EA016457B1 - Аналог тиофена для лечения вирусной инфекции гепатита с - Google Patents

Аналог тиофена для лечения вирусной инфекции гепатита с Download PDF

Info

Publication number
EA016457B1
EA016457B1 EA200970478A EA200970478A EA016457B1 EA 016457 B1 EA016457 B1 EA 016457B1 EA 200970478 A EA200970478 A EA 200970478A EA 200970478 A EA200970478 A EA 200970478A EA 016457 B1 EA016457 B1 EA 016457B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
virus
compound
hepatitis
ribavirin
pharmaceutical combination
Prior art date
Application number
EA200970478A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200970478A1 (ru
Inventor
Лаваль Чань Чунь Кун
Санджой Кумар Дас
Карл Пуассон
Константин Г. Яннопулос
Ги Фалардо
Луи Вайанкур
Реал Дени
Original Assignee
Вирокем Фарма Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Вирокем Фарма Инк. filed Critical Вирокем Фарма Инк.
Publication of EA200970478A1 publication Critical patent/EA200970478A1/ru
Publication of EA016457B1 publication Critical patent/EA016457B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F7/00—Compounds containing elements of Groups 4 or 14 of the Periodic Table
    • C07F7/02—Silicon compounds
    • C07F7/08—Compounds having one or more C—Si linkages
    • C07F7/0803—Compounds with Si-C or Si-Si linkages
    • C07F7/081—Compounds with Si-C or Si-Si linkages comprising at least one atom selected from the elements N, O, halogen, S, Se or Te
    • C07F7/0812—Compounds with Si-C or Si-Si linkages comprising at least one atom selected from the elements N, O, halogen, S, Se or Te comprising a heterocyclic ring
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/38—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom
    • A61K31/381—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom having five-membered rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/005—Enzyme inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/21—Interferons [IFN]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
    • C07D333/26—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D333/38—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
    • C07D333/26—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D333/38—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D333/40—Thiophene-2-carboxylic acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Compounds Containing Sulfur Atoms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Изобретение относится к соединениюи его фармацевтически приемлемым солям, и их применению для лечения вирусной инфекции гепатита C. Также изобретение относится к фармацевтическим композициям на основе указанного соединения, а также его фармацевтическим комбинациям с дополнительными агентами, в частности с рибавирином и интерфероном-α.

Description

Изобретение относится к соединению
016457 Β1
и его фармацевтически приемлемым солям, и их применению для лечения вирусной инфекции гепатита С. Также изобретение относится к фармацевтическим композициям на основе указанного соединения, а также его фармацевтическим комбинациям с дополнительными агентами, в частности с рибавирином и интерфероном-а.
Изобретение относится к новому соединению и содержащим его фармацевтическим композициям для лечения вирусной инфекции гепатита С.
Гепатит представляет собой заболевание, имеющее распространение по всему миру. Он, как правило, имеет вирусную природу, хотя известны другие факторы. Вирусный гепатит представляет собой наиболее распространенную форму гепатита. Приблизительно 750000 американцев заражаются гепатитом каждый год и из них более чем 150000 заражаются вирусом гепатита С (НСУ).
Вирус НСУ представляет собой вирус, содержащий РНК с цепью позитивной полярности, который принадлежит к семейству флавивирусов (НауЬзпбае) и имеет самую тесную взаимосвязь с чумными вирусами, которые включают вирус холеры свиней и вирус вирусной диареи крупного рогатого скота (ВУЭУ). Вирус НСУ, как полагают, реплицируется через продуцирование матрицы комплементарной РНК с цепью негативной полярности. Вследствие отсутствия эффективной системы репликации культуры для вируса частицы вируса НСУ были выделены из смешанной плазмы крови человека и, как показано посредством электронного микроскопа, имеют диаметр приблизительно 50-60 нм. Геном вируса НСУ представляет собой одноцепочечную РНК позитивной полярности, состоящей из приблизительно 9600 комплементарных пар оснований нуклеиновых кислот (Ьр), кодирующую полипротеин, состоящий из 3009-3030 аминокислот, который гидролизуется котрансляционно и посттрансляционно на зрелые вирусные белки (соге-белок, Е1, Е2, р7, N82, N83, Ν84Α, Ν84Β, Ν85Α, Ν85Β). Полагают, что структурные гликопротеины Е1 и Е2 являются внедренными в вирусную липидную оболочку и образуют стабильные гетеродимеры. Также полагают, что структурный соге-белок взаимодействует с вирусным геномом РНК с образованием нуклеокапсида. Неструктурные белки, обозначенные как Ν82-Ν85, включают протеины с ферментативными функциями, участвующие в репликации вируса и в процессинге белка, включая полимеразу, протеазу и геликазу.
Основным источником заражения вирусом гепатита С (НСУ) является кровь. Интенсивность проявления инфекции вируса НСУ как проблема со здоровьем проиллюстрирована посредством уровня распространения среди групп повышенного риска. Например, 60-90% больных гемофилией и более чем 80% наркоманов, принимающих наркотики внутривенно, в западных странах являются хронически инфицированными вирусом гепатита С. В случае наркоманов, принимающих наркотики внутривенно, уровень распространения варьируется от приблизительно 28 до 70% в зависимости от изучаемой группы населения. Доля новых инфекций вируса НСУ, сопутствующих посттрансфузии, значительно снижена в последнее время вследствие усовершенствований диагностических средств, используемых для отбора доноров крови.
Комбинирование пегилированных интерферонов плюс рибавирин представляет собой лечение, выбираемое в случае хронической инфекции вируса НСУ. Такое лечение не обеспечивает продолжительный вирусный ответ (8УВ) у большинства пациентов, инфицированных наиболее распространенным генотипом вируса (1а и 1Ь). Кроме того, значительные побочные эффекты мешают соблюдению текущего режима терапии и могут вызывать у некоторых пациентов необходимость снижения дозировки/дозы или прекращения приема лекарства.
Следовательно существует потребность в разработке противовирусных средств для применения в лечении или предупреждении флавивирусных инфекций.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает соединение, представляющее собой
или его фармацевтически приемлемую соль.
Соединение настоящего изобретения представляет собой ингибитор полимеразы вируса НСУ. Неожиданно было обнаружено, что данное соединение проявляет улучшенные свойства относительно других тиофеновых ингибиторов полимеразы вируса НСУ. Следовательно, соединение настоящего изобретения имеет превосходный потенциал для лечения и предупреждения инфекций гепатита С.
В другом аспекте изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей указанное выше соединение и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.
В следующем аспекте изобретение относится к фармацевтической комбинации, содержащей указанное выше соединение по и по меньшей мере один дополнительный агент. Дополнительные агенты выбирают из ингибиторов вирусной сериновой протеазы, ингибиторов вирусной полимеразы, ингибиторов вирусной геликазы, иммуномодулирующих агентов, антиоксидантов, антибактериальных агентов, терапевтических вакцин, гепатопротекторов, антисмысловых агентов, ингибиторов протеазы Ν82/3 вируса НСУ и ингибиторов участка внутренней посадки рибосомы (ШЕ8).
В предпочтительном варианте указанный по меньшей мере один дополнительный агент в фарма
- 1 016457 цевтической комбинации выбирают из рибавирина и интерферона-α.
В еще одном предпочтительном варианте указанный по меньшей мере один дополнительный агент в фармацевтической комбинации выбирают из рибавирина и пегилированного интерферона-α.
В следующем аспекте изобретение относится к применению указанного выше соединения для лечения вирусной инфекции гепатита С у носителя вируса. Предпочтительно носителем вируса является че ловек.
В предпочтительных вариантах изобретение относится к фармацевтически приемлемой соли соединения
или его свободной форме.
В следующем аспекте изобретение относится к фармацевтическая комбинации, включающей
а) соединение
Ь) пегилированный интерферон-α; и
с) рибавирин.
Далее, изобретение относится к применению терапевтически эффективных количеств
а) соединения
b) пегилированного интерферона-α и
c) рибавирина для лечения вирусной инфекции гепатита С у носителя вируса.
Термин ингибитор вирусной сериновой протеазы, используемый в этом документе, означает средство, которое является эффективным в ингибировании функции вирусной сериновой протеазы, включающей сериновую протеазу вируса НСУ, у млекопитающего. Ингибиторы сериновой протеазы вируса НСУ включают, например, те соединения, которые описаны в международных публикациях: ЖО 99/07733 (Воейгтдег 1пдеШе1т), ЖО 99/07734 (Воейгтдег 1пдеШе1т), ЖО 00/09558 (Воейгтдег 1пде1Ье1т), ЖО 00/09543 (Воейгтдег 1пде1Ье1т), ЖО 00/59929 (Воейгтдег 1пде1Ье1т), ЖО 02/060926 (ВМ8), ЖО 2006039488 (Уег1ех), ЖО 2005077969 (Уег1ех), ЖО 2005035525 (Уег1ех), ЖО 2005028502 (Уег1ех), ЖО 2005007681 (Уег1ех), ЖО 2004092162 (Уег1ех), ЖО 2004092161 (Уег1ех), ЖО 2003035060 (Уег1ех), ЖО 03/087092 (Уег1ех), ЖО 02/18369 (Уег1ех) или ЖО 98/17679 (Уег1ех).
Термин ингибиторы вирусной полимеразы, используемый в этом документе, означает средство, которое является эффективным в ингибировании функции вирусной полимеразы, включающей полимеразу вируса НСУ, у млекопитающего. Ингибиторы полимеразы вируса НСУ включают ненуклеозиды, например, те соединения, которые описаны в международных публикациях:
ЖО 03/010140 (Воейгтдег 1пде1Ье1т), ЖО 03/026587 (Вп81о1 Муегз 8цшЬЬ); ЖО 02/100846 А1, ЖО 02/100851 А2, ЖО 01/85172 А1 (О8К), ЖО 02/098424 А1 (О8К) , ЖО 00/06529 (Мегск), ЖО 02/06246 А1 (Мегск), ЖО 01/47883 (1арап ТоЬассо), ЖО 03/000254 (1арап ТоЬассо), и в европейском патенте ЕР 1256628 А2 (Адоигоп).
Кроме того, другие ингибиторы полимеразы вируса НСУ также включают аналоги нуклеозидов, например, те соединения, которые описаны в международных публикациях: ЖО 01/90121 А2 (Мешх), ЖО 02/069903 А2 (Вюсгуз! РЕагтасеиИсаЕ 1пс.), и ЖО 02/057287 А2 (Мегск/Ыз) и ЖО 02/057425 А2 (МегскЛз1з).
Конкретные примеры нуклеозидных ингибиторов полимеразы вируса НСУ включают КТ626/К4479
- 2 016457 (Коске), К7128 (Коске), МК-0608 (Мегск), К1656 (Коске-Ркагтакке!) и валопицитабин (Уа1ор1скаЬ1пе) (Иешх).
Конкретные примеры ингибиторов полимеразы вируса НСУ включают 1ТК-002/003 и ЛК-109 (1арап ТоЬассо), НСУ-796 (У1горкагта), 68-9190 (611еаб), и РР-868554 (РПхег).
Термин ингибиторы вирусной геликазы, используемый в этом документе, означает средство, которое является эффективным в ингибировании функции вирусной геликазы, включающей геликазу семейства флавивирусов (ИауМпбае), у млекопитающего.
Иммуномодулирующий агент, так как используют в этом документе, означает те агенты, которые являются эффективными в улучшении/усилении или в потенцировании реакции иммунной системы у млекопитающего. Иммуномодулирующие агенты включают, например, интерфероны класса I (такие как α-, β-, δ- и Ω-интерфероны, τ-интерфероны, консенсусные интерфероны и асиало-интерфероны), интерфероны класса II ( такие как γ-интерфероны) и пегилированные интерфероны.
Термин интерферон класса I, используемый в этом документе, означает интерферон, выбранный из группы интерферонов, которые все связываются с первым (I) типом рецепторов. Он включает интерфероны класса I как природного, так и синтетического происхождения. Примеры интерферонов класса I включают α-, β-, δ- и Ω-интерфероны, τ-интерфероны, консенсусные интерфероны и асиалоинтерфероны. Термин интерфероны класса II, используемый в этом документе, означает интерферон, выбранный из группы интерферонов, которые все связываются со вторым (II) типом рецепторов. Примеры интерферонов класса II включают γ-интерфероны. Антисмысловые препараты включают, например, ^8-14803.
Конкретные примеры ингибиторов протеазы N83 вируса НСУ включают Β! Б-Ν-2061 (Воекппдег ШдеШеш), 8СН-6 и 8СН-503034/Боцепревир (8скегтд-Р1оидк), УХ-950/телапревир (Уейех) и ΠΜΝ-Β (!п1егМипе). 689132 (611еаб), ТМС-435350 (Т1Ьо1ес/МебМг), ΓΓΜΝ-191 ДШегМипе), МК-7009 (Мегск).
Ингибитор сайта внутренней посадки рибосомы (ШЕ8) включает ^^-14803 ^8^ РкагтасеиНсаИ) и те соединения, которые описаны в международной публикации \УО 2006019831 (РТС 1кегареибс8).
В одном варианте осуществления дополнительный агент представляет собой интерферон α 1А, интерферон α 1Β, интерферон α 2А или интерферон α 2Β.
Интерферон доступен в пегилированной и непегилированной формах. Пегилированные интерфероны включают РЕ6А8У84т и Ред-йИгоп.
Рекомендованная доза в монотерапии с применением РЕ6А8У84т в случае хронического гепатита С составляет 180 мг (ампула на 1,0 мл или предварительно заполненный шприц на 0,5 мл) один раз в неделю в течение 48 недель путем подкожного введения в живот или в бедро.
Рекомендованная доза РЕ6А8У84т при использовании в комбинации с рибавирином в случае хронического гепатита С составляет 180 мг (ампула на 1,0 мл или предварительно заполненный шприц на 0,5 мл) один раз в неделю.
Ежедневная доза рибавирина составляет 800-1200 мг, вводимых перорально двумя поделенными дозами. Доза должна быть подобрана для пациента индивидуально в зависимости от характеристики заболевания исходного уровня (например, генотип), реакции на терапию, и приемлемости/переносимости режима приема лекарства.
Режим приема рекомендованной дозы РЕ6-!п1гоп1т составляет 1,0 мг на килограмм в неделю (мг/кг/неделя) подкожно в течение одного года. Дозу следует вводить в один и тот же день недели.
При введении в комбинации с рибавирином, рекомендованная доза РЕ6-!п1гоп составляет 1,5 мкг на килограмм в неделю (мкг/кг/неделя).
В дополнительных вариантах осуществления ингибитор вирусной сериновой протеазы представляет собой ингибитор сериновой протеазы вируса НСУ;
ингибитор вирусной полимеразы представляет собой ингибитор полимеразы вируса НСУ;
ингибитор вирусной геликазы представляет собой ингибитор геликазы вируса НСУ.
В одном варианте осуществления вирусная полимераза представляет собой РНК-зависимую РНКполимеразу.
В одном варианте осуществления вирусная полимераза представляет собой полимеразу вируса НСУ.
Индивидуальные компоненты для применения в способе настоящего изобретения или комбинации настоящего изобретения могут быть введены либо последовательно либо одновременно отдельно взятыми или скомбинированными фармацевтическими составами.
Под термином фармацевтически приемлемые соли подразумевают фармацевтически приемлемые соли, полученные из фармацевтически приемлемых неорганических и органических кислот и оснований. Примеры подходящих кислот включают хлороводородную, бромоводородную, серную, азотную, перхлорную, фумаровую, малеиновую, фосфорную, гликолевую, молочную, салициловую, янтарную, толуол-р-сульфоновую, винную, уксусную, трифторуксусную, лимонную, метансульфоновую, муравьиную, бензойную, малоновую, нафталин-2-сульфоновую и бензолсульфоновую кислоты. Другие кислоты, та
- 3 016457 кие как щавелевая, хотя сами по себе фармацевтически неприемлемые, могут быть полезными в качестве промежуточных соединений в получении соединения изобретения и его фармацевтически приемлемых солей присоединения кислот.
Соли, полученные из аминокислот также являются включенными (например, Ь-аргинин, Ь-лизин).
Соли, полученные из соответственных оснований, включают соли щелочных металлов (например, натрия, лития, калия), соли щелочноземельных металлов (например, кальция, магния), соли аммония, соли \1С' (где Я представляет собой С1-4алкил), холин и трометамин.
В дальнейшем в этом документе упоминание соединения в соответствии с изобретением включает это соединение и его фармацевтически приемлемые соли.
Специалистам в данной области будет ясно, что соединение в соответствии с настоящим изобретением может существовать в различных полиморфных формах. Как известно в данной области, полиморфизм представляет собой способность соединения кристаллизоваться в виде более чем одной отличающейся кристаллической или полиморфной форме. Полиморф представляет собой твердую кристаллическую фазу соединения по меньшей мере с двумя различными компоновками/расположениями или полиморфными формами молекулы этого соединения в твердом состоянии. Полиморфные формы данного соединения определяются одной и той же химической формулой или композицией и отличаются по химической структуре также как кристаллические структуры двух различных химических соединений.
Кроме того, специалистам в данной области будет ясно, что соединение в соответствии с настоящим изобретением может существовать в различных сольватных формах, например в гидратной форме. Сольваты соединения изобретения также могут образовываться при внедрении молекул растворителя в структуру кристаллической решетки молекулы соединения во время кристаллизационного процесса.
Если не определено иначе, то все используемые в этом документе технические и научные термины имеют значение, аналогичное общепринятому и понятному значению для среднего специалиста в области, в которой находится это изобретение. Все публикации, заявки на патент, патенты и другие ссылки, упоминаемые в этом документе, включены путем ссылки со всей полнотой. В случае конфликта/противоречия, настоящее описание изобретения, включая определения, будет проверяться. Кроме того, материалы, способы, и примеры являются только иллюстративными и не предназначены для ограничения.
Термин носитель вируса или пациент означает человека мужского пола или женского пола, например ребенка, подростка или взрослого.
Будет ясно, что количество соединения изобретения, необходимое для применения в лечении, будет варьироваться в зависимости от пути введения, от природы состояния/заболевания, для которого необходимо лечение, и от возраста и состояния пациента, и, в конечном счете, будет на усмотрении штатного врача больницы или ветеринара. Однако, как правило, подходящая доза будет находиться в диапазоне от приблизительно 0,1 до приблизительно 750 мг/кг массы тела в день, например, в диапазоне 0,5-60 мг/кг/день или, например, в диапазоне 1-20 мг/кг/день.
Желательная доза может быть легко/удобно представлена разовой дозой или в виде поделенной дозы, вводимой через надлежащие интервалы времени, например, в виде двух, трех, четырех или более доз в день.
Соединение удобно вводится в стандартной лекарственной форме; например, содержащей 10-1500 мг, предпочтительно 20-1000 мг, наиболее предпочтительно 50-700 мг активного ингредиента на дозированную лекарственную форму.
Идеально активный ингредиент следует вводить с достижением максимальных концентраций активного соединения в плазме от приблизительно 1 - приблизительно 75 мкМ, приблизительно 2-50 мкМ, приблизительно 3 - приблизительно 30 мкМ. Этого можно добиться, например, внутривенной инъекцией 0,1-5%-ного раствора активного ингредиента, необязательно в солевом растворе или при пероральном введении в виде болюса, содержащего приблизительно 1 - приблизительно 500 мг активного ингредиента. Желательные уровни в крови могут поддерживаться непрерывным вливанием с обеспечением приблизительно 0,01 - приблизительно 5,0 мг/кг/ч или дробными вливаниями растворов, содержащих приблизительно 0,4 - приблизительно 15 мг активного ингредиента на килограмм (мг/кг).
В том случае, когда соединение настоящего изобретения или его фармацевтически приемлемые соли применяют в комбинации со вторым терапевтическим средством, активным в отношении того же самого вируса, доза каждого соединения либо может быть аналогична дозе, используемой при применении соединения как такового, либо может отличаться от дозы, используемой при применении соединения как такового. Специалистам в данной области будет легко оценить надлежащие дозы.
Хотя для применения в терапии является возможным, что соединение изобретения может быть введено в виде исходного химического вещества, предпочтительно предоставлять активный ингредиент в виде фармацевтической композиции. Таким образом, изобретение дополнительно обеспечивает фармацевтическую композицию, содержащую соединения настоящего изобретения или их фармацевтически приемлемые производные вместе с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями для них и, необязательно, с другими терапевтическими и/или профилактическими ингредиентами. Носитель(и) долж(е)н(ы) быть приемлемым(и) в смысле совместимости с другими ингредиентами состава и без
- 4 016457 вредным(и) для его/их рецепиента.
Фармацевтические композиции включают фармацевтические композиции, подходящие для перорального, ректального, назального, местного (включая буккальное и сублингвальное), трансдермального, вагинального или парентерального (включая внутримышечное, подкожное и внутривенное) введения или фармацевтические композиции в форме, подходящей для введения путем ингаляции или путем инсуффляции. Там, где это подходит, составы могут быть легко/удобно представлены отдельными дозированными единицами/порциями и могут быть приготовлены любым из способов, общеизвестных в области фармации. Все способы включают стадию приведения в контакт активного соединения с жидкими носителями или тонкоизмельченными твердыми носителями или с тем и другим и затем, при необходимости, стадию придания продукту желательной формы.
Фармацевтические композиции, подходящие для перорального введения, могут быть удобным образом представлены в виде отдельных форм, таких как капсулы, крахмальные капсулы или таблетки, каждая из которых содержит заданное количество активного ингредиента; в виде порошка или гранул; в виде раствора, суспензии или эмульсии. Активный ингредиент также может быть представлен в виде болюса, электуария или пасты. Таблетки и капсулы для перорального введения могут содержать традиционные эксципиенты, такие как связывающие вещества, наполнители, скользящие вещества, разрыхлители или смачивающие вещества. Таблетки могут быть покрыты оболочкой в соответствии со способами, хорошо известными в данной области. Жидкие препараты для перорального введения могут быть в форме, например, водных или масляных суспензий, растворов, эмульсий, сиропов или эликсиров или могут быть представлены в виде сухого продукта, предназначенного для разведения водой или другой подходящей средой (индифферентное вещество, вводимое в лекарственную форму для придания массы) перед применением. Такие жидкие препараты могут содержать традиционные добавки, такие как суспендирующие вещества, эмульгирующие вещества, неводные среды (которые могут включать пищевые масла) или консерванты.
Соединение в соответствии с изобретением также может быть составлено в форме смесей для парентерального введения (например, посредством инъекции, например, болюсной инъекции или путем непрерывного вливания) и могут быть представлены в форме для однократного приема лекарственных средств: в ампулах, предварительно-заполненных шприцах, в упаковках лекарственных средств для вливания небольших объемов или в упаковках лекарственных средств для многократного приема с добавленным консервантом. Композиции могут быть в таких формах, как суспензии, растворы или эмульсии в масляных или водных средах, и могут содержать вещества, способствующие составлению смеси, такие как суспендирующие, стабилизирующие и/или диспергирующие вещества. Альтернативно, активный ингредиент может находиться в порошковой форме, полученной асептическим выделением стерильного твердого вещества или лиофилизацией из раствора, для разведения подходящей средой, например, стерильной, апирогенной водой, перед применением.
Для местного нанесения на эпидермис, соединения в соответствии с изобретением могут быть составлены в виде мазей, кремов или лосьонов или в виде пластыря для трансдермального введения лекарственного средства. Такие пластыри для трансдермального введения могут содержать промоторы всасывания, такие как линалоол, карвакрол, тимол, цитраль, ментол и ΐ-анетол. Мази и крема могут быть составлены, например, с водной или масляной основой с добавлением подходящих загущающих и/или гелеобразующих веществ. Лосьоны могут быть составлены с водной или масляной основой и, как правило, будут также содержать одно или более эмульгирующих веществ, стабилизирующих веществ, диспергирующих веществ, суспендирующих веществ, загущающих веществ или окрашивающих веществ.
Композиции, подходящие для местного введения в ротовую полость, включают лепешки/леденцы, содержащие активный ингредиент в ароматизированной основе, обычно в сахарозе и гуммиарабике или в трагаканте; пастилки, содержащие активный ингредиент в инертной основе, такой как желатин и глицерин или сахароза и гуммиарабик; и растворы для полоскания ротовой полости, содержащие активный ингредиент в подходящем жидком носителе.
Фармацевтические композиции, подходящие для ректального введения, где носитель представляет собой твердое вещество, являются представленными, например, в виде суппозиториев с разовой дозой. Подходящие носители включают кокосовое масло и другие вещества, обычно применяемые в данной области, и суппозитории могут быть легко образованы посредством смешивания активного соединения с размягченным(и) или расплавленным(и) носителем(ями) с последующим охлаждением и формованием в прессформах.
Композиции, подходящие для вагинального введения, могут быть представлены в виде вагинальных суппозиториев, тампонов, кремов, гелей, паст, пен или спреев, содержащих в дополнение к активному ингредиенту такие носители, которые известны в данной области как приемлемые.
Для внутриназального введения соединения изобретения могут быть применены в виде жидкого спрея или в виде диспергируемого порошка или в виде капель. Капли могут быть составлены посредством водной или неводной основы, также содержащей одно или более диспергирующих веществ, солюбилизирующих веществ или суспендирующих веществ. Доставка жидких спреев из упаковок, находящихся под повышенным давлением, является удобной.
- 5 016457
Для введения ингаляцией, соединения в соответствии с изобретением удобно доставляются из инсуффлятора, распылителя (аэрозольный аппарат) или упаковки, находящейся под повышенным давлением или из другого удобного средства доставления аэрозольного спрея. Упаковки, находящиеся под повышенным давлением, могут содержать подходящий газ-вытеснитель, такой как дихлордифторметан, трихлорфторметан, дихлортетрафторэтан, диоксид углерода или другой подходящий газ. В случае аэрозоля, находящегося под повышенным давлением, дозированная единица может быть определена посредством обеспечения клапана для доставки дозированного количества.
Альтернативно, для введения посредством ингаляции или инсуффляции, соединения в соответствии с изобретением могут находиться в форме сухой порошковой композиции, например порошковой смеси соединения и подходящей порошковой основы, такой как лактоза или крахмал. Порошковая композиция может быть представлена в дозированной лекарственной форме, например в капсулах или ампулах или, например, желатиновых или блистерных упаковках, из которых порошок может быть введен посредством ингалятора или инсуффлятора.
При желании могут быть применены вышеописанные составы, приспособленные к тому, чтобы давать замедленное высвобождение активного ингредиента.
Следующие общие схемы и примеры обеспечивают для иллюстрации различных вариантов осуществления настоящего изобретения и их не следует рассматривать как ограничение объема изобретения. Способы синтеза для получения тиофеновых соединений также описаны в заявках на патент: ра1еи( арр11са(юи8 υδ Ра1еи( № 6881741, υδδΝ 10/730272, поданной 9 декабря 2003 г., υδδΝ 11/042442, поданной 26 января 2005 г., υδδΝ 11/433749, поданной 15 мая 2006 г., в международной публикации XVО 02/100851, в патенте υδ 2004-0116509, в международной публикации νθ 2004/052885, в патенте υδ 2005-0009804, в международной публикации νθ 2004/052879 и в патенте υδ 2004-0192707. Тиофеналкинильные соединения также раскрыты в международных публикациях νθ 2006/072347 и νθ 2006/072348.
В примерах все температуры даны в грудусах по Цельсию без поправок; и, если не указано иное, все части и процентные содержания приведены по массе.
Могут быть использованы следующие сокращения, которые даны ниже:
Вос - трет-бутоксикарбонил;
ОСС - 1,3-дициклогексилкарбодиимид;
ОСЕ - 1,2-дихлорэтан;
ЭСМ - дихлорметан;
ΌΙΡΕΑ - Ν,Ν-диметилформамид;
Е(оАс - этилацетат;
На1 - галоген;
ЬАН - литий алюминий гидрид;
МеОН - метанол;
ТЕА - трифторуксусная кислота;
ТНЕ - тетрагидрофуран;
ЬЭА - литий-диизопропиламид;
ТЬС - тонкослойная хроматография;
РВЕ - круглодонная колба.
Все процедуры очистки методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ИРЬС) проводят с использованием колонки с обращенной фазой С18, заполненной частицами размером 5 мкм. Диаметр колонки составляет 19 мм, и длина составляет 100 мм. Элюент представляет собой смесь ацетонитрила и воды с соответствующим градиентом концентрации ацетонитрила и с концентрацией НС1 3 мМ.
Пример 1. Получение 5-(3,3-диметил-бут-1-инил)-3-[(транс-4-гидроксициклогексил)-(транс-4метилциклогексанкарбонил)амино]тиофен-2-карбоновой кислоты
- 6 016457
Стадия I. Метиловый эфир 3-[(1,4-диоксаспиро[4.5]дец-8-ил)-(транс-4-метилциклогексанкарбонил)амино]-5-иодтиофен-2-карбоновой кислоты (из примера 3) растворяют в тетрагидрофуране и обрабатывают посредством 3н раствора НС1. Реакционную смесь перемешивают при 40°С в течение 3 ч. Реакционную смесь упаривают при пониженном давлении. Смесь растворяют в этилацетате и промывают водным насыщенным раствором №1НСО3. Отделяют органический слой, сушат над Ыа28О4, фильтруют и концентрируют с получением соединения, указанного в заглавии.
Стадия II. К холодному (0°С) раствору метилового эфира 5-иод-3-[(транс-4-метилциклогексанкарбонил)-(4-оксоциклогексил)амино]тиофен-2-карбоновой кислоты в МеОН в атмосфере Ν2, добавляют порциями NаΒН4 и перемешивают. После завершения реакции, добавляют 2%-ный раствор НС1 и перемешивают в течение 15 мин. Реакционную смесь концентрируют в вакууме досуха. Остаток распределяется между водой и этилацетатом. Отделяют органический слой, сушат над Мд8О4 и концентрируют досуха. Остаток очищают посредством колоночной хроматографии на силикагеле с использованием смеси ЕЮАс: гексан в качестве элюента с получением соединения, указанного в заглавии.
Стадия III. К раствору метилового эфира 3[(транс-4-гидроксициклогексил)-(транс-4-метилциклогексанкарбонил)амино]-5-иодтиофен-2-карбоновой кислоты и этинилтриметилсилана в диметилформамиде, добавляют триэтиламин и трис(дибензилиденацетон)дипалладий (0), и реакционную смесь перемешивают при 60°С в течение 16 ч в атмосфере Ν2. Диметилформамид и триэтиламин удаляют при пониженном давлении, и остаток распределяется между водой и этилацетатом. Отделяют органический слой, сушат (№128О4). концентрируют и остаток очищают посредством колоночной хроматографии с использованием смеси этилацетата и гексана (1:2) в качестве элюента с получением соединения, указанного в заглавии.
Стадия IV. Метиловый эфир 3-[(транс-4-гидроксициклогексил)-(транс-4-метилциклогексанкарбонил)амино]-5-триметилсиланилэтинилтиофен-2-карбоновой кислоты и 2-хлор-2-метилпропан собирают в дихлорметане и добавляют свежесублимированный хлорид алюминия при -78°С. Реакционную смесь перемешивают при той же температуре в течение 6 ч. Реакционную смесь выливают в воду, разбавляют дихлорметаном. Органический слой отделяют, сушат (№128О4) и концентрируют. Остаток очищают колоночной хроматографией с использованием этилацетата и гексана с получением соединения, указанного в заглавии.
Ссылка: 1. Сйет. 8ос, Сйет. Соттип., 1982, 959-960.
Стадия V. Метиловый эфир-5-(3,3-диметил-бут-1-инил)-3-[(транс-4-гидроксициклогексил)-(транс4-метилциклогексанкарбонил)амино]тиофен-2-карбоновой кислоты растворяют в смеси ТНЕ:метанол: Н2О в соотношении 3:2:1 и обрабатывают посредством 1н раствора Ь1ОН-Н2О. После 2 ч перемешивания при 60°С, реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении на роторном испарителе. Смесь распределяется между этилацетатом и водой. Водный слой подкисляют с использованием 0,1н. раствора НС1. Этилацетатный слой отделяют и сушат над №28О4. Растворитель удаляют и остаток очищают посредством колоночной хроматографии с использованием смеси метанола и дихлорметана (1:9) в качестве злюента с получением соединения, указанного в заглавии.
Таблица 1. Соединение в соответствии с настоящим изобретением
Структура Химическое название Данные массспектрометрии*
1 он р·' я/™· 5-(3,3-ДИМЕТИЛ-БУТ-1-ИНИЛ)-3- [(ТРАНС-4-ГИДРОКСИЦИКЛОГЕКСИЛ)(ТРАНС-4- МЕТИЛЦИКЛОГЕКСАНКАРБОНИЛ)АМИНО] ТИОФЕН-2-КАРБОНОВАЯ КИСЛОТА (М-Н): 444,3
* Данные масс-спектрального анализа записаны с использованием масс-спектрометрии с ионизацией электрораспылением.
Пример 2. Оценка соединений в анализе пробы РНК НСV-зависимой РНК-полимеразы.
Следующие ссылки все включены путем ссылки:
1. Вейгепк, 8., Тоте1, Ь., Эе Егапсексо, В. (1996) ЕМВО 15, 12-22.
2. Наг1оте, Е., апб Йапе, Ό. (1988) АпйЬоб1ек: А ЬаЬога1огу Мапиа1. Со1б 8ргйщ Нагйогб ЬаЬога1огу. Со1б 8рппд НагЬогб. ΝΥ.
3. Ьойтапп, V., Когпег, Е., Непап, и., апб ВайепксЫадег, В. (1997) 1. νπΌ1. 71, 8416-8428.
4. Тоте1, Ь., ЕаШа, С, 8ап1о1шк Е., Эе Егапсексо, В., апб Ьа Мошса, N. (1993) 1. νπΌ1. 67, 4017-4026.
Соединения оценивают с использованием анализа пробы полимеразы ш уйго, содержащей очищенную рекомбинантную РНК НСV-зависимую РНК-полимеразу (№5В-белок). Ν85Β НСV является экспрессированным в клетках насекомых с использованием рекомбинантного бакуловируса в качестве вектора. Экспериментальные методики, использованные для клонирования, экспрессии и очистки Ν85Βбелка вируса НСV описаны ниже. Далее следуют подробности методов анализа пробы РНК-зависимой РНК-полимеразы для тестирования соединений.
- 7 016457
Экспрессия Ы35В-белка НСУ в клетках насекомых: Комплементарная ДНК (кДНК), кодирующая весь КТ35В-белок штамма НСУ-Вк, генотип 1Ь, является амплифицированной посредством полимеразной цепной реакции (ПЦР), с использованием праймеров Ν85Ν1ΐ65' (5'-ССтаосостАЗСТСААТСТССТАСАСАТСС-З') и Χ1οΝ353' I5' -СТССАестсСАСССТССАТССОТТСббСАС-З' ) и плазмиды рСЭ 3,8-9,4 в качестве матрицы (Тоте1 е! а1, 1993). Ν35Ν1ιο5' и Χ1οΝ353' содержат два участка ΝΙιοΙ и ΧΙιοΙ (подчеркнутые последовательности), соответственно, на своем 5'-конце. Амплифицированный ДНК-фрагмент клонируют в бактериальной плазмиде экспрессии рЕТ-21Ь (Шхадеп) между сайтами рестрикции ΝΜ и ΧΙιοΙ. для продуцирования плазмиды ρΕΤ/Ν35Β. Эту плазмиду позднее используют в качестве матрицы для ПЦР-амплификации №5В-кодирующего участка, С использованием праймеров Ν85Β-Η9 (5' -АТАСАТАТСССТАССАТСТСААТСТССТАСАСАТСС-З' ) и №5В-К4 (5'- бДАТССССАТССССТТСАТСССТТССССАа-З') ^5В-Н9 охватывает участок из 15 нуклеотидов в плазмиде рЕТ-21Ь, за которым следуют инициирующий трансляцию кодон (АТС) и 8 нуклеотидов, соответствующих 5'-концу №5В-кодирующего участка (п1. 7590-7607 в последовательности НСУ с номером изолята М58335). №5В-В4 содержит два сайта ВатН1 (подчеркнутые), за которыми следуют 18 нуклеотидов, соответствующие участку около терминирующего трансляцию кодона в геноме НСУ (п1. 9365-9347).
Амплифицированная последовательность, размером в 1,8 кЬ (тысяча пар нуклеотидов), была переварена посредством Ν1κΙ и ВатН1 и лигирована в предварительно переваренную плазмиду рВ1иеВас11 Цпуйгодеп). Получающуюся в результате рекомбинантную плазмиду обозначают как рВас/^5В. Клетки 319 совместно трансфицируют 3 мкг рВас/№5В, вместе с 1 мкг линеаризованной ДНК бакуловируса (1пуйгодеп) так, как описано в протоколе производителя. После двух раундов очистки от бляшек выделяют №5В-рекомбинантный бакуловирус, Вас№5В. Присутствие рекомбинантного №5В-белка определяют посредством вестерн-блоттинг-анализа (Нат^у аиб Ьапе, 1988) Вас№5В-инфицированных клеток 319, с использованием поликлональной антисыворотки кролика (анти-№5В), индуцированной против варианта №5В-белка с гистидиновой меткой, экспрессированного в Е. той. Инфицирование клеток 319 посредством такого очищенного от бляшек вируса проводят в однолитровых вращающихся колбах с плотностью клеток 1,2х106 клеток на миллилитр (клетки/мл) и с множественностью инфицирования, равной 5.
Получение растворимого рекомбинантного №5В-белка.
319-клетки инфицируют так, как описано выше. Через шестьдесят часов после инфицирования, клетки собирают, затем промывают дважды забуференным фосфатом физиологическим раствором (РВ3). Тотальные белки солюбилизируют так, как описано в публикации Εο1ιιη;·ιηπ е! а1. (1997), с некоторыми модификациями. Кратко, белки экстрагируют в три стадии, 31, 32, 33, с использованием лизирующих буферных растворов (ЬВ) I, ЬВ II, и ЬВ III (Εοΐιιηηηη е! а1, 1997). Композицию ЬВП модифицируют таким образом, чтобы она содержала 0,1% тритона Χ-100 и 150 мМ №С1, для снижения количества солюбилизированного №5В-белка на этой стадии. Кроме того, на всем протяжении протокола избегают разрушения ультразвуком клеточных экстрактов для сохранения целостности структуры белка.
Очистка рекомбинантного №5В-белка с использованием жидкостной экспресс-хроматографии белков (ЕРЬС).
Растворимый №5В-белок в фракции 33 разбавляют с понижением концентрации №1С1 до 300 мМ, затем его инкубируют порционно с гранулами ДЭАЭ-сефарозы (Атегзйат-Рйагтааа) в течение 2 ч при 4°С так, как описано в публикации Вейгеиз е! а1. (1996). Несвязанное вещество устраняют посредством центрифугирования в течение 15 мин при 4°С, при 25000 оборотах в минуту (грт) с использованием ротора 3\У41 (Весктаи). Надосадочную жидкость дополнительно разбавляют с понижением концентрации №С1 до 200 мМ и впоследствии наносят со скоростью потока 1 мл/мин на колонку с гепарином Н1Тгар® объемом 5 мл (Атегзйат-Рйаттааа), соединенную с системой жидкостной экспресс-хроматографии белков (ЕРЬС) (Атегзйат-Рйаттааа). Связанные белки элюируют фракциями по 1-мл, с использованием раствора №1С1 с непрерывным градиентом 0,2-1М, в пределах объема 25 мл. №5В-белки-содержащие фракции идентифицируют посредством электрофореза в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия (3Э3-РАСЕ), с последующим вестерн-блоттингом с использованием антисыворотки против №5В-белка при разбавлении 1:2000. Фракции с позитивной полярностью объединяют, и буферный раствор для элюирования заменяют на 50 мМ-ный раствор по NаРΟ4 (рН 7,0), 20%-ный раствор по глицерину, 0,5%-ный раствор по тритону Χ-100 и 10 мМ-ный раствор по ОТТ, с использованием колонки РЭ-10 (Атегзйат-Рйагтааа). Затем наносят пробу на колонку НГТтар® 3Р объемом 1 мл (АтегзйатРйатташа), со скоростью потока 0,1 мл/мин. Связанные белки элюируют с использованием раствора №С1 с непрерывным градиентом №1С1 0-1М в пределах объема 15 мл. Элюированные фракции анализируют посредством электрофореза в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия (3Э3-РАСЕ) и вестерн-блоттинга. Альтернативно, белки визуализируют, после 3Э3-РАСЕ, посредством окрашивания серебром с использованием набора 3йует 3!аш Р1из (ВюВаб), который описан производителем. Фракции с позитивной полярностью тестируют на активность РбРр (рНК-зависимой РНКполимеразы) (смотри ниже), и объединяют наиболее активные фракции с позитивной полярностью, и хранят в виде 40%-ного раствора глицерина при -70°С.
Флэш-планшетный сцинтилляционный анализ сближения (3ТКЕР-ЕЬА3Н А33АУ) для РНКзависимой РНК-полимеразы (РбРр) вируса НСУ ίη νίίτο, использованный для оценивания аналогов.
- 8 016457
Суть этого анализа состоит в измерении внедрения меченного радиоактивным изотопом [3Н] ИТР (уридинтрифосфата) в матрицу-праймер Ро1угА/биотинилированный олиго кТ. регистрируемого на поверхности покрытых стрептавидином титрационных флэш-микропланшетах с введенной сцинтилляционной жидкостью Р1а8Йр1а1е8™ (ΝΕΝ Ь1£е 8с1еисе Ртокиск 1пс.. МА. И8А. 8МР 103А). Кратко. 400 нг/мкл раствора ро1угА (Атегайат Рйагтас1а Вю1есй) смешивают объем-на-объем с раствором 5'-биотин-олиго кТ15 с концентрацией 20 пикомоль/мкл. Матрицу и праймеры денатурируют при 95°С в течение 5 мин. затем инкубируют при 37°С в течение 10 мин. Ренатурированные матрица-праймеры потом разбавляют в Тп§-НС1-содержащем буферном растворе и дают соединиться с покрытыми стрептавидином флэшпланшетами в течение ночи. Несвязанное вещество отбрасывают; соединения добавляют в 10 мкл раствора с последующим добавлением 10 мкл раствора. с концентрацией 50 мМ по МдС12. с концентрацией 100 мМ по ТЙ8-НС1 (рН 7.5). с концентрацией 250 мМ по №1С1 и с концентрацией 5 мМ по ИТТ. Ферментативную реакцию инициируют добавлением 30 мкл раствора. содержащего фермент и субстрат. с получением следующих концентраций: 25 мкМ по уридинтрифосфату (ИТР). 1 мкКи по [3Н] ИТР и 100 нМ по рекомбинантному №5В-белку вируса НСУ. Реакциям КкКр (рНК-зависимой РНК-полимеразы) дают протекать в течение 2 ч при комнатной температуре. после чего лунки промывают три раза 250 микролитрами 0.15М раствора №С1. высушивают на воздухе при 37°С. и подсчитывают с использованием жидкостного сцинтилляционного счетчика (ОТа11ас М1стоЬе1а Тп1ех. Регкш-Е1тет. МА. И8А).
Пример 3. Клеточная культура для анализа репликации РНК вируса НСУ с использованием клеточного люциферазного репортера.
Соединения настоящего изобретения представляют собой ингибиторы полимеразы вируса НСУ. Неожиданно было обнаружено. что соединения. соответствующие настоящему изобретению и имеющие особый тип замещения. проявляют улучшенный терапевтический индекс относительно других тиофеновых аналогов.
Репликонные клеточные линии Ний-7. 5.2 и ЕТ. которые получены из Ний-7-клеточной линии гепатокарциномы. поддерживают в культуре так. как это описано в публикации Кпедет. Ν; Ьойтапп. У; Вайеп8сй1адет. К. ЕпйапсетеШ о£ йераШш С У1ти8 КИА герйсаЮп Ьу се11 сийите-акарйуе ти1а1юп8. 1. У1го1. 2001. 75. 4614-4624. Клетки Ний-7. 5.2 содержат сильно адаптированную в клеточной культуре репликонную конструкцию 13891ис-иЬ1-пео/И83-3'/5.1. которая несет. в дополнение к гену неомицина. интегрированную копию гена люциферазы светляков (Кпедег. Ν; Ьойтапп. У; Вайеп8сй1адет. К. ЕпйапсетеШ о£ йераййк С У1ти8 КИА герйсаЮп Ьу се11 сийите-акарйуе ти1айоп8. 1. Уйо1. 2001. 75. 4614-4624). Такая клеточная линия позволяет измерять репликацию РНК вируса НСУ и трансляцию путем измерения активности люциферазы. Ранее было показано. что активность люциферазы тесно связана с уровнем РНК репликона в таких клетках (Кпедег. Ν; Ьойтапп. У; Вайеп8сй1адег. К. ЕпйапсетеШ о£ йераШш С У1ти8 КИА герйсаЮп Ьу се11 сийите-акарйуе тШайопк 1. Уио1. 2001. 75. 4614-4624). Клеточная линия Ний-7. ЕТ имеет те же признаки. которые указаны для клеточной линии Ний-7. 5.2. за исключением того. что клетки ЕТ являются более здоровыми и содержат адаптационную мутацию N84В-гена НСУ вместо Ν85Ά. Обе клеточные линии поддерживают в культурах на суб-конфлюэнтном уровне (<85%). так как уровень РНК репликона является наиболее высоким в активно пролиферирующих клетках. Культуральная среда. использованная для пассирования клеток состоит из модифицированной по способу Дульбекко среды Игла (ИМЕМ) (С1Ьсо ВКЬ ЬаЬогаЮпек МЕщккаида. ΟΝ. Сапака). дополненной фетальной бычьей сывороткой с конечной концентрацией 10%. пенициллином/стрептомицином с конечной концентрацией 1%. глутамином с конечной концентрацией 1%. пируватом натрия с конечной концентрацией 1%. заменяемыми аминокислотами с конечной концентрацией 1%. и С418 с конечной концентрацией 350 мкг/мл. Клетки инкубируют при 37°С. в атмосфере 5%-ного СО2 и для поддержания суб-конфлюэнтности подвергают пассированию дважды в неделю.
Приблизительно 3000 жизнеспособных клеток Ний-7. 5.2 или ЕТ (100 мкл) на лунку высевают на белый непрозрачный (матово-белый) 96-луночный титрационный микропланшет. Культуральная среда. использованная для анализа аналогична культуральной среде. описанной выше. за исключением того. что она не содержит С418 и феноловый красный. По истечении периода инкубирования 3-4 ч при 37°С в инкубаторе с 5%-ным СО2. добавляют соединения (100 мкл) в различных концентрациях. Затем клетки дополнительно инкубируют в течение 4 дней при 37°С в инкубаторе с 5%-ным СО2. После этого культуральную среду удаляют и клетки лизируют путем добавления 95 мкл буферного раствора люциферазы (субстрат люциферина в забуференном детергенте). Клеточные лизаты инкубируют при комнатной температуре и защищают от прямого света в течение по меньшей мере 10 мин. Планшеты подвергают считыванию для определения количества люцифераз с использованием люминометра (ОТа11ас М1стоВе1а Тп1их. Реткт Е1тег™. МА. И8А).
50%-Ингибирующие концентрации (1С508) в отношении ингибирующего действия определяют по кривой зависимости доза-эффект с использованием одиннадцати концентраций на каждое соединение в двух экземплярах. Кривые строят по экспериментальным точкам с использованием нелинейного регрессионного анализа. и концентрации 1С50§ получают интерполяцией из получающейся в результате кривой с использованием программного обеспечения СтарйРак РгЬш. версия 2.0 (СтарйРак 8оП\таге 1пс.. 8ап
- 9 016457
И1едо, СА, И8А).
Пример 4. Оценивание соединений в ферментативном анализе с использованием укороченного с Сконца на 21 остаток аминокислоты ЫЗ5В-белка вируса НСУ штамма ВК с генотипом 1Ь.
Следующие ссылки все включены путем ссылки:
Тоте1, Ь., Еай1а, С., 8апЮ1шГ Е., Эе Егапсезсо, В., апй Ьа Мотса, N. (1993) 1. Упо1. 67, 4017-4026.
ЬезЬигд, С.А. е1 а1. СгубГа1 бГгисГиге οί Гйе КМА-йерепйеп! КМА-ро1утегабе Ггот ЬераЙ18 С νίιυδ геуеа18 а Ги11у епспс1ей асО\ге 8Йе. №11. 8йисГ. Вю1. 6, 937-943 (1999).
Ееггап, Ε. е1 а1. С11агас1епхаОоп оГ 8о1иЬ1е ЬераЙ18 С νίπΐδ ВМА-йерепйеп1 ВМА ро1утегазе ехргеззей ίη ЕзсйепсЫа сой. 1. Упо1. 73, 1649-1654 (1999).
Соединения оценивают с использованием анализа пробы полимеразы ίη νίΙΐΌ. содержащей рекомбинантную РНК-зависимую РНК-полимеразу НСУ Щ85В-белок), экспрессированную в бактериальных клетках. Экспериментальные методики, использованные для клонирования, экспрессии и очистки Ν35Βбелка НСУ, описаны ниже. Ниже подробно описано проведение анализа проб РНК-зависимой РНКполимеразы для тестирования соединений.
Экспрессия М85В-белка вируса НСУ в клетках насекомых.
Экспрессия и очистка М85В-белка НСУ.
Рекомбинантную растворимую форму, представляющую собой фермент на основе укороченного с С-конца на 21 остаток аминокислоты М85В-белка вируса НСУ штамма ВК с генотипом 1Ь (Тоте1 е1 а1, 1993), содержащий Ν-концевую гексагистидиновую метку, клонируют и экспрессируют в ЕзсйепсЫа сой ВЬ21 (ΌΕ3). Укороченный фермент очищают так, как описано в публикациях ЬезЬигд е1 а1. (1999) и Ееггап е1 а1. (1999) с минимальными модификациями. Кратко, растворимые бактериальные лизаты вводят на Νί-хелатирующую аффинную колонку Н1Тгар (ОЕ Неаййсаге, Ва1е й'ИтГе, ОС, Сапайа). Связанный фермент элюируют с использованием раствора с градиентом имидазола. Затем имидазол удаляют из буферного раствора смешанных активных фракций с использованием обессоливающих колонок ΡΌ-10 (ОЕ НеаНйсаге, Ва1е й'ИтГе, ОС, Сапайа). Дополнительной очистки добиваются путем пропускания препарата белковых веществ через катионообменную колонку на сефарозе НГГгар ЗР (ОЕ НеаНйсаге, Ва1е й'ИтГе, ОС, Сапайа) с использованием для элюирования градиентного раствора №С1. После этого буферный раствор заменяют раствором с концентрацией 10 мМ по Тпз (рН 7,5), 10% по глицерину, 5 мМ по ЭТТ, 600 мМ по №1С1 с использованием колонки ΡΌ-10. Фракции с позитивной полярностью тестируют на активность РНК-зависимой полимеразы и наиболее активные фракции смешивают и хранят при -70°С.
Анализ пробы М85В-белка ш νίΙΐΌ.
Измерение ингибирующего действия соединений в отношении полимеризационной активности М85В-белка вируса НСУ осуществляют путем оценивания количества меченного радиоактивным изотопом уридинтрифосфата (ИТР), внедренного посредством фермента в новосинтезированную РНК с использованием матрицы/праймера гомополимерной РНК. Кратко, праймер на основе 15-мерного 5'биотинилированного олигонуклеотида ДНК (ойдо йТ), ренатурированный до гомополимерной матрицы РНК ро1угА, улавливается на поверхности покрытого стрептавидином шарика (ОЕ НеаНйсаге, Ва1е й'ИтГе, ОС, Сапайа). По существу, соединения тестируют при различных концентрациях (0,005-200 мкМ) в конечном объеме 50 мкл реакционной смеси, состоящей из ТП8-НС1 с концентрацией 20 мМ (рН 7,5), МдС12 с концентрацией 5 мМ, ЭТТ с концентрацией 1 мМ, Мао с концентрацией 50 мМ, очищенного фермента Ν85Ε с концентрацией 50 нМ, ро1угА/о11дойТ|5 с концентрацией 250 нг Д^йгодеп, Виг1шд1оп, Оп!апо, Сапайа), нерадиоактивного ИТР с концентрацией 15 мкМ, и [3Н]ИТР с концентрацией 1 мкКи (3000 Ки/ммоль; ОЕ Неаййсаге., Ва1е й'ИтГе, ОС, Сапайа). Полимеризационную активность фермента Ν85Ε НСУ оценивают количественно путем измерения внедрения субстрата с меченным радиоактивным изотопом [3Н]ИТР на 3'конец растущего праймера, и детектирование выполняют путем считывания сигнала с использованием жидкостного сцинтилляционного счетчика (Аа11ас МюгоВе!а Тп1их, Регкш Е1тег™, МА, И8А).
Анализ внедрения [3Н]Тимидина.
Клетки общим количеством 1,000-2,000 на лунку высевают в 96-луночные агглютинационные планшеты в объеме 150 мкл модифицированной по способу Дульбекко среды Игла (ЭМЕМ) (Ь1Ее Тес1по1од1ез, 1пс., ОаййегбЬигд, Мй.), дополненной фетальной бычьей сывороткой (ЕВ8) (НуС1опе ЬаЬогаГопез, 1пс., Ьодап, И1ай) с концентрацией 10% и глутамином (ЫГе Тесйпо1од1е8, 1пс.) с концентрацией 2 мМ. Пенициллин и стрептомицин (ЫГе Тес1по1оду, 1пс.) добавляют с получением конечных концентраций до 500 ед./мл и 50 мкг/мл соответственно. После инкубирования в течение 18 ч при 37°С в атмосфере 5%-ного СО2, среду удаляют и заменяют соединениями, разбавленными в культуральной среде. Шесть серийных двукратных разбавлений лекарственных средств испытывают трижды. После дополнительного 72-часового инкубирования добавляют 50 мкл раствора [3Н]метилтимидина (Атегзйат ЫГе 8с1епсе, 1пс., Аг1тд1оп НефНК 111.; 2 Ки/ммоль) в культуральной среде с концентрацией 10 мкКи/мл, и планшеты инкубируют в течение дополнительных 18 ч при 37°С. Затем клетки промывают забуференным фосфатом физиологическим раствором (РВ8), трипсинизируют в течение 2 мин и собирают на стекловолоконный фильтр с использованием харвестера клеток ТотГес (ТотГес, Огапде, Сопп.). Фильтры сушат при 37°
- 10 016457 в течение 1 ч и помещают в мешок с 4,5 мл жидкого коктейля для сцинтилляционного счета (Аа11ас Оу, Тигки, Рш1апй). Кумуляция [3Н]метилтимидина, представляющего собой жизнеспособные реплицирующиеся клетки, измеряют с использованием жидкостного сцинтилляционного счетчика (1450-М1сгоЬе1а; ^а11ас Оу). Ссылка по 8ОР (стандартизированные технологические операции): 265-162-03. Для этого эксперимента использованные клеточные линии представляют собой следующее: клетки Ний-7 ЕТ (клетки, полученные из клеточной линии Ний-7 (гепатоцеллюлярная карцинома, человек) и содержащие субгеномный репликон НСУ), клетки МоЙ-4 (периферическая кровь, острый лимфобластный лейкоз, человек), клетки Όϋ-145 (рак предстательной железы, метастаз в головной мозг, человек), клетки Нер-О2 (гепатоцеллюлярная карцинома, человек), и клетки 8Н-8У5У (нейробластома, человек).
Анализ полученных данных
50%-ные цитотоксические концентрации (СС50з) в отношении клеточной токсичности определяют из кривых зависимости доза-эффект с использованием шести - восьми концентраций на каждое соединение в трех экземплярах. Кривые строят по экспериментальным точкам с использованием нелинейного регрессионного анализа, и значения 1С50 получают интерполяцией из получающейся в результате кривой с использованием программного обеспечения ОгарйРай Рпзш, версия 2,0 (ОгарйРай 8ой\\аге 1пс., 8ап О1е§о, СА, ϋ8Α).
Т1 (терапевтический индекс): Соотношение СС50/1С50 в клетках репликона вируса НСУ (Клетки Ний-7 ЕТ) из примера 12. В том случае, когда соединения тестируют более, чем один раз, проверяют среднее значение Т1.
В табл. 2 приведен перечень терапевтических индексов (Т1з) соединения по изобретению относительно других тиофеновых ингибиторов полимеразы вируса НСУ.
Таблица 2
+: <100 ++: 100-1000 +++: 1000-2000 ++++: 2000-4000 +++++: 4000-6000 ++++++· >6000
о+А д Х^ ОН θ Х^ он
- 11 016457
7 8 ОН У 0\^ Ьн
^сн, НС Ε ν с Ν-Ν У р Ч*»» он
р( №»* он
1 Хйв»' он
Соединения Α-Ι могут быть синтезированы так, как описано в патенте И8 Ра1еп1 № 6881741, в международных публикациях: ^О 02/100851, ^О 2004/052885 или ^О 2006/072347.
Пример 5. Стабильность в человеческих и крысиных микросомах и индукция в культивируемых человеческих гепатоцитах.
Некоторые соединения, соответствующие настоящему изобретению и имеющие особый тип замещения, проявляют улучшенные микросомальную стабильность и/или индукцию в человеческих гепатоцитах относительно других тиофеновых аналогов. Например, соединения 1 и 2 показывают лучшие профиль микросомальной стабильности и профиль индукции относительно соединения Е.
Стабильность в человеческих и крысиных микросомах.
Каждое соединение инкубируют в микросомах печени (1,6 мг/мл) при 37°С в условиях окисления и глюкоронизации (ΝΑ])14Ι с концентрацией 1,5 мМ и ϋΏΡΟΑ с концентрацией 1,5 мМ в фосфатном буферном растворе, рН 7,4). Растворы для инкубирования, не содержащие NΑ^ΡН и ИОРОА, используют в качестве контрольных растворов. Соединения инкубируют при концентрации 50 мкМ в течение 0 и 60 мин. Реакцию останавливают путем введения равного объема ацетонитрила. Смесь центрифугируют и надосадочную жидкость анализируют посредством НРЬС/иУ (высокоэффективная жидкостная хроматография с использованием детектора ультрафиолета) или М8/М8 (тандемная масс-спектрометрия). Процентное содержание остатков родительской молекулы соответствует площади родоначального соединения через 60 мин инкубировании относительно площади родоначального соединения в нулевой момент инкубирования х 100.
Индукция в культивируемых человеческих гепатоцитах
Индукцию осуществляют в криоконсервированных или в свежекультивированных человеческих гепатоцитах. Клетки культивируют на коллагене в течение 48 ч. После этого периода клетки дозируют со свежеприготовленной с добавлением известного количества тестового вещества инкубационной средой, содержащей тестовое соединение или индуктор в качестве позитивного контроля, рифампицин. Конечные концентрации тестовых соединений в инкубационных средах составляют 1, 10 и 100 мМ, тогда как позитивный контроль тестируют при концентрации 10 мМ. Негативный контроль (Ν^ состоит из инкубирования клеток с ΏΜ8Ο с конечным содержанием 0,1%. В течение всех 48 ч выполняют обработку клеток посредством свежеприготовленной инкубационной среды с добавлением известного количества тестового соединения или индуктора в качестве контроля, заменяемой ежедневно. В конце индуктивного периода, среду содержащую индуктор, удаляют, и клетки промывают дважды 200 мкл буферного раствора КгеЬз-Неп8е1е11, содержащего НЕРЕ8 (№2-гидроксиэтилпиперазин-№2-этансульфокислота) с концентрацией 12 мМ, рН 7,4 (КН-буферный раствор). Затем измеряют индукцию СУР3А4 по активности с использованием тестостерона в качестве субстрата и по уровням мРНК. Для измерения активности СУР3А4, добавляют свежеприготовленный КН-буферный раствор с добавлением тестостерона в концентрации 200 мМ и клетки инкубируют в течение 30 мин при 37°С. В конце периода инкубации среду удаляют и анализируют посредством НРБС/М8 (высокоэффективная жидкостная хроматография/Массспектрометрия) с целью определения 6-бета-гидрокси-тестостерона. Максимальную индукцию (100% индукцию) определяют при обработке Рифампицином с концентрацией 10 мМ. Потенциал тестовых соединений, вызывающий индукцию СУР3А, описывают в виде процента максимальной индукции, полученной с классическим индуктором. Для определения уровня мРНК собирают гепатоциты и получают тотальную РНК с использованием набора ^^адеп Впеазу РипВсапоп Κίΐ (М1зз1ззаида, ΟΝ) в соответствии с инструкциями производителя. Комплементарные ДНК гепатоцитов синтезируют из тотальной РНК с
- 12 016457 использованием обратной транскриптазы М-МЬУ (обратная транскриптаза вируса лейкоза мышей Молони) (1пуйгодеп, Саг1Ьаб, СА) с универсальным праймером (Косйе И1адпо8!1с, Сегтапу). Анализ экспрессии определенной мРНК в образцах тотальной РНК осуществляют посредством количественной полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени с использованием тест-системы для определения нуклеотидных последовательностей АВ1 РК18М 7700 8ециепсе Ое1ес11оп 8у§!ет. Использованные праймеры для СУР3А4 представляют собой 5'-ТСА ОСС ТСС ТСС ТСС ТСТ АТС ТАТ-3' в качестве прямого праймера и 5'-ААС ССС ТТА ТСС ТАС САС ААА АТА ТТТ-3' в качестве обратного праймера. Использованная проба представляет собой 5'-/56-ЕАМ/ТСС АСС ССС САС АСС ТСТ ССС Т/36-ТАМ8р/-3'. Данные нормализуют по рибосомной 188 мРНК (У1С) с определением в реальном времени. Анализ данных и статистические тесты выполняют с использованием программного обеспечения М1сго§ой Ехсе1. Результаты могут быть представлены в виде экспрессии гена изменения фолдинга (способа укладки) молекулы белка в сравнении с контрольной группой в соответствии со следующей формулой:
ДС! = С! ЕАМ - С! У1С,
ДДС! = ДС! (потенциальное лекарство) - ДС! (контрольная группа).
Индукция фолдинга: 2 - ДДС!.
Вышеупомянутые примеры могут быть повторены с подобным успехом при замене реагентов и/или условий эксперимента, использованных в вышеупомянутых примерах, описанными в общем или описанными конкретно реагентами и/или условиями эксперимента этого изобретения.
Исходя из предшествующего описания, специалист в данной области может легко выявить существенные характеристики этого изобретения и, не выходя за рамки его сущности и объема, может сделать различные изменения и модификации изобретения с тем, чтобы адаптировать его к различным применениям и условиям/состояниям.

Claims (12)

1. Соединение, представляющее собой или его фармацевтически приемлемая соль.
2. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по п.1 и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.
3. Фармацевтическая комбинация, содержащая соединение по п.1 и по меньшей мере один дополнительный агент.
4. Фармацевтическая комбинация по п.3, где указанный по меньшей мере один дополнительный агент выбирают из ингибиторов вирусной сериновой протеазы, ингибиторов вирусной полимеразы, ингибиторов вирусной геликазы, иммуномодулирующих агентов, антиоксидантов, антибактериальных агентов, терапевтических вакцин, гепатопротекторов, антисмысловых агентов, ингибиторов протеазы N82/3 вируса НСУ и ингибиторов участка внутренней посадки рибосомы (1ИЕ8).
5. Фармацевтическая комбинация по п.4, где указанный по меньшей мере один дополнительный агент выбирают из рибавирина и интерферона-α.
6. Фармацевтическая комбинация по п.4, где указанный по меньшей мере один дополнительный агент выбирают из рибавирина и пегилированного интерферона-α.
7. Применение соединения по п.1 для лечения вирусной инфекции гепатита С у носителя вируса.
8. Применение по п.7, где упомянутым носителем вируса является человек.
9. Фармацевтически приемлемая соль соединения
СНз
10. Соединение
11. Фармацевтическая комбинация, включающая:
а) соединение
b) пегилированный интерферон-α и
c) рибавирин.
12. Применение терапевтически эффективного количества фармацевтической комбинации, включающей:
а) соединение
b) пегилированный интерферон-α и
c) рибавирин, для лечения вирусной инфекции гепатита С у носителя вируса.
О Евразийская патентная организация, ЕАПВ
Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
EA200970478A 2006-11-15 2007-11-15 Аналог тиофена для лечения вирусной инфекции гепатита с EA016457B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US85893906P 2006-11-15 2006-11-15
PCT/CA2007/002064 WO2008058393A1 (en) 2006-11-15 2007-11-15 Thiophene analogues for the treatment or prevention of flavivirus infections

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200970478A1 EA200970478A1 (ru) 2009-12-30
EA016457B1 true EA016457B1 (ru) 2012-05-30

Family

ID=39401287

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200970478A EA016457B1 (ru) 2006-11-15 2007-11-15 Аналог тиофена для лечения вирусной инфекции гепатита с
EA201101492A EA201101492A1 (ru) 2006-11-15 2007-11-15 Аналоги тиофена для лечения или предупреждения флавивирусных инфекций

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201101492A EA201101492A1 (ru) 2006-11-15 2007-11-15 Аналоги тиофена для лечения или предупреждения флавивирусных инфекций

Country Status (26)

Country Link
US (3) US8003685B2 (ru)
EP (3) EP2559692A1 (ru)
JP (2) JP5290186B2 (ru)
KR (1) KR20090086081A (ru)
CN (3) CN102675279A (ru)
AP (1) AP2579A (ru)
AU (1) AU2007321677B2 (ru)
BR (1) BRPI0718915A2 (ru)
CA (1) CA2670260A1 (ru)
CO (1) CO6180430A2 (ru)
DK (1) DK2104674T3 (ru)
EA (2) EA016457B1 (ru)
EC (1) ECSP099319A (ru)
ES (1) ES2423219T3 (ru)
HK (2) HK1136562A1 (ru)
HR (1) HRP20130658T1 (ru)
IL (1) IL198751A0 (ru)
MX (1) MX2009005185A (ru)
NO (1) NO20092038L (ru)
NZ (2) NZ576780A (ru)
PL (1) PL2104674T3 (ru)
PT (1) PT2104674E (ru)
RS (1) RS52874B (ru)
SG (1) SG176488A1 (ru)
SI (1) SI2104674T1 (ru)
WO (1) WO2008058393A1 (ru)

Families Citing this family (36)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP5030947B2 (ja) 2005-05-13 2012-09-19 ヴァイロケム・ファーマ・インコーポレーテッド フラビウイルス感染の治療及び予防のための化合物及び方法
JP2012502906A (ja) * 2008-09-17 2012-02-02 ネクター セラピューティックス オリゴマー−プロテアーゼ阻害剤コンジュゲート
BRPI0922364A2 (pt) 2008-12-03 2017-08-29 Presidio Pharmaceuticals Inc Composto, composição farmacêutica e uso de um composto
UY32793A (es) * 2009-07-21 2011-01-31 Gilead Sciences Inc Compuestos inhibidores de los virus flaviviridae, composición farmacéutica que los contiene y sus usos
KR20120081123A (ko) 2009-09-09 2012-07-18 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 플라비비리대 바이러스의 억제제
MX2012006026A (es) * 2009-11-25 2012-08-15 Vertex Pharma Derivados de acido 5-alquinil-tiofen-2-carboxilico y usos para tratamiento o prevencion de infecciones por flavivirus.
MX2012007076A (es) * 2009-12-18 2012-07-20 Boehringer Ingelheim Int Terapia combinada de hcv.
AP3576A (en) 2010-01-15 2016-02-08 Gilead Sciences Inc Inhibitors of flaviviridae viruses
JP5777223B2 (ja) 2010-01-15 2015-09-09 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド フラビウイルス科ウイルスのインヒビター
AU2011210795A1 (en) 2010-01-29 2012-08-02 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Therapies for treating Hepatitis C virus infection
EP2575475A4 (en) * 2010-05-28 2013-11-27 Presidio Pharmaceuticals Inc HCV NS5A INHIBITORS
EP2582717A2 (en) 2010-06-15 2013-04-24 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Hcv ns5b polymerase mutants
EP2585447A2 (en) 2010-06-28 2013-05-01 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compounds and methods for the treatment or prevention of flavivirus infections
WO2012006060A1 (en) 2010-06-28 2012-01-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compounds and methods for the treatment or prevention of flavivirus infections
WO2012006070A1 (en) * 2010-06-28 2012-01-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compounds and methods for the treatment or prevention of flavivirus infections
BR112013001516A2 (pt) 2010-07-22 2016-06-07 Novartis Ag compostos de tiofeno 2,3,5-trissubstituídos e empregos destes
MX2013001869A (es) 2010-08-17 2013-06-28 Vertex Pharma Compuestos y metodos para el tratamiento o prevencion de infecciones virales por flaviviridae.
US8822520B2 (en) 2010-09-22 2014-09-02 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Substituted bicyclic HCV inhibitors
US8771665B2 (en) 2010-12-17 2014-07-08 Cocrystal Discovery, Inc. Inhibitors of hepatitis C virus polymerase
US9296719B2 (en) * 2011-07-08 2016-03-29 Indiana University Research And Technology Corporation Compositions and methods for the treatment of norovirus infection
WO2013010112A1 (en) 2011-07-13 2013-01-17 Gilead Sciences, Inc. Thiophen-2-carboxylic acid derivatives useful as inhibitors of flaviviridae viruses
WO2013016501A1 (en) 2011-07-26 2013-01-31 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Formulations of thiophene compounds
WO2013016499A1 (en) 2011-07-26 2013-01-31 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Methods for preparation of thiophene compounds
US8492386B2 (en) 2011-10-21 2013-07-23 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
CA2811250C (en) 2011-10-21 2015-08-11 Abbvie Inc. Methods for treating hcv
US8466159B2 (en) 2011-10-21 2013-06-18 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
GB2506086A (en) 2011-10-21 2014-03-19 Abbvie Inc Methods for treating HCV comprising at least two direct acting antiviral agent, ribavirin but not interferon
CN103087052A (zh) * 2011-10-31 2013-05-08 上海壹志医药科技有限公司 噻吩衍生物及其药物用途
WO2014055142A1 (en) 2012-06-20 2014-04-10 Cocrystal Discovery, Inc. Inhibitors of hepatitis c virus polymerase
US8927741B2 (en) 2012-08-17 2015-01-06 Gilead Sciences, Inc. Synthesis of an antiviral compound
US8759544B2 (en) 2012-08-17 2014-06-24 Gilead Sciences, Inc. Synthesis of an antiviral compound
US8841340B2 (en) 2012-08-17 2014-09-23 Gilead Sciences, Inc. Solid forms of an antiviral compound
EP2762124A1 (en) 2013-01-31 2014-08-06 IP Gesellschaft für Management mbH Packaging comprising administration units of polymorphs, amorphous forms or solvates
TWI731854B (zh) 2015-03-23 2021-07-01 美商共結晶製藥公司 Ｃ型肝炎病毒聚合酶之抑制劑
US11192914B2 (en) 2016-04-28 2021-12-07 Emory University Alkyne containing nucleotide and nucleoside therapeutic compositions and uses related thereto
CN112203652A (zh) 2018-05-09 2021-01-08 共晶制药公司 用于治疗hcv的组合疗法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006072348A2 (de) * 2004-12-22 2006-07-13 Aicuris Gmbh & Co. Kg Alkinyl-substituierte thiophene

Family Cites Families (130)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3076817A (en) * 1963-02-05 New j-amino-thiophene-z
DE1055007B (de) 1957-08-29 1959-04-16 Dr Hans Fiesselmann Verfahren zur Herstellung von 3-Aminothiophen-2-carbonsaeureestern und den entsprechenden freien Carbonsaeuren
US3470151A (en) * 1966-05-17 1969-09-30 Beecham Group Ltd Furyl- and thienyl-penicillins and salts thereof
AU518216B2 (en) * 1977-09-06 1981-09-17 Hafslund Nycomed Pharma Aktiengesellschaft Thienothiazine derivatives
US4244205A (en) 1978-04-25 1981-01-13 Wean United Inc. Apparatus for aligning extrusion producing members of a press
DD146952A1 (de) 1979-11-09 1981-03-11 Karl Gewald Verfahren zur herstellung von substituierten 3-amino-4-cyan-5-phenylthiophenen
JPS57116077A (en) 1981-01-12 1982-07-19 Kanebo Ltd Thieno(3,2-b)pyridinecarboxylic acid derivative
GB8515207D0 (en) * 1985-06-15 1985-07-17 Boots Co Plc Therapeutic agents
GB8627698D0 (en) 1986-11-20 1986-12-17 Boots Co Plc Therapeutic agents
DD263055A1 (de) 1987-07-28 1988-12-21 Univ Dresden Tech Verfahren zur herstellung substituierter 3-amino-5-phenyl-thiophene
DE4023048A1 (de) * 1990-07-20 1992-01-23 Basf Ag Dicarbonsaeureimide, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als herbizide
JP2574085B2 (ja) 1991-10-28 1997-01-22 株式会社トクヤマ ３−アミノ−２−チオフェンカルボン酸誘導体の製造方法
FR2689129B1 (fr) 1992-03-27 1995-05-12 Atochem Elf Sa Nouveaux dérivés de l'acide 3-mercapto-2-thénoique et leurs procédés de préparation.
JPH0625221A (ja) 1992-07-10 1994-02-01 Tokuyama Soda Co Ltd ３−アミノ−２−チオフェンカルボン酸誘導体の製造方法
JPH0748360A (ja) 1993-05-31 1995-02-21 Yoshitomi Pharmaceut Ind Ltd ビフェニルテトラゾール誘導体
EP0658559A1 (de) * 1993-12-14 1995-06-21 Chemisch Pharmazeutische Forschungsgesellschaft m.b.H. Thienothiazinderivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als 5-dipoxygenase und Cyclooxygenaseinhibitoren
DE19522603A1 (de) * 1995-06-19 1997-01-09 Siemens Ag Schutzeinrichtung gegen Überlastung der Schaltkontakte eines Schaltgerätes
JPH10507205A (ja) * 1995-08-02 1998-07-14 ホータ．ウリアッヒ イ シイア．エセ．アー． 抗真菌活性を有する新規カルボンアミド
KR100423590B1 (ko) * 1995-08-02 2004-09-10 호따. 우리아치에씨아. 에세. 아. 항진균활성을갖는신규피리미돈유도체
HU227742B1 (en) 1996-10-18 2012-02-28 Vertex Pharma Inhibitors of serine proteases, particularly hepatitis c virus ns3 protease
JP4000608B2 (ja) * 1996-11-07 2007-10-31 トヨタ自動車株式会社 水素製造充填装置および電気自動車
TW523506B (en) * 1996-12-18 2003-03-11 Ono Pharmaceutical Co Sulfonamide or carbamide derivatives and drugs containing the same as active ingredients
AU6959898A (en) * 1997-04-11 1998-11-11 David J. Grainger Compounds and therapies for the prevention of vascular and non-vascular pathol ogies
TR200101905T2 (tr) * 1997-04-28 2002-06-21 Texas Biotechnology Corporation Endotelin ile ilgili hastalıkların tedavisinde kullanılan sülfanoamidler.
US5783705A (en) * 1997-04-28 1998-07-21 Texas Biotechnology Corporation Process of preparing alkali metal salys of hydrophobic sulfonamides
US6344476B1 (en) * 1997-05-23 2002-02-05 Bayer Corporation Inhibition of p38 kinase activity by aryl ureas
US6187799B1 (en) * 1997-05-23 2001-02-13 Onyx Pharmaceuticals Inhibition of raf kinase activity using aryl ureas
DE69829381T2 (de) 1997-08-11 2006-04-13 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd., Laval Hepatitis c inhibitor peptide
ATE283865T1 (de) 1997-08-11 2004-12-15 Boehringer Ingelheim Ca Ltd Peptidanaloga mit inhibitorischer wirkung auf hepatitis c
WO1999011647A1 (fr) * 1997-09-02 1999-03-11 Yoshitomi Pharmaceutical Industries, Ltd. Composes thiophene condenses et leur utilisation en medecine
US6140351A (en) * 1997-12-19 2000-10-31 Berlex Laboratories, Inc. Ortho-anthranilamide derivatives as anti-coagulants
US7329670B1 (en) * 1997-12-22 2008-02-12 Bayer Pharmaceuticals Corporation Inhibition of RAF kinase using aryl and heteroaryl substituted heterocyclic ureas
AU2003204708B2 (en) 1997-12-22 2006-05-25 Bayer Healthcare Llc Inhibition of Raf Kinase using Substituted Heterocyclic Ureas
US6291514B1 (en) * 1998-02-09 2001-09-18 3-Dimensional Pharmaceuticals, Inc. Heteroaryl amidines, methylamidines and guanidines, preparation thereof, and use thereof as protease inhibitors
US6262044B1 (en) * 1998-03-12 2001-07-17 Novo Nordisk A/S Modulators of protein tyrosine phosphatases (PTPASES)
US20050119332A1 (en) * 1998-03-12 2005-06-02 Lone Jeppesen Substituted thiophene compounds as modulators of protein tyrosine phosphatases (PTPases)
US6214879B1 (en) * 1998-03-24 2001-04-10 Virginia Commonwealth University Allosteric inhibitors of pyruvate kinase
US6689754B1 (en) * 1998-04-10 2004-02-10 G. D. Searle & Co. Heterocyclic glycyl β-alanine derivatives
DK0957099T3 (da) * 1998-04-15 2003-03-17 Pfizer Prod Inc Heterocykliske carboxamider
EP0960882A1 (en) * 1998-05-19 1999-12-01 Hoechst Marion Roussel Deutschland GmbH Thienyl substituted acylguanidines as inhibitors of bone resorption and vitronectin receptor antagonists
US6858223B2 (en) * 1998-06-23 2005-02-22 Altana Pharma Ag Compositions comprising phenylaminothiophenacetic acid derivatives for the treatment of acute or adult respiratory distress syndrome (ARDS) and infant respiratory distress syndrome (IRDS)
AU4385399A (en) * 1998-06-29 2000-01-17 Biochem Pharma Inc. Thiophene and furan 2,5-dicarboxamides useful in the treatment of cancer
JP2003525200A (ja) 1998-07-27 2003-08-26 イスティトゥト ディ リチェルケ ディ ビオロジア モレコラーレ ピー．アンジェレッティ ソチエタ ペル アツィオニ ポリメラーゼ阻害剤としてのジケト酸誘導体
AR022061A1 (es) 1998-08-10 2002-09-04 Boehringer Ingelheim Ca Ltd Peptidos inhibidores de la hepatitis c, una composicion farmaceutica que los contiene, el uso de los mismos para preparar una composicion farmaceutica, el uso de un producto intermedio para la preparacion de estos peptidos y un procedimiento para la preparacion de un peptido analogo de los mismos.
US6323180B1 (en) 1998-08-10 2001-11-27 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd Hepatitis C inhibitor tri-peptides
US7101878B1 (en) * 1998-08-20 2006-09-05 Agouron Pharmaceuticals, Inc. Non-peptide GNRH agents, methods and intermediates for their preparation
DE19903398A1 (de) 1999-01-29 2000-08-10 Hassan Jomaa Verwendung von Thiadiazolderivaten zur prophylaktischen und therapeutischen Behandlung von Infektionen
EP1152759A2 (en) * 1999-02-09 2001-11-14 3-Dimensional Pharmaceuticals, Inc. METHODS OF TREATING C1s-MEDIATED DISEASES AND CONDITIONS, AND COMPOUNDS AND COMPOSITIONS THEREFOR
ATE278674T1 (de) * 1999-03-12 2004-10-15 Boehringer Ingelheim Pharma Heterocyklischer harnstoff und verwandte verbindungen als entzündungshemmende mittel
WO2000055152A1 (en) * 1999-03-12 2000-09-21 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Aromatic heterocyclic compounds as anti-inflammatory agents
UA74546C2 (en) 1999-04-06 2006-01-16 Boehringer Ingelheim Ca Ltd Macrocyclic peptides having activity relative to hepatitis c virus, a pharmaceutical composition and use of the pharmaceutical composition
JP2001010957A (ja) 1999-04-28 2001-01-16 Sankyo Co Ltd 肝障害の予防または抑制剤
DE19920247A1 (de) 1999-05-03 2000-11-16 Hassan Jomaa Arzneimittel mit einem Gehalt an Verbindungen mit einem Stickstoff-Sauerstoff-Heterocyclus als Wirkstoff und ihre Verwendung
HN2000000051A (es) * 1999-05-19 2001-02-02 Pfizer Prod Inc Derivados heterociclicos utiles como agentes anticancerosos
US6867217B1 (en) * 1999-05-19 2005-03-15 Pharmacia Corporation Substituted polycyclic aryl and heteroaryl pyridones useful for selective inhibition of the coagulation cascade
GB9929552D0 (en) * 1999-12-14 2000-02-09 Proteus Molecular Design Compounds
AU7446600A (en) 1999-10-01 2001-05-10 Japan Energy Corporation Novel diarylamide derivatives and use thereof as medicines
NZ518697A (en) * 1999-11-29 2004-02-27 Novartis Ag Pesticidal N-heteroaryl alpha-alkoximino-carboxamides
CN1623984A (zh) 1999-12-27 2005-06-08 日本烟草产业株式会社 稠环化合物及其药物用途
DE10002424A1 (de) * 2000-01-20 2001-07-26 Siemens Ag Di(het)arylaminothiophen-Derivate
GB0003154D0 (en) * 2000-02-12 2000-04-05 Astrazeneca Uk Ltd Novel compounds
MY138097A (en) * 2000-03-22 2009-04-30 Du Pont Insecticidal anthranilamides
WO2001085172A1 (en) 2000-05-10 2001-11-15 Smithkline Beecham Corporation Novel anti-infectives
MY164523A (en) 2000-05-23 2017-12-29 Univ Degli Studi Cagliari Methods and compositions for treating hepatitis c virus
JP2001354658A (ja) 2000-06-15 2001-12-25 Taisho Pharmaceut Co Ltd ヒドロキシホルムアミジン化合物及びその塩並びにそれらを含む医薬
US6414013B1 (en) * 2000-06-19 2002-07-02 Pharmacia & Upjohn S.P.A. Thiophene compounds, process for preparing the same, and pharmaceutical compositions containing the same background of the invention
GB0017676D0 (en) 2000-07-19 2000-09-06 Angeletti P Ist Richerche Bio Inhibitors of viral polymerase
SV2003000617A (es) 2000-08-31 2003-01-13 Lilly Co Eli Inhibidores de la proteasa peptidomimetica ref. x-14912m
MXPA03004016A (es) * 2000-11-08 2004-02-12 Syngenta Participations Ag Pirrolcarboxamidas y pirrolcarbotioamidas y sus usos agroquimicos.
US7015223B1 (en) * 2000-11-20 2006-03-21 Pharmacia Corporation Substituted polycyclic aryl and heteroaryl 1,2,4-triazinones useful for selective inhibition of the coagulation cascade
DE60119968T2 (de) 2000-11-20 2007-01-18 Bristol-Myers Squibb Co. Hepatitis c tripeptid inhibitoren
US6892279B2 (en) * 2000-11-30 2005-05-10 Mosaid Technologies Incorporated Method and apparatus for accelerating retrieval of data from a memory system with cache by reducing latency
DE10061876A1 (de) * 2000-12-12 2002-06-20 Aventis Pharma Gmbh Arylierte Furan- und Thiophencarbonsäureamide, Verfahren zu ihrer Herstellung, ihre Verwendung als Medikament sowie sie enthaltende pharmazeutische Zubereitungen
EP2399588B1 (en) 2001-01-22 2020-04-29 Merck Sharp & Dohme Corp. Nucleoside derivatives as inhibitors of rna-dependent rna viral polymerase
US20030165873A1 (en) 2001-03-02 2003-09-04 Come Jon H. Three hybrid assay system
US20040102324A1 (en) * 2002-02-28 2004-05-27 Annis Gary David Heterocyclic diamide invertebrate pest control agents
AU2002252183A1 (en) 2001-03-06 2002-09-19 Biocryst Pharmaceuticals, Inc. Nucleosides, preparation thereof and use as inhibitors of rna viral polymerases
US6734207B2 (en) * 2001-04-20 2004-05-11 Parker Hughes Institute Cytotoxic compounds
EP1256628A3 (en) 2001-05-10 2003-03-19 Agouron Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c virus (hcv) ns5b rna polymerase and mutants thereof
US6713638B2 (en) * 2001-05-18 2004-03-30 Joel M. Linden 2-amino-3-aroyl-4,5 alkylthiophenes: agonist allosteric enhancers at human A1 adenosine receptors
AR036081A1 (es) 2001-06-07 2004-08-11 Smithkline Beecham Corp Compuesto de 1,2-dihidroquinolina, su uso para preparar una composicion farmaceutica, metodos para prepararlo y compuestos del acido 2-aminobenzoico n-alquilado de utilidad como intermediarios en dichos metodos
PT1401825E (pt) 2001-06-11 2009-10-23 Virochem Pharma Inc Compostos e métodos para o tratamento ou para a prevenção de infecções com flavivírus
JP2005500287A (ja) 2001-06-11 2005-01-06 シャイアー バイオケム インコーポレイテッド Ｆｌａｖｉｖｉｒｕｓ感染の処置または予防のための化合物および方法
SE0102102D0 (sv) * 2001-06-13 2001-06-13 Hoeganaes Ab High density stainless steel products and method for the preparation thereof
AR035543A1 (es) 2001-06-26 2004-06-16 Japan Tobacco Inc Agente terapeutico para la hepatitis c que comprende un compuesto de anillo condensado, compuesto de anillo condensado, composicion farmaceutica que lo comprende, compuestos de benzimidazol, tiazol y bifenilo utiles como intermediarios para producir dichos compuestos, uso del compuesto de anillo con
SE0102617D0 (sv) * 2001-07-25 2001-07-25 Astrazeneca Ab Novel compounds
EP2335700A1 (en) 2001-07-25 2011-06-22 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis C virus polymerase inhibitors with a heterobicylic structure
SE0102616D0 (sv) * 2001-07-25 2001-07-25 Astrazeneca Ab Novel compounds
US6689854B2 (en) 2001-08-23 2004-02-10 3M Innovative Properties Company Water and oil repellent masonry treatments
JP2003073357A (ja) 2001-09-03 2003-03-12 Mitsubishi Pharma Corp アミド化合物を含有するＲｈｏキナーゼ阻害剤
US6924276B2 (en) * 2001-09-10 2005-08-02 Warner-Lambert Company Diacid-substituted heteroaryl derivatives as matrix metalloproteinase inhibitors
EP1429759A4 (en) 2001-09-26 2004-12-15 Bristol Myers Squibb Co COMPOUNDS FOR TREATING HEPATITIS C VIRUS
JP2005506334A (ja) * 2001-10-04 2005-03-03 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション ＮＦ−κＢ阻害剤
US7220777B2 (en) * 2001-10-15 2007-05-22 Smithkline Beecham P.L.C. Lactam derivatives as antagonists for human 11cby receptors
US7285557B2 (en) * 2001-10-15 2007-10-23 Smithkline Beecham P.L.C. Pyrimidinones as melanin concentrating hormone receptor 1
ATE539744T1 (de) 2001-10-24 2012-01-15 Vertex Pharma Hemmer von serin-protease, insbesondere von hepatitis-c-virus-ns3-ns4a-protease, mit einem kondensierten ringsystem
TWI281916B (en) * 2001-10-25 2007-06-01 Lilly Co Eli Antitumor compounds and methods
AU2002352443A1 (en) * 2001-12-21 2003-07-15 Consejo Superior De Investigaciones Cientificas Compounds and their therapeutic use related to the phosphorylating activity of the enzyme gsk-3
US6835745B2 (en) * 2002-01-15 2004-12-28 Wyeth Phenyl substituted thiophenes as estrogenic agents
WO2003068223A1 (en) * 2002-02-11 2003-08-21 Bayer Corporation Aryl ureas with raf kinase and angiogenesis inhibiting activity
PL373399A1 (en) 2002-04-11 2005-08-22 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of serine proteases, particularly hcv ns3-ns4a protease
US7109354B2 (en) * 2002-05-28 2006-09-19 3-Dimensional Pharmaceuticals, Inc. Thiophene amidines, compositions thereof, and methods of treating complement-mediated diseases and conditions
CN1155679C (zh) 2002-09-20 2004-06-30 华南理工大学 含低聚噻吩骨格的液晶化合物及其制备方法
US7179836B2 (en) * 2002-09-20 2007-02-20 Smithkline Beecham Corporation Chemical compounds
US20040162285A1 (en) * 2002-11-01 2004-08-19 Pratt John K. Anti-infective agents
US7902203B2 (en) * 2002-11-01 2011-03-08 Abbott Laboratories, Inc. Anti-infective agents
US20050075331A1 (en) * 2003-10-06 2005-04-07 Pratt John K. Anti-infective agents
US20040097492A1 (en) 2002-11-01 2004-05-20 Pratt John K Anti-infective agents
BR0315897A (pt) 2002-11-01 2008-05-13 Abbott Lab agentes antiinfecciosos
DE10253220A1 (de) * 2002-11-15 2004-05-27 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Neue Dihydroxy-Methyl-Phenyl-Derivate, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung als Arzneimittel
ES2345438T3 (es) 2002-12-10 2010-09-23 Virochem Pharma Inc. Compuestos y metodos para el tratamiento o prevencion de infecciones por flavivirus.
EP1569929B9 (en) 2002-12-10 2011-09-14 Virochem Pharma Inc. Compounds and methods for the treatment or prevention of flavivirus infections
US20040192707A1 (en) 2002-12-10 2004-09-30 Laval Chan Chun Kong Compounds and methods for the treatment or prevention of Flavivirus infections
US7098241B2 (en) * 2002-12-16 2006-08-29 Hoffmann-La Roche Inc. Thiophene hydroxamic acid derivatives
US7196114B2 (en) * 2003-02-17 2007-03-27 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Substituted 3-(benzoylureido) thiophene derivatives, processes for preparing them and their use
WO2004092161A1 (en) 2003-04-11 2004-10-28 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of serine proteases, particularly hcv ns3-ns4a protease
ES2381548T3 (es) 2003-04-11 2012-05-29 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibidores de serina proteasas, particularmente de la proteasa VHC NS3-NS4A
CN101724022A (zh) 2003-07-18 2010-06-09 沃泰克斯药物股份有限公司 丝氨酸蛋白酶抑制剂、特别是hcv ns3-ns4a蛋白酶抑制剂
UY28500A1 (es) 2003-09-05 2005-04-29 Vertex Pharma Inhibidores de proteasas de serina, en particular proteasa ns3-ns4a del vhc.
US20050119189A1 (en) 2003-09-18 2005-06-02 Cottrell Kevin M. Inhibitors of serine proteases, particularly HCV NS3-NS4A protease
TW200512181A (en) * 2003-09-26 2005-04-01 Tanabe Seiyaku Co Amide-type carboxamide derivatives
DE10359791A1 (de) * 2003-12-19 2005-07-21 Bayer Healthcare Ag Substituierte Thiophene
JP2008505849A (ja) 2004-02-04 2008-02-28 バーテックス　ファーマシューティカルズ　インコーポレイテッド セリンプロテアーゼ、特に、ｈｃｖ、ｎｓ３−ｎｓ４ａプロテアーゼの阻害剤
DE602005002357T2 (de) * 2004-03-26 2008-05-29 Smithkline Beecham Corp. Als antivirale mittel geeignete 4-carboxypyrazolderivate
CN1989131A (zh) * 2004-03-30 2007-06-27 希龙公司 取代的噻吩衍生物用作抗癌药
EP1771169A1 (en) 2004-07-14 2007-04-11 PTC Therapeutics, Inc. Methods for treating hepatitis c
CA2583472A1 (en) 2004-10-01 2006-04-13 Chao Lin Hcv ns3-ns4a protease inhibition
DE102004061746A1 (de) * 2004-12-22 2006-07-06 Bayer Healthcare Ag Alkinyl-substituierte Thiophene
JP5030947B2 (ja) 2005-05-13 2012-09-19 ヴァイロケム・ファーマ・インコーポレーテッド フラビウイルス感染の治療及び予防のための化合物及び方法
US20100160255A1 (en) * 2005-07-29 2010-06-24 Takeda Pharmaceutical Company Limited Spiro-cyclic compound

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006072348A2 (de) * 2004-12-22 2006-07-13 Aicuris Gmbh & Co. Kg Alkinyl-substituierte thiophene

Also Published As

Publication number Publication date
CN102675279A (zh) 2012-09-19
HK1138569A1 (en) 2010-08-27
US8269014B2 (en) 2012-09-18
BRPI0718915A2 (pt) 2013-12-03
JP2012006966A (ja) 2012-01-12
CN101568538A (zh) 2009-10-28
US8658674B2 (en) 2014-02-25
DK2104674T3 (da) 2013-07-15
AU2007321677B2 (en) 2013-04-11
US20120059170A1 (en) 2012-03-08
MX2009005185A (es) 2009-07-07
CA2670260A1 (en) 2008-05-22
AP2579A (en) 2013-01-29
CN101568538B (zh) 2012-09-05
EP2104674A4 (en) 2010-03-17
AP2009004859A0 (en) 2009-06-30
HK1136562A1 (en) 2010-07-02
RS52874B (en) 2013-12-31
EA201101492A1 (ru) 2012-09-28
NZ596922A (en) 2013-03-28
ES2423219T3 (es) 2013-09-18
CO6180430A2 (es) 2010-07-19
US20080299080A1 (en) 2008-12-04
KR20090086081A (ko) 2009-08-10
ECSP099319A (es) 2009-07-31
EP2104674B1 (en) 2013-05-01
EA200970478A1 (ru) 2009-12-30
AU2007321677A1 (en) 2008-05-22
US20120301430A1 (en) 2012-11-29
PL2104674T3 (pl) 2013-12-31
IL198751A0 (en) 2010-02-17
HRP20130658T1 (en) 2013-09-30
SG176488A1 (en) 2011-12-29
WO2008058393A1 (en) 2008-05-22
EP2559692A1 (en) 2013-02-20
CN102250074A (zh) 2011-11-23
SI2104674T1 (sl) 2013-09-30
PT2104674E (pt) 2013-07-26
JP5290186B2 (ja) 2013-09-18
EP2104674B8 (en) 2013-10-02
EP2104674A1 (en) 2009-09-30
EP2559691A1 (en) 2013-02-20
US8003685B2 (en) 2011-08-23
JP2010509376A (ja) 2010-03-25
NZ576780A (en) 2011-12-22
NO20092038L (no) 2009-08-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA016457B1 (ru) Аналог тиофена для лечения вирусной инфекции гепатита с
JP2020090536A (ja) フィロウイルス科ウイルス感染症を処置するための方法
JP6104504B2 (ja) ヌクレオシド類似体
JP2023526179A (ja) ヌクレオシド類似体またはヌクレオシド類似体を含有する併用製剤の抗ウイルスにおける使用
US20050009775A1 (en) Nucleoside compounds in hcv
EP1321463B1 (en) Thiazole derivatives and their use for the treatment or prevention of Flavivirus infections
AU2024205205A1 (en) Methods for treating SARS CoV-2 infections
CA2389745C (en) Method for the treatment or prevention of flaviviridae viral infection using nucleoside analogues
EA012650B1 (ru) ПРИМЕНЕНИЕ [D-MeAla]-[EtVal]-ЦИКЛОСПОРИНА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ИНФЕКЦИИ ГЕПАТИТА С И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, ВКЛЮЧАЮЩАЯ [D-MeAla]-[EtVal]-ЦИКЛОСПОРИН
IL217228A (en) Compounds of Type 2&#39;-Deoxy-2&#39;-Fluoro-2&#39;-c-Methyluridine Nucleoside Phosphoramide Compounds
US20110171174A1 (en) Synergistic Combinations of a Macrocyclic Inhibitor of HCV and a Nucleoside
EA030189B1 (ru) Аналоги 2&#39;-хлоронуклеозидов для инфекции вгс
CN102119167A (zh) 核苷环状磷酸酯
TW201136945A (en) Purine nucleoside phosphoramidate
JP2009524585A (ja) ウイルス感染を処置するためのジアリールウレア
JP2020203947A (ja) Ｎｓ５ａ、ｎｓ５ｂまたはｎｓ３阻害剤を使用する、ｂ型肝炎ウイルス感染症を処置するための方法
US20070099855A1 (en) Glycyrrhizin or derivatives thereof for for treating or preventing severe acute respiratory syndrome (sars)
US20230277575A1 (en) Nucleoside Analogues to Inhibit the Main Protease of a Coronavirus
KR20220023204A (ko) 섬유아세포 성장인자 11을 유효성분으로 포함하는 항바이러스 조성물
WO2005032576A1 (ja) Ｃ型肝炎治療剤
WO2024114709A1 (en) A crystal form of a fused heterocycle derivative compound
JP2023128167A (ja) 抗ウイルス剤
JP2021134181A (ja) 抗ｂ型肝炎ウイルス剤
CN116510017A (zh) Trpv4抑制剂在慢性乙型肝炎、肝纤维化、肝癌的治疗中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM RU