EA019029B1 - Химерные гены, кодирующие инсектицидные белки bacillus thuringiensis, и их применение - Google Patents

Химерные гены, кодирующие инсектицидные белки bacillus thuringiensis, и их применение Download PDF

Info

Publication number
EA019029B1
EA019029B1 EA200802018A EA200802018A EA019029B1 EA 019029 B1 EA019029 B1 EA 019029B1 EA 200802018 A EA200802018 A EA 200802018A EA 200802018 A EA200802018 A EA 200802018A EA 019029 B1 EA019029 B1 EA 019029B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
sequence
dna
amino acid
protein
plant
Prior art date
Application number
EA200802018A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200802018A1 (ru
Inventor
Йерун Ван Ри
Франк Мелеватер
Гербен Ван Элдик
Original Assignee
Байер Кропсайенс Н.В.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Байер Кропсайенс Н.В. filed Critical Байер Кропсайенс Н.В.
Publication of EA200802018A1 publication Critical patent/EA200802018A1/ru
Publication of EA019029B1 publication Critical patent/EA019029B1/ru

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8261Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • C12N15/8271Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
    • C12N15/8279Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance
    • C12N15/8286Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance for insect resistance
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N37/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most two bonds to halogen, e.g. carboxylic acids
    • A01N37/18Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most two bonds to halogen, e.g. carboxylic acids containing the group —CO—N<, e.g. carboxylic acid amides or imides; Thio analogues thereof
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/195Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
    • C07K14/32Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Bacillus (G)
    • C07K14/325Bacillus thuringiensis crystal peptides, i.e. delta-endotoxins
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/0004Oxidoreductases (1.)
    • C12N9/0006Oxidoreductases (1.) acting on CH-OH groups as donors (1.1)
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12YENZYMES
    • C12Y101/00Oxidoreductases acting on the CH-OH group of donors (1.1)
    • C12Y101/01Oxidoreductases acting on the CH-OH group of donors (1.1) with NAD+ or NADP+ as acceptor (1.1.1)
    • C12Y101/0104Malate dehydrogenase (oxaloacetate-decarboxylating) (NADP+) (1.1.1.40)
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02ATECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A40/00Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/10Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in agriculture
    • Y02A40/146Genetically Modified [GMO] plants, e.g. transgenic plants

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Insects & Arthropods (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

Изобретение относится к последовательностям химерных генов, кодирующих инсектицидные белки, продуцируемые штаммами Bacillus thuringiensis. Конкретно, предлагаются химерные гены, кодирующие белок Cry1С, белок Cry1B или белок Cry1D, которые применяются для защиты растений от повреждений насекомыми. Изобретение также относится к растительным клеткам или растениям, включающим такие гены, и способам их получения или применения, а также растительным клеткам или растениям, включающим один из указанных химерных генов и по меньшей мере еще один из указанных химерных генов.

Description

Изобретение относится к последовательностям новых генов, кодирующих инсектицидные белки, продуцируемые штаммами ВасШик 11шппщепк1к. Конкретно, предлагаются новые химерные гены, кодирующие белок Сгу1С, которые применяются для защиты растений от повреждений насекомыми. Также сюда включены растительные клетки или растения, включающие такие гены, и сюда включены способы их получения или применения, а также сюда включены растительные клетки или растения, включающие такой химерный ген сгу1С и по меньшей мере еще один ген, кодирующий инсектицидный белок, такой как одна из новых последовательностей генов, кодирующих белок Сгу1В или белок СгуЮ.
Уровень техники
Штамм и белки, выделенные из ВасШик 11шппщепк1к (обозначен здесь как В1). хорошо известны благодаря их специфичной токсичности к насекомым-вредителям, и их использовали почти столетие назад для борьбы с насекомыми-вредителями. Сейчас доступны некоторые трансгенные виды растений, экспрессирующие Βΐ-белки, и они успешно ограничивают повреждения насекомыми на растениях.
Несмотря на выделение достаточного количества инсектицидных Βΐ-белков, только несколько В1белков экспрессировали в трансгенных растениях, которые были коммерциализированы, и только в некоторых сельскохозяйственных культурах. Большинство коммерциализированных трансгенных В1растений принадлежит к крупным полевым сельскохозяйственным культурам, таким как кукуруза и хлопок. В меньших товарных сельскохозяйственных культурах, таких как овощи, только несколько видов растений были трансформированы В1-генами, для того чтобы предоставить им устойчивость к основным насекомым-вредителям в виде чешуекрылых, но в настоящее время не регулируется производство, и отсутствуют на рынке овощные культуры В1-растений или семена, устойчивые к чешуекрылым. Ζΐιαο е1 а1. (2003) описали трансгенные растения брокколи, экспрессирующие Сгу1Ас или Сгу1С В1-токсины, а также растения, полученные путем скрещивания между этими растениями, так чтобы оба токсина - Сгу1Ас и Сгу1С экспрессировались в одном и том же растении, но эти растения не были коммерциализированы. №\\ТеаГ ™ картофель, включающий ген сгуЗА, активный к жесткокрылым, был кратковременно коммерциализирован в Северной Америке, но удален с рынка в 2001 году.
В настоящем изобретение предлагаются новые гены, кодирующие белки Сгу1С типа из В1-белков, которые идеальны для объединения с генами, кодирующими белки Сгу1В или Сгу1Э типа В1-белков.
ДНК последовательности генов сгу1С, сгу1В или сгу1Э по изобретению и ДНК последовательности модифицированного транспортного пептида по изобретению (продемонстрированы в приложенном списке последовательностей) представляют собой синтетические гены, не обнаруженные в природе, и отличные от любой известной ДНК последовательности. Действительно, любая из ДНК последовательностей из 8ЕО Ш Νο. 1, 3, 10, 14 или 16 демонстрирует по большей части 76,6% идентичности последовательности с известными родственными ДНК последовательностями.
Цели и сущность изобретения
В настоящем изобретении предлагается применение в растениях для борьбы с насекомыми нескольких новых генов, выделенных из В1. Конкретно, такие гены применяют в овощных культурах сельскохозяйственных растений, конкретно, в растениях вида Втаккюасеае, таких как цветная капуста, капуста, китайская капуста, репа, горчица, масличная культура рапса, кормовая капуста, брокколи, брюссельская капуста, горчичный шпинат и им подобные. Конкретно, в одном воплощении этого изобретения следующие растения вида Втаккюа защищают от насекомых с помощью новых генов по настоящему изобретению: В. сапиа1а, В. е1опда!а, В. ГтийсШока, В. _)ипсеа, В. парик, В. паппока, В. шдга, В. о1егасеа, В. ретушШк, В. тара, В. тирекйтк, В. керйсерк, В. (оигпеГогШ и им подобные, конкретно растения вида Вгакк1са о1егасеае или Втаккюа парик. Растения или семена, включающие по меньшей мере один из новых генов по изобретению, могут быть получены путем трансформации растительных клеток и получения растений или их семян, включающих гены по изобретению. Также сюда включены растения или семена, полученные путем скрещивания с трансформированным растением, содержащим, по меньшей мере, один из генов по изобретению, и с помощью применения обычных стадий разведения. Обычно любой вид растения, который следует защитить от вида насекомых, которые уничтожаются или контролируются с помощью В1-белков, кодируемых новыми генами по этому изобретению, может быть трансформирован генами по изобретению для получения трансгенных растений и семян с повышенной устойчивостью к таким насекомым.
В одном воплощении, в настоящем изобретении также предлагается комбинация технологий, позволяющих получать наиболее оптимальный продукт с точки зрения управления устойчивостью. Действительно, в одном воплощении этого изобретения, растения по изобретению продуцируют по меньшей мере 2 различных В1-белка, и такие белки кодируются генами сгу по изобретению, имеющим высокий уровень экспрессии, которые были стабильно интегрированы, предпочтительно, в единственный локус генома растения. В одном воплощении изобретения по меньшей мере 2 таких В1-гена включают ген сгу1С и сгу1В, сгу1С и ген стуШ или комбинацию генов сгу1С, сгу1В и стуШ по этому изобретению. В воплощении изобретения маркерный ген, позволяющий быструю идентификацию трансгенных растений, предпочтительно ген устойчивости к гербициду, локализован в том же растении, конкретно, в том же локусе генома растения, что и ген сгу по изобретению. В воплощении этого изобретения, маркерный ген
- 1 019029 представляет собой ген, кодирующий фосфинотрицин ацетилтрансферазу или глифосфатнечувствительный белок ЕР8Р8.
В изобретении также предлагаются новые гены сгу1В и сгуЮ. конкретно химерные гены сгу1В или сгуЮ. которые могут экспрессироваться в растениях с высоким уровнем экспрессии, такие гены, как сгу1В1 и сгу1В2, и гены сгуЮ1 и сгуЮ2. Также здесь предлагаются растительные клетки, растения или семена, включающие любые из этих генов, и способы их получения или применения индивидуально или в комбинации.
Также в настоящем изобретении предлагаются новые гены, кодирующие инсектицидный белок, включающий функциональный интрон растения в их кодирующей последовательности. Также присутствие интрона служит гарантией, что экспрессия гена не приводит к получению функционального белка, когда ген находится в такой среде, где интрон не может быть сплайсирован, в такой среде, как бактерия или другой прокариотический организм. Присутствие этого интрона в последовательности гена также дает возможность гену экспрессироваться с получением высокого уровня в растениях.
Также сюда включены варианты белка Сгу1С по изобретению, включающие последовательность из 8ЕО ГО Νο. 2 от положения аминокислоты 29 до положения аминокислоты до положения аминокислоты 627, но где одна, некоторые или все из следующих аминокислот в следующих положениях заменены по сравнению с положениями в 8ЕО ГО Νο. 2: аминокислота в положении 125 представляет собой Аланиин, аминокислота в положении 184 представляет собой Валин, аминокислота в положении 295 представляет собой Аргинин, аминокислота в положении 454 представляет собой Аспарагиновую кислоту или аминокислота в положении 593 представляет собой Аргинин. Также здесь предлагаются варианты белка Сгу1В по изобретению, включающие последовательность из 8ЕО ГО Νο. 11 от положения аминокислоты 31 до положения аминокислоты 64 8, но где аминокислота в положении 151 в 8ЕО ГО Νο.11 представляет собой Тирозин или аминокислота в положении 353 в 8ЕО ГО Νο. 11 представляет собой Аргинин, или белок, где аминокислота в положении 151 в 8ЕО ГО Νο.11 представляет собой Тирозин и аминокислота в положении 353 в 8ЕО ГО Νο. 11 представляет собой Аргинин.
Также в это изобретение включена новая последовательность ДНК, кодирующая транспортный пептид хлоропластов, конкретно ДНК, включающая последовательность из 8ЕО ГО Νο. 16 от положения нуклеотида 7 до положения нуклеотида 371, конкретно последовательность из 8ЕО ГО Νο. 16, а также такая последовательность ДНК из 8ЕО ГО Νο.17, кодирующая вариант белка, такого как транспортный пептид хлоропластов, включающий последовательность из 8ЕО ГО Νο. 17 от положения аминокислоты 3 до положения аминокислоты 124, где аминокислота Сук в положении 55 заменена на Туг и/или где аминокислота С1у добавлена после аминокислоты С1у в положение 51.
Конкретно, в настоящем изобретении предлагается химерный ген, включающий следующие функционально-связанные последовательности: а) область, кодирующая белок Сгу1С, включающая последовательность ДНК из любой из последовательностей 8ЕО ГО Νο. 1, 3, 4 или 6, или их варианта, и Ь) промоторную область, способную управлять экспрессией в растительных клетках. В одном воплощении такой промотор включает последовательность из 8ЕО ГО Νο. 18 или 19. В другом воплощении химерный ген дополнительно включает 3'-область полиаденилирования и терминации транскрипции, конкретно, 3'область из гена, кодирующего НАДФ-зависимую малатдегидрогеназу из Натела Ыбеийк. В другом воплощении химерный ген дополнительно включает расположенную между промотором и кодирующей областью лидерную последовательность гена Е1, специфичного для тапетума, из Огуха кайта.
В настоящем изобретении также предлагается последовательность ДНК, включающая любой из вышеуказанных химерных генов, которая дополнительно включает второй химерный ген, причем указанный второй химерный ген включает следующие функционально-связанные последовательности: а) вторую область, кодирующую белок Сгу1В, включающую последовательность ДНК из 8ЕО ГО Νο. 8 или 10, и Ь) вторую промоторную область, способную управлять экспрессией в растительных клетках; или предлагается последовательность ДНК, включающая любой из вышеуказанных химерных генов, которая дополнительно включает второй химерный ген, причем указанный второй химерный ген включает следующие функционально-связанные последовательности: а) область, кодирующую белок СгуГО, включающую последовательность ДНК из 8ЕО ГО Νο. 12 или 14, и Ь) промоторную область, способную управлять экспрессией в растительных клетках. В одном воплощении предлагаются вышеуказанные последовательности ДНК, где указанная вторая промоторная область включает последовательность из 8ЕО ГО Νο. 18 или 19 и отличается от указанной первой промоторной области; или где указанный второй химерный ген дополнительно включает 3'-область полиаденилирования и терминации транскрипции, конкретно, 3'-область из гена, кодирующего ΝΑΌΡ-зависимую малатдегидрогеназу из Натела Ыбеийк. В другом воплощении второй химерный ген в этих последовательностях ДНК дополнительно включает лидерную последовательность специфичного для тапетума гена Е1 из Огуха кайуа, расположенную между промотором и кодирующей областью.
В настоящем изобретении также предлагаются вышеуказанные последовательности ДНК, дополнительно включающие третий химерный ген, причем указанный третий химерный ген включает следующие функционально-связанные последовательности: а) область, кодирующую белок СгуГО, включающую последовательность ДНК из 8ЕО ГО Νο. 12 или 14, и Ь) промоторную область, способную управ
- 2 019029 лять экспрессией в растениях.
Также в настоящее изобретение включены трансгенные растительная клетка или растение, включающие любые из вышеуказанных генов или последовательностей ДНК, стабильно инкорпорированных в их геном, предпочтительно, когда клетка или растение представляют собой растение или растительную клетку растения вида Втаззка, конкретно вида Втаззка о1егасеае, более конкретно представляют собой капусту или цветную капусту.
Также в это изобретение включено применение любых из вышеуказанных химерных генов или последовательностей ДНК для борьбы с насекомыми-вредителями, чтобы получить растительные клетки, растения или семена с повышенной устойчивостью к насекомым; применение любых из вышеуказанных химерных генов или последовательностей ДНК для замедления или предотвращения развития устойчивости к инсектицидному белку, экспрессирующемуся в трансгенных растениях, у насекомых, которые пытаются кормиться такими растениями; или применение любых из вышеуказанных химерных генов или последовательностей ДНК для получения капусты, масличного рапса или цветной капусты, защищенных от Р1и1е11а ху1оз!е11а.
Также сюда включены способы борьбы с насекомыми, включающие стадию посадки на плантации или посев в поле растений, включающих любые из вышеуказанных химерных генов или последовательностей ДНК; а также способы борьбы с насекомыми в растениях вида Вта881са, включающие стадию экспрессии любых из вышеуказанных химерных генов или последовательностей ДНК в растениях; или способы получения растений или семян, устойчивых к насекомым, включающие стадии: а) получения растения, трансформированного геном по любому из пп.1-5 или последовательностью ДНК по любому из пп.6-12, и Ь) селекции потомства указанного растения или его семян, содержащих указанный ген или последовательность ДНК.
Также согласно этому изобретению предлагается химерный ген, включающий следующие функционально-связанные последовательности: а) первый фрагмент последовательности, кодирующей инсектицидный белок, Ь) интронную последовательность растения, с) второй фрагмент указанной кодирующей последовательности, б) промоторную область, способную управлять экспрессией в растительных клетках, и где инсектицидный белок не может быть получен из такого химерного гена в данной клеткехозяине, где интрон не сплайсирован; конкретно, такой химерный ген, где такой интрон представляет собой второй интрон гена 8Т-Ь81 из 8о1аиит 1иЬего8ит.
Дополнительно здесь также предлагается микроорганизм, включающий любые из вышеуказанных химерных генов или последовательностей ДНК, конкретно, такие организмы имеют происхождение из ЕзсйепсШа, ВасШиз ог АдгоЬас!егшт.
Описание
Согласно этому изобретению последовательность нуклеиновой кислоты обозначает молекулу ДНК или РНК в одноцепочечной или двухцепочечной форме, предпочтительно молекулу ДНК. Используемый здесь термин выделенная ДНК обозначает последовательность ДНК, которая не является природной, или уже не встречается в окружающей среде, где она исходно присутствовала, например кодирующая последовательность ДНК, ассоциированная с другими регуляторными элементами в последовательности химерного гена, ДНК перенесенная в другую клетку-хозяин, такую как растительная клетка, или искусственная полученная синтетическим путем последовательность ДНК, имеющая отличную нуклеотидную последовательность по сравнению с любой природной последовательностью ДНК.
Согласно этому изобретению были сконструированы последовательности нуклеиновой кислоты, конкретно последовательности ДНК, кодирующие токсины В1 Сгу или их варианты. Новые последовательности ДНК обозначены здесь, как сгу1С1-4, сгу1В1, сгу1В2, стуШ1 и стуШ2, и кодируемые ими белки обозначены здесь, как белки Сгу1С (например, Сгу1С1, Сгу1С3 и Сгу1С4), Сгу1В (например, Сгу1В1 и Сгу1В2) и белки СтуГО (например, СтуШ1 и СтуЮ2). Также здесь предлагается новая последовательность ДНК, кодирующая модифицированный транспортный пептид хлоропластов, например, последовательность ДНК, включающая последовательность из 8Е0 ГО Ыо. 16 от положения нуклеотида 7 до положения нуклеотида 371, конкретно, последовательность из 8Е0 ГО Ыо. 16, которая предназначена для оптимальной экспрессии в растениях, конкретно, в овощах, таких как растения вида Втаззкасеае р1аи1з, особенно, капуста и цветная капуста.
Согласно этому изобретению термин белок Сгу1С обозначает любой инсектицидный белок, включающий кратчайший фрагмент аминокислотной последовательности из 8Е0 ГО Ыо. 2, который сохраняет инсектицидную активность (здесь и далее обозначается как кратчайший токсический фрагмент), конкретно, любой белок, включающий аминокислотную последовательность от положения аминокислоты 29 до положения аминокислоты 627 в 8Е0 ГО Ыо. 2, предпочтительно, любой инсектицидный белок, включающий аминокислотную последовательность из 8Е0 ГО Ыо. 2 от положения аминокислоты 3 до положения аминокислоты 627. Также сюда включен инсектицидный белок, включающий аминокислотную последовательность из 8Е0 ГО Ыо. 2 (также называемый здесь, как белок Сгу1С1), из 8Е0 ГО Ыо. 5 (также называемый здесь, как белок Сгу1С3) или 8Е0 ГО Ыо. 7 (также называемый здесь, как белок Сгу1С4).
Белок Сгу1С, включающий аминокислотную последовательность от положения аминокислоты 29
- 3 019029 до положения аминокислоты 627 в 8ЕО ГО Νο. 2, сохраняет всю или почти всю инсектицидную активность цельного белка, какая производится в природе, и добавление белковых последовательностей в Νили С-концевой части не нарушает этой активности. Следовательно, в изобретении применяется и образует часть этого изобретения любой белок, характеризующийся аминокислотной последовательностью, содержащей или включающей эту область. Эти белки включают инсектицидные гибридные или химерные белки, включающие кратчайший токсический белковый фрагмент из белка из 8ЕО ГО Νο. 2. Также в это определение включены варианты белков, включающих аминокислотную последовательность от положения аминокислоты 29 до положения аминокислоты 627 в 8Еф ГО Νο. 2, такие как инсектицидные белки, включающие последовательность, имеющую на уровне аминокислотной последовательности идентичность последовательности с этой областью из 8ЕО ГО Νο.2, по меньшей мере на 95%, конкретно по меньшей мере на 96, 97, 98 или на 99%, как определено с использованием глобального алгоритма сравнения №сй1стап-\Уип5с11 в ЕМВО88 (Ктсе с1 а1., 2000) с целью получить оптимальное сравнение по всей длине последовательностей использовали параметры по умолчанию (штраф за образование пробела 10, штраф за продолжение пробела 0,5; для сравнений аминокислотных последовательностей использовали матрицу ЕВЬО8иМ62), предпочтительно белки, имеющие несколько, предпочтительно 5-10, конкретно менее чем 5 вставок замен или делеций аминокислот без существенного изменения активности белка, предпочтительно без изменения инсектицидной активности белка. Предпочтительные варианты белка Сгу1С по изобретению включают белок, включающий последовательность из 8Еф ГО Νο. 2 от положения аминокислоты 29 до положения аминокислоты 627, но где одна, несколько или все из следующих аминокислот в следующих положениях заменены по сравнению с положениями в 8ЕО ГО Νο. 2: аминокислота в положении 125 представляет собой Аланин, аминокислота в положении 184 представляет собой Валин, аминокислота в положении 295 представляет собой Аргинин, аминокислота в положении 454 представляет собой Аспарагиновую кислоту или аминокислота в положении 593 представляет собой Аргинин. Также сюда включены любые белковые варианты на основе белка Сгу1С, гибриды или мутатны, сохраняющие, по существу, такую же инсектицидную активность, как и у определенного выше белка Сгу1С по изобретению.
Используемая здесь терминология, где ДНК или белок включают определенную последовательность X, обозначает, что ДНК или белок включают или содержат, по меньшей мере, последовательность X, так чтобы можно было включить другие нуклеотидные или аминокислотные последовательности на 5'-конце (или Ν-конце) и/или З'-конце (или С-конце), например (нуклеотидную последовательность), соответствующую белку маркера селекции, как описано в ЕР 0193259, (нуклеотидную последовательность) транспортного пептида и/или 5' или 3' лидерную последовательность.
Для целей этого изобретения термином идентичность последовательности двух родственных нуклеотидных или аминокислотных последовательностей, выраженная в процентах, обозначают количество положений в двух последовательностях с оптимальным сравнением, которые имеют идентичные остатки (х100), деленное на количество сравниваемых положений. Пробел, т.е. положение при сравнении, где остаток присутствует водной последовательности, но отсутствует в другой, рассматривается как положение с неидентичными остатками. Сравнение двух последовательностей осуществляется с помощью алгоритма №ей1етап и ^ци8сй (№ей1етаи аий ХУшъсЕ 1970) в ЕМВО88 (К1се е1 а1., 2000), с целью получить оптимальное сравнение по всей длине последовательностей использовали параметры по умолчанию (штраф за образование пробела 10, штраф за продолжение пробела 0,5).
Используемая здесь терминология кратчайший токсический фрагмент белка Сгу по изобретению обозначает, что кратчайший фрагмент или часть белка Сгу, сохраняющие инсектицидную активность, могут быть получены с помощью ферментативного гидролиза полноразмерного белка Сгу, с использованием таких ферментов, как трипсин или химотрипсин, или терминология обозначает, что кратчайший фрагмент или часть белка Сгу, сохраняющие инсектицидную активность, могут быть получены с помощью осуществления нуклеотидных делеций в последовательности ДНК, кодирующей белок Сгу. Такой кратчайший токсический фрагмент также может быть получен путем обработки белка Сгу с помощью желудочного сока насекомого, предпочтительно сока средней кишки, полученного от образцов насекомых, чувствительных к такому белку Сгу (т.е., подверженных уничтожению или другому негативному воздействию на их рост, или питающихся этим белком).
Согласно этому изобретению термин белок СгуГО обозначает любой инсектицидный белок, включающий кратчайший токсический фрагмент аминокислотной последовательности из 8ЕО ГО Νο. 15, конкретно, любой инсектицидный белок, включающий аминокислотную последовательность от положения аминокислоты 21 или 29 до положения аминокислоты 604 в 8Еф ГО Νο. 15, предпочтительно любой инсектицидный белок, включающий аминокислотную последовательность из 8ЕО ГО Νο. 15 от положения аминокислоты 3 до положения аминокислоты 604. Также сюда включен инсектицидный белок, включающий аминокислотную последовательность из 8Еф ГО Νο. 13 (также называемый здесь, как белок Сгу1Э1) или из 8ЕО ГО Νο. 15 (также называемый здесь, как белок Сгу1Э2). Белок Сгу1Э. включающий аминокислотную последовательность от положения аминокислоты 29 до положения аминокислоты 604 в 8ЕО ГО Νο. 15 сохраняет всю или большую часть инсектицидной активности целого белка, какая производится в природе, и добавление белковых последовательностей в его Ν- или С-концевой части не
- 4 019029 нарушает этой активности. Следовательно, в изобретении применяется и образует часть этого изобретения любой белок, характеризующийся аминокислотной последовательностью, содержащей или включающей эту область. Эти белки включают инсектицидные гибридные или химерные белки, включающие кратчайший токсический белковый фрагмент из белка из БЕО Ш Νο. 15. Также в это определение включены варианты белков с отличной аминокислотной последовательностью от положения аминокислоты 29 до положения аминокислоты 604 в БЕО Ш Νο. 15, такие как инсектицидные белки, включающие последовательность, имеющую на уровне аминокислотной последовательности идентичность последовательности с этой областью из БЕО Ш Νο.15, по меньшей мере на 95%, конкретно по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98 или на 99%, как определено с использованием глобального алгоритма сравнения №еб1етап-\Уш15с11 в ЕМВОББ (Ктсе с1 а1., 2000) с целью получить оптимальное сравнение по всей длине последовательностей использовали параметры по умолчанию (штраф за образование пробела 10, штраф за продолжение пробела 0,5; для сравнений аминокислотных последовательностей использовали матрицу ЕВЬОБиМ62), предпочтительно белки, имеющие несколько, предпочтительно 5-10, конкретно менее чем 5 вставок замен или делеций аминокислот без существенного изменения активности белка, предпочтительно без изменения инсектицидной активности белка.
Согласно этому изобретению термин белок Сгу1В обозначает любой инсектицидный белок, включающий кратчайший токсический фрагмент аминокислотной последовательности из БЕО Ш Νο. 11, конкретно любой инсектицидный белок, включающий аминокислотную последовательность от положения аминокислоты 31 до положения аминокислоты 648 в БЕО Ш Νο. 11, предпочтительно любой инсектицидный белок, включающий аминокислотную последовательность из БЕО Ш Νο. 11 от положения аминокислоты 3 до положения аминокислоты 648. Также сюда включен инсектицидный белок, включающий аминокислотную последовательность из БЕО Ш Νο. 11 или из БЕО Ш Νο. 9. Белок Сгу1В, включающий аминокислотную последовательность от положения аминокислоты 31 до положения аминокислоты 648 в БЕО Ш Νο. 11, сохраняет всю или большую часть инсектицидной активности целого белка, какая производится в природе, и добавление белковых последовательностей в его Ν- или Сконцевой части не нарушает этой активности. Следовательно, в изобретении применяется и образует часть этого изобретения любой белок, характеризующийся аминокислотной последовательностью, содержащей или включающей эту область. Эти белки включают инсектицидные гибридные или химерные белки, включающие кратчайший токсический белковый фрагмент из белка из БЕО Ш Νο. 11. Также в это определение включены инсектицидные белки, включающие варианты аминокислотной последовательности от положения аминокислоты 31 до положения аминокислоты 648 в БЕО Ш Νο. 11, такие как инсектицидные белки, включающие последовательность, имеющую на уровне аминокислотной последовательности идентичность последовательности с этой областью из БЕО Ш Νο.11, по меньшей мере на 80%, конкретно по меньшей мере на 85, 90, 95, 96, 97, 98% или по меньшей мере на 99%, как определено с использованием глобального алгоритма сравнения №еб1етап-\Уш15с11 в ЕМВОББ (Ктсе е1 а1., 2000) с целью получить оптимальное сравнение по всей длине последовательностей использовали параметры по умолчанию (штраф за образование пробела 10, штраф за продолжение пробела 0,5; для сравнений аминокислотных последовательностей использовали матрицу ЕВЕОБИМ62), предпочтительно белки, имеющие несколько, предпочтительно 5-10, конкретно менее чем 5, вставок замен или делеций аминокислот без существенного изменения активности белка, предпочтительно, без изменения инсектицидной активности белка. Предпочтительные варианты белка Сгу1В по изобретению включают инсектицидный белок, включающий последовательность из БЕО Ш Νο. 11 от положения аминокислоты 31-648, но где аминокислота в положении 151 в БЕО Ш Νο.11 представляет собой Тирозин, или аминокислота в положении 353 в БЕО Ш Νο. 11 представляет собой Аргинин, или белок, где аминокислота в положении 151 в БЕО Ш Νο. 11 представляет собой Тирозин, и аминокислота в положении 353 в БЕО Ш Νο. 11 представляет собой Аргинин.
При использовании здесь термины ДНК или ген, как в сгу1С1-ДНК, обозначают любую последовательность ДНК, кодирующую белок Сгу1С, Сгу1В или белок СгуЮ. соответственно, как определено выше. Эти термины включают определенные выше природные, искусственные или синтетические последовательности ДНК, кодирующие белки Сгу1С, Сгу1В или СгуЮ, такие как любые из БЕО Ш Νο. 2, 5, 7, 9, 11, 13, 15. Также сюда включены последовательности ДНК, кодирующие инсектицидные белки, которые являются достаточно подобными любой из последовательностей ДНК из БЕО Ш Νο. 1, 3, 4, 6, 8, 10, 12 или 14, так что они могут гибридизоваться, (т.е. иметь способность) гибридизоваться с этими последовательностями ДНК при жестких условиях гибридизации. При использовании здесь, жесткие условия гибридизации конкретно обозначают следующие условия: иммобилизацию определенных последовательностей ДНК на фильтр и предгибридизацию фильтров в течение 1-2 ч или в растворе 50% формамида, 5% ББРЕ, 2х реагента Денхардт и в 0,1% БЭБ при 42°С, или в растворе 6хББС, 2х реагента Денхардт и в 0,1% БЭБ при 68°С. Затем непосредственно в предгибридизационный раствор добавляют меченный с помощью дигоксигенина или радиоактивно-меченый зонд, и проводят инкубацию в течение 16-24 ч при подходящей температуре, указанной выше. После инкубации фильты затем отмывают в течение 30 мин при комнатной температуре в растворе 2х ББС, 0,1% БЭБ с двумя последующими отмывками в течение
- 5 019029 мин каждая при 68°С в растворе 0,5х88С и 0,1% 8Ό8. Радиоавтограф проявляют путем экспонирования фильтров в течение 24-48 ч на рентгеновскую пленку (Кобак ХАК-2 или эквивалентной) при -70°С с усиливающим экраном. Конечно, эквивалентные условия и параметры могут использоваться в этом процессе с сохранением желаемых жестких условий гибридизации. Предпочтительные варианты последовательностей ДНК для сгу1С, сгу1В или сгуШ по этому изобретению представляют собой последовательности ДНК, кодирующие варианты инсектицидного белка Сгу1С, Сгу1В или СгуШ, описанные выше.
Также, как здесь определено, сюда включены следующие последовательности в виде Сгу1С-ДНК или гена: а) ДНК, включающая нуклеотидную последовательность из 8ЕО Ш Νο. 1 от положения нуклеотида 85 до положения нуклеотида 2073, Ь) ДНК, включающая нуклеотидную последовательность из 8ЕО Ш Νο. 3 от положения нуклеотида 85 до положения нуклеотида 2073, с) ДНК, включающая нуклеотидную последовательность из 8ЕО Ш Νο. 1 от положения нуклеотида 85 до положения нуклеотида 2073, сшитую с последовательностью ДНК из 8ЕО Ш Νο. 16, б) ДНК, включающая нуклеотидную последовательность из 8ЕО Ш Νο. 4 от положения нуклеотида 7 до положения нуклеотида 2439, е) ДНК, включающая нуклеотидную последовательность из 8ЕО Ш Νο. 3 от положения нуклеотида 85 до положения нуклеотида 2073, сшитую с последовательностью ДНК из 8ЕО Ш Νο. 16, или Г) ДНК, включающая нуклеотидную последовательность из 8ЕО Ш Νο. 6 от положения нуклеотида 7 до положения нуклеотида 2439.
Также, как здесь определено, сюда включены следующие последовательности в виде СгуШ-ДНК или гена: а) ДНК, включающая нуклеотидную последовательность из 8ЕО Ш Νο. 14 от положения нуклеотида 85 до положения нуклеотида 1812, или Ь) ДНК, включающая нуклеотидную последовательность из 8ЕО Ш Νο. 12 от положения нуклеотида 7 до положения нуклеотида 2178.
Также, как здесь определено, сюда включены следующие последовательности в виде Сгу1В-ДНК или гена: а) ДНК, включающая нуклеотидную последовательность из 8ЕО Ш Νο. 8 от положения нуклеотида 7 до положения нуклеотида 2310, или Ь) ДНК, включающая нуклеотидную последовательность из 8ЕО Ш Νο. 10 от положения нуклеотида 91 до положения нуклеотида 1944.
Последовательности ДНК генов Сгу1С, Сгу1В или СгуЮ по изобретению (как продемонстрировано в списке последовательностей без последовательности транспортного пептида) демонстрируют по большей части только 76,6% идентичности последовательности с наиболее близкими известными ранее последовательностями ДНК, доступными в базах данных. Доступные базы данных последовательностей проверяли на последовательности с наиболее близкой идентичностью последовательностей с использованием хорошо известного алгоритма ВЬА8Т, и затем использовали глобальный алгоритм сравнения Хссб1стап-\Уип5с11 в ЕМВО88 (К1се с1 а1., 2000) с целью обнаружения оптимального сравнения между наиболее близкими последовательностями и последовательностями по изобретению (рассматривая их полную длину и используя параметры по умолчанию - штраф за образование пробела 10, штраф за продолжение пробела 0,5). Для СгуШ-ДНК, фрагмент ранее известной последовательности ДНК (равной длины) был выбран с гарантией оптимального сравнения, но даже в таком случае идентичность с наиболее близкой последовательностью составила только 72,5% идентичности последовательности при сравнении с любыми известными последовательностями ДНК, приведенными в доступных базах данных.
Следовательно, также сюда включены следующие последовательности в виде генов сгу1С, сгу1В или сгуШ, которые представляют собой последовательности ДНК, кодирующие инсектицидный белок, имеющий идентичность последовательности с любой из кодирующих последовательностей из 8ЕО Ш Νο. 1, 3, 4, 6, 8, 10, 12 или 14 или с последовательностями ДНК, кодирующими инсектицидный белок, который гибридизуется с любой из последовательностей из 8ЕО Ш Νο. 1, 3, 4, 6, 8, 10, 12 или 14 при жестких условиях гибридизации, предпочтительно жестко гибридизуется с той частью последовательности ДНК любой из последовательностей 8ЕО Ш Νο. 1, 3, 4, 6, 8, 10, 12 или 14, которая требуется для кодирования кратчайшего токсического белкового фрагмента белков по этому изобретению. Идентичности последовательностей ДНК, обозначенные здесь, рассчитывают с использованием глобального алгоритма сравнения Хееб1етап-\Уип5с11 в ЕМВО88 (К1се е1 а1., 2000) с целью обнаружения оптимального сравнения по всей длине последовательностей, используя параметры по умолчанию (штраф за образование пробела 10, штраф за продолжение пробела 0,5; для сравнения последовательностей ДНК используют матрицу ΕΌΝΑΡυΚΕ), жесткие условия гибридизации определены выше.
При использовании здесь термин инсектицидная активность обозначает способность белка уничтожать насекомых, ингибировать их рост или вызывать уменьшение количества питания при проглатывании такого белка насекомыми, предпочтительно экспрессирующегося белка в рекомбинантном организме-хозяине, таком как растительная клетка. Понятно, что при использовании здесь активность по отношению к насекомым одного вида, предпочтительно к их личинкам, является достаточной для того, чтобы белок имел инсектицидную активность, хотя часто белки по изобретению оказывают влияние на насекомых других видов. Рекомбинантные организмы-хозяева, экспрессирующие по меньшей мере один из белков по изобретению - Сгу1С, Сгу1В или СгуШ, обычно создаются для определенного основного вида насекомого-вредителя, или их воздействие направлено на определенный основной вид насекомоговредителя для определенной сельскохозяйственной культуры или области, где такой вид насекомых является вредителем, например моль капустная для растения вида Вгакыса, но часто с другими насекомыми
- 6 019029 также можно бороться с помощью рекомбинантных организмов-хозяев по изобретению, таких как трансгенные растительные клетки или растения, например, могут служить иллюстрацией трансгенные растительные клетки растений по изобретению вида Вта551са - цветной капусты или капусты или трансгенные растения по изобретению вида Вта551са - цветная капуста или капуста, включающие ген сгу1С и/или ген сгу1В согласно изобретению.
При использовании здесь термины количества для борьбы (с насекомыми) белка или борьба с помощью белка или рекомбинантного организма-хозяина, экспрессирующего белок по изобретению, обозначают количество белка, которого достаточно для ограничения повреждения растению при поедании насекомыми такого растения, например, путем уничтожения насекомых или путем ингибирования развития насекомых, ингибирования их фертильности или роста таким образом, чтобы виды насекомых наносили меньшие повреждения растению. Это не означает, что обработка растений с помощью химических инсектицидов более не является необходимой (например, для контроля за видами насекомых, на которых белки по изобретению не оказывают влияния, таких как (дополнительные вторичные) насекомые-вредители вида жесткокрылых или двукрылых), но такая обработка с помощью химических инсектицидов насекомых, на которых направлено воздействие белков по изобретению, может быть существенно уменьшена или ее можно избежать, если получить приемлемую представленность трансгенных растений в поле и приемлемый выход трансгенных растений.
Согласно этому изобретению насекомые, чувствительные к новым белкам Сгу по изобретению, контактируют с этими белками, представленными в количествах для борьбы с насекомыми, предпочтительно, в количествах, уничтожающих насекомое. В одном воплощении изобретения рекомбинантные организмы-хозяева по изобретению, такие как трансгенные растительные клетки или растения по изобретению, экспрессируют на высоком уровне белок или комбинацию белков по изобретению, так чтобы получить высоко-дозовый уровень. При использовании здесь термины высокодозовый уровень, устойчивость насекомого к высокой дозе или высокодозовая экспрессия по отношению к рекомбинантной растительной клетке или растению обозначают концентрацию инсектицидного белка в растительной клетке или растении (измеренную с помощью метода ЕЬ18А в виде процента от общего растворимого белка, количество которого измеряют после экстракции растворимых белков в экстракционном буфере (например, в экстракционном буфере, описанном у 1аи8еи8 с! а1., 1997) с использованием анализа по Бредфорду (ВтабГотб) (Вю-Ваб, Ктсйтоиб, СА; ВгабГогб, 1976)), причем инсектицидный белок уничтожает насекомое-мишень на стадии развития, на которой насекомое является существенно менее чувствительным, предпочтительно в 25-100 раз менее чувствительным к токсину, чем насекомое на первой личиночной стадии, и таким образом, можно ожидать гарантии полного уничтожения насекомого-мишени. В одном воплощении это обозначает получение по меньшей мере 97%, предпочтительно по меньшей мере 99%, наиболее предпочтительно 100% смертности для четвертой личиночной стадии (для насекомых, имеющих 5 личиночных стадий) или для последней личиночной стадии (для насекомых, имеющих 4 личиночных стадии) насекомого-мишени по измерениям с помощью обычных инсектиционных биоанализов, предпочтительно биоанализов цельного растения через 10-14 дней после поглощения насекомым таких растительных клеток или растения с использованием обычных контролей. Существование одного вида насекомых-мишеней (т.е. вида насекомых, предпочтительно их личинок, которые могут вызывать существенные повреждения одному или разнообразным видам растений, и которые обычно представляют собой насекомых, для которых создано и разработано трансгенное В!-растение), для которых трансформированные растительные клетки или растения согласно этому изобретению обеспечивают высокодозовый уровень инсектиционной устойчивости, который является достаточным для растения, созданного для получения высокодозовой экспрессии согласно этому изобретению. Предпочтительные насекомые для белков по этому изобретению представляют собой насекомых-вредителей растений, наносящих экономический вред.
При использовании здесь, термины Сгу1-белок/ДНК или Сгу-белок/ДНК по этому изобретению, обозначают любой из белков Сгу1С, Сгу1В или СтуЮ, или любую из последовательностей ДНК Сгу1С, Сгу1В или СтуЮ, как здесь определено. При использовании здесь, Сгу- или Сгу1-белок может представлять собой полноразмерный белок, также называемый протоксином, или может представлять собой форму белка, усеченную настолько, чтобы сохранялась инсектицидная активность, или Сгу- или Сгу1-белок может представлять собой комбинацию различных белков, представленных в гибридном или сшитом белке. Термин протоксин обозначает полноразмерный инсектицидный кристаллический белок, поскольку он кодируется природной последовательностью В1-ДНК, термин токсин обозначает его инсектицидный фрагмент, конкретно его кратчайший инсектицидный фрагмент, обычно с молекулярным весом, который находится в пределах примерно 50-65 кДа, конкретно, примерно 60 кДа, как определено с помощью БЭБ-РАСЕ-электрофореза путем использования обычного сравнения со стандартами молекулярного веса.
При использовании здесь термин химерный ген используется для обозначения гена или последовательности ДНК, включающих по меньшей мере два различных фрагмента ДНК (таких как промотор, 5'-нетранслируемый лидер, кодирующая область, интрон, З'-нетранслируемая трейлерная последовательность и З'-концевая область образования транскрипта и область полиаденилирования), которые не явля
- 7 019029 ются природно-ассоциированными друг с другом, или которые ведут происхождение из других источников. Обычно, при использовании здесь экспрессируемый в растении химерный ген представляет собой ген, включающий промоторную область, функционально-связанную с синтетической, искусственной кодирующей последовательностью, такой как любая из последовательностей генов сгу1С, сгу1В или стуЮ по изобретению.
Последовательности ДНК, кодирующие белки Сгу1 по изобретению, могут быть химически синтезированы с использованием обычных методов и могут быть вставлены в экспрессирующие векторы для продуцирования больших количеств белков Сгу1. Белки Сгу1 могут использоваться для получения специфичных моноклональных или поликлональных антител подходящим способом (Нойе с1 а1., 1988) для разработки иммуноанализов (например, ЕЫБЛ, ХУеЧегп-блотинг. покрытые антителами мерные стержни) для детекции присутствия или отсутствия этих белков в любом материале, таком как растительный материал.
Инструменты, разработанные для идентификации трансгенных растительных клеток, растений или растительных материалов, таких как листья или семена, включающие любые из генов сгу1 по изобретению, интегрированных в их геном, или ДНК-содержащие продукты, которые включают или выделены из растительного материала, включающего ген сгу1 по изобретению, основаны на определенных характеристиках последовательности новых генов по изобретению, таких как определенная рестрикционная карта геномной области, включающей интегрированный (чужеродный) ген сгу1, молекулярные маркеры или последовательности чужеродной ДНК, интегрированные в геном растения.
Так как последовательность чужеродной ДНК, такой как последовательность генов сгу1 по изобретению, является известной, то могут быть разработаны праймеры и зонды, которые специфично распознают эти последовательности в нуклеиновой кислоте (ДНК или РНК) образца с помощью молекулярнобиологического метода. Например, может быть разработан способ ПЦР для идентификации генов по изобретению в биологических образцах (таких как образцы растений, растительный материал или продукты, включающие растительный материал). Такой способ ПЦР основан по меньшей мере на двух специфичных праймерах, например, один распознает последовательность внутри гена сгу1, и другой распознает последовательность внутри ассоциированной последовательности транспортного пептида или внутри регуляторных областей, таких как промотор или 3 '-концевая область химерного гена, включающих указанный ген сгу1 по изобретению, или оба праймера специфично распознают последовательность гена сгу1 по изобретению. Праймеры, предпочтительно, содержат последовательность размером между 15 и 35 нуклеотидами, которые при оптимизированных условиях ПЦР специфично распознают последовательность внутри химерного гена сгу1 по изобретению, так что специфичный фрагмент (интегрированный фрагмент или дискриминирующий ампликон) амплифицируется из образца нуклеиновой кислоты, включающего ген сгу1 по изобретению. Это означает, что при оптимизированных условиях ПЦР амплифицируется только интегрированный фрагмент-мишень и никакая другая последовательность в геноме растения или в чужеродной ДНК.
ПЦР-праймеры, подходящие для использования в изобретении, представляют собой олигонуклеотиды, размер которых находится в пределах от 17 нуклеотидов до примерно 200 нуклеотидов, включающих нуклеотидную последовательность, по меньшей мере, из 17 последовательно расположенных нуклеотидов, предпочтительно из 20 последовательно расположенных нуклеотидов, выбранных из последовательностей химерных генов сгу1С, сгу1В или стуШ, перенесенных в растительные клетки или растения по изобретению.
Конечно, размер праймеров может быть длиной более чем указанные 17 последовательно расположенных нуклеотидов, и может быть длиной, например, 20, 21, 30, 35, 50, 75, 100, 150, 200 нт или еще более. Праймеры могут полностью состоять из нуклеотидных последовательностей, выбранных из нуклеотидных последовательностей сгу1. Однако нуклеотидная последовательность праймеров на их 5'-конце (т.е. вне области 3'-локализованных 17 последовательно расположенных нуклеотидов) является менее критичной. Таким образом, 5'-последовательность праймеров может состоять из нуклеотидной последовательности, выбранной из последовательности химерного гена сгу1, по необходимости, но может содержать несколько (например, 1, 2, 5, 10) несоответствий. 5'-последовательность праймеров может почти полностью состоять из нуклеотидной последовательности, не связанной с генами сгу1 по изобретению, такой как нуклеотидная последовательность, представляющая один или более сайтов распознавания ферментов рестрикции. Такие не связанные последовательности или фланкирующие последовательности ДНК, содержащие несоответствия, предпочтительно, должны быть не более чем 100 нуклеотидов, более предпочтительно, не более чем 50 нуклеотидов, или не более чем 25 нуклеотидов.
Кроме того, подходящие праймеры могут включать или состоять из нуклеотидной последовательности на их 3'-конце, охватывающей область соединения между геном сгу1 по изобретению и ассоциированной последовательностью транспортного пептида или регуляторных элементов в последовательности химерного гена сгу1, интегрированного в ДНК растения, такие как промоторная последовательность, лидерная последовательность, трейлерная последовательность или 3'-последовательность терминации транскрипции и последовательность полиаденилирования. Также будет сразу понятно специалисту в данной области, что выбранные подходящим образом пары ПЦР-праймеров также не будут включать
- 8 019029 последовательностей, комплиментарных друг другу.
При использовании здесь термин праймер охватывает любую нуклеиновую кислоту, которая способна инициировать синтез новой нуклеиновой кислоты в зависимом от матрицы процессе, таком как ПЦР. Обычно праймеры представляют собой олигонуклеотиды размером от 10 до 30 нуклеотидов, но могут применяться также более протяженные последовательности. Праймеры могут быть представлены в двухцепочечной форме, хотя одноцепочечная форма является предпочтительной. Зонды могут быть использованы в качестве праймеров, но в основном они создаются для связывания ДНК- или РНКмишени, и нет необходимости их использования в процессе амплификации.
При использовании здесь термин распознающий по отношению к специфичным праймерам обозначает тот факт, что специфичные праймеры специфично гибридизуются с последовательностью нуклеиновой кислоты в генах сгу1 по изобретению при условиях стандартного протокола ПЦРидентификации, посредством чего специфичность определяется с помощью присутствия положительных и отрицательных контролей, что хорошо известно из уровня техники.
Также сюда включен набор реактивов для детекции генов сгу1 по изобретению в биологическом материале, а также применение такого набора реактивов для скрининга биологического материала. При использовании здесь термин набор реактивов обозначает набор реагентов, предназначенных для целей осуществления идентификации генов сгу1 по изобретению в биологических образцах. Более конкретно, предпочтительное воплощение набора реактивов включает по меньшей мере один или два специфичных праймера, как описано выше. Необязательно набор реактивов может дополнительно включать любой другой реагент, описанный здесь в протоколе ПЦР-идентификации. Альтернативно, согласно другому воплощению этого изобретения набор реактивов может включать специфичный зонд, как описано выше, который специфично гибридизуется с нуклеиновой кислотой биологических образцов, идентифицируя там присутствие генов сгу1. Необязательно набор реактивов может дополнительно включать любой другой реагент (такой как, но не ограниченный ими, буфер для гибридизации, метку) для идентификации генов сгу1 в биологических образцах с использованием специфичного зонда.
В уровне техники описаны стандартные протоколы ПЦР, такие как описанные в РСК Аррйсайоиз Мапиа1 (Коске Мо1еси1аг Вюскеш1са1з, 2и1 Εάίΐίοη, 1999). Оптимальные условия для ПЦР, включающие последовательность специфичных праймеров, определены в протоколе ПЦР-идентификации для каждого вида растения, содержащего ген. Однако понятно, что может быть необходимым изменять ряд параметров в протоколе ПЦР-идентификации к специфичным лабораторным условиям, и может быть необходима их небольшая модификация для получения сходных результатов. Например, при использовании другого метода получения ДНК может требоваться изменение, например, количества праймеров, полимеразы и используемых условий отжига. Подобным образом, выбор других праймеров может диктовать другие оптимальные условия для протокола ПЦР-идентификации. Однако эти изменения будут очевидны специалисту в данной области, и, кроме того, подробно описаны в использующихся в настоящее время руководствах по применению ПЦР, таких как цитированное выше.
Примеры подходящих комбинаций праймеров согласно изобретению представляют собой последовательности для гена сгу1В по изобретению (последовательность 5' - 3'): Р1В227 (ТАС ТТС САА САС ААА САА ССА САА ССА С, 8ΕΟ ГО Νο. 20) и Р1В228 (СТС САС ССА ААС САА СТС САА САА, 8ΕΟ ГО Νο. 21), и для гена Сгу1С по изобретению: Р1С247 (ААС СТТ САС ССА СТТ ССА ААС, 8ΕΟ ГО Νο. 22) и Р1С252 (ААС АТС АСС СТТ ТСТ САТ АСС АС, 8ΕΟ ГО Νο. 23). Следовательно, сюда включен любой ген, кодирующий инсектицидный белок Сгу1В или Сгу1С, и специфично распознаваемый этими праймерами, а также любой способ детекции таких генов с использованием таких или других специфичных праймеров.
Также для детекции последовательностей ДНК по этому изобретению могут быть созданы и включены сюда специфичные маркеры или зонды, относящиеся к любому из генов сгу1С, сгу1В или сгуГО по изобретению. В одном воплощении этого изобретения специфичные маркеры, праймеры или меченные зонды не детектируют или распознают любое растение того же вида, представленное в качестве тестового растения, которое не содержит последовательности ДНК гена сгу1 по изобретению, конкретно, такие маркеры, праймеры или меченные зонды не детектируют или распознают любое растение, экспрессирующее белок сгу1С, сгуГО или сгу1В, где такое растение не содержит последовательности ДНК по изобретению (такую как ДНК сгу1С, сгуГО или сгу1В, как здесь определено, например, ДНК, включающую последовательность любой из 8ΕΟ ГО Νο. 1, 3, 4, 6, 8, 10, 12, или 14).
Последовательности ДНК по этому изобретению могут иметь небольшие модификации, чтобы предусмотреть присутствие более подходящих сайтов ферментов рестрикции, или для создания небольших изменений без изменения эффективности и предпочтительно без существенного изменения белка, который они кодируют. Действительно, хорошо известно, что из-за вырожденности генетического кода большинство аминокислотных кодонов может быть заменено на другие кодоны без изменения аминокислотной последовательности белка. Кроме того, некоторые аминокислоты могут быть заменены на другие эквивалентные аминокислоты без существенного изменения, предпочтительно, без изменения инсектицидной активности белка. Также маловероятно, что изменения в аминокислотной последовательности или композиции в областях молекулы, отличных от тех, что ответственны за связывание или
- 9 019029 образование пор, вызывают различия в инсектицидной активности белка (например, С-концевая часть Сгу1-протоксина может быть удалена или заменена на другую аминокислотную последовательность без оказания влияния на инсектицидную активность белков Сгу1 по изобретению). Эквиваленты последовательностей ДНК по изобретению включают последовательности ДНК, содержащие менее чем 20, предпочтительно 5-10 нуклеотидных отличий по сравнению с генами сгу1 по этому изобретению, как здесь определено, но которые кодируют инсектицидный белок Сгу1 по изобретению, как здесь определено.
Небольшие модификации в последовательностях ДНК, такие как описанные выше, могут быть осуществлены обычными способами, например с помощью ПЦР-опосредованного мутагенеза (Но с1 а1.,1989, \У1Шс с1 а1., 1989). Более основательные модификации в последовательностях ДНК могут быть осуществлены обычными способами бе ηονο синтеза ДНК желаемой кодирующей области с использованием доступных методов ΌΝΆ.
При использовании здесь, термин кодирующий по отношению к гену, кодирующему белок, обозначает способность такого гена производить белок при транскрипции и трансляции кодирующей последовательности, содержащейся в таком гене в клетке-хозяине, которая является мишенью. Следовательно, химерный ген сгу1С1 по изобретению кодирует белок Сгу1С1 по изобретению, даже если этот ген содержит две кодирующие последовательности, прерванные некодирующей интронной последовательностью.
Термин по существу, тот же по отношению к аминокислотной последовательности белка Сгу1 по изобретению обозначает, что этот белок включает аминокислотную последовательность, которая отличается от аминокислотной последовательности сравниваемого белка не более чем на 5%, предпочтительно не более чем на 2%; и по отношению к токсичности белка Сгу, это обозначает, что в это понятие включают белок, чья величина ЬС50, полученная при тех же условиях биоанализа (предпочтительно, полученная в том же биоанализе с использованием насекомых из одной и той же популяции и с использованием подходящих контролей), отличается от соответствующей величины ЬС50 сравниваемого белка не более чем в 2 раза, предпочтительно не более чем на 50%.
При использовании здесь термин микроорганизм обозначает любой живой организм, который можно наблюдать только с помощью микроскопа, такой как бактерии, дрожжевые клетки, растительные клетки, вирусы, грибы. Этот термин включает все основные одноклеточные организмы с размерами ниже границ видимости, которые могут быть размножены и с которыми могут быть произведены манипуляции в лаборатории, обычно представляющие собой прокариотические или одноклеточные эукариотические формы жизни, включающие тканевые клеточные культуры и плазмиды.
Последовательности ДНК гена сгу1 по изобретению, полученные из тотальной ДНК, могут быть лигированы в подходящие экспрессирующие векторы и трансформированы в подходящие клеткихозяева, которые могут быть затем скринированы с помощью обычных инструментов детекции на присутствие и экспрессию токсина.
Поиск в базах данных с использованием генов по этому изобретению выявляет, что последовательности ДНК по изобретению существенно отличаются от любых ранее описанных генов или последовательностей ДНК, кодирующих токсины с активностью против чешуекрылых (см., например, версию последовательностей ДНК, описанных в патентных заявках от 26.01.2006 (Сепехец выпуск 200602), Нойе апб ^Н|(е1еу. 1989; Сйсктоге е1 а1., 1998; и обновление от 2.08.2005 вебсайта, соответствующего публикации Сйсктоге е1 а1. (1998), который можно обнаружить по адресу: 1и1р://\у\у\г.НГе5сг5и55ех.ас.ик/1юте/ №П С’псктоге/Βΐ/ίηά ех.111т1).
Идентичность ближайшей последовательности на уровне ДНК (для всей длины последовательности по изобретению) в доступных базах данных последовательностей ДНК (доступных из патентной или научной литературы) составила 76,60% для ДНК сгу1С из 5>ЕО Ш №. 1 или 3, и 73% для ДНК сгу1В из 8ЕО Ш №. 10, и 72,5% для ДНК сгуЮ из 8ЕО Ш №. 14, при осуществлении сравнения с использованием определенных выше параметров по умолчанию №еб1етап-\Уип5с11 в ЕМВО88. Следовательно, исходя из того, что доступные базы данных последовательностей ДНК являются репрезентативными для всех известных последовательностей ДНК, последовательности ДНК по этому изобретению отличаются по нуклеотидной структуре по меньшей мере на 23% от установленной ранее последовательности ДНК. Исходя из того, что ближайшие последовательности содержатся в доступных базах данных, это отражает отличие примерно в 485 нуклеотидов для нуклеотидной последовательности из 8ЕО Ш №. 1 или 3, отличие примерно в 524 нуклеотидов для нуклеотидной последовательности из 8ЕО Ш №. 10, и отличие примерно в 498 нуклеотидов для нуклеотидной последовательности из 8ЕО Ш №. 14 с их соответствующими ближайшими опубликованными последовательностями ДНК. Это отличие будет еще более явным для последовательностей ДНК из 8ЕО Ш №. 4, 6, 8 или 12, которые кодируют сшитый белок с транспортным пептидом. Также было обнаружено, что оптимизированная последовательность ДНК транспортного пептида хлоропластов по этому изобретению (8ЕО Ш №. 16), которая была адаптирована для экспрессии в растениях-мишенях по изобретению, имеет 76,1% идентичности последовательности (для соответствующей части равной длины с последовательностью 8ЕО Ш №. 16) с ближайшими последовательностями ДНК, идентифицированными в доступных базах данных последовательностей ДНК, и, следовательно, обладает большим отличием.
- 10 019029
С помощью терминов инсектицидно эффективная часть (часть или фрагмент) последовательностей ДНК, кодирующих белок Сгу1, также обозначенных здесь, как усеченный ген или усеченная последовательность ДНК, обозначается последовательность ДНК, кодирующая полипептид, который имеет меньше аминокислот, чем протоксиновая форма белка Сгу1, но который еще остается инсектицидным.
С целью экспрессии всей последовательности ДНК или ее инсектицидно эффективной части, кодирующей белок Сгу по этому изобретению, в рекомбинантном организме-хозяине, таком как Е. сой, в других В!-штаммах или в растениях, могут быть введены подходящие сайты рестрикции, фланкирующие последовательность ДНК. Это может быть осуществлено с помощью сайт-направленного мутагенеза с использованием хорошо известных процедур (8!апккеик с! а1., 1989; ^ййе с! а1., 1989). С целью получения повышенной экспрессии в растениях, гены сгу1 по изобретению представлены в виде искусственных генов, где последовательность адаптировали для оптимальной экспрессии с помощью синтеза ДНК. В такой последовательности замена последовательностей ДНК, ингибирующих оптимальную экспрессию, достигается путем создания последовательностей ДНК, включающих кодоны, более предпочтительные для растений, предпочтительно для рода или вида растения-мишени.
Для получения повышенной экспрессии в растениях или для предотвращения экспрессии инсектицидного белка, когда он не присутствует в растительной клетке-хозяине (такого как в бактериальной клетке-хозяине), в одном воплощении изобретения характерный для растения интрон вставляют в химерные гены сгу1 по изобретению, предпочтительно, в кодирующую область по меньшей мере одного из генов сгу1 по изобретению. Может использоваться любой из известных характерных для растения интронов (например, Вго\\п. 1986, Вго\\п аиб 81тркоп, 1998, Вго\\п е! а1., 1996) до тех пор, пока он является функционально-связанным с фрагментами кодирующей последовательности, так чтобы гарантировать корректный сплайсинг. Функциональная связь интрона и полученный в результате корректный сплайсинг обычно контролируется у вида растения-хозяина, которое является мишенью, или в его клетках, с помощью ОТ-ПЦР или с помощью Нозерн-блотинга, или с помощью любых других способов, известных из уровня техники. В одном воплощении интрон, характерный для гена двудольного растения используется в генах, которые должны экспрессироваться в клетках двудольного растения, и интрон, характерный для гена однодольного растения используется в генах, которые должны экспрессироваться в клетках однодольного растения. В одном воплощении, интрон по изобретению представляет собой второй интрон индуцируемого светом тканеспецифичного гена 8Т-Ь81 из 8о1ашт !иЬегокит (картофель), как описано у Ескек е! а1. (1986), например, нуклеотидная последовательность из 8ЕЦ ГО Ыо. 1, расположенная между нуклеотидами 672 и 862. В одном воплощении этого изобретения характерный для растения интрон вводят в любую последовательность, кодирующую инсектицидный В!-белок, конкретно, интрон из 8ЕЦ ГО Ыо. 1, расположенный между положениями нуклеотидов 672 и 862, так чтобы он эффективно сплайсировался в растительных клетках. Эффективный сплайсинг в растительных клетках может быть измерен с использованием обычных методов, таких как ОТ-ПЦР, Нозерн-блотинг или детекция функционального белка, продуцируемого в растительных клетках. Конечно, для эффективного сплайсинга интроны необходимо вставить в корректное положение кодирующей последовательности, так чтобы были получены функциональные 5'- и З'-сайты сплайсинга. Было обнаружено с помощью ОТ-ПЦР анализа, что каждый из двух генов сгу по изобретению, продемонстрированных в 8ЕЦ ГО Ыо. 1 и 3, содержащих характерный для растения интрон в различных положениях, оба эффективно сплайсируются в растительных клетках Вгаккюа о1егасеае и производят мРНК, кодирующую ожидаемый белок Сгу.
Согласно одному воплощению этого изобретения белки направляются во внутриклеточные органеллы, такие как пластиды, предпочтительно хлоропласты, митохондрии, или секретируются из клетки, что потенциально оптимизирует стабильность белка и/или экспрессию. Для этой цели, химерные гены по изобретению включают область, кодирующую сигнальный или направляющий пептид, связанный с областью, кодирующей белок Сгу по изобретению. Особенно предпочтительные пептиды, включенные в белки по изобретению, представляют собой транспортные пептиды для направления в хлоропласты или другие пластиды, особенно дублированные области транспортных пептидов из генов растений, чей генный продукт направляется в пластиды, оптимизированный транспортный пептид, описанный у ЬеЬгци е! а1. (1996), или Саре11абек е! а1. (И8 патент 5635618), транспортный пептид ферредоксинΝΆΌΡ+оксидоредуктазы из шпината (Ое1ти11ег е! а1., 1993), транспортный пептид, описанный у \Уопд е! а1. (1992), и направляющие пептиды в опубликованной патентной заявке РСТ \УО 00/26371. В одном воплощении изобретения транспортный пептид хлоропластов включает последовательность из 8ЕЦ ГО Ыо. 17 от положения аминокислоты 3 до положения аминокислоты 124 или ее варианты, такие как транспортный пептид хлоропластов, включающий последовательность из 8ЕЦ ГО Ыо. 17 от положения аминокислоты 3 до положения аминокислоты 124, где аминокислота Сук в положении 55 заменена на Туг в 8ЕЭ ГО Ыо. 17 и/или где аминокислота С1у вставлена после аминокислоты С1у в положении 51 в 8ЕЦ ГО Ыо. 17. Также являются предпочтительными пептиды, являющиеся сигналами секреции белка, связанного с таким пептидом вне клетки, таким как сигнал секреции ингибитора протеиназы картофеля II (Кеб е! а1., 1986), сигнал секреции гена альфа амилазы 3 риса (8ι.ι11ίΓΓ е! а1., 1991) и сигнал секреции белка табака ΡΚ.1 (Согиейккеи е! а1., 1986).
Применяемые сигнальные пептиды согласно изобретению конкретно включают транспортный пеп
- 11 019029 тид хлоропластов (например, Уаи Эсп Вгоеск е! а1. (1985), или оптимизированный транспортный пептид хлоропластов патента И8 5510471 и патента И8 5635618, вызывающих транспорт белка в хлоропласты, секреторный сигнальный пептид или пептид, направляющий белок в другие пластиды, митохондрии, ЭР или другую органеллу. Сигнальные последовательности для направления белка во внутриклеточные органеллы или для секреции во внеклеточное пространство растительной клетки или к клеточной стенке обнаружены в природных направляемых к мишени или секретируемых белках, предпочтительно такие сигнальные последовательности, которые описаны в публикациях К1окдеи е! а1. (1989), К1окдеи аиб \УеП (1991), Ыеийаик & Кодегк (1998), ВШ е! а1. (1999), Мотк е! а1. (1999), Некке е! а1. (1989), Тау1абогак1 е! а1. (1998), ТегакЫша е! а1. (1999), Рагк е! а1. (1997), 8йсйегЬаи е! а1. (1995), каждая из которых введена сюда с помощью ссылки, конкретно последовательности сигнальных пептидов направляемых к мишени или секретируемых белков растений вида ВгакДса, зерновых, хлопка или сои. Предпочтительная последовательность ДНК, кодирующая транспортный пептид по изобретению, представляет собой ДНК, включающая последовательность из 8ЕО ΙΌ Ыо. 16 от положения нуклеотида 7 до положения нуклеотида 371, конкретно, последовательность из 8ЕО ΙΌ Ыо. 16.
Кроме того, для любого насекомого-вредителя, выступающего в роли мишени, свойства связывания белков Сгу по изобретению можно оценить с использованием методов, известных из уровня техники (например, Уаи Рте е! а1., 1990), для определения того, связываются ли белки Сгу1 по изобретению с сайтами в средней кишке насекомого-мишени, которые не распознаются (или конкурируют за связывание) другими белками Сгу или отличными от Сгу. Связывание других В!-токсинов с различными сайтами связывания у релевантных чувствительных насекомых, или других токсинов, выделенных из В!-штаммов или других источников, (таких как У1Р-токсины или ингибиторы протеиназ (кишечных) насекомых), с различным принципом действия, является также здесь очень важным для экспрессии в растении в дополнение к любому из генов сгу1 для предотвращения или замедления развития устойчивости насекомого к инсектицидным токсинам, экспрессирующимся растением. Благодаря характеристикам новых генов сгу1, они являются чрезвычайно полезными для трансформирования растений, например, однодольных, таких как зерновые или пшеница, или двудольных, таких как хлопок, соя или растения вида ВгакДса, для защиты этих растений от повреждения насекомыми.
Особенно для целей управления устойчивостью насекомых для определенного насекомоговредителя является предпочтительным объединять ген сгу1С по этому изобретению с другим геном, кодирующим белок для борьбы с насекомыми, конкретно, кристаллический В!-белок, который не распознает по меньшей мере один сайт связывания, распознаваемый таким белком Сгу1С у насекомогомишени. Предпочтительные белки для борьбы с насекомыми для объединения с белками Сгу1С по изобретению, конкретно, для одновременной экспрессии в растениях, предпочтительно в растениях вида ВгакДса, конкретно в капусте и цветной капусте, включают белок Сгу1В по этому изобретению, белок У1Р3Аа или его токсический фрагмент, как описано в публикациях Ек1гисй е! а1., 1996 и в Патенте И8 6291156, или инсектицидные белки из штаммов видов ХйеиогйаЬбик, 8еггаба или Рйо!огйаЬбик (например, \Уа1егПе1б е! а1., 2001; ГГгепс11-С.опк1ап1 аиб Во\\еп. 2000). В одном воплощении такую коэкспрессию получают путем трансформирования растения, уже экспрессирующего белок для борьбы с насекомыми, геном сгу1 по изобретению, или путем скрещивания растений, трансформированных геном, кодирующим белок для борьбы с насекомыми, и растений, трансформированных геном сгу1 по изобретению. Для растений вида ВгакДса, в качестве первого гена предпочтительно применяется ген сгу1, и в качестве второго гена применяются гены, кодирующие белки Сгу1В, СгуШ или У1Р3Аа, или их варианты или производные. Способы получения экспрессии различных инсектицидных В!-белков (или, подобным образом, для других белков для борьбы с насекомыми) в одном и том же растении с целью минимизировать или предотвратить развитие устойчивости к трансгенным устойчивым к насекомым растениям, описаны в патенте ЕР 0408403. В одном воплощении изобретения, ген сгу1С по изобретению локализован в том же локусе, что и второй ген для борьбы за насекомыми, такой как ген сгу1В или сгуШ, в клетках трансгенного растения или в растениях по изобретению, так чтобы эти гены не сегрегировались в потомстве таких растительных клеток или растений.
Предпочтительно, в целях селекции, но также для повышения опций борьбы с сорняками, трансгенные растения по изобретению также трансформируются ДНК, кодирующей белок, инактивирующий гербициды широкого спектра действия, или трансформируются ДНК, кодирующей белок, который является вариантом белка-мишени для гербицида, но этот вариант белка является не чувствительным к такому гербициду, например, гербициду на основе глуфосината или глифосата.
Инсектицидно эффективный ген сгу1, предпочтительно, химерный ген сгу1, кодирующий инсектицидно эффективный участок протоксина Сгу, может быть стабильно вставлен подходящим образом в ядерный геном растительной клетки, и трансформированная растительная клетка может применяться подходящим образом для получения трансформированного растения, которое является устойчивым к насекомым. В этом отношении, обезвреженная Т1-плазмида, содержащая инсектицидно эффективную часть гена сгу1 в АдгоЬас!егшт, например, АдгоЬас!егшт !итеГас1еик, может применяться для трансформации растительной клетки, и после этого трансформированное растение может быть регенерировано из трансформированной растительной клетки с использованием процедур, описанных, например, в ЕР
- 12 019029
0116718, ЕР 0270822, РСТ публикации \УО 84/02913 и опубликованной Европейской Патентной Заявке (ЕР) 0242246 и в публикации Эе В1оск е! а1. (1989). Предпочтительные Τί-плазмидные векторы, каждый содержат инсектицидно эффективную часть гена сгу, расположенную между пограничными последовательностями, или, по меньшей мере, локализованную слева от правой пограничной последовательности из Т-ДНК Τί-плазмиды. Конечно, другие типы векторов могут использоваться для трансформации растительной клетки с использованием процедур, таких как прямой перенос гена (как описано, например, в ЕР 0233247), опосредованная пыльцой трансформация (как описано, например, в ЕР 0270356, РСТ публикации \УО 85/01856 и патенте И8 4684611), трансформация, опосредрванная вирусной РНК растения (как описано, например, в ЕР 0067553 и патенте И8 4407956), опосредованная липосомами трансформация (как описано, например, в И8 патенте 4536475), и другие способы, такие как способы трансформации определенных линий зерновых культур (например, И8 патент 6140553; Егошш е! а1., 1990; Согбоп-Кашш е! а1., 1990), и общий способ трансформирования однодольных растений (РСТ публикация \УО 92/09696). Для трансформации хлопка особенно предпочтительным является способ, описанный в патентной публикации РСТ \УО 00/71733. Для трансформации сои существует ссылка на способы, известные из уровня техники, например Ншсйее е! а1. (1988) и Сйпйои е! а1. (1990), или способ из \¥О 00/42207.
Также кроме трансформации ядерного генома в изобретение включена также трансформация плазмидного генома, предпочтительно, генома хлоропластов. Ко1а е! а1. (1999) описали способ экспрессии белка Сгу2А в хлоропластах табака, и Ьш е! а1. (2003) описали экспрессию гена сгу1С в транспластомных растениях табака.
Полученное в результате трансформированное растение может использоваться в подходящей схеме разведения растения для получения большего количества трансформированных растений с одинаковыми характеристиками или для введения инсектицидно эффективной части гена в другие сорта тех же или родственных видов растений. Семена, которые получают из трансформированных растений, содержат инсектицидно эффективную часть гена сгу в виде стабильной вставки в геном.
Инсектицидно эффективный ген сгу1, предпочтительно, последовательность из 8ЕО Ш Ио. 1, 3, 4 или 6, вставляют в геном растительной клетки так, чтобы вставленный ген располагался ниже (т.е. 3') по отношению к промотору и под контролем промотора, который управляет экспрессией гена в растительной клетке (называемый здесь способный к экспрессии в растении промотор). Предпочтительно это выполняется путем вставки химерного гена сгу1, включающего способный к экспрессии в растении промотор, в геном растительной клетки, конкретно, в ядерный или пластидный геном (например, хлоропластов). Предпочтительные способные к экспрессии в растении промоторы включают: основные сильные промоторы 358 (358-промоторы) вируса мозаики цветной капусты (СаМУ) изолятов СМ 1841 (Сагбпег е! а1., 1981), СаЬЬВ-8 (Егаиск е! а1., 1980) и СаЬЬВ-Л (Ни11 апб Но^е11. 1987); 358-промотор, описанный Обе11 е! а1. (1985), промоторы семейства убиквитина (например, убиквитиновый промотор маиса, описанные Сйпйеизеп е! а1., 1992, см. также Согпе.)о е! а1., 1993), доз2-промотор (бе Ра!ег е! а1., 1992), етипромотор (Ьаз! е! а1., 1990), актиновые промоторы из АгаЫборзК такие как промотор, описанный Ап е! а1. (1996), актиновые промоторы риса, такие как промотор, описанный 2йапд е! а1. (1991); промоторы вируса мозаики жилки маниоки (\УО 97/48819, Уегбадиег е! а1. (1998)), серии промоторов рРЬЕХ из Вируса 8иЬ!еггапеап С1оуег 8!ип! (\УО 96/06932), конкретно, дубликат промоторной области, выделенной из сегмента 4 или 7 вирусного генома знЫеггапеап с1оуег з!ип! (обозначенные здесь как промоторы 8787 или 8484), описанный у Воеу1пк е! а1. (1995) или у 8сйиптапп е! а1. (2003), промотор алкогольдегидрогеназы, например, рАб1118 (СепВапк входные номера Х04049, Х00581), и ТВ1'-промотор, и ТК.2'промотор (ТК.1'-промотор и ТК.2'-промотор, соответственно), которые направляют экспрессию генов 1' и 2', соответственно, из Т-ДНК (Уе1!еп е! а1., 1984). Альтернативно может использоваться промотор, который не является конститутивным, но скорее является специфичным для одной или более тканей или органов растения (например, листьев и/или корней), посредством чего вставленная часть гена сгу экспрессируется только в клетках специфичной ткани (ей) или специфичного органа(ов). Например, инсектицидно эффективная часть гена сгу может селективно экспрессироваться в листьях растения (например, кукурузы, хлопка) путем расположения инсектицидно эффективной части гена под контроль светоиндуцируемого промотора, такого как промотор малой субъединицы собственного гена растения рибулоза-1,5-бифосфат карбоксилазы или промотор гена из другого растения, такого как горох, как описано в Патенте И8 5254799. Другая альтернатива использование промотора, чья экспрессия является индуцируемой, предпочтительно путем скарификации, такой как при кормлении насекомого, например, МР1промотора, описанного у Согбега е! а1. (1994), или ТК.2'-промотора или промотора маннопин-синтазы из АдгоЬас!егшш (Уе1!еп е! а1., 1984), или промотора, индуцируемого химическими факторами.
Инсектицидно эффективная часть гена сгу предпочтительно вставляют в геном растения так, чтобы вставленная часть гена располагалась выше (т.е. 5') подходящих 3'-концевых сигналов регуляции транскрипции (т.е. сигналы образования транскрипта и полиаденилирования). Предпочтительно, это выполняют путем вставки химерного гена сгу1 в геном растительной клетки. Предпочтительные сигналы полиаденилирования и образования транскрипта включают такие сигналы из 3'-не транслируемой области гена, кодирующего НАДФ-зависимую малатдегидрогеназу из Иауейа Ыбепйз (МагзйаН е! а1., 1996), из
- 13 019029 гена нопалин-синтетазы (Перюкег е( а1., 1982), из гена октопин-синтетазы (С1е1еп е( а1., 1984) и из гена 7 из Τ-ΌΝΆ (УеИеп апб 8сНе11. 1985), которые действуют в качестве 3'-нетранслируемых последовательностей ДНК в трансформированных растительных клетках.
В одном воплощении этого изобретения по меньшей мере один из генов по изобретению, предпочтительно по меньшей мере 2 гена трансформируются в растения, выбранные из группы, состоящей из: кукурузы, хлопка, кресса водяного, хрена, васаби, руколы, кресса, редиса, канолы, сои, овощных культур, растений вида СгисДегае, растений вида Вгаккюасеае, таких как цветная капуста, капуста, китайская капуста, репа, горчица, масличная культура рапса, кормовая капуста, брокколи, брюссельская капуста, горчичный шпинат и им подобных. Конкретно, в одном воплощении этого изобретения следующие растения вида Вгаккюа защищают от насекомых с помощью генов по этому изобретению: В. саппа1а, В. е1опда1а, В. Ггибси1ока, В. щпсеа, В. парик, В. паппока, В. 1пг1а, В. гоки1апк, В. шдга, В. о1егасеа, В. регуиг618, В. гара, В. гирекбгк, В. кербсерк, В. 1оитеГойи и им подобные, конкретно, растения вида Вгаккюа о1егасеае (такие подвиды, как Ьобубк и сарба!а) или растения вида Вгаккюа парик, а также растения следующего рода: Варйапик (такого как В. кабуик), Агшогаша (такого как А. гикбсапа), ^акаЫа (такого как )арошса), Егиса (такого как Е. уеккапа), №кйийшш (такого как Ν. оГГ1апа1е), и Ьер1бшш (такого как Ь. кабуиш).
Изобретение включает вышеперечисленные растения вида Вгаккюа, трансформированные по меньшей мере одним или двумя генами по изобретению, такими как гены сгу1В и сгу1С по изобретению, а также растения, полученные после скрещивания или бридинга с родственными растениями (включающими растения или родственные виды растений), которые содержат гены по изобретению. Такое скрещивание или бридинг могут быть осуществлены с использованием традиционных методов бридинга, известных из уровня техники, но могут также включать работу ш убго, такую как освобождение зародыша, слияние протопластов и подобные. Следовательно, изобретение также относится к растениям вида Вгаккюасеае, таким как В. парик, В. гара, В. _)ипсеа или В. саппаШ, которые содержат ген или гены по изобретению, такие как гены сгу1В и сгу1С по изобретению, полученные из скрещиваний с трансформированным растением В. о1егасеа или его потомком, или с растениями В. о1егасеа, которые содержат ген или гены по изобретению, такие как гены сгу1В и сгу1С по изобретению, полученные из скрещиваний с трансформированным растением В. парик, и изобретение относится к применениям таких растений.
Трансформация растительных клеток также может использоваться для получения белков по изобретению в больших количествах в культурах растительных клеток, например, для получения белка Сгу1, который затем может применяться в зерновых культурах после корректного включения в состав. Когда здесь делается ссылка на трансгенную растительную клетку, то этим обозначают растительную клетку (или также растительный протопласт), как таковой, в выделенном виде или в тканевой культуре, или обозначают растительную клетку (или протопласт), содержащуюся в растении или в дифференцированном органе или ткани, и обе возможности конкретно сюда включены.
Следовательно, ссылка на растительную клетку в описании формулы изобретения не предназначена для обозначения только выделенных клеток в культуре, но обозначает любую растительную клетку, где бы она ни была локализована, или в каком бы типе растительной ткани или органа не присутствовала.
Все или часть генов сгу1 по изобретению, кодирующих белок, направленный против чешуекрылых, также могут использоваться для трансформации бактерий, таких как В. 1йиг1пд1епк1к, которые обладают инсектицидной активностью против чешуекрылых или против жесткокрылых. Таким образом, может продуцироваться трансформированный В1-штамм, который применяется для борьбы с широким спектром насекомых-вредителей в виде чешуекрылых и жесткокрылых или для дополнительной борьбы с насекомыми-вредителями в виде чешуекрылых. Трансформация бактерий, таких как бактерии рода Ркеибошопак, АдгоЬайепиш, Васб1ик или ЕксйепсЫа, генами сгу1 по изобретению, введенными в подходящий носитель для клонирования, может проводиться подходящим способом, предпочтительно с использованием подходящих методов электропорации, как описано в публикации Майб1оп е( а1. (1989) и в Патентной публикации РСТ \УО 90/06999.
Трансформированные штаммы вида Васб1ик, содержащие ген сгу по этому изобретению, могут быть обработаны ферментами с помощью подходящих методов (Пи1шаде, 1981; Вегпйагб апб υΐζ, 1993) для обеспечения высокого выхода продукта в клетках. В подходящих условиях, которые хорошо известны (Пи1шаде, 1981), каждый из этих штаммов спорулирует с получением кристаллических белков, содержащих высокий выход протоксина Сгу.
Инсектицидная, конкретно, направленная против чешуекрылых композиция по этому изобретению может быть включена в состав подходящим способом с использованием микроорганизмов, трансформированных геном сгу, или, предпочтительно, его соответствующими белками Сгу, или протоксином Сгу, токсином или инсектицидно эффективной частью протоксина в качестве активного ингредиента, вместе с подходящими носителями, разбавителями, эмульгаторами и/или дисперсантами (например, как описано в публикации Вегпйагб апб υΐζ, 1993). Эта инсектицидная композиция может быть включена в состав в виде порошка смачивающегося, пилюль, гранул или пылеобразного вещества, или в виде жидкого состава с водными или неводными растворителями, представленного в виде пенки, геля, суспензии, концентрата и т.д.
- 14 019029
Способ борьбы с насекомыми, конкретно с чешуекрылыми, согласно этому изобретению может включать применение (например, распыление) инсектицидного количества белков Сгу или клетокхозяев, трансформированных геном сгу по этому изобретению, в локусе, который необходимо защитить. Локус, который необходимо защитить, может включать, например, место обитания насекомыхвредителей или растущую растительность, или область, где растительность должна расти.
В одном воплощении этого изобретения насекомые, против которых могут применяться гены сгу1 или белки Сгу1 по изобретению, включают насекомых, выбранных из группы, состоящей из: Р1и!е11а ху1оз!е11а, 8робор!ета ех1диа, 8робор!ета НИогаНз, 8робор!ета Ггищрегба, ТпсНорБыа πί, НеНобпз уйезсеиз, Матез!га Ьгаззюае, Р1епз Ьгаззюае, Маибиса зех!а, СНопзЮпеига ГитГегаиа, СНопзЮпеига осс1беи!а11з, СНопзЮпеига гозасеапа, Рапбет1з ругизаиа, Р1а1уио1а зШИаиа, БутаШпа б1зраг, Огду1а 1еисозбдта, Ма1асозота б1зз1па, БатЫиа ПзсеПапа, СЫ1о зирргеззаБз, С1й1о райе11из, 8сйрорНада тсейи1аз, Ат§уго!аеша сбгаиа, Аподла гара, С11гузоте1а зспр1а, Оз(г1п1а ииЬйайз, Рзеибор1из1а тс1ибеиз, и ТНаитеЮроеа рйуосатра. В одном воплощении Р1и!е11а ху1оз!е11а (моль капустная) является предпочтительным насекомымвредителем, которое является мишенью. Это представленный во всем мире вид, который вызывает огромные потери в некоторых крестоцветных растениях, конкретно в растениях вида Вгаззюасаеа. Белки Сгу1С, Сгу1В и Сгу1Э, кодируемые генами по этому изобретению, конкретно применяются для борьбы с этим насекомым, например, путем экспрессии генов по изобретению в клетках растения.
С такими насекомыми можно бороться путем посадки на плантации или выращивании в поле растений, включающих любой из генов сгу1С по изобретению, или путем сохранения присутствия белка Сгу1С, как определено здесь, в растениях или на растениях, осаждаемых такими насекомыми (например, путем посева или посадки на плантацию растения вида Вгаззюа, такого как капуста или цветная капуста, трансформированного геном сгу1С1 или сгу1С2 по этому изобретению, или путем распыления композиции, содержащей белок Сгу1С по этому изобретению). Изобретение также относится к применению генов сгу1 по этому изобретению, по меньшей мере, генов сгу1С1 или сгу1С2 в растениях для их защиты от чешуекрылых насекомых-вредителей, предпочтительно, в комбинации с геном сгу1В или сгу1Э по этому изобретению.
В настоящем изобретении также предлагается модифицированная последовательность, кодирующая транспортный пептид хлоропластов. Такая кодирующая последовательность содержит применяемые кодоны, адаптированные для высокой экспрессии в растениях, конкретно в растениях вида Вгаззюасеае, таких как Вгаззка о1егасеа или Вгаззка иариз, особенно в капусте, цветной капусте или масличном рапсе (каноле). В одном воплощении изобретения модифицированный транспортный пептид включает нуклеотидную последовательность из 8ЕС ΙΌ Ыо. 16 от положения нуклеотида 7 до положения нуклеотида 371, конкретно, последовательность из 8ЕС ΙΌ Ыо. 16. Также в изобретение включены растительные клетки, растения или семена, включающие последовательность, кодирующую модифицированный транспортный пептид по изобретению, а также применение этой последовательности, кодирующей транспортный пептид для направления любого белка в хлоропласты, конкретно в хлоропласты овощных растительных культур, конкретно растений вида Вгаззка.
Эти и/или другие воплощения этого изобретения отражаются в содержании формулы изобретения, которая образует часть описания изобретения.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами, которые не рассматриваются как ограничение изобретения или правовой охраны. Если не оговорено иначе, все методы рекомбинантной ДНК проводили согласно стандартным протоколам, как описано в публикации 8атЬгоок е! а1. (1989) Мо1еси1аг С1ои1ид: А БаЬота!оту Маииа1, 8есоиб Ебйюи, Со1б 8рппд НагЬоиг БаЬота!оту Ргезз, ЫУ и в публикации АизиЬе1 е! а1. Уо1итез 1, 2 (1994) Сиггеи! Рго!осо1з ίη Мо1еси1аг Вю1оду, Сиггеи! Рго!осо1з, И8А. Стандартные материалы и методы для молекулярной работы с растениями описаны в публикации Р1аи! Мо1еси1аг Вю1оду БаЬГах (1993) Ьу ΡΌΌ. Сгоу риЬйзкеб Ьу В1О8 8аеиййс РиЬБсайоиз Б!б (ИК) аиб В1аск\\'е11 8άеиййс РиЬйсайоиз, ИК.
Далее следует прилагаемый список последовательностей, обозначенных в примерах, формуле изобретения и в описании изобретения.
Список последовательностей
8ЕС ΙΌ Ыо.1: оптимизированная последовательность, кодирующая Сгу1С1, включающая интрон в положении 672.
8ЕС ΙΌ Ыо.2: аминокислотная последовательность белка Сгу1С1, кодируемого 8ЕС ΙΌ Ыо. 1.
8ЕС ΙΌ Ыо.3: оптимизированная последовательность, кодирующая Сгу1С2, включающая интрон в положении 489.
8ЕС ΙΌ Ыо.4: оптимизированная последовательность, кодирующая Сгу1С3, включающая последовательность из 8ЕС ΙΌ Ыо. 1 и 8ЕС ΙΌ Ыо. 16, кодирующая белок, сшитый с транспортным пептидом.
8ЕС ΙΌ Ыо.5: белок Сгу1С3, кодируемый 8ЕС ΙΌ Ыо. 4.
8ЕС ΙΌ Ыо.6: оптимизированная последовательность, кодирующая Сгу1С4, включающая последовательность из 8ЕС ΙΌ Ыо. 3 и 8ЕС ΙΌ Ыо. 16, кодирующая белок, сшитый с транспортным пептидом.
8ЕС ΙΌ Ыо.7: белок Сгу1С4, кодируемый 8ЕС ΙΌ Ыо. 6.
8ЕС ΙΌ Ыо.8: оптимизированная последовательность, кодирующая Сгу1В1, включающая последо
- 15 019029 вательность, кодирующую транспортный пептид.
8Е0 ΙΌ №.9: белок Сгу1В1, кодируемый последовательностью из 8ЕО ГО №. 8.
8ЕО ГО №.10: оптимизированная последовательность, кодирующая Сгу1В2.
8ЕО ГО №.11: белок Сгу1В2, кодируемый последовательностью из 8ЕО ГО №. 10.
8ЕО ГО №.12: оптимизированная последовательность, кодирующая СгуЕЭ1, включающая последовательность, кодирующую транспортный пептид.
8ЕО ГО №.13: белок Сгу1Э1, кодируемый последовательностью из 8ЕО ГО №.12.
8ЕО ГО №.14: оптимизированная последовательность, кодирующая СгуЕЭ2.
8ЕО ГО №.15: белок Сгу1Э2, кодируемый последовательностью из 8ЕО ГО №. 14.
8ЕО ГО №.16: последовательность, кодирующая оптимизированный транспортный пептид хлоропластов.
8ЕО ГО №.17: транспортный пептид хлоропластов, кодируемый последовательностью из 8ЕО ГО №. 16.
8ЕО ГО №.18: дублированная промоторная последовательность (8787) вируса 87 киЫеггаиеап с1оует к1ипЕ
8ЕО ГО №.19: дублированная промоторная последовательность (8484) вируса 84 киЫеггаиеап с1оуег к1ипЕ
8ЕО ГО №. 20: праймер Р1В227 гена сгу1В.
8ЕО ГО №. 21: праймер Р1В228 гена сгу1В.
8ЕО ГО №. 22: праймер Р1С247 гена сгу1С.
8ЕО ГО №. 23: праймер Р1С252 гена сгу1С.
Примеры
1. Конструкция химерных генов и трансформация векторов.
Некоторые гены сгу1 были созданы и собраны с использованием комбинации технологий получения генов с оптимальной представленностью в растительных клетках.
сгу1С1-ДНК, которая была создана для оптимальной экспрессии в растительных клетках, представлена в последовательности 8ЕО ГО №. 1. Эта последовательность ДНК кодирует инсектицидный белок Сгу1С1 по изобретению (8ЕО ГО №. 2). Для трансформации растений первый химерный ген (химерный ген сгу1С1) конструируют с включением следующих функционально-связанных элементов (5'-3'): промотора, включающего дублированную промоторную область, выделенную сегмента 7 вирусного генома кнЫеггапеап с1оуег к1ип1 (8787-промотор, Воеу1пк е1 а1., 1995, 8ЕО ГО №. 18), лидерную последовательность из специфичного для тапетума гена Е1 (6Е1) из Огуха кайуа (МюЫе1к е1 а1., 1992), последовательность сгу1С1-ДНК, включающую второй интрон из свето-индуцируемого тканеспецифичного гена 8ТЬ81 из 8о1апит ФЬегокит (Ескек е1 а1., 1986) в положении 672 (8ЕО ГО №. 1), и последовательность, включающую 3'-не транслируемую область гена НАДФ-зависимой малатдегидрогеназы из Иауепа ЫбепЕк (3' Ме1, Магкйа11 е1 а1., 1996).
Был создан подобный химерный ген сгу1С, где 8Т-Ь81 интрон 2 находился в положении 489 сгу1СДНК (т.е. сгу1С2-ДНК), который представлял собой химерный ген сгу1С2, сконструированный подругому точно такой же химерный ген сгу1С1.
Для точного направления белка Сгу1С в отношении хлоропластов клетки сконструированы варианты химерных генов сгу1С1 и сгу1С2, которые включают модифицированную последовательность, кодирующую оптимизированный транспортный пептид (8ЕО ГО №.16), как описано в публикации ЬеЬгип е1 а1. (1996), функционально-связанный с кодирующей областью сгу1С так, чтобы сшитый белок транспортного пептида экспрессировался в растительных клетках. Это химерные гены сгу1С3 и сгу1С4, включающие последовательности, кодирующие Сгу1С3 и Сгу1С4, соответственно, каждая из которых содержит последовательность модифицированного транспортного пептида хлоропластов из 8ЕО ГО №.16. Последовательность ДНК Сгу1С3 представлена в 8ЕО ГО №. 4, она представляет собой последовательность Сгу1С1 из 8ЕО ГО №. 1, сшитую с кодирующей последовательностью транспортного пептида из 8ЕО ГО №. 16. Последовательность ДНК Сгу1С4 представлена в 8ЕО ГО №. 6, она представляет собой последовательность Сгу1С2 из 8ЕО ГО №. 3, сшитую с кодирующей последовательностью транспортного пептида из 8ЕО ГО №. 16.
Сгу1В1-ДНК, которая была создана для оптимальной экспрессии в растительных клетках, представлена в 8ЕО ГО №. 8. Эта последовательность ДНК кодирует инсектицидный белок Сгу1В1 по изобретению (8ЕО ГО №. 9). Для трансформации растений конструируют химерный ген (химерный ген сгу1В1) с включением следующих функционально-связанных элементов (5'-3'): промотора, включающего дублированную промоторную область, выделенную из сегмента 4 вирусного генома киЬΐе^^аиеаи с1оует кЕнИ (8484-промотор, Воеу1пк е1 а1., 1995, 8ЕО ГО №. 19), лидерную последовательность из специфичного для тапетума гена Е1 (6Е1) из Огуха кайуа (МюЫе1к е1 а1., 1992), последовательность Сгу1В1-ДНК, включающую модифицированный транспортный пептид хлоропластов из 8ЕО ГО №.16 и последовательность, включающую 3'-нетранслируемую область гена НАДФ-зависимой малатдегидрогеназы из Иауепа ЫбепЕк (3' Ме1, Магкйа11 е1 а1., 1996).
Вторая форма химерного гена Сгу1В также была создана с использованием сгу1В2-ДНК (8ЕО ГО
- 16 019029
Νο. 10), где не содержится последовательности, кодирующей оптимизированный транспортный пептид, так чтобы в цитоплазме растительных клеток происходило накопление белка Сгу1В. Такая форма представляет собой химерный ген сгу1В2.
сгуЮ1-ДНК, которая была создана для оптимальной экспрессии в растительных клетках, представлена в 8ЕЭ ΙΌ Νο. 12. Эта последовательность ДНК кодирует инсектицидный белок Сгу1Э1 по изобретению (8ЕЭ ΙΌ Νο. 13). Для трансформации растений конструируют химерный ген (химерный ген сгу1Э1) с включением следующих функционально-связанных элементов (5'-3'): 8484-промотора (8ЕЭ ΙΌ Νο. 19), лидерной последовательности гена Е1 (СЕ1) из Огуха кабуа (М1сЫе1к е1 а1., 1992), последовательность сгу1Э1-ДНК, включающую модифицированный транспортный пептид хлоропластов из 8ЕЭ ΙΌ Νο.16 и последовательность, включающую 3'-не транслируемую область гена НАДФ-зависимой малатдегидрогеназы из Натела Ыбеибк (3' Ме1, Магкйа11 е1 а1., 1996).
Вторая форма химерного гена сгуЮ также была создана с использованием сгт1Э2 -ДНК, где не содержится последовательности, кодирующей оптимизированный транспортный пептид, так чтобы в цитоплазме растительных клеток происходило накопление белка СгуЮ. Такая форма представляет собой химерный ген сгу1Э2.
Вектор для трансформации ДНК (рТ1С4В1) конструируют с включением химерного гена сгу1С4 и химерного гена сгу1В1 между границами Т-ДНК в ориентации по отношению друг к другу - голова к хвосту (3'Ме1-сгу1С4-СЕ1 лидер-5787 - 8484-СЕ1 лидер-сгу1В1-3'Ме1), а также вектор для переноса (рТ1С2В2), включающий химерный ген сгу1С2 и химерный ген сгу1В2 между границами Т-ДНК в ориентации по отношению друг к другу - голова к хвосту (3'Ме1-сгу1С2-СЕ1 лидер-8787 - 8484-СЕ1 лидерсгу1В2-3'Ме1). Таким образом, гены сгу1С и сгу1В по изобретению совместно переносятся в растительную клетку, и располагаются в одном локусе после успешной трансформации.
Конструируют подобные Т-ДНК векторы, которые содержат вышеуказанные химерные гены сгу1С, но которые при этом содержат в качестве второго химерного гена гены сгу1Э1 или сгу1Э2 вместо вышеуказанных химерных генов сгу1В. Также конструируют вектор для трансформации, содержащий триплет гена сгу, включающий гены сгу1С, сгу1Э и сгу1В (каждый из которых содержит или не содержит модифицированный транспортный пептид).
Векторы для трансформации, содержащие гены по изобретению, были выделены на основе рС8С1700 (СотеИкке!'! аиб УаибеМе1е, 1989). Основа вектора содержит следующие генетические элементы:
a) плазмидное ядро, включающее последовательность начала репликации из плазмиды рВК322 (Εο11уаг е1 а1., 1977) для репликации в Екс1юлс1иа той и рестрикционный фрагмент, включающий последовательность начала репликации из плазмиды рУ81 из Ρкеибοтοηак (Ιΐοΐι е1 а1., 1984) для репликации в АдгоЬас1егшт 1ите£ас1еик;
b) ген маркера селекции, дающий устойчивость к стрептомицину и спектиномицину (аабА) для роста и селекции плазмиды в ЕксйегюЫа той и АдгоЬас1егшт 1ите£ас1еик;
c) область ДНК, состоящая из фрагмента кодирующей последовательности гена ирП - неомицин фосфотрансферазы из транспозона Ти903 (Ока е1 а1., 1981).
Т-ДНК область из каждого вектора для трансформации также содержит химерный ген Ьаг, который служит в качестве гена маркера селекции. Экспрессия гена Ьаг дает возможность продуцироваться ферменту фосфинотрицин-ацетилтрансферазы, который метаболизирует гербицид глуфосинат аммоний, таким образом, переводя его в негербицидное состояние в растении. Химерный ген Ьаг включает 3553промоторную область из 358 транскрипта вируса мозаики цветной капусты (Обе11 е1 а1.,1985), последовательность, кодирующую Ьаг из гена фосфинотрицин ацетилтрансферазы из 81герЮтусек йуд^οксοр^сик, как описано в публикации Т^тртои е1 а1. (1987), и 3'-концевую последовательность терминации транскрипта и последовательность полиаденилирования из 3'-не транслируемой области гена нопалинсинтетазы из Т-ДНК плазмиды рТ1Т37 (Эерюкег е1 а1., 1982).
Также конструируют векторы для трансформации, подобные описанным, где используются химерные гены сгу1С1 или сгу1С3 (подобно, как вышеописанные сгу1С, но содержащие интрон 8Т-Ь81 в положении 489). Также эти векторы содержат химерные гены сгу1В1 или сгу1В2, или описанные выше химерные гены сгуЮ1 или сгуЮ2.
Перед использованием для трансформации растений подтверждали с помощью рестрикционного анализа и с помощью секвенирования ДНК, что все плазмиды сконструированы корректно.
2. Трансформация растений и регенерация.
Вышеописанные векторы для трансформации рТ1С4В1 и рТ1С2В2, содержащие гены сгу1С и сгу1В по изобретению, переносили в штаммы АдгоЬас1егшт 1ите£ас1еик для трансформации в растениях с использованием обычных методов.
Растения цветной капусты и капусты трансформировали с использованием АдгоЬасЮлит для трансформации. Семена растений Вгаккюа ο1е^асеа уаг. сарйа!а (капуста) или Вгаккюа ο1е^асеа уаг. όοίΓ^Ίίκ (цветная капуста) стерилизовали путем погружения в 70% раствор этанола с последующим погружением в 6% раствор отбеливателя. Семена затем промывали в стерильной воде и переносили в маленькие чашки Петри, содержащие среду на основе М8. Чашки Петри помещали в стеклянные контейнеры и инкубиро- 17 019029 вали в течение 5-8 дней при 24°С. Гипокотильные экспланты размером 0,5-0,7 см разрезают и помещают в жидкую среду вместе с подходящими гормонами. АдгоЬас!егшт 1итеГас1еи5, несущие гены, представляющие интерес, добавляют к среде для получения конечной концентрации, составляющей 1х107 бактерий/мл. После периода совместной культивации, экспланты промывают в жидкой среде, содержащей подходящие антибиотики или гормоны, и помещают сушиться на фильтровальную бумагу.
Экспланты культивируют в течение одной недели в среде, индуцирующей каллюс, содержащей 5 мг/л нитрата серебра и 250 мг/л обоих - триациллина и карбенициллина, и 10 мг/л фосфинотрицина для селекции случаев трансформации.
Каждые две недели экспланты переносили в свежую среду. Каждую неделю экспланты проверяли на предмет образования каллюса. Каллюсы удаляли из эксплантов и переносили в среду, индуцирующую образование побегов. Побеги переносили в пластиковые контейнеры, содержащие среду для выращивания растений. Побеги держали на этой среде до тех пор, пока они не нормализуются и не укоренятся. Если их размер составлял 3-10 см и они имели хорошо развитую корневую систему, то их переносили в теплицу.
Растения масличного рапса также трансформировали генами сгу1С и сгу1В с использованием АдгоЬас!егшт 1итеГас1еи8. Гипокотильные экспланты растений Вгаккюа парик использовали с помощью обычных методов трансформации и регенерации, например, как метод, описанный в публикации Эе В^ск е1 а1. (1989).
3. Анализ трансформантов.
Один раз трансформированные растения регенерируются, используется ПЦР-анализ и Саузернанализ для подтверждения интеграции трансгенов. Иммунологические анализы, такие как Сгу1С- и Сгу1В-специфичные ЕЫ8А-анализы или Вестерн-блот анализы, используются для селекции трансформированных растений, демонстрирующих оптимальный уровень экспрессии белков Сгу1С и Сгу1В.
С помощью ОТ-ПЦР экспериментов на РНК, собранной из растений цветной капусты, демонстрируют, что растения являются трансформированными генами Сгу1С из 8Еф ΙΌ Νο. 1 или 3, включая присутствие интронной последовательности в различных положениях, подтверждая таким образом, что происходит корректный сплайсинг, и в этих растениях продуцируется функциональный белок Сгу1С. Это также подтверждается Нозерн-блот анализом РНК из этих растений.
Также с помощью инсектиционных анализов с использованием личинок Р1и1е11а ху^йеПа при стандартных условиях инсектиционного биоанализа с использованием подходящих контролей селектированных трансформированных растений капусты, цветной капусты и масличного рапса, содержащих гены сгу1С и сгу1В, подтверждали высокую инсектицидную активность и высокий уровень экспрессии этих белков в тех трансформированных растениях, которые селектировали на предмет оптимальной экспрессии. Также насекомые Р1и1е11а χу1ο8(е11а. которые были селектированы по устойчивости к белку Сгу1С или Сгу1В, все равно эффективно уничтожались растениями по изобретению.
Потомство растений и семена также получают из трансформированных селектированных растений по изобретению, и продемонстрировано, что гены по изобретению сегрегируются в таком потомстве согласно ожидаемому правилу Менделя. Селекция трансгенных растений в теплице и в поле в многочисленных точках локализации приводит в результате к идентификации линий растения, которые имеют оптимальную стабильность и экспрессию химерных генов Сгу1 вместе с оптимальной агрономической представленностью. Скрещивание селектированных наилучшим образом представленных трансгенных растений с некоторыми различными коммерческими линиями, и их повторное обратное скрещивание приводит в результате к присутствию (связанных) генов Сгу1В и Сгу1С по изобретению в различном генетическом окружении растений капусты, цветной капусты или масличного рапса, оптимально адаптированных к различным областям или климатическим условиям.
Цитированные ссылки
Ап е1 а1. (1996) Р1ап! 1. 10, 107.
Вегпйагй апй υΐζ (1993) Ргойис1юп οΓ ВасШик 11шппд1епк1к ткесиайек Γογ ехрептеп1а1 апй отттегаа1 икек, 1п ВасШик 1Ниг1пд1епк1к, Ап Еиν^^οитеиΐа1. Вюрекйайе: Τίκοιγ апй Ргасйсе, рр.255-267, ейк. Еп1^1811е, Р.Р., Гогу, 18., Вайеу, М.1. апй Н1ддк, 8., Ιοίιπ ХУйеу апй δο^, №\ν ΥοιΊ< (1993).
ВШ е! а1. (1999) 1. Вю1. С1ет. 274, 22884-22894.
Вοеν^пк е! а1. (1995) УиШсду, 207, 354-361.
Ηο1ι\3Γ е! а1. (1977) бепе, 2: 95-113.
ВгайГэгй е! а1. (1976) Апа1. Вюсйет. 72, 248-254.
Вго\уп (1986) М.1с1е1с Ас1йк Век. 1986 14, 9549-9559.
Вго\уп апй (1998) Апп. Веу. Р1ап! Рйукю1. Р1ап! Мο1. Вю1. 49, 77-95.
Вишие!а1. (1996) Р1ап! Мс1 Вю1. 32, 531-535.
СНгМепкеп е! а1. (1992) Р1ап! Мο1. Вю1. 18, 675-689.
СНпкЮн е! а1. (1990). Тгепйк В^есИш^^у 8, 145.
СоШета е! а1. (1994) ТИе Р1ап! Шита 6, 141.
(‘οπι^ο е! а1. (1993) Р1ап! Мс1. Вю1. 23, 567-581.
СогпеИккеп & Уапйе\\'1е1е (1989) ШОею Аайк Векеагсй, 17: 19-25.
Сο^ие1^ккеи е! а1. (1986) ЕМВО 1. 5, 37-40.
- 18 019029
Спсктоге е! а1. (1998) М1сгоЫо1. Μοί. ΒίοΙ Веу. 62(3), 807-13.
Ба11а е! а1. (1990) В1о/Тесйпо1о§у 8, 736-740.
Бе В1оск е! а1. (1989) Р1ап! РЕузюк, 91: 694.
Бе Ра!ег е! а1., 1992, Р1ап! 1. 2, 834-844.
Берккег е! а1. (1982) 1оигиа1 о! Мо1еси1аг апб ЛррНеб Сепейсз, 1: 561-573.
Бктаде (1981), Ргобисйоп о! Вас!епа Гог Вю1одка1 Соп1го1 о! 1пзес!з т Вю1одка1 Соп!го1 т Сгор Ргобисйоп, Еб. Рарап/аз, Б.С., Озтип РиЬНзЕегз, То1о\\а. N.1., И8Л, рр. 129-141 (1981).
Ескез е! а1. (1986) Мо1еси1аг апб Сепега1 Сепейсз, 205: 14-22.
Ез!гисЕ е! а1., (1996), Ргос №111 Асаб δα И8А 93, 5389-94.
Е!гепсЕ-Сопз!ап! апб Во\\еп (2000) Се11 Мо1 Б11с δα 57, 828-33.
Егапск е! а1. (1980) Се11 21, 285-294.
Еготт е! а1. (1990) Вк/Тескпокду 8, 833-839.
Сагбпег е! а1. (1981) №.1с1ек Аабз ВезеагсЕ 9, 2871-2887.
С1е1еп е! а1. (1984) ЕМВО 1 3, 835-845.
Согбоп-Катт е! а1. (1990) ТЕе Р1ап! Се11 2, 603-618.
Неззе е! а1. (1989), ЕМВО 1. 8, 2453-2461.
НшсЕее е! а1. (1988) Вк/Тескпокду 6, 915.
Но е! а1. (1989). Сепе 77, 51-59.
Нойе е! а1. (1988) Арр1. апб Епукопт. М1сгоЫо1. 54, 2010-2017.
Нойе апб \Ы!е1еу (1989) М1сгоЫо1о§1са1 Веу1ете 53, 242-255.
Ни11 апб Ноие11 (1987) У1го1о§у 86, 482-493.
ИоЬ е! а1. (1984) Р1азт1б, 11: 206-220.
Чапзепз е! а1. (1997) Сгор 8аепсе 37, 1616-1624.
Кей е! а1. (1986), №с1. Аабз Вез. 14, 5641-5650.
К1оздеп е! а1. (1989), Мо1. Сеп. Сепе!. 217, 155-161.
К1оздеп апб \\еИ (1991), Мо1. Сеп. Сепе!. 225, 297-304.
Ко!а е! а1. (1999) Ргос. №Й. Асаб. δά. И8А 96, 1840-1845.
Баз! е! а1. (1990) ТЕеог. Арр1. Сепе!. 81, 581-588.
БеЬгип е! а1. (1996) υδ Ра!еп! 5,510,471.
Бт е! а1. (2003) Во!. Ви11. Асаб. δω. 44: 199-210.
МаЫ11оп е! а1, ЕЕΜδ М1сгоЫо1. Бе!!егз 60, 205-210 (1989).
МагзЕа11 е! а1. (1996) Р1ап! РЕуз1о1о§у, 111: 1251-1261.
М1сЫе1з е! а1. (1992) риЬйзЕеб РСТ аррйсайоп \О92/13956.
Мотз е! а1. (1999), ВюсЕет. ВюрЕуз. Вез. Соттип. 255, 328-333.
№еб1етап апб \ипзсЕ (1970) 1. Мо1. Вю1., 48: 443-53.
№иЕаиз & Водегз (1998), Р1ап! Мо1. Вю1. 38, 127-144.
Обе11 е! а1. (1985) №!иге, 313: 810-812.
Ое1ти11ег е! а1., Мо1. Сеп. Сепе!. 237, 261-272 (1993).
Ока е! а1. (1981) 1оита1 о! Мо1еси1аг Вю1о§у, 147: 217-226.
Рагк е! а1. (1997), 1. Вю1. СЕет. 272, 6876-6881.
В1се е! а1. (2000) Тгепбз т Сепейсз, 16: 276-277.
δсЕиптапп е! а1. (2003) Еипсйопа1 Р1ап! Вю1о§у 30, 453 -460.
δЕсЕе^Ьаπ е! а1. (1995) Ргос. №!1. Асаб. δ^ ША 92, 9245-9249.
δй^татο!ο е! а1. (1989) №11иге 338, 274-276.
διапззепз е! а1. (1989), №.1с1ек Аабз ВезеагсЕ 12, 4441-4454.
δπ!1ί!! е! а1. (1991) Р1ап! Мо1ес. Вю1. 16, 579-591.
Тау1абогак1 е! а1. (1998), ЕЕΒδ Бей. 426, 62-66.
ТегазЫта е! а1. (1999), Арр1. М1сгоЫо1. Вю1есЬпо1. 52, 516-523.
ТЕотрзоп е! а1. (1987) ТЕе ЕМВО 1оигпа1, 6: 2519-2523.
Уап Беп Вгоеск е! а1., 1985, №11иге 313, 358.
Уап В1е е! а1. (1990) δс^епсе 247, 72.
Уе1!еп е! а1. (1984) 1., ЕМВО 1 3, 2723-2730.
Уе1!еп апб δсЕе11 (1985) №.1с1ек Аабз ВезеагсЕ 13, 6981-6998.
Уегбадиег е! а1. (1998) Р1ап! Мо1. Вю1. 37, 1055-1067.
\а!егйе1б е! а1. (2001) Тгепбз М1сгоЫо1 9, 185-91.
\Ы!е е! а1. (1989) Тгепбз ш Сепе!. 5, 185-189.
\\'опд е! а1. (1992) Р1ап! Мо1ес. Вю1.20, 81-93.
2атЬгузк1 (1988) Аппиа1 Веу1ете о! Сепейсз, 22: 1-30.
/Капу е! а1. (1991) ТЕе Р1ап! Се11 3, 1155-1165.
2Еао е! а1. (2003) №11иге В1о!есЕпо1о§у, 21: 1493-1497.
Все цитированные ссылки введены в описание с помощью ссылки. Цитирование любой из этих ссылок не должно быть истолковано, как признание правильности каждого утверждения, которое содер
- 19 019029 жится в такой ссылке, а также не должно быть истолковано, как признание того, что такая ссылка является соответствующей предшествующему уровню техники или части общих знаний в любой области.
Список последовательностей <110> Вауег ВгоЗстепсе Ν.ν.
Уап Βίε, Иегоеп
Меи1емаебег, Кгапк
Уап Е1сНк, СегЬеп <120> Новые гены, кодирующие инсектицидные белки <130> ВС306-2003 <160> 23 <170> Рабепб1п νεΓθίοη 3.3 <210> 1 <211> 2076 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> модифицированная последовательность <220>
<221> СОЗ <222> (1)..(672) <220>
<221> Интрон <222> (673)..(861) <220>
<221> СОЗ <222> (862) . . (2073) <400> 1
абд дсб дад дад аас аас сад аас сад бдб абс ссб бас аас бдб сбб 48
Меб А1а <31и С1и Азп Азп Θΐη Азп С1п Суз Не Рго Туг Азп Суз Ьеи
1 5 10 15
бед аас ссб дад дад дбб сбб сбб даб дда дад ада абс бсб асб дда 96
Зег Азп Рго С1и С1и Уа1 Ьеи Ьеи Азр С1у С1и Агд 11е Зег ТИг 61у
20 25 30
- 20 019029
аас Азп ЬсЬ Зег ОН Зег 35 аБс Не даН Азр аИ Не ЬсЬ Зег си Ьеи 40 ЬсЬ Зег сП Ьеи дП Уа1 сад <31п Пс РИе 45 си Ьеи дП Уа1 ЪсЬ Зег 144
аас Пс дЬЬ ссЬ дда дда дда ис сП ди дда си аЬс даН Пс дН 192
Азп РИе Уа1 Рго С1у С1у <31у РНе Ьеи Уа1 61у Ьеи Не Азр РИе Уа1
50 55 60
ьдд дда аЪс дЪЬ дда ссС ЬсЬ сад Едд даЬ ди Нс си ди сад аОс 240
Тгр 61у Не Уа1 С1у Рго Зег <31п Тгр Азр А1а РИе Ьеи Уа1 С1п Не
65 70 75 80
дад сад си аСс аас дад ада аЬс дс! дад Ис дсЪ ада аас ди дсЬ 288
61и С1п Ьеи Не Азп 61и Агд Не А1а С1и РИе А1а Агд Азп А1а А1а
85 90 95
аЬс дсЬ аас сП дад дда сЪЬ дда аас аас Ис аас аЬс Бас дП дад 336
Не А1а Азп Ьеи С1и С1у Ьеи С1у Азп Азп РИе Азп 11е Туг Уа1 С1и
100 105 110
дсЪ ЬЬс аад дад Бдд дад дад даЬ сП аас аас си дад асЬ ада асЪ 384
А1а Рке Ьуз С1и Тгр С1и б1и Азр Рго Азп Азп Рго С1и ТИг Агд ТЬг
115 120 125
ада дЬЬ аЬс дае ада ЬЬс ада аЬс сП даЬ дда сП си дад ада даН 432
Агд Уа1 11е Азр Агд Рке Агд Не Ьеи Азр б1у Ьеи Ьеи С1и Агд Азр
130 135 140
аЬЬ ссЬ ЬсЬ ЬЬс ада аОс ЬсЬ дда Нс дад дН ссО си ис ОсС дН 480
Не Рго Зег РИе Агд Не Зег О1у РИе С1и \7а1 Рго Ьеи Ьеи Зег Уа1
145 150 155 160
Бас дсЬ сад дсЬ дсЬ аас сП саЬ сП дсЬ аЬс си ада даЬ ОсЬ дП 528
Туг А1а 61п А1а А1а Азп Ьеи Н13 Ьеи А1а 11е Ьеи Агд Азр Зег Уа1
165 170 175
аЬс ЬЬс дда дад ада Ьдд дда си асЬ асЬ аЬс аас дН аас дад аас 576
Не РИе С1у С1и Агд Тгр С1у Ьеи ТИг ТЬг 11е Азп Уа1 Азп С1и Азп
180 185 190
Ьас аас ада си аОс ада саЬ аЪс даН дад Бас ди даЬ сак ЬдЬ дсЬ 624
Туг Азп Агд Беи Не Агд Н1з Не Азр С1и Туг А1а Азр ΗΪ8 Суз А1а
- 21 019029
195 200205
аас асР Рас аас ада дда СРР аас аас сРР сер аад РсР асР Рас сад 672
Азп ТЬг Туг Азп Агд <31у Ьеи Азп Азп Ьеи Рго Ьуз Зег ТЬг Туг С1п
210 215 220
дЬаадРЬЬсР дсРЬсЬассР ЪРдаСаРаРа РаЬааРааРЬ аСсаРЬааРС адРадРааЬа 732
ЬааРаЬЬЬса ааЬаЬЬЬЬЬЪ РсааааЬааа адааЬдЬадЪ аЬаРадсааЬ ЬдсЬСЬЬсЬд792
ЬадЬРЬаСаа дЬдЬдЬаЬаЬ ЬЬЬааЬЬЬаР аасЬЬЬЬсЬа аЬаЬаЬдасс ааааЪЬЬдЬЬ852 даРдРдсад дас Ьдд аСс асЬ Рас аас ада сСР ада ада дар сРР асР сРР903
Авр Тгр Не ТИг Туг Азп Агд Ьеи Агд Агд Авр Ьеи ТЬг Ьеи
225 230235
асР ТЬг дРР Уа1 240 сРР Ьеи дар Азр аРР 11е дер А1а дсР А1а 245 РРс РЬе РРс РЬе ссР Рго аас Азп Рас Туг 250 даР Азр аас Азп ада Агд ада Агд 951
Рас ССР аРс сад ссР дРР дда сад сРР асР ада дад дРР Рас асР даЬ 999
Туг Рго 11е С1п Рго Уа1 <31у С1п Ьеи ТЬг Агд О1и Уа1 Туг ТЬг Азр
255 260 265 270
ССР сРР аРс аас РРс аас ссР сад сРР сад РсР дРР дсР сад сРР ссР 1047
Рго Ьеи 11е Азп РЬе Азп Рго С1п Ьеи <31п Зег Уа1 А1а (31п Ьеи Рго
275 280 285
асР РРс аас дРР аРд дад РсР РсР дсР аРс ада аас ссР саР сРР РРс 1095
ТЬг РЬе Азп Уа1 Мер С1и Зег Зег А1а 11е Агд Азп Рго Η13 Ьеи РЬе
290 295 300
дар аРР сРР аас аас сРР асР аРс РРс асР дас ьдд РРс РсР дРР дда 1143
Азр 11е Ьеи Азп Азп Ьеи ТЬг 11е РЬе ТЬг Азр Тгр РЬе Зег Уа1 С1у
305 310 315
ада аас РРс Рас ьдд дда дда саР ада дРР аРс РсР РсР СРР аРс дда 1191
Агд Азп РЬе Туг Тгр <31у С1у НЬз Агд Уа1 11е Зег Зег Ьеи 11е 31у
320 325 330
дда дда аас аРс асР РсР ССР аРс Рас дда ада дад дсР аас сад дад 1239
С1у <31у Азп 11е ТЬг Зег Рго 11е Туг О1у Агд С1и А1а Азп С1п С1и
335 340 345 350
- 22 019029
ссР Рго ссР Рго ада Агд РсР Зег РРс РЬе 355 асР ТЬг РРс РЬе аас Азп дда <31у ССР Рго 360 дрр Уа1 РРс РЬе ада Агд асР ТЬг сРР Ьеи 365 РсР Зег 1287
аас ссР асР сРР ада СРР сРР сад сад ССР Рдд ссР дсР ссР ссР РРс 1335
Азп Рго ТЬг Ьеи Агд Ьеи Ьеи (31п (31п Рго Тгр Рго А1а Рго Рго РЬе
370 375 380
аас сРР ада дда дрр дад дда дрр дад РРс РсР асР ссР асР аас РсР 1383
Азп Ьеи Агд С1у Уа1 С1и С1у Уа1 С1и РЬе Зег ТЬг Рго ТЬг Азп Зег
385 390 395
РРс асР Рас ада дда ада дда асР дрр даР РсР сРР асР дад сРР ссР 1431
РЬе ТЬг Туг Агд С1у Агд <31у ТЬг Уа1 Азр Зег Ьеи ТЬг О1и Ьеи Рго
400 405 410
ссР дад даР аас РсР дрр ССР ССР ада дад дда Рас РсР саР ада сРР 1479
Рго С1и Азр Азп Зег Уа1 Рго Рго Агд <31и С1у Туг Зег Шз Агд Ьеи
415 420 425 430
РдР саР дсР асР РРс дрр сад ада РсР дда асР ссР РРс сРР асР асР 1527
Суз Н13 А1а ТЬг РЬе Уа1 С1п Агд Зег С1у ТЬг Рго РЬе Ьеи ТЬг ТЬг
435 440 445
дда дрр дрр РРс РсР Рдд асР саР ада РсР дсР асР сРР асР аас асР 1575
С1у Уа1 Уа1 РЬе Зег Тгр ТЬг Н13 Агд Зег А1а ТЬг Ьеи ТЬг Азп ТЬг
450 455 460
аРс дар ссР дад адд арс аас сад аРс ссР сРР дрр аад дда РРс ада 1623
Не Азр Рго <31и Агд 11е Азп С1п 11е Рго Ьеи Уа1 Ьуз С1у РЬе Агд
465 470 475
дЕР Сдд дда дда асР РсР дрр аРс асР дда ссР дда РРс асР дда дда 1671
Уа1 Тгр С1у С1у ТЬг Зег Уа1 11е ТЬг С1у Рго С1у РЬе ТЬг <31у С1у
480 485 490
дар аРР сРР ада ада аас асР РРс дда дар РРс дрр РсР сРР сад дрр 1719
Азр 11е Ьеи Агд Агд Азп ТЬг РЬе С1у Азр РЬе Уа1 Зег Ьеи (31п Уа1
495 500 505 510
аас аРс аас РсР ССР аРс асР сад ада Рас ада сРР ада РРс ада Рас 1767
Азп 11е Азп Зег Рго 11е ТЬг С1п Агд Туг Агд Ьеи Агд РЬе Агд Туг
- 23 019029
515 520 525
дек Сек БсБ ада даБ дсБ ада дББ аБс дББ сББ асБ дда дсБ дсБ БсБ 1815
А1а Зег Зег Агд Азр А1а Агд Уа1 11е Уа1 Беи ТИг С1у А1а А1а Зег
530 535 540
асБ дда дББ дда дда сад дББ БсБ дББ аас аБд ссБ сББ сад аад асБ 1863
Тйг <31у Уа1 <31у О1у 61п Уа1 Зег Уа1 Азп МеБ Рго Беи С1п Буз Тйг
545 550 555
аБд дад аБс дда дад аас сББ асБ БсБ ада асБ ББс ада Бас асБ даБ 1911
МеБ С1и 11е <31у С1и Азп Беи ТИг Зег Агд ТИг РИе Агд Туг Тйг Азр
560 565 570
ББс БсБ аас ссБ ББс БсБ ББс ада дсБ аас ссБ даБ аББ аБс дда аБс 1959
РИе Зег Азп Рго РНе Зег РИе Агд А1а Азп Рго Азр 11е 11е <31у 11е
575 580 585 590
БсБ дад сад ссБ сББ ББс дда дсБ дда БсБ аБс БсБ БсБ дда дад сББ 2007
Зег (31и (31п Рго Беи Рйе <31у А1а (31у Зег 11е Зег Зег (31у С1и Беи
595 600 605
Бас аБс даБ ааа аБс дад аБс аБс СББ дсБ даБ дсБ асБ ББс дад дсБ 2055
Туг 11е Азр Буз 11е <31и 11е 11е Беи А1а Азр А1а ТЙГ РИе С1и А1а
610 615 620
дад БсБ даБ ББа дад ада Еда 2076
<31и Зег Азр Беи 01и Агд
625 <210> 2 <211> 628 <212> Белок <213> Искусственная <220>
<223> Синтетическая конструкция <400> 2
МеБ А1а <31и <31и Азп Азп <31п Азп С1п Суз Не Рго Туг Азп Суз Беи
10 15
- 24 019029
Зег Азп Рго <31и С1и Уа1 Ьеи Ьеи Азр <31у 25 С1и Агд 11е Зег 30 ТЙ.Г С1у
20
Азп Зег Зег 11е Азр 11е Зег Ьеи Зег Ьеи Уа1 С1п РЬе Ьеи Уа1 Зег
35 40 45
Азп РЬе Уа1 Рго С1у С1у С1у РНе Ьеи Уа1 С1у Ьеи 11е Азр РНе Уа1
50 55 60
Тгр <31у 11е Уа1 С1у Рго Зег Θΐη Тгр Азр А1а Рке Ьеи Уа1 С1п 11е
65 70 75 80
С1и С1п Ьеи 11е Азп (31и Агд 11е А1а С1и РНе А1а Агд Азп А1а А1а
85 90 95
Не А1а Азп Ьеи (31и <31у Ьеи С1у Азп Азп РНе Азп 11е Туг Уа1 С1и
100 105 110
А1а РЬ.е Ьуз 61и Тгр С1и С1и Азр Рго Азп Азп Рго С1и ТИг Агд Ткг
115 120 125
Агд Уа1 11е Азр Агд РИе Агд 11е Ьеи Азр <31у Ьеи Ьеи С1и Агд Азр
130 135 140
11е Рго Зег Рке Агд 11е Зег (31у РИе О1и Уа1 Рго Ьеи Ьеи Зег Уа1
145 150 155 160
Туг А1а (31п А1а А1а Азп Ьеи Нхз Ьеи А1а 11е Ьеи Агд Азр Зег Уа1
165 170 175
11е РИ.е (31у С31и Агд Тгр <31у Ьеи ТИг Ткг 11е Азп Уа1 Азп С1и Азп
180 185 190
Туг Азп Агд Ьеи 11е Агд Н13 11е Азр О1и Туг А1а Азр Н13 Суз А1а
195 200 205
Азп Ткг Туг Азп Агд С1у Ьеи Азп Азп Ьеи Рго Ьуз Зег ТИг Туг Θΐη
210 215 220
Азр Тгр 11е ТНг Туг Азп Агд Ьеи Агд Агд Азр Ьеи ТИг Ьеи ТИг Уа1
225 230 235 240
Ьеи Азр 11е А1а А1а РИе Рке Рго Азп Туг Азр Азп Агд Агд Туг Рго
- 25 019029
245 250 255
Не <31п Рго Уа1 260 О1у С1п Беи ТИг Агд <31и 265 Уа1 Туг ТИг Азр 270 Рго Беи
11е Азп РИе Азп Рго <31п Беи 61п Зег Уа1 А1а С1п Беи Рго ТИг РИе
275 280 285
Азп Уа1 МеЕ С1и Зег Зег А1а 11е Агд Азп Рго ΗΪ3 Беи РИе Азр 11е
290 295 300
Беи Азп Азп Беи ТИг 11е РИе ТИг Азр Тгр РИе Зег Уа1 <31у Агд Азп
305 310 315 320
РИе Туг Тгр <31у 61у Н13 Агд Уа1 11е Зег Зег Беи 11е 61у С1у С1у
325 330 335
Азп 11е ТИг Зег Рго 11е Туг 61у Агд (31и А1а Азп С1п С1и Рго Рго
340 345 350
Агд Зег РИе ТИг РИе Азп О1у Рго Уа1 РИе Агд ТИг Беи Зег Азп Рго
355 360 365
ТИг Беи Агд Беи Беи С1п С1п Рго Тгр Рго А1а Рго Рго РИе Азп Беи
370 375 380
Агд С1у Уа1 С1и О1у Уа1 С1и РИе Зег ТИг Рго ТИг Азп Зег РИе ТИг
385 390 395 400
Туг Агд С1у Агд <31у ТИг Уа1 Азр Зег Беи ТИг С1и Беи Рго Рго С1и
405 410 415
Азр Азп Зег Уа1 Рго Рго Агд 61и С1у Туг Зег Н1з Агд Беи Суз Н13
420 425 430
А1а ТИг РИе Уа1 С1п Агд Зег <31у ТИг Рго РИе Беи ТИг ТИг С1у Уа1
435 440 445
Уа1 РИе Зег Тгр ТИг Н13 Агд Зег А1а ТИг Беи ТИг Азп ТИг 11е Азр
450 455 460
Рго С1и Агд 11е Азп С1п 11е Рго Беи Уа1 Буз С1у РИе Агд Уа1 Тгр
465 470 475 480
- 26 019029
б1у <31у ТНг Зег Уа1 485 Не ТНг 61у Рго О1у 490 РНе ТНг С1у С1у Азр 495 11е
Ьеи Агд Агд Азп ТНг РНе О1у Азр РНе Уа1 Зег Ьеи (31п Уа1 Азп Не
500 505 510
Азп Зег Рго Не ТНг С1п Агд Туг Агд Ьеи Агд РНе Агд Туг А1а Зег
515 520 525
Зег Агд Азр А1а Агд Уа1 Не Уа1 Ьеи ТНг <Э1у А1а А1а Зег ТНг С1у
530 535 540
Уа1 61у С1у О1п Уа1 Зег Уа1 Азп Меб Рго Ьеи (31п Ьуз ТНг Меб б1и
545 550 555 560
Не б1у С1и Азп Ьеи ТНг Зег Агд ТНг РНе Агд Туг ТНг Азр РНе Зег
565 570 575
Азп Рго РНе Зег РНе Агд А1а Азп Рго Азр Не Не С1у 11е Зег С1и
580 585 590
<31п Рго Ьеи РНе С1у А1а С1у Зег 11е Зег Зег 61у С1и Ьеи Туг Не
595 600 605
Азр Ьуз 11е 61и Не Не Ьеи А1а Азр А1а ТНг РНе С1и А1а С1и Зег
610 615 620
Азр Ьеи С1и Агд
625 <210> 3 <211> 2076 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> модифицированная последовательность <220>
<221> экзон <222> (1)..(489)
- 27 019029 <220>
<221> Интрон <222> (490)..(678) <220>
<221> экзон <222> (679)..(2073) <400> 3
аРд Мер 1 дсР А1а дад С1и дад <31и аас Азп 5 аас Азп сад 61п аас Азп сад 61п РдР Суз 10 аРс 11е ссР Рго Рас Туг аас Азп РдР Суз 15 сРР Ьеи 48
Рсд аас ссР дад дад дрр срр сРР дар дда дад ада аРс РсР асР дда 96
Зег Азп Рго 61и С1и Уа1 Ьеи Ьеи Азр С1у 61и Агд 11е Зег ТЬг С1у
20 25 30
аас РсР РсР аРс дар аРР РсР сРР РсР сРР дрр сад РРс срр дрр РсР 144
Азп Зег Зег 11е Азр 11е Зег Ьеи Зег Ьеи Уа1 С1п РЧе Ьеи Уа1 Зег
35 40 45
аас РРс дСЬ ссР дда дда дда РРс сРР дрр дда сРР аРс даР РРс дрр 192
Азп РЬе Уа1 Рго <31у <Э1у С1у РНе Ьеи Уа1 С1у Ьеи 11е Азр РЧе Уа1
50 55 60
ьдд дда аРс дрр дда ССР РсР сад ьдд даР дсР РРс сРР дрр сад аРс 240
Тгр С1у 11е Уа1 С1у Рго Зег С1п Тгр Азр А1а РЬе Ьеи Уа1 С1п 11е
65 70 75 80
дад сад СРР аРс аас дад ада аРс дер дад РРс дсР ада аас дсР дсР 288
(31и С1п Ьеи 11е Азп С1и Агд 11е А1а <31и РЬе А1а Агд Азп А1а А1а
85 90 95
аРс дсР аас сРР дад дда срр дда аас аас РРс аас аРс Рас дрр дад 336
Не А1а Азп Ъеи С1и С1у Ьеи С1у Азп Азп РНе Азп 11е Туг Уа1 С1и
100 105 110
дсР РРс аад дад рдд дад дад дар ССР аас аас ссР дад асР ада асР 384
А1а РНе Ьуз С1и Тгр С1и <31и Азр Рго Азп Азп Рго С1и ТЬг Агд ТЙ.Г
ада §ΐί 115 а!с да! ада Ис ада 120 а!с сЧ да! дда с!! 125 сЧ дад ада да! 432
- 28 019029
Агд Л7а1 Не Азр Агд РИе Агд 11е Ьеи Азр С1у Ьеи Ьеи С1и Агд Азр
130 135 140
аЬЕ ССЬ ЬсЬ ЕЬс ада акс ЕсЬ дда ЕЬс даа дЬЬ ССЕ СЕР сЬЕ ЬсЕ дЬЕ 480
11е Рго Зег РИе Агд 11е Зег <31у РИе О1и Уа1 Рго Ьеи Ьеи Зег Уа1
145 150 155 160
Рас дек сад дЬаадЕЬЬсЕ дсЕЕсЬассЕ ЬЕдаЕаЬаЬа ЕаЕааЕааЕЕ529
Туг А1а С1п аЪсаЕЬааЬЬ адЬадЬааЬа ЕааЬаЬЬЬса аакаЬЕЕЕЕЕ ЬсааааЬааа адааЬдкадЬ589 аЕаЬадсааЬ ЕдсЬЬЕЬсЬд ЬадЬЬЕаЬаа дЕдЬдЬаЬаЪ ЕЕЬааЕЕЬаЕ аасЬЕЕЬсЕа649
аЕаЬаЬдасс аааасаЬддЬ даЬдСдсад дсЕ дсЬ А1а А1а аас Азп сЕЪ Ьеи сак Н13 сЕЕ Ьеи дсЬ А1а 170 акс 11е 702
165
сЬЕ ада дак ЕсЬ дЬЬ аЬс ЬЬс дда дад ада £дд дда сЬЬ асЬ асЬ аЕс 750
Ьеи Агд Азр Зег Уа1 11е РЬе 61у С1и Агд Тгр (Э1у Ьеи ТЬг ТНг 11е
175 180 185
аас дЬЕ аас дад аас Рас аас ада сЬЬ аЬс ада сак аЬс даЬ дад Рас 798
Азп Уа1 Азп С1и Азп Туг Азп Агд Ьеи 11е Агд ΗΪ8 11е Азр 61и Туг
190 195 200
дсЪ даЬ саО ЕдЕ дсЬ аас асЕ Рас аас ада дда сЕЕ аас аас сЕЕ ссЕ 846
А1а Азр Н13 Суз А1а Азп ТЬг Туг Азп Агд С1у Ьеи Азп Азп Ьеи Рго
205 210 215
аад ЪсЬ асЬ Еас сад дас Едд аЬс асЬ Ьас аас ада сЕЕ ада ада даЕ 894
Ьуз Зег ТИг Туг С1п Азр Тгр 11е ТИг Туг Азп Агд Ьеи Агд Агд Азр
220 225 230 235
сЬЪ асЬ сЕЬ асЬ дЕЬ сЬЬ даЕ аЬЕ дсЬ дек ЬЬс ЬЬс ссЬ аас Рас даЕ 942
Ьеи ТИг Ьеи Ткг Уа1 Ьеи Азр 11е А1а А1а РИе РЬе Рго Азп Туг Азр
240 245 250
аас ада ада Рас ссЬ аЬс сад ссЕ дЬЕ дда сад сЕЕ асЬ ада дад дЬЬ 990
Азп Агд Агд Туг Рго 11е С1п Рго Уа1 С1у С1п Ьеи ТНг Агд С1и Уа1
255 260 265
Бас Туг асй ТЬг дай Азр 270 ССЬ Рго сСЬ Ьеи аЬс 11е аас Азп ЬЬс РЬе 275 аас Азп ссЬ Рго сад <31п сЬЬ Ьеи сад С1п 280 ЬсЬ Зег дЕЕ Уа1 дсЬ А1а 1038
сад сЬЬ ссЬ асЬ ЬЬс аас дЬЬ аЬд дад ЬсЬ ЬсЕ дсЬ акс ада аас ссЕ 1086
С1п Ьеи Рго ТЬг РЬе Азп Уа1 МеЬ О1и Зег Зег А1а 11е Агд Азп Рго
285 290 295
саЪ СЙЕ ЬЬс даЬ аЬЬ СЬЬ аас аас сЬЬ асЬ аЕс ЬЬс асЬ дас Ьдд СЬс 1134
Н13 Ьеи РЬе Азр 11е Ьеи Азп Азп Ьеи ТЬг 11е РЬе ТЬг Азр Тгр РЬе
300 305 310 315
ЬсС деь дда ада аас ЬЬс Ьас ьдд дда дда саЕ ада дьй аЬс ЬсЬ ЬсЬ 1182
Зег Уа1 С1у Агд Азп РЬе Туг Тгр 61у 61у ΗΪ3 Агд Уа1 11е Зег Зег
320 325 330
СЙЬ аЬс дда дда дда аас аЕс асЬ ЬсЕ ссЬ аЕс Бас дда ада дад дсЬ 1230
Ьеи Не О1у С1у С1у Азп 11е ТЬг Зег Рго 11е Туг С1у Агд (31и А1а
335 340 345
аас сад дад ссЕ ссЬ ада ЬсЕ ЬЬс асЬ ЬЕс аас дда ссЕ дСЕ ЕЬс ада 1278
Азп С1п С1и Рго Рго Агд Зег РЬе ТЬг РЬе Азп 61у Рго Уа1 РЬе Агд
350 355 360
асЬ сСЕ ЬсЬ аас ссЬ асС сЕЕ ада сЬЕ сЬЬ сад сад ССЬ Ьдд ссЕ дсЬ 1326
ТЬг Ьеи Зег Азп Рго ТЬг Ьеи Агд Ьеи Ьеи Θΐη 61п Рго Тгр Рго А1а
365 370 375
ссЬ ССЬ ЬЬс аас сЬЬ ада дда дЬЬ дад дда дЬС дад ЬЕс ЕсЬ асЬ ссЬ 1374
Рго Рго РЬе Азп Ьеи Агд 61у Уа1 б1и (31у Уа1 С1и РЬе Зег ТЬг Рго
380 385 390 395
асЬ аас ЬсЬ ЬЬс асЬ Бас ада дда ада дда асЬ дЫ: даЬ ЬсЬ сЬЬ асЬ 1422
ТЬг Азп Зег РЬе ТЬг Туг Агд С1у Агд С1у ТЬг Уа1 Азр Зег Ьеи ТЬг
400 405 410
дад сЬЬ ссЬ ссЬ дад дай аас ЬсЬ дЬЬ ССЙ ссЬ ада дад дда Бас ЕсЬ 1470
С1и Ьеи Рго Рго С1и Азр Азп Зег Уа1 Рго Рго Агд С1и 61у Туг Зег
415 420 425
саЬ ада сЕЕ ЬдЬ саЬ дсЬ асЬ ЬЬс дЬЬ сад ада ЕсЬ дда асЬ ссЬ ЬСс 1518
Н13 Агд Ьеи Суз Нтз А1а ТЬг РЬе Уа1 С1п Агд Зег С1у ТЬг Рго РЬе
- 30 019029
430 435 440
СРР Ьеи асР ТЬг 445 асР ТЬг дда С1у дРР Уа1 дрр Уа1 РРс РЬе 450 РсР Зег гдд Тгр асР ТЬг саР Ηί з ада Агд 455 РсР Зег дсР А1а аср ТЬг сРР Ьеи 1566
асР аас асР аРс дар ссР дад адд аРс аас сад аРс ссР сРР дрр аад 1614
ТЬг Азп ТЬг 11е Азр Рго С1и Агд 11е Азп <31п Не Рго Ьеи Уа1 Ьуз
460 465 470 475
дда РРс ада дрр гдд дда дда асР РсР дрр аРс асР дда ссР дда РРС 1662
<31у РЬе Агд Уа1 Тгр С1у С1у ТЬг Зег Уа1 Не ТЬг 61у Рго О1у РЬе
480 485 490
аср дда дда даР аРР сРР ада ада аас асР РРс дда даР РРс дрр РсР 1710
ТЬг С1у 61у Азр 11е Ьеи Агд Агд Азп ТЬг РЬе С1у Азр РЬе Уа1 Зег
495 500 505
сРР сад дрр аас аРс аас РсР ссР аРс асР сад ада Рас ада сРР ада 1758
Ьеи <31п Уа1 Азп 11е Азп Зег Рго 11е ТЬг <31п Агд Туг Агд Ьеи Агд
510 515 520
РРс ада Рас дсР РсР РсР ада даР дсР ада дрр аРс дрр сРР асР дда 1806
РЬе Агд Туг А1а Зег Зег Агд Азр А1а Агд Уа1 Не Уа1 Ьеи ТЬг С1у
525 530 535
дсР дсР РсР асР дда дрр дда дда сад дрр РсР дрр аас ард ссР сРР 1854
А1а А1а Зег ТЬг <31у Уа1 С1у <31у <31п Уа1 Зег Уа1 Азп Мер Рго Ьеи
540 545 550 555
сад аад асР ард дад аРс дда дад аас сРР асР РсР ада асР РРс ада 1902
Θΐη Ьуз ТЬг Мер <31и 11е 61у С1и Азп Ьеи ТЬг Зег Агд ТЬг РЬе Агд
560 565 570
Рас асР даР РРс РсР аас ссР РРс РсР РРс ада дсР аас ссР даР аРР 1950
Туг ТЬг Азр РЬе Зег Азп Рго РЬе Зег РЬе Агд А1а Азп Рго Азр Не
575 580 585
аРс дда аРс РсР дад сад ССР сРР РРс дда дсР дда РсР арс РсР РсР 1998
11е <31у 11е Зег <31и С1п Рго Ьеи РЬе С1у А1а С1у Зег Не Зег Зег
590 595 600
дда дад сРР Рас аРс даР ааа аРс дад аРс аРс СРР дсР даР дсР асР 2046
- 31 019029
(31у С1и Ьеи Туг 605 11е Азр Ьуз 610 11е С1и Не 11е Ьеи А1а Азр А1а ТЬг 615
РРс дад дсР дад РсР даР РРа дад ада Ъда 2076
РЬе С1и А1а С1и Зег Азр Ьеи <31и Агд
620 625
<210> 4 <211> 2442 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> модифицированная последовательность <220>
<221> СЬЗ <222> (1)..(1038) <220>
<221> Интрон <222> (1039)..(1227) <220>
<221> СЬЗ <222> (1228) . . (2439) <400> 4
аРд Мер 1 дсР А1а РсР Зег аРс 11е РсР Зег 5 РсР Зег РсР Зег дРР Уа1 дсР А1а асР ТЬг 10 дРР Уа1 РсР Зег ада Агд асР ТЬг дсР А1а 15 ссР Рго 48
дсР сад дсР аас аРд дРР дсР ссР РРс асР дда СРР аад РсР аас дсР 96
А1а С1п А1а Азп Мер Уа1 А1а Рго РЬе ТЬг С1у Ьеи Ьуз Зег Азп А1а
20 25 30
дсР РРс ссР асР асР аад аад дсР аас даР РРс РсР асР сРР ссР РсР 144
А1а РЬе Рго ТЬг ТЬг Ьуз Ьуз А1а Азп Азр РЬе Зег ТЬг Ьеи Рго Зег
35 40 45
аас дда дда ада дРР сад РдР аРд сад дРР £дд ссР дсР Рас дда аас 192
Азп С1у С1у Агд Уа1 61п Суз Мер О1п Уа1 Тгр Рго А1а Туг С1у Азп
50 55 60
- 32 019029
аад Ьуз 65 аад Ьуз ббс РНе дад С1и асб ТНг сбб Ьеи 70 бсб Зег бас Туг сбб Ьеи ссб Рго ссб Рго 75 сбб Ьеи бсб Зег абд Меб дсб А1а ссб Рго 80 240
асб дбб абд абд дсб бсб бсб дсб асб дсб дбб дсб ссб ббс сад дда 288
ТНг Уа1 Меб Меб А1а Зег Зег А1а ТНг А1а Уа1 А1а Рго РНе <31п С1у
85 90 95
сбб аад бсб асб дсб бсб сбб ссб дбб дсб ада ада бсб бсб ада бсб 336
Ьеи Ьуз Зег ТНг А1а Зег Ьеи Рго Уа1 А1а Агд Агд Зег Зег Агд Зег
100 105 110
сбб дда аас дбб бсб аас дда дда ада абс ада бдб дад дад аас аас 384
Ьеи С1у Азп Уа1 Зег Азп О1у С1у Агд 11е Агд Суз С1и С1и Азп Азп
115 120 125
сад аас сад бдб абс ссб бас аас бдб сбб бед аас ссб дад дад дбб 432
<31п Азп С1п Суз 11е Рго Туг Азп Суз Ьеи Зег Азп Рго С1и 61и Уа1
130 135 140
сбб Сбб даб дда дад ада абс бсб асб дда аас бсб бсб абс даб абб 480
Ьеи Ьеи Азр С1у С1и Агд 11е Зег ТНг С1у Азп Зег Зег 11е Азр 11е
145 150 155 160
бсб сбб бсб сбб дбб сад ббс сбб дбб бсб аас ббс дбб ссб дда дда 528
Зег Ьеи Зег Ьеи Уа1 С1п Рке Ьеи Уа1 Зег Азп РНе Уа1 Рго С1у <31у
165 170 175
дда ббс сбб дбб дда сбб абс даб ббс дбб бдд дда абс дбб дда ссб 576
О1у РНе Ьеи Уа1 С1у Ьеи 11е Азр РНе Уа1 Тгр С1у 11е Уа1 61у Рго
180 185 190
бсб сад ьдд даб дсб ббс сбб дбб сад абс дад сад сбб абс аас дад 624
Зег С1п Тгр Азр А1а Рке Ьеи Уа1 С1п 11е С1и С1п Ьеи 11е Азп С1и
195 200 205
ада абс дсб дад ббс дсб ада аас дсб дсб абс дсб аас сбб дад дда 672
Агд 11е А1а С1и РНе А1а Агд Азп А1а А1а 11е А1а Азп Ьеи С1и С1у
210 215 220
сбб дда аас аас ббс аас абс бас дбб дад дсб ббс аад дад бдд дад 720
Ьеи 61у Азп Азп РНе Азп 11е Туг Уа1 С1и А1а РНе Ьуз С1и Тгр С1и
- 33 019029
225 230 235 240
дад даБ ссБ аас аас ссБ дад асБ ада асБ ада дББ аБс даБ ада ББс 768
<31и Азр Рго Азп Азп Рго С1и Ткг Агд Ткг Агд Уа1 Не Азр Агд Рке
245 250 255
ада аБс сББ даБ дда сББ сББ дад ада даБ аББ ССБ БсБ ББс ада аБс 816
Агд Не Ьеи Азр С1у Ьеи Ьеи С1и Агд Азр Не Рго Зег Рке Агд Не
260 265 270
БсБ дда ББс дад дББ ссБ СББ сББ БсБ дББ Бас дсБ сад дсБ дсБ аас 864
Зег С1у Рке (31и Уа1 Рго Ьеи Ьеи Зег Уа1 Туг А1а С1п А1а А1а Азп
275 280 285
сББ саБ СББ дсБ аБс СББ ада даБ БсБ дББ аБс ББс дда дад ада Бдд 912
Ьеи Н13 Ьеи А1а Не Ьеи Агд Азр Зег Уа1 Не Рке 61у С1и Агд Тгр
290 295 300
дда СББ асБ асБ аБс аас дББ аас дад аас Бас аас ада сББ аБс ада 960
61у Ьеи Ткг Ткг Не Азп Уа1 Азп 61и Азп Туг Азп Агд Ьеи Не Агд
305 310 315 320
саБ аБс даБ дад Бас дсБ даБ саБ БдБ дсБ аас асБ Бас аас ада дда 1008
Н1з Не Азр <31и Туг А1а Азр Н1з Суз А1а Азп Ткг Туг Азп Агд <31у
325 330 335
сББ аас аас сББ ССБ аад БсБ асБ Бас сад дБаадБББсБ < дсББсБассБ 1058
Ьеи Азп АЗП Ьеи Рго Ьуз Зег Ткг Туг С1п
340 345
ББдаБаБаБа БаБааБааББ аБсаББааББ адБадБааБа БааБаБББса ааБаББББББ 1118
БсааааБааа адааБдБадБ аБаБадсааБ БдсББББсБд БадБББаБаа дБдБдБаБаБ 1178
БББааБББаБ аасББББсБа аБаБаБдасс ааааБББдББ даБдБдсад дас Бдд аБс 1236 Азр Тгр 11е
асБ Бас аас ада сББ ада ада даБ сББ асБ сББ асБ дББ сББ даБ аББ 1284
Ткг Туг Азп Агд Ьеи Агд Агд Азр Ьеи Ткг Ьеи Ткг Уа1 Ьеи Азр Не
350 355 360 365
дсБ дсБ ББс ББс ссБ аас Бас даБ аас ада ада Бас ссБ аБс сад ссБ 1332
А1а А1а Рке Рке Рго Азп Туг Азр Азп Агд Агд Туг Рго 11е <31п Рго
- 34 019029
370 375 380
дЬЬ Уа1 дда (31у сад С1п сЬЬ Ьеи 385 асЬ Ткг ада Агд дад С1и дЕЕ Уа1 Сас Туг 390 асЬ Ткг даЬ Азр ссЬ Рго сЬЬ Ьеи аЬс 11е 395 аас Азп ЬСс Рке 1380
аас ссЕ сад сЬЬ сад ЬсЬ дЕЬ дсЬ сад сСЬ ссЬ асЬ ЪЬс аас дЬЕ аЬд 1428
Азп Рго <31п Ьеи <31п Зег Уа1 А1а С1п Ьеи Рго Ткг Рке Азп Уа1 МеЬ
400 405 410
дад ЬсЬ Ъсё дсЬ аЬс ада аас ссЬ саЬ сЬС ЬЬс даЬ аЕЬ СЁС аас аас 1476
С1и Зег Зег А1а 11е Агд Азп Рго Н13 Ьеи Рке Азр 11е Ьеи Азп Азп
415 420 425
сЬЬ асЪ аЬс ЬЬс асЬ да с ьдд ЬЬс ЬсЬ дС£ дда ада аас ЕЕс Ьас Ьдд 1524
Ьеи Ткг Не Рке Ткг Азр Тгр Рке Зег Уа1 С1у Агд Азп Рке Туг Тгр
430 435 440 445
дда дда саС ада дЪС аЬс СсЬ ЬсЪ сЬЬ аЪс дда дда дда аас акс асС 1572
О1у <31у Н13 Агд Уа1 11е Зег Зег Ьеи 11е С1у <31у О1у Азп 11е Ткг
450 455 460
ЬсЕ ссЕ акс Сас дда ада дад дек аас сад дад ссЬ ссЕ ада ЬсЬ СЬс 1620
Зег Рго 11е Туг 61у Агд С1и А1а Азп С1п С1и Рго Рго Агд Зег Рке
465 470 475
асЬ ЕЬс аас дда ссЬ дЬЬ ЬЕс ада асЕ сЬС ЬсС аас ссЬ аск сЕЬ ада 1668
Ткг Рке Азп 61у Рго Уа1 Рке Агд Ткг Ьеи Зег Азп Рго Ткг Ьеи Агд
480 485 490
сЬЬ сЕЬ сад сад ссЬ Ьдд ссЕ дсЬ ссЬ ссЬ ЬЕс аас сЬЬ ада дда дЬЕ 1716
Ьеи Ьеи С1п (31п Рго Тгр Рго А1а Рго Рго Рке Азп Ьеи Агд С1у Уа1
495 500 505
дад дда дЕЪ дад ЬЬс ЕсЬ аск ссЬ асЬ аас Еск ЪЬс асЬ Сас ада дда 1764
<31и С1у Уа1 С1и Рке Зег Ткг Рго Ткг Азп Зег Рке Ткг Туг Агд 31у
510 515 520 525
ада дда асЬ дьь дае СсЬ сЬЬ асЬ дад сЪЪ ссЬ сск дад даЬ аас ЬсЕ 1812
Агд С1у Ткг Уа1 Азр Зег Ьеи Ткг С1и Ьеи Рго Рго <31и Азр Азп Зег
530 535 540
дЬЬ ссЬ ссЪ ада дад дда Ьас РсЬ саС ада сЬЬ ЪдЪ сак дсЬ асЕ ЬСс 1860
- 35 019029
Уа1 Рго Рго Агд 545 <31и С1у Туг Зег Н13 550 Агд Беи Суз Наз А1а 555 ТИг РИе
дне сад ада БсБ дда асБ ССБ ББс СББ асБ асБ дда дББ дББ ББс БсБ 1908
Уа1 С1п Агд Зег С31у ТИг Рго РИе Беи ТИг ТИг <31у Уа1 Уа1 РИе Зег
560 565 570
кдд асБ саБ ада Иск дсБ асБ сББ асБ аас асБ аБс даБ ссБ дад адд 1956
Тгр ТИг Н13 Агд Зег А1а ТИг Беи ТИг Азп ТИг 11е Азр Рго <31и Агд
575 580 585
аБс аас сад аБс ссБ сББ дББ аад дда ББс ада дББ ндд дда дда асБ 2004
11е Азп <31п 11е Рго Беи Уа1 Буз С1у РИе Агд Уа1 Тгр О1у С1у ТИг
590 595 600 605
БсБ дББ аБс асБ дда ссБ дда ББс асБ дда дда даБ аББ СББ ада ада 2052
Зег Уа1 11е ТИг С1у Рго <31у РИе ТИг С1у С1у Азр 11е Ьеи Агд Агд
610 615 620
аас асБ ББс дда даН ББс дББ БсБ сББ сад дББ аас аБс аас БсБ ссБ 2100
Азп ТИг РИе С1у Азр РИе Уа1 Зег Беи С1п Уа1 Азп 11е Азп Зег Рго
625 630 635
аБс асБ сад ада Бас ада сББ ада ББс ада Бас дсБ БсБ БсБ ада даБ 2148
11е ТИг С1п Агд Туг Агд Беи Агд РИе Агд Туг А1а Зег Зег Агд Азр
640 645 650
дсБ ада дББ аБс дББ сББ асБ дда дсБ дсБ БсБ асБ дда дББ дда дда 2196
А1а Агд Уа1 11е Уа1 Беи ТИг <31у А1а А1а Зег ТИг С1у Уа1 <31у <31у
655 660 665
сад дББ БсБ дес аас аБд ссБ сББ сад аад асБ аБд дад аБс дда дад 2244
С1п Уа1 Зег Уа1 Азп МеБ Рго Беи С1п Буз ТИг МеБ С1и 11е С1у С1и
670 675 680 685
аас сББ асБ БсБ ада асБ ББс ада Бас асБ даБ ББс БсБ аас ссБ ББс 2292
Азп Беи ТИг Зег Агд ТИг РИе Агд Туг ТИг Азр РИе Зег Азп Рго РИе
690 695 700
БсБ ББс ада дсБ аас ссБ даБ аББ аБс дда аБс БсБ дад сад ССБ сББ 2340
Зег РИе Агд А1а Азп Рго Азр 11е 11е С1у 11е Зег С1и С1п Рго Ъеи
705 710 715
- 36 019029
2436
ЬЬс дда дсЬ дда ЬсЬ аЬс ЬсЪ ЬсЬ дда дад си Ьас аЪс даЬ ааа аЪс
РЬе С1у А1а (31у Зег 11е Зег Зег С1у б1и Ьеи Туг 11е Азр Ьуз 11е
720 725 730
дад аЬс аЬс си дсЬ даН дсЬ асЬ ис дад дсЬ дад ЬсЬ даь иа дад
С1и 11е 11е Ьеи А1а Азр А1а ТИг РИе С1и А1а С1и Зег Азр Ьеи С1и
735 740 745
ада Ьда
Агд
750
2442 <210> 5 <211> 750 <212> Белок <213> Искусственная <220>
<223> Синтетическая конструкция <400> 5
МеС 1 А1а Зег 11е Зег 5 Зег Зег Уа1 А1а ТИг 10 Уа1 Зег Агд ТИг А1а 15 Рго
А1а С1п А1а Азп МеЬ Уа1 А1а Рго РИе ТИг С1у Ьеи Ьуз Зег Азп А1а
20 25 30
А1а РИе Рго ТИг ТИг Ьуз Ьуз А1а Азп Азр РИе Зег ТИг Ьеи Рго Зег
35 40 45
Азп С1у С1у Агд Уа1 С1п Суз МеЬ σΐη Уа1 Тгр Рго А1а Туг С1у Азп
50 55 60
Ьуз Ьуз РИе С1и ТИг Ьеи Зег Туг Ьеи Рго Рго Ьеи Зег МеЪ А1а Рго
65 70 75 80
ТЬг Уа1 МеЬ МеЬ А1а Зег Зег А1а ТИг А1а Уа1 А1а Рго РИе О1п С1у
85 90 95
Ьеи Ьуз Зег ТЬг А1а Зег Ьеи Рго Уа1 А1а Агд Агд Зег Зег Агд Зег
100 105 110
- 37 019029
Ьеи <31у Азп Уа1 Зег Азп С1у С1у 120 Агд Не Агд Суз С1и 125 О1и Азп Азп
115
С1п Азп С1п Суз Не Рго Туг Азп Суз Ьеи Зег Азп Рго С1и С1и Уа1
130 135 140
Ьеи Ьеи Азр С1у С1и Агд 11е Зег ТИг <31у Азп Зег Зег 11е Азр Не
145 150 155 160
Зег Ьеи Зег Ьеи Уа1 С1п РИе Ьеи Уа1 Зег Азп РИе Уа1 Рго С1у С1у
165 170 175
<31у РЬе Ьеи Уа1 С1у Ьеи Не Азр РЬе Уа1 Тгр С1у 11е Уа1 С1у Рго
180 185 190
Зег С1п Тгр Азр А1а РЬе Ьеи Уа1 С1п Не С1и (31п Ьеи Не Азп С1и
195 200 205
Агд Не А1а С1и РИе А1а Агд Азп А1а А1а Не А1а Азп Ьеи 61и С1у
210 215 220
Ьеи С1у Азп Азп Рке Азп Не Туг Уа1 61и А1а Рке Ьуз 61и Тгр С1и
225 230 235 240
С1и Азр Рго Азп Азп Рго С1и Ткг Агд Ткг Агд Уа1 Не Азр Агд РИе
245 250 255
Агд Не Ьеи Азр О1у Ьеи Ьеи С1и Агд Азр Не Рго Зег РИе Агд Не
260 265 270
Зег С1у Рке С1и Уа1 Рго Ьеи Ьеи Зег Уа1 Туг А1а С1п А1а А1а Азп
275 280 285
Ьеи Н13 Ьеи А1а 11е Ьеи Агд Азр Зег Уа1 Не РИе С1у С1и Агд Тгр
290 295 300
61у Ьеи ТИг ТЬг Не Азп Уа1 Азп С1и Азп Туг Азп Агд Ьеи 11е Агд
305 310 315 320
Н1з Не Азр С1и Туг А1а Азр ΗΪ3 Суз А1а Азп ТЬг Туг Азп Агд С1у
325 330 335
Ьеи Азп Азп Ьеи Рго Ьуз Зег Ткг Туг С1п Азр Тгр Не ТНг Туг Азп
- 38 019029
340 345 350
Агд Ьей Агд Агд Азр Ъеи ТЬг Ьей ТЬг Уа1 Ьей Азр 11е 365 А1а А1а РЬе
355 360
РЬе Рго Азп Туг Азр Азп Агд Агд Туг Рго 11е <31п Рго Уа1 О1у С1п
370 375 380
Ьей ТЬг Агд (31и Уа1 Туг ТЬг Азр Рго Ьей 11е Азп РЬе Азп Рго С1п
385 390 395 400
Ьей (31п Зег Уа1 А1а С1п Ьей Рго ТЬг РЬе Азп Уа1 Мей (31и Зег Зег
405 410 415
А1а Не Агд Азп Рго Н13 Ьей РЬе Азр 11е Ьей Азп Азп Ьей ТЬг 11е
420 425 430
РЬе ТЬг Азр Тгр РЬе Зег Уа1 С1у Агд Азп РЬе Туг Тгр 61у С1у Нтз
435 440 445
Агд Уа1 11е Зег Зег Ьей 11е С1у 61у С1у Азп 11е ТЬг Зег Рго 11е
450 455 460
Туг 61у Агд С1и А1а Азп С1П С1и Рго Рго Агд Зег РЬе ТЬг РЬе Азп
465 470 475 480
С1у Рго Уа1 РЬе Агд ТЬг Ьей Зег Азп Рго ТЬг Ьей Агд Ъеи Ъеи С1п
485 490 495
С1п Рго Тгр Рго А1а Рго Рго РЬе Азп Ьей Агд (31у Уа1 С1и С1у Уа1
500 505 510
61и РЬе Зег ТЬг Рго ТЬг Азп Зег РЬе ТЬг Туг Агд 61у Агд С1у ТЬг
515 520 525
Уа1 Азр Зег Ьей ТЬг <31и Ьей Рго Рго С1и Азр Азп Зег Уа1 Рго Рго
530 535 540
Агд С1и (31у Туг Зег Н13 Агд Ьей Суз ΗΪ3 А1а ТЬг РЬе Уа1 С1п Агд
545 550 555 560
Зег С1у ТЬг Рго РЬе Ьей ТЬг ТЬг С1у Уа1 Уа1 РЬе Зег Тгр ТЬг Н13
565 570 575
- 39 019029
Агд Зег А1а ТЬг Ьеи 580 ТЬг Азп ТЬг Не 585 Азр Рго С1и Агд 11е 590 Азп С1п
Не Рго Ьеи Уа1 Ьуз <31у РЬе Агд Уа1 Тгр С1у <31у ТЬг Зег Уа1 11е
595 600 605
ТЬг О1у Рго С1у РЬе ТЬг С1у <31у Азр Не Ьеи Агд Агд Азп ТЬг РЬе
610 615 620
С1у Азр РЬе Уа1 Зег Ьеи С1п Уа1 Азп Не Азп Зег Рго Не ТЬг С1п
625 630 635 640
Агд Туг Агд Ьеи Агд РЬе Агд Туг А1а Зег Зег Агд Азр А1а Агд Уа1
645 650 655
Не Уа1 Ьеи ТЬг О1у А1а А1а Зег ТЬг С1у Уа1 С1у С1у С1п 9а1 Зег
660 665 670
Уа1 Азп Мер Рго Ьеи С1п Ьуз ТЬг Мер С1и Не 61у С1и Азп Ьеи ТЬг
675 680 685
Зег Агд ТЬг РЬе Агд Туг ТЬг Азр РЬе Зег Азп Рго РЬе Зег РЬе Агд
690 695 700
А1а Азп Рго Азр 11е 11е <31у 11е Зег С1и <31п Рго Ьеи РЬе С1у А1а
705 710 715 720
С1у Зег Не Зег Зег С1у О1и Ьеи Туг Не Азр Ьуз Не С1и Не 11е
725 730 735
Ьеи А1а Азр А1а ТЬг РЬе С1и А1а 61и Зег Азр Ьеи С1и Агд
740 745 750 <210> 6 <211> 2442 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> модифицированная последовательность <220>
- 40 019029 <221> СОЗ <222> (1) . . (855) <220>
<221> Интрон <222> (856) . . (1044) <220>
<221> СОЗ <222> (1045)..(2439) <400> 6
аРд Мер 1 дсР А1а РсР Зег аРс 11е РсР Зег 5 РсР Зег РсР Зег дРР Уа1 дсР А1а асР ТЬг 10 дРР Уа1 РсР Зег ада Агд асР ТЬг дсР А1а 15 ссР Рго 48
дсР сад дсР аас аРд дРР дсР ссР РРС асР дда сРР аад РсР аас дсР 96
А1а С1п А1а Азп Мер Уа1 А1а Рго РЬе ТЬг С1у Ьеи Ьуз Зег Азп А1а
20 25 30
дсР РРс ссР асР асР аад аад дсР аас даР РРс РсР асР сРР ссР РсР 144
А1а РЬе Рго ТЬг ТЬг Ьуз Ьуз А1а Азп Азр РЬе Зег ТЬг Ьеи Рго Зег
35 40 45
аас дда дда ада дРР сад РдР аРд сад дРР Рдд ссР дсР Рас дда аас 192
Азп С1у <31у Агд Уа1 С1п Суз Мер (31п Уа1 Тгр Рго А1а Туг С1у Азп
50 55 60
аад аад РРс дад асР сРР РсР Рас сРР ссР ссР сРР РсР аРд дсР ссР 240
Ьуз Ьуз РЬе С1и ТЬг Ьеи Зег Туг Ьеи Рго Рго Ьеи Зег Мер А1а Рго
65 70 75 80
асР дРР аРд аРд дсР РсР РсР дсР асР дсР дРР дсР ссР РРс сад дда 288
ТЬг 17а 1 Мер Мер А1а Зег Зег А1а ТЬг А1а Уа1 А1а Рго РЬе С1п С1у
85 90 95
сРР аад РсР асР дсР РсР сРР ссР дРР дсР ада ада РсР РсР ада РсР 336
Ьеи Ьуз Зег ТЬг А1а Зег Ьеи Рго Уа1 А1а Агд Агд Зег Зег Агд Зег
100 105 110
сРР дда аас дРР РсР аас дда дда ада аРс ада РдР дад дад аас аас 384
Ьеи С1у Азп Уа1 Зег Азп 61у С1у Агд 11е Агд Суз С1и С1и Азп Азп
115 120 125
- 41 019029
сад С1п аас Азп 130 сад С1п ЕдЕ Суз аЕс 11е ССЕ Рго Еас Туг 135 аас Азп ЕдЕ Суз сЕЕ Беи Есд Зег аас Азп 140 ссЕ Рго дад С1и дад С1и дЕЕ Уа1 432
сЕЕ сЕЕ даЕ дда дад ада аЕс ЕсЕ асЕ дда аас ЕсЕ ЕсЕ аЕс даЕ аЕЕ 480
Беи Беи Азр С1у <31и Агд 11е Зег ТЙГ С1у Азп Зег Зег 11е Азр 11е
145 150 155 160
ЕсЕ сЕЕ ЕсЕ сЕЕ дЕЕ сад ЕЕс сЕЕ дЕЕ ЕсЕ аас ЕЕс дЕЕ ссЕ дда дда 528
Зег Беи Зег Беи Уа1 61п РИе Беи Уа1 Зег Азп РИе Уа1 Рго С1у С1у
165 170 175
дда ЕЕс сЕЕ дЕЕ дда сЕЕ аЕс даЕ ЕЕс дЕЕ Едд дда аЕс дЕЕ дда ссЕ 576
(31у Рке Беи Уа1 61у Беи 11е Азр РИе Уа1 Тгр С1у 11е Уа1 С1у Рго
180 185 190
ЕсЕ сад Едд да С дсЕ ЕЕс сЕЕ дЕЕ сад аЕс дад сад сЕЕ аЕс аас дад 624
Зег 61п Тгр Азр А1а РИе Беи Уа1 <31п 11е С1и (31п Беи 11е Азп С1и
195 200 205
ада аЕс дсЕ дад ЕЕс дсЕ ада аас дсЕ дсЕ аЕс дсЕ аас сЕЕ дад дда 672
Агд Не А1а С1и РИе А1а Агд Азп А1а А1а 11е А1а Азп Беи О1и С1у
210 215 220
сЕЕ дда аас аас ЕЕс аас аЕс Еас дЕЕ дад дсЕ ЕЕс аад дад Едд дад 720
Беи С1у Азп Азп РЬе Азп 11е Туг Уа1 С1и А1а РИе Буз С1и Тгр <31и
225 230 235 240
Зад даЕ ссЕ аас аас ССЕ дад асЕ ада асЕ ада дЕЕ аЕс даЕ ада ЕЕс 768
(31и Азр Рго Азп Азп Рго С1и ТНг Агд ТИг Агд Уа1 11е Азр Агд Рйе
245 250 255
ада аЕс сЕЕ даЕ дда сЕЕ сЕЕ дад ада даЕ аЕЕ ссЕ ЕсЕ ЕЕс ада аЕс 816
Агд 11е Беи Азр О1у Беи Беи С1и Агд Азр 11е Рго Зег РИе Агд 11е
260 265 270
ЕсЕ дда ЕЕс даа дЕЕ ссЕ сЕЕ сЕЕ ЕсЕ дЕЕ Еас дсЕ сад дЕаадЕЕЕсЕ 865
Зег С1у РИе С1и Уа1 Рго Беи Беи Зег Уа1 Туг А1а С1п
275 280 285
дсЕЕсЕассЕ ЕЕдаЕаЕаЕа ЕаЕааЕааЕЕ аЕсаЕЕааЕЕ адЕадЕааЕа ЕааЕаЕЕЕса 925
- 42 019029 ааЕаЬЕЕЪЬЕ ЬсааааЬааа адааЬдЬад! аЬаЬадсааЬ СдсПЬЬсЬд ЬадЬЕЬаЬаа 985 дЬдкдЬаЬаЬ ЬЕЬааПСа! аасЬЬЬЬсЬа аЬаЬакдасс аааасаСддС даЬдЬдсад 1044
дП А1а дсЬ А1а аас Азп сП Ьеи сак ΗΪ3 290 сЬЕ Ьеи дсЬ А1а акс 11е сП Ьеи ада Агд 295 даЬ Азр ЕсЬ Зег дН Уа1 аЬс 11е Не РЬе 300 дда С1у 1092
дад ада Сдд дда сП асЬ асЬ аЬс аас дН: аас дад аас Бас аас ада 1140
(31и Агд Тгр С1у Ьеи ТИг ТЬг 11е Азп Уа1 Азп С1и Азп Туг Азп Агд
305 310 315
сП аЬс ада саЬ акс дак дад Еас дсЬ да! са! ЬдЬ дсЬ аас ас! Ьас 1188
Ьеи Не Агд Нхз 11е Азр С1и Туг А1а Азр Нхз Суз А1а Азп ТИг Туг
320 325 330
аас ада дда сЬС аас аас сП СС1 аад ЬсС асЬ Бас сад дас Ьдд аЬс 1236
Азп Агд б1у Ьеи Азп АЗП Ьеи Рго Ьуз Зег Ткг Туг О1п Азр Тгр 11е
335 340 345
аск Ьас аас ада сП ада ада даЪ СЬЬ асЕ сЕЬ асЬ дЬЬ сП даЬ аП 1284
Тйг Туг Азп Агд Ьеи Агд Агд Азр Ьеи ТИг Ьеи ТЬг Уа1 Ьеи Азр 11е
350 355 360 365
дсЬ дсБ Ис ЬЬс ссЬ аас Ьас да! аас ада ада Бас ссЬ аЬс сад ссЬ 1332
А1а А1а Рйе РЬе Рго Азп Туг Азр Азп Агд Агд Туг Рго 11е С1п Рго
370 375 380
дП дда сад сЬЬ асЬ ада дад дП Ьас асЬ да! ССЪ сЬЬ акс аас Пс 1380
Уа1 С1у С1п Ьеи Тйг Агд С1и Уа1 Туг ТЬг Азр Рго Ьеи 11е Азп РИе
385 390 395
аас Азп ссЬ Рго сад <31п 400 сП Ьеи сад С1п 1сЬ Зег дИ Уа1 дсЬ А1а 405 сад Θΐη сП Ьеи ссЬ Рго асЬ ТИг Нс РЬе 410 аас Азп дН Уа1 аЬд МеЬ 1428
дад ЕсС ЬсС дсС а(:с ада аас ссС саЕ сП Нс да С аН сП аас аас 1476
61и Зег Зег А1а 11е Агд Азп Рго Н13 Ьеи РЬе Азр 11е Ьеи Азп Азп
415 420 425
СП ас! аЬс еьс асЬ дас ьдд Ш ЬсЬ дП дда ада аас Нс Ьас ьдд 1524
Ьеи ТИг 11е РИе ТЬг Азр Тгр Рке Зег 17а 1 С1у Агд Азп РЬе Туг Тгр
- 43 019029
430 435 440 445
дда С1у дда (31у сак Нхз ада Агд дкк Уа1 450 акс 11е ЕсЪ Зег Еск Зег сСС Ьеи акс 11е 455 дда 61у дда (31у дда С31у аас Азп акс 11е 460 аск Ткг 1572
Ьск ссБ акс Бас дда ада дад дсе аас сад дад сск ССк ада ЬсЬ ккс 1620
Зег Рго 11е Туг 61у Агд (31и А1а Азп С1п (31и Рго Рго Агд Зег Рке
465 470 475
аск ЬЕс аас дда сск дкк ЬЬс ада аск сЬЪ Ьск аас ССк аск скк ада 1668
Ткг Рке Азп (31у Рго Уа1 Рке Агд Ткг Ьеи Зег Азп Рго Ткг Ьеи Агд
480 485 490
сЕЕ скк сад сад сск ьдд сск дсЬ ссЬ сск ЬЬс аас СкЬ ада дда дкк 1716
Ьеи Ьеи (31x1 Θΐη Рго Тгр Рго А1а Рго Рго Рке Азп Ьеи Агд (31у Уа1
495 500 505
дад дда д£Х дад ЕЕс ЙСЬ аск сск аск аас Ьск ЬЬс аск Ьас ада дда 1764
(31и С1у Уа1 (31и Рке Зег Ткг Рго Ткг Азп Зег Рке Ткг Туг Агд 61у
510 515 520 525
ада дда аск дЪБ дас ЕсЕ скк асЕ дад скк сск сск дад дак аас ЬсЬ 1812
Агд <31у Ткг Уа1 Азр Зег Ьеи Ткг С1и Ьеи Рго Рго <31и Азр Азп Зег
530 535 540
дЕЕ сск сск ада дад дда Бас Ьск сак ада С1Ь кдк сак дек аск Ькс 1860
Уа1 Рго Рго Агд С1и С31у Туг Зег Наз Агд Ьеи Суз Нтз А1а Ткг Рке
545 550 555
дкк сад ада Еск дда аск ссЕ ЕЕс СЬЬ аск аск дда дкк дкк Ькс Ьск 1908
Уа1 61п Агд Зег 61у Ткг Рго Рке Ьеи Ткг Ткг (31у Уа1 Уа1 Рке Зег
560 565 570
Ъдд асЕ сак ада ЕсЕ дек асЕ СЕЕ аск аас аск акс дак сск дад адд 1956
Тгр Ткг Н1з Агд Зег А1а Ткг Ьеи Ткг Азп Ткг 11е Азр Рго (31и Агд
575 580 585
акс аас сад акс сск скк дкк аад дда ЬЬс ада дкк Ьдд дда дда аск 2004
Не Азп (31п 11е Рго Ъеи Уа1 Ьуз С1у Рке Агд Уа1 Тгр С1у С1у Ткг
590 595 600 605
Еск дкк акс аск дда сск дда ЕЕс аск дда дда дак акк Скк ада ада 2052
Зег Уа1 11е ТЬг С1у 610 Рго С1у РЬе ТЬг О1у 615 <31у Азр 11е Ьеи Агд 620 Агд
аас асР РРс дда даР РРс дрр РсР сРР сад дрр аас аРс аас РсР ссР 2100
Азп ТЬг РЬе С1у Азр РЬе Уа1 Зег Ьеи (31п Уа1 Азп 11е Азп Зег Рго
625 630 635
арс асР сад ада Рас ада сРР ада РРс ада Рас дсР РсР РсР ада даР 2148
11е ТЬг С1п Агд Туг Агд Ьеи Агд РЬе Агд Туг А1а Зег Зег Агд Азр
640 645 650
дсР ада дрр аРс дрр сРР асР дда дсР дсР РсР асР дда дРР дда дда 2196
А1а Агд Уа1 11е Уа1 Ьеи ТЬг С1у А1а А1а Зег ТЬг С1у Уа1 <31у С1у
655 660 665
сад дрр РсР дрр аас аРд ссР сРР сад аад асР аРд дад аРс дда дад 2244
61п Уа1 Зег Уа1 Азп МеР Рго Ьеи С1п Ьуз ТЬг Мер О1и 11е О1у <31и
670 675 680 685
аас СРР асР РсР ада асР РРс ада Рас асР даР РРс РсР аас ссР РРс 2292
Азп Ьеи ТЬг Зег Агд ТЬг РЬе Агд Туг ТЬг Азр РЬе Зег Азп Рго РЬе
690 695 700
РсР РРс ада дсР аас ссР даР аРР арс дда аРс РсР дад сад ссР сРР 2340
Зег РЬе Агд А1а Азп Рго Азр 11е 11е 61у 11е Зег 61и (31п Рго Ьеи
705 710 715
РРс дда дсР дда РсР аРс РсР РсР дда дад сРР Рас аРс даР ааа аРс 2388
РЬе С1у А1а 61у Зег 11е Зег Зег 61у С1и Ьеи Туг 11е Азр Ьуз 11е
720 725 730
дад аРс аРс сРР дсР даР дсР асР РРс дад дсР дад РсР дар РРа дад 2436
С1и 11е 11е Ьеи А1а Азр А1а ТЬг РЬе С1и А1а С1и Зег Азр Ьеи С1и
735 740 745 ада Рда
Агд
750
2442
<210> 7
<211> 750
<212> Белок
<213> Искусственная
- 45 019029 <220>
<223> Синтетическая конструкция <400> 7
МеБ 1 А1а Зег 11е Зег 5 Зег Зег Уа1 А1а Ткг 10 Уа1 Зег Агд Ткг А1а 15 Рго
А1а С1п А1а Азп МеБ Уа1 А1а Рго Рке Ткг <31у Ьеи Ьуз Зег Азп А1а
20 25 30
А1а Рке Рго Ткг Ткг Ьуз Ьуз А1а Азп Азр Рке Зег Ткг Ьеи Рго Зег
35 40 45
Азп С1у С1у Агд Уа1 61п Суз МеБ <31п Уа1 Тгр Рго А1а Туг б1у Азп
50 55 60
Ьуз Ьуз Рке С1и Ткг Ьеи Зег Туг Ьеи Рго Рго Ьеи Зег МеБ А1а Рго
65 70 75 80
Ткг Уа1 Мек МеБ А1а Зег Зег А1а Ткг А1а Уа1 А1а Рго Рке С1п С1у
85 90 95
Ьеи Ьуз Зег Ткг А1а Зег Ьеи Рго Уа1 А1а Агд Агд Зег Зег Агд Зег
100 105 110
Ьеи С1у Азп Уа1 Зег Азп С1у б1у Агд 11е Агд Суз О1и 61и Азп Азп
115 120 125
С1п Азп С1п Суз 11е Рго Туг Азп Суз Ьеи Зег Азп Рго С1и С1и Уа1
130 135 140
Ьеи Ьеи Азр <31у О1и Агд 11е Зег Ткг 61у Азп Зег Зег 11е Азр 11е
145 150 155 160
Зег Ьеи Зег Ьеи Уа1 С1п Рке Ьеи Уа1 Зег Азп Рке Уа1 Рго <31у С1у
165 170 175
(31у Рке Ьеи Уа1 СЭ1у Ьеи 11е Азр Рке Уа1 Тгр С1у 11е Уа1 61у Рго
180 185 190
- 46 019029
Зег <31п Тгр 195 Азр А1а РИе Ьеи Уа1 200 С1п 11е 61и <31п Ьеи 205 11е Азп С1и
Агд 11е А1а С1и Рке А1а Агд Азп А1а А1а 11е А1а Азп Ьеи С1и С1у
210 215 220
Ьеи 61у Азп Азп Рке Азп Не Туг Уа1 С1и А1а РИе Ьуз С1и Тгр С1и
225 230 235 240
<31и Азр Рго Азп Азп Рго С1и ТЬг Агд Ткг Агд Уа1 11е Азр Агд РИе
245 250 255
Агд 11е Ьеи Азр С1у Ьеи Ьеи (31и Агд Азр 11е Рго Зег РИе Агд 11е
260 265 270
Зег (31у РЬе С1и Уа1 Рго Ьеи Ьеи Зег Уа1 Туг А1а (31п А1а А1а Азп
275 280 285
Ьеи Н13 Ьеи А1а 11е Ьеи Агд Азр Зег Уа1 11е РИе <31у С1и Агд Тгр
290 295 300
С1у Ьеи ТИг ТИг 11е Азп Уа1 Азп 61и Азп Туг Азп Агд Ьеи 11е Агд
305 310 315 320
Н13 11е Азр С1и Туг А1а Азр Н13 Суз А1а Азп Ткг Туг Азп Агд С1у
325 330 335
Ьеи Азп Азп Ьеи Рго Ьуз Зег Ткг Туг С1п Азр Тгр 11е ТИг Туг Азп
340 345 350
Агд Ьеи Агд Агд Азр Ьеи Ткг Ьеи Тйг Уа1 Ьеи Азр 11е А1а А1а Рке
355 360 365
РИе Рго Азп Туг Азр Азп Агд Агд Туг Рго 11е С1п Рго Уа1 С1у С1п
370 375 380
Ьеи Ткг Агд 61и Уа1 Туг ТИг Азр Рго Ьеи 11е Азп РИе Азп Рго (31п
385 390 395 400
Ьеи С1п Зег Уа1 А1а <31п Ьеи Рго Тйг РИе Азп Уа1 МеЬ 61и Зег Зег
405 410 415
А1а 11е Агд Азп Рго Наз Ьеи РЬе Азр 11е Ьеи Азп Азп Ьеи ТИг 11е
- 47 019029
420 425 430
РНе ТНг Азр 435 Тгр РНе Зег Уа1 С1у 440 Агд Азп РНе Туг Тгр 445 61у 61у Наз
Агд Уа1 11е Зег Зег Ьеи 11е О1у <31у С1у Азп Не ТНг Зег Рго 11е
450 455 460
Туг (31у Агд <31и А1а Азп С1п С1и Рго Рго Агд Зег РНе ТНг РНе Азп
465 470 475 480
61у Рго Уа1 РНе Агд ТНг Ьеи Зег Азп Рго ТНг Ьеи Агд Ьеи Ьеи С1п
485 490 495
<31п Рго Тгр Рго А1а Рго Рго РНе Азп Ьеи Агд С1у Уа1 С1и С1у Уа1
500 505 510
<31и РНе Зег ТНг Рго ТНг Азп Зег РНе ТНг Туг Агд С1у Агд С1у ТНг
515 520 525
Уа1 Азр Зег Ьеи ТНг С1и Ьеи Рго Рго (31и Азр Азп Зег Уа1 Рго Рго
530 535 540
Агд С1и 61у Туг Зег ΗΪ3 Агд Ьеи Суз Н13 А1а ТНг РНе Уа1 О1п Агд
545 550 555 560
Зег С1у ТНг Рго РНе Ьеи ТНг ТНг 61у Уа1 Уа1 РНе Зег Тгр ТНг Н13
565 570 575
Агд Зег А1а ТНг Ьеи ТНг Азп ТНг 11е Азр Рго С1и Агд 11е Азп С1п
580 585 590
11е Рго Ьеи Уа1 Ьуз С1у РНе Агд Уа1 Тгр 61у С1у ТНг Зег Уа1 11е
595 600 605
ТНг С1у Рго С1у РНе ТНг С1у С1у Азр 11е Ьеи Агд Агд Азп ТНг РНе
610 615 620
С1у Азр РНе Уа1 Зег Ьеи Θΐη Уа1 Азп 11е Азп Зег Рго 11е ТНг С1п
625 630 635 640
Агд Туг Агд Ьеи Агд РНе Агд Туг А1а Зег Зег Агд Азр А1а Агд Уа1
645 650 655
- 48 019029
11е Уа1 Ьеи ТЬг С1у 660 А1а А1а Зег ТЬг С1у 665 Уа1 С1у С1у С1п 670 Уа1 Зег
Уа1 Азп МеЬ Рго Ьеи С1п Ьуз ТЬг МеЬ С1и 11е <31у С1и Азп Ьеи ТЬг
675 680 685
Зег Агд ТЬг РЬе Агд Туг ТЬг Азр РЬе Зег Азп Рго РЬе Зег РЬе Агд
690 695 700
А1а Азп Рго Азр 11е 11е (31у 11е Зег 61и С1п Рго Ьеи РЬе С1у А1а
705 710 715 720
О1у Зег 11е Зег Зег О1у С1и Ьеи Туг 11е Азр Ьуз 11е С1и 11е 11е
725 730 735
Ьеи А1а Азр А1а ТЬг РЬе 61и А1а <31и Зег Азр Ьеи С1и Агд
740 745 750
<210> 8
<211> 2313
<212> , ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> : модифицированная последовательность
<220>
<221> сьз
<222> (1) . . (2310)
<400> 8
аЪд дсЬ ЬсЬ аЬс ЬсЬ ЬсЬ ЬсЬ дН дсЬ асЬ ди ЬсЬ ада асЬ дсЬ ссЪ 48
МеЬ А1а Зег 11е Зег Зег Зег Уа1 А1а ТЬг Уа1 Зег Агд ТЬг А1а Рго
1 5 10 15
дсЬ сад дсЬ аас аЬд ди дсЬ ссЬ Пс асЬ дда си аад ЬсЬ аас дсЬ 96
А1а С1п А1а Азп МеЬ Уа1 А1а Рго РЬе ТЬг С1у Ьеи Ьуз Зег Азп А1а
20 25 30
дсЬ Нс ссЬ асЬ асЬ аад аад дсС аас даЬ Пс ЬсЬ асЬ сН ссЬ ЬсЬ 144
А1а РЬе Рго ТЬг ТЬг Ьуз Ьуз А1а Азп Азр РЬе Зег ТЬг Ьеи Рго Зег
40 45
аас Азп дда О1у 50 дда С1у ада Агд дРР Уа1 сад СЛп РдР Суз 55 аРд Мер сад С1п дРР Уа1 Рдд Тгр ссР Рго 60 дсР А1а Рас Туг дда С1у аас Азп 192
аад аад РРс дад асР сРР РсР Рас сРР ссР ссР сРР РсР аРд дсР ссР 240
Ьуз Ьуз РЬе С1и ТЬг Ьеи Зег Туг Ьеи Рго Рго Ьеи Зег МеР А1а Рго
65 70 75 80
асР дРР аРд аРд дсР РсР РсР дсР асР дсР дРР дсР ссР РРс сад дда 288
ТЬг Уа1 Мер Мер А1а Зег Зег А1а ТЬг А1а Уа1 А1а Рго РЬе С1п С1у
85 90 95
сРР аад РсР асР дсР РсР сРР ссР дРР дсР ада ада РсР РсР ада РсР 336
Ьеи Ьуз Зег ТЬг А1а Зег Ьеи Рго Уа1 А1а Агд Агд Зег Зег Агд Зег
100 105 110
сРР дда аас дРР РсР аас дда дда ада аРс ада РдР асР Рсд аас ада 384
Ьеи С1у Азп Уа1 Зег Азп С1у С1у Агд 11е Агд Суз ТЬг Зег Азп Агд
115 120 125
аад аас дад аас дад аРс аРс аас дсР дРР РсР аас саР РсР дсР сад 432
Ьуз Азп <31и Азп С1и 11е 11е Азп А1а Уа1 Зег Азп Нтз Зег А1а С1п
130 135 140
аРд даР сРР сРР ссР даР дсР ада аРс дад даР РсР сРР РдР аРс дсР 480
Мер Азр Ьеи Ьеи Рго Азр А1а Агд 11е С1и Азр Зег Ьеи Суз 11е А1а
145 150 155 160
дад дда аас аас аРс даР ссР РРс дРР РсР дсР РсР асР дРР сад асР 528
С1и С1у Азп Азп 11е Азр Рго РЬе Уа1 Зег А1а Зег ТЬг Уа1 С1п ТЬг
165 170 175
ддр аРс аас аРс дсР дда ада аРР сРР дда дРР сРР дда дРР ссР РРс 576
О1у 11е Азп 11е А1а 61у Агд 11е Ьеи С1у Уа1 Ьеи С1у Уа1 Рго РЬе
180 185 190
дсР дда сад сРР дсР РсР РРс Рас РсР РРс сРР дРР дда дад сРР Рдд 624
А1а С1у С1п Ьеи А1а Зег РЬе Туг Зег РЬе Ьеи Уа1 С1у С1и Ьеи Тгр
195 200 205
ссР ада дда ада даР сад Ьдд дад аРс РРс сРР дад саР дРР дад сад 672
Рго Агд С1у Агд Азр С1п Тгр С1и 11е РЬе Ьеи С1и Нхз Уа1 С1и С1п
- 50 019029
210 215 220
сЬЬ Ъеи 225 аЬс 11е аас Азп сад <31п сад С1п аЬс 11е 230 асЬ ТЬг дад С1и аас Азп дсЬ А1а ада Агд 235 аас Азп асЕ ТЬг дсб А1а си Ъеи дсЕ А1а 240 720
ада сЬС сад дда сСС дда даб ЬсЬ ЬЕс ада дсъ Бас сад сад ЪсЬ си 768
Агд Ъеи (31п С1у Ъеи <31у Азр Зег РЬе Агд А1а Туг С1п С1п Зег Ъеи
245 250 255
дад дас Едд СЕЪ дад аас ада дай даЬ дс! ада асЕ ада ЕсЕ ди си 816
<31и Азр Тгр Ъеи С1и Азп Агд Азр Азр А1а Агд ТЬг Агд Зег Уа1 Ъеи
260 265 270
саЪ асЬ сад бас аЪс дсЬ сСЕ дад СЕЬ даЬ Нс си аас дсЕ аЬд ССЙ 864
Н13 ТЬг 61п Туг 11е А1а Ъеи б1и Ъеи Азр РЬе Ъеи Азп А1а Меб Рго
275 280 285
сЕЕ ЬЕс дсЪ аЪс ада аас сад дад дЬЕ ссЪ сЫ си аЬд ди Пас дсб 912
Ъеи РЬе А1а 11е Агд Азп <31п <31и Уа1 Рго Ъеи Ъеи МеЬ Уа1 Туг А1а
290 295 300
сад дсб дсб аас си саЪ СЬЕ сЬЕ сЬЕ си ада даЬ дсЕ ЬсЬ сП ис 960
61п А1а А1а Азп Ъеи Н13 Ъеи Ъеи Ъеи Ъеи Агд Азр А1а Зег Ъеи РЬе
305 310 315 320
дда ЪсЕ дад ЬЕс дда сЕЬ асЬ ЬсЬ сад дад абс сад ада ЕаЬ Пас дад 1008
С1у Зег С1и РЬе О1у Ъеи ТЬг Зег С1п С1и 11е С1п Агд Туг Туг СЛи
325 330 335
ада сад дЬЬ дад ада асЪ ада даЬ Ьас ЬсЬ даб Ьас ЬдЕ ди дад Ьдд 1056
Агд Θΐη Уа1 С1и Агд ТЬг Агд Азр Туг Зег Азр Туг Суз Уа1 С1и Тгр
340 345 350
бас аас асЬ дда сЕЪ аас ЬсЬ сЬЬ ада дда асЬ аас дсЬ дсЪ ЬС1 ьдд 1104
Туг Азп ТЬг <31у Ъеи Азп Зег Ъеи Агд С1у ТЬг Азп А1а А1а Зег Тгр
355 360 365
дСЕ ада Ьас аас сад ис ада ада дай СЬЬ асЬ си дда ди си даЕ 1152
Уа1 Агд Туг Азп С1п РЬе Агд Агд Азр Ъеи ТЬг Ъеи С1у Уа1 Ъеи Азр
370 375 380
сЕЬ дЬЬ дсЬ сЕЕ ЕЪс ссЬ ЬсЬ Пас дас асЪ ада асЬ Ьас ссб абс аас 1200
- 51 019029
Ьеи 385 Уа1 А1а Ьеи РЬе Рго 390 Зег Туг Азр ТЬг Агд 395 ТЬг Туг Рго 11е Азп 400
асР РсР дсР сад сРР асР ада дад дрр Рас асР даР дсР аРс дда дсР 1248
ТЬг Зег А1а 61п Ьеи ТЬг Агд С1и Уа1 Туг ТЬг Азр А1а 11е О1у А1а
405 410 415
асР дда дрр аас аРд дсР РсР аРд аас рдд Рас аас аас аас дсР ссР 1296
ТЬг О1у Уа1 Азп Мер А1а Зег Мер Азп Тгр Туг Азп Азп Азп А1а Рго
420 425 430
РсР РРс РсР дсР аРс дад дсР дсР дсР аРс ада РсР ссР саР сРР сРР 1344
Зег РЬе Зег А1а 11е (31и А1а А1а А1а 11е Агд Зег Рго Н1з Ьеи Ьеи
435 440 445
даР РРс СРР дад сад сРР асР аРс РРс РсР дсР РсР РсР ада ьдд РсР 1392
Азр РЬе Ьеи О1и С1п Ьеи ТЬг 11е РЬе Зег А1а Зег Зег Агд Тгр Зег
450 455 460
аас асР ада сас аРд асР Рас Рдд ада дда саР асе аРс сад РсР ада 1440
Азп ТЬг Агд Н13 Мер ТЬг Туг Тгр Агд С1у ΗΪ3 ТЬг 11е О1п Зег Агд
465 470 475 480
ССР аРс дда дда дда СРР аас асР РсР асР саР дда дсР асР аас асР 1488
Рго 11е С1у С1у С1у Ьеи Азп ТЬг Зег ТЬг Н1з С1у А1а ТЬг Азп ТЬг
485 490 495
РсР аРс аас ссР дрр асР сРР ада РРс дсР РсР ада даР дрр Рас ада 1536
Зег 11е Азп Рго Уа1 ТЬг Ьеи Агд РЬе А1а Зег Агд Азр Уа1 Туг Агд
500 505 510
асР дад РсР Рас дсР дда дрр сРР срр рдд дда аРс Рас СРР дад ссР 1584
ТЬг О1и Зег Туг А1а (31у Уа1 Ьеи Ьеи Тгр С1у 11е Туг Ьеи 51и Рго
515 520 525
аРс сас дда дрр ссР асР дрр ада РРс аас РРС асР аас ссР сад аас 1632
11е Η1Ξ С1у Уа1 Рго ТЬг Уа1 Агд РЬе Азп РЬе ТЬг Азп Рго Θΐη Азп
530 535 540
аРс РсР даР ада дда асР дсР аас Рас РсР сад ссР Рас дад РсР ссР 1680
11е Зег Азр Агд <31у ТЬг А1а Азп Туг Зег (31п Рго Туг (31и Зег Рго
545 550 555 560
- 52 019029
дда О1у сСЕ Ьеи сад С1п сЬЬ Ьеи аад Ьуз 565 дай Азр ЬсЬ Зег дад (31и асЬ ТЬг дад <31и 570 СЬЬ Ьеи ссЬ Рго ссЬ Рго дад С1и асЬ ТЬг 575 асЬ ТЬг 1728
дад ада ссЬ аас Ьас дад ЬсС Бас ЕсЬ саЬ ада сЬЪ ЬсЕ саЬ аЬс дда 1776
С1и Агд Рго Азп Туг С1и Зег Туг Зег Н1з Агд Ьеи Зег ΗΪ3 11е О1у
580 585 590
айс айс сЬЪ сад ЬсЬ ада дЬЬ аас дЕЕ ссЬ дЬЬ Ьас ЬсЬ Ьдд аск саЬ 1824
11е 11е Ьеи О1п Зег Агд Уа1 Азп Уа1 Рго Уа1 Туг Зег Тгр ТЬг Н13
595 600 605
ада ЬсЬ дсЕ даЬ ада асЬ аас асЬ аЬс дда ссЕ аас ада аЬс асЬ сад 1872
Агд Зег А1а Азр Агд ТЬг Азп ТЬг 11е С1у Рго Азп Агд 11е ТЬг О1п
610 615 620
айс ссЬ аЬд дЬЬ аад дсЕ ЬсЬ дад сЬЬ ССЙ сад дда асЕ асЬ дЬЬ дЬЬ 1920
11е Рго МеЬ Уа1 Ьуз А1а Зег С1и Ьеи Рго <31п С1у ТЬг ТЬг Уа1 Уа1
625 630 635 640
ада дда ссЬ дда ЬЬс аск дда дда дай аЕс сЬЬ ада ада асЬ аас асЬ 1968
Агд С1у Рго 61у РЬе ТЬг С1у 61у Азр 11е Ьеи Агд Агд ТЬг Азп ТЬг
645 650 655
дда дда ЕЬс дда ссЬ аЬс ада дЕЬ асЬ дЬЬ аас дда ссЕ сЬЕ асЕ сад 2016
С1у <31у РЬе С1у Рго 11е Агд Уа1 ТЬг Уа1 Азп С1у Рго Ьеи ТЬг С1п
660 665 670
ада Ьас ада аЬс дда ЬЪс ада Ьас дсЬ ЬсЬ асЬ дЬЬ дай СЬс даЬ ЬЕс 2064
Агд Туг Агд 11е С1у РЬе Агд Туг А1а Зег ТЬг Уа1 Азр РЬе Азр РЬе
675 680 685
ЬЕс дЬЬ ЕсЬ ада дда дда асЬ асЬ дЬЕ аас аас ЪЕс ада ЪЬс сЬЬ ада 2112
РЬе Уа1 Зег Агд 61у С1у ТЬг ТЬг Уа1 Азп Азп РЬе Агд РЬе Ьеи Агд
690 695 700
асЕ аЬд аас ЬсЬ дда даЬ дад сЕЕ аад Ьас дда аас ЬЕс дЬЬ ада ада 2160
ТЬг МеЬ Азп Зег С1у Азр С1и Ьеи Ьуз Туг С1у Азп РЬе Уа1 Агд Агд
705 710 715 720
дсЕ ЬЕс асЬ асЬ ссЬ ЬЬс асЬ ЬЕс асЬ сад аЬс сад даЬ аЬс акс ада 2208
А1а РЬе ТЬг ТЬг Рго РЬе ТЬг РЬе ТЬг С1п 11е <31п Азр 11е 11е Агд
725 730 735
- 53 019029
2256
асБ БсБ аБс сад дда СББ БсБ дда аас дда дад дББ Бас аБс даБ ааа
ТИг Зег 11е С1п С1у Ьеи Зег 61у Азп С1у С1и Уа1 Туг 11е Азр Ьуз
740 745 750
аБс дад аБс аЬс ССБ дББ асБ дсБ асБ ББс дад дсБ дад Бас даБ ББа
11е С1и 11е Не Рго Уа1 ТИг А1а ТИг РИе С1и А1а С1и Туг Азр Ьеи
755 760 765
2304
<211>
770
13>
Искусственная <220>
<223> Синтетическая конструкция <400> 9
МеБ А1а Зег 11е Зег Зег Зег Уа1 А1а ТИг Уа1 Зег Агд ТИг А1а Рго
1 5 10 15
А1а С1п А1а Азп МеБ Уа1 А1а Рго РИе ТИг О1у Ьеи Ьуз Зег Азп А1а
20 25 30
А1а РИе Рго ТИг ТИг Ьуз Ьуз А1а Азп Азр РИе Зег ТИг Ьеи Рго Зег
35 40 45
Азп <31у С1у Агд Уа1 <31п Суз МеБ С1п Уа1 Тгр Рго А1а Туг <31у Азп
50 55 60
Ьуз Ьуз РИе С1и ТИг Ьеи Зег Туг Ьеи Рго Рго Ьеи Зег МеБ А1а Рго
65 70 75 80
ТИг Уа1 МеБ МеБ А1а Зег Зег А1а ТИг А1а Уа1 А1а Рго РИе С1п С1у
85 90 95
Ьеи Ьуз Зег ТИг А1а Зег Ьеи Рго Уа1 А1а Агд Агд Зег Зег Агд Зег
- 54 019029
100 105 110
Ьеи С1у Азп Уа1 Бег Азп <31у С1у Агд Не Агд Суз Ткг Зег Азп Агд
115 120 125
Ьуз Азп С1и Азп <31и 11е Не Азп А1а Уа1 Зег Азп Н13 Зег А1а С1п
130 135 140
Мер Азр Ьеи Ьеи Рго Азр А1а Агд Не С1и Азр Зег Ьеи Суз Не А1а
145 150 155 160
С1и <31у Азп Азп Не Азр Рго Рке Уа1 Зег А1а Зег Ткг Уа1 С1п Ткг
165 170 175
С1у 11е Азп Не А1а <31у Агд Не Ьеи С1у Уа1 Ьеи С1у Уа1 Рго Рке
180 185 190
А1а С1у <31п Ьеи А1а Бег Рке Туг Зег Рке Ьеи Уа1 С1у С1и Ьеи Тгр
195 200 205
Рго Агд С1у Агд Азр (31п Тгр С1и Не Рке Ьеи С1и ΗΪ8 Уа1 <31и С1п
210 215 220
Ьеи 11е Азп С1п С1п Не Ткг С1и Азп А1а Агд Азп Ткг А1а Ьеи А1а
225 230 235 240
Агд Ьеи <31п <31у Ьеи С1у Азр Зег Рке Агд А1а Туг С1п С1п Зег Ьеи
245 250 255
С1и Азр Тгр Ьеи <31и Азп Агд Азр Азр А1а Агд Ткг Агд Зег Уа1 Ьеи
260 265 270
Н13 Ткг С1п Туг Не А1а Ьеи С1и Ьеи Азр Рке Ьеи Азп А1а Мер Рго
275 280 285
Ьеи Рке А1а Не Агд Азп 61п С1и Уа1 Рго Ьеи Ьеи МеР Уа1 Туг А1а
290 295 300
(31п А1а А1а Азп Ьеи Н13 Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Агд Азр А1а Зег Ьеи Рке
305 310 315 320
01у Бег 61и Рке 61у Ьеи ТИг Зег <31п С1и Не С1п Агд Туг Туг С1и
325 330 335
- 55 019029
Агд (31η Уа1 С1и 340 Агд Ткг Агд Азр Туг 345 Зег Азр Туг Суз Уа1 350 С1и Тгр
Туг Азп Ткг С1у Ьеи Азп Зег Ьеи Агд С1у Ткг Азп А1а А1а Зег Тгр
355 360 365
Уа1 Агд Туг Азп Θΐη Рке Агд Агд Азр Ьеи Ткг Ьеи С1у Уа1 Ьеи Азр
370 375 380
Ьеи Уа1 А1а Ьеи Рке Рго Зег Туг Азр Ткг Агд Ткг Туг Рго 11е Азп
385 390 395 400
Ткг Зег А1а (31п Ьеи Ткг Агд 61и Уа1 Туг Ткг Азр А1а Не 61у А1а
405 410 415
Ткг С1у Уа1 Азп Мек А1а Зег Мек Азп Тгр Туг Азп Азп Азп А1а Рго
420 425 430
Зег Рке Зег А1а Не С1и А1а А1а А1а Не Агд Зег Рго Н13 Ьеи Ьеи
435 440 445
Азр Рке Ьеи С1и С1п Ьеи Ткг 11е Рке Зег А1а Зег Зег Агд Тгр Зег
450 455 460
Азп Ткг Агд Н1з Мек Ткг Туг Тгр Агд СЯу Н13 Ткг Не С1п Зег Агд
465 470 475 480
Рго 11е С1у С1у С1у Ьеи Азп Ткг Зег Ткг Н13 61у А1а Ткг Азп Ткг
485 490 495
Зег 11е Азп Рго Уа1 Ткг Ьеи Агд Рке А1а Зег Агд Азр Уа1 Туг Агд
500 505 510
Ткг <31и Зег Туг А1а С1у Уа1 Ьеи Ьеи Тгр С1у Не Туг Ьеи С1и Рго
515 520 525
Не Нхз С1у Уа1 Рго Ткг Уа1 Агд Рке Азп Рке Ткг Азп Рго (31п Азп
530 535 540
11е Зег Азр Агд <31у Ткг А1а Азп Туг Зег С1п Рго Туг С1и Зег Рго
545 550 555 560
- 56 019029
61у Ьеи (31п Ьеи Ьуз 565 Азр Зег <31и ТЬг С1и Ьеи 570 Рго Рго С1и ТЬг 575 ТЬг
61и Агд Рго Азп Туг б1и Зег Туг Зег Н±з Агд Ьеи Зег ΗΪ3 Не <31у
580 585 590
11е Не Ьеи С1п Зег Агд Уа1 Азп Уа1 Рго Уа1 Туг Зег Тгр ТЬг Н13
595 600 605
Агд Зег А1а Азр Агд ТЬг Азп ТЬг 11е С1у Рго Азп Агд Не ТЬг <31п
610 615 620
11е Рго Мер Уа1 Ьуз А1а Зег С1и Ьеи Рго С1п 61у ТЬг ТЬг Уа1 Уа1
625 630 635 640
Агд <31у Рго С1у РЬе ТЬг <31у С1у Азр Не Ьеи Агд Агд ТЬг Азп ТЬг
645 650 655
<31у С1у РЬе <31у Рго Не Агд Уа1 ТЬг Уа1 Азп С1у Рго Ьеи ТЬг <31п
660 665 670
Агд Туг Агд Не 61у РЬе Агд Туг А1а Зег ТЬг Уа1 Азр РЬе Азр РЬе
675 680 685
РЬе Уа1 Зег Агд <31у 61у ТЬг ТЬг Уа1 Азп Азп РЬе Агд РЬе Ьеи Агд
690 695 700
ТЬг МеР Азп Зег С1у Азр 61и Ьеи Ьуз Туг С1у Азп РЬе Уа1 Агд Агд
705 710 715 720
А1а РЬе ТЬг ТЬг Рго РЬе ТЬг РЬе ТЬг С1п Не О1п Азр Не Не Агд
725 730 735
ТЬг Зег Не С1п С1у Ьеи Зег <31у Азп <31у С1и Уа1 Туг 11е Азр Ьуз
740 745 750
11е <31и Не Не Рго Уа1 ТЬг А1а ТЬг РЬе 61и А1а 61и Туг Азр Ьеи
755 760 765
С1и Агд
770 <210> 10
- 57 019029 <211> 1947 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> модифицированная последовательность <220>
<221> СЬЗ <222> (1)..(1944) <400> 10
аБд МеБ 1 дсБ А1а асБ Ткг Бед Зег аас Азп 5 ада Агд аад Ьуз аас Азп дад (31и аас Азп 10 дад С1и аБс 11е аБс 11е аас Азп дсБ А1а 15 дББ Уа1 48
БсБ аас саБ БсБ дсБ сад аБд даБ сББ СББ ССБ даБ дсБ ада аБс дад 96
Зег Азп Н1з Зег А1а б1п МеБ Азр Ьеи Ьеи Рго Азр А1а Агд 11е 61и
20 25 30
даБ БсБ сББ БдБ аБс дсБ дад дда аас аас аБс даБ ссБ ББс дББ БсБ 144
Азр Зег Ьеи Суз 11е А1а С1и С1у Азп Азп 11е Азр Рго Рке Уа1 Зег
35 40 45
дсБ БсБ асБ дББ сад асБ ддь аБс аас аБс дсБ дда ада аББ сББ дда 192
А1а Зег Ткг Уа1 <31п Ткг 61у 11е Азп 11е А1а <31у Агд 11е Ьеи <31у
50 55 60
дББ сББ дда дББ ссБ ББс дсБ дда сад сББ дсБ БсБ ББс Бас БсБ ББс 240
Уа1 Ьеи <31у Уа1 Рго Рке А1а О1у С1п Ьеи А1а Зег Рке Туг Зег Рке
65 70 75 80
сББ дББ дда дад сББ Бдд ссБ ада дда ада даБ сад Бдд дад аБс ББс 288
Ьеи Уа1 <31у <31и Ьеи Тгр Рго Агд С1у Агд Азр С1п Тгр С1и 11е Рке
85 90 95
сББ дад саБ дББ дад сад сББ аБс аас сад сад аБс асБ дад аас дсБ 336
Ьеи 61и НФз Уа1 С1и С1п Ьеи 11е Азп С1п (31п 11е Ткг <31и Азп А1а
100 105 110
ада аас асБ дсБ сББ дсБ ада сББ сад дда сББ дда даБ БсБ ББс ада 384
Агд Азп Ткг А1а Ьеи А1а Агд Ьеи <31п С1у Ьеи 61у Азр Зег Рке Агд
115 120 125
- 58 019029
дсЕ А1а Еас Туг 130 сад <31п сад С1п ЕсЕ Зег сЕЕ Беи дад 61и 135 дас Азр ^дд Тгр сЕЕ Беи дад <31и аас Азп 140 ада Агд даЕ Азр даЕ Азр дсЕ А1а 432
ада асЕ ада ЕсЕ дЕЕ сЕЕ саЕ асЕ сад Еас аЕс дсЕ сЕЕ дад сЕЕ даЕ 480
Агд ТИг Агд Зег Уа1 Беи Н13 ТИг О1п Туг 11е А1а Беи С1и Беи Азр
145 150 155 160
ЕЕс сЕЕ аас дсЕ аЕд ссЕ сЕЕ ЕЕс дсЕ аЕс ада аас сад дад дЕЕ ссЕ 528
РНе Беи Азп А1а МеЕ Рго Беи РНе А1а 11е Агд Азп <31п С1и Уа1 Рго
165 170 175
сЕЕ сЕЕ аЕд дЕЕ Еас дсЕ сад дсЕ дсЕ аас сЕЕ саЕ СЕЕ сЕЕ СЕЕ сЕЕ 576
Беи Беи МеЕ Уа1 Туг А1а С1п А1а А1а Азп Беи Н13 Беи Беи Беи Беи
180 185 190
ада даЕ дсЕ ЕсЕ сЕЕ ЕЕс дда ЕсЕ дад ЕЕс дда сЕЕ асЕ ЕсЕ сад дад 624
Агд Азр А1а Зег Беи РНе (31у Зег С1и РНе С1у Беи ТНг Зег С1п С1и
195 200 205
аЕс сад ада ЕаЕ Еас дад ада сад дЕЕ дад ада асЕ ада даЕ Еас ЕсЕ 672
11е С1п Агд Туг Туг <31и Агд С1п Уа1 <31и Агд ТИг Агд Азр Туг Зег
210 215 220
даЕ Еас ЕдЕ дЕЕ дад Едд Еас аас асЕ дда сЕЕ аас ЕсЕ сЕЕ ада дда 720
Азр Туг Суз Уа1 О1и Тгр Туг Азп ТИг 61у Беи Азп Зег Беи Агд (31у
225 230 235 240
асЕ аас дсЕ дсЕ ЕсЕ Едд дЕЕ ада Еас аас сад ЕЕс ада ада даЕ сЕЕ 768
ТНг Азп А1а А1а Зег Тгр Уа1 Агд Туг Азп С1п РНе Агд Агд Азр Беи
245 250 255
асЕ сЕЕ дда дЕЕ СЕЕ даЕ сЕЕ дЕЕ дсЕ сЕЕ ЕЕс ссЕ ЕсЕ Еас дас асЕ 816
ТНг Беи <31у Уа1 Беи Азр Беи Уа1 А1а Беи РНе Рго Зег Туг Азр ТНг
260 265 270
ада асЕ Еас ссЕ аЕс аас асЕ ЕсЕ дсЕ сад сЕЕ асЕ ада дад дЕЕ Еас 864
Агд ТИг Туг Рго 11е Азп ТИг Зег А1а (31п Беи ТНг Агд С1и Уа1 Туг
275 280 285
асЕ даЕ дсЕ аЕс дда дсЕ асЕ дда дЕЕ аас аЕд дсЕ ЕсЕ аЕд аас Едд 912
ТНг Азр А1а 11е С1у А1а ТИг С1у Уа1 АЗП МеЕ А1а Зег МеЕ Азп Тгр
- 59 019029
290 295 300
Бас Туг 305 аас Азп аас Азп аас Азп дсБ А1а ссБ Рго 310 БсБ Зег ББс РИе БсБ Зег дсБ А1а аБс 11е 315 дад С1и дсБ А1а дсБ А1а дсБ А1а аБс 11е 320 960
ада БсБ ссБ саБ сББ СББ даБ ББс сББ дад сад сББ асБ аБс ББс БсБ 1008
Агд Зег Рго Н13 Ьеи Ьеи Азр РИе Ьеи 61и С1п Ьеи ТИг 11е РИе Зег
325 330 335
дсБ БсБ БсБ ада ьдд БсБ аас асБ ада сас аБд асБ Бас Бдд ада дда 1056
А1а Зег Зег Агд Тгр Зег Азп ТИг Агд Н13 МеБ ТИг Туг Тгр Агд С1у
340 345 350
саБ асе аБс сад БсБ ада ссБ аБс дда дда дда сББ аас асБ БсБ асБ 1104
ΗΪ3 ТИг 11е С1п Зег Агд Рго 11е С1у С1у (31у Ьеи Азп ТИг Зег ТИг
355 360 365
саБ дда дсБ асБ аас асБ БсБ аБс аас ссБ дББ асБ СББ ада ББс дсБ 1152
Н13 О1у А1а ТИг Азп ТИг Зег 11е Азп Рго Уа1 ТИг Ьеи Агд РИе А1а
370 375 380
БсБ ада даБ дББ Бас ада асБ дад БсБ Бас дсБ дда дББ сББ сББ Бдд 1200
Зег Агд Азр Уа1 Туг Агд ТИг <31и Зег Туг А1а 61у Уа1 Ьеи Ьеи Тгр
385 390 395 400
дда аБс Бас сББ дад ССБ аБс сас дда дББ ССБ асБ дББ ада ББс аас 1248
<31у 11е Туг Ьеи С1и Рго 11е Н13 С1у Уа1 Рго ТИг Уа1 Агд РИе Азп
405 410 415
ББс асБ аас ссБ сад аас аБс БсБ даБ ада дда асБ дсБ аас Бас БсБ 1296
РИе ТИг Азп Рго С1п Азп 11е Зег Азр Агд С1у ТИг А1а Азп Туг Зег
420 425 430
сад ссБ Бас дад БсБ ссБ дда сББ сад сББ аад даБ БсБ дад асБ дад 1344
<31п Рго Туг С1и Зег Рго С1у Ьеи б1п Ьеи Ьуз Азр Зег О1и ТИг 61и
435 440 445
сББ ссБ ссБ дад асБ асБ дад ада ссБ аас Бас дад БсБ Бас БсБ саБ 1392
Ьеи Рго Рго С1и ТИг ТИг С1и Агд Рго Азп Туг 61и Зег Туг Зег Н13
450 455 460
ада СББ БсБ саБ аБс дда аБс аБс сББ сад БсБ ада дББ аас дББ ссБ 1440
- 60 019029
Агд 465 Ьеи Зег Н1з Не С1у 470 Не 11е Ьеи <31п Зег Агд 475 Уа1 Азп Уа1 Рго 480
дбб бас бсб ьдд асб саб ада бсб дсб даб ада асб аас асб абс дда 1488
Уа1 Туг Зег Тгр ТНг ΗΪ3 Агд Зег А1а Азр Агд ТНг Азп ТНг Не С1у
485 490 495
ссб аас ада абс асб сад абс ссб абд дбб аад дсб бсб дад Сбб ссб 1536
Рго Азп Агд Не ТНг С1п Не Рго Меб Уа1 Ьуз А1а Зег <31и Ьеи Рго
500 505 510
сад дда асб асб дбб дбб ада дда ссб дда ббс асб дда дда даб абс 1584
С1п С1у ТНг ТНг Уа1 Уа1 Агд С1у Рго <31у РНе ТНг С1у С1у Азр Не
515 520 525
сбб ада ада асб аас асб дда дда ббс дда ссб абс ада дбб асб дбб 1632
Ьеи Агд Агд ТНг Азп ТНг <31у (31у РНе <31у Рго Не Агд Уа1 ТНг Уа1
530 535 540
аас дда ссб сбб асб сад ада бас ада абс дда ббс ада бас дсб бсб 1680
Азп С1у Рго Ьеи ТНг С1п Агд Туг Агд Не С1у РНе Агд Туг А1а Зег
545 550 555 560
асб дбб даб ббс даб ббс ббс дбб бсб ада дда дда асб асб дбб аас 1728
ТНг Уа1 Азр РНе Азр РНе РНе Уа1 Зег Агд (31у <31у ТНг ТНг Уа1 Азп
565 570 575
аас ббс ада ббс сбб ада асб абд аас бсб дда даб дад Сбб аад бас 1776
Азп РНе Агд РНе Ьеи Агд ТНг Меб Азп Зег С1у Азр С1и Ьеи Ьуз Туг
580 585 590
дда аас ббс дбб ада ада дсб ббс асб асб ссб ббс асб ббс асб сад 1824
С1у Азп РНе Уа1 Агд Агд А1а РНе ТНг ТНг Рго РНе ТНг РНе ТНг Θΐη
595 600 605
абс сад даб абс абс ада асб бсб абс сад дда сбб бсб дда аас дда 1872
Не О1п Азр 11е Не Агд ТНг Зег Не С1п С1у Ьеи Зег С1у Азп 61у
610 615 620
дад дбб бас абс даб ааа абс дад абс абс ссб дбб асб дсб асб ббс 1920
С1и Уа1 Туг Не Азр Ьуз 11е О1и Не 11е Рго Уа1 ТНг А1а ТНг РНе
625 630 635 640 дад дсР дад Рас даР РРа дад ада Рда 1947 <31и А1а (31и Туг Азр Ьеи (31и Агд
645 <210> 11 <211> 648 <212> Белок <213> Искусственная <220>
<223> Синтетическая конструкция <400> 11
Мер 1 А1а ТЬг Зег Азп Агд 5 Ьуз Азп С1и Азп 10 61и 11е 11е Азп А1а Уа1 15
Зег Азп Н13 Зег А1а <31п Мер Азр Ьеи Ьеи Рго Азр А1а Агд 11е С1и
20 25 30
Азр Зег Ьеи Суз 11е А1а С1и С1у Азп Азп 11е Азр Рго РЬе Уа1 Зег
35 40 45
А1а Зег ТЬг Уа1 С1п ТЬг С1у 11е Азп 11е А1а <31у Агд 11е Ьеи С1у
50 55 60
Уа1 Ьеи С1у Уа1 Рго РЬе А1а С1у (31п Ьеи А1а Зег РЬе Туг Зег РЬе
65 70 75 80
Ьеи Уа1 (31у С1и Ьеи Тгр Рго Агд С1у Агд Азр Θΐη Тгр С1и 11е РЬе
85 90 95
Ьеи С1и ΗΪ3 Уа1 С1и <31п Ьеи 11е Азп С1п С1п 11е ТЬг С1и Азп А1а
100 105 110
Агд Азп ТЬг А1а Ьеи А1а Агд Ьеи С1п С1у Ьеи С1у Азр Зег РЬе Агд
115 120 125
А1а Туг С1п С1п Зег Ьеи (31и Азр Тгр Ьеи 61и Азп Агд Азр Азр А1а
130 135 140
Агд ТЬг Агд Зег Уа1 Ьеи Н13 ТЬг <31п Туг 11е А1а Ьеи С1и Ьеи Азр
145 150 155 160
- 62 019029
РЬе Ьеи Азп А1а Мек 165 Рго Ьеи РНе А1а 11е Агд 170 Азп 61п С1и Уа1 175 Рго
Ьеи Ьеи МеЬ Уа1 Туг А1а С1п А1а А1а Азп Ьеи Н13 Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи
180 185 190
Агд Азр А1а Зег Ьеи Рйе С1у Зег С1и Рке С1у Ьеи ТИг Зег Θΐη 61и
195 200 205
Не <31п Агд Туг Туг <31и Агд 61п Уа1 С1и Агд ТЬг Агд Азр Туг Зег
210 215 220
Азр Туг Суз Уа1 С1и Тгр Туг Азп ТИг С1у Ьеи Азп Зег Ьеи Агд С1у
225 230 235 240
ТИг Азп А1а А1а Зег Тгр Уа1 Агд Туг Азп 61п РИе Агд Агд Азр Ьеи
245 250 255
ТЬг Ьеи С1у Уа1 Ьеи Азр Ьеи Уа1 А1а Ьеи Рке Рго Зег Туг Азр Ткг
260 265 270
Агд ТЬг Туг Рго 11е Азп ТИг Зег А1а <31п Ьеи ТИ.Г Агд 61и Уа1 Туг
275 280 285
ТЬг Азр А1а Не С1у А1а ТЬг О1у Уа1 Азп Мек А1а Зег МеЬ Азп Тгр
290 295 300
Туг Азп Азп Азп А1а Рго Зег Рке Зег А1а Не С1и А1а А1а А1а Не
305 310 315 320
Агд Зег Рго Н13 Ьеи Ьеи Азр РИе Ьеи С1и <31п Ьеи ТИг Не Рке Зег
325 330 335
А1а Зег Зег Агд Тгр Зег Азп ТИг Агд Н13 МеЬ Тйг Туг Тгр Агд С1у
340 345 350
Н13 Тйг 11е С1п Зег Агд Рго Не С1у С1у <31у Ьеи Азп ТИ.Г Зег ТИг
355 360 365
Шз О1у А1а ТИг Азп ТИг Зег 11е Азп Рго Уа1 ТИг Ьеи Агд Рке А1а
- 63 019029
370 375 380
Зег Агд Азр 385 Уа1 Туг Агд 390 ТЬг (31и Зег Туг А1а 395 С1у Уа1 Ьеи Ьеи Тгр 400
С1у 11е Туг Ьеи 61и Рго 11е Н13 С1у Уа1 Рго ТЬг Уа1 Агд РЬе Азп
405 410 415
РЬе ТЬг Азп Рго С1п Азп 11е Зег Азр Агд С1у ТЬг А1а Азп Туг Зег
420 425 430
С1п Рго Туг С1и Зег Рго С1у Ьеи С1п Ьеи Ьуз Азр Зег <31и ТЬг С1и
435 440 445
Ьеи Рго Рго С1и ТЬг ТЬг С1и Агд Рго Азп Туг О1и Зег Туг Зег Н13
450 455 460
Агд Ьеи Зег Нтз 11е <31у 11е 11е Ьеи С1п Зег Агд Уа1 Азп Уа1 Рго
465 470 475 480
Уа1 Туг Зег Тгр ТЬг Н13 Агд Зег А1а Азр Агд ТЬг Азп ТЬг 11е С1у
485 490 495
Рго Азп Агд 11е ТЬг О1п 11е Рго МеЬ Уа1 Ьуз А1а Зег <31и Ьеи Рго
500 505 510
С1п О1у ТЬг ТЬг Уа1 Уа1 Агд С1у Рго С1у РЬе ТЬг (31у <31у Азр 11е
515 520 525
Ьеи Агд Агд ТЬг Азп ТЬг С1у (31у РЬе С1у Рго 11е Агд Уа1 ТЬг Уа1
530 535 540
Азп О1у Рго Ьеи ТЬг С1п Агд Туг Агд 11е С1у РЬе Агд Туг А1а Зег
545 550 555 560
ТЬг Уа1 Азр РЬе Азр РЬе РЬе Уа1 Зег Агд С1у <31у ТЬг ТЬг Уа1 Азп
565 570 575
Азп РЬе Агд РЬе Ьеи Агд ТЬг МеЬ Азп Зег С1у Азр О1и Ьеи Ьуз Туг
580 585 590
<31у Азп РЬе Уа1 Агд Агд А1а РЬе ТЬг ТЬг Рго РЬе ТЬг РЬе ТЬг (31п
595 600 605
- 64 019029
11е (31п Азр 610 11е 11е Агд Ткг 615 Зег 11е <31п (31у Ьеи 620 Зег О1у Азп С1у
С1и Уа1 Туг 11е Азр Ьуз 11е С1и 11е 11е Рго Уа1 Ткг Ткг Рке
625 630 635 640
С1и А1а <31и Туг Азр Ьеи С1и Агд
645 <210> 12 <211> 2181 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> модифицированная последовательность <220>
<221> СЬЗ <222> (1) . . (2178) <400> 12
акд Мек 1 дек А1а кек Зег акс 11е кек Зег 5 кек Зег кек Зег дкк Уа1 дек А1а аск Ткг 10 дкк Уа1 кек Зег ада Агд аск Ткг дек А1а 15 сск Рго 48
дек сад дек аас акд дкк дек сск ккс аск дда екк аад кек аас дек 96
А1а С1п А1а Азп Мек Уа1 А1а Рго Рке Ткг С1у Ьеи Ьуз Зег Азп А1а
20 25 30
дек ккс сск аск аск аад аад дек аас дак ккс кек аск екк сск кек 144
А1а Рке Рго Ткг Ткг Ьуз Ьуз А1а Азп Азр Рке Зег Ткг Ьеи Рго Зег
35 40 45
аас дда дда ада дкк сад кдк акд сад дкк тдд сск дек кас дда аас 192
Азп <31у С1у Агд Уа1 <31п Суз Мек (31п Уа1 Тгр Рго А1а Туг С1у Азп
50 55 60
аад аад ккс дад аск екк кек кас екк сск сск екк кек акд дек сск 240
Ьуз Ьуз Рке С1и Ткг Ьеи Зег Туг Ьеи Рго Рго Ьеи Зег Мек А1а Рго
65 70 75 80
- 65 019029
асР ТЬг дрр Уа1 аРд Мер аРд Мер дсР А1а 85 РсР Зег РсР Зег дсР А1а асР ТЬг дсР А1а 90 дрр Уа1 дсР А1а ссР Рго РРс РЬе сад Θΐη 95 дда С1у 288
сРР аад РсР асР дсР РсР сРР ссР дрр дсР ада ада РсР РсР ада РсР 336
Ьеи Ьуз Зег ТЬг А1а Зег Ьеи Рго Уа1 А1а Агд Агд Зег Зег Агд Зег
100 105 110
СРР Ьеи дда (31у аас Азп 115 дрр Уа1 РсР Зег аас Азп дда <31у дда С1у 120 ада Агд аРс Не ада Агд РдР Суз дад 61и 125 аРс Не аас Азп аас Азп 384
сад аас сад РдР дрр ссР Рас аас РдР сРР РсР аас ССР аад дад аРс 432
С1п Азп С1п Суз Уа1 Рго Туг Азп Суз Ьеи Зег Азп Рго Ьуз <31и Не
130 135 140
аРс СРР дда дад дад ада срр дад асР дда аас асР дрр дсР даР аРс 480
Не Ьеи <31у 61и С1и Агд Ьеи С1и ТЬг С1у Азп ТЬг Уа1 А1а Азр Не
145 150 155 160
РсР сРР дда СРР аРс аас РРс срр Рас РсР аас РРс дрр ссР дда ддр 528
Зег Ьеи С1у Ьеи 11е Азп РЬе Ьеи Туг Зег Азп РЬе Уа1 Рго С1у С1у
165 170 175
дда РРс аРс дрр дда сРР сРР дад сРР аРс Рдд дда РРс аРс дда ссР 576
61у РЬе Не Уа1 С1у Ьеи Ьеи С1и Ьеи 11е Тгр С1у РЬе 11е С1у Рго
180 185 190
РсР сад гдд даР аРс РРс сРР дсР сад аРс дад сад срр аРс РсР сад 624
Зег С1п Тгр Азр Не РЬе Ьеи А1а С1п 11е С1и С1п Ьеи Не Зег С1п
195 200 205
ада аРс дад дад РРс дсР ада аас сад дсР аРс РсР ада сРР дад дда 672
Агд Не С1и С1и РЬе А1а Агд Азп С1п А1а Пе Зег Агд Ьеи С1и С1у
210 215 220
сРР РсР аар сРР Рас ааа дрр Рас дрр ада дсР РРС РсР да с ьдд дад 720
Ьеи Зег Азп Ьеи Туг Ьуз Уа1 Туг Уа1 Агд А1а РЬе Зег Азр Тгр С1и
225 230 235 240
аад даР ссР асР аас ссР дсР сРР ада дад дад аРд ада аРс сад РРс 768
Ьуз Азр Рго ТЬг Азп Рго А1а Ьеи Агд С1и (31и Мер Агд Не б!п РЬе
- 66 019029
245 250 255
аас Азп даБ Азр аБд МеБ аас Азп 260 БсБ Зег дсБ А1а сП Ьеи аБс 11е асБ ТЬг 265 дсБ А1а аБс 11е ссБ Рго сББ Ьеи ББс РЬе 270 ада Агд дББ Уа1 816
сад аас Бас дад дББ дсБ сП СББ БсБ дББ Бас дББ сад дсБ дсБ аас 864
<31п Азп Туг С1и Уа1 А1а Ьеи Ьеи Зег Уа1 Туг Уа1 С1п А1а А1а Азп
275 280 285
сББ саБ сП БсБ аБс сП ада даБ дББ БсБ дББ ББс дда дад ада Бдд 912
Ьеи Н1з Ьеи Зег 11е Ьеи Агд Азр Уа1 Зег Уа1 РЬе 61у (31и Агд Тгр
290 295 300
дда Бас даБ асБ дсБ асБ аБс аас аас ада Бас БсБ даБ СББ асБ БсБ 960
С1у Туг Азр ТЬг А1а ТЬг 11е Азп Азп Агд Туг Зег Азр Ьеи ТЬг Зег
305 310 315 320
сП аБс саБ дН Бас асБ аас саБ БдБ дББ даБ асБ Бас аас сад дда 1008
Ьеи 11е Н13 Уа1 Туг ТЬг Азп Н13 Суз Уа1 Азр ТЬг Туг Азп С1п С1у
325 330 335
сББ ада ада сП дад дда ада ББс сББ БсБ да с Бдд аБс дББ Бас аас 1056
Ьеи Агд Агд Ьеи С1и С1у Агд РЬе Ьеи Зег Азр Тгр 11е Уа1 Туг Азп
340 345 350
ада Пс ада ада сад сП асБ аБс БсБ дББ сББ даБ аБс дББ дсБ ББс 1104
Агд РЬе Агд Агд С1п Ьеи ТЬг 11е Зег Уа1 Ьеи Азр 11е Уа1 А1а РЬе
355 360 365
ББС РЬе ссБ Рго 370 аас Азп Бас Туг даБ Азр аБс 11е ада Агд 375 асБ ТЬг Бас Туг ссБ Рго аБс 11е сад <31п 380 асБ ТЬг дсБ А1а асБ ТЬг сад С1п 1152
СББ асБ ада дад дББ Бас сББ даБ сББ ссБ ББс аБс аас дад аас сББ 1200
Ьеи ТЬг Агд С1и Уа1 Туг Ьеи Азр Ьеи Рго РЬе 11е Азп С1и Азп Ьеи
385 390 395 400
БсБ ссБ дсБ дсБ БсБ Бас ссБ асБ ББс БсБ дсБ дсБ дад БсБ дсБ аБс 1248
Зег Рго А1а А1а Зег Туг Рго ТЬг РЬе Зег А1а А1а С1и Зег А1а 11е
405 410 415
- 67 019029
акс 11е ада Агд ЬсС Зег ссЬ Рго 420 сак Н13 сЬЬ Ьеи дЬЕ Уа1 даЬ Азр ЬЬс РЬе 425 сЬЬ Ьеи аас Азп ЬсС Зег ЬЬс РЬе асЬ Ткг 430 аЕс 11е Гас Туг 1296
аск даЬ ЬсС сЬЬ дек ада Бас дек Ьас Ьдд дда дда саЬ сЕЬ дСЬ аас 1344
Ткг Азр Зег Ьеи А1а Агд Туг А1а Туг Тгр С1у С1у Н13 Ьеи Уа1 Азп
435 440 445
ЬсЕ ЬСс ада асЪ дда аск аса асЬ аас сЕЬ аЬс ада ЬсЬ ссЕ сЕЬ Гас 1392
Зег РЬе Агд Ткг 61у Ткг Ткг Ткг Азп Ьеи 11е Агд Зег Рго Ьеи Туг
450 455 460
дда ада дад дда аас асЬ дад ада ссЬ дЬЬ асЬ акс асС дсЬ Ьск ссЬ 1440
С1у Агд 61и <31у Азп Ткг <31и Агд Рго Уа1 Ткг 11е Ткг А1а Зег Рго
465 470 475 480
ЬсЕ дЬЕ ссС аЕс ЬЕс ада асЬ сЬЬ ЬсЬ Еас аЬс аск дда сЕЬ даЬ аас 1488
Зег Уа1 Рго 11е РЬе Агд Ткг Ьеи Зег Туг 11е Ткг С1у Ьеи Азр Азп
485 490 495
ЕсЕ аас ССЬ дЬЕ дек дда аСс дад дда дЬЬ дад ЬЬс сад аас аск аЬс 1536
Зег Азп Рго Уа1 А1а (31у 11е С1и С1у Уа1 С1и Рке <31п Азп Ткг 11е
500 505 510
ЕсЕ ада ЕсЕ аЬс Ьас ада аад ЕсЬ дда ссЬ аЕс даЬ ЬсЬ ЬЬс ЬсЬ дад 1584
Зег Агд Зег 11е Туг Агд Ьуз Зег С1у Рго 11е Азр Зег Рке Зег <31и
515 520 525
сЬЬ ссЕ ссЬ сад даЬ дсЕ ЬсЕ дЬЬ ЕсЬ ссЬ дсЬ аЬс дда Бас ЬсЬ сак 1632
Ьеи Рго Рго С1п Азр А1а Зег Уа1 Зег Рго А1а Не С1у Туг Зег Н1з
530 535 540
ада сЬЬ ЪдЕ сак дсЬ асЕ ЬЕс сЬЕ дад ада аЬс ЬсС дда ссЬ ада аЕс 1680
Агд Ьеи Суз Н1з А1а Ткг Рке Ьеи (31и Агд Не Зег О1у Рго Агд 11е
545 550 555 560
дсЬ дда аск дЪЬ ЕЕс ЕсЬ Ьдд асЬ сак ада ЬсЬ дсЬ ЬсЬ ссЬ асЬ аас 1728
А1а (31у Ткг Уа1 РЬе Зег Тгр Ткг Н13 Агд Зег А1а Зег Рго Ткг Азп
565 570 575
дад дЬЕ СсЬ ссЬ ЬсЬ ада акс аск сад аЬс ссС Сдд дЬЕ аад дсЬ сак 1776
С1и Уа1 Зег Рго Зег Агд Не Ткг <31п Не Рго Тгр Уа1 Ьуз А1а Н13
580 585 590
- 68 019029
аск Ткг екк Ьеи дек А1а 595 кек Зег дда <31у дек А1а кек Зег дкк Уа1 600 акс 11е аад Ьуз дда С1у сск Рго дда С1у 605 ккс Рке аск Ткг дда С1у 1824
дда дак акс екк аск ада аас кек акд дда дад екк дда аск екк ада 1872
С1у Азр 11е Ьеи Ткг Агд Азп Зег Мек 61у О1и Ьеи С1у Ткг Ьеи Агд
610 615 620
дкк аск ккс аск дда ада екк сск сад кек кас кас акс ада ккс ада 1920
Уа1 Ткг Рке Ткг 61у Агд Ьеи Рго 61п Зег Туг Туг 11е Агд Рке Агд
625 630 635 640
кас дек кек дкк дек аас ада кек дда аск ккс ада кас кек сад сск 1968
Туг А1а Зег Уа1 А1а Азп Агд Зег С1у Ткг Рке Агд Туг Зег Θΐη Рго
645 650 655
сск кек кас дда акс кек ккс сск аад аск акд дак дек дда дад сск 2016
Рго Зег Туг <31у 11е Зег Рке Рго Ьуз Ткг Мек Азр А1а <31у <31и Рго
660 665 670
екк аск кек ада кек ккс дек сак аса аск екк ккс аск сск акс аск 2064
Ьеи Ткг Зег Агд Зег Рке А1а Н13 Ткг Ткг Ьеи Рке Ткг Рго 11е Ткг
675 680 685
ккс кек ада дек сад дад дад ккс дак ска кас акс сад кек дда дкк 2112
Рке Зег Агд А1а С1п С1и (31и Рке Азр Ьеи Туг 11е С1п Зег (31у Уа1
690 695 700
кас акс дак ада акс дад ккс акс сск дкк аск дек аск ккс дад дек 2160
Туг 11е Азр Агд 11е 61и Рке Не Рго Уа1 Ткг А1а Ткг Рке С1и А1а
705 710 715 720
дад кас дак кка дад ада кда 2181
О1и Туг Азр Ьеи О1и Агд
725
<210> 13
<211> 726
<212> Белок
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетическая конструкция <400> 13
Мер 1 А1а Зег 11е Зег 5 Зег Зег Уа1 А1а Ткг Уа1 10 Зег Агд Ткг А1а 15 Рго
А1а С1п А1а Азп Мер Уа1 А1а Рго Рке Ткг С1у Ьеи Ьуз Зег Азп А1а
20 25 30
А1а Рке Рго Ткг Ткг Ьуз Ьуз А1а Азп Азр Рке Зег Ткг Ьеи Рго Зег
35 40 45
Азп О1у <31у Агд Уа1 С1п Суз МеР С1п Уа1 Тгр Рго А1а Туг С1у Азп
50 55 60
Ьуз Ьуз Рке С1и Ткг Ьеи Зег Туг Ьеи Рго Рго Ьеи Зег МеР А1а Рго
65 70 75 80
Ткг Уа1 Мер МеР А1а Зег Зег А1а Ткг А1а Уа1 А1а Рго Рке 61п С1у
85 90 95
Ьеи Ьуз Зег Ткг А1а Зег Ьеи Рго Уа1 А1а Агд Агд Зег Зег Агд Зег
100 105 110
Ьеи С1у Азп Уа1 Зег Азп С1у С1у Агд 11е Агд Суз С1и 11е Азп Азп
115 120 125
С1п Азп С1п Суз Уа1 Рго Туг АЗП Суз Ьеи Зег Азп Рго Ьуз С1и 11е
130 135 140
11е Ьеи С1у С1и С1и Агд Ьеи 61и Ткг С1у Азп Ткг Уа1 А1а Азр 11е
145 150 155 160
Зег Ьеи <31у Ьеи 11е Азп Рке Ьеи Туг Зег Азп Рке Уа1 Рго С1у С1у
165 170 175
С1у Рке 11е Уа1 С1у Ьеи Ьеи С1и Ьеи 11е Тгр С1у Рке 11е С1у Рго
180 185 190
Зег <31п Тгр Азр 11е Рке Ьеи А1а С1п 11е С1и <31п Ьеи 11е Зег 61п
195 200 205
- 70 019029
Агд 11е О1и С1и РЬе А1а Агд Азп Θΐη А1а 11е Зег Агд Ьей С1и С1у
210 215 220
Ъеи 225 Зег Азп Ъеи Туг Ъуз Уа1 230 Туг Уа1 Агд А1а 235 РЬе Зег Азр Тгр С1и 240
Ъуз Азр Рго ТЬг Азп Рго А1а Ъеи Агд С1и С1и МеЕ Агд 11е С1п РЬе
245 250 255
Азп Азр МеЕ Азп Зег А1а Ъеи 11е ТЬг А1а 11е Рго Ъеи РЬе Агд Уа1
260 265 270
С1п Азп Туг С1и Уа1 А1а Ъеи Ъеи Зег Уа1 Туг Уа1 С1п А1а А1а Азп
275 280 285
Ъеи Н13 Ъеи Зег 11е Ъеи Агд Азр Уа1 Зег Уа1 РЬе С1у С1и Агд Тгр
290 295 300
С1у Туг Азр ТЬг А1а ТЬг 11е Азп Азп Агд Туг Зег Азр Ъеи ТЬг Зег
305 310 315 320
Ъеи 11е Н13 Уа1 Туг ТЬг Азп Н13 Суз Уа1 Азр ТЬг Туг Азп С1п С1у
325 330 335
Ъеи Агд Агд Ъеи (31и С1у Агд РЬе Ъеи Зег Азр Тгр 11е Уа1 Туг Азп
340 345 350
Агд РЬе Агд Агд <31п Ъеи ТЬг 11е Зег Уа1 Ъеи Азр 11е Уа1 А1а РЬе
355 360 365
РЬе Рго Азп Туг Азр 11е Агд ТЬг Туг Рго 11е С1п ТЬг А1а ТЬг С1п
370 375 380
Ъеи ТЬг Агд С1и Уа1 Туг Ъеи Азр Ъеи Рго РЬе 11е Азп С1и Азп Ъеи
385 390 395 400
Зег Рго А1а А1а Зег Туг Рго ТЬг РЬе Зег А1а А1а <31и Зег А1а 11е
405 410 415
11е Агд Зег Рго ΗΪ3 Ъеи Уа1 Азр РЬе Ъеи Азп Зег РЬе ТЬг 11е Туг
420 425 430
Ткг Азр Бег Ьеи 435 А1а Агд Туг А1а Туг Тгр (31у <31у Ηίβ Ьеи Уа1 Азп
440 445
Зег Рке Агд Ткг С1у Ткг Ткг Ткг Азп Ьеи 11е Агд Зег Рго Ьеи Туг
450 455 460
<21у Агд С1и <31у Азп Ткг С1и Агд Рго Уа1 Ткг 11е Ткг А1а Зег Рго
465 470 475 480
Бег Уа1 Рго 11е Рке Агд Ткг Ьеи Зег Туг 11е Ткг С1у Ьеи Азр Азп
485 490 495
Бег Азп Рго Уа1 А1а <31у 11е С1и С1у Уа1 С1и Рке <31п Азп Ткг 11е
500 505 510
Бег Агд Зег 11е Туг Агд Ьуз Зег б1у Рго 11е Азр Зег Рке Зег С1и
515 520 525
Ьеи Рго Рго С1п Азр А1а Зег Уа1 Зег Рго А1а 11е С1у Туг Зег Н1з
530 535 540
Агд Ьеи Суз Н13 А1а Ткг Рке Ьеи б1и Агд 11е Зег 61у Рго Агд 11е
545 550 555 560
А1а С1у Ткг Уа1 Рке Зег Тгр Ткг Н13 Агд Зег А1а Зег Рго Ткг Азп
565 570 575
С1и Уа1 Бег Рго Зег Агд 11е Ткг С1п 11е Рго Тгр Уа1 Ьуз А1а Н13
580 585 590
Ткг Ьеи А1а Зег С1у А1а Зег Уа1 11е Ьуз С1у Рго 61у Рке Ткг (31у
595 600 605
С1у Азр 11е Ьеи Ткг Агд Азп Зег МеБ <31у С1и Ьеи 61у Ткг Ьеи Агд
610 615 620
Уа1 Ткг Рке Ткг <31у Агд Ьеи Рго С1п Зег Туг Туг 11е Агд Рке Агд
625 630 635 640
Туг А1а Зег Уа1 А1а Азп Агд Зег <31у Ткг Рке Агд Туг Зег С1п Рго
645 650 655
- 72 019029
Рго Зег Туг С1у 660 11е Зег РЬе Рго Ьуз 665 ТЬг МеЬ Азр А1а С1у 670 С1и Рго
Ьеи ТЬг Зег Агд Зег РЬе А1а Н13 ТЬг ТЬг Ьеи РЬе ТЬг Рго 11е ТЬг
675 680 685
РЬе Зег Агд А1а (31п С1и 61и РЬе Азр Ьеи Туг 11е С1п Зег О1у Уа1
690 695 700
Туг 11е Азр Агд 11е О1и РЬе 11е Рго Уа1 ТЬг А1а ТЬг РЬе 61и А1а
705 710 715 720
С1и Туг Азр Ьеи 61и Агд
725 <210> 14 <211> 1815 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> модифицированная последовательность <220>
<221> СОЗ <222> (1)..(1812) <400> 14
аЬд МеС 1 дсЬ А1а дад <31и аЬс 11е аас Азп 5 аас Азп сад <31п аас Азп сад <31п ЬдЬ Суз 10 дее Уа1 ссЬ Рго Ьас Туг аас Азп ЕдЬ Суз 15 сЕЬ Ьеи 48
ЬсЬ аас ссЕ аад дад аЬс аЬс сЬЬ дда дад дад ада сЬЬ дад асЬ дда 96
Зег Азп Рго Ьуз С1и 11е 11е Ьеи С1у С1и С1и Агд Ьеи С1и ТЬг С1у
20 25 30
аас асЬ дЬЕ дсЕ даЬ аЬс ЬсЬ сЬЬ дда СЬЕ аЬс аас ЕХс СЬЬ Ъас ЬсЬ 144
Азп ТЬг Уа1 А1а Азр 11е Зег Ьеи С1у Ьеи 11е Азп РЬе Ьеи Туг Зег
35 40 45
аас ЕЬс дЕЬ ссЬ дда ддь дда ЬЬс аЬс дЬЕ дда сЕЕ сЕЬ дад сЬЕ аЕс 192
Азп РЬе Уа1 Рго С1у С1у С1у РЬе 11е Уа1 С1у Ьеи Ьеи <31и Ьеи 11е
50 55 60
- 73 019029
Едд Тгр 65 дда СЯу ЕЕс РНе аЕс 11е дда С1у ссЕ Рго 70 ЕсЕ Зег сад С31п Едд Тгр даЕ Азр аЕс 11е 75 ЕЕс РНе сЕЕ Беи дсЕ А1а сад С1п аЕс 11е 80 240
дад сад сЕЕ аЕс ЕсЕ сад ада аЕс дад дад ЕЕс дсЕ ада аас сад дсЕ 288
С1и <31п Беи 11е Зег С1п Агд 11е О1и (31и РНе А1а Агд Азп <31п А1а
85 90 95
аЕс ЕсЕ ада сЕЕ дад дда сЕЕ ЕсЕ ааЕ СЕЕ Еас ааа дЕЕ Еас дЕЕ ада 336
11е Зег Агд Беи СЯи С1у Беи Зег Азп Беи Туг Буз Уа1 Туг Уа1 Агд
100 105 110
дсЕ ЕЕс ЕсЕ дас Едд дад аад даЕ ссЕ асЕ аас ссЕ дсЕ сЕЕ ада дад 384
А1а РНе Зег Азр Тгр С1и Буз Азр Рго ТНг Азп Рго А1а Беи Агд 61и
115 120 125
дад аЕд ада аЕс сад ЕЕс аас даЕ аЕд аас ЕсЕ дсЕ сЕЕ аЕс асЕ дсЕ 432
С1и МеЕ Агд 11е (31п РНе Азп Азр МеЕ Азп Зег А1а Беи 11е ТНг А1а
130 135 140
аЕс ссЕ сЕЕ ЕЕс ада дЬЕ сад аас Еас дад дЕЕ дсЕ сЕЕ СЕЕ ЕсЕ дЕЕ 480
11е Рго Беи РНе Агд Уа1 С1п Азп Туг С1и Уа1 А1а Беи Беи Зег Уа1
145 150 155 160
Еас Туг дЕЕ Уа1 сад С1п дсЕ А1а дсЕ А1а 165 аас Азп сЕЕ Беи саЕ Н13 сЕЕ Беи ЕсЕ Зег 170 аЕс 11е сЕЕ Беи ада Агд даЕ Азр дЕЕ Уа1 175 ЕсЕ Зег 528
дЕЕ ЕЕс дда дад ада Едд дда Еас даЕ асЕ дсЕ асЕ аЕс аас аас ада 576
Уа1 РНе <31у С1и Агд Тгр 61у Туг Азр ТНг А1а ТНг 11е Азп Азп Агд
180 185 190
Еас ЕсЕ даЕ сЕЕ асЕ ЕсЕ СЕЕ аЕс саЕ дЕЕ Еас асЕ аас саЕ ЕдЕ дЕЕ 624
Туг Зег Азр Беи ТНг Зег Беи 11е Н13 Уа1 Туг ТНг Азп Нтз Суз Уа1
195 200 205
даЕ асЕ Еас аас сад дда сЕЕ ада ада сЕЕ дад дда ада ЕЕс сЕЕ ЕсЕ 672
Азр ТНг Туг Азп <31п С1у Беи Агд Агд Беи С1и С1у Агд РНе Беи Зег
210 215 220
дас Бдд аЕс дЕЕ Еас аас ада ЕЕс ада ада сад сЕЕ асЕ аЕс ЕсЕ дЕЕ 720
- 74 019029
Азр 225 Тгр 11е Уа1 Туг Азп Агд 230 Рке Агд Агд <31п 235 Ьеи Ткг 11е Зег Уа1 240
екк дак акс дкк дек ккс ккс сск аас кас дак акс ада аск кас сск 768
Ьеи Азр 11е Уа1 А1а Рке Рке Рго Азп Туг Азр 11е Агд Ткг Туг Рго
245 250 255
акс сад аск дек аск сад екк аск ада дад дкк кас екк дак екк сск 816
11е С1п Ткг А1а Ткг С1п Ьеи Ткг Агд <31и Уа1 Туг Ьеи Азр Ьеи Рго
260 265 270
ккс акс аас дад аас екк кек сск дек дек кек кас сск аск ккс кек 864
Рке 11е Азп С1и Азп Ьеи Зег Рго А1а А1а Зег Туг Рго Ткг Рке Зег
275 280 285
дек дек дад кек дек акс акс ада кек сск сак екк дкк дак ккс екк 912
А1а А1а (31и Зег А1а 11е 11е Агд Зег Рго Н1з Ьеи Уа1 Азр Рке Ьеи
290 295 300
аас кек ккс аск акс кас аск дак кек екк дек ада кас дек кас кдд 960
Азп Зег Рке Ткг 11е Туг Ткг Азр Зег Ьеи А1а Агд Туг А1а Туг Тгр
305 310 315 320
дда дда сак екк дкк аас кек ккс ада аск дда аск аса аск аас екк 1008
61у С1у Н13 Ьеи Уа1 Азп Зег Рке Агд Ткг 61у Ткг Ткг Ткг Азп Ьеи
325 330 335
акс ада кек сск екк кас дда ада дад дда аас аск дад ада сск дкк 1056
11е Агд Зег Рго Ьеи Туг С1у Агд С1и С1у Азп Ткг 61и Агд Рго Уа1
340 345 350
аск акс аск дек кек сск кек дкк сск акс ккс ада аск екк кек кас 1104
Ткг Не Ткг А1а Зег Рго Зег Уа1 Рго 11е Рке Агд Ткг Ьеи Зег Туг
355 360 365
акс аск дда екк дак аас кек аас сск дкк дек дда акс дад дда дкк 1152
11е Ткг <31у Ьеи Азр Азп Зег Азп Рго Уа1 А1а 61у 11е С1и <31у Уа1
370 375 380
дад ккс сад аас аск акс кек ада кек акс кас ада аад кек дда сск 1200
С1и Рке С1п Азп Ткг 11е Зег Агд Зег 11е Туг Агд Ьуз Зег С1у Рго
385 390 395 400
- 75 019029
аРс даР РсР РРс РсР дад сРР ссР ссР сад дар дсР РсР дРР РсР ссР 1248
11е Азр Зег РЬе Зег <31и Ьеи Рго Рго σΐη Азр А1а Зег Уа1 Зег Рго
405 410 415
дсР А1а аРс 11е дда С1у Рас Туг 420 РсР Зег саР Н13 ада Агд сРР Ьеи РдР Суз 425 саР Н13 дсР А1а асР ТЬг РРс РЬе сРР Ьеи 430 дад б1и ада Агд 1296
аРс РсР дда ССР ада аРс дсР дда асР дрр РРс РсР тдд асР саР ада 1344
11е Зег С1у Рго Агд 11е А1а <31у ТЬг Уа1 РЬе Зег Тгр ТЬг Н13 Агд
435 440 445
РсР дсР РсР ссР асР аас дад дрр РсР ссР РсР ада аРс асР сад а£с 1392
Зег А1а Зег Рго ТЬг Азп (31и Уа1 Зег Рго Зег Агд 11е ТЬг <31п Не
450 455 460
ссР Рдд дРР аад дсР саР асР сРР дсР РсР дда дсР РсР дрр аРс аад 1440
Рго Тгр Уа1 Ьуз А1а Н13 ТЬг Ьеи А1а Зег <31у А1а Зег Уа1 11е Ьуз
465 470 475 480
дда ссР дда РРс асР дда дда даР аРс сРР асР ада аас РсР аРд дда 1488
С1у Рго 01у РЬе ТЬг <31у О1у Азр 11е Ьеи ТЬг Агд Азп Зег Мер С1у
485 490 495
дад сРР дда асР сРР ада дрр асР РРс асР дда ада сРР ссР сад РсР 1536
С1и Ьеи <31у ТЬг Ьеи Агд Уа1 ТЬг РЬе ТЬг <31у Агд Ьеи Рго С1п Зег
500 505 510
Рас Рас аРс ада РРс ада Рас дсР РсР дрр дсР аас ада РсР дда асР 1584
Туг Туг 11е Агд РЬе Агд Туг А1а Зег Уа1 А1а Азп Агд Зег С1у ТЬг
515 520 525
РРс ада Рас РсР сад ссР ссР РсР Рас дда аРс РсР РРс ссР аад асР 1632
РЬе Агд Туг Зег С1п Рго Рго Зег Туг б1у 11е Зег РЬе Рго Ьуз ТЬг
530 535 540
аРд даР дсР дда дад ссР СРР асР РсР ада РсР РРс дсР саР аса асР 1680
Мер Азр А1а <31у <31и Рго Ьеи ТЬг Зег Агд Зег РЬе А1а Н1з ТЬг ТЬг
545 550 555 560
СРР РРс асР ссР аРс асР РРс РсР ада дсР сад дад дад РРс даР сРа 1728
Ьеи РЬе ТЬг Рго 11е ТЬг РЬе Зег Агд А1а С1п 61и (31и РЬе Азр Ьеи
- 76 019029
565
Бас аБс сад БсБ дда дББ Бас аБс даБ
Туг 11е С1п Зег <31у Уа1 Туг 11е Азр
580 585
асБ дсБ асБ ББс дад дсБ дад Бас даБ
ТИг А1а ТИг РИе С1и А1а С1и Туг Азр
595 600
<210> 15
<211> 604
<212> Белок
<213> Искусственная
570 575
ада аБс дад ББс аБс ссБ дББ 1776
Агд 11е <31и РИе 11е Рго Уа1
590
ББа дад ада Бда 1815
Ьеи <31и Агд
<220>
<223> Синтетическая конструкция <400> 15
МеБ 1 А1а <31и 11е Азп 5 Азп <31п Азп С1п Суз 10 Уа1 Рго Туг Азп Суз 15 Ьеи
Зег Азп Рго Ьуз С1и 11е 11е Ьеи 61у С1и С1и Агд Ьеи <31и ТИг (31у
20 25 30
Азп ТИг Уа1 А1а Азр 11е Зег Ьеи <31у Ьеи 11е Азп РИе Ьеи Туг Зег
35 40 45
Азп РИе Уа1 Рго С1у С1у <31у РИе 11е Уа1 О1у Ьеи Ьеи С1и Ьеи 11е
50 55 60
Тгр С1у РИе 11е С1у Рго Зег С1п Тгр Азр 11е РИе Ьеи А1а С1п 11е
65 70 75 80
С1и С1п Ьеи 11е Зег С1п Агд 11е С1и С1и РИе А1а Агд Азп <31п А1а
85 90 95
11е Зег Агд Ьеи С1и <31у Ьеи Зег Азп Ьеи Туг Ьуз Уа1 Туг Уа1 Агд
100 105 110
А1а РИе Зег Азр Тгр С1и Ьуз Азр РГО ТИг Азп Рго А1а Ьеи Агд <31и
115 120 125
О1и Меб 130 Агд 11е (31п РНе Азп 135 Азр Меб Азп Зег А1а 140 Ьеи 11е ТНг А1а
11е Рго Ьеи РНе Агд Уа1 С1п Азп Туг С1и Уа1 А1а Ьеи Ьеи Зег Уа1
145 150 155 160
Туг Уа1 <31п А1а А1а Азп Ьеи Н13 Ьеи Зег 11е Ьеи Агд Азр Уа1 Зег
165 170 175
Уа1 РНе <31у С1и Агд Тгр С1у Туг Азр ТНг А1а ТНг 11е Азп Азп Агд
180 185 190
Туг Зег Азр Ьеи ТНг Зег Ьеи 11е Н13 Уа1 Туг ТНг Азп Н13 Суз Уа1
195 200 205
Азр ТНг Туг Азп (31η (31у Ьеи Агд Агд Ьеи С1и С1у Агд РНе Ьеи Зег
210 215 220
Азр Тгр 11е Уа1 Туг Азп Агд РНе Агд Агд <31п Ьеи ТНг 11е Зег Уа1
225 230 235 240
Ьеи Азр 11е Уа1 А1а РНе РНе Рго Азп Туг Азр 11е Агд ТНг Туг Рго
245 250 255
11е С1п ТНг А1а ТНг С1п Ьеи ТНг Агд С1и Уа1 Туг Ьеи Азр Ьеи Рго
260 265 270
РНе 11е Азп С1и Азп Ьеи Зег Рго А1а А1а Зег Туг Рго ТНг РНе Зег
275 280 285
А1а А1а <31и Зег А1а 11е 11е Агд Зег Рго Нхз Ьеи Уа1 Азр РНе Ьеи
290 295 300
Азп Зег РНе ТНг 11е Туг ТНг Азр Зег Ьеи А1а Агд Туг А1а Туг Тгр
305 310 315 320
(31у С1у Н13 Ьеи Уа1 Азп Зег РНе Агд ТНг (31у ТНг ТНг ТНг Азп Ьеи
325 330 335
11е Агд Зег Рго Ьеи Туг (31у Агд С1и (31у Азп ТНг С1и Агд Рго Уа1
340 345 350
- 78 019029
ТЬг Не ТЬг 355 А1а Зег Рго Зег Уа1 360 Рго Не РЬе Агд ТЬг 365 Ьеи Зег Туг
11е ТЬг С1у Ьеи Азр Азп Зег Азп Рго Уа1 А1а С1у Не <31и 61у Уа1
370 375 380
(31и РЬе С1п Азп ТЬг Не Зег Агд Зег Не Туг Агд Ьуз Зег С1у Рго
385 390 395 400
11е Азр Зег РЬе Зег С1и Ьеи Рго Рго С1п Азр А1а Зег Уа1 Зег Рго
405 410 415
А1а Не С1у Туг Зег Н1з Агд Ьеи Суз Н13 А1а ТЬг РЬе Ьеи С1и Агд
420 425 430
Не Зег С1у Рго Агд Не А1а 61у ТЬг Уа1 РЬе Зег Тгр ТЬг Н13 Агд
435 440 445
Зег А1а Зег Рго ТЬг Азп С1и Уа1 Зег Рго Зег Агд Не ТЬг <31п 11е
450 455 460
Рго Тгр Уа1 Ьуз А1а ΗΪ3 ТЬг Ьеи А1а Зег С1у А1а Зег Уа1 11е Ьуз
465 470 475 480
С1у Рго С1у РЬе ТЬг С1у С1у Азр 11е Ьеи ТЬг Агд Азп Зег МеБ С1у
485 490 495
С1и Ьеи С1у ТЬг Ьеи Агд Уа1 ТЬг РЬе ТЬг С1у Агд Ьеи Рго С1п Зег
500 505 510
Туг Туг 11е Агд РЬе Агд Туг А1а Зег Уа1 А1а Азп Агд Зег <31у ТЬг
515 520 525
РЬе Агд Туг Зег С1п Рго Рго Зег Туг <31у Не Зег РЬе Рго Ьуз ТЬг
530 535 540
МеБ Азр А1а С1у <31и Рго Ьеи ТЬг Зег Агд Зег РЬе А1а Н13 ТЬг ТЬг
545 550 555 560
Ьеи РЬе ТЬг Рго Не ТЬг РЬе Зег Агд А1а Θΐη С1и С1и РЬе Азр Ьеи
565 570 575
Туг Не С1п Зег С1у Уа1 Туг Не Азр Агд Не <31и РЬе Не Рго Уа1
580 585590
ТЬг А1а ТЬг РЬе <31и А1а С1и Туг Азр Ьеи <31и Агд
595600 <210> 16 <211>372 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> модифицированный транспортный пептид <220>
<221> СЬЗ <222> (1)..(372) <400> 16
аЬд МеЕ 1 дсЬ А1а ЬсЕ Зег аЬс 11е ЕсЪ Зег 5 ЬсЕ Зег ЬсЬ Зег ди Уа1 дсС А1а асЕ ТЬг 10 ди Уа1 СсЬ Зег ада Агд асЬ ТЬг дсь А1а 15 ссЬ Рго 48
дсЬ сад дсЬ аас аЬд дП дсЬ ссЬ ис ас! дда си аад ЬсЬ аас дсЬ 96
А1а С1п А1а Азп Мей Уа1 А1а Рго РЬе ТЬг С1у Ьеи Ьуз Зег Азп А1а
20 25 30
дсЪ ис ссЕ асЕ асЬ аад аад дсЬ аас даЬ ис ЬсЬ асЬ сП си ЬсЬ 144
А1а РЬе Рго ТЬг ТЬг Ьуз Ьуз А1а Азп Азр РЬе Зег ТЬг Ьеи Рго Зег
35 40 45
аас дда дда ада дЫ сад ЬдЬ аЬд сад ди ьдд СС1 дсЬ Ьас дда аас 192
Азп С1у С1у Агд Уа1 С1п Суз МеЬ С1п Уа1 Тгр Рго А1а Туг С1у Азп
50 55 60
аад аад Пс дад асЬ си ЬсЬ Ьас си ссЬ ССЬ сП ЕсЬ аЬд дсЬ ссЬ 240
Ьуз Ьуз РЬе <31и ТЬг Ьеи Зег Туг Ьеи Рго Рго Ьеи Зег МеЬ А1а Рго
65 70 75 80
асЬ дН аЬд аЬд дсЬ ЕсЬ Ес1 дсЬ асС дсС ди дсЬ ссЬ Нс сад дда 288
ТЬг Уа1 МеЬ МеЕ А1а Зег Зег А1а ТЬг А1а Уа1 А1а Рго РЬе С1п С1у
85 90 95
с(Ц аад ЬсС асС дсЬ ЕсЕ си ссЬ дЬЬ дсЬ ада ада ЬсЬ ьи ада ьи 336
- 80 019029
Ьеи Ьуз Зег ТЬг 100 А1а Зег Ьеи Рго Уа1 105
сЬЬ дда аас дЬЕ ЬсЬ аас дда дда ада
Ьеи С1у Азп Уа1 Зег Азп С1у О1у Агд
115 120
А1а Агд Агд Зег Зег Агд Зег
110
аЬс ада ЬдЬ 372
11е Агд Суз <210> 17 <211> 124 <212> Белок <213> Искусственная <220>
<223> Синтетическая конструкция <400> 17
МеЬ 1 А1а Зег 11е Зег 5 Зег Зег Уа1 А1а ТЬг 10 Уа1 Зег Агд ТЬг А1а 15 Рго
А1а С1п А1а Азп МеЬ Уа1 А1а Рго РЬе ТЬг О1у Ьеи Ьуз Зег Азп А1а
20 25 30
А1а РЬе Рго ТЬг ТЬг Ьуз Ьуз А1а Азп Азр РЬе Зег ТЬг Ьеи Рго Зег
35 40 45
Азп С1у С1у Агд Уа1 С1п Суз МеЬ <31п Уа1 Тгр Рго А1а Туг С1у Азп
50 55 60
Ьуз Ьуз РНе С1и ТЬг Ьеи Зег Туг Ьеи Рго Рго Ьеи Зег МеЕ А1а Рго
65 70 75 80
ТЬг Уа1 МеЬ МеЪ А1а Зег Зег А1а ТЬг А1а Уа1 А1а Рго РЬе С1п С1у
85 90 95
Ьеи Ьуз Зег ТЬг А1а Зег Ьеи Рго Уа1 А1а Агд Агд Зег Зег Агд Зег
100 105 110
Ьеи (31у Азп Уа1 Зег Азп С1у С1у Агд 11е Агд Суз
115 120
<210> 18 <211> 988
- 81 019029 <212> ДНК <213 > Вирус зиЬРеггапеап οίονετ зРипР <400>18
сРадаРааРР дРРаРРаРса аРаааадааР РРРРаРРдРР аррдрдррар РРддРааРРР 60
аРдсРРаРаа дРааРРсРаР даРРааРРдР дааРРааРаа дасРааРдад даРааРааРР 120
дааРРРдаРР аааРРаасРс Рдсдаадсса РаРдРсРРРс асдРдададР сасдРдаРдР 180
сРссдсдаса ддсРддсасд дддсРРадРа РРасссссдР дссдддаРса дадасаРРРд 240
асРаааРдРР дасРРддааР ааРадсссРР ддаРРадаРд асасдрддас дсРсаддаРс 300
РдРдаРдсРа дрдаадсдср РаадсРдаас дааРсРдасд даададсдда сааасдсаса 360
РддасРаРдд сссасРдсРР РаРРааадаа дРдааРдаса дсРдРсРРРд сРРсаадасд 420
аадрааадаа РадРддаааа сдсдРРааРР дРРаРРаРса аРаааадааР РРРРаРРдРР 480
аРРдРдРРаР РРддРааРРР аРдсРРаРаа дРааРРсРаР даРРааРРдР дааРРааРаа 540
дасРааРдад даРааРааРР дааРРРдаРР аааРРаасРс рдсдаадсРа РаРдРсРРРс 600
асдрдададр сасдРдаРдР сРссдсдаса ддсРддсасд дддсРРадРа РРасссссдР 660
дссдддаРса дадасаРРРд асРаааРдРР дасРРддааР ааРадсссРР ддаРРадаРд 720
асасдРддас дсРсаддаРс РдРдаРдсРа дРдаадсдсР РаадсРдаас дааРсРдасд 780
даададсдда сааасдсаса РддасРаРдд сссасРдсРР РаРРааадаа дРдааРдаса 840
дсРдРсРРРд сРРсаадасд аадРааадаа РадРддаааа сдсдРааада аРаадсдРас 900
РсадРасдсР РсдРддсРРР аРаааРадРд сРРсдРсРРа РРсРРсдРРд РаРсаРсаас 960
даадаадРРа адсРРРдРРс РдсдРРРс 988
<210>19 <211>1042 <212> ДНК <213> Вирус зиЬРеггапеап οίονετ зРипР
- 82 019029
<400> 19 кааЬЬаакад ЪааЬкаЬдаЪ ЪааЪЪаЬдад аЬаададккд Ызаккаакдс ккакдаддаа 60
кааадаакда ЬЪааЬаккдк ССааЬкккаЬ Ьссдсдаадс ддЪдЬдЬкак дкСкккдккд 120
дадасаксас дкдасксЪса сдЬдакдксЪ ссдсдасадд скддсасддд дсккадЪаЪЪ 180
асссссдЪдс сдддаксада дасаЬЬЬдас ЬааакаЪкда сЪЪддаакаа Ьадсссккдд 240
аЬЬадакдас асдкддасдс ксаддаксЬд ЪдаСдскадЪ даадсдскка адскдаасда 300
аЬскдасдда ададсддаса ЬасдсасаЬд даЬЪакддсс сасакдкска аадЪдкаксЬ 360
скЬЬасадсЬ аЪаксдаЬдк дасдкаадаЬ дскккасккс дсЬЬсдаадк ааадкаддаа 420
аССдсксдск аадккаСЬск ЪЪЪскдааад аааккааккк аакЪскаакк аааккааакд 480
адкддсскдс адЬааккаак адкааЪЪакд аЪЪааккаЬд адакаададк ЪдЪкаккааЪ 540
дскЬаЪдадд ааЪааадаак даЬкааЪаЬЬ дкккааСЬкк аЬкссдсдаа дсддкдЪдЬЪ 600
акдккЪккдк ЬддадасаЪс асдЬдаскск сасдкдакдС скссдсдаса ддсЪддсасд 660
дддсСЬадЬа кЪасссссдЬ дссдддакса дадасакЬЪд асЪааакакк дасЪкддааЪ 720
аакадсссЪЬ ддакЪадакд асасдкддас дсЬсаддакс кдЪдакдсЬа дкдаадсдсЪ 780
ЪаадсЬдаас даакскдасд даададсдда сакасдсаса Ьддаккакдд сссасакдкс 840
кааадЪдкак скскккасад скакаЬсдаЬ дкдасдЪаад аЬдсЪккаск ксдскЪсдаа 900
дкааадЬадд аааккдсЬсд скаадккаЪЬ скЪЬЬскдаа адааакЬаак ЬкаакксЬаа 960
аСЪаааЪЪаа акдадЬддск акааакадСд ЪсдакдсЬас сксасаксдЪ акксЬЬсккс 1020
дсаксдЪскд СЬскддкЬЬк аа 1042
<210> 20 <211> 28 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
- 83 019029
<223> праймер
<400> 20
РасРРсдаас адааадаасд адаасдад 28
<210> 21
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> праймер
<400> 21
дрссадсдаа аддаасксса адаа 24
<210> 22
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> праймер
<400> 22 21
аассРРдадд дасРЬддааа с
<210> 23
<211> 23
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> праймер
<400> 23
аадаРдаддд РРРсРдаРад сад 23
55

Claims (31)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Химерный ген, включающий следующие функционально связанные последовательности:
    a) область, кодирующую инсектицидный белок Сгу 1С ВасШик Шигтд1еик1к, включающую последовательность ДНК с идентичностью по меньшей мере 98% к ДНК с любой из последовательностей 8Е0 ΙΌ Νο. 1, 3, 4 или 6, или включающую последовательность ДНК, гибридизующуюся в строгих условиях гибридизации с любой из последовательностей 8Е0 ГО Νο. 1, 3, 4 или 6, где указанная область кодирует белок, включающий аминокислотную последовательность от аминокислоты в положении 29 до аминокислоты в положении 627 последовательности 8Е0 ГО Νο. 2, и
    b) промоторную область, способную управлять экспрессией в растительных клетках.
  2. 2. Химерный ген по п.1, где указанный промотор включает последовательность 8Е0 ГО Νο. 18 или 19.
  3. 3. Химерный ген по п.1 или 2, который также включает 3'-область полиаденилирования и терминации транскрипции.
  4. 4. Химерный ген по п.3, где указанная 3'-область полиаденилирования и терминации транскрипции представляет собой область гена НАДФ-зависимой малатдегидрогеназы из Намела Ыбеибк.
  5. 5. Химерный ген по любому из пп.1-4, который дополнительно включает лидерную последовательность специфичного для тапетума гена Е1 из Огуха кайма, расположенную между промотором и кодирующей областью.
  6. 6. Химерный ген по любому из пп.1-5, где указанный белок включает последовательность от аминокислоты в положении 29 до аминокислоты в положении 627 последовательности 8Е0 ГО NО:2, но где по меньшей мере одна аминокислота в следующих положениях заменена по сравнению с 8Е0 ГО Νο. 2, а именно: аминокислота в положении 184 представляет собой валин, аминокислота в положении 295 представляет собой аргинин, аминокислота в положении 454 представляет собой аспарагиновую кислоту или аминокислота в положении 593 представляет собой аргинин.
  7. 7. Применение химерного гена по п.6 для получения растений видов Вгаккюа ο1е^асеае, Вгаккюа иарик, Вгаккюа гара, Вгаккюа дпюеа или Вгаккюа салпайк устойчивых к Р1и1е11а хуШк1е11а.
  8. 8. ДНК, включающая химерный ген по любому из пп.1-5, дополнительно включающая второй химерный ген, причем указанный второй химерный ген включает следующие функционально связанные последовательности:
    a) область, кодирующую инсектицидный белок Сгу1В ВасШик Шипид1еик1к, включающую последовательность ДНК с идентичностью по меньшей мере 98% к ДНК с последовательностью 8Е0 ГО Νο. 8 или 10 или включающую последовательность ДНК, гибридизующуюся в строгих условиях гибридизации с 8Е0 ГО Νο. 8 или 10, где указанная область кодирует белок, включающий аминокислотную последовательность от аминокислоты в положении 31 до аминокислоты в положении 648 последовательности 8ЕО ГО Νο. 11, и
    b) промоторную область, способную управлять экспрессией в растительных клетках.
  9. 9. ДНК, включающая химерный ген по любому из пп.1-5, дополнительно включающая второй химерный ген, причем указанный второй химерный ген включает следующие функционально связанные последовательности:
    a) область, кодирующую инсектицидный белок Сгу1И ВасШик включающую последо- вательность ДНК с идентичностью по меньшей мере 98% к ДНК с последовательностью 8ЕО ГО Νο. 12 или 14 или включающую последовательность ДНК, гибридизующуюся в строгих условиях гибридизации с 8ЕО ГО Νο. 12 или 14, где указанная область кодирует белок, включающий аминокислотную последовательность от аминокислоты в положении 21 до аминокислоты в положении 604 последовательности 8ЕО ГО Νο. 15, и
    b) промоторную область, способную управлять экспрессией в растительных клетках.
  10. 10. ДНК по п.8 или 9, где указанная промоторная область включает последовательность 8ЕО ГО Νο. 18 или 19.
  11. 11. ДНК по п.8 или 9, где указанный второй химерный ген дополнительно включает 3'-область полиаденилирования и терминации транскрипции.
  12. 12. ДНК по п.11, где указанная 3'-область полиаденилирования и терминации транскрипции представляет собой область гена НАДФ-зависимой малатдегидрогеназы из Намела Ыбеибк.
  13. 13. ДНК по любому из пп.8-12, где указанный второй химерный ген дополнительно включает лидерную последовательность специфичного для тапетума гена Е1 из Огуха кайма, расположенную между промотором и кодирующей областью.
  14. 14. ДНК по п.8, дополнительно включающая третий химерный ген, причем указанный третий химерный ген включает следующие функционально связанные последовательности:
    a) область, кодирующую инсектицидный белок Сгу1И ВасШик Шигтдхеибк, включающую ДНК с последовательностью 8ЕО ГО Νο. 12 или 14, и
    b) промоторную область, способную управлять экспрессией в растительных клетках.
    - 85 019029
  15. 15. ДНК по любому из пп.8-14, где указанный белок включает последовательность от аминокислоты в положении 29 до аминокислоты в положении 627 последовательности 8Е0 ΙΌ N0: 2, но где по меньшей мере одна аминокислота в следующих положениях заменена по сравнению с 8Е0 ΙΌ №. 2: аминокислота в положении 184 представляет собой валин, аминокислота в положении 295 представляет собой аргинин, аминокислота в положении 454 представляет собой аспарагиновую кислоту или аминокислота в положении 593 представляет собой аргинин.
  16. 16. ДНК по любому из пп.8-14, где указанный белок включает последовательность от аминокислоты в положении 31 до аминокислоты в положении 648 последовательности 8Е0 ΙΌ N0: 11, но где аминокислота в положении 151 представляет собой тирозин или аминокислота в положении 353 представляет собой аргинин.
  17. 17. Трансгенная растительная клетка, включающая химерный ген по любому из пп.1-5 или ДНК по любому из пп.8-14, стабильно инкорпорированные в ее геном.
  18. 18. Трансгенная растительная клетка, включающая химерный ген по п.6 или ДНК по п. 15, стабильно инкорпорированную в ее геном.
  19. 19. Растение, включающее ген по любому из пп.1-5 или ДНК по любому из пп.8-14, стабильно инкорпорированные в его геном.
  20. 20. Растение по п.19 или растительная клетка по п.17, которые представляют собой растение или растительную клетку из вида Вгаккюа.
  21. 21. Растение по п.20, которое представляет собой растение из вида Вгаккюа о1егасеае, Вгаккюа парик, Вгаккюа гара, Вгаккюа )ипсеа или Вгаккюа саппайг
  22. 22. Растение по п.21, которое представляет собой капусту или цветную капусту.
  23. 23. Применение химерного гена по любому из пп.1-5 для борьбы с насекомыми-вредителями.
  24. 24. Применение химерного гена по любому из пп.1-5 для получения растительных клеток, растений или семян с повышенной устойчивостью к насекомым-вредителям.
  25. 25. Применение химерного гена по любому из пп.1-5 для получения растений видов Вгаккюа о1егасеае, Вгаккюа парик, Вгаккюа гара, Вгаккюа )ипсеа или Вгаккюа саппай, устойчивых к Р1и1е11а ху1ок1е11а.
  26. 26. Способ борьбы с насекомыми-вредителями, включающий посадку на плантации или посев в поле растений, включающих химерный ген по любому из пп.1-5 или ДНК по любому из пп.8-14.
  27. 27. Способ борьбы с насекомыми-вредителями в растениях вида Вгаккюа, включающий обеспечение экспрессии в растениях химерного гена по любому из пп.1-5 или ДНК по любому из пп.8-14.
  28. 28. Способ получения растений или семян, устойчивых к насекомым-вредителям, включающий стадии:
    a) получения растения, трансформированного химерным геном по любому из пп.1-5 или ДНК по любому из пп.8-14, и
    b) селекции потомства указанного растения или его семян, содержащих указанный ген или ДНК.
  29. 29. Микроорганизм, включающий химерный ген по любому из пп.1-5 или ДНК по любому из пп.814.
  30. 30. Микроорганизм по п.28, который представляет собой ЕксйепсЫа, ВасШик или АдгоЬайегшш.
  31. 31. Применение ДНК по любому из пп.8-14 для замедления или предотвращения развития устойчивости к инсектицидному белку, экспрессирующемуся в трансгенных растениях, у насекомых, которые пытаются кормиться такими растениями.
    Евразийская патентная организация, ЕАПВ
    Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
EA200802018A 2006-03-21 2007-03-16 Химерные гены, кодирующие инсектицидные белки bacillus thuringiensis, и их применение EA019029B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US78431006P 2006-03-21 2006-03-21
EP06075679 2006-03-21
PCT/EP2007/002342 WO2007107302A2 (en) 2006-03-21 2007-03-16 Novel genes encoding insecticidal proteins

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200802018A1 EA200802018A1 (ru) 2009-04-28
EA019029B1 true EA019029B1 (ru) 2013-12-30

Family

ID=38222134

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200802018A EA019029B1 (ru) 2006-03-21 2007-03-16 Химерные гены, кодирующие инсектицидные белки bacillus thuringiensis, и их применение

Country Status (9)

Country Link
US (2) US20100235951A1 (ru)
EP (1) EP1999141B1 (ru)
CN (1) CN101405296B (ru)
AR (1) AR059995A1 (ru)
AU (1) AU2007228981B2 (ru)
CA (1) CA2646471C (ru)
EA (1) EA019029B1 (ru)
PL (1) PL1999141T3 (ru)
WO (1) WO2007107302A2 (ru)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2741833C2 (ru) * 2014-12-12 2021-01-29 Зингента Партисипейшнс Аг Композиции и способы контроля вредителей растений
RU2743397C2 (ru) * 2016-06-18 2021-02-18 Бэйджинг Дабейнонг Биотекнолоджи Ко., Лтд. Нуклеиновокислотная последовательность для обнаружения наличия трансгенного трансформанта сои DBN9004 в биологическом образце, набор, содержащий такую последовательность, и способ такого обнаружения

Families Citing this family (152)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PL1999141T3 (pl) 2006-03-21 2011-10-31 Bayer Cropscience Nv Nowe geny kodujące białka owadobójcze
US9994621B2 (en) 2007-06-01 2018-06-12 Bayer Cropscience N.V. Genes encoding insecticidal proteins
EP2204094A1 (en) 2008-12-29 2010-07-07 Bayer CropScience AG Method for improved utilization of the production potential of transgenic plants Introduction
EP2039772A2 (en) 2009-01-06 2009-03-25 Bayer CropScience AG Method for improved utilization of the production potential of transgenic plants introduction
EP2039770A2 (en) 2009-01-06 2009-03-25 Bayer CropScience AG Method for improved utilization of the production potential of transgenic plants
EP2039771A2 (en) 2009-01-06 2009-03-25 Bayer CropScience AG Method for improved utilization of the production potential of transgenic plants
AR075126A1 (es) 2009-01-29 2011-03-09 Bayer Cropscience Ag Metodo para el mejor uso del potencial de produccion de plantas transgenicas
DE102009001469A1 (de) 2009-03-11 2009-09-24 Bayer Cropscience Ag Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen
DE102009001681A1 (de) 2009-03-20 2010-09-23 Bayer Cropscience Ag Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen
DE102009001730A1 (de) 2009-03-23 2010-09-30 Bayer Cropscience Ag Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen
DE102009001732A1 (de) 2009-03-23 2010-09-30 Bayer Cropscience Ag Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen
DE102009001728A1 (de) 2009-03-23 2010-09-30 Bayer Cropscience Ag Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen
EP2232995A1 (de) 2009-03-25 2010-09-29 Bayer CropScience AG Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen
EP2239331A1 (en) 2009-04-07 2010-10-13 Bayer CropScience AG Method for improved utilization of the production potential of transgenic plants
CA2782636A1 (en) * 2009-12-16 2011-06-23 Dow Agrosciences Llc Methods and compositions comprising vip3ab and cry1fa polypeptides for c ontrol of fall armyworm
JP5969920B2 (ja) * 2009-12-16 2016-08-17 ダウ アグロサイエンシィズ エルエルシー 昆虫の抵抗性を管理するためのCry1CAとCry1ABタンパク質との併用
ES2710850T3 (es) 2009-12-16 2019-04-29 Dow Agrosciences Llc Uso de Cry1Da en combinación con Cry1Ca para el control de insectos resistentes
CA2782548A1 (en) * 2009-12-16 2011-06-23 Dow Agrosciences Llc Combined use of cry1ca and cry1fa proteins for insect resistance management
BR122019001711B8 (pt) * 2009-12-16 2022-10-11 Dow Agrosciences Llc Composição e método para o controle de pragas de lepidópteros
CN102811617A (zh) 2010-01-22 2012-12-05 拜耳知识产权有限责任公司 杀螨和/或杀虫活性物质结合物
JP5730992B2 (ja) 2010-06-03 2015-06-10 バイエル・クロップサイエンス・アーゲーBayer Cropscience Ag N−[(ヘタ)アリールエチル)]ピラゾール(チオ)カルボキサミド類及びそれらのヘテロ置換された類似体
CN102918028B (zh) 2010-06-03 2016-04-27 拜尔农科股份公司 N-[(杂)芳基烷基]吡唑(硫代)羧酰胺及其杂取代的类似物
UA110703C2 (uk) 2010-06-03 2016-02-10 Байєр Кропсайнс Аг Фунгіцидні похідні n-[(тризаміщений силіл)метил]-карбоксаміду
US8653114B2 (en) 2010-06-03 2014-02-18 Bayer Intellectual Property Gmbh O-cyclopropylcyclohexyl-carboxanilides and their use as fungicides
AU2011264074B2 (en) 2010-06-09 2015-01-22 Bayer Cropscience Nv Methods and means to modify a plant genome at a nucleotide sequence commonly used in plant genome engineering
CN103119169B (zh) 2010-06-09 2018-11-20 拜尔作物科学公司 植物基因组改造中常用的在核苷酸序列上修饰植物基因组的方法和工具
AR082286A1 (es) 2010-07-20 2012-11-28 Bayer Cropscience Ag Benzocicloalquenos como agentes antifungicos
EP2611813B1 (de) 2010-09-03 2015-01-21 Bayer Intellectual Property GmbH Dithiin-tetra(thio)carboximide zur bekämpfung phytopathogener pilze
JP2012062267A (ja) 2010-09-15 2012-03-29 Bayer Cropscience Ag 殺虫性ピロリンn−オキサイド誘導体
JP2012082186A (ja) 2010-09-15 2012-04-26 Bayer Cropscience Ag 殺虫性アリールピロリジン類
EP2460406A1 (en) 2010-12-01 2012-06-06 Bayer CropScience AG Use of fluopyram for controlling nematodes in nematode resistant crops
WO2012038480A2 (en) 2010-09-22 2012-03-29 Bayer Cropscience Ag Use of biological or chemical control agents for controlling insects and nematodes in resistant crops
EP2624699B1 (en) 2010-10-07 2018-11-21 Bayer CropScience Aktiengesellschaft Fungicide composition comprising a tetrazolyloxime derivative and a thiazolylpiperidine derivative
MX2013004278A (es) 2010-10-21 2013-06-05 Bayer Ip Gmbh N-bencil carboxamidas heterociclicas.
US9545105B2 (en) 2010-10-21 2017-01-17 Bayer Intellectual Property Gmbh 1-(heterocyclic carbonyl) piperidines
JP2013542215A (ja) 2010-11-02 2013-11-21 バイエル・インテレクチユアル・プロパテイー・ゲー・エム・ベー・ハー N−ヘタリールメチルピラゾリルカルボキサミド類
WO2012062749A1 (de) 2010-11-12 2012-05-18 Bayer Cropscience Ag Benzimidazolidinone verwendbar als fungizide
US9206137B2 (en) 2010-11-15 2015-12-08 Bayer Intellectual Property Gmbh N-Aryl pyrazole(thio)carboxamides
CN103443078B (zh) 2010-11-15 2017-03-22 拜耳知识产权有限责任公司 氰基烯胺以及其作为杀真菌剂的用途
US9351489B2 (en) 2010-11-15 2016-05-31 Bayer Intellectual Property Gmbh Cyanoenamines and their use as fungicides
MX2013005407A (es) 2010-11-15 2013-07-03 Bayer Ip Gmbh 5-halopirazolcarboxamidas.
JP2013543858A (ja) 2010-11-15 2013-12-09 バイエル・インテレクチユアル・プロパテイー・ゲー・エム・ベー・ハー 5−ハロゲノピラゾール(チオ)カルボキサミド類
EP2454939A1 (en) 2010-11-18 2012-05-23 Bayer CropScience AG Post-harvest treatment
WO2012072547A1 (de) 2010-11-30 2012-06-07 Bayer Cropscience Ag Pyrimidin- derivate und ihre verwendung als schädlingsbekämpfungsmittel
KR20130123416A (ko) 2010-12-01 2013-11-12 바이엘 인텔렉쳐 프로퍼티 게엠베하 작물에서 선충류를 구제하고 수확량을 증가시키기 위한 플루오피람의 용도
EP2460407A1 (de) 2010-12-01 2012-06-06 Bayer CropScience AG Wirkstoffkombinationen umfassend Pyridylethylbenzamide und weitere Wirkstoffe
EP2474542A1 (en) 2010-12-29 2012-07-11 Bayer CropScience AG Fungicide hydroximoyl-tetrazole derivatives
JP2014502611A (ja) 2010-12-29 2014-02-03 バイエル・インテレクチユアル・プロパテイー・ゲー・エム・ベー・ハー 殺菌剤ヒドロキシモイル−テトラゾール誘導体
WO2012088645A1 (en) 2010-12-31 2012-07-05 Bayer Cropscience Ag Method for improving plant quality
CA2827159A1 (en) 2011-02-15 2012-08-23 Ruth Meissner Synergistic combinations containing a dithiino-tetracarboxamide fungicide and a herbicide, safener or plant growth regulator
WO2012120105A1 (en) 2011-03-10 2012-09-13 Bayer Cropscience Ag Use of lipochito-oligosaccharide compounds for safeguarding seed safety of treated seeds
EP2502495A1 (en) 2011-03-16 2012-09-26 Bayer CropScience AG Use of a dithiino-tetracarboxamide for the protection of harvested products against phytopathogenic fungi
UA110241C2 (en) 2011-03-31 2015-12-10 Bayer Ip Gmbh Herbicides and fungicides active phneylisoxazoline 3-5-carboxamide and 3- phneylisoxazoline -5-thioamides
US20140038823A1 (en) 2011-04-22 2014-02-06 Peter Dahmen Active compound combinations comprising a (thio)carboxamide derivative and a fungidical compound
ES2657825T3 (es) 2011-06-06 2018-03-07 Bayer Cropscience Nv Métodos y medios para modificar el genoma de una planta en un sitio preseleccionado
UA115128C2 (uk) 2011-07-27 2017-09-25 Байєр Інтеллектуал Проперті Гмбх Протравлювання насіння для боротьби з фітопатогенними грибами
CN103717076B (zh) 2011-08-10 2016-04-13 拜耳知识产权股份有限公司 含有特定特特拉姆酸衍生物的活性化合物组合物
BR112014002988A2 (pt) 2011-08-12 2017-03-01 Bayer Cropscience Nv expressão específica de célula de proteção de transgenes em algodão
MX348003B (es) 2011-08-22 2017-03-08 Bayer Cropscience Nv Metodos y medios para modificar un genoma vegetal.
US20140206726A1 (en) 2011-08-22 2014-07-24 Juergen Benting Fungicide hydroximoyl-tetrazole derivatives
EP2561759A1 (en) 2011-08-26 2013-02-27 Bayer Cropscience AG Fluoroalkyl-substituted 2-amidobenzimidazoles and their effect on plant growth
JP5959646B2 (ja) 2011-09-15 2016-08-02 バイエル・インテレクチュアル・プロパティ・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツングBayer Intellectual Property GmbH 殺菌剤としてのピペリジンピラゾール類
MX362112B (es) 2011-09-16 2019-01-07 Bayer Ip Gmbh Uso de fenilpirazolin-3-carboxilatos para mejorar el rendimiento de las plantas.
BR112014006208B1 (pt) 2011-09-16 2018-10-23 Bayer Intellectual Property Gmbh método de indução de respostas reguladoras do crescimento nas plantas aumentando o rendimento de plantas úteis ou plantas de cultura e composição de aumento do rendimento da planta compreendendo isoxadifen-etilo ou isoxadifeno e combinação de fungicidas
JP6138797B2 (ja) 2011-09-16 2017-05-31 バイエル・インテレクチュアル・プロパティ・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツングBayer Intellectual Property GmbH 植物収量を向上させるためのアシルスルホンアミド類の使用
JP6255344B2 (ja) 2011-10-04 2017-12-27 バイエル・インテレクチュアル・プロパティ・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツングBayer Intellectual Property GmbH サッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子を阻害することによって真菌類及び卵菌類を防除するためのRNAi
US9617286B2 (en) 2011-11-21 2017-04-11 Bayer Intellectual Property Gmbh Fungicide N-[(trisubstitutedsilyl)methyl]-carboxamide derivatives
EP2782447A1 (de) 2011-11-25 2014-10-01 Bayer Intellectual Property GmbH 2-iod-imidazol-derivate
CN104066725A (zh) 2011-11-25 2014-09-24 拜耳知识产权有限责任公司 新颖的杂环烷醇衍生物
JP2015504442A (ja) 2011-11-30 2015-02-12 バイエル・インテレクチユアル・プロパテイー・ゲー・エム・ベー・ハー 殺菌性n−ビシクロアルキルおよびn−トリシクロアルキル(チオ)カルボキサミド誘導体
EP2601839A1 (en) 2011-12-08 2013-06-12 Bayer CropScience AG Synergisitic fungicidal combinations containing phosphorous acid derivative and zoxamide
EP2606732A1 (en) 2011-12-19 2013-06-26 Bayer CropScience AG Use of an anthranilic diamide derivatives with heteroaromatic and heterocyclic substituents in combination with a biological control agent
US9414595B2 (en) 2011-12-19 2016-08-16 Bayer Cropscience Ag Use of anthranilic acid diamide derivatives for pest control in transgenic crops
TWI558701B (zh) 2011-12-29 2016-11-21 拜耳知識產權公司 殺真菌之3-[(1,3-噻唑-4-基甲氧基亞胺)(苯基)甲基]-2-經取代之-1,2,4-二唑-5(2h)-酮衍生物
TWI557120B (zh) 2011-12-29 2016-11-11 拜耳知識產權公司 殺真菌之3-[(吡啶-2-基甲氧基亞胺)(苯基)甲基]-2-經取代之-1,2,4-二唑-5(2h)-酮衍生物
PE20190346A1 (es) 2012-02-27 2019-03-07 Bayer Ip Gmbh Combinaciones de compuestos activos
US11692016B2 (en) 2012-03-09 2023-07-04 Vestaron Corporation High gene expression yeast strain
WO2013134734A2 (en) 2012-03-09 2013-09-12 Vestaron Corporation Toxic peptide production, peptide expression in plants and combinations of cysteine rich peptides
JP2015515454A (ja) 2012-03-14 2015-05-28 バイエル・インテレクチュアル・プロパティ・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツングBayer Intellectual Property GmbH 殺有害生物性アリールピロリジン類
WO2013139949A1 (en) 2012-03-23 2013-09-26 Bayer Intellectual Property Gmbh Compositions comprising a strigolactame compound for enhanced plant growth and yield
CN104245687B (zh) 2012-04-12 2016-12-14 拜尔农科股份公司 作为杀真菌剂的n-酰基-2-(环)烷基吡咯烷和哌啶
EP2838363A1 (en) 2012-04-20 2015-02-25 Bayer Cropscience AG N-cycloalkyl-n-[(trisubstitutedsilylphenyl)methylene]-(thio)carboxamide derivatives
WO2013156559A1 (en) 2012-04-20 2013-10-24 Bayer Cropscience Ag N-cycloalkyl-n-[(heterocyclylphenyl)methylene]-(thio)carboxamide derivatives
CN104245940A (zh) 2012-04-23 2014-12-24 拜尔作物科学公司 植物中的靶向基因组工程
CN104768934B (zh) 2012-05-09 2017-11-28 拜耳农作物科学股份公司 吡唑茚满基甲酰胺
EP2662362A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG Pyrazole indanyl carboxamides
MX2014013489A (es) 2012-05-09 2015-02-12 Bayer Cropscience Ag 5-halogenopirazolindanil carboxamidas.
EP2662363A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG 5-Halogenopyrazole biphenylcarboxamides
EP2662361A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG Pyrazol indanyl carboxamides
EP2662370A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG 5-Halogenopyrazole benzofuranyl carboxamides
EP2662360A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG 5-Halogenopyrazole indanyl carboxamides
EP2662364A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG Pyrazole tetrahydronaphthyl carboxamides
AR091104A1 (es) 2012-05-22 2015-01-14 Bayer Cropscience Ag Combinaciones de compuestos activos que comprenden un derivado lipo-quitooligosacarido y un compuesto nematicida, insecticida o fungicida
MX354745B (es) 2012-09-25 2018-03-16 Bayer Cropscience Ag 3-fenilisoxazolin-5-carboxamidas 5-oxi-sustituidas y 3-fenilisoxazolin-5-tioamidas 5-oxi-sustituidas herbicidas y fungicidas.
RU2015116907A (ru) * 2012-10-05 2016-11-27 ДАУ АГРОСАЙЕНСИЗ ЭлЭлСи ПРИМЕНЕНИЕ Cry1Ea В КОМБИНАЦИЯХ ДЛЯ БОРЬБЫ С РЕЗИСТЕНТНОЙ СОВКОЙ ТРАВЯНОЙ
US20150259294A1 (en) 2012-10-19 2015-09-17 Bayer Cropscience Ag Method of plant growth promotion using carboxamide derivatives
JP6153619B2 (ja) 2012-10-19 2017-06-28 バイエル・クロップサイエンス・アクチェンゲゼルシャフト カルボキサミド誘導体を含む活性化合物の組み合わせ
CN104869829B (zh) 2012-10-19 2017-11-17 拜尔农科股份公司 包含羧酰胺衍生物和生物控制剂的活性化合物复配物
AU2013333846B2 (en) 2012-10-19 2017-04-20 Bayer Cropscience Ag Method for enhancing tolerance to abiotic stress in plants using carboxamide or thiocarboxamide derivatives
EP2908641B1 (en) 2012-10-19 2018-01-10 Bayer Cropscience AG Method for treating plants against fungi resistant to fungicides using carboxamide or thiocarboxamide derivatives
EP2735231A1 (en) 2012-11-23 2014-05-28 Bayer CropScience AG Active compound combinations
WO2014083088A2 (en) 2012-11-30 2014-06-05 Bayer Cropscience Ag Binary fungicidal mixtures
US9510596B2 (en) 2012-11-30 2016-12-06 Bayer Cropscience Ag Binary pesticidal and fungicidal mixtures
EP2925137A1 (en) 2012-11-30 2015-10-07 Bayer CropScience AG Binary fungicidal or pesticidal mixture
BR112015012055B1 (pt) 2012-11-30 2021-01-12 Bayer Cropscience Ag composição fungicida ternária, seu processo de preparação, método para controlar um ou mais microrganismos nocivos, semente resistente a microrganismos nocivos e seu método de tratamento
EA030236B1 (ru) 2012-11-30 2018-07-31 Байер Кропсайенс Акциенгезельшафт Тройные фунгицидные и пестицидные смеси
AR093909A1 (es) 2012-12-12 2015-06-24 Bayer Cropscience Ag Uso de ingredientes activos para controlar nematodos en cultivos resistentes a nematodos
AR093996A1 (es) 2012-12-18 2015-07-01 Bayer Cropscience Ag Combinaciones bactericidas y fungicidas binarias
BR112015014307A2 (pt) 2012-12-19 2017-07-11 Bayer Cropscience Ag difluorometil-nicotínico- tetrahidronaftil carboxamidas
WO2014161821A1 (en) 2013-04-02 2014-10-09 Bayer Cropscience Nv Targeted genome engineering in eukaryotes
JP6397482B2 (ja) 2013-04-12 2018-09-26 バイエル・クロップサイエンス・アクチェンゲゼルシャフト 新規トリアゾール誘導体
US9550752B2 (en) 2013-04-12 2017-01-24 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft Triazolinthione derivatives
JP2016519687A (ja) 2013-04-19 2016-07-07 バイエル・クロップサイエンス・アクチェンゲゼルシャフト バイナリー殺虫または農薬混合物
CN105555135B (zh) 2013-04-19 2018-06-15 拜耳作物科学股份公司 涉及邻苯二甲酰胺衍生物应用的用于改善对转基因植物生产潜能的利用的方法
TW201507722A (zh) 2013-04-30 2015-03-01 Bayer Cropscience Ag 做為殺線蟲劑及殺體內寄生蟲劑的n-(2-鹵素-2-苯乙基)-羧醯胺類
WO2014177514A1 (en) 2013-04-30 2014-11-06 Bayer Cropscience Ag Nematicidal n-substituted phenethylcarboxamides
US9770022B2 (en) 2013-06-26 2017-09-26 Bayer Cropscience Ag N-cycloalkyl-N-[(bicyclylphenyl)methylene]-(thio)carboxamide derivatives
EP3049517B1 (en) 2013-09-24 2018-04-11 Bayer CropScience NV Hetero-transglycosylase and uses thereof
TW201607929A (zh) 2013-12-05 2016-03-01 拜耳作物科學公司 N-環烷基-n-{[2-(1-經取代環烷基)苯基]亞甲基}-(硫代)甲醯胺衍生物
UA120701C2 (uk) 2013-12-05 2020-01-27 Байєр Кропсайєнс Акцієнгезелльшафт N-циклоалкіл-n-{[2-(1-заміщений циклоалкіл)феніл]метилен}-(тіо)карбоксамідні похідні
CN103773775B (zh) * 2014-01-26 2015-11-18 江苏省农业科学院 一种人源抗虫基因及其编码的抗Cry1B毒素独特型单链抗体与应用
TW201542093A (zh) 2014-03-21 2015-11-16 艾格里遺傳學股份有限公司 用於控制玉米穗蟲之Cry1D
RU2737538C2 (ru) 2014-10-16 2020-12-01 Пайонир Хай-Бред Интернэшнл, Инк. Инсектицидные полипептиды, обладающие улучшенным спектром активности, и их применения
CN107531676A (zh) 2015-04-13 2018-01-02 拜耳作物科学股份公司 N‑环烷基‑n‑(双杂环基亚乙基)‑(硫代)羧酰胺衍生物
MX2018007534A (es) 2015-12-22 2018-09-07 Agbiome Inc Genes pesticidas y metodos de uso.
BR112018070695A2 (pt) 2016-04-06 2019-02-12 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft combinação de vírus da poliedrose nuclear e diamidas
US11781151B2 (en) * 2016-04-14 2023-10-10 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Insecticidal CRY1B variants having improved activity spectrum and uses thereof
WO2018019676A1 (en) 2016-07-29 2018-02-01 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft Active compound combinations and methods to protect the propagation material of plants
US20190281828A1 (en) 2016-09-22 2019-09-19 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft Novel triazole derivatives
BR112019005668A2 (pt) 2016-09-22 2019-06-04 Bayer Ag novos derivados de triazol
US20190225974A1 (en) 2016-09-23 2019-07-25 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Targeted genome optimization in plants
US11447531B2 (en) 2016-10-21 2022-09-20 Vestaron Corporation Cleavable peptides and insecticidal and nematicidal proteins comprising same
CN106928329B (zh) * 2017-03-06 2020-09-22 中国农业科学院植物保护研究所 一种新的杀虫蛋白及其核苷酸序列
BR112019024827A2 (pt) * 2017-05-26 2020-06-16 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Construto de dna, planta transgênica ou progênie da mesma, composição e método para controlar uma população de pragas de insetos
AU2018285213B2 (en) 2017-06-13 2022-05-19 Bayer Aktiengesellschaft Herbicidally active 3-phenylisoxazoline-5-carboxamides of tetrahydro and dihydrofuran carboxamides
US20220306591A1 (en) 2018-01-25 2022-09-29 Bayer Aktiengesellschaft Herbicidally active 3-phenylisoxazoline-5-carboxamides of cyclopentenylcarboxylic acid derivatives
BR102018009263A8 (pt) * 2018-05-07 2023-01-31 Embrapa Pesquisa Agropecuaria Molécula de ácido nucleico cry1da códon-otimizada, construção de ácido nucleico, vetor, célula hospedeira, célula vegetal, planta transgênica, método para transformar uma célula, método para produzir uma planta transgênica, método de controle de pragas invertebradas de plantas de cultivo e usos da molécula de ácido nucleico
CN108359673A (zh) * 2018-05-08 2018-08-03 江苏省农业科学院 一种高效杀食用菌眼蕈蚊的Bt cry11基因、编码蛋白及其应用
CN112513033A (zh) 2018-06-04 2021-03-16 拜耳公司 除草活性的双环苯甲酰基吡唑
EA202191910A1 (ru) 2019-01-14 2021-11-16 Байер Акциенгезельшафт Гербицидные замещенные n-тетразолил-арилкарбоксамиды
BR112021012852A2 (pt) 2019-02-20 2021-09-21 Bayer Aktiengesellschaft 4-(4-trifluormetil-6-ciclopropil pirazolil) pirimidinas ativos de modo herbicida
DK3937637T3 (da) 2019-03-12 2023-07-24 Bayer Ag Herbicidt virksomme 3-phenylisoxazolin-5-carboxamider af s-holdige cyclopentenylcarbonsyreestere
BR102019023319A2 (pt) * 2019-11-06 2021-05-18 Embrapa-Empresa Brasileira De Pesquisa Agropecuaria molécula de ácido nucléico do evento transgênico de milho me240913 expressando a proteína cry1da, célula, planta e semente transgênica, usos das mesmas, produto de planta, método, kit e amplicon para detecção do evento, e métodos para produzir uma planta transgênica e de controle de insetos-pragas lepidópteros
WO2021204669A1 (de) 2020-04-07 2021-10-14 Bayer Aktiengesellschaft Substituierte isophtalsäurediamide
CA3179394A1 (en) 2020-04-07 2021-10-14 Bayer Aktiengesellschaft Substituted isophthalic acid diamides
ES2973424T3 (es) 2020-04-07 2024-06-20 Bayer Ag Diamidas de ácido isoftálico sustituidas
US20230180757A1 (en) 2020-04-07 2023-06-15 Bayer Aktiengesellschaft Substituted isophthalic acid diamides and their use as herbicides
CN112011565B (zh) * 2020-05-20 2023-01-24 科稷达隆(北京)生物技术有限公司 一种棉花转化事件kjc003及其应用
WO2022125639A1 (en) * 2020-12-08 2022-06-16 Monsanto Technology Llc Modified plant-associated bacteria and methods of their use
EP4026833A1 (de) 2021-01-12 2022-07-13 Bayer Aktiengesellschaft Herbizid wirksame 2-(het)arylmethylpyrimidine
AR126252A1 (es) 2021-07-08 2023-10-04 Bayer Ag Amidas de ácido benzoico sustituidas
CN116063431B (zh) * 2022-09-19 2023-11-10 隆平生物技术(海南)有限公司 一种植物抗虫蛋白质及其应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1099760A1 (en) * 1999-11-09 2001-05-16 Centrum Voor Plantenveredelings- En Reproduktieonderzoek (Cpro) Bacillus thuringiensis Cry1Ia-Cry1Ba hybrid toxins
WO2002057664A2 (en) * 2001-01-09 2002-07-25 Bayer Bioscience N.V. Bacillus thuringiensis insecticidal proteins
US20030226171A1 (en) * 2002-05-03 2003-12-04 Stefan Jansens Insect resistant plants and methods for making same

Family Cites Families (38)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4407956A (en) * 1981-03-13 1983-10-04 The Regents Of The University Of California Cloned cauliflower mosaic virus DNA as a plant vehicle
CA1192510A (en) 1981-05-27 1985-08-27 Lawrence E. Pelcher Rna plant virus vector or portion thereof, a method of construction thereof, and a method of producing a gene derived product therefrom
NL8200523A (nl) * 1982-02-11 1983-09-01 Univ Leiden Werkwijze voor het in vitro transformeren van planteprotoplasten met plasmide-dna.
US4536475A (en) * 1982-10-05 1985-08-20 Phytogen Plant vector
EP0320500B1 (en) 1983-01-13 2004-11-17 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Non-oncogenic ti plasmid vector system and recombinant DNA molecules for the introduction of expressible genes into plant cell genomes
EP0131623B2 (en) 1983-01-17 1999-07-28 Monsanto Company Chimeric genes suitable for expression in plant cells
WO1985001856A1 (en) 1983-11-03 1985-05-09 Johannes Martenis Jacob De Wet Method for the transfer of exogenous genes in plants using pollen as a vector
BR8600161A (pt) 1985-01-18 1986-09-23 Plant Genetic Systems Nv Gene quimerico,vetores de plasmidio hibrido,intermediario,processo para controlar insetos em agricultura ou horticultura,composicao inseticida,processo para transformar celulas de plantas para expressar uma toxina de polipeptideo produzida por bacillus thuringiensis,planta,semente de planta,cultura de celulas e plasmidio
US5254799A (en) * 1985-01-18 1993-10-19 Plant Genetic Systems N.V. Transformation vectors allowing expression of Bacillus thuringiensis endotoxins in plants
US4615807A (en) 1985-07-23 1986-10-07 United States Environmental Resources, Corp. Method for wastewater treatment
GB2191502A (en) 1985-07-26 1987-12-16 Advanced Extraction Technol Processing inert-rich natural gas streams
ES2018274T5 (es) 1986-03-11 1996-12-16 Plant Genetic Systems Nv Celulas vegetales resistentes a los inhibidores de glutamina sintetasa, preparadas por ingenieria genetica.
EP0265556A1 (en) 1986-10-31 1988-05-04 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Stable binary agrobacterium vectors and their use
IL84459A (en) 1986-12-05 1993-07-08 Agracetus Apparatus and method for the injection of carrier particles carrying genetic material into living cells
JP2829128B2 (ja) 1989-01-31 1998-11-25 ストレイジ テクノロジー コーポレイション 読取り書込みヘッドバッファ
US6855873B1 (en) * 1989-05-31 2005-02-15 Bayer Bioscience, N.V. Recombinant plant expressing non-competitively binding Bt insecticidal cryatal proteins
EP0400246A1 (en) 1989-05-31 1990-12-05 Plant Genetic Systems, N.V. Prevention of Bt resistance development
AU8914291A (en) 1990-11-23 1992-06-25 Plant Genetic Systems N.V. Process for transforming monocotyledonous plants
FR2673643B1 (fr) * 1991-03-05 1993-05-21 Rhone Poulenc Agrochimie Peptide de transit pour l'insertion d'un gene etranger dans un gene vegetal et plantes transformees en utilisant ce peptide.
US5273746A (en) * 1992-01-29 1993-12-28 Mycogen Corporation Bacillus thuringiensis isolates active against phthiraptera pests
GB9318207D0 (en) * 1993-09-02 1993-10-20 Sandoz Ltd Improvements in or relating to organic compounds
FR2712302B1 (fr) * 1993-11-10 1996-01-05 Rhone Poulenc Agrochimie Eléments promoteurs de gènes chimères de tubuline alpha.
ATE266734T1 (de) 1994-08-30 2004-05-15 Commw Scient Ind Res Org Pflanzentraskriptionsregulator von circovirus
NZ333471A (en) 1996-06-20 1999-07-29 Scripps Research Inst Cassava vein mosaic virus promoters and uses thereof
US6110668A (en) 1996-10-07 2000-08-29 Max-Planck-Gesellschaft Zur Forderung Der Wissenschaften E.V. Gene synthesis method
US5942664A (en) * 1996-11-27 1999-08-24 Ecogen, Inc. Bacillus thuringiensis Cry1C compositions toxic to lepidopteran insects and methods for making Cry1C mutants
CA2252612C (en) * 1997-02-20 2010-01-05 Plant Genetic Systems, N.V. Improved transformation method for plants
WO1998044137A2 (en) * 1997-04-03 1998-10-08 Novartis Ag Plant pest control
US6489542B1 (en) 1998-11-04 2002-12-03 Monsanto Technology Llc Methods for transforming plants to express Cry2Ab δ-endotoxins targeted to the plastids
WO2000042207A2 (en) 1999-01-14 2000-07-20 Monsanto Technology Llc Soybean transformation method
CN1234869C (zh) 1999-05-19 2006-01-04 拜尔生物科学公司 农杆菌介导的棉花转化的改进方法
FR2795739B1 (fr) 1999-07-01 2003-08-15 Agronomique Inst Nat Rech Gene synthetique cryic et plantes transgeniques exprimant ledit gene
CA2395897C (en) * 1999-12-28 2011-11-15 Bayer Cropscience N.V. Insecticidal proteins from bacillus thuringiensis
ES2397549T3 (es) * 2001-01-09 2013-03-07 Bayer Cropscience Nv Proteínas insecticidas de Bacillus thuringiensis
US7411112B2 (en) * 2003-10-09 2008-08-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Maize promoter named CRWAQ81
CN100582223C (zh) 2005-03-31 2010-01-20 浙江大学 转基因水稻的培育方法
WO2007062064A2 (en) * 2005-11-23 2007-05-31 Regents Of The University Of California, San Diego Methods and compositions for controlling parasitic infections with bt crystal proteins
PL1999141T3 (pl) 2006-03-21 2011-10-31 Bayer Cropscience Nv Nowe geny kodujące białka owadobójcze

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1099760A1 (en) * 1999-11-09 2001-05-16 Centrum Voor Plantenveredelings- En Reproduktieonderzoek (Cpro) Bacillus thuringiensis Cry1Ia-Cry1Ba hybrid toxins
WO2002057664A2 (en) * 2001-01-09 2002-07-25 Bayer Bioscience N.V. Bacillus thuringiensis insecticidal proteins
US20030226171A1 (en) * 2002-05-03 2003-12-04 Stefan Jansens Insect resistant plants and methods for making same

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CAO J. ET AL.: "Broccoli plants with pyramided Cry1Ac and Cry1C Bt genes control diamondback moths resistant to Cry1A and Cry1C proteins" *
FUNCTIONAL PLANT BIOLOGY, vol. 30, no. 4, 2003, pages 443-452, XP009086620 ISSN: 1445-4408 the whole document *
SCHUNMANN PETRA H. D. ET AL.: "A suite of novel promoters and terminators for plant biotechnology." *
TANG WEI ET AL.: "Development of Insect-resistant transgenic indica rice with a synthetic Cry1C* gene" MOLECULAR BREEDING, vol. 18, no. 1, August 2006 (2006-08), pages 1-10, XP002442156 ISSN: 1380-3743 the whole document *
THEORETICAL AND APPLIED GENETICS, vol. 105, no. 2-3, August 2002 (2002-08), pages 258-264, XP002442157 ISSN: 0040-5752 the whole document *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2741833C2 (ru) * 2014-12-12 2021-01-29 Зингента Партисипейшнс Аг Композиции и способы контроля вредителей растений
RU2743397C2 (ru) * 2016-06-18 2021-02-18 Бэйджинг Дабейнонг Биотекнолоджи Ко., Лтд. Нуклеиновокислотная последовательность для обнаружения наличия трансгенного трансформанта сои DBN9004 в биологическом образце, набор, содержащий такую последовательность, и способ такого обнаружения

Also Published As

Publication number Publication date
WO2007107302A3 (en) 2007-11-15
CA2646471A1 (en) 2007-09-27
CA2646471C (en) 2016-05-31
AU2007228981B2 (en) 2012-10-04
US11060103B2 (en) 2021-07-13
CN101405296B (zh) 2014-04-30
US20100235951A1 (en) 2010-09-16
EA200802018A1 (ru) 2009-04-28
AU2007228981A1 (en) 2007-09-27
EP1999141B1 (en) 2011-06-01
US20170107534A1 (en) 2017-04-20
PL1999141T3 (pl) 2011-10-31
EP1999141A2 (en) 2008-12-10
AR059995A1 (es) 2008-05-14
CN101405296A (zh) 2009-04-08
WO2007107302A2 (en) 2007-09-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA019029B1 (ru) Химерные гены, кодирующие инсектицидные белки bacillus thuringiensis, и их применение
US20210403939A1 (en) Copi coatomer gamma subunit nucleic acid molecules that confer resistance to coleopteran and hemipteran pests
US20200224215A1 (en) Copi coatomer delta subunit nucleic acid molecules that confer resistance to coleopteran and hemipteran pests
US20200224214A1 (en) Copi coatomer alpha subunit nucleic acid molecules that confer resistance to coleopteran and hemipteran pests
US20180251779A1 (en) Copi coatomer beta subunit nucleic acid molecules that confer resistance to coleopteran and hemipteran pests
WO2020207125A1 (zh) 用于检测玉米植物dbn9501的核酸序列及其检测方法
EA017638B1 (ru) Модифицированный полипептид с дикамба-монооксигеназной активностью, кодирующая его молекула нуклеиновой кислоты и способы их применения
JPH03247220A (ja) 植物の殺虫性トキシン
EA020327B1 (ru) Гены токсинов и способы их применения
US20150322455A1 (en) Sec23 nucleic acid molecules that confer resistance to coleopteran and hemipteran pests
RU2685927C2 (ru) Cry1d для борьбы с хлопковой совкой
US20160355841A1 (en) Rna polymerase ii33 nucleic acid molecules to control insect pests
CN103145814B (zh) 杀虫蛋白质、其编码基因及用途
CN104920425A (zh) 杀虫蛋白的用途
CN103739683A (zh) 杀虫蛋白质、其编码基因及用途
CN110035662A (zh) 二元杀虫cry毒素
US10344298B2 (en) WUPA nucleic acid molecules that confer resistance to coleopteran and hemipteran pests
US20180223308A1 (en) Rab5 nucleic acid molecules that confer resistance to coleopteran and hemipteran pests
US20170218391A1 (en) Gawky (gw) nucleic acid molecules to control insect pests
CN102993281B (zh) 杀虫蛋白质、其编码基因及用途
CN102993280B (zh) 杀虫蛋白质、其编码基因及用途
JP4228072B2 (ja) アビジンをコードする人工合成遺伝子
US20180135072A1 (en) Thread nucleic acid molecules that confer resistance to hemipteran pests
US11674152B2 (en) Anti-armyworm use of CRY1AB/CRY1ACZM gene
US20160186203A1 (en) Gho/sec24b2 and sec24b1 nucleic acid molecules to control coleopteran and hemipteran pests

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KG MD TJ TM

PC4A Registration of transfer of a eurasian patent by assignment
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): KZ