DK171236B1 - 2'-Desoxy-5-fluoruridinderivater, fremgangsmåder til fremstilling deraf samt farmaceutiske præparat omfattende en sådan forbindelse - Google Patents

Description

i DK 171236 B1

Opfindelen angår hidtil ukendte 2'-desoxy-5-fluoruridinderivater, fremgangsmåder til fremstilling deraf samt et farmaceutisk præparat til cancerbehandling omfattende en effektiv mængde af en sådan forbin-5 delse samt en farmaceutisk acceptabel bærer for denne. Disse forbindelser har en høj anticanceraktivitet og en udmærket antiviral aktivitet, og de er nyttige som antitumormidler eller som antivirale midler.

2'-Desoxy-5-fluoruridin (Fudr) opviser en høj 10 antitumoraktivitet, men også en høj toxicitet, af hvilken grund der er problemer med sikkerheden ved anvendelsen af denne forbindelse.

Man har fremstillet forskellige 2'-desoxy-5-fluoruridinderivater til at overvinde dette problem.

15 F.eks. beskriver japanske ikke undersøgte patentskrifter nr. 61.591/1985 og 106.593/1985 mange 2'-desoxy-5-fluoruridinderivater. Disse 2'-desoxy-5-fluoruridinde-rivater har til en vis grad begrænset problemet, men de er ikke tilfredstillende hvad angår høj antitumorakti-20 vitet og terapeutisk index, absorption o.l.

Skriftet GB-A-2 066 812 beskriver 2'-desoxy-5-fluoruridiner, i hvilke 5'-OH-gruppen er esterificeret med en aminosyre. Sådanne forbindelser angives at besidde kraftig antitumorvirkning, en overordentlig redu-25 ceret toksicitet og god absorption ved oral indgivelse.

Fra EP-A2-180 897 kendes 2'-desoxy-5-fluoruri-diner, der i den ene af 3'- og 5'-stillingerne er etherificeret med benzyl og i den anden af disse stil-30 linger er esterificeret. Disse forbindelser har kraftig antitumoraktivitet og lav toksicitet. Forbindelserne er imidlertid kun i ringe grad opløselige i vand, hvilket kræver specielle forholdsregler, når de skal formuleres til injektionsbrug.

35 Det har nu overraskende vist sig, at forbindel ser , der er nært beslægtede med sådanne ifølge oven- 2 DK 171236 B1 nævnte EP-skrift, men i hvilke den esterificerende gruppe indeholder en aminogruppe, opnår en uventet kraftig forøgelse i vandopløseligheden i forhold til i øvrigt tilsvarende forbindelser ifølge dette skrift.

5 Som følge heraf vil det være simplere at formulere injektionspræparater end hidtil.

I overensstemmelse hermed er 2'-desoxy-5-fluor-uridinderivatet ifølge opfindelsen ejendommeligt ved, at det har den almene formel (I): 10

15 hvV

CT N

*

20 I

OR2 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 hvori 2 den ene af og R2 er en benzylgruppe, eventuelt sub 3 stitueret på phenylringen med 1-3 substituenter udvalgt 4 blandt C^-Cg alkyl, C^-Cg alkoxy, halogeneret al 5 kyl, halogen, hydroxy og nitro, og den anden er en ami- 6 nosyrerest med 2-20 carbonatomer, eller er et syre- el 7 ler baseadditionssalt deraf.

8

Nedenfor gives særlige eksempler på substituen- 9 terne i benzylgruppen R^ og R2 i formel (I).

10

Eksempler på alkylgrupper som substituenter i 11 benzylgruppen er ligekædede eller forgrenede alkylgrupper med 1-6 carbonatomer såsom methyl, ethyl, 3 DK 171236 B1 propyl, isopropyl, butyl, sec-butyl, t-butyl, pentyl og hexyl.

Eksempler på alkoxygrupper som substituenter er ligekædede eller forgrenede alkoxygrupper med 1-6 5 carbonatomer, såsom ethoxy, propoxy, isopropoxy, butoxy, sec-butoxy, t-butoxy, pentyloxy og hexyloxy.

Eksempler på halogener som substituent er fluor, chlor, brom og iod.

Eksempler på halogenerede alkylgrupper som sub-10 stituenter er alkylgrupper med 1-3 carbonatomer substitueret med 1-3 halogenatomer, såsom chlormethyl, brommethyl, trifluormethyl, 1,2-dichlorethyl, 1,2- difluorethyl og 2,2,2-trifluorethyl.

Foretrukne eksempler på benzylgruppen, der 15 eventuelt har 1-3 substituenter, er benzyl og en benzyl-gruppe med 1 eller 2 substituenter på phenylringen såsom 2-chlorbenzyl, 3-chlorbenyl, 4-chlorbenzyl, 2- brombenzyl, 3-brombenzyl, 4-brombenzyl, 2-fluorben-zyl, 3-fluorbenzyl, 4-fluorbenzyl, 2,4-dichlorbenzyl, 20 3,4-dichlorbenzyl, 2-chlor-4-brombenzyl, 2-trifluor-methylbenzyl, 4-trifluormethylbenzyl, 4-nitrobenzyl, 2,4-dinitrobenzyl, 2-methylbenzyl, 4-methylbenzyl, 4-ethylbenzyl, 4-t-butylbenzyl, 4-methoxybenzyl, 3- ethoxybenzyl, 4-hydroxybenzyl, 2,4-dihydroxybenzyl og 25 2-methyl-3-nitrobenzyl.

Alment er methylgrupper med 1 eller 2 halogenatomer på phenylringen mere fortrukket.

Betegnelsen "aminosyrerest" betyder den monovalente gruppe, der bliver tilbage efter fjernelse af OH 30 gruppen fra carboxylgruppen i en aminosyre. Betegnelsen "aminosyre" skal i denne forbindelse inkludere naturligt forekommende aminosyrer og syntetiske aminosyrer, der er forbindelser, der hver indeholder i det mindste én aminogruppe og i det mindste én carboxylgruppe og 35 med et indhold på 2-20 carbonatomer i molekylet.

Eksempler på naturligt forekommende aminosyrer 4 DK 171236 B1 er sådanne, der opbygger proteiner i organismer, såsom alanin, isoleucin, glycin, serin, threonin, valin, leucin, arginin, lysin, asparagin, asparaginsyre, glutamin, glutaminsyre, cystin, cystein, methionin, 5 tyrosin, phenylalanin, tryptophan, histidin, hydroxy-prolin, prolin, osv. Naturligt forekommende aminosyrer og syntetiske aminosyrer, der ikke opbygger proteiner i organismer, men spiller en vigtig rolle hos levende organismer, er også inkluderet, og eksempler derpå er 10 sarcosin, creatin, homocystin, cysteinsulfonsyre, norleucin, isoserin, homoserin, hydroxylysin, norvalin, dehydrovalin, ornithin, arginoravsyre, dopa, 3-mono-iodtyrosin, 3,5-diiodtyronin, thyroxin, α,γ-diamino-smørsyre, 2,3-diaminoravsyre, α-aminoadipinsyre, α,β-15 diaminopropionsyre, saccharopin, β-alanin, y-amino-smørsyre, β-aminosmørsyre, ε-aminocapronsyre, acediasulfon, agaristin, aranocin, hadacidin, melpha-lan og ibotensyre. Yderligere eksempler er acetylserin, acetylthreonin, benzylasparaginsyre og lignende, nemlig 20 substituerede aminosyrer med acetylgrupper, ethoxycar-bonylgrupper, benzyloxycarbonylgrupper eller benzyl-grupper som substituent for hydroxygrupper, aminogrup-per eller carboxygrupper i aminosyrer såsom serin, threonin og lignende hydroxyaminosyrer, asparagin, or-25 nithin, lysin og lignende basiske aminosyrer med i det mindste 2 aminogrupper, glutaminsyre, asparaginsyre og lignende sure aminosyrer med i det mindste 2 carboxyl-grupper.

Blandt aminosyrerester repræsenteret med Rj el-30 ler R2 i forbindelserne ifølge opfindelsen foretrækkes α-aminosyrerester. Mere foretrukket er rester af aminosyrer, der opbygger proteiner i organismen. Særlige eksempler på sådanne aminosyrerester er resterne af alanin, isoleucin, glycin, serin, threonin, valin, leucin, 35 arginin, hydroxylysin, lysin, asparagin, asparaginsyre, glutamin, glutaminsyre, cystin, cystein, methionin, 5 DK 171236 B1 tyrosin, phenylalanin, tryptophan, histidin, hydroxy-prolin, prolin og lignende. Mest foretrukket er resterne af alanin, isoleucin, glycin, O-acetylserin, valin, leucin, lysin, asparaginsyre-3-benzylester, phenylala-5 nin, histidin og prolin.

Aminosyreresterne i forbindelserne ifølge opfindelsen kan inkludere sådanne med formlen -CO-B-NR10R11 (f) 10 hvori B er en lavere alkylengruppe eventuelt substitueret med phenyl eller en lavere alkylthiogruppe, og R10 og R11 hver betegner hydrogen eller lavere alkyl eller sammen med det nitrogenatom, de er bundet til, 15 danner en piperidinring, og hvor aminosyreresterne også inkluderer en pyrrolidinylcarbonyl- eller piperi-dylcarbonylgruppe, hvori carbonylgruppen ikke er bundet til nitrogenatomet i den heterocycliske ring.

Hvad angår aminosyreresten med formlen (f), kan 20 eksempler på lavere alkylengrupper, eventuelt substitueret med phenyl eller en lavere alkylthiogruppe, og som er angivet ved B, være C^-Cg ligekædede eller forgrenede alkylengrupper eventuelt substitueret med phenyl eller med C1-C6 ligekædede eller forgrenede alkyl-25 thiogrupper såsom methyl, methylmethylen, ethylmethy-len, isopropylmethylen, isobutylmethylen, t-butylme-thylen, ethylen, trimethylen, tetramethylen, 2-methyl-trimethylen, pentamethylen, hexamethylen, phenylmethy-len, benzylmethylen, 5-phenylpentylmethylen, 3-phenyl-30 hexamethylen, methylthiomethylen, 2-methylthioethylme-thylen, hexylthiomethylen, isopropylthiomethylmethylen, 3-tbutylthiohexamethylen, etc. Eksempler på lavere al-kylgrupper R10 og R^ er ligekædede eller forgrenede alkylgrupper med 1-6 carbonatomer, såsom methyl, ethyl, 35 propyl, isopropyl, butyl, t-butyl, pentyl og hexyl.

Saltene af 2'-desoxy-5-fluoruridinderivaterne 6 DK 171236 B1 ifølge opfindelsen inkluderer syreadditionssalte med en syre, der er i stand til at danne et salt med en amino-gruppe i en aminosyre og salte med en base, der kan danne et salt med en carboxylgruppe i en sur aminosyre.

5 Eksempler på nyttige syrer til dannelse af saltene er uorganiske syrer såsom saltsyre, hydrogenbromid, phos-phorsyre, salpetersyre, svovlsyre, svovlsyrling og lignende og organiske syrer såsom p-toluensulfonsyre, me-thansulfonsyre, vinsyre, phthalsyre, fumarsyre, citron-10 syre, maleinsyre, malonsyre, mælkesyre, ravsyre, ascor-binsyre, linolensyre, oliesyre, nicotinsyre, picrylsul-fonsyre og lignende. Eksempler på nyttig baser til dannelse af salte er natriumhydroxid, kaliumhydroxid, na-triumcarbonat, etc.

15 Fremgangsmåderne ifølge opfindelsen er ejendom melige ved det, der er angivet i de kendetegnende dele af henholdsvis krav 10 eller krav 11.

Forbindelserne ifølge opfindelsen med formlen (I) kan således fremstilles ved processer som vist ne-20 denfor i reaktionsskema-1 og -2.

7 DK 171236 B1

Reaktionsskema-1 o °

HN'^F hvV

q-'St A-OH (IH) 10 Rs O—i oN Rs U 0Rs (Π) (W) 15 20 o

hnVF

oV

25 T? O

Afbeskyttelse 1 ---> \~y *hcc OR2 30 (Γ ) 35 8 DK 171236 B1 hvori: R3 og R2 er som ovenfor defineret, den ene af r3 og r4 er hydrogen, og den anden er en benzylgruppe, eventuelt substitueret på phenylringen med 1-3 5 substituenter valgt blandt C-^Cg alkyl, C^-Cg alkoxy, C^-Cj halogeneret alkyl, halogen, hydroxy og nitro, den ene af R5 og Rg er en aminosyrerest med 2-20 carbo-natomer samt med en N-beskyttende gruppe, og den anden er en benzylgruppe eventuelt substitueret på phenylrin-10 gen med 1-3 substituenter udvalgt blandt C^-Cg alkyl, Ci-Cg alkoxy, C^-C^ halogeneret alkyl, halogen, hydroxy og nitro, og A er en aminosyrerest med 2-20 carbonato-mer samt med en N-beskyttende gruppe.

Man kan fremstille forbindelsen (IV) ved 15 esterkondensation af forbindelse (II) og aminosyre (III). Man kan benytte aminosyren som sådan eller på form af et reaktivt derivat såsom et halogenid, syreanhydrid eller lignende. Eksempler på den N-beskyttende gruppe i aminosyren er sådanne, der al-20 mindeligvis anvendes, f.eks. t-butoxycarbonyl (Boc), trichlorethoxycarbonyl, benzyloxycarbonyl, benzyloxy-carbonyl med 1-3 substituenter såsom methoxy, methyl, nitro og lignende. Man udfører sædvanligvis esterkondensationen mellem forbindelserne II og III i et 25 vandfrit opløsningsmiddel under tilstedeværelse af en basisk forbindelse og et kondensationsmiddel. Eksempler på anvendelige opløsningsmidler er aromatiske carbon-hydrider såsom benzen, toluen, xylen og lignende, halogenerede carbonhydrider såsom dichlormethan, chloro-30 form, dichlormethan og lignende, ethere såsom ethyl-ether, dioxan, tetrahydrofuran og lignende, pyridin, nitromethan, dimethylformamid, etc. Eksempler på anvendelige basiske forbindelser er trialkylamin, pyridin, dialkylaminopyridin, picolin, lutidin og 35 lignende tertiære aminer, natriumcarbonat, barium-carbonat og lignende metalcarbonater, etc, blandt 9 DK 171236 B1 hvilke dialkylaminopyridin, især di(C1-C3 alkyl)amino-pyridin såsom dimethylaminopyridin, diethylamino-pyridin er mest foretrukket. Eksempler på nyttige kondensationsmidler er p-toluensulfonylchlorid, 2,4,6-5 triisopropylbenzensulfonylchlorid (TPS chlorid) og lignende arylsulfonylchlorider, alkylsulfonylchlorid (især alkylsulfonylchlorid såsom methansulfonylchlorid, ethansulfonylchlorid eller lignende), N,N-dicyclohe-xylcarbodiimid (DCC), thionylchlorid, phosphoroxychlo-10 rid, etc. blandt hvilke man foretrukket anvender DCC og TPS chlorid. Den anvendte mængde af forbindelse (III) er ca. 1-1,5 mol per mol af forbindelse (II). Den basiske forbindelse og kondensationsmidlet bruges begge i mængder på ca. 1-5 mol per mol af forbindelse (II).

15 Reaktionen udføres sædvanligvis ved en temperatur fra ca. -50°C og op til stuetemperatur.

Den således opnåede forbindelse (IV) underkastes en reaktion til fjernelse af den beskyttende gruppe. Denne reaktion udføres ved kendt teknik. Man kan f.eks.

20 gennemføre reaktionen under anvendelse af 0,5-5N saltsyreopløsning under tilstedeværelse af et opløsningsmiddel. Ved denne reaktion fjerner man den gruppe, der beskytter aminosyreresten under dannelse af et hydro-chlorid (I') af forbindelsen (I). Anvendelige opløs-25 ningsmidler inkluderer methylenchlorid, chloroform, te-trahydrofuran, dioxan og lignende.

DK 171236 B1 10

Reaktionsskema-2 0 l ηϊΎρ hij

0*V A'_-X CV) O^N

HO-no^ *' °Ί£) 10 Jm 0R·

(F u d R) (W

15 i F

OR, HfV

1 Π^ΊνΓ

C 8 3 C C = NH O N

evn) R O—lo 20 -r „ 2 < y , cf3 so3 h cf3 so3 h ^' OR j (Γ ) 25 hvori: og R2 er som defineret ovenfor, A' er en ami-nosyrerest med 2-20 carbonatomer samt med en N-beskyttende gruppe, X er halogen, den ene af R? og Rg er hy- 30 drogen og den anden er en aminosyrerest med 2-20 carbonatomer samt med en N-beskyttende gruppe, og Rg er en benzylgruppe, eventuelt substitueret på phenyl-ringen med 1-3 substituenter udvalgt blandt C2-C6 alkyl, Cj-Cg alkoxy, C2-C3 halogeneret alkyl, halogen, 35 hydroxy og nitro.

Forbindelsen (VI) kan fremstilles ved reaktion 11 DK 171236 B1 mellem FudR og aminosyrehalogenidet (V) i et opløsningsmiddel under tilstedeværelse af en basisk forbindelse. Man bringer forbindelse (VI) til reaktion med det substituerede eller ikke-substituerede benzyl-5 imidat (VII) under tilstedeværelse af trifluormethan-sulfonsyre, hvorved gruppen, der beskytter aminosyre-resten, fjernes til opnåelse af forbindelsen (I") som et salt af trifluormethansulfonsyre.

Eksempler på halogen for X i formel (V) er 10 chlor og brom.

Anvendelige opløsningsmidler og anvendelige basiske forbindelser inkluderer de eksempler, der er nævnt ovenfor i forbindelse med reaktionsskema-l. Man benytter ca. 1-1,5 mol af aminosyrehalogenidet 15 og ca. 0,1-0,5 mol af den basiske forbindelse for hvert mol FudR. Reaktionen udføres ved en temperatur fra ca. -50°C og op til stuetemperatur og løber til ende på 2-12 timer.

Ved reaktionen mellem forbindelse (VI) og det 20 substituerede eller usubstituerede benzylimidat (VII) benyttes ca. 1-5 mol af forbindelse (VII) og ca. 0,01-0,5 mol trifluormethansulfonsyre per mol af forbindelse (VII), og man kan benytte de samme opløsningsmidler som nævnt ovenfor for den tidligere reaktion, 25 ved denne reaktion. Reaktionstemperaturen ligger fra omtrent stuetemperatur til kogepunktet af opløsningsmidlet. Reaktionstiden er ca. 2-12 timer.

Man kan omdanne hydrochloridet af forbindelsen ifølge opfindelsen og trifluorlmethansulfonsyresaltet 30 deraf fremstillet ved fremgangsmåderne i reaktions-skemaerne-1 og -2 til andre ønskede salte ved sædvanlige udvekslingsreaktioner for salte ifølge kendt teknik.

F.eks. kan man opløse forbindelsen opnået i reaktionsskema-l eller -2 i en vandig opløsning af natrium-35 hydroxid, kaliumhydroxid , natriumcarbonat, natrium-hydrogencarbonat eller lignende base til neutralisation 12 DK 171236 B1 af syreadditionssaltet, og derefter kan man tilsætte en ønsket syrekomponent til frembringelser af det ønskede syreadditionssalt, fulgt af frysetørring.

Man kan isolere forbindelsen ifølge opfindelsen 5 fremstillet ved de ovenfor beskrevne processer ved konventionelle adskillelsesmetoder, såsom søjle-chromatografi, og man kan rense den ved konventionel teknik såsom ved omkrystallisering.

Til anvendelse som farmaceutisk præparat bringer 10 man forbindelsen ifølge opfindelsen i forbindelse med en farmakologisk acceptabel egnet bærer, og man omdanner blandingen til et passende præparat afhængig af indgivelsesvejen. Anvendelige bærere inkluderer en bærer ifølge kendt teknik f.eks. excipienter, bindere, 15 smøremidler, farvestoffer, sprængmidler, etc. Typiske præparater i denne forbindelse er f.eks. tabletter, kapsler, granulater, pulvere, væsker, injektionsvæsker til intravenøs eller lignende parenteral indgivelse og stikpiller til indførelse i endetarmen, etc. Mængden af 20 forbindelsen ifølge opfindelsen, der skal findes som effektiv komponent i en dosisenhed i den farmaceutiske blanding, kan nemt bestemmes, når man kender arten af præparatet, og den varierer ikke meget fra mængden i sædvanlige farmaceutiske præparater. Sædvanligvis er en 25 foretrukket mængde effektiv forbindelse ca. 25-500 mg per dosisenhed. Forbindelserne ifølge opfindelsen kan formuleres i et egnet præparat ved kendt teknik.

Dosis af det således opnåede farmaceutiske præparat vil variere med symptomernes alvor, patientens 30 vægt, alder og andre faktorer. Den daglige dosis er sædvanligvis ca. 50-2000 mg per voksen person beregnet som den effektive komponent. Det farmaceutiske præparat kan indgives daglig som en enkeltdosis eller i 2-4 opdelte doser.

35 Nedenfor gives eksempler og præparationseksemp ler, der skal illustrere opfindelsen, og farmakologiske 13 DK 171236 B1 afprøvninger til at belyse opfindelsens værdi.

Ved de angivne NMR data i eksemplerne refererer tallene, der er anbragt for oven til højre for symbolet "H" eller anbragt forneden til højre for symbolet "C" 5 eller "N", til positionen i forbindelsen. Betegnelsen "H®" eller "Cg-H" refererer til det hydrogenatom, der er bundet til carbonatomet i 6-stillingen. På lignende måde betegner f.eks. betegnelsen "H3', H4', H5 " eller "C3, 4i 51-H" de hydrogenatomer, der er bundet til carlo bonatomerne i 3'-, 4'- og 5'-stillingerne.

Eksempel 1

Man opløste 2,44 g O3'-trityl-2'-desoxy-5-fluoruridin i 15 ml tetrahydrofuran. Man tilsatte 15 0,5 g natriumhydrid og holdt blandingen under omrøring ved 60°C i 30 min. Nu tilsatte man 0,6 3 g benzyl-chlorid og 0,375 g natriumiodid og lod reaktionen foregå ved 6 0°C i 6 timer. Reaktionsblandingen blev neutraliseret med en vandig IN HCl opløsning og ind-20 koncentreret. Til remanensen satte man 20 ml af en 0,5 N HCl opløsning i methanol, og man holdt blandingen under omrøring ved stuetemperatur natten over. Reaktionsblandingen blev neutraliseret med en mættet vandig NaHC03 opløsning og indkoncentreret, hvorefter man satte 25 20 ml chloroform til remanensen og frafilterede bundfaldet. Dette bundfald blev opløst i ethylacetat, og man vaskede opløsningen med vand, tørrede over glauber-salt og indkoncentrerede til opnåelse af O5'-benzyl-2'-desoxy-5-fluoruridin. Den således opnåede forbindelse 30 blev suspenderet i 15 ml methylenchlorid, hvortil man satte 0,84 g Boc-glycin, 1,24 g DCC og 0,05 g dimethyl-aminopyridin. Denne blanding blev holdt under omrøring ved stuetemperatur natten over, hvorefter man filterede reaktionsblandingen og indkoncentrerede filtratet.

35 Remanensen blev blandet med 5 ml af en 4N HCl opløsning i dioxan, man holdt blandingen under omrøring i 30 min.

14 DK 171236 B1 og tilsatte 20 ml diethylether. De udfældede krystaller blev frafiltreret og renset med methanol-ethylether til opnåelse af 1,28 g af forbindelse 1 vist nedenfor i Tabel 1.

5

Eksempel 2

Man gentog fremgangsmåden fra eksempel l, idet man dog benyttede relevante udgangsmaterialer til fremstilling af den ønskede forbindelse. Man gentog frem-10 gangsmåden til fremstilling af forbindelserne 2-11 og 28-30 vist nedenfor i Tabel 1.

Eksempel 3

Man opløste 2,44 g O5'-trityl-2'-dexoxy-5-15 fluoruridin i 15 ml THF og satte hertil 0,5 g pulveriseret natriumhydroxid og 0,225 g pulveriserede Molecular Sieves 3A (Linde Co., U.S.A.). Man holdt blandingen under opvarmning og tilbagesvaling i 2 timer, hvorefter man tilsatte 0,845 g p-chlorbenzyl-20 chlorid og 0,15 g natriumiodid. Opvarmningen under tilbagesvaling fortsatte i 2 timer, hvorefter man lod blandingen henstå til afkøling, filterede reaktionsblandingen, neutraliserede filtratet med 15 ml af en mættet vandig opløsning af ammoniumchlorid og vaskede 25 med en mættet vandig opløsning af natriumchlorid. Man tørrede det organiske lag over glaubersalt og indkoncentrerede. Til remanensen satte man 20 ml af en 0,5N HCl opløsning i methanol, og man holdt blandingen under omrøring natten over. Nu neutraliserede man 30 blandingen med en mættet vandig NaHC03 opløsning og indkoncentrerede, man satte 20 ml THF til remanensen og vaskede blandingen med en mættet, vandig NaCl opløsning, tørrede over glaubersalt og indkoncentrerede. Koncentratet blev omkrystalliseret fra ethanol til op-35 nåelse af 1,32 g O3 -p-chlorbenzyl-2'-desoxy-5-fluor-uridin. Man opløste 1,07 g DCC og 0,73 g Boc-glycin i 15 DK 171236 B1 12 ml THF og satte til denne opløsnig 1,32 g 03'-p-chlorbenzyl-2'-5-fluoruridin samt 0,05 g dimethylamino-pyridin. Man holdt blandingen under omrøring ved stuetemperatur i 5 timer, hvorefter man filtrerede, ind-5 koncentrerede filtratet og satte 5 ml af en 4N HC1 opløsning i dioxan til remanensen. Denne blanding blev holdt under omrøring i 30 min., hvorefter man tilsatte 20 ml diethylether, frafilterede de udfældede krytaller og omkrystalliserede dem fra ethanol-isopropylalkohol 10 til opnåelse af 0,83 g af forbindelse 12 vist nedenfor i Tabel l.

Eksempel 4

Man gentog fremgangsmåden fra eksempel 3, idet 15 man dog benyttede de relevante udgangsmaterialer af de ønskede forbindelser og fremstillede forbindelserne 13-22 vist nedenfor i Tabel 1.

Eksempel 5 20 Man opløste 0,10 g O3'-p-chlorbenzyl-O5'- alanyl-2'-desoxy-5-fluoruridin,hydrochlorid i 4 ml af en 1:1 blanding af vand og chloroform, og til denne opløsning satte man under omrøring 0,018 g NaHC03. Omrøringen fortsatte i 10 min., hvorefter man fraskilte 25 chloroformlaget. Man tilsatte dråbevis en opløsning af 0,10 g 4-toluensulfonsyre i 2 ml methanol, frafiltrerede et hvidt bundfald og omkrystalliserede fra methanol-ethylether til opnåelse af 0,105 g af forbindelse 23 vist nedenfor i tab. 1.

30

Eksempel 6

Man gentog fremgangsmåden fra eksempel 5, idet man dog benyttede relevante udgangsmaterialer til fremstilling af de ønskede forbindelser til opnåel-35 se af forbindelserne 24-27 vist nedenfor i Tabel 1.

DK 171236 B1 16

Eksempel 7

Man opløste 2,44 g 2'-desoxy-5-fluoruridin i 25 ml pyridin, man tilsatte 0,97 g Boc-glycylchlorid og lod blandingen reagere under isafkøling i 3 timer.

5 Nu bortdestillerede man opløsningsmidlet, satte vand til remanensen, ekstraherede blandingen med methylen-chlorid, tørrede ekstrakten over glaubersalt og indkoncentrerede. Remanensen blev opløst i 25 ml methylen-chlorid, og hertil satte man 2,14 g p-chlorbenzylimidat 10 og 0,75 g trifluormethansulfonsyre. Man lod denne blanding reagere ved stuetemperatur i 3 timer og bortdestillerede opløsningsmidlet. Til remanensen satte man en mættet vandig NaHCC^ opløsning for at gøre opløsningen alkalisk. Man ekstraherede med ethylether og tørre-15 de ekstrakten over glaubersalt, man tilsatte hydrogen-chlorid, frafiltrerede de udskilte krystaller og omkrystalliserede filtratet fra methanol-ethylether til opnåelse af 0,75 g af forbindelse 12 vist nedenfor i Tabel 1.

20 Nedenfor i Tabel 1 angives den kemiske struktur og de fysisk-kemiske strukturkonstanter for forbindelserne 1-30 fremstillet i eksemplerne 1-7.

Forbindelse l

Struktur: Rx = <ζ^-ΟΗ2-, DK 171236 B1 17

Tabel 1 r2 = nh2ch2co-Saltform : hydrochlorid Krystalform: amorf Udbytte : 57,5% 10 1H-NMR TMS som standard 6 (DMSO-d6) 11,7-12,0 (b, 1 Η, NH) , 7,96 (d, 1 H, J*=7 Hz, H6) , 7,34 (s, 5 H, araratisk ) , 6,14 (t, 1 H, J=7 Hz, H1 ') , 15 4,54 (s, 2 H, -CH2HQ ), 3,80 - 4,30 (m, 1 H, H4'), 3,85 (s, 2 Η, ΝΗ2ΟΗ^0Ο2-), 3,50-3,80 (m, 2 H, H5'), 2,0 - 2,2 (m, 2 Η, H2').

20

Forbindelse 2

Struktur: Rx = Cl- <^~~^>-CH2-, r2 = nh2ch2co- 25 Saltform : Hydrochlorid

Udbytte : 63% 1H-NMR TMS som standard δ (DMSO-d6) 11,6-12,0 (b, 1 Η, NH), 7,96 (d, 1 Η, H6), 7,35 30 1' (s, 4 H, aromatisk ), 6,20 (t, 1 H, J-7 Hz, H ), 4,50 (s, 2 H, -CH2O 3,90-4 ,50 (m, 1 H, H4'), 3,50-3,90 (m, 2 Η, H5'), 3,84 {s, 2 H, 35 NHjCH^COj-), 2,1-2,4 (m, 2 H, H2 ).

18

Forbindelse 3

Struktur: Rj = NH2CH2CO-, DK 171236 B1 5 R2 - F- <Q>-CH2-

Saltform : hydrochlorid Udbytte : 71% ^H-NMR TMS som standard δ (DMSO-d5) 10 11,7-12,0 (b, 1 Η, NH), 7,95 (d, 1 H, H^), 7,0-7,6 1 1 (m, 4 H, aranatisk ), 6,13 (t, 1 H, J=7 Hz , H ), 4,52 (s, 2 H, -CH2-O), 3,9-4,4 (m, 4 H, H3 , H4', H5') / 3,85 (s, 2 H, NH2CH2CC>2-) , 3,64 (b, 2 H, 15 21 H20) , 2,1-2,3 (m, 2 Η, H ) .

Forbindelse 4 20 Struktur: ^ = NH2CH2CO-, R2 - =ρ3-Ο-0Η2-

Saltform : hydrochlorid

Udbytte : 62% 25 -^H-NMR TMS som standard δ (DMSO-dg) 11,8-12,0 (b, 1 Η, NH) , 7,98 (d, 1 H, H6) , 7,4-7,8 (m, 4 H, aromatisk ) , 6,14 (t, 1 H, 3-1 Hz, H^ ), 30 4,65 (s, 2 H, -CH2-fV 3,9-4,3 (m, 4 H, Η , Η , H3 ), 3,85 (s, 2 H, NH^HjCOj-) , 3,37 (b, 2 H, H20), 2,0-2,5 (m, 2 Η, H2').

35 19 DK 171236 B1

Forbindelse 5 Struktur: R1 = NH2CH2CO-, r2 = no2-£)-ch2-

Saltform : hydrochlorid Udbytte : 52% 1H-NMR TMS som standard 6 (DMSO-dg) 10 11,7-11,9 (b, 1 Η, NH) , 7,95 (d, 1 H, H6), 8,15 (d, J=9 H 2, aromatisk ), 7,62 (d, J=9 K z, aromatisk ), 6,14 (t# 1 H, J=7 Hz, H1'), 4,70 (s, 2 H, -CH2 <3>.

3,90-4,30 (m, 4 Η, H3', H4', H5'), 3,85 (s, 2 H, 15 NH2CH^C02-), 3,64 (b, 2 H, H20), 2,1-2,4 (m, 2 H, H2').

20 Forbindelse 6

Struktur: Rx = NH2CH2CO-, r2 = ch3o- <Q>-ch2-

Saltform: hydrochlorid 25 Udbytte : 72% 1H-NMR,TMS som standard 6 (DMSO-d6) 11,7-11,9 (b, 1 Η, NH), 8,01 (d, 1 H, J=7 Hz, H6) , 7,27 (2 H, d, J=9 Hz, aromatisk), 6,94 (2 H, d, J=9 30 7 1

Hz, araratisk ), 6,11 (t, 1 H, J=7 Hz, H* ), 4,45 (s, 2 H, -CH2-0), 3,90-4,20 (m, 4 Η, H3', Η4', H5'), 3?85 (S, 2 H, NHjCH^COj-), 3,60 (b, 35 2 Η, H20), 2,10-2,40 (m, 2 Η, H* ).

Forbindelse 7

Struktur: Rj = NH2CH2CO-, 20 DK 171236 B1 R2 = t-butyl-<^^>-CH2-

Saltform: hydrochlorid Udbytte : 65% 1H-NMR,TMS som standard δ (DMSO-dg) 10 11,8-12,0 (b, 1 Η, NH), 7,98 (d, 1 H, J=7 Hz, H6) , 7,20-7,60 (m, aromatisk ), 6,11 (t, 1 H, J=7 Hz, H1'), 4,49 (s, 2 H, -CH2-^J^>), 3,90-4 ,20 (m, 4 Η, Η3’, Η4’, H5'), 3,85 (s, 2 Η, ΝΗ,ΟΗ^Ο,-) , 15 ’ ~21 3,34 (b, 2 H, H20), 2,00-2,40 (m, 2 Η, H ).

Forbindele 8 20 Struktur: Rx = NH2CH2CO-,

Br R2 =^ch2- 25 Saltform: hydrochlorid Udbytte : 78% 1H-NMR,TMS som standard 6 (DMSO-d6) 11,7-12,0 (b, 1 Η, NH), 7,99 (d, 1 H, J=7 Hz, H6) , 30 7,20-7,60 (m, 4 H, aromatisk.), 6^13 (t, 1 H, J=7 Hz, H1')-, 4,54 (S, 2 H, -CHj-^^ > » 3,90-4,20 * (m, 4 Η, Η3', Η4', H5’), 3,85 (s, 2 H, NH^HgCOj-) , 35 3,36 (b, 2 H, H20), 2,0-2,40 (m, 2 Η, H2').

Forbindelse 9

Struktur: = NH2CH2CH2CO-, 21 DK 171236 B1 R2 1 C2H5- O -CH2- 5

Saltform: hydrochlorid Udbytte : 63% ^Η-ΝΜΕ,ΤΜΞ som standard δ (DMSO-dg) 10 11,7-11,90 (b, 1 Η, NK), 8,10 (d, 1 H, J=7 Hz, H6), 7j23 (s, 4 H, aromatisk), 6,12 (t, 1 H, J=7 Hz, H1 ), 4,49 (s, 2 K, ) ' 3i90"4i20 <b' 4 H' Η3', Η4’, H5'), 3,40 (b, 2 H, H-O) , 2.97 (t, J=8 15

Hz, NH2CH2CH2C02-), 2,67 (t, J=8 Hz, NH2CH2CH2C02~), ,2,66 (q, J=8 Hz, CU^CB) , 2,12-2,40 (m, 2 H, H2'), 1,17 (t, J=8 Hz, CH3CH2“^3)· 20

Forbindelse 10 NHo 25 Struktur: = (CH3)2CHCHCO-(d forbindelse), 2 “ C1^^3CH2” 30 Saltform: hydrochlorid Udbytte : 79% 1H-NMR,TMS som standard 6 (DMSO-d6) 11.8-11,90 (b, 1 Η, NH), 7,98 (d, 1 H, J=7 Hz, H6), 35 7 7 7,20-7,60 (m, 3 H, aromatisk)» 6,13 (t, 1 H, J=7 22 DK 171236 B1

Hz, H1'), 4,55 (s, 2 H, -CHj-^^), 4 ,00-4 ,40 (b, 4 K, Η3', Η4', H5'), 3,35 (b, 2 H, HjO) , 2,10-2,50 5 (m, 2 H, H2'), 1,50-1,9 (ni, 1 H, (CH3) 2CHC (NH2) HCC>2-) , 0,7-1,2 (m, 6 H, (CH3)2CHC(NHj)HC02~).

Forbindelse 11

Struktur: = NH2(CH2)5CO-, 1° CH3 R2 - 0^CH2-

Saltform: hydrochlorid 15 Udbytte : 76% ^H-NMR,TMS som standard δ (DMSO-d6) 11,7-11,9 (b, 1 Η, NH), 8,00 (d, 1 H, J=7 Hz, H6), 7,1-7,2 (m, 4 H, aromatis^, 6,12 (t, 1 H, J=7 Hz, H1'), 4,52 (s, 2 H, -CH2-0), 4,0-4,4 (b, 4 Η, Η3', Η4', H5 *), 3,34 (b, 2 H, H.,0) , 3,0 (t, J=8 Hz, NH2(CH2)4CH2C02-, 2,10-2,50 (m, 25 2 Η, H2'), 1,0-2,5 (m, 8 H, NH2(CH2)^CH2C02"), 2,29 (s, 3 H, ch3 30 Forbindelse 12

Struktur: Rx = NH2CH2CO-, r2 - c1-<0CH2'

Saltform : hydrochlorid 35 Krystalform: amorf

Udbytte : 72% 23 DK 171236 B1 ^H-NMR, TMS som standard 6 (DMSO-d6) 11.7- 11,9 (b, 1 Η, NH), 8,02 (d, 1 H, J=7 Hz, 5 6 H ), 7,40 (s, 4 H, aromatisk) , 6,13 (t, 1 K, J=7 Hz, H1'), 4,55 (s, 2 H, “CHj-^J^) , 4-,0-4,4 (b, 4 Η, Η3', Η4’, H5'), 3,84 (s, 2 H, NH2CH2C02-), 3,34 (bs, 2 Η, H,0) , 2,10-2,50 (m, 2 Η, H2') .

Forbindelse 13 nh2

15 I

Struktur: R1 = CH3CHCO-, R2 = C1-<0,-CH2- 20 Saltform: hydrochlorid Udbytte : 78% 1H-NMR,TMS som standard 6 (DMSO-dg) 11.8- 12,0 (b, 1 Η, NH) , 8,00 (d, 1 H, J=7 Hz, H6), 25 * lt 7,40 (s, 4 H, aromatisk), 6,12 (t, 1 H, J=7 Hz, H ) 4,55 (s, 2 H, -CH2-Q), 3,90-4,4 (b, 4 H, Η3', Η4', H5'), 4,00 (m, 1 H, CH3C(NH2)HC02~), 30 3,35 (bs, 2 K, H20), 2,10-2,50 (m, 2 Η, H2 ), 1,43 (d, 3 H, J=8 Hz, CH3C (NH2)HC02-) .

Forbindelse 14 35 CH, NH, \ I 2

Struktur: Rj = ^CHCHCO-, CH3 R2 - C1OCB2- 24 DK 171236 B1

Saltform: hydrochlorid Udbytte : 82% 1H-NMR,TMS som standard 5 6 (DMSO-dg) 11,,0-11,5 (b, 1 Η, NH) , 7,95 (d, 1 H, J=7 Hz, H6) , 7,35 (s, 4 H, aromatisk) » 6,10 (t, 1 H, J=7 Hz, H1'), 4,50 (s, 2 H, -CH2-Q>), 4,00-4,40 (b, 4 Η, Η , Η , H3 ), 3,80 Id, 1 H( (CH3)2CHC(NHj)HC02>), 3,30 (bs, 2 H, H20) , 2,10-2,50 (it, 2 Η, H2'), 1,50- I, 90 (b, 1 H, (CH3)2CHC(NH2)HC02-), 0,70-1,10 (m, 6 H, (CH.) ,CHC(NH,)HCO--) .

15 -1 2. 2 2

Forbindelse 15 NH2

20 I

Struktur: H1 = (CH3)2CHCH2CHCO-, R2 = Cl- 0-CH2-Formsalt: hydrochlorid 25 Udbytte : 77% 1H-NMR,TMS som standard δ (DMSO-d6) II, 50-11,90 (b, 1 Η, NH), 7,96 (d, 1 H, J=7 Hz, H6) , 7,4 0 (s / 4 H, aromatisk), 6,15 (t, 1 H, J=7 Hz, H1') , 4,53 (s, 2 H, -CH2-^J^> ) , 3 ,60-4,20 (m, 4 Η, Η3' , H4 ' , H5 ), 3,25 (t, 1 H, J=ll Hz, (CH3) 2CHCH2C (NH2)JLC02-) , 2,12-2,50 (m, 2 Η, H2'), 1,20-1,90 (m, 3 H, 35 (CH3)2CILCH2C(NH2)HC02-) , 1,00 (s, 3 H, OH, J ^CHCH,C(NH,)HCO,-), 0,90 (s, 3 H,

CV

CH, ""““^CHCH-C (NH,) HCO,-) , CH3^ * * λ

Forbindelse 16 25 DK 171236 B1 |CH3 5 Struktur: R1 = CH3CH2CHCHCO-, nh2 r2 = cl- £)-ch2- 10 ~

Saltform: hydrochlorid Udbytte : 81% ^H-NMR,TMS som standard δ (DMSO-d6) 11,50-12,00 (b, 1 Η, NK) , 8,00 (d, 1 H, J=7 Hz, H6), 15 1' 7,40 (s, 4 H, aromatisk) , 6,15 (t, 1 H, J=7 Hz, ), 4,60 (s, 2 H, -CH2-£}), 4,01-4,42 (m, 4 Η, Η3’, H4 *, H5’), 3,85 (d, 1 H, J=6 Hz, CH3CH2C(CH3)HC(NH2)HC02-), 20 3,20-3,40 (m, 2 H, H20), 2,20-2,40 (b, 2 H, H2'), 1,80-2,40 (b, 1 H, CK3CH2C(CH3)HC(NH2)HCOj-), 0,70-1,80 (m, 8 H, CH3CH2C(CH3)HC(NH2)HC02~).

25

Forbindelse 17 N»2

Struktur: Rx = CH3C02CH2CHC0-, 30 e2 - Cl- O -CH2-

Saltform: hydrochlorid Udbytte : 75% 1H-NMR,TMS som standard 35 δ (DMSO-dg) 26 DK 171236 B1 11,8-12,0 (b, 1 Η, NK), 8,22 (df 1 H, J=7 Hz, H6), 7,41 (s, 4 H, aromatisk ), 6,14 (t, 1 H, J*7 Hz, H1 ’) , 5 4,61 (s, 2 K, -CH2^3 ) , 4,00-4,40 (m, 4 H, , HS , ), 3,20-3,40 (mf 2 H, HjO), 2,10-2,50 (b, 2 Η, H2'), 2,0 (s, 3 E, C^COjCHjC (NHj) HCOj-) .

10 15 20 25 30 35 27 DK 171236 B1

Forbindelse 18 |NH2 5 Struktur: R1 = CH3SCH2CH2CHCO-, E2 = Cl- Och2-

Saltform: hydrochlorid Udbytte : 74% 10 ^H-NMR,TMS som standard δ (DMSO-dg) 11,80-12,00 (b, 1"Η, NH) , 7,98 (d, 1 H, J=7 Hz, H^) , 7,38 (s, 4 H, aromatisk)» 6,10 (t, 1 H, J=7 15 Hz, H1'), 4,52 (s, 2 H, -CH2-^^ ) , 3,95-4,45 (b, 4 Η, Η3', Η4', H5'), 3,15-3,45 (m, 2 H,' H20), 3,40 (t, 1 H, CH3SCK2CH2C(NH2)HC02-), 2,85-2,90 (m, 2 H, CH-jSCHjCHjC (NH2) HCC>2-) , 20 o . ~ 2,20-2,40 (b, 2 Η, H ), 2,20 (s, 3 H, CH^SCH2CH2C (NH2)HC02-), 1,50-1,60 (m, 2 H, CH3SCH2CH2C(NH2)HC02-).

25 30 35

Forbindelse 19 28 DK 171236 B1 0 NH? 5 /—λ 11 ^

Struktur : = ({__7-CH;)0CCH2CHC0-, r2 - C1-<Q-CH2- 10 Saltform: hydrochlorid Udbytte : 73% 1H-NMR,TMS som standard 6 (DMSO-d6) 11, 8-12 jO (b, 1 Η, NH)# 8,00 (d, 1 H, J=7 Hz, H6) , 15 7,39 (s, 4 H, aromatisk )» 7,35 (g, 4 H, <^>-CH2OCOCH2C (NH2) HC02-) , 6,11 (t, 1 H, J=7 Hz, H1'), 5,11 (S, 2 H, ^^-CH20C0CH2C(NH2)HC02-) , 20 4,52 (s, 2 H, -CH2-0)), 3,95-4,40 (b, 4 H, Η3', Η4', H5'), 3,10 (bs, 2 H, HjO), 2,10-2,40 (b, 2 H, H2').

Forbindelse 20 25 nh2

Struktur Rj = NH2(CH2)4CHCO-, 30 R2 = Cl-^[^-CH2-

Saltform: hydrochlorid Udbytte : 26% 1H-NMR,TMS som standard 35 δ (DMSO-dg) 29 DK 171236 B1 11,45-11,90 (b, 1 Η, NH) , 7,95 (d, 1 Η, J=7 Hz, H6), 7,35 (s, 4 H, aromatisk ) , 6,13 (t, 1 H, J=7 Hz, H1') , 4,50 (s, 2 H, -CH2-f3 ) , 3,95-4,45 (b, 4 Η, H3', ^ 4' 51 Η , H ), 3,10-3,65 (b, 1 H, NH2(CH2)4C(NH2)HC02-), 3,20-3,40 (m, 2 Η, Η2<3) , 2,65-3,10 (b, 2 H, NH2CH2(CH2)3C{NH2)HC02-), 2,10-2,50 (m, 2 Η, H2'), 10 1,00-2,10 (b, 6 H, NH2CH2(CH^)3C(NH2)HCOj-).

Forbindelse 21 nh2

Struktur: R^ -O -ch2chco-, 15 r2 = cl- \ /-ch2-

Saltform: hydrochlorid Udbytte : 79% *-H-NMR,TMS som standard 20 δ (DMSO-d6) 11,90 (b, 1 Η, NH), 8,00 (d, 1 H, J=8 Hz, H6) , 7,40 (s, 4 H, aromatisk), 7,23 (s, 5 H, aronatisk ^^-CH2C(NH2)HC02-) , 6,10 (t, 1 H, J=8 Hz, 25 H1'), 4,50 (s, 2 H, -CH2^Q ) , 4,00-4,40 (b, 5 H, H3', H4', H5' , ^^kCH2C(NH2)HC02-) , 3,20-3,50 (m, 2 H, H20), 3,19 (s, 2 Η, (NH2> HC02>) , 2,00-2,15 (b, 2 Η, H2'), 1,08 (t, 1 H, J=8 Hz, 3^ diethylether (opløsningsmiddel)).

Forbindelse 22 yNK nh2 35 Struktur: R, - R2 . C1-Q.CH,- 30 DK 171236 B1

Saltform: 1/2 tartrat Udbytte : 80% 1H-NMR,TMS som standard δ (DMSO-dg)

5 H

Η N H

7,60 (s, 1 H, CL -CH2C(NH2)HC02-), 7,40 (s, 4 H,

H

10 Η H

aromatisk), 6,90 (s, 1 Η, -CH2C (NH2) HC02~) , 6,10 (t, 1 H, J=8 Hz, H1'), 4,50 (s, 2 H, “CH2"^^)/ 3^0-4,40 (m, 5 H, H3’, H4 ' , H5 ’ ,

H

As N——-CH2C(NH2)HC02-) ,

20 H

/\ 2,80-3,05 (m, 2 H, -CH2C(NH2)HC02“), 2,10-2,40 (m, 2 H, H2').

25

Forbindelse 23 NH- i 2 R, = CH..CHCO-, 30 Struktur: 1 r2 = ci-^Y>-ch2-

Saltform: CH3‘O>*S03H salt Krystalform: amorf 35 Udbytte: 82% 31 DK 171236 B1 ^H-NMRiTMS som standard 6 (DMSO-D6) 11,65-12,00 (b, 1 Η, NH), 7,95 (d, 1 H, J=8 Hz, 5 H6), 7,20, 7,38, 7,78 & 7,90 (s, 4 H, CH^ ^-SO^H) , 7,4 0 (s, 4 H, aromatisk ) , 6,11 (t, 1 H, J=8 Hz, H1'), 4,55 (s, 2 H, ) , 3,90-4,40 (m, 4 H, H3', H4', H5’), 3,72, (m, 10 1 7 1 K, CH3C(NH2)HC02-), 3,38 (s, 2 H, H20), 2,20-2,40 (fc, 2 Η, H2'), 2,23 (s, 3 H, CH3^J^-S03H) , 1,40 (d, 3 H, J=8 Hz, CH3C(NH2)HC02-) .

15

Forbindelse 24 nh2 20 Struktur: R2 = CH3CHCO-, R2 - C1-<0'CH2‘

Saltform: 1/2 maleat 25 Udbytte : 38% 1H-NMR,TMS som standard 6 (DMSO-d6)

CHCOOH

II

12,45 (s, 1 H, CHCOOH), 7,95 (d, 1 H, J=8 Hz, 30 6 H ), 7,40 (s, 4 H, aromatisk ), 6,30 (s, 1 H,

CHCOOH

r j, CHCOOH), 6,10 (t, 1 H, J=8 Hz, H1 ), 4,52 (s, 35 2 H, -CH2-Q), 3,90-4,42 (m, 4 H, H3 ' , H4 ’ , H5 ’) , 4^05 (q, 1 H, J=8 Hz, CH3C(NH2)HC02~), 3,38 (b, 32 DK 171236 B1 2 H, H20), 2,18-2,40 (m, 2 Η, H2'), 1,39 (d, 1 H, J=8 Hz, CH3C(NH2)HC02-).

5 Forbindelse 25 |rø2

Struktur: R1 = CH3CHCO-, 10 R2 = C1" O'®2'

Saltform: 1/2 tartrat Udbytte : 57% 15 1H-NMR,TMS som standard 6 (DMSO-dg) 11,80-12,00 (b, 1 Η, NH), 7,98 (ά, 1 H# J=8 Hz, E^) , 7,39 (s, 4 H, araratisk ) , 6,10 (t, 1 H, J=8 20 Hz, H1'), 4,50 (s, 2 H, -CH2"^^ ) , 4,00-4,50

COOH

(n, 4 Η, Η3’, Η4', H5'), 4,40 (ε, 1 H, HOCH

HCOH

25 1 COOH), 4,00 (m, 1 H, CH3C(NH2)HC02-), 3,40 (b, 2 H, H20) , 2,20-2,40 (m, 2 H, H2') , 1,40 (d, 3 H, J=8 Hz, CH^C(NH-)HC02-).

30 -1

Forbindelse 26 nh2 35 Struktur: R1 = CH3CHCO-, R2 = C1-^CH2-Saltform: 1/3 citrat 33 DK 171236 B1

Udbytte: 74% 1H-NMR,TMS som standard δ (DMSO-dg) 5 11,70-12,10 (b, 1 Η, NH), 10,0-12,0 (b, 2 H,

CH.COOH

I 2

HOOCCOH

CH2COOH), 7,95 (d, 1 H# J=8 Hz, H6), 7,40

10 II

(s, 4 H, aromatisk ) , 6,11 (t, 1 H, J=9 Hz, H ), 4,51 (s, 2 -H, -CK2-Q> ) , 4 ,00-4 ,50 (m, 4 K,

Η3', Η4', H5'), 4,05 (η, 1 H, CH3C(NK2)HCOj-), 3,35 , _ CH..COOK

15 I 2

(b, 2 Η, H,O), 2.72 (s, 2 H, HOOCCOH 2 Ί I

CH,COOH), 2,20-2,39 (m, 2 Η, H2’), 1,39 (d, 3 H, J=8 Hz, 20 CH3C(NH2)KC02-) .

Forbindelse 27 nh2 25 Struktur: R1 = CH3CHCO-, r2 = cl- ^>ch2-

Saltform: phosphat 30 Udbytte : 40% ^H-NMR,TMS som standard 6 (DMSO-dg) 11,65-12,00 (b, 1 Η, NH), 7,90 (d, 1 H, J=8 Hz, ^ H^) , 7,40 (s, 4 H, aromatisk), 6,05 (t, 1 H, J=8 DK 171236 B1

Hz, H1'), 4,50 (s, 2 H, -CH2-f3 > ' 4,00-4,50 (m, 4 Η, Η3’, Η4', H5'), 4,00 (m, 1 H, CH-jC (NH2) HCOj-) , 3,35 (b, 2 H, H20), 2,15-2,40 (m, 2 Η, H2'), I, 40 (d, 3 K, J=8 Hz, CH3C (NH^HCOj-) .

Forbindelse 28

Struktur: Rx = NH2CH2CO-,

r2 - Cl- /W

10 Saltform: -

Udbytte : 75% ^H-NMR,TMS som standard 6 (DMSO-dg) II, 80-12,00 (b, 1 Η, NH) , 7,90 (d, 1 H, J=8 Hz, H^) , 7,40 (s, 4 H, araretisk ) , 6,15 (t, 1 H, J=8

Hz, H1'), 4,54 (s, 2 H, ] ’ 4>00~4>50 (n, 4 H, H3', H4’, H5’), 4,06 (2 H, s, NHjCH^CC^-) , 2' 2Q 3,32 (b, 2 H, H20), 2,10-2,50 (m, 2 Η, H ).

Forbindelse 29

25 NH

Struktur: Rx = ~ R2 = C1O^CH2_ 30 Saltform: hydrochlorid Udbytte : 63% 1H-NMR,TMS som standard 6 (DMSO-dg) 11,80-12,10 (b, IH, NH), 8,03 (d, 1 H, J=8 Hz, 35 DK 171236 B1 Λ°-

Hb) , 9,3-10,2 (b, 1 H, \ / ), 7,41 (s, 4 H, aromatisk) , 6,13 (t, 1 H, J=8 Hz, H ^ ), 4,56 (s, 2 H, "CH2"CZ) ) ' 4<>00"4ϊ50 (m' 4 H' r3'' h4'' h5')# 3>22 5 (b, 2 H, H20), 2,00-2,50 (m, 2 Η, H2').

Forbindelse 30

Struktur: Rx = NH2CH2CO-, 10 R2 = HO- O -CH2"

Saltform: hydrochlorid

Udbytte : 53% ^H-NMR,TMS som standard 15 6 (DMS0-d6) 11,7-11,9 (b, 1 Η, NH) , 9,37 - (bs, -ζ^-ΟΗ) , 7,92 (d, 1 H, J=8 Hz, H6), 7,14 (d, J=8 Hz, 2 H, aromatisk , 6,70 (d, J= 8 Hz, 2 H, aromatisk ) / 6,08 20 {t, 1 H, J=8 Hz, H1'), 4,52 (s, 2 H, -CH2-^j) ) , 4,0-4,4 (m, 4 H, H3', H4', H5'), 3,82 (s, 2 H, NH2CH2C02-), 3,35 (bs, 2 H, H20), 2,0-2,45 (m, 2 H, H2’).

25 30 35 DK 171236 B1 36

Eksempel 8 (A) Fremstilling af 5'-0-[N-(t-butoxycarbonyl)glycyl]-3'-O-(4-chlorbenzyl) -2'-desoxy-5-fluoruridin.

Til en opløsning af 9,45 g N-(t-butoxycarbonyl)-5 glycin i 60 ml acetonitril satte man 6,13 g dicyclo-hexylcarbodiimid under omrøring og isafkøling. Efter 3 timers forløb frafilterede man udfældet dicyclohexyl-urinstof og indkoncentrerede filtratet. Man opløste den olieagtige remanens i 15 ml vandfri pyridin og 10 satte til denne opløsning 5,00 g 3'-O-(4-chlorbenzyl)-2'-desoxy-5-fluoruridin. Man lod blandingen henstå i 3 timer ved stuetemperatur og 30 min. ved 40°C, hvorefter man tilsatte 5 ml vand ved stuetemperatur, lod blandingen henstå i 30 min. og indkoncentrerede. Man opløste 15 remanensen i 50 ml ethylacetat og vaskede opløsningen 3 gange med en mættet vandig opløsning af natrium-hydrogencarbonat og 2 gange med en mættet vandig opløsning af natriumchlorid. Nu tørrede man opløsningen over vandfri magnesiumsulfat og indkoncentrerede.

20 Remanensen blev sat på en silicagelkolonne og elueret med 1% methanol-chloroform til opnåelse af 5,33 g (75%) 5'-O-[N-(t-butoxycarbonyl)glycyl]-3'-O-(4-chlor benzyl )-2'-desoxy-5-fluoruridin.

NMR (DMSO-dg) 6: 11,85 (IH, bs, NH) , 7,94 (IH, d, 25 J = 7Hz, C6_H), 7,40 (4H, S, CgH4Cl) , 7,20 (IH, t, J = 6Hz, OCONH), 6,14 (IH, t, J=6Hz, C-p-H), 4,54 (2H, s, C—2C6H4Cl)' 4,30-4,16 (4H, m, C3. 415.-H), 3,74 (2H, d, J=6Hz, CH2CO), 2,38-2,83 (2H, m, C2.-H), 1,37 (9H, S, CH3 X 3) 30 (B) og (C)

Idet man fulgte fremgangsmåden beskrevet ovenfor under (A) og anvendte relevante udgangsmaterialer fremstillede man forbindelserne vist i Tabel 2. I denne 35 tabel betegnes forbindelserne ved hjælp af R2 og R1 grupper i formlen (I). Dette gælder også for de følgen- 37 DK 171236 B1 de tabeller. Endvidere betyder "Str" struktur i tab.

2 og i de følgende tabeller.

DK 171236 B1 38

Tabel 2

Eksempel 8 ( B ) 5

Str : Rs = - CHi-<^~yc g R i = (f^VcHj O-C-NHCH, c-N==/ il il

1 ° Udbytte : 4 3 % O O

NMR (DMSO-ds ) δ : 11, 85 (IH, s, NH) 7, 9 3 (1 H, d, J = 7H 2, Ce -H) 15 7, 6 9 (IH, t, J = 6 H z , OCONH) 7, 3 9 · (4 H, s, Cs Ht Cg) 7, 33 (5H, s, Cs Hs) 6, 13 (IH, t, J = 6 H z , C..-H) 5, 04 (2 H, s, CHi Cs H5 ) 20 4, 5 3 (2 H, s, CH2 Cs Ht Cg ) 4, 30-4, 14 (4 H, m, Cg· ,· 5·-Η) 3, 8 3 (2H, d, J = 6 H z , c'H2’C0) 2, 3 7-2, 2 7 (2 Η, m, Cj.-H) 25 30 35 39 DK 171236 B1

Eksempel 8 ( C ) s Str : Ra = - C Hj —5

Ri = C H s O-f \-C H2 O-C-NHCHi C-^==7 II II

O o

Udbytte ’.73% NMR (DM S 0 - d6 ) δ : 11, 86 (IH, b s, NH) 7, 92 (IH, d, J = 7 H z , C6 -H) 7, 62 (IH, t, J = 6 H z , OCONH) 15 7, 4 0 (4 H, s, Cs Hi C6) 7, 2 9 (2 H, d, J=9Hz, C 3 , 5 - H • fra nethoxybenzyl ) 6, 9 0 (2 H, d, J =9H z, C2 . s -H fra nethoxybenzyl ) 20 6, 1 5 (IH, t, J = 6 H z , Cr-H) 4, 9 7 (2 H, s, CH2 Cs Ha OCH3 ) 4, 53 (2 H, s, C ϊ£2 C5 HA C δ ) 4, 3 0-4, 19 (4 H, m, C3. g.-H) 3, 84 (2 H, d, J =6Hz, CH2 CO) 25 3 , 74 ( 3H, s, OCH3 ) 2, 32-2, 20 (2 H, m, C2--H) 30 35 40 DK 171236 B1 (D) Fremstilling af 5'-O-(N-benzyloxycarbonyl)glycyl-3'-O-(4-chlorbenzyl)-21-desoxy-5-fluoruridin.

Til en opløsning af 1,00 g 3'-O-(4-chlorbenzyl)-2'-desoxy-5-fluoruridin i 20 ml pyridin satte man 1,23 5 g N-benzyloxycarbonylglycinchlorid og lod blandingen henstå ved stuetemperatur i 2 dage under reaktion.

Man indkoncentrerede reaktionsblandingen under reduceret tryk og satte 30 ml ethylacetat og 20 ml vand til remanensen. Man fraskilte det organiske lag og 10 tørrede det over vandfri magensiumsulfat, hvorefter man bortdestillerede opløsningsmidlet. Den opnåede olieag-tige remanens blev sat på en silicagelkolonne og elue-ret med 1% methanol-chloroform til rensning og opnåelse af 0,26 g (17%) af det ønskede 5'-O-(N-benzyloxy-15 carbonyl)glycyl-3'-O-(4-chlorbenzyl)-2'-desoxy-5-fluor-uridin.

Det således opnåede produkt blev ved hjælp af tyndtlagschromatografi identificeret som den samme forbindelse som ved eksempel 8 (B) (opløsningsmiddel til 20 fremkaldelse chloroform:methanol = 39:2, påvisning; bestråling med UV).

(E) Fremstilling af 3'-O-(4-chlorbenzyl)-2'-desoxy-5-fluor-5'-0-glycyluridin,hydrochlorid.

25 I 3 ml 4N HC1 i dioxan opløste man 0,88 g 5'- 0-[N-(t-butoxycarbonyl)glycyl]-3'-O-(4-chlorbenzyl)-2'-desoxy-5-fluoruridin opnået i eksempel 8 (A), og man lod blandingen henstå i 30 min. ved stuetemperatur. Man bortdestillerede opløsningsmidlet, satte remanensen 30 på en silicagelkolonne og eluerede med 4-6% methanol-chloroform til opnåelse af 0,36 g (45%) 3'-0(4- chlorbenzyl)-2'-desoxy-5-fluor-5'-O-glycyluridin, hy-drochlorid.

41 DK 171236 B1

Form: Hygroskopisk pulver.

NMR (DMSO-dg) 6: 11,83 (IH, bs, NH), 8,68 (3H, bs, NH2, HC1), 8,04 (IH, C, J=7Hz, Cg-H), 7,41 (4H, S, C6H4C1), 6j15 (IH, t, J=6Hz, ,-K), 4,56 (2K, s, CH2C6H4C1), 4,41-4,15 (4H, n, C3·,4 «,5·“Η), 3;83 (2H, s, CHjCO), 2,44-1,93 (2H, m, C2,-H) 10 Elementæranalyse for: C1gHigClFN3Og,HC1,H2

Beregnet : C, 44,83%, H, 4,60%, N, 8,71%

Fundet : C, 44,64%, H, 4,91%, N, 8,43%

Eksempel 9-17 15 Idet man anvendte relevante udgangsmaterialer fulgte man fremgangsmåden fra eksempel 8 (A) og derefter fremgangsmåden for eksempel 8 (E) til opnåelse af forbindelserne vist nedenfor i Tabel 3. Forbindelsen fra eksempel 12 blev opnået ved hjælp af fremgangsmåden 20 fra eksempel 8 (A).

25 30 35 DK 171236 B1 42

Tabel 3

Eksenpel 9 5

Str : R2 =-CH2^(3 R, = H C δ ^NH2 CH2 C-

II

Udbytte : 2 7 % O

Form Hygroskopisk pulver NMR (DM S 0-d 6 ) <5 : 11, 83 (IH, b s, NH) 8, 54 (3 H, b s, NH2 , HCn 15 8, 01 (IH, d, J=7Hz, CB -H) 7? 3 5 (5H, s, C6 H5 ) 6, 14 (IH, t, J =6Hz, Cr-H) 4, 5 6 (2 H, s, CH2 C6 H5 ) 4, 40-4, 16 (4 H, m, Cg. 4· 5·-Η) 20 3 , 82 C 2 H, s, CHj CO) ’ ’ 2, 4 2-2, 29 (2 H, m, Cj.-H) 25 30 35 43 DK 171236 B1

Eksempel 1 O

5 Str : R2 =-Ca2-H^~\oCH3

Ri = H C S ^ NH2 CHj C-

II

io 0

Udbytte : 2 8 %

Form : Hygroskopisk pulver NMR (DMSO - d6 ) δ : 11, 86 (1 H, b s, NH) 15 9, 4 8 (3 H, b s, NH2 , HCn 8, 04 (IH, d, J = 7H z, C6 -H)

7,29 (2 H, d, J =8H z, C3 . s -H

fra benzenringen)

6, 94 (2 H, d, J =8H z, C2 . ε -H

20 fra benzenringen) 6, 1 3 (IH, t, J = 6Hz, Cr-H) 4, 48 (2 H, s, CH2 Cs Ha -OCH3 ) 4 ^ 39-4, 18 (4 H, m, C3. 4· δ·-Η) 3, 82 (2 H, s, CH2 CO) ' ’ 25 2, 3 7 - 2; 28 (2 H, m, Cg.-H) 30 e> 35 44 DK 171236 B1

Eksempel 11

Str : Rg =-CH2^) R, =HC2 ^ NH2 CH2 C-

II

io O

Udbytte : 8 8 %

Form : Hygroskopisk pulver NMR (DMS 0- d g ) <5 : 11; 86 (IH, b s, NH) 15 8, 6 7 (3 H, b s, NH2 , HCC ) 8, 04 (IH, d, J=7Hz, C6 -H) 7^ 6 8-7, 2 5 (4H, m, C6 H4 Br) 6, 17 (IH, t , J =6H z, Cr-H) 4,60 (2 H, s, CH2 C6 H4 Br) 20 4j 4 3 - 4} 20 (4 H, m, Cg. 4· g.-H) 3, 83 (2 H, s, CH2 CO) ’ ' 2^ 4 1-2, 35 (2H, m, Cg.-H) 25 30 35 45 DK 171236 B1

Eksempel 12 s Str : R2 = -CH!n^\ci

O

" ^ R) = - C - C H s CH2 -N >iHC5 10 N-'

Udbytte : 2 6 %

Form : Hygroskopisk pulver NMR (DMSO-ds ) δ : 11, 8 3 (IH, b s , NH) 15 10, 82 (IH, bs, HC δ ) 7, 98 (1 H, d, J =7H z, C6 -H) 7, 4 1 · (4 H, s, C6 HA C«) 6, 2 3-6, 0 6 (IH, m, Cj.-H) 4, 5 5 (2 H, s, CH2 Cb Ha C δ ) 20 4, 3 3-4, 1 6 (4 H, m, Cr r ,.-H) 3, 4 6-2, 7 9 (8 H, m, ' n/ -CH2 CH2 -N \ ) 2, 4 6-2, 28 (2 H, m, C«.-H) 25 /—< 1, 87- 1, 4 0 (6 H, m, - lT~S< ) 30 35 46 DK 171236 B1

Eksempel 13 S Str : R2 = -CHj-jTyct

Ri =HC{ i NHa - CH-C- I II (L)

C H O

10 / \ ch3 ch3

Odbytte : 5 5 %

For ID i Hygroskopisk pulver NMR (DMSO-ds ) <5 : 15 11, 80 (IH, bs, NH) 9, 3 0 (3 H, b s, NH2 , HCS ) 8, 0 0 * (1 H f d, J = 7 H z , C6 -H) 7, 40 (4H, s , C6 Ha C β ) 6, 14 (IH, t, J = 6 H z , C..-H) 20 4, 5 6 (2 H, s , C H2 C6 H* C δ ) 4, 42-4, 16 (4 H, m, Cg. 4· 5·-Η) 3, 83 (IH, d, J = 5Hz, C'HC’O) 2, 4 3-2, 08 (3 H, m, C2--H, (CH3 ) a CH-) 25 o, 9 7, 0, 9 3 (hver 3 H, d, J=7Hz, CH3 ) 30 35 47 DK 171236 B1

Eksempel 14

5 Str : R2 =-CH2-^y.CQ

Ri =HC Q j NH2 -CH-C- I II (L)

CH2 O

10 *

C H

ch! \h3

Udbytte : 5 1 % 2 5 For DJ Hygroskopisk pulver NMR (DM S O - d 6 ) <5 : 11, 80 (IH, b s, N3 -H) 8, 82 (3 H, b s, NH2 , HCfi ) 8, 02 (IH, d, J = 7 H z, C6 -H) 20 7, 4 1 (4 H, s, C6 Ha Cg ) 6, 14 (IH, t , J =6H z, Cr-H) 4, 5 7 (2 H, s, CH2 C6 Ha C β ) 4,4 1 - 4 T 2 0 (4 H, m, Cy 5·-Η) 4, 00-3, 80 (IH, m, CH'COi 25 2, 5 3 _2, 32 (m, Cg· —H, faldt sarrmen med DMS O) 1, 8 5- 1, 6 7 (3 H, m, - C H2 CH (CHs ) s ) 0, 86 (6H, d, J = 5H z, CH3 x 2) 30 _j 35 48 DK 171236 B1

Eksempel 15

Str : R2 =-CH2-^\ct Ri =H C 6 j H

(Vc- (L)

V-/ II

io O

Udbytte ’.63%

Form : Hygroskopisk palver NMR (DMS 0 - de ) δ : 11, 86 (IH, b s, NH) 15 9, 9 9 (2 H, bs, prolin NH, HC6) 8, 0 3 ‘ (1 H, d, J = 7 H z , C6 -H) 7, 4 1 (4H, s, C6 Ha C δ ) 6, 14 (IH, t, J = 6 H z , Cr-H) 4, 5 7 (2 H, s, CH2 C6 Ha C β ) 20 4, 4 2 -4, 2 7 (5 H, m, C3. 4· 5·-Η, C H C 0) ’ ’ 3, 3 9-3, 18 (4 H, m, -NHCH2 CH2 CH2 ) 2, 4 0-2, 3 2 (2 H, m, Cg.-H) 25 2, 0 8- 1, 8 5 (2 H, m, -NHCH2 CJH2 CH2 ) 30 35 49 DK 171236 B1

Eksempel 16 5 Str : R2 =-CH2-f\ce

O

II

Ri =-c-ch2 ch2 nh2 ^HCC

Udbytte: 6 1 %

Form : Hygroskopisk pulver NMR (DMS 0- ds ) <5 : 15 1 1, 86 (1 H, b s, NH) 8, 1 9 (3 H, b s, NH2 , HCfi ) 7 9 7 (IH, d, J = 7 H z , C6 -H)

7, 4 1 '(4 H, s, C6 H4 CO

6, 1 2 (1 H, t , J = 6 H z , Cr- H) 20 4, 5 5 (2 H, s, CH2 C6 Ha C δ ) 4, 3 1-4, 18 (4 H, m, C8· 4· 5·-Η) 3, 03 (2 H, t, J = 6 H z , -CH2 CO) 2, 77 (2 H, t, J = 6 H z , NCH2 ) 2, 34 (2 H, t , J = 5H z . C^-H) 25 30 c> 35 50 DK 171236 B1

Eksempel 17 5 Str : Rs = -CH2h^\c{

O

II _ R i -- C—( NH iHC{ 10 \_/

Udbytte : 9 1 %

Fon : Hygroskopisk pulver NMR (DMS O - d s ) 6 : 11, 86 (IH, b s, NH) 15 9, 2 2 (2 Η, NH, H C β ) 7, 9 4 (IH, d, J =7H z, C6 -H) 7, 4 1 '(4 H, s, C, H, C{) 6, 1 2 (1 H, t, J =6H z, Cj.-H) ' 4, 54 (2 H, s, Cjis C6 H4 C« ) 20 4, 28-4, 1 6 (4 H, m, C,· ,. 5·-Η) 3, 1 8- 1, 8 3 (1 1 H, m, ’ ’ ο2·-η, C O—/ k-) 25 30 35 DK 171236 B1 51

Eksempel 18

Fremstilling af 5'-O-benzyl-21-desoxy-5-fluor-3'-0-glycyluridin,hydrochlorid.

Til en opløsning af l,00g 5'-O-benzyl-2'-desoxy-5 5-fluoruridin i 30 ml vandfri pyridin satte man 0,78 g N-(t-butoxycarbonyl)glycin og 1,80 g 2,4,6-triisopro-pylbenzensulfonylchlorid, og man lod blandingen henstå natten over til reaktion ved stuetemperatur.

Nu indkoncentrerede man reaktionsblandingen 10 under reduceret tryk og udrystede remanensen med ethyl-acetat og vand. Man vaskede det organiske lag med en mættet vandig opløsning af natriumhydrogencarbonat, tørrede over vandfrit magnesiumsulfat og indkoncentrerede under reduceret tryk. Remanensen blev sat på en 15 silicagelkolonne og elueret med 1% methanol-chloroform til rensning og opnåelse af 1,06 g af det ønskede 5'-0-benzyl-3'-0-[N-(t-butoxycarbonyl)glycyl]-2'-desoxy-5-fluoruridin.

Det ovenfor fremstillede mellemprodukt blev nu 20 opløst i 10 ml 10% saltsyre-dioxan, og man holdt blandingen under omrøring i 2 timer ved stuetemperatur.

Man indkoncentrerede reaktionsblandingen under reduceret tryk og satte remanensen på en silicagelkolonne, idet man eluerede med 10% methanol-chloro-25 form til opnåelse af 0,77 g (60%) af det ønskede 5'-0-benzyl-2'-desoxy-5-fluor-3'-O-glycyluridin,hydrochlorid .

52 DK 171236 B1

Form: Hygroskopisk pulver: NMR (DMSO-dg) 6: 9,10 (3H, bs, NH2, HC1), 7,97 (IH, d, J=7Hz, Cg-ft), 7,35 (5H, S, C6H5), 6,22 (IH, t, J=6Hz, C^-H), 5 5,36 (IH, bs, C3,-H), 4,58 (2H, s, CH2CgH5), 4,27 (IH, bs, C4,-H), 3,81 (2H, s, CH2CO), 3,77-3,71 (2H, m, Cg.-H), 2,55-2,31 (C2i-H, faldt sammen med DMSO).

10 Eksempel 19-26

Idet man benyttede relevante udgangsmaterialer og fulgte fremgangsmåden fra eksempel 18, fremstillede man de nedenfor i tab. 4 viste forbindelser.

15 20 25 30 35 DK 171236 B1 53

Tabel 4

Eksempel 19 5 Ci

Str : r2 = - c h2 -fy C e R i = H C i i NHj C H2 C -

II

10 Udbytte : 6 7 % O

Form *· Hygroskopisk pulver NMR (DM S 0- d6 ) 6 : 11, 78 (1 H, b s, NH) 8, 55 (3 H, b s, NH2 , HC6) 15 8, 0 2 (IH, d, J = 7 H z , C$ -H) 7, 6 2-7. 41 (3 H, m, C5 H3 Ci2) 6, 16 (IH, t, J=7Hz, Cr-H)' . 4, 6 1 (2 H, s , C H2 C5 H3 C S 2 ) 4,4 3-4. 1 5 (4 H, m, C.. ,· 5·-Η) 20 3 , 83 ( 2 H, s, CH2 CO) ' ’ 2, 52“ 2, 29 (Cn'-H, faldt sarrmen med DMSO) 25 30 35 54 DK 171236 B1

Eksempel 20 5 _/CH3

Str : R2 --C H2 -/)) R i = H C C } NH2 CH2 ΟΙ!

ίο O

Udbytte : 8 0 %

Form : hygroskopisk pulver NMR (DMSO-ds ) δ : 11, 7 0 Cl H, b s, NH) is 8, 5 5 (3H, b s, NH2, H C δ ) 8, 0 1 (IH, d, J = 7 H z, C6 -H) 7, 2 8-7, 11 (4 H, m, C6 H> CH3 ) 6, 1 3 (IH, t, J = 6H z, Cr-H) 4, 51 (2 H, s, CH2 -Cb Ha -CH3 ) 20 4, 4 0-4, 1 9 (4 H, m, Cg. 4· δ·-Η) 3, 82 (2 H, s, CH2 CO) ’ ’ 2, 46-2, 3 1 (5 H, m, Cg.-H, -Cs Ha -CH3 ) 25 30 35 55 DK 171236 B1

Eksempel 21 5 cc

Str : R2 =-CH2 R, =HC Q <, NH2 CH2 Οι o ^

O

Udbytte : 9 %

Form : Olie NMR (DMSO- dg) <5 : 15 8,9 7 (3 H, b s, NH2 , HCn 7, 99 (IH, d, J =7H z, C5 -H) 7, 61-7, 29 (4 H, m, C6 HA Cg) 6, 1 6 · (1 H, t, J = 6 H z , C 1 · - H) 4, 7 6-4, 24 (6 H, m,- CH2 C5 H4 C«, 20 c3\ 4’, 5’“H) 3, 85 (2 H, s, CH2 CO) 2. 54-2, 33 (Cft'-H, faldt saimen med DMSO) 25 30 35 56 DK 171236 B1

Eksenpel 22

Str : Rj = - C H2 -/~\c S

CHS O

I II (L) io Ri =HCS )NH2 - CH-C-

Udbytte • 17%

Form ' hygroskopisk pulver NMR (DMSO-ds ) δ 8, 6 1 (3 H, b s, NHj , HC{) is 7, 98 (1 H, d, J = 7H z, C6 -H) 7, 40 (4 H, s, C5 H4 C 6 ) 6, 14 (IH, t, J = 6 H z , Cj.-H) 4, 5 5 · (2 H, s, CHa C6 H4 C β ) 4, 41-4, 05 (5H, m, Cj· ^-H, 20 CH) 2, 4 3-2, 2 9 (2 H, m, C2·- H) 1,4 2 (3 H, d, J = 7H 2, CH3 ) 25 30 35 57 DK 171236 B1

Eksempel 23 5 str : _ R2 = -ch2 -j(^ R, =HCe i nh2 -ch2 c-

10 II

o

Udbytte : 5 0 %

Forffl : Hygroskopisk pulver 1S NMR (DMS O- ds ) δ : 9, 01 (3 H, b s , NH2, H C C ) 8, 0 1 (IH, d, J - 7 H z, C6 -H) 7, 4 2-7, 26 (4 H, m, Cs H4 C«) 6, 16 (IH, t, J = 6 H z , C,.-H) ' 20 4 , 57 ( 2 H, s, CH_2CsH4C8) 4, 41-4 15 (4H, m, C,· —H) 3, 80 (2¾. s. C H2 CO)3’1'5 ^^ 2 ^ 31 (C 2* “ H, faldt sammen med DMS 0) 25 --—- 30 35 58 DK 171236 B1

Eksempel 24 5

Str : R 2 = - C Hj i R i = H C δ j NH2 -CH-C- I II (L)

io C H2 O

A

k/

Udbytte : 1 15 Form ‘ Hygroskopisk pulver NMR (DMSO-de ) <5 : 9, 2 3 (3 H, b s , NHj , H C { ) 7, 9 5' (1 H, d, J = 7 H z , C5 -H).

7, 40 (4 H, s, C6 Hr C«) 28 7, 26 (5H, s, C8 Hs ) 6, 1 2 (1 H, t, J = 7Hz, C..-H) 4, 4 9 (2H, s, CHs C6 Hr Cl) 4, 31-4, 05 (5 H, m, Cj^ 5·-Η, C H ) 25 3, 2 1 -3, 08 (2 H, m. CH8 Cs H5 ) 2, 29-2, 19 (2 H, m, 02·-Η) 30 35 59 DK 171236 B1

Eksempel 25 5 Str : R2 = - C H2

II

Ri=HCC*,NH2-CH-C- (L) (CH2 ) 2 io ^ ch3

Udbytte .'23%

ForiD : Hygroskopisk pulver NMR (DMS O- d6 ) δ : 15 11, 78 (IH, bs, NH) 8,7 8 (3 H, b s, NH2 , HCfi ) 8, 01’CIH, d, J =7H z, C6 -H) 7, 41 (4H, s, C6 ΗΑ CS) 6, 1 3 (IH, t, J = 6 H z , Cr-H)

20 4, 5 6 (2 H, s, CH2 C6 Ha CO

4, 4 2-4, 0 5 (5 H, m, Cg. 4· 5·-Η, C H C O) 2, 66-2, 0 2 (9 H, m, Cg.-H, C jHs - S - (C H2 ) 2 -) 25 - 30 35 60 DK 171236 B1

Eksempel 26 5 Str : R2 - - c H2 -Z~Vf R, = H C δ ^ NH2 -CH2 -C-

II

o 1 o Udbytte I 7 2 % ΓΟΓΒ Hygroskopisk pulver NMR (DMSO- d6 ) δ : 11, 78 (IH, bs, NH) 8, 5 5 (3 H, b s, NH2 , HCi) is 8, 0 1 (1 H, d, J =7 H z. C$ -H) 7, 5 0-7, 08 (4 H, m, C$ Η» F) 6, 1 3 (1 H, t , J =6H z, Cj.-H) 4, 54 (2 H, s, CH2 Cs Hr F) 4, 41-4, 14 (4 H, m, Cg. ,. 5·-Η) 20 3 , 83 ( 2 H, s, CH2 CO) ’ ’ 2, 46-2, 28 (2 H, m, Cg.-H) 25 30 35 DK 171236 B1 61

Eksempel 27

Fremstilling af 3'-O-(4-chlorbenzyl)-2'-desoxy-5 ' -O-(3-diethylaminopropanoyl)-5-fluoruridin,hydrochlorid.

Til en opløsning af 3-diethylaminopropansyre, 5 hydrochlorid i 30 ml tetrahydrofuran, der var afkølet til -15eC, satte man 0,56 ml triethylamin og 0,50 ml isobutylchlorformiat til opnåelse af et blandet syre-anhydrid.

Til denne blanding satte man 1,00 g 3’—O—(4-10 chlorbenzyl)-2'-desoxy-5-fluoruridin og 0,56 ml triethylamin, og man holdt blandingen under omrøring ved stuetemperatur natten over. Man frafiltrerede udfældet bundfald og indkoncentrerede filtratet, hvorefter man satte remanensen på en silicagelkolonne og 15 eluerede med 5% methanol-chloroform til opnåelse af 0,10 g (7%) 31-O-(4-chlorbenzyl)-2'-desoxy-5'-O- (3-diethylaminopropanoyl)-5-fluoruridin,hydrochlorid.

Form: Hygroskopisk pulver.

NMR (DMSO-dg) 6: 20 11,96 (IH, bs, NH), 7,98 (IH, <3, J=7Hz, Cg-H), 7,41 (4H, S, C6H4C1), 6.16 (IH, t, J=6Hz, C^.-H), 4,55 (2H, s, CH2C6H4C1), 4,27-4 ,23 (4H, m, C3,r 4 < # 5·—H), 3,19-2,94 (8H, m, CH2CH2CO, CH2CH3 x 2), 25 2,41-2,33 (2H, m, C2.-H), 1,21 (6H, t, J=7Hz, CH3 x 2)

Eksempel 28

Fremstilling af 3'-O-(4-chlorbenzyl)-2'-desoxy-5-fluor-30 5'-O-glycyluridin,L-tartrat.

Til 0,50 g 5'-0-[N-(t-butoxycarbonyl)glycyl ]-3'-O-(4-chlorbenzyl)-2'-desoxy-5-fluoruridin opnået i eksempel 8 (A) satte man 2 ml 4N saltsyre i dioxan, og man lod blandigen henstå i 15 min. ved stuetemperatur.

35 Derefter bortfordampede man opløsningsmidlet og opløste remanensen i en lille mængde vand. Man gjorde opløsnin- 62 DK 171236 B1 gen svagt basisk med en mættet vandig opløsning af na- triumhydrogencarbonat og ekstraherede den tre gange med 40 ml ethylacetat. Ethylacetatlaget blev tørret over vandfri magnesiumsulfat, man tilsatte en opløsning af 5 0,14 g L-vinsyre i ethylacetat og indkoncentrerede blandingen til ca. 40 ml. Man frafiltrerede det dannede bundfald til opnåelse af 0,38 g (65%) 3'-O-(4-chlor- benzyl)-2'-desoxy-5-fluor-5'-O-glycyluridin,L-tartrat.

Form: Hygroskopisk pulver.

10 NMR (DMSO-dg) 6: 7,97 (IH, d, Js7Hz, Cg-H), 7,40 (4H, s, CgH4Cl), 7,26 (7H, bs, NH, NH2, OH x 2, COOH x 2), 6,14 (IH, t, J=6Hz, C1,-H), 4,54 (2H, s, CH2C6H4C1), 4,43-4,20 ( 4H, jn, 0¾ , ci-E), 15 ' 4,06 (2H, s, HOOCCHOHCHOHCOOH), 3,75 (2H, s, CH2CO), 2,41-2,28 (2H, m, C2,-H)

Eksempel 29-30

Under anvendelse af relevante udgangsmaterialer 20 og fremgangmåden fra eksempel 28 fremstillede man forbindelserne vist i Tabel 5.

25 30 35 63

Tabel 5 DK 171236 B1

Eksempel 29

Str · R2 = - C H2 -^>C δ

Ri =HOOCCH = CHCOOH \ NH2 -ch2 -c-

II

O

Odbytte: 6 5 %

For ID : hygroskopisk pulver NMR (DM S 0 - de ) δ : 7, 98 (IH, d, J-7Hz, C6 -H) 7, 7 4 · (5 H, bs, NH, NH2 , C00HX2) 7, 4 O (4 H, s , C5 Η* C 8 ) 20 6) 52 (2 H, s, HOOC CH = CIICOOH) 6, 14 (IH, t. J = 7 H z , Cj.-H) 4, 54 (2H, s, CHi C6 H* C C ) 4, 38-4, 18 (4 H, m, C,· r S.-H) 3, 64 (2 H, s, CHj C O) ® ' ’ 25 2, 4 0-2, 28 (2H, m, C2.-H) 30 35 64 DK 171236 B1

Eksempel 30

Str : R2 =- CH2 /~yC Q

Ri =H3 C^-SOs H x 1 / 2 y NH2 -ch2 -C-

10 II

o

Udbytte : 5 8%

Forfll Hygroskopisk pulver NMR (DMSO-de) δ : 15 8, 3 0 (2. 5H, bs, NHj og S 03 Hx 1/2) 7, 9 8 (1H, d. J = 7Hz, Ce -H) 7, 49 (IH, d, J = 8H z, p-tosylåt 20 C2.6 _Hx 1/2) 7, 4 0 (4 H. s . Ct Ht C{) 7, 11 (IH, d. J=8Hz, p-tosylat C3i5 -Hx 1/2) 6, 24-6, '08 (IH, m, 0,·-Η) 25 4, 54 (2 H, s, CHz C6 H* Ci) 4, 4 2-4, 38 (2 H, m, C 3 ,.-H) 4, 23-4, 20 (2 H, m, Cj.-H) 3, 87 (2 H, s, -CHs CO) 2, 4 2-2, 28 (3. 5H, m, 0,·-Η og 30 CHS x 1/2) 35 DK 171236 B1 65

Farmakologisk afprøvning I.

Man afprøvede forbindelse 12 ifølge opfindelsen for antitumorvirkning til påvisning af anvendelighed af forbindelsen.

5 (a) Fremgangsmåde til bestemmelse af antitumoraktivitet.

Man transplanterede i hvert tilfælde 5 x 106 Sarcoma-180 celler subkutant på ryggen af mus af 10 hankøn af ICR/JCL stammen (vægt 27-30 g). Prøveforbindelsen blev indgivet som en svagt sur vandig opløsning oralt med en dosis på 1,0 ml/100 g kropsvægt én gang om dagen til hver mus i en prøvegruppe på 7 mus 7 dage i træk, idet man foretog første indgivelse 24 15 timer efter transplantationen, og man indgav en svagt sur vandig opløsning uden prøveforbindelse oralt til musene i en kontrolgruppe i en mængde på 1,0 ml/100 g kropsvægt en gang om dagen 7 dage i træk, idet man påbegyndte indgivelsen 24 timer efter transplantationen.

20 På den 10. dag efter transplantationen udtog man tumoren og vejede den til beregning af gennemsnitsvægten af tumorerne i grupper, der havde modtaget prøveforbindelse og vægten af tumorer i kontrolgruppen.

Man bestemte den effektive dosis (ED50) til opnåelse 25 af 50% cancerinhibition fra dosis-responskurven. Man bestemte dosis for 50% inhibition af forøget kropsvægt (IB50) fra kurven over dosis-ændring i kropsvægt. Det terapeutiske index (T.I. = IB5)/ED50) blev bestemt med følgende resultater som vist nedenfor i 30 tab. 6.

35 66

Tabel 6 DK 171236 B1 EDgo ib50 t·1· _(mq/kq/daq) (mq/kq/daq)_ 5

Forbindelse 12 0,75 3,60 4,80 O3'-p-chlorbenzyl-2'- 0,94 1,54 1,64 desoxy-5-fluoruridin_ 10

Det ses af Tabel 6, at forbindelse 12 har større virkning og besidder et højere terapeutisk index end O3'-p-chlorbenzyl-2'-desoxy-5-fluoruridin, der hidtil har været betragtet som et overlegent anticancermiddel.

15

Farmakologisk afprøvning II.

Man fortyndede Sarcoma-180 celler, der var dyrket i ascites fra ICR mus, med en fysiologisk saltopløsning og transplanterede 2 x 107 celler til ryggen 20 af hver af en række ICR mus. 24 timer efter transplantationen indgav man en prøveforbindelse opløst i sterilt fysiologisk saltvand i halevenen på hver af musene en gang om dagen, 7 dage i rækkefølge.

Man udtog en fast svulst fra undersiden af den 25 dorsale hud på musene 10 dage efter transplantationen, og vejede den. Man bestemte forholdet (T/C) mellem vægten af svulsten (T) hos gruppen, der havde modtaget prøveforbindelsen og vægten af svulsten (C) i kontrolgruppen. Man bestemte 50% svulstinhibitionsdosis 30 (ED50), hvor værdien af T/C er 0,5 fra dosisrespons-kurven over dosis, og forholdet (T/C). Tabel 7 viser resultaterne.

35 67

Tabel 7 DK 171236 B1

Prøveforbindelse< Formel ( I ) > E Djq

Eks. nr._Rj|__Rj__(mg/kg^ g __ (E) "cHs ~x_y~hcc >nh2 cH2 ^ ^ ° 10 -ch2 -/"Λ- c c hc6 <nh2 ch-c- 1 3 X:=/ CH 0 5 CH3 CH3 is ^ HCC \ KH2 9Η~ζ~ 14 -ch2 -s y ce 9h2 o 1 5

CH

ch3 ch3 20 ^ ^\ 1 9 -CH2 C C HCC t NH2 CH2 -(J- o , 8

25 2 2 -CH2 C δ HC6 > NH2 ?Η-ς- 1, O

x=/ ch3 o

HO-9H-COOH

2 8 -CH2 -/^y C δ HO-CH-COOH χ q 30 x=/ ^ nh2 ch2 -ς- 1 o 35 68 DK 171236 B1

Nedenfor følger præparationseksempler for fremstilling af farmaceutiske præparater med indhold af forbindelser ifølge opfindelsen.

5 Præparationseksempel 1

Kapsler.

Man sammenblandede forbindelse 3, lactose, krystallinsk cellulose og majsstivelse i de nedenfor givne forhold. Man tilsatte den nedenfor angivne mængde ma-10 gnesiumstearat og indkapslede blandingen i kapsler med indhold af ca. 193 mg/kapsel under anvendelse af en passende kapselmaskine.

Komponenter_ mg/kapsel 15 Forbindelse 3 200,0

Lactose 30,0

Krystallinsk cellulose 50,0

Majsstivelse 10,0

Magnesiumstearat _3,0 20 293,0

Præparationseksempel 2

Granulat.

Man sammenblandede forbindelse 7, lactose, 25 krystallinsk cellulose og majsstivelse i de nedenfor givne mængdeforhold. Hertil satte man en 10% opløsning af hydroxypropylcellulose i ethanol, og man æltede og granulerede blandingen under anvendelse af et passende udstyr. Man tørrede granulatet og tilpassede størrelsen 30 til 12-42 mesh. Det opnåede granulat blev overtrukket med hydroxypropylmethylcellulose i den nedenfor angivne mængde under anvendelse af en passende overtræksindretning, og størrelsen blev tilpasset til 12-42 mesh.

35 DK 171236 B1 69

Komponent_ mg/1000 mg

Forbindelse 7 200,0

Lactose 200,0

Krystallinsk cellulose 311,0 5 Majsstivelse 200,0

Hydroxypropylcellulose 10,0

Fedtsyremonoglycerid 3,5

Titandioxid 5,5 1.000,0 10

Præparationseksempel 3

Tabletter.

Man sammenblandede forbindelse 1, majsstivelse, og cellulose-calciumglycolat i de nedenfor givne mæng-15 deforhold. Man tilsatte en 10% opløsning af hydroxypropylcellulose i ethanol, hvorefter man æltede og granulerede blandingen med et passende granuleringsudstyr.

Man tørrede granulatet og tilblandede de nedennævnte mængder af magnesiumstearat og kiselsyreanhydrid.

20 Blandingen blev benyttet til fremstilling af tabletter under anvendelse af en passende tabletmaskine, og man overtrak tabletterne med hydroxypropylmethylcellulose.

Komponent_ mg/tablet 25 Forbindelse 1 200,0

Majsstivelse 5,0

Cellulose-calciumglycolat 20,0

Hydroxypropylcellulose 2,0

Magnesiumstearat 2,5 30 Kiselsyreanhydrid 2,5

Hydroxypropylmethylcellulose 19,999 Macrogol 6000 0,001

Titandioxid 2,0 254,0 35 DK 171236 B1 70

Præparationseksempel 4

Stikpiller.

Man smeltede Witepsol® W-35 (Dynamite Nobel Co., Ltd., Tyskland) ved ca. 60°C og holdt smelten ved ca.

5 45°C. Man blandede smelten og forbindelse 5 i de neden for angivne mængdeforhold og fremstillede heraf stikpiller, der hver vejede 1 g under anvendelse af passende støbeforme til stikpiller.

10 Komponent_ mg/stikpille

Forbindelse 5 400,0

Witepsol® W-35 600,0 1.000,0 15

Præparationseksempel 5 Forbindelse fra eksempel 13 50 mg

Lactose 97 mg

Krystallinsk cellulose 50 mg 20 Magnesiumstearat 3 mg

Man fremstillede heraf kapsler, der hver vejede 200 mg.

Præparationseksempel 6 25 Forbindelse fra eksempel 14 10 mg

Lactose 184 mg

Krystallinsk cellulose 100 mg

Magnesiumstearat 6 mg

Man fremstillede heraf kapsler, der hver vejede 30 300 mg.

35 71 DK 171236 B1

Præparationseksempel 7 Forbindelse fra eksempel 19 10 mg

Lactose 240 mg

Majsstivelse 340 mg 5 Hydroxypropylcellulose 10 mg

Man fremstillede heraf granulat (600 mg i hver indpakning).

Præparationseksempel 8 10 Forbindelse fra eksempel 8 (E) 10 mg

Macrogol 300 500 mg

Destilleret injektionsvand (efter behov)

Man fremstillede heraf en injektionsopløsning (5 ml per ampul).

15

Præparationseksempel 9

Man fremstillede 1000 tabletter til oral indgivelse, der hver indeholdt 10 mg af forbindelsen fra eksempel 22, og som havde følgende sammensætning.

20

Forbindelse fra eksempel 22 10 g

Lactose (japansk farmakopé) 45 g

Majsstivelse (japansk farmakopé) 25 g

Krystallinsk cellulose 25 g 25 (japansk farmakopé)

Methylcellulose 1,4 g (japansk farmakopé)

Magnesiumstearat 1 g (japansk farmakopé) 30

Man sammenblandede grundigt forbindelsen fra eksempel 22, lactose, majsstivelse og krystallinsk cellulose og granulerede blandingen med en 5% vandig opløsning af methylcellulose. Det opnåede granulat blev 35 presset gennem en 200 mesh sigte og tørret omhyggeligt.

Det tørrede granulat blev presset gennem en 200 mesh 72 DK 171236 B1 sigte og blandet med magnesiumstearat, hvorefter man pressede blandingen til tabletter.

Præparationseksempel 10 5 Forbindelse fra eksempel 9 10 mg

Macrogol 300 500 mg

Destilleret injektionsvand efter behov.

Man fremstillede heraf en injektionsopløsning (5 ml per ampul.

10

Præparationseksempel 11 Forbindelse fra eksempel 8 (E) 0,4 g

Polyethylenglycol 1000 30,0 g

Polyethylenglycol 6000 50,0 g 15 Renset vand 20,0 g

Man fremstillede heraf stikpiller, der hver vejede 2,5 g.

20

Claims (18)

1. 2. Forbindelse ifølge krav 1, kendeteg net ved, at den eventuelt substituerede benzylgruppe er udvalgt blandt benzyl, 2-chlorbenzyl, 3-chlorbenzyl, 4-chlorbenzyl, 2-brombenzyl, 3-brombenzyl, 4-brom-benzyl, 2-fluorbenzyl, 3-fluorbenzyl, 4-fluorbenzyl, 25 2,4-dichlorbenzyl, 3,4-dichlorbenzyl, 2-chlor-4-brom-benzyl, 2-trifluormethylbenzyl, 4-trifluormetylbenzyl, 4-nitrobenzyl, 2,4-dinitrobenzyl, 2-methylbenzyl, 4-methylbenzyl, 4-ethylbenzyl,4-t-butylbenzyl, 4-methoxy-benzyl,3-ethoxybenzyl,4-hydroxybenzyl, 2,4-dihydroxy- 30 benzyl og 2-methyl-3-nitrobenzyl.
2. 3. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den eventuelt substituerede benzylgruppe er en benzylgruppe substitueret på phenylringen med 1 eller 2 halogenatomer. DK 171236 B1
3. 4. Forbindelse ifølge krav l, kendetegnet ved, at aminosyreresten er en a-aminosyrerest.
4. 5. Forbindelse ifølge krav 2, kendetegnet ved, at α-aminosyreresten er af en aminosyre, 5 der opbygger proteiner i organismen.
5. 6. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den ene af og R2 er en benzylgruppe, eventuelt substitueret på phenylringen med 1-3 sub-stituenter udvalgt blandt lavere alkyl, lavere alkoxy 10 og halogen, og den anden af Rj^ og R2 er en gruppe med den almene formel: -CO-B-NR10NR11 15 hvori B er en lavere alkylengruppe, eventuelt substitueret med en phenylgruppe eller en lavere alkylthio-gruppe, og R10 og Rj^ hver betegner hydrogen eller lavere alkyl, eller sammen med det nitrogenatom, de er bundet til, danner en piperidinring, eller den anden af 20 og R2 er en pyrrolidinylcarbonyl- eller piperidyl-carbonylgruppe, hvori carbonylgruppen ikke er bundet til nitrogenatomet i den heterocycliske ring.
6. 7. Forbindelse ifølge krav 6, kendetegnet ved, at R2 er en benzylgruppe, eventuelt substi- 25 tueret på phenylringen med 1-3 substituenter udvalgt blandt lavere alkyl, lavere alkoxy og halogen.
7. 8. Forbindelse ifølge krav 7, kendetegnet ved, at R-l er en gruppe med den almene formel:
8. 30 -CO-B-NH2 hvori B er en usubstitueret lavere alkylengruppe, og R2 er en benzylgruppe substitueret på phenylringen med 1-2 halogenatomer.
9. 9. Forbindelse ifølge krav l, kendeteg net ved, at det er DK 171236 B1
10. 31-O-(4-chlorbenzyl)-2'-desoxy-5-fluor-5'-O-glycyluri-din, hydrochlorid; 3'-O-(2,4-dichlorbenzyl)-2'-desoxy-5-fluor-5'-O-gly-cyluridin, hydrochlorid; 5 eller
11. 31-O- (4-chlorbenzyl)-2'-desoxy-5-fluor-5'-O-valyluri-din, hydrochlorid.
12. 10. Fremgangsmåde til fremstilling af et 2'-desoxy-5-fluoruridinderivat ifølge krav 1, k e n d βίο t e g n e t ved, at man lader en forbindelse med formlen O HN-^y^F
13. 15. Jj
14. 20 OR a hvori den ene af R3 og R4 er hydrogen, og den anden er en benzylgruppe, eventuelt substitueret på phenylringen 25 med 1-3 substituenter udvalgt blandt C^-Cg alkyl, Cl-Cg alkoxy, Ci~C3 halogeneret alkyl, halogen, hydroxy og nitro, reagere med en aminosyre med formlen
15. 30 A-OH hvori A er en aminosyrerest med 2-20 carbonatomer samt med en N-beskyttende gruppe, eller med et reaktivt derivat deraf, hvorpå man fjerner den beskyttende gruppe 35 fra den dannede forbindelse.
16. 11. Fremgangsmåde til fremstilling af et 2'- DK 171236 B1 desoxy-5-fluoruridinderivat ifølge krav l, kendetegnet ved, at man lader et 21 -desoxyuridin-derivat med formlen 5 0 F ,v R’ °ipl 0Re hvori den ene af R7 og Rg er hydrogen, og den anden er 15 en aminosyrerest med 2-20 carbonatomer samt med en N-beskyttende gruppe, reagere med et benzylimidat med formlen ORq
17. 20 I ci3cc=nh hvori Rg er en benzylgruppe, eventuelt substitueret på phenylringen med 1-3 substituenter udvalgt blandt 25 C^-Cg alkyl, C^-Cg alkoxy, C^Cg halogeneret alkyl, halogen, hydroxy og nitro, under tilstedeværelse af trifluormethansulfonsyre, og om ønsket underkaster den dannede forbindelse en udveklingsreaktion med henblik på saltdannelse.
18. 12. Farmaceutisk præparat til cancerbehanding, kendetegnet ved, at det omfatter en effektiv mængde af en forbindelse ifølge krav i og en farmaceutisk acceptabel bærer for denne. 35