CN102603926B - 一种高效价肝素钠制备新工艺 - Google Patents

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Abstract

本发明公布了一种高效价肝素钠制备新工艺，属于生化原料药生产技术领域，尤其是涉及到高效价肝素钠的制备工艺。为提供收率高、成本低，质量好的肝素钠精品，开发出如下制备新工艺：以粗品肝素钠为原料，采用盐解、酶解工艺进行预处理，依次经离子絮凝、超滤、玻璃粉吸附三种除杂技术，可获得260nm光吸收极低的肝素钠中间体。再经简单氧化、采用改进后的溶剂进行分级，最终得到高效价的肝素钠精品。本发明具有提取条件温和、回收率高、成本低的特点，易于获得高效价、低杂质含量的肝素钠精品并适合于进行工业化大生产。

Description

一种高效价肝素钠制备新工艺
技术领域
本发明属于生化原料药生产技术领域，尤其是涉及到高效价肝素钠的制备工艺。
背景技术
肝素钠是粘多糖硫酸酯类抗凝血药，是由猪或牛的肠粘膜中提取的硫酸氨基葡聚糖的钠盐，属粘多糖类物质。肝素钠原料药的原料是肝素粗品，其提取只能源自健康生猪的小肠粘膜，由于含有大量杂蛋白、杂核酸、微生物等，需经过物理和化学提取分离过程，定向获取天然结构基团完整的肝素，从而制成肝素钠原料药。肝素钠原料药是肝素制剂的有效成分和低分子肝素制剂的起始原料，目前这些制剂往往采用注射方式给药，这使得肝素钠原料药需要有很高的纯度，方可保证制剂的用药安全。
现有肝素钠提取纯化方法大多采用酸碱处理去除杂质蛋白、核酸等物质，采用多次氧化的方法去除色素类物质，采用乙醇多次分级的方式去除硫酸皮肤素等杂多糖。上述酸碱处理的方式易造成核酸、色素的残留量高，导致后续氧化次数增多；酸处理及多次氧化易导致肝素钠部分失活，难以得到高效价的肝素钠；多次乙醇分级易造成收率降低及物料的浪费。
发明内容
本发明的目的在于改进现有技术的不足，从而提供了一种高效价肝素钠的生产工艺。本发明具有操作简单、工艺时间短的特点，所得产品具有光吸收低、效价高的特点。
本发明的目的可以通过下述技术方案实现：本发明以肝素钠粗品为原料，采用常规盐解、酶解工艺进行预处理。预处理后的药液首先采用离子絮凝剂进行处理，离子絮凝剂采用的离子可以是钙离子、铝离子，并可以通过沉淀物形式去除，其加入量为0.5～5％(W/V)；絮凝后的药液需过滤澄清，再采用超滤膜进行超滤以除去小分子杂质及部分色素物质，超滤膜采用的孔径范围为2000～8000Da；超滤结束后，药液中尚残存少量的核酸类杂质，此时再采用带有硅羟基的玻璃粉进行吸附处理，此时得到中控光吸收260nm合格的中间体。对此中间体药液再进行1～2次氧化即可得到400nm光吸收合格的中间体。再对260nm、400nm合格的药液采用改进后的溶剂进行分级，所使用的溶剂中乙醇度数为45～70度(体积百分数)，溶剂中加氯化钠量为0.5～3.5％(W/V(溶剂体积))。沉淀经冻干后即可得到高效价的肝素钠原料药。
本发明生产工艺制得的产品其质量指标提高情况如下：
260nm光吸收(0.4％溶液，w/v)：小于等于0.050
400nm光吸收(0.4％溶液，w/v)：小于等于0.025
效价(EP7.0方法)：大于200IU/mg
具体实施方式
实施例1，一种高效价肝素钠制备新工艺，是将100g肝素钠粗品投入塑料杯中，加入1000ml纯化水溶解，加入浓度3.0％(w/v)的氯化钠，酶解3～5小时。酶解完成后，加入0.5～5％(W/V)钙离子或铝离子试剂反应30分钟，离心去除絮凝沉淀物，再调pH9～10形成离子沉淀物，通过澄清过滤去除沉淀。经澄清过滤后的药液采用2000～8000Da的超滤膜进行超滤，滤出液体积为药液体积的三倍量。超滤后的药液再采用经预处理的玻璃粉进行吸附，玻璃粉的加入量为药液体积的0.1倍(V/V)，搅拌吸附30分钟。将药液中的玻璃粉通过过滤去除，然后在药液中分次加入2.5％(V/V)的双氧水，氧化结束后过滤至澄清，分级。此时，中控260nm、400nm应符合要求，否则增加一次氧化。将中控合格的沉淀溶解，再采用0.22um的滤膜过滤，用特定度数的乙醇进行分级，收集沉淀，沉淀经冻干后即可得到高效价的肝素钠原料药。
实施例2，一种高效价肝素钠制备新工艺，是将10Kg肝素钠粗品投入塑料桶中，加入100L纯化水溶解，加入浓度3.0％(w/v)的氯化钠，酶解3～5小时。酶解完成后，加入0.5～5％(W/V)钙离子或铝离子试剂反应30分钟，离心去除絮凝沉淀物，再调pH9～10形成离子沉淀物，通过澄清过滤去除沉淀。经澄清过滤后的药液采用2000～8000Da的超滤膜进行超滤，滤出液体积为药液体积的三倍量。超滤后的药液再采用经预处理的玻璃粉吸附，玻璃粉的加入量为药液体积的0.1倍(V/V)，搅拌吸附30分钟。将药液中的玻璃粉通过过滤去除，然后在药液中分次加入2.5％(V/V)的双氧水，氧化结束后过滤至澄清，分级。此时，中控260nm、400nm应符合要求，否则增加一次氧化。将中控合格的沉淀溶解，再采用0.22um的滤膜过滤，用特定度数的乙醇进行分级，收集沉淀，沉淀经冻干后即可得到高效价的肝素钠原料药。

Claims (2)

1.一种高效价肝素钠制备工艺，其特征在于是将100g肝素钠粗品投入塑料杯中，加入1000ml纯化水溶解，加入浓度3.0％(w／v)的氯化钠，酶解3～5小时，酶解完成后，加入0.5～5％(W／V)钙离子或铝离子试剂反应30分钟，离心去除絮凝沉淀物，再调pH9～10形成离子沉淀物，通过澄清过滤去除沉淀，经澄清过滤后的药液采用2000～8000Da的超滤膜进行超滤，滤出液体积为药液体积的三倍量，超滤后的药液再采用经预处理的玻璃粉进行吸附，玻璃粉的加入量为药液体积的0.1倍(V／V)，搅拌吸附30分钟，将药液中的玻璃粉通过过滤去除，然后在药液中分次加入2.5％(V／V)的双氧水，氧化结束后过滤至澄清，分级，此时，中控260nm、400nm应符合要求，否则增加一次氧化，将中控合格的沉淀溶解，再采用0.22um的滤膜过滤，用45-70度数(体积百分数)的乙醇进行分级，收集沉淀，沉淀经冻干后即可得到高效价的肝素钠原料药。
2.一种高效价肝素钠制备工艺，其特征在于是将10Kg肝素钠粗品投入塑料桶中，加入100L纯化水溶解，加入浓度3.0％(w／v)的氯化钠，酶解3～5小时，酶解完成后，加入0.5～5％(W／V)钙离子或铝离子试剂反应30分钟，离心去除絮凝沉淀物，再调pH9～10形成离子沉淀物，通过澄清过滤去除沉淀，经澄清过滤后的药液采用2000～8000Da的超滤膜进行超滤，滤出液体积为药液体积的三倍量，超滤后的药液再采用经预处理的玻璃粉吸附，玻璃粉的加入量为药液体积的0.1倍(V／V)，搅拌吸附30分钟，将药液中的玻璃粉通过过滤去除，然后在药液中分次加入2.5％(V/V)的双氧水，氧化结束后过滤至澄清，分级，此时，中控260nm、400nm应符合要求，否则增加一次氧化，将中控合格的沉淀溶解，再采用0.22um的滤膜过滤，用45-70度数(体积百分数)的乙醇进行分级，收集沉淀，沉淀经冻干后即可得到高效价的肝素钠原料药。
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肝素钠的三氯化铝精制工艺;罗喜牛;《中国医药工业杂志》;19981031;第29卷(第10期);第441-442页 *

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