DK176524B1 - Blandinger af sulfaterede polysaccharider samt fremstilling og anvendelse deraf - Google Patents
Blandinger af sulfaterede polysaccharider samt fremstilling og anvendelse deraf Download PDFInfo
- Publication number
- DK176524B1 DK176524B1 DK199101243A DK124391A DK176524B1 DK 176524 B1 DK176524 B1 DK 176524B1 DK 199101243 A DK199101243 A DK 199101243A DK 124391 A DK124391 A DK 124391A DK 176524 B1 DK176524 B1 DK 176524B1
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- molecular weight
- process according
- heparin
- mixtures
- ester
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
- C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
- C08B37/0075—Heparin; Heparan sulfate; Derivatives thereof, e.g. heparosan; Purification or extraction methods thereof
- C08B37/0078—Degradation products
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
Description
DK 176524 B1 BLANDINGER AF SOLFATEREDE POLYSACCHARIDER SAMT FREMSTILLING OG ANVENDELSE DERAF.
Den foreliggende opfindelse angår poiysaccharider med lav molekylvægt, 5 især hepariner med lav molekylvægt.
Hepariner er biologiske stoffer udvundet ved ekstraktion, som hører til familien af glycosaminoglycaner, og de er anvendelige på grund af deres antskoa-guierende og antlthrombotiske virkninger. De anvendes især ved behandling 10 af venethromboser efter operationer. I nativ form har hepariner imidlertid visse ulemper, som begrænser deres anvendelse. Således kan den antikoagu-ierende virkning fremkalde blødninger, og følsomheden overfor visse serum-faktorer, såsom pf4, nødvendiggør anvendelse af relativt høje doser. Det er altså nødvendigt at forøge den antithrombotiske virkning, som især tilskrives 15 antiprothrombinase, på bekostning af den antikoagulerende virkning, som tilskrives antithrombinvlrkning.
Til dette formål er der blevet foreslået fragmentering af hepariner til molekyler med lavere molekylvægte. I EP patentskrift nr. 40.144 beskrives således 20 blandinger af sulfaterede poiysaccharider med samme generelle struktur som de poiysaccharider, der indgår i heparin, idet disse poiysaccharider Indeholder en ethyienisk dobbeltbinding ved en af kædeendeme og har en gennemsnitsmolekylvægt efter vægt på mellem 2000 og 10.000 dalton. Disse blandinger fås ved depolymerisation og forsæbning af en heparinester. Det er 25 anført, at blandingerne har en hø) antithrombotisk virkning og en total antikoagulerende virkning, som er lavere end virkningen af heparin.
Et af hovedproblemerne med hepariner egjrt de e^meget heterogene pro-_ dukter. Det er altså svært at vurdere det bidrag, som hver heparintype giver 30 til heparinproduktets virkning, det er svært at bestemme heparintypernes opførsel under depolymerisationen, og det er svært at kontrollere heparintypernes struktur og egenskaber i slutprodukterne. Af disse grunde har de ovenfor nævnte problemer ikke kunnet løses på en fuldstændig tilfredsstillende må- » DK 176524 B1 2 de. De ovenfor beskrevne fremgangsmåder, især fremgangsmåden beskrevet i EP patentskrift nr. 40.144, gør det ikke muligt at få blandinger med ønskede farmakologiske egenskaber, dvs. en tilstrækkeligt bøj halveringstid i plasma, en tilstrækkeligt høj absorptionshastighed, en god biologisk tiigæn-5 geiighed og en Sav "clearance".
Der er også blevet beskrevet andre fremgangsmåder til fragmentering af heparin med henblik på at formindske de uønskede virkninger (Johnson et al., Thrombos. Haemostas. Stuttg,, 1978, 35, 588; Lane et al., Thrombosis Re~ 10 search 18, 651; US patenlskrift nr. 3.786.167). Alle disse publikationer synes at vise, at den ønskede virkning fremmes, når heparinets fragmenteringsgrad forøges (se også EP patentpoblikation nr. 301.618, som beskriver pentasac-charider med antithrombotisk virkning).
15 Nyligt gennemførte undersøgelser af hepariners virkningsmekanisme ved dannelse af thrombin har vist, at hepariners virkning in vitro påvirkes af gennemsnitsmolekylvægten (Beguin et al, Thromb, Haemost., 61, 30, 1989). Forfatterne angiver, at hepariner med lav molekylvægt fremfor alt har en an-tiprothrombinase-virkning, og at hepariner med højere molekylvægt har en 20 antithrombin-virkning.
Det er også blevet foreslået at fraktionere hepariner til udvinding af blandinger med mere homogen gennemsnitsmolekylvægt. S EP patentpublikation nr. 337.327 beskrives således en fremgangsmåde til fremstilling af ollgosaccha-25 ridfragmenter afledt af heparin, og denne fremgangsmåde muliggør fremstilling af blandinger med formindsket molekyivægtspredning. ifølge denne fremgangsmåde fjernes først fraktioner med en gennemsnitsmoiekylvægt på under 3000 dalton, hvilket medfører, at fragmenter indejioidende mindre end 10-18 saccharider fjernes fra slutproduktet, og fraktioner med en molekyl· 30 vægt på over 7000 dalton. Denne behandling, som har til formål at homogenisere slutproduktet, gør det ifølge opfinderne muligt at formindske den anti-koagulerende virkning under bibeholdelse af ønsket antithrombotisk virkning.
r OK 178524 B1 3
Tif trods for disse arbejder har de dannede blandinger stadig en tilbageværende blødningsfrerrskaidende virkning elier en ait for lav antithrombotisk virkning. Intet i den forpublicerede litteratur gør det muligt at bestemme hvilke egenskaber, der bør kombineres til opnåelse af en optimal biologisk virkning.
5 Den konklusion, som forfatterne til de ovenfor angivne artikler drager, er sigende: "Vi ved ikke hvilken, der er den optimale kombination af heparinets egenskaber, Nøjagtig karakterisering af forskellige præparater og sammenligning af egenskaberne med kliniske observationer kan eventuelt give et svar".
10
Det har nu vist sig, at det er muligt at opnå hepariner med fordelagtige egenskaber, især til forebyggelse og behandling af thrombotiske tilstande. Det har således uventet vist sig, at når slutproduktet indeholder både forbindelser med høj molekylvægt og forbindelser med lav molekylvægt, så udviser pro-15 duktet en bedre virkning. I modsætning til hvad der fremgår af den kendte teknik, synes det altså at være fordelagtigt, at der i siutblandingen bibeholdes forbindelser med høj molekylvægt samt en vis heterogenitet.
Fannakokinetiske undersøgelser af blandingerne ifølge opfindelsen viser, at 20 de forener meget fordelagtige egenskaber.
Blandingerne ifølge opfindelsen har især en længere halveringstid end modent heparin og andre kendte produkter. Det er desuden vigtigt at understrege, at blandingerne ifølge opfindelsen i modsætning til heparin haren halve-25 ringetid, som er uafhængig af den injicerede dosis. Dette er interessant, da den fremkaldte virkning er meget mere forudsigelig end ved anvendelse af heparin.
Hos mennesker har blandingerne ifølge opfindelsen en udmærket biologisk 30 tilgængelighed, bestemt ved hjælp af anti-Xa-aktiviteten. Således fås en værdi på ca. 30% for heparin og ca. 90% for blandingerne ifølge opfindelsen.
Dette er meget fordelagtigt, da det muliggør formindskelse af de injicerede doser og forbedring af den terapeutiske virkning.
r DK 176524 B1 4
En anden vigtig egenskab af blandingerne ifølge opfindelsen er den store absorptionshastighed. Denne egenskab gør det muligt at opnå en næsten øjeblikkelig biologisk virkning. Dette medfører en hurtigere og sikrere be-5 handling af patienten.
En anden egenskab af blandingerne ifølge opfindelsen er, at de har en lav ’’clearance” sammenlignet med modent beparin og andre kendte produkter.
Takket være den kemiske struktur, molekylvægten og sulfatindholdet udviser 10 blandingerne ifølge opfindelsen en god modstandsdygtighed mod nedbryd-ning (desufetering, hydrolyse) og eliminering, hvilket forøger blandingernes terapeutiske virkning.
Blandingerne ifølge opfindelsen udviser desuden en længere opholdstid end 15 udgangs-heparinet Denne egenskab viser sig ved en forlængelse af den tid, i hvilken produktet forbliver aktivt in vivo, og altså ved en bedre terapeutisk virkning.
Blandingerne ifølge opfindelsen har også en mindre følsomhed over for se-20 rumfaktorer, hvilket forøger virkningsvarigheden in vivo og muliggør anvendelse af lave doser.
Disse meget fordelagtige egenskaber fås ved, at man under fremstillingen regulerer visse strukturegenskaber af de tilstedeværende forbindelser og re-25 gulerer molekylvægtfordelingen. De dannede blandinger har et gunstigt forhold mellem fraktioner med høj molekylvægt og fraktioner med lav molekylvægt, hvilket giver blandingerne nødvendige antithrombotiske egenskaber med en ubetydelig biødningsfremkalriende virkning.__ _ ___ 30 De karakteristiske egenskaber udtrykkes ved hjælp af den procentuelle andel af tunge kæder respektive lette kæder og forholdet mellem blandingernes gennemsnitsmoiekylvægt efter vægt og deres gennemsnitsmolekylvægt efter antal, som afspejler molekylvægtspredningen.
r DK 176524 B1 5
Den foreliggende opfindelse angår således blandinger af sulfaterede poly-saccharlder med den samme generelle struktur som de polysaccharides der indgår i heparin, og disse blandinger er ejendommelige ved, at de har lavere 5 gennemsnitsmolekySvægt efter vægt end heparin, at de indeholder mellem 9 og 20% kæder med en molekylvægt på under 2000 dalton og mellem 5 og 20% kæder med en molekylvægt på over 8000 dalton, og at forholdet mellem gennemsnitsmolekylvægten efter vægt og gennemsnitsmolekylvægten efter antal er mellem 1,3 og 1,6.
10
Det er desuden blevet konstateret, at det er muligt at forbedre blandingernes egenskaber yderligere ved at formindske deres indhold af urenheder. De fleste hepariner indeholder sådanne urenheder som nucleinsyrer, polypeptider og forskellige polysaccharider. Blandt disse kan især nævnes chondroitinsul-15 tater, hepsransulfat og dermatansuifat. På grund af den meget høje molekylvægt, de indgående substltuenter og sulfatehngsgraden kan hver og en af disse urenheder forstyrre fremstillingen af produktet (f.eks. depolymerisatio-nen), så den endelige molekylvægtfordeling forandres. Urenhederne kan også direkte påvirke aktiviteten ved at modificere egenskaberne af de aktive 20 kæder. Sføige opfindelsen er det muligt at eliminere disse urenheder, hvorved der kan konstateres en forbedring af egenskaberne af de blandinger, som har været underkastet denne forbehandling. Virkningen af denne forbehandling kan måles ved anvendelse af dermatansuifat som urenhedsstandard.
25 Blandingerne af sulfaterede polysaccharider ifølge opfindelsen indeholder fortrinsvis mindre end 2% dermatansuifat.
Endvidere har blandingerne af sulfaterede polysaccharider ifølge opfindelsen_ fortrinsvis en gennemsnitsmolekySvægt efter vægt på mellem ca. 3500 og 30 5500 dalton.
8 DK 178524 B1 Kæderne af de sulfaterede polysaccharider, som indgår i blandingerne ifølge opfindelsen, indeholder fortrinsvis en 2-G-suifo~4~enopyranosuronsyre ved en af kædeenderne.
5 Den foreliggende opfindelsen angår også en fremgangsmåde til fremstilling af blandinger af sulfaterede polysaccharider, som har lavere gennemsnitsmolekylvægt end heparin og indeholder mellem 9 og 20% kæder med en molekylvægt på under 2000 dalton og mellem 5 og 20% kæder med en molekylvægt på over 8000 dalton, og hvori forholdet mellem gennemsnltsmoiekyl-10 vægten efter vægt og gennemsnitsmolekylvægten efter antal er mellem 1,3 og 1.6, og denne fremgangsmåde er ejendommelig ved. at den omfatter følgende trin: (a) i et første trin omdannes heparin i vandholdigt medium ti! et salt 15 deraf ved hjælp af et kvaternært ammoniumsalt med iang kæde, (b) i et andet trin forestres det dannede salt tii dannelse af en ester med en forestringsgrad på mellem 9,5 og 14%, og (c) i et tredje trin depolymeriseres den dannede ester med en forestringsgrad på mellem 9,5 og 14%.
20
Det er blevet konstateret, at man kan regulere depolymerisationsniveauet og dermed slutproduktets molekylære egenskaber ved at forestre saltet af ud-gangsheparinet til passende forestringsgrad.
25 Ifølge opfindelsen er det altså muligt direkte og på reproducerbar måde at fremstille blandinger af sulfaterede polysaccharider med de ovenfor angivne egenskaber.
Det ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen anvendte udgangsheparin er 30 fortrinsvis et svineheparin, især fra svineslimhinde. Det har vist sig, at aktiviteten af de dannede blandinger kan variere væsentligt afhængigt af ud-gangsheparinets oprindelse. Når udgangsheparinet hidrører fra kvæg, fås
P
DK 176524 B1 7 således blandinger med højere antikoagulerende virkning, end når heparinet hidrører fra grises tarmsiimbinde.
ifølge en særligt foretrukken variant af fremgangsmåden ifølge opfindelsen 5 gennemføres desuden et indledende trin ti! udfældning af udgangsheparinet ved hjæip af en alkohol. Denne forbehandling gør det muligt at formindske indholdet af urenheder af typen chondroifinsulfat og heparansuffat En alkohol, som giver gode resultater ved denne behandling, er methanol.
10 Natriumheparinets renhed kan dernæst bestemmes ved væskechromatografi med sterisk udelukkelse.
Dette Indledende trin gør det især muligt at fremstille et heparin med et indhold af dermafansulfat på mindre end 2%.
15
Saltdannelsen af heparinet gennemføres på følgende måde.
Heparinsaitet kan fremstilles ved, at et overskud af tilsvarende salt omsættes med et natriumheparin i vandholdigt medium ved en temperatur nær 20°C.
20 Det anvendte kvaternære ammoniumsalt er fortrinsvis et benzethonlumsalt, især benzethonsumchiorid, som kan omsættes med natriumheparinet.
Forestringen i det andet trin af fremgangsmåden gennemføres på følgende måde.
25
Den partielle rieparinester i form af salt, hvis forestringsgrad er på mellem 9,5 og 14%, kan fremstilles ved forestring af det kvaternære ammoniumsalt (med lang kæde) af heparin i et ehioreret organisk opløsningsmiddel i nærværelse af en chlorforbindelse. Reaktionens effektivitet kan forøges ved regulering af 30 andelene af de forskellige reaktionskomponenter, reaktionstemperaturen og reaktionstiden.
Den partielle heparinester er hensigtsmæssigt en aromatisk ester.
DK 176524 B1 8
Den anvendte chlorforbindelse er fortrinsvis benzylchlorid, og det chlorerede opløsningsmiddel er fortrinsvis chloroform eiler methylenchlorid.
5 For at forestringsgraden skat blive på mellem 9,5 og 14%, er det Især hensigtsmæssigt, at der per vægtdet heparinsalt anvendes 1 volumendei chlor-forbindelse i 3-5 voiumendete chloreret organisk opløsningsmiddel, samt at reaktionen gennemføres i løbet af 15-48 timer ved en temperatur på mellem 25 og 45°C, fortrinsvis på mellem 30 og 4G°C.
10
Ifølge en foretrukken udførelsesform foreligger den partielle heparinester i form af natriumsait
De således dannede estere kan udvindes ved udfældning ved hjælp af en 15 alkohol, især methanol, i nærværelse af natriumacetat Der anvendes fortrinsvis mellem 1 og 1,2 volumener alkohol per volumen reaktionsmedium, Esterens forestringsgrad kan kontrolleres ved højeffektiv væskechromatogra-fL Når der er tale om en benzylesfer, kan man måle den mængde benzylai-kohol, som fås ved forsæbning af esteren ved 0°C.
20
Det sidste trin af fremgangsmåden ifølge opfindelsen gennemføres hensigtsmæssigt på følgende måde.
Depolymerisafionen sker fortrinsvis ved, at esteren behandles med en stærk 25 base i vandig opløsning. Fortrinsvis anvendes natriumhydroxid.
Vægtforholdet mellem base og ester er hensigtsmæssigt mellem 0,05 og 0,2, _ fortrinsvis mellem 0,08 og 0,15 30 Reaktionsmediets temperatur indstilles til en værdi på mellem 50 og 70 °C, fortrinsvis mellem 55 og 65 °C, og reaktionen gennemføres s løbet af 30 minutter til 3 timer, fortrinsvis i løbet af 1-2 timer.
DK 176524 B1 9
Det er desuden hensigtsmæssigt at gennemføre reaktionen i et medium, hvori vægtforhoidet mellem vand og ester er mellem 15 og 30.
Ifølge en særligt fordelagtig udføreisesform gennemføres depolymerisationen 5 ved, at én vægtde! af den i trin 2 dannede aromatiske ester af heparin i form af salt, hvis forestringsgrad er på mellem 9,5 og 14%, blandes med 0,03 -0,15 vægtdele natriumhydroxid og 20-30 vægtdele vand, hvorefter den dannede blanding holdes ved en temperatur på mellem 55 og 65 °C i 1-2 timer, 10 Produktet kan udvindes ved, at reaktionsmediet neutraliseres ved hjælp af en fortyndet mineralsyre, fortrinsvis saltsyre, hvorpå udfældning gennemføres ved hjælp af en alkohol, såsom methanol.
På denne måde er det muligt direkte og på reproducerbar måde at fremstille 15 en blanding af suifaierede polysaccharider, som Indeholder mellem 9 og 20% kæder med en molekylvægt på under 2000 dalton og mellem 5 og 20% kæder med en molekylvægt på over 8000 dalton, som har en gennemsnitsmole-kyivægt på mellem 3500 og 5500 dalton, og hvori forholdet mellem gennemsnitsmolekylvægten efter vægt og gennemsnitsmolekylvægten efter antal er 20 mellem 1,3 og 1,6.
Blandingerne ifølge opfindelsen kan hensigtsmæssigt anvendes som antith-rombotiske midler.
25 De kan især anvendes til at forhindre venethromboser ved risiko-tilstande.
Dette gælder også ved langvarige risiko-tilstande. Blandingerne ifølge opfindelsen gør det for første gang muligt ved bestemte doser at formindske risi- _ koerne for thrombotiske tilstande ved ortopædisk kirurgi. Denne risiko, som er 70% i fraværelse af behandling og ca, 25% i nærværelse af heparin, er ca.
30 10% ved anvendelse af blandingerne ifølge opfindelsen eller til og med end nu mindre.
10 OK 176524 B1
Ved indsprøjtning af blandingerne ifølge opfindelsen i en kunstig nyres rørsystem kan forekomsten af thromboser formindskes. Den sidstnævnte anvendelse kan udvides fil forhindring af thromboser i kirurgisk materiei.
5 En anden fordelagtig terapeutisk anvendelse af blandingerne ifølge opfindelsen er forhindring af thrombotiske tilstande i arterierne, især ved myocar-dieinfarkt.
Det er desuden meget fordelagtigt at anvende blandingerne ifølge opfinde!-10 sen til forhindring af venetbrorrsfooser hos kirurgiske patienter ved behandling efter operationen. Denne anvendelse er meget fordelagtig, da den gør det muligt at undgå de blødningsrisid under operation og de problemer med type og dosis af bedøvelsesmidler, som kan optræde ved behandling før operation.
15
Alle disse egenskaber viser de terapeutiske muligheder for præparaterne ifølge opfindelsen.
Opfindelsen illustreres ved hjælp af de følgende, ikke-begrænsende eksem-20 pier.
Bestemmelsesmetoder
Produkternes molekylvægte og molekylvægtfordelinger bestemmes ved 25 højtryksvæskechromatografi med anvendelse af to serieforbundne søjler (f.eks. de søjler, som forhandles under betegnelserne TSK G 3000SW" (30 x 0,75 cm) og "Uchrosorb 100 ΟΐοΓ 10 μ (25 x 0,75 cm) eller "TSK G
_ 2GG0SW", forbundet til en refraktometrisk detektor. Det anvendte opløs-__ ningsmlddel er en 0,3 M phosphatpuffer med en pH~værdl på 7, og strøm-30 men er 0,7 ml pr. minut. Systemet kalibreres med standarder fremstillet ved fraktionering af enoxaparln ("Pharmuka") ved udelukkelseschromatografi på agarose-poly-acrylamid (”IBF") ifølge den metode, der er beskrevet af Bar-rowCisffe et aL, Thromb, Res., 12, 27-38 (1977-1978) eller DA Lane et al., DK 176524 B1 11
Thromb. Res., 12, 257-271 (1977-1978). Resultaterne beregnesved hjælp af dataprogrammet GPCø (Perkin Elmer).
I de følgende eksempler måles blandingernes totale antskoagulerende virk-5 ning ved turbidimetti med anvendelse af den første internationale standard for heparin med lav molekylvægt. Virkning mod faktor Xa (den antithrombo-tiske virkning) måles ifølge den amldolytiske metode på ehrømøgent substrat, der er beskrevet af Telen et al., Thromb. Res., 10, 399-410 (1977), idet der anvendes den første Internationale standard for heparin med lav molekyl-10 vægt.
Eksempel 1
Dette eksempel illustrerer den indledende behandling af natriumheparin til 15 formindskelse af indholdet af urenheder af typen chondroitinsuifat og hepa-ransulfat.
Til en opløsning af 10 g kommercielt natriumsalt af heparin 1100 ml vand indeholdende 3 g natriumchiorid sættes 80 ml methanol Efter udfældning frafii-20 treres produktet, hvorpå det vaskes og tørres. Renhedsgraden af det herved dannede natriumheparin måles ved væskechromatografi med sterisk udelukkelse. Herved anvendes to serieforbundne søjler, nemlig de søjler, som forhandles under betegnelserne ”TSK 2000SW” (80 x 0,75 em) og ’TSK 3000SW” (80 x 0,75 cm), koblet til en UV-detektor Indstillet på 206 nsn. Den 25 anvendte mobile fase er en 0,5 M vandig opløsning af natriumsulfat, som cirkulerer med en strømning på 1 mi per minut. Prøven sammenlignes med en heparinstandard indeholdende 2% dermatansulfat.
Under de ovenfor angivne betingelser indeholder det dannede heparin min-30 dre end 2% dermatansulfat.
» DK 176524 B1 12
Eksempel 2
Dette eksempel illustrerer fremstiiiingen af det kvatemære ammoniumsalt af heparin, 5
Til en opløsning af 10 g natriumheparinat ifølge eksempel 1 indeholdende mindre end 2% demiatansulfat i 100 ml vand sættes en opløsning af 25 g benzethøniumchiorid i 125 ml vand. Produktet, som fås ved stuetemperatur, frafiltreres, vaskes med vand og tørres, 10 På samme måde fremstilles benzethoniumsaltet af et heparin, som ikke er underkastet den i eksempel 1 beskrevne behandling.
Eksempel 3 15
Dette eksempel illustrerer fremstillingen af blandinger Ifølge opfindelsen og disse blandingers egenskaber.
(1) Forestring, 20
Til en opløsning af 15 g benzethoniumheparinat (forbehandlet ved fremgangsmåden beskrevet i eksempel 1) i 75 ml methylenchlorid sættes 15 mi benzylchlorid. Opløsningen opvarmes ved en temperatur på 35 som opretholdes i 25 timer. Derefter tilsættes 90 ml af en 10%’s opløsning af natri-25 umaeetat i methanol. Bundfaldet frafiltreres, vaskes med methanol og tørres.
Herved fås 6,5 g heparin-benzylester s form af natriumsalt, hvis forestrings-grad (bestemt på den ovenfor angivne måde) er 13,3%.
(2) Depolymerisation, 30
10 g heparin-benzylester i form af natriumsalt (dannet på den ovenfor beskrevne måde) opløses i 250 ml vand. Den dannede opløsning opvarmes til 62 °C, og der tilsættes 0,9 g natriumhydroxid. Temperaturen holdes ved 62°C
OK 176524 B1 13 i 1 time og 30 minutter, Reaktionsblandingen afkøles derpå til 20 °C og neutraliseres ved tilsætning af fortyndet saltsyre. Natriumchlorid-koncentrationen i reaktionsmediet indstilles derpå på 10%. Produktet udfældes sluttelig i 750 ml methanol, hvorpå det frafiltreres og tørres. Herved fås et heparin med de 5 følgende egenskaber.
Gennemsnitsmoiekylvægt efter vægt; 3900 dalton.
Molekylvægtfordeling; 20% kæder med en molekylvægt på under 2000 dalton, 10 5,5% kæder med en molekylvægt på over 8000 dalton.
Spredning; d = 1,39.
Anti-Xa-aktivitet: 106 internationale enheder (IE/mg),
Antikoagulerende virkning; 22,6 I E/mg.
15 Eksempel 4
Idet der gås ud Fra estere med en farestringsgrad på mellem 9,5 og 14% fremstilles på lignende måde depolymeriserede hepariner med de følgende egenskaber, 20 (a) Gennemsnitsmolekylvægt efter vægt: 4425 dalton.
Molekylvægtfordeling: 12,4% kæder med en molekylvægt på under 2000 dalton, 9,3% kæder med en molekylvægt på over 8000 dalton.
25 Spredning: d - 1,37.
Anti-Xa-virkning: 102 I E/mg.
Antikoagulerende virkning: 33 lE/mg (b) Gennemsnitsmoiekylvægt efter vægt: 4579 dalton.
30 Molekylvægtfordeling; 11,2% kæder med en molekylvægt på under 2000 dalton.
10,4% kæder med en molekylvægt på over 8000 dalton.
Spredning: d ~ 1,37.
DK 178524 B1 14
Antl-Xa-virkning: 104 IE/mg,
Arstikoaguierende virkning: 37 SE/mg.
(c) Gennemsnitsmolekylvægt efter vægt: 4448 dalton.
5 Molekylvægtfordellng: 12,8% kæder med en molekylvægt på under 2000 dalton.
9,5% kæder med en molekylvægt på over 8000 dalton.
Spredning: d ™ 1,38.
Antl-Xa-virkning: 100 iE/mg.
10 Antikoagulerende virkning: 32 IE/mg.
Eksempel 5
Dette eksempel illustrerer fremstillingen af en blanding, som ikke er omfattet 15 af opfindelsen.
(1) Forestring.
Til en opløsning af 15 g benzethoniumheparinat (forbehandle! ifølge metoden 20 beskrevet i eksempel 1) i 80 ml methylenchlorid sættes 12 ml benzylchllorid.
Den fremkomne opløsning opvarmes til en temperatur på 28 °C, som opret-holdes i 30 timer. Derefter tilsættes der 90 ml af en 10%’s opløsning af natriumacetat i methanol. Bundfaldet frafiltreres, vaskes med methanol og tørres.
Herved fås 8,3 g heparinbenzylester I form af natriumsalt. Dette produkts 25 forestringsgrad bestemmes ved, at man ved hjælp af højeffektiv væskechro-matografi bestemmer den mængde benzylalkohol, som frigøres ved forsæbning af esteren ved D°C. Forestringsgraden er 9,2%.
(2) Depolymerisation.
30 10 g af den ovenfor fremstillede heparin-benzylester i form af natriumsalt opløses i 200 ml vand. Opløsningen opvarmes til 58°G, og der tilsættes 1,1 g natriumhydroxid. Temperaturen holdes ved 58 °C i 1 time. Reaktionsbiandin- 9 DK 176524 B1 15 gen afkøles dernæst til 20 °C og neutraliseres ved tilsætning af fortyndet saltsyre. NatrlumchSoridkoncentrationen I reaktionsmediet indstilles derefter på 10%. Produktet udfældes til slut i 600 ml methanol, hvorpå det frafiltreres og tørres. Herved fås et heparin med de følgende egenskaber, 5
Gennemsnitsmolekylvægt efter vægt: 5425 dalton.
Moiekyivægtfordeling: 9,6% kæder med en molekylvægt på under 2000 dalton.
19,5% kæder med en molekylvægt på over 8000 dalton.
10 Spredning: d = 1,44,
Anti~Xa~virkning: 122 SE/mg.
Antikoagulerende virkning: 68,6 lE/mg.
Det fremgår af resultaterne, at dette produkt har en høj antikoagulerende 15 virkning. Blandingerne fremstillet ifølge opfindelsen har således bedre egenskaber.
20 Dette eksempel illustrerer den forbedrede stabilitet in vivo af blanlngerne ifølge opfindelsen, udtrykt ved hjælp af halveringstiden i plasma.
Et første farmakokinetisk forsøg blev gennemført med frivillige forsøgspersoner med en alder på mellem 21 og 30 år. Forsøgspersonerne modtager injek-25 tioner i doser fra 20 til 80 mg pr. ml. Blodprøver med et volumen på 4,5 ml tages på forskellige tidspunkter og opbevares ved ca, 4 °C, Prøverne centrifugeres derefter ved 2300 g i 15 minutter, og et plasma, som er fattigt på blod plader, fraskilles og fryses før _ analyse. Blandingernes halveringstid be-stemmes dernæst ved måling af anti-Xa-virkning, Der gøres nedenfor rede 30 for de fremkomne resultater.
Når de i eksempel 3 og 4 fremstillede blandinger indgives i en dosis på 40 mg, er halveringstiden længere end 4 timer i 75% af tllfældene, og halve- r DK 176524 B1 16 ringstiden er længere end 4,5 timer i 45% af tilfældene. Ved en dosis på 60 mg er halveringstiden længere end 3,7 timer i 75% af tilfældene. Når intakt heparin injiceres Intravenøst under identiske doseringsbettngelser, måles en halveringstid på ca. 0,6 timer. Et produkt fremstillet ifølge den fremgangsmå-5 de, som beskrives i det europæiske patentskrift nr. 40.144, udviser en halveringstid på over 4,5 timer i 17% af tilfældene.
Et andet forsøg gennemførtes under lignende betingelser med anvendelse af 20 patienter. Når blandinger ifølge opfindelsen indgives i en dosis på 40 mg, 10 er halveringstiden over 4 timer i 80% af tilfældene, og halveringstiden er over 4,5 timer i ca. 40% af tilfældene. Ved en dosis på 20 mg er halveringstiden over 3,9 timer i 60% af tilfældene.
Claims (28)
1. Blandinger af suifaterede polysaccharider rrsed samme generelle struktur som de polysaccharider, der indgår i heparin, kendetegnet ved, at 5 de har lavere gennemsnitsmolekylvægt efter vægt end heparin, at de indeholder mellem 9 og 20% kæder med en molekylvægt på under 2000 dalton og mellem 5 og 20% kæder med en molekylvægt på over 8000 dalton, og at forholdet mellem gennemsnitsmolekylvægten efter vægt og gennemsnitsmo-lekyivægten efter antal er på mellem 1,3 og 1,6. 10
2. Blandinger ifølge krav 1,kendetegnet ved, at de indeholder mindre end 2% dermatansulfat,
3. Blandinger ifølge krav 1 eller 2, kendetegnet ved, at de har en 15 genrsemsnitsmolekylvægt efter vægt på mellem ca. 3500 og ca, 5500 dalton.
4. Blandinger ifølge ethvert af kravene 1-3, kendetegnet ved, at kæderne af suifaterede polysaccharider indeholder en 2-G~sulfo~4~ enopyranosuronsyre ved en af kædeenderne. 20
5. Fremgangsmåde til fremstilling af blandinger af suifaterede polysaccharl-der ifølge ethvert af kravene 1-4, kendetegnet ved, at der gennemføres de følgende trin: (a) i et første trin omdannes et heparin i vandholdigt medium til et salt deraf 25 ved hjælp af et kvaiernært ammoniumsalt med lang kæde, (b) i et andet trin forestres det fremkomne salt til en ester med en forestrings-grad mellem 9,5 og 14%, og (c) i et tredje trin depoiymehseres den fremkomne ester med en forestrirsgs-grad mellem 9,5 og 14%. 30
6. Fremgangsmåde ifølge krav 5, kendetegnet ved, at det andet trin gennemføres I et chloreret organisk opløsningsmiddel i nærværelse af en chlorforblndelse. OK 178524 B1
7. Fremgangsmåde ifølge krav 8, kendetegnet ved, at chlorforbin-deisen er benzyichlond, og at opløsningsmidlet er chloroform eller methy- lenchlorid. 5
8. Fremgangsmåde ifølge et vilkårligt af kravene 5-7, kendetegnet ved, at forestringen gennemføres ved blanding af 1 vægtdel heparinsait med ca, 1 voiumendel af en chiorforbindeise i 3-5 volumendeie af et chioreret organisk opløsningsmiddel ved en temperatur på mellem 25 og 450C, fortrins- 10 vis mellem 30 og 40DC.
9. Fremgangsmåde ifølge krav 5, kendetegnet ved, at det tredje trin gennemføres ved, at esteren behandles med en stærli base i vandig opløsning. 15
10. Fremgangsmåde ifølge krav 9, kendetegnet ved, at vægtforholdet mellem base og ester er mellem 0,05 og 0,2, fortrinsvis mellem 0,08 og 0,15.
11. Fremgangsmåde ifølge krav 9, kendetegnet ved, at vægtforiioldet 20 mellem vand og ester er mellem 15 og 30,
12. Fremgangsmåde ifølge krav 9, kendetegnet ved, at mediets temperatur indstilles på en værdi på mellem 50 og 70GC, fortrinsvis mellem 55 og 85,:>Ct og at reaktionen gennemføres i løbet af 30 minutter til 3 timer, fortrins- 25 vis i løbet af 1-2 timer.
13. Fremgangsmåde ifølge et vilkårligt af kravene 5-12, kendetegnet ved, at man i et indledende trin udfælder udgangsheparinet ved hjælp af en alkohol. 30
14. Fremgangsmåde ifølge krav 5, kendetegnet ved, at urenheder Ijernes fra blandingerne. DK 178524 B1 19
15. Fremgangsmåde ifølge krav 14, kendetegnet ved, at urenheder valgt blandt nuclelnsyrer, poiypeptider og polysaccharider, især chondroitin-sulfater, heparan- og dermatansuifat, fjernes.
16. Fremgangsmåde ifølge krav 15, kendetegnet ved at dermantan- sulfafet fjernes til et restindhold på under 2%·
17. Fremgangsmåde ifølge ethvert af de foregående krav 6 og 14-16, k e n d e t e g n e t ved, at der fremstilles blandinger med en gennemsnitsmolekyl- 16 vægt mellem ca. 3500 dalton og ca. 5500 dalton,
18. Fremgangsmåde ifølge krav 5, kende tegnet ved, at i det første trin omdannes heparinet til benzethoniumsaltet.
19. Fremgangsmåde ifølge krav 5, kendetegnet ved, at i det andet trin gennemføres forestnngen med et chlorderivat, især benzyichlorid.
20. Fremgangsmåde ifølge krav 5, kendetegnet ved, at i det andet trin gennemføres forestnngen med et organisk opløsningsmiddel 20
21. Fremgangsmåde ifølge krav 5, kendetegnet ved, at i det andet trin reguleres mængderne af de forskellige reagenser og temperaturen og reaktionstiden.
22. Fremgangsmåde ifølge krav 5, kendetegnet ved, af i det andet trin af forestnngen dannes en aromatisk ester som heparinester.
23. Fremgangsmåde iføIge krav 5, Ren d e t e g n e t ved, at esteren, der er dannet i det andet trin, udvindes ved udfældning med alkohol, især 30 methanol, i nærværelse af natriumacetat. DK 176524 B1
24. Fremgangsmåde ifølge krav 5, kendetegnet ved, at forestrings-graden af heparinesteren reguleres, især ved højeffektiv væskechromatografi i væskefase.
25. Fremgangsmåde ifølge krav 5, kendetegnet ved, at i det tredje trin gennemføres depolymerisationen med en stærk hase i vandig opløsning, især med natriumhydroxid.
26. Anvendelse af blandinger af sulfaterede poiysaccharider iføige et vilkår- 10 ligt af kravene 1 -4 til fremstilling af terapeutiske præparater.
27. Anvendelse ifølge krav 26 til fremstilling af terapeutiske præparater beregnet til anvendelse til forhindring af venethremboser efter operationer. 15 26, Terapeutisk præparat på basis af blandinger af sulfaterede poiysacchari der med samme generelle strukturer som de poiysaccharider, der indgår i heparin, og som har en lavere gennernsnitsmolekylvægt efter vægt end heparin, som indeholder mellem 9 og 20% kæder med en molekylvægt på under 2000 dalton og mellem 5 og 20% kæder med en molekylvægt på over 20 8000 dalton, og hvis forhold mellem gennemsnitsmolekylvægten efter vægt og gennemsnitsmolekylvægten efter antal ligger mellem 1,3 og 1,6.
29. Præparat iføige krav 28, som er et antithrombotisk præparat. 25
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DK200401720A DK200401720A (da) | 1990-06-26 | 2004-11-09 | Blandinger af sulfaterede polysaccharider samt fremstilling og anvendelse deraf |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR9008013A FR2663639B1 (fr) | 1990-06-26 | 1990-06-26 | Melanges de polysaccharides de bas poids moleculaires procede de preparation et utilisation. |
| FR9008013 | 1990-06-26 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK124391D0 DK124391D0 (da) | 1991-06-25 |
| DK124391A DK124391A (da) | 1991-12-27 |
| DK176524B1 true DK176524B1 (da) | 2008-07-14 |
Family
ID=9398013
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK199101243A DK176524B1 (da) | 1990-06-26 | 1991-06-25 | Blandinger af sulfaterede polysaccharider samt fremstilling og anvendelse deraf |
Country Status (26)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5389618A (da) |
| JP (1) | JP3287363B2 (da) |
| KR (1) | KR0185586B1 (da) |
| AT (1) | AT398976B (da) |
| AU (1) | AU643531B2 (da) |
| BE (1) | BE1006827A3 (da) |
| CA (1) | CA2045433C (da) |
| CH (1) | CH682236A5 (da) |
| DK (1) | DK176524B1 (da) |
| ES (1) | ES2036922B9 (da) |
| FI (1) | FI104490B (da) |
| FR (1) | FR2663639B1 (da) |
| GB (1) | GB2245898B (da) |
| GR (1) | GR1000763B (da) |
| HU (1) | HU210925B (da) |
| IE (1) | IE66341B1 (da) |
| IL (1) | IL98604A (da) |
| IT (1) | IT1248557B (da) |
| LU (1) | LU87957A1 (da) |
| MX (1) | MX25829A (da) |
| NL (1) | NL194947C (da) |
| NO (1) | NO304991B1 (da) |
| NZ (1) | NZ238691A (da) |
| PT (1) | PT98102B (da) |
| SE (1) | SE506267C2 (da) |
| ZA (1) | ZA914869B (da) |
Families Citing this family (57)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| USRE38743E1 (en) | 1990-06-26 | 2005-06-14 | Aventis Pharma S.A. | Mixtures of particular LMW heparinic polysaccharides for the prophylaxis/treatment of acute thrombotic events |
| US5707973A (en) * | 1991-04-23 | 1998-01-13 | Rhone-Poulenc Rorer S.A. | Sulfated polysaccharids for treatment or prevention of thromboses |
| FR2687158B1 (fr) * | 1992-02-07 | 1995-06-30 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Polysaccharides sulfates, procede de preparation, composition pharmaceutique et utilisation. |
| US5849721A (en) * | 1992-02-07 | 1998-12-15 | Rhone-Poulenc Rorer S.A. | Sulfated polysaccharides obtained from heparin, preparation process, pharmaceutical composition and use thereof |
| HU219339B (en) * | 1993-09-30 | 2001-03-28 | Seikagaku Kogyo Co Ltd | Dermatan sulphate with low heparin or heparane sulphate content and pharmaceutical compositions comprising them |
| CA2370539C (en) | 1999-04-23 | 2009-01-06 | Massachusetts Institute Of Technology | System and method for notating polymers |
| EP1192187A1 (en) * | 1999-06-30 | 2002-04-03 | Hamilton Civic Hospitals Research Development, Inc. | Heparin compositions that inhibit clot associated coagulation factors |
| JP4897991B2 (ja) * | 1999-07-23 | 2012-03-14 | ラボラトリオス ファルマセウティコス ロビ ソシエダッド アノニマ | 超低分子量ヘパリン組成物 |
| AU1594801A (en) * | 1999-11-12 | 2001-06-06 | Emisphere Technologies, Inc. | Liquid heparin formulation |
| US6608042B2 (en) | 2000-03-28 | 2003-08-19 | Aventis Pharma, S.A. | Pharmaceutical compositions containing oligosaccharides, the novel oligosaccharides and preparation thereof |
| US6969705B2 (en) * | 2000-07-21 | 2005-11-29 | Aventis Pharma S.A. | Compositions of polysaccharides derived from heparin, their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
| HUP0300939A2 (hu) * | 2000-09-08 | 2003-09-29 | Hamilton Civic Hospitals Research Development, Inc. | Antitrombotikus készítmények |
| ES2238383T3 (es) | 2000-12-16 | 2005-09-01 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh | Uso de heparina de bajo peso molecular para el tratamiento de la osteoartrosis. |
| DE10141106A1 (de) * | 2001-08-22 | 2003-03-13 | Aventis Pharma Gmbh | Verwendung von Heparinoid-Derivaten zur Behandlung und Diagnose von mit Heparinoiden behandelbaren Erkrankungen |
| EP1423130A1 (en) * | 2001-08-28 | 2004-06-02 | Leo Pharma A/S | Antithrombotic compositions comprising low molecular weight heparin and low molecular weight dermatan sulphate |
| US7084118B2 (en) | 2002-02-22 | 2006-08-01 | Genentech, Inc. | Combination treatment with t-PA variant and low molecular weight heparin |
| EP2284535A1 (en) * | 2002-03-11 | 2011-02-16 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Low molecular weight heparins |
| ATE356150T1 (de) * | 2002-06-20 | 2007-03-15 | Chemi Spa | Verfahren zur herstellung von heparinestern |
| US20030236221A1 (en) * | 2002-06-20 | 2003-12-25 | Chemi Spa | Process for the preparation of esters of heparin |
| US20040265943A1 (en) * | 2002-09-23 | 2004-12-30 | Aventis Pharma S.A. | Method for quantitatively determining specific groups constituting heparins or low molecular weight heparins |
| FR2844808B1 (fr) * | 2002-09-23 | 2005-02-25 | Aventis Pharma Sa | Methode de determination de groupements specifiques constituant les heparines ou les heparines de bas poids moleculaire |
| US20040171819A1 (en) | 2002-10-10 | 2004-09-02 | Aventis Pharma S.A. | Mixtures of polysaccharides derived from heparin, their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
| WO2004066808A2 (en) * | 2002-12-20 | 2004-08-12 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Glycan markers for diagnosing and monitoring disease |
| KR20060052692A (ko) * | 2003-06-05 | 2006-05-19 | 센텔리옹 에스아에스 | 고콜레스테롤혈증 또는 당뇨병과 관련된 혈관형성 결함을치료하기 위한 섬유모세포 성장 인자를 코딩하는플라스미드 |
| US7956046B2 (en) | 2003-07-24 | 2011-06-07 | Aventis Pharma S.A. | Oligosaccharide mixtures derived from heparin, preparation thereof and pharmaceutical compositions containing them |
| ITMI20031679A1 (it) * | 2003-08-29 | 2005-02-28 | Opocrin Spa | Processo per la produzione di eparine a basso peso |
| US20050186679A1 (en) * | 2004-02-24 | 2005-08-25 | Christian Viskov | Method for determining specific groups constituting heparins or low molecular weight heparins |
| EP1582531A1 (en) | 2004-03-24 | 2005-10-05 | Aventis Pharma S.A. | Process for oxidizing unfractionated heparins and detecting presence or absence of glycoserine in heparin and heparin products |
| US20050261241A1 (en) * | 2004-05-19 | 2005-11-24 | Celsus Biopharmaceuticals, Inc. | Use of dermatan sulfates and/or desulfated heparins to treat or prevent heparinoid-induced autoimmune responses |
| GB0509433D0 (en) * | 2005-05-09 | 2005-06-15 | Uni For Milj Og Biovitenskap | Method |
| EP1792621B1 (en) | 2005-11-30 | 2012-04-04 | Istituto di Ricerche Chimiche e Biochimiche "G. Ronzoni" | Orally administrable heparin derivatives |
| US20070154546A1 (en) * | 2005-12-30 | 2007-07-05 | Zhang Jack Y | Sustained release pharmaceutical compositions |
| CN100436483C (zh) * | 2006-05-24 | 2008-11-26 | 杭州九源基因工程有限公司 | 一种依诺肝素钠的纯化生产方法 |
| CA2652205A1 (en) | 2006-05-25 | 2007-12-06 | Mallik Sundaram | Low molecular weight heparin composition and uses thereof |
| US8101733B1 (en) | 2006-06-27 | 2012-01-24 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Methods of evaluating mixtures of polysaccharides |
| US7968082B1 (en) | 2007-01-26 | 2011-06-28 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Evaluating mixtures of low molecular weight heparins by NMR |
| US7790466B1 (en) | 2007-01-26 | 2010-09-07 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Evaluating mixtures of low molecular weight heparins by chain profiles or chain mapping |
| FR2912409B1 (fr) * | 2007-02-14 | 2012-08-24 | Sanofi Aventis | Heparines de bas poids moleculaire comprenant au moins une liaison covalente avec la biotine ou un derive de la biotine leur procede de preparation,leur utilisation |
| US9139876B1 (en) | 2007-05-03 | 2015-09-22 | Momenta Pharmacueticals, Inc. | Method of analyzing a preparation of a low molecular weight heparin |
| AU2009250803A1 (en) * | 2008-05-20 | 2009-11-26 | Crystal Clear Partnership | Separation of polysaccharides by charge density gradient |
| EP2233145A1 (en) | 2009-03-19 | 2010-09-29 | Sanofi-Aventis | A dose of AVE5026 for the treatment of venous thromboembolism in patients with severe renal impairment |
| CN102791742B (zh) * | 2010-01-19 | 2014-12-24 | 动量制药公司 | 评价肝素制剂 |
| CN102792158B (zh) | 2011-01-28 | 2013-07-10 | 杭州九源基因工程有限公司 | 一种基于毛细管电泳的依诺肝素钠精细结构测定方法 |
| WO2012115952A1 (en) | 2011-02-21 | 2012-08-30 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Evaluating heparin preparations |
| AR085961A1 (es) | 2011-04-11 | 2013-11-06 | Sanofi Sa | Polisacaridos que poseen dos sitios de union a la antitrombina iii, metodo para prepararlos y composiciones farmaceuticas que los contienen |
| CN102603925B (zh) * | 2012-03-21 | 2013-12-11 | 东营天东制药有限公司 | 一种由粗品肝素钠直接生产依诺肝素钠的方法 |
| CN102603926B (zh) * | 2012-03-27 | 2014-04-30 | 烟台东诚生化股份有限公司 | 一种高效价肝素钠制备新工艺 |
| CN102633908A (zh) * | 2012-05-02 | 2012-08-15 | 雷晓刚 | 一种高品质超低分子量肝素的制备方法 |
| RU2512768C1 (ru) * | 2012-12-18 | 2014-04-10 | Федеральное бюджетное учреждение "Государственный институт кровезаменителей и медицинских препаратов (ФБУ "ГИКиМП") | Способ получения низкомолекулярного гепарина |
| CN103145868B (zh) * | 2013-01-07 | 2015-09-16 | 中国科学院昆明植物研究所 | 一种低分子量糖胺聚糖衍生物及其药物组合物和其制备方法与应用 |
| CN103175925B (zh) * | 2013-03-20 | 2014-12-03 | 山东辰中生物制药有限公司 | 依诺肝素钠生产过程中肝素苄基酯的酯化率的检测方法 |
| CN103214591B (zh) * | 2013-04-12 | 2015-11-04 | 中国科学院昆明植物研究所 | 一种含末端2,5-脱水塔罗糖或其衍生物的低分子量糖胺聚糖衍生物 |
| GB2515315A (en) * | 2013-06-19 | 2014-12-24 | Dilafor Ab | New Processes |
| EP3247332A1 (en) * | 2015-01-20 | 2017-11-29 | Incarda Therapeutics, Inc. | Unit aerosol doses for anticoagulation |
| CN109666086B (zh) * | 2018-11-05 | 2020-12-22 | 上海宝维医药技术有限公司 | 一种高纯度肝素季铵盐的制备方法及其应用 |
| WO2022015794A1 (en) | 2020-07-14 | 2022-01-20 | Optimvia, Llc | Methods for synthesizing non-anticoagulant heparan sulfate |
| WO2021007429A1 (en) | 2019-07-09 | 2021-01-14 | Optimvia Llc | Methods for synthesizing anticoagulant polysaccharides |
Family Cites Families (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DK108622C (da) * | 1963-01-18 | 1968-01-15 | Roussel Uclaf | Fremgangsmåde til fremstilling af benzylheparinat eller dets alkalimetalsalte. |
| FR2482611B1 (fr) * | 1980-05-14 | 1986-03-07 | Pharmindustrie | Nouveaux polysaccharides sulfates, procedes pour leur preparation et leur utilisation comme medicaments |
| US4351938A (en) * | 1980-05-19 | 1982-09-28 | Riker Laboratories, Inc. | Anticoagulant substance |
| FR2503714B1 (fr) * | 1981-04-10 | 1986-11-21 | Choay Sa | Procede d'obtention de mucopolysaccharides biologiquement actifs, de purete elevee, par depolymerisation de l'heparine |
| ATE15142T1 (de) * | 1981-05-21 | 1985-09-15 | Akzo Nv | Antithrombotikum auf basis von polysacchariden, verfahren zur dessen herstellung und medizinale zusammensetzungen. |
| FR2548672A1 (fr) * | 1983-07-04 | 1985-01-11 | Pharmuka Lab | Oligosaccharides sulfates et leur utilisation comme medicaments |
| DK196886D0 (da) * | 1986-04-30 | 1986-04-30 | Novo Industri As | Fremstilling af polysaccharider |
| IT1213384B (it) * | 1986-11-24 | 1989-12-20 | Lab Derivati Organici Mediolan | Processo per la preparazione controllata di gilcosaminoglicani a basso peso molecolare. |
| FR2614026B1 (fr) * | 1987-04-16 | 1992-04-17 | Sanofi Sa | Heparines de bas poids moleculaire, a structure reguliere, leur preparation et leurs applications biologiques |
| ES2006891A6 (es) * | 1988-04-09 | 1989-05-16 | Bioiberica | Procedimiento de preparacion de fracciones de oligosacaridos por depolimerizacion quimica controlada de heparina. |
| EP0337327A1 (en) * | 1988-04-09 | 1989-10-18 | Bioiberica, S.A. | Process for the preparation of new oligosaccharide fractions by controlled chemical depolimerization of heparin |
| US4981955A (en) * | 1988-06-28 | 1991-01-01 | Lopez Lorenzo L | Depolymerization method of heparin |
| US5011919A (en) * | 1989-01-30 | 1991-04-30 | Ajorca S.A. | Modified heparins and obtention process |
| IT1243300B (it) * | 1990-12-20 | 1994-05-26 | Fidia Spa | Derivati dell'eparina |
-
1990
- 1990-06-26 FR FR9008013A patent/FR2663639B1/fr not_active Expired - Lifetime
-
1991
- 1991-05-17 MX MX2582991A patent/MX25829A/es unknown
- 1991-06-18 NL NL9101049A patent/NL194947C/nl not_active IP Right Cessation
- 1991-06-19 GR GR910100270A patent/GR1000763B/el not_active IP Right Cessation
- 1991-06-20 LU LU87957A patent/LU87957A1/fr unknown
- 1991-06-24 AU AU79288/91A patent/AU643531B2/en not_active Expired
- 1991-06-24 IL IL9860491A patent/IL98604A/en not_active IP Right Cessation
- 1991-06-24 GB GB9113589A patent/GB2245898B/en not_active Expired - Lifetime
- 1991-06-25 ZA ZA914869A patent/ZA914869B/xx unknown
- 1991-06-25 NO NO912485A patent/NO304991B1/no not_active IP Right Cessation
- 1991-06-25 DK DK199101243A patent/DK176524B1/da not_active IP Right Cessation
- 1991-06-25 HU HU912122A patent/HU210925B/hu unknown
- 1991-06-25 IE IE221691A patent/IE66341B1/en not_active IP Right Cessation
- 1991-06-25 FI FI913101A patent/FI104490B/fi not_active IP Right Cessation
- 1991-06-25 BE BE9100607A patent/BE1006827A3/fr not_active IP Right Cessation
- 1991-06-25 SE SE9101957A patent/SE506267C2/sv not_active IP Right Cessation
- 1991-06-25 ES ES009101505A patent/ES2036922B9/es not_active Expired - Fee Related
- 1991-06-25 CA CA002045433A patent/CA2045433C/fr not_active Expired - Lifetime
- 1991-06-25 CH CH1884/91A patent/CH682236A5/fr not_active IP Right Cessation
- 1991-06-25 JP JP17903091A patent/JP3287363B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1991-06-25 KR KR1019910010600A patent/KR0185586B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1991-06-25 NZ NZ238691A patent/NZ238691A/en not_active IP Right Cessation
- 1991-06-26 IT ITMI911757A patent/IT1248557B/it active IP Right Grant
- 1991-06-26 PT PT98102A patent/PT98102B/pt not_active IP Right Cessation
- 1991-06-26 AT AT0128191A patent/AT398976B/de not_active IP Right Cessation
-
1993
- 1993-07-16 US US08/092,577 patent/US5389618A/en not_active Ceased
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK176524B1 (da) | Blandinger af sulfaterede polysaccharider samt fremstilling og anvendelse deraf | |
| Wu et al. | Anticoagulant and antithrombotic evaluation of native fucosylated chondroitin sulfates and their derivatives as selective inhibitors of intrinsic factor Xase | |
| FI88046C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av hepariner med laog molekylvikt | |
| USRE38743E1 (en) | Mixtures of particular LMW heparinic polysaccharides for the prophylaxis/treatment of acute thrombotic events | |
| EP1070503B1 (en) | Compositions comprising low molecular weight Heparin | |
| JP6543467B2 (ja) | 二糖繰り返し単位を含んでいる非抗凝固グリコサミノグリカンおよびそれらの医療用途 | |
| ITMI970678A1 (it) | Glicosaminoglicani aventi elevata attivita' antitrombotica | |
| US5849721A (en) | Sulfated polysaccharides obtained from heparin, preparation process, pharmaceutical composition and use thereof | |
| AU671817B2 (en) | Sulphated polysaccharides, preparation thereof, pharmaceutical composition and use thereof | |
| CA2914256C (en) | New processes for the production of chemically-modified heparins |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PUP | Patent expired |