовательности, имеющие фланкирующие сайты расщепления протеазой (например, сайты расщепления ЖЛ17И), могут находиться в отдельном ограниченном сайте - в соединении Ж2В/Ж3 (\УО 2008/100464).
В других примерах реализации изобретения последовательность может быть вставлена в контекст сайта внутреннего входа рибосом (СВВР, например СВВР вируса энцефаломиокардита), как это указывалось выше, например в 3'-нетранслируемой области генома (\УО 2008/094674). В одном примере такого вектора, основанного, например, на последовательности вируса жёлтой лихорадки, кассета СВВР/-иммуноген может вставляться в сайт множественного клонирования, находящийся в 3'нетранслируемой области генома вектора, например в место делеции (например, делеции 136 нуклеотидов вируса жёлтой лихорадки) после стоп-кодона полипротеина (\УО 2008/094674).
Подробности, касающиеся инсерции белка О вируса бешенства и полномерного белка Р респираторно-синцитиального вируса в векторы на основе о-ПИВ и д-ПИВ, представленные в настоящем изобретении, указаны в примере 3. Принцип, описанный в примере 3, может применяться в отношении других векторов и иммуногенов, описанных в настоящем изобретении.
Иммуногены.
ПИВ (о-ПИВ и д-ПИВ), основанные на последовательностях флавивирусов и живых аттенуированных (ослабленных) химерических флавивирусов (например, ЖЛ/КЭ, ЖЛ/ЛГТ, ЛЗН/КЭ и ЛЗН/ЛГТ), как это описано выше, могут использоваться в различных вариантах реализации изобретения для представления чужеродных патогенов (например, не являющихся патогенами флавивирусов, т.е. вирусных, бактериальных, грибковых и паразитарных патогенов) и иммуногенов, имеющих отношение к раку или аллергии. Как будет указано далее, в определённых примерах реализации изобретения может оказаться выгодным выбор в качестве мишени нескольких патогенов, которые занимают ту же экологическую нишу, например, встречающихся в одном географическом регионе. Отдельные, но не исключительные примеры таких иммуногенов представлены ниже.
В дополнение к вирусу КЭ, клещи, как известно, передают и другое распространённое заболевание - болезнь Лайма. Таким образом, в первом примере реализации изобретения ПИВ, представленные в настоящем изобретении, такие как ПИВ, включающие последовательности вирусов КЭ/ЛГТ, а также химерические флавивирусы, включающие последовательности вируса КЭ (например, ЖЛ/КЭ, ЖЛ/ЛГТ, ЛЗН/КЭ, ЛГТ/КЭ и ЛЗН/ЛГТ; во всех случаях, где используется вирус КЭ, возможно использование штамма Нург этого вируса), могут использоваться как векторы для представления защитных иммуногенов причинного фактора болезни Лайма (клещевой спирохеты Воггейа ЬигдбогГсп). Эта комбинация, предназначенная для индукции иммунитета против обоих инфекционных агентов (КЭ и В.ЬигдбогГеп). обладает рядом преимуществ, поскольку КЭ и болезнь Лайма являются заболеваниями,
- 12 023888 передающимися клещами. Подход на основе ПИВ может применяться и для химер (например, ЖЛ/КЭ, ЖЛ/ЛГТ, ЛЗН/КЭ или ЛЗН/ЛГТ) в соответствии с настоящим изобретением, а также для нехимерических вирусов КЭ и ЛГТ. Примером иммуногена В.ЬшдбогГегк который может быть использован в одном из вариантов реализации настоящего изобретения, является О8рА (Οίρκοη е! а1., Уасеше, 21:3875-3884, 2003). Кроме того, для повышения безопасности и/или увеличения иммуногенности ОзрА может подвергаться мутациям, которые будут снижать вероятность аутоиммунного ответа и/или лишать его нежелательных сайтов посттрансляционной модификации в клетках позвоночных животных, такой как Ν-связанное гликозилирование, что может влиять на иммуногенность продукта экспрессии. Мутации, которые снижают вероятность аутоиммунного ответа, могут включать, например, мутации, описанные ^ШеИ е1 а1., Ргос. №11. Асаб. 8с1. И.8.А. 101:1303-1308, 2004. В одном из примеров реализации данного изобретения изменяется РТК-ОзрА, предполагаемый перекрёстно-реагирующий эпитоп для Т-клеток, ВЬ О8рА165-173 (УУЪЕСТЬТА), что делает его похожим на соответствующую последовательность пептида ВоттеНа аГ/е1П (ΡΤόΕΟΚνΛΝ). В РТК-ОзрА соответствующая последовательность выглядит как РТЬЕОКЬТА. Последовательность ОзрА имеет следующий вид:
ткку1!§]§1 ПаЕаскцп у$$1с]екпзу зчсПр^етку |у5кекпкб£ кубНаГудк 61 1е1к05бкп абкзкукЮ збб1§ци!е уГкеЗ^кбу аккчдзкбкз
121 з1еекГпек§ еукекНЦа б§1г1еуг§] кзб§$£каке у|к§уу1е£1 НаекпЕу 181 ксдпбзкп 1зкз§еУ5Уе 1пб1бззаа1 кк(ааЛЗН5£1збщупзк к1кб|у(1ке 24] ηΐίϊνςςγόϊ п§1к1е§зау еккМе!кп а1к
В настоящем изобретении может использоваться вся последовательность и/или иммуногенные фрагменты полномерной последовательности. К примерам таких фрагментов относятся один или большее число из следующих доменов:
домен 1 (аминокислоты 34-41), домен 2 (аминокислоты 65-75), домен 3 (аминокислоты 190-220) и домен 4 (аминокислоты 250-270) (Нап§ е1 а1., СНп. И1ад. ЬаЬ. 1ттип. 1(4):406-412, 1994).
Таким образом, например, может быть получен пептид, включающий любую одну или несколько из следующих последовательностей (которые включают вариации последовательностей, которые могут быть включены в указанные выше последовательности в любой комбинации):
ίΡΟΕ/ΟΜ/ΙΚ/Τ/ΟνΕ; ΟΤδϋΚΝ/δ/ΟΝΟδΟν/Τ;
Ν/Η/Ε1δ/Ρ/Ε/Α/δΚ/ΝδΟΕν/]δ/Τν/ΑΕ/ΑΕΝ/ΏΟΤ/δΟ/Ν8/Τδ/ΤΑ/φ/ΚΑΤΚΚΤΑ/ΟΑ/Κ/ΤΠ3Η/Οδ/Α С/Ν/ΚΤ; 8Ν/ΑΟΤΚ/ΝΕΕΟ8/Ν/Κ/ΤΑνΕίΤ/ΚΚ/ΤΕΟ/ΚΕΙ/ΕΚΝ.
В дополнение к иммуногенам В.ЬшдбогГегк могут экспрессироваться белки слюны клещей, такие как 64ТРР, Рас и 8а1р20, что позволит, например, создать кандидата на звание трёхвалентной специфичной вакцины (КЭ + болезнь Лайма + клещи). Кроме того, белки слюны клещей могут экспрессироваться вместо иммуногенов В.ЬшдбогГеп в векторах, содержащих последовательности вируса КЭ. Также существует большое число других белков слюны клещей, которые могут использоваться для создания вакцины против клещей, в соответствии с настоящим изобретением (ЕгапшзскеШ е1 а1., 1п8ес1 Вюсйет. Мо1. Βίο1. 35:1142-1161, 2005). Один или несколько из этих иммуногенов могут экспрессироваться в о-ПИВ-КЭ. Как бы то ни было, также возможно применение д-ПИВ вследствие их большой ёмкости для инсерций. В дополнение к ПИВ-КЭ, в качестве векторов могут быть использованы и другие вакцины на основе ПИВ, например, для защиты от болезни Лайма и другого заболевания, вызываемого флавивирусами, например лихорадки Западного Нила. Экспрессия этих иммуногенов может оцениваться в клеточной культуре, а иммуногенность/защитные свойства могут изучаться на доступных животных моделях (например, как это описано О1р8оп е1 а1., Vасс^ηе. 21:3875-3884, 2003; ЬаЬиба е1 а1., РаШод. 2(е27):02510259, 2006). Иммуногены и другие патогены могут аналогично экспрессироваться в дополнение к иммуногенам возбудителя болезни Лайма и клещей, что позволит создавать кандидатов на звание поливалентной вакцины. К примерам иммуногенов слюны клещей, которые могут использоваться в качестве вариантов реализации настоящего изобретения, относятся:
- 13 023888
64ТК.Р (АР4691701
МКЛЕЕУЕЗЬЕ 8ΤΛ.ΑΕΤΝΑΑΚ АОКГОЗОЮТ ΗΟΒΕΗΓ,ΝΙ,ΥΛ Ο1ΕΡΑΟΡΚΟΥ РО1.ТА5ЮОЕ уоакеоокао νανεκγογογ ρ8\υουρυοου οουοουοουο суодоеозлу οουρουυουυ ΥΡ80ΥΟΟΟΥΟ 05Υαθ5Υ005 ΥΤΥΡΝνΚΑΕΑ ΟΑΑΑ
Пас (ΑΡ270496 Ι
МРТАРТСАЫ. А13Н.О8РС8 ЗЗЕПСЕЕрОТ ΐνΕΤΤΤΟΕΈΥ ΕΚΗΥΚΝΗΪΟί ССАЕ1ΥΚΝ53ΙI ЛЕАУУМСТЕХ ИЬРРУνΝΑΠΥ ΕΟΙΚΗΚΙΝΚΤ 1РОГУК1.1СХ РТУЛЧРОЕ.ГУ ЬУУМОЗООИЗ ЦРЕЕЦКЕ5ТО ТПЕОЗХТСЗЗ ΑΑΑΚУТЕАЫ ΙΕΑΕΕΝΟΤΛΗ 1ТО\УТТЕТРТ ТЬЁРТТЕЗОР ΕΑΙΡ
5а1р20 (Ε13008559)
МКТАЬТСА1Х А15РЬС8РС8 88ЕОСЬЕКО5 ВБЕТТТСЖУ ЕКУУККНРОЬ СОЛрУКИЗЗП ЛЕЛУУКСТЕЗ 1.ЕРЕЗУ13ТТ\У ΕΟΙΚΗΚΙΝΚΤ ΙΡΕΡΎΝΙ-ΙΟΝ РТУАМРМЗРУ ΕνΥΜΟδΝΟΝδ Υ5ΕΕΌΕΟΟΚΤ ОЗЗАА У(.)УТЕ 0Ы1ЦАЕЕЖ ΤΑΗΙΤΟΆΤΊΈ ΑΡΤΤΙ ,ΕΡΤΤΕ ТО ЕЕ А18
Более подробная информация, касающаяся ПИВ, связанных с вирусом КЭ, и ЖАВ, представлена в примере 2 (см. ниже).
В изобретении также представлены вакцины на основе векторов, в роли которых могут выступать ПИВ и ЖАВ, против других патогенов, не являющихся флавивирусами, включая вакцины с двойным действием, которые вызывают развитие защитного иммунитета как против флавивирусов (в зависимости от того, оболочечный белок какого вируса закодирован в векторе) и других патогенов, не являющихся флавивирусами (в зависимости от экпрессируемых иммунологических детерминант). Этот подход аналогичен примеру векторной вакцины на основе ПИВ против КЭ, болезни Лайма и клещей, описанному ранее. Как указывалось выше, возможно создание таких вакцин с двойным действием против широкого круга патогенов путём экспрессии вирусных, бактериальных, грибковых и паразитарных иммуногенов, а также иммуногенов, связанных с раком и аллергиями. В качестве отдельных, но не исключительных примеров приведём здесь описание структуры и биологических свойств кандидатов на звание вакцины на основе векторов в виде ПИВ и вирусов бешенства и респираторно-синцитиального вируса, сконструированных путём экспрессии белка С вируса бешенства и полномерного белка Р РСВ в месте делеций или в сочетании с различными делениями в векторах, представленных одно- или двухкомпонентными ПИВ.
Как показано в примерах ниже, конструкции на основе о-ПИВ могут обладать определенными преимуществами для стабильного представления относительно коротких чужеродных иммуногенов (похожих на белок ОзрЛ возбудителя болезни Лайма и белки слюны клещей), поскольку эти инсерции сочетаются с относительно короткими делениями АС. Векторы на основе двухкомпонентных ПИВ могут обладать преимуществами для стабильного представления относительно крупных иммуногенов, таких как белок С вируса бешенства и белок Р РСВ, поскольку инсерции в таких векторах сочетаются, например, с большими делециями ДргМЕ, ДСргМЕ и ΔΝ81. Некоторые из компонентов д-ПИВ могут изготавливаться и использоваться как вакцины, например конструкция ПИВ-Р РСВ, описанная ниже, содержащая делецию ΔСр^МЕ. В этом случае вакцина вызывает развитие иммунного ответа (т.е. появление нейтрализующих антител) преимущественно против экспрессирующегося белка, но не против патогена векторафлавивируса. В других примерах реализации изобретения возможно получение вакцины двойного действия, вызывающей развитие иммунитета против вектора и вставленного компонента. Кроме того, по причине большой ёмкости для инсерций векторов на основе ПИВ и возможности использования двухкомпонентных геномов векторы на основе ПИВ предлагают возможность одновременного воздействия на несколько патогенов флавивирусов, например, путём экспрессии чужеродных иммуногенов сразу двух различных флавивирусов в двух компонентах д-ПИВ.
В дополнение к белку Р РСВ, белку С вируса бешенства, защитным иммуногенам возбудителя болезни Лайма и белкам слюны клещей, приведенных выше в качестве примеров чужеродных иммуногенов, возможна экспрессия других чужеродных иммуногенов, что может использоваться для воздействия на другие заболевания, включая, например, иммуногены вируса гриппа типов А и В. В этих примерах реализации изобретения возможно использование нескольких коротких эпитопов и/или целых генов белков вирусных частиц, таких как гены вируса гриппа А М2, НА и ΝΑ и/или гены вируса гриппа В ΝΒ или ВМ2. Более короткие фрагменты М2, ΝΒ и ВМ2, соответствующие, например, М2е или внеклеточному фрагменту М2, также могут быть использованы. В дополнение к этому возможно использование фрагментов гена НА, включая эпитопы, обозначаемые как НА0 (23 аминокислоты в длину, что соответствует месту отщепления НА). К отдельным примерам последовательностей, связанных с вирусом гриппа, которые могут быть использованы в вариантах реализации настоящего изобретения, относятся:
- 14 023888
ΡΑΚΙΓΚΕΚαΡΡΟΑΙΑΟΡίΕ (НАО), РАКЬЬК.ЕКОРРОА1АСРЬЕСЗОС (НАО), ΝΝΑΤΡΝΥΤΝνΝΡΙδΗΙΚΟδ (ΝΒβ), ΜδΕΕΤΕνΕΤΡΤΚΝΕλναϋΚΟΝϋδδϋ (М2е), МЯЕЕТРЛ'ЕТРТРКР.%Т.СРС5О88О (М2е), М8ЕЕТЕУЕЗЕ'П<МС\УОСРСЗО35П (М2е), ΕνΕΤΡΤΚΝ (М2е),
5Ы.ТРУГ,ТР[КЖи;ССКСЬгГ)35ГЗ (М2е) и δΙΧΤΕνΕΤΡΙΚΝΕ%ΌεΚ (М2е).
Дополнительные последовательности М2е, которые могут быть использованы в настоящем изобретении, включают последовательности из внеклеточного домена белка ВМ2 вируса гриппа В (консенсус МЬЕРРЦ, например ЬЕРР01Ь818ОС). а также последовательности пептида М2е вируса птичьего гриппа Η5Ν1 (\181.1.ТТЛТТ1.ТК\С.\\'ОСКС81)881П
К другим примерам патогенных иммуногенов, которые могут представляться в векторах этого изобретения, относятся кодон-оптимизированные последовательности белков дад (55 кДа), др120, др160 ВИЧ и ВИО (вируса иммунодефицита человека и вируса иммунодефицита обезьян), гены тас239-геу/(а(/пеГ ВИО или аналогичные гены ВИЧ, а также другие иммуногены ВИЧ; иммуногены ВПЧ (вируса папилломы человека), такие как ВПЧ16, ВПЧ18 и другие, например нуклеокапсидный белок Ь1, который самостоятельно формирует ВПЧ-подобные частицы, нуклеокапсидный белок Ь2 или его иммунодоминантные порции (например, аминокислоты 1-200, 1-88 или 17-36), белки Е6 и Е7, которые участвуют в трансформации и иммортализации клеток млекопитающих, соединяясь и соответствующим образом мутируя (соединение двух генов приводит к образованию белка слияния, известного под названием Е6Е7КЪ-, который примерно в 10 раз слабее вызывает трансформацию фибробластов, и мутации компонента Е7 во втором остатке делает получившийся мутированный белок слияния неспособным вызывать трансформацию) (Воигкпе11 е( а1., Vасс^ηе. 14:1485-1494, 1996). К другим иммуногенам относятся защитные иммуногены против энцефаломиокардита, ЦМВ (цитомегаловируса), ВПГ2 (вируса простого герпеса 2 типа), вирусов паразита малярии, МусоЪас(етшт (иЪегси1о515, вызывающей туберкулёз, С.ОГПсПе и других известных возбудителей нозокомиальных инфекций, а также грибковых патогенов, иммуногенов рака, белков, связанных с аллергией, которые можно использовать в качестве мишеней для вакцинации.
Вставки чужеродных иммуногенов, представленные в настоящем изобретении, могут модифицироваться по различным механизмам. Например, для увеличения уровня экспрессии и удаления длинных повторов последовательностей нуклеотидов, что позволит увеличить стабильность РНК-генома векторов на основе ПИВ, применяется оптимизация кодона. Иммуногенность может быть повышена путём химеризации белков с известными иммуностимулирующими элементами, таким как агонисты КПР (колоколоподобных рецепторов), стимулирующие цитокины, компоненты системы комплемента, белки теплового шока и т.д. (например, см. обзор 1ттипоро(еп(1а(от5 ίη МоДегп Vасс^ηе5, 8сЬупк апД О'Надап ЕДк., 2006, Е1кеу1ет АсаДетю Ргекк: Атк1егДат, ВокЮп).
Что касается конструкций двойных вакцин против бешенства и других заболеваний, вызываемых флавивирусами, то для применения у человека и в ветеринарии в определённых географических областях могут представлять интерес и другие комбинации, такие как сочетание КЭ + бешенство, ЖЛ + бешенство и т.д. Такие комбинации могут быть сформированы аналогично. Возможная структура конструкций экспрессии не ограничивается описанными здесь примерами. Например, делеции и инсерции могут модифицироваться, генетические элементы могут перегруппировываться, также могут использоваться другие генетические элементы, облегчающие презентацию антигена и увеличивающие иммуногенность (например, сигналы секреции, детерминанты внутриклеточного транспорта, включения или слияния с иммуностимулирующими элементами, такими как цитокины, агонисты КПР, такие как флагеллин, компоненты мультимеризации, такие как лейциновая застёжка-молния, а также пептиды, которые увеличивают время циркуляции белка в крови; эти элементы могут происходить не от флавивирусов и не от вируса бешенства). Кроме того, такая структура может применяться для о-ПИВ и д-ПИВ - кандидатов на звание вакцины, основанных на векторных геномах других флавивирусов и экспрессирующих иммуногены других патогенов, например, патогенов, описанных в настоящем изобретении, а также других патогенов.
К другим примерам векторов на основе ПИВ и ЖАВ, представленных в настоящем изобретении, относятся комбинированные вакцины, такие как вакцина против ДЕН + вируса Чикунгунья (ЧИКВ) и ЖЛ + ЧИКВ. ЧИКВ - это альфа-вирус, эндемичный для Африки, Юго-Восточной Азии, Индийского субконтинента с островами, островов Тихого океана. Этот вирус делит экологическую/географическую нишу с вирусами ЖЛ и ДЕН1-4. Он вызывает тяжёлое заболевание, которое характеризуется выраженной болью (артритом, другими симптомами, напоминающими ДЕН) и длительными последствиями у большинства пациентов (8ипоп е! а1., МеД. СПп. №г1П Ат. 92:1323-1343, 2008; 8епеуиа1пе е! а1., ί. Ттауе1 МеД. 14:320-325, 2007). К другим примерам векторов на основе ПИВ и ЖАВ, представленных в настоящем изобретении, являются ЖЛ + Эбола или ДЕН + Эбола, которые совместно циркулируют в Африке.
Иммуногены к указанным патогенам, не относящимся к флавивирусам, последствия заражения которыми хорошо известны в медицинских кругах, могут включать гликопротеин В или белок слияния рр65/1Е1 ЦМВ (Кеар е! а1., Vасс^ηе, 25(42):7441-7449, 2007 и указанные в этом источнике ссылки), некоторые белки клещей (обзор: 8ке1ку е! а1., №к Кеу. МюгоЪю1. 4(6):469-476, 2006), антигены паразита ма- 15 023888 лярии, такие как КТ8,8 (преэритроцитарный белок циркумспорозоита, БЦС) и другие иммуногены (например, см. обзор: Ы е! а1., Уассше, 25(14):2567-2574, 2007), оболочечные белки Е1 и Е1 ЧИКВ (или кассеты С-Е2-Е1, Е2-Е1), структурные белки ВГС (вируса гепатита С) С-Е1-Е2, которые образуют ВПЧ (Е/е11е е! а1., I. Уйой 76(23): 12325-12334, 2002) или другие белки, которые индуцируют ответ со стороны Т-клеток, гликопротеин ОР вируса Эбола (Уаид е! а1., У1то1оду, 377(2):255-264, 2008).
В дополнение к иммуногенам, описанным выше, представленные здесь векторы могут включать один или несколько иммуногенов, полученных из одного или нескольких вирусов или направляющих иммунный ответ против одного или нескольких вирусов (например, вирусные целевые антигены, включающие, например, дцДНК-вирус (например, аденовирус, герпесвирус, вирус Эпштейна-Барра, вирус простого герпеса 1 типа, вирус простого герпеса 2 типа, вирус простого герпеса человека 8 типа, цитомегаловирус человека, вирус опоясывающего лишая, поксвирус); оцДНК-вирус (например, парвовирус, папилломавирус (например, Е1, Е2, Е3, Е4, Е5, Е6, Е7, Е8, БПВ1 (бычий папилломавирус 1), БПВ, БПВ, БПВ, БПВ и БПВ (Из: РарШотауйив апй Нитап Сапсег, под ред. Н. Рйв!ег (СКС Ргевв, 1пс. 1990)); Ьапсав!ег е! а1., Сапсег Ме!ав!. Кеу. р. 6653-6664, 1987; Рйв!ег е! а1., Лйу. Сапсег Кев. 48:113-147, 1987)); дцРНК-вирусы (например, реовирусы); (+)оцРНК-вирусы (например, пикорнавирус, вирус Коксаки, вирус гепатита А, полиовирус, тогавирус, вирус краснухи, флавивирус, вирус гепатита С, вирус жёлтой лихорадки, вирус лихорадки денге, вирус лихорадки Западного Нила); (-)оцРНК-вирусы (например, ортомиксовирус, вирус гриппа, рабдовирус, парамиксовирус, вирус кори, вирус свинки, вирус парагриппа, рабдовирус, вирус бешенства); оцРНК-РТ-вирусы (например, ретровирус, вирус иммунодефицита человека (ВИЧ); оцДНК-РТ-вирусы (например, гепаднавирус, вирус гепатита В). Иммуногены могут также происходить от других вирусов, не указанных здесь, но доступных для специалистов в области вирусологии.
Что касается ВИЧ, то иммуногены могут получаться из любого изолята ВИЧ. Как принято в вирусологии, изоляты ВИЧ в настоящее время классифицируются на отдельные генетические подтипы. Известно, что ВИЧ-1 представлен как минимум десятью подтипами (А, В, С, Ό, Е, Р, О, Н, I и К). Известно, что ВИЧ-2 представлен как минимум пятью подтипами (А, В, С, Ό и Е). Подтип В связан с эпидемией ВИЧ у гомосексуалистов и потребителей внутривенных наркотиков из различных стран мира. Большинство иммуногенов ВИЧ-1, лабораторных адаптированных изолятов, реагентов и картированных эпитопов принадлежит к подтипу В. В африканских странах, расположенных южнее Сахары, в Индии и Китае, т.е. в областях с высокой частотой вновь выявленных случаев ВИЧ-инфекции, с ВИЧ-1 подтипа В связана лишь небольшая часть инфекций, а самым распространённым инфекционным подтипом, по-видимому, является подтип С. Таким образом, в определённых вариантах реализации этого изобретения может быть полезным использование иммуногенов ВИЧ-1 от подтипов В и/или С. Может также быть полезным включить иммуногены от различных подтипов ВИЧ (например, подтипов В и С ВИЧ-1, подтипов А и В ВИЧ-2 или комбинацию подтипов ВИЧ-1 и ВИЧ-2) в одну иммунологическую композицию. Подходящими для этого иммуногенами являются, например, ЕNУ, ОАО, РОЬ, ИЕР, а также их варианты, производные и полученные из них белки слияния.
Иммуногены могут также получаться из бактерий одного или нескольких видов, а также направлять иммунный ответ против бактерий одно или нескольких видов (врр.) (например, бактериальные целевые антигены, включающие, например, ВасШив врр. (например, ВасШив аШйтатв), Вогйе!е11а врр. (например, Вогйе!е11а рейивв1в), Воттейа врр. (например, Воттейа ЬитдйогГей), Вгисе11а врр. (например, Вгисе11а аЬойив, Вгисе11а сашв, Вгисе11а теШегМв, Вгисе11а вшв), Сатру1оЬас!ет врр. (например, Сатру1оЬас!ет ίςριπί), Сй1атуФа врр. (например, Сй1атуФа рпеитотае, Сй1атуФа рвШаск Сй1атуФа !гасйотайв), С1овйгйшт врр. (например, С1овйгйшт Ьо!и1шит, С1ов!ййтт ФГйсйе, С1овйгйшт регГппдепв, С1ов1пйтт !е!ат), СогупеЬас!егшт врр. (например, СотупеЬас!етшт ШрШепае), Еп!егососсив врр. (например, Еп!егососсив ГаесаПв, еп!егососсив Гаесит), ЕвсйепсЫа врр. (например, ЕвсйейсЫа сой), РгаптвеПа врр. (например, РгаптвеПа !и1атепв1в), Наеторййив врр. (например, Наеторййив тПиеп/а), НейсоЬас!ег врр. (например, НейсоЬас!ет ру1оп), ЬедюпеПа врр. (например, ЬедюпеПа рпеиторййа), йерГОвриа врр. (например, Ьер!овр1та йИеггодАЖ), йавЮпа врр. (например, йавЮпа топосу!одепев), МусоЬас!етшт врр. (например, МусоЬас!етшт 1ергае, МусоЬас!етшт !иЬетси1ов1в), Мусор1авта врр. (например, Мусор1авта рпеитотае), №1ввейа врр. (например, №1ввейа допоггйеа, №1ввейа тетпдШШв), Рвеийотопав врр. (например, Рвеийотопав аегидтова), Кюкейыа врр. (например, Кюкейыа йскейвп), 8а1топе11а врр. (например, 8а1топе11а 1урйк 8а1топе11а 1урйпшгшт), 8Й1де11а врр. (например, 8Й1де11а воппе!), 8!арйу1ососсив врр. (например, 8!арйу1ососсив аигеив, 8!арйу1ососсив ер1йетт1й1в, 8!арйу1ососсив варторйуПсв, соади1аве педаПуе в!арйу1ососсив (например, патент США № 7473762)), 8!гер!ососсив врр. (например, 8!гер!ососсив ада1асПае, 8йер!ососсив рпеитотае, 8йер!ососсив ругодепев), Тгеропета врр. (например, Тгеропета ра1ййит), УШйо врр. (например, УФпо сйо1егае) и Уегвииа врр. (Уегвииа ревйв). Иммуногены могут также происходить от бактерий других видов или направлять иммунный ответ против бактерий других видов, не указанных здесь, но доступных для специалистов в области микробиологии.
Иммуногены могут также получаться из паразитарных организмов одного или нескольких видов, а также направлять иммунный ответ против бактерий одно или нескольких видов (врр.) (например, парази- 16 023888 тарные целевые антигены, включающие, например, Апсу1ок!оша крр. (например, А.киокепа1е), АшкаСк крр., Аксаг1к кппкпШкек, Ва1апккшт сок, СекЮка крр., Сатткае крр., С1опогсЫк ктепк15, Эюгосоекит кепкпксит, ИкгосоеНиш кокрек, О1рку11око1кг1ит 1а!иш, Эгасипси1и5 крр., ЕсЫпососсиз крр. (например, Е.дгапи1окик, Е.тиккосиктк), Еп!атоеЬа к1к!о1укса, Еп!егоЬшк уегшкиИпк, Раксю1а крр. (например, Р.керакса, Р.шадпа, Р.д1дапкса, Р.]асккот), Ракс1о1орк15 Ьикк1, С1агк1а крр. (С1агк1а 1ашЬка), Спа!кок!ота крр., Нутепо1ер18 крр. (например, Н.папа, Н.ккпкш1а), Ье1ккшата крр., Ьоа 1оа, Ме!огск1К крр. (М.соп)ипс!ик, М.а1Ыкик), №са!ог атепсапик, Оеккгакеа крр. (например, овод), Опскосегакае крр., Ор1к1когсЫк крр. (например, Олауегппк О.Гекпепк, О.диауадш1епк15 и О.поуегса), Р1акшокшш крр. (например, Р.Еа1с1рагит), Рго!оГаксю1а гоЬик1а, РагаГакс1о1орк15 Гаксютогркае, Рагадотшик \уе51егтапк 8ск1к!окоша крр. (например, 8.шапкот, 8..)аротсиш, 8апекопдк 8.каеша!оЬшш), 8риоте1га еппасе1еигорае1, 8!гопду1о1кек к!егсогакк, Таеша крр. (например, Т.кад1па!а, Т.кокиш), Тохосага крр. (например, Т.сатк, Т.сак), Тохор1акта крр. (например, Т.допкк), ТпскоЬкката гедепк, Тпс1ипе11а кртакк, Тпскштк ктскшга, ТгошЫсиккае крр., Тгурапокота крр., Типда репеКапк и/или Уискегепа Ьапсгойк Иммуногены могут также происходить от паразитарных организмов других видов или направлять иммунный ответ против паразитарных организмов других видов, не указанных здесь, но доступных для специалистов в области паразитологии.
Иммуногены могут быть получены из опухолевых целевых антигенов или направлять развитие иммунитета против опухолевых целевых антигенов (например, опухолевых целевых антигенов). Термин опухолевый целевой антиген (ОЦА) может включать как антигены, связанные с опухолью (АСО), так и опухольспецифичные антигены (ОСА), когда источником антигена является опухолевая клетка. ОЦА могут быть представлены антигеном, который экспрессируется на поверхности опухолевых клеток в больших количествах, чем на нормальных клетках, а также антигеном, который экспрессируется на нормальных клетках во время эмбрионального развития. ОСА, как правило, - это антигены, уникальные для опухолевых клеток; они не экспрессируются нормальными клетками. Классификация ОЦА предполагает выделение пяти категорий в соответствии с паттерном экспрессии, функцией и генетическим происхождением: антигены рака яичек (РЯ) (например, МАСЕ, ΝΥΈ80-1); антигены дифференцировки меланоцитов (например, Ме1ап А/МАКТ-1, 1угок1паке, д100); мутационные антигены (например, МИМ-1, р53, СИК-4); сверхэкспрессируемые аутоантигены (например, НЕК-2/пеи, р53) и вирусные антигены (например, ВПЧ, ВЭБ (вирус Эпштейна-Барра)). К соответствующим ОЦА относятся, например, др100 (Сох е! а1., 8аепсе, 264:716-719, 1994), МАКТ-1/Ме1ап А (Ка^акаш1 е! а1., I. Ехр. Мек., 180:347-352, 1994), др75 (ТКР-1) (Уапд е! а1., I. Ехр. Мек., 186:1131-1140, 1996), тирозиназа (Уо1Ге1 е! а1., Еиг. I. 1шшипо1., 24:759-764, 1994), ΝΥ-ΞδΟ-1 (УО 98/14464; УО 99/18206), протеогликан меланомы (Не11к!гош е! а1., I. 1шшипо1., 130:1467-1472, 1983), антигены семейства МАСЕ (например, МАСЕ-1, 2, 3, 4, 6 и 12; Уап кег Вгиддеп е! а1., 8аепсе, 254:1643-1647, 1991; патент США № 6235525), антигены семейства ВАСЕ (Вое1 е! а1., 1шшипку, 2:167-175, 1995), антигены семейства САСЕ (например, САСЕ-1,2; Уап кеп Еупке е! а1., I. Ехр. Мек. 182:689-698, 1995; патент США № 6013765), антигены семейства КАСЕ (например, КАСЕ-1; Саид1ег е! а1., 1шшиподепекск, 44:323-330, 1996; патент США № 5939526), Ν-ацетилглюкозаминилтрансфераза-У (СиШоих е! а1., I. Ехр. Мек. 183:1173-1183, 1996), р15 (КоЬЫпк е! а1., I. 1шшипо1. 154:5944-5950, 1995), β-катенин (КоЬЬшк е! а1., I. Ехр. Мек., 183:1185-1192, 1996), МИМ-1 (Сойке е! а1., Ргос. №·ιΐ1. Асак. 8ск И.8.А. 92:7976-7980, 1995), циклинзависимая киназа-4 (ЦЗК4) (Уо1Ге1 е! а1., 8аепсе, 269:1281-1284, 1995), р21-гак (Роккиш е! а1., 1п!. I. Сапсег 56:40-45, 1994), ВСК-аЬ1 (ВоссЫа е! а1., В1оок, 85:2680-2684, 1995), р53 (ТкеоЬа1к е! а1., Ргос. №И. Асак. 8ά. И.8.А. 92:11993-11997, 1995), р185 НЕК2/пеи (егЬ-В1; Р1кк е! а1., I. Ехр. Мек., 181:2109-2117, 1995), рецептор эпидермального фактора роста (РЭФР) (Натк е! а1., Вгеак! Сапсег Ке8. Тгеа!, 29:1-2, 1994), канцероэмбриогенные антигены (КЭА) (Кмопд е! а1., I. Сапсег 1пк!., 85:982-990, 1995), патенты США № 5756103; 5274087; 5571710; 6071716; 5698530; 6045802; ЕР 263933; ЕР 346710 и ЕР 784483; мутированные муцины, связанные с карциномой (например, продукты гена МИС-1; 1егоше е! а1., I. 1шшипо1., 151:1654-1662, 1993); продукты гена ЕВNА вируса Эпштейна-Барра (например, ЕВNА-1; Кюкгпкоп е! а1., Сапсег 8иЬЬау, 13:53-80, 1992); белки Е7, Е6 папилломавируса человека (Кеккшд е! а1., I. 1шшипо1. 154:5934-5943, 1995); простатспецифичный антиген (Р8А; Хие е! а1., Тке Ргок!а!е? 30:73-78, 1997); простат-специфичный мембранный антиген (Р8МА; 1кгаек е! а1., Сапсег Ке8. 54:1807-1811, 1994); идиотипичные эпитопы антигенов, например идиотипы иммуноглобулина или идиотипы рецептора Т-клеток (Скеп е! а1., 1. 1шшипо1. 153:47754787, 1994); К8А (патент США № 5348887), кинезин-2 ГО1е1/, е! а1., Вюскеш. Вюркук. Кек. Сошшип. 275(3):731-738, 2000), Н1Р-55, ТСР (антиапоптотический фактор) (Тоошеу е! а1., Вг. I. Вюшек. 8ск 58(3):177-183, 2001), опухолевый белок Ό52 (Вгупе е! а1., Сепошкк? 35:523-532, 1996), Н1РТ, ΝΥ-ВК-Т (УО 01/47959), ИУ-ВК-62, ИУ-ВК-75, \У-ВК-8у ИУ-ВК-87 и \¥-ВК-96 (8сап1ап, М. 8его1одю апк Вю1пГогша!к Арргоаскек !о 1ке 1кепкйсакоп оГ Нишап Тишог Апкдепк, ш Сапсег Уассшек 2000, Сапсег Кекеагск 1пкк!и!е, Νον Уогк, ΝΥ) и/или антигены рака поджелудочной железы (например, 8ЕО ГО NΟ: 1288 патента США № 7473531). Иммуногены могут также происходить от других ОЦА или направлять иммунный ответ против других ОЦА, не указанных здесь, но доступных для специалистов в области онкологии.
- 17 023888
В дополнение к последовательностям специфичных иммуногенов, указанным выше, настоящее изобретение также включает применение аналогов этих последовательностей. К таким аналогам относятся последовательности, которые, например, на 80, 90, 95 или 99% совпадают с основными последовательностями или их фрагментами. К аналогам также относятся фрагменты основных последовательностей, которые включают, например, один или несколько иммуногенных эпитопов последовательностей. Кроме того, к аналогам относятся усечённые или расширенные последовательности (например, инсерции дополнительных/повторных иммунодоминантных эпитопов/эпитопов вспомогательных клеток), отличающиеся от основных последовательностей на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11-20 и т.д. аминокислот с одного конца или обоих концов. Усечение может приводить к удалению иммунологически незначимых или значимых последовательностей, например, в пределах известных структурных/иммунологических доменов или между доменами; также может происходить полное удаление нежелательных доменов; такие модификации могут затрагивать 21-30, 31-50, 51-100, 101-400 и т.д. аминокислот. Модификации также могут затрагивать, например, 20-400, 30-100 и 50-100 аминокислот.
Коктейли.
В изобретении также представлены составы из двух и большего числа ПИВ и/или векторов на основе ПИВ, как это описано в настоящем изобретении. Как указывалось выше, использование таких комбинаций, или коктейлей, может предоставлять преимущества для индукции иммунитета против более чем одного иммуногена и/или патогена. Это может оказаться полезным, например, при вакцинации против различных флавивирусов, эндемичных для определённого географического региона, в котором проживают вакцинируемые лица. Это также может оказаться полезным в плане введения сразу нескольких иммуногенов против одной и той же мишени.
К примерам коктейлей ПИВ, представленных в настоящем изобретении, относятся ПИВ-ЯЭ + ПИВ-ДЕН и ПИВ-ЖЛ + ПИВ-ДЕН, а также другие коктейли. В обоих этих примерах один из компонентов или оба ПИВ могут быть как одно-, так и двухкомпонентными ПИВ, как это указывалось ранее. В дополнение, в случае ПИВ-ДЕН ПИВ может включать последовательности только одного серотипа вируса лихорадки денге из группы серотипов вируса лихорадки денге 1-4. Кроме того, коктейль может включать ПИВ, экспрессирующие последовательности двух, трёх или всех четырёх серотипов. Кроме того, описанные в настоящем изобретении вакцины против вируса КЭ/Воггейа ЬигдбогГеп/белка слюны клещей (например, 64ТКР, Пас, 8а1р20) могут быть основаны на включении различных иммуногенов в один ПИВ или живой аттенуированный вирус, а также могут быть основаны на комбинации ПИВ (или ЖАВ), каждый из которых включает один или несколько иммуногенов. Коктейли, представленные в настоящем изобретении, могут применяться в виде готовых форм или смешиваться непосредственно перед введением.
Использование, лекарственные формы и введение вакцины.
В настоящем изобретении представлены векторы на основе ПИВ, ПИВ, векторы на основе ЖАВ и ЖАВ, а также соответствующие им молекулы нуклеиновых кислот, фармацевтические или вакцинные композиции и методы их использования и получения. Векторы на основе ПИВ, ПИВ, векторы на основе ЖАВ и ЖАВ, представленные в настоящем изобретении, могут использоваться, например, в целях вакцинации для индукции иммунного ответа против вируса КЭ, других флавивирусов и/или других экспрессирующихся иммуногенов, как это описано в настоящем изобретении. Эти методы могут являться профилактическими; в этом случае эти средства применяются у субъектов (например, у человека или других млекопитающих), у которых в настоящее время нет инфекции, вызываемой вирусом КЭ или другими флавивирусами и/или патогенами, из которых был получен экспрессируемый иммуноген, но риск развития такой инфекции повышен. Методы также могут носить лечебный характер; в этом случае они применяются у субъектов, страдающих от инфекции, вызываемой одним или несколькими соответствующими патогенами. Кроме того, вирусы и векторы могут использоваться по отдельности или в сочетании друг с другом или с другими вакцинами. Субъекты, которые получают лечение в соответствии с методами настоящего изобретения, - это человек, а также другие представители млекопитающих (например, скот (крупный рогатый скот, свиньи, лошади, овцы, козы) и домашние животные, в том числе коты и собаки).
Приготовление лекарственной формы векторов на основе ПИВ, ПИВ, векторов на основе ЖАВ и ЖАВ, представленных в настоящем изобретении, может осуществляться по стандартным методикам, принятым в фармакологии. Для приготовления вакцин возможно использование большого числа фармакологически приемлемых растворов; эти растворы при профессиональном подходе легко могут адаптироваться к настоящему изобретению (см., например, Кетшдкои'к Рйагтасеийса1 8с1еисе5 (18* ебйюи), ей. А. Оеииаго, 1990, Маск РиЬйкЫид Со., Еаккои, РА). В двух отдельных примерах реализации настоящего изобретения препараты векторов на основе ПИВ, ПИВ, векторов на основе ЖАВ и ЖАВ приготавливаются на минимально-эссенциальной среде Эрля (МЭСЭ), содержащей 7,5% лактозы и 2,5% альбумина человеческой сыворотки, или на МЭСЭ, содержащей 10% сорбитола. В любом случае векторы ПИВ, ПИВ, векторы на основе ЖАВ и ЖАВ могут просто разводиться в физиологически приемлемом растворе, таком как стерильный солевой раствор или стерильный буферный солевой раствор.
Векторы на основе ПИВ, ПИВ, векторы на основе ЖАВ и ЖАВ, представленные в настоящем изобретении, могут применяться по методикам, принятым в медицине, а необходимое количество вирусов и
- 18 023888 векторов легко определяется при профессиональном подходе. Необходимое количество вируса, которое следует ввести пациенту, может определяться на основании таких факторов, как, например, размер и общее состояние здоровья субъекта, которому предполагается введение вируса. Например, в случае живых аттенуированных вирусов, представленных в настоящем изобретении, вирусы могут приготавливаться в виде стерильного водного раствора, содержащего 102-108, например 103-107, инфекционных единиц (например, бляшкообразующих единиц или тканевых культуральных инфекционных доз) в определённом объеме препарата (0,1-1,0 мл). ПИВ могут вводиться в таких же дозах и в таком же объёме. Титры ПИВ, тем не менее, обычно измеряются, например, в фокусообразующих единицах, что определяется иммунологическим окрашиванием фокусов, поскольку эти дефектные конструкции, как правило, не образуют вирусоподобные частицы. Дозы могут варьировать от 102 до 108 БОЕ, а объём введения может составлять от 0,1 до 1,0 мл.
Все вирусы и векторы, представленные в настоящем изобретении, могут вводиться, например, внутрикожно, подкожно, внутримышечно, внутрибрюшинно или перорально. В отдельных примерах реализации этого изобретения дендритные клетки активизируются при внутрикожном или чрескожном введении препарата с помощью, например, микроигл или микроабразивных устройств. Кроме того, вакцины, представленные в настоящем изобретении, могут вводиться в виде одиночной дозы или, как вариант, их введение может предполагать назначение нагрузочной дозы с последующей ревакцинацией, которая проводится, например, через 2-6 месяцев, что определяется медицинскими показаниями. Кроме того, вакцины на основе ПИВ могут назначаться путём иммунизации ДНК или РНК с использованием методов, известных в медицине (Сйапд с1 а1., ΝηΙ. Вю1ес1то1. 26:571-577, 2008; Койет с1 а1., Ргос. Νηΐΐ. Асаб. 8с1. И.8.Л. 101:1951-1956, 2004).
Кроме того, при введении вирусов и вакцин, представленных в изобретении, возможно применение адъювантов, известных в медицине. Адъюванты могут использоваться для усиления иммуногенности вирусов. К таким адъювантам относятся, например, липосомальные лекарственные формы, синтетические адъюванты, такие как Ц821, мурамилдипептид, монофосфориллипид А, полифосфазин, олигонуклеотиды СрО или другие молекулы, которые активизируют колоколоподобные рецепторы (КПР) на поверхности клеток или на ядерной мембране внутри клетки. Несмотря на то что эти адъюванты обычно используются для усиления иммунного ответа на инактивированные вакцины, они также могут использоваться с живыми или репликационно-дефектными вакцинами. В случае живых и репликационнодефектных вакцинам полезными могут оказаться как агонисты, так и антагонисты КПР. Кандидаты на звание вакцины могут создаваться так, чтобы экспрессировать агонисты КПР. В случае вирусов, которые поступают в организм через слизистые, например, перорально, возможно применение слизистых адъювантов, таких как термолабильный токсин Е.сой (ЬТ) или мутантные производные ЬТ. В дополнение к этому, гены, кодирующие цитокины, также обладают адъювантной активностью и могут вводиться в геном кандидатов на звание вакцины. Таким образом, гены, кодирующие определённые цитокины, такие как ГМ-КСФ, ИЛ-2 (интерлейкин-2), ИЛ-12, ИЛ-13, ИЛ-5 и т.д., могут вводиться в геном вместе с чужеродными иммуногенами. Полученная в результате вакцина будет характеризоваться усиленным иммунным ответом или будет модулировать иммунитет в сторону преимущественного развития клеточного, гуморального ответа или ответа со стороны слизистой оболочки (например, см. обзор: 1ттипороЮпПаЮгк ίη Мойегп Уассшек, Зсйупк апб О'Надап Ейк., 2006, Е1кеу1ег Асабепйс Ргекк: АтПегбат. Войоп, и др.). Кроме того, в месте введения вакцины, как вариант, возможно применение пластыря, содержащего соответствующий адъювант в виде токсина. Токсин вызывает местное воспаление, вызывая миграцию лейкоцитов, что приводит к более выраженному иммунному ответу.
Примеры
Дополнительная информация об изобретении приведена в разделе Примеры. В разделе Примеры приводится описание экспериментов, в которых исследовались ПИВ, основанные на вирусах ЛЗН, ЯЭ и ЖЛ (см., например, \7О 2007/098267 и \7О 2008/137163). Сначала было показано, что полученные конструкции значительно менее патогенны (по данным теста нейровирулентности у чувствительных грудных мышат; отсутствие смертельных случаев для всех исследованных доз), чем доступные ЖАВ, использовавшиеся в качестве контроля (ЖЛ17И, ЖАВ ЖЛ/ЯЭ, ЖАВ ЖЛ/ЛЗН). Авторы показали, что конструкции д-ПИВ в данной модели авирулентны, следовательно, двухкомпонентные ПИВ не вызывают неконтролируемого (неограниченного) распространения вирусов ίη У1уо и не могут приводить к развитию клинических симптомов. Во-вторых, авторы сравнили иммуногенность и эффективность ПИВ и ЖАВ и показали, что вакцины на основе ПИВ могут вызывать развитие иммунного ответа, сравнимого с таковым для ЖАВ; таким образом, эти вакцины равноэффективны (например, это наблюдалось для пары вакцин ПИВ-ЛЗН и ЖАВ ЖЛ/ЛЗН). Для одной из исследованных пар оказалось, что ЖАВ ЖЛ17Э значимо более иммуногенен, чем ПИВ-ЖЛ. Следовательно, образование ВПЧ может различаться для разных конструкций ПИВ аналогичной структуры. Было предположено, что ПИВ-ЖЛ не приводит к образованию большого количества ВПЧ ЖЛ, в отличие от ПИВ-ЛЗН (ВПЧ ЛЗН), и что увеличенное образование ВПЧ может быть достигнуто путём генетических модификаций в соединении СргМ субоптимальных конструкций ПИВ. Соединение СргМ - это важная позиция в полипротеине флавивируса, которая участвует в образовании оболочки вируса и в синтезе вирусных белков (УаткйсЫкоу апй Сотрапк,
- 19 023888
У1го1о§у, 192:38-51, 1993; АтЪегд апй Юсе, 1. У1го1. 73:8083-8094, 1999; 8!оскк апй ЬоЫдк, 1. νίτοί. 72:2141-2149, 1998). Авторы изобретения предположили, что выделение ВПЧ в клетках, инфицированных ПИВ, в отличие от образования вирусных частиц при инфицировании цельным вирусом, может усиливаться путём разъединения вирусной протеазы и сайтов расщепления сигналазой в месте соединения, а также путём применения сильного гетерологичного сигнального пептида (ТАП (тканевый активатор плазминогена) и т.д.) вместо сигнала для ргМ, а также путём мутагенеза сигнала для ргМ. Эффективность расщепления сигналазой в соединении СргМ у флавивирусов низкая (8!оскк апй ЬоЫдк, 1. νίΐΌ1. 72:2141-2149, 1998), например, по прогнозам он-лайн-программы 81диа1 Р 3.0. Ожидается, что более эффективное расщепление может быть достигнуто путём анализа замещений специфичных аминокислот в области сайта расщепления с помощью 81диа1 Р 3.0 (например, как описано в заявке \УО 2008/100464) с последующим включением избранных мутаций в геномы ПИВ, восстановлением потомства ПИВ и измерением выделения ВПЧ. Сигналы нефлавивирусного происхождения вставляются в геном флавивирусов по стандартным методикам. Разъединение сайтов расщепления вирусной протеазой и сигналазой может достигаться путём абляции вирусного сайта расщепления любой неконсервативной мутацией (например, КК8 в С вируса ЖЛ17Э до ККА, или СК8, или К88 и т.д.) или делецией всего сайта или нескольких из его 3 остатков. При необходимости, образование свободного ^концевого участка чужеродного белка может достигаться с помощью таких элементов, как аутопротеаза или терминирующий кодон, следующий за СВВР. Кроме того, нативный инициирующий кодон АИС гена белка С также может подвергаться абляции (в конструкциях, где последовательность белка С не является необходимой, например, ДС ПИВ), и АИС может размещаться перед чужеродным антигеном. Оптимизация сигналов вектора может проводиться путём случайного мутагенеза, например путём инсерции синтетической рандомизированной последовательности с последующей идентификацией жизнеспособных вариантов ПИВ с повышенной секрецией ВПЧ.
Авторы также установили, что конструкции ПИВ были гораздо более иммуногенными у хомяков при внутрибрюшинном введении, чем при подкожном. По-видимому, это связано с более направленным воздействием на антигенпрезентирующие клетки в лимфоидной ткани, которых много в брюшной полости и гораздо меньше в подкожной клетчатке. На основании этих наблюдений пришли к выводу, что эффективное воздействие ПИВ на дендритные клетки, которых много в коже, возможно при чрескожном введении вакцины, например при микроабразии кожи или внутрикожном введении с помощью микроигл (Эеаи е! а1., Нит νηαίη. 1:106-111, 2005).
Кроме того, были проведены эксперименты, подтверждающие осуществимость введения смесей, или коктейлей, различных ПИВ, как это описано в настоящем изобретении (например, ЯЭ + ДЕН и ЖЛ + ДЕН). При введении коктейлей очень важно подтвердить, что взаимодействие между одновременно назначаемыми компонентами отсутствует и что индуцируется развитие сбалансированного иммунного ответа. Для иммунизации грызунов использовались различные смеси ПИВ. Развивающийся иммунный ответ сравнивался с иммунным ответом на введение конструкций ПИВ по отдельности. Взаимодействия компонентов смеси не наблюдалось. Таким образом, применение коктейлей ПИВ вполне осуществимо. Такие составы могут иметь особое значение в географических регионах, в которых одновременно циркулируют несколько различных флавивирусов. Этот подход также может быть использован для одновременного введения нескольких вакцин на основе ПИВ против патогенов нефлавивирусного происхождения.
Более того, было показано, что после введения по меньшей мере двух доз ПИВ ответа со стороны нейтрализующих антител против пакующей оболочки вируса не развивалось (выявлялись антитела против ВПЧ, выделяющихся из инфицированной клетки). Это было показано с помощью вспомогательного компонента д-ПИВ (см. фиг. 2) (ДргМЕ), упакованного отдельно, а также путём определения нейтрализующих антител к гетерологичным пакующим оболочкам (например, к оболочке вируса ЛЗН, которая использовалась для упаковки ПИВ-ЯЭ во вспомогательных клетках, в которых транскрибируются ЛЗНспецифичные белки СргМЕ). Последнее наблюдение подтверждает целесообразность последовательного применения различных вакцин на основе ПИВ, произведенных на универсальной пакующей клеточной линии, и последовательного применения различных рекомбинантных вакцин на основе ПИВ-векторов у одного пациента, как указывалось выше. В дополнение, авторы подтвердили прежние наблюдения, что конструкции ПИВ могут стабильно распространяться с высоким выходом ίη νίΐΐΌ и что рекомбинантного восстановления полноценных вирусных частиц после длительного и многократного пассажа в субстратных клетках не происходит (Макои е! а1., ^го1о§у 351:432-443, 2006; 81шЧо\' е! а1., ί. νίΐΌ1. 21:1173711748, 2007).
Эти и другие аспекты изобретения обсуждаются далее в разделе Примеры.
- 20 023888
Пример 1. Исследования создания платформы на основе псевдоинфекционных вирусов.
Аттенюирование в модели нейровирулентности (НВ) на грудных мышатах.
Материалы, использованные в исследованиях, описание которых дано ниже, характеризуются в табл. 1 и цитированных в ней литературных источниках. К таким материалам относятся о-ПИВ-ЛЗН (основанный на последовательностях вируса ЛЗН дикого типа штамма ΝΥ99), о-ПИВ-ЯЭ, о-ПИВ-ЛЗН/ЯЭ (основанный на остове вируса ЛЗН дикого типа и генах ргМЕ вируса ЯЭ дикого типа штамма Накаяма |№-1кауата|). о-ПИВ-ЖЛ/ЛЗН (остов вируса ЖЛ 17Ό и гены ргМЕ вируса ЛЗН) и о-ПИВ-ЖЛ (основанный на последовательностях вируса ЖЛ17Э). К дополнительным материалам относятся д-ПИВ-ЖЛ (д-ПИВ ЖЛ, выращенный на обычных клетках ПДХ (почек детёнышей хомяков); 81ш51оу е! а1., 1. Уио1. 21:11737-11748, 2007) и двухкомпонентный д-ПИВ-ЛЗН (выращенный на обычных клетках среды Уего; 8и/ик1 е! а1., 1. Уток 82:6942-6951, 2008).
Результат аттенуирования (ослабления) этих прототипов ПИВ сравнивался с ЖАВ ЖЛ 17Ό, химерическим вирусом ЖЛ/ЯЭ и химерическим вирусом ЖЛ/ЛЗН в тесте НВ на грудных мышатах (внутрикожное введение вируса). Для этого использовались высокочувствительные 5-дневные мыши линии 1СК. Химерические вирусы включали нуклеокапсид и неструктурные последовательности вируса желтой лихорадки и последовательности ргМЕ вируса ЯЭ или ЛЗН). Ни у одного из животных, которым вводилась конструкция ПИВ, не было выявлено клинических признаков заболевания; смертельных случаев также не было. Смертельные случаи наблюдались у животных, инфицированных ЖАВ (табл. 2). Вирус ЖЛ17Э нейровирулентен для мышей всех возрастов, тогда как химерические вакцины не являются нейровирулентными для взрослых мышей, но могут приводить к дозозависимой смертности у более чувствительных грудных мышат (Ошгакйоо е! а1., У1го1оду, 257:363-372, 1999; Аггоуо е! а1., 1. У1го1. 78:12497-12507, 2004). В соответствии с этим 90-100% грудных мышат, которым была введена как минимум 1 БОЕ вируса ЖЛ17О, погибли. ЖАВ ЖЛЯЕ и ЖЛ/ЛЗН вызывали частичную смертность при введении в значительно более высоких дозах ((>2 1о§10 БОЕ и 3 1о§10 БОЕ соответственно), а средняя продолжительность жизни (СПЖ) у умерших животных, как и ожидалась, была выше. Таким образом, эта чувствительная модель показала, что конструкции ПИВ совершенно авирулентны (по меньшей мере в 20000-200000 раз менее нейровирулентны, чем лицензированная вакцина ЖЛ17Э).
д-ПИВ ЖЛ и ЖЛ ЛЗН не приводили к появлению клинических симптомов заболевания, а смертельных случаев зарегистрировано не было. Следовательно, двухкомпонентные варианты ПИВ, которые теоретически могут распространяться в ткани мозга, вследствие коинфицирования клеток обоими компонентами, не приводили к развитию заболевания. Более того, авторы попытались определить д-ПИВ в ткани головного мозга дополнительных животных в условиях этого эксперимента. Мыши забивались на 6-й день после введения ПИВ. Титрование не выявило д-ПИВ в ткани головного мозга (головной мозг 10 и 11 мышей, которым было введено 4 1од10 БОЕ д-ПИВ ЖЛ и д-ПИВ ЛЗН соответственно, гомогенизировался и титровался). Таким образом, д-ПИВ не приводят к распространению инфекции, что было бы характерно для полноценного вируса. ЖАВ ЖЛ/ЯЭ, как было показано, реплицируется в головном мозге взрослых мышей линии 1СК, заражённых внутрикожно, с пиковым титром на 6-й день, составляющим вирусом ~6 1од10 БОЕ/г, что протекает, однако, бессимптомно (Ошгакйоо е! а1., Уио1оду, 257:363-372, 1999). Коинфицирование клеток компонентами д-ПИВ, очевидно, менее эффективный процесс в плане распространения инфекции, чем инфицирование полноценным вирусом. Данные указывают на то, что репликация д-ПИВ ίη νί\Ό быстро попадает под контроль врождённого иммунитета (а также приобретённого иммунитета у взрослых животных).
Иммуногенностъ/эффективностъ у мышей и хомяков.
Иммуногенность/эффективность прототипов ПИВ, описанных выше, сравнивалась с соответствующими характеристиками химерических ЖАВ и вируса ЖЛ 17Ό на мышах и сирийских хомяках. Общий принцип эксперимента показан на фиг. 3 (мыши, внутрибрюшинная иммунизация). Эксперименты на хомяках проводились аналогично (плюс-минус несколько дней, подкожное или внутрибрюшинное введение вирусов, дозы указаны ниже). Мыши линии 1СК в возрасте 3,5 недели (группы о-ПИВ-ЛЗН и о-ПИВ-ЖЛ, ЖАВ ЖЛ/ЛЗН и ЖЛ 17Ό) и мыши линии С57/ВБ6 (группы о-ПИВ-ЯЭ и ЖАВ ЖЛ/ЯЭ) иммунизировались внутрибрюшинно различными дозами конструкций ПИВ (4-6 1о§10 ФОН на дозу) или химерических ЖАВ и ЖАВ ЖЛ17Э (4 1од10 БОЕ). Группы ПИВ-ЛЗН, ПИВ-ЯЭ и ПИВ-ЖЛ ревакцинировались на 21-й день соответствующими конструкциями в дозе 5 1од10 БОЕ (табл. 3). С помощью стандартного метода ΡΚΝΤ50 (реакции нейтрализации редукции бляшек) в сыворотке определялся уровень нейтрализующих антител против ЖАВ ЖЛ/ЛЗН или /ЯЭ, а также против вируса ЖЛ17Э. ПИВ-ЛЗН индуцировал сильно выраженный ответ со стороны нейтрализующих ЛЗН-специфических антител во всех группах животных как с ревакцинацией, так и без неё, на что указывали титры ΡΚΝΤ50, определяемые в пулах плазмы иммунизированных животных на 20- и 34-й дни; эти титры были сравнимы с титрами в контрольной группе ЖАВ ЖЛ/ЛЗН. В соответствии с этим животные, иммунизированные ПИВ-ЛЗН и ЖАВ ЖЛ/ЛЗН, были защищены от потенциально летального заражения вирусом ЛЗН дикого типа, которое проводилось на 35-й день (внутрибрюшинно, 270 ЛД,50), чего не происходило с животными, иммунизированными имитацией вакцины (табл. 3). При определении уровня ЛЗН-нейтрализующих антител в сыворотке отдельных мышей отмечалась высокая степень однородности иммунного ответа у различных
- 21 023888 животных (фиг. 4). Таким образом, вакцины на основе ПИВ с одним циклом репликации могут быть равны по иммуногенности и эффективности соответствующим ЖАВ. ПИВ-ЯЭ также оказались высокоиммуногенными (у чёрных мышей), тогда как иммуногенность ПИВОЖЛ была значительно ниже, чем у контрольного вируса ЖЛ17Э (мыши 1СК). Тем не менее, отмечалась дозозависимая защита животных, иммунизированных ПИВ-ЖЛ (но не животных, которым вводилась имитация вакцины), после тяжёлого, потенциально летального внутрикожного заражения вирусом ЖЛ дикого типа (штамм Асиби [Αδ&ί]) (500 ЛД50) (табл. 3). Эти данные согласуются с тем, что защитным по отношению к флавивирусной инфекции считается титр нейтрализующих антител, равный 1:10.
Контрольный вирус ЖЛ17Э был высокоиммуногенным (например, на 34-й день титр РККТ50 составлял 1:1280); этот вирус мог инфицировать клетки и эффективно реплицироваться ш У1уо, а его оболочка является сильным иммуногеном. Следовательно, маловероятно, что низкая иммуногенность ПИВЖЛ была связана с его неспособностью инфицировать клетки или реплицироваться в инфицированных клетках ш У1уо. Авторы изобретения считают, что низкая иммуногенность ПИВ-ЖЛ (например, по сравнению с ПИВ-ЛЗН), вероятнее всего, связана с низким уровнем образования ЖЛ-специфичных ВПЧ в клетках, инфицированных ПИВ-ЖЛ (тогда как в клетках, инфицированных ПИВ-ЛЗН, секреция ВПЧ высока). Как указывалось выше, мы предполагаем, что иммуногенность ПИВ-ЖЛ может быть значительно повышена, например, путём соответствующих модификаций соединения СргМ, например путём разъединения сайтов расщепления двумя протеазами, которое происходит в этом соединении (т.е. сайтов расщепления вирусной протеазой и сигналазой), и/или применением сильного гетерологичного сигнала [например, сигнала белка О вируса бешенства или сигнала эукариотического тканевого активатора плазминогена (ТАП) (Майи е! а1., МюгоЬек аиб 1иТесбои, 2:1677-1685, 2000) и др.] вместо сигнала ЖЛ для ргМ.
Аналогичный эксперимент был проведен на сирийских хомяках в возрасте 4,5 недели; сравнивалась иммуногенность конструкций ПИВ и контрольных ЖАВ. Животные иммунизировались подкожно исследуемыми вирусами в различных дозах (табл. 4). ПИВ-ЛЗН характеризовался высокой иммуногенностью, например, титр ЛЗН-специфичных антител (РККТ50) на 38-й день составлял 1:320, 1:640 и 1:1280 в группах животных, которым было введено 5, 6 и 6 (нагрузочная доза) + 5 (ревакцинация) 1од10 БОЕ, соответственно. Такой результат был несколько ниже, чем для контрольного ЖАВ ЖЛ/ЛЗН (доза 4 1о§10 БОЕ, титр >1:2560). ПИВ-ЯЭ и ПИВ-ЖЛ индуцировали образование специфических нейтрализующих антител, титр которых был всё же ниже, чем для контрольных вирусов ЖАВ Л/ЯЭ и ЖЛ17Э. Все животные, иммунизированные ПИВ-ЛЗН и ЖЛ/ЛЗН, были надёжно защищены от потенциально летального заражения ЛЗН дикого типа, на что указывало отсутствие смертельных случаев и заболеваемости (например, потери массы тела после заражения), а также отсутствие или значительное снижение уровня виремии вируса ЛЗН после заражения. Животные, которым вводилась имитация вакцины, были не защищены от заражения (табл. 4). ПИВ-ЯЭ и ПИВ-ЛЗН защищали животных от последующего заражения дозозависимым образом. Эффективность защиты в этом эксперименте показана на фиг. 5. Например, у животных, которым вводилась имитация вакцины, отмечалась высокая виремия вируса ЖЛ после заражения (штамм АбЫ адаптированный к хомякам). Пик виремии отмечался на 3-ий день, титр вирусов составлял >8 1од10 БОЕ/мл (верхняя левая часть фигуры); у всех этих животных определялась потеря массы тела, одно из 4-х животных погибло (верхняя правая часть фигуры). В отличие от этого виремия была значительно более низкой или отсутствовала вообще у хомяков, иммунизированных ПИВ-ЖЛ (две дозы), несмотря на относительно низкий титр нейтрализующих антител, или вирусом ЖЛ17Э; ни у одного из этих животных снижения массы тела не было. Аналогично, животные, иммунизированные ПИВ-ЛЗН или ЖАВ ЖЛ/ЛЗН, были полностью или в значительной степени защищены от виремии вируса ЛЗН после заражения, от снижения массы тела и смерти, чего не отмечалось в случае животных, которым была введена имитация вакцины. Следовательно, на второй животной модели была показана высокая иммуногенность и эффективность ПИВ.
В другом эксперименте на хомяках животные иммунизировались конструкциями ПИВ внутрибрюшинно; всего вводилось две дозы вакцины. В табл. 5 приведены результаты сравнения иммунного ответа со стороны нейтрализующих антител (специфичных для каждой вакцины), содержание которых определялось в пулах плазмы хомяков в предыдущем эксперименте (подкожное введение вакцины), и после внутрибрюшинной иммунизации. Сравнение проводилось для ПИВ-ЛЗН, ПИВ-ЖЛ/ЛЗН, ПИВ-ЛЗН/ЯЭ и ПИВ-ЖЛ после введения первой дозы (20-21-й день) и после введения второй дозы (34-38-й день). Было выявлено чёткое влияние пути иммунизации после введения первой и второй доз вакцины. Например, после введения первой дозы ПИВ-ЛЗН при подкожной иммунизации уровень ЛЗН-специфичных антител составлял 1:40 (по данным РК№Т50), тогда как при внутрибрюшинной иммунизации титр антител был значительно выше (1:320). Та же картина наблюдалась и после введения второй дозы вакцины (титры были такими же). Для других конструкций было выявлено более выраженное влияние пути иммунизации после введения первой и второй доз вакцины. Интересно, что ПИВ-ЖЛ/ЛЗН оказался высоко иммуногенным при внутрибрюшинном введении (титр 1:320 после внутрибрюшинного введения первой дозы и 1:20 после подкожного введения первой дозы вакцины; титр 1:1280 после внутрибрюшинного введения первой дозы и 1:160 после подкожного введения второй дозы). Аналогично, было отмечено значительное
- 22 023888 увеличение иммуногенности ПИВ-ЯЭ (например, титр ЯЭ-специфичных антител после внутрибрюшинного введения двух дох составлял 1:640). Таким образом, более прицельное воздействие на клетки лимфоидной ткани, в частности, на антиген-презентирующие клетки, число которых в брюшной полости гораздо выше, чем в тканях под кожей, является важным фактором успешного применения вакцин на основе ПИВ. У человека эффективное воздействие на дендритные клетки кожи, что увеличивает амплитуду иммунного ответа, возможно при внутрикожном введении вакцины. Это предлагаемый авторами способ иммунизации ПИВ человека.
В описанных выше экспериментах также проводили определение индукции образования нейтрализующих антител против пакующих оболочек (отдельно от ответа на ВПЧ, которые закодированы в конструкциях ПИВ и выделяются инфицированными клетками). Метод ΡΚΝΤ50 не выявил ЛЗНспецифичных нейтрализующих антител у животных, иммунизированных 5 1од10 БОЕ второго компонента д-ПИВ ЛЗН, содержащим делецию ДСргМЕ и, таким образом, не кодирующим ВПЧ, по пакующим оболочки ЛЗН во вспомогательных клетках линии ПДХ - СргМЕ (ЛЗН). В сыворотке животных, иммунизированных 4 1о§10 БОЕ второго компонента д-ПИВ ЖЛ, упакованного в оболочки ЖЛ, ЖЛ-специфичных нейтрализующих антител обнаружено не было. Две дозы ПИВ-ЖЛ/ЛЗН, упакованного в оболочку ЖЛ, не индуцировали образование ЖЛ-специфичных нейтрализующих антител. Аналогично, две дозы ПИВЯЭ, упакованного в оболочку ЛЗН не индуцировали образования ЛЗН-специфичных антител. Отсутствие нейтрализующих антител против пакующих оболочек позволяет наладить производство различных вакцин ПИВ на одной (универсальной) вспомогательной клеточной линии, а также проводить иммунизацию пациента различными рекомбинантными вакцинами, основанными на одно и том же векторе, в соответствии с настоящим изобретением.
Коктейли ПИВ.
ПИВ осуществляют один цикл репликации ίη νί\Ό (как вариант, возможно осуществление нескольких циклов, число которых ограниченно). Поэтому считаем, что смеси различных ПИВ могут назначаться одновременно без взаимодействия между отдельными конструкциями полученной смеси, или коктейля. Для подтверждения возможности использования вакцин на основе ПИВ в виде коктейлей иммунные ответы у мышей и хомяков против некоторых конструкций ПИВ, назначаемых в виде смесей, сравнивались с иммунными ответами против этих же конструкций, вводимых по отдельности. В обеих животных моделях были получены одинаковые результаты. Результаты эксперимента на мышах приведены в табл. 6. В пулах сыворотки от животных, которым вводилась одна или две дозы смеси ПИВ-ЯЭ + ПИВЛЗН или только ПИВ-ЯЭ, определялись схожие титры ЯЭ-специфичных нейтрализующих антител (1:20 и 1:80; 1:640 и 1:160 для одной и двух доз соответственно). Аналогично, титры ЛЗН-специфичных антител при введении смеси ПИВ-ЯЭ + ПИВ-ЛЗН и только одного ПИВ-ЛЗН были похожими (1:320 и 1:640; 1:5120 и 1:5120 для одной и двух доз соответственно). Перекрёстно-специфичный ответ при введении ПИВ-ЯЭ или ПИВ-ЛЗН практически не развивался или был слабо выражен. Эти результаты также подтверждают титры антител в сыворотке отдельных животных, измеренные с помощью ΡΚΝΤ50. Таким образом, понятно, что вакцины на основе ПИВ могут эффективно назначаться в виде коктейлей, индуцируя развитие иммунитета против двух или большего числа патогенов флавивирусного происхождения. В дополнение следует сказать, что, как указывалось выше, различные коктейли могут включать вакцины, основанные на ПИВ нефлавивирусного происхождения, а также вакцины, основанные на ПИВфлавивирусах и ПИВ нефлавивирусного происхождения.
Исследования ίη νίΙΐΌ.
Различные прототипы ПИВ серийно пассажировались до 10 раз во вспомогательных клетках среды ПДХ или в обычных клетках среды Уего (для д-ПИВ). Образцы, забираемые после каждого пассажа, титровались в клетках среды Уего путём иммунологического окрашивания. Конструкции размножались до высоких титров, однако рекомбинантного восстановления полноценного вируса не наблюдалось. Например, число ПИВ-ЛЗН постепенно выросло до титра 7-8 1о§10 БОЕ/мл во вспомогательных клетках среды ПДХ - С-ргМ-Е (ЛЗН), содержащих репликон вируса венесуэльского лошадиного энцефалита (ВЛЭ), экспрессирующий белки С-ргМ-Е вируса ЛЗН, а число д-ПИВ ЛЗН возрастало до 8 1од10 БОЕ/мл в клетках культуры Уего, причём рекомбинации не отмечалось.
Пример 2. ПИВ-КЭ.
Последовательности кандидатов на звание вакцины на основе ПИВ-КЭ могут основываться на последовательностях вируса КЭ дикого типа или серологически сходного с ним вируса Лангат (ЛГТ) (естественно аттенуированный вирус, например штамм дикого типа ТР-21 или его эмпирически аттенуированный вариант, штамм Е5) или основываться на химерических последовательностях, содержащих остов (нуклеокапсидная и неструктурные последовательности) вируса ЖЛ17О или других флавивирусов, например вируса ЛЗН, и гены белков ргМЕ вирусов КЭ, ЛГТ или других серологически близких флавивирусов из серокомплекса вируса КЭ. Кандидаты на звание ЖАВ ДЛ/КЭ сконструированы на основе остова вируса ЖЛ17О и генов ргМЕ вируса КЭ или связанных с ним вирусов (например, вируса ЛГТ, штамм Е5), т.е. по тому же принципу, что и другие химерические вакцины на основе ЖАВ.
Конструирование прототипов вакцины ПИВ-КЭ и ЖАВ ЖЛ/КЭ проводилось путём клонирования соответствующих генетических элементов в плазмиды для получения ПИВ-ЛЗН (Макоп е! а1., У1то1о§у,
- 23 023888
351:432-443, 2006; 8н/нк| е! а1., 1. У1го1. 82:6942-6951, 2008) или в плазмиды для получения химерических ЖАВ (например, рВ8А-АР1 - одноплазмидная версия инфекционного клона ЖАФ ЖЛ/ЯЭ; АО 2008/036146) в соответствии со стандартными методиками, принятыми в генетике. Сначала проводили компьютерную оптимизацию кодона последовательностей ргМ штамма Нург вируса КЭ (номер доступа в СепВапк И39292) и штамма Е5 вируса ЛГТ (номер доступа в СепВапк АЕ253420). чтобы соответствовать предпочтительному использованию кодона в геноме человека, а также для выявления повторяющихся последовательностей, превышающих в размерах 8 нуклеотидов, для обеспечения высокой генетической стабильности вставок (при необходимости может быть выполнено дальнейшее сокращение величины повторяющихся последовательностей нуклеотидов). Гены синтезировались химически и клонировались в плазмиды для получения ПИВ-ЛЗН и ЖАВ ЖЛ/ЯЭ. Получившиеся в результате плазмиды транскрибировались ίπ νίίτο. Затем транскрипты РНК трансфицировались в соответствующие клетки (клетки культуры Уего для химерических вирусов или вспомогательные клетки ПДХ для ПИВ). Так получались образцы вируса и ПИВ.
Конструкции ЖАВ ЖЛ/КЭ.
В конструкциях ЖЛ/КЭ, содержащих гены ргМЕ штамма Нург вируса КЭ (плазмиды р42, р45 и р59) или штамма Е5 вируса ЛГТ (плазмида Р43), сначала изучались два различных вида соединения СргМ (см. фиг. 6; соединения С-ргМ приведены в приложении 1, и полная последовательность 5'-концевого участка, покрывающая 5'-концевую нетранслируемую область-С-ргМ-Е-начало области N81, приведена в приложении 2). Химера ЖЛ17И/Нург из плазмиды р42 содержала сигнальный пептид гибрида ЖЛ17И/Нург для белка ргМ, тогда как химера ЖЛ17И/Нург из плазмиды р45 содержала сигнальный пептид гибрида ЖЛ17И/ЛЗН для белка ргМ (приложение 1). Первый химерический вирус создавал очень высокие титры в Р0 (сразу же после трансфекции) и Р1 (следующий пассаж в клетках культуры Уего) - до 7,9 1о§10 БОЕ/мл, что было в 0,5 1о§10 раз выше, чем титры последнего вируса; в дополнение к этому, первый вирус образовывал в клетках культуры Уего значительно большие бляшки (фиг. 6). Следовательно, использование КЭ-специфичных остатков в сигнальном пептиде для ргМ предоставляло значительные преимущества в росте вирусов, по сравнению с сигналом, содержащим ЛЗН-специфичные остатки. Химеры ЖЛ17И/ЛГТ из плазмид включали такой же сигнал для ргМ, что и вирус из плазмид р42. Эти химеры также характеризовались очень высоким титром в пассажах Р0 и Р1 (до 8,1 1од10 БОЕ/мл) и образовывали крупные бляшки. Вирус, производный от вируса из плазмид р42, также образовывался в плазмидах р59, которые содержали сильную аттенуирующую мутацию, которая описывалась ранее в контексте вирусной вакцины на основе ЖАВ ЖЛ/ЛЗН, а именно 3-а.а.-делецию в гене специфичного для ЖЛ17И белка С (Р8К, остатки 40-42 в начале α-спирали I; АО 2006/116182). Как и ожидалось, вирус из р59 рос в меньших титрах (5,6 и 6,5 1од10 БОЕ/мл в Р0 и Р1 соответственно) и образовывались меньшие бляшки (что определялось в отдельном эксперименте с титрованием; это не отражено на фиг. 6) по сравнению с родительской химерой из плазмид р42. Эти первоначальные наблюдения о ростовых свойствах прототипов ЖАВ ЖЛ/КЭ и корреляция репликации ш νίύΌ с морфологией бляшек были подтверждены в экспериментах с кривыми роста (фиг. 8).
Конструкции ПИВ-КЭ.
Конструировались варианты ПИВ-ЛЗН/КЭ. Упакованные образцы ПИВ получались в плазмидах р39 и р40 (фиг. 7; приложение 1 для последовательности соединения СргМ, приложение 3 для полной последовательности 5'-нетранслируемая концевая область-ДСргМЕ-начало N81). Эти образы содержали полноценные сигналы ргМ вирусов Нург и ЛЗН соответственно. Оба ПИВ успешно восстанавливались и размножались во вспомогательных клетках культуры ПДХ-СргМЕ (ЛЗН) или ПДХ-С (ЛЗН) (Макои е! а1., У1го1оду, 351:432-443, 2006; АЛтап е! а1., Уассше, 26:2762-2771, 2008). Титры образов в Р0 и Р1 варианта из р39 были в 0,2-1,0 1од10 раз выше, чем титры варианта из плазмид р40. В дополнение к этому, клетки культуры Уего, инфицированные вариантом р39, в иммунофлуоресцентном анализе, в котором использовались поликлональные КЭ-специфичные антитела, окрашивались ярче, чем клетки, инфицированные вариантом р40, что указывает на более эффективную репликацию (фиг. 7). Более высокая скорость репликации кандидата р39, чем кандидата р40 была подтверждена в эксперименте с кривыми роста (фиг. 8). В последнем эксперименте оба кандидата, по-видимому, лучше росли на вспомогательных клетках культуры ПДХ-С(ЛЗН), чем на клетках культуры ПДХ-СргМЕ (ЛЗН); так, титр варианта р39 достигал ~7 1од10 БОЕ/мл на 5-й день (заметьте: пиковые титры достигнуты не были). Открытие эффекта сигнала ргМ на скорость репликации кандидатов на звание вакцины на основе ПИВ и химерических ЖАВ, а также сравнение способности различных сигналов образовывать более эффективно реплицирующуюся и более иммуногенную конструкцию являются отличительными чертами данного подхода. Как указывалось выше, настоящее изобретение также включает использование других сигналов флавивирусов, включая сигналы с соответствующими мутациями, с разъединением сайтов расщепления вирусной протеазой и сигналазой в соединении СргМ, например, путём мутации или удаления сайта расщепления вирусной протеазой в С-концевой участке гена С, предшествующему сигналу ргМ, с использованием сильных сигналов нефлавивирусного происхождения (например, сигнала ТАП и др.) вместо сигнала ргМ, а также с оптимизацией последовательностей, расположенных дальше сайта расщепления сигналазой.
- 24 023888
В изобретении также представлены и другие варианты ПИВ-КЭ, основанные на вирусе КЭ дикого типа (штамм Нург) и вирусе ЛГТ (штамм дикого типа ТР21 или аттенуированный штамм Е5), а также химерические вирусы, содержащие остов вируса ЖЛ 17Ό и последовательности ргМЕ вирусов КЭ или ЛГТ. Вспомогательные клетки, экспрессирующие белки С, СргМЕ и т.д. (например, КЭ-специфичные белки), необходимые для транскомплементации, могут создаваться путём трансфекции стабильной ДНК или с помощью соответствующего вектора, например репликона альфа-вируса, такого как репликон штамма ТС-83 вируса венесуэльского лошадиного энцефалита, с последующей селекцией клеток, содержащих репликон, с помощью антибиотика. В реализации изобретения на практике могут использоваться клетки культур Уего и ПДХ-21. Последняя культура - это признанный субстрат для изготовления вакцин для применения у человека; кроме того, возможно использование других клеточных линий, пригодных для создания вакцин для применения у человека или в ветеринарии. В дополнение к конструкциям о-ПИВ, возможно также создание конструкций д-ПИВ. Для получения дополнительных гарантий безопасности вакцин для человека, животных и окружающей среды в них могут водиться соответствующие модификации, включая применение дегенеративных кодонов и комплементарных мутаций в 5'- и 3'-элементов С8, что позволит снизить вероятность рекомбинаций, которые теоретически могут привести к появлению жизнеспособного вируса. После конструирования кандидаты на звание вакцины могут оцениваться ίη νίίτο на стабильность и пригодность к массовому производству и ίη νίνο на аттенуирование и иммуногенность/эффективность. Для этого могут использоваться доступные доклинические животные модели, например, такие, как модели, использованные для создания и контроля качества вакцин против КЭ и ЖЛ.
Нейровирулентностъ и нейроинвазивностъ конструкций ПИВ-КЭ и ЖАВ ЖЛ/КЭ у мышей.
Молодые взрослые мыши линии 1СК (возраст ~3,5 недели) инфицировались кандидатами на звание ПИВ-КЭ и ЖАВ ЖЛ/КЭ в различных дозах; для определении нейровирулентности проводилось внутрикожное заражение, а для определения нейроинвазивности - внутрибрюшинное заражение (позднее также определялись иммуногенность и эффективность). Животные, которым вводилось 5 1од10 ФОБ ПИВ-Нург (варианты р39 и р40) обоими способами, выживали, слабости у них также не определялось, как и у животных, которым вводилась имитация вакцины (табл. 7); таким образом, вакцины на основе ПИВ-КЭ полностью авирулентны. У мышей, заражённых внутрикожно контрольными вирусами ЖЛ 17Ό (1-3 1од10 БОЕ), определялась дозозависимая смертность, тогда как животные, заражённые внутрибрюшинно (5 1од10 БОЕ), выживали, что соответствует представлениям об отсутствии нейроинвазивности вируса ЖЛ 17Ό. Все животные, которым вводились различные дозы прототипов ЖАВ ЖЛ/КЭ (р42, р45, р43 и р59) (2-4 1ο§ι0 БОЕ), умерли (была совершена эвтаназия умирающих животных). Эти варианты, повидимому, менее аттенуированы, чем вирус ЖЛ 17Ό, например, об этом свидетельствует 100%-ная смертность и более короткая СПЖ при введении вирусов в дозе 2 1ο§10 БОЕ - самой низкой из исследованных доз для кандидата на звание ЖАВ ЖЛ/КЭ. Фенотип ПИВ-КЭ, характеризующийся отсутствием нейровирулентности, вирулентный фенотип ЖАВ ЖЛ/КЭ и фенотип ЖЛ 17Ό с промежуточной вирулентностью представлены на фиг. 9, на котором показаны кривые выживания мышей после внутрикожного заражения. Следует отметить, что варианты р43 (гены ргМЕ вируса ЛГТ) и р59 (вариант ЖАВ ЖЛ/Нург с делецией 6С2) были менее нейровирулентными, чем конструкции ЖАВ ЖЛ/Нург р42 и р45, на что указывает разница в СПЖ для соответствующих доз вирусов (табл. 7). В дополнение к этому, кандидаты р43 и р 59 характеризовались отсутствием нейроинвазивности, тогда как р42 и р 45 приводили к частичной смертности после внутрибрюшинного введения в дозе 5 1од10 БОЕ (табл. 7; фиг. 10). Следует отметить, что, как бы то ни было, все конструкции ЖАВ ЖЛ/КЭ были значительно слабее (т.е. были аттенуированы), чем вирусы КЭ дикого типа, например чем вирус штамма Нург дикого типа, который был одинаково высоко вирулентен для мышей в низких дозах при внутрикожном (ЛД50 ~0,1 БОЕ) и внутрибрюшинном введении (ЛД50 <10 БОЕ) ^а11пет е1 а1., ί. Оеп. νίτο1. 77:1035-1042, 1996; Мапй1 е1 а1., ί. νίτο1. 72:2132-2140, 1998; Мапй1 е1 а1., 1. Оеп. νίτο1. 78:1049-1057, 1997).
Иммуногенность/эффективность конструкций ПИВ-КЭ и ЖАВ ЖЛ/КЭ у мышей.
Определялся ответ со стороны КЭ-специфичных нейтрализующих антител у мышей, иммунизированных одной или двумя дозами описанных выше вариантов ПИВ-КЭ или ЖАВ ЖЛ/КЭ, а также человеческой вакциной против КЭ, инактивированной в формалине (1:30 человеческой дозы) (внутрибрюшинная иммунизация). Затем животные заражались вирусом штамма Нург КЭ дикого типа (500 БОЕ внутрибрюшинно); определялась заболеваемость (например, снижение массы тела) и смертность после заражения.
На 20-й день после иммунизации определялся ответ со стороны КЭ-специфичных нейтрализующих антител у мышей, иммунизированных одной или двумя дозами описанных выше вариантов ПИВ-КЭ или ЖАВ ЖЛ/КЭ (см описание эксперимента в табл. 7), а также человеческой вакциной против КЭ, инактивированной в формалине (1:20 человеческой дозы, одна или две дозы) и контролем - имитацией вакцины ЖЛ 17Ό (внутрибрюшинная иммунизация). Определение антител против вируса КЭ штамма Нург дикого типа проводилось методом РКЫТ50 (реакция нейтрализации редукции бляшек на 50%) (табл. 8; вторая доза указанных исследуемых вакцин вводилась на 14-й день). Проводилось определение титров антител в сыворотке отдельных животных, в пулах сыворотки от двух животных (в большинстве случаев) и в
- 25 023888 пулах сыворотки от 4 животных для групп отрицательного контроля (ЖЛ17Э и имитация вакцины). Титры антител в отдельных сыворотках, а также средние геометрические титры (СГТ) для каждой из групп приведены в табл. 8. Титры антител в исследованных образцах были сходными в пределах каждой группы, например, в группах, иммунизированных ПИВ, что указывает на высокую однородность иммунного ответа у животных. Как и ожидалось, нейтрализующих КЭ-специфичных антител в группах отрицательного контроля не определялось (группы ЖЛ17Э и имитации вакцины; СГТ <1:10); в соответствии с этим животные в этих группах оказались незащищёнными от заражения на 21-й день после иммунизации вирусом КЭ дикого типа (штамм Нург) в высокой дозе (500 БОЕ внутрибрюшинно). Данные о смертности за ограниченный период наблюдения (9 дней после заражения; наблюдение было продолжено) представлены в табл. 8, а динамика средней массы тела после заражения, указывающая на заболеваемость, приведена на фиг. 11. Нейтрализующие антитела были выявлены в организмах убитых животных в группе вакцинного контроля; титр этих антител был особенно высок после введения двух доз вакцины (СГТ 1:1496); животные в группе 2 доз вакцины были полностью защищены от КЭ, и смертности или потери массы тела в этой группе не было (это не относится к животным из группы 1 дозы вакцины). У животных, которым была введена одна или две дозы ПИВ-Нург р39, титр антител был очень высок (СГТ 1:665 и 1:10584); эти животные были надёжно защищены от КЭ. Это указывает на то, что введение дефектной вакцины на основе о-ПИВ-КЭ приводит к развитию бурного иммунитета. У двух животных, выживших после иммунизации химерой ЖЛ/Нург р42 (см. табл. 7), титр антител также был высоким (СГТ 1:6085); эти животные были защищены от заражения вирусом дикого типа (табл. 8; фиг. 11).
Интересно, что ПИВ-Нург р40 и ЖЛ/Нург р45 оказались слабоиммуногенными (СГТ 1:15 и 1:153 для одной и двух доз и 1:68 соответственно. Как указывалось выше, эти вакцины содержали ЛЗНспецифичные последовательности в сигнале для ргМ, тогда как высокоиммуногенные конструкции ПИВНург р39 и ЖЛ/Нург р42 содержали КЭ-специфичные сигнальные последовательности. В соответствии с приведенными выше данными этот результат указывает на важность правильного выбора сигнала для ргМ, например, КЭ-специфичного сигнала. Это позволит добиться высокого уровня репликации и выделения ВПЧ, что в рамках этого эксперимента ίη νίνο приводило к совершенно другому иммунному ответу. Иммуногенность химер ЖЛ/ЛГТ р43 и ЖЛ/Нург бС2 р59 была относительно низкой, что, впрочем, и ожидалось. Это объясняется использованием гетерологичной оболочки (оболочки вируса ЛГТ, отличающейся от оболочки вируса КЭ, которым проводилось заражение) и выраженным аттенуирующим эффектом делеции бС2 соответственно.
Пример 3. Экспрессия чужеродных генов.
В примерах конструкций рекомбинантных ПИВ, описанных ниже, проводилась оптимизация кодона (например, для эффективной экспрессии в целевой клетке-хозяине); также было проведено удаление длинных повторяющихся последовательностей нуклеотидов, что позволило увеличить стабильность вставок (размером >8 нуклеотидов; при необходимости может быть выполнено дополнительное укорочение повторов). Затем проводился химический синтез генов. Гены клонировались в векторные плазмиды ПИВ-ЛЗН по стандартным методам, принятым в молекулярной биологии, упакованные ПИВ восстанавливались после транскрипции ίη νίίτο и трансфекции соответствующих вспомогательных (для о-ПИВ) или обычных (для д-ПИВ) клеток.
Экспрессия белка О вируса бешенства в о-ПИВ и д-ПИВ ЛЗН.
Вирус бешенства из семейства РНаЬбоутбае - это серьёзный патоген, поражающий человека и животных. Несмотря на доступность нескольких убитых вакцин, в медицине и ветеринарии существует потребность в усовершенствованных вакцинах (например, недорогих профилактических прединфекционных вакцин). Гликопротеин О вируса бешенства опосредует попадание вируса в клетки и является основным иммуногеном этого вируса. Для создания ветеринарных вакцин этот гликопротеин экспрессировался на различных векторах (например, РакЮге! апб ВгосЫег, Ер1бешю. 1пГес1. 116:235-240, 1996; Ы е1 а1., У1го1о§у, 356:147-154, 2006).
Проводилась оптимизация кодона полномерного белка О вируса бешенства (оригинальный пастеровский изолят вируса, номер доступа ОепВапк NС 001542). Ген синтезировался химически и вставлялся в области делеций Δί'.’. Δρ^ΜΕ и ΔСρ^ΜΕ в векторы ПИВ-ЛЗН (фиг. 12). Последовательности конструкций приведены в приложении 4. Общая структура конструкций представлена на фиг. 13. Полный ген белка О, содержащий свой собственный сигнальный пептид, вставлялся в рамке за геном С ЛЗН. Эта инсерция комбинировалась с делецией ΔС (конструкции ΔС и ΔСρ^ΜΕ) или не сочеталась с ней ^ргМЕ) и находилась за несколько остатков от сигнала ргМ. За последовательностью трансмембранного С-концевого якоря белка О вставлялась аутопротеаза 2А вируса ящура. Это обеспечивало отщепление С-концевого участка О от вирусного полипротеина во время трансляции. За элементом А2 вируса ящура следовал ЛЗН-специфичный сигнал для ргМ и гены ргМЕ-№1-5 (в случае конструкции ΔС) или сигнал для Ν81 и гены Ν81-5 в конструкциях Δρ^ΜΕ и ΔСρ^ΜΕ.
Упакованные ПИВ ЛЗН(АС)-О вируса бешенства, ЛЗН(АргМЕ)-О вируса бешенства и ЛЗН^ргМЕ)О вируса бешенства получались в результате трансфекции во вспомогательных клетках ПДХ, дополняющих делецию вектора на основе ПИВ [содержащих репликон вируса венесуэльской лошадиной лихорадки (штамм ТС-83) и экспрессирующие структурные белки, необходимые для транс- 26 023888 радки (штамм ТС-83) и экспрессирующие структурные белки, необходимые для транс-комплементации]. Эффективная репликация и экспрессия белка О вируса бешенства для всех трёх конструкций, которыми трансфицировались/инфицировались вспомогательные клетки ПДХ-С(ЛЗН) и/или ПДХ-СргМЕ (ЛЗН), а также обычные клетки культуры ПДХ, подтверждались путём окрашивания с применением иммунологической метки и иммунофлуоресцентным анализом (ИФА) с помощью моноклональных антител к белку О вируса бешенства (КаЬО-МАЦ) (фиг. 14). Титры антител определялись в клетках культуры Уего окрашиванием с применением иммунологической метки с помощью МАЦ или поликлональных антител против вируса ЛЗН. Кривые роста конструкций в клетках ПДХ-СргМЕ (ЛЗН) после трансфекции транскриптами РНК ίη νίίΓΟ приведены на фиг. 14 (нижняя часть фигуры). Отмечался эффективный рост ПИВ до титров ~6 - >7 1од10 БОЕ/мл. Важно отметить, что окрашивание с помощью КаЬО-МАЦ и антител к ЛЗН определялись почти одинаковые титры, что представляло собой первой доказательство генетической стабильности вставки. В фиксированных без нарушения проницаемости мембраны клетках культуры Уего, инфицированных ПИВ, при окрашивании с помощью КаЬО-МАЦ наблюдалось выраженное окрашивание мембраны. Это говорит о том, что продукт экспрессии эффективно доставлялся к поверхности клеток (фиг. 15). Это явление считается главной предпосылкой для высокой иммуногенности экспрессируемого белка О. Отдельные упакованные ПИВ могут распространяться в инфицированных вспомогательных клетках ПДХ, но не могут размножаться в обычных клетках, как это показано для ПИВ ЛЗН(ДС)-О вируса бешенства на фиг. 16. Факт отсутствия распространения в обычных клетках ПДХ говорит о том, что рекомбинантные РНК-геномы не могут неспецифически упаковываться в мембранные носители, содержащие белок О, если образуются в инфицированных клетках. Такие же результаты были получены для белка О другого рабдовируса - вируса везикулярного стоматита (ВВС), в отличие от более ранних наблюдений про неспецифическую упаковку репликона вируса леса Семлики (ВЛС), экспрессирующего белок О ВВС (КоШ е1 а1., Се11, 79:497-506, 1994). Это является желательной чертой с точки зрения безопасности. В противоположном случае неспецифическая упаковка может приводить к ограниченному распространению ПИВ ίη νί\Ό, возможно усиливая антирабический иммунный ответ. Это явление также может предоставлять определенные преимущества, учитывая, что безопасность таких ПИВ также была продемонстрирована. Стабильность вставок гена белка О вируса бешенства в трёх ПИВ была показана путём серии пассажей во вспомогательных клетках ПДХ-СргМЕ (ЛЗН) при высоком и низком содержании ЧИ (частиц инфицирования) (0,1 или 0,001 БОЕ на клетку). При каждом пассаже собирались клеточные супернатанты; этот материал титровался в обычных клетках (например, клетках культуры Уего) иммунологическим окрашиванием с помощью анти-ЛЗН поликлональных антител. Так определялся общий титр ПИВ. Титр частиц, содержащих ген О, определялся с помощью моноклонального антитела к белку О вируса бешенства (результаты отражены на фиг. 17 для содержания ЧИ 0,1; аналогичные результаты были получены и для содержания ЧИ 0,001). ПИВ ЛЗН(ДС)-О вирус бешенства были стабильными во всех 5 пассажах, тогда как титр ПИВ, содержащих вставки, на 6-ом пассаже начал снижаться, что указывает на нестабильность вставки. Это явление вполне ожидаемо, поскольку в этой конструкции крупная вставка гена О (~1500 нуклеотидов) сочетается с небольшой делецией ДС (~200 нуклеотидов), что значительно увеличивает общий размер рекомбинантного РНК-генома. В отличие от этого, в ПИВ ЛЗН(ДргМЕ)-О вируса бешенства и ЛЗН(ДСргМЕ)-О вируса бешенства вставки сочетаются со значительно большей делецией (~ 000 нуклеотидов). Поэтому в этих конструкциях вставка оставалась стабильной на протяжении всех 10 пассажей (фиг. 17). Кроме того, как можно видеть на фиг. 17, на некоторых пассажах для всех трёх ПИВ достигались высокие титры (8 1о§10 БОЕ/мл и выше), что является дополнительным доказательством того, что ПИВ можно легко производить в больших количествах.
После введения ίη νί\Ό о-ПИВ ЛЗН(ДС)-О вируса бешенства индуцирует сильный ответ со стороны нейтрализующих антител против вирусов ЛЗН и бешенства, а также ответ со стороны Т-клеток. ПИВ ЛЗН(ДргМЕ)-О вируса бешенства и ЛЗН(ДСргМЕ)-О вируса бешенства будут индуцировать гуморальный иммунный ответ только против вируса бешенства, поскольку они не кодируют белки ргМЕ вируса ДЗН. Инфицирование конструкцией о-ПИВ ЛЗН(ДС)-О вируса бешенства можно также сочетать с введением конструкции ЛЗН(ДргМЕ)-О вируса бешенства в виде д-ПИВ (см. фиг. 12), что позволит увеличить дозу экспрессируемого белка О и усилить иммунитет против обоих патогенов, вследствие ограниченного распространения вируса. Примером распространения могут служить следующие данные. Результаты титрования в клетках культуры Уего образца о-ПИВ (ПИВ ЛЗН(ДргМЕ)-О вируса бешенства) и образца д-ПИВ (ПИВ ЛЗН(ДргМЕ)-О вируса бешенства + ЛЗН(ДС); последний ПИВ не кодирует белок О вируса бешенства) показаны на фиг. 18. Инфицирование обычных клеток культуры Уего о-ПИВ приводило к тому, что с помощью КаЬО-МАЦ окрашивались лишь отдельные клетки (или небольшие скопления клеток, образованные вследствие деления клеток). В отличие от этого, после инфицирования клеток д-ПИВ наблюдались большие очаги окрашенных клеток (фиг. 18, правая часть), что являлось результатом коинфицирования ПИВ обоих типов.
Конструкция ЛЗН(ДСргМЕ)-О вируса бешенства также может использоваться для создания д-ПИВ, если ввести эту конструкцию в геном вспомогательных клеток, в которых транскрибируются последовательности СргМЕ (см. фиг. 12). Например, такой конструкцией может быть геном вируса ЛЗН, содержа- 27 023888 щий делецию одного из белков N8, например, N81, N83 или N85, которые, как известно, могут быть транс-комплементарными (Кйготукй ек а1., 1. У1го1. 73:10272-10280, 1999; Кйготукй ек а1., 1. У1го1. 74:3253-3263, 2000). Авторы изобретения сконструировали геном ЛЗН-ДЛ81 (последовательность представлена в приложении 4) и получили подтверждение коинфекции конструкциями ЛЗН(ДргМЕ)-О вируса бешенства или ЛЗН(ДСргМЕ)-0 вируса и распространения вируса ίη νίΙΐΌ с помощью метода окрашивания с применением иммунологической метки. В случаях тонких д-ПИВ во вспомогательный геном можно вставить белок О вируса бешенства, что приведёт к его экспрессии, например, в геном ЛЗН-Д№1. Это позволит увеличить количество экспрессируемого белка О вируса бешенства и в результате этого увеличить интенсивность антирабического иммунного ответа. Как в случае любых версий д-ПИВ, один иммуноген может принадлежать одному патогену (например, белок О вируса бешенства), а другой - второму патогену, что приведёт к тройной антигенной специфичности вакцины. Как указывалось ранее, делеции ДЛ81 в других примерах реализации изобретения могут заменяться делециями/мутациями ДЛ83 и/или ДЛ85.
Экспрессия белка Р РСВ в о-ПИВ и д-ПИВ ЛЗН.
Респираторно-синцитиальный вирус (РСВ), принадлежащий к семейству Рагатухоушйае, является одной из самых частых причин тяжёлых заболеваний дыхательных путей у маленьких детей во всём мире (СоШп5 аий Сгслус, Кекриакогу 8уисуйа1 У1ги8 аий Мекариеитоу1ги8, 1и: Ктре ек а1. Ейк., Не1й5 У1го1оду, 5 ей., РЫ1айе1рЫа: ^о1кег8 Ыитег/Ырршсокк ХУППатк аий ХУПкиъ, 2007:1601-1646). Белок слияния вируса - это основной вирусный антиген, который можно использовать для создания безопасной и эффективной вакцины. Чтобы избежать поствакцинального обострения РСВ-инфекции, что наблюдалось ранее для кандидата на звание формалин-инактивированной вакцины, необходимо создать сбалансированный ответ на Р со стороны Тх-1/Тх-2. Этого можно добиться путём улучшения стимуляции КПР необходимого условия для индукции образования высокоаффинных антител (ЭеЦайо ек а1., №Ц. Мей. 15:34-41, 2009). А это, в свою очередь, может быть достигнуто введением Р в активный вектор на основе вируса. Ранее нами было показана способность химерических векторов на основе ЖАВ жёлтой лихорадки индуцировать развитие сильного, сбалансированного ответа со стороны Тх-1/Тх-1 ш νί\Ό против антигена вируса гриппа (\УО 2008/036146). В настоящем изобретении для представления белка Р и индукции оптимального иммунного ответа использовались химерическая ЖАВ и вектор на основе ПИВ жёлтой лихорадки. Для этих целей также могут использоваться и другие ЖАВ и ПИВ, описанные в настоящем изобретении.
Сначала была проведена оптимизация кодона полномерного белка Р штамма А2 РСВ (номер доступа в ОеиВаик Р03420), как это описывалось ранее. Затем последовательность синтезировалась и клонировалась в плазмиды для получения О-ПИВ и д-ПИВ ЛЗН с помощью схем инсерции, приведенных на фиг. 12 и 13 для белка О вируса бешенства, с применением стандартных методов, принятых в молекулярной биологии. Точные последовательности инсерции и соседних генетических элементов представлены в приложении 5. Для трансфекции вспомогательных клеток ПДХ-СргМЕ(ЛЗН) применялись полученные ш У1кго транскрипты РНК ПИВ ЛЗН(ДС)-Р РСВ, ЛЗН(ДргМЕ)-Р РСВ и ЛЗН(ДргМЕ)-Р РСВ. Эффективная репликация и экспрессия белка Р РСВ была продемонстрирована с помощью иммунологического окрашивания трансфицированных клеток МАЦ анти-Р РСВ, как это показано для конструкции ЛЗН(ДргМЕ)-Р РСВ на фиг. 19. Присутствие упакованного ПИВ в супернатанте от транфицированных клеток (титр достигал 7 1од10 БОЕ/мл) подтверждалось путём титрования в клетках культуры Уего с иммунологическим окрашиванием. Кроме того, возможно использование похожих конструкций, которые содержат модифицированный ген полномерного белка Р. Например, ^концевой сигнальный пептид белка Р в модифицированном белке Р замещён на соответствующий сигнальный пептид белка О вируса бешенства. Эта модификация предназначена для выяснения, поможет ли использование гетерологичного сигнала увеличить скорость синтеза белка Р и/или репликацию ПИВ.
- 28 023888
Конструкции прототипа ПИВ, которые использовались в исследованиях создания платформы для вакцины
Таблица 1
Конструкция Генетический состав Упаковка
ПИВ-ЛЗН Вирус ЛЗН, штамм ΝΥ99 дикого типа Оболочка ЛЗН; вспомогательные клетки культуры ПДХ-СргМЕ(ЛЗН) или ПДХ-С(ЛЗН) (Мазон е1а1., Уйо1о£у 2006, 351:432-43; ЗУЛтап е1 а1., Уассте 2008, 26:2762-71)
ПИВ-ЖЛ/ЛЗН Оболочка (ВПЧ): Вирус ЛЗН, штамм ΝΥ99 дикого типа Остов: ЖЛ17Э Оболочка ЖЛ 17ϋ; вспомогательные клетки культуры ПДХ-СргМЕ(ЖЛ) (ЗУЫтап е( а!., Α3ν νΐηω Кеб, 2008, 72:77-126)
пив-лзн/яэ Оболочка (ВПЧ): вирус ЯЭ, штамм Накаяма [Макауата] дикого типа Остов: Вирус ЛЗН, штамм ΝΥ99 дикого типа Оболочка ЛЗН или ЯЭ; вспомогательные клетки культуры ПДХ-С(ЛЗН) или ПДХ-СргМЕ(ЛЗН) (НЫка^а е1 а!,, Уасс1пе 2008, 26:2772-8)
пив-жл ЖЛ 170 Оболочка ЖЛ 17ϋ; Вспомогательные клетках культуры ПДХ-СргМЕ(ЖЛ) или ПДХ-С(ЖЛ) (Мазоп е( а!., νίιοίοβν 2006, 351:432-43)
Таблица 2
Безопасность: нейровирулентность для грудных мышат
Конструкция Дозы (1<*1·) Смертность (%) СПЖ (дни)2
ПИВ-ЖЛ 1-4 0/10(0%) НП
ПИВ-ЛЗН 2-5 0/10 (0%) нп
ПИВ-ЛЗН/ЯЭ 1-4 0/11 (0%) нп
ПИВ-ЖЛ/ЛЗН 1-4 0/10-11 (0%) нп
ЛЗН д-ПИВ 1 —4 0/10-11 (0%) нп
ЖЛ д-ПИВ 1 -4 0/10(0%) нп
ЖЛ 170 2 1 0 -I 10/10(100%) 10/10(100%) 9/10(90%) з/ю(зо%) 7.6 9,3 9,9 9.6
жл/яэ 4 3 2 1 9/11 (82%) 7/10(70%) 3/11 (27%) 0/11 (0%) 9,7 12,3 12 нп
жл/лзн 3 0-2 2/11 (18%) 0/10-11 (0%) 12,5 нп
дение вирусов в различных дозах.
2 СПЖ (средняя продолжительность жизни) для умерших мышей; нп - не применимо.
- 29 023888
Таблица 3
ПИВ высокоиммуногенны и эффективны у мышей1
Группа Доза ΡΚΝΤ (реакция нейтрализации редукции бляшек) 20-й день ΡΚΝΤ (реакция нейтрализации редукции бляшек) 34-й день Смертность после заражения
ПИВ-ЛЗН 640 1280 0/8 (0%)
Ι06 1280 2560 1/8(12,5%)
ΙΟ6+Ι05 2560 2560 0/6 (0%)
контроль: ЖЛ/ЛЗН Ι04 1280 2560 1/8 (12,5%)
ПИВ-ЛЗН/ЯЭ ю4 10 20 Н/О
10* 20 20 Н/О
10*+10* 20 160 Н/О
контроль: ЖЛ/ЯЭ Ι04 160 320 Н/О
ПИВ-ЖЛ ю4 <10 <10 8/8(100%)
Ι05 <10 <10 5/7 (71%)
105+105 10 10 У 2/5(40%)
контроль: ЖЛ 170 ю4 640 1280 0/7 (0%)
Контроль: имитация Раствори- Н/О 0 7/7(100%)
вакцины - инфицирование тель
вирусом ЛЗН
- инфицирование вирусом Раствори- Н/О 0 8/8 (100%)
ЖЛ тель
1 Внутрибрюшинная иммунизация (нагрузка (д0), ревакцинация (д21) в некоторых группах мышей; заражение (д35): вирус ЛЗН (штамм ΝΥ99, дикий тип), 3 1од10 БОЕ внутрибрюшинно, 270 ЛД50; вирус ЖЛ (штамм Акйл. дикий тип), 3 1од10 БОЕ внутрикожно, 500 ЛД50; Н/О - 0 не определялось.
Таблица 4
ПИВ иммуногенны у хомяков и защищают их от заражения1
Г руппа Доза (-ы) ΡΚΝΤ (реакция нейтрализации редукции бляшек) 38-й день ПОСЛЕ ЗАРАЖЕНИЯ:
Смертность Заболе- ваемость Пиковая 1емия (Ιος)
ПИВ-ЛЗН 10’ 320 ; 0/5 (0%) . 0/5(0%) . 2,3 .
106 640 0/5 (0%) . 0/5(0%) 1,8
106+105 1280 0/5 (0%) 0/5(0%) <1,3
контроль; ЖЛ/ЛЗН ю4 >2560 0/5 (0%) 0/5 (0%) <1,3
пив-лзн/яэ -щ3- 20 2/5 (40%) 2/5 (40%) 2,2
105+10* 40 0/5 (0%) 0/5 (0%) <1,3
контроль: ЖЛ/ЯЭ 10“ 2560 0/5 (0%) 0/5 (0%) 1,3
ПИВ-ЖЛ --- <10 1/3 (33%) 3/3(100%) 8,3
ю5 <10 1/5 (20%) 4/5 (80%) 8,3
105+105 20 0/4(0%) .· 0/4 (0%) 2,5
контроль: ЖЛ Ι7Ο ю4 >2560 0/4 (0%) 0/4 (0%) <1,3
Контроль: имитация вакцины Растворитель <10 3/4 (75%) 4/4 (100%) 4,0
- инфицирование вирусом
ЛЗН
- инфицирование вирусом ЖЛ Растворитель <10 1/4 (25%) 4/4 (100%) 8,4
- инфицирование вирусом ЯЭ Растворитель <10 2/5 (40%) 2/5 (40%) 3,0
1 Сирийские хомяки, подкожная иммунизация (нагрузка (д0), ревакцинация (д21) в некоторых группах мышей; заражение (д39): вирус ЛЗН (штамм ΝΥ99, дикий тип), 6 1од10 БОЕ внутрибрюшинно, вирус ЯЭ (штамм №кауаша, дикий тип), 5,8 1од10 БОЕ внутрикожно или вирус ЖЛ, адаптированный к хомякам (штамм ΑδίΒί), 7 1од10 БОЕ внутрибрюшинно (МсАгНиг е! а1., I. Уиок, 77:1462-1468, 2003; МсАгНиг е! а1., Уник Кек. 110:65-71, 2005).
- 30 023888
Иммунизация хомяков ПИВ: сравнение подкожного или внутрибрюшинного путей
Таблица 5
Вирус ΡΚΝΤ, 20-21-й день Ревакцинация (1<>8н>) ΡΚΝΤ, 34-38-й день
ПК ВБ ПК ВБ
ПИВ-ЛЗН 40 320 5 1280 1280
пив-жл/лзн 10 320 5 160 1280
пив-лзн/яэ 10 80 5 40 640
ПИВ-ЖЛ <10 10 5 20 80
Таблица 6
Иммунный ответ на коктейли ПИВ (мыши)1
Группа Доза ΡΚΝΤ 20-й день ΡΚΝΤ 34-й день
Анти-ЯЭ Анти-ЛЗН Анти-ЯЭ Анти-ЛЗН
ПИВ-ЛЗНЛЕ + ВБ-ЛЗН 10’ +10’ 20 320 640 5120
только ПИВ-ЛЗН/ЯЭ 10’ 80 <10 160 20
только ПИВ-ЛЗН 10’ <10 640 <10 5120
Имитация вакцины - <10 <10 <10 <10
1 Мыши линии С57/ВБ6, внутрибрюшинное введение (д0 и д21); титры ΡΚΝΤ для пулов плазмы.
Нейровирулентность (внутрикожное введение) и нейроинвазивность (внутрибрюшинное введение) кандидатов на звание вакцины ПИВ-КЭ и ЖЛ/КЭ взрослым мышам линии 1СК
Таблица 7
Конструкция Нейровирулентность (внутрикожное введение) Нейроинвазивноеть (внутрибрюшинное введение)
Доза (-ы) 0<>Ы Смертность (%) СПЖ, дни1 Доза (-ы) 0°?ю) Смертное ть (%) СПЖ, дни1
ПИВ-Нург р39 5 0/7 (0%) нп 5 0/16(0%) НП
ПИВ-Нург р40 5 0/6 (0%) нп 5 0/16(0%) нп
ЖЛ/Нург р42 4 3 2 8/8(100%) 8/8(100%) 8/8 (100%) 6.3 6.4 7.4 5 6/8 (75%) 13.3
ЖЛ/ЛГТ р43 4 3 2 8/8 (100%) 8/8 (100%) 8/8 (100%) 7,9 7,6 8,4 5 0/8 (0%) нп
ЖЛ/Нург р45 4 3 2 8/8 (100%) 8/8 (100%) 8/8 (100%) 6,1 6,6 6,8 5 5/8 (62.5%) 11.2
ЖЛ/Нург 6С2 р59 4 3 2 8/8 (100%) 8/8 (100%) 8/8 (100%) 6,6 7,4 8,1 5 0/8 (0%) НП
ЖЛ17О 3 2 1 8/8 (100%) 7/8 (87,5%) 4/8 (50%) 9 9,6 10 5 0/8 (0%) нп
Имитация вакцины оритель) нет 0/8 (0%) НП нет 0/8 (0%) нп
1 СПЖ умерших мышей.
- 31 023888
Таблица 8
Титры нейтрализующих антител (РК№Т50) у мышей, иммунизированных внутрибрюшинно (против вируса КЭ (штамм Нург дикого типа)), защита от заражения (наблюдение после заражения в течение 9 дней)
Иммуноген Доза(ы) Титр ΡΚΝΤμ, индивидуальные образцы Ι’ΚΝΤ,ο (11 Смертность после заражения (%) на 9-й день2
ПИВ-Нург р39,1 доза 5 1746 (2) 1187 (2) 164 (2) 574 (2) 665 0/8 (0%)
ПИВ-Нург р39, 2 дозы 5+5 16229(2) 12928 (2) 12927 (2) 4627 (2) 10,584 0/8 (0%)
ПИВ-Нург р40, 1 доза 5 <10(2) <10 (2) 18(2) 33(2) 15 6/8 (75%)
ПИВ-Нург р40, 2 дозы 5+5 169(2) 638 (2) 26 (2) 192(2) 153 1/8 (12,5%)
ЖЛ/Нург р42 5 9210(1) 4020 (1) 6,085 0/2 (0%)
ЖЛ/ЛГТ р43 5 123(2) 32(2) 96(2) 45 (2) 64 1/8(12.5%)
ЖЛ/Нург р45 5 292 (2) 16(1) 68 0/3 (0%)
ЖЛ/Нург 402 р59 5 194(2) 93(2) 45(2) 26(2) 68 0/8 (0%)
Убитая человеческая вакцина против КЭ, 1 доза (1 /20 человеческой дозы) 1/20 19(2) <Ю(2) 13(2) <10(2) 12 1/8(12.5%)
Убитая человеческая вакцина против КЭ, 2 дозы (каждая 1/20- человеческой дозы) 1/20+1/20 3435 (2) 1267 (2) 770 (2) 1,496 0/6 (0%)
контроль: ЖЛ 170 5 <10(4) Н(4) <10 5/8 (62.5%)
Имитация вакцины нет <10(4) <10(4) <10 4/8 (50%)
'Число в скобках указывает на число мышей в каждом пуле сыворотки.
2Приведены данные о смертности за 9 дней.
- 32 023888
Примеры опубликованных мутаций гена белка Р, которые могут применяться для аттенуирования кандидата на звание химерической ЖАВ КЭ
Таблица 9
Остаток Домен Комментарий Атг ену и рова н и е Ссылка
Ν52Κ I! Петля ΌΙ- ОН , возможно, участвует в движениях петли, необходимых для активизации слияния яэ.жл Наае^аига е1 а(, 1992, ЗсМезт^ег е! а1, 1996
Е84К и Консервативная область, Е у вируса КЭ, К/К у других вирусов, атгенюирование пассажем в клещах ϊχοάβχ 011 содержит перекрёстно реагирующие эпитопы флавивирусов КЭ ЬаЬшЗае1а1, 1994
Е55К и Консервативная область, Е у вируса КЭ, К/К. у других вирусов, аттеюоирование отбором вариантов бляшек в клетках культуры Уего, ОН содержит перекрёстно реагирующие эпитопы флавивирусов ЯЭ \\'иеса|. 1997
ΗΙ04Κ Ϊ1 В пределах высококонсервативного пептида слияния (аа 98-113), Ну КЭ, 0 у других вирусов КЭ Кеуе1а1, 1995
И07Р 11 В пределах высококонсервативного пептида слияния (аа 98-113), Ь у всех флавивирусов, Р у аттенюированных вирусов ЯЭ КЭ. ЯЭ, лзн Кеу с1 а1, 1995, Аггоуо е! а1,1999, 2004
ΤΙ23Κ п Петля 01-011, Е у вируса КЭ, А у вируса ЛКЛ КЭ Но1г.тапп е1 а1, 1997
- 33 023888
ΚΙ26Ε 11 Петля ΟΙ-ΟΠ, К у вируса КЭ, Е у вируса Д-2 ДЕН2 Вгау, 98
ΚΙ36Ε 11 Петля ΠΙ-ΟΙΙ, К у вируса КЭ и ЯЭ, Е у вируса Д-2 яэ
Ν154ΐχΥ) I Сайт гликозилирования, упакованный с консервативным Н 104, участвует в слиянии ДЕН2, ДЕНТ, ЖЛ СииакНоо е! а1, 1993, Р1е(пеуе1а1, 1993, Каи/апо еЬ а!, 1993,1εηηίη§5 еС а1, 1994
ΚΙ71Ε I Наружный фрагмент ΠΙ, участвующий в слиянии КЭ МапсН, 1989, Ноктапп, 1997
Ι173Τ Наружный фрагмент 01, участвующий в слиянии ЖЛ СЬатЬегз ап4 МокеИв 2001
Ε>1 β 1Υ Петля ОТ-ОП КЭ Но1гтапп е( а), 1997
Κ204Κ Выравнивание гидрофобного кармана, участвующее в слиянии ДЕН1.ДЕНЗ СииакНоо е1а1, 2004
Ρ2725 II Высоко консервативная область, соединение одной из двух альфаспиралей яэ СесШа е( а1,1991
Ο308Ν ГЛ Прикрепление к клетке, ϋΚΤ у вируса КЭ, ЕО5 у вируса ЖЛ, Т-Х у других вирусов, изменение до N создавало сайт гликозилирования у вируса шотландского энцефалита (ШЭ) и снижало вирулентность, мотив гликозилирования Ν-Χ-Τ/8 ШЭ Лап£ δΐ а1, 1993, Оао е( а1, 1994
53 ЮК 111 Предполагаемый механизм прикрепления к клетке, изменение Е до 0 у вируса ЯЭ снижало вирулентность яэ Лапе е1 а1,1993, Оао е1 а1, 1994, Ми е1а1, 1997
КЗ 1 ΙΕ ΠΙ высоко консервативная область, предполагаемый механизм прикрепления к клетке кэ,жл Кеу е( а1, 1995, ίβηηίη^ί, 1994
ТЗЗЗЬ ш предполагаемый механизм прикрепления к клетке жл.лгт Кауптап е( а1,1998
С334К гп предполагаемый механизм прикрепления к клетке ЖЛ СЬатЬегб апс! Ы«ске115, 2001
5335К ш предполагаемый механизм прикрепления к клетке яэ е( а1,1997
К336О [П предполагаемый механизм прикрепления к клетке яэ СесШа апб ОоиМ, 1991
Р337О ш предполагаемый механизм прикрепления к клетке яэ СеаНа апд СоиМ, 1991
С368К 111 предполагаемый механизм прикрепления к клетке кэ. яэ Ноктап е( з1 1997, Назе^ат е1 а1 1992
Υ384Η ΠΙ Изменение до Н атгенюировало вирус КЭ, предполагаемый механизм прикрепления к клетке, 3 позиции к удалённому КСЮ у КЭ ΗοΙζηκηη е( а1, 1990
вируса КЭ
У385К П1 консервативная область, -2 позиции к удалённому КСЮ у вируса КЭ, предполагаемый механизм прикрепления к клетке ϋ2 Н|гатз15и е1 а1,1996, 1х>Ы§5я 1990
О386К [[[ консервативная область,-1 позиция к удалённому КСЮ у вируса КЭ, предполагаемый механизм прикрепления к клетке ДЕН2, ЭМВ (Энцефалит Мюррей-Валли) Штатами, 1996, ЬоЫёзе! а1, 1990
Е387К Г11 консервативная область, +2 позиции к удалённому КСЮ у вируса КЭ, предполагаемый механизм прикрепления к клетке ДЕН2. ЭМВ (Энцефалит Мюррей-Валли) Н|гата1яи, 1996, ίο6ί®5 е( а1,1990
Р403К нет консервативная область, Сконцевой регион на включён в кристаллическую структуру $Е ДЕН2, ДЕН4 Капало е1 а1, 1993, Вгау е( а1, 1998
Η438Υ нет консервативная область, Сконцевой регион на включён в кристаллическую структуру $Е ЛГТ СатрЬеИ апй Р1е1пеу 2000
Н496К попе консервативная область, Суконцевой регион на включён в кристаллическую структуру кЕ КЭ Огйьип е1а1, 2001
- 34 023888
Ссылки:
Накеда^а е! а1., ФгоЦду, 191(1):158-165;
8сЬ1екшдег е! а1., 1. Оеп. νίτο1. 1996, 77 (Р! 6):1277-1285, 1996;
ЬаЪийа е! а1., Уйиз Кек. 31(3):305-315, 1994;
Аи е! а1., Фтик Кек. 51(2):173-181, 1997;
^ктапп е! а1., 1. Оеп. νίτο1. 78 (Р! 1):31-37, 1997;
Вгау е! а1., 1. νίτο1. 72(2): 1647-1651, 1998;
ΟπιιήΚΚοο е! а1., Фго^ду, 194(1):219-223, 1993;
ΡΚΐ^ν е! а1., 1. νίτο1. 67(8):4956-4963, 1993;
Камию е! а1., 1. νίτο1. 67(11):6567-6575, 1993;
.Тепшпдк е! а1., 1. 1п£ес!. Όίκ. 169(3):512-518, 1994;
\1апс11 е! а1., 1. νίτο1. 63(2):564-571, 1989;
СЬашЪегк е! а1., 1. νίτο1. 75(22): 10912-10922, 2001;
СесШа е! а1., ФгоШду, 181(1):70-77, 1991;
Лапд е! а1., 1. Оеп. УиЫ. 74 (Р! 5):931-935, 1993;
Оаο е! а1., 1. Оеп. νίτο1. 75 (Р! 3):609-614, 1994;
^ктапп е! а1., 1. νίτο1. 64(10):5156-5159, 1990;
Н1тата!ки е! а1., ФгоШду, 224(2):437-445, 1996;
^Ыдк е! а1., ФгоШду, 176(2):587-595, 1990;
СатрЪе11 е! а1., ФгоШду, 269(1):225-237, 2000;
СгПкип е! а1., 1. Оеп. νΰο1. 82(Р! 7):1667-1675, 2001.
Другие варианты осуществления изобретения
Все публикации, заявки на получение патента и патенты, упомянутые в этой спецификации, включены в неё во всей полноте посредством ссылок так, как если бы каждая отдельная публикация, заявка на патент или патент были конкретно и по отдельности указаны как включенные посредством ссылки.
Для специалистов в данной области будет очевидно, что возможны различные модификации и отклонения от приведенных в настоящем изобретении описаний вирусов, векторов, композиций и методов и что эти модификации не будут выходить на рамки настоящего изобретения. Несмотря на то что изобретение было описано в связи с конкретными примерами его осуществления, следует понимать, что заявленное здесь изобретение, не ограничивается этими конкретными примерами. На самом деле, различные модификации описанных примеров осуществления настоящего изобретения, очевидные для специалистов в области медицины, фармакологии и связанных с ними областей науки, будут оставаться в рамках этого изобретения. Использование единственного числа в этом тексте не исключает возможности употребления соответствующей формы множественного числа, если контекст не указывает на обратное. Аналогично, и множественное число не исключает возможности употребления единственного числа. Другие примеры осуществления изобретения находятся в рамках следующих ниже пунктов формулы изобретения.
- 35 023888
Список последовательностей <110> САНОФИ ПАСТЕР БАЙОЛОДЖИКС КО.
<120> РЕПЛИКАЦИОННО-ДЕФЕКТНЫЕ ВАКЦИНЫ И ВАКЦИННЫЕ ВЕКТОРЫ ПРОТИВ ФЛАВИВИРУСОВ <130> 06132/133НО2 <140> РСТ/и309/ОС1ббб <141> 2009-03-16 <150> из 61/092,314 <151> 2008-08-29 <150> 03 61/069,451 <151> 2008-03-14 <160> 78 <170> РаЬепПп νεΓβίοη 3.5 <2Ю> 1 <211> 12 <212> БЕЛОК <213> Уе11ом Геуег Ухгиз <400> 1
Зег Н1з Аер Уа1 Леи ТЬг Уа1 С1п РЬе Ьеи Не Ьеи 15 10 <210> 2 <211> 8 <212> БЕЛОК <213> Тхск-Ьогпе ЕпсерЬаШНз Ухгиз <400> 2
С1у МеО Ьеи С1у Мее ТЬг Не А1а 1 5 <210> 3 <211> 20 <212> БЕЛОК <213> Синтетическая <400> 3
Зег Нхз Азр Уа1 Ьеи ТЬг Уа1 С1п РЬе Ьеи Не Ьеи С1у Мег Ьеи 01у 15 Ю 15
Ме£ ТЬг Не А1а 20 <210> 4 <211> 20 <212> БЕЛОК <213> Тхск-Ьсгпе ЕпсерЬаПЫз Ухгиз
- 36 023888
Азр С1у Ьуз Туг Азр Ьеи Не А1а 55 ТЬг Уа1 Азр Ьуз Ьеи 60 61и Ьеи Ьуз
50
С1у ТЬг Зег Азр Ьуз Азп Азп С1у Зег 61у Уа1 Ьеи 61и <31 у Уа1 Ьуз
65 70 75 80
А1а Азр Ьуз Зег Ьуз Уа1 Ьуз Ьеи ТЬг 11е 5ег Аар Азр Ьеи С1у С1п
85 90 95
ТЬг ТЬг Ьеи С1и ν&ι РЬе Ьуз С1и Азр 61 у Ьуз ТЬг Ьеи Уа1 Зег Ьуз
100 105 но
Ьуз Уа1 ТЬг Зег Ьуз Азр Ьуз Зег Зег ТЫ 61и 61и Ьуз РЬе Азп 61и
115 120 125
Ьуз С1у 61и Уа1 5ег 61и Ьуз Не Не ТЬг Агд А1а Азр С1у ТЬг Агд
130 135 140
Ьеи С1и Туг ТЬг С1у Не Ьуз Зег Азр 61у Зег 61у Ьуз А1а Ьуз С1и
145 150 155 160
Уа1 Ьеи Ьуз С1у Туг Уа1 Ьеи 61и 61 у ТЬг Ьеи ТЬг А1а С1и Ьуз ТЬг
165 170 175
ТЬг Ьеи Уа1 Уа1 Ьуз О1и 61у ТЬг Уа1 ТЬг Ьеи Зег Ьуз Азп Не Зег
180 185 190
Ьуз Зег 61у С1и Уа1 Зег С1и Ьеи Азп Аэр ТЬг Азр Зег Зег А1а
195 200 205
А1а ТЬг Ьуз Ьуз ТЬг А1а А1а Тгр Азп Зег С1у ТЬг Зег ТЬг Ьеи ТЬг
210 215 220
Не ТЬг Уа1 Азп Зег Ьуз Ьуа ТЬг Ьуз Азр Ьеи Уа1 РЬе ТЬг Ьуз С1и
225 230 235 240
Азп ТЬг 11е ТЬг Уа1 С1п С1п Туг Азр Зег Азп 61у ТЬг Ьуз Ьеи С1и
245 250 255
<31у Зег А1а Уа1 С1и 11е ТЬг Ьуз Ьеи Азр С1и 11е Ьуз Азп А1а Ьеи
260 265 270
Ьуз <210> 9 <211> 8 <212> БЕЛОК <213> Синтетическая <220>
<221> СМЕШ_ПРИЗНАК <222> (4)..(4) <223> X обозначает (31и или 01у <220>
<221> СМЕШ_П РИЗН АК <222> (5)..(5) <223> X обозначает Меб или Не <220>
<221> СМЕШ_ПРИЗНАК <222> (6)..(6) <223> X обозначает Ьуе, ТЬг или Е1у <400> 9
Ьеи Рго С1у Хаа Хаа Хаа Уа1 Ьеи
5 <210> 10 <211> И <212> БЕЛОК <213> Синтетическая <220>
<221> СМЕШ_ПРИЗНЙК <222> (6)..(6) <223> X обозначает Аэп, Зег, или Азр <220>
<221> СМЕШ_ПРИЗНАК <222> (11)..(11) <223> X обозначает Уа1, или ТЬг <400> 10
61у ТЬг Зег Азр Ьуз Хаа Азп С1у Зег 61у Хаа 15 10 <210> 11 <211> 31 <212> БЕЛОК <213> Синтетическая <220>
<221> СМЕШ_ПРИЗНАК <222> (1)..(1) <223> Хаа обозначает Азп, Н1з, или 61и <220>
<221> СМЕП1_ПРИЗНАК <222> (3)..(3) <223> Хаа обозначает 5ег, Рго, Ьеи, А1а, или Зег <220>
<221> СМЕШ ПРИЗНАК <222> (4)..(4)
- 39 023888 <223> Хаа обозначает Ьуз или Азп <220>
<221> СМЕШ_ПРИЗНАК <222> (8).,(3) <223> Хаа обозначает Уа1 или Не <220>
<221> СМЕШ_ПРИЗНАК <222> (9) . . (9) <223> Хаа обозначает Зег или ТЕг <220>
<221> СМЕШ_ПРИЗНАК <222> (10).,(10) <223> Хаа обозначает Уа1 или А1а <220>
<221> СМЕШ_ПРИЗНАК <222> (11) . . (И) <223> Хаа обозначает б1и или А1а <220>
<221> СМЕШ_ПРИЗНАК <222> (13)..(13) <223> Хаа обозначает Азп или Азр <220>
<221> СМЕ111_ПРИЗНАК <222> (15)..(15) <223> Хаа обозначает ТНг или Зег <220>
<221> СМЕШ__ПРИЗНАК <222> (16)..(16) <223> Хаа обозначает Азр или Агп <220>
<221> СМЕШ_ПРИЗНАК <222> (17)..(17) <223> Хаа обозначает 5ег или ТЕг <220>
<221> СМЕ1Н_ПРИЗНАК <222> (18)..(18) <223> Хаа обозначает Зег или ТНг <220>
<221> СМЕ1П_ПРИЗНАК <222> (19)..(19) <223> Хаа обозначает А1а, С1п, или Агд <220>
<221> СМЕШ_ПРИЗНАК <222> (25)..(25) <223> Хаа обозначает А1а или 01у <220>
<221> СМЕШ_ПРИЗНАК <222> (26)..(26) <223> Хаа обозначает А1а, Ьуз, или ТЕг <220>
<221> СМЕН] ПРИЗНАК
- 40 023888
<222> <223> 128} , - [23) Хаа обозначает Азп или Аар
<2202
<221> СМЕЛ! ПРИЗНАК
<222> (29)..(29)
<223> Хаа обозначает Зег или А1а
<220>
<2212 СМЕШ ПРИЗНАК
<2222 ¢30)-.(30)
<223> Хаа обозначает <31 у, Азп, или Ьув
<4 00> 11
Хаа Не Хаа Хаа Зег С1у 51и Хаа Хаа Хаа Хаа Ьеи Хаа Азр Хаа Хаа
10 15
Хаа Хаа Хаа А1а ТЬг Ьуз Ъуз ТЬг Хаа Хаа Тгр Хаа Хаа Хаа ТЬг 20 25 30 <210> 12 <211> 21 <2122 БЕЛОК <213> Синтетическая <2202 <2212 СМЕШ_ПРИЗНАК <222> (2)..(2) <223> Хаа обозначает Азп или А1а <220>
<221> СМЕШ_ПРИЗНАК <2222 (5)..(5) <223> Хаа обозначает Ьуз или Азп <220>
<221> СМЕШПРИЗНАК <2222 (Э)..(Э) <223> Хаа обозначает 5ег, Азп, Ьуз, или ТЬг <2202 <2212 СМЕШПРИЗНАК <2222 (14) . .(14)
<223> Хаа обозначает ТЬг или Луз
<220>
<221> СМЕШ ПРИЗНАК
<222> (15) -.(15)
<2232 Хаа обозначает ТЬг или Ьуа
<220>
<2212 СМЕШ ПРИЗНАК
<222> (17) -·(17)
<223> Хаа обозначает Азр или Ьуз
<2202
<221> СМЕШ . ПРИЗНАК
<222> (19) .. (19)
<223> Хаа обозначает Не или Ъеи
- 41 023888 <4О0> 12
Зег Хаа С1у ТЬг Хаа Ьеи С1и С1у Хаа А1а Уа1 С1и Не Хаа Хаа Ьеи 15 10 15
Хаа 51и Хаа Ьуз Азп 20 <210> 13 <211> 154 <212> БЕЛОК <213> КЫр1серЬа1из аррепШси1аРиз <400> 13
Меб Ьуз А1а РЬе РЬе Уа1 Ьеи Зег Ьеи Ьеи Зег ТЬг А1а А1а Ьеи ТЬг 15 10 15
Аэп А1а А1а Агд А1а С1у Агд Ьеи 61у Зег Азр Ьеи Азр ТЬг РЬе С1у 20 25 30
Агд Уа1 Нйз С1у Азп Ьеи Туг А1а С1у 11е С1и Агд А1а 01у Рго Агд 35 40 45
С1у Туг Рго С1у Ьеи ТЬг А1а Зег 11е С1у С1у С1и ”а1 С1у А1а Агд 50 55 60
Ьеи С1у С1у Агд А1а 01у Уа1 С1у Уа1 Зег Зег Туг С1у Туг С1у Туг 65 70 75 60
Рго Зег Тгр Е1у Туг Рго Туг С1у С1у Туг С1у С1у Туг Е1у С1у Туг 85 90 95
С1у С1у Туг С1у С1у Туг Азр С1п С1у РЬе С1у Зег А1э Туг С1у С1у 100 ' 105 110
Туг Рго С1у Туг Туг С1у Туг Туг Туг Рго Зег С1у Туг С1у Е1у 31у 115 120 125
Туг Е1у С1у Зег Туг С1у 61у Зег Туг С1у С1у Зег Туг ТЬг Туг Рго 130 135 140
Азп Уа1 Агд А1а Зег А1а С1у А1а А1а А1а 145 150
<210> 14
<211> 184
<212> БЕЛОК
<213> 1хос1е5 5сари1аг15
<4 00> 14
- 42 023888
МеС 1 Агд ТЬг А1а РЬе 5 ТЬг Суз А1а Ьеи Ьеи А1а 10 11е Зег РЬе Ьеи 15 61 у
Зег Рго Суз Зег Зег Зег С1и Азр С1у Ьеи 61 и 61п Азр ТЬг 11е Уа1
20 25 30
61и ТЬг ТЬг ТЬг 61п Азп Ьеи Туг 61и Агд Шз Туг Агд Азп Шз Зег
35 40 45
61у Ьеи Суз С1у А1а <51п Туг Агд Аэп Зег Зег ΗΪ3 А1а 61и А1а 7а1
50 55 60
Туг Азп Суз ТЬг Ьеи Азп ΗΪ3 Ьеи Рго Рго Уа1 Уа1 Азп А1а ТЬг Тгр
65 70 75 80
С1и С1у 11е Агд Н1з Агд Не Азп Ьуз ТЬг 11е Рго 61п РЬе Уа1 Ьуз
85 90 95
Ьеи 11е Суз Азп РЬе ТЬг ν*ι А1а МеЬ Рго 61п 61и РЬе Туг Ьеи Уа1
100 105 110
Туг Мер 61у Зег Азр С1у Αδη Зег Азр РЬе 61и 61и Азр Ьуз С1и Зег
115 120 125
ТЬг 61у ТЬг Азр 61и Азр Зег Азп ТЬг б1у Зег Зег А1а А1а А1а Ьуз
130 135 140
Уа1 ТЬг 61и А1а Ьеи 11е 11е 61и А1а 61а 61и Азп Суз ТЬг А1а Н1з
14 5 150 155 160
Не ТЬг С1у Тгр ТЬг ТЬг С1и ТЬг Рго ТЬг ТЬг Ьеи 61и Рго ТЬг ТЬг
165 170 175
С1и Зег С1п РЬе 61и А1а 11е Рго
180
<210> 15
<211> 17 7
<212> ; 5ЕЛОК
<213> Хходез зсари1аг!5
<400> 15
МеЬ Агд ТЬг А1а Ьеи ТЬг Суз А1а Ьеи Ьеи А1а Не Зег РЬе Ьеи 61у
1 5 10 15
Зег Рго Суз Зег Зег Зег С1и 61 у 61 у Ьеи 61и Ьуз Азр Зег Агд Уа1
20 25 30
С1и ТЫ ТЬг ТЬг С1п Азл Ьеи Туг 61и Агд Туг Туг Агд Ьуз ΗΪ3 Рго
- 43 023888
40 45
С1у Ьеи Суз С1у А1а С1п Туг Агд Азп Зег Зег НЬз А1а С1и А1а Уа1 50 55 60
Туг Азп Суз ТЬг Ьеи Зег Ьеи Ьеи Рго Ьеи Зег Уа1 Азп ТЬг ТЬг Тгр 65 70 75 30
С1и С1у Не Агд НЬз Агд Не Азп Ьуз ТЬг Не Рго С1и РЬе Уа1 Азп 35 90 95
Ьеи Не Суз Азп РЬе ТЬг УаЬ А1а МеЬ Рго Азр С1п РЬе Туг Ьеи Уа1 100 105 110
Туг МеЪ С1у Зег Азп СЬу Азп Зег Туг Зег С1и С1и Азр С1и Азр С1у 115 120 125
Ьуз ТЬг С1у Зег Зег А1а А1а Уа1 С1п Уа1 ТЬг С1и 61п Ьеи Не Не 130 135 140
С1п А1а С1и 61и Азп Суз ТЬг А1а НЬз Не ТЬг СЬу Тгр ТЬг ТЬг С1и 145 150 155 160
А1а Рго ТЬг ТЬг Ьеи С1и Рго ТЬг ТЬг С1и ТЬг 61п РЬе 61и А1а Не 165 170 175
Зег <210> 16 <211> 19 <212> БЕЛОК <213> ТпПиепга А уЬгиз <400 16
Рго А1а Ьуз Ьеи Ьеи Ьуз С1и Агд СЬу РЬе РЬе СЬу А1а Не А1а С1у 15 10 15
РЬе Ьеи С1и <210 17 <211> 23 <212> БЕЛОК <213> ЬпПиепга А уЬгиз <400> 17
Рго А1а Ьуз Ьеи Ьеи Ьуз С1и Агд С1у РЬе РЬе СЬу А1а Не А1а С1у 15 10 15
РЬе Беи С1и С1у Зег 61у Суз 20
<210> 18
<211> 19
<212> БЕЛОК
<213> 1п£1иепга В \Чгиз
<400> 18
Азп Азп А1а ТЬг РЬе Азп Туг ТЬг Азп Уа1 Азп Рго 11е Зег Нгз Не
10 15
Агд С1у Зег <2105 19 <211> 24 <212> БЕЛОК <213> 1п£1иепга А νΐгиз <400> 19
МеС Зег Бен Беи ТЬг 31и ν&Ι С1и ТЬг Рго Не Агд Азп С1и Тгр С1у 15 10 15
Суз Агд Суз Азп Азр Зег Зег Азр 20 <210> 20 <211> 24 <212> БЕЛОК <213> 1п£1иепга А νίΓ45 <400> 20
МеС Зег Беи Беи ТЬг 61и Уа1 61и ТЬг Рго ТЬг Агд Азп С1и Тгр С1и 1 5 10 ' 15
Суз Агд Суз Зег Азр Зег 5ег Азр 20 <210> 21 <211> 24 <212> БЕЛОК <213> 1п£1иепга А νίτ«3 <400> 21
МеС Зег Беи Беи ТЬг С1и Уа1 С1и ТЬг Беи ТЬг Агд Азп С1у Тгр 31у 15 10 15
Суз Агд Суз Зег Азр Зег Зег Азр 20 <210> 22 <211> 8 <212> БЕЛОК <213> 1п£1иепга Α νίτυε <400> 22
С1и Уа1 С1и ТЬг Рго ТЬг Агд Αδη
5 <210> 23 <211> 23 <212> БЕЛОК <213> 1п£1иепга Α уд.гиз <400> 23
Зег Ьеи Ьеи ТЬг СЬи Уа1 С1и ТЬг Рго Не Агд Азп СЬи Тгр С1у Суз 15 10 15
Агд Суз Азп Азр Зег Зег Азр 20 <210> 24 <211> 17 <212> БЕЛОК <213> 1ь£1иепга Α .Ίγίξ <400> 24
Зег Беи Ьеи ТЬг С1и УаЬ С1и ТЬг Рго 11е Агд Азп С1и Тгр С1у Суз 15 10 15
Агд <210> 25 <211> 6 <212> БЕЛОК <213> 1п£1иепга В νίτυΞ <400> 25
МеЕ Ьеи С1и Рго РЬе С1п 1 5 <210> 26 <211> 12 <212 > БЕЛОК <213> 1п£1иепга В νίτϋδ <400> 26
Ьеи С1и Рго РЬе С1п 11е Ьеи Зег 11е Зег С1у Суз 15 10 <210> 27 <211> 24 <212> БЕЛОК <213> Ανίβη 1л£1иепга Α νίπΐ5 ЗиЬЬуре Η5Ν1 <400> 27
МеЬ Зег Ьеи Ьеи ТЬг С1и Уа1 С1и ТЬг Ьеи ТЬг Агд Азп С1у Тгр С1у 15 10 15
Суз Агд Су5 Зег Азр Зег Зег Азр 20 <210> 28 <211> 28 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 28
Агд Ьуз Агд Агд Зег Шз Азр Уа1 Ьеи ТЬг Уа1 С1п РЬе Ьеи Не Ьеи 15 10 15
С1у Мер Ьеи С1у Мер ТЬг 11е А1а А1а ТЬг Уа1 Агд 20 25 <210> 29 <211> 84 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 29 аддааасдсс дЬЬсссаЬда ЬдЬЬсЬдасЬ дьдсааььсс СааЫЬЬддд саЬдсЬдддс 60 аСдасааЬсд садсЬасддЬ Ьсдс 84 <210> 30 <211> 84 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 30
ЬссЫЬдсдд саадддЬасЬ асаадасЬда сасдЬЬаадд аЬЬаааассс дЬасдасссд 60
ЬасЬдЬЬадс дЬсдаЬдсса адсд 84 <210> 31 <211> 28 <212> БЕЛОК
- 47 023888 <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 31
Агд Ьуз Агд Агд 5ег Ήιβ Аар Уа1 Ьеи ТЬг 7а1 С1п РЬе Ьеи Не Ьеи 15 10 15
С1у Μθΐ. Ьеи А1а Суз Уа1 С1у А1а А1а ТЬг Уа1 Агд 20 25 <210> 32 <211> 64 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 32 аддааасдсс де^сссаЬда ЁдЫтсТдасС дкдсаатЕсс ЁааСЬТСддд саСдсЬддсЬ 60
ЪдСдЪсддад садс^ассдЬ деда 84 <210 33 <211> 84 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220 <223> Синтетическая Конструкция <400> 33 ^ссСЬЪдсдд саадддСас£ асаадасЬда сасдЫгаадд а^Ъаааассс дЬасдассда 60 асасадссТс дЬсда£;ддса сдсЬ 84 <210> 34 <211> 23 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 34
С1п Ьуе Ьуз Агд С1у С1у ТЬг Азр Тгр МеЬ 5ег Тгр Ьеи Ьеи \/а1 Не 15 10 15
С1у МеЬ Ьеи С1у МеЬ ТЬг Не А1а А1а ТЬг Уа1 Агд 20 25
<210> 35
<211> 84
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 35 саааадааас дддддддаас адас£дда£д адс£ддсЬдс СсдСааЪсдд саЦдсЬдддс 60 аЬдасааЬед садсЬасддЬ Ссдс 84 <210> 36 <211> 84 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 36 дЬСЬЬсЪСЬд сссссссЬДд ЪсЬдассЬас Ьсдассдасд адсаЬЬадсс дЪасдасссд 60
ЬасЬдСЪадс дЬсдаЬдсса адсд 84 <210> 37 <211> 26 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 37
С1п Ьуз Ьуа Агд С1у С1у Ъуа ТЬг С1у Не А1а Уа1 МеЬ Не С1у МеЬ 15 10 15
Ьеи А1а Суз Уа1 С1у А1а А1а ТЬг Уа1 Агд 20 25 <210> 38 <211> 78 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 38 саааадааас дсдддддааа дасаддсаНа дс±д£даСда ЬаддсаСдс!: ддсСЬд1:д1:с 60 ддадсадсСа ссдСдсда 78 <210> 39 <211> 78 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция
- 49 023888 <400> 39 дЪЬСЪсЪГСд сдсссссМ;!: сЬдЬссдЬаЬ сдасасГасГ аЬссдГасда ссдаасасад 60 ссЬсд£сдаЪ ддсасдсъ 78 <210> 40 <211> 793 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 40
МеЬ Зег С1у Агд Ьуз А1а С1п С1у Ьуз ТЬг Ьеи О1у Уа1 Азп Ме-Ь Уа1 15 10 15
Агд Агд С1у Уа1 Агд Зег Ьеи Зег Αδη Ьуз Не Ьуз С1п Ьуз ТЬг Ьуз 20 25 30
С1п Не С1у Азп Агд Рго С1у Рго Зег Агд С1у Уа1 С1п С1у РЬе 11е 35 40 45
РЬе РЬе РЬе Ьеи РЬе Азп 11е Ьеи ТЬг С1у Ьуз Ьуз Не ТЬг А1а Ηϊε 50 55 60
Ьеи Ьуз Агд Ьеи Тгр Ьуз МеГ Ьеи Азр Рго Агд С1п С1у Ьеи А1а Уа1 65 70 75 60
Ьеи Агд Ьуз 7а1 Ьуз Агд Уа1 7а1 Зег Ьеи МеЬ Агд С1у Ьеи Зег Зег 85 90 95
Агд Ьуз Агд Агд Зег ΗΪ3 Азр Уа1 Ьеи ТЬг Уа1 С1п РЬе Ьеи Не Ьеи 100 105 110
С1у МеГ Ьеи С1у МеГ ТЬг Не А1а А1а ТЬг Уа1 Агд Ьуз С1и Агд Азр 115 120 125
О1у Зег ТЬг Уа1 Не Агд А1а С1и С1у Ьуз Азр А1а А1а ТЬг <31п \/а1 130 135 140
Агд Уа1 С1и Азп С1у ТЬг Суз Уа1 Не Ьеи А1а ТЬг Азр Μβΐ С1у Зег 145 150 155 160
Тгр Суз Азр Азр Зег Ьеи Зег Туг С1и Суз Уа1 ТЬг Не Азр С1п С1у 165 170 175
С1и С1и Рго Уа1 Азр νβΐ Азр Суз РЬе Суз Агд Азп Уа1 Азр С1у Уа1 180 185 190
- 51 023888
РЬе ТЬг Уа1 Зег Зег С1и Ьуз ТЬг Не Ьеи ТЬг Мер Е1у С1и Туг 31у 450 455 460
Азр Уа1 Зег Ьеи Ьеи Суз Агд \Га1 А1а Зег С1у Уа1 Азр Ьеи А1а С1п 465 470 475 480
ТЬг УаЬ 11е Ьеи С1и Ьеи Азр Ьуз ТЬг Уа1 С1и ΗΪ3 Ьеи Рго ТЬг А1а 485 490 495
Тгр С1п Уа1 Н1з Агд Азр Тгр РЬе Азп Азр Ьеи А1а Ьеи Рго Тгр Ьуз 500 505 510
Ηί5 Е1и С1у А1а Агд Азп Тгр Азп Азп А1а Е1и Агд Ьеи 7а1 Е1и РЬе 515 520 525
Е1у А1а Рго Шз А1а Уа1 Ьуз Мер Азр Уа1 Туг Азп Ьеи С1у Азр Е1п 530 535 540
ТЬг 61у Уа1 Ьеи Ьеи Ьуз А1а Ьеи А1а С1у 'Ра! Рго Уа1 А1а Ηίδ Не 545 550 555 560
Е1и <51у ТЬг Ьуз Туг Н1з Ьеи Ьуз Зег 61у Шз Уа1 ТЬг Суз <31и Уа1 565 570 575
С1у Ьеи С1и Ьуз Ьеи Ьуз Мер Ьуз С1у Ьеи ТЬг Туг ТЬг Мер Суз Азр 580 585 590
Ьуз ТЬг Ьуз РЬе ТЬг Тгр Ьуз Агд А1а Рго ТЬг Азр Зег Е1у Н1з Азр 595 600 605
ТЬг Уэ1 Уа1 Мер С1и Уа1 ТЬг РЬе Зег ЕЬу ТЬг Ьуз Рго Суз Агд 11е 610 615 620
Рго Уа1 Агд А1а Уа1 А1а Шз С1у Зег Рго Азр Уа1 Азп Уа1 А1а Мер 625 630 635 640
Ьеи 11е ТЬг Рго Азп Рго ТЬг 11е 51и Азп Азп Е1у С1у С1у РЬе 11е 645 650 655
Е1и Мер Е1п Ьеи Рго Рго С1у Азр Азп 11е 11е Туг ’/□ 1 С1у С1и Ьеи 660 665 670
Зег Туг С1п Тгр РЬе С1п Ьуз С1у Зег Зег Не Е1у Агд Уа1 РЬе С1ь 675 680 685
Ьуз ТЬг Ьуз Ьуз С1у 11е С1и Агд Ьеи ТЬг Уа1 Не С1у СЬи Шз А1а 690 695 700
- 52 023888
Тгр Азр РЬе С1у Зег А1а 61у <31у РЬе Ьеи 5ег Зег Не С1у Ьуз А1а
705 710 715 720
Ьеи Н1з ТЬг Уа1 Ьеи С1у 61у А1а РЬе Азп Зег Не РЬе С1у С1у т/а1
725 730 735
С1у РЬе Ьеи Рго Ьуз Ьеи Ьеи Ьеи С1у Уа1 А1а Ьеи А1а Тгр Ьеи С1у 740 745 750
Ьеи Азп Ме5 Агд Азп Рго ТЬг МеЪ Зег МеЬ Зег РЬе Ьеи Ьеи А1а О1у 755 760 765
Уа1 Ьеи Уа1 Ьеи А1а МеЬ ТЬг Ьеи 61у Уа1 С1у А1а Азр €1п С1у Суз 770 775 780
А1а Не Азп РЬе С1у Ьуз Агд С1и Ьеи
785 790 <210> 41 <211> 2500 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 41
адЬаааЪссС д-Сд-^дсЪааЪ бдаддЪдсаб 5дд5с6дсаа а£сдад££дс Ьаддсаа^аа 60
асаса'ЬЬ'бдд аЪЪааЪЬЪЬа абсдЫ: сдЬЪ дадсдаЪЪад сададаасСд ассадааса5 120
дЬсЕддЬсд! ааадсЬсадд дааааасссЬ дддсдЬсаа5 а!дд5асдас даддадЬСсд 180
с6ссЬ5д5са аасаааабаа аасаааааас аааасаааЬб ддааасадас сРддасс56с 240
аададдСд!Ь сааддаЬ5Ьа ίοίϊΗϊαΙΙ ЬЫдЬЬсаас а^ЬИдасЬд даааааадаЬ 300
сасадсссас сбааададдЬ Рд-ЬддааааЬ дсбддассса адасааддсС. ЕддсЕд^Ъс·!: 360
ааддааад£с аадададЬдд Ьддссад£££ даСдададда ЬЬдЬссЬсаа ддааасдссд 420
1:5ссса5да5 дЬ5с5дасЬд ЬдсааЬ^ссЬ аа£Ы:Рдддс аЬдсСдддса £дасга£сдс 480
адс5асдд61: сдсааддааа дадасддсад 5асддЪса£а сдсдсддаад дЪаадда^дс 540
сдсЬасссаа дЬдадад£дд ааааЬдд^ас с5дсд5са££ сЬддссассд асаИдддсЪс 600
ХСдд^дСдаС даЕадссьиг сисагдадьд сдьаассаьа даесаадд1:д аддаассьдь 660
Ьдасд15да5 ЬдсЬЬс^дсс дааасдЬдда Ъдддд^дЪаС. с5сдааЬа1;д дасддСдЬдд 720
Ъааасаадаа ддаадсадаа ссадасдсЬс адЪдсИа! а ссс1:сссасд сЬсааддада 780
дсЪдассдда сддддасэ1;а ааЪддсъдда дддсдас^са с£ссдаасзс аЫ:^дасссд 840
сдЬсдадддс ЪдддЬсЬдда аааа5сддсЬ д5£ддсссЬс дс!аЬдд5да садтсдтЫд 900
- 53 023888
дс^сасдсГд дадЬсСдЬдд М:асЬсдсдЪ ддсадСдс^д дЪдд£дсЪсс ЪсЬдЪс^дс 960
ссс£д£сЪас дсдЪссадд!: д^ас^саЫгГ ддаааасада даЪЪ£СдЬса ссддсассса 1020
ддддасдас!: сддд1:аассс £дд(:дс£1; да асЬддд1:ддЬ Сдсд£1;ас1:а ЬСассдсЬда 1080
дддсааассс £сьа1:ддаъд £дСддсСдда 1дааа1:с1:аЬ саддадаа1:с ссдсасааас 1140
садддаа^а£ ЪдссССсасд сааадс£д£с сда^асааад д£сдсддс£а дд!дсссаас 1200
ааЬдддассд дссасссСдд сддаддааса £садддадд£ асад^д^дса аасдддасса 1260
дадЪдаЪада ддс1;дддд£а а!сас1:дсдд ссЬдЫсддс аааддаад1:а ^ЬдЁсдс^Ьд 1320
сд^сааддса дсс1д£.дадд ссааааадаа ддс£ас£ддд сасдЪсЬаЬд асдссаасаа 1380
даЁсд£1; СаЪ асад£дааад £ддаассаса сасаддддач £асд£ддсдд ссаасдадас 1440
Ьса££ссдд£ сдсаааасдд ссадсЬЁсас сдЬдСсаСсс даааадасса Гсс1;сас1:а1: 1500
дддддадЬа^ ддсдасдМ: Ъ сЪсЬдсссЪд ссдддЪддсЬ адсддад1:сд ассЁддссса 1560
дасадЪсаЪс с£ддаас£дд аЬаааасад·): ЪдадсаЪсЪд ссЬассдс^Ь ддсаддЪдса 1620
саддда££дд ££Ъаасдасс ЪЬдсссЪдсс аЪддааасаЪ дааддадсда дааасЪддаа 1680
ЪааЪдсадад сдасЬсдЪад ааЪЪсддЪдс ссс£са£дсс д£даада£дд асдссаасаа 1740
ЪсЪдддЪдаС садассддсд 1:1:01:001:1.33 адсЪсЪсдсЪ ддсдЬассад ЪЪдсссасаЬ 1800
сдааддаасд аадСассасс ЪдаадЪсадд ссаСд£аас1: £дсдадд1:дд дссЪддадаа 1860
дъъдааааъд аааддЪсЪЬа сдЪасасааЪ дЪдЬдасаад ассаадЪ^са саЪддаадад 1920
ддсссссаса да1:адсддсс асдасасЪдЪ ддгдаъддад дгдасс£ ъъг сЬддаасааа 1980
асссЬдсада а£асссд£дс дддсИдСадс ^сасдда^сЬ сссдаЪдЪса аЬдЪСдсЬа·!: 2040
дсЬдаЬЬаса ссЪаасссЪа ссаЪсдадаа ίаасдд^дди дд-ЬИГ.ЬаП'Ьд ада£дсадс£ 2100
£ссдссаддс да^аасаЪса Ьс1:асд1:ддд сдаасЬсЪеЪ ЪассадЪддЪ еесадааадд 2160
дадСЛсааС^ дддсдддЪсЪ Ьссаааааас даадааддда аСсдаасда! ЪдасддЪЬаС 2220
сддсдадсас деа£дддаЪ£ СЪддЪЪссдс адддддаС1:с сЪдЪсХЪсЪа ίЪддЪааддс 2280
аседса£эсс д^дсЪддддд дсдсаЪ^саа Ь ЪсЬаЪ^Ыхс дддддсдГдд ддЪСссСдсс 2340
ЬааасЪсс^д сЪдддад1:ад ссс1:ддсс1д д££дддасгд аагаъдсдда аСссдасдаС 2400
дСссаЪдСса £Ъсс^сЪЪдд ссддсдСдсЬ Сд£ас1;ддсс а^дасасЪдд дсдССддсдс 2460
сда^саадда ^дсдссаЬса асХЬЬддсаа дадададсИс 2500
<210> <211> <212> <213> 42 2496 ДНК Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая Конструкция
<400> 42
- 54 023888
ЪсаЪЪ1адда сасасдаНа асбссасдба ассадасдбб бадсбсаасд абссдббабб 60
£д{;д£ааасс бааНааааб бадсаадсаа сбсдсбаабс дбсбсббдас бддб сб бдба 120
садассадса бббсдадбсс ебббббддда сссдсадбба бассабдсбд сбссбсаадс 160
даддаасад! ббдббббббд ббббдбббаа ссбб с д Ь сбд дассбддаад 240
Небеса сза дНесбаааб адааааадаа ааасаадббд баааасбдас еббббббеба 300
д^дЬсдддЪд дабббсбсса асассбббба сдассбдддб бсбдббссда ассдасаада 360
ббссббСсад ббсбсбсасс ассддбсааа сбасбсбссб аасаддадбб ссбббдсддс 420
аадддбасба саадасЬдас аедббаадда ббаааасссд басдасссдб асбдббадсд 480
бсдабдссаа дедЬбеебб! сбсбдссдбс абдссадбаб дсдсдссббс саббссбасд 540
дсдабдддбб сасбсбсасс ббббассабд дасдсадбаа дассддбддс бдбасссдад 600
аассасасба сбабсддааа даабасбсас дсаббддбаб сбадббссас бссббддаса 660
асбдсаасба асдаадасдд сбббдсассб ассссасаба дадсббабас сбдссасасс 720
аИ Сдб бсП сс ббедб сб £ ддбебдедад бсасдаабаб дддадддбде дадббссбсб 760
сдасбддссб дссссбдбаб ббассаассб сссдсбдадб даддеббдбд бааасбдддс 340
дсадсбсссд асссадассб ббббадссда саассдддад сдабассасб дбсадсааас 900
сдадбдсдас сбсадасасс аабдадсдса ссдбсасдас сассасдадд адасадаасд 960
дддасадабд сдсаддбсса сабдадбааа ссббббдбсб сбаааасадб ддссдбдддб 1020
сссссдсбда дессаббддд ассасдаасб бдасссасса асдсаабдаб аабддсдасб 1080
сссдПСддд адабассбас асассдассб аедббадаба дбссбсббад ддедбдбббд 1140
дбсссИаба аеддаадбде дбббсдасад дсбабдбббс садсдссдаб ссасдддббд 1200
Насссбддс сддбдддасс дссбссббдб адбсссбсса бдбсасасдб ббдсссб ддб 1260
сбсасбабсб ссдассссаб бадбдасдсс ддасаадссд бббссббсаб аасадсдаас 1320
деадПеедб сддасасбсс ддбббббеэб ссдабдассс дбдсадабас бдеддббдбб 1380
сбадсаааба бдбеасбббс ассббддбдб дбдбссссба абдсассдсс ддббдсбсбд 1440
адбааддсса дсдббббдсс ддбедаадбд дсасадбадд СббббСбддб аддадсдаба 1500
сссссбсаба ссдсбдсааа дадасдадас ддсссассда бсдссбсадс бддассдддб 1560
сбдбсадбад дассббдасс баббббдбеа асбсдбадас ддабддсдаа ссдбссасдб 1620
дбсссбаасс аааббдебдд ааедддаедд бассбббдба сббссбсдсб сбббдассбб 1680
анасдбсбс дсбдадсабс ббаадссасд дддадбаедд сасббсбасс бдеадабдбб 1740
адасссасба дбсбддссдс аададдаабб бсдададсда ссдсабддбс ааедддбдба 1800
дсббссссдс ббсабддбдд асббсадбсс ддбасаббда асдсбссасс сддассбсбб 1660
саасНесас бббссадааб дсабдбдбба сасасбдббс бддббсаадб СЬсССббСбС 1920
- 55 023888
ссдддддЬд* сЪаЬсдссдд ЬдсЬаЬдаса ссасСассЬс сасТ:ддаааа дассЪРдЬСЁ 1980
(;дддасд1;сЬ 1;а1;дддсасд сссдасаЬсд адЬдссЬада дддсЪасадЪ ЬасаасдаЬа 2040
сдас1аа£д£ ддаЬЬдддаЪ ддЬадсЬсЬЪ аЬЬдссасса ссааааЬаас £сЬасд£сда 2100
аддсддЬссд с^аНдЬадС адаЬдсассс дс^Сдадада а^ддЬсасса аад^сС^Ьсс 2160
с£саадЪ£аа сссдсссада аддЬРСЬЬЪд сгБсХСсссС ЬадсЪЪдсЪа ас£дссаа1;а 2220
дссдсЬсдСд сдЬасссЬаа аассааддсд ОсссссЬаад дасадаадаР аассаИссд 2280
СдасдЪаЬдд сасдассссс сдсдРаадЬЬ аадзЬаааад сссссдсасс ссааддасдд 2340
аОЬЬдаддас дасссЬсаЬс дддассддас саасссЬдас Ь^а^асдссЬ ЬаддсЬдсЬа 2400
'Ьасад'Ьаадд адаассддсс дсасдаасаЬ дассдд^ас! дСдасссдса ассдсддсЬа 2460
дпссЪасдс ддгад^гдаа ассд£ссьсь сЬсдад 2496
<210> 43 <2П> 193 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 43
МеЬ Зег С1у Агд Ьуз А1а С1п С1у Ьуз ТЬг Ьеи С1у Уа1 Азп Μβί νβΐ 15 10 15
Агд Агд С1у 7а1 Агд Зег Ьеи Зег Азп Ьуз Не Ьуз С1п Ьуз ТЬг Ьуз 20 25 30
С1п Не С1у Азп Агд Рго С1у Рго Зег Агд С1у Уа1 С1п СЬу РЬе Не 35 40 45
РЬе РЬе РЬе Ьеи РЬе Азп Не Ьеи ТЬг СЬу Ьуз Ьуз Не ТЬг А1а Шз 50 55 60
Ьеи Ьуз Агд Ьеи Тгр Ьуз МеС Ьеи Азр Рго Агд С1п С1у Ьеи А1а Уа1 65 70 75 60
Ьеи Агд Ьуз Уа1 Ьуз Агд Уа1 Уа1 А1а Зег Ьеи Ме£ Агд С1у Ьеи Зег 65 90 95
Зег Агд Ьуз Агд Агд Зег ΗΪ3 Азр Уа1 Ьеи ТЬг Уа1 С1п РЬе Ьеи Не 100 105 ПО
Ьеи С1у НеЬ Ьеи А1а Суз Уа1 С1у А1а А1а ТЬг Уа1 Агд Ьуз С1и Агд 115 120 125
Азр СЬу Зег ТЬг Уа1 11е Агд А1а С1и С1у Ьуз Азр А1а А1а ТЬг С1п
- 57 023888
645 650 655 (Ли Ме£ С1п Ьеи Рго Рго С1у Азр Азп Не Не Туг Уа1 С1у С1и Ьеи 660 665 670
Зег Туг С1п Тгр РЬе С1п Ьуз С1у Зег Зег 11е С1у Агд Уа1 РЬе С1п 675 680 685
Ьуз ТЬг Ьуз Ьуз С1у 11е С1и Агд Ьеи ТЬг Уа1 11е С1у (Ли ΗΪ3 А1а 690 695 700
Тгр Азр РЬе С1у Зег А1а С1у С1у РЬе Ьеи Зег Зег 11е С1у Ьуз А1а 705 710 715 720
Ьеи ΗΪ3 ТЬг \7а1 Ьеи С1у СЛу А1а РЬе Азп Зег 11е РЬе С1у С1у νδΐ 725 730 735
С1у РЬе Ьеи Рго Ьуз Ьеи Ьеи Ьеи С1у Уа1 А1а Ьеи А1а Тгр Ьеи С1у 740 745 750
Ьеи Азп Мер Агд Азп Рго ТЬг МеЬ Зег МеЪ Зег РЬе Ьеи Ьеи А1а <31у 755 760 765
Уа1 Ьеи Уа1 Ьеи А1а МеЬ ТЬг Ьеи С1у Уа1 С1у А1а Азр С1п 01 у Суз 770 775 780
А1а Ые Азп РЬе 01у Ьуз Агд С1и Ьеи 785 790 <210> 44 <211> 2500 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 44
адЬаааЬссЬ дЬдЬдсЬааЬ ЬдаддЬдсаЬ ЬддЬсЬдсаа аЬсдадЬСдс ЬаддсааЬаа 60
асасаЬЫздд а^ЬааРЬРЬа аЬсдЬЬсдЬЬ дадсдаЫад сададаасЬд ассадаасаЪ 120
дЬсЬддЬсдС ааадсЬсадд дааааасссЬ дддсдЬсааЬ ардд1;асдас даддадЬЬсд 180
сЬссЬЬдЬса аасааааЬаа аасаааааас аааасаааЬЬ ддааасадас сЬддассЬЬс 240
аададдЬдСЬ сааддаЬЬЬа ЬсЬЬЬЬЬсЬЬ ЬЫзд^Ьсаас аиьсдасгд даааааадаь 300
сасадсссас сЬааададдЬ ЬдЬддааааЬ дсьддассса адасааддсЬ ьддсьдььсь 360
ааддааадгс аадададсдд ЬддссадЬЬЬ даЬдададда ЬЬдЬссЬсаа ддааасдссд 420
ЬЬсссаСдаЬ дЫсЬдасЬд ЬдсааЬЬссЬ ааЬЬЬЬдддс аЬдсЬддсН дСдСсддадс 480
- 59 023888
адс^ассд^д сдаааадаас дсдасддаад сассдЁдаЁа адддсЁдадд дбааддаЁдс 54 0
ддсгасдсзд дЁдададЁад адааЁддсас ЁЁдсдЁааЁа сЁсдсдасЁд аеаСдддаЁс 600
сЁддИдбдас даЁадссЁса дЁЁаЁдаэЁд сдЁаасааЁа дассадддсд аадаассЁдЁ 660
ддасдИдас ЁдЁЁЁсЁдЁа даааЁдЁдда ЁддсдЁЁЁаЁ сЁддадЁасд дссдсЁдЁдд 720
аааасаддад ддсЁсасдаа сЁсдаадаЁс ЁдЁдсЁдаЁЁ ссаадСсасд сдсааддада 780
дЁЁдассддЁ ададдссаса адЁддсЁЁда аддддасЁса ЁЁдаддассс ассЁдасЁад 840
ддЕддадддЕ ЁдддЁЁЁдда адааЁсддЁЁ дсЁсдсдсЁс дсЁаЁддЁса ссдЁсдЁдЁд 900
дсЁдасасЁд дададЁдИсд ЁдасЁсдддЁ ЁдсЁдЁдЁЁд дЁЁдЁссЁсс СсЁдЁЁЁддс 960
сссадбдЁас дсдЁссаддЁ дЁасЁСаЁЁЁ ддаааасада даЁЁЁСдбса ссддсассса 1020
ддддасдасЁ сдддЁаассс ЁддЁдсЁЁда асЁдддЁддЁ ЁдсдЁЁасЁа ЁЁассдсЬда 1080
дддсааассс ЁсЁаЁддаЁд ЁдЁддсЁдда ЁдсааЁсЁаЁ саддадааЁс ссдсасааас 114 0
садддаабаЁ ЁдссЁЁсасд сааадсЁдЁс сдаЁасааад дЁсдсддсЁа ддЁдсссаас 1200
ааЁдддассд дссасссЁдд сддаддааса ЁсадддаддЁ асадЁдЁдса аасдддасса 1260
дадЁдаЁада ддсЁддддЁа аЁсасЁдсдд ссЁдЁЁсддс аааддаадЁа ЁЁдЁсдсЁЁд 1320
сд^сааддса дссЁдЁдадд ссааааадаа ддсЁасЁддд сасдЁСЁасд асдссаасаа 1380
даЁсдЁЁЁаЁ асадЁдааад Ёддаассаса сасаддддаЁ ЬасдЁддсдд ссаасдадас 14 4 0
ЁсаЁЁссддЁ сдсаааасдд ссадсЁЁсас сдЁдЁсаЁсс даааадасса ЁссЁсасЁаЁ 1500
дддддадЁаЁ ддсдасдЁЁЁ сЁсЁдсЁСЁд ссдддЁддсЁ адсддадЁсд ассЁддссса 1560
дасадЁсаЁс сЁддаасЁдд аЁаааасадЁ ЁдадсаЁСЁд ссЁассдсЁЁ ддсаддЁдса 1620
садддаЁЁдд ЁЁЁаасдасс ЁЁдсссЁдсс аЪддааасаЁ дааддадсда дааасЁддаа 1680
ЁааЁдсадад сдасЁсдбад ааЁСсддЁдс сссЁсабдсс дбдаадаЁдд асдЁсЁасаа 1740
ЁсЁдддЁдаЁ садассддсд ЁЁСЁссЁЁаа адсЁСЁсдсЁ ддсдЁассад ЁЁдсссасаЁ 1800
сдааддаасд аадЁассасс ЁдаадЁсадд ссаЁдЁаасЁ ЁдсдаддЁдд дссЁддадаа 1860
д££даааа£д аааддЁСЁЁа сдЁэсасааЁ дЁдЁдасаад ассаадЁЁса саЁддаадад 1920
ддсссссаса даЁадсддсс асдаГасЁдЁ ддЬдаЁддад дЁдассЁЁЁЁ сЁддаасааа 1980
асссЁдсада аЁасссдЁдс дддсЁдЁадс ЁсасддаЁс! сссдаЁдЁса аЁдЁЁдсЁаЁ 2040
дсСдаЁЁаса ссЁаасссЁа ссаЁсдадэа ЁаасддЁддЁ ддссЁЁаГЁд адаГдсадсЁ 2100
Ёссдссаддс даЁаасаЁса ЁсЁасдЁддд сдаасЁсЁсЁ. ЁассадЁддЁ ЁЁсадааадд 2160
дадЁЁсааЁЁ дддсдддЁсЁ Ёссаааааас даадааддда аЁсдаасдаЁ ЁдасддЁЁаЁ 2220
сддсдадсас дсаЁдддаЁЛ. ЁЁддЁЁссдс адддддаЁЁс сЁдЁсЁЁСЁа ЁЁддЁааддс 2280
асЁдсаЁасс дЕдсЕддддд дсдсаЁЁсаа ЁЁСЁЙЁЁЁЁС дддддсдЬдд ддЁЁссЁдсс 2340
ЁааасЁссЁд сЁдддадЁад сссЁддссЁд дЁЁдддасЁд ааЁаЁдсдда аЁссдасдаЁ 2400
- 60 023888 д£сса£д£са ЪЪссСсЪЪдд ссддсдЪдсР £д£ас£ддсс а'Ьдасас'Ьдд дсдЪЬддсдс 2460 сдаЪсаадда ЪдсдссаЬса ас^ЪЪддсаа дадададсЪс 2500 <210> 45 <211> 2500 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 45
СсаМт^адда сасасда£1:а ас^ссасд^а ассадасдМ: £адс£саасд аЪссдЪЪаЪ£ 60
Ьд^дГааасс дааГГааааб £адсаадсаа с£сдс£аа1:с д^сГс.Ъдас ЪддЪсХЪдЪа 120
садассадса 1;1;Ссдад^сс Οι ί ЪЪДддда сссдсадЪЪа ЪассаъдсЪд с£сс£саадс 180
даддаасадС ДСд£С£Ьа££ 1: £д£ Ь Ъд Ь ΐ:ΐ: Ъд £ аа сс^ббд^с^д дасс£ддаад 240
ЪЪс^ссасаа д^ссГаааб адааааадаа ааасаадГЁд ЬаааасЪдас сгГгЬЪГсга 300
дГдГсдддГд даЬбЪсбсса асассДЪР1:а сдассЬддд1: СсЬдЬЪссда ассдасаада 360
££сс££Ъсад ЁИс^сСсасс ассдд1:сааа с!ас£с£сс£ аасаддадЪЪ ссЪЪЪдсддс 420
аадддбасба саадас^дас асдЪЪаадда 1:6аааасссд басдассдаа сасадсеЪсд 480
Ссда^ддсас дсЬ^Ъ Сс±С.д сдс£дсс£Сс д-Ьддсас£а£ Ьсссдас^сс саДЪссЬасд 540
ссда£дсд£с сасИсИсаИс ИсС^ассдЬд аасдсаИзаИ дадсдс£дас ^а^асссСад 600
дассасасдд сЬа^сддадС саа-Ьас-Ызас дса^ЪдЪЪаЪ сЪдд^сссдс ЪЪсЪЪддаса 660
ссЪдсаасГд асааадаса£ сЪЪЪасасс! ассдсааа^а дассГсаЪдс сддсдасасс 720
£Ъ£Ъд1;сс£с ссдад£дсР£ дадс^съад асасдас£аа ддЬ^сад^дс дсд£1:ссЪс1; 780
саасСддсса Ъс£ссдд1.д£ ЪсассдаасЪ Дссссбдад!: аасГссДддд £ддас£да6с 840
ссассЪссса асссааасс£ £сГ£адссаа сдадсдсдад сдаЪассадЪ ддсадсасас 900
сдас^дбдас сДсГсасадс асГдадссса асдасасаас саасаддадд адасааассд 960
ддд£саса£д сдсадд^сса са^дад^ааа сс£С1:1:д£с£ с£аааасад£ ддссд£ддд£ 1020
сссс£дссда дссса^иддд ассасдаас!: £дасссасса асдсааРдаЬ аа^ддсдас!: 1080
сссдЁ'Ы.ддд адаСассСас асассдасс!: асдИада^а дИссИсССад ддсд£д£££д 1140
д^сссигаба асддаадцдс дс^Рсдасад ссРэДдг£тс садсдссдаЬ ссасдддЪРд 1200
С£ассс1;ддс сддЪдддасс дссЪссЫ:дС адбсссЬсса Сд£сасасд£ РЪдсссЪддЪ 1260
съсас£а!с£ ссдасссса£ £ад£дасдсс ддасаадссд ^ЪЪсс^ИсаИ аасадсдаас 1320
дсад^ЁссдГ сддасасСсс дд11ЛЪ£сЪ1: ссда1:дассс д^дсадаЪас ГдсддШдИ: 1380
с£адсааа£а ЪдЪсасЪЪЪс ассЪЪддЪдЬ д£д6сссс£а абдсассдсс дд£ЪдсЪс!:д 1440
адсааддсса дсдссглдсс ддЪсдаад^д дсасад£адд сЪЪ^ЪСЪддЪ аддадъдага 1500
- 61 023888
сссссСсаЬа ссдс^дсааа дадасдадас ддсссассда £сдсс1:садс Иддассддд! 1560
сЪдЮад^ад дасс'Ыздасс ЪаЪЬЫдСса ас^сдЪадас ддаЬддсдаа ссдЪссасд! 1620
д1;сссЬаасс аааЬ-ЬдсЬдд аасдддасдд ЪассЬЪЬд^а сЪ£сс£сдсЬ сЬЬЪдассЫ: 1680
аНасдЪсЪс дс^дадсаЮ Наадссасд дддад^асдд сас1ЛсС.асс Ъдсада^д^Ь 1740
адасссасиа дгсиддссдс аададдааН Ъсдададсда ссдсасдд^с аасддд1д£а 1800
дсСЮсСИдс ИсаИдд^дд ас£1сад£сс дд^асаИда асдс1;ссасс сддассЪсЪЪ 1860
саас£Шас Шссадаа! дса1:д1:дЬСа сасас^дИс ^ддИсаад^ дЬассИсЮ 1920
ссдддддЪдЪ с1а£сдссдд 1дс1;а1даса ссас!асс1:с сас^ддаааа дассИдГ^с 1980
^дддасдЪс!: 1а1дддсасд сссдаса£сд ад1дсс1ада дддс1асад! 1асаасда1а 2040
сдасЪааЪдЪ дда^Лдддэ!: дд^адсесИ аИдссасса ссааааЬаас ЪсСасдЁсда 2100
аддсдд^ссд сЬаМд^ад! ада£дсассс дс££дадада аЪдд!сасса аадЪсСЪЬсс 2160
съсаадггаа сссдсссада адд^глъььд ег^стиссе гадсгЛдсХа аспдссааЪа 2220
дссдсЬсдЪд сдЬассс^аа аассааддсд ЬсссссЬаад дасадаада! аассаЪЪссд 2280
1дасд1а1;дд сасдассссс сдсд1аад££ аада^аааад сссссдсасс ссааддасдд 2340
ашдаддас дассс!са1с дддассддас саассс^дас ί1аСасдсс£ 1аддс1дсса 2400
саддЪасад£ ааддадаасс ддссдсасда аса^дассдд 1:асСдСдасс сдсаассдсд 2460
дсСадЪЪссЪ асдсдд'ЬадЪ £дааассд££ сСсСсХсдад 2500
<210> 46 <211> 794 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 46
Мес Бег С1у Агд Ьуз А1а С1п С1у Ьуз ТЬг Ьеи С1у Уа1 Азп МеС Уа1 15 10 15
Агд Агд С1у Уа1 Агд Зег Ьеи Зег Азп Ьуз 11е Ьуз С1п Ьуз ТЬг Ьуз 20 25 30
С1п 11е С1у Азп Агд Рго С1у Рго Зег Агд С1у Уа1 С1п Й1у РЬе 11е 35 40 45
РЬе РЬе РЬе Ьеи РЬе Азп 11е Ьеи ТЬг 01у Ьуз Ьуз 11е ТЬг А1а Н1з 50 55 60
Ьеи Ьуз Агд Ьеи Тгр Ьуз Мер Ьеи Азр Рго Агд С1п 61у Ьеи А1а \Га1 65 70 75 80
- 64 023888
Азр Ьуз ТЬг Ьуз РЬе ТЬг Тгр Ьуз Агд А1а Рго ТЬг Азр Зег С1у Н1з 595 600 605
Азр ТЬг Уа1 Уа1 МеЬ С1и Уа1 СЬу РЬе Зег С1у ТЬг Агд Рго Суг Агд 610 615 620
Не Рго Уа1 Агд А1а Уа1 А1а ΗΪ3 С1у Уа1 Рго С1и Уа1 Азп Уа1 АЬа 625 630 635 640
МеС Ьеи Не ТЬг Рго Азп Рго ТЬг МеЬ С1и Азп Азп С1у СЬу СЬу РЬе 645 650 655
Не СЬи МеС СЬп Ьеи Рго Рго СЬу Азр Азп Не Не Туг νβΐ С1у Азр 660 665 670
Ьеи Азр НЬз СЬп Тгр РЬе СЬп Ьуз СЬу Зег Зег Не СЬу Агд УаЬ Ьеи 675 680 685
СЬп Ьуз ТЬг Агд 1>у5 СЬу 11е С1и Агд Ьеи ТЬг Уа1 Ьеи СЬу СЬи Низ 690 695 700
АЬа Тгр Азр РЬе СЬу Зег ν&1 СЬу СЬу УаЬ МеЬ ТЬг Зег 11е СЬу Агд 705 710 715 720
А1а МеЪ НЬз ТЬг ν^Ι Ьеи (31 у СЬу А1а РЬе Азп ТЬг Ьеи Ьеи СЬу СЬу 725 730 735
УаЬ СЬу РЬе Ьеи Рго Ьуз 11е Ьеи Ьеи СЬу УаЬ А1а МеС А1а Тгр Ьеи 740 745 750
СЬу Ьеи Азп МеЪ Агд Азп Рго ТЬг Ьеи Зег МеЬ СЬу РЬе Ьеи Ьеи Зег 755 760 765
СЬу СЬу Ьеи УаЬ Ьеи А1а МеС ТЬг Ьеи СЬу УаЬ СЬу АЬа Азр СЬп СЬу 770 775 780
Суз АЬа Не Азп РЬе СЬу Ьуз Агд СЬи Ьеи 785 790 <210> 47 <211> 2500 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 47 адЬаааЬссС дЬдЬдсЬааЬ сдаддсдсаЬ Сддьссдсаа аьсдадьсдс ьаддсааьаа
- 65 023888
асасаЪЬ^дд аЬЬааЬЬЬЬа а£сд££сдЫ: дадсдаСЬад сададаасСд ассадаасаЬ 120
д£с£дд^сдС ааадсЬсадд дааааасссь дддсдЬсааС а^ддИасдас даддадЪЬсд 180
с£ссЬЬд£са аасааааЪаа аасаааааас аааасаааЫ: ддааасадас сЬддассЪЬс 240
аададд1;д1:1; сааддаЪЬЪа ЬсЬ Ь£±дЫ:саас а^Ы^дасЬд даааааадаь 300
сасадсссас с£ааадздд£ ЬдСддаааа1: дсЬддассса адасааддс^ ЬддсСдЫзсЬ 360
ааддааэд!; с аадададЬдд ЬддссадЫЬ даЬдададда ЫдСссЬсаа ддааасдссд 420
1:1:ссса1:даЪ дЪЬсЬдасЬд Ьдсаа^ЬссЬ ааЬЪЬЪдддс аЬдсЪдддда ЬдасдаЪсдс 480
адс1;ас^дЬд сдаадддада дадасддсЬс ЬасддЬдаЬс ададссдаад дьадддасдс 540
Сдсдасссад дЬдадддЬсд ааааЬддсас сСдЬдЬЬаПЬ сЬддсдассд асаЬдддсСс 600
сЬддЪдЪдаЬ даЬ?сЬсЬдд с^ЬаЬдааНд £д£ЬасЬа£Ь даСсадддСд аададсс^дС 660
ддасдЬддас ^деььс^дСа даддсд^сда дааадЬдасс сЬддааЁаЬд дасда^дЬдд 720
ссддсдадаа ддс^ссадда дЬсддадаДс сд£д£Ьда1;с ссЬЁсасаЛд сдсадсдсда 780
ЬсСдасаддд адддд1:сасс адЬддсЪсда аддсдаадса дЪсааддссс а^с^дасЬсд 840
сдЬЪдааддс ЪдддЪдЬдда аааасааасЬ с£ЪЬассс1:1: адссЬддЬда Ъдд^сдсдЬд ЭОО
дс£да£дд1:а дасддас^сс МзссссдсаЬ ЛсЪсэЬЪдЬЬ дСдд^ддсСс ЬсдсдсЪсдс 960
сссЬдсаЬас дсдЪссаддЬ дЪасдсассЬ сдааааЬсда даСЪЬсдЬса саддсдЬсса 1020
аддЬасСасс сддсЬсассс ЬсдЬдсСдда дсЬдддаддс ЬдЬдЬсасЬд ЬЬасадссда 1080
сддаааассР адЬсЬддаЪд ЬдЬддсьдда сЬссаЬс^аЬ саддададсс сддсасадас 1140
садддадЬас ЬдссЬссасд сЪаадс£дас Ьдддасааад дЬадссдсаа да^дЬсссас 1200
ааЬддддссЪ дссаесЬЬдс ссдаддааса ссааЬссддЬ асддСаЬдса адсдада^са 1260
д^с^даЬсдс дда^ддддда аЬсаЫздсдд ссЬсСЪсддС аааддсадса ДСдСсасС^д 1320
сдЬдааддЬд асаЪдсдадд асаадаадаа ддссасадд!: саЬд^аЬаЬд аЬдЬдаасаа 1380
ааЬсасаЬаЬ ассаЬСаадд Садаассаса Ьасаддддаа ЬЬсд^ддсад сааасдадас 1440
ЬсаСадсдда сдааадЬссд ссЬссЬЬсас сдСсСссЬсс дадаааасаа ЬссЬдасссЬ 1500
сддадасСас ддсдасдЬаЬ сЪЪЬдсСдЪд садддСддсс адсддсдСдд ассЬСдсЬса 1560
дасадЪсд^д ^ЬддсссЬдд асаадасаса ЪдадсасСЬд ссаасадссЬ ддсаддЬдса 1620
садддас^дд ЬЬ£аасдасс СддсдсЬссс дЬддааасаЬ дасддсдсбд аадсаСддаа 1680
идаддсаддд адасЬддЬдд ааЫзЬддаас сссасасдсс д£ааада£дд асдЬЬЬЬсаа 1740
ЬсЪЬддЪдас садасадддд ЬдсЬсс^даа аЬсасДддсд ддсдЪдссЪд ЬадссадсаЪ 1800
сдадддсаса аадЬаЬсасс Сдаад1:сДдд дсаЬдЬаасс ЬдсдаадСдд дссЬддаааа 1860
дсЬдаада1:д аааддасЬЬа сдЬасасЪдЬ 1;ЬдЬдаЬаад ассаадЬЬЬа саьддаадсд 1920
адссссаасд даЫзссддсс аЬдаЬассдС сдИдаСддад дЬЬддЬЬ^сЬ ссддсассад 1980
- 66 023888
ассацдкада аЬассадЦда дадсЬдЛсдс ссасддСдЪа сссдаддЪаа асдСддссаС 2040
дс£даЪ£аса ссдааЬссса скакддадаа сааЁддсдда ддд£1:са£сд аааЛдсадс!: 2100
дссдсскдда дасаасакса ЦЦДаЬдЪсдд сдассЬсда!: са^сааСддЬ Ьссадааадд 2160
дЪсЬЬссаЪс ддссдсдЬсс ИИсадаадас асдааааддс а££дааадас ЪЪасадЪссЪ 2220
дддсдаасак дсСЪдддасЪ ксдддксадЦ РддсддддЬа аЦдасаадса Ладдсададс 2280
ЛаСдсасасс дЬ^сЬсддИд дддсаЪЪЪаа 1ас1с1д11д ддбддсдЬдд дЦЦ ШзсЦЦсс 2340
дааааНссСд сЪсдд£д1:сд саакддссЬд дс11ддасбд аакаЬдсдса аДссЬасасЛ 2400
дадИаЬдддд иььсецстдг саддаддссЬ ддЪссСддса аЦдасЬсЦдд дадЬдддсдс 2 4 60
сда^саадда ЦдсдссаЦса асЪСЪддсаа дадададсбс 2500
<210> 48 <211> 2500 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 48
ЬсаСССадда сасасда££а асЬссасдЪа ассадасдЦЬ Ьадсъсаасд аЬссдЦЬаЬЦ 60
ЬдСдЦааасс СааЪЬааааЬ Садсаадсаа сЬсдсЬааЁс дЪсЪсЪЬдас ЬддДсСЪдСа 120
садассадса ^ЪСсдадСсс сЪСЪСЪддда сссдсад^Ъа £асса1:дсЪд с£сс1:саадс 180
даддаасадЪ С С д 1. ι. Ц ί а 1. ι. ьъдьеъьсед С^ДСдСССаа сс1:££д£с1:д дассСддаад 240
ЬСс^ссасаа дЬСсс^аааС адааааадаа ааасаадЬЬд Цаааас^дас сЬ£ЦДЦЬсЦа 300
дЦдГсдддПд даЦЦксЬсса асассЪЬЪка сдассСдддЬ ЬсЬдИСссда ассдасаада 360
^ИссССЦсад СЛсЬсЪсасс ассддДсааа скасЪскссЦ аасаддадЪЪ ссЬЬкдсддс 420
аадддСасЛа саадаскдас асдкЪаадда ЬЪаааасссд Ьасдасссс£ асЬдсЪадсд 480
ΐсдаСдасас дсГЧсссСсЬ сЬсЪдссдад аЪассасЬад ЬсЬсддсЬес са£ссс1дсд 540
асдсЛдддСс састсссадс дасасааЬаа дассдеЬддс ^дСасссдад 600
дассасасСа с^аададасс дааЬасССас асааСдаСаа сЬадСсссас £кс£сддаса 660
ссЬдсассЬд асааадасаИ сСссдсадсС сССЛсасСдд дасс^ИаСас сЬдсЬасасс 720
ддссдсЛсСИ ссдадд^сск садСс^сЪад дсасаасЬад ддаадЬдЪас дсд£сдсдс£ 780
адасЬдСссс ЬссссадЪдд ЬсассдадсЬ ЦссссЬСсдЦ сад£Лссддд ЛадасЦдадс 840
дсаасС^ссд асссасассЦ ЦЦЦЦдДДЦда даааДдддаа ЪсддассасЪ ассадсдсас 900
сдас£ассаС сидсскдадд ааддддсдЬа адад^аасаа сассассдад адсдсдадсд 960
дддасдЪаЪд сдсаддСсса саЬдсдЬдда дсСЦИЬадсЛ сЬааадсадЬ дЬссдсаддЦ 1020
^ссаЪда^дд дссдадцддд адсасдассх сдасссИссд асасадСдас аа^дЬсддсЬ 1080
- 67 023888
дсс££1;1:дда Ьсадэсс^ас асассдассЪ дадд^адаЬа дЪссЬс!:сдд дссдЬдЪсЪд 1140
дЪсссЪсаЪд асддадд^дс даЬЬсдасЬд асссСдЬЬЬс саЬсддсдСЬ с^асадддЬд 1200
1Ьассссдда сддЬддаасд ддсЬссИдЬ ддСЬаддсса £дсса£асд£ ЬсдсСс1:ад£ 1260
садас^адсд ссЬассссс£ ЬадЪаасдсс ддадаадсса ЬЬ^ссд-ЬсдЬ аасадЪдаас 1320
дсас^Ьссас £д1асдс£сс 1:дЬЬс1:^с^^ ссддСдЬсса д£:аса1;а-{;ас ПасасСЁдТ;·!; 1380
ТЬадСдеа^а ЬддЬааЬТсс аЬсЬЬддЬдЬ а^дессссЬЬ аадсассдес д£ЛЬдсЬс1д 1440
адЬа£сдсс£. дсЬЬЬсаддс ддаддаадЬд дсададдадд с£сСЛЬ£дСТ аддасЪддда 1500
дссЬсЪда^д ссдсЪдсаЬа дааасдасас д1:сссассдд Ъсдссдсасс ЬддаасдадЪ 1560
сС-дТсадсас аассдддасс ЬдЫ:сЬдЬдЬ асЬсдЬдаас дд^ИдТсдда ссдЬссасдТ 1620
дсссс1;дасс аааЫдстдд ассдсдаддд сассШЬд(:а сЁдссдсдас Πίсд£ассИ 1680
асЬссдЪссс ЬсЬдассасс ЬЬааассЪЬд дддЬдЬдсдд саЪЬЬсЪасс Ъдсаааад'Ы: 1740
адаассасЪд дЬсСдЬсссс асдаддасМ: ЪадЬдассдс ссдсасддас а£сдд£сдЪа 1800
дсЬсссдЬдЪ ЪЬсаЪад^дд асЫзсадасс сдЪасаЪЪдд асдсЬЬсасс сддасс!С1^ 1860
сдасЪ^сЬас Г'ЬЬссЬдааЬ дсаЬдЬдаса аасасРа^с еддЪ^саааЪ дЬасс£±сдс 1920
ЬсддддТ1:дс сЬааддссдд ЬасСаЬддса дсасЬассЬс саассааада ддссдЬддЬс 1980
СддЬаса^сС ЬаЬдд^сасЬ сИсдасадсд ддСдссаса£ дддс^ссаЪЬ ЬдсассддЬа 2040
сдасЬааЬдЬ ддсЪ1:аддд1: да£асс£с1:£ дИассдссЬ сссаад£адс ^СИасд^сда 2100
сддсддассС. сЬдПдИадЬ аааЬасадсс дсЪддадсЪа дЬадЬСасса адд^сЫЪсс 2160
садаадд1:ад ссддсдсадд аад^сЪЪсЪд ЬдсЫЬЬссд £аас1НсЬд ааГдЬсадда 2220
сссдсТТд'Ьа сддасссЕда адсссадЬса ассдссссаЬ ХаеХдтСсдЬ а^ссдЬсЬсд 2280
а^асдсдсдд саададссас сссдьаааы аъдадасаас ссассдсасс саэаадаадд 2340
сИПаддас дадссасадс дЬЬассддас сдаассЪдас Ь’ЬаЬасдсд'Ь ЪаддаЪдЪда 2400
сЬсаНасссс ааадаадаса дЬссЬссдда ссаддассдИ НасЪдадасс сСсасссдсд 2460
дс^адЪЬссЪ асдсдд!ад1: ЪдааассдТ!: сЬсЬсЬсдад 2500
<210> 49 <211> 791 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 49
МеГ 8ег С1у Агд Ьуз А1а 61η С1у Ьуз ТЬг Ьеи С1у Уа1 Азп Ме£ Уа1
5 10 15
Агд Агд С1у Уа1 Агд Зег Ьеи Зег Азп Ьуз 11е Ьуз <31п Ьуз ТЬг Ьуз
- 68 023888
- 69 023888
- 70 023888
785 790 <210> 50 <211> 2491 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 50
адЪаааЪесЪ д^дЬдсЪаа! ίдаддбдсаЪ ЬддЪсЪдсаа а!сдад£бдс 11аддсааίаа 60
асасаб^Ъдд а£Ь33ίί^ί3 а£сд£1:сд£1 дадсда^ад сададаас!д ассадааса£ 120
д1:с£дд1:сд1: ааадс£садд дааааассс£ дддсд(:саа£ аίддίасдас даддад^сд 180
οίссСбдЁса аасаааа1?аа аасаааааас аааасааа££ ддааасадас с^ддаддЬдс 240
СсааддаЪЪЪ δίοίίίΐίαί ίίίί9ΐίθ££ саЪЪЪЪдас!: ддаааааада Ъсасадссоа 300
сс£ааададд ί£д£ддаааа Сдс£ддассс аадасааддс ίίςφοίφίίο ίааддааадί 360
саададад£д д1ддссад£ί 1:да£дададд дЬссбса аддааасдсо дСПсссаЪда 420
ίдЪ£с£дас£ д£дсааЬ£сс ίаа!ίί£ддд саЪдсЪдддс 3ί5ώθώΗίθ7 садс±3θ99ί 480
Ъсдсааддаа ададасддса дЪасддЕсаЪ асдсдсддаа дд£ааддаПд ссдсЬассса 540
даааа£дд£а ссЪдсдбсаЬ ίοίддссасс дасаЪдддсЁ сΐΐддΐдίда 600
еда!адсс1:£ ΐсΐίаСдадΐ дсдбаассас адабсааддб даддаассίд £1дасд1:£да 660
ίίςοίίοίςο сдааасд£дд абддддсдеа бсСсдаа^аИ ддасддбдбд дίааасаада 720
аддаадсада ассадасдсЬ сад£дс££а£ асссХсссас дс!сааддад адсЪдассдд 780
асддддаса£ ааа£дд££дд адддсдас^с ассссдааса οπίίίς3θοο дсдСсдаддд 840
сЪддд£сЪдд аааааЪсддс Ьд'ЬЪддсссЪ сдсЪаЪдд£д асадЬсдЪЫ: ддс£сасдс£ 900
ддадСс^дЪд дъьасъсдсд £ддсад£дс£ дд£ддЪдс£с с1сбд£с1:Сд οοοοΐρίοίά 960
сдсдСссадд £д£ас1са12 ί £ддаааасад адаЪЪСЪдЪс ассддсассс аддддасдас 1020
£сддд£аасс с£ддедс{Лд аас^ддд£дд бСдсдС!ас^ аШассдсод адддсааасс 1080
οίοί8ί99Ηί дрдрддсрдд а£дсааСс£а ίΟ3ςς&ςδ3ί сссдсасааа ссадддааЪа 1140
ίСдссИЪсас дсааадсрдр ссдабасааа ддгсдсддс^ аддгдсссаа сааСдддаос 1200
ддссассс£д дсддаддаас абсадддадд ίасадЬдЪдс ааасдддасс ададЪдабад 1260
аддс£дддд£ аа£сас£дсд дсс^дъесдд саааддаадЬ а££дСсдсЪ£ дсдбсааддс 1320
адссЬдСдад дссааааада аддс^ассдд дсасдίсίаί дасдссааса 3ς3ίοςίίίа 1330
ί303ςί5βΒ£ дЪддаассас асасадддда ££асд£ддсд дссаасдада сЪса!±ссдд 1440
ίсдсаааасд дсеадс£ίса οσςίρίΟ8ίс сдаааадасс 3ίοοίсас£а 1500
ЪддсдасдЪЪ ίοίοΐροίζοί дссддд^ддс ίадсддадίс дасс£ддсес адасад1: οβί 1560
- 72 023888
сс£ддаас1;д даЪаааасад СЛдадсаЪсС дссЪассдс£ £ддсадд£дс асадддаСЬд 1620
дНОаасдас сОадсссОсс саЬддаааса Ьдааддадсд адааасГдда а^ааГдсада 1680
дсдасГсдГа даа££сдд£д ссссГса^дс сдГдаадаЪд дасдЪс±аса аЪсЬдддЪда 1740
Гсадассддс дСГсГссГСа аадсГсГсдс Гддсд1асса д^Сдсссаса Гсдааддаас 1800
даадГассас сГдаадГсад дссаГдГаас ГГдсдаддЪд ддсс^ддада адЪЬдааааб 1Б60
даааддСсГГ асдСасасаа ГдГдЪдасаа дассаадГГс асаГддаада дддсссссас 192 0
адаГадсддс сасдаГасЬд СддЬдаГдда ддЬдассЬЫ: ЬсГддаасаа аасссЬдсад 1980
ааЬасссд^д сдддсГдГад сКсасддаГс ЬсссдаГдГс аабдГЬдсЪа ГдсОдаООас 2040
ассгаасссО ассаЬсдада аЬаасддЬдд ГддПтСагь дадасдсадс Пюсдссадд 2100
сдаЪаасаЬс а^сЬасдЬдд дсдаас^сЬс ьъассадЪдд 1Л7садааад ддад1;*:саа1; 2160
гдддсдддЬс СГссаааааа сдаадааддд ааГсдаасда Ы;дасдд1Ьа Гсддсдадса 2220
сдса1;ддда7 £Ъ1:ддЪ1;ссд саддддда!:7 ссЬдЬсЬГсГ а^ЪддЪаадд сасГдсабас 2280
сдбдсГдддд ддсдсаЬГса аГЪсГаГГГГ сдддддсдЪд дддЬГссЬдс сОааасГССЬ 2340
дсЬдддадба дсссЪддссЪ ддЪЪдддасЬ дааЬаЪдсдд аа1ссдасда ЪдЪссаЪдЮ 2400
аЮссГсЪСд досддсдЪдс ЫгдЬасЬддс са£дасас£.д ддсдСГддсд ссдаГсаадд 2460
аГдсдссаГс аасЬЬЬддса ададададсЪ с 2491
<210> 51 <211> 2491 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 51
£саЫ:£адда сасасдаг£а ас^ссасдга ассадасдгс садсссаасд аоссд^сасс 60
СдГдГааасс ОааЫааааГ Гадсаадсаа сСсдсЬааГс дГсГсГГдас ГддГсГГдГа 120
садассадса тГЬсдадТсс сЬДЪЫзддда сссдсадГГа ЬассаЪдсЪд с£сс5саадс 180
даддаасадЬ ГЪдПзПза^С ^едгг1:г1:ед геГтдтгтаа сстдгсгд дассгссаса 240
адгсссгааа гадааааада аааасаадС!: дГаааасГда ссСГЬттГсЬ адгдгсдддь 300
ддаЬГГс^сс аасассЪСЪЪ асдассСддд ОГсгдьгссд аассдасаад аНссОтьса 360
дЬ£с1:с1:сас сассддГсаа асЬасОсЪсс ЬаасаддадЬ ЬссЬЬЬдсдд саадддЬасГ 420
асаадасЪда сасдГЬаадд агеаааассс дГасдасссд ОасОдИадс д£сда£дсса 480
адсдЬЬссГЬ ЬсГсГдссдГ саГдссадГа ГдсдсдссШ: сса£Ссс£.ас ддсдаЬдддГ 540
ЬсасЬсЬсас сХс^сассаг ддасдсадГа адассддгдд сГдЬасссда даассасасЪ 600
асГаГсддаа адаа^ас^са сдсаИддЪа £с£ад1;Ьсса сЪсс££ддас аас^дсаасЪ 660
- 73 023888
аасдаадасд дс£ЬЛдсасс ЬассссасаЕ ададс£1а!а ссЬдссасас саЮбдЮе! 720
ЪссЪСсдСсЬ £дд£с£дсда дИсасдааЬа ОдддадддИд сдадисссс ^сдасЬддсс 780
ЪдссссЪдЪа Шзассаасс ЪсссдсЪдад 1даддс££д£ д!ааас£ддд сдсадс£ссс 840
дасссадасс ЪббЪЬадссд асаассддда дсдабассас бдбсадсааа ссдадОдсда 900
ссЬсадасас саа^дадсдс ассдьсасда ссассасдад дадасадаас ддддасада! 960
дсдсаддИсс асаЪдадЪаа эссЪЪЪЪдСс ЪсЪаааасад ЪддссдСддд ЪссссСдсЪд 1020
адсссаббдд дассасдаас Ыдасссасс аасдсаабда баабддсдас РсссдббЬдд 1060
дадаЬаесСа сасассдасс ЬасдЪЪадаЪ ад1сс£с£1а дддсдЬдЬЫ. дд£ссс£Са£ 1140
аасддаадЬд сдНОсдаса сдсЬаЪдЫс ссадсдссда Ьссасддд^Ь дИасссСдд 1200
ССддЬ.дддас сдссЪссИд ЬадОсссбсс аЬдОсасасд £11дссс1?дд Ьсбсасбабс 1260
Ьссдасссса тсадссасдс сддасаадсс д£Ъ£сс£Ъса Ьаасадсдаа сдсад^Сссд 1320
ЬсддасасЬс сддЪНбОсО 6ссда1.дасс сд£дсада£а сЬдсдд'Ь'ЬдЬ СсЪадсааа! 1380
аДдЬсасбИ сассббддЬд ^д^дЬсссс^ ааЪдсассдс сдд£.С.дс£с£ дадОааддсс 1440
адсдббббдс сдд'ЬсдаадС ддсасадЬад дс±1± 1с1дд ЬаддадЬдаС ассссс£са£ 1500
ассдсЬдсаа ададасдада сддсссассд абсдссОсад сбддассддд ЪсбдбсадОа 1560
ддасз^чдаз с£а£ЬС1:д£с аасИсд^ада сдда1:ддсда ассдбссасд ^д^ссс^аас 1620
саааЬЛдсЁд даасдддасд дбассЪЪЪдЪ асИссЪсдс £с£±£дассХ ЬаЪСасдЪсЪ 1680
сдсбдадсаб сббаадссас ддддадЬасд дсасЬбсрас с^дсадаЬдЬ: СадасссасЪ 1740
адОсЬддссд саададдааЪ бЪсдададсд ассдсаЬддЬ саасддд^дб адсЫссЪбд 1800
с££са£дд!д дасС£сад1;с сддЬасаЪ^д аасдсЪссас ссддассИсИ Ссаас££ЪСа 1860
сШссадаа 1дса5д1д1Ь асасасЬд'ЬР сбддббсаад бдбассббсб сссдддддбд 1920
Ьс1;аЪсдссд дЬдс^аИдас ассас^ассЬ. ссас^ддааа адасскЬдЪ!: £Ьдддасд1:с 1980
ЬСаЬдддаас дсссдасабс дадрдссбад адддс^асад ЪЪасаасдаЪ асдасХаа^д 2040
ЬддаОРддда ЪддЁадсЪсЪ ЪэЪСдссасс ассаааа£аа сЬсСасдбсд ааддсдд^сс 2100
дссассдсад £ада£дсасс СдСбЛдадад ааЪддбсасс ааад£с£Р£с ссЬсаадбба 2160
асссдсссад ааддШШ дсЮс^Ьссс ЪъадсЕЪдсЪ аасбдссаа! адссдсбсд! 2220
дсдоасссьа ааассааддс дбсссссбаа ддасадаада ЪаассаЪЪсс дИдасдЬаСд 2280
дсасдасссс ссдсдбаадб ^аадаЪаааа дсссссдсас сссааддасд даЬЬЪдадда 2340
сдасссЪсаС сдддассдда ссаассс^да сСЛаЬасдсс ^аддсИдсЁ асаддЬасад 2400
£ааддадаас сддссдсасд аасаОдассд дбасбдбдас ссдсаассдо ддсСадб^сс 2460
ьасдсддгад Ъ£дааассд£ Сссс£съсда 9 2491
<210> 52
- 74 023888 <211> 730 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 52
МеГ Зег Ьуз Ьуз Рго 61у <31у Рго С1у Ьуз Зег Агд А1а Уа1 Туг Ьеи 15 10 15
Ьеи Ьуз Агд С1у МеЬ Рго Агд Уа1 Ьеи Зег Ьеи Не С1у Ьеи Ьуз Агд 20 25 30
Зег Зег Ьуз О1п Ьуз Ьуз Агд С1у С1у ТЬг Азр Тгр Ме£ Зег Тгр Ьеи 35 40 45
Ьеи Уа1 11е С1у Ме£ Ьеи С1у МеЪ ТЬг Не А1а А1а ТЬг Уа1 Агд Ьуз
55 60
31и Агд Азр С1у Зег ТНг Ϋβΐ 11е Агд А1а С1и С1у Ьу$ Азр А1а А1а 65 70 75 90
ТЬг С1п Уа1 Агд Уа1 С1и Азп С1у ТНг Суз Уа1 11е Ьеи А1а ТНг Азр 85 90 95
МеП С1у Зег Тгр Суз Азр Азр Зег Ьеи Зег Туг С1и Суз Уа1 ТНг Не 100 105 ПО
Азр С1п С1у С1и С1и Рго ν^Ι Азр Ы Азр Суз РЬе Суз Агд Азп \Га1 115 120 125
Азр С1у Уа1 Туг Ьеи С1и Туг С1у Агд Суз С1у Ьуз С1п С1и С1у Зег 130 135 140
Агд ТНг Агд Агд Зег Уа1 Ьеи 11е Рго Зег НЬз А1а С1п С1у С1и Ьеи 145 150 155 160
ТНг С1у Агд С1у НЬз Ьуз Тгр Ьеи С1и С1у Азр Зег Ьеи Агд ТНг ΗΪ3 165 170 175
Ьеи ТНг Агд Уа1 С1и С1у Тгр Уа1 Тгр Ьуз Азп Агд Ьеи Ьеи А1а Ьеи 180 185 190
А1а Ме£ Уа1 ТНг \Га1 Уа1 Тгр Ьеи ТНг Ьеи 31и Зег Уа1 \7а1 ТНг Агд 195 200 205
Уа1 А1а Уа1 Ьеи Уа1 Уа1 Ьеи Ьеи Суз Ьеи А1а Рго Уа1 Туг А1а Зег 210 215 220
- 75 023888
- 76 023888
<210> 53 <211> 2286 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 53
адСадЫ:сдс с7д£д£дадс ЬдасааасЬЬ адЬадЬдЬЫ дЪдаддаЫза асаасаа£Ьа 60
асасадЬдсд адсЬдЬЬЬсЬ Ьадсасдаад аЪсЪсдаЬдЬ сЬаадааасс аддадддссс 120
ддсаададсс дддсЬдЬсЬа ^ЬЬдсЬаааа сдсддааЬдс сссдсд^дЬЬ дЬссЬЬдаЫ: 180
ддасгьаадс ддадсьссаа асаааадааа сдддддддаа садасЬддаЬ дадсЬддс^д 240
сЬсдСааЬсд дсаЬдсЬддд саЬдасааЬс дсадсЬасдд СЛсдсаадда аададасддс 300
адСасддЬса Ьасдсдсдда аддЬааддаС дссдсЬассс аэдЬдададЬ ддааааЬддЬ 360
ассСдсдЬса ГЬсЬддссас сдасаСдддс ЬсЬЬддЬдЬд аСдаЬадссЬ ЬЬсЬ^аЬдад 420
ЬдсдЬаасса ЬадаЬсаадд ЬдаддаассЬ дЬЬдасдЬЬд аМдсЬЬсЪд ссдааасдСд 430
дабддддбдЬ аЬсЛсдааЪа ЪддасддЪдЬ ддЬааасаад ааддаадсад аассадасдс 540
Ьсад^дсЬЬа ЬасссСссса сдсЬсаадда дадсЬдассд дасддддаса ЬаааЬддЬЬд 600
дадддсдасг сас^ссдаас асаЫЬдасс сдсдЬсдадд дсгдддбсСд даааааЬсдд 660
сЬдЬЬддссс ЬсдсЬаЬддЬ дасадЬсдЫ ЬддсЬсасдс ЬддадЬсЬдЬ ддЬЬасЬсдс 720
д^ддсадЬдс ^ддЬддРдсР ссЬсЪдЬсЬЬ дссссЬдЬсЬ асдсдСссад д^дЬасЪсаЬ 780
РСддааааса дадаЬЫзЬдС сассддсасс саддддасда сЬсддд^аас ссЬддЬдсЬЬ 840
даасСдддРд д^ЬдсдЬСас ЬзЬСассдс·!: дадддсааас ссЬсЬа1:дда ЬдЬдЬддсЬд 900
да^дсааЬсЬ аЬсаддадаа 1;сссдсасаа ассадддааЬ аМдссЬ^са сдсааадссд 960
ЬссдаЪасаа аддЬсдсддс ЬаддЬдссса асааЬдддас сддссассс!: ддсддаддаа 1020
саСсадддад дЬасадгдЬд сааасдддас сададЬдаЪа даддс^дддд ^ааьсасъдс 1080
ддссЬд^Ьсд дсаааддаад ЬаЬЬдьсдсЬ ЬдсдЬсаадд садссЬдЬда ддссааааад 1140
ааддсЬасЬд ддсасдЬсЬа Ъдасдссаас аадаЬсдЫЬ аЬасадЬдаа адГддаасса 1200
сасасадддд аЫзасдЬддс ддссаасдад асЬсаЫзссд дЬедсаааас ддссадСЫзс 1260
ассдЬдЪсаС ссдаааадас саЬссЪсасС а1:дддддадс а^ддсдасдЬ «с^сСдсЬс 1320
ЬдссдддЪдд сЬадсддадЪ сдассЬддсс садасадЬса ЬссЬддаасЬ ддаЬааааса 1380
дЫгдадсаЮ ЬдссЬассдс СЬддсаддЬд сасадддаЫ дд£Ыаасда сссьдсссСд 1440
ссаЬддааас аЬдааддадс дадаа.асЬдд ааЬааЬдсад адсдасГсдЬ адааЬЬсддЬ 1500
дссссСсаЬд ссдЬдаадаЪ ддасдЬсЬас ааЬсЬдддСд а1:садассдд сдГссСссЬс 1560
ааадсгс1:сд сЬддсдЬасс адЬЬдсссас аьсдааддаа сдаадЬасса ссЬдаадЬса 1620
- 78 023888
ддссайдйаа сййдсдаддй дддссйддад аадййдаааа йдаааддйсй йасдйасаса 1680
айдОдйдаса адассаадйй сасаьддаад адддссссса садайадсдд ссасдайасй 1740
дйддйдайдд аддйдассйй ййсйддааса аэасссъдса даайасссдй дсдддсбдба 1800
дсйсасддаЪ сйсссдайдь саайдййдсй айдсйдаййа сассСаассс йассайсдад 1860
аайаасддйд дйддй ΐΛΐ ай йдадайдсад сййссдссад дсдайаасай сайсйасдйд 1920
ддсдаасйсй сййассадйд дйййсадааа дддадййсаа ййдддсдддй сййссааааа 1980
асдаадаадд даайсдаасд аййдасддйй айсддсдадс асдсайддда СйййддйЪсс 2040
дсадддддай йссйдЪсййс йаййддйаад дсасйдсайа ссдйдсйддд дддсдсаййс 2100
ааййсйа1 йй йсдддддсдй ддддййссйд ссйааасйсс йдсйдддадй адсссйддсс 2160
йддйгдддэс йдаайайдсд даайссдасд айдйссайдй саййссйсйй ддссддсдйд 2220
сОйдйасйдд ссайдасасй дддсдййддс дссдасасйд ддйдйдссай адасайсадс 2280
сддсаа 2286 <210> 54 <211> 2286
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность <220> <223> Синтетическая Конструкция <400> 54 йсайсаадсд дасасасЬсд асйдйй-Ьдаа йсайсасааа сасйссйаай йдййдййаай 60
йдйдйсасдс йсдасааада айсдйдсййс йададсйаса даййсйййдд йссйсссддд 120
ссдййсйсдд сссдасадай ааасдайййй дсдссййасд дддсдсасаа саддаасйаа 180
ссйдааййсд ссйсдаддйй йдййййсййй дсссссссйй дйсйдассйа сйсдассдас 240
дадсаййадс сдйасдассс дйасйдййад сдйсдайдсс аадсдййссй ййсйсйдссд 300
СсайдссадЪ аСдсдсдссИ йссаййссйа сддсдайддд ййсасйсйса ссййййасса 360
йддасдсадй аадассддйд дсйдйасссд адаассасас йасйайсдда аадаайасйс 420
асдсаййддй айсйадййсс асйссййдда саасйдсаас йаасдаадас ддсййЪдсас 480
сйассссаса йададсййай ассйдссаса ссайййдййс ййссййсдйс ййддйсйдсд 540
адйсасдаай айдддадддй дсдадййссй сссдасйддс сйдссссйдй айййассаас 600
сйсссдсйда дйдаддсййд йдйааасйдд дсдсадсйсс сдасссадас сйййййадсс 660
дасаассддд адсдайасса сйдйсадсаа ассдадйдсд ассйсадаса ссаайдадсд 720
сассдйсасд ассассасда ддадасадаа сддддасада •йдсдсаддйс сасайдадйа 780
эассййййдй сйсйааааса дГддссдГдд дйссссйдсй дадсссаййд ддассасдаа 840
сййдасссас саасдсаайд айаайддсда сйсссдйййд ддадайассй асасассдас 900
- 79 023888
с!асд£1ада ХадЬссЬсЫ: адддсдХдХ^ ЁддЬсссХСа ХаасддаадХ дсдХЁХсдас 960
аддсЬаСдЬЬ Хссадсдссд аХссасдддХ ХдХХасссХд дссддХддда ссдссХссХХ 1020
д£ад£ссс6с са£дбсасас дХХХдсссХд дХсСсасХаХ сСссдасссс аХХадХдасд 1080
ссддасаадс сдХХХссХХс аХаасадсда асдсадХХсс дХсддасасХ ссддХХХХХс 1140
СХссдаЪдас ссдХдсада£ асЬдсдд^Хд ХХсХадсааа ХаХдХсасХХ ХсассХХддХ 1200
дСд^дСсссс ХааХдсассд ссддСХдсЬс ХдадХааддс садсдХХХХд ссддХсдаад 1260
Ъддсасад^а ддсХХХХсХд дХаддадХда ХасссссХса ХассдсХдса аададасдад 1320
асддсссасс даХсдссХса дсЬддассдд д'СсТ.дЬсад^ аддассХХда сСХаХХЬХдХ 1380
саас5сд5ад асддаХддсд аассдХссас дХдьссссаа ссаааХХдсХ ддаасдддас 1440
ддСассЪЬЬд ХасХХссХсд сХсХХХдасс Х^аЬХасдСс ХсдсЬдадса ЬсХЬаадсса 1500
сддддадЬас ддсасЫсХа ссХдсадаХд ХХадасссас £адХсХддсс дсаададдаа 1560
еысдададс дассдсаХдд ХсаасдддХд ХадсХХссЕС дсХХсаХддХ ддаоХХсэдХ 1620
ссддЬасаЬЬ даасдсХсса сссддассХ с ХХсааеХХХХ асХХХссада аХдсахдХдХ 1680
1асасас£д1; ХсХддХХсаа д5д5асс££с ХсссдддддХ дХсХаХсдсс ддХдсХаХда 1740
сассасЬасс СссасСддаа аадасс55дЬ ХбХдддасдЬ сХХаЬдддса сдсссдасаХ 1800
сдад£дсс£а дадддс^аса дЬСасаасда Хасдас£аа£ дЬддаГГддд аХдд£.адс1:с 1860
С1аЫ.дссас сассааааса асхсхасдхс дааддсддхс сдсхаххдха дгадахдсас 1920
ссдсЫдада дааХддЬсас сааадХсС £Ь сссЬсаадЫ аасссдссса дааддХССН: 1980
ИдсЁТс^Ъсс сХСадсСДдс Хаас£дссаа ХадссдсХсд Хдсд£ассс£ аааассаадд 2040
сд^ссссста аддасадаад аХаассаХХс сдХдасдХаХ ддсасдассс сссдсдхаад 2100
Ыаадайааа адсосссдса ссссааддао ддаХХХдадд асдасссХса Хсдддассдд 2160
ассаасссид ас57а£асдс сххаддсхдс 5асаддХаса дЬааддадаа ссддссдсас 2220
даасаЬдасс ддХасХдХда сссдсаассд сддсХдХдас ссасасддСа ХсХдЬад5сд 2280
дссдЬб 2286 <210> 55 <211> 727 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 55
МеЪ Зег Ьуз Ьуз Рго 51у С1у Рго С1у Ьуз 5ег Агд А1а Уа1 Туг Ьеи 15 10 15
Ьеи Ьуз Агд С1у Ме5 Рго Агд Уа1 Ьеи Зег Ьеи Не 31у Ьеи Ьуз Агд
МеЬ
Агд
61п
С1у
С1п
С1у
ТЬг
61у
160
ТЬг
МеЬ
А1а
Суз
ТЬг
240
А1а
С1и
Аэр
- 81 023888
530 535 540
ТЬг 545 Уа1 Уа1 МеС С1и Уа1 550 ТЬг РЬе Зег 01у ТЬг Ьуз 555 Рго Суз Агд 11е 560
Рго Уа1 Агд А1а Уа1 А1а Н±з С1у Зег Рго Азр Уа1 Азп Уа1 А1а меС
565 570 575
Ьеи 11е ТЬг РГО Азп Рго ТЬг Не С1и Аэп Аэп С1у С1у С1у РЬе 11е
580 535 590
С1и МеС С1п Ьеи Рго Рго С1у Азр Азп Пе 11е Туг ν31 С1у С1и Ьеи
595 600 605
Зег Туг С1п Тгр РЬе С1п Ьуз С1у Зег Зег Пе С1у Агд Уа1 РЬе С1п
610 615 620
Ьуз ТЬг Ьуз Ьуз С1у 11е С1и Агд Ьеи ТЬг Уа1 Пе С1у 51и ΗΪ3 А1а
625 630 635 640
Тгр Азр РЬе С1у Зег А1а 61у С1у РЬе Ьеи Зег Зег Пе С1у Ьуз А1а
645 650 655
Ьеи Ηί3 ТЬг 7а1 Ьеи С1у С1у А1а РЬе Азп Зег Пе РЬе С1у С1у Уа1
660 665 670
61у РЬе Ьеи Рго Ьуз Ьеи Ьеи Ьеи 61у Уа1 А1а Ьеи А1а Тгр Ьеи С1у
675 630 685
Ьеи АзД Мес Агд АзП Рго ТЬг Меи Зег Мес Зег РЬе Ьеи Ьеи А1а С1у
690 695 700
ν&1 Ьеи ν3ι Ьеи А1а МеС ТЬг Ьеи С1у ν=α С1у А1а Азр ТЬг С1у Суз
705 710 715 720
А1а Не Азр 11е Зег Агд С1п 725 <210> 5б <211> 2280 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 56 адСадССсдс сСдСдСдадс ЬдасааасСС адСадСдССС дСдаддаССа асаасааССа 60 асасадСдсд адсСдСССсС Садсасдаад аСсСсдаСдС сСаадааасс аддадддссс 120
- 83 023888
ддсаададсс дддсЕдЕсЕа ЕЕЕдсЕаааа сдсддааЕдс ССсдсдЕдЕЕ дЕссЬЕдаЕЕ 180
ддасЕЪаадс ддадсЕссаа дсаааадааа сдсдддддаа адасаддсаЕ адсЕдЕдаЕд 240
аЕаддсаЕдс ЕддсЕЕдЕдЕ сддадсадсЕ ассдЕдсдаа аадаасдсда сддаадсасс 300
дЕдаЕааддд сЕдадддЕаа ддаЕдсддсЕ асдсаддЕда дадЕададаа ЕддсасЕЕдс 360
дЕааЕасЕсд сдасЕдаЕаЕ дддаЕссЕдд ЕдЕдасдаЕа дссЕсадЕЕа ЕдааЕдсдЕа 420
асааЕадасс адддсдаада ассЕдЕддас дЕЕдасЕдЕЕ ЕсЕдЕадааа ЕдЕддаЕддс 430
дЕЕЕаЕсЕдд адЕасддссд сЕдЕддаааа саддадддсЕ сасдаасЕсд аадаЕсЕдЕд 540
сЕдаЕЕссаа дЕсасдсдса аддададЕЕд ассддЕадад дссасаадЕд дсЕЕдааддд 600
дасЕсаЕЕда ддасссассЕ дасЕадддЕд дадддЕЕддд ЕЕЕддаадаа ЕсддЕЕдсЕс 660
дсдсЕсдсЕа ЕддЕсассдЕ сдЕдЕддсЕд асасЕддада дЕдЕсдЕдас ЕсдддЕЕдсЕ 720
дЕдЬЕддЕЕд ЕссЕссЕсЕд ЕЕЕддсссса дЕдЕасдсдЕ ссаддЕдЕас ЕсаЕЕЕддаа 780
аасададаЬЕ ЕЕдЕсассдд сасссадддд асдасЕсддд ЕаасссЕддЕ дсЕЕдаасЕд 840
ддЕддЕЕдсд ЕЕасЕаЕЕас сдсЕдадддс ааасссЕсЕа ЕддаЕдЕдЕд дсЕддаЕдса 900
аЕсЕаЕсадд адааЕсссдс асааассадд дааЕаЕЕдсс ЕЕсасдсааа дсЕдЕссдаЕ 960
асаааддЕсд сддсЕаддЕд сссэасааЕд ддассддсса сссЕддсдда ддаасаЕсад 1020
ддаддЕасад ЕдЕдсааасд ддассададЕ даЕададдсЕ ддддЕааЕса сЕдсддссЕд 1080
ЕЕсддсааад даадЕаЕЕдЕ сдсЕЕдсдЕс ааддсадссЕ дЕдаддссаа ааадааддсЕ 1140
асЕдддсасд ЕсЕаЕдасдс саасаадаЕс дЕЕЕаЕасад ЕдааадЕдда ассасасаса 1200
ддддаЕЕасд Еддсддссаа сдадасЕсаЕ ЕссддЕсдса ааасддссад сЕЕсассдЕд 1260
ЕсаЕссдааа адассаЕссЕ сасЕаЕдддд дадЕаЕддсд асдЕЕЕсЕсЕ дсЕсЕдссдд 1320
дЕддсЕадсд дадЕсдассЕ ддсссадаса дЕсаЕссЕдд аасЕддаЕаа аасадЕЕдад 1380
саЕсЕдссЕа ссдсЕЕддса ддЕдсасадд даЕЕддЕЕЕэ асдассЕЕдс ссЕдссаЕдд 1440
ааасаЕдаад дадсдадааа сЕддааЕааЕ дсададсдас ЕсдЕадааЕЕ сддЕдссссЕ 1500
саЕдссдЕда адаЕддасдЕ сЕасааЕсЕд ддЕдаЕсада ссддсдЕЕсЕ ссЕЕааадсЕ 1560
сЕсдсЕддсд ЕассадЕЕдс ссасаЕсдаа ддаасдаадЕ ассассЕдаа дЕсаддссаЕ 1620
дЕаасЕЕдсд аддЕдддссЕ ддадаадЕЕд ааааЕдааад дЕсЕСасдЕа сасааЕдЕдЕ 1680
дасаадасса адЕЕсасаЕд даададддсс сссасадаЕа дсддссасда ЕасЕдЕддЕд 1740
аЕддаддЕда ссЕЕЕЕсЕдд аасаааассс ЕдсадааЕас ссдЕдсдддс ЕдЕадсЕсас 1800
ддаЕсЕсссд аЕдЕсааЕдЕ ЕдсЕаЕдсЕд аЕЕасассЕа асссЕассаЕ сдадааЕаас 1860
ддЕддЕддЕЕ ЕЕаЕЕдадаЕ дсадсЕЕссд ссаддсдаЕа асаЕсаЕсЕа сдЕдддсдаа 1920
сЕсЕсЕЕасс адЕддЕЕЕса дааадддадЕ ЕсааЕЕдддс дддЕсЕЕсса ааааасдаад 1980
аадддааЕсд аасдаЕЕдас ддЕЕаЕсддс дадсасдсаЕ дддаЕЕЕЕдд ЕЕссдсаддд 2040
- 84 023888
ддаЬЬссЬдЪ сббсбаббдд бааддсасбд сабассдбдс бддддддсдс аббсааббсб 2100
аГ^Ызсдддд дсдбддддбб ссбдссбааа сбссбдсбдд дадбадсссб ддссбддббд 2160
ддасЪдааЬа бдсддаабсс дасдабдбсс абдбсаббсс бсббддссдд сдбдсббдба 2220
сЬддссаЬда сасбдддсдб бддсдссдас асбдддбдбд ссэбадасаб садссддсаа 2280
<210> 57 <211> 2280 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 57
бсабсаадсд дасасасЪсд асбдбббдаа бсабсасааа сасбссбааб бдббдббааб 60
бдбдбсасдс Ъсдасааада абсдбдсббс бададсбаса даббебббдд бссбсссддд 120
ссдббсбсдд сссдасадаЬ ааасдабббб дсдссббасд дддсдсасаа саддаасбаа 180
ссбдааббсд ссЬсдаддЬС. едббббеббб дсдсссссбб бебдбеедба бсдасасбас 240
бабседбаед ассдаасаса дссбсдбсда бддсасдсбб ббеббдедеб дееббедбдд 300
сасбаббссс дасЪссса£Ь ссбасдссда бдсдбссасб сбсабсбсбб ассдбдаасд 360
саббабдадс дсСдас^а^а сссбаддасс асасбдсбаб еддадбсааб аеббаедсаб 420
бдббабсбдд Ьсссдс1:Ьс1 бддасассбд саасбдасаа адасабсббб асассбассд 480
сааабадасс ЪсаЪдссддс дасассбббб дбссбсссда дбдсббдадс ббсбадасас 540
дасбааддбб сад1:дсдсдЬ бссбсбсаас бддссабсбс сддбдббсас сдаасббссс 600
сбдадбаасб ссЬддд^дда сбдабсссас сбсссаассс ааассббсбб адссаасдад 660
сдсдадсдаб ассадЬддса дсасассдас бдбдассбсб сасадсасбд адсссаасда 720
сасаассаас аддаддадас ааассддддб сасабдсдса ддбссасабд адбааассбб 780
ббдбсбсбаа аасадЬддсс дбдддбсссс бдсбдадссс аббдддасса сдаасббдас 840
ссассаасдс ааЬдаЬааЬд дсдасбсссд бббдддадаб ассбасасас сдассбасдб 900
бадабадбсс ЬсЫадддед бдбббддбсс еббабааедд аадбдедббб сдасаддсба 960
бдбббссадс дссдаЬссас дддббдббас ссбддссддб дддассдссб ссббдбадбс 1020
ссбссабдбс асасд£ГЛдс ссбддбсбса сбабсбссда ссссаббадб дасдссддас 1080
аадссдбббс с^ЬсаЬааса дсдаасдсад ббседбедда сасбссддбб бббсббссда 1140
бдасесдбдс адаЬасЬдсд дббдббсбад сааабабдбс асбббсассб бддбдбдбдб 1200
ссссбаабдс ассдссддЬ'Ь дсбсбдадба аддссадсдб бббдееддбе даадбддсас 1260
адбаддеббб СсЬддЬадда дбдабасссс сбсабассдс бдсааадада сдадасддсс 1320
сассдабсдс с£садс£дда ссдддбсбдб садбаддасс ббдассбабб ббдбсаасбс 1380
- 85 023888
д^адасдда! ддсдаассдС ссасд£д£сс с£аассааа£ £дс1ддаасд ддасдд^асс 1440
ШдИасИс сЮдсЮСМ дассИаМза сд£с£сдс1;д адсаЮПаа дссасдддда 1500
дСасддсас! 1с1ассЪдса да СдЫадас ссас^адИс! ддссдсаада ддааШсда 1560
дадсдассдс а1:дд!саасд ддЪдЪадсЪЪ сс±1дс£1;са ЬддЪддасИ садИссддСа 1620
саМдаасдс £ссасссдда сс^сИсаас шгасии садаа^дса^ д1д11асаса 1680
с1дСЪс1дд1 1саад1д£ас с1£с1сссдд ддд^дссса! сдссдд£дс£ аСдасассас 1740
£ассЪссас£ ддаааадасс ΐ: £дЪ 1 с Сддд асдЪсЪЪаЪд ддсасдсссд аса^сдад^д 1800
ссЬададддс 1асад1Ьаса асда^асдас 1аа1д1дда£ £ддда1дд1а дс1сЬ£а£Сд 1860
ссассассаа ааЬаасЬс^а сд1:сдааддс ддЪссдсСаС Сд^ад^ада! дсасссдсИ 1920
дададаа^дд 1сассааадЪ сШсссиа адтаасссд сссадаадд!. 1980
ИсссЪЪадс ИдсЪаасЪд ссаа^адссд с!сдЁдсд1а ссс^аааасс ааддсд^ссс 2040
сс^ааддаса даадаЬаасс аМссд£дас д£а!ддсасд ассссссдсд ГаадНаада 2100
Ъаааадсссс сдсассссаа ддасдда!Л1 даддасдасс с^саЮддда ссддассаас 2160
сс^дасИа! асдссС1адд с!дс£асадд ЪасадЪаадд адаассддсс дсасдаасаЪ 2220
дассдд^ас! дЁдасссдса ассдсддс£д Сдасссасас дд£а£с1дСа дгсддссды 2280
<210> 58 <211> 635 <212> БЕЛОК <213> АгННс1а1 Зедеипсе <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 58
МеЬ Зег Ьуз Ьуз Рго 01 у 61у Рго С1у Ьуз Зег Агд А1а 7а1 Туг Ьеи 15 10 15
Ьеи Ьуз Агд Й1у МеЬ Рго Агд 1/а1 Ьеи Зег Ьеи Не 61у Ьеи Ьуз 51п 20 25 30
Ьуз Ьуз Агд С1у С1у Ьуз ТЬг С1у 11е А1а ”л1 Не Уа1 Рго С1п А1а 35 40 45
Ьеи Ьеи РЬе 7а1 Рго Ьеи Ьеи '7а 1 РЬе Рго Ьеи Суз РЬе 51у Ьуз РЬе 50 55 60
Рго Не Туг ТЬг Не Рго Азр Ьуз Ьеи Й1у Рго Тгр Зег Рго 11е Азр
10 75 90
11е Шз Ыз Ьеи Зег Суз Рго Азп Азп Ьеи '7а1 7'а1 61и Азр С1и 61у
90 95
- 86 023888
- 88 023888
Н1з А1а 610 Азр ТЬг С1у Суз А1а 615 Не Азр 11е Зег Агд С1п 61и Ьеи Агд 620
Суз С1у Зег С1у Уа! РЬе Не 4Ϊ3 Азп Азр Уа1
625 630 635 <210> 59 <211> 2000 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 59
891:851:1:050 срдрдрдадс рдасааасРР адРадрдРРр дРдаддаРРа асаасааРРа 60
асасадРдсд адсРдРрРсР Радсасдаад аРсРсдаРдР сРаадааасс аддадддссс 120
ддсаададсс дддсРдРсРа РРРдсРаааа сдсддааРдс сссдсдРдРР дРссРРдаРР 180
ддасРРаадс аааадаадсд адддддсаад асрддрарад срдрдарсдр РссРсаддсР 240
сР рррдрррд РасссРРдсР ддрарррссс срррдсрррд дсаааРРРсс раРсРаРасс 300
аРсссРдаРа адсРсдддсс ррддадрссс аРРдаРаРРс ассаРРРдад сРдсссааас 360
аассрсдрсд ррдаддарда адддрдсасР ааРсРРРсРд даРРРРссра сарддадррд 420
ааадРдддсР аРаРРРсадс саРРаадаРд аасддсРРРа сРРдРасадд адрсдрдасс 480
даадссдада саРаРасааа рррсдрддда расдрсасса ссассРРсаа дадаааасас 540
РРссдсссаа сдссРдасдс РРдРсдддсс дсРРасаасР ддаадаРддс аддадаРссР 600
сдаРаРдаад ааРсРсРдса саасссдРаР ссРдаРРаес аРРддсРдсд дасадРсаад 660
асрассаадд ададРсрддР саРРаРаРса ссаадсдрдд ссдаРсРРда РссРРаРдаР 720
адаРсссРдс асадРадддР РРРРссРддс дддааРРдРа дсддРдРРдс адРаРсаадР 780
ассРасРдсР ссасРаасса сдасРасасР аРаРддаРдс сРдадаассс РсдасРсддР 840
аРдадЬРдсд асаРРРРРас даасРсасдд ддсаадсддд саРсРааддд дЬсРдаааса 900
ίдсдддрССд ррдаРдадсд ддддррдрар аааРсРсРРа ааддсдссРд РаадсРдааа 960
сРсРдРддед РасРддддсР дсдссРдаРд дасддсасаР дддРддсРаР дсадасаадс 1020
ааРдааасаа адРддРдРсс сссРддРсад сРддРРааРс рдсасдасРР РаддРсРдас 1080
даааРсдадс ассРРдРддР ддаддаасРд дрдаадааас дсдаададРд ссРддасдса 1140
сррдададра РРаРдассас саааРссдРР РссРРсадаа дасРдадсса ссРдсдааад 1200
срддрдссад ддрСсдддаа ддсррараср аррррсааса адасрсррар ддаддсддар 1260
дсссаррара адрсадррад дасррддаар дадаРааРРс ссрссааадд ардрсрдада 1320
дрсддрддда даРдссассс ссаРдРсааР ддддрдррсР РРаасддааР саРссРддда 1380
- 89 023888
сс!дасддда асд£дс£да£ 1сссдада£д сааЪсЬЪссс сЪдсадса асаса1:ддэа 1440
сЪссЪддЪдЪ с££сад£да£ асссс£да£д сасссасИдд ссдэссссад сас£дЪд£Ъс 1500
ааааа^ддсд аЬдаддссда адасЪЬбдЪд даадСЬсасс £дсссда£д£ асасдааадд 1560
аьаъсъддад НадассЪддд сс1:1:сс1:аа£ ЪддддСаад£ асд1;дсДссЗ: дад£дсддд£ 1620
дссЬЬдассд с6£1.да6дсЪ даЪсаЫЪЪЪ сЪдаЪдасс1; дсСддсддад ддКдаа£сдс 1630
^ссдадссда сасадсасаа £с£сададдд асаддссддд аад^аадЪд!: дас£ссдсаа 1740
Ъс^ддсаада М^а^Ъад^ад Ы:дддадад£ Сасаад^сЪд даддададас ЪдддЪ1; даа£ 1300
М:£да£с£дс £сааас£1;дс аддсда£д£а даа£саааЪс с1ддасссде ссдддасадд 1360
1сса£адс1с ^сасдЪЪЪсЪ сдсад££дда ддадЪЬсЬдс ΐοΐΐσαΐχίΣο сд1:даасд1:д 1920
сасдс!даса с^дддЪдедс са£адасаЪс адссддсаад адс£дада1:д ЪддаадЪдда 1980
д£д£1:са1:ас асаа^да^д^ 2000
<210> 60 <211> 2000 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 60
ЬсаЪсаадсд дасасасЪсд асКд^'Ь'Сдаа Кса^сасааэ сасЪссЬаа!. ^дЪЬд^ЬааЪ 60
ЪдЬд1:сасдс £сдасааада ЪададсЪаса даЬ^сЪСЪдд £сс£сссддд 120
ссд^ЪсЪсдд сссдасада!: ааасдаЪЬЬЬ дсдссЫ:асд дддсдсасаа саддаасЪаа 180
ссЪдааЪЪсд ЪЪСЪсЪЪсдс ЪсссссдЪЪс ^дассаЪаЪс дасасьадса аддад^ссда 210
даааасааас аЪдддаасда ссаЪаааддд дааасдааас саП.Ъааадд абада^аЪдд 300
ЪадддасЪаЪ 1сдадсссдд аассСсаддд ЪаасЬа1;аад Ддд1ааасКс дасдддЬ^Ъд 360
{Хддадсадс аасЪссЪасЪ Ссссасд^да £1адааадас сЪааааддаЪ д^ассКсаас 420
С££сасссда СаСааадЪсд дЪаа^Ъс^ас ££дссдааа£ дааса^дЪсс 1зсадсас1;дд 480
сЫсддсЬс! дЪаЪаЪдЪСЪ ааадсасссЬ а^дсадЪддД дд!;ддаад1:£ сбсЪЪЪ^дЪд 540
ааддсдддГГ дсддас^дсд аасадсссдд сдааЁдЪЪда сс££с£ассд ^ссЪсЪадда 600
дс£аСасЪ£с Ызададасд!: д^СдддсаНа ддас£аа£дд ί-аассдасдс сСд^садСИс 660
1да1дд1£сс 1сКсадасса дСаа£а£ад£ дд£Лсдсасс ддс£адаас1: аддааСас^а 720
Ьс^адддасд Сд£саДссса ааааддассд ссс1:^ааса1: сдссасаасд ЪсаЪад1;£са 780
ЬддаЪдасда ддЪдаЪ1:дд£ дсСдаСд^да £а£асс£асд дас£сС£ддд адс£дадсса 840
Сас^саасдс Ъд£ааааа1:д с1;1.дадКдсс ссдМ:сдссс д£ада££ссс садас^М^дК 900
асдсссааас аасЪасЪсдс ссссааса^а £Ь±ададаа£ ЪЬссдсддас аЪЪсдасЪЪЪ 960
- 90 023888
дадасассдс аГдассссда сдсддасгас сгдссдГдса сссассдаГа сдгсГдГГсд 1020
ГгасГГГдГГ Ссассасадд дддассадГс дассааГГад асдГдсГдаа аГссадасГд 1080
сГГГадсГсд Гддааоасса ссГссГГдас сасГГсГГГд сдсГГсГсас ддассГдсдГ 1140
даасГсГсаГ ааГасГддГд дГГГаддсаа аддаадГсГГ сгдасгсддг ддасдсГГГс 1200
дассасддГс ссаадсссГГ ссдааГаГда ГаааадГГдГ ГсГдадааГа ссГссдссГа 1260
сдддГааГаГ ГсадГсааГс сГдаассГГа сГсГаГГаад ддаддГГГсс ГасадасГсГ 1320
садссасссГ сГасддГддд ддГасадГГа ссссасаада ааГГдссГГа дГаддасссГ 1330
ддасГдсссГ ГдсасдасГа адддсГсГас дГГадааддд аадасдГсдг ГдгдГассГГ 1440
даддассаса даадГсасГа ГддддасГас дГдддГдасс ддсГддддГс дГдасасаад 1500
ГГГГГассдс ГасГссддсГ ГсГдааасас сГГсаадГдд асдддсГаса ГдГдсГГГсс 1560
ГаГадассГс аГсГддассс ддааддаГГа ассссаГГса Гдсасдадда сГсасдссса 1620
сддаасГддс дааасгасда сГадГааааа дасГасГдда сдассдосГс ссасГГадсд 1680
аддсГсддсГ дГдГсдГдГГ ададГсГссс ГдГссддссс ГГсаГГсаса сГдаддсдГЬ 1740
адассдГГсГ аагаагсагс аасссгсгса агдГГсадас сГссГсгсГд асссаасГГа 1800
ааасГадасд адГГГдаасд ГссдсГасаГ сГГадГГГад дассГдддсд ддсссГдГсс 1860
аддГаГсдад адГдсааада. дсдГсаассГ ссгсаадасд адааддадад дсасГГдсас 1920
дГдсдасГдГ дасссасасд дГаГсГдГад ГсддссдГГс ГсдасГсГас ассГГсассг 1980
сасаадГаГд ГдГГасГаса 2000
<210> 61 <211> 1303 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <22ΰ>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 61
МеГ 5ег Ьуэ Ьуз Рго <31у С1у Рго С1у Ьуз Зег Агд А1а Уа1 Азп МеГ 15 10 15
Ьеи Ьуз Агд С1у МеГ Рго Агд Уа1 Ьеи Зег Ьеи Не С1у Ьеи Ьуз С1п
25 30
Ьуз Ьуз Агд С1у С1у Ьуз ТЬг 01у Не А1а УаЬ Не УаЬ Рго СЬп А1а 35 40 45
Ьеи Ьеи РЬе Уа1 Рго Ьеи Ьеи Уа1 РЬе Рго Ьеи Суз РЬе С1у Ьуз РЬе 50 55 60
Рго 11е Туг ТЬг 11е Рго Азр Ьуз Ьеи С1у Рго Тгр Зег Рго 11е Азр
- 91 023888
70 75 80
Не ΗΪ5 ΗΪ5 Ьеи Зег Суз Рго Азп Азп Ьеи Уа1 Уа1 С1и Азр Е1и 61у 85 90 95
Суз ТЬг Азп Ьеи Зег Е1у РЬе Зег Туг Меб Е1и Ьеи Ьуз νβΐ Е1у Туг 100 105 110
11е Зег А1а 11е Ьуз Меб Азп С1у РЬе ТЬг Суз ТЬг С1у га! Уа1 ТЬг 115 120 125
С1и А1а С1и ТЫ Туг ТЬг Азп РЬе Уа1 С1у Туг Уа1 ТЫ ТЫ ТЫ РЬе 130 135 140
Ьуз Агд Ьуз Ηίδ РЬе Агд Рго ТЬг Рго Азр А1а Суз Агд А1а А1а Туг 145 150 155 160
Азп Тгр Ьуз Меб А1а Е1у Азр Рго Агд Туг Е1и С1и Зег Ьеи Н1з Азп 165 ПО 175
Рго Туг Рго Азр Туг Й5 Тгр Ьеи Агд ТЬг Уа1 Ьуз ТЬг ТЬг Ьуз С1и 180 185 190
Зег Ьеи Уа1 11е 11е Зег Рго Зег Уэ1 А1а Азр Ьеи Азр Рго Туг Азр 195 200 205
Агд Зег Ьеи Ηί.8 Зег Агд Уа1 РЬе Рго С1у 51у Азп Суз Зег 61у \7а1 210 215 220
А1а νβΐ Зег Зег ТЬг Туг Суз Зег ТЬг Азп Н1з Азр Туг ТЬг 11е Тгр 225 230 235 240
Меб Рго Е1и Азп Рго Агд Ьеи С1у Меб Зег Суз Азр 11е РЬе ТЬг Азп 245 250 255
Зег Агд С1у Ьуз Агд А1а Зег Ьуз Е1у Зег С1и ТЬг Суз С1у РЬе Уа1 260 265 270
Азр С1и Агд С1у Ьеи Туг Ьуз Зег Ьеи Ьуз С1у А1а Суз Ьуз Ьеи Ьуз 275 280 285
Ьеи Суз Е1у Уа1 Ьеи С1у Ьеи Агд Ьеи Меб Азр Е1у ТЬг Тгр Уа1 А1а 290 295 300
Меб 61п ТЬг Зег Азп Е1и ТЬг Ьуз Тгр Суз Рго Рго С1у С1п Ьеи Уа1 305 310 315 320
Аяп Ьеи Нбз Азр РЬе Агд Зег Азр С1и 11е С1и Ыз Ьеи Уа1 Уа1 Е1и
- 92 023888
325
330 335
61и Ьеи Уа1 Ьуз Ьуз Агд С1и С1и 340
Суз Ьеи Азр А1а Ьеи С1и Зег 11е 345 350
Мег ТЬг ТЬг Ьуз Зег Уа1 Зег РЬе 355 360
Агд Агд Ьеи Зег Н1з Ьеи Агд Ьуз 365
Ьеи Уа! Рго С1у РЬе С1у Ьуз А1а 370 375
Туг ТЬг 11е РЬе Азп Ьуз ТЬг Ьеи 380
МеЬ С1и А1а Азр А1а Ηιξ Туг Ьуз 385 390
Зег Уа1 Агд ТЬг Тгр Азп С1и Не 395 400
11е Рго Зег Ьуз 61у Суэ Ьеи Агд 405 т/з1 С1у С1у Агд Суз Нгз Рго Низ 410 415
Уа1 Азп С1у Уа1 РЬе РЬе Азп С1у 4 20
11е 11е Ьеи С1у Рго Азр С1у Азп 425 430
Уа1 Ьеи Не Рго С1и МеЬ С1п Зег 435 440
Зег Ьеи Ьеи 61п С1п Н1з МеЬ С1и 445
Ьеи Ьеи Уа1 Зег Зег \/а1 11е Рго 450 455
Ьеи МеЬ Н1з Рго Ьеи А1а Азр Рго 4 60
5ег ТЬг Уа1 РЬе Ьуз Азп С1у Азр 465 470
С1и А1а С1и Азр РЬе Уа1 С1и Уа1 475 480
Низ Ьеи Рго Азр ’ / а 1 ΗΪ3 С1и Агд 485
11е Зег 61у Уа1 Азр Ьеи С1у Ьеи 490 495
Рго Αξπ Тгр С1у Ьуз Туг Уа1 Ьеи 500
Ьеи бег А1а С1у А1а Ьеи ТЬг А1а 505 510
Ьеи МеГ Ьеи 11е 11е РЬе Ьеи Мер 515 520
ТЬг Суз Тгр Агд Агд \/а1 Азп Агд
525
Зег С1и Рго ТЬг С1п Шз Азп Ьеи 530 535
Агд С1у ТЬг С1у Агд С1и \7а1 Зег 540
7а1 ТЫ Рго С1п Зег С1у Ьуз 11е 545 550
11е Зег Зег Тгр С1и Зег Туг Ьуз 555 560
Зег С1у С1у С1и ТЬг С1у Ьеи Азп 565
РЬе Азр Ьеи Ьеи Ьуз Ьеи А1а С1у 570 575
Азр Уа1 С1и Зег Азп Рго С1у Рго
С1у С1у Ьуз ТЬг С1у Ие А1а Уа1
- 93 023888
- 94 023888
835 840 845
А1а Н1з Азп Айр Ьуй Агд А1а Айр Рго А1а РЬе Уа1 Суз Агд С1п 61у 850 855 860
1/а1 Уа1 Азр Агд С1у Тгр С1у Азп <51у Суй С1у Ьеи РЬе Ну Ьуз С1у 865 870 875 880
Зег Не Аар ТЬг Суз А1а Ьуз РЬе А1а Суз Зег ТЬг Ьуз А1а Не С1у 885 890 895
Агд ТЬг Не Ьеи Ьуз Пи Азп 11е Ьуз Туг 51и Уа1 А1а 11е РЬе \7а1 900 905 910
ΗΪ3 С1у Рго ТЬг ТЬг Уаг О1и Зег Шз 01у Азп Туг Зег ТЬг 51п Уа1 915 920 925
С1у А1а ТЬг С1п А1а 61у Агд РЬе Зег Не ТЬг Рго А1а А1а Рго Зег 930 935 940
Туг ТЬг Ьеи Ьуз Ьеи С1у С1и Туг С1у С1и Уа1 ТЬг Уа1 Азр Суз С1и 945 950 955 960
Рго Агд Зег 31у Не Азр ТЬг Азп А1а Туг Туг Уа1 МеЬ ТЬг Уа1 С1у 965 970 975
ТЬг Ьуз ТЬг РЬе Ьеи Уа1 Н1з Агд С1и Тгр РЬе МеЬ Азр Ьеи Азп Ьеи 980 985 990
Рго Тгр Зег Зег А1а 51у 5ег ТЬг Уа1 Тгр Агд Азп Агд С1и ТЬг Ьеи 995 1000 1005
Мер С1и 1010 РЬе С1и С1и Рго Нгз 1015 А1э ТЬг Ьуз С1п Зег 1020 Уа1 Не А1а
Ьеи С1у 1025 Зег С1п <31 и С1у А1а 1030 Ьеи Н13 <31п А1а Ьеи 1035 А1а <51 у А1а
Не Рго 1040 ν^ι Ии РЬе Зег Зег 1045 Азп ТЬг Уа1 Ьуз Ьеи 1050 ТЬг Зег С1у
Шз Ьеи 1055 Ьуз Суз Агд Уа1 Ьуз 1060 Меб С1и Ьуз Ьеи С1п 1065 Ьеи Ьуз С1у
ТЬг ТЬг 1070 Туг 51 у Уа1 Суз Зег 1075 Ьуз А1а РЬе Ьуз РЬе 1080 Ьеи 51 у ТЬг
Рго А1а Азр ТЬг С1у ΗΪ5 С1у ТЬг Уа1 νβι Ьеи Ии Ьеи Пп Туг
- 95 023888
1085 1090 1095
ТЬг 61у ТЬг Азр С1у Рго Суз Ьуз Уа1 Рго Не Зег 5ег Уа1 А1а
1100 1105 1110
Деи Азп Азр Ьеи ТЬг Рго Уа1 С1у Агд Ьеи Уа1 ТЬг Уа1 Азп
1115 1120 1125
Рго РЬе Уа1 Зег Уа1 А1а ТЬг А1а Аэп А1а Ьуз Уа1 Ьеи Не 61и
ИЗО 1135 1140
Ьеи 61и Рго Рго РЬе С1у Азр Зег Туг Не Уа1 Уа1 СЬу Агд 61у
1145 1150 1155
С1и С1п 61п Не Азп Н1з ΗΪ3 Тгр Н1з Ьуз Зег Е1у Зег Зег Не
1160 1165 1170
О1у Ьуз А1а РЬе ТЬг ТЬг ТЬг Ьеи Ьуз 61у А1а С1п Агд Ьеи А1а
1175 ИЗО 1185
А1а Ьеи 61у Азр ТЬг А1а Тгр Азр РЬе 61у Зег Уа1 <31у 61у Уа1
1190 1195 1200
РЬе ТЬг Зег Уа1 61у Ьуз А1а Уа1 ΗΪ3 61п Уа1 РЬе 31у 61 у А1а
1205 1210 1215
РЬе Агд Зег Ьеи РЬе С1у С1у Мер Зег Тгр Не ТЬг С1п С1у Ьеи
1220 1225 1230
Ьеи С1у А1а Ьеи Ьеи Ьеи Тгр Мер 61 у Не Азп А1а Агд Азр Агд
1235 1240 1245
Зег Не А1а Ьеи ТЬг РЬе Ьеи А1а Уа1 61у С1у Уа1 Ьеи Ьеи РЬе
1250 1255 1260
Ьеи Зег Уа1 Азп Уа1 Е1й ΗΪ3 А1а Азр ТЬг С1у Суз А1а Не Азр
1265 1270 1275
11е Зег Агд С1п О1и Ьеи Агд Суз С1у Зег 61у Уа1 РЬе 11е ΗΪ3
1280 1285 1290
Азп Азр Уа1 61и А1а Тгр Меб Азр Агд Туг
1295 1300 <210> 62 <211> 4000 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность
- 96 023888 <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400 62
адСадССсдс сСдСдСдадс СдасааасСС адСадСдССС дСдаддаССа асаасаасса 60
асасадСдсд адсСдСССсС Садсасдаад аСсСсдаСдС сСаадааасс аддадддссс 120
ддсаададсс дддсСдСсаа СаСдсСаааа сдсддааЬдс сссдсдСдСС дСссССдаСС 180
ддасССаадс аааадаадсд адддддсаад асСддСаСад сСдСдаСсдС СссСсаддсС 240
сССССдСССд СасссССдсС ддСаСССссс сСССдссссд дСаааСССсс СаСсСаСасс 300
аСсссСдаСа адсСсдддсс ССддадСссс аССдаСаССс ассаСССдад сСдсссааас 360
аассСсдСсд ссдаддасда адддсдсасс аассСССсСд даССССссса сасддадсСд 420
ааадСдддсС аСаСССсадс саССаадаСд аасддсСССа сССдСасадд адСсдСдасс 480
даадссдада саСаСасааа ЬССсдЪддда СасдСсасса ссассССсаа дадаааасас 540
ССссдсссаа сдссСдасдс ССдСсдддсс дссСасаасС ддаадаСддс аддадаСссС 600
сдаСаСдаад ааСсСсСдса саасссдСаС ссСдаССасс аССддсСдсд дасадСсаад 660
асСассаадд ададСсСддС саССаСаСса ссаадсдСдд ссдаСсССда СссССаСдаС 720
адаСсссСдс асадСадддС ССССссСддс дддааССдСа дсддСдССдс адСаСсаадС 780
ассСасСдсС ссасСаасса сдасСасасС аСаСддаСдс сСдадаассс СсдасСсддС 840
аСдадССдсд асаСССССас даасСсасдд ддсаадсддд саСсСааддд дСсСдаааса 900
СдсдддСССд ССдаСдадсд ддддССдСаС аааСсСсССа ааддсдссСд СаадсСдааа 960
сСсСдСддсд СасСддддсС дсдссСдаСд дасддсасаС дддСддсСаС дсадасаадс 1020
ааСдааасаа адСддСдСсс сссСддСсад сСддССааСс СдсасдасСС СаддСсСдас 1080
даааСсдадс ассССдСддС ддаддаасСд дСдаадааас дсдаададСд ссСддасдса 1140
сССдададСа ССаСдассас саааСссдСС СссССсадаа дасСдадсса ссСдсдааад 1200
сСддСдссад ддССсдддаа ддсССаСасС асссссааса адасСсССаС ддаддсддаС 1260
дсссаССаСа адСсадССад дасССддааС дадаСааССс ссСссааадд аСдСсСдада 1320
дСсддСддда даСдссассс ссаСдСсааС ддддСдССсС ССаасддааС саСссСддда 1380
ссСдасддда асдСдсСдаС СсссдадаСд сааСсССссс ССсСдсадса асасаСддаа 1440
сСссСддСдС сССсадСдаС ассссСдаСд сасссасСдд ссдассссад сасСдСдССс 1500
аааааСддсд аСдаддссда адасСССдСд даадЬСсасс СдсссдасдС асасдааадд 1560
аСаСсСддад СадассСддд ссССссСааС СддддСаадС асдСдсСссС дадСдсдддС 1620
дссССдассд сСССдаСдсС даСсаССССС сСдаСдассС дсСддсддад ддСдааСсдс 1680
Сссдадссда сасадсасаа СсСсададдд асаддссддд аадСаадСдС дасСссдсаа 1740
СсСддсаада ССаССадСад ССдддададС СасаадСссд даддададас СдддССдааС 1800
- 97 023888
ЫзСдаЬсЬдс Ьсааас^Идс аддсдаЬдЬа дааЬсаааЬс сЁддасссдд аддааадасс 1860
дд£аЫдсад ЬсаЬдагЬдд ссЬдаСсдсс сдсдЬаддад садЫзасссЬ сЬсЬаасЬЬс 1920
саадддаадд Ьда£да1дас ддЬаааЬдсЬ асЬдасдЬса садаЬдЬсаС сасдаеьсса 1980
асадсРдсЬд дааадаассЬ аЪдсаЬЬдЬс ададсааЬдд аЬдЬддда^а саЬдЬдсдаг 2040
даЬасЬаЪса сЫаЬдаа^д ессадЪдсЪд ЬсддсЪддЪа аЬдаЬссада адасаЬсдас 2100
тдГГддГдса сааадЬсадс ад£с£асдЬс аддЬаРддаа да1:дсассаа дасасдссас 2160
Юаадасдса д£сддаддЬс асЬдасадЬд садасасасд дадааадсас есЬадсдаас 2220
аадааддддд сЬСдда^дда садсассаад дссасааддЬ аЬЬЬддЬааа аасадааЬса 2280
£ддаЬсЬЬда ддаассс^дд аЬаЬдсссЬд д^ддсадссд ЬсаЫзддЬЬд даЬдс*:Ьддд 2340
адсаасасса ЬдсадададЬ ^дЬдГЬЬдЬс дЬдсЬаСЬдс Ь-ЬМзддЬддс сссадсЬЪас 2400
адсЬЪЪаасЬ дссЫддааЬ дадсаасада дасСЪсЫдд ааддадЬдЬс Ьддадсааса 2460
ЬдддЬддаЬЬ ЬддЫсЬсда аддсдасадс ЬдсдЬдасСа СсаЬд^сЬаа ддасаадсс£ 2520
ассаЬсдаЬд ЬдаадаЬда!: дааЬа^ддад дсддссаасс ИддсададдЬ ссдсадЪЬа! 2580
ЬдсЪаСЬЬдд сЬассдГсад сдаЬсЬс1ссс ассааадсьд сдЬдсссддс саЪдддадаа 2640
дсЬсасааЬд асааасдЬдс 1:дасссадсЬ ЬЫдЬдЬдса дасааддадь ддЬддасадд 2100
ддсСддддса асддсЬдсдд асЬаЬЬ'Ьддс аааддаадса ЬЬдасасаЬд сдссаааЪИ: 2160
дссСдсСсЬа ссааддсаас аддаадаасс аЬЫЬдааад адааЬаЬсаа дЬасдаадЬд 2820
дссаЫзСЬЬд ЬссаЬддасс аас^асЬдЬд дадЬсдсасд дааасс.ас£с сасасаддСС 2880
ддадссасЬс аддсадддад аГЬсадсаЪс асЬссЬдсдд сдсс^СсаЬа сасасЬааад 2940
сЬЬддадааЬ аЬддададдЬ дасадЬддас ЬдЬдаассас ддЬсадддаЬ ЪдасассааЬ 3000
дсаЬасЬасд СдаДдас-ЬдЬ Ьддаасааад асдСЬсЬЪдд ЪссаьсдЬда дЬддЪЬсаЬд 3060
дассЬсаасс ЬсссСЬддад садЬдсЬдда адЬасЬдЬдЪ ддаддаасад ададасдСЬа 3120
аЬддадЫЛд аддаассаса сдссасдаад садСсЬдЬда ЬадсаЬЬддд сЬсасаадад 3180
ддадсЬсЬдс аЪсаадс£ЬЪ ддсЪддадсс аЬЪссЬдЬдд ааЪЪЪЪсаад саасасЬдСс 3240
аадЬЬдасдР сдддЬса-ЫзЬ даадГдиада дЬдаада1:дд аааааЬСдса дЫ:дааддда 3300
асаассЬа^д дсдЪсСдЫ:с аааддсЬЫс аадЪЫс^Ьд ддасЪсссдс адасасаддЬ 3360
сэсддсасЬд ЬддЬдЬЬдда а^ЬдсадЬас асЬддсасдд аЬддассЬЬд сааадЬЬссЬ 3420
аЬсЬсдСсад сддсЫсаЫ: даасдассьа асдссадЬдд дсадаЬЬддЬ сасСдЬсаас 3480
садЬддссас ддссаасдс! ааддЬссЬда ЫдааСкдда ассасссЬЬЬ 3540
ддадасСсаС асаЬадЪддС дддсададда даасаасада Ьсаа(:сасса сСддсасаад 3600
гсЬддаадса дсаЬЬддсаа адссЬЬЬаса ассасссЬса ааддадсдса дадасЬадсс 3660
дсЬсЬаддад асасадсТЬд ддастдда ЬсадЫгддад дддЪдЬЬсас сЬсадЫгддд 3120
- 98 023888
ааддсСдСсс а^саадЬдКЁ сддаддадса ЬкссдсОсас ЪдЪДсддадд саСдЪссЦдд 3780
а^аасдсаад дакСдсКддд ддсксксскд скдкддакдд дсаСсаакдс ссдидасадд 3840
^сса^адсЪс ксасдЦСЛсЪ сдсадШдда ддадкксЬдс ссЬРссЬсЪс сд£даасд1:д 3900
сасдсСдаса сЪдддСдСдс саСадаса^с адссддсаад адс^дадаЪд ЬддаадЬдда 3960
дЪдЬЪсаЪас асааЪдаЪд! ддаддсСТдд акддассддС 4000
<210> 63 <211> 4000 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 63
8са1:саадсд дасасасЪсд асЪдШкдаа ксаСсасааа сасЬсскаак ЬдЬкдЬСааН 60
кдкдСсасдс Ссдасааада аСсдкдсС^с ЦададсЪаса даккскЬЬдд ЪссЪсссддд 120
ссдСЛс£сдд сссдасад'Ы! аНасдаСЛ ίΐ дсдссЪЪасд дддсдсасаа саддааскаа 180
сседаа^ссд сс^сссцсдс ксссссди^с £дасса!а£с дасас£адса аддад^ссда 240
даааасааас асдддаасда ссацаааддд дааасдааас саСкСааадд а'Еадакакдд 300
ЬадддасСаЪ Ссдадсссдд аассдсаддд гаассанаад ЬддЪааасЬс дасдддксЬд 360
КЪддадсадс аас^ссЦасЦ Ьсссасдкда ££адааадас сСааааддак дЬассЬсаас 420
££С.сасссда 7а1:ааадЬсд д^ааСЬс^ас 1:1дссдаааЪ даасаЬдЬсс £садсас£дд 480
сИ:сддс£сС дРаЪаРдЪЫ: ааадсасссЬ аЬдсадЬддС дд£ддаад1Л сЬсССЛедЬд 540
ааддсдддЪР дсддасЦдсд аасадсссдд сдаакдИЬда ссЪ'ЬсЬассд 1сс1с1адда 600
дсбаСасЬбс ЪЛададасдЬ дкЪдддсаЪа ддасЪаа^дд Ъаассдасдс с8дЪсадЪ£с 660
£да£дд££сс ссИсадасса дСаагаЪадЪ дд^Цсдсасс ддсЪадаас£ аддааСасба 720
1с1адддасд Хд-ьса^ссса ааааддассд ссс^Ъааса^ сдссасаасд Рса£ад££са 780
РддаЪдасда дд^дакРддЪ дсСдаРдЪда ЬаЪассЬасд дасРсС^ддд адсСдадсса 840
Расксаасдс ЦдЦаааааСд сЪЪдадСдсс ссдСЪсдссс дЪадаЬЬссс садасЦЬСдР 900
асдсссааас аас1ае±сдс ссссааса^а ЪЪЪададааЪ Ъкссдсддас а1£сдас£ЪС 960
дадасассдс ацдассссда сдсддасСас сРдссд^дба сссассдаЪа сд'Ьс'ЬдЪСсд 1020
£Лас1:ссд1:с Ссассасадд дддассад£с дассаа^Ьад асд^дс^даа акссадасСд 1080
с^ЦЦадсСсд Сддаасасса сс£сс££дас сас±Сс££Сд сдс££с£сас ддассКдсд^ 1140
даасСсксак ааъасЪддЪд д£Л£аддсаа аддаадЪсЪЪ с£дас1: сдд£ ддасдсс££с 1200
дассасддсс ссаадсссЫ ссдаакаЦда СаааадССдц ссхдадааца ссиссдсска 1260
сдддЪааСа!: СсадСсааСс сЪдаассРЪа с£с£а£Ьаад ддаддЪЬЪсс ЬасадасЬсЬ 1320
- 99 023888
садссасссй сйасддйддд ддйасадййа ссссасаада ааййдссййа дйаддасссй 1380
ддасйдсссй йдсасдасйа адддсЪсЪас дййадааддд аадасдйсдй йдЪдйассйй 1440
даддассаса даадйсасйа йддддасйас дйдддйдасс ддсйддддйс дйдасасаад 1500
йййййассдс йасйссддсй йсйдааасас сййсаадйдд асдддсйаса йдйдсйййсс 1560
йайадассйс айсйддассс ддааддаййа ассссаййса йдсасдадда сйсасдссса 1620
сддаасйддс дааасйасда сйадйааааа дасйасйдда сдассдссйс ссасййадсд 1680
аддсйсддсй дйдйсдйдйй ададйсйссс йдйссддссс Ъйсаййсаса сйдаддсдйй 1740
адассдййсй аайаайсайс аасссйсйса айдййсадас сйссйсйсЬд асссаасййа 1900
ааасйадасд адйййдаасд йссдсйасай сййадййЬад дассйдддсс йссйййсйдд 1360
ссайаасдйс адйасЪаасс ддасйадсдд асдсаЪссЪс дйсааЪддда дадаййдаад 1920
дййсссййсс асйасйасйд ссайййасда йдасйдсадй дйсйасадйа дйдсйааддй 1980
йдйсдасдас сйййсййдда йасдйаасад йсйсдййасс йасасссйай доасасдсйа 2040
сйайдайадй даайасЪйас дддЪсасдас адссдассаЪ ЬасйаддйсЪ йсйдйадсйд 2100
асаассасдй дйййсадйсд йсадайдсад йссайассйй сйасдйддйй сйдйдсддйд 2160
адййсйдсдЪ садссйссад йдасйдйсас дйсйдЪдЪдс сйсйЪйсдйд адайсдсййд 2220
ййсйЪссссс даассЪассй дйсдйддййс сддйдййсса Ъааассаййй ййдйсййадй 2280
ассйадаасй ссййдддасс йайасдддас сассдйсддс адйаассаас сйасдаассс 2340
йсдСйдйддй асдйсЪсйса асасааасад сасдайаасд аааассзссд дддйсдаайд 2400
Ъсдаааййда сддаассЪйа сйсдййдйсй сйдаадаасс ййссйсасад ассйсдййдй 2460
асссассйаа ассаададсй йссдсйдйсд асдсасйдай адйасадайй ссйдййсдда 2520
йддйадсйас асййсйасйа сййайассйс сдссддййдд ассдйсйсса ддсдйсаайа 2580
асдайааасс дайддсадйс дсйадададд йддййЪсдас дсасдддссд дйасссйсйй 2640
сдадйдййас йдйййдсасд асйдддйсда ааасасасдй сйдййссйса ссассйдйсс 2700
ссдассссдй йдссдасдсс йдайааассд йййссййсдй аасйдйдйас дсддйййааа 2760
сддасдадай ддЪйссдййа Ьссййсййдд йаааасйййс йсййайадйй сайдсййсас 2820
сддйааааас аддйассйдд ййдайдасас сйсадсдйдс сйййдайдад дйдйдйссаа 2830
ссйсддйдад йссдйсссйс йаадйсдйад Ъдаддасдсс дсддаадйай дйдйдайЪйс 2940
даассйсййа йассйсйсса сйдйсассйд асасййддйд ссадйсссйа асйдйддййа 3000
сдйайдайдс асйасйдаса ассййдйййс йдсаадаасс аддйадсасй сассаадйас 3060
сйддадЪйдд адддаассйс дйсасдассй йсайдасаса ссйссййдйс йсйсйдсаай 3120
йассйсааас йссййддйдО дсддйдсййс дйсадасасй айсдйаассс дадйдййсйс 318 0
ссйсдадасд садййсдааа ссдассйсдд йааддасасс ййаааадййс дййдйдасад 3240
- 100 023888
сссаассдса дсссадгааа οίЬсаса^сс саснсеасс ΐίίίί33ϋ9ί ΟΒΒΟίίΟΟΟί 3300
1дЫдда1ас сдсадасаад ίίсссдааад ίСсааадаас сс!дадддсд ίсίдίдίсса 3360
дЬдссд^дас ассасаассЬ ЬаасдЬсаЬд ίς3θθ9ΐ9οσ ЬассЬддаас дίίίсаадда 3420
Ьададсад!с ассдаадЬаа сЬЬдс^ддаЬ ^дсФЭ7сасс сдЬсГаасса дίдасадΐίд 3480
ддаааасааа д£сассдд!;д ссдд!Ьдсда Нссаддас£ аасЬЬаасс£ ЬддЬдддааа 3540.
сс^сИдад^а СдЬаСсасса οοο9ίοίοοί οίίςίίςίοί έςίίβςίςςί 9&οο9ίΘίίο 3600
адэссЬЬсдЪ сд!аассдьь ЬсддаааЬдЬ ί99ί299θφί ίСссЬсдсдЬ οίсЬдакедд 3660
сдадаЬсс1с ^дЬдЬсдаас ссЬдааас^ 39ίсаасс£с οοο9θ33ςί9 дадЪсаассс 3720
ί ^сдасадд ЬадЬЬсасаа дссЬссЬсдЬ ааддсдадСд асаадссЬсс 9ί£θ39ρ3θθ 3730
ЬаЫ:дсдЫ:с сСаасдассс ссдададдас аасассЬасе сдЬадГίΒος адсасЬдЪсс 3840
аддЬаЬсдад ад^дсааада дсдьсаасс^ ссьсаадасд адааддадад дсасСЬдсас 3900
д£дсдас£д£ дасссасасд дЬаЬсЬдЬад ίсддссд!яс есдасЬοίас βαοίίο3οοί 3960
сасаадЬа^д ЬдХЛасСаса ссЬссдаасс ЬассЛддсса 4000
<210> 64 <211> 702 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 64
Μβί Зег Ьуз Ьуз Рго С1у С1у Рго С1у Ьуз Зег Агд А1а Уа1 Туг Ьеи 15 10 15
Ьеи Ьуз Агд С1у Мег Рго Агд \7а1 Ьеи Зег Ьеи Не С1у Ьеи Ьуз Агд
25 30
А1а Мее Ьеи Зег Ьеи 11е Азр С1у Ьуз С1у Рго 11е Агд РЬе Уа1 Ьеи 35 40 45
А1а Ьеи Ьеи А1а РЬе РЬе Агд РЬе ТЬг А1а 11е А1а Рго ТЬг Агд А1а
55 60
Уа1 Ьеи Азр Агд Тгр Агд С1у Уа1 Азп Ьуз С1п ТЬг А1а Μθί Ьуз Ыз
70 75 80
Ьеи Ьеи Зег РЬе Ьуз Ьуз С1и Ьеи С1у ТЬг Ьеи ТЬг Зег А1а 11е Азп
90 95
Агд Агд Зег Зег Ьуз С1п Ьуз Ьуз Агд С1у б1у Ьуз ТЬг С1у 11е А1а 100 105 110
- 101 023888
- 102 023888
- 103 023888
Зег Тгр С1и Зег 625 Туг Ьуз 630 Зег СЬу СЬу СЬи ТЬг СЬу Ьеи Азп 635 РЬе Азр 640
Ьеи Ьеи Ьуз Ьеи А1а СЬу Азр УаЬ СЬи 5ег Азп Рго СЬу Рго АЬа Агд
64 5 650 655
Азр Агд Зег Ие АЬа Ьеи ТЬг РЬе Ьеи АЬа УаЬ СЬу СЬу 7а1 Ьеи Ьеи
660 665 670
РЬе Ьеи Зег УаЬ А5П \7а1 Η1ξ АЬа Азр ТЬг С1у Суз АЬа Г1е Азр Не
675 680 685
$ег Агд СЬп СЬи Ьеи Агд Суз СЬу Зег СЬу УаЬ РЬе ГЬе НЬз
690 695 700
<210> 65
<211> 2200
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 65
адЬадЫсде сЬдЬдбдадс ЬдасааасЬЬ адЬадЬдЬЬЬ дЬдаддаЬЬа асаасааЬЬа 60
асасадЬдсд адсЬдЬЬЬсЬ Ьадсасдаад аСсЪсдаЬдЬ сьаадааасс аддадддссс 120
ддсаададсс дддсЬдЬсЬа ЬЬЬдсЬаааа сдсддааЬдс сссдсдЬдЬЬ дЬссЬЬдаЫ: 180
ддасЬОаада дддсЬаЬдЬЬ дадссЬдаЬс дасддсаадд ддссааЬасд аЬЬЬдЬдЬЬд 240
дсЬсЬсЬЬдд сдЬЬсЬЬсад дЬЬсасадса аЬЬдсЬссда сссдадсадЬ дсЬддаЬсда 300
ЬддададдЬд Ьдаасаааса аасадсдаЬд ааасасс1:Ьс ЬдадЬЬЬсаа дааддаасЬа 360
дддассЬЬда ссадЬдсЬаЬ саа£сддсдд адсЬсааадс аааадаадсд адддддсаад 420
асЬддиаЬад сЬдЬдаСсдЬ ЬссЬсаддсЬ сЬЬЬЬдЬЬЬд ОасссЬЬдсЬ ддЬаЬЬЬссс 480
сЬЬЬдсЬЬЬд дЬаааЬЬЬсс ЬаЬсЬаЬасс абсссЬдаЬа адсисдддсс ЬЬддадЬссс 540
аЬЬдаЬаЬЬс ассаЬЬЪдад сЬдсссааас аассЬсдЬсд ЫдаддаЬда адддЬдсасЬ 600
ааЬсЬЫсЬд даЬЬЬЛссЬа саЬддадЬЬд ааадЬдддсС- аЬаЬЬЬсадс саЬЬаадаЬд 660
аасддсЬЬЬа сЬЬдЬасадд адСсдЬдасс даадссдада саСаЬасааа ЫзЬсдЬддда 720
ЬасдЬсасса ссассЬЬсаа дадаааасас ььссдсссаа сдссьдасдс ЬЬдЬсдддсс 730
дсььасаась ддаадаЬддс аддадаЬссЬ сдаЬаСдаад ааЬсЬсЬдса саасссдЬаЬ 840
ссЬдаЬЬасс аЬЬддсЬдсд дасадЬсаад асЬассаадд ададЬсЬддЬ саЬЬаЬаЬса 900
ссаадсдЬдд ссдаЬсЬЬда ЬссЬЬаЬдаЬ адаЬсссЪдс асадЬадддЬ ЬЬЬЬссьддс 960
дддааЬЬдЬа дсддЬдЬЬдс адЬаЬсаадЬ ассЬасЬдсЬ ссасЬаасса сдасЬасасЬ 1020
- 104 023888
абабддабдс сбдадаассс бсдасбсддб абдадббдсд асаЫбббас даасбсасдд 1080
ддсаадсддд сасссааддд дбсбдаааса гдсдддбббд ббдасдадсд ддддббдбаб 1140
ааабсСсбба ааддсдссбд баадсбдааа сбсбдбддсд басбддддсб дсдссбдабд 1200
дасддсасаб дддбддсбаб дсадасаадс аасдааасаа адсддЬдбсс сссбддбсад 1260
сбддббаабс бдсасдасбб баддбсбдас дааабсдадс ассббдбддб ддаддаасбд 1320
дбдаадааас дсдаададЬд ссбддасдса сббдададба ббабдассас сааабссдбб. 1330
бссббсадаа дасбдадсса ссбдсдааад сбддбдссад ддббсдддаа ддсббабасб 1440
аиисааса адасбсббаб ддаддсддаб дсссаббаба адбсадббад дасббддааб 1500
дадабааббс ссбссааадд абдбсбдада дбсддбддда даЪдссассс ссабдбсааб 1560
ддддбдбб сб ббаасддааб сабссбддда ссбдасддда асдбдсбдаб бсссдадабд 1620
саабсббссс ббсбдсадса асасаЬддаа сбссбддбдб сб^садбдаб ассссбдабд 1680
сасссасбдд ссдассссад сасбдбдб1с ааааабддсд абдаддссда адасбббдбд 1740
даадббсасс бдсссдабдб асасдааадд абабсбддад бадассбддд ссббссбааб 1800
бддддбаадб асдбдсбссб дадбдсдддб дссббдассд сбббдабдсб дабсаббббб 1860
сбдабдассб дсбддсддад ддбдаабсдс бссдадссда сасадсасаа бсбсададдд 1920
асаддссддд аадбаадбдб дасбссдсаа бсбддсаада ббаббадбад ббдддададб 1980
басаадбсбд даддададас бдддббдааб бббдабсбдс Ссааасббдс аддсдаЬдЬа 2040
даабсааабс сбддасссдс ссдддасадд бссабадсбс бсасдбббс1; сдсадббдда 2100
ддадббсбдс ъсьъссесес сдСдаасдСд сасдсбдаса сбдддбдбдс сабадасабс 2160
адссддсаад адсбдадабд бддаадбдда дбдббсабас 2200
<210> бб <211> 2200 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 66
бсабсаадсд дасасасбсд асбдбббдаа бсабсасааа сасбссбааб бдббдббааб 60
бдбдбсасдс бсдасааада абсдбдсббс бададсбаса дабсссббдд бссбсссддд 120
ссдббсбсдд сссдасадаб ааасдабббб дсдссббасд дддсдсасаа саддаасбаа 180
ссбдааббсб сссдабасаа сбсддасбад сбдссдббсс ссддббабдс бааасасаас 240
сдададаасс дсаадаадбс саадбдбсдб баасдаддсб дддсбсдбса сдассбадсб 300
ассбсбссас асббдбббдб ббдбсдсбас бббдбддаад асбсааадбб сббссббдаб 360
сссбддаасб ддбсасдаба дббадссдсс бсдадбббсд ббббсббсдс бсссссдббс 420
- 105 023888
Ъдасса£аъс дасас£адса аддад^ссда даааасааас а1;дддаасдз сса1;аааддд 480
дааассааас сагЫааадд а£ада£а£дд ДадддасЬаЪ Ьсдадсссдд аассЬсаддд 540
£аас£а£аад 6дд£ааас1:с дасдддЫ:1:д ^Дддадсадс аасЪссСасС: 1:сссасд1:да 600
1;Ъадааадас снаааадда^ д-ЬассЪсаас £Ь£садссда Ёа£аэад£.сд дДаабСсЪас 660
ЬЪдссдааа1: дааса^дЪсс Исадсас1:дд сЪСсддс^сЪ дСа£а£д,Ь£'С ааадсасссЬ 720
аЪдсад^ддЪ ддЪддаад^Ь с£с£Ъ£Ъд£д ааддсдддбЪ дсддасбдсд аасадсссдд 780
сдаа^дббда сс^бсЬассд ίοΌΐσίадда дсЬабасббс ^Сададасд^ д^бдддсаба 840
ддасСааЬдд Саассдасдс с£д£сад£1с ЪдаЪддЬСсс 6с1садасса дсааъасадс 900
ддЪЪсдсасс ддсЬадаасЪ аддаа^асЪа бсбадддасд едбса^ссса ааааддассд 960
сссЪЪаасаЪ сдссасаасд ЬсаЪадЪЪса Ддда^дасда ддЪдаЬЬддЬ дсЬдаЦдбда 1020
ЪаЪассЪасд дасСсСЪддд адсбдадсса иас1;саасдс сд^ааааа^д сЪ^дадЪдсс 1080
ссд1£сдссс д6ада6£ссс садасбб бд£ асдсссааас аасЬас^сдс ссссаасаСа 1140
ЬЬСададааЪ б^ссдсддас аЪЪсдасЪЪЪ дадасассдс аИдассссда сдсддасЪас 1200
с£дссд1:дба сссассда1:э сд^сЬд^сд ^Ъас1:еъдъе Ъсассасадд дддассадЬс 1260
дассаа££ад асд1:дс1:даа а£ссадас£д с^Ъадс^сд Ьддаасасса сс£сс££.дас 1320
сасССсС^Сд сдс56с£сас ддассЪдсдС даасбсбсаС аабасСддбд д£5Саддсаа 1330
аддаадЪсЬЪ сЪдас^сддТ. ддасдсЬЬДс дассасддбс ссаадссс££. ссдаа£:а£да 1440
^аааад'СЛдЪ £ссдадаа£а ссДссдссДа сдддбааЬа-С. Ъсад£саа1:с сХдаасс^Ъа 1500
с£сЪа££аад ддаддЪЪСсс ЬасадасЬсЬ садссасссь сбасддЪддд ддбасад^Ъа 1560
ссссасаада ааббдссбЪа дбаддасссС ддасОдсссб £дсасдасеа адддс£с!ас 1620
д^Садааддд аадасдСсдб Сд'Сд'ЬассДб даддассаса даадбсасДа Ъддддасбас 1680
дЪдддЪдасс ддсбдддд^с дС.дасасаад ЪЪД11:ассдс ЪасЪссддсЪ ЪсЪдааасас 1740
с£1:саадЬдд асдддсЬаса £д£дс£££сс £а£адасс£с а£с1ддассс ддааддаОа 1300
ассссаЬбса бдсасдадда сЪсасдссса сддаасбддс дааасбасда сбадбааааа 1860
дас£ас£дда сдассдссгс ссасд^адсд аддсбеддсе дЪдЪ сд^дбб адад1с1ссс 1920
Ьд^ссддссс бдсаМ:саса сбдаддсдЫ: адаседЪбсЬ аа^ааЪса^с аассОсЪса 1930
а^д'ЬЬсадас сЪссЬс^сЪд асссаасЫга ааасЬадасд ад^ДИдаасд Ессдс^аса^ 2040
сб Ъад1Л£ ад дассбдддсд ддссс^дбсс аддСа^сдад адСдсааада дсд£саасс£ 2100
ссОсаадасд адааддадад дсасЪЪдсас д^дсдасЪдЪ дасссасасд д£аЪс£д£ад 2160
6сддссдД£с ЪсдасЬсЪас асс5£сассЬ сасаад1:аЬд 2200
<210 67 <211> 368 <212> БЕЛОК
- 106 023888 <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 67
МеЬ Зег Ьуз Ьуз Рго С1у С1у Рго С1у Ьуз Зег Агд А1а 7а1 Азп МеГ
Ьеи Ьуз Агд С1у МеЬ Рго Агд Уа1 Ьеи Зег Ьеи Не С1у Ьеи Ьуз Агд 20 25 30
А1а МеЬ Ьеи Зег Ьеи 11е Аар С1у Ьуз Е1у Рго 11е Агд РЬе ’7а1 Ьеи 35 40 45
А1а Ьеи Ьеи А1а РЬе РЬе Агд РЬе ТЬг А1а 11е А1а Рго ТЬг Агд А1а 50 55 60
Уа1 Ьеи Азр Агд Тгр Агд С1у Уа1 Азп Ьуз 61п ТЬг А1а МеЬ Ьуз ΗΪ3 65 70 75 80
Ьеи Ьеи Зег РЬе Ьуз Ьуз Е1и Ьеи С1у ТЬг Ьеи ТЬг Зег А1а Не Азп 85 90 95
Агд Агд Зег Зег Ьуз С1п Ьуз Ьуз Агд С1у С1у Ьуз ТЬг С1у Не А1а 100 105 110
Уа1 МеЬ 11е С1у Ьеи Не А1а Зег УаЬ СЬу А1а Уа1 ТЬг Ьеи Зег Азп 115 120 125
РЬе С1п С1у Ьуз Уа1 МеГ МеЬ ТЬг Уа1 Азп А1а ТЬг Азр Ή1 ТЬг Азр 130 135 140
Уа1 11е ТЬг Не Рго ТЬг А1а А1а С1у Ьуз Азп Ьеи Суз Не УаЬ Агд 145 150 155 160
А1а МеЬ Азр Уа1 С1у Туг МеЬ Суз Азр Азр ТЬг Не ТЬг Туг С1и Суз 165 170 175
Рго Уа1 Ьеи Зег А1а С1у Азп Азр Рго СЬи Азр 11е Азр Суз Тгр Суз 180 185 190
ТЬг Ьуз Зег А1а УаЬ Туг Уа1 Агд Туг С1у Агд Суз ТЬг Ьуз ТЬг Агд 195 200 205
Н1з Зег Агд Агд Зег Агд Агд Зег Ьеи ТЬг Уа1 С1п ТЬг НЬз С1у С1и 210 215 220
Зег ТЬг Ьеи А1а Азп Ьуз Ьуз С1у А1а Тгр МеГ Азр Зег ТЬг Ьуз А1а
- 107 023888
- 108 023888
109 023888
740 745 750
С1у Ьеи Ьеи С1у А1а Ьеи Ьеи Ьеи Тгр Меб С1у 11е Азп А1а Агд Азр
755 760 765
Агд Зег 11е А1а Ьеи ТЬг РЬе Ьеи А1а Уа1 С1у С1у Уа1 Ьеи Ьеи РЬе
770 775 780
Ьеи Зег Уа1 Азп 7а1 Низ А1а Азр ТЬг С1у 11е Нйз Агд С1у Рго А1а
785 780 795 800
ТЬг Агд ТЬг ТЬг ТЬг С1и Зег С1у Ьуз Ьеи 11е ТЬг Азр Тгр Суз Суз
805 310 815
Агд Зег Суз ТЬг Ьеи Рго Рго Ьеи Агд Туг С1п ТЬг Азр Зег С1у Суз
820 825 830
Тгр Туг С1у Меб С1и Не Агд Рго С1п Агд Низ Азр С1и Ьуз ТЬг Ьеи
335 840 845
Уа1 С1п Зег С1п \7а1 Азп А1а Туг Азп А1а Азр Меб Не Азр Рго РЬе
350 855 860
(51п Ьеи С1у Ьеи 865 <210> 68 <211> 2700 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 63
адбадббсдс сбдбдбдадс бдасааасбб адбадбдббб дбдаддабба асаасаабба 60
асасадбдсд адсбдбббсб бадсасдаад абсбсдабдб сбаадааасс аддадддссс 120
ддсаададсс дддсбдбсаа бабдсбааза сдсддаабдс сссдсдбдбб дбссббдабб 180
ддасббаада дддсбабдбб дадссбдабс дасддсаадд ддссаабасд абббдбдббд 240
дсбсбсббдд сдббсббсад дббсасадса аббдсбссда сссдадсадб дсбддабсда 300
бддададдбд бдаасаааса аасадсдабд ааасассббс бдадбббсаа дааддаасба 360
дддассббда ссадбдсбаб саабсддсдд адсбсэааас аааадаааад аддаддааад 420
ассддааббд садбсабдаб бддссбдабс дссадсдбад дадсадббас ссбсбСбаас 480
ббссэаддда аддбдабдаб дасддбаааб дсбасбдасд бсасадабдб сабсасдабб 540
ссаасадсбд сбддааадаа ссбабдсабб дбсададсаа ГддабдСддд абасабдбдс 600
- 110 023888
дагдагасга гсасггаГда аГдсссадгд егдгеддегд дГааГдаГсс адаадасаГс 660
дасГдГГддГ дсасааадГс адсадГсГас дГсаддГаГд даадаГдсас саадасасдс 720
сасГсаадас дсадГсддад дГсасГдаса дГдсадасас аеддадааад сасГсГадсд 780
аасаадаадд дддсссддай ддасадсасс ааддссасаа ддгагггддГ ааааасадаа 840
ГсаГддаГсГ Гдаддаассс ГддаГаГдсс сГддГддсад ссдГсаГГдд ГГддаГдеГГ 900
дддадсааса ссаГдсадад адГГдГдГГГ дГедГдеГаГ ГдеГГГГддГ ддссссадсГ 960
ГасадсГГГа асГдссГГдд ааГдадсаас ададасгГсГ ГддааддадГ дГсГддадса 1020
асаГдддГдд аГГГддГГсГ сдааддсдас адеГдедГда сГаГсаГдГс Гааддасаад 1080
ссГассаГсд аГдГдаадаГ даГдааГаГд даддсддсса ассГддсада ддГссдсадГ 1140
гаггдсгагг гддсГассдГ садсдаГсГс гссассааад сГдсдгдссс ддссаГддда 1200
даадсГсаса аГдасааасд ГдсГдассса деГГГГдГдГ дсадасаадд адГддГддас 1260
аддддсИддд дсаасддсгд сддасГаГГГ ддсаааддаа дсаГГдасас аГдсдссааа 1320
ГГГдссГдсг сГассааддс ааГаддаада ассаГгггда аададаагаг саадГасдаа 1380
дГддссаГГГ ГГдГссаГдд ассаасГасГ дГддадГсдс асддааасГа сГссасасад 1440
дГГддадсса сГсаддсадд дадаГГсадс аГсасГссГд сддсдссГГс аГасасасГа 1500
аадсГГддад ааГаГддада ддГдасадГд дасГдГдаас сасддГсадд даГГдасасс 1560
ааГдсаГасГ асдГдаГдас ГдС Гддааса аадасдГГсГ ГддГссаГсд ГдадГддГГс 1620
аГддассГса ассГсссГГд дадсадГдсГ ддаадГаеГд ГдГддаддаа садададасд 1680
ГГааГддадГ ГГдаддаасс асасдссасд аадсадГсГд ГдаГадсаГГ дддсГсасаа 1740
дадддадсГс ГдсаГсаадс ГГГддеГдда дссаГГссГд ГддааГГГГс аадсаасасГ 1300
дГсаадГГда сдГсдддГса ГГГдаадГдГ ададГдаэда гддаааааГГ дсадГгдаад 1360
ддаасаассГ аГддсдГсГд ГГсаааддсГ ггсаадгггс ГГдддасГсс сдсадасаса 1920
ддГсасддса сГдГддГдГГ ддааГГдеад ГасаеГддса еддаГддасс ГГдсааадГГ 1930
ссГаГсГсдГ садГддсГГс аГГдаасдас сГаасдссад ГдддсадаГГ ддГсасГдГс 2040
аасссГГГГд ГГГсадГддс сасддссаас дсГааддГсс ГдаГГдааГГ ддаассассс 2100
ГГГддадасГ саГасаГадГ ддГдддсада ддадаасаас адаГсааГса ссасГддсас 2160
аадгсГддаа дсадсаггдд сааадссГГГ асаассассс Гсаааддадс дсададасГа 2220
дссдсГсГад дадасасадс ГГдддаеГГГ ддаГсадГГд даддддГдГГ сассГсадГГ 2280
дддааддсгд ГссаГсаадГ дГГеддадда дсаГГссдсГ сасГдГГсдд аддсаГдГсс 2340
ГддаГаасдс ааддаГГдсГ дддддсГсГс еГдГГдГдда ГдддсаГсаа ГдсГсдГдас 2400
аддГесаГад сГсГсасдГГ ГсГсдсадГГ ддаддадГГс ГдсГсГГссГ сГссдГдаас 2460
дГдсасдсГд асасГдддаГ ссассдГдда ссГдссасГс дсассассас адададедда 2520
- 111 023888
аад!1да1аа сада!1дд1д с!дсаддадс 1дсасс11ас сассас!дсд с!ассааас! 2580
дасадсддс! д!1дд1а1дд 1а1ддада1с адассасада даса!да!да ааадассс!с 2640
д!дсад!сас аад!даа!дс 11а1аа1дс1 да!а1да!1д асссИИса д11дддсс11 2700
<210> 69 <211> 2700 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 69
1са1саадсд дасасас!сд ас1д!11даа 1са1сасааа сас1сс1аа! 1д11д11аа1 60
1д1д1сасдс 1сдасааада а1сд!дс!1с 1ададс1аса да11с111дд 1оо1сссддд 120
ссд!1с1сдд сссдасадИ а1асда1Ъ11 дсдссИасд дддсдсасаа саддаас!аа 180
сс1даа11с! сссда!асаа с!сддас!ад сЬдссдИсс есддсгагдс 1ааасасаас 240
сдададаасс дсаадаад!с саад!д1сд! 1аасдаддс1 дддс!сд!са сдасс1адс! 300
асс!с1ссас асПдшд! 11д1сдс1ас 111д1ддаад асгсааади сИссИда! 360
ссс!ддаас! дд!сасда!а дИадссдсс 1сдад1 1 11д С 111с1 11 1с 1сс1сс111с 420
1ддсс11аас д!сад!ас1а ассддас!ад сдд!сдса!с с1сд!саа!д ддададаИд 480
ааддИссс! 1ссас1ас1а с!дсса111а сда!дас!дс ад!д!с1аса д!ад1дс1аа 540
дд!1д1сдас дасс111с11 дда!асд!аа сад!с1сд11 асс!асассс 1а1д1асасд 600
с1ас1а1да! ад1даа1ас! 1асддд1сас дасадссдас са!1ас1адд 1с11с1д1ад 660
с!дасаасса сд1д!11сад 1сд1сада1д сад!сса1ас 011:013091:9 д!1с1д1дсд 720
д1дадис1д сд!садсс!с сад1дас1д! сасд1с!д1д 1доо1о111о д!дада!сдс 730
идисИсс сссдаассЬа сс1д!сд!дд 11ссдд1д11 сса!ааасса 11111д1с11 840
ад!асс!ада ас!сс11ддд асс!а!асдд дассассд!с ддсад!аасс аасс!асдаа 900
ссс1сд11д! дд!асд!с1с 1 саасасааа садсасдаСа асдаааасса ссддддюда 960
а!д1сдаааС 1дасддаасс 11ас1сд11д 1с1с1даада асе!1сс1са садасс1сд! 1020
1д1асссасс 1ааассаада дс!1ссдс1д 1сдасдсас1 да!ад!асад а!1сс1д11с 1080
дда!дд!адс 1асас11с1а с!ас11а1ас с!ссдссдд! 1ддассд1с1 ссаддсдЮа 1140
аСаасдаЬаа аосдаЬддса д£сдс£адад адд!дд111с дасдсасддд ссдд!ассс1 1200
с11сдад1д! 1ас1д111дс асдас!ддд! сдаааасаса сд!с1д11сс 1сассасс1д 1260
1ссссда.ссс сдЦдссдас дсс!да1ааа ссд!11сс11 сд!аас1д!д 1асдсдд111 1320
ааасддасда да!дд11ссд 11а1сс11с1 1дд1аааас1 11с1с11а1а д!1са1дс11 1330
сассдд!ааа аасадд!асс 1дд11да1да сасс!садсд 1дсс111да1 даддЪд!д1с 1440
- 112 023888
саассЛсдд!; дад^ссдЬсс сЬсЬаадЪсд £адЬдаддас дссдсддаад лаЬдСдрда!: 1500
г£сдаассгс ьЬа^ассЬсС ссассдьсас содасассгд дьдссадЬсс сгаасСд^дд 1560
ЬЬасдиаЬда ЬдсасЬасЬд асаассЬЬдЬ ЬЬсОдсаада ассаддЬадс асЬсассаад 1620
£ассСддадЬ Ьддадддаас сЬсдЬсасда ссЬЬсаЬдас асассЬссЬЬ дЬсЬсЬсЬдс 1680
ааЫзассЬса аасНссННдд ЬдЬдсддЬдс ььсдьсадас асЬаЬсдЬаа сссдад-одЫ: 1740
с£сссьсдад асд£адо£сд ааассдасс!: сдд£ааддас асс^Ьаааад НОсдПдода 1300
садНсаасЬ дсадсссадЬ ааасНсаса ЬсЬсасЬЬси ассЬСХЬСаа сдЬсаасСЬс 1360
ссЬЬдЬЬдда Ьассдсадас аадЬЬЬссда аадЬЬсааад аассс1;дадд дсдЬсСдЬдЬ 1920
ссад£дссдо дасассасаа сс^ЬаасдЬс а^дНдассдН дсс’зассЬдд аасдЫНсаа 1980
ддаЬададса дьсассдаад Ьаасндсод да0Ьдсдд1:с асссдЬсоаа ссадЬдасад 2040
ЬЬдддаааас ааадЬсассд дЬдссддЬЬд сдаЬЬссадд асЬаасЬЬаа ссЬСддЬддд 2100
ааассЬсЬда. дЬаЬдРаЬса ссасссдЬсЬ ссЬсЬЬдЬЬд Ьс^адЬЬадЬ ддЬдассдЬд 2160
ЬОсадассЬЬ сдЬсдЬаасс д'Ь^Ьсддааа ^дньддгддд адЬЫюсЬсд сд^сЬсЬдаЬ 2220
сддсдадаЬс сЬсЬд^дЬсд аасссЬдааа ссЬадЪсаас сЬссссасаа дСддадЬсаа 2280
сссЬЬссдас аддЬадЬЬса саадссиссЬ сдЬааддсда дЬдасаадсс ЬссдЬасадд 2340
ассЬаНЬдсд ЬЬссЬаасда сссссдадад дасаасассЬ асссдЬадЫ: асдадсасЬд 2400
ЬссаддЪаЬс дададЛдсаа ададсд1:саа сс^ссЬсаад асдадаадда даддсассОд 2460
сасдЬдсдас ЬдЬдасссЬа ддЬддсассЬ ддасддЬдад сдЬддЬддЬд ЛсЬсЪсдссЬ 2520
ССсаасЬаЬЕ дЬсЬаассас дасдЬссЬсд асдЬддааЬд дЬдд£дасдс даЬддЮСда 2580
сЬдЬсдссда саассаЬасс аЬассСсЬад 5сЬддЪд1:сЬ сЪдЬас^асЬ РЬЬсЬдддад 2640
сасд!;садЬд ^ЬсасЬЬасд ааЬао^асда с£аЬас£аас НдддаааадЬ саасссддаа 2700
<210> 70 <211> 734 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 70
МеЬ Зег Ьуз Ьуз Рго С1у СЬу Рго С1у Ьуз Зег Агд А1а Уа1 Туг Ьеи
5 10 15
Ьеи Ьуз Агд С1у МеЬ Рго Агд Уа1 Ьеи Зег Ьеи 11е С1у Ьеи Ьуз Агд
25 30
А1а Мео Ьеи Зег Ьеи Не Азр С1у Ьуг С1у Рго 11е Агд РЬе Уа1 Ьеи 35 40 45
- 113 023888
- 114 023888
- 115 023888
<210> 71 <211> 2298 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 71
адХадХЮдс сХдХдЪдадс ХдасааасЬХ адХадХдХХХ дХдаддаХЬа асаасааХХа 60
асасадХдсд адсХдСХСсХ Хадсасдаад аХсХсдаХдХ сХаадааасс аддадддссс 120
ддсаададсс дддсХдхсХа ХХХдсХаааа сдсддааХдс сссдсдХдХХ дХссХХдаХХ 180
ддасХХаада дддсхахдхх дадссХдаХс даеддсаадд ддссаахасд ахххдхдххд 240
дсХсХсХХдд сдХХсХХсад дХХсасадса аХХдсХссда сссдадсадХ дсХддаХсда 300
- 116 023888
ьддададдсд бдаасаааса аасадсдаЕд ааасассЕЕс ЕдадЕЕЕсаа дааддаасЕа 360
дддассЬЬда ссад1:дс1а1: сааЕсддсдд адсЕсааадс аааадаадсд адддддсдад 420
Ь^дсСаа^сс Ьсааадсааа ЕдсааЕЕасс асааЕссЕса сЕдсадЕсас аЕЕЕЪдЕЕЕЕ 430
дс£СсЪдд£с аааасаЬсас ЕдаадааЕЕЕ ЕаЕсааЕсаа саЕдсадЕдс адЕЕадсааа 540
ддсба£сХ£а дСдсЪсХдэд аасЕддЕЕдд ЕаЕассадЕд ЕЕаЕаасЕаЕ адааЕЕаадЕ 600
аа^аюаадд аааасаадбд саабддааса даЕдсгаадд ЕааааЕЕдаЕ аааасаадаа 660
Нада^ааак аЪаааааЪдс ЕдЕаасадаа ЕЕдсадЕЕдс ЕсаЕдсааад сасассасса 720
асааасаабС дадссадаад адаасЕасса аддЕЕЕаЕда аЕЕаЕасасЕ саасааЕдсс 780
ааааааасса аЪд^аасаЬЪ аадсаадааа аддаааадаа даЕЕЕсЕЕдд ЕЕЕЕЕЕдЕЕа 840
дд^дсиддаС сЪдсааЪсдс садЕддсдЕЕ дсЕдЕаЕсЕа аддЕссЕдса ссЕадааддд 900
даад!дааса ада1:саааад ЕдсЕсЕасЕа Ессасаааса аддсЕдЕадЕ 03901:1:31:03 960
ааЪддадИЬа д^дЬс^аас садсааадЕд ЕЕадассЕса аааасЕаЕаЕ адаЕааасаа 1020
ίЬдббасска ЪЪдЪдаасаа дсааадсЕдс адсаЕаЕсаа аЕаЕадааас ЕдЕдаЕадад 1080
С^ссаасааа адаасаасад асЕасЕадад аЕЕассаддд ааЕЕЕадЕдЕ ЕааЕдсаддЕ 1140
д^аасЪасас сЕд^аадсас ЕЕасаЕдЕЕа асЕааЕадЕд ааЕЕаЕЕдЕс аЕЕааЕсааЕ 1200
да^аЪдссЪа ЕаасаааЕда Есадааааад ЕЕааЕдЕсса асааЕдЕЕса ааЕадЕЕада 1260
садсааадбб асЕсЕаЕсаЕ дЕссаЕааЕа ааададдаад ЕсЕЕадсаЕа ЕдЕадЕасаа 1320
СбассасСаб аЕддСдЕЕаЕ адаЕасассс ЕдЕЕддааас ЕасасасаЕс сссСсЕаЕдЕ 1380
асаассааса саааадаадд дЕссаасаЕс ЕдЕЕЕаасаа даасЕдасад аддаЕддЕас 1440
£д£дасаа£д саддаЕсадъ аЕсЕЕЕсЕЕс ссасаадсЕд ааасаЕдЕаа адЕЕсааЕса 1500
аабсдадба!: ЕЕЕдЕдасас ааЕдаасадЕ ЕЕаасаЕЕас саадЕдаааЕ аааЕсЕсЕдс 1560
ааЬдббдаса СаЕЕсаассс саааЕаЕдаЕ ЕдЕааааЕЕа ЕдасЕЕсааа аасадаЕдЕа 1620
адсадсбссд ЕЕаЕсасаСс ЕсЕаддадсс аЕЕдЕдЕсаЕ дсЕаЕддсаа аасЕаааЕдЕ 1680
асадсаЬсса аЕаааааЕсд ЕддааЕсаЕа аадасаЕЕЕЕ сЕаасдддЕд сдаЕЕаЕдЕа 1740
1сааа1:ааад ддаЕддасас ЕдЕдЕсЕдЕа ддЕаасасаЕ ЕаЕаЕЕаЕдЕ аааЕаадсаа 1800
даадд£ааэ.а дЕсЕсЕаЕдЕ ааааддЕдаа ссааЕааЕаа аЕЕЕсЕаЕда сссаЕЕадЕа 1860
СбссссЬс^д аЕдааЕЕЕда ЕдсаЕсааЕа ЕсЕсаадЕса асдадаадаЕ Еаассададс 1920
с^адсаЪЪЪа ЕЛсдЕаааЕс сдаЕдааЕЕа ЕЕасаЕааЕд ЕаааЕдсЕдд ЕаааЕссасс 1980
асааа£а£са ЕдаЕаасЕас ЕаЕааЕЕаЕа дЕдаЕЕаЕад ЕааЕаЕЕдЕЕ аЕсаЕЕааЕЕ 2040
дс^дСГддас ЕдсСсЕЕаЕа сЕдЕааддсс адаадсасас садЕсасасЕ аадсааадаЕ 2100
саасЪдадЪд дЕаЕаааЕаа ЕаЕЕдсаЕЕЕ адЕаасааЕЕ ЕЕдаЕсЕдсЕ сааасЕЕдса 2160
ддсдабдбад 881:03881:00 Еддасссдсс сдддасаддЕ ссаЕадсЕ сЕ сасдЕЕЕсЕс 2220
- 117 023888 дсадсгддад дадССсСдсС сССссСсСсс дСдаасдСдс асдсСдасас СдддСдСдсс 2280 аСадасаСса дссддсаа 2298 <210> 72 <211> 2298 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220 <223> Синтетическая Конструкция <400> 72
СсаСсаадсд дасасасСсд асСдСССдаа СсаСсасааа сасСссСааС СдССдССааС 60
СдСдСсасдс Ссдасааада аСсдСдсССс СададсСаса даССсСССдд СссСсссддд 120
ссдССсСсдд сссдасадао ааасдаСССС. дсдсссСасд дддсдсасаа саддаасСаа 180
ссСдааССсС сссдаСасаа сСсддасСад сСдссдССсс ссддССаСдс Сааасасаас 240
сдададаасс дсаадаадСс саадСдСсдС СаасдаддсС дддсСсдСса сдассСадсС 300
ассСсСссас асССдСССдС ССдСсдсСас СССдСддаад асСсааадСС сССссССдаС 360
сссСддаасС ддСсасдаСа дССадссдсс СсдадСССсд ССССсССсдс СсссссдсСс 420
аасдаССадд адСССсдССС асдССааСдд СдССаддадС дасдСсадСд Саааасаааа 480
сдаадассад ссгсдгадгд ассссьсааа асадссадсс дСасдСсасд СсааСсдССС 540
ссдаСадааг сасдадасСс ССдассаасс аСаСддСсас ааСаСпдаСа СсССааССса 600
ССаСадССсс ССССаССсас аССассССдС сСасдаССсс аССССаасСа ССССдСГсСС 660
ааСссассса СаСССССасд асаСсдСсгС аасдссаасд адСаедСССс дрдСддСддС 720
гдссгдссад сссддссСпс ссссдасддс СссаааСаеС СааСаСдСда дССдССасдд 780
сссссссддс СасаССдСаа сссдсгссср СссССРРсСС сбааадаасс аааааасэаС 840
ссасаассСа дасдССадсд дСсассдсаа сдасаСадаС СссаддасдС ддаСсССссс 900
сССсасССдС СсСадССССс асдадаСдас аддСдСССдС СссдасаСса дСсдааСадС 960
ССассСсааС сасадааССд дСсдСССсас ааСсСддадС ССССдаСаСа СсСаСЁСдСС 1020
аасааСддаС аасасССдСС сдСССсдасд ссдСаСадсС сасаСсСЬСд асасСаСсСс 1030
ааддССдССС СсССдССдСс СдаСдаЬсСс СааСддСссс ССаааСсаса аССэсдСсса 1140
саССдаСдСд дасаССсдСд ааСдСасааС СдассаСсас ССааСаасад СааССадССа 1200
сСаСасддаС аССдСССасс адСсСССССс ааССасаддС СдССасаадС ССаСсааСсС 1260
дСсдСССсаа СдадаСадСа саддСаССаС СССсСССССс адааСсдСаС асаСсаСдСС 1320
ааСддСдаСа СассасааСа СсСаСдСддд асаассСССд аСдСдСдСад дддадаЬаса 1380
СдССддССдС дССсСсгссс саддссдСад асааассдсс сССдасСдСс СссСассаСд 1440
асасСдссас дссссадгса Садааадаад ддСдССсдас СССдСасаСС СсаадССадС 1500
- 118 023888
ЬЬадсЬсаЬа ааасасЬдЬд ЫасЬЬдЬса ааЬЬдЬааЬд дЬЬсасЬЬЬа ЬЬЬададасд 1560
ЬЬасаасЬдЬ аьаадььддд дьььабасьа асаЬЬЬЪааЬ асбдаадЬЬЪ ьъдЬсЬаеаЬ 1620
ЬсдЬсдаддс ааЬадЬдЬад адаЬссЬсдд ЬаасасадЬа сдаЬассдЬЬ ЪЪдаЬЬЬаса 1680
Ьд1сд1аддЬ ЬаЬИЬЬадс ассЫадЬаЬ ЬЬсЬдЬаааа даНдсссас дсЬааЬасаЬ 1740
адЬЬίθίίίο ссЬассЬдЬд асасадасаЬ ссаЬЬдЬдЬа аЬаЬааЬаса ίίίαίΐοςίί 1800
οίίσοβίίίί сададаьаса ЬЬЬЬссасЬЬ ддЫ:аЬьаьЬ 1:ааадаЬасЬ дддьааЬсаь 1860
ааддддадас ЪасЬЬааасЬ асдЬадЬЬаЬ β9δ9ίίθ39ί ЬдсЬсЬЬсЬа аЬЬддЬсЬсд 1920
да£сд1ааа£ аадсаСЬбад дсТасНааЬ ааЬдбаЬЬас аИЬасдасс аЬЬСаддЬдд 1980
ίςίίίβίώςί асЪаЬЬдаЬд аЬаЬЬааЬаЬ сасЬааЬаЬс а^а1аасаа гадэааЬЬаа 2040
сдасаассЬд асдадааЪа! дасаЬЬссдд ЬсЬЬсдЬдЬд д^садЬдЬда (НсдИЬсЬа 2100
дЬЬдасЬсас саЬаЬИаН аЬаасдЬааа ЬсаЬЬдЪЬаа аасЬадасда д^ЪЬдаасдЬ 2160
ссдсЬасаЬс ЬЬадЬбЬадд ассЬдддсдд дсссЬдЬсса ддЬаЬсдада дЬдсааадад 2220
сдЬсаассбс сЬсаадасда дааддададд сасЬЬдсасд ίдсдасίдίд асссасасдд 2280
ьаьсЬдЬадь сддссдИ 2298
<210> 73 <211> 667 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 73
МеЬ 1 Зег Ьуз Ьуз Рго 5 С1у С1у Рго С1у Ьуз Зег Агд А1а Уа1 Азп МеО
10 15
Ьеи Ьуз Агд С1у МеЬ Рго Агд 7а1 Ьеи Зег Ьеи 11е 51у Ьеи Ьуз С1п
20 25 30
Ьуз Ьуз Агд С1у С1у С1и Ьеи Ьеи 11е Ьеи Ьуз А1а Азп А1а Не ТЬг
35 40 45
ТЬг Не Ьеи ТЬг А1а Уа1 ТЬг РЬе Суз РЬе А1а Зег С1у С1п А5П Не
50 55 60
ТЬг С1и С1и РЬе Туг С1п Зег ТЬг Суз Зег А1а Уа1 Зег Ьуз С1у Туг
65 70 75 80
Ьеи Зег А1а Ьеи Агд ТЬг С1у Тгр Туг ТЬг Зег Уа1 Не ТЬг 11е С1и
65 90 95
Ьеи Зег Азп 11е Ьу5 С1и Азп Ьуз Суз Азп С1у ТЬг Азр А1а Ьуз Уа1
- 119 023888
- 120 023888
121 023888
610 615 620
Рго С1у рго А1а Агд Азр Агд Зег Не А1а Ьеи ТЬг РЬе Ьеи А1а Уа1
625 630 635 640
С1у С1у Уа1 Ьеи Ьеи РЬе Ьеи Зег Уа1 Аэп Уа1 Ηί5 А1а Азр ТЬг С1у
645 650 655
Суз А1а Не Азр Не Зег Агд С1п С1и Ьеи Агд 660 665 <210> 74 <211> 2097 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 74
адХадХХсдс сХдХдХдадс ХдасааасХХ адХадХдХХХ дХдаддаХХа асаасааХХа 60
асасадХдсд адсХдХХХсХ Хадсасдаад аХсХсдаХдХ сХаадааасс аддадддссс 120
ддсаададсс дддсХдХсаа ХаХдсХаааа сдсддааХдс сссдсдХдХХ дХссХХдаХХ 180
ддасХХаадс аааадаадсд адддддсдад ХХдсХааХсс Хсааадсааа ХдсааХХасс 240
асааХссХса сХдсадХсас аХХХХдХХХХ дсХХсХддХс аааасаХсас хдаадааххх 300
ХаХсааХсаа саХдсадХдс адххадсааа ддсхахсхха дХдсхсХдад аасхддххдд 360
хаХассадХд ХХахаасхах адааХХаадх ааХаХсаадд аааахаадхд хаахддааса 420
даХдсХаадд хааааххдах аааасеадаэ ХХадаХаааХ ахаааааХдс Хдхаасадаа 480
ХХдсадХХдс ХсаХдсааад сасассасса асааасааХс дадссадаад адаасХасса 540
аддХХХаХда аХХахасасХ саасааХдсс ааааааасса ахдхаасахх аадсаадааа 600
аддаааадаа даХХХсХХдд ххххххдхха ддХдХХддаХ схдсаахсдс садХддсдхх 660
дехдхахсха аддХссХдса ссХадааддд даадХдааса адаХсаааад ХдсХсХасХа 720
Хссасаааса аддсХдХадХ сэдсХХаХса ааХддадХХа дХдХсХХаас садсааадХд 780
ХХадассХса аааасХаХаХ адаХааасаа хХдХХассХа ХХдХдаасаа дсааадсХдс 840
адсаХаХсаа аХаХадааас ХдХдаХадад ХХссаасааа адаасаасад асХасХадад 900
аХХассаддд ааХХХадХдХ ХааХдсаддХ дХаасХасас сХдХаадсас ХХасаХдХХа 960
асХааХадХд ааХХаХХдХс аХХааХсааХ даХаХдссХа ХаасаааХда Хсадааааад 1020
ХХааХдХсса асааХдХХса ааХадХХада садсааадХХ асХсХаХсаХ дХссаХааХа 1080
ааададдаад ХсХХадсаХа хдхадхасаа ххассасхах ахддХдххах адахасассс 1140
ХдХХддааас ХасасасаХс сссХсХаХдХ асаассааса саааадаадд дхссаасахс 1200
- 122 023888
бдЬЬСаасаа даасСдасад аддаЬддСас ЬдЬдасааЬд саддаЬсадЬ еШШис 1260
ссасаадсСд ааасаЬдЬаа адЬЬсааЬса ааСсдадЬаЬ (зЫдЬдасас ааСдаасад^ 1320
ЬСаасаЫас саадЬдаааЬ аааЬсЬсЬдс ааЬдЬСдаса ЪаЪЬсаассс саааЬа^да·!; 1330
ЬдСааааЬСа ЬдасЫсааа аасадаЬдЪа адсадсТссд ίЬа!:саса1:с Тсьаддадсс 1440
аЫдЬдЬса·): дсЪаЬддсаа аасЬаааЁдЬ асадсаЬсса аСаааааЬсд ЬддааЬсаСа 1500
аадасаЬЬЬЬ сЬаасдддСд сдаЬЬаЬдЬа СсаааЬааад ддаЬддасас Ьд^дЬс^дЬа 1560
ддЬаасасаЬ ЕаЬаЬЬаТдЬ аааСаадсаа дааддЬаааа дЬсЬсЬаЪдЬ ааааддЬдаа 1620
ссаасаа£аа аъьссьагда сссагЬадЬа ССссссЬсЬд асдааЬЬЬда СдсаЬсааЬа 1680
СсЬсаадЬса асдадаадаЬ Ьаассададс сЬадсаЬЬЬа СЕсдЬаааЬс сдаЬдааЬСа 1740
ЫзасаЬааЬд ЬаааЬдсЬдд СаааЬссасс асаааЬаЬса ЬдаЬаасЬас СаЬааЬЬаСа 1300
дЬдаЬСаЬад ЬааЬаЬЬдЬЬ аЬсаЫааН: дсЬдЬЬддас ЬдсЬсЫаЬа сСдЬааддсс 1360
адаадсасас садЬсасасС аадсааадаС саасОдадЬд дЬаСаааСаа ЬаЬЬдсаССЬ 1920
адбаасааЬЬ ЬЬдаЬсСдсб сааасЬСдса ддсдаЪдЬад ааЬсаааЬсс сддасссдсс 1980
сдддасадд-!: ссаЬадсЬсЬ сасдЬЫсЬс дсадЬЬддад дадсьсьдсь сЫссбсЬсс 2040
дЬдаасдЬдс асдсЬдасас ЬдддЬдЬдсс абадасаЬса дссддсаада дсЬдада 2097
<210> 75 <211> 2097 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 75
СсаЬсаадсд дасасасСсд асЬдЫзЬдаа ЬсаЬсасааа сасЬссЬааЬ ЬдбЬдЪНааЬ 60
ЬдСдЬсасдс бсдасааада аЬсдЬдсЫс ЬададсЬаса даЬЬсЬЬЬдд ЬссЬсссддд 120
ссдиьсссдд сссдасады абасдасы:!: дсдссЫзасд дддедсасаа саддаасЬаа 180
ссЪдааЬЪсд сьгссьссдс ЬсссссдсЬс аасдаЫадд адсеиедсСЪ асд^саасдд 240
ЬдЪЬаддадЬ дасдЬсадЬд Ьаааасаааа сдаадассад ЫЬЬдСадЬд асМюЬЬааа 300
аСадЪЬадЫ: дЬасдЬсасд ЬсаабсдЬСЬ ссдаЬадааС сасдадасЬс РЬдассаасс 360
аЪабддЬсас аакаЪСдаСа ЪсЪЬааСЪса СЬаЬадЬСсс ЫЫаПсас аЫассЬСд! 420
сбасдаЬЬсс аЬЫЬаасЬа СЬЬЬдЬЬсСЬ аатсЬатпа ЬаЬЬЬЫзасд асаЪЬдЬсЬЬ 480
аасдЬсаасд адЬасдЫЬс дИдЬддЬддЬ ЬдЫЬдЫад сЬсддЬсЬЬс ЬсЬЬдаЬддЬ 540
ЬссаааЬасС СааСаСдСда дССдСЬасдд гООИИуд! СасаЫдЬаа ЫсдЫссг- 600
СссЫЬЬсъь сЬааадаасс аааааасааь ссасаасс1:а дасдЬЬадсд дЬсассдсаа 660
сдасаЬада!: ТссаддасдЬ ддаЬсЬЬссс сЫсасЬЬдЬ ЬсЬадЬССЬс асдадаЬдаЬ 720
- 123 023888
аддъдььъд! £ссдаса1:са д£сдаасадД ££асс£саа1; сасадааЪСд дИсдЪД^сас 780
ааЪсЪддад!: ϋΐ ΐ Дда1;а1: а £с1:а1;££д1;Ъ аасаа£дда£ аасасЪСдЪЬ сд1££сдасд 840
Гсд£а£ад£Г Ъа^аЛ οί,ΐΐς асас^а^сес ааддД£д1:1;1: СсЫ: дЪ V дЪ с ^да^даЪсХс 900
1:аа1:дд12ссс Ъ£ааа1:саса аЫтасдЬсса саЪ^да'ЬдЪд дасаЛЪсдЪд аа^д6асаа1: 960
£да££.а1;сас 121:аа1:аасад £аа£1адЪЬа с£а£асдда£ аЪЪдЪЪЪасЪ адЪс£Ъ£1:1:с 1020
аа^ асаддЪ ЬдЪ'ЬасаадЬ ЬСаЪсаа'ЬС'Ь д£сд£1;1:саа ЬдадаЪад^а садд£а1Ъа1; 1080
ЪЪЬсЮсЪЪс адааЪсдЪа!: аса£са1:д££ аа£дд£да1а ^ассасааЬа Дс£а£д£ддд 1140
асаасс(:Ъ Ид аЪдЬд^дЪад дддада^аса Ъд-Ь £дд1 Ъд£ дЪ£СЪс£Ъсс саддСЪдЪад 1200
асаааС Ьд1:£ с^ИдасСдСс ЪссСассаЪд асас£дЪ1:ас дДссИадИса Дадааадаад 1260
дд£д££сдас ЬЪЪд^асаЪЪ ЬсаадД1:ад£ Ъ^адс^саЪа ааасасЪдЪд ЪЪасСЪдЪса 1320
ааЪЪд^ааЪд д££ сасМзСа ^Ъ^ададасд ££асаасЬд£ аЪаадЪЪддд д^И:аЪас^а 1380
асаЪ'Ыз'ЬааЬ асСдаад££Ъ ££д£с£аса1: £сд£сдаддс ааСад£д1:ад адаЪссЪсдд 1440
^аасасадЬа сда^ассдСИ ££да1:££.аса 1:д1;сд£адд1: £а£М£1;адс ассЪДадЪаЪ 1500
££с1:д1:аааа даЫздсссас дсСаа^асаЪ ад£££а11:£с ссЪассЪд^д асасадаса£ 1560
сса££д£д£а а£а£аа1:аса сЪЪссаЪЪЪЬ садада£аса ЪссасЬС 1620
ддИаЬЪа!!. ±ааада£асЬ дддЪаа^саЪ ааддддадас ЪасХ^ааасЪ асдЪадЪЪаЪ 1680
адад1:СсадТ: Ъдс£сЪЪсЪа а^Идд^сИсд даИсдЪаааЬ аадсаЪЪ1ад дс£асИ:ааЬ 1740
аа^д^аЪСас аЪЪИасдасс а£Ъ£аддЪдд ГдЁС^а^адЁ асЪатдаЪд апа££аа£а£ 1800
сас^ааНаИс а£Ьа^аасаа СадНаайЪаа сдасаассДд асдадаа1:а£ даса^Ьссдд 1Θ60
Ъс1:ЪсдЪдЪд дЪсадЪдЬда ££сд£££с£а д£±дас1;сас саЪа^ЪЪаЪС аДаасдЪааа 1920
ЪсаЪ'ЬдЪЪаа аасЪадасда д^СдаасдД ссдс£.аса£с ЪЪадЪМ: адд ассДдддсдд 1980
дссс!:д1:сса дд1:а£сдада д^дсааадад сд£саасс£с сЪсаадасда дааддададд 2040
сас1:Ьдсасд Сдсдас£д1:д асссасасдд Ъа£с£д£ад£ сддссд££с£ сдасСсИ 2097
<210> 76 <211> 1327 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 76
Меб Зег Ьуз Ьуз Рго 61у 61у Рго 61у Ьуз Зег Агд А1а Ун! Азп МеЬ 15 10 15
Ьеи Ьуз Агд С1у МеЬ Рго Агд 7з1 Ьеи Зег Ьеи Не С1у Ьеи Ьуз С1п 20 25 30
124 023888
- 125 023888
- 126 023888
- 127 023888
Уа1 Уа1 Ьеи Ьеи Ьеи 805 Ьеи Уа1 А1а Рго А1а 810 Туг Зег РЬе Азп Суз 815 Ьеи
С1у МеЬ Зег Азп Агд Азр РЬе Ьеи С1и С1у Уа1 Зег С1у А1а ТЬг Тгр
820 825 830
Уа1 Азр Ьеи Уа1 Ьеи С1и С1у Азр Зег Суз Уа1 ТЬг 11е МеС Зег Ьуз
8 35 840 845
Азр Ьуз Рго ТЬг 11е Азр Уа1 Ьуз Меи МеЬ Аэп МеС С1и А1а А1а Азп
850 855 8 60
Ьеи А1а С1и Уа1 Агд Зег Туг Суз Туг Ьеи А1а ТЬг Уа1 Зег Азр Ьеи
865 870 875 880
Зег ТЬг Ьуз А1а А1а Суз Рго А1а МеЬ С1у С1и А1а Н1з Азп Азр Ьуз
885 8 90 395
Агд А1а Азр Рго А1а РЬе Уа1 Суз Агд С1п С1у Уа1 Уа1 Азр Агд 61у
900 905 910
Тгр <31 у Азп 61у Суз <51у Ьеи РЬе 61у Ьуз С1у Зег Не Азр ТЬг Суз
915 920 925
А1а Ьуз РЬе А1а Суз Зег ТЬг Ьуз А1а Не С1у Агд ТЬг Ые Ьеи Ьуз
930 935 940
С1и Азп 11е Ьуз Туг С1и Уа1 А1а Не РЬе Уа1 Низ С1у Рго ТЬг ТЬг
94 5 950 955 960
Уа1 б1и Зег Шз 61у Азп Туг Зег ТЬг С1п Уа1 С1у А1а ТЬг С1п А1а
965 970 975
С1у Агд РЬе Зег Не ТЬг Рго А1а А1а Его Зег Туг ТЬг Ьеи Ьуз Ьеи
980 985 990
С1у С1и Туг С1у С1и 7а1 ТЬг Уа1 Азр Суз <31и Рго Агд Зег С1у 11е 995 1000 1005
Азр ТЬг Азп А1а Туг Туг 1/а1 Μβΐ ТЬг 7а 1 С1у ТЬг Ьуз ТЬг РЬе 1010 1015 1020
Ьеи Уа1 Ηίε Агд С1и Тгр РЬе МеГ Азр Ьеи Азп Ьеи Рго Тгр Зег 1025 1030 1035
Зег А1а С1у 1040
Зег
ТЬг
Уа1
Тгр Агд Азп 1045
Агд 61и ТЬг Ьеи МиГ 1050
С1и
- 128 023888
РЬе 61и 61и Рго Шз А1а ТЬг 1060 Ьуз С1п Зег УаЬ Не 1065 А1а Ьеи 61у
1055
Зег С1п 61и 61у А1а Ьеи Ηί 3 61п А1а Ьеи А1а 61у А1а Не Рго
1070 1075 1080
Уа1 С1и РЬе Зег Зег АЗП ТЫ Т/а1 Ьуз Ьеи ТЫ Зег С1у Нгз Ьеи
1085 1090 1095
Ьуз Суз Агд УаЬ Ьуз МеЬ 61и Ьуз Ьеи С1п Ьеи Ьуз 61у ТЬг ТЬг
1100 1105 1110
Туг 61 у Уа1 Суз Зег Ьуз А1а РЬе Ьуз РЬе Ьеи 61 у ТЬг Рго А1а
1115 1120 1125
Азр ТЬг 61 у ΗΪ3 61у ТЬг 7а1 Уа1 Ьеи С1и Ьеи 61п Туг ТЬг С1у
ИЗО 1135 1140
ТЬг Аяр 61 у Рго Суз Ьуз УаЬ Рго Не Зег Зег Уа1 А1а Зег Ьеи
1145 1150 1155
Азп Азр Ьеи ТЬг Рго Уа1 61у Агд Ьеи 7а1 ТЬг Уа1 Азп Рго РЬе
1160 1165 1170
Уа1 Зег Уа1 А1а ТЬг А1а Азп А1а Ьуз Уа1 Ьеи Не 61и Ьеи 61и
1175 1180 1185
Рго Рго РЬе 61у Азр Зег Туг Не ν3ι Уа1 61у Агд 61у С1и 61п
1190 1195 1200
С1п Не Азп Н1з НЬз Тгр ΗίΞ Ьуз Зег С1у Зег Зег Не С1у Ьуз
1205 1210 1215
А1а РЬе ТЬг ТЬг ТЬг Ьеи Ьуз 61 у А1а 61п Агд Ьеи А1а А1а Ьеи
1220 1225 1230
С1у Азр ТЬг А1а Тгр Азр РЬе 61у Зег νβΐ С1у 61у Уа1 РЬе ТЬг
1235 1240 1245
Зег Уа1 61у Ьуз А1а Уа1 ΗΪ5 С1п УаЬ РЬе 61у С1у А1а РЬе Агд
1250 1255 1260
Зег Ьеи РЬе 61у 61у МеЬ Зег Тгр Не ТЬг С1п 61у Ьеи Ьеи 61 у
1265 1270 1275
А1а Ьеи Ьеи Ьеи Тгр МеЬ 61у Не Азп А1а Агд Азр Агд Зег Не
1280 1285 1290
- 129 023888
А1а Ьеи ТЬг РЬе Ьеи А1а Уа1 С1у С1у Уа1 Ьеи Ьеи РЬе Ьеи Зег 1295 1300 1305
Уа1 Азп Уа1 ΗΪ5 А1а Азр ТЬг С1у Суз А1а Не Азр 11е Зег Агд
1310 1315 1320
С1п С1и Ьеи Агд 1325
<210> 77 <211> 4100 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетическая Конструкция
<400> 77 дайссйаайа сдасйсасйа йададйадЪЬ сдссйдйдйд адсйдасааа сЬйадйадйд 60
Ьййдйдадда ййаасаасаа Ьйаасасадй дсдадсйдйй Осййадсасд аадайсйсда 120
ОдОсйаадаа ассаддаддд сссддсаада дссдддсйдй сааЪайдсйа ааасдсддаа 180
йдссссдсдй дйгдйссййд аййддасйЪа адсаааадаа дсдадддддс дадЪйдсйаа 240
йссйсааадс ааайдсааЬЬ ассасаайсс йсасйдсадй сасаЬЬййдЬ Ьййдсййсйд 300
дйсаааасай сасйдаадаа ййййайсэаЪ саасайдсад йдсадййадс аааддсйайс 360
ййадйдсйсг дадааейддс йддйайасса дйдййайаас йабадааййа адйаайайса 420
аддаааайаа дйдйаайдда асадайдсйа аддйаааайй даЬаааасаа дааЪСадайа 480
ааЬайааааа йдсОдйааса дааййдсадй йдсйсайдса аадсасасса ссаасаааса 540
аЪедадссад аададаэсйа ссааддОййа йдааЫайас асйсаасааЬ дссааааааа 600
ссаайдйаас аййаадсаад ааааддаааа даадайййсЬ йддййЬЬййд ЬЪаддйдЬЪд 660
дайсйдсаай сдссадйддс дййдсйдйай сйааддйссй дсассйадаа ддддаадйда 720
асаадайсаа аадйдсОсйа сйайссасаа асааддсЪдй адйсадсййа Ьсааайддад 780
ЬйадСдйсСЬ аассадсааа дйдййадасс ЬсааааасСа йайадайааа сааййдйСас 840
сйайОдйдаа саадсааадс ОдсадсаОай сааайайада аасйдйдайа дадООссаас 900
аааадаасаа садасйасйа дадаьсасса дддаасйьад йдййаайдса ддйдйаасйа 960
сассйдйаад сасОЬасайд ЬйаасЬаайа дЬдааййайй дйсаййааЬс аайдайаЪдс 1020
сйайаасааа Одайсадааа аадЬйаайдй ссаасаайдй йсааайадйй адасадсааа 1080
дййасОсйай сайдйссайа айаааададд аадйсййадс айайдйадйа сааййассас 1140
йайайддйдй йайадайаса сссйдЬЬдда аасйасасас айссссйсйа йдйасаасса 1200
асасаааада адддйссаас айсЪдйййаа саадаасйда сададдайдд ЬасЬдСдаса 1260
- 130 023888
аЬдсаддагс адЬагссЫс сгсссасаад сбдааасабд бааадббсаа б.сааабсдад 1320
ОаОтдОда сасаабдаас адЬЬГааса! бассаадбда аабааабсбс бдсаабдббд 1380
асаЕаГГсаа ссссаааЬаЬ даЫдЬаааа ббабдасббс ааааасадаб дбаадсадсб 1440
ссдИаГсас аЬсЬсЬадда дссаИдбдб сабдсбабдд саааасбааа бдбасадсаб 1500
ссааЬааааа £сдтддаа£с аГааадасаг бббсбаасдд дбдсдаббаб дбабсаааба 1560
аадддабдда сас^д^дЬсЬ дГадд^ааса саббабабба бдбааабаад саадааддба 1620
ааадЬсЬсЬа ОдСааааддб даассааЪаа бааабббсба бдасссабба дбаббссссб 1680
сбдабдааЬС ЬдаЬдсаЬса аСа^сЬсаад бсаасдадаа даббаассад адссбадсаб 1740
ЬЪаЬСсдЬаа а^ссдаЬдаа С^аЬЬасаса абдбааабдс бддбааабсс ассасаааба 1800
ОсаРдаЬаас ЪасЪаЪаэЬЪ а^ад^даЪба бадбаабабб дббабсабба аббдсбдббд 1860
дас£дсЬс£Ъ а£асС.д!аад дссадаадса сассадбсас асбаадсааа дабсаасбда 1820
дЬдд^аЬааа СааЬаЬЬдса бббадбааса аббббдабсб дсбсааасбб дсаддсдабд 1980
ГадааГсааа ОссОддассс ддаддааада ссддбаббдс адбсабдабб ддссбдабсд 2040
ссгдсд^эдд адсадЫ^асс сбсбсбаасб бссаадддаа ддбдабдабд асддбааабд 2100
сЬасЬдаедЪ сасадаЬдЬс абсасдаббс саасадсбдс бддааадаас сбабдсаббд 2160
^сададсааГ ддаГдЬддда басабдбдсд абдабасбаб сасббабдаа Ьдсссадбдс 2220
РдСсддсСдд ^аабдабсса даадасабсд асбдббддбд сасааадбса дсадбсбасд 2280
Осадд1:аОдд аадаЬдсасс аадасасдсс асбсаадасд садбсддадд бсасбдасад 2340
Одсадасаса сддадааадс асбсбадсда асаадааддд ддсббддабд дасадсасса 2400
аддссасаад дЪаЬЪЪддЬа аааасадааб сабддабсбб даддаасссб ддабабдссс 2460
ЪддЬддсадс сдЬсаЬ^ддс бддабдсббд ддадсаасас сабдсадада дббдбдбббд 2520
бсд^дсбаЬ^ дсбЬЬЬддЬд дссссадсбб асадсбббаа сбдссббдда абдадсааса 2580
дадасбСсбб ддааддадСд бсбддадсаа сабдддбдда бббддббсбс дааддсдаса 2640
дспдсдгдас гаоса^дьсб ааддасаадс сбассабсда бдбдаадабд абдаабабдд 2700
аддсддссаа ссЪддсадад дбссдсадбб аббдсбаббб ддсбассдбс адсдабсбсб 2760
ссассааадс ЬдсдСдсссд дссабдддад аадсбсасаа бдасааасдб дсбдасссад 2820
сСССХдЬдЪд садасаадда дбддбддаса ддддсбдддд саасддсбдс ддасбабббд 2880
дсаааддаад саОЬдасаса бдсдссаааб ббдссбдебс бассааддса абаддаадаа 2940
ссаЬЬМдаа ададааСаЬс аадбасдаад бддссабббб бдбссабдда ссаасбасбд 3000
ЬддадОсдса сддааасЬас бссасасадд ббддадссас бсаддсаддд адаббсадса 3060
Рсассссгдс ддсдссЬсса басасасбаа адсббддада абабддадад дбдасадбдд 3120
асЬд1:даасс асддЪсаддд аббдасасса абдсабасба сдбдабдасб дббддаасаа 3180
- 131 023888
адасд1;1:с£1 ддЪсса^сдЪ дад^ддЦЛса 1:ддассСсаа ссЪсссЬЛдд адсадСдскд 3240
даад!асЪд£ дЬддаддаас адададасд£ ^ааЪддадЪД Цдаддаасса сасдссасда 3300
адсадСсОдб да^адсабСд ддсксасаад адддадсОсО дсаСсаадсЬ ЦОддсСддад 3360
ссаСЦссСдЦ ддааъ^ЪЪса адсаасаскд £саадС1:дас дСсдддСсаЬ ЪЬдаадбдСа 3420
дад£даада1: ддааааа1:6д садЪСдаадд даасаасс^а СддсдЬс^д1!: ЪсаааддсЬЪ 3480
СсаадЬЪЪсЪ ЪдддасЬссс дсадасасад дЬсасддсас ЪдЦддЪдЪ'Ьд даа£1:дсад£ 3540
асасТддсас ддаСддассЦ ЦдсааадЪСс сОаСсЬсдЪс адЬддсЬЦса кЦдаасдасс 3600
£аасдссад1: дддсадаШд дСсасСдЦса 30001:1:1:1:91: ССсадЦддсс асддссаасд 3660
ссааддЦсос даЦЦдааПд даассассси ГЁддадас^с аЛасаЪад^д дЛдддсадад 3720
дадаасааса даЦсааЦсас сасСддсаса адЦсЕддаад садсаШддс ааадссЬ^Ьа 3780
оаассассс!; саааддадсд сададэсОад осдсЬсЬадд адаоасадок ЪдддасТОбд 3840
даксад^кдд аддддкдЪЬс ассЦсадкбд ддааддсЪдк ссаЦсаадкд ЦЦсддаддад 3900
сакЪссдсЬс аскд^бедда ддсакдЬсс^ ддакаасдса аддабЪдскд ддддс^Сксс 3960
сд££д^ддаи дддсассаас доссдсдаса ддиссаьадс ссЦсасд^гс сссдсадТхд 4020
даддадЮсп дсссоисссс Ьссд^даасд £дсасдс1:да саскдддгде дссаЬадаса 4080
1:садсоддса ададсСдада 4100
<210> 78 <211> 4100 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая Конструкция <400> 78
сСаддаЪЪаИ дсЬдадЦдак аЪсЬсаЬсаа дсддасасас Ъ сдасЬд 1: Ь £ дааЬса1:сас 60
аавсасЪссЪ ааЪЪдЪЪдЪЬ ааСЬд^дСса сдсСодасаа адааЬодкдс ЬЬскададсС 120
асадаЪЪсСР ЕддкссСссс дддссдкЬс!: сддсссдаса дсгасасдас Лг^дсдссос 180
аоддддсдса саасаддаас СаассЪдааЬ ЬсдСЬкЛсл-ь сдс^сссссд сСоаасда1:1: 240
аддадЪггсд с^ЪасдСЪаа оддсдгсадд адОдасдСса дЦдСааааса ааасдаадас 300
садкСЛЦдЪа дЪдасЪЪсЫ; аааа^ад^Са дС^дЁасдЦс асдЬсааЬсд ЬЪЬссдаЛад 360
ааксасдада с1:сС1:дасса ассаЪаЪддЪ сасааЪаЪСд а£а!:еЪ£аа£ ЬсаЪЪаЬад£ 420
Ъсо(:1:СЬаЦ6 сасаЬЬасс!: ЪдЪсЪасдаЪ ЪссаЪЪ^Ьаа д-е-Ь сЫааЬсЬаЬ 480
ккакак!: 1:1:1: асдасак^дД скЬаасдкса асдад^асдЦ {ЛсдЪдЬддЪ дд6ЪдЫ:Ьд6 540
ТадсОсддТс 1: есгс£ ЦдаЦ дскЬссаазЕ асХЛааОаСд кдадЦЦдкка сддООСОЬМ: 600
ддЪРасаЪЪд ΐ аа££сд1: £с сгсснааада ассаааааас аа^ссасаас 660
- 132 023888
сХадасдХХа дсддХсассд саасдасаХа даХХссадда сдХддаХсХХ ссссххсасх 720
ХдХХсХадХХ ХХеасдадаХ даХаддХдХХ ХдХХссдаса ХсадХсдааХ адХХХассХс 780
аахсасадаа ххддхсдххх сасааХсхдд адхххххдах ахахсхаххх дХХаасааХд 840
даХаасасХХ дХХсдХЬХсд асдХсдХаХа дХХХаСаХсХ СХдасасХаХ сХсааддХХд 900
ХХХХсХХдХХ дХсХдаХдаХ сХсХааХддХ сссХХаааХс асааХХасдХ ссасаХХдаХ 960
дХддасаХХс дХдааХдХас ааХХдаХХаХ сасХХааХаа садХааХХад ХХасХаХасд 1020
даХаХХдХХХ асхадхсххх ХХсаахХаса ддХХдХХаса адХХХаХсаа ХсХдХсдХХХ 1080
сааХдадаХа дХасаддХаХ ХаХХХХсХсс ХХсадааХсд ХаХасаХсаХ дХХааХддХд 1140
аХаХассаса аХаХсХаХдХ дддасаассХ ХХдаХдХдХд ХаддддадаХ асаХдХХддХ 1200
ХдХдХХХХсХ ХсссаддХХд ХадасаааХХ дХХсХХдасХ дХсХссХасс ахдасасХдХ 1260
ХасдХссХад ХсаХадааад аадддХдХХс дасХХХдХас аХХХсаадХХ адХХХадсХс 1320
аХаааасасХ дХдХХасХХд ХсаааХХдХа аХддХХсасХ ХХаХХХадад асдХХэсаас 1380
ХдХахаадХХ ддддХХХаХа сХаасаХХХХ ааХасХдаад ХХХХХдХсХа саХХсдХсда 1440
ддсааХадХд ХададаХссХ сддХаасаса дХасдаХасс дХХХХдаХХХ асаХдХсдХа 1500
ддХХаХХХХХ адсассХХад ХаХХХсХдХа ааадаХХдсс сасдсХааха саХадХХХах 1560
ХХсссХассХ дХдасасада саХссаХХдХ дХааХаХааХ асахХХаХХс дХХсХХссаХ 1620
ХХХсададах асаХХХХсса сХХддХХаХХ аХХХааадаХ асХдддХааХ саХаадддда 1680
дасХасХХаа асХасдХадХ ХаХададХХс адХХдсХсХХ сХааХХддХс ХсддаХсдХа 1740
ааХаадсаХХ хаддсХасХх ааХааХдХаХ ХасаХХХасд ассаХХХадд ХддХдХХХаХ 1800
адХасХаХХд аХдаХаХХаа ХаХсасХааХ аХсаХХаХаа сааХадХааХ Хаасдасаас 1860
сХдасдадаа ХаХдасаХХс сддХсХХсдх дхддХсадхд хдаххсдххх схадххдасх 1920
сассаХаХХХ аХХаХаасдХ аааХсаХХдХ ХаааасХада сдадХХХдаа сдХссдсХас 1980
аХсХХадХХХ аддассхддд ссХссХХХсХ ддссаХаасд ХсадХасхаа ссддасхадс 2040
ддасдсаХсс ХсдХсааХдд дададаххда аддххсссхх ссасХасХас ХдссаХХХас 2100
даХдасХдса дХдХсХасад ХадХдсХаад дХХдХсдасд ассХХХсХХд даХаедХаас 2160
адХсХсдХХа ссХасасссХ аХдХасасдс ХасХаХдаХа дХдааХасХХ асдддхсасд 2220
асадссдасс аххасхаддх сххсхдхадс Хдасаассас дХдХХХсадХ сдХсадаХдс 2280
адХссаХаес ХХсХасдХдд ХХсХдХдсдд ХдадХХсХдс дХсадссХсс адХдасХдХс 2340
асдХсХдХдХ дссХсХХХсд ХдадаХсдсХ ХдХХсХХссс ссдаассХас сХдХсдХддХ 2400
ХССддХдХХс саХааассаХ ХХХХдХсХХа дХассХадаа сХссХХддда ссХаХасддд 2460
ассассдхсд дсадхаасса ассХасдаас ссХсдХХдХд дХасдХсХсХ саасасэаас 2520
адсасдаХаа сдаааассас сддддХсдаа ХдХсдаааХХ дасддаассХ ХасХсдХХдХ 2580
- 133 023888
сЬсЬдаадаа ссЫссЬсас адассНсдЪН д^асссассС ааассаадад сЪНссдсЪдЪ 2640
сдасдсасед аЬадЬасада ίЬссЬдсЬсд даЬддЬадсЬ асастЛсЬас ЬасСЪаЪасс 2700
ЪссдссддН ддассдесЬс саддсдЬсаа ЬаасдаНааа ссдаЬддсад СсдсЬадада 2760
ддГддЬЪЬсд асдсасдддс сдд!:ассс1:с ЬИсдадИдСН асЬдИНЬдса сдасЪдддЪс 2820
даааасасас дЪсЬдЬЬссЬ сассассЬдЬ ссссдасссс дЬЬдссдасд ссЬдаЬааас 2880
сдЬЬЪссПс дСаас^дЬд^: асдсддНЬЬа аасддасдад аЬдд^ссдЬ ^аЬссЬНсЬН 2940
ддЬаааасН £с£сС1:а£ад ίЪсаЬдсЪЪс ассдд^аааа асаддСассЬ ддсЬдаЪдас 3000
ассЬсадсдН дссЪЪЪдаЪд адд^д^дНсс аассСсддЬд адЬссдНссс Ьс^аадЬсдС 3060
адЬдаддасд ссдсддаадЬ аГдтдЪдаЫ: ДсдаассЪсЪ ЪаЪассЬсСс сас1:дЬсасс 3120
ЬдасасСНдд ЬдссадЬссс ^аасЬдЬддЬ ЬасдЪаЬдаЪ дсасЬасГда саассЬЬдЪН 3180
1С1;дсаадаа ссаддиадса сЪсассаадЬ ассЬддад1:1: ддадддаасс ЬсдЬсасдас 3240
сНсаЬдаса сассСссЬЪд ЬсСс^сЬдса а£1ассЁсаа асЪссЪЪдд^ дЪдсддЬдсС 3300
Ьсд^садаса сСаСсдЬаас ссдадЬдИИс СсссИсдада сд^адЫсда аассдасс1:с 3360
ддЬааддаса ссИРаааадЬ СсдРЬдЪдас адЬЬсаасЬд садсссадЬа аасЬЬсасаЬ 3420
сЬсасЬЪсЬа сс£Л ЬЬЬаас д^саасЬЬсс сЬЬдСЬддаС ассдсадаса адИЪссдаа 3480
адЕЁсааада асссЬдаддд сдЬсГдЬдСс садГдссдЬд асассасаас сНаасдЬса 3540
^дЬдассдЬд сс1ассЬдда асдЪЪЬсаад да^ададсад Ъсассдаад1: аасЬЬдсЬдд 3600
агьдсддеса сссдЬсгаас сад£дасадЬ сдддааааса аадссассдд ЬдссддЬЬдс 3660
даЪЬссадда сНаасЬСаас с£Ъдд1:ддда аасс£с1дад ЪаИд^а’зсас сасссдСс^с 3720
с£с£Сд££д£ сЪадПадСд дЬдассдСдС £садасс££с д^сдЬаассд ПЬсддаааС 3780
дЫзддЬддда деНссссдс дЬсЬсНдаЬС ддсдадаЬсс Нс^дСдНсда асссХдааас 3840
сЬадЪсаасс Ьссссасаад ЬддадЪсаас ссЬЬссдаса ддЪадЪЪсас аадссЬссЬс 3900
дЬааддсдад ЬдасаадссЬ ссдьасадда ссЪа^ЪдсдЪ Нсс^аасдас ссссдададд 3960
асаасассЬа сссдЬадЬЬа сдадсасЬдЬ ссаддЬаСсд ададЬдсааа дадсдЬсаас 4020
сЪссЪсаада сдадааддад аддсаснлдс асдЬдсдас!: дЬдасссаса сддЪаЬсЪдЪ 4080
ад^сддссдЬ Ъсьедасьсь 4100
- 134 023888
Приложение 1
СУ-ТВЕУ Нург или Ον-ίΘΤ Е5 с γρν/ΤΒΕν химерным сигналом (р42, р59, и р43 конструкции) (ЗЕО Ю N03: 28-30)
ΥΡ170 рагъ1а! ®1дпа1
Τ5ΞΓν рахХха! э!дпа1
С ргоееап ΥΡ17Π Нург Ог ЬСТ Е5 ргН ргоЪеап & КЕЕ 5 Η ϋ V Ъ Т V $ Р Ь 1 Ь С МЬСМ Т I А А Т V К 401 А ОаАААОТССО ТТСССАТОАТ СТГСГСАСТС ТССААТТССТ ААТТТТСССС АТССТСОССА ТСАСААТССС АССТАСОСГГ СОС
Т ССТГТССОСС ААСООТАСТА СААОАСТСАС АССТТААССА ТТААААСССС ТАОЗАССССТ АСТСТТАССС ТС0АТ5ССАА ОСС
СУ-ТВЕУ Нург с ΥΡν/ννΝν химерным сигналом (р45) (ЗЕО 10 N03: 31-33) с ргоЕехо ΥΡ170 ΜΝν рапна! аддпа!
ΥΡ 170 рагр 1а1 в!дпа! Нург ргК ргоСехп
Е КЕЯ ЗНО V Ь Т V С Р Ь I Ь С М Ь А С V <3 А АТУ Я 4 01 А ССАААССССС ТТСССАТСАТ СТТСТСАСТС ТССААТТССТ ААТТТТОССС АГССТСССТТ СТОТСОСАСС АССТАСССТС ССА
Т ССТТТОСССС ААСООТАСТА САйСАСТОАС АССТТААССА ттаадасссо тасоассоаа САСАОССГСО тсоатсссас сст
КУ-ИМУ/ТВЕУ Нург с ТВЕУ сигналом <р39) (5ЕО Ю N05: 34-36)
ТЕБУ в1дпа1
ΜΝν С ргоЬехп Нург ргМ ргоЬе1п
О к к кает о к м з н ь ь ν ι с м ь с μτι дату е 201 СААААСААА СбОССССОАА САОАСТООАТ СМЗСТОССТС СТОЗТААТСС ССАТОСТСОа СЛТОАСААТС ССАССТАССС ттсос
СТТТТСТТТ ССССССССТГ СТСТОАССТА СТСОАСССАС САОСАТРАОС ССТАСОАССС СТАСТОТТАО ССТСОАТОСС ААОСС
Ρν-ννΝν/ΤΒΕν Нург с ИМУсИгиалоМ(р40) (ЗЕО Ю N03: 37-39)
ΜΝν вхдпа!
ΜΝν С ргосехл Нург ргм ρχο(«ίη
О к к я’ <з а к т о ι а ν м гаме асу а а а тук 201 СААААСААА СООСООСЗАА А0АСАСССАТ АССТСК5АТС АТАОССАТСС ТОССТТСТСТ ССОАССАОСТ АССОТССОА
СТТТТСТТТ ССССССССТГ ТСТЕТСССТА ТССАСАСТАС ТАТСОСТАСС АСССААСАСА СССТССТССА ТСССАСССТ
- 135 023888
Приложение 2
СУ-ТВЕУ Нург с ΥΡν/ΤΒΕν химерным сигналом (р42) (5ЕО10 N05:40-42)
ДОТАДАТССТ СЮТССТААТ ТСАССТОСАТ ТОЗТСТОСАА АТССАСГГСС ТАОССДАТАА АСАСАТПСС АТТААТГТТА АТОЗТТССТГ СВДССАТТАЗ ТСАТТТАОСА СЙСАСОАТТА АСТССАССТА АССАСАССТТ ТАССТСААСС? АТСССТТАТТ ТСТСТАААСС ТААТТААААТ ТАССААССАА СТСССТААТС 1 НТК
С ргоСе!п
САСАСААСТО АССАОААСАТ СТСТССТССТ АААЗСТСАЯО ОАААААСССГ ООСССТСААТ АТООТАСОАС САОСАОТТСС СТССТТСТСА ААСААААТАА СТСТСТТСАС ТССТСТТСТА САОАССАССА ТТТССАСТСС СТТГТТСССА СССЯСДСТТА ТДССАТОСТС СТССТСАА-ЗС САССААСАаТ ТГСТТГТАТТ
С ргоЬегп
ОКТ К О 1 СЫНУ ОРЗ καν О С Ρ I Ρ Ρ Р Ь Ρ N I I Т С к К I ААСААААААС ААААСАААТТ ССАААСАСАС СТОЗАССТТС ААСАООТеТГ САДСОАТТТА ТСРПТТСТТ ТГТСТТСААС АПТТСАСТв СААААААДАТ ТПЗТТТТТТЗ ТГГТСТТТАА ССТТТСТСТС ОАССТССААС ТТСТССАСАА СТТССТАААТ АОАААААЙАА АААСААОТТО ТААААСТСАС СТТТТТТСТА
С ргоСехп
-ТАН Ь К К Ь И К М ГОР к <? е ь А V 1 к к ν к к ν ν А 5 Ь к к α САСАССССАС СТАААЗАОаТ ТОТОСААААТ ОСТООАСССА АОАСААООСТ ГООСГСТТСТ ААа<ЗАААСТС ААСАЯАОТОО ТОасСАОТТТ САТОАЗАССА СТСТСОССТС САТРГСТССА АСАССТТТТА СОАССТСОСТ ТСТОТТССОА АССОАСААСА ТТССТТТСАО ТТСТСТСАСС ассоотсааа стастстсст
ΥΡ170 ρΛϊΧϊιΙ £1дла1
ТВЕУ ρβιΧίΛΪ згдпа!
С ргрЪеАп ргМ ргоЬегп ьззя как 3Ηϋ ν о τ ν о р ь г .ь о мьск тга ату к к б к · 401, ТГСТССГСАА ОСАААССССС ТТСССАТОАТ ОТТСТОАСТО ТОСААТГССТ ААРТТТШАЗС атсстзооса тоасаатозс аостаозотт сослаооааа
ААСАООАЙТТ ССГТЮССее ААСССТАСТА СААСАСТСАС АССТТААОТА ТТААААСССО ТАСОАСССОТ АСТОТТАОС© ТСОАТОССАА ОСОТТССТТТ ргМ ргоСехп .
- ϋ о з туг к а в с к о а а τ о ν к ν в ист сух ьатр н о з ·
501 ОАОАСООСАО ТАСОСТСАТА СССССОСААО СТААООАТСС СССТАСССАА ОТСАСАСТСО ААААПЭОТАС СТОСОТСАТТ СТООССАССС АСАТОООСТС
СТСТСССОТС АТОССАВТАГ ВСВСОССТТС САТТССГАСС ССОАТОООТТ САСТСТСАСС ГГТТАССАТО ОАСОСАОТАА ОАСССЙТООС ТВТАССС6А0 ргМ рсоЬеГп »кса о з с, з ¥ е с ντι о о о е Е Р V О V О СРОК Η V О ονγ 601 ТГООТСТОАТ САТАОССТТТ СТТАТСАОТа ССТААССАТА САТСААСОТС АОСААССТОТ ТСАСОТТОАТ ТИЛТСТОСС (ЗАААССТООА ТОСООТСТАТ
ААССАСАСТА СТАТСОСААА СААТАСТСАС ССАТТССТАТ СТАВТТССАС ТССТТВСДСА АСТССААСТА АССААСАОЗО СТТТОСАССТ АССССАСАТА ргм ргосехп
Ь В Υ 3 К С О КОВ «3 3 К Т К Я 3 V Ь I Р 5 К А О <3 Б СТО К С Н К
701 СТСОААТАТО ОАСООТВТОО ТАААСААОАА ООААССАОАА ССАВАСССТС АОТССТТАТА СССТСССАСС СТСААССАСА ССТСАССССА СССССАСАТА
САССТТАТАС СТСССАСАСС АТТТСТТСТТ ССТТССТСТТ ССТСТСССАС ТСАССААТАТ СССАСССТСС САСТТССТСТ ССАСТССССТ СССССТСТАТ ргМ ρΓΟϋβίη • М Ь В 003 ЬКТН Ь Т К V Е <3 Η V Ν X N К Ь ЬАЬ А М V Т V V И 1 ААТаСТГСОА ОСОСОАСТСА СТССОААСАС АТТТОАСССС СОТССАСССС ТСС5ТСТ0СА ААААТССССТ СТТОССССТС ССТАТССТСА САСТСОТТТС ТГАССААССТ СССОСТОАСТ ОАОССТТСТС ТАААСТССОС ССАОСТСССС АСССАСАССТ ТТТТАОС.СОА СААССОССАС СОАТАССАСТ ОТСАССАААС
Нург Е ρν1η ргМ ргоСега •ОТО Е 5 V V ТКУ А V Ь V V £, Ь С О А Ρ V Υ А 5 А С ТНЬ ΕΝΑ сстсАсосте оаотстотоо ттастсосвт оссаотосто стоотсстсс тстстсттсс ссстстстас осстссаоот стастсаттт ооаааасаоа
СОАОТ6ССАС СТСАОАСАСС ААТОАОСССА ССОТСАССАС САССАССАОС А6АСАСААСС ВССАСАСЙ.ТС СОСАОСТССА саюастааа ссттттстст
Нург Е ргосехп орут сто с τ т к ν т ь ν ь б ь с о с ν τ ι таб оке з н о ν
САТТТТОТСА ССОССАСССА «ЗОСАСЗАСТ СОООТААССС ТООТССТТСА АСТОССТООТ ТОСОТТАСТА ТТАССССТОА ОООСАААССС ТСТАТСОАТС
СТААААСАСТ ООСССТСОСТ ССССТССТСА ссссаттссс АССАССААСТ тсасссасса асссаатсат аатсссоаст сссстттоос аоатасстас
Нург Е рго¥е!п •«ЬО А I Υ ОВЙР АОТ А В Υ СЬНА КЬ5 ОТК V А А К СРТ·
ТСТООСТССА ТОСААТСТАТ СА0СА6ААТС ссосасааас сасосзаатат тсссггсасс сааасстотс соатасаддс стсосооста сотосссаас АСАССОАССТ АССТТАСАТА СТССТСТГАв ООССТОТТТа ОТСССТТАТА АСООААОТОС ОТТТССАСАО ОСГАТС-ТТТС САатоССОАТ ССАСОССТТС
Нург Е ргоСел-П
-МОР А т о А ВЕК ОСО ТУСК КО0 $0К ΟΜΟΝ НСО ЬРС ААТСССАССС СССАСССТСС СССАСОААСА ТСАСССАССТ АСАСТСТССА ААССОСАССА САСТОАТАОА ОССОЗООСТА АТСАСТСССС ССТСТГСССС ТТАСССТООС СССТСОСАСС СССТССТТСТ АСТСССТССА ТОТСАСАССТ ТГОСССТОСТ СТСАСТАТСТ ССОАССССАТ ТАСТСАСССС СОАСААОССС
Нург Б ргоЪе!п
КС51 V А С V К А АСЕА ККК АТС НУУО А N К 1УУ ТУКУ
АААООААОТА ТТОТСОСТТС СОТСААСОСА СССТСТСАОС ССАААААОАА ОССГАСТССС САССТСТАТС АССССААСАА САТССТТТАТ АСАСТСАААС ТТТССГТСАТ ААСАСССААС ССАСТТСССТ СССАСАСТСС сстттттстт сссатсассс СТССАОАТАС тсссоттстт СТАССАААТА ТСТСАСТТТС
Нург Е ргоСехп
- ЕРН ТОО γ V А Α ΝΕΤ Я 3 О ККТА ЗрТ У55 Е К Τ I ЬТМ· ТССААССАСА САСАССССАТ ТАССТООСОС ССААСОАСАС ТСАТТССОСТ СССААААССС ССАОСТТСАС ССТСТСАТСС ОААААСАССА ТССТСАСТАТ ассттостст СТСТССССТА АТОСАССССС ССГГССТСТС аЗТААОаССА ссотгстссс сстссаайтс ссасастасс сгтттстсст АССАСТСАТА
Нург Е ргоЬе1п
СЕТ О О V 3 ьъс К V А ЗСУО ОАО ТУХ 1.61,0 КТУ ЕНЬ ОССССАСТАТ ССССАССТТТ СТСГССТСТО СССССТСССТ АССССАСТСО АССТСССССА САСАОТСАТС СТССАДСТСС АТААААСАСТ ТСАССАТСТС СССССГСАТА ССССТССААА ОА5АССАЙАС СССССАСССА ТССССТСАСС ТССАССОСОТ СТСТСАСТАО ОАССТТОАСС ТАПТГСТСА АСТССТАСАС
Нург Б ргоЬеХп
Ρ Τ А Η О V к кон Р N О Ъ АЬР Н К Н Б С А А Ν Η Ν ΝΑΕ К Ъ V Е
ССТАССССТТ СССАССТССА саоссаттсс ТТТААССАСС ТТССССТССС АТССАДАСАТ СААССАЙССА САААСТССАА ТААТССАСАС ССАСТССТАС ОСАТСОССАА СССТССАССТ СТСССТААСС АААТГОСТСС ААССССАССС ТАССТТТСТА СТТССТСССТ СТТТОАССТТ АТТАССТСТС ОСТОАОСАТС
Нург Е ргоЬеХп
РСА РИА УКМО V У N ЬСО ОТСУ ЬЬК А О А СУРУ А Η I ААТТСССТОС СССТСАТССС СТСААСАТОО АССТСТАСАА ТСТСССТСАТ САСАСССССС ТТСТССТТАА АССТСТСССТ ССССТАССАС ТТССССАСАТ ТТААСССАСО СОСАОТАССС САСТТСТАСС ТССАСАТСТТ АСАСССАСТА СТСТСССССС ААСАССААТТ ТССАСАСССА ССССАТССТС ААССССТСТА
Нург Е ргоГе!д
- 136 023888 •ЕСТ К ¥ Н Ь К 3 С НУТ С Е V С БЕК Б К М К С Б Т ΪΤΜ С □ К ССААСОААСе ААСГДССЛСС ТвАЛЗТСАСС ССАТСТДАСТ ТСССАеСТСС СССТССАСАА СТТСАААДТС АААССГСТТА СЙТАСАСААТ СТСТЗАСААС всттссгтес ттсдтезтео дсттсАбтсс остасатгса ассстссасс созасстстг саасттгтас ттгссасаат осатототта сасастсттс
Нург Е ргосетп.
ткет мкк арт озон οτν УМЕ V Т Р 3 б Т К РСК ιρνκ АССААСТТСА САТООААСАЗ СССССССАСА САТАСССССС АССАТАСТОТ ООТСАТССАС ЗТСАССТТТТ СТОЗААСААА АСССТССАОА АТАССССТСС ТОСТТСААБТ втлеегтегс ССССОССТвТ СТАТССССОС ТОСТАТСАСА ССАСТАССТС СА.СТСЗАААА САССТТСТТТ ТОООАСОТСТ ТАТССССАСЗ
Нург Б ргогехп • А V А Н О 3 Р Р V № V А М Б I Т Р N Р Т Г В N № в О 5 В I Е М О Ь (Хадтгст&вс ТСАСОСДТСТ СССОАТСТСА АТОТТОСТАТ ОСТОАТТАСА ССТААСССТА. ССАТСОАОАА ТААССбТСОТ ССТТТТАТТС АОАТОСАОСТ СССОАСАТСО АСТОССТАСА ССССТАСА0Т ТАСААССАТА СОАСТААТОТ ОСАТТООСАТ СЙТАОСТСТТ АТГСССАССА ССААААТААС ТСТАОЗТССА
Нург Е ргоЬе1п • Р Р О О N I I Υ V О В Б 3 Υ О Η Е ОКС 331 с к ν р ОКТ К К С ТСССССАССС ОАТААСАТСА ТСТАОЗТОСС СОААСТСТСТ ТАССАОТООТ ТТСАВАААСС САОТТСААГГ (ЗООССООТСТ ТССААААААС СААСААОООА АбОСбСТССЗ СГАТТСТАОТ ДОАТОСДССС ЙСГТОАСАСА АТвЗТСАССА ААЗТСТТТСС СТСААСТТАА СССССССАСА айотпттто сттстгссст
Нург В ргоЪехп
I Е К Б Т V I ЙЕН А Μ ϋ В О 3 А ОСЕ Б 3 3 X ОКА БЫТ V Б <5 3
2201 АТООААСОАТ ТЗАСЗСХТАТ СбвСЗЛЗСАС ЗСАТОЗСАТТ ТТОСТТССЗС АЗООЗОАТТС СТСТСГТСТА ТТевТААОеС АСТОСАТАСС ЗТОСТЗОООЗ
ТАССТТОСТА АСТОССАДТА СССССТССТС ССТАСССТАА ААССААСССЗ ТСССССТААО ОАСАОААОАТ ААССАТТССС ТСАССТАТбС САСОАССССС Нург В ρχοϋβίη • ΑΡΗ 3ΙΡ О 3 V О Р Б Р К Б Б I» 3 V А £» А · и БОБ N Μ Η N РТМ· 2301 еСССМТСАА ТТСТАТГТТС ООбОССбТВО ООТТССТССС ТАААСТССТО СТООЗАЗТАб СССТОЗССТЗ СТТЗСОАСТб ААТАТЗС6СА АТСС6АСОА.Т
СОСОТААОТТ ААОАТАДААб СССССВСАСС ССААООАСбО АТТТСАООАС САСССТСАТС СОСАССОСАС СААСССТСАС ТТАТАССССТ ТАСЗСТССТА НурГ Е ρίΟΐβίη №51 деле σί ΥΡ17»
- 8 И 5 Р Б Б А О V Б V Б А Μ Т Б С νΟΑ В <3 О С А I N ГОК К. В Б 2401 ЗТССАТСТСА ТТССТСТТОб ссооезтест ТСТАСТСССС АТОАСАСТСЗ ССОТТОЗССС СОАТСААОЗА ТОСЗССАТСА АСТТТСОСАА ОАОАОАОСТС
САООТАСАОТ ААСбДЙААСС ОЗССбСАСОА АСАТСАССЗб ТАСТОТСАСС СОСААССССС ССГАЗТТССТ АСбСОСТАбТ ХбДААССЗТТ СТСТСТССАС
СУ-ТВЕУ Нург с ΥΡν/ννΝν химерным сигналом (р45) (ЙЕ<210 N05:43-45)
АОТАААТССТ ОТОТОСТААТ ТОАООТССАТ тсзтстйсаа атссаоттос таозсаатаа асасатттсс аттааттгта атсоттсзтт сазсоаттас ТСАТТГадОА САСАССАТТА АСТССАСОТА АССАСАСОТТ ТАОСТСААСС АТССОТТАТТ ТОЮТАААСС ΤΑΑΤΓΑΑΑΑΤ ТАС-СААЗСАА СТСССТААТС
5' ОГК
С ргоее1о γρχτο
Μ 36К К А о С К Т Б СУМ Η V К К ЗУК 5 Б 5 N К I К 101 САОАбААСТЗ АССАЙААСАТ ЗТСТЗОТССТ АААОСТСАСЗ ЗАААААСССТ ОЗСССТСААТ АТССГАСОАС ОАОСАОТТСС СТССТТОТСА ААСААААТАА
ОТСТСТТОАС ТОбТСГГОТА САЯАССАбСА ГГТСОАЗТСС СТТГПЯООА ССТОСАСТТА ТАССАТССТО СТССТСААОС САООДАСАЗТ ТТбТТТТАТТ С ргОЬехп ΥΡ170 • окт К <3 I б N К Р б Р 5 К О V (} С Р Ϊ РРР Б Р М I Б Т б К К I ААСААААААС аааасааатг ооааасаоас стссассттс ааоаостотт саассатгта тстттттстт тттсттсаас аттгтсастс саааааасат тгетттттта ТТТТбТТТАА сстттстстс сасстосаас ттстссасаа сттсстааат апааааасаа ааасаасттс таааастсас СТТТТТТСТА с ргосеХа ΥΡ17Π •ТАН Б К К Б МКМ БОР КОСЕ, А V Б К К V К К V V А 3 Б МКС САСАССССАС СТАААСАССТ ТСТССААААТ ССТССАСССА АСАСААСССТ ТОССТСТТСТ ААССАААСТС ААСАСАСТСС ТССССА0ТТТ ЗАТЗАСАЗСА (ЗТСТССССТС САТТТСТССА АСАССТТТТА ССАССТССЗТ ТСТСТТСССА АССйАСААСА ТТССТТТСАС ТТСТСТСАСС АССССТСААА СТАСТСТССТ
С рго£е3.п ΥΡ17Ρ ΜΝν рагМа! ахдпа!
ΥΡ 17Р рагеха! ехдпа!
Нург ргМ ргоье1п
ЬЗЗК ККК 5 Η О V Ь Т V ОРЬ I Ь С МЬАС УСА АТУ НКЕК ТТСТССТСАА ССАААССССС ТТСССАТСАТ СТТСТСАСТС тесааттсст ааттттсссс атсстссстт сготсссасс АЙСТАСССТС ССАААА6ААС ААСАССАС-ТТ СС1ТТССССС ААСОСТАСТА СААЙАСТСАС АСетТААбСА ТТААААСССС ТАССАССбАА САСАСССТСС ТССАТСССАС ссттгтсттс
Нург ргМ рго£е!п • 0С5 τνΐ КАЕС КВА АТ0 УКУЕ ЫСТ С V I ЬАТВ И <3 5
СССАССОААО САССЗТСАТА АСОССТСАОО ЗТААССАТСС СОСТАСССАС СТСАСАСТАВ АЗААТСбСАС ТТСССТААТА СТСОСОАСТО АТАТСССАТС СССГСССТТС СТСССАСТАТ ТССССАСТСС САТТССТАСС СССАТСССТС САСТСТСАТС ТСТТАСССТС ААСССАТТАТ САССССТСАС ТАТАСССТАС
Нург ргЯ ргоЪехП •ИСВ Ώ 3 Ь е Υ Е С УТ1 ООСЕ Е Р V ϋνρ СРСК κνη ονγ СТССТСТСАС САТАСССТСА СТТАТСААТС ССТААСААТА ОАССАССССС ААСААССТСТ ССАССТТСАС ТОТТГСТСТА (ЗАААТСТССА ТСССЕТТГАТ САССАСАСТЗ СТАТССбАСТ СААТАСПАС ССАТТСТГАТ СТОбТСССбб ТТСТТббАСА ССТССААСТб АСАДАСАСАТ СТТТаСАССГ АССбСАААТА
Нург ргМ ргоЬе1л
ЬБУС КСС КОЕ бЗКТ К К 5 V Ь I Р5НА ОСЕ ЬТС КСНК СТОЗАСТАСб бССССТСТОС ААААСАббАб бССТСАСбАА СТСОААбАТС ТСТбСТбАТТ ССААСТСАСб СбСААббАОА ЗТТбАССССТ АОАббССАСА САССТСАТСС ССОССАСАСС ТТТГбТССТС СССАСТбСТГ САССТТСТАб АСАССАСТАА бСТТСАСТОС ОССТТССТСТ СААСТООССА ТСТССОЗТОТ
Нург ргМ ргоЬехп
- НЬВ 6ϋ3 ЬКТН ЬТК V Е б МУНК №ЯЬ ДАЬ АНУТ V V № АбТОЗСТТбА АССОСАСТСА ТТСАОСАССС. АССТОАСТАб ОбТОбАСОбТ ТбОбТТТОбА АбААТСОСТТ ССТСбСОСТС ЗСТАТОбТСА ССбТССТСТб ТСАСООААСТ ТССССТСАСТ ААСТССТССС ТССАСТОАТС ССАССТСССА АСССАААССТ ТСТТАСССАА СОДЯССССАб ССАТАССАСТ ОССАССАСАС
Нург ргМ ргоЬехп
Нург В ргеьеХп •ЬТЬ βδνν τκν ауь ууьь СЬА ρνγ А 5 к с ТНЬ ΕΝΚ сстсАсастс ОАбАСтетсе тсастсссст тсстстсттс етготсстсс тстоттгосс сссастстас ссстссасст стастсатгт ССААААСАбА СбАСТСТСАС СТСТСАСАСС АСТОАССССА АССАСАСААС СДАСАСОАбС АСАСАААССб ОббТСАСАТб СССАбСТССА САТбАЙТААА ССТГТТСТСТ
Нург Е ριτοίβίη
ОРУТ сто ОТТ КУТЬ V Ь Е ЬОб С V Т I ТАЕ ОКР 3 Μ ϋ V 0Α1Ί НОТСА ССООСАСССА СССОАССАСТ СОССТААССС ТОСТССТТСА АСТООСТООТ ТОСОТТАСТА ТГАССбСТОА ООССАААССС ТСТАТОбАТО СТААААСАОТ бОСССТббОТ ССССТОСТСА ССССАТТСОС АССАСОААСТ ТОАСССАССА АСССААТСАТ ААТОбСбАСТ ССССТТТООС АСАТАССТАС
Нург В ргфъехп • ИБО А I Υ о В Η Р А О Т К В Υ СЬНА КБЗ ОТК УААК С Р Т Т6ТСССТ00А ТбСААТСТАТ.САОСАЗААТС ССССАСАААС САЙОбААТАТ ТОССТГСАСб САААбСТбТС СбАТАСААДб СТСОСббСГА ООТбСССААС АСАСССАССТ АСОТТАСАТА СТССТСТТАО СССОТСТТТО СТСССТТАТА АСООААОТСС ОТТТСбАСАб 6СТАТСТГТС САбСОССОАТ ССАСОСбТТС
Нург Е ргосехп
- 137 023888
К С Р А Т Ь А Е Е Н О С С ТУСК В. О О 5 ϋ Я ΟΝΟΝ НСС ПРО
ААТСОСАССС СССАСССТСС СССАССААСА ТСАОССАССТ АСАСТСТССА ААССОСАССА САСТСАТАСА СССТССССТА АТСАСТСССЙ ССТСТТСССС ГГАСССТООС СССТССОАСС СССТССТТОТ АСТСССТССА ТСТСАСАССТ ТТССССТССТ СТСАСТАТСТ СССАССССАТ ТАСТСАСССС ССАСААОССС
Нург Б ρχοίβίη
Κ05Ι V А С V К А А С Б А К К К АТС Н У У О А N К I V Υ ТУКУ
АААООААОТА ТТСТСОСТТС СЗТСААСССА СССТСТСАСС ССАААААСАА СОСТАСГОСС САССТСТАТС АССССААСАА САТССТТТАТ АСАЙТСАААС ТТТССТТСАТ ААСАОСОААС ОСАЙТТССОТ СОСАСАСТСС ССТТТГГСТГ СССАТОАССС ОТССАОАТАС ТССОСТТСТТ СТАССАААТА ТСТСАСТ'ГТС
Нург В ргобе1п • Е Р К ТСС Υ V А А ΝΕΤ Н3<3 ККТА 5 Р Т V 5 5 Е К. Т I ЬТН·
ТССААССАСА САСАООССАТ ТАССТССССС ССДАССАВАС ТСАГТССССТ СОСААААССС ССАОСТТСДС ССТСТСАТСС СААААОАССА ТССТСАСТАТ АССТГССТСТ СТОТССССТА АТССАССССС ССТТССТСТС АОТААССССА СССТТТТССС СОТССААЙТС ССАСАСТАСС СТТТТСТССТ АССАСТСАТА . Нург Б ргоЪе!п • 0 В Υ СОУЗ Ь Ь С К V А 3 С V В I, Л о τνι Ь Е Ь О κτν ЕНЬ
СООСОАСТАТ СССОАОЗТТТ СТСТССТСТС ССОООТООСТ АССОСАСТСС АССТООСССА ОАСАОТСАТС СТООААСТСС АТААААСАЙТ ТСАССАТСТС СССССТСАТА ССССТССААА ОАОАСОАОАС СССССАСССА ТСОССТСАОС ТСОАССОССТ СКЗТСАСТАО ОАССТТСАСС ТАТТТТОТСА АСТССТАСАС нурх Е ргосеха
РТАМ о V Н К В М Р N ϋ Ь А Ь Р И К Н Ё С А К. N Η N ΝΑΕ К, Ь V Е
ССТАССЗСТТ ееСАССТССА СадСОАТГОС ТГТААСОАСС ТТ6СССТССС АТССАААСАТ СААСеАаССА ОАААСТОСАА таатосасас СОАСТСОТАЙ ССАТССССАА ССОТССАСОТ ОТСССТААСС АААТТОСТСС ААС6ССАСОО ТАССТТТОТА СТТССТСОСТ СТТТОАССТТ АТТАССТСТС ССТОАЙСАТС
Нург Б ргоСе!п • Р О А РИА V К М В У Υ N Ь С ϋ О Т С V Ь Ь К А Ь А СУРУ А Η I ·
ААГТСССТОС ссстсдтесс стоаасатос асотстасаа тсгссстсат саоасссссс ггстссгтаа адстстсост сссстассас ттссссасат
ТТАДСССАСС ОСОАЙТАСОС САСТТСТАСС ТССАОАТОТТ АОАСССАСТА ОТСТООССОС ААОАЙОААТТ ТСОАОАОССА ССОСАТСОТС ААСООСТОТА
Нург Е ргобе^п •ЕСТ К Υ Я Ь КЗС НУТ С В V О ЬЕК ЬКМ К О Ь Т У Г М сок
ССААООААСС ААСТАССАСС ТСААОТСАОО ССАТСТААСТ ТССОАООТСС ОССТООАЗАА ОГГОААААТС АААЙОТСТТА СОТАСАСААТ ОТСТОАСААС
ССТТССТТСС ТТСАТССТОС АСТТСАОТСС ССТАСАТТОА АСССТССАСС СССАССТСТТ СААСТТТТАС ТТТССАОААТ ОСАТОТСТТА САСАСТСТТС
Нуре Е ртоЪаэ-Л
ТКРТ Ж К К АРТ Р5СН ОТУ УМЕ V Т Р 5 <3 Т К РСК I Р V К
АССАИЗТТСА САТООААОАЙ СССССССАСА САТМЗСЭЗСС АССАТАСТСТ ОТТСАТССАС СТСАССТТТТ СТ6СААСААА АСССТССАОА АТАССОСТСС ТССТТСААСТ СТАССТТСТС ССОООООТСТ СТАТСОССОС ТССТАТОАСА ССАСТАССТС САСТООАААА ОАССГТСТТТ ТОООАСОТСТ ТАТООССАСО ' Нург Е рго без. η
- А V А Н С 3 РЦУЫ V А М Ь I Т Р N Р Т I Е N НСС СР1Е М О Ь ОООСТСТАСС ТСАСССАТСТ ССССАТ6ТСА АТСГГОСТАТ ОСТОАТТАСА ссгаассста ссатссасаа таассстсст ссттттаттс асатссасст ССССАСАТСС АОТОССТАСА ОСССТАСАОТ ТАСААСОАТА СОАСТААТСТ ООАТТОООАТ С0ТАССГСТТ АТТСССАССА ссаааатлас тсгасстсоа • Нург Е рсоЪехп •РРС О Μ ϊ I Υ V С ВЬЕ Υ о И Р ОК0 ЗЗГ О К V Р окт к к с ТСССССАССС САТААСАТСА ТСТАССТООа ССААСТСТСТ ТАССАОТССТ ТТСМАААСО САОТТСААТТ ОСОСООСТСТ ТССААААААС СААСААСОСА А6СС0СТССС СТАГТСТАЙТ АСАТССАССС ОСТТОАСАОА АТССТСАССА ААСТСТТТСС СТСААЙТТАА СССОСССАЙА АОО7ТТТТТС СТТСТТСССТ
Нург Е ргогехп
I Е К Ь ТУ1 6 £ Н АИОР С 5 А ССР 1,351 СКА б Η Т V Ь С О
АТССААССАТ ТСАСССТТАТ СООСОАОСАС ОСАТООСАТТ ТТОСТТСССС АЙССССАТТС СТОТСТТСТА ТТОСТААССС АСТССАТАСС СТССТССССС ТАССТТССТА АСТСССААТА СССССТССТС ССТАСССТАА ААССААСССС ТСССССТААС САСАСААОАТ ААССАТТССС ТСАССТАТСС САССАССССС
Нург В ргоЬедц
- АРМ 3 I Р , С С V в РЬР К Ь Ϊ. Ь С V А ЬАМ ЬОЬ N М Й N РТМ СОЗСАТТСАА ТТСТАГГТТС СССССССТСС ССТТССТ6СС ТАААСТССГС СТбОСДСГВД СССТССССТС СТТСССАСТС ААТАГССОСА АГССОАОЗАТ СОССТААСТТ ААОАТААААС СССССССАСС ССААССДССН атттсассас сассстсатс (ЗООАССССАС саассстоас ТТАТАСОССТ ТАСОСТССТА
Нург Е ргоЬегп ·
N31 депе о£ ΪΡ17Ο
-5М5 РЬЬА σνΐ» V I, А НТЬС У<ЗА ООО С А I N РОК КВЬ ОГССАТОТСА ТТССТСТЮТ ССООССТОСТ ТОХАСТООСС АТСАСАСТСС СССТГОСССС СеАТСААСОА ТООЗССАТСА АСТТТОССАА оасаоаостс САССТАСАСТ ААССАСААСС ССССССАССА АСАТСАССОЙ ТАСТСТСАСС СбСААССОСО ССТАОТТССТ АСССООТАОТ ТОАААСССТТ СГСТСТСОАО
СУ-ЬОТУ Е5 с ΥΡν/ΤΒΕν химерным сигналом (р43) (8ΕΟ Ю N08: 48-48)
АЙТАААТССТ СТОТССТААТ тоасстосат тсстстссаа АТССАЗТГСС таяйсаатаа асасатттоз аттаатттта атсоттсстт САСССАТТАС ТСАТТТАОаА САСАСОАТТА АСТССАССТА АССАОАСЙТГ тасстсаасй атсссттатт тстотааасс тааттаааат ТАОСААССАА СТСССТААТС
5· итк
С ргоЬегп ΥΡ17Ο
N 5 С Я К А О С К Т Ь ЙУН МУКИ О V К 3 Ь 3 Я К I К САСАЙААСТ6 АССАСААСАТ ОТСТССТССТ АААОСГСАОЙ САААААСССТ ОСССОТСААТ АТОЙТАССАС САОСАСТТСС СТССГГСТСА ААСААААТАА СТСТСТТ6АС ТеСТСТТСТА САСАССАВСА ТТГССАСТСС СТТТГГСССА СССОСАСТТА ТАССАТССТС СТССТСААСС САССААСАСТ ТТСТТТТАТТ
С ρχοεβίη ΪΈΊ70 * ОКТ КОЕ С N К Р СРЗ КСУ 0СР1 РРР ЬРМ 1ЬТС ΚΚΙ ААСААААААС ААААСАААТТ ССАААСАЙАС СТОСАССГТС ААОАССТСТТ СААССАТТТА ТСТТТГГСТТ ТТТСТТСААС АТТТТСАСТС СААААААСАТ ТГСТПТТТС ТТТТСТТТАА ССТТТСТСТО САССТ50ААС ТТСТССАСАА СТТССТАААТ АСАААААСАА АААСААСТТС ТААААСТСАС СТГТТТТСТА
С ргоСв£п ΥΡ170
ТАН ЬКЯЕ, ИКМ ЬПР К О С 3, АУЬ ЕКУ ККУУ АЗЪ МКС САСАССССАС СТАААСАОСТ ТСТССААААТ ССТССАСССА АСАСААСССТ ТСССТСТТСТ ААССАААСТС ААСАСАСТСС ТССССАСГГТ САТСАСАССА СТСТСООСТС САТТТСТССА АСАССТТТТА СОАССТСбСТ ТСТСТТССОА АСССАСААСА ТГССТТТСАО ТГСГСТСАСС АССОСТСААА СТАСТСТССТ
С ргосехп ΥΡ170 ТЗЕУ рагЬба! эхдпа!
ΪΡ 17Р рагСЛа! З1дпа1 ргМ ргосехл Ьалдас БЕ ьезк ккк 5 н с νίτν орь ιΐα мьам τια ату яквк ТТСТССТСАА ССАААССССС ТТСССАТСАТ СГГСТСАСТС ТССААТТССТ ААТТТТООСС АТОСТОСйОА ТСАОЗАТССС АССТАСТСТС ССААМСАСА ААСАООАСГГ ССТТТОСССС ААЙОЗТАСТА СААСАСТЙАС ассттаайоа ТТААААСССС тасс-ассссг астсстассс тссатсасас ссттссстст ргМ ргосе1л ьапдас Е5 •'008 «VI К А В С К О А АТО УКУЕ ЫЙТ СУГ ЬАТО МЙЗСАЗДССЙСХС ТАТО0ТЙАТС АОАССССАДС СТАОООАССС ТОССАСССАО ОТСАСОСТСС ААААТСССАС СТСТСТТАТТ СТОСССАССС АСАТСЙССТС СТСТОССОАО АТАССАСТАЙ ТСТСОЙСТТС САТСССТССС АСССТСОЙТС САСТСССАСС ТТТТАСССТЙ САСАСААТАА ОАССССТОСС ТЙТАССССАС ргМ ргоСе!а ьапдас Е5
- 138 023888
• М С Б В 5 Ь А У Б С ντί & ζ} О Е ЕРУ О V ϋ СРОК О V Ε КУТ
601 СТООТСТОАТ САТТСТСТОО СТТАТСААТО ТСТТАСТАТТ ОАТСАСООТО ААОАОССТОТ ССАСОТОСАС ТСТГТСТОТА САСОССТССА САААОТСАСС СЗАССАСАСТА СТААСАОАСС СААТАСТГАС АСААТСАТАА СТАеТСССАС ТТСТСеСАСА ССТССАССТС АСАААСАСАТ СТССССАОСТ СТТТСАСТСС рГН ргОБехп ЬвддаЪ Е5
701 б Е Υ С К С С Я Я Е <3 5 К 5 А Я 5 VII РЕНА С Я О Ь Т С ЯСНО СТССААТАТС САСОАТСТСС ССООССАСАА ОССТССАССА СТСЙОАСАТС ССТСТТСАТС ССТТСАСАТО СССАСССССА ТСТСАСАОСО АООССТСАСС ОАССТТАТАС СТОСТАСАСС СОССССТСГГ СС6АССТССТ САСССТСТАС ССАСААСТАС 06ААЯТСТАС ОСОТСССССТ АСАСТСТССС ТССССАОТСС ргМ ргобехп ЬапдаХ Е5
οοι • И ь В ОБА V К А Н Ь Ί Я V Е 0 МУНК N К Ь РТб 3 Ь V М V А М АСТСССТССА АСССОААССА ОТСААОСССС АТСТСАСТСС ССТТСААОСС ТСССТСТССА ААААСАААСГ СТТТАСССТГ АСССТООТОА ТССТСОССТС ТСАСССАССТ тссссттсст саоттсссос ТАСАСТСАСС ссаасттссо асссасасст ттттстттса сааатссоаа тсосассаст ассаососас ргМ ргобегп Ьапдаб Е5 Б ргоЬехп ЬапсаХ Е5
901 < Ь Μ V ϋ О Ь Ь Р Я -I Ь I V V V А Ь ΑΙΑ ΡΑΥ А 5 Я С ΤΗΣ Б N Я ССТОАТССТА САСССАСТСС ТТССССССАТ ТСТСАТТСТТ СГССТСССТС ТСССССТССС СССТССАТАС СССТССДССТ СТАСССАССТ ССААААТС5А ССАСТАССАТ СТСССТСАСС ААССОСССТА АСАСТААСАА САССАСССАС АССОССАОСО ОООАССТАТС СОСАООТССА САТОССТООА ССТПТАССТ Е ргобе!п Ьалдаб Е5
1001 ОРУТ С V <5 ОТТ Я Ь Т Ь V Ь В Ь О О С V т V Т А О О К Р 3 I. □ V ОАТТТСОТСА САСОСОТССА АСОТАСТАСС СОССТСАССС ТССТОСТССА ССТСОСДССС ТСТСТСАСТС ТТАСАССССА СОСААААССТ АСТСТССАТС СТАААОСДОТ отссосасот тссатсатоо осссастооо ассассасст соассстссс асасдстоас аатотсосст ООТТТТСОА ТСАСАССГАС Е ргобе!а ЬапдаС Е5
1101 • Μ Σ ϋ 3 I У ОЕЗР А 0 Т ЯВУ СХ.НА КЬТ С Т К V А А Я СРТ ТОТСОСТСОА СТССАТСТАТ САООАОАОСС СООСАСАОАС САСООАОтАС Т6ССТССАОЗ СТААОСПЗАС ТСООАСААаС ОТАОССОСАА ОАТСТСССАС АСАССОАССТ САООТАОАТА ОТССГСТСОО ОССОТСТСГО ОТСССТСАТС АСОСАСОТСС ОАТТСОАСТС АСССТСТТТС САТСОССОТТ СТАСАСООТС * Е ргоС-βΙη Ьапдаб Е5
1201 •МОР АТЬР ЗЕЕ 030 ТУСК Я О 0 ЗРЯ О И О N ЯСС ЬРС ААТСОООССТ ОССАССТТОС ССОАОСААСА ССААТССООТ АСООТАТССА АОСОАОАТСА ОТСТОАТСОС ОСАТООСОСА АТСАТТССОС ССТСТТССОТ тгассссоса соотсодАсе еостсеттот ООТТАООССА ТОССАТАСОТ ТСОСТСТАЗТ САОАСТАОСО ССТАСССССТ ТАОТААСОСС ООАОААОССА Е ргосехп Ьапдат: 25
1301 К С 3 I V Т С V К V ТСЕР ККК АТС Η V У О V N К ΙΤΥ Т I К V АААСОСАОСА ТГОТСАСТТС СОТОААООТО АСАТОООАСС АСААОААОАА ООССАСАЙОТ САТОТАТАТС АТСТСААСАА ААТСАСАГАТ АССАТТААОО ТГТСОЗТСОТ ААСАОТСААС ОСАСТТССАС ТСТАСОСТСС ТОТГСТТСТТ ССООТСТССА ОТДСАТАТАС ТАСАСГТОТТ ТТАОТСТАТА ТООТААТТСС Б ргосе!п Ьапаац Ξ5
1401 ' Е Р Н Т 0 В Р V А А НЕТ Н 3 О ЯК5А ЗРТ V 3 3 В К- Т I Ь Т Ь ТАОААССАСА ТАСАОСОСАА ТТССТОССЙЗ САААССАСАС ТСАТАОСООА ССАААСТССО ССТССТТСАС СОТСТССТСС ОАОААААСАА ТССТСАСССТ АТСТТООТОТ АТОТССССТГ ААОСАССОТС СТТТССТСТО АОТАТСОССТ ОСТТТСАООС ССАООААОТС ОСАОАССАОО СТСТТТТСТТ АЭЗАСТСССА Е ргоЪе!л Ьалдаб Е5
1501 ОРУ СРУЗ Ь Ь С Е V А 5 О V О Ь А 0 Т V V ЦАЬР К Т Н Б Н Ь СООАЗАСТАС ССССАСОТАТ СТТТССТОТЗ СДОООТООСС АОСООСОТСО АССТТОСТСА ОАСАОТСОТС ТТСОСССТОО АСААОАСАСА ТСАйСАСТТО ОССТСТОАТО ССОСТССАТА САААССАСАС СТСССАССОО ТССССОСАСС ТООААСОАОТ СТОТСАОСАС ААСССООАСС ТСТТСТСТОТ АСТСОТСААС Б ргоХехл. ЬапдаХ Е5
1601 РТАМ ОУН ЯРИ РНРЬ АЬР МКН РОДЕ АМЫ еао кьуе ССААСАОССТ СОСАССТОСА САОСОАСТОО ТТТААСОАСС ТСОСОСТССС СТОСАААСАТ ОАСООСОСТС ААОСАТООАА ТСАООСАООС АСАСТСОТСС
1701 «ЗСТГСТОЗОА ССОТССАССТ СТСССТСАСС АААТТССТОС АССССЕАСОе САССТТТСТА СТСССССбАС ТТССТАССТТ АСТСССТССС ТСТСАССАСС В ргоЬе£п Ьапдак Е5 - Ρ«ϊ РИА УКМО νΡΗ ΙΟϋ £Τ&ν ЬЬК 3 Ъ А <3 V Р V А 3 3 · ааптййаас сссасасосс огААдсАтей ассттттсаа тсттостсдс саоАсдеосе тсстссгсаа атсастойоз сесетссстс тазссаосат ТГАААССТПЗ СООТСТССОО САТГТСТАСС ТбСААААЙТГ АСААССАСТГО ОТСТСТСССС АССАССАСТТ ТАСТОАССЗС ССССАСССАС АТСССТССТЬ Б ргоЬепп ЬапдаЬ В5
1ЕО1 •ЕСТ КУДЬ К 5 С НУТ СЕУО ЬЕК 1КМ К О I. Т УТУ СГК СОАбСеСАСА АМ5ТАТСАСС ТвААОТСТСС (ЗСАТСТААСС ТОССААОТСО бССТййАААА ОСТСААОАТ6 ХААбОАСТТА СОТАСАСТбТ ТТСТЗДТАА<3 ССТСССЕТОТ ТТСАЗАСТОС АСТТСАСАСС ССТАСАТТСС АСССТТСАСС СОСАССТГТТ ССАСТТСТАС ТТТССТОААТ ССАТСТСАСА ААСАСТАТТС Б ρτοΐβίη ЬалдаС £5
1ЭО1 ТКРТ икк АРТ Р5СН РТУ УМЕ У<5Р5 6 Т К РСЯ I Р V К. · АССААОТТТА САТООАА6СС Д5ССССААС5 вАЗТСССССС АТОАТАСССТ ССТСАТООАО СТГССТТТСТ СОЗССАССАЗ АССАТСТАОА АТАССАВТСА тееттсАААГ стассттсос тсоеееттос стадооссоо тастатоэса 6Састасстс сахссааайа ооссетеотс тестАСАТСТ татсотсаст Е ρτοΟβίη ЬапдаС £5
2001 • ДУА Н С V РЕУМ УАМ Ъ1Т РНРТ М£М КОС β Р I Е М 0 Ь САССТСТС6С ССАСеСТСТА ССССАССТАА АССТССССАТ ССТСАГГАСА СССААТСССА СТАТОЗАСАА СААТССССОА О6СТГСАТСС АААТССАССТ СТССАСАССС СОГОССАСАТ ОЗОСТССАТ? ТССАССОСТА СОАСТААТСТ &ЗСТТА®ЗСТ (ЭАТАССГСТГ СТТАСССССТ СССААСТАвС ТТТАССТССА Е ргоЬе!п ЬапдаЬ Е5
2101 •ΡΡβ ΡΜΙ1 УУС Ρΐϋ НОМР ς К С 831 ОЯУЬ окт ЯКС СССОССТООА САСААСАТСА ТТТАТСТССС 03АССТСОАТ САТСААТОСТ ТССАСААА60 ОТСТТССАТС СССССССТСС ТТСАОААСАС АССААААССС СбОСеСАССТ СТСТтеТАСТ АААТАСАССС ССТСйАССТА СТАОТТАССА АОеТСТТТСС САСААЗСТАО ССОбСССАбО ААбТСТТСТС ТбСТТТТССО Б ргсс.е!п ЬгцздаЬ Е5
2201 1ВКЬ Т V Ь ВЕН АИРР СЗУ ОСУ М Т 31 СКА МНТ УЬВ5- атгоаааоас ттасаэтсст ееесоААСАт ссстсййаст тсеестсазг тссссооста атсасаасса таооса6А6С татссасасс сттстсйвтс ТААСТТТСТО ААТОТСАООА ССОЗСТГОТД СССАСССТВА А6СССА0ТСА АССОССССАТ ТАСТеГКСТ АТССбТСТСО АТАССТСТбе СААОАвССАС В ргоьелп Ьалдаъ Е5
2301 А К N ТЬЬ СОУС РБР К I Ь 1. а V А МАН ЪСЬ N М К К Р т ь · 6С0САТТТАА ТАСТСЮТТе оетоететсс сггттсттсс СААААТССТС СГССОТСТСС СААТООССТО ОСТТОСАСТО ААТАТОСОСА АТССТАСАСТ ССССТАААТТ АТОАОАСААС ССАССОСАСС СААААСААВС СПТТАСОАС САСССАСАСС СТГАСССОАС СОААССТСАС ГГАТАСОССТ ΤΑΟΰΑΤΒΤΟΑ Б рГоЪехй Ъ&пдаХ 35
2401 N51 деле οί ΥΡ17Ρ ' а м 0 р 1 Ь 3 ось V Ь А м т ь о уса р с с С А I N РСК К Б ь вАСТАГОССВ 1 пенсии САОСАОСССТ 66ТССТ00СА АТСАСТСТ6С «ЗАйТООСССС СОАТСААОВА ТСССССАТСА АСТГГОССАА САСАОАвСТС СТСАТАСССС АААбААВАСА СТССТСССОА ССАССАСС6Т ТАСТОАСАСС СТСАСССССС ССТАОТТССГ АСССССТАвТ ТЕААДСС6ТТ СТСТСТСОАС
1 Ον-ΤΒΕν Нург с ΥΡν/ΤΒΕν химерным сигналом и с1С2 делецией я С белке (р59) (5ЕО Ю N05: 49-51) 51 итк АСТАААТССТ СТСТССТААТ КЗАССТССАТ ТССТСТССАА АТССАСТТОС ТАСССААТАА АСАСАГГТСС АТТААТТТТА АТССТТССТГ САСССАТТАС ТСАТТТАССА САСАССАТГА АСГССАССТА АССАСАССТТ ТАССТСААСС АТСССТТАТГ ТСТСТАААСС ТААТТААААТ ТАЙСААеСАА СТСССТААТС
- 139 023888
С ргосе!л м з о й к а о о кть ο ν я м ν е й с у е зьз νκικ САСАОАКСТС АССАСААСАТ ОТСТССТСОТ АААОСТСАОС САААААСССТ ОССССТСААТ АТСОТАСОАС САОСАОТТСС СТССТТСТСА ААСААААТАА СТСТСТТСАС ТССЗТСТГаТА САСАССАОСА ТТТСОАОТСС СТТТТТЙСОА СССССАЗТТА ТАССАТССТС СТССТСААСС САОСААСАОТ ТТСТГТТАТТ ' ά€2 йе1е£1оп (РЗЕ)
С ргоъехп • окт Κξ}1 <3 N Е Р ОСУ ОСР ΙΡΡΡ Ь Р N I Ь Т О К К I ТАН ААСААААААС ААААСАААТТ СОАЛАСАОАС СГОСАОСТСТ ТСААООАТТТ АТСТТТТТСТ ТТТТСТТСАА САТТТТСАСТ ОСААААААСА ТСАСАССССА ТТСТТТТТТС ТТГТОТТТАА ССТТТСТСГО ОАССТССАСА АОТТССТААА ТАОАААААСА ААААСААСТТ ОТААААСТОА ССТТТТТГСТ АОТОТСООСТ
С рго!е1п
- Ь К й Ь » К И ПОР Е О О Ь А У Ь Е К V К й V V А 5 Ь НЕС Ь 5 3
ССТАААСАОС ТТСТООАААА ТОСТООАССС ААСАСААССС ТТСОСТСТТС ТААССАААОТ СДАСАОАСТС ОТССССАОТТ ТСАТОАСАСС АТТСТССТСА ООАТТГСТСС ААСАССТТТТ АЙОАССТСОО ТТСТОТГССО ААССОАСААО аттсстттса сттстстсас сасссстсаа АСТАСТСТСС таасасоаст
ΥΡ17Ώ рахь!а1 51дпа1
ТВЕУ рагМа! з1дпа1
С ргоЪехп
Нург ргМ ргоЬехп
Е К й й 5 Η Р V Ь Т V 0 ? Ь I Ь О М Ь С Μ Т I А АТУ Е К Е й Р С 3
АССАААСССС СТТСССАТОА ТСТТСТСАСТ СТОСААТТСС ТААТТТТССС САТССТОСЗС АТОАСААТСО САОСТАСССТ ТСССААССАА АОАОАССССА ТССТТТСССС СААСОСТАСТ асаасастса сассттааос АТГААААССС СТАССАСССО ТАСТСТТАОС СТССАТСССА АСССТТССТТ ТСТСТССССТ
Нург ргМ ргоСелп
- ТУ1 ЙАЕ ОКРА А То УЕУ Е N С Т С У I Ь А Т Р М С 5 М С Р СТАСССТСАТ АСССССССАА ССТААСЗАТС СООСТАСССА АОТОАСАОТС СААААТССТА ССТССОТСАТ ТСТОСССАСС САСАТСООСТ СТТОСТСТ6А САТОССАСТА ТЗСОССССТТ ССАТТССТАС ССССАТСОСТ ТСАСТСТСАС СТТТТАССАТ ССАСОСАСТА АСАСССОТСС СТСТАССОЗА СААССАСАСТ
Нург ргМ ргоЬезл •РЗЕ, 5УЕС ντί РОС ВЕРУ РУР С Г С Е N V О С V Υ Ь Е Υ ТСАТАСССТТ ТСТТАТСАСТ СССТААССАТ АСАТСААОСТ САССААССТС ТТСАССТТОА ТТССТТСТСС ССАААССТОС АТОССОТСТА ТСТССААТАТ АСТАТСОСАА АСААТАСТСА СССАТГССТА ТСТАСТТССА СТССТТССАС ААСТОСААСТ ААССААЙАСС ССТТТ6САСС ТАССССАСАТ АСАССТТАТА
Нург ргМ ргеЬеЕп
ОКСО К 0 Е С 3 Е Т й Е 3 V Ь I РЗЕ А О С Е Ь Т О НОЯ К Я Ь Е ССАСССТСТС СТАААСААСА АССААССАСА АССАОАСОСТ САОТОСТТАТ АСССТСССАС ССТСААСОАО АССТСАССОО АСООСОАСАТ АААТСОТТСС ССТСССАСАС САТТТСГТСТ тссттсстст тсстстссса ОТСАОЗААТА ТСОСАСССТО ССАСТТССТС тссастоссс ТСССССТОТА ТТТАССААСС
Нург ргМ ргобегп • ОРЗ Ь Е т н Ь Т К. У £ О Я V К К N Е Ь Ь А Ь АМУ ТУУИ Ь Т Ь АОООССАСТС АСТСОЗААСА САТТТОАССС ОСОТССАОСО СТОСОТСТОО АААААТСССС ТОТТООСССТ СОСТАТООТО АСАОТСОТТТ СОСТСАСЙСТ ТСССОСТСА0 ТСАОССТТОТ СТАААСТСОС СОСАОСТССС ОАСССАОАСС ТТТТТАОССС АСААСССООА ОСОАТАССАС ТОТСАССААА СССАОТОССА . Нург Б ρπΛβίϊΙ
Нург ргМ ргос«1ц
901 ОСАСТСТСТС ОТТАСТСССС ТСССАСТССТ ССТССТОСТС СТСГОТСТТС ССССТ6ТСТА СОСОТССАОС ТОТАСТСАТТ ТССААААСАС АОАТТТТСТС
- 140 023888
ССТСАСАСАС СААТСЗАСССС АСССТСАСОА ССАССАССАС САСАСАСААС СОССАСАСАТ ОСССАССТСС АСАТОАСТАА АССТТТТСТС ТСТААААСАС Нург Е ргоЪе1п τστα σττ κντ ь ν ь е ъсс с ν τ ι т а е с к р 5 Μ ϋ V И Ь О
АССОССАССС АСОООАССАС ТСОССТААСС СТСОТОСТТС ААСТОССТСС ТТОССТТАСГ АТТАСОЗСТС АСОССАААСС СТСТАТОСАТ С-ТСТСССТСС тссссатсс-о ТССССТОСТС АССССАТТСС оассасоаас ттсасссасс аасссаатса таатосссас тссестттсс САСАТАССТА САСАСОЗАСС
Нург Е ргоЬ.е1п
- А I Υ 9 Е Ν £>АфТ Е Е Υ С Ь Н А К 0 5 О Т К V А А К С р Τ М С Р ’
АТОСАА.ТСТА ТСА36А0ААТ СССССАСААА ССАСССААТА ТТСССТТСАС ОСАААОСТСТ СССАТАСААА ССТССССОСТ АССТОСССАА. СААТСССАСС ТАССТТАСАТ АОТССТСТТА СООССТСТТТ ССТСССТТАТ ААССОААОТС СОТТТССАСА ОССТАТСТГТ ССАССОСССА ТССАССООТТ (ЗТТАСССТОО
Нург В ргосехп • А Т Ь АВЕН ООО Т V С' К Я ϋ О ЗОЕ С И С КПСС Ь Г С КОЗ
ССССАСССТС ССОСАССААС АТСАССОАСС ТАСАСТОТСС АААСССОАСС АОАСТСАТАС ассстсссст ААТСАСТССС СССТОТТССС САААОСААСГГ ссостсооас ссссгссгтс тастссстсс атстсасасс тттоссстао тстсастатс тсссасссса ттастсасос сосасаассс стттссттса
Нург В рго£е!п
I V А С V К А АСЕ АККК АТС Н V Υ О А N К I V Υ ТУК V Е р Η
АТТСТСОСТТ ССОТСААССС АОССТСТОДС СЗССАААААеА АСОСТАСТСС ОСАССТСТАТ САССССААСА АСАТССТТТА ТАСАСТОААА СТССААССАС
ТААСАЙСОАА СССАСТТССб ТСССАСАСГС СООТТТТТСТ ТСССАГСАСС СОТССАСАТА СТОСООТТСТ ТСТАССАААТ АТОТСАСТГТ САССТТСЗСТС
Нург Е ρτοΓβίη • ТОО Υ V А АВЕТ К 5 С Е К Т АЗРТ V 3 3 Е К Т I Ь Τ Μ О Е Υ АСАСАееаЗА ТТАССТСОСО ОССААССАОА СТСАТТССОС ТСССААААСС СССАЯСТТСА СССТСТСАТС ССААААОАСС АТССТСАСТА ТОООССАОТА тстстсссст аатосассос соеттостст састаасссс асссттттсс соотсоаазт сссасаотао ссттттстсо тассаотсат ассссстсат
Нург В ргоЬе1п
- С ϋ V ЗЪЬС Е V А 5 О V О Ь А О Τ V I Ь В Ъ О К Τ V Е Η I» РТА ТСОССАСОТТ ТСТСТССТСТ ОССССОТООС ТАССОСАСТС ОАССТОСССС АСАСАОТСАТ ССТСОААСТС САТААААСАС ТТСАОСАТСТ СССТАССОСТ АССССТОСАА АОАСАСОАСА ССССССАССС АТСОССТСАС СТСОАСССОО ТСТОТСАОТА ОСАССТТСАС СТАТТТТСТС ААСГССТАЗА СООАТССССА
Нург В ргоЬехп
Η ΰ V Ή К О V . Г Ν ϋ Ь А Ь Р К К Я В «3 А ЕНИН КАЕ Е Ь V Е Р С А ТСССАССТСС АСАСОСАТТС СТТТААССАС СТТССССТСС САТССАААСА ТОАДЙСАССО АЙАААСТССА АТААТОСАСА СССАСТССТА СААТТСССТС АССОТССАСС ТСТСССТААС САААТТССТС СААСОССАСС СТАССТТТСТ АСТТССТОЗС ТСГТТСАССТ ТАГГАССТСТ СС-СТОАССАТ СТТААОССАС
Нург В ргоЬехп ‘РВА ν к м ονγΗ ь о о ото ν ь о к аьа сур ν а й ι ест ССССТСАТОС СЗТСААеАТа ОАССТСТАСА АТСТСССТОА ТСАОАСССОС СТТСТССТТА АА0СТСТСОС ТССССТАССА СТТССССАСА ТСОААССААС ООООАОТАСа ССАСТГСТАС СТОСАЙДТСТ ТАСАСССАСТ АСТСТОСССС СААСАССААТ ТТССАСАССО АССССАТСОТ СААССССТСТ АССТТССТТС
Нург В ρτοϊβΐη * К Υ Н Ь К 3 С Ηντ с в ν с ь е к ъ к м к с ъ τυτκ сок τ к р ОААСТАССАС СТСААСТСАС СССАТСТААС ТГСССАССТС ОСССТССАСА АОТТСААААТ ОААйССТСТТ асстасасаа тстстсасаа САССААЙТТС СТТСАТС&ГО САСТТСАСТС СССТАСАТТС ААСОСТССАС ССССАССТСТ ТСААСТТТТА СТТТССАСАА ТССАТСТЙТТ АСАСАСТСТТ СТСОТТСААС
Нург Б ргоЪехп
ТИКЕ АРТ О 5 С НОТУ УМЕ УТР 3 С Т К РСЕ I Р V Е А V А 1901 АСАТССААЙА ©ЗОСССССДС ДСАТАбСССС САСОАТАСТС ТОСТСАТОСА ССТСАССТТГ ТСТСОААСАА ААСССТССАО ААТАССССТС ССОССТСТАС
ТСТАССТГСТ СССООСОСТС ТСТАТССССО СТОСТАТОАС АССАСТАССТ ССАСТОСААА АОАССТТСТТ ТГСССАССТС ТТАТСС6САС СССССАСАТС Нург В ргоСе1п * Н С 5 РОУ Ν V А Μ Ь I Τ ΡΝΡ Т I В Н НОС 6 Р I Е М 0 О Р Р <3 - 141 023888 ргМ Нург
Т V X ПАЕ ΟΚϋ А А Т О V К V Е N 3 Т С V I Ь А Ί ОМС £ N С ϋ АЗТАСОЗТСА ТАСЗСЗСОЗА АЗЗТААЗЗАТ ЗССССТАССС ААСТЗАЗАЗТ 03ААААЮ0Т АССТЗСОТСА ТТСТ6СССАС СЗАСАТ003С ТСТТЗОТОТО ТСАТЗССАЗТ АТЗСЗСЗССТ ТССАТТССТА ССССЗАТЗЗС ТТСАСТСТСА ССТТТТАССА ТЗОАСЗСАЗТ ААЗАССЗЗТЗ ССТСТАСССС АЗААССАСАС ргМ Нур С • 0 5 X, 5 ¥ Б С V Т I 0 д 3 8 В Р V О V О СРС ЕМУ О <3 V У Ь Е У
АТСАТАСССТ ГГСГТАТСАЗ ТЙССТААССА ТАСАТСААЗЗ ТЗАЗЗААССТ СТТОАСЗТТб АТТОСГТСТС ССЗАААССТЗ САТЗСЗЗТЗТ АТСТССААТА ТАСТАТСЗЗА ААСААТАСТС АСЗСАТТЗЗТ АТСТАЗТТСС АСТССТТСЗОА СААСТЗСААС ТААСЗААОАС ОЗСТТТЗСАС СТАССССАСА ТАОАССТТАТ ргМ Нург • <3 К С С К о Е 3· 5 К Т К К 5 V Е I Р 3 Н а д с В Ь Т <5 кек к и ь ТОЗАСОЗТОТ ООТАААСААС ААОЗААЗСАЗ ААССАСАССС ТСАСТССТТА ТАСССТСССА СЗСТСААЙЗА ОАЗСТСАССС 0АС330САСА ТАААТССТТС АССТЗССАСА ССАТТТСТТС ТТССТТСЗТС ТТССТСТЗСЗ АСТСАССААТ АТЗСЗАЗССТ ССОАСЗТТССТ СТССАСТССС СТСССССТОТ АТТТАССААС ргМ Нург
Б С О 5 Ь К Т Η 1 Т К V Е С И V Η К N К ЬЬАЬ АМУ ТУУ И Ь Т Ь ЗАЗЗЗСЗАСТ САСТСССААС АСАТТТЗАСС ССССТССАСС ССТСЗСТСТЗ ОАААААГСЗЗ СТЗТТЗЗССС ТСЙСТАТЗЗТ ОАСАЗТССТТ ТСССТСАСОС СТСССЗСТЗА ЗТЗАСССТТС ТЗТАААСТЗО ЗСЗСАССТСС СЗАСССАОАС СТТПТАССС САСААССОЗО АЗСЗАТаССА СТСТСАОСАА АСССАЗТССО
Е Нург ргМ Нург • Е 3 V УТК V А V ь V V Ь Ь С Ь А Р V У АЗК СТН БЕЛК ОРУI ТЙЗАЗТСТСТ ОЗТТАСТССС ЗТЗЗСАСТЗС ТЗСТСЗТОСТ ССТСТСТСТТ СССССТСТСТ АСЗСЗТССАЗ СТЗТАСТСАТ ТТССААААСА ЗАЗАТТТТСТ
АССТСАОАСА ССААТСАЗСС САСССТСАОЗ АССАССАССА ССАСАСАОАА СССССАСАСА ТЗСЗСАЗСТС САСАТСАСТА ААССТТТТСТ СТСТААААСА Е Нург . Т С Т ОСТТ КУТ Ь V Ь Е Ь С 3 СУТ ΙΤΑ ЕСКР 3 М О V М Ь I САССЙССАСС САССССАСОА стсссстаас сстостзстт саастсостс сттсссттас таттасссст оассссааас сстстатсса тстстссстс
СТССССОТСС СТССССТССТ САОСССАТТС ССАССАССАА СТГОАСССАС СААСССААТС АТААТСОССА СТСССОТТТС СОАСАТАССТ АСАСАССХЗАС Е Нург
С А I Υ О В N РАС Т к Е γ СЬН АКБ 5 О Т X V А А Я С Р Т М <3 Р ί САТССААТСТ АТСАСОАЗАА ТСССОСАСАА АССАЗССААТ АТТЗССТТСА СЗСАААЗСТЗ ТССЗАТАСАА АССТССССЙС ТАЗЗТЗСССА АСААТЗОЗАС
СГАСС7ТАСА ТАСТССТСТТ АССССЗТЗТТ ТОСТСССТТА ТААССЗААЗТ ОССТТТССАС АЙССТАТСТТ ТССАЗСЗССЗ АТССАССЗЗТ ТОТТАСССТС
Е Нург
- А Т Ь А Е Е Н 0 3 3 ТУС К Я О 0 5 В К С И С КНС 3 О К С К 6 5 ·
I СССССАСССТ СССССАССАА САТСАЗСОАЗ ЗТАСАСТСТС САААССОЗАС САЗАЗТЗАТА САвОСТООСС ТААТСАСТСС ЗЗССТЗТТСЗ ЗСАААЗЗААС
ОССССТСССА ССЗССТОТТ СТАЗТСССТС САТСТСАСАС СТТТССССТЗ СТСТСАСТАТ СТСССАСССС АТТАСТСАСС СССЗАСААЗС ССТТТССТТС
Е Нург • I V А СУКА А С В АКК К А Т 3 Н V У О А N КГУУ ТУК V 8 Р
I ТАТТОТСССТ ТСССТСААОС СА0ССТЗТСА ЗЗССАААААЗ ААОССТАСТО СССАССТСТА ТЗАСЗССААС ААСАТССТТТ АТАСАЗТЗАА АСТССААССА
АТААСАСССА АСССАЗТТСС СТСССАСАСТ ССЗСТГГТТС ТТСССАТСАС СССТССАОАТ АСТСС&ЗТТС ТТСТАССААА ТАТОТСАСТТ ТСАССТТЗСТ Е Нург
Η Т С О У V А А N Е ТН5С К К Т АЗР Т V 5 5 В К Т I О Т МСЕУ ί САСАСАСССС АТТАССТООС ОСССААСЗАЗ АСТСАТТСОЗ ЗТСССААААС ССССАОСТТС АССЗТСТСАТ СССААААСАС САТССТСАСТ АТСССЗСАСТ зтотстсссс ТААТССАССС ССССТТССТС ТСАСТААССС САСССТТГТС СССЗТСОААС ТСССАСАСТА СОСТТТТСТС СТАЗЗАСТЗА ТАСССССТСА Е Нург • СОУ 5 Ь Ь С К V А 5 С V О Ь А 0 Т V I Ь Е ί, ОКТ V Е Н Ь Р Т А АТССССАССТ ТТСТСТССТС ТССССССТСС СТАССССАСТ ССАССТСССС САйАСАСТСА ТССТССААСТ ООаТаАААСА СТТЗАЗСАТС ТСССТАСССС ТАССЗСТССА ААСАЙАССАО АССССССАСС ЗАТСЗССТСА ССТЗСАСССС ЗТСТСТСАЗТ АССАССТТСА ССТАТТТТСТ СААСТССТАС АСССАТСССС
Е нург •НОУ НКОИ ΡΝΟ ЬАЬ РМКН Б С А К К И ΝΝΑΕ КЬУ ЕРС ТТООСАССТС САСАСССАТТ (ЗОТТТААОЗА ССТТССССТ6 ССАТССАААС АТСААОСАСС ОАСАААСТСС ААТААТССА6 АСССАСГССТ АСААГТСССТ
ААСССТССАС СТОТСССТАА ССАААТТССТ ССААСеССАС ССТАССТТГе ТАСТТССТСС стстттсасс ТТАТТАССТС ТСССТОАЗСА ТСТТААОССА
Б Нург
АРМА УКМ ονγ НЬСО ОТС УЬЬ КАЬА <3νΡ УАН I Е С Т · «ЭССССТСАТС СССРЗДАСАТ ССАССТСТАС ААТСтазеТС АТСАСАСССС ССТТСТССТТ АААССТСТСС СТСЙОЗТАСС АСТТССССАС АТССААОЗАА
С0СССА5ТАС СССАСТТСТА ССТССАСАТС ТТАСАСССАС ТАСТСТСССС ССААСАССАА ТТТССАОАСС «ЗАСОЗСАТОС ТСААСООСТС ТА6СТТССТТ
В Нург • КУН ЬКЗ ОНУТ С В V «ЗОЕ кькм коь ТУТ МСОК ТКР· СОААСТАССА ССТСААСТСА ССССАТСТАА СТТСССАЙСТ СССССТСОАС ААЙТТСАААА ТСАААСЗТСТ ТАССТАСАСА АТСТСТОАСА АСАССААОТТ ССТТСАТССТ ССАСТТСАСТ ССССТАСАТГ СААСОСТССА ССОССАССТС ТТСААСТТТТ АСТТТССАСА АТССАТСТСТ ТАСАСАСТОТ ТСТССТТСАА
Е Нург
ТИК КАРТ ОЗС НОТ УУМЕ УТР 5СТ КРСК ТРУ К А V САСАТССААС АССССССССА САСАТАСССС ССАСОАТАСТ СТбОТСАТСС АСОТЙАССТТ ТТСТОЙААСА АААСССТССА СААТАССССТ ССООССТСТА
СТОТАССГТС ТССССССОСТ СТСТАТСССС ЗСТСС1АТСА САССАСТАСС ТССАСТСОАА ААСАССТТСТ ТГТССОАССТ СТТАТОООСА СССССОАСАТ
Б Нург
А Я <3 5 РОУ Ν V А МЬГТ ΡΝΡ ΤΙΕ NN33 3ΡΙ ЕМС? ЬРРЗ·
ОСТСАССЗАТ СТСССЗАТСТ СААТеТТЗСТ АТССТСАТТА САССТААССС ТАССАТССАЗ ААТААСССТЗ 0Τ33ΤΤΊΤΑΤ Т0АЗАТЗСА6 СТТСОЗССАЗ
СОАЗТСССТА ОАЗОЗСТАСА ЗТТАСААСЗА ТАСОАСТААТ ЗТвЗАТТЗО© АТЗЗТАЗСТС ТТАТОЗССАС САССААААТА АСТСТАСОТС ЗААСЗСЗЗТС
Е Нург « ονι ί у ν з в ь з уди кдк зззх еку рок тккз хвкОСОАТААСАТ САТСТАССТС ЗЗСЗААСТСТ СТТАССАЗТЗ ЗТТТСДСААА бЗЙАЗТГСАА ТТСОЗСЗЗЗТ СТТССАДААА АСЗААОААЗЗ ЗААТСОААСЗ СЗСТАТТЗТА ЗТАЗАТССАС ССЗСТТЗАЗА ЗААТЗСТСАС САААЗТСТТТ СССТСААЗТТ ААСССЗСССА ЗААЗЗТТГТТ ТЗСТТСТТСС СТТАЗСГТЗС
Е Нург • Ъ Т V Ι3ΕΗ АНО Р О 5 АСЗР Ь53 Ι3Κ АЬНТ УЬЗ ЗАР АТТЗАСЗЗТТ АТСЗССЗАЗС АСССАТЗОЗА ТТТТЗЗТТСС ЗСАЗЗЗЗЗАТ ТССТЗТСТТС ТАТТСЗТААС ЗСАСТЗСАТА ССОТССГООЗ ©ЗСС6САТТС ТААСТСССАА ТАСССССТСС ТСССТАСССТ ААААССАЙЭЗ ССТСССССТА АЗЗАСАЗААЗ АТААССАТТС СбТЗАОЗГАТ ЗЗСАС6АССС СССЗСЗТААС ' Е Нург
Μ3ΙΡ ЗЗУ ЗРЬ РХЬЬ ЬЗУ А Ъ А НЬЗЬ N М К N Р Т ИЗМ$ ААТТСТАТТТ ТССЗССЗСЗТ ЗССЗТТССТО ССТАААСТОС ТССТСОСАСТ А0СССТ63СС ТСеТТЗСЗАС ТЗААТАТССС ЗАДГСССАСЗ АТЗТССАТ6Т ТТААСАТААА АЗСССССЗСА ССССААСЗАС ССАТТТСАСЗ АСЗАСССТСА ТСЗЗЗАСССС АССААСССТС АСТТАТАСЗС СГГАСЗСТЗС ТАСАЗСТАСА
Е Нург
ИНУ N51 рГоЬегп
РЬЬ АЗУ ЬУЬА МТБ ЗУС АОТЗ С А I 013 КО САТТССТСТТ ЗЗССЗССЗТС СТТСТАСТСЗ ССАТЗАСАСТ ЗСЗСЗТТОЗС ЗССЗАСАСТЗ ЗЗТЗТЗССАТ АЗАСАТСАЙС СОЙСАА 3ΤΑΑΟΟΑ6ΑΑ ССЗЗССЗСАС ЗААСАТСАСС ССТАСТЗТСА СССЗСААССЗ СЗЗСТЗТОАС ССАСАСЗОТА ТСТЗТАСТСС ЗСССТТ
- 142 023888
Ρίν-ννΝ/ΤΒΕν Нург с νΐίΝΫ сигналам (р40) (5Е0 Ю N03:55-57)
АСТАСТГСеС стстетедбс ТОАСАДАСП АСТА6ТСТТТ СТОАССАТТА АСААСААТТА АСАСАСТССО АОСГОТГТСТ ТАОСАССААС АТСТССАТСТ тсАтсладса сдсасвдтсс астотттоаа тсатсасааа састссгаат татлгААТ тототсассс тсоасаааоа атсотосттс таоасстаса
ЮГУ С • X К Р СОР скак а ν γ ь ь к й о μ р й ν ь 3 ь I О Ь К Я 5 5« 01 СТААСАААСС АООАООСССС СОСААОАОСС ОЭССТОТСТА ΤΤΪΟΟΤΑΑΑΑ СССОСААТСС ССОЗССКЗТТ СТССТТОАП ОЗАСТТААСС ©ЗАОСТССАА оаттсггтоо тсстсссосо ссоттстсэз сссоасаоат ааассатгтт ссоссттасс ооссссасаа САССААСТАА ССТ5ААТТС0 ССГССАООТТ «Νν а!дпа1
ЮТ <1е1есей с ргМ Зург а К К К С С К Т С I А V Μ I С М Ь А С V САА Т V К К Е К О <3 5 Т
201 ссаааасааа соссосооаа асасаоссат аостстсахо АГАСССАТСС тсасггстот сооассайст ассотоссаа адсласссса ССОААОСАСС
СОТТТТСТГТ ОСССССССТТ ТСТОТСССТА ТССАСАСТАС ТАТССОТАСС АССвААСАСА СССТССТССА ТОССАСОСГГ ттсттвсост оссттсотоо ргм Нург
V 1 Й А й С К О А А Г ο ν К V В N О Т С V I Ь А ТОМ С 3 Н С С О 5 3 01 ОТСАТААОСС СТСАОООТАА ЙОАТСОЗССТ АСССАЙОТСА САСТАСАОАА ТСССАСТТОС СТААТАСТСС СвАСТСАТАТ ОСОАТССТОС ТСТСАССАТА
САСТАТТССС ОАСТСССАТТ ССТАСОССОА ТОСОТССАСТ СТСЬТСТСТТ АССОТОААСО САТТАТОАОС ОСТСАСТАТА СССГАООАСС АСАСТССТАТ ргМ Нург
401 СССГСА5ТТА ТСААТЗОЗТА АСААТАСАСС АОССССААОА АСОТСТССАС СТТСАСТОТТ ТСТОТЛЙААА ТОТОСАТООС ОТТТАТСГОС АОТАССбССО СООИЗТСААТ АСТТАСССАТ ТОТТАТСТОО ТСССОСТТСТ ТОСАСАССТС СААСТОАПАА АЗАСАГСТТТ АСАССТАССО СААДТАОАСС ТСАТСССОСС ргМ Нург •СОК ЭЕ 0 8 К Т Е Е 3 V Ь I Р 3 НАС С Е Ь Т О Й О И К И БЕС $01 СТОТООАААА САСОАООССТ САСОААСТСО ААСАТСГСТО СТСАТТССАА ОТСАСССВСА АООАОДОТТС АССОСТАСйО СССАСААОТО ССТТОДДООС
ОАСАССТТТТ СГССТСССОА вТЗСТТОАСЗС ТТСТАОАСАС САСТААЯОТТ САОТОССССТ ТССТСТСААС КЗСССАТСТС СССТСТТСАС СОААСТТССС ргМ Нург
РЗЬЕ ТНЬ ТКУ В С И V И К N НЬЬ АЬАМ У Т V У Н Ь Т Ь Е 5 601 ОАСТСАТТОА ООАСССДССТ САСТАОССТ0 САСССТТООО ТТТОСААСАА ТОЗСТТССТС ССССТСССТА ТОСТСАССбТ СОТОТООСТС АСАСГОСАСА
СТОАЯТААСТ ССТОЗОТОЗА СТОДТСССАС СгСССААССС АААССПС'11 ДОССААСОАО ССССАСССАТ АССАСТООСА ССАСАССОАС ТСТОАССТСТ в нург ргм Нург
V ν Т Е V А V Ь V V Ь О С Ь А Р V Υ А 3 ЕСТ стзтсотоас тссоаттсст СТСТТСОТТС ТССТССТСТС ТГТССССССА стстасссст ссасстстас тсатттссаа аасайазагт ттстсасссс САСАЗСАСТа АССССААССА САСААССААС АОЗАССАСАС АААССССССТ САСАТССССА ССТССАСАТС АСТАААССТТ ТТСТСТСТАА ААСАСТСССС
Е Нург
- т о с т т к ν Т Ь V Ь В Ь СОСУ Т I Т А Е С К Р 5 м о ν н ЬОА САСССАССОС АССАСТСССС ТААСССТССТ ССТТСААСТС СОТСОТТССС ТТАСТАТТАС СССТСАССОС АААСССТСТА ТОСАТСТСТС ССТОСАТССА
СТСССТСССС ТССТСАСССС АТТСССАССА ССААСТТСАС ССАССААССС ААТСАТААТС СССАСТСССС ТТТСССАСАТ АССТАСАСАС ССАССТАССТ
Е Нург
I Υ а Е N Р А <ЗТК В Υ С Ь Н А К Ь 3 ϋ Т К V А АЕС Р Т М С Р А Т
АТСТАТСАСС АСААТСССЕС АСАААССАСС СААТАТТССС ТТСАСССААА ССГСТСССАТ АСАААССТСС ССОСТАССТС СССААСААТС ООАССЗСССА
ТАСДТАСТСС ТСТТАССССС ТСТТТССТСС СТТАТЛАССС ААСТСССТТТ ССАСАСЙСТА ТСТТТССАСС ССССАТССАС СССТТЙТТАС ССКЗСССССТ
Е Нург
Ь А Е ЕНО ОСТУ СКК О $ 5 ОКОН О N Н С С Ь Р С К С 3 I V ·
СССТСССССА ССААСАТСАС ССАОСТАСАС ТСТОСАААСО ОСАССАСАСТ САТАСАСССТ ООООТААТСА СТОСООССТО ТТССССАААС СААСТАТТСТ ©ЗОАСССССТ ССТТЙТАСТС ССТССАТСТС АСАССТТТСС ССТОСТСТСА СТАТСТСССА ССССАГГАОТ ОАССССССАС ААССССТТТС СТТСАТААСА
Е Нург 'АСУ ХААС ВАХ ККА ТОНУ УРА N К I УУТУ КУЕ РНТ состтесетс ааоосассст стсассссаа ааасаассст астосссасо тстатсасос СААСААСАТС СТТТАТАСАС ТСАААСТССА АССАСАСАСА ССОААСОСАСЗ ТТСОЗТССОА САСТССООТТ ТГТСТТСССА ТСАСССОтес АСАТАСГЗСС сттсттстас сааататстс астттсасст тсстстстат
В Нург
СОУУ А,ΑΝ ΕΤΗ ЗОКК ТАЗ РТУ ЗЗЕК Т1Ь ТИС ЕУОО ССССАТТАСС ТСССССССАА ССАОАСТСАТ ТССОСТСОСА АААСОСССАО СТТСАСССТС ТСАТСССААА АСАССАТССТ САСТАТСССС САСТАТСССС ССССТААТОС АССОССССТТ ССТСТСАСТА АССССАСССТ тггесссатс СААСТОССАС АОТАОССТТТ ТСТССТАССА СТОАТАСССС СТСАТАСССС
Е Нург • УЗЬ 1СЙ УАЗе V О Ь А О Т -V 1 Ь Е ЬОК ТУЕ НЬРТ АНО'
АССТТТСТСТ ОСТСТОСССС СТСССТАйСО ОАСТССАССТ ООСССАОАСА ОТСАТССТСС ААСТОСАТАА ААСАСТТСАС САТСТСССТА ССССТТОССА
ТССАААОАОА ССАСАССССС САСССАТООС СТСАССГОСА ССбООТСТОТ САСТАСОАСС ТТОАССТАТТ ТТСТСААСТС СТАСАССОАТ ОСССААССОТ
Б Нург
-УНЕ о Η Р N ОБА Ь Р Н К Η Ξ С АНН Η N N АЕЕЬ V Е Р САР
ССТССАСАСО САТТССТТТА АССАССТГСС ССТСССАТСС АААСАТОААб ОАССОАОААА СТОСАА.ТААТ ССАСАСССАС ТССТАСААТТ СССТОССССТ
ССАССТСТСС СТААССАААТ ТССТССААСС ССАСССТАСС ТТТСТАСТТС СТСССТСТТТ САССТТАТТА ССТСТСССТС АССАТСТТАА ОССАСОСССА
Е Нург
НАУК МОУ Υ Ν I* СО0Т СУЬ ЬХА ЬАСУ РУА Η I В О Т К Ϋ САТССССТОА АСАТСОАССТ СТАСААТСТС ССТСАТСАСА ССООССТТСТ ССТТАААОСТ СТСССТСССО ТАССАЙТТСС ССАСАТССАА СОААССААСТ ОТАСОССАСТ ТСТАССТССА СДТетГАЗАС ССАСТАСТСТ ССССССААСА ОСААТТТССА ОАСССАСССС АТСОТСААСС ООТСТАССТТ ССТТССТТСА
В Нург • НЬК 36Н УТ СЕ V С Ь ЕКЬ КМКС Ь Т Υ ТИС О К Т К РТНАССАССТОАА СТСАСОССАТ СТААСТТЗСС АОСТСССССТ ССАСААСТО ААААТСАААС ОТСТТАССТА САСААТСТСТ ОАСААОАССА АСТТСАСАТС ТОСТССАСТТ САСТССССТА САТТСААССС ТССАСССССА ССТСТТСААС ТТГТАСТГЕС САСААТССАТ СТСТТАСАСА СТОТТСТСОТ ТСААСТСТАС • В Нург
- К К А РТОЗ С Й О Т V V Μ Е V Т РЗС ТКР С Е I Р УКА УАН СААСАОСОСС СССАСАСАТА ОСОСССАССА ТАСТСТССТС АТССАССТОА ССТТТТСТОС ААСААААССС ТССАСААТАС СССТССССОС тстаостсас СТТСТСССОС ОООТСТСТАТ ССССССТССТ АТСАСАССАС ТАССТССАСТ СОААААСАСС ТТСТТТТСОС АССТСТТАТС СССАСССССС АСАТССАСТС
В Нург
- 143
О 5 Ε> ϋ V И V А М Ь ΙΤΡΝ ΡΤΙ Ё Η Ν СССР ГЕМ О Ь Ρ Р С О Ν 1601 ССАТСТСССО АТСТСААТСТ ТОСТАТССТО АТТАСАССТА АСССТАССАТ СОАЙААТААС ССТССТССТТ ТТАТТСАОАТ ОСАССТТССС ССА6СССАТА
ССТАСАЗОСС ТАСАОТТАСА АССАТАСОАС ТААТСТССАТ ТОООАТССТА ССТСТГАТТС ССАССАССАА ААТААСТСТА ССТССААССС ОСТССССТАТ Е Нург
- I I Υ V О Е Ь 3 Υ О И Р О КОЗ 3 I О К УРО КТК К О I Е К Ь Т 1901 АСАТСАТСТА СОТСООССАА СТСТСТТАСС АЗТ00ТТТСА САААСССАСТ ТСАА7ТС00С СЙСТСТТСОА АААААССААе ААСОСААТСС ААССАТТОАС
ТСТАСТАСАТ ССАСССОСТТ 6ΑΟΑ6ΑΑΓΟΟ ТСАССААДСТ СТТТСССТСА АОТТААСССО СССАСаАССТ ТТТТТССТТС ТТСССТТАОС ТТССТААСТС В Нург ·
V I С Е И А И ϋ Р С ЗАО С Г Ь Ξ 310 К А Ь Η Т V Ь С С А Р N 3 2001 СОТТАТСОСС САССАСОСАТ ΟΟΟΑΤΤΤΤΟΟ ТТССССАССС ССАТТССТСТ СТТСТАТТСС ТААСССАСТС САТАСССТСС ТССССССССС АТТСААТТСТ
ССААТАСССС СТССТССеТА СССТААААСС ААЗОСЗТССС ССТААОСАСА ЗААЗАТААСС АТТССбТЗАС ЗТАТСЗСАСЙ АССССССЗСС ТААЗТТААЗА Е Нург
I Р 3 С V С Р Ь Р К Ь I, Ь О V А 1> АНЬ С Ь Ν Μ ЕКР Т М 3 М 5 Р Ь 2101 АТТТТСОООО ОССТООЗСТГ ССтеССГААА СТССТССПЗЗ ОАОТАЗСССТ ЗСССТЗЗТТО ССАСТОААТА ТСССОААТСС САССАТЗТСС АТЗТСАТТСС
ТААААССССС СССАССССАА СОАСССАТГТ САЗСАССАСС СТСАТСОООА ССООАССААС ССТСАСТТАТ АСОССТТАОО СТОСТАСАЯС ТАСАЗТААОС Е Нург
ИМУ N31 ρΐΌΕβίβ « Ь А О V Ь V Ь А М т Ь С V ОАО т<зса ιοί з к о 2201 тсттеессео сотссттста стсоссатоа састссссот тссссссоас астсостсто ссатаоасат сассссссаа
АСААССООСС ОСАСОААСАТ ОАСССОТАСТ ОТСАСССОСА АССОСОЗСТО ТОАСССАСАС ССТАТСТСТА ОТСОЗССОТТ
- 144 023888
Приложение 3
Конструкции, экспрессирующие С белок вируса бешенства.
\νΝ (ДСртМЕ) - последовательность (частичная) ПИВ бешенства. (8ЕЦ ГО N0: 58-60) и-сегпйпив ог с
5- итк
1 АСТАОТТСВС ТСАТСААОСО СТСТСТСАбС оасасастто тзасааастг аотаотсттт отоаооатта асаасаатта АСТСТТТСАА тсатсасааа састсстаат тоттотгаат И-сегт1сн10 οί С АСАСдатсаз Авсгетттст ТОТОТСАОЭС ТООАСАААОА ТАОСАСОАА0 АТОЗТОСТТС М 3 АТСТСОАТОТ ТАВАОСГАСА
• К К Р сср о к & к а ν υ ъ ь к в σ я р η ν ь з ь ι О Ь К О к к к ·
101 СТААСАААСС ОАТТСТТГОО Н-Ьегтп1пи> АООАСОЭССС тсстсссооо □С С оосааоаосс окюстотсга тттсстаааа сосооаатос ссоттстсво сссоасасат аалсйатгрг сооссттаоо ЛаЫея-С в1срта! СССООЗТОТТ ОТССТТОАТТ 030СССАСАА САООААСТАА ОСАСТТААОС ССТОААТТСО АААЛОААЭСО ТТТТСТТСОС
расЪ1а! С з1дпа1 наЫеа-с ргоеекп
• О 6 К Т С Г 1 % V I У РОД Ь Ь Ρ V ? ί Ь νρε» ь с р е крр I Υ т
201 АОООСССААО АСТО0ТАТА0 ТСССССОТТС ТОАССАТАТС СТОТОАТООТ ТССТСАЙОСТ СТТТТОТТТО ТАСССТТОСТ ОЗТАТГТССС СТТТОСТТГО аТАААПТеС ОАСАСТАОСА АООАОТССвА оаааасдаас атсссаасса сСатаадвоо САААОЗАААС САТТТАААСС КаЫев-0 рх*осе1п - татстатасс атасататот
I Р О К Ь С Ρ Н 3 Р I □ 1 Н Н Ь 8 С Р N N С V V ВОВ с с т Н Ь 8 С
ιοι атссстсата ТАОвОАСТАТ АОСТСОООСС ТСОАОСССОО ТТОСАвТССС АТТОДТАТТС АССАТТТОАО СТССССАААС ААССТСАООО ТААСТАТААО ТООТАААСТС ОАСОООТТТС ВаЫев-0 рго7е!п
АА\д_|т_лэт.т_и ттилоолтен даоаттклст аатстттстс ТТООАОСАОС АаСгССТАСТ тсссасотса ттаоааавас
• Р 8 Υ К 3 ь к ν в υ I 3 А I К Я НОРТ СТО V V т 3 А 3 Т Υ Т И ·
401 ватгттсста сАтэвАЗТгд СТААААТОАТ СТАССТСААС АААОТ9ФЭСТ АТЛТТТСАвС САТТЛАОАТО ААСМСТТТА ТГГСАСССОА ТАТАААОТСе ОТААТТСТАС ТТвСОЗАААТ КаЫеа-В ргоБе1п СТТВТАСАОС АОТСОТОАСС НААСАТОТСС ТСАОСАСТЭЗ сааоссоаоа сттоовстст САТАТАСААА СТАТАТВТТТ
- ρ ν й Υ V Т 1 г трк вкн р к р т рол СНА А Υ Η V К к А вор
£01 ТТТСОТСОСА ТАСОТСАССА АААОСАСССТ АТССАОТОвТ ССАССГгСДА ОдОААААСАС ТТСОЭСССАА СОССТОАСОС ттатоовесс ССТТАСААСТ СОААСАТОеС ООПЭОААОТТ СТСТТТТОТО ААООСОООТТ ООДОАСТОСО аасасссозс СОААТОТТВА ССТТСГаССО . НаЫез-0 ргосе!п АВСАбАТССТ ТСсТСТАОСА
В Υ Ж I ϊ 8 1 Я пру ρ о υ я и ь в т ν к Т Т 1 В 8 1 V I I 8 Р 8 V А
бод СОАТАТОААО ААТСТСТОСА ССТАТАСТТС ТТАОАОАСОТ саасссстат сстоатгасс Аттоесгасе сасаотсаао астассааоо аоаотстоот ОТТООЗСАТА «ЗАСТААТОа ТАЛССОАСОС СТСТСАСТТС ТСАТООТТСС ТСТСАЗАССА НлЫва-О ргосе!п САТТАТАТСЛ СТААТАТАОТ ССААОСЗТОЗ всттсасАСС
. сел РУО К 5 Ь Н 5 Ρ V Ρ Р С О N С ί 1 О V А V Э 3 ТУСЯ Т Я Н ·
701 ССОАТСТТОА ОВСТАОААСТ ТССТТАТВАТ АВОААТАСТА АОАТСССТОС АСАОТАООвТ ТТТТССТВОС ΒΒΒΑΑΤΤΒΤΑ ТСТАОООАСО ТОТСАТСССА ААААВСАССВ СССТТААСАТ НдЫев-О ргоЬекп всовтоттес аотатсааст СОССАСААСО ТСАТАОТТСА АССТАСТОСТ ТС-ЗАТОАСОА ССАСТААССА вотаАтгост
• о γ т ί н и τ > ВНР Н Ь О М 8 С 0 ΙΡΤ N 3 В ОКНА 8 К О 8 В Т
ао1 сзаСтасаст ататосатос остоатотоа татасстасо СТВАВААССС ЮТАСТСООТ АТЭАОТПЗСО АСАТТТГТАС оастсттскю аостоаосса тастсааоэс тотааааатв ВаЫее-С ргос.е1п ОААСТСАСЗВ ВВСААВСООВ СТТВАВТОСС сссттсассс САТСТААвОЗ ОТАОАТТССС ВТСТОАААСА САСАСТТТСТ
С С Р 1 г π в а С Ь Υ К 8 Ь К 0 А С К Ь К Ъ С О V Ь О 1 к ь м ПОТИ
901 тасоаоттто АСОСССАААС ТТОАТСАОСО ААСТАСТСОС оаоаттатат ааатстстта ааоососсто тааостоааа стстотоосо тастоээост ССССААСАТА ΤΤΤΑΟΑΟΑΑΤ ТТССВСООАС АТТСОАСТТТ ОАОАСАССВС АТСАСССССА НаМвр-О ргосе!п ОСОССТОАТО ОЗССОАСтаС ОАСОДСАСД-Т СтОСССтОта
• ν А М 0 Т 8 Я В Т К И С Р Р С о Ь V Я С НОР В 5 о Ж I В Н Ь V V
1001 ОЗОТОССГАТ ОСАВАСААОС ААТОАААСАК АСТССТОТСС СССГООТСАв СТОЗТТААТС ТОСАОЗАСГТ ТАСВТСТОАС 0АААТО5АСС АССТГСТвСГ СССАССОАТА СОТСТОТТОЗ ТТАСТГТвТТ ТСАССАСАОО СООАССАОТС (ЗАССААТТДв АСОТОСТОАА АТССАОАСТС СТТТАОСТОО ТООААСАССА
КаЫев-й ρΓΟϊ,βΙη
145
- Е Е Ь V К К 1 * БЕС Ь ϋ А Ь Е 5 I Μ Т Т К $ V 5 Р К К Ь 5 Н Ь Е К
1101 СЙАССААСТО ССТССТГСАС 6ТОААОАААС ОСбААСДОТО ССТССАСССА СТТСАСАСТА ТТАТСАССАС САААТСССТТ ТССТТСАСАА САСТСАСССА ССТ6ССААА0 САСТТСТТТС СССТТСТСАС ОСАССТСССТ СААСТСТСАТ ААТАСТОСТС СТТТАС5САА АЕОААОТСТТ СТОАСТСССТ ССАСССТТТС НаЫез-0 ргоке1п
ь ν р < 3 ГОК АУТ I Г N К Т Ь К Е А 0 А Η У К 5 V В ΐ Μ N Е I I Р
1201 СТООТОССАС САССАСССТС ОСТТСОСОАА СССТТАТАСТ АТТТТСААСА АСАСТСТТАТ С0АС6СССАТ ССААССССТТ ССОААГДТСА ТААААОТТО? тстсасаата сстссосста КаЫез-0 рГйЬе1п ССССАТТАТА АОТСАСТТВД ОАСТТ00ААТ САСАТААТТС СОССТААТАТ ТСАСТСААТС СТСААССГТА СТСТАТТААС
• 5 К 5 СЕЙ 7 0 0 1 Ϊ СНР Η V N С V Г 1 ' N61 I Ь С Р В С I1 < V Г, I
1301 ССТССАААСС АГОТСТОАСА ОСАОСТТТСС ТАСАОАСТСТ стссстосса САОССАСССТ ОАТОССАССС ССАТОТСААТ СОООТСТТСТ стдсоотоес 00ТАСА6ТТА ОСССАСААСА ЕзЫе$-*С ргоЬе!г ТГАДССбААТ САТССТСССА ССТСАСССОД ААТТ6ССТТА бТАССАСССТ ССАСТССССТ ДССТССГСАТ Т6САС6АСТА
-РЕМ 0 5 5 1 1 Ь 0 0 НМЕ Ь Ь V 5 5 V I Р1М ВРЕД 0 Р 5 Т V г
1401 ТССССАСАТС АССОСТСТАС СААТСТТССС 6ТТАСААС6С ТТСТССАССА ААЕАСОТСОТ АСАСАТССАА СТССТССТСТ СТТСАСТСАТ ТСТСТАССТТ ОАООАССАСА САА0ТСАСТА КаЫе&-С рго^еАп АССССТСАТЗ САСССАСТСС СССАССССАЗ ТООО6АСТАС СТ006ТСАСС СОСТСОООТС САСТСТСТТС СТ0АСАСАА6
К Ν О 1 0 Е А Е 0 Г V Е V К Ь Р ϋ V НЕК I 5 С V С Ь С Ъ Р N ИСКУ
АААААТСОСС АТСАООССОА АСАСТТТСТО ОААОТТСАСС ТСССССАТОТ АСАСОАААОО АТАТСТООД6 ТАСАССТОСС ССТТССТААТ ТС0С0ТДА6Т ТТТТТАСССС ТАСТСС06СТ ТСТОАДАСАС СТТСААОТС6 АСС6ССТАСД ТСТОСТТТСС ТАТАОАССТС АТСТЗОАССС ООААООАТТА ДССССДТТСА
КаЫеа-С ргоЬеАП • V Ъ Ь 5 А С А Ь Т А Ь М Ь I I Г ЬМТС ИНК V N В £ Е Р Т О К N
АССТССТССТ САСТСССССТ СССТТОАССЙ СТТТСАТССТ САТСАТТТТТ СТ6АТСАССТ ССТСССС6ДС ССТСААТСеС ТСССАССССА САСАССАСАА ТССАССАбСА СТСАСОСССА СОСААСТССС ОАААСТАССА СТАСТААААА ОАСТАСТССА ССАСССССТС ССАСТТАССС АСССТОЗССТ СТСТССТОТТ
НаЬхея-0 ргот.е1ь ►СН<3 тоне V в V ТРО 5 С К 1 1 5 5 И Е 5 Υ К £ 5 СЕТ С Ь N
ТСТСДСАССС АСДССССССС ДДСТААСТСТ 6АСТСС0САД ТСТСССААСД 7ТАТТАСТДС ТГСОСАЗА6Т ГАСДАСГСТС САССАСДОАС ТСССТГСАЛТ АСАЗТСТССС ТСТССОСССС ТТСДТТСАСА СТЙАОЙСОТТ АСАССОТТСТ ААТААТСАТС ААСССТСТСА АТОТТСАСАС СТССТСТСТС ДСССААСТТА ргеМ51 βΐςηβΐ
ГМ.СУ 2А • N51 «Гдоа!
Г В Ь 1 К Ь А 0 Ь V Е 5 N Р 6 Р А НОН 5 I А Ь ТР1 А V С <3 V с ]
ТТТСАТСТСС ТСАААСТТОС А6СС6АТ6ТА 6ААТСАДАТС СТСОАСССОС СССйОАСАСб ТССАТДССГС ТСАССТТТСТ СОСАОТТССА СОЙСТГСТСС АААСТАСАСС А6ТТТ0ААСС ТССОСТАСАТ СТТАСТТТАЗ САССТСбССС СССССТСТСС АбОТАТССАС АБТОСАААСА ОССТСААССТ ССТСААОАСО
N51 згдпа!
тсттсстстс сотоаасзто сасостоаса стосстстсс сатасасатс ассссссавд асстсасатс тссаастсса стсттсатас АСААТСАТСТ АСАА6САЗАС ОСАСТТССАС ОТОССАСТСТ ОАСССАСАСО ОТАТСТСТАС ТССССССТТС ТСОАСТСТАС АССТТСАССГ САСААСТАТС ТСТТАСТАСА
- 146 023888
ΑΝ (ДС)-последовательность (частичная) ПИВ бешенства С (5>Е0 ГО N0: 61-63)
5ΊΓΓΚ
1 еелНпив οί С аотаоттсзс стототажсс тсатсаасоо сасасастсо НИ 5 ТСАСАААСТТ АЙТАСТСТТТ СТСАОСАТТА АСААСААТТА АСАСАОТЗСО АОСТОТТТСТ ТАОСАСОААС атстсоатот ЛСТОТТТСАА ТСАТСАСААА САСТССТЛАТ ТОТТОТТААТ теТСТСАССС ТСОАСАААОА атсстосттс тасасстаса Н-Евгш1пиз οί С
- к К Р ССР С К 8 Н А У N НЬК В <3 И Р Я V Е 8 Е 1 О Е К 0 К К Я
101 стааоааасс здттЕтгтиз Н-сегшХпиз аооаоооссс ТССГСССЭЭС οί С ОССААОАОСС ссоттстссс ОООСТОТСАА ТХТОСТАААА СОСОСААТСС ССССАСАОТТ АТАССАТТТТ ОССССТТАОЭ ССССОЗТ5ГТ СТССТТСАТТ СОАСТТААЗС ААААОААССС ссососасаа САОЗЛАСТАА сстоааттсо ТтТТСТТСОС ВдЫея-0 ргос«1л
р»ГС1э1 С £1дпа1 КАЫеэ-0 ®1дпа1
• С о к ϊ О I ; к V I V Р ф А СЕРУ РЕЕ УРР Ь С Р О КРР I ¥ Т
201 АОЭЭЭаСААЗ тсссссоттс АСТСЗТАТАС ГОАССАТАТС стстаАгаэт тсстСаосст сттттсттта ТАСССПОСТ САСАСТАОСА АООАОТССОА ОААААСАААС АТООСААСОА каЫеа-а ргосеХп оотатттссс стттоспто огааатттсс татстатасс ССАТАААЗОС- ОАААССАААС САТТТАААСС АТ АО АТ АТОС
I р о 1 < Е О Р Н 3 Р I в I н Н Ь 8 СРН в ь V V ВОВ ССТ N Ь 5 С
301 АТСССГСАТА АССТСССОСС ттссастссс аттсататтс ассагттоас стссссааас ТАОЭЗАСТАТ ТСОАОСССОО ААССТСАООЗ ТААСТАТААО ТСОТАаАСТС САСЗООТТТО ЯаЫеэ-0 ргоЬе!п ААССтсатес ттоасоатса АосетасАСГ аатстттстс ТТССАОСАСС ААСГССТАСТ ЮССАСОТОА ТГАСАААСАС
• Р 5 У ИВЕ к ν с ϊ с ϊ з а 1км нор': Г СТО V V Т ЕАВТ У Т В
401 саттттОста СТААААООАТ САТООАСТТО АААОТ&90СТ АТАТТГСЛЗС САТГАДОАТО ААССОСТТтА стасстСАас тттсасссза татааастсз зтааттстас ттсссоааат АаЫев-О ргоСе!п СТтСТАСАЗС АОТССТСАСС ОААССС6АОА САТАТАСААА СААСАТСТСС ТСАЙСАСГОв СТТСООСТСТ ОТАТАТОТТТ
- Р V с γ ν т ' ГТРК К К Η Р К Р Т УСА С К А ЛУНИ К И А сор
501 тттсотзсаА таойтсасса ссассттсаа овдаааасас ттссосссаа Свсстолазс ттотсаассс осттлсааст сюаазамос аозазатссг аааосассст атосазтоог ззтооааотт стстгттетв ааоэсооотг оссоастосо алс&осссоо озаатзттод ссттстассо тсстстазоа ЯаЫбй'О ргоЬвХп
К Υ В ] ! 8 Е Н ИРУ РОУН и ь к τνκ ТТКВ ЗЬУ ΓΙ3 РЗУА
£01 ССАТАТСААС ОСТАТАСТТС ААТСТСТССА ТТАОАОАСОТ СААССССТАГ СТТОООСАТА ССТ6АТТАСС АТТОССТОСО оасастсааз 00АСТААТОЗ ТаАСССАССС сготсаоттс ' КаЫев-С ргос<*1п АСТАССААСС АСАСТСТСХЗТ САТТАТАТСА ССААСССТОС ТОАТОеТТСС ТСТСАОАССА отаататаот ООГГСОСАСС
- ОБ О РУО к 8 е н 8 к ν р р е вне; 9 β V А У 8 3 Т У С 5 ТЫН·
701 ССОАТСТТвА ООСГАОААСТ ТССТТАТСАТ АЗЗААТАСТА АОАТСССТОС тстаоззасз АСАСТАОС5Т ТТТТССТОСС ССОААТТОТА ссаототтос аотатсааот АССТАСТОСТ ССАСТААССА ТОТСАТСССА ААААООАССО СССТТААСАТ СОССаСААСЗ ТСАТАСТТСА ТОйАТЗАСйА ООтОАТТОЗТ КвЫяя-0 ргосеХа
• О У Т I М К Ϊ > ВНР ВЬО К 5 С Г 1 Р Υ ы з а в к а а зке з в т
801 ССАСТАСАСТ осгвАТЗтал ататосатсс ТАТАССТАСО СТЗАСаАССС □АСТСТТООЗ ТСОаСТССЗТ АТЗАЙТТООЗ АСАГПТТАС АОСТОАОССА ТАСТСААСОС ТСТАААААТС ЯаЫея-о ргоСе1п ОААСТСЛСОЗ ОССААСС03О САТеГААССб СТСТСАААСА сттоастссс соаттсоссс СТАСАТТССС САСАСТТТОТ
с в Р V рва <3 Е Ϋ К 8 С К О А С ВЕК Е С 6 V Е 0 Е КЕМ В 3 Т К
»01 тосоззггм асосссааас ттсатсасос аастасгсос ЗООСГТСТАТ АААТСТСТТА ААЗЗССССТО ТААОСМААА СТсТОТОЗОв ТАСТОСООСТ ЙОЗОТЮАТв ОАОЭОСАСАТ ССССААСАТА ТГТАСАОААТ ТТССОООСАС АТТССАСТГТ ОАСАСАССОС АТОАСССССА СвСССАСТАС СТССССТОТА КоЫМ-0 ρτοΐβΐη
• V А М 0 Г 8 N В Т 1 с и с р гас ь ν к ] крр Й 5 0 В X В И Ь V V .
1001 ззотоостат сссассоата □САСАСААСС сстсгвттаз аатоааасаа ТГАСТТТйТТ Аотсатстсс ссстоотсад стооттаатс ТСАССАСАОО ОХЗАССАСТС ОАССААТТАО мЫея-а ргэьет ТОСАССАСТТ ТАЗОТСТСАС САААТССАОС АССТТОТСОГ АССТОСТОАА АТССАСАСТв СТТТАОСТОЗ ТООААСАССА
в в е V К К I 1 В В с Е О А Е В 8 1 Μ Т Т К В V 3 В Я Я ЪЗН Е Л к
пи ОЗАООААС7ГЭ ССТССТТОАС ОТСААСАААС ЗСЗААЗАЗТС ССТООАОЗСА СТГСАОАСТА ТТАТОАССАС САААТССОТТ ТССТТСаОАА 6АСТОА0ССА ССТОСОАААС САСТТСТТГС ОЭСТТСТСАС ООАССТСССТ ОААСТСТСАТ ААТАСТОЗТС ЗГГТАСООА АОСААОТСТТ СТОДСТСООТ ОСАСОСТГТС ВаЫвя-С ргоее1п
147 023888
НК Т Б М 5 А О АНУК 5 V
ΤΗΝ £ I I Р
СТССТСССАС ССТТССЗСАА 5ССТТАТАСТ АТТТТСААСА АСАСТСТТАТ ССАСССССАТ ССССАТТА7А АСТСАСТТАС САСТТССААТ САСАТААТТС САССАССОТС ССААССССТТ СССААТаТСА ТААААСТТСТ ГСТСАСААТА ССТСССССТА СОССТААТАТ ТСАСТСААТС СТСААССТТА СТСТАТТАА6
ВаЫез-С ргоЬеБп
СОК С Н Р
V Г Г N61 I Б С Ρ06Ν
ССТССАААСС АТ6ТСГЙА5А СТСССТССбА 6АТСССАССС ССАТСТСААТ ССССТСТТСТ ТТААСССААТ САТССТОССА ССТСАССССА АСбТЙСТбАТ
ССАЗСТТТСС ТАСАСАСТСТ САЗССАСССТ СТАСОСТССС ОСТАСАСТТА ССССАСААСА ААТТСССТТА СТАССАСССТ ССАСТОСССТ ТССАССАСТА
РаЫез-З ргоБеХп ♦РЕМ 0551. Б С О ННЕ Б Б V 5 5 V 1 Р Б М К Р I А Р Р 5 ТУГ
ТССС6АСАТ0 СААТСТТССС ТТСТССАССА АС АСА Тб 5 АА СТССТССТ6Т СТГСАЗТСАТ АССССТСАТС САСССАСТСС СССАССССАС САСТСТСТТС
АССССТСТАС ОТГАСААССС ААСАССТССТ ТСТСТАССТГ САССДССАСА САЛСТСДСТА ТСОССАСТАС СТССОТСАСС ЗССТССССТС 6Т5ДСАСЯА5
РаЫее-О ριοΐ,δίη
ААААА7СССС АТСАСССС5А АСАС7ТТСТС СААСТТСАСС ТСССССАТСТ АСАС6АААСС АТАТСТССАС ТАСАССТСОС ССТТССТААТ ТССССТААСТ ТТТТТАСССС ТАСТСС56СТ ТСТСАААСАС СТТСААСТСС АСССССТАСА ТСТССТТТСС ТАТАСАССТС АГСТССАССС ССААССАТТА АССССАТТСА
КаЪ1б$-С ргоΙβΐη
V Б Б БАС А Б Т А Б М Б I I Г БИТС Ч К В V N В 5 Е Р Т С Н Н АССТССТССТ САСТСССССТ СССТТСАССС СТТТСАТССТ САТСАТТТТТ СТСАТЗАССТ ССТСССССАС ССТСААТССС ТССЗАЗСССА САСАССАСАА ТССАССАССА СТСАССССХА СЗОААСТССС 5АААСТАС5А СТАсТААААА САСТАСТСЗА ССАСССССТС ССАСТТАССС АСССТССССТ СТСТССТСТТ
ГМОУ 2А б в с торе
ВаМея-3 ргоееАп
Т Р й 5 6 К I
И Е 5 У К 5 С ЗЕТ
ТСТСАСАССа АСАЗЗСС&36 ААСТААЗТ6Т САСТССЗСАА ТСТЗССААОА ТТАТТА0ТА5 ТТСССАЗАСТ ТАСААбТСТС ЗАССАСАСАС ТОЗСТТСААТ АОАСТСТССС ТСТССЗЗССС ТТСАТТСАСА СТЗАССССТТ АОАСССТТСТ ААТААТСАТС ААСССТСТСА атсгтсасас стсстстстс асссаастта
С/ргМ 31дпа1
ΓΜΟν 2А
БА С С
Р С СКТ 6 I А V МТС Б I А СУСА
ТТТСАТСТОС ТСАААСТТЗС АССССАТСТА СААТСАААТС СТЗСАСССЗб АЗСЛААСАСС СЗТАТТеСАС ТСАТСАТТЗС ССТСАТСССС ТСССТАССАС АААСТАСАСС АСТТТ5ААСС ТССССТАСАТ СТТАЗТТТАС СДССТССССС ТССТТТСТСС ССАТААССТС АСТАСТААСС С5АСТАСССС АСССАТССТС С/рШ ЗхдПа!
N ε о с к ν ММТ
РХМ
N А т о V τ С V I Т 1 Р Т А А 6 КН
1901 САСТТАСССТ СТСТААСГТС СААСССАА63 ТСАТСАТСАС СЗТАААТССТ АСТСАССТСА САОАТОТСАТ САСЗАТТССА АСАЭСТССТС ОАААСААССТ СТСААТСССА САСАТТСДАО СТТСССТТСС ДСТАСТАСТ5 ССАТТТАССА Т6АСТССАСГ 6ТСТАСА6ТА ЗТЗСТААОСТ ТСТССАССАС СТГТСТТООА ргМ
- С I V РАМ! > УСУ М С 0 0 Т 1 1 р У Е С РУБ 5 А С Η £>РГ ΟΪΟ
2001 АТОСАТТОТС ТАССТААСАС АСАССААТСС ТСТССТТАСС АТСТССЗАТА ТАСАСССТАТ САТСТССБАТ САТАСТАТСА СТТАТСАДТС зтасасоста статсатаст 6ААТАСТТАС ргМ СССАСТЗСТС ТСЗЗСТССТА АТСАТССАСА АСАСАТССАС СССТСАССАС АССССАССАТ ТАСТАССТСТ ТСТОТАЗСТС
СМСТ К 8 А V Υ У Я Υ С В С Т К ТИН 5 В В 5 Р К 5 Б Т V 0ТНС
2101 ТЗТТССТССД АСААССАССТ САААСГСДБС 5ТТТСАСТСС АСТСГАСЗТС ТСАСАТССАС ДССТАТССАА САТССАССАА САСАССССАС ТССАТАССТТ СТАССТССТТ СТСТССЗСТЙ ргН ТСААСАСССА СТСЗСАССТС АСТОАСАСТС САОАСАСАСО АСТТСТЗССТ САСССТССАС ТСАСТСТСАС 6ТСТ0Т0ТСС
• Е 5 Т БАН X К С А ИМО 5 Т X ΑΤΡΪ БУК ТЁ5 Η I Б Й НРС
2201 САСАААССАС СТСТТТССТС ТСТАССЗААС АЗАТСЗСТТС ААСААСОССЗ ТТСТТССССС СТТССАТОСА САССАССААС саасстасст стсатесттс ргМ СССАСААОСГ С0СТСТ7ССА АТТТСОТААА ААСАСААТСА ТССАТСТТСА бСДАСССТСО ТАААССАТТТ ТТСТСГГАСТ АССТАСААСТ ССТТСССАСС
• У А Б V А А V I С И МБС 5 К Т М ОРУ УГУ УББ1 Б V А РАУ
2301 АТАТССССТС ТАТАССЙСДС СТСССАСССЗ САссатсссс ТСАТТСЗТТС АЗТААССААС 6АТССТТЗСС АОСААСАССА ТССАЗАСАСТ ТСТСТГТеТС СТССТАТТОС ТТТТОбТбСС СССАССТТАС СТАССААССС ТСЗТТСТССТ АСЗТСТСТСА АСАСАДАСАС САССАТААСС ААААССАССС СССТССАйТЗ Е
ргМ 5 Г N С Б 3 М Б Μ Р СЕБЕ С V 5 С А Т МУСЬ У Б Е С 0 5 С V Т I
2401 АЗСТТТААСТ ТССАААТТСА СССТТЙСААТ ССЗААССТТА сассаасаза СТССТТ6ТСТ слеттсттес ааозастстс СТСААСААСС ТТССТСАСАС Е ТССАССААСА Т55СТССАГТ ТССТТСТССА АСОССАСАСС ТСССТСАСТА АССТС5ТТЗТ АСССАССТАА ассаазаост ТССЗСТСТСС АСССАСТСАТ
148 023888
К М К н Μ Ε ДАНЬ А Ε V В 5 Υ
ТСАТСТСГАА ССАСААСССТ АССАТСОАТО ТОААОАТСДТ СААТАТОСАС СССОССААСС ТОССАСДССТ ССССАбТТАТ ТССТАТТГСО СТАСССТСАС АСТАСАСАТТ ССТСТТССОА ТОСТАССТАС АСТТСТАСТА СТТАТАССТС СОССОСТТСО АСССТСТССА СССОТСААТА АССАТАААСС САТСОСАСТС ΐ
О Ь 5 Т К А А СРА МОЕ А И N О К Р А 0 Р А ГУСЯ О О V V О Н
ССАТСТСТСС ДССАААССГС ССТССССССС СДТСбСАСАА ССТСАСААТС ДСАААСОТСС ТСАСССАССТ ТТТСТСТССА ОАСААССАСГ ССТССАСДСС ССТАСАСАСС ТССТТТССАС ССАС060ССС СТАСССТСТТ ССАСТСТТАС ТСТТТССАСО АСТСССТССА АААСАСАССТ СТСТТССТСА ССАССТСТСС с и е ы осо
СССТОССССА Асоестссоо АСТАТТТОСС АДДССААССА ТТОАСАСАТС ССеСАААТТТ СССТССТСГА ССААОССААТ АОСААОААСС Α1ΤΤΤΟΑΑΑ0 СССАСССССТ ТССССАСССС ТОАТАААССС ТТТССТТССТ ААСТСТСТАС ССССТТТАДА ССОАССАСАТ ССТТСССТТА ТССТТСТТСС ТААААСТТТС £ Ч б Ν Υ 5 ΤΟν САТО
АОААТАТСАА ОТАСОААСТС ОССАТТТТТС ТССАТОСАСС ААСТАСТОТС САСТСОСАСС ОАААСТАСТС САСАСАОСТТ ООАОССАСТС АСССАСССАС ТСТТАТАСТТ САТССТТСАС СССТАААААС АООТАССТСС ТТСАТОАСАС СТСАСССТСС СТТТОАТСДС СТСТОТССАА ССТСССТСАО ТСССТСССТС
АТТСАССАТС АСТССТОСОС С6ССТТСАТА САСАСТАААС СТТООАСААТ АГССАОАСОТ САСАСТССАС ТСТСААССАС ССТСАОССАТ ТСАСАССААТ ТААОТССТАО ТОАООАСССС ССООДАСТАТ ОТОТСАТТГС СААССТСТТА ТАССТСТССА СТСТСАССТС ДСАСТТССТС ССАОТСССТД АСГСТССТТА
ССАТАСТАСб ГСАТОАСТСТ ГОСААСАААС АС5ТТСГТ05 ТССАГССТСД СТОСТТСАТС СДССГСААСС ТСССТТССАС САОТОСТССА АСТДСТОТйТ ССТАТ5АТ5С АСТАСТСАСА АССТТОТТТС ТОСААСААСС АООТАОСАСТ САССААОТАС СТООАСТТСО АС60ААССТС ОТСАССАССТ ТСАТСАСАСА
А Ь С ЗОЕ О А Ь Н О А Ь
0СА0ОААСАС АОАОАСОТТА АТССАСТТТО АОСААССВДА ССССАССААС САСТСТСТСА ТАОСАТТССО СТСАСАА5АО ССАССТСТСС АТСААОСТТТ ССТССТТОТС ТСТСТССААТ ТАССТСАААС ТССТТОСТОГ ССООТОСТТС СТСАОАСАСТ АТССТААССС САСТСТТСГС ССТССАОАСС ТАОТТССААА
• А 0 А ΐ р ν е р з з Ν Т V К Ь Т ί ; о н ь к с в ν к н е : к ь О Ь К О
СОСТОСАОСС АТТССТОТОО ААТТТТСААО саасастстс ААСТТСАСОТ сесетсАггт ОААОТСТАбА ОТОДАбАТОб АААААТТОСА СТТОААСООА
ССОАССТССС ТААССАСАСС ТТААААОТТС СТТСТСАСАС ТТСААСТОСА Е ССССАСТААА СТТСАСАТСТ САСГТСТАСС ТТТТТААСОТ СААСТТСССТ
Т Т Υ С V с $ КАР К Р Ъ С ; тра РТС Н е Т ν V I. ε 1 0 Υ Т С Т С
АСААССТАТО ссотстсттс АААЗОСТТТС ААОТТТСТТО ООАСТСССбС АОАСАСА5СТ СДСООСАСТС ТООГОТТООА АТТОСАСТАС АСТСССАСОО
ТОТТОСАТАС СОСАОАСААС ТТТСССАААО ТТСАААСААС сстсаооосс Е ТСТСТОТССА ОТОССбТСАС АССАСААССТ ТААССТСАТС ТСАСССТОСС
о р с К V Р I 3 3 V А 3 Ь Ы С Ь Т Р V { Ζ К Ь V ТУН Р Г V 3 V А Т
АТССАССТТС САААОТТССТ АТСТСЕТСАС ТСОСТГСАТТ ЕДАСОАССТА АСОССАОТОО ССАОйТТССТ састогсдас ССГТТТСТТТ САСТООССАС
ТАССТССААС ОТТТСААСОА ТАОАССАОТС АССОААСТАА СТТССТ06АТ Е ТССССТСАСС ССТСТААССА СТОАСАСТТС ООААААСААА СТСАСССОТО
ООССААСССТ
ССССТТОССА
ААСОТССТСА ТТОААТТСбА АССАСССТТТ ООАОАСТСДТ АСАТАСТСОТ ЕСССАСАООА СААСААСАСА тсаатсасса стоосасаас ТТССАОбАСТ ААСТТААССТ ТССТСОСАДА ССТСТСДСТА ТСТАТСАССА ССССТСТССТ СТТОТГСТСТ ДСТГАСТСОТ ОАСССТОТТС
ГО 5 V С С
ТСТЕБААССА
АСАССТТСОТ бСАТТСОСАА АСССТТТАСА АССАСССТСА ААСОАССССА СА6АСТАЕСС ССТСТАОСАС АСАСА0СТГ6 ОСАСТГГСОД ТСАОТТССАО ССТААССОТТ ТССОАААТОТ ТбСТСССАОТ ТТССТСОССТ СТСТОАТССО СОАСАТССТС ТбТОТССААС ССТОАААССТ АОТСААССТС н ς ν г ооа г к з
ССОТСТТСАС
СССАСААСТС
СТСАОТТ06С ААСОСТОТСС АТСААСТбТТ ССОАСОДССА ТТССОСТСАС ТОТТСССАОС САТСТССТСС АТААСССААС САТТОСТССС САСТСААССС ТТСССАСАСС ТАОТТСАСАА осстсстсст ааоосоастс асаассстсс СТАСАОСАСС таттссоттс стаассассс
А 1 Ь Ь Ч М С б V 1» I. Р Ь £ V N
осстстсстс ССОАСАСОАС Е ТТСТССАТСО аасасстасс ССАТСААТОС СОТАСТТАСО ТССТОАСЛСО АОСАСТОТСС ТССАТАССТС АОбТАТСОАО Н51 7САССТТТСТ астссаааоа СОСАСТТССА 0С6ТСААССТ ССАСТТСТСС ССТСААОАСС ТСТТССТСТС ССТСААССТС АОААОСАСАб осасттссас
Н А В Т О С А ТОТ Зное ь & С 0 3 0 V Р I н и о ν ВАН N 0 А Υ ·
САОЗСТОАСК СТОООТОТОС САТАОАСАТС АСССОЗСААО АОСТаАСАТО ТССААСТОбА ОТОТГСАТАС АСААТСАТСТ ©ЗАООСТТОЗ АТООАССООТ ОТасСАСГСТ ОаСССАСАСО огатстотао тааассоттс тсоастстас ассттсасст сасааотато тоттастаса сстсозаасс ТАССТООССА
149 023888 \νΝ (ДртМЕ)-иоследовательность (частичная) ПИВ бешенства С (8ЕЦ ГО N0: 64-66)
С ргосе1а
АСТАОТТССС СТСТОГОАОС ТСАСАААСТТ АвТАвТСГГТ стсаооатта асаасаатта асасаотссс АОСТСТТТСТ ТАОСАСОААв АтСТССаТОТ ТСАТСААОСС «ЗАСАСАСТС© АСТСТТТСАА ТСАТСАСААА САСТССТДАТ ТСТПЭТГААТ ГСТСТСАССС ТССАСАААСА ДТССТвСТТС ТДСАССТАСА
С ргосеХп
К К Р СОР в К 8 I 1 А V Υ Ь Ь К Я в Μ Р Я V Ь 5 Ь I С Ь К К А М С
стааоааасс ОАГГСТГТОв АОвАОООССС ТССТСССООО вОСААОАОСС сотстсов ОевСТОТСТА ТТТОСТАААА СОООЗААТЗС СССССОТЗТТ ОТССГТвАТТ ОСАСТТААвА вввСТАТОТТ СССОАСДвАТ АААСвАТТТТ ОСОССГТАСв ОаОСОСиСАА сАООААСТАА ССТОААТТСТ СССвАТАСАА с ρϊ-οΤθϊη
- 3 0 I 0 С К ( } Р I к КУС А с с А Р Р Я РТА НАРТ ЯДУ СЕЯ
ОАвССГОАТС едСООСААОО стсосастао стсссвттсс ООССААТАСО ΑΤίΎΟΤΟΓΤΟ ССТСТСгТОС ССОвТГАТОС ТАААСАСААС СОАйАОААСС С рГоС.е1п СОТГСТТСаО ОТТСАСАОСА АТТОСТСССА сссоаосаст ОСТООАТСОА вСААвААЗТС СААОГОТСОТ ТААООАОЭСТ авОСТСОТСА СОАССТАОСТ
И К в 1 / N к 0 ТАМ КПСС 5 к к К В С втьт 8 А I няя 5 3 К (
ТООАОАООТО ТСААСАААСА ААСАОССАТО АААСАССТТС ТОАОТТТСАА ОААОЗААСТА ОООАССТТОА ОСАОТОСТАТ СААТООССОО АОСТСААМЗС АССТСТССАС АСТТОТГГОТ ТТОТСССТАО ТТТСТОСААб АСТСАААвТТ СТТССТТОАТ СССТЗОААСТ ССТСАСОАТА вТТАОСООСС ТСОАОТТТСО
КаЫ«а-з з1дпа1 ρβΐχϊβΐ с З1дпл1
С ртсс«1п ргоЬеХп
КЕЯ βΟΚ ТО!
V 1 V РОА Ь Ь К V
Ь Ь V Р Р
Ь С К в
АААЫЗААОСО ттгтстгсвс АОООЭОСААО АСТООТАТАО ТСССССОТТС ТЗАССАТАТС стотоатсог тсстсаоост сттттаттто тасссттэст ОАСАСТАвСА АООАОТССОА ОААААСАААС АТОООААССА КАЫбВ-в ρϊο^βΐη ООТАТТТССС СТТТОСТТТО ССАТАААООО ОАААСОАААС ОТАААТТТСС СДТТУААА0О
•ТУТ н Р р к сор Н $ р I 0 I Н Н ь 5 СРП N С V V в п в ОСТ
ГАТСТАГАСС АТСССТЗАТА АвСТСОСОСС ТТ6ОАЯТССС АТТвАТАТТС АССАТГИЭАЗ СТвСССАААС ААССТО5ТС0 ТТвАОЭАТОА АОООГвСАСТ АТАвАТАТвв ТАввОАСТАТ ТСвАвСССОО ААССТСАООО ТААСГАТАДС ТООТАААСТС ОАСООСТТТО ТТОвАОСАСС ААСТССТАСТ ТСССАСОТОА
ВАЫеа-в ргосе!п .
1ι 5 О К 5 Υ
V О ¥ I 3 А 1 К Μ НОРТ СТО V V Т
ААТСТГТСТв 0А7ТТТССТА САТОвАОТТв ААА<ЗТФЭвСТ АТАТТТСАСС САТТААОАТв ААСОвСТИА СТТОТАСАОО АвТСОТвАСС вААОСОЭДОА ТТАОАААвАС СТААААввАТ вТАССТСААС ТТГСАСССОА ТАТАААОТСО ОТААТТСТАС ТГОССОДААТ ОААСАТЭТСС ТСАОСАСТОО СТТСООСТСТ
КАЫея-в ргоьеХп '
К К Р Т Р О А СКА ΑΥΑΜ сататасааа птсзтоооа таозтсдсса ссассттсаа оаоаааасас тгссосссаа сссстоассс ттотсоовсс осттасааст ввААОАтоес ОТаТАТОТТТ АААОСАСССТ АТОСаОТзОТ ОзТСОАаОТТ СТСТпТСТО ААоОСОввТТ ОСвОАСТССС ААСАвССОЭО СвААТОТТОА ССТТСТАССв
КАМеэ-в ргоЬе1п
ССР я у в ί : 3 ь н N Р У КОУН ИСК Т V К Т Т К I : а ь ν ί ί ®
АООАОАТССТ тсстстаооа Р ААТСТСГОСА ТТАвАОАСОТ СААССОЗТАТ ССТОАТТАСС АТТООСТССО ОТТОООСАТА ООАСТААТОО ТААСС0А03С КАЫев-3 ргоСе!п ОАСДЭТСААЗ СТОТСАвТГС аСтассааоо ТСАТООТТСС АОАСТСТСОТ ТСТСАСйССА САТТАТАТСА ОТААТАТАвТ
ρ ε ν л \ С Ь 0 РУО К 5 Ь Н 3 К V РРО 3 N С £ 3 0 V А V 5 3 Т У С ί
ССААОСОТОО овттсосдсс ССОАТСТТОА ООСТАОААСТ ТССТТАТОАТ АООААТАСТА АОАТСССТОС АСАОТАООСТ ТТТТССТООС ТСТАОООАОО ТОТСАТСССА ААААОСАССв ЕАЫев-0 ргоье4а ООЗААЛТОТА СССГТАКСАТ осовтоттвс СвССАСААСО АСТАТСААОТ ТСАТАвТТСА АССТАСТвСТ ТввАТОАСвА
• тын С У Т 1 К М 1 1 Е N Я Я С 0 М 5 С I ) I Р Т N 8 К в К Я ί 1 8 К 0
- 150 023888
ССДеТААССА СОАСТАСАСТ АТАТбСДТСС СТЙАОААССС ТССАСТСОЗТ АТСАСТТССО АСАТТТТТАС СААСТСАССб йССААСССбС САТСТАА6Й0 00ТСАТТС6Т ССТОАТСГОА ТАТАССТАСС САСТСТТССС АеСТСАСССА ТАСТСААС6С ТСТЛААААТС СТТ2АСТССС ССОТТССССС СТАСАТТССС
ДаСпэз-й ргоье±п
СТСТСАААСА ТСССССТТТС ТТСАТСАОСС 5С0СТТ6ТАТ АААТСТСТТА ААСССОССТС ТААССТСААА СТСТСТСОСО ТАСТСССЗСТ СССССТСАТС САСАСТТТбТ АСССССАААС ААСТАСТСЕС ССССААСАТА ТТТАОАСААТ ТТССОССОАС АТТсСАСТТТ САбАСАСССС АТСАСССССА СОСССАСТАС
РАЫез-С рго1е!п ν А М ОТ
САССССАСАТ ООСТСССТАТ ОСАСАСААСС ААТСАААСАА АОТОСТСТСС СССТССТСАО СТОСТТААТС ТССАССАСТТ ТАССТСТСАС ОАААТСОАСС СТОСССТСТА СССАССОАТА СОТСТСТТСС ТТАСТТТСТТ ТСАССАСАСС ССбАССАЕТС САССААТТАС ДССТССТЕАА АТССАЗАСТС СТТТАСсТСО ядыез-б рсоьвхп
Ь V V Е Е Ь V К К В БЕС Ь О А Ь Е 3 I МТТ К 5 V 3 Г К В Ь 5 Н
АССТТСТССТ СОАССААСТО бТСААОААпС СССААСАСТС ССТСОАСССА СТТСАОАСТА ТТАТСАССАС САААТССОТТ ТССТТСАСАЙ САСТЕАСССА ТССААСАССА ССТССТТСАС САСТТСТТТС СССТТСТСАС ССАССТСССТ СААСТСТСАТ ААТАСТССТС СТТТАСОСАА АССААСТСТТ СТСАСТСССТ
ВАЫез-С ргосехл
ССТСССАААО С7ООТСССАО СОТТСОССАА СОСТТАТАСТ АТТТТСААСА АСАСТСТТАТ ССАСССООАТ ОСССАТТАТА АОТСАОТТАО САСТТОСААТ ССАСЗСТТТС САССАССЗТС ССААЙСССТТ СССААТАТйА ТААААСТТЙТ ТСТОАСАДТА ССТССОССТА ССС6ТААТАТ ТСАОТСДАТС СТОААССТТА
ААЫвЭ-С ρτοΐ^ίη
В ϊ I Р 5 К С С Ъ В V С С Н СН
НУН СУРЕ Я С I
САСАТААТТС ССТССАААбС АТОТСТОДСА СТСООТСССА САТСССАССС ССАТСТСААТ ССССТСТТСТ ТТААСОСААТ САТССТСССА ССТСАССООА СТСТАТТААС ССАОСТТТСС ТАСАЗАСТСТ САСССАСССТ СТАССЗТССС ОСТАСАСТТА ССССАСААЙА ААТТСССТТА СТАССАСССТ ССАСТОСССТ
НАЫвЗ-С ρΓΟΙθίη
АССТОСТОАТ ТССССАСАТС СААТСТТССС ТТСТССАССА АСАСАТООАА СТССТССТСТ СТТСАСТОАТ АССССТОАТС САСССАСТСС СССАССССАС ТССАССАСТА АССССТСТАС ОТТАСДАСОО ААОАССТСЗТ ТСТСТАССТТ САСОАССАСА СААСТСАСТА ТСССОАСТАС СТСССТСАСС СОСТСССОТС
ΚΑΒϊ.$8*·6 ргоЬ-βίη
ТУГ К N <5
ГУ Е V Я Ь ГОУ
САСТСТСТТС АААААТСССС АТСАСССССА АСАСТТТСТО ОААСТТСАСС ТСССССАТСТ ДСАССАААСО АТДТСТОСАС ТАСАССТССС ССТТССТААТ ЙТСДСАСААС ТТТТТАСССС ТАСТСССОСТ ТСТйАААСАС СТТСАА6ТСС АСОООСТАСА ТСТССТТТСС ТАТАСАССТС АТСТОСАССС ООААССАТТА &АЪ1«з-С ргоЬехп ьмтс мяк ν я к з е р т
ТССЙСТААСТ АССТССТССТ САЙТОССССТ СССТТСАССС СТТТ5АТЙСТ ЗАТСАТТТТТ СТСАТСАССТ ССТЙССССАО ООТОААТСОС ТССОАССССА АОСССАТТСА ТССАСйАСОА СТОАСССССА СЗСААСТЕ6С ОАААСТАСЙА СТАОТААААА ОАСТАСТООА ССАСССССТС ССАСТТАССО АООСТСООСТ
ААЫез-С ргоСейп
САСАССАСАА ТСТСАОАСОО АСАСОСССОС ААСТААСТСТ 0АСТСС6САА ТСТСССААСА ТТАТТАСТАС ТТСОСАОАСТ ТАСААСТСТб ОАбСАОАОАС СТСТССТСТТ АОАОТСТССС ТСТССОСССС ТТСАТТСАСА СТСАбССОТТ АСАСССТТСТ ААТААТСАТС ААСССТСТСА АТСТТСАСАС СТССТСТСТб
ГНОУ 2А N51 81дпз1
ААЫез-б ρχ·οΕβϊΓ>
• С Ь N ГОЬЬ КЬА С О У ргйИ31 з!дпа1
СРА А О К
Т6ССТТСААТ ТТТСАТСТСС ТСАААСТТСС АССССАТСТА САДТСАААТС СТОСАСССОС СССОСАСАСС ТССАТАОСТС ТСАССТТТСТ СССАСТТССА АСССААСТТА АААСТАСАСС АСТТТСААСО ТССССТАСАТ СТГМТТТАС САССТССССЗ СбСССТОТСС АбОТАТССАЗ АЗТССАААОА ОССТСААССТ
N51
N81 3ΪήΠ4ΐ
СУЬЬ Г Ь 5 V Ν V НАОТ СС
ЗСАОТТСТОС ТСТТССТСТС СОТОААССТС САСССТСАСА СТСССТСТСС САТАСАСАТС АСССООСААС АССТСАСАТ6 Т5СААСТ0ОА СТ5ТТСАТАС ССТСААСАСС АОАДОСАСАС ССАСТТССАС СТСССАСТСТ ПАСССАСАС5 СГАТСТСТАС ТССССОСТТС ТССАСТСТАС АССТТСАССТ САСААОТАТС
- 151 023888
Ρίν-Μ/Νν хелпер ΔΝ51 (5ΕΟ ГО N05: 67-69)
Μ 3
АОТАЗТТСЗС СТСТЗТСАЗС ТОАСАААСТГ АЗТАЗТЗТТТ ОТОАЗОАТТА АСААСААТТА АСАСАСГОСЗ АЗСТЗТТТСТ ТАССАСОААС АТСТССАТОТ ТСАТСААЗСО ЗАСАСАСТСО АСТЗТТТОАА ТСАТСАСАДА САСТССТААТ ТСТТЗТТААТ ТЗТОТСАССС ТССАСАААЗА АТССТЗСТТС ТАЗАССТАСА
С
К К Р СОР 3 К 5 А А V N М Ъ К Е 3 Μ Р Е V Ь 5 Ь 1 О Ь К Е А М Ь · СТААОАААСС АООАООЗССС СОСААОАОСС СЗОСТЗТСАА ТАТОСТАААА ССССОААТСС ССССОЗТОТТ ОТССТТСАТТ СЗАСТТААСА ЗСССТАТЗТТ ОАТГСТТТСа ТССТСССОСС ССЗГГСТССС ССССАСАОТТ АТАССАТГТТ СССССТТАСС ССОСЗСАСАА САОСААСТАА ССТСААТТСТ СССОАТАСАА с
• з ί. ί зека р I к р у ь а ь ь а р р е рта 1 А Р Т Е А V ЪРЕ ЗАЗССТОАТС ЗАСЗЗСАДЗО ЗЗССААТАСО АПТОТЗТГС ССТСТСТТОЗ СЗТТСТТСАО СГГСАСАЗСА АТТЗСТССЗА ССССАЗСАОТ ССТОЗАТССА СТССОАСТАО ОТССССТТСС ССОЗТТАТСС ТАААСАСААС ССЙЗАСААСС ССААСААСТС СААСТЗТССТ ТААСЗАЗЗСТ ССОСТСЗТСА ССАССТАССТ
С
МЕСУ N К О ТАМ КНЬЬ ЗРК К В Ь ОТЬТ 5 А Г ΝΕΕ 3 5 К О
ТССАСАОСТС ТСАА.САААСА ААСАЗСОАТС АААСАССТГС ТСАОТТТСАА СААССААСТА. СССАССТТЗА ССАЗТЗСТАТ СААТСЗЗССС АССТСААААС АССТСТССАС АСТТЗГГТСТ ТТСТСОСТАС ТТТСТОЗААО АСТСАААСТТ СТТССРГОАТ СССТЗСААСТ СОТСАС6АТА ЗТТАЗССОСС ТСЗАЗТТТТС
81дпа1 рйрйДйе ргМ • К Я К ССК 7 О I А V Μ I С Ь I А 5 V О АУТ Ъ 3 N Р О С К У Μ М · 401 ΑΑΑΑΘΑΑΑΑΟ АОСАООАААО АССССААТТЗ САЗТСАТСАТ ТССССТСАТС СССАСССТАС САССАОТТДС ССТСТСТААС ГГССААСССА АОСТСАТСАТ
ТТТГСГГГГС ТССГССТТГС ТЗЗССТТААС ЗГСАЗТАСТА АССООАСТАЗ СФЗТСОСАТС СТСВТСААТС СЗАЗАОАТТС АМЗВГТСССТ ТССАСТАСТА. ргМ ' •ТУИ А Т О V τον I Т I РТАА 0 К N Ь С I V К А М ϋ V С Υ М С 501 ЗАСЗОТАААТ ЗСТАСТЗАСЗ ТСАСАЗАТСТ САТСАССАТТ ССААСАЗСТЗ СТОЗАААОАА ССТАТОСАТТ ОТСАСАОСАА ТССАГСГОД} АТАСАТСПЗС
СТСССАГТТА ССАТСАСТОС АЗТСТСГАСА ЗТАОТОСТАА ОСТГЗТСЗАС ЗАССТТТСТТ ОСАТАСЗТАА САСТСТСЗТТ АССТАСАССС ТАТЗТДСАСЗ ргМ
О ϋ Т I Т Υ Б С Р V ЪЗАС ПОР £ Π I ОСМС Т К 5 А V Υ УЕТО· 601 ОАТОАТАСГА ТСАСТТАТОА АТЗСССАЗТЗ СТОТСЗССТЗ ОТААТСАТСС АОАА0АСАТС САСТОТТССГ ОСАСАААСТС АОСАЗТСТАС СТСАОСТАТС
СТАСТАТОАТ АЗТЗААТАСТ ТАСйвЗТОС Оасазссзас саттастасс тсттстотао СТОАСААССА ССТСТТТСАО ТСОТСАОАТС САСТССАТАС ргМ « ЕСТ КТЕ Е5ЕЕ 5 Е Е 3 Ь Т V ς Т К С Е 5 Т Ь А N К К С АМН· 701 ОААЗАТОСАС СААСАСАСЗЗ САСТСААЗАС ССАСТССОАС 6ТСАСТЗАСА ЗТЗСАЗАСАС АСОСАЗАААЙ САСТСТАССС ААСААСААЗО ЗСЗСТТОСАТ
СТТСТАССТО ЗТТСТСТССЗ ЗТВАЗГГСТС СОТСАЙССГС- САЗТСАСТЗТ САССТСТЗТ6 ТЗССТСТТТО ЗТСА0А.ТССС ТТЗГГСТТСС ССССААССТА ргМ
05Т КАТЕ Υ Ь V К Т β 3 И I Ь К N Р С Υ А Ь V А А V I С Η М Ь 801 СОАСАССАСС ААССССАСАА ООТАТТТСЗТ АААААСАСАА ТСАТССАТСТ ТСАССААССС ТЗСАТАТССС СТСОТСССАС СССТСАТГСС ТТССАТССТТ
ССТОТССТСС ТТССССТЗТТ ССАТАААССА ТТТТТСТСТТ АСТАССТАСА АСТССТТССС АССТАТАССС САССАССС-ТС СЗСАСТААСС ААССТАСОАА ргМ
С 3 N Т МОЕ УУР V V Ь Ь Ь Ь V АРА Ϊ3ΡΝ С Ь С М 3 N Й О Р Ь СООАЗСААСА ССАТЗСАСАС АСТТСТСТТТ ЗТССТССТАТ ТЗСТТТТОЗТ ЗЗССССАОСТ ТАСАССТТТА АСТСССТТЗО АаТСАОСйАС АЗАСАСТТСТ СССТССТГСТ ОЗТАСОТСТС ТСААСАСААА САОСАССАТА АСОААААССА ССССССТССА АТСТССАААТ ТСАССОААСС ТТАСТССГТС ТСТСТСААСА
Б • В 3 V 3 О А ТИУО Ь V Ь Е О О 5 С V Т I М 3 ΚΟΚ Р Т Г О V К М · ТССААССАСТ ЗТСТЗЗАССА АСАТСССТСС АТТТССТТСТ ССААЗССЗАС АЗСТЗСОТЗА СТАТСАТОТС ТАА30АСААЗ ССТАССАТСС АТЗТСААСАТ АССТТССТСА САОАССТССТ ТСГАСССДСС ТАААССААСА ССТТССЗСТС ТССАСЗСАСТ САТАСТАСАО АТТССТСТТС ОСАТСОТАСС ТАСаСТТСТА
Е
ΜΝΜ ΒΑΑΝ Ь А К V К 5 УСУЬ АТУ 5СЬ 3ΤΚΑ АСР АМО ОАТСААТАТС САООССОССА АССТОССАОА СОТСОЗСАСТ ТАТТОСТАТТ ТСОСТАССОТ САОССАТСТС ТССАССАААЙ СТССОТОССС (ЗбССАТОСбА СТАСТТАТАС СТССОССОСТ Т00АСС0ТСТ ССАООССТСА АТААСОАТАА АССОАТОССА ЗТСОСТАСАС АССТООТГТС САСССАСОСО ССОСТАСССТ
В £ А Η N ОКЕ АОР АРУС Е0<3 УУО ЕСИС КОС СЬР <ЗКС5 ОААССТСАСА АТОАСАААСО ТОСТСАСССА ОСГТТТСТОТ ОСАОАСААОО АСТЗСТОСАС АСОООСТСЗО ОСААСОЗСТО СОЗАСТАТТТ ЗССАААЗОАА СТТСЗАЗТЗТ ТАСТСТТТЗС АС0АСТ300Т СОААААСАСА СЗТСТОТТСС ТСАССАССТС ТССССЗАССС СЗТГОССЗАС ОССТОАТААА ССЗТТТССТТ
Е • ΙΟΤ САК РАСЗ ТКА ХЗЕ Т1ЬК Б N I ΚΥΕ УА1Р УКЗЗСАТТЗАСАС АТССЗССААА ТТТЗССТССТ СТАССААООС ААТАССАМА АССАТТГТЗА ААСАЗААТАТ СААСТАСЗАА ОТОЗССАТТГ ТГОТССАТЗЗ ССТААСТСТЗ ТАСЗСЗЗТТТ АААСЗСАСОА САТеЗТТССО ТТАТССТТСТ ТООТААААСТ ТТСТСТТАТА ЗТТСАТССТТ САСССЗТААА АА.СА5СТАСС
В •РТТ V Б 5 Η О N Υ 5ТС УЗАТ О А С ЕРЗ ΙΤΡΑ АРЗ УТЬ АССААСТАСТ зтозаотсзс асззаааста стссасасаз ЗТГОЗАЗССА стсаззсазо засатгсасс АТСАСТССТС сззссссттс АТАСАСАСТА ТЗЗТТЗАТСА САССТСАЗСЗ ТЗССТТТЗАТ ОАЗЗТЗТЗТС СААССТСЗЗТ ЗАОТСОЗТСС СТСТААЗТСЗ ТАЗТЗАССАС ЗССЗССЗААЗ ТАТЗТЗТСАТ
Б
К Ь С В ΥΟΒ V Т V ОСЕР »53 1СТ ΝΑΥΥ УМТ УСТ КТРЬ ААЗСТТЗОАЗ ААТАТЗОАЗА ЗОТЗАСАЗТС ЗАСТЗТЗААС САСЗСТСАЗЗ ЗАТТЗАСАСС ААТЗСАТАСТ АСОТОАТЗАС ТСТГОЗААСА ААЗАСОТТСТ ТТСЗААССТС ГГАТАССТСТ ссастзтсас стзасасттз ЗТЗССАЗТСС стаастзтзо ттасстатза тссастастс АСААССТТСТ ТТСТЗСААЗА
ТЗЗТССАТСО ТЗАЗТЗЗТГС АТЗЗАССТСА АССТСССТТЗ ЗАЗСАЗТССТ ЗЗААСТАСТЗ Τ6Τ03Α33ΑΑ САСАЗАСАСС ТТААТЗОАСТ ТГЗАССАДСС АССАОСТАОС АСТСАССААЗ ТАССТЗЗАЗТ ТСЗАЗОЗААС СТСЗТСАССА ССТТСАТЗАС АСАССТССТТ СТСТСТСТЗС ААГГАССТСА ААСТССТТ30 . Я А Т КОЗУ I А Ь 350 ВЗАЬ НфА ЬАЗ АГРУ ЕРЗ 5ΝΤ АСАСЗССАСЗ ААЗСАСТСТО ТСАТАЗСАТТ ЗООСТСАСАА СА500АССТС ТССАТСААЗС ТТТСССТОСА ОССАТТССТС ТССААТТТТС ААССААСАСТ ТОТОСЗОТЗС ТТСОТСАЗАС АСТАТСЗТАА СССЗАСТЗГТ СТСССТССАО АССТАЗТТСО АААСССАССТ ССЗТААСС-АС АССТТААААЗ ТТСОТТСТЗА
Е '
152 023888
V К Б Т зон ь к с к ν к к Е К Б О Б К <3 Т т Υ О V С 5 К А Р К Р Б 1801 СТСААСТТСА ССТСТССТСА ТТТСААСТСТ АСАСТС-ААСА ТССАААААТТ ССАСТТСААО ССААСААССТ АТССССТСТС ТТСАААВОСТ ТТСААОТТТС
САСТТСААСТ ССАССССАСТ АААСТТСАСА тстсасттст асстттттаа сотсаасттс ссттсгтсса ТАССйСАСАС ААСТТТСССА ААСТТСАААС
СТР А О Т СНСТ V V Б Б Б О Υ Т <3 Т Г) С р С К V Р I 5 £ V д $ ·
Д901 ТТ6С0АСТСС СССАСАСАСА ООТСАССССА СТСТООТСТТ ССААТТССАС ТАСАСТОССА СеОАТОСАСС ТТСЗСАААСТТ сстатстозт састсссттс
ААСССТСАСС СССТСТСТСТ ССАСТССССТ САСАССАСАА ССТТААССТС АТСТСАСССТ СССТАССТСС ААССТТТСАА ССАТАСАССА СТСАСССААС е •БЫВ Б Т Р V С К Б V Т V » Р Р V 3 V А ТА» А К V Б I Е Б ЕРР 2001 АТТОААССАС СТААССССАС ТССОСАСАТТ ССТСАСТСТС ААСССТТТТС ГГГСАСТССС САСССССААС ССТААОСТСС ТСАТТСААтГ ССААССдССС таасттсстс саттсссстс асссстстаа ссаотсасао ттсссаааас ааастсассс стссссетгс соаттссасс астаасттаа ссттсстсас
Е рева γιν ν с к с в ο ο τνη ннн кзса з ι с кат т т т б ·
2101 ТГТССАСАСТ САТАСАТАСТ ССТССССАСА ССАСААСААС АСАТСААТСА ССАСТСССАС ААСТСТССАА ССАССАТТОС САААСССТТТ АСААССАССС
АААССТСТСА СТАТСТАТСА ССАССССТСТ ССТСТТСТТС ГСТАЙТГАСТ ССТСАСССТС ТТСАСАССТТ ССТССТААСС СТТТСССААА ТСТТвЗТСС-С • К С А ОКБ А А Б С СТА МНР С 5 V С СУР Т 5 V С К А V НОУ' 2201 ТСААДОСАОС ОСДЙАСАСТА СССССТСТАС ЙАЗАСАСАСС ТТСССАСТТТ ССАТСДОТТС САССССГСТТ САССТСАСТТ СССААСССТС ТССАТСААСТ
АСТГТССТСС ССТСТСТСАТ СССССАСАТС СТСТСГСТСС ААСССТОААА ССТАСТСААС СТССССАСАА СТСОАСТСАА СССТТСССАС АССТАСТТСА • ρ ΰ а а т к й б р с смз и ι т о сьь саб б б и м ст» а к с 2301 СТТСООАСОА ССАТТССОСТ САСТСТТСОС АЗССАТСТСС ТСОАТААССС ААССАТТССТ ООСООСТСТС СТСТТОТССА ТССССАТСАА ТССТОЗТСАС
СААСССТССТ ССТААССССА СТСАСААССС ТСССГАСАСС АССТАТТОСС ТТССТААССА ССССССАСАО 6АСААСАССТ АССССТАСТТ АССАССАСТО ' йё1еЪеа N51
К 3 I А Б Т Р Б А V 3 3 V Б Б Р Б 5 V N V Н А О Т 6 X Н Я С РАТК·
2401 АССТССАТАС СТСТСАССТТ ТСТСССАСГГ ССАОСАСТТС ТЙСТСТТССГ СТССЗТСААС СТССАСССТС АСАСТСССАТ ССАСССТССА ССТСсСйСТС
ТССА36ТАТС ЗАОАСТССАА АСАЗСЗТСАА ССТССТСААС АСЗАСАЛЗвА САСЗСАСТТС САССТОССАС ТСТСАСССГА ССТСОСАССТ ССАСЗвТСАС <Зё1еЬе<1 №1
ТТТ Е 5 С К Б Г Т ВИС С К 5 С Т I» Р РБК Ϊ (5 Т В 5 О С Η Ϊ С · 25 01 осассассас лэасасозоа ааоттсатаа сайаттост5 стесАжздвс тссассттас сассастосо стассаааст «засаосссст еттсотАтас сатсстсстс тстстсесст ттсаастатт стстаассас сдсотсстоэ асстссаато стсстсассс сатсстттса стстссссса саассатасс йеХес&З N31 »5 2 а •МЕХ КРОК НОВ К Т Б V О 3 О V Я А ΪΝΑ В Μ I О Р Р О Б 6 Б 2601 ТАТССАСАТС АСАССАСАЗА САСАТСАТЗА АААОАСССТС СТССАСТСАС ААСТСААТСС ТТАТААГССТ САТАТСАТТС АСССТТТТСА СТТССЗССТТ
АТАССТСТАС ТСТССТСТСТ СТСТАСТАСТ ТТТСТСССАС САСОТСАСТС ТТСАСГГАСС ААТАТТАССА СТАТАСТААС ТСССААЛАСТ СААСССССАА
153
Приложение 4
Р1У-^КУ(ДргМЕ)/К§У-Р (8Еф ΙΌ N0: 70-72)
С ргоЬв^тт
М 3
АСТАЙТТССС СТОТСТОАСС ТОАСАААСТТ АСТЙСТ6ТТТ СТСАССАТТА АСААСААТТА АСАСАСТССС АеСТОТТТСТ ТАССАСбААС АТСТССАТСТ ТСАТСААОСО САСАСАСТСС АСТСТТТОАА ТСАТСАСААА САСТССТААТ ТСТТЗТТААТ ЮТОТСАСаС ТОСАСАААбА АТССТОСТТС ТАОАССТАСА
С ргоЬе1п • К К Р сор С К $ К А V У О Ь К К О Μ Р К V Ь 51,1 <3 Ь К й АМЬ‘
СГААОАААСС АССАОООССС СОСААСАССС ССССТСТСТА ТГТССГАААА СеС&ЗААТСС ССССОЗТйТТ СТССТТСАТГ ©ЗАСГГААСА 0©ЗСТАТ0ТТ ОАТТСТТТвС тсстсссэзо ссеттстссо сссоасаоат ааасомттт оссссттасо ссососасаа сассаастаа сстсааттст сссоатасаа
С ргоЬе!п
51,1 σ с к α р ι р р ν ъ аььа Р Р К РТА I А Р Τ δ А V Ь О К САОССТОАТС ЗАСООСААОО ООССААТАСС АТТТОЮТТО ССТСТСГГОе ССТТСТГСАО (ЗТТСАСА13СА АТТОСТССОА СССОАОСАЗТ ССТООАТСОА СТСОЗАСТАе СТОССОТТСС ССОСТТАТСС ТАААСАСААС СОАОАСААСС ССААОААСТС СААСТСТСОТ ТААСОАОССТ СФЗСТСОТСА СОАССТАССТ
N53
С ргоЬехп
ИКСУ N К о ТАМ КНЬЬ 5 Г К К Е Ь <3 Т Ь Т 5 А 1 N Й К 5 3 К 0
ТОЗАСАСОТС ТСААСАААСА ААСАОСОАТО АААСАССТГС ТОАОТТТСАА СААООААСТА ОООАССТТОА ССАОТОСТАТ СААТСООСОО АОСТСАААСС АССТСТССАС АСТТОТТТСТ ТТСТСССТАС ТТТСТСОААС АСТСАААСТТ СТТССТТ6АТ СССТССААСТ ССТСАССАТА СТТАССОЗСС ТСГСАСГТТСС
Р ехдпа! ·
N53 с1еа.Уаде
Р1
- К К К О О В I, Ъ I Ь КАК А I Τ Τ I Ь Т АУТ Р С р А 3 β О N I Т 401 ААААОААОСС АвО©ЗОССАО ТТОСТААТСС ТСАААОСААА ТОСААТТАСС АСААТССТСА СТССАОТСАС АТТТТСТТГТ ОСГГСТССТС ААААСАТСАС
ТГГТСТГССС ТССССС6СТС ААССАТТйЗС АСТТТОЭТТТ АССТТААТСС ТОТГАССАСТ САССТСАСТО ТААААСАААА ССААСАССАС ТТТТСТАСТС Р1 • Е Е Р У 0 3 Т С 5 А V 5 К <3 У Ь 5 А 2, Я Т С И Υ Т 3 V ί Τ I Ε Ζ, 5
501 ΤΟΑΑβΑΑΤΤΤ ТАТСААТСАД САТССАОТСС АСТТАОСААА СССТАТСТТА ОТОСТСТСЛЗ ААСТОСТТСС ТАТАССАОТС ТТАТААСТАТ АОААТТААОТ
АСТТСТТААА АТАОТТАСТТ СТАССТСАСО ТСААТССТТГ ССОАТАОААТ САСОАОАСТС ТТСАССААСС АТАТОСТСАС ААТАТТСАТА ТСТТААТГСА Р1
Ν I К Е N К С ВОТ & А К V К Ь Г К □ Ё 1 О К У К N А V Τ Е I, О О X, €01 ААТАТСААОС ААААТААОТО ТААТОСААСА ОАТОСТААОС ТААААТТСАТ ААААСААОАА ТТАОАТАААТ АТАААААТОС ТОТААСАОАА ТТОСАОТТОС
ТТАТАСТТСС ТТТТАТТСАС АТТАССТТет СТАОвАТТСС АТГТТААСТА ΤΤΊΊΌ-ТТСГТ ААТСТАТТТА ТАТПТГАСв АСАТТвТСТТ ААССТСААСО Р1
- МОЗ Τ Р Р Τ Η N К А К А ВОР К Р Μ N УТЬ В В А К К Τ N УТЬ701 ТСАТССАААС САСАССАССА АСАААСААТС САСССАСААО АОААСТАССА АССТТТАТОА АТТАТАСАСТ СААСААТОСС АААААААССА АТСТААСАТТ
АСТАССТТТС СТСТООТССТ ТОТТТСТТАО СТСОСТСТТС ТСТТОАТССТ ТССАААТАСТ ТААГАТСТСА СТТСТТАССС ТГЕТТТТОСТ ТАСАТТСТАА
К К К К К К РЬС РЪЬ О V С 5 А I А 5 О V А V 5 К V Ь Н Ь Е О
ААОСААЙААА АСЗСААААОАА САТТТСТТОЗ ТТТТТТОТТА ОСТОТТССАТ СТССААТССС САЙТОСССТТ ССТСТАТСТА АОСТССТССА ССТАСААОСО ттсаттсттт ТССТТТТСТТ СТАААОААСС ААААААСААТ ссасаасста САССТТАССС СТСАССОСАА ссасатаоат ТССАССАССТ осагсттссс
Р2
Е V В X I К $ АЬЬ 5 Τ В К А V V 3 Ъ 3 Ν О V 5 УОТ 5 X V О О О X СкайтсааСа асатсааадо тсстстаста тссасаааса АООСТСТАСТ САОСТТАТСА ААТСОАЙТТА СТОТСТТААС САССАААЙТС ТГАЗАССТСА СТТСАСТТСТ ТСТАСГПТС АССАЙАТСАТ АОСТСТГТЙТ ТСОЗАСАТСА ОТССААТАОТ ТТАССТСААТ САСАСААТТО СТСОТТТСАС ААТСТССАСТ
Р2
Ν Υ I ϋΚΟ Ь Ь Р 1 V В К 05С 5 I 5 В ΙΒΤ V I Е Р 0 0 К В В К ·
ААААСТАТАТ АСАТАААСАА ТТСТТАССТА ТТСТСААСАА ССАААССТСС АССАТАТСАА АТАТАЗАААС ТСТСАТАСАС ТТССАА.СААА АСААСААСАО ТТТТСАТАТА ТСТАТТТСТТ ААСААТСбАТ ААСАСТГ6ТТ ССТГТСйАСС ТСБТАТАБТТ ТАТАТСТТТС АСАСТАТСТС ААОСТТСТТТ ТСТТОТТСТС
Р2 *ЬЬЕ I Т К £ Р 5 V ВАС УТТР V 5 Τ Υ М Ь Τ N 5 Е 1,1,5 Ь1Н АСТАСТАСАС АТТАССАСбС ААПТАбТСТ ТААТССАСбТ СТААСТАСАС СТСТААЙСАС ТТАСАТСТТА АСТААТАОТО ААТТАТТОТС АГТААТСААТ ТСАТСАТСТС ТААТОСТССС ТТАААТСАСА АТТАССТССА САТТСАТСТС САСАТТССТС ААТСТАСААТ ТСАТТАТСАС ТТААТААСАС ТААТТАОТТА р2 ϋΜΡΙ ΤΝσ окк ЬМЭИ Ννο ΐνκ 005Υ 5ΙΜ 5ΙΙ К Е Е ν 6АТАТСССТА ТААСАААТОА ТСАСАААААС ТТААТСТССА АСААТСТТСА ААТАйТГАОА САОСААА6ГТ АСТСТАТСАТ ОТССАТААТА АААСАООААС статасооат АТКЗТТТАСТ АСIV!'Ш'тс ААТТАСАСйТ ТСТТАСААС? ТТАТСААТСТ СТССТГГСАА ТСАСАТАСТА САОСТАТТАТ ТТТСТССТТС
Р2 • Ь Α Υ V V о ЬРЬУ ονί РТР СИКЬ НТ5 РЬС ΤΤΝΤ КЕСТСТГАССАТА ТОТЙЗТАСАА ТТаССАСТАТ АТССТСТТАТ АСАТАСАССС ТбТТООАААС ТАСАСАСАТС СССТСТАТйТ АСААССААСА СААААОААСС АОААТССТАТ АСАТСАТСТТ аатсйтоата ТАССАСААТА ТСТАТСТООО АСААССТТТС АТеТЙТСТАС ©ЗОАСАТАСА ТСТТЭЗТТОТ СТТТТСТТСС
Р2 • 5 м 1 сьтк ТОЙ ему СОНА С 5 V 5РР Р О А Е ТСК У03 СТССААСАТС ТОТТТААСАА СААСТСАСАС АССАТССТАС ТСТСАСААТО САТСАТСАСТ АТСТТТСТТС ССАСААССТО АААСАТСТАА АОТТСААГСА САССТТСТАС АСАААТТСТТ СТТСАСТОТС ТССТАССАТС АСАСТСТГАС ОТССТАСТСА ТАСААДЗААС СЗТСТТССАС ТТТСТАСАТТ ТСААСТТАСТ
Р2
N К V Р СОТ Μ N 5 ЬТЬР 3ΕΙ и 1 С ΗνϋΙ рыр ΚΥΟ С К I м ААТССАОТАТ ТТТСТОАСАС ААТСААСАОТ ТТААСАТТАС СААОТЙАААТ АААТСТСТСС ААТСТТОАСА ТАГТСААССС САААТАТОАТ ТСТААААТТА ГГАССТСАТА АААСАСТСГС ТТАСТТСТСА ААТТеТААТС «ЗТТСАСТТТА ТТТЛЗАСАСС ТТАСААСТСТ АТААЙТГООО ©ТСТАТАСТА АСАТТТТААТ
Р2
ТЗК ΤϋΥ 555У ΙΤ5 ЬСА 1У5С Υ С К ТКС Т А 5 Н К N К · ТСАСТТСААА ААСАСАТСТА ЙЗСАОСТССС ТТАТСАСАТС ТСТАОТАбСС АТТЙТСТСАТ ССТАТОССАА ААСТАААТСТ АСАОСАТССА АТАААААТСС АСТСАМТТТ ТТСТСТАСАТ ТССТССАСОС ААТАОТОТАЗ АОАТССТСОС ТААСАСАСТА СОАТАССОТТ ТТЙАТТТАСА ТСТССТА©ЗТ ТАТТТТТАОС
Р2 • С11 К Τ Р 5 ΝΟ€ Οϊν 5ΝΚΟ МОТ V 5 V СКТЬ ΥΥΨ N К О ТОСААТСАТА ААСАСАТТТТ СТААСбССТС ССАТТАТСТА ТСАААТАААЙ ©ЗАТОЗАСАС ТСТЗТСТбТА ©ЗТААСАСАТ ТАТАТТАТСТ АААТААОСАА АССТТАЙТАТ ТТСТОТАААА САТТССССАС ССТААТАСАТ АСТТТАТТТС ССТАССТСТС АСАСАСАСАТ ССАТТСТСТА АТАТААТАСА ТТТАТТССТТ
Р2
В С К 5 ьуу к с Е Р I I Ν ΡΥϋ РОУ РР50 ЕРО Α$Ι 507Ν СААСбТАААА СТСТСТАТСТ ААДАССТСАА ССААТААТАА АТТТСТАТСА СССДТТАСТА ТТССССТСТС АТСААТТТСА ТЗСАТСААТА ТСТСААСТСА
- 154 023888
СТТССАТТГТ САСАСАТКСА ПТГССАСТГ ОБТТАТТАТТ ТАААЗАТАСТ СЭЗТААТСАТ ААОООСАБАС ТАСТГАААСТ АССТАЕТТАТ АОАБТТСАСТ Р2
ТМ. Οατη&ίη
Е К I Νζ}5 БАХ! К К 3 & В Б ' Б Η N V МАЙ К 5 Т Т К I Μ ΙΤΤ
АСБАБААСАТ ТААССАСАЙС СТАССА.ТТТК ТТСБТАААТС СБАТЙАА.ТТА ТТАСАТААТЗ ТАААтеСКЙ ТМАТССАСС АСАААТКТСА ТБАТААСГАС ТССТСТТСТА АТТССТСТСС ЙАТСОТАААТ ААОСАТТТАС ССТАСТТДЛТ ААТБТАТТАС АТТТАС6АСС АГТТАББТБй ТЙГТТА7А0Т АСТАТЛЗАТС
ТО 0оша1п
СуЬэрБавтоБс Та11 ►III V ! I V I Б Б 5 Б I А V Б Б Б Б Ϊ СКА К 5 Т Р УТЬ 3 К О ТАТААТТАТА БТБАТТАТАО ТААТАТТСТТ АТСАТТДАТТ ССТСТТООАС ТбСТСТГАТА СТСТААЙССС АОААБСАСАС САСТСАСАСТ ААБСАААБАТ АТАТТААТАТ САСТААТАТС АТТАТААСАА ТВДТААТТАА ССАСААССТС АСБАОААТАТ САСАТТССОБ ТСТТССТОТС ОТСАбТСТОА ТТСОТТТСТА
РМОУ 2А
Οοπβίη οί ΚΝν в {5ρ1ίΧ)
- СуХор1азтп1с ТаЛ1
Тхап&тетпЪг-але рге Е/«$1 вХдца!
О Б 5 <3 Т N N БАР 5 N N ? ОБЬ К Б А С О V Е 3 N Р С Р А К О К 3
СААСТОАЯТБ СТАТАААТАА ТАТТССИТТТ АОТААСААТГ ТГСАТСТОСГ САААСГГССА СОСБАТОТАе ААТСАААТСС ТБСАСССБСС С6С0АСАССТ СТТСАСТСАС САТАЗТГАТТ АТААОЗТААА ТСАГГБТТАА ААСТАБАССА СТТТСААССТ ССССТАСАТС ТТАБТТТАСС АССТОССССС ССССТСТССА
N31
ТгалвгпетЬгапе сЗотгя1п о£ Н№/ Е (врИХ) • I А Ь ТРЬ А V С С У Б Б Р Б 3 V N V К АОТ ОСА ΙΟΧ3 КО ссдтвдетст сассттгстс есдеттойАз басггстсст сггсстстсс стсаассгбс АСССТСАСАС ТСССТСТССС АТАСАСАТСА ССССССАА СБТАТСБАБА БТ6САДДЗА0 СОТСААССТС СТСААБАССА БААББАБАСС САСТТ6САСО ТСССАСТБТО АСССАСАСОО ТАТСТСТАОТ СББСССТТ
Ρΐν-\Λ/Νν(Δ0ρΓΜΕ)/Κ5ν-Ρ (ЗЕОЮ N05: 73-75) ά$1«Χβι3 С ргоСегп
АБТЙОТТССС СТСТСТСАСС ТЗАСАААСТТ АСТАСТСТТГ СТСАССАТТА АСААСААГГА АСАСАЙТССБ АССТСТТТС? ТАЙСАССААС АТСТССКГСТ ТСАТСААбОЗ ОАСАСАСТСв АСТОТТКЗАА ТСАТСАСААА САСТССТААТ ТетТСТГААТ ТСТСТСАСБС ТСБАСАААБА АТССТССТТС ТАЙАОСТАСА
С рсоЪе1&
N33 с1«ауаде
- ККР СОР С К 5 К А V N М Б К КОМР КУБ 5 Б I 5 Б К С К К К 101 СТААСАААСС АССАСССССС СБСААЙАБСС БОССТСТСАА ТАТЗСТАААА СОСССААТСС СССБССТБТТ СТССТТБАТТ ОСАСТТААСС ААААСААССБ САГТСТТТСС ТССТСССССС ССБТТСТССС ССССАСАСТТ АТАССАТТТТ СССССТТАСС БОССССЛСАА САССААСТАА ССТ6ААТТСС ТГТТСТТССС
Р зхдпа!
N33 с1еауаде
Р1 асссссссас ТТССТААТСС тсаааосааа тссааттасс асаатсстса стбсастсас атттгстттт ОСТТСТССТС ААААСАТСАС ТОААСДАТТТ
ТСССССССТС ААССАТТАСС АБТТТССТТТ АССТТААТСЗС ТСТТАЗСАСТ ОАС6ТСАОТС ТААААСАААА ССААСАССАЙ ТТТТСТАСТС АСТТСТТААА
Р1
Υ О 3 Т СЗА V 3 К Б Υ Б 3 АБЕ Т С И У Т 5 V ΙΤΙ ЕБЗ ΝΙΚΕ
ТАТСААТСАА САТ6САСТ6С АОТТАбСААА СССТАТСТТА СТОСТСТБАБ ААСТОСГГСС ТАТАССАСТС ТТАТААСТАТ АСААТТААСТ ААТАТСААСС
АТАСТТАОТТ ОТАССТСАСС ТСААТССТТТ ССЙАТАСААТ САОЗАОАСТС ТТОАССААСС АТАТССТСАС ААТАТТСАТА ТСТТААТТСА ТГАТАБТТСС
Р1 • N К С N С Т О А К V К Б I КОВ БОКУ К N А У ТЕ Б О Б Б МОЗ аааатаастс таатссааса оатсстааоз тааааттсат аааасаабаа ттайатааат АТАААААТБС ТСТААСАОАА ТТССАСГГОС ТСАТССАААС
ТГТТАТГСАС АТТАССТТОТ СТАССАТТСС АТТТТААСТА ТТТТСТТСТТ ААТСТАТТТА ТАТТТТТАСС АСАТТСТСТТ ААССТСААСС АСТАСБТТТС
Р1
-ТРР Т N N К АКК ЕБР ΚΡΜΝ УТБ N N Α К К Т N УТБ 5 К. X
САСАССАССА АСАААСААТС САСССАСААВ АСААСТАССА АССТТТАТСА АГТАТАСАСТ СААСААТССС АААААААССА АТСТААСАТТ ААОСААСААА
СТСТССТССТ ТСТТТСТТАС СТСОСТСТТС ТСТТСАТССТ ТССАААТАСТ ТААТАТБТСА СТТСТТАССС ТТТТТТТССТ тасаттстаа ТТССТТСТТТ
Р1
Р2
ККНК Р Б С РББ С V С 3 А I А 3 С V А V 3 К УБН БЕС Е V N К АОСААААСАА САТГГСТТСС ТТТТТТОТТА ССТОТТССАТ СТССААТОЗС САСТОЗССТТ ССТОТАТСТА АОСТССТССА ССТАСААОСС СААбТСААСА ТССТТТТСТТ СТАААОААСС ААААААСААТ ССАСААССТА ОАС5ТГАЗСО ОТСАССОСАА СОАСАТАБАТ ТССАОЗАССТ ББАТСТТССС СТТСАСТТСТ
Р2
- I К 5 А Б Б 5 Т М К АУУ $БЗ N С V 5 УБТ ЗКУ БОБК N У I
АБАТСААААБ ТБСТСТАСТА ТССАСАААСА АООСТЗТАБТ СЙЗСТТАТСА ААТООАОТТА СТСТСТТААС САССАААОТС ТТАСАССТСА ААААСТАТАТ ТСТАСТТТТС АС6АБАТОАТ АБСТБТТТСТ ТССОАСАТСА ЙТСБААТАвТ ТТАССТСААТ САСАйААТТЙ СТСЙТТГСаС ААТСТЕЭБАЗТ ТТТТСАТАТА
- Р2
-око Б Б Р I УЫК 0 5 С 3Ι3Ν ΙΕΤ УХЕ РОфК ΝΝΚ ББЕ
А5АТАЙАСАА ТТОТТАССТА ТОТБААСАА ЙСАААБСТБС АБСАТАТСАА АТАТАБАААС ТСТБАТАБАБ ТТССААСААА АБААСААСАС АСТАСТАСАО ТСТАТГГеТТ аасаатсоат ААСАСТТСТТ СБТТТСБАСС ТССТАТАЗТТ ТАТАТСТТГС АСАСТАТСТС ААСаТТБТТТ ТСТТСТТБТС ТСАТСАТСТС
Р2
ΙΤΚΞ Р 5 V N А С УТТР V 5 Т УМБ ΤΝ5Ε ББЗ Ь1К ϋΜΡΙ
АТТАССА©СЮ ААТТТАБТБТ ТААТБСАСБТ СТААСТАСАС СТСТААССАС ТТАСА7БТТА АСТААТАБТС ААТТАТТСТС АТТААТСААТ БДТАТБССТА ТААТБЙТССС ТТАААТСАСА АТТАССТССА САТТСАТСТС САСАТГССТС ААТБТАСААТ ТОАТТАТСАС ТТААТААСАБ ТААТТАСТТА СТАТАССБАТ
Р2
- Т N О ОКК I» М 3 N N V О I V К 005Υ $ΙΜ 311 КЕЕУ Б Α Υ
ТААСАААТБА ТСАБАААААС ТТААТБТССА АСААТСТТСА ААТАСТТАСА САССАААОТТ АСГСТАТСАТ СТССАТААТА АААЗАООААС ТСТТАБСАТА • АТТБТТТАСТ АСТСГГТТТС ААТТАСАССТ ТСТТАСААБТ ТТАТСААТСТ СТССТТТСАА ТБАБАТАБТА САББТАТТАТ ТТТСТССТТС АСААТОЗТАТ Р2
- 155 023888
ТСТАСТАСАА ТТАССАСТАТ АКЗСТСТТАТ АСАТАСАССС ТСТТСОАААС ТАСАСАСАТС СССТСТАТСТ АСААССААСА СААААСААСС ОТССАДСАТС АСАТСАТОТТ АДТССТОАТА ТАССАСААТА ТСТАТСТССС АСААССТГТС АТСТСГСТАС СООАСАТАСА ТСТТССТТОТ СТТТТСТТСС САССТТСТАО
Г2
С 1. Т Я Т ϋ К О « Υ С О N А <3 5 V 5 Г Р Р О А Ξ ТСК V О 3 МАУР
ТОТТТААСАА СААСТСАСАС АЙОАТСОТАС ТСТЙАСААТЙ СДЙйАТСАОТ АТСТТТСТГС ССАСДАЙСТО ААДСАТОТАА АОТГСААТСА ААТССАЕТАТ АСАААТТСТТ СТТСАСТСТС ТССТАССАТС АСАСТСТТАС ОТССТАОТСА ТАСАААЙААЙ ОСТСТТССАС ТТТСТАСАТТ ТСААЙТТАСТ ТТАССТСАТА
Р2 • СОТ МКЗ ЬТЬР 3 Ε I МЬС Ν V О I Р Ν Р К Υ О С К I Μ Т 5 К · ТТТЕТОАСАС ААТСААСДСТ ТТААСАТТАС СААСТСАААТ АААТСТСТСС ААТСТТЗАСА ТАГТСААССС САААТАТСАТ ТСТААААТТА ТСАСТТСААА АААСАСТОТС ТТАСТТОТСА ААТТОТААТС СТТСАСТТТА ТТТАОАОАСО ТТАСААСТОТ АТААСТТСОЗ СТТТАТАСТА АСАТТТТДДТ АСТОААСТТТ
Р2 • Т ϋ V 833ν X Т 3 Ь <3 А I V 3 С Υ С К Т К С Т А 5 N К N Я СХХ ААСАОАТСТА АССАССТССС ТГАТСАСАТС ТСТАйОАОСС АТТСТСТСАТ ССТАТСОСАА ААСТДДАТСТ АСАССДТССА АТАААААТСО ТООААТСАТА ТТСТСТАСАТ ТССТССАООС ААТАОТСТАй ДСАТССТСОС ТААСАСАСТА ССАТАССОТТ ТТСАТТТАСА ТСТССТАССТ ТАТТТТТАВС АССТТАСТАТ
Р2
К Т Р 5 N00 О ϊ V 5 N К О МОТ УЗУ 5 N Т Ь Υ Υ V N К О Е О К 3
ААЙАСАТТТТ СТААСССОТС СЙАТГАГСТА ТСААДТААДО ССАТСОАСАС ТСТСТСТСТА С6ТААСАСАТ ТАТАТТАТСТ АААТААОСАА ОААСОТААДД ТТСТСТАААА САТТОСССАС ОСТААТАСАТ АСТТТАТТТС ССТАССТСТС АСАСАСАСАТ ССАТТСТСТА АТАТААТАСА ТТТАТТССТТ СТТССАТХТТ
Р2
Ь Υ V КОЕ £> I I И Р Υ О р ь V Р Р 5 О ЕГО АЗТ 3 <3 V N Ε X I СТСТСТАТСТ ААААССТОАА ССААТААТАА АТТТСТАТСА СССАТТАЗТА ТГССССТСГО АТОААТТТСА ТОСдТСААТА ТСТСААСТСА АССАОААОАТ САСАСАТАСА ТТТТССАСТТ ОСТТАТТАТТ ТАААСАТАСТ СйОТААТСАТ ААООООАСАС ТАСТТАААСТ АСОТАСТТАТ АСДЕТТСДОТ ТОСТСТТСТА тм 0ом&1л •N05 Ь А Р I Я К 5 ϋ Е Ь Ь Η Ν V ΝΑΟ К 5 Т ΤΝΙΜ ΙΤΤ III ТААССАСАСС СТАОСАТГГА ТТССТАДАТС ССАТСААТТА ТТАСАТААТО ТАААТОСТОС ГАААТССАСС АСАААТАТСА ТСАТААСТАС ТАТААТТАТА АТТСОТСТСО СДТССТАААТ ААОСАТТТАС ОСТАСТТААТ ААТСТАТТАС АТТТАСОАСС АТГТАОСТОС ТСТГГАТАСТ АСТАТТСАТС АТАТТААТАТ
ТМ ΙΧπιιΑίη
Сухор1азтп1С Та11
V I I ν 1 ь ί, 5 Ь I А V 5 Ь Ь Ь Υ СКА К 5 Т Р УТЬ 5 К й О Ь 5 С СТСАТТАТАО ТААТАТТСТГ АТСАТТАКГТ ССТСТТООАС Т6СТСТТАТА СГОТААСССС АВААССАСАС СА5ТСАСАСТ ААССАААОАТ СААСТСАЙТО САСТААТАТС АТТАТААСАА ТАСТААТТАА СЙАСААССТб АССАОААТАТ САСАТТССОС ТСТТССТСТС СТСАСТСТСА ТГСОТТТСТА СТТСАСТСАС
РМОУ 2А
Сус.ор1ада»1с Та11 тоетЬгапе бошахп о£ ΗΝν Е 1зр11с) рге Ε/Ν5Ι э1дпа1 • I Ν Ν 2 А Р 5 N N Р рЬЬ К Ь А б О У Е 3 N Р СРА Я О Е 3 I А Ь СТАТАААТАА ТАТТССАТТТ ДСТДАСДАТТ ТТСАТСТССТ САААСТТССА СССОАТОТАС ААТСАААТСС ТССАСССОСС ССОСАСАССТ ССАТАЙСТСТ САТАТТГАТТ АТААССТААА ТСАТТСТТАА ААСТАСАСС-А ОТТТБААССТ ССОСТАСАТС ТТАОТТТАСС АССТССОСОС С-СССТСТССА ССТАТССАОА
ТгапзгаегаЬгапе «2ота1п οί ННУ Е (ер!±1:) №1 • Т Р Ь А V С Е УЬЬ РЪЗ V Ν V Н КОТ ОСА 1015 КОЕ Ь Я САССТТТСТС ОСАСТТССАО САСТГСТССТ СТТССТСТСС СТСААССТОС АСССТОАСАС ТССОТОТССС АТАЙАСАТСА СССОССААСА ССТСАЙА СТОСАААОАО ССТСААССТС СТСААСАССА ЙААССАСАСС САСТТССАСС ТССйАСТОТО АСССАСДССО ТАТСТСТАОТ ССССССТТСТ ССАСТСТ
Р1У-¥УМУ(ЛС)/К5У-Р (5ЕО10 N05:76-78)
ОАТССТААТА ССАСТСАСТА ТАОДЕГАСГТ сесстзтетс АССТСАСААА СТТАЙТАОТО ТГТСТСадСА ТТААСААСАА ТТААСАСАСТ еСОАССТСГТ ΟΤΑΟΟΑΊΤΑΙ ССТОйСТСАТ АТеТСАГСАА ССССАСАСАС ТСОАСтеТТТ СААТСАТСАС АААСАСТССТ ААТТОТТСТТ ААТТСТСТСА СССТСОАСАА
Ы-Бесттйпи® о£ С м зкк вес река вау ммь хвои рву ьзь ТСТТАОСАСО ААОАТСТССА ТСТСТАВДАА АССА13<ЗА©ЗС ССССССАДСД СССОСССТСТ СААТАТОСТА АААОЗСССАА ТССССССССТ ОТТСТССТТС АЗААТССТСС ТТСТАСАССТ АСАСАТТСТГ ТССТССТССС ССССССТТСТ СССССССАСА 6ТТАТАССАТ ТТТООЗССТТ АСССОССССА СААСАСОААС Н-Е.елп1пиа οί С р зхдпа! .
N53
Р1
16ЬК ОКК ЯСС ΕΙιΙ.1 ΟΚΑ ΝΑΙ ТТ1Ь ТАУ ТРС РА5С
АТТССАСТТА адСААААСАА СССАССОбСС САСТТССТАА ТССТСААА6С АААТССААТТ АССАСАКТСС ТСАСТ0САОТ САСАТТТТСТ ТГГеСТТСТС
ТААССТСААТ ТССТТГТСТТ СССТСССССС СТСААССАТТ АСОАСТТТСС ТТТАССТТАА ТООТбТТАОС АСТСАССТСА СТСТААААСА АААСОААСАС
Р1 • ΟΝΙ ТЕЕ ΡΥ03 ТС5 А У 5 ΧβΥΕ 8 А Ь ЕТС Μ Υ Т 5 УХТ СТСААААСАТ САСТСААСАА ТТТТАТСААТ САДСАЮСАС ТОСАСТТАСС АААСЙЗСТАТС ТТАЙТССТСТ САОААСТСОТ ТОбТАТАССА СТСГГТАТААС САСТТТТСТА СТСАСТТСТТ ААААТАСТТА СТТеТАССТС АСОТСААТСС ГТТСССАТАС АДТСАСОАОА СТСТТСАССА АССАТАТССТ САСААТАТТС
ΡΊ
401 ТАТАСААТТА АСТААТАТСА АССААААТАА СТСТААТССА АСАСАТССТА АССТААААТТ САТААААСАА СААТТАСАТА ААТАТААААА ТССТСТААСА АТАТСТТЛАТ ТСАТТАТАСТ ТССТПТДТТ САСАТТАССТ ТОТСТАССАТ ТССАТГГТАА СТАТТТТСТТ СТТААТСТАТ ΤΤΑΤΑΓΠΤΤ АССАСАТТСТ
Р1
ВЬ01 ЕМО 5ТР Р т N N ЙАН КВЬ РКРМ ΝΥΤ 1.ΝΝ АКкТ 501 СААТТССЙЗТ ТССТСАТССА АА13САСАССА ССААСАААСА АТОЗА5ССАС АДЗАСААСТА ССДАССТТТА ТСААГТАТАС АСТСААСААТ СССААААААА
СТТААССТСА АСОАСТАССТ ТГССТСТТЭТТ ССТТСГГТ&Т ТАЗСТОЗСТС ТТСТСТГ6АТ ССТТССАААТ АСТТААТАТС ТСАСТТСТТА СССТТТТГГТ Р2
ΕΊ
- МУТ ЬЗК ХККХ ΚΡΙι ΟΡΙι ЬСУС 5 А I А 5 С V А V 5 КУБ ССААТСТААС АТТААеСААС ААААЯСАААА СААЙАТТТСТ ТССТПТТТС ТТАССТСТТС САТСТССААТ ССССАОТССС СТТССТСТАТ СТААССТССТ ОСТТАСАТТС ТААТТССТТС ТТТТССТТТТ СТТСТАААОА АССААААААС ААТССАСААС СТАОАССТТА ССОСТСАССС СААССАСАТА САТТССАССА
Р2
ССАССТАСАА ССССААСТСА АСААОАТСАА ААОТОСТСТА СТАТССАСАА АСААСССЮТ АСТСАОСТТА ТСАААТСОАС ТТАСТСТСТТ ААССАССАА* ССТСОАТСТТ ССССТГСАСТ ТОТТСТДОТГ ТТСАССДСАТ САТАССТСТ! ТСТТСССАСД ТСАСТССААТ АСТТТАССТС ААТСАСАСАА ТТССГССТТТ
Р2
- 156 023888
СТСТТАОАСС ТСАААААСТА ТАТАОАТААА СААТТСТТАС СТАТТОТСАА СДДОСАААСС ТССАОСАТАТ САААТАТАСА ААСТСТСАТА САСТТССААС САСААТСТСС АЗТТТТТСАТ АТАТСТАТТТ СТТААСААТС САТААСАСТТ ЗТТССТТТСС АСЯТССТАТА СТТТАТАТСТ ТТСАСАСТДТ СТСААССТТС
Р2 • К N К аьь ΕΙΤΗ ε ρ ε V N А с ν т т Р V 5 ΤΪΜ Ь Τ Ν 5 ЕЬЬ ААААСААСАА САСАСТАСТА САСАТТАССА еСОААТТТАб ТЯТТААТОСА ЯСТСТААСТА САССТСТААС САСТТАСАТС ТТААСТААТА СТЯААТТАТТ ТТТТСТТСТТ СТСТСАТОАТ СТСТААТОСТ СССТТАААТС АСААТТАССТ ССАСАТТСАТ СТСОАСАТТС ЯТСААТСТАС ААТТСАТТАТ САСТТААТАА
Р2 • 5 Ь I Ν О Μ Ρ I Т Ν О 0 К. К Ь М 3 Ν Ν V ¢17 Й 0 О 3 Υ 3 I М 3 X СТСАТТААТС АДТОАТАТвС СТАТААСААА ТОАТСАСААА ААСТГААТСТ ССААСААТСТ ТСАААТАОТТ АСАСАССААА СТТАСТСТАТ САТСТССАТА СДСТААТТАЯ ТТАСТАТАСС САТАТТСТТТ АСТАОТСТТТ ТТСААТТАСА ССТТСТГАСА аотттатсаа ТСТЯТССТТТ СААТСАСАТА СТАСАССТАТ
Г2
I К Е Е V Ь А Υ V V <2ЬРЬ Υ С V I О Т Р С » К. ЬНТ 3 Р Ь СТТЙ атаадаоася аастсттасс ататстаста сааттассас ТАТАТОСТ6Т татасатаса ссстсттяса аастасасас атсссстста тстасаасса ТАТТТТСТСС ТТСАСААТСС ТАТАСАТСАТ ЯТТААТООТЯ АТАТАССАСА АТАТСТАТОТ ОСКЗАСААССТ ТТСАТС-ТСТС ТАСОЯЗАСАТ АСАТОГГОСТ
Р2
- Т К Б Я 5 Μ I С X Т КТО Я О И УСОМ А О 5 V 3 Р Ρ Р О А ЕТС АСАСААААОА АЯСЯТССААС АТСТСТТТАА СААЯААСТОА СА&АССАТОО ТАСТЯТСАСА АТЯСАООАТС АСТАТСТТТС ТТСССАСААЯ СТЯААДСАТЯ ТСТЯТТТТСТ ТСССАЯСТРЗ ТАЗАСАААТТ СГТСТТОАСТ СТСТССТАСС АТСАСАСТЗТ ТАССТССТАС ТСАТАСАААО ААСССТСТТС САСТГТСТАС
ТАААЯТТСАА ТСАААТСОАС ТАТТТТСТОА САСААТЕААС А6ТТТААСАТ ТАССААСТСА ААТАААТСТС ТССААТСТТС АСАТАТТСАА ССССАААТАТ АТТТСААС-ТТ АЗТТТАССТС АТААААСАСТ СТСТТАСТТС ТСАААТТСТА АТЗСТТСАСТ ТТАТПАОАС АССТТАСААС ТСТАТААСТТ ССССТТТАТА
Р2
О С К I И Т 5 КТО V 5 5 5 V I Т 3 Ь С А I V $ СУС К Т К СТАЗ
ОАТГЗТАдАА ТТАТСАСТТС АААААСАЯАТ СТААЯСАЯСТ СССТТАТСАС АТСТСТАЯОА СССАТГСТСТ САТССТАТСС СААААСТААА ТСТАСйЭСАТ СТААСАТТТТ ААТАСТСААЙ ТТТТТСЗТСТА САТТССТССА СССААТАСТС ТАСАЯАТССТ СОСТААСАСА СТАССАТАСС СТТТТСАТТТ АСАТСТСЗТА
Р2 • к к и я σ т ί к т р. а к а с э υ ν $ ν к с м о т ν ε ν с к т ь γ υ · ССААТАДААА ТССТСЯААТС АТАААСАСАТ ТТТСТААССС ЯТСССАТТАТ СТАТСАААТА ААЕССАТССА САСТСТСТСТ ОТАССТАДСА САТТАТАТТА ССТТАТТТТТ АЗСАССТТАС ТАТТТСТОТА АААСАТТССС САСеСТААТА САТАСТТТАТ ТТСССТАССТ СТСАСАСАСА САТССАТТСТ СТААТАТААТ
ТСТАААТАА6 СААСААССТА АААЯТСТСТА ТСТААААССТ СААССААТАА ТАААТТТСТА ТСАСССАТТА СТАТТССССТ СТСаТОААТТ ТОАТЗСАТСА АСАТТГАТТС СТТСТТССАТ ТТТСАСАСАТ АСАТТТГССА СТТСОТГАТТ АТТТАААСАТ АСГТСССТААТ САТААССССА ОАСТАСТТАА АСТАСЗТАС-Т
ТЛЗ ϋσπιβίη
I 5 О V КЕК I И О 5 Ь А Р 1 К К ЗОЕ Ь Ь Η N V N А С К 5 Т Т Ν I ·
1701 АТАТСТС ААС ТСААССАСАА САТТААССАЯ аясстаосат ттатгсотаа атссоатсаа ТТАТТАСАТА атстааатсс тжзтааатсс АССАСАААТА
ТАТАСАОТТС АйТТОСТСТГ СТААТТОСТС ТСССАТСЯТА ААТААССАТТ ТАСССТАСТТ ААТААТСТАТ ТАСАТТТАСС АССАТТТДСС ТССТЗТТТАТ ТМ Оота1л
СуТор1азтХс ТаИ
Μ - I Т ΤΙΣ XVII VII Ь 3 Ь I А V С ЬЬЬ Υ С к А К 5 Т РУТ·
157 023888
ТСАТСАТААС ТАСТАТААТТ АТАСТСДТГА ТАСТААТАТТ СТГАТСАТТА АТТОСТСТТС бАСТбСТСТТ АТАСТСТААб СССАбААОСА САССАСТСАС АбТАсТАТТб АТбАТАТТАА ТЛТСАСТААТ АТСАТТАТАА СААТАбТААТ ТААССАСААС СТбАССАОАА ТАТ6АСАТТС СбСТСТТССТ СТССТСАСТС
ГМОУ 2А
Су£ор1а5пй.с Таз.1 • Ь 3 К О О Ь 5 С I Ν 14 I А Ж 3 N N Ж Р Ь Ь К Ъ А б ϋ V В 3 N РОР 1901 АСТААВСААА сатсаасгоа стсстатаал таататтсса ттта(зтааса аттттсатст сстсааасгт ссасйссатс твдаатсааа тсстосассс
ТСАТГССТТТ СТАСГКЗАСТ САССАТАТТТ АТТАТААСет АААТСДТТбТ ТААААСТАСА ССАЯГГТСАА ССТССССТАС АТСТТАСТТТ АббАССТССС · ргМ
С/ргМ з1дда!
6СКТ С I А V Μ I С Ь I А СУС А V Т Ь 5 N Р оси: V Μ Μ Т V N А
ОЗАбСАААбА СССбТАТТбС АбТСАТбАГГ ббССТСАТСб ССТССбТАСб АбСАСТТАСС СТСТСТААСТ ТССААСССАА ССТСАТСДТС АСОСТАААТб ССТССТТТСТ ССССАТААСС ТСАбТАСТАА ССОСАСТАОС СОАСССАТСС ТСбТСААТбб 6АСАОАТТ6А АССТТСССТТ ССАСТАСТАС ТСССАТТТАС ргМ • Т ϋ V τον ΙΤΙΡΤΑΑ ОКЫ Ъ С I V вам о ν с υ м с р о Т I · СТАСТОАССТ САСА6А.ТСТС АТСАССАТТС СААСАбСТОС Т9СААА6ААС СТАТОСАТТС ТСАОАбСААТ СОАТОТСОСА ТАСАТбТССб АТСАТАСТАТ САТСАСТССА ОТСТСТАСАС ТАбТССТААО ОТТбТОЗАСС АССТТТСТТС САТАСЗТААС АбТСТСбТТА ССТАСАСССТ АТбТАСАССС ТАСТАТСАТА ргМ •ТУЕ С Р V Ь 5 А С Ν0Ρ ΕΡΙΟ СМС Т К 5 А V У V В У б Я С Т САСТТАТСАА ТССССЙЗТОС ТСТССбСГОб ТААТОАТССА ОААбАСАТСО АСТбТТОбТС САСАААОТСА ССАПТСТАСС ТСАбСТАТОб ААОАТОСАСС 6ТОААТАСТТ АСбОСТСДСС АСАОСССАСС АТТАСТАббТ СТТСТОТАОС ТбАСААССАС бТСТТТСАбТ СОТСАСАТОС АбТССАТАСС ТТСТАСОТОб ргМ
К Т К Н ЗЕК ЗКН 3 Ь Т V О Т Н СЕ5 Т Ь А N К К С АИМ Р 5 Т К ААбЛСАСбСС АСТСААОАСО САбТСООАОб ТСАСТСАСАС ТССАСАСАСА СбСАСАААОС АСТСТАОССА АСААОААССС бОСГТССАТС САСАССАССА ТТСТСТОСОО ТбАСТТСТСС 6ТСА6ССТСС АбТОАСТеТС АСбТСТбГСТ СССТСТТТСС ТСАОАТСОСТ ТОГТСТТССС ССбААССТАС СТСТСОТСОТ ргМ • АТЕ У Ь V КТЕЗ Μ I Ь К N Р О У А Ь V А А V I б Μ М Ь <3 5 N Т АббССАСААб ОТАТТТОСТА ААААСДСААТ САТСОАТСТТ САССААСССТ ОбАТАТОССС ТОбТОбСАОС СОТСАГТббТ ТООАТбСТТС ССАССААСАС ТССбОТСТГС САТАААССАТ ТТТРЗТСТГА ОТАССТАСАА СТССТТОббА ССТАТАСООС АССАССОТСС ССАСТААССА АССТАСбААС ССТСОТТСТО ргМ • мок ν V Р V У Ь Ь Ь Ь V А р А У 3 Ж N С Ь С М 3 N К О Ж Ь Е С V САТССДбАСА СТТСТСТТТС ТССТОСТАТТ ССТТТТССТС СССССАССГГ АСАССТТТАА СТСССТТВДА АТСАССААСА САСАСТТСТТ ССААССАСГС СТАССТСТСТ СААСАСАААС АОСАСОАТАА ССААААССАС СОбббТССАА ТСТССАААТТ ОАСССААССТ ТАСТССТТСТ СТСТСААОАА ССТТССТСАС ргМ
О А Т И V о I V Ь Е С О 3 С V Т I К 5 К Р К Ж Т I Р УКМ М К Μ Е ТСТООАбСАА САтаЗСТСОА ТТТОйТТСТС СААСОССАСА ОСТОССТСАС ТАТСАТОТСТ ААООАСААОС СТАССАТСОА ТСТбААбАТС АТОААТАТСС АбАССТСбТТ ОТАСССАССТ АААССААОАВ СТТСООСТСТ ССАСОСАСТС АТАСТАСАСА ТГССТбТЕСб ОАТЗСТАССТ АСАСТТСТАС ТАСТТАТАСС • А А N Ь А В V Я $ У С У Ь АТУ 3003 Т К А А С Р АМОЕ А Η N АСОССОССАА ССТОССАОАб СТССССАСТТ АТТОСТАТТТ ОбСТАСССТС АССОАТСТСТ ССАССАААбС ТССОТССССС ОССАТОСОАС ААССТСАСАА ТСССССООТТ СОАССОТСТС САООССТСАА ТААСбАТААА ССОАТООСАО ТСбСТАСАСА СОТООТТТСО АСОСАССООС СССТАСССТС ТТССАОТОТТ
- 158 • О К К. А О Р А РУС К <3 С V V О Ь С М С ясс СЬРС К С 5 I о т 2801 ТОАСАААССТ ОСТСАСССАС СТТТТСТОТС САСАСААССА СТССТССАСА СССССТССС© СААСОССТСС СОАСТАГТТС ОСАААОСААС САТТСАСАСА
АСТСТТТССА ССАСТСССТС СААААС&САС ©ТСГСТТССТ САССАССТСТ СССССАСССС СТТССССАСС ССГСАТАААС ССТТТССТТС СТААСТСТСТ Е
САКР А С 3 Τ X А 1 3 К Т I Ь К Е N Г X Υ Е V А I Р V Н <3 Ρ Τ Т У
2901 ТССОССАААТ ТТСССТССТС ТАССААСССА АТАССААСАА ССАТТТТСАА АСАСААТАТС ААСТАССААС ТССССАГТТТ ТСТССАТССА ССААСТАСТ©
АСССССТТТА ААСООАССАС АТССТТСССТ ТАТССТТСТТ ©СТААААСТТ ТСТСТТАТАС ТТСАТОСГТС АССООТАААА АСАССТАССТ ОСТТСАТСАС В • В 3 Н С Ν Υ ЗТОУ С А Т 0 А С К Р 3 I ТРА А Р 3 Υ Т Ь К Ь С Ё · 3001 ТСОАСТСССА СССАААСТАС ТССАСАСАОС ТТССАОССАС ТСАОССАСО© АСАТТСАССА ТСАСТССТОС ССССССТТСА ТАСАСАСТАА АЗСТТССАСА
АССТСАВССТ СССТТТСАТС АССТСТОТСС ААССТСССТС АСТССОТССС ТСТААСТССТ АСТСАСОАСО ССОССОААСТ АТСТСТСАТТ ТССААССТСТ • Υ С Б V Τ V 0 СЕР К 5 О I 0 Τ Ν ΑΥΥ V Μ Т У О Т К ТРЬ V Н К 3101 АТАГССАОАС ОТОАСАОТСС АСТСТСААСС АСОСТСАССС АТГОАСАССА АТОСАТАСТА ССГОАТСАСТ СТТОСААСАА АСАССТТСТТ ОСТССАТССТ
ТАТАССТСТС САСТСТСАСС ТСАСАСТТОС ТСЗССАСТССС ТААСТСТССТ ТАССТАТОАТ ОСАСТАСТСА СААССТГСТТ ТСТОСААСАА ССАССТАССА В
БЯРМ ОЬЯ 1 Р И 53АС 5 Τ V ИНЫ К Е Т Ь МЕР ВЕР ЯАТК· 3201 ОАСТССТТСА ТССДССТСАА ССТСССТТО© АССАйТССТС ОААСТАСТОТ СТССАССААС АОАСАСАССТ ТААТССАСТТ ТСАССААССА САССССАССА
СГСАССАА&Т АССТСОАОТТ ОСАОССААСС ТССТСАССАС СТТСАТСАСА САССТССТТС ТСТСТСТССА АТТАССТСАА АСТССТТООТ СТССООТССТ 2 • ОЗУ I А Ь ©ЗОЕ О А Ь НОА Ь А © А 1рУ £ Р $ 3 Ν Τ V К Ь Т ·
3301 АССАСТСТСТ САТАССАТТС ОССТСАСААС АЙСОАССТСТ ССАТСААССТ ТТСССТССАЗ ССАТГССТСТ ССААТГТТСА АССААСАСТС ТСААСТТСАС
ТССТСАСАСА СТАТСОТААС сссастсггс тссстссаса сстасттсса аасссасстс сстаассаса ССТТААААСТ тссттстсас асттсаастс &
•ЗОН X. К С Я V К М ЕКЬ О Ь К С ΤΤΥ СУС 3 К А Р К Р Ь СТР
3401 СТССССТСАТ ТТОААСТСТА САЗТОААОАТ СОАААААТТС САСТТСААОС ОААСААССТА ТССССТСТСТ ТСАААСССТТ ТСААСТТТСТ ТСССАСТССС
САОСССАСТА ААСТТСАСАТ СТСАСТТСТА ССТТТТТААС СТСААСТТСС СТТОТТССАТ АССССАОАСА АСТТТСССАА АСТГСАААЗА АСССТОАССС
Α ϋ Т С нет V V Ь Е Ь О Υ тот РСР СКУР 13 3 УАЗ х ы о ь ·
3501 ССАЗАСАСАЗ СТСАССОСАС ТОТСОТСГГО ОААТТССАСТ АСАСТОССАС 05АТССАССТ ТССАААЙТТС СТАТСТСЙТС АСТСССТТСА ТТСААСЙАСС
ССТСТСТСТС САОТСССОТС АСАССАСААС СТТААСеТСА ТОТСАСССТО ССТАССТССА АССТТТСАА© ОАТДСАССАС ТСАСОЗААВТ аасттссто©
Е • ТРУ с к ь V Т V N ρ ρ ν зуа τ А N А К V Ь I Е Ь ЕРРР С й 3 3601 ТААССССАОТ СвССАЗАТТС СТСАСГОТСА АСССТТТТСГ ТТСЛСТСССС АСОСССААСО СТААОСТССТ ОАТТСААТТО СААССАСССТ ТСООАОАСТС
АТТСССеТСА СССОТСТААС САОТОАСАСТ ТСССААААСА ААСТСАСССС ТССССбТТСС ©АТТССАССА СТААСТТААС СТТССТСЙЙА ААССТСТСАС Е •γιν у о к с в о о ινη я η н к з о з 5ΐα карт тте кса 3 701 АТАСАТАСТС СТОСЙСАОАС ОАСААСААСА САТСААТСАС САСТСССАСА АСТСТССААЙ САССАТТССС АААСССТТТА СААССАСССТ САААЙЙАЙСС татстатсас сасссстстс стсттеттст сгасттастс отсассстст тсаоассггс стсстаассс тттссоааат сттеатееоА стгтсстссс Е
ОКЬА А Ь С ОТА Η ϋ Р С ЗУ© © V Г Т 3 У С КАУ Η О V Г С С А 3 601 САЙАЙАСТАЗ ССССТСТАЙС АОАСАСАССТ ТЗСОАСТТТС САТСАСТТСС АССССТСТТС АССТСАСТТ© ССААСОСТСТ ССАТСААСТО ТТССОАССАС ©ТСТСТСАТС СССОАСАТСС ТСТСТСТССА АСССТСАААС СТАСТСААСС ТССССАСААЙ ТОСАОТСААС ССТТСССАСА ССТАСТТСАС ААЙССТССТС ’ РНЗ ЬРС <ЗМ5Н г т 2 О Ь ь ОАЦЬ ЦИМ О I И АЕОЯ ЗГА3 901 САТТССССТС АСТСТТС&ЗА ООСАТ0ТССТ ©САТААСССА АС©АТТ©СТС ОССССТСТСС ТСТТОТСОАТ ССОСАТСААТ ССТССТСАСА ©СТССАТАСС
СТААОССОАО ТОАСААСССТ СССТАСАСЗА ССТАТТСССТ ТССТААССАС СССССАОАС© АСААСАССТА СССбТАСТГА ССАОСАСТСТ ССАССТАТС© N51
- е
ЪТР ХАУС ©VI. ЬРЬ ЗУНУ Η Α ϋ Т©С ΑΙΟΙ ЗРО ЕЬР 4 001 ТСТСАССТТТ СТСССАСТТС САССАСТТСТ ССТСТТССТС ТССОТСААСС ТОСАСОСТСА САСТОССТСТ СССАТАСАСА ТСАСССОССА АСАССТСАОА
АОАСТССААА САОССТСААС СТССТСААСА ССАСААОаЛ© АЙССАСТТСС АССТССОАСТ СТСАСССАСА ОЗСТАТСТСТ АСТСССССОТ ТСТССАСТСТ

Claims (36)

1. Репликационно-дефектный псевдоинфекционный флавивирус с геномом флавивируса, который включает (ί) одну или большее число делеций или мутаций в последовательностях нуклеотидов, которые кодируют один или большее число белков, выбранных из группы, состоящей из капсидного белка С, предшественника мембранного белка (ргМ), оболочечного или капсульного белка (Е), неструктурного белка 1 (N81), неструктурного белка 3 (N83) и неструктурного белка 5 (N85). и (ίί) последовательность, которая кодирует один или большее число иммуногенов вируса бешенства.
2. Репликационно-дефектный псевдоинфекционный флавивирус по п.1, в котором указанные одна или большее число делеций или мутаций происходят внутри последовательностей капсидного белка С генома флавивируса.
3. Репликационно-дефектный псевдоинфекционный флавивирус по п.1, в котором указанные одна или большее число делеций или мутаций происходят в последовательностях предшественника мембранного белка (ргМ) и/или оболочечного белка (Е) генома флавивируса.
4. Репликационно-дефектный псевдоинфекционный флавивирус по п.1, в котором указанные одна или большее число делеций или мутаций происходят в последовательностях капсидного белка (С), предшественника мембранного белка (ргМ) и оболочечного белка (Е) генома флавивируса.
5. Репликационно-дефектный псевдоинфекционный флавивирус по п.1, в котором указанные одна или большее число делеций или мутаций происходят в последовательностях неструктурного белка 1 (N81) генома флавивируса.
6. Репликационно-дефектный псевдоинфекционный флавивирус по п.1, в котором указанный иммуноген вируса бешенства включает иммуноген - белок О вируса бешенства или иммуногенный фрагмент этого белка.
7. Репликационно-дефектный псевдоинфекционный флавивирус по любому из пп.1-6, в котором указанный геном флавивируса включает последовательности, кодирующие предшественник мембранного белка (ргМ) и/или оболочечный белок (Е).
8. Репликационно-дефектный псевдоинфекционный флавивирус по любому пп.1-7, в котором геном флавивируса выбран из генома вируса жёлтой лихорадки, вируса лихорадки Западного Нила, вируса клещевого энцефалита, вируса Лангат, вируса японского энцефалита, вируса лихорадки денге, последовательностей вируса энцефалита Сент-Луиса, а также химер этих вирусов.
9. Репликационно-дефектный псевдоинфекционный флавивирус по п.8, в котором указанная химера включает последовательности предшественника мембранного белка (ргМ) и оболочечного белка (Е) первого флавивируса, а также последовательности капсидного (С) и неструктурных белков второго флавивируса, отличающегося от первого.
10. Репликационно-дефектный псевдоинфекционный флавивирус по п.9, в котором указанный первый флавивирус представляет собой вирус клещевого энцефалита или вирус Лангат.
11. Репликационно-дефектный псевдоинфекционный флавивирус по п.9 или 10, в котором указанный второй флавивирус, отличающийся от первого, представляет собой вирус жёлтой лихорадки, вирус лихорадки Западного Нила или вирус Лангат.
12. Репликационно-дефектный псевдоинфекционный флавивирус по любому из пп.1-11, в котором указанный геном упакован в частицу, включающую последовательности предшественника мембранного белка (ргМ) и оболочечного белка (Е) флавивируса, который является тем же самым или отличается от вируса генома.
13. Репликационно-дефектный псевдоинфекционный флавивирус по любому из пп.1-12, в котором последовательности, кодирующие указанный иммуноген вируса бешенства, вставляют вместо одной или большего числа делеций или мутаций одного или большего числа белков или сочетаются в геноме с такими мутациями или делециями.
14. Репликационно-дефектный псевдоинфекционный флавивирус по любому из пп.1-13, в котором последовательности, кодирующие указанный иммуноген вируса бешенства, вставляют в геном флавивируса в последовательности, кодирующие оболочечный белок (Е), в последовательности, кодирующие неструктурный белок 1 (N81), в последовательности, кодирующие предшественник мембранного белка (ргМ), межгенно между последовательностями, кодирующими оболочечный белок (Е) и неструктурный белок 1 (N81), межгенно между последовательностями, кодирующими неструктурный белок 2В (N826) и неструктурный белок 3 (N83), или в качестве бицистронной инсерции в нетранслируемой 3'-области генома флавивируса.
15. Композиция, включающая первый репликационно-дефектный псевдоинфекционный флавивирус по пп.1-14 и второй репликационно-дефектный псевдоинфекционный флавивирус, отличающийся от первого, с геномом, включающим одну или большее число делеций или мутаций в последовательностях нуклеотидов, кодирующих один или большее число белков, выбранных из группы, состоящей из капсидного белка С, предшественника мембранного белка (ргМ), оболочечного или капсульного белка (Е), неструктурного белка 1 (N81), неструктурного белка 3 (N83) и неструктурного белка 5 (N85), причем один
- 160 023888 или большее число белков, кодируемых последовательностями, в которых произошла одна или большее число мутаций или делеций во втором репликационно-дефектном псевдоинфекционном флавивирусе, отличающемся от первого, отличаются от одного или большего числа белков, кодируемых последовательностями, в которых произошла одна или большее число делеций или мутаций в первом репликационно-дефектном псевдоинфекционном флавивирусе.
16. Способ индукции иммунного ответа на иммуноген вируса бешенства со стороны субъекта, включающий введение субъекту одного или большего числа репликационно-дефектных псевдоинфекционных флавивирусов по любому из пп.1-14 и/или композиции по п.15.
17. Способ по п.16, в котором субъект подвержен риску, однако у него нет инфекции, вызванной вирусом бешенства.
18. Способ по п.16, в котором субъект имеет инфекцию, вызванную вирусом бешенства.
19. Применение репликационно-дефектного псевдоинфекционного флавивируса по любому из пп.114 или композиции по п.15 для индукции иммунного ответа на белок, закодированный в геноме флавивируса, в дополнение к источнику иммуногена.
20. Применение по п.19, в котором субъект подвержен риску, однако у него нет инфекции, вызванной флавивирусом, который соответствует геному псевдоинфекционного флавивируса, включающего последовательности, кодирующие предшественник мембранного белка и/или оболочечный белок флавивируса.
21. Применение по п.19, в котором субъект имеет инфекцию, вызванную флавивирусом, который соответствует геному псевдоинфекционного флавивируса, включающего последовательности, кодирующие предшественник мембранного белка и/или оболочечный белок флавивируса.
22. Фармацевтическая композиция, включающая псевдоинфекционный флавивирус по любому из пп.1-14 или композицию по п.15 и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.
23. Фармацевтическая композиция по п.22, дополнительно включающая адъювант.
24. Молекула нуклеиновой кислоты, соответствующая геному псевдоинфекционного флавивируса по любому из пп.1-14.
25. Способ получения репликационно-дефектного псевдоинфекционного флавивируса по любому из пп.1-14, включающий введение молекулы нуклеиновой кислоты по п.24 в клетку, которая экспрессирует белок, соответствующий любым последовательностям, удалённым из генома репликационнодефектного псевдоинфекционного флавивируса.
26. Способ по п.25, в котором белок экспрессируется в клетке из генома второго репликационнодефектного флавивируса, отличающегося от первого вируса.
27. Способ по п.25, в котором белок экспрессируется из репликона.
28. Способ по п.27, в котором репликон представляет собой репликон альфа-вируса.
29. Способ по п.28, в котором альфа-вирус представляет собой вирус венесуэльского лошадиного энцефалита.
30. Репликационно-дефектный псевдоинфекционный флавивирус с геномом флавивируса, включающим одну или большее число делеций или мутаций в последовательностях нуклеотидов, кодирующих один или большее число белков, выбранных из группы, состоящей из капсидного белка С, предшественника мембранного белка (ргМ), оболочечного или капсульного белка (Е), неструктурного белка 1 (N81), неструктурного белка 3 (N83) и неструктурного белка 5 (N85), причем геном флавивируса содержит последовательности вируса лихорадки Западного Нила, в которых последовательности, кодирующие предшественник мембранного белка и оболочечный белок, замещены последовательностями, кодирующими предшественник мембранного белка и оболочечный белок вируса клещевого энцефалита или вируса Лангат, и последовательности, кодирующие сигнальную последовательность между капсидным белком и предшественником мембранного белка генома флавивируса, содержат последовательности, кодирующие сигнальную последовательность белков капсида/предшественника мембранного белка вируса клещевого энцефалита или вируса Лангат, или его вариант.
31. Репликационно-дефектный псевдоинфекционный флавивирус по п.30, в котором последовательности, кодирующие предшественник мембранного белка и оболочечный белок вируса лихорадки Западного Нила замещены последовательностями, кодирующими предшественник мембранного белка и оболочечный белок вируса клещевого энцефалита.
32. Репликационно-дефектный псевдоинфекционный флавивирус по п.30 или 31, дополнительно содержащий транскрибируемый капсидный белок.
33. Репликационно-дефектный псевдоинфекционный флавивирус по п.32, в котором капсидный белок представляет собой капсидный белок вируса лихорадки Западного Нила.
34. Репликационно-дефектный псевдоинфекционный флавивирус по п.32, в котором капсидный белок продуцируется в упаковывающей линии клеток.
35. Репликационно-дефектный псевдоинфекционный флавивирус по п.32, в котором капсидный белок закодирован в геноме второго флавивируса, содержащего одну или большее число делеций или мутаций.
36. Репликационно-дефектный псевдоинфекционный флавивирус по п.30 или 31, в котором указан- 161 023888 ный вирус клещевого энцефалита представляет собой штамм Нург.
EA201001491A 2008-03-14 2009-03-16 Репликационно-дефектные вакцины и вакцинные векторы против флавивирусов EA023888B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US6945108P 2008-03-14 2008-03-14
US9281408P 2008-08-29 2008-08-29
PCT/US2009/001666 WO2009114207A2 (en) 2008-03-14 2009-03-16 Replication-defective flavivirus vaccines and vaccine vectors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201001491A1 EA201001491A1 (ru) 2011-06-30
EA023888B1 true EA023888B1 (ru) 2016-07-29

Family

ID=41065743

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201591888A EA201591888A1 (ru) 2008-03-14 2009-03-16 Репликационно-дефектные вакцины и вакцинные векторы против флавивирусов
EA201001491A EA023888B1 (ru) 2008-03-14 2009-03-16 Репликационно-дефектные вакцины и вакцинные векторы против флавивирусов

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201591888A EA201591888A1 (ru) 2008-03-14 2009-03-16 Репликационно-дефектные вакцины и вакцинные векторы против флавивирусов

Country Status (16)

Country Link
US (2) US8815564B2 (ru)
EP (1) EP2265284A4 (ru)
JP (1) JP5779352B2 (ru)
KR (1) KR101719316B1 (ru)
CN (2) CN105039266A (ru)
AU (1) AU2009223727B2 (ru)
BR (1) BRPI0908936A2 (ru)
CA (1) CA2717499A1 (ru)
EA (2) EA201591888A1 (ru)
HK (1) HK1162306A1 (ru)
IL (1) IL208147A (ru)
MX (1) MX2010010034A (ru)
SG (1) SG188891A1 (ru)
UA (1) UA103316C2 (ru)
WO (1) WO2009114207A2 (ru)
ZA (1) ZA201006437B (ru)

Families Citing this family (38)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2007347184A1 (en) * 2006-09-29 2008-08-21 Sanofi Pasteur Biologics Co Recombinant rhinovirus vectors
EP2361930A3 (en) 2007-03-26 2011-10-26 Dako Denmark A/S Multimers of MHC-peptide complexes and uses thereof in Borrelia infectious diseases
EP2167536A1 (en) 2007-07-03 2010-03-31 Dako Denmark A/S Mhc multimers, methods for their generation, labeling and use
US10611818B2 (en) 2007-09-27 2020-04-07 Agilent Technologies, Inc. MHC multimers in tuberculosis diagnostics, vaccine and therapeutics
US10968269B1 (en) 2008-02-28 2021-04-06 Agilent Technologies, Inc. MHC multimers in borrelia diagnostics and disease
BRPI0908936A2 (pt) * 2008-03-14 2017-03-28 Sanofi Pasteur Biologics Co vacinas de flavivírus de replicação defeituosa e vetores de vacina
CA2718731A1 (en) * 2008-03-27 2009-10-01 Sanofi Pasteur Biologics Co. Recombinant rhinovirus vectors
WO2010009735A2 (en) 2008-07-23 2010-01-28 Dako Denmark A/S Combinatorial analysis and repair
GB0817244D0 (en) 2008-09-20 2008-10-29 Univ Cardiff Use of a protein kinase inhibitor to detect immune cells, such as T cells
WO2010037402A1 (en) 2008-10-02 2010-04-08 Dako Denmark A/S Molecular vaccines for infectious disease
US20120128713A1 (en) * 2009-03-16 2012-05-24 Sanofi Pasteur Limited Replication-Defective Flavivirus Vaccine Vectors Against Respiratory Syncytial Virus
JP5931724B2 (ja) * 2009-06-29 2016-06-08 ジェノセア バイオサイエンシーズ， インコーポレイテッド ＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓＰｎｅｕｍｏｎｉａｅに対するワクチンおよび組成物
BRPI0914507A2 (pt) * 2009-12-23 2012-04-10 Fundacao Oswaldo Cruz vacina para lentivìrus baseada em vìrus recombinante vacinal da febre amarela
WO2011119628A2 (en) * 2010-03-23 2011-09-29 The Regents Of The University Of California Compositions and methods for self-adjuvanting vaccines against microbes and tumors
US10081795B2 (en) * 2010-03-24 2018-09-25 Research Development Foundation Flavivirus host range mutations and uses thereof
WO2012003320A2 (en) 2010-07-01 2012-01-05 Research Development Foundation Flavivirus host-range mutations and uses thereof
EP2665490B1 (en) 2011-01-20 2020-03-04 Genocea Biosciences, Inc. Vaccines and compositions against streptococcus pneumoniae
CN102181408A (zh) * 2011-01-30 2011-09-14 中国检验检疫科学研究院 圣路易斯脑炎病毒样颗粒的制备方法及其应用
US9284356B2 (en) 2011-07-12 2016-03-15 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Identification of a west nile virus CD4 T cell epitope and use thereof
US20150030565A1 (en) * 2012-01-09 2015-01-29 Sanofi Pasteur Biologics, Llc Purification of flaviviruses
WO2013116770A1 (en) * 2012-02-01 2013-08-08 Sanofi Pasteur Biologics, Llc Replication-defective flavivirus vaccines and vaccine vectors
WO2013138670A1 (en) * 2012-03-15 2013-09-19 Icahn School Of Medicine At Mount Sinai Yellow fever virus ns5 mutants as flavivirus vaccine candidates
WO2013138776A1 (en) 2012-03-16 2013-09-19 Merial Limited Novel methods for providing long-term protective immunity against rabies in animals, based upon administration of replication-deficient flavivirus expressing rabies g
US8895028B2 (en) * 2012-07-20 2014-11-25 Arbovax, Inc. Methods and compositions for dengue virus 3 (DV3) infectious clone
US20140271708A1 (en) * 2013-03-15 2014-09-18 Merial Limited Novel methods for providing long-term protective immunity against rabies in animals, based upon administration of replication-deficient flavivirus expressing rabies G
SG11201607287XA (en) * 2014-03-01 2016-09-29 Univ Texas Recombinant isfahan viral vectors
BR112016029201B8 (pt) 2014-06-20 2023-12-05 Us Health Quimera de ácido nucleico, composição imunogênica, uso de um ou mais vírus inativados compreendendo a quimera de ácido nucleico e método para inativar um vírus
EP3031923A1 (en) * 2014-12-11 2016-06-15 Institut Pasteur Lentiviral vector-based japanese encephalitis immunogenic composition
EP3302511A1 (en) 2015-06-02 2018-04-11 De Staat der Nederlanden, vert. door de Minister van VWS Surface display of antigens on gram-negative outer membrane vesicles
WO2018060771A1 (en) 2016-09-30 2018-04-05 Sanofi Pasteur Live attenuated chimeric zika virus and its use as an immunogenic composition
EP3601367A4 (en) 2017-03-30 2020-09-16 The University of Queensland CHEMERICAL MOLECULES AND ASSOCIATED USES
WO2018231690A1 (en) * 2017-06-12 2018-12-20 Washington University Zika virus strains for treatment of glioblastoma
GB201716254D0 (en) * 2017-10-05 2017-11-22 Univ Leuven Kath Live-attenuated flaviruses with heterologous antigens
GB201814563D0 (en) * 2018-09-07 2018-10-24 Univ Leuven Kath Chimeric flavivirus lyssavirus vaccines
CN109943590B (zh) * 2019-04-18 2022-11-18 西南大学 一种复制缺陷型猪圆环病毒、其制备方法及应用
CN110157685B (zh) * 2019-05-20 2022-11-01 中国科学院武汉病毒研究所 一种复制缺陷西尼罗病毒的制备方法及应用
WO2020242388A1 (en) * 2019-05-28 2020-12-03 Chiang Mai University Mature virus-like particles of flaviviruses
WO2021048003A1 (en) * 2019-09-13 2021-03-18 Katholieke Universiteit Leuven Chimeric filovirus vaccines

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20010046499A1 (en) * 1999-12-03 2001-11-29 Kantor Fred S. Tick antigens and compositions and methods comprising them
US20040223979A1 (en) * 1997-02-28 2004-11-11 Chambers Thomas J. Chimeric flavivirus vaccines
US20060159704A1 (en) * 2001-03-09 2006-07-20 Fundacao Oswaldo Cruz-Fiocruz Use of flavivirus for the expression of protein epitopes and development of new live attenuated vaccine virus to immunize against flavivirus and other infectious agents
WO2006086838A1 (en) * 2005-02-16 2006-08-24 The Council Of The Queensland Institute Of Medical Research Flavivirus replicon constructs for tumour therapy
US20070218078A1 (en) * 2004-04-09 2007-09-20 Wyeth Synergistic Attenuation of Vesicular Stomatitis Virus, Vectors Thereof and Immunogenic Compositions Thereof
US20070249032A1 (en) * 2004-07-12 2007-10-25 Tengen Biomedical Company Flavivirus vaccine

Family Cites Families (45)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4393201A (en) 1981-11-04 1983-07-12 The Wistar Institute DNA Which codes for glycoprotein of era-strain rabies virus
EP0117657A1 (en) 1983-02-01 1984-09-05 Genentech, Inc. Rabies immunogenic polypeptides and vaccine using them, DNA sequences, expression vectors, recombinant cells, and cultures therefor, and processes for their production
FR2563434B1 (fr) * 1984-04-25 1986-07-25 Transgene Sa Vaccin contre la rage et procede pour sa preparation
US5830477A (en) * 1984-04-25 1998-11-03 Transgene S.A. Vaccine against rabies and process for preparation thereof
US5274087A (en) 1986-08-13 1993-12-28 Molecular Diagnostics, Inc. cDNA coding for carcinoembryonic antigen (CEA)
ES2059330T3 (es) 1986-08-13 1994-11-16 Miles Inc Un cdna codificador de antigeno carcinoembrionico.
US5122599A (en) 1986-08-13 1992-06-16 Molecular Diagnostics, Inc. CDNAS coding for members of the carcinoembryonic antigen family
CA1340221C (en) 1988-01-29 1998-12-15 Thomas Frank Bumol Vectors, compounds and method for expression of a human adenocarcinoma antigen
US5804381A (en) 1996-10-03 1998-09-08 Cornell Research Foundation Isolated nucleic acid molecule encoding an esophageal cancer associated antigen, the antigen itself, and uses thereof
US6184024B1 (en) 1988-07-14 2001-02-06 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Chimeric and/or growth-restricted flaviviruses
JPH03139286A (ja) * 1989-10-25 1991-06-13 Nippon Seibutsu Kagaku Kenkyusho 狂犬病ウイルスｇ蛋白質を産生する組み換えバキュロウイルス及びｇ蛋白質の製造方法
US6071716A (en) 1990-10-01 2000-06-06 Dana-Farber Cancer Institute DNA encoding, B7, a new member of the IG superfamily with unique expression on activated and neoplastic B cells
EP0575491B1 (en) 1991-03-07 2003-08-13 Virogenetics Corporation Genetically engineered vaccine strain
WO1992019266A1 (en) 1991-05-06 1992-11-12 The United States Of America, As Represented By The Department Of Health And Human Services Recombinant virus expressing carcinoembryonic antigen and methods of use thereof
US6235525B1 (en) 1991-05-23 2001-05-22 Ludwig Institute For Cancer Research Isolated nucleic acid molecules coding for tumor rejection antigen precursor MAGE-3 and uses thereof
US5830753A (en) 1994-09-30 1998-11-03 Ludwig Institute For Cancer Research Isolated nucleic acid molecules coding for tumor rejection antigen precursor dage and uses thereof.
US6045802A (en) 1994-10-03 2000-04-04 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Enhanced immune response to an antigen by a composition of a recombinant virus expressing the antigen with a recombinant virus expressing an immunostimulatory molecule
ES2154738T3 (es) 1994-10-03 2001-04-16 Us Gov Health & Human Serv Composicion que comprende un virus recombinante que expresa un antigeno y un virus recombinante que expresa una molecula inmunoestimuladora.
US5939526A (en) 1995-03-21 1999-08-17 Ludwig Institute For Cancer Research Isolated RAGE-1 derived peptides which complex with HLA-B7 molecules and uses thereof
US6083925A (en) 1995-06-07 2000-07-04 Connaught Laboratories Limited Nucleic acid respiratory syncytial virus vaccines
DE69841690D1 (de) * 1997-02-28 2010-07-08 Acambis Inc Chimäre Impfstoffe gegen Flaviviren
US20040005542A1 (en) 2001-06-22 2004-01-08 Krempl Christine D Respiratory syncytial virus vaccines expressing protective antigens from promotor- proximal genes
ATE356206T1 (de) 1997-10-08 2007-03-15 Us Gov Health & Human Serv Menschliches krebsantigen ny eso-1/cag-3 und dazu kodierendes gen
JP2002500003A (ja) 1997-11-28 2002-01-08 ザ・クラウン・イン・ザ・ライト・オヴ・ザ・クイーンズランド・デパートメント・オヴ・ヘルス フラビウイルスの発現および送達のシステム
MXPA01002120A (es) 1998-08-31 2003-03-27 Trinity College Dublin Polipeptidos y polinucleotidos de estafilococo negativo a coagulasa.
EP1261704B1 (en) 1999-11-30 2009-07-01 Ludwig Institute For Cancer Research Isolated nucleic acid molecules encoding cancer associated antigens, the antigens per se, and uses thereof
WO2002072803A2 (en) 2001-03-09 2002-09-19 The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Subgenomic replicons of the flavivirus dengue
CN1551782A (zh) 2001-06-01 2004-12-01 ��������ķ������ 嵌合黄病毒载体
EP1461441A4 (en) * 2001-11-26 2006-02-22 Univ Queensland FEEDING SYSTEM FOR FLAVIVIRUS VACCINES
RU2307872C2 (ru) * 2002-10-09 2007-10-10 СиАйДи КО., ЛТД НОВАЯ ПОЛНОРАЗМЕРНАЯ ГЕНОМНАЯ PHK ВИРУСА ЯПОНСКОГО ЭНЦЕФАЛИТА, ПОЛУЧЕННАЯ ИЗ НЕЕ ИНФЕКЦИОННАЯ кДНК JEV И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ
CN1322120C (zh) * 2003-03-20 2007-06-20 上海天甲生物医药有限公司 乙肝乙脑双价疫苗
AU2003902842A0 (en) 2003-06-06 2003-06-26 The University Of Queensland Flavivirus replicon packaging system
CN1304579C (zh) * 2003-07-21 2007-03-14 上海天甲生物医药有限公司 重组的以黄热病病毒为载体的疫苗
US7473531B1 (en) 2003-08-08 2009-01-06 Colora Corporation Pancreatic cancer targets and uses thereof
EP1737885A2 (en) * 2004-04-12 2007-01-03 THE GOVERNMENT OF THE UNITED STATES OF AMERICA, as represented by THE SECRETARY, DEPARTMENT OF HEALTH AND HUMAN SERVICES Method of using adenoviral vectors to induce an immune response
US7332322B2 (en) 2004-09-14 2008-02-19 Ilya Frolov Venezuelan equine encephalitis virus replicons with adaptive mutations in the genome and uses thereof
BRPI0609949A2 (pt) 2005-04-24 2010-05-11 Acambis Inc flavivìrus recombinante, seu uso na preparação de vacina, composição farmacêutica compreendendo o mesmo, molécula de ácido nucléico e método para atenuar candidato a vacina de flavivìrus
AU2007217352B2 (en) * 2006-02-27 2013-09-26 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Pseudoinfectious flavivirus and uses thereof
RU2009105099A (ru) 2006-07-14 2010-08-27 Санофи Пастер Байолоджикс Ко. (Us) Конструирование рекомбинантных вирусных вакцин путем прямой транспозон-опосредованной инсерции чужеродных иммунологических детерминант в белки векторного вируса
EP2117589A4 (en) 2007-01-31 2010-07-21 Sanofi Pasteur Biologics Co FLAVIVIRUS VACCINE VECTOR AGAINST INFLUENZA VIRUS
CA2676689C (en) 2007-01-31 2014-12-16 Sanofi Pasteur Biologics Co. Recombinant bicistronic flavivirus vectors
US20110003884A1 (en) 2007-02-09 2011-01-06 Pugachev Konstantin V Viral Vectors and Methods of Use
BRPI0811281A2 (pt) 2007-05-07 2014-10-21 Univ Colorado Flavivírus de genoma de dois componentes e seus usos
BRPI0908936A2 (pt) 2008-03-14 2017-03-28 Sanofi Pasteur Biologics Co vacinas de flavivírus de replicação defeituosa e vetores de vacina
US20120128713A1 (en) 2009-03-16 2012-05-24 Sanofi Pasteur Limited Replication-Defective Flavivirus Vaccine Vectors Against Respiratory Syncytial Virus

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040223979A1 (en) * 1997-02-28 2004-11-11 Chambers Thomas J. Chimeric flavivirus vaccines
US20010046499A1 (en) * 1999-12-03 2001-11-29 Kantor Fred S. Tick antigens and compositions and methods comprising them
US20060159704A1 (en) * 2001-03-09 2006-07-20 Fundacao Oswaldo Cruz-Fiocruz Use of flavivirus for the expression of protein epitopes and development of new live attenuated vaccine virus to immunize against flavivirus and other infectious agents
US20070218078A1 (en) * 2004-04-09 2007-09-20 Wyeth Synergistic Attenuation of Vesicular Stomatitis Virus, Vectors Thereof and Immunogenic Compositions Thereof
US20070249032A1 (en) * 2004-07-12 2007-10-25 Tengen Biomedical Company Flavivirus vaccine
WO2006086838A1 (en) * 2005-02-16 2006-08-24 The Council Of The Queensland Institute Of Medical Research Flavivirus replicon constructs for tumour therapy

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Shustov et al. "Production of pseudoinfectious yellow fever virus with a two-component genome", J. Virology, 2007, v. 81, p. 11737-11748; abstract *

Also Published As

Publication number Publication date
KR101719316B1 (ko) 2017-03-24
WO2009114207A2 (en) 2009-09-17
US20110135686A1 (en) 2011-06-09
EP2265284A2 (en) 2010-12-29
EA201591888A1 (ru) 2016-05-31
KR20110002845A (ko) 2011-01-10
IL208147A0 (en) 2010-12-30
AU2009223727A1 (en) 2009-09-17
BRPI0908936A2 (pt) 2017-03-28
CA2717499A1 (en) 2009-09-17
SG188891A1 (en) 2013-04-30
US20130243812A1 (en) 2013-09-19
AU2009223727B2 (en) 2014-09-11
WO2009114207A3 (en) 2010-01-07
US9217158B2 (en) 2015-12-22
JP5779352B2 (ja) 2015-09-16
JP2011516040A (ja) 2011-05-26
EP2265284A4 (en) 2012-04-25
MX2010010034A (es) 2010-12-06
CN105039266A (zh) 2015-11-11
HK1162306A1 (en) 2012-08-31
US8815564B2 (en) 2014-08-26
UA103316C2 (ru) 2013-10-10
CN102202687B (zh) 2015-07-29
ZA201006437B (en) 2016-03-30
EA201001491A1 (ru) 2011-06-30
IL208147A (en) 2016-02-29
CN102202687A (zh) 2011-09-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA023888B1 (ru) Репликационно-дефектные вакцины и вакцинные векторы против флавивирусов
TWI777093B (zh) 非洲豬瘟病毒疫苗
Colombage et al. DNA-based and alphavirus-vectored immunisation with prM and E proteins elicits long-lived and protective immunity against the flavivirus, Murray Valley encephalitis virus
ES2618309T3 (es) Partículas de replicón de alfavirus multi-antigénico y métodos
ES2682268T3 (es) Virus recombinante del sarampión que expresa polipéptidos del virus de Chikungunya y sus aplicaciones
EA015907B1 (ru) Рекомбинантный флавивирус и его применение
EA012037B1 (ru) Поливалентные вакцины, содержащие рекомбинантные вирусные векторы
HU229101B1 (en) Dna transfection system for the generation of infectious influenza virus
HU228705B1 (en) Chimeric flavivirus vaccines
Nogueira et al. Biological and immunological characterization of recombinant Yellow Fever 17D viruses expressing a Trypanosoma cruzi Amastigote Surface Protein-2 CD8+ T cell epitope at two distinct regions of the genome
Phenix et al. Recombinant Semliki Forest virus vector exhibits potential for avian virus vaccine development
Carrion Jr et al. Vaccine platforms to control arenaviral hemorrhagic fevers
KR20100016313A (ko) 이성분 게놈 플라비바이러스 및 그것의 용도
CA3085224A1 (en) Measles-vectored lassa vaccine
CN117535322A (zh) 具有异源抗原的活的减毒黄病毒
US11291714B2 (en) Recombinant antigen derived from Zika virus E protein and use thereof
Ye et al. Reverse genetics approaches for the development of mammarenavirus live-attenuated vaccines
CN101528254A (zh) 通过向载体病毒蛋白中直接转座子介导插入外源免疫决定簇构建重组病毒疫苗
JP5675789B2 (ja) 免疫接種のための発現ベクターとしての水疱性口内炎ウイルスの異なる複数の抗原型
Spreng et al. Salmonella vaccines secreting measles virus epitopes induce protective immune responses against measles virus encephalitis
US9889192B2 (en) Immunization with rabies virus vector expressing foreign protein antigen
Burnette Recombinant subunit vaccines
Hernández et al. Immunogenicity of a recombinant adenovirus expressing porcine reproductive and respiratory syndrome virus polyepitopes
Poh et al. Characterization of cytotoxic T‐lymphocyte epitopes and immune responses to SARS coronavirus spike DNA vaccine expressing the RGD‐integrin‐binding motif
US11351240B2 (en) Chimeric yellow fever ZIKA virus strain

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM RU