FI89497C - Foerfarande foer framstaellning av 2'-deoxi-5-fluoruridins derivat - Google Patents

Description

1 89497

Menetelmä 2'-deoksi-5-fluoriuridiinin johdannaisten valmistamiseksi Tämä keksintö koskee menetelmää uusien 2'-deoksi-5-fluori-uridiinin johdannaisten ja niiden suolojen valmistamiseksi. Nämä yhdisteet sisältävät korkean syöpää vastustavan aktiivisuuden ja erinomaisen antiviraalisen aktiivisuuden, ja ne ovat käyttökelpoisia tuumoria vastustavina aineina tai anti-viraalisina aineina.

2'-deoksi-5 - fluoriuridiinin (FudR) tuumoria vastustava aktiivisuus on korkea, mutta se on hyvin toksinen, mikä tuo esille ongelman koskien sen rajoittavaa turvallisuusmargi-naalia.

Erilaisia 2'-deoksi-5-fluoriuridiinin johdannaisia on kehitetty tämän ongelman voittamiseksi. Esimerkiksi japanilaiset tarkastamattomat patenttijulkaisut 61 591/1985 ja 106 593/ 1985 tuovat esille lukuisia 21-deoksi-5 - fluoriuridiinin johdannaisia. Esille tuodut 2'-deoksi-5-fluoriuridiinin johdannaiset ovat lieventäneet ongelmaa jossain määrin, mutta niiden tuumoria vastustava aktiivisuus ei ole tyydyttävän korkea, ja niiden terapeuttinen arvo, absorptio ja vastaavat ominaisuudet ovat riittämättömät.

Keksinnön mukaisesti suoritettiin laajoja tutkimuksia edellä määritellyn aikaisemman ongelman voittamiseksi ja kehitettiin onnistuneesti uusia 2'-deoksi-5 - fluoriuridiinin johdannaisia, joiden tuumoria vastustava aktiivisuus on korkeampi kuin tavanomaisilla 2'-deoksi-5-fluoriuridiinin johdannaisilla, ja jotka ovat hyvin turvallisia ihmisruumiin kannal-: ta. Esillä oleva keksintö on toteutettu perustuen tähän uu teen havaintoon.

Tämä keksintö koskee menetelmää 2'-deoksi-5-fluoriuridiinin johdannaisen valmistamiseksi, jota kaava (I) esittää, 2 89497

O

HN'^r^

Λ iJ

CT N

(ΐ> R‘ °^Λ or2 jossa kaavassa: toinen Rx:stä ja R2:sta on bent syy liryhmä, joka voi valinnaisesti sisältää substituentin, joka on valikoitu ryhmästä, joka sisältää C^Cg-alkyyliryhmän, C^-Cg-alkoksiryhmän, halo-genoidun C1-C3-alkyyliryhmän, halogeeniatomin, hydroksyyli-ryhmän ja nitroryhmän fenyylirenkaassa, ja toinen sisältää aminohappotähteen.

Keksinnön oleelliset tunnusmerkit on esitetty oheisissa patenttivaatimuksissa.

Kaavan (I) mukaiset yhdisteet ovat käyttökelpoisia tuumoria vastustavina aineina ja antiviraalisinä aineina, niiden toksisuus on alhainen, ne ovat helposti veteen liukenevia ja niiden turvallisuusmarginaali on laaja.

Jäljempänä esitetään spesifisiä esimerkkejä bentsyyliryhmän substituenteista, joita Rx ja R2 edustavat kaavassa (I).

Esimerkkejä alkyyliryhmistä bentsyyliryhmän substituentteina ovat suora- tai haaraketjuiset 1-6 hiiliatomia sisältävät alkyyliryhmät, kuten esimerkiksi metyyli, etyyli, propyyli, isopropyyli, butyyli, sek-butyyli, tert-butyyli, pentyyli, heksyyli ja vastaavat.

Esimerkkejä alkoksiryhmistä substituenttina ovat suora- tai haaraketjuiset 1-6 hiiliatomia sisältävät alkoksiryhmät, kuten esimerkiksi metoksi, etoksi, propoksi, isopropoksi, bu-toksi, sek-butoksi, tert-butoksi, pentyylioksi, heksyylioksi ja vastaavat.

3 89497

Esimerkkejä halogeeniatomeista substituenttina ovat fluori, kloori, bromi, jodi ja vastaavat..

Esimerkkejä halogenoiduista alkyyliryhmistä substituenttina ovat alkyyliryhmät, joista kukin sisältää 1-3 hiiliatomia ja on eubstituoitu l-3:lla halogeeniatomi1 la, kuten esimerkiksi kloorimetyyli, bromimetyy1i, trifluorimetyy1i, 1,2-dikloo-rietyyli ja vastaavat.

Ritilä tai F^tlla. esitettyjen subs t i tuent 11 en määrä bent-syyliryhmässä on edullisesti 1, 2 tai 3.

Edullisia esimerkkejä bentsyyliryhmistä, jotka valinnaisesti sisältävät 1-3 substituenttia, ovat bentsyyli ja bent-syyliryhmä, joka sisältää 1 tai 2 substituenttia fenyyli-renkaassa, kuten esimerkiksi 2-klooribentsyyli, 3-kloori-bentsyyli, 4-klooribentsyyli, 2-bromibentsyy1ι, 3-bromi-bentsyyli, 4-bromibentsyyli, 2-fluoribentsyyli, 3-fluori-bentsyyli, 4-fluoribentsyyli, 2,4-dik1ooribentsyy 1i, 3,4-dik1ooribentsyy1i, 2-k1oori-4-bromi bent syy1i, 2-trifluori-*:* metyyl ibentsyyl i , 4-tri f luorimet.yyl ibentsyyl i , 4-nitrobent- syyli, 2,4-dinitrobentsyyli , 2-metyyl i bent syy 1 i , 4-metyyli-: bentsyyli, 4-etyylibentsyyli, 4-tert-butyylibentsyyli, 4- metoke ibent syy 1 i , 3-etokeibentsyy1i, 4-hydr oks ibent syy 1 i , • · 2,4-dihydroks ibentsyy1i, 2-metyyli-3-nitrobentsyylι ja vas- I taavat.

Bentsyyliryhmät, jotka sisältävät 1 tai 2 halogeeniatomia fenyy1irenkaassa ovat yleensä edullisempia.

-/-/- Tässä yhteydessä käytetty ilmaisu "aminohappotähde" tar- ·. : : koittaa monovalenttista ryhmää, joka jää jäljelle, kun hyd- ' \ roksyyliryhmä on poistettu aminohapon karboksyyliryhmästä.

Tässä yhteydessä käytetty ilmaisu "aminohappo" on tarkoitettu sisältämään luonnollisia aminohappoja ja synteettisiä t aminohappoja, jotka ovat yhdisteitä, joista kukin sisältää vähintään yhden aminoryhmän ja vähintään yhden karboksyyli- 4 89497 ryhmän, ja joista jokainen sisältää 2-20 hiiliatomia molekyylissä .

Esimerkkejä luonnollisista aminohapoista ovat ne, jotka ovat organismien proteiinin aineosia, kuten esimerkiksi alaniini, isoleuaiini, glysiini, seriini, treoniini, väliini, leusiini, arginiini, lysiini, asparagiini, asparagiinihappo, glutamiini, glutamiinihappo, kystiini, kyeteiini, metioniini, tyrosiini, fenyy1 ialaniini, tryptofaani, histidiini, hydroksipro1iini, proliini, jne. Luonnolliset aminohapot ja synteettiset aminohapot, jotka eivät ole organismien proteiinin aineosia, mutta joilla on tärkeä merkitys elävässä organismissa luetaan myös mukaan, ja esimerkkejä niistä ovat sarkosiini, kreatiini, ho-mokyetiini, kysteiinisulfonihappo, norleusiini, isoseriini, homoseriini, hydroksilysiini, norvaliini, dehydrova1ιini, or-nitiini, arginomerlpihkahappo, dopa, 3-monojodi tyrosiini, 3,5-dijodityroniini, tyroksiini, a,γ-diaminovoihappo, 2,3-di-aminomer ipihkahappo , a-aminoadipiinihappo , oc , B-diaminopropio-nihappo, sakkaropiini, B-alaniini,y -aminovoihappo, B-amino-voihappo, ε-kapronihappo, asediasulfoni, agarietiini, arano-siini, hadaeidiini, melfalaani, iboteenihappo ja vastaavat. Lisäesimerkkejä ovat asetyyliseriini, asetyy1itreoniini, bentsyyliasparagiinihappo ja vastaavat, nimittäin substituoi-dut aminohapot, jotka sisältävät asetyyliryhmän, etoksikarbo-nyyliryhmän , bentsyy1ioksikärbonyy1iryhmän tai bentsyyliryh-män substituenttina hydrcksyyliryhmälle, aminoryhmälle tai karboksyyliryhmälle aminohapoissa, kuten esimerkiksi seriini, treoniini ja vastaavat hydroksiaminohapot, asparagiini, orni-tiini, lysiini ja vastaavat emäksiset aminohapot, jotka sisältävät vähintään kaksi ammoryhmää, glutami inihappo, aspa-ragiinihappo ja vastaavat happamet aminohapot, jotka sisältävät vähintään kaksi karboksyyliryhmää.a -aminohappotähde on edullinen aminohappotähteiden joukossa, joita Rj tai R2 edustavat esillä olevan keksinnön mukaisissa yhdisteissä. Edullisempia ovat aminohappotähteet, jotka ovat proteiinin aineosina. Erityisiä esimerkkejä sellaisista aminohappotähteistä : ovat alaniinin, isoleusiinin, glysiinin, seriinin, treoniinin, 5 89497 valiinin, leusiinin, arginiinin, hydroksilysimin, lysiinin, aeparagiinin, asparagiinihapon, glutamunin, glutami lmhapon, kystiinin, kysteiinin, metioniinin, tyrosiirun, fenyyliala-niinin, tryptofaamn, histidiinin, hydroksiproliinin, pro 111-nin ja vastaavien tähteet. Edullisimpia ovat alaniinin, iso-leueiinin, glysiinin, O-aeetyyliseriinin, valiinin, leusiinin, lysiinin, asparagiinihappo- β-bentsyy1iesterin, fenyyliala-niinin, histidiinin, pro) i. inin ja vastaavien tähteet.

Esillä olevan keksinnön mukaisiin aminohappotähteisiin voi lukeutua oheisen kaavan mukaisia tähteitä 10 11 -CO-B--NR R (f) jossa kaavassa B on alempi a 1ky 1eeniryhmä, joka voi valinnaisesti sisältää fenyyliryhmän tai alemman alkyylitloryhmän, 10 11 ja R ja R tarkoittavat kumpikin vetyatomia tai alempaa al-kyyliryhmää tai yhteenvietyinä typpiatomin kanssa, johon ne ovat kiinnittyneet, muodostaen piperidiinirenkaan, ja aminohappotähteisiin lukeutuu myös pyrrolidinyylikarbonyyli-tai piperidyylikarbonyy1iryhmä, jossa karbonyy1iryhmä ei ole liittynyt typpiatomiin heterorenkaassa.

Koskien kaavan (f) mukaista aminohappotähdettä, esimerkkejä alemmista alkyleeniryhmistä, jotka voivat valinnaisesti si sältää fenyy11ryhmän tai alemman a1kyy 1itioryhmän, ja jota B edustaa, ovat suora- tai haaraketjuis et C^-Cg-alkyleenιryhmät, jotka voivat valinnaisesti sisältää fenyy1iryhmän tai suora- tai haaraketjuisen C^-Cg-alkyy1itioryhmän, kuten esimerkiksi metyleeni, metyy.l imety leeni , etyyl imety leeni , iso-propyy1imetyleeni, isobutyylimetyleeni, tert-butyylimetylee-ni, etyleeni, trimetyleeni, tetrametyleeni, 2-metyylitrimetyleeni , pentametyleeni, hekeamety1eeni, fenyy1imetyleeni, bentsyylimetyleeni, 5 - fenyy1ipentyy1 imetyleeni, 3-fenyy1ihek-sametyleeni, metyy1itiomety1eeni, 2-metyy1itioetyy1 imetyleeni, : heksyy 1itiometyleeni, ιsopropyylitiometyy1 imety1eeni, 3-tert- 6 89497 butyylitioheksametyleeni, jne. Esimerkkejä alempien alkyyli-en ryhmistä, joita R10 ja R11 edustavat, ovat suora- tai haa-raketjuiset, 1-6 hiiliatomia sisältävät alkyyliryhmät, kuten esimerkiksi metyyli, etyyli, propyyli, isopropyyli, butyyli, tert-butyyli, pentyyli, heksyyli ja vastaavat.

Keksinnön mukaisiin 2'-deoksi-5-fluoriuridiinin johdannaisten suoloihin lukeutuvat esimerkiksi happoadditiosuolat, hapon kanssa, joka pystyy muodostamaan suolan aminohapon aminoryhmän kanssa, suolat emäksen kanssa, joka pystyy muodostamaan suolan happamen aminohapon karboksyyliryhmän kanssa, ja vastaavat. Esimerkkejä käyttökelpoisista hapoista, jotka pystyvät muodostamaan suoloja, ovat epäorgaaniset hapot, kuten esimerkiksi kloorivetyhappo, bromivetyhappo, fos-forihappo, typpihappo, rikkihappo, rikkihapoke ja vastaavat; ja orgaaniset hapot, kuten esimerkiksi p-tolueenisulfonihap-po, metaanisulfonihappo, viinihappo, ftaalihappo, fumaari-happo, sitruunahappo, omenahappo, malonihappo, maitohappo, meripihkahappo, askorbiinihappo, linoleenihappo, öljyhappo, nikotiinihappo, pikryylisulfonihappo ja vastaavat. Esimerkkejä käyttökelpoisista emäksistä, jotka pystyvät muodostamaan suoloja, ovat natriumhydroksidi, kaliumhydroksidi, natriumkarbonaatti, jne.

Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa jäljempänä esitettävien reaktiokaavioiden l ja 2 mukaisten prosessien avulla.

Reaktiokaavio 1 o o ηνΧ/ρ hn^v^f I JJ X Jf

0 "in A-OH (Π0 O "N

R3 °~Χ ~~ Rs °~χ ORi ORs (Π) (IV) 7 89497

O

ΗΝ/γ' ^

oV

R'

suojauksen poiste^ / * H C Q

0R2 (Γ ) joissa kaavoissa Rj ja R2 ovat kuten edellä on määritelty, toinen Rg:sta ja R^:etä on vetyatomi, ja toinen on bentsyyli-ryhmä, joka voi valinnaisesti sisältää fenyylirenkaassa sub-stituentin, joka on valikoitu ryhmästä, joka sisältää C^-Cg-alkyyliryhmän, C^-Cg-alkoksiryhmän, halogenoidun C^-Cg-alkyy-liryhmän, halogeeniatomin, hydroksyyliryhmän ja nitroryhmän, toinen Rg:stä ja Rgista on aminohappotähde, joka sisältää suo-jaavan ryhmän N-asemassa, ja toinen on bentsyy1iryhmä, joka voi valinnaisesti sisältää fenyylirenkaassa substituentin, joka on valikoitu ryhmästä, joka sisältää C^-Cg-alkyy1iryh-män, Cj-Cg-alkoksiryhmän, halogenoidun Cj-C^-alkyy1iryhmän, halogeeniatomin, hydroksyyliryhmän ja nitroryhmän, ja A on aminohappotähde, joka sisältää suojaavan ryhmän N-asemassa.

Yhdistettä (IV) voidaan valmistaa saattamalla yhdiste (II) ja aminohappo CI II) esterikondensaatioon. Aminohappoa voidaan käyttää sellaisenaan tai reaktiivisen johdannaisen muodossa, kuten esimerkiksi halogenidi, happoanhydridi tai vastaavat. Esimerkkeihin aminohapon N-asemassa olevasta suojäävästä ryhmästä lukeutuvat sellaiset, joita yleisesti käytetään alalla, esimerkiksi t-butoksikarbonyyli CBoc), trikloorietoksikarbo-nyyli, bentsyylioksikarbonyyli, bentsyylioksikarbonyyliryhmät, jotka sisältävät 1-3 substituenttia, kuten esimerkiksi matoksi, metyyli, nitro ja vastaavat. Yhdisteen CII) ja yhdisteen <11 I) esterikondensaatio suoritetaan tavallisesti vedettömässä liuottimessa emäksisen yhdisteen ja kondensaatioaineen 8 89497 läsnä ollessa. Esimerkkejä käyttökelpoisista liuottimista ovat aromaattiset hiilivedyt, kuten esimerkiksi bentseeni, tolueeni, ksyleeni ja vastaavat, halogenoidut hiilivedyt, kuten esimerkiksi dikloorimetaani, kloroformi, dikloorietaani ja vastaavat, eetterit, kuten esimerkiksi etyy1ieetteri, dioksaani, tetrahydrofuraani ja vastaavat, pyridiini, nitro-metaani, dimetyyliformamidi, jne. Esimerkkejä käyttökelpoisista emäksisistä yhdisteistä ovat trialkyy1iamiini, pyridiini, dialkyyliaminopyr idi ini, pikoliini, lutidimi ja vastaavat tertiääriset amiinit, natriumkarbonaatti, bariumkarbonaatti ja vastaavat metai1ikarbonaatit, jne., joiden joukossa dialkyyliaminopyr idi in i , erityisesti di<Cj-Cg-alkyy1i)aminopyri-diini, kuten esimerkiksi dimetyyliaminopyridiini, dietyyliami-nopyridiini tai vastaava, on edullisin. Esimerkkejä käyttökelpoisista kondenso intiaineista ovat p-tolueenisulfonyyli-kloridi, 2,4,6-1ri-isopropyy1ibentseenisu 1 fonyy1ikloridi (TPS-kloridi) ja vastaavat aryy1isulfonyy1ik1oridit, alkyy1isulfo-nyylikloridi (erityisesti C^-Cg-alkyylisulfonyylikloridi, kuten esimerkiksi metaanisulfonyylikloridi, etaanisulfonyy1ik-loridi tai vastaavat), N,N-disykloheksyylikarbodi-imidi (DCC), tionyylikloridi, f os forioksikloridi, jne., joista DCC:a ja TPS:a käytetään edullisesti. Yhdisteen (III) käyttömäärä on noin 1 - noin 1,5 moolia yhdisteen (II) moolia kohti. Emäksistä yhdistettä ja kondensointiainetta käytetään kumpaakin määrinä noin 1 - noin 5 moolia yhdisteen (II) moolia kohti.

Reaktio suoritetaan lämpötilassa, joka on tavallisesti noin o -50 C - huoneen lämpötila.

Siten saatu yhdiste (IV) saatetaan reaktioon suojaavan ryhmän poistamiseksi niin haluttaessa. Tämä reaktio suoritetaan tavanomaisilla menetelmillä. Reaktio toteutetaan esimerkiksi käyttäen 0,5-5N suolahappoliuoeta liuottimen läsnä ollessa. Tässä reaktiossa poistetaan ryhmä, joka suoja aminohappotähdettä, jolloin muodostuu yhdisteen (I) hydrokloridi (I'). Käyttökelpoisiin liuottimiin lukeutuvat metyleenikloridi, kloroformi, tetrahydrofuraani, dioksaani ja vastaavat.

9 89497

Reaktiokaavio 2 0 o ΗιΛ/F Hl'K'v'*'

IT xJ

oOT A· -X (V) 0*14 ~~ Rj °Ί<^ OH 0rb (FudR) (VI) 0 OR, HN'K'* 1 j „Aj*

C6 3 CC-CNH CT N

R* °-L0 j C F3 S03 H x y * cf3 s°3 h OR, (r ) jossa kaaviossa R^ ja R2 ovat kuten edellä on määritelty, A' on aminohappotähde, joka sisältää suojaavan ryhmän N-asemassa, X on halogeeniatomi, toinen Reistä ja Rgtsta on vetyatomi, ja toinen on aminohappotähde, joka sisältää suojaavan ryhmän N-asemassa, ja Rg on bentsyyliryhmä, joka voi valinnaisesti sisältää fenyylirenkaassa substituentin, joka on valikoitu ryhmästä, joka sisältää C^-Cg-alkyyliryhmän, C^-Cg-alkoksiryh-män, halogenoidun Cj-Cg-alkyyliryhmän, ha 1ogeeniatomin, hydr-okeyyliryhmän ja nitroryhmän.

10 89497

Yhdistettä (VI) voidaan valmistaa antamalla FudR:n reagoida aminohappohalogenidin (V) kanssa liuottimessa emäksisen yhdisteen läsnä ollessa. Yhdisteen (VI) annetaan reagoida sub-stituoidun tai substituoimattoman bentsyyli-imidaatin kanssa (VII) trifluorimetaanisulf onihapon läsnä ollessa, jonka reaktion avulla aminohappotähdettä suojaava ryhmä poistetaan, jolloin saadaan yhdiste (I'') trifluorimetaanisulfonihapon suolan muodossa.

Tyypillisiä kaavassa (V) X:llä esitettyjä ha 1ogeeniatomeja ovat kloori ja bromi.

Käyttökelpoisiin liuottimiin ja emäksisiin yhdisteisiin lukeutuvat esimerkit, jotka on mainittu edellä reaktiokaavion 1 kuvauksen yhteydessä. Noin 1 - noin 1,5 moolia aminohappo- halogenidia ja noin 0,1 - noin 0,5 moolia emäksistä yhdistettä käytetään kumpaakin FudR-moolia kohti. Reaktio suoritetaan o lämpötilassa noin -50 C - huoneen lämpötila, ja se saatetaan päätökseen noin 2 - noin 12 tunnissa.

Reaktiossa yhdisteen (VI) ja substituo idun tai substituoimat-toman bentsyylι-imidaatin (VII) välillä käytetään noin 1 -noin 5 moolia yhdistettä (VII) ja noin 0,01 - noin 0,5 moolia trif luorimetaanisu 1 f onihappoa kumpaakin, yhdisteen (VI) moolia kohti. Edellä mainitussa reaktiossa esimerkein esitettyjä liuottimia voidaan käyttää tässä reaktiossa, Reaktion lämpötila on alueella huoneen lämpötilasta suunnilleen liuottimen kiehumispisteeseen. Reaktioaika on noin 2 - noin 12 tuntia.

Keksinnön mukaisen yhdisteen hydrokloridi ja sen trifluorime-taanisu 1 f onihapposuo la, jota on valmistettu reaktiokaavioiden 1 ja 2 mukaisissa prosesseissa, voidaan muuttaa toisiksi halutuiksi suoloiksi tavanomaisten suolojen vaihtoreaktioiden avulla, joita on tavallisesti aikaisemmin suoritettu alalla. Reak t. i okaa v ioe sa 1 tai 2 saatu yhdiste esimerkiksi liuotetaan natriumhydroks:din, ka 1iumhydroksidin, natriumkarbonaa- n 89497 tin, natriumvetykarbonaatin tai vastaavan emäksen vesiliuokseen happoadditiosuo 1an neutra 1 o imi seksι, ja sen jälkeen lisätään haluttua happokomponenttia halutun happoadditiosuo1 a n muodostamiseksi, minkä jälkeen suoritetaan l yo f111g o ι n11 .

Keksinnön mukaisia yhdisteitä, joita on valmistettu edellä kuvailtujen prosessien avulla, voidaan eristää tavanomaisilla erotusmenetelmillä, kuten esimerkiksi ko1 onni kromatogra f ia, ja niitä voidaan puhdistaa tavanomaisilla puhdistusmenetelmillä, kuten esimerkiksi uudelleenkiteyttäminen.

Farmaseuttisena koostumuksena käyttöä varten, keksinnön mukainen johdannainen sekoitetaan farmakologisesti hyväksyttävän, sopivan kantajan kansa, ja seoksesta tehdään sopiva valmistemuoto spesifisen antamisreitin mukaisesti. Käyttökelpoisiin kantajiin lukeutuvat sellaiset, jotka ovat jo alalla tunnettuja, esimerkiksi täyteaineet, sideaineet, voiteluaineet, väriaineet, hienontavat aineet, jne. Tyypillisiä farmaseuttisen koostumuksen valmistemuotoja ovat, esimerkiksi tabletit, kapselit, rakeet, jauheet, nesteet, ruiskeet laskimon-sisäiseen tai vastaavaan parentera a 1iseen antamiseen, peräpuikkomuodot peräsuolen kautta antamista varten, jne.

Keksinnön mukaisen yhdisteen määrä, joka sisällytetään tehokkaana komponenttina farmaseuttisen koostumuksen annosykeik-köön, voidaan sopivasti määrittää valmistemuodon mukaan, eikä se suuresti poikkea siitä määrästä, jota tavanomaiset farmaseuttiset koostumukset sisältävät. Vaikuttavan komponentin edullinen määrä on tavallisesti noin 25 - noin 500 mg annos-yksikköä kohti. Keksinnön mukaiset yhdisteet voidaan formuloida sopivaksi, valmistemuodoksi tavanomaisilla menetelmillä.

Siten saadun farmaseuttisen koostumuksen annostus vaihtelee oireiden vakavuuden, potilaan painon, iän ja muiden tekijöiden mukaan. Päivittäinen annostus on tavallisesti noin 50-2000 mg aikuista kohden laskettuna vaikuttavana komponenttina.

12 89497

Farmaseuttista koostumusta voidaan antaa päivittäin kerta-annoksena tai jaettuna 2-4 annokseen.

Esimerkit Jäljempänä on esitettynä esimerkit ja valmistueesimorkit, jotka ovat keksintöä valaisevia, ja farmakologiset koetulokset keksinnön selvittämiseksi.

Esimerkkien sisältämien NMR-tulosten yhteydessä numerot, joita käytetään yläindeksinä symbolin "H“ oikealla puolella tai alaindeksinä symbolin "C" tai "N" oikealla puolella, ovat 6 käytössä osoittamaan paikkaa yhdisteessä. Täten termi "H ” tai "Cg-H”, esimerkiksi, viittaa vetyyn, joka on^sitoutunut_ hiiliatomiin asemassa 6. Samalla tavoin termi "H , H , H tai "Cg- g--H", esimerkiksi, tarkoittaa vetyjä, jotka ovat sitoutuneet hii1iatomeihin asemissa 3'-, 4'- ja 5'.

Esimerkki 1 3 ' Määrältään 2,44 g 0 -trityy1i-2'-deoksi-5-fluoriuridiinia liuotettiin 15 mlraan tetrahydrofuraania (THF). Natriumhydri- o dia <0,5 g) lisättiin, ja seosta sekoitettiin 60 C:esa 30 minuuttia. 0,63 g:n määrä bentsyylikloridia ja 0,375 g nat- o riumjodidia lisättiin, ja seoksen annettiin reagoida 60 C:ssa 6 tuntia. Reaktioseos neutraloitiin lN-HCl:n vesiliuoksella ja konsentroitiin. Jäännökseen lisättiin 20 ml 0,5 N-HCl:n liuosta metanolissa, ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa yli yön. Reaktioseos neutraloitiin kyllästetyllä NaHCOgrn vesiliuoksella ja konsentroitiin. Jäännökseen lisättiin 20 ml kloroformia, ja saostuma otettiin talteen suodattamalla. Sakka liuotettiin etyyliasetaattiin, ja liuos pestiin vedellä, kuivattiin Glauber-suolan päällä ja konsentroitiin, jolloin saatiin 0 -bent syy 1i-2'-decksi-5 - fluoriuridii-nia. Täten saatu yhdiste suspendoitiin 15 ml:aan metyleeni-kloridia. Suspensioon lisättiin 0,84 g Boc-glysιiniä, 1,24 g DCC:a ja 0,05 g d imetyy 1 iammopyr idi in iä . Seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa yli yön. Reaktioseos suodatettiin, ja l! ” 89497 suodos konsentroitiin. Jäännös sekoitettiin 5 ml:n kanssa 4 N -HC1-liuosta dioksäänissä, seosta sekoitettiin 30 minuuttia, ja 20 ml dietyy1ieetteriä lisättiin. Saostuneet kiteet otettiin talteen suodattamalla ja puhdistettiin metanoli — etyy — lieetterin kanssa, jolloin saatiin 1,28 g yhdistettä 1, joka on esitettynä taulukossa 1.

Esimerkki 2

Sama menettely kuin esimerkissä 1 toistettiin sillä poikkeuksella, että käytettiin lähtöaineita, joita tarvittiin halutun yhdisteen valmistamiseksi. Menettely toistettiin yhdisteiden 2-11 ja 28-30 tuottamiseksi, jotka on esitetty jäljempänä t.aulukoesa 1 .

Esimerkki 3 5 ' 2,44 g:n määrä 0 -trityyli-2'-deoksi-5-flucriuridiinia liuotettiin 18 ml:aan THF:a. Liuokseen lisättiin 0,5 g natrium-hydroksidi jauhetta ja 0,225 g mo 1ekyy1iseulajauhetta , Molecular Sieves 3A (tavaramerkki, Linde Co.'n tuote, USA). Seosta keitettiin palauttaen kuumentaen 2 tunnin ajan, minkä jäl-. keen lisättiin 0,845 g p-k1ooribentsyy 1 ik 1 or i dia ja 0,15 g ’! nat. riumjodidia . Seosta keitettiin palautus jäähdyt taen, kuu- mentaen 2 tunnin ajan ja jätettiin seisomaan jäähtymistä varten. Reaktioseos suodatettiin, ja suodos neutraloitiin 15 ml :11a ammonirmtcloridin kyllästettyä vesiliuosta ja pestiin natriumkloridin kyllästetyllä vesiliuoksella. Orgaaninen ker-’· ros kuivattiin Glauber-suolan päällä ja konsentroitiin. Jään nökseen lisättiin 20 ml 0,5N-HCl:n liuosta metanolissa, ja seosta sekoitettiin yli yön. Seos neutraloitiin kyllästetyllä NaHCOgin vesiliuoksella ja konsentroitiin. THF:a lisättiin .·. (20 ml) jäännökseen, ja seosta pestiin kyllästetyllä NaCl:n veei1iuoksella, kuivattiin Glauber-suolan päällä ja konsentroitiin. Konsentraatti kiteytettiin uudelleen etanolista, .... 3 ' · jolloin saatiin 1,32 g 0 -p-k1ooribentsyy 11-2'-deokei-5 - fluo- riuridiinia. 12 ml:aan THF:a liuotettiin 1,07 g DCC:a ja 0,73 3' g Boc-glys i imä . Liuokseen lisättiin 1,32 g 0 -p-k 1 oo r ibent - 14 89 497 syγ11-2'-deoksi-5-f luoriuridiin ia ja 0,05 g dimetyy1iaminopy-ridiiniä. Seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 5 tunnin ajan, ja se suodatettiin. Suodos konsentroitiin, ja 5 ml 4N-HCl : n liuosta di oks äänissä lisättiin jäännökseen. Seosta sekoitettiin 30 minuuttia, minkä jälkeen lisättiin 20 ml di-etyylieetteria. Saostuneet kiteet suodatettiin pois ja kiteytettiin uudelleen eta no 11-is opropyy11a 1 k oho 11sta, jolloin saatiin 0,83 g yhdistettä 12, joka on esitetty jäljempänä taulukossa 1.

Esimerkki 4

Sama menettely kuin esimerkissä 3 toistettiin, silla poikkeuksella, että käytettiin 1ähtöyhdisteltä, joita tarvittiin tavoitellun yhdisteen valmistukseen, tuottaen kutakin yhdistettä 13-22, jotka on jäljempänä esitetty taulukossa 1.

Esimerkki 5 - 3 ' 5 ' 0,10 g:n määrä 0 -p-k 1 ooribentsyy 11-0 -alanyy11-2'-deoksi-5-f luorluridiin l .hydrok1 oridi liuotettiin 4 ml:aan veden ja kloroformin 1:1 Paosta. Liuokseen lisättiin 0,018 g NaHCO^ra sekoituksessa. Seosta sekoitettiin 10 minuuttia, ja klorofor-mikerros erotettiin. Liuosta, joka sisälsi 0,10 g 4-tolueeni-eu1 f onihappoa 2 ml:esa metanolia, lisättiin tipoittain, ja valkoinen sedimentti suodatettiin pois, ja kiteytettiin uudelleen metano1ietyy1ieetteristä, jolloin saatiin 0,105 g yhdistettä 23, joka on jäljempänä esitetty taulukossa 1.

Esimerkki 6

Sama menettely kuin esimerkissä 5 toistettiin, sillä poikkeuksella, että käytettiin lähtöyhdisteitä, joita tarvittiin tavoitellun yhdisteen valmistukseen, tuottaen kutakin yhdistettä 24-27, jotka, on jäljempänä esitetty taulukossa 1.

Esimerkki 7 2,44 g : n määrä 2 '-deoks i-5-f luor lur idi ima liuotettiin 25 m 1 : a an pyndnniä. Boc-g 1 y syy 11 k 1 o r id i a (0,97 g) lisättiin, ’ 89 497 ja seoksen annettiin reagoida jää jäähdytyks essä 3 tunnin ajan. Sen jälkeen liuotin tislattiin pois, vettä lisättiin jäännökseen, seos uutettiin mety1 eonlk 1 or1din kanssa, ja uute kuivattiin Glauber-suolan päällä ja konsentroitiin. Jäännös liuotettiin 25 ml : aan met yleeniklondia . Liuokseen lisättiin 2,14 g p-klooribent syy 1i-imidaattia ja 0,75 g trιfluorimeta.v nisulf omhappoa . Seoksen annettiin reagoida huoneen lämpötilassa 3 tunnin ajan, ja liuotin tislattiin pois. Jäännökseen lisättiin kyllästettyä NaHCOg:n vesiliuosta liuoksen tokemi seksi aikai isoksi . Liuos uutettiin etyylicettor:1]a, ja uut e kuivattiin G 1 auber-suo 1an päällä. Suolahappoa lisättiin, saostuneet kiteet suodatettiin pois, ja suodos kiteytettiin uudelleen met a no 1 i-etyy i i*e 11 er is t ä , jolloin, saatiin 0,75 g yhdistettä 12, joka. on jäljempänä esitetty taulukossa i.

Taulukossa t on jäljempänä esitetty esimerkeise 1-7 valmistettujen yhdisteiden 1-30 kemiallinen rakenne ja fysikaalis-kemialliset vakiot.

ie 89 497

Taulukko 1

Yhdiste 1

Rakenne: R^ ®<^^-CH2-, R2 * NH2CH2CO-

Muoto: .(suola): Hydrokloridi Kidemuoto: Amorfinen

Saanto: 57,5 % ^H-NMR TMS sisäinen standardi δ (DMSO-dg) 11.7-12.0 (b, 1 H, NH), 7.96 (d, 1 H, J=7 Hz, H6), aromaat- 1 , 7.34 (s, 5 H, tinen.: ), 6.14 (t, 1 H, J=7 Hz, Ηχ ), 4.54 (s, 2 H, -CH2-(3 ), 3.80 - 4.30 (m, 1 H, H4'), 3.85 (s, 2 H, NH^I^CC^-), 3.50-3.80 (m, 2 H, H5'), 2.0 - 2.2 (m, 2 H, H2') .

Yhdiste 2

Rakenne: s C1~^~^-CH2~t r2 = nh2ch2co-

Muoto (suola): Hydrokloridi Saanto:63% 1H-NMR TMS sisäinen standardi δ (DMSO-dg) 11.6-12.0 (b, 1 H, NH), 7.96 (d, 1 H, H6), 7.35 aromaat- - , (s, 4 H,tinen ), 6.20 (t, 1 H, J=7 Hz, H ), 4.50 (s, 2 H, -CH2^)>, 3.90-4.50 (m, 1 H, H4'), 3.50-3.90 (m, 2 H, H5'), 3.84 (s, 2 H, NHjCH^CO^), 2.1-2.4 (m, 2 H, H2') .

17 89 497

Yhdiste 3

Rakenne: R1 = «HjCHjCO-,

*2 - P-0CV

Muoto (suola): Hydrokloridi Saanto: 71 % 3H-NMR TMS sisäinen standardi δ (DMSO-dg) 11.7- 12.0 (b, 1 H, NH), 7.95 (d, 1 H, H6), 7.0-7.6 aromaat- . , (m, 4 H,tinen ), 6.13 (t, 1 H, J=7 Hz, H1 ), 4.52 (s, 2 H, -CH2-Q), 3.9-4.4 (m, 4 H, H3', H4', H5’), 3.85 (s, 2 H, NH2Ch'2C02-) , 3.64 (b, 2 H, H20), 2.1-2.3 (m, 2 H, H2*).

Yhdiste 4

Rakenne: = NH2CH2CO-, «2 - cr3ÖCH2'

Muoto .(suola): Hydrokloridi Saanto: 62 % H-NMR TMS sisäinen standardi δ (DMSO-dg) 11.8- 12.0 (b, 1 H, NH), 7.98 (d, 1 H, H6), 7.4-7.8 (m, 4 H,^°^at"), 6.14 (t, 1 H, J=7 Hz, H1'), 4.65 (s, 2 H, -CH2-0), 3.9-4.3 (m, 4 H, H3', H4', H5'), 3.85 (s, 2 H, N^O^COj-) , 3.37 (b, 2 H, H20), 2.0-2.5 (m, 2 H, H2').

> is 89497

Yhdiste 5

Rakenne: *1 " NH2CH2C°-· *2 * B02-Ö^H2'

Muoto (suola): Hydrokloridi Saanto: 52 % 3H-NMR TMS sisäinen standardi δ (DMSO-dg) 11.7- 11.9 (b, 1 H, NH) , 7.95 (d, 1 H, H6), 8.15 (d/ J— 9 Hz, £^nen ) » 7.62 (d, J=9 Hz, 6.14 (t, 1 H, J=7 Hz, H1'), 4.70 (s, 2 H, -CH2^^ ) , 3.90-4.30 (m, 4 H, H3', H4', H5'), 3.85 (s, 2 H, NH2CH2C02-), 3.64 (b, 2 H, HjO), 2.1-2.4 (m, 2 H, H2') .

Yhdiste 6 „ , R. = NHoCHoC0-,

Rakenne: 1 2 2 r2 - ch3o-0)-ch2-

Muoto (suola): Hydrokloridi Saanto: 72 % H-NMR TMS sisäinen standardi δ (DMSO-d,.)

O

11.7- 11.9 (b, 1 H, NH), 8.01 (d, 1 H, J=7 Hz, H6), aromaat- 7.27 (2 H, d, J=9 Hz, tinen ), 6-94 (2 H, d, J=9 aromaat- i »

Hz»tinen )» 6.11 (t, 1 H, J=7 Hz, ), 4.45 (s, 2 H, -CH2-0), 3.90-4.20 (m, 4 H, H3', H4', H5'), 3.85 (s, 2 H, NHjCH^COj-), 3.60 (b, 2 H, H20), 2.10-2.40 (m, 2 H, H2').

I' 19 89 4S7

Yhdiste 7

Rakenne: = NHjCI^CO-, R2 = t-Butyl^\cH.,-

Muoto (suola): Hydrokloridi Saanto: 65 % 3H-NMR TMS sisäinen standardi S (DMSO-dg) 11.8-12.0 (b, 1 H, NH), 7.98 (d, 1 H, J=7 Hz, H6), aroraaat- 7.20- 7.60 (m,tinen ), 6.11 (t, 1 H, J=7 Hz, K1'), 4.49 (s, 2 H, -CH2-0>, 3.90-4.20 (m, 4 H, H3', H4', H5'), 3.85 (s, 2 H, NH^H^CC^-) , 3.34 {b, 2 H, H20), 2.00-2.40 (m, 2 H, H2').

Yhdiste 8

Rakenne: ~ NHjCHjCO-,

Br R2 =<0-ch2-

Muoto (suola): Hydrokloridi Saanto: 78 % *H-NMR TMS sisäinen standardi δ (DMSO-dg) 11.7-12.0 (b, 1 H, NH), 7.99 (d, 1 H, J=7 Hz, H6), aromaat— 7.20- 7.60 (m, 4 H,tinen ), 6.13 (t, 1 H, J=7 Hz, H1')-, 4.54 (s, 2 H, -CH2^), -3.90-4.20 (m, 4 H, H3', H4’, H5'), 3.85 (s, 2 H, NH2CH2CC>2-) , 3.36 (b, 2 H, H20), 2.0-2.40 (m, 2 H, H2').

20 89 497

Yhdiste 9

Rakenne: R1 * NHjCH^CO-, R2 - C2H5ÖCH2'

Muoto (suola): Hydrokloridi Saanto: 63 % 3H-NMR TMS sisäinen standardi 5 (DMSO-dg) 11.7- 11.90 (b, 1 H, NH), 8.10 (d, 1 H, J=7 Hz, H6), 7.23 (s, 4 6.12 (t, 1 K, J=7 Hz, H1'), 4.49 (s, 2 H, -CH2-0), 3.90-4.20 (b, 4 H3', H4', H5'), 3.40 (b, 2 H, H20), 2.97 (t, J=8 Hz, NH2CH2CH2CQ2-), 2.67 (t, J=8 Hz, NH2CH2CH2C02-), 2.66 (q, J=8 Hz, ) , 2.12-2.40 (m, 2 H, H2'), 1.17 (t, J=8 Hz, ) .

Yhdiste 1 0 NH- I 2

Rakenne: Rj * (CH3)2CHCHCO-(d yhdiste), R2 ” C1'0'CH2'

Muoto (suola): Hydrokloridi Saanto: 79 % 3H-NMR TMS sisäinen standardi 6 (DMSO-dg) 11.8- 11.90 (b, 1 H, NH), 7.98 (d, 1 H, J=7 Hz, H6), aromaat- 7.20-7.60 (m, 3 H, tinen )» 6.13 <t, 1 Hr j=7 21 89 497

Hz, H1'), 4.55 (s, 2 H, -CH2~^^), 4.00-4.40 (b, 4 H, H3', H4', H5'), 3.35 (b, 2 H, HjO) , 2.10-2.50 (m, 2 H, H2’), 1.50-1.9 (m, 1 H, (CH3)2CHC(NH2>HCC^-), 0.7-^1.2 (m, 6 H, (CH3) 2CHC (NH2) HC02~) .

Yhdiste 1 1

Rakenne: ®]_ =- NH2(CH2)^CO-, /CH3 *2 » 0-«2-

Muoto (suola): Hydrokloridi Saanto: 76 % *H-NMR TMS sisäinen standardi δ (DMSO-dg) 11.7-11.9 (b, 1 H, NH) , 8.00 (d, 1 H, J=7 Hz, H6), aromaat- 7.1-7.2 (m, 4 H, tinen ), 6.12 (t, 1 H, J=7 Hz, H1'), 4.52 (s, 2 H, -CH2-^^)' 4.0-4.4 (b, 4 H, H3’, H4', H5'), 3.34 (b, 2 H, Η2<0) , 3.0 (t, J=8 Hz, NH2(CH2)4CH2C02-, 2.10-2.50 (m, 2 H, H2'), 1.0-2.5 (m, 8 H, NH2 (CH2)4CH2C02~), 2.29 (s, 3 H, -^^)-ch3

Yhdiste 1 2

Rakenne: R^ = NH2CH2CO-, "2 - «O CH2~

Muoto (suola): Hydrokloridi Kidemuoto: Amorfinen Saanto: 72 % 22 S 9 497 ^H-NMR TMS sisäinen standardi δ (DMSO-dfi) 11.7- 11.9 (b, 1 H, NH) , 8.02 (d, 1 H, J=7 Hz, c aromaat- H°), 7.40 (s, 4 H,tinen ), 6.13 (t, 1 K, J=7

Hz, H1'), 4.55 (s, 2 H, -CH2"<^3 ) » 4.0-4.4 (b, 4 H, H3',H4', H5'), 3.84 (s, 2 H, . NH2CH2C02-), 3.34 (bs,2 H, H00) , 2.10-2.50 (m, 2 H, K2') .

Yhdiste 13 NH- i 2

Rakenne: ~ CH^CHCO-, *2 * «“O CH2-

Muoto (suola): Hydrokloridi Saanto: 78 % 3H-NMR TMS sisäinen standardi δ (DMSO-dg) 11.8- 12.0 (b, 1 H, NH), 8.00 (d, 1 H, J=7 Hz, H6), aromaat- . ι i 7.40 (s, 4 H,tinen ), 6.12 (t, 1 H, J=7 Hz, H ), 4.55 (s, 2 H, -CH2hQ ) , 3.90-4.4 (b, 4 H, H3', H4', H5'), 4.00 (m, 1 H, CH^C(NH2)HC02-), 3.35 (bs, 2 H, H20), 2.10-2.50 (m, 2 H, H2'), 1.43 (d, 3 H, J=8 Hz, CH3C(NH2)HC02-).

Yhdiste 14 CH- NH-

\ I

Rakenne: R^ = CHCHCO-, ch3 R2 - C1^G>-CB2- 23 8 9 497

Muoto (suola): Hydrokloridi Saanto: 82 % *H-NMR TMS sisäinen standardi δ (DMSO-dg) 11.0-11.5 (b, 1 H, NH), 7.95 (d, 1 H, J=7 Hz, H6), 7.35 (s, 4 H, 'fromaat“), 6.10 (t, 1 H, J=7 Hz, tinen H1'), 4.50 (s, 2 H, -CH2-^^), 4.00-4.40 (b, 4 H, H3', H4', H5'), 3.80 (d, 1 H, (CH-j) 2CHC (NH2) HCOj-) , 3.30 (bs, 2 H, H20), 2.10-2.50 (m, 2 H, H2'), 1.50- I. 90 (b, 1 H, (CH3)2CHC (NH2)HC02-) , 0.70-1.10 (m, 6 H, (CH3)2CHC(NH2)HC02-).

Yhdiste 15 NH_ I 2

Rakenne: ^ = (CH3)2CHCH2CHCO-, R2 - C1-0-Cli2-

Muoto (suola): Hydrokloridi Saanto: 77 % H-NMR TMS sisäinen standardi δ (DMSO-dg) , II. 50-11.90 (b, 1 H, NH), 7.96 (d, 1 H, J=7 Hz, H6), 7.40 (s, 4 H,tinen ), 6.15 (t, 1 H, J=7 Hz, H1 ), 4.53 (s, 2 H, -CH2-{3), 3.60-4.20 (m, 4 H, H3', H4', H5'), 3.25 (t, 1 H, J=ll Hz, (CH3)2CHCH2C(NH2)HC02~), 2.12-2.50 (m, 2 H, H2'), 1.20-1.90 (m, 3 H, (CH3)2CHCH2C(NH2)HC02-), 1.00 (s, 3 H, 24 8 9 497 CH3\ j^CHCH-)C(NH9)HC0--) , 0.90 (s, 3 H, ch3x * CH3\ —^J^CHCH-C (NH_) HCO--) , ch3/

Yhdiste 16 CH.

I 3

Rakenne: R. = CH,CH_CHCHCO-,

1 3 2 I

nk2 r2 = Cl O CH2-

Muoto (suola): Hydrokloridi Saanto: 81 % *H-NMR TMS sisäinen standardi δ (DMSO-dg) 11.50-12.00 (b, 1 H, NK), 8.00 (d, 1 H, J=7 Hz, H6), aromaat- η , 7.40 (s, 4 H,tinen ), 6.15 (t, 1 H, J=7 Hz, H1 ), 4.60 (s, 2 H, -CH^Q), 4.01-4.42 (m, 4 H, H3', H4', H5'), 3.85 (d, 1 H, J=6 Hz, CH3CH2C(CH3)HC(NH2)HC02~), 3.20-3.40 (m, 2 H, HjO), 2.20-2.40 (b, 2 H, H2’), 1.80-2.40 (b, 1 H, CH3CH2C(CH3)HC(NH2)HC02~), 0.70-1.80 (m, 8 H, CH3CH2C (CH3) HC (NHj) HCO.,-) .

Yhdiste 17 nh2

Rakenne: Ri = CH3C02CH2(!:HC0-, 25 89 497 R2 = C1-0<H2-

Muoto.(suola): Hydrokloridi Saanto: 75 % ^H-NMR TMS sisäinen standardi δ (DMSO-dg) 11.8-12.0 (b, 1. H, NH) , 8.22 (d, 1 H, J=7 Hz, H6), aromaat- 1, . 7.41 (s, 4 H,tinen ), 6.14 (t, 1 H, J=7 Hz, H ), 4.61 (s, 2 H, -CH2-^) ) , 4.00-4.40 (m, 4 H, H3', H4', H5'), 3.20-3.40 (m, 2 H, H20), 2.10-2.50 (b, 2 H, H2'), 2.0 (s, 3 H, CH^CC^CH^ (NH2) HC02~) .

Yhdiste 18 NH_ I 2

Rakenne: Rl = CH^CH^CHCO-, R2 = -Och2-

Muoto (suola): Hydrokloridi Saanto: 74 % ^H-NMR TMS sisäinen standardi δ (DMSO-dg) 11.80-12.00 (b, 1 H, NH), 7.98 (d, 1 H, J=7 Hz, H ), 7.38 (s, 4 H, tinen )» 6.10 (t, 1 H, J=7 Hz, H1'), 4.52 (s, 2 H, “CH2~^^ ) , 3.95-4.45 (b, 4 H, H3’, H4', H5'), 3.15-3.45 (m, 2 H, H20), 3.40 (t, 1 H, CH3SCH2CH2C(NH2)HC02-), 2.85-2.90 (m, 2 H, CH3SCH2CH2C (NH2)HC02~), 2.20-2.40 (b, 2 H, H2'), 2.20 (s, 3 H, 26 89 497 CH3SCH2CH2C(NH2)HC02-), 1.50-1.60 (m, 2 H, CH3SCH2CH2C(NH2)HC02-).

Yhdiste 19 0 NH_

/r\ n I

Rakenne: R1 = ^J-CHjOCCHjCHCO-, R2'=C1^Q>-CH2-

Muoto (suola): Hydrokloridi Saanto: 73 % 3H-NMR TMS sisäinen standardi δ (DMSO-dg) 11.8-12.0 (b, 1 H, NH), 8.00 (d, 1 H, J=7 Hz, H6), aromaat- 7.39 (s, 4 H,tinen ), 7.35 (s,. 4 H, ^^-CH20C0CH2C(NH2)HC02-) , 6.11 (t, 1 H, J=7 Hz, H1'), 5.11 (s, 2 H, ^^>-CH20C0CH2C(NH2)HC02-) , 4.52 (s, 2 H, -CH2-0), 3.95-4.40 (b, 4 H, H3', H4', H5'), 3.10 (bs, 2 H, H20), 2.10-2.40 (b, 2 H, H2') .

Yhdiste 20 NH- 1 2

Rakenne: = Ν«2<CH2)4CHCO-, R2 = C1-^CH2-

Muoto (suola): Hydrokloridi

Saanto: 26 % 7h-NMR TMS sisäinen standardi 6 (DMSO-d-)

O

11.45-11.90 (b, 1 H, NH), 7.95 (d, 1 H, J=7 Hz, H6), 27 8 9 497 aromaat- , . .. . ..l' 7.35 (s, 4 H,tinen ), 6.13 (t, 1 H, J=7 Hz, ), 4.50 (s, 2 H, -CH2-0 ) , 3.95-4.45 (b, 4 H, H3', H4', H5'), 3.10-3.65 (b, 1 H, NH2(CH2)4C(NH2)HC02~), 3.20-3.40 (m, 2 H, H20), 2.65-3.10 (b, 2 H, NH2CH2(CH2)3C(NH2)HC02-), 2.10-2.50 (m, 2 H, H2'), 1.00- 2.10 (b, 6. H, NH2CH2 (CH2) 3C(NH2)HC02-) .

Yhdiste 21 nh2

Rakenne: Rj = <^)-CH2CHCO-, r2 - c1^ch2-

Muoto (suola): Hydrokloridi Saanto: 79 % ^H-NMR TMS sisäinen standardi δ (DMSO-d-)

O

11.90 (b, 1 H, KK), 8.00 (d, 1 H, J=8 Hz, H6), aromaat- 7.40 (s, 4 H,tinen ), 7.23 (s, 5 H, ^^-CH2C (NH2) HC02-) , 6.10 (t, 1 H, J=8 Hz, H1'), 4.50 (s, 2 H, “ch2-^^ ) ' 4.00-4.40 (b, 5 H, H3’, H4’, H5', ^^-CH2C(NH2)HC02-) , 3.20-3.50 (m, 2 H, H20) , 3.19 (s, 2 H, ^^-CH2C (NH2) HC02-) , 2.00- 2.15 (b, 2 H, H2'), 1.08 (t, 1 H, J=8 Hz, dietyylieetteri (liuotin).

Yhdiste 22 Λ p

Rakenne: Rj = »-L-cHjCHCO-, r2 - C1H0-CH2- 28 8 9497 Γ

Muoto (suola): 1/2 tartraatti Saanto: 80 %

1H-NMR TMS sisäinen standardi δ (DMSO-dg) H

H N H “/N\- 7.60 (s, 1 H, ‘ .N—-CH2C(NH2)HC02-) , 7.40 (s, 4 H,

H

H K

aromaat- tinen , 6.90 (s, 1 H, -CH2C (NK2) HC02-) , 6.10 (t, 1 H, J=8 Hz, H1'), 4.50 (s, 2 K, ' 3·80"4·40 (m, 5 H, H3’, H4' , H5’,

H

iM--CH2C(NH2)HC02-) ,

H

/N

2.80-3.05 (m, 2 H, -CH2C (NH2) HC02~) , 2.10-2.40 (m, 2 H, H2') .

Yhdiste 23 NH- I 2

Rakenne: ^]_ = CH^CHCO-,

»2 - “O-CV

Muoto: (suola)cH?-^~y~SQ3H

Kidemuoto: Amorfinen Saanto: 82 % 29 8 9 4 9 7

TMS sisäinen standardi 6 (DMSO-dJ

• O

11.65-12.00 (b, 1 H, NH), 7.95 (d, 1 H, J=8 Hz, H6), 7.20, 7.38, 7.78 & 7.90 (s, 4 H, C;s aromaat-

Vs03H), 7.40 (s, 4 H, tinen ), 6.11 (t, 1 H, J=8 Hz, H1-'), 4.55 (s, 2 H, “CH2H^J/ > » 3.90-4.40 (m, 4 H, H3', H4', H5'), 3.72, (m, 1 H, CH3C(NH2)HC02-), 3.38 (s, 2 H, H20), 2.20-2.40 (b, 2 H, H2'), 2.23 (s, 3 H, CH3~^3~S03H) · 1.40 (d, 3 H, J=8 Hz, CH3C(NH2)HCOj-).

Yhdiste 24 NH_ I 2

Rakenne: = CH3CHCO-, R2 = C1OCH2'

Muoto (suola): 1/2 maleaatti Saanto: 38 % ^H-NMR TMS sisäinen standardi δ (DMSO-dg)

CHCOOH

II

12.45 (s, 1 H, CHCOOH), 7.95 (d, 1 H, J=8 Hz, e aromaat- H°) , 7.40 (s, 4 H,tinen ), 6.30 (s, 1 H,

CHCOOH

ir j, CHCOOH), 6.10 (t, 1 H, J=8 Hz, H ), 4.52 (s, 2 H, -CH2-^^), 3.90-4.42 (m, 4 H, H3', H4', H5'), 4.05 (q, 1 H, J=8 Hz, CH3C(NH2)HC02~), 3.38 (b, 30 89 4 97 2 H, H20), 2.18-2.40 (m, 2 H, H2'), 1.39 (d, 1 H, J=8 Hz, CH3C(NH2)HC02-).

Yhdiste 25 NH0 I 2

Rakenne : — CH^CHCO-, R2 =‘C1OhCH2'

Muoto (suola): 1/2 tartraatti Saanto: 57 % / 3H-NMR TMS sisäinen standardi 6 (DMSO-dg) 11.80-12.00 (b, 1 H, NH), 7.98 (d, 1 H, J=8 Hz, .6. _ „ „ , , aromaat- .

H ), 7.39 (s, 4 H,tinen ), 6.10 (t, 1 H, J=8 Hz, H1'), 4.50 (s, 2 H, -CH2-^^ ) , 4.00-4.50

COOH

(m, 4 H, H3', H4', H5'), 4.40 (s, 1 H, HOCH

HCOH

COOH), 4.00 (m, 1 H, CH3C(NH2)HC02-), 3.40 (b, 2 H, H20) , 2.20-2.40 (m, 2 H, H2'), 1.40 (d, 3 H, J=8 Hz, CH3C{NH2)HC02-).

Yhdiste 26 ^ i 2

Rakenne: :R^ = CH3CHCO-, r2 " c1O'CH2'

Muoto (suola): 1/3 sitraatti 31 89497

Saanto: 74 % 3H-NMR TMS sisäinen standardi δ (DMSO-dg) 11.70-12.10 (b, 1 H, NH), 10.0-12.0 (b, 2 H,

CH-COOH

I 2

HOOCCOH

I s CH2COOH), 7.95 (d, 1 H, J=8 Hz, H°) , 7.40 (s/ 4 H/ tinen 9 6·χ— (t, 1 H* J—8 Hzt H ) t 4.51 (s, 2 H, ~CK2·^) ) / 4.00-4.50 (m, 4 K, H3', H4', H5'), 4.05 (n, 1 H, CH3C (KH2)HC02~), 3.35

CH-.CCCK

I 2

(b, 2 H, H.,0) , 2.72 (s, 2 H, HOOCCOH 2 I

CH^CCOH), 2.20-2.39 (m, 2 H, H2'), 1.39 (d, 3 H, J=8 Hz, ch3c(nh2)hco2-).

Yhdiste 27 NH_ I 2

Rakenne: = CH^CHCO-, r2 = C1^-CH2-

Muoto (suola): Fosfaatti Saanto: 40 % 3H-NMR TMS sisäinen standardi 6 (DMSO-d,)

O

11.65-12.00 (b, 1 H, NH), 7.90 (d, 1 H, J=8 Hz, H6), 7.40 (s, 4 6·05 {t' 1 H' J=8 32 89 497

Hz, H1'), 4.50 (s, 2 H, -CH2h^^ ) , 4.00-4.50 (m, 4 H, H3', H4', H5'), 4.00 (m, 1 H, CH3C(NHj)HCOj-), 3.35 (b, 2 H, H20), 2.15-2.40 (m, 2 H, H2'), I. 40 (d, 3 H, J=8 Hz, CH3C(NH2)HC02~).

Yhdiste 28

Rakenne: =. NH2CH2CO-, *2 = C1O^CH2·

Muoto (suola): -Saanto: 75 % ^H-NMR TMS sisäinen standardi δ (DMSO-dg) II. 80-12.00 (b, 1 H, NH), 7.90 (d, 1 H, J=8 Hz, 6 aromaat- H°), 7.40 (s, 4 H,tinen ), 6.15 (t, 1 H, J=8

Hz, H1'), 4.54 (s, 2 H, -CH2h^^> ) , 4.00-4.50 (m, 4 H, H3', H4', H5'), 4.06 (2 H, s, NH2CH2C02-), 3.32 (b, 2 H, H20), 2.10-2.50 (m, 2 H, H2').

Yhdiste 29 /v

Rakenne: \_/ , R2 = cl-0-CHj-

Muoto (suola): Hydrokloridi Saanto: 63 % ^H-NMR TMS sisäinen standardi 6 (DMSO-dc)

O

11.80-12.10 (b, 1 H, NH), 8.03 (d, 1 H, J=8 Hz, I; .

33 3 9 497

S /V

H°), 9.3-10.2 (b, 1 H, \_/ ), 7.41 (s, 4 H, aromaat- , , tinen .), 6.13 (t, 1 H, J=8 Hz, H ), 4.56 (s, 2 H, -CH2-^^ ) , 4.00-4.50 (m, 4 H, H3', H4’, H5 ') , 3.22 (b, 2 H, H20), 2.00-2.50 (m, 2 H, H2').

Yhdiste 30

Rakenne: = NH2CH2CO-, r2 * ho^ck2-

Muoto (suola): Hydrokloridi Saanto: 53 % ^H-NMR TMS sisäinen standardi 5 (DMSO-dg) 11.7-11.9 (b, 1 H, NH) , 9.37 - (bs, , 7.92 (d, 1 H, J=8 Hz, H6), 7.14 (d, J=8 Hz, 2 H, aromaat- aromaattinen > 6*70 (d, J=8 Hz, 2 H,tinen , 6.08 (t, 1 H, J=3 Hz, H1'), 4.52 (s, 2 H, > ' 4.0-4.4 (m, 4 H, H3’, H4', H5'), 3.82 (s, 2 H, NH2CH2C02-), 3.35 (bs, 2 H, H20), 2.0-2.45 (m, 2 H, H2').

34 8 9 4 S 7

Esimerkki 8 <A) 5' -Ο-Λί- < t-butoks ikarbonyy1i> glysyy1ij-3'-0-(4-kloori-benteyy1i)-2'-deoks i-5-fluoriuridi inin valmistaminen

Liuokseen, jossa oli 9,45 g N-<t-butoksikarbonyyli>-glysiiniä 60 ml:sea asetoni trii1 ia, lisättiin 6,13 g disyk1oheksyy1i- karbodi-imidiä sekoittaen jääjäähdytyksen alla. Kolmen tunnin kuluttua suodatettiin muodostunut disyklohekeyyliurea pois, ja suodos konsentroitiin. Öljymäinen jäännös liuotettiin 15 ml:aan vedetöntä pyridiiniä, ja liuokseen lisättiin 5,00 g 3'-0-(4-klooribentsyyli>-2'-deoksi-5-fluoriuridiinia. Seos jätettiin seisomaan kolmeksi tunniksi huoneen lämpötilassa ja o 30 minuutiksi lämpötilassa 40 C. Seokseen lisättiin 5 ml vettä huoneen lämpötilassa, ja seos jätettiin seisomaan 30 minuutiksi ja konsentroitiin sen jälkeen. Jäännös liuotettiin 50 mitään etyyliasetaattia, ja liuos pestiin kolme kertaa kyllästetyllä natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella ja kahdesti natriumkloridin kyllästetyllä vesiliuoksella. Liuos kuivattiin edelleen vedettömän magnesiumsulfaatin päällä ja konsentroitiin. Jäännös siirrettiin piihappogee1ikolonni in ja uutettiin l-%:lla metanoli-kloroformilla, jolloin saatiin 5,33 g <75 %> 5 '-0-/·Ν-( t-butoksikarbonyyli > glysyy 1 i.7-3 '-0-< 4-kloor ibentsyy1i)-2'-deoksi-5-fluor iur idi inia.

NMR (DMSO-dg) : 11.85 (1H, bs, NH), 7.94 (1H, d, J=7Hz, Cj-H), 7.40 (4H, s, C6H4C1), 7.20 (1H, t, J=6Hz, OCONH), 6.14 (1H, t, J=6Hz, C^.-H), 4.54 (2Hf s, CH2C6H4C1), 4.30-4.16 (4H, m, C3.f4.fS.-H)f 3.74 (2H, d, J=6Hz, CHjCO), 2.38-2.32 (2H, m, C2.-H), 1.37 (9H, st CHj x 3) 35 894S7 < R ) j a < r )

Noudattaen edellä kuvailtua, kohdan <A> mukaista menettelyä, ja käyttemällä sopivia lähtöaineita, valmisteltiin taulukossa 7 esitettäviä yhdisteitä. Taulukossa 2 yhdisteet esitetään kaavan < I > mukaisilla Rg-ja Rj-ryhrr.il la . Tätä sovelletaan s viiraa vi in taulukoihin. Myöskin taulukossa 2 ja myöhemmissä tau lukoissa, ilmaisu "Str" tarkoittaa rakennetta.

36 89 497

Taulukko 2

Esimerkki 1Γ (B)

Rak : R2 =-CH2-^Vcö ri = 0-CH2 O-C-NHCH, C-

II II

Saanto : 4 3 % O O

N M R (DMS 0- d6 ) δ : 11. 8 5 (1 H, s, NH) 7. 9 3 (1 H, d, J=7Hz, C6 -H) 7. 69 (1H, t, J = 6 H z , OCONH) 7. 3 9* (4 H, s , C6 Ηα C2) 7.33 ( 5 H, s, C s H 5 ) 6. 13 (1H, t, J = 6 H z , Cr —H) 5. 04 (2H, s, CH_2 C5 H5 ) 4. 53 (2 H, s, C H_ 2 Cs H * C2) 4. 30-4. 14 (4H, m, C,· 4- ,.-H) 3. 83 (2 H, d. J=6Hz, C’Hs CO) 2. 3 7 - 2. 2 7 (2 H, m, Cg.-H) I; 37 8 94 97

Esimerkki 8 (C)

Rak : R2 =-CH2H^yC Q

R i =CH3 0-/~\cH2 0-C-NHCH2 C-X=/ II II

0 0

Saanto : 7 3 % NMR (DMS 0- d6 ) δ : 11. 86 (1H, bs, NH) 7. 92 (1H, d, J = 7 H z , C6 -H) 7. 62 (1H, t, J = 6 H z , OCONH) 7. 40 (4 H, s, C6 H4 C6) 7. 29 (2H, d, J=9Hz, C3 , 5 -H of • metoksibentsyylistä) 6. 90 (2H, d, J = 9Hz, C2 , ε - H of metoksibentsyylistä) 6. 1 5 (1H, t, J = 6Hz, Cr-H) 4. 97 (2H, s, cn2 C6 H4 OCH3 ) 4. 5 3 (2 H, s . C E2 C6 H4 C β ) 4. 30-4. 19 (4H, m, Cg. 4- g.-H) 3. 84 (2H, d, J = 6H z, C’H2 CO) 3. 74 (3Ht s, OCH3 ) 2. 32-2. 2 0 (2 H, m. Cg.-H) 38 3 9 4 97 CD) 5 ' - 0-( N-bentsyylioksikarbonyyli )glysyyli-3 '-0-<4-kloori-bentsyyli ) - 2 ' -deoks ι - 5 - f luori uridi. i nm valmistaminen

Liuokseen, joka sisälsi 1,00 g 3'-0-<4-klooribent syy 1i )-2 ' -deoksi-5-f luoriundiinis 20 ml : ssa pyridiiniä, lisättiin 1,23 g N-bentsyy1iokeikarbonyy1iglysiiniklorldia, ja seoksen annettiin reagoida huoneen lämpötilassa kaksi päivää.

Reaktioseos konsentroitiin alipaineessa, ja jäännökseen lisättiin 30 ml etyyliasetaattia ja 20 ml vettä. Orgaaninen kerros erotettiin liuoksesta ja kuivattiin vedettömän magnesiumsulfaatin päällä, ja liuotin tislattiin pois. Muodostunut öljymäinen jäännös siirrettiin piihappogee1iko1 onniin ja eluoitiin l-%: 11a metano1i-k1oroformi1la puhdistusta varten, jolloin saatiin 0,26 g <17 %) tavoiteltua 5'-0-<N-bentsyyli-oksikarbonyyl i ) - 2 ' -deoksi-5-f luonuriduma .

Siten saatu tuote identifioitiin esimerkin 8 (B) mukaisesti tuotetuksi yhdisteeksi ohutlevykromatografiän avulla (kehite-liuotin: kloroformi:metanoli = 39:2, ilmaisu: säteilytys UV- säteillä).

(E) 3'-0-<4-klooribent syy1i >-2'-deoksi-5-fluori-5'-0-glysyy1i-uridi inihydrokloridin vaImistaminen 3 ml:aan 4N-HCl-dioksaania liuotettiin 0,88 g 5'-0-£N-(t-butokeikarbonyy1i)glysyyliJ-3'-0-(4-klooribentsyyli)-2'-deok-si-5 - fluoriuridiinia, jota oli saatu esimerkin 8 (A) mukaisesti, ja liuos jätettiin seisomaan 30 minuutiksi huoneen lämpötilassa. Liuotin tislattiin pois< ja jäännös siirrettiin pιihappogee1iko 1onniin ja eluoitiin 4-6-%:lla metano 1i-k 1 oro-formilla, jolloin saatiin 0,36 g (45 3'-0-(4-klooribent-syyli>-2'-deok8i-5-fluori-5'-0-glysyyliuridiinihydrokloridia.

>; : 39 8 9 4 9 7

Muoto: Hygroskooppinen jauhe NMR (DMSO-d6) i: 11.83 (1H, bs, NH), 8.68 (3H, bs, NH2, HC1), 8.04 (1H, d, J=7Hz, Cg-H), 7.41 (4H, S, CgH4Cl), 6.15 (1H, t, J=6Hz, C1(-H), 4.56 (2Hr s, CH2CgH4Cl), 4.41-4.15 (4H, m, C3,f4,#5,-H)f 3.83 (2H, s, CHjCO), 2.44-1.99 (2H, m, C2.-H)

Alkuaineanalyysi: for C18H19ClPN30g-HC1*H20

Laskettu: c, 44.83%; H, 4.60%; N, 8.71%

Todettu: C, 44.64%; H, 4.91%; N, 8.43%

Esimerkit 9-17 Käyttämällä sopivia lähtöaineita, esimerkin 8 (A) ja sen jäl keen esimerkin 8 (E) menetelmiä noudatettiin, jolloin saatiin taulukossa 3 jäljempänä esitettävät yhdisteet. Esimerkin 12 mukaisesti saatavaksi tarkoitettu yhdiste saatiin kuitenkin noudattamalla esimerkin 8 (A) mukaista menettelyä.

40 8 9 497

Taulukko 3

Esimerkki 9

Rak : R2 =-CH2-(~) R, = H C δ · NH2 CH2 C-

II

Saanto '27% O

Muoto: Hygroskooppinen jauhe N M R ( D M S 0- d6 ) δ : 11.83C1H, bs.NH) 8. 54 (3 H, b s , NH2 , HC δ ) 8. 0 1 (1 H, d, J =7H z, C6 -H) 7. 3 5 (5 H, s, Cs H5 ) 6. 14 (1 H, t . J = 6 H z , Cr-H) 4. 5 6 (2 H, s, CH2 C6 H5 ) 4. 40-4. 16 (4 H, m, Cg. 4· 5·-Η) 3. 82 (2 H, s, CH2 CO) ' ’ 2. 4 2-2. 2 9 (2H. m, C2--H) I:

Esimerkki 10 41 89497

Rak : R2 =-CH2^\0CH3

Rl == H C <2 * NH2 CH2 C-

II

O

Saanto: 2 8%

Muoto: Hygroskooppinen jauhe N M R (D M S O - d 6 ) δ : 11. 86 (1 H, b s, NH) 9. 48 (3H, bs, NH2 , HC <2 ) 8. 04 C1 H, d, J =7Hz, C6 -H) 7. 29 (2H, d, J = 8Hz, C3 , 5 -H of bentseenirenkaasta) 6. 94 (2 H, d. J = 8 H z , C2 , 6 -H of bentseenirenkaasta) 6. 1 3 (1 H, t . J =6H z , Cr-H) 4. 48 (2 H, s, CH2 C6 Ha -OCH3 ) 4. 39-4. 18 (4 H, m, Cg. g.-H) 3. 82 (2H, s, CH2 CO) ’ * 2. 37-2. 28 (2 H, m, Cg.-H)

Esimerkki 11 42 89 4 97

Rak : R2 =-CH2-^3 R i = H C δ · NH2 CH2 C-

II

o

Saanto · 8 8%

Muoto: Hvflroskooppinen jauhe N M R ( D M S 0 — d 6 ) <5 : 11. 86 (1 H. bs, NH) 8. 67 (3 H, b s, NH2 , HCö) 8. 0 4 (1 H, d, J = 7Hz, CB -H) 7. 68-7. 2 5 (4 H, m, C6 H 4 Br) 6. 17 J = 6Hz, Cr-H) 4. 6 0 (2 H, s. CH_2 C6 H4 Br) 4. 4 3-4. 20 (4 H, m. Cg. 4· &.-H) 3. 83 (2 H, s, CH2 CO) ' 2. 4 1-2. 3 5 (2 H, m, Cg.-H) i

Esimerkki 12 43 89497

Rak : R2 =- CH2-^~y~C g 0 11 R i =-c-ch2 ch2 -nVHCfi

Saanto : 2 6 %

Muoto: Hygroskooppinen jauhe N M R (D M S 0- d6 ) δ : 11. 83 (1H, b s, NH) 10. 82 (1 H> b s , HC6) 7. 9 8 (1 H, d, J = 7 H z, C6 -H) 7. 4 1' (4 H, s, C6 H4 Cg) 6. 2 3-6. 0 6 (1 H, m, C^-H) 4. 5 5 (2 H, s, CH2 C6 Ha C β ) 4. 33-4. 16 (4 H, m, Cg. 4- g.-H) 3. 4 6-2. 7 9 (8 H, m, ' n/ -CH2 CH2 -N \ ) 2. 4 6-2. 28 (2 H, m, Cg.-H) 1. 87-1. 40 (6 H, m, - lT^>< > 44 3 9 497

Esimerkki 13

Rak : R2 = - C Q

Rl = H C C · NHs -CH-C- I II (L)

C H O

CHa^CHg

Saanto : 5 5 %

Muoto: Hyflroskooppinen jauhe N M R ( D M S O - d e ) δ : 11. 80 (1 H. bs, NH) 9. 30 (3 H, b s , NH2 , HCfi ) 8. 0 0(1 H. d, J=7Hz, C6 -H) .

7. 4 0 (4 H, s , C6 H4 C 6 ) 6. 14 (1H, t, J = 6Hz, Cr-H) 4. 56 (2H, s, CH2 C6 Ha CÖ ) 4. 42-4. 16 (4 H, m, Cg. 4· g.-H) 3. 83 (1H. d, J = 5Hz, c’HCO) 2. 4 3- 2. 08 (3 H, m, Cg.-H.

(CH3 ) 2 CH-) 0. 9 7, 0. 9 3 (kukin 3 H, d, J=7Hz, CH3 ) I:

Esimerkki 14 45 89497

Rak : R2 = - C H2-^~yC β

Rl = H C β · NH2 -CH-C- I II (L) ch2 o

CH

c'Hs \h3

Saanto : 5 1 %

Muoto: Hygroskooppinen jauhe NM R (D M S 0- de ) δ : 1 1. 80 (1 H, b s, N3 -H) 8. 82 (3 H, b s , NH2 , HCfi ) 8. 0 2 (1 H, d, J=7Hz, C6 -H) 7. 4 1 (4 H, s , C6 Ha C β ) 6. 14 (1 H, t , J = 6H z, Cr-H) 4. 57 (2H, s, CH2 C6 H4 C β ) 4. 41-4. 20 (4 H, m, Cg. 4· 5·-Η) 4. 0 0-3. 80 (1H, m, CH’CO) 2. 53 — 2. 32 (m, C 2 · — H , yhteenliitetyt D M S O :n kanssa 1. 85- 1. 67 (3 H, m, -CH2 CH_ (CH3 ) 2 ) 0. 86 (6H, d, J = 5H z, CH3 x 2) 46 3 9 4 S 7

Esimerkki 1 5

Rak : R2 ^-CHg-^yCC

R, = H C δ · H

/N\ (L) <_>c· .v~/ Il o

Saanto : 6 3 %

Muoto: Hy^roskoooDinen-^jauhe N M R (D M S 0- ds ) <5 : 11. 86 (1 H, b s, NH) 9 . 9 9 (2H, b S , proliini N H, H C δ ) 8. 0 3 ' (1 H, d, J = 7 H z , C6 -H) 7. 4 1 (4 H, s, C6 Ha CQ ) 6. 14 (1 H, t , J = 6H z , Cr-H) 4. 57 (2H, s, CH2 C6 H4 Cö ) 4. 4 2-4. 27 (5H, m, Cg. 4· 5·-Η, CHCO) 3. 3 9 - 3. 1 8 (4 H, m, -NHCH2 CH2 CIi2 ) 2. 40-2. 32 (2H, m, Cg.-H) 2. 0 8- 1. 8 5 (2 H, m, -NHCH2 CH2 CH2 ) l!

Esimerkki 16 47 89497

Rak : R2 =-CH2 -O c e o

II

Ri =-C-CH2 CH2 NH2 · H C δ

Saanto : 6 1 %

Muoto: Hygroskooppinen jauhe NMR (DMS 0- de) <5 : 11. 86 (1 H, b s, NH) 8. 19 (3H, b s, NH2 , HC δ ) 7.97 (1H, d, J = 7Hz, C5 -H) 7. 41‘(4H, s, Cg H* C 6 ) 6. 1 2 (1 H, t . J = 6Hz, Cr-H) 4. 5 5 (2 H, s, CH2 C s H * C δ ) 4. 31-4. 18 (4 H, m, Cg. 4· &·-Η) 3. 03 (2 H, t, J = 6 H z , -CH2 CO) 2. 77 (2 H, t, J = 6 H z , NCH2 ) 2. 3 4 (2 H, t , J = 5 H z , C2·- H) 48 3 94 97

Esimerkki 17

Rak : R2 =-CH2-^yCg

O

li R, = — C—/ NH · HCö

Saanto : 9 1 %

Muoto: Hygroskooppinen jauhe NMR (DM S 0 - d e ) δ : 11. 86 (1H, bs, NH) 9. 2 2 (2 H, NH, HC δ ) 7. 94 (1H, d, J = 7Hz, C6 -H) 7. 4 1' (4 H, s, C6 H4 CC) 6. 12 (1 H, t , J =6H z, Cr-H) 4. 54 (2H, s, CH2 C6 H4 CC) 4. 28-4. 16 (4 H, m, Cg. 4· 5--H) 3. 1 8- 1. 83 (1 1 H, m, ' ' C9.-H, CO-Y N —) L \_/ l; 49 89497

Esimerkki 18 5'-O-bent syy1i-2'-deokei-5-fluori-3'-0-glysyyliuridi inihydro-kloridin valmistaminen

Liuokseen, joka sisälsi 1,00 g 5'-0-bentsyy1i-2'-deoksi-5-fluoriuridiinia 30 ml:ssa vedetöntä pyridiiniä, lisättiin 0,78 g N-(t-butoksikarbonyyli)glysiiniä ja 1,80 g 2,4,6-tri-isopropyylibentseenisulfonyylikloridia, ja seoksen annettiin reagoida huoneen lämpöti 1-assa yli yön.

Reaktioseos konsentroitiin alipaineessa, ja jäännös jaettiin osiin etyyliasetaatin ja veden kesken. Orgaaninen kerros pestiin kyllästetyllä natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella, kuivattiin vedettömän magnesiumsulfaatin päällä ja konsentroitiin alipaineessa. Jäännös siirrettiin piihappogee1ikotonniin ja eluoitiin 1 %:lla metanolikloroformilla puhdistusta varten, jolloin saatiin 1,06 g tavoiteltua 5'-0-bentsyyli-3'-0-/N-(t-butoksikarbonyyli)glysyyli/-2'-deoksi-5-fluoriuridiinia .

Myöhemmin edellä tuotettu yhdiste (välituote) liuotettiin 10 mlraan 10 X suolahappo-dioksaania ja sekoitettiin 2 tunnin ajan huoneen lämpötilassa.

Reaktioseos konsentroitiin alipaineessa, ja jäännös siirrettiin piihappogeelikolonniin, ja eluoitiin puhdistamista varten 10-*:lla metanoli-kloroformi1la, jolloin saatiin 0,77 g (60 X) tavoiteltua 5 '-0-bentsyy1i-2'-deoksi-5-fluori-3'-0-glysyy1iur idi inihydrok 1oridia.

Muoto; Hygroskooppinen jauhe NMR (DMSO-dg) i: 9.10 (3H, bs, NH2, HC1), 7.97 (1H, d, J=7Hz, Cg-H), 7.35 (5H, s, C6H5), 6.22 (1H, t, J=6Hz, Cj^-H), 5.36 (1H, bs, C3,-H), 4.58 (2H, s, CHjCgHg), 4.27 (1H, bs, C4,-H), 3.81 (2H, s, CH2CO), 3.77-3.71 (2H, m. Cg.-H), 2.55-2.31 (C2.-H, yhteenliittynyt DMSO:n kanssa 50 89 457

Esimerkit 19-26

Noudattamalla esimerkin 18 mukaista menettelyä ja käyttämällä sopivia lähtöaineita, valmistettiin jäljempänä taulukossa 4 esitetyt yhdιs t e e t .

51 89497

Taulukko 4

Esimerkki'19

Rak : R2 =~ CH2 δ R, = HCö · NH2 CH2 C-

II

Saanto : 6 7 % O

Muoto: Hygroskooppinen jauhe N M R (D M S 0 - d6 ) δ : 11. 78 (1H, b s, NH) 8. 5 5 (3 H, b s, NH2 , HC δ ) 8. 02 (1H, d, J = 7 H z , C6 -H) 7. 6 2-7. 41 (3 H, m, C6 H3 Cö2 ) 6. 1 6 (1 H. t. J = 7 H z . Cr-H) 4. 6 1 (2 H, s. CH2 C6 H3 C δ 2 ) 4. 43-4. 15 (4 H, m, Cg. 4· g.-H) 3. 83 (2 H, s. CH2 CO) * ’ 2. 52_ 2. 29 ( C 2 · — H , yhteenliittynyt D M S O :n kanssa

Esimerkki 20 52 89 497 /ch3

Rak : R 2 = - C H2 R, =HCg * nh2 ch2 c-

II

o

Saanto : 8 0 %

Muoto: Hygroskooppinen jauhe NMR (DMS O- d6 ) δ : 11. 7 0 (1 H, b s, NH) 8. 5 5 (3 H, b s, NH2 , HCfi) 8. 0 1 (1H, d, J = 7 H z , C6 -H) 7. 2 8-7. 11 (4 H, m, C5 33 4 CH3 ) 6. 13 (1 H, t, J =6H z, Cr —H) 4. 51 (2 H, s, Oils -C6 H 4 -CH3 ) 4. 40-4. 19 (4 H, m, Cg. 4· 5·-Η) 3. 82 (2 H, s, CH2 CO) ’ ' 2. 46-2. 3 1 (5 H, m, Cg.-H, -c6 H* -CH3 ) I : 53 8 9 497

Esimerkki 21 ce v>_

Rak : R 2 =-CH2

Rl =HC8 · NH2 ch2 C-

II

o

Saanto : 9 %

Muoto': öljy NMR (DM S O - dB ) δ : 8. 97 (3 H, b s. NH2 , HCn 7. 9 9 (1 H, d, J =7H z, C6 -H) 7. 6 1 -7. 2 9 (4H, m, C6 H4 C δ ) 6. 1 6 · (1 H, t, J = 6Hz, Cr-H) 4. 7 6-4. 24 (6 H, m, CH2 C6 H* CC,

Cg· 4 · g · — H) 3. 8 5 (2 H, s, CHi CO) 2. 5 4_ 2. 3 3 ( C 2 ’ — H r yhteenliittynyt D M S O :n kanssa 54 89 4S7

Esimerkki 22

Rak : Rs = - C H2 ^~A-C β CH3 0 I II (L)

Ri =HCC · NHs -CH-C-

Saanto : 1 7 %

Muoto: Hygroskooppinen jauhe NMR (DMS 0- d6 ) <5 : 8. 6 1 (3H, b s, NH2 , H C δ ) 7. 98 (1H, d, J = 7Hz, C6 -H) 7. 40 (4H, s, Cs H4 CS) 6. 14 (1H, t, J = 6 H z , Cr-H) 4. 5 5 (2 H, s, CHs C6 HA CC ) 4. 41-4. 05 (5 H, m, Cg. 4· g.-H, C H) ’ 2. 43-2. 29 (2 H, m, Cg.-H) 1. 4 2 (3H, d, J=7Hz,CH3 ) 55 8 9 497

Esimerkki 2 3

Rak : ^ ® r2 = -ch2

Ri = H C δ · NH2 -CH2 C-

II

O

Saanto ’ 50%

Muoto: Hygroskooppinen jauhe N M R (D M S 0- d6 ) δ : 9. O 1 (3 H, b s, NH2 , H C δ ) 8. O 1 (1H, d, J = 7Hz, C6 -H) 7. 4 2-7. 26 (4 H, m, C6 HA Cö) 6. 16 (1H, t. J = 6 H z , Cr-H) 4. 5 7 (2 H, s, CH2 C 6 H 4. C δ ) 4. 4 1-4. 15 (4 H, m, C8· 4· 5·-Η) 3. 80 (2 H, s. CH2 CO) ’ 2. 54-2. 3 1 (Cz.-H, yhteenliittynvt D M S O :n kanssa 56 89497

Esimerkki 2 4

Rak : R 2 = — cH2^yCfi

Rl = H C β · NH2 -CH-C- I II (L) ch2 o ό

Saanto : 1 9 %

Muoto: Hygroskooppinen jauhe NMR (DMS 0- d s ) «5 : 9. 23 (3 H, b s, NH2 , HCC) 7. 9 5 · (1 H, d, J = 7H z, C5 -H) 7.4 0 (4 H, s, C6 H* CQ ) 7. 26 (5H( s, C6 H5 ) 6. 12 (1H, t, J = 7Hz, Cr-H) 4. 4 9 (2 H, s, CH2 C6 H4 C β ) 4.3 1 -4. 0 5 ( 5 H, m, Cg. 5·-Η, C H) ' 3. 21-3. 08 (2 H, m, CH2 C6 H5 ) 2. 29-2. 19 (2 H, m, Cg.-H)

Esimerkki 2 5 t 57 3 9 4 S 7

Rak : R2 = - C H2 ^yC Q

II

Rt =HCg *NH2 -CH-C- (L) (CH2 ) 2 s c h3

Saanto '· 2 3 %

Muoto: Hygroskooppinen jauhe N M R (D M S 0 - d e ) δ : 11. 78 (1H, b s, NH) 8. 78 (3 H, b s, NH2 , HCS) 8. 0 1 ‘ (1 H, d, J = 7Hz, C6 -H) 7. 41 (4H, s, C6 HA CC) 6. 1 3 (1 H, t , J =6H z. Cr-H) 4. 56 (2H, s, CH2 Cb H4. CC) 4. 4 2-4. 0 5 (5 H, m, Cg. 4· g.-H.

CHCO) * * 2. 66-2. 0 2 (9 H, m, Cg.-H, C H3 - S - (CH2 ) 2 -) 58 8 9 4 9 7

Esimerkki 2 6

Rak : Rg =-CHg -^~^F

R, =HCC · nh2 -ch2 -c-

II

o

Saanto : 7 2 %

Muoto: Hygroskooppinen jauhe N M R (D M S 0 - d6 ) δ : 11. 78 (1H, b s, NH) 8. 55 (3 H, b s, NH2 , HCC) 8. 0 1 (1H, d, J =7Hz, C6 -H) 7. 50-7. 08 (4 H, m, C6 H* F) 6. 1 3 ( 1 H, t, J = 6Hz, Cr-H) 4. 54 (2 H, s, CH2 C6 H4 F) 4. 41-4. 14 (4 H, m, Cg. 4> &.-H) 3. 83 (2 H, s, CH2 CO) ’ ' 2. 4 6-2. 28 (2 H( m, Cg.-H) I: 59 39497

Esimerkki 27 3'-0-< 4-klooribentsyyli)-2'-deoks i-5'-0-<3-dietyyliaminopro-panoyyl i ) - 5-f luor iuridiinihydrokloridin valmistammen 3-dietyyliaminopropaanihappohydrokloridin liuokseen 30 ml:sea o tetrahydrofuraania, joka oli jäähdytetty -15 C:seen, lisättiin 0,56 ml trietyyliamiinia ja 0,50 ml isobutyy1ikloorifor-maattia, jolloin saatiin sekahappoanhydridiä.

Seokseen lisättiin 1,00 g 3'-0-(4-klooribentsyy1i)-2'-deoksi- 5-fluoriuridiinia ja 0,56 ml trietyyliamiinia, ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa yli yön. Liukenematon aines suodatettiin pois, ja suodos konsentroitiin. Jäännös siirrettiin piihappogeelikolonniin ja eluoitiin puhdistamista varten 5-X:lla metanolikloroformi1la, jolloin saatiin 0,10 g (7 %) 3'-0-(4-kloor ibentsyy1i>-2'-deoksi-5'-0-(3-dietyy1iaminopropa-noyy1i)-5-fluoriuridi inihydrokloridia.

Muoto: Hygroskooppinen jauhe NMR (DMSO-dg) S : 11.96 (1H, bs, NH), 7.98 (1H, d, J=7Hz, Cg-H), 7.41 (4H, s, C6H4Cl)f 6.16 (1H, t, J=6Hz, C-p-H), 4.55 (2H, s, CH2CgH4Cl), 4.27 — 4.23 (4 H, m, C 3if 4· 51-H)» 3.19-2.94 (8H, m, CH2CH2CO, CH2CH3 x 2), 2.41-2.33 (2H, m, Cj.-H), 1.21 (6H, t, J=7Hz, CH3 x 2)

Esimerkki 28 3 '-0-(4-klooribentsyy1i)-2'-deoksi-5-fluori-5'-0-glysyy1i-uridiini L-tartraatin valmistaminen 0,50 g:aan esimerkin Θ (A> mukaisesti saatua 5'-0-/N-(t-butok-s ikarbonyyli)glysyyli7-3'-0-< 4-k100ribent syy1i)-2'-deoksi-5-fluoriuridiinia lisättiin 2 ml 4N-suolahappo-dioksaania, ja βο 39457 seos jätettiin seisomaan 15 minuutiksi huoneen lämpötilassa. Liuotin haihdutettiin myöhemmin, ja jäännös liuotettiin pieneen määrään vettä. Liuos tehtiin heikosti emäksiseksi kyllästetyllä natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella ja uutettiin kolme kertaa 40 ml:lla etyyliasetaattia. Etyy1iasetaattiker-ros kuivattiin vedettömän magnesiumsulfaatin päällä, ja siihen lisättiin liuosta, joka sisälsi 0,14 g L-viinihappoa etyyliasetaatissa, ja seos konsentroitiin noin 40 mliksi. Siten muodostunut saostuma suodatettiin, jolloin saatiin 0,30 g <65 %> 3 '-0-(4-klooribentsyy1i)-2'-deoksi-5-fluori-5'-0-gly-syyliuridiini L-tartraattia.

Muoto: Hygroskooppinen jauhe NMR < DMSO-dg) S : 7.97 (1H, d, J=7Hz, Cg-H), 7.40 (4H, s, C6H4C1), 7.26 (7H/ bs t NHf NH2, OH x 2, COOH x 2), 6.14 (1H, t, J=6Hz, Cj^.-H), 4.54 (2H, s, CHjCgH^l), 4.43—4.20 (4H, m, ι 4ι ^i-H), 4.06 (2H, s, HOOCCHOHCHOHCOOH), 3.75 (2H, s, CHjCO), 2.41-2.28 (2H, ra, C2.-H)

Esimerkit 29 ia 30

Noudattamalla esimerkin 28 mukaista menettelyä ja käyttämällä sopivia lähtöaineita, valmistettiin taulukossa 5 esitettyjä yhdisteitä.

61 89 497

Taulukko 5

Esimerkki 2 9

Rak : R 2 =-CH2 -^\c β

Ri =HOOCCH=CHCOOH* NH2 -ch2 -C-

II

o

Saanto : 6 5%

Muoto: Hygroskooppinen jauhe NM R (DM S 0 - d6 ) δ : 7. 98 (1 H, d, J=7Hz, C6 -H) 7. 7 4 ' ( 5 H, bs, NH, N H 2 , C00Hx2) 7. 40 (4 H, s, C6 HA CS) 6. 52 (2 H, s, HOOCCH = CHCOOH) 6. 14 (1H, t, J =7Hz, C 1 * — H) 4. 54 (2 H, s, CH2 C6 Ha Cg ) 4. 38-4. 18 (4 H, m, C3· 4· 5·-Η) 3. 64 (2 H, s, CH2 CO) ' ’ 2. 4 0-2. 28 (2 H, m, Cg.-H) ‘2 89497

Esimerkki 3 0 .

Rak' : R2 =-CH2 β R, =H3 C-QS03 H X 1 / 2 · N H 2 -CH2 - C -

II

O

Saanto : 58%

Muoto: Hygroskooppinen jauhe N M R (DMS O- ds ) <5 : 8. 30 (2. 5 H, b s, NH2 ja S03 Hx 1/2) 7. 9 8 *( 1 H, d, J = 7Hz, CB -H) 7. 49 (1H, d, J = 8 H z , p — tosylaatti C2 6 -Hx 1/2) 7. 40 (4 H, s, Ce H4 Cfl) 7. 11 (1 H, d, J=8Hz, p — tosylaatti C3 5 -Hx 1/2) 6. 24-6. *08 (1H, m, C^-H) 4. 54 (2 H, s, CH2 C6 Ha CS) 4. 42-4. 38 (2 H, m, Cg. 4·-Η) 4. 23-4. 20 (2 H, m, Cg.’-H) 3. 87 (2 H, s. -CH2 CO) 2. 4 2-2. 28 (3. 5H, m, Cg.-H ja CH3 x 1/2) li i 63 89 497

Farmakologinen koe I

Keksinnön mukainen yhdiste 12 testattiin tuumoria vastustahan vaikutuksen osalta yhdisteen käyttökelpoisuuden toteen näyt t ämi seksi ,

Koemenet e l.mät ta) Menetelmä tuumoria vastustavan aktiivisuuden määrittämiseksi

Sa r c oma - 1 8 0 : n kudoksia istutettiin ihonalaisesti kannan ICP.' ICL uroshiirten selkään (psinovaihtelu 27-30 g) määränä 6 5 x 10 solua kuhunkin. Koeyhdiete annettiin heikosti happanen vesiliuoksen muodossa. Liuosta annettiin suun kautta jokaiselle hiirelle (7 hiirtä kussakin ryhmässä) annoksena 1,0 ml / 1 00 g ruumiinpainoa kerran päivässä 7 : nä peräkkäisenä päivänä, alkaen 24 tuntia kudossiirron jälkeen, ja heikosti hapanta vesiliuosta, joka ei sisältänyt yhtään koeyhdistettä, annettiin suun kautta kontrolliryhmälle määränä 1,0 ml/100 g ruumiinpainoa kerran päivässä 7:nä peräkkäisenä päivänä, alkaen 24 tuntia kudossiirron jälkeen.

Tuumori poistettiin ruumiista kymmenentenä päivänä kudossiirron jälkeen ja punnittiin tuumorien keskimääräisen painon laskemiseksi ryhmässä, jolle annettiin k oeyhd i s t et t.ä sisä! ( ’ vaä liuosta, ja vastaavan painon laskemiseksi kontrolliryhmässä. Tehokas annos (ED^q) 80-¾:sen syöpä inhibition aikaansaamiseksi määritettiin annoe-vaste-käyrä1tä. Annos, joka aiheuttaa 50 %:n inhibition ruumiinpainon lisäykselle (IB 5£>, määritettiin annos-ruumiinpainon muutos -käyral+ä. Terapeuttinen indeksi <T. T . ~ IB^q/ED^q) maa n t ett iin tulosten avulla, jotka on esitetty jäljempänä taulukossa 6.

64 89497

Taulukko 6 ED50 IB50 T.I.

(mg/kg/päivä) <mg/kg/päivä)

Yhdiste 12 0,75 3,60 4,80 3 ' 0 -p-klooribentsvyli-2'-deoksi-5-fluori- uridiini 0,94 1,54 1,64

Taulukosta 6 on nähtävissä, että yhdisteellä 12 on voimak-^ kaampi tehokkuus ja suurempi terapeuttinen indeksi kuin 0 p-k 1ooribent syy11-2'-deoksi-5 - fluoriuridiini 1la, ja sillä on tästä Gyyetä selvästi parempi syöpää vastustava vaikutus.

Farmakologinen koe II

Sarcoma-ΙΘΟ, jota oli edelleen viljelty ICR-hiirten aecites-nesteeesä, laimennettiin fysiologisella saliinilla ja istutettiin ihonalaisesti ICR-hiirten selkiin määränä 2 x 10 solua kuhunkin. Kaksikymmentäneljä tuntia kudossiirron jälkeen annettiin jokaisen hiiren häntälaskimoon koeyhdistettä, liuotettuna steriloituun fysiologiseen saliiniin, kerran päivässä 7 : nä peräkkäisenä päivänä.

Kiinteä tuumori eristettiin hiirten selänpuoleisen ihon alta kymmenentenä päivänä kudossiirron jälkeen tuumorin painon mittaamiseksi. Koeyhdisteryhmän tuumorin painon (T) suhde (T/C) kontrolliryhmän tuumorin painoon (C) määritettiin. 50-%:se3ti tuumoria inhiboiva annos (EDgg-arvo), jossa T/C on 0,5, määritettiin annostuksen annos-vaste-käyrältä ja suhteesta (T/C). Taulukossa 7 esitetään tulokset.

I : 65 89497

Taulukko 7

Koeyhdiste <ForfllUla (I) > E D gQ

Es- no-_R2__Rj__(mg/kg) (E) “CH2 -<f^V CS HCÖ * NH2 CH2 if !· 0 __X=/__0__ -CH2 -ry C δ HCC · NH2 9H-(J- 13 X=/ Ah o 1* 5 ch3 ch3 HCδ * NH2 9H-9- 14 -ch2 -/ v ce 9H2 o 1 5

CH

ch3 ch3 c δ 1 9 -ch2 /\ ce Hce * nh2 ch2 -9- 0 8 x=/ o 22 -ch2 ry ce Hce * nh2 9h—ς- ι. o x=/ ch3 o

HO-9H-COOH

2 8 -CH2-/ y ce HO-CH-COOH η n · nh2 ch2 -9-0 66 894S7 Jäljempänä ositetaan valmistueesimerkkejä, jotka valaisevat keksinnön mukaista yhdistettä sisältävien farmaseuttisten koostumusten valmistusta.

Valmistusesimerkkι 1 kapseloidun koostumuksen valmistaminen

Yhdistettä 3, laktoosia, kiteistä selluloosaa ja maissitärk-kelystä sekoitettiin keskenään seuraavassa esitettävinä osuuksina. Magnes i uroste*ra att ia lisättiin jäljempänä esitettävänä määränä, ja seos kapseloitiin määrän ollessa kapselia kohti noin 293 mg, käyttäen sopivaa kapselointiisitet ta.

{Component it ___mg /kapse 11

Yhdiste 3 200,0

Laktoosi 30,0

Kiteinen selluloosa 50,0

Maιssitärkkelys 10,0

Magnesiumetearaattι 3 0_ 293,0

Valmistusesimerkki 2

Rakeisen koostumuksen valmistaminen

Yhdistettä 7, laktoosia, kiteistä selluloosaa ja maiseitärk-kelystä sekoitettiin keskenään seuraavassa esitettävinä osuuksina. 10-*:ta hydrok sipropyy1ise 1lutoosan liuosta etanolissa lisättiin, ja seosta sekoitettiin, ja se rakeistettiin käyttäen sopivaa rakeistue 1aite11a. Rakeet kuivattiin ja säädettiin seulakokoon 12-42. Muodostuneet rakeet päällystettiin hydrok e ipropyy1 imetyyliselluloosalla jäljempänä esitettävät lä mäyrällä käyttäen sopivaa päällystyslaitetta, ja säädettiin seulakokoon 12-42.

I: ι 67 39497 {Component, it__mg / kapseli

Yhdiste 7 200,0

Laktoos i 200,0

Kiteinen selluloosa 311,0

Maissitärkkelys 200,0

Hydroksipropyy1ise1luloosa 10,0

Hyd rok s i propyyltmetyyliselluloosa 70,0

Paevahappomonoglyseridi 3,5

Titaanidioksidi _______5.5 1000,0

Valmiatuseeimerkki 3

Tabletoidun koostumuksen valmistaminen

Yhdistettä 1, maissitärkkelystä ja se 11u1oosakaI smmglyko-laattia sekoitettiin keskenään seuraavasea esitettävinä osuuksina. 10-%:ta hydroksipropyy 1 ise 1 lu 1 oosan. liuosta etanolissa lisättiin, minkä jälkeen seosta sekoitettiin, ja se rakeistettiin sopivalla rake is tus la i 11 ee 1 la . Rakeet, kuivattiin ja seuraavat osuudet magnesiumstearaattia ja piihappoanhydrι-dia lisättiin. Seoksesta muodostettiin tabletteja sopivan t a b 1 e t. i nmuodos t us la i 11 een avulla, ja tabletit Päällystettiin hydroksipropyylimetyyliselluloosalla.

Komponent i t_ma / kaose 1 i

Yhdiste 1 200,0

Mais sitärkkelys 5,0

Selluloosaksisiumglykolaatti 20,0

Hydroksipropyyliselluloosa 2,0

Magneslumstearaatti 2,5

Piihappoanhydridi 2,5

Hydroksipropy ylime tyylisell ui. oosa 19,999

Macrogol 6000 0,001 T i t a a n i d i o k s i d j _2,0 254 68 89 497

Va 1 mi e tue ee ime rkk ι 4

Koostumuksen valmistaminen peräpuikon muodossa "Witepsol W-35”:a (tavaramerkki Dynamite Nobel Co., Ltd:n o tuote, Länsi-Saksa) sulatettiin noin 60 C:ssa, ja liuosta pi~ o dettiin noin 45 C:sena. Liuos ja yhdiste 5 sekoitettiin seu-raavina osuuksina ja muotoiltiin peräpuikon muotoon, jokaisen painaessa 1 g, käyttäen sopivaa peräpuikon mucdostus 1aite11a.

Komponentit_____ma / peräpuikko

Yhdiste 5 400,0

Witepsol W-35 600,0 1000,0

Valmistueesimerkki 5

Esimerkin 13 mukainen yhdiste 50 mg

Laktoosi 97 mg

Kiteinen selluloosa 50 mg

Magnesiumstearaat. ti 3 mg

Valmistettiin kapseleita (200 mg kukin), joista kukin sisälsi edellä määritellyn koostumuksen.

Valmiatusesimerkki 6

Esimerkin 14 mukainen yhdiste 10 mg

Laktoosi 184 mg

Kiteinen selluloosa 100 mg

Magnesiumstearaatti 6 mg

Valmistettiin kapseleita (300 mg kukin), joista jokainen si sälsi edellä määritellyn koostumuksen.

f; ,· 69 89497

Valmistus esimerkki 7

Esimerkin 19 mukainen yhdiste 10 mg

La ktoosi 24 0 mg

Maissi tärkkelys 340 mg

Hyd r ok s i. n r opyy 1 i s e 1 1 u 1 Dos a 10 mg

Valmisteltiin rakeita (600 mg jokainen päällystetty yksikkö> , joista jokainen sisälsi edellä määritellyn koostumuksen.

Valmistusesimerkki 8

Esimerkin 8 (F) mukainen yhdiste 10 mg

Macrogol 300 500 mg

Tislattu vesi ruiskeen antoon (tarkoituksenmukaisesti).

Valmistettiin ruiskeliuos (5 ml ampullia kohti), joka sisälsi edellä määritellyn koostumuksen.

Valmistusesimerkki 9

Tuhat tablettia valmistettiin suun kautta antamista varten joista jokainen sisälsi 10 mg esimerkin 22 mukaisesti saatua yhdistettä, ja joilla jokaisella oli seuraava koostumus

Esimerkin 22 mukainen yhdiste 10 g

Laktoosi (japanilainen farmakopea) 45 g

Ma i ssitärkkelys (japanilainen farma-kopea) 25 g

Kiteinen selluloosa (japanilainen farmakopea) 25 g

Met yy1 i s e] 1u 1 o os a (japanilainen f a rmakopea) 1 ,5 g

Msgnpei ntnsfoa rssf t , c japanilainen farmakopea) 1 g yo 89457

Esimerkin 22 mukainen yhdiste, laktoosi, mai s s itärkkelys 3-kiteinen selluloosa sekoitettiin perusteellisesti, ja seos rakeistettiin 5-3?:sen me t yy 1 i s c 1 1 u 1 oo a an vesiliuoksen kanssa. S j t en saadut ra k eet. ajettiin seulan läpi, jonka s eu 1 a t they s oli 200, ja kuivattiin huolellisesti. Kuivat rakeet ajettiin seulan läpi, jonka seulat.iheys oli 200 ja sekoitettiin magnesiums tearaatin kanssa. Seos puristettiin tableteiksi.

Valmistuseeimerkki 10

Esimerkin 9 mukainen yhdiste 10 mg

Marrogol 300 500 mg

Tislattua veftä ruiskeena antamista varten sopiva määrä.

Valmistettiin ruiekeliuos (5 ml ampullia kohti), joka sisälsi edellä määritellyn koostumuksen.

VaImi stusesimerkkl 11

Esimerkin 3 <E) mukainen yhdiste 0,4 g

Polyetyleeniglykoli 1000 30 g

Polvetyleeniglykoli 6000 50 g

Puhdistettu vesi 20 g

Valmistettiin peräpuikkoja, joista jokainen painoi 2,5 g, joista jokainen sisälsi edellä määritellyn koostumuksen.

i

Claims (5)

1. 7i 89497
2. 1. Menetelmä kaavan (I) mukaisen farmaseuttisesti käytettävän 21-deoksi-5-fluoriuridiinijohdannaisen valmistamiseksi, O oV *'°T^ OR2 jossa kaavassa: toinen R^rstä ja R2:sta on bentsyyliryhmä, joka voi valinnaisesti sisältää 1, 2 tai 3 substituenttia, joka on valikoitu ryhmästä, joka sisältää Cx-C6-aikyyliryhmän, C^-Cg-alkoksi-ryhmän, halogenoidun Cj-Cj-alkyyliryhmän, halogeeniatomin, hydroksyyliryhmän ja nitroryhmän fenyylirenkaassa, ja toinen käsittää aminohappotähteen, jossa on 2-20 hiiliatomia, tai sen suolan, tunnettu siitä, että annetaan a) oheisen kaavan mukaisen yhdisteen O HnJ"v/F «v ORi jossa kaavassa: toinen R3:sta ja R4:stä on vetyatomi ja toinen on bentsyyliryhmä, joka voi valinnaisesti sisältää 1, 2 tai 3 substituenttia, joka on valittu ryhmästä, joka sisältää C^-Cg-al- 89497 kyyliryhmän, C^-Cg-alkoksiryhmän, halogenoidun C1-C3-alkyyli-ryhmän, halogeeniatomin, hydroksyyliryhmän ja nitroryhmän fenyylirenkaassa, reagoida kaavan A-OH mukaisen aminohapon kanssa, jossa kaavassa A on aminohappotähde, joka sisältää suojaavan ryhmän N-asemassa, tai sen reaktiivinen johdannainen, ja haluttaessa suojaavan ryhmän poistamisen muodostuneesta yhdisteestä, tai b) annetaan oheisen kaavan mukaisen 2'-deoksiuridiinijohdannaisen reagoida O HN-^v'F oV
3. 0 Rt jossa kaavassa toinen R7 ja R8:sta on vetyatomi ja toinen on aminohappotähde, joka sisältää suojaavan ryhmän N-asemassa, reagoida oheisen kaavan mukaisen bentsyyli-imidaatin kanssa ORg i ci3cc=cnh jossa kaavassa R9 on bentsyyliryhmä, joka voi valinnaisesti sisältää 1, 2 tai 3 substituenttia, joka on valikoitu ryhmästä, joka sisältää C^-Cg-alkyyliryhmän, C^-Cg-alkoksiryhmän, halogenoidun C^-C^-aikyyliryhmän, halogeeniatomin, hydr-oksyyliryhmän ja nitroryhmän fenyylirenkaassa, trifluorime-taanisulfonihapon läsnä ollessa ja haluttaessa saatetaan muodostunut yhdiste suolan vaihtoreaktioon.
4. 2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että li 89497 (i) mainitulla aminohappotähteellä on kaava -CO-B-NR10R1:L, jossa B on alempialkyleeniryhmä, jossa mahdollisesti voi olla fenyyli- tai alkyylitioryhmä, ja R10 ja R11 esittävät vetyatomia tai alempaa alkyyliryhmää tai yhdessä typpiatomin kanssa, johon ne ovat kiinnittyneet, ne muodostavat piperi-diinirenkaan, tai (ii) mainittu aminohappotähde on pyrrolidinyylikarbonyyli-tai piperidinyylikarbonyyliryhmä, joissa karbonyyliryhmä ei ole kiinnittynyt heterorenkaan typpiatomiin, tai (iii) mainittu aminohappotähde on seriinin, treoniinin, ar-giniinin, hydroksilysiinin, lysiinin, asparagiinin, aspara-giinihapon, glutamiinin, glutamiinihapon, kystiinin, kyste-iinin, tyrosiinin, tryptofäänin, histidiinin, hydroksipro-liinin, β-alaniinin, O-asetyyliseriinin tai asparagiinihap-ρο-β-bentsyyliesterin tähde.
5. 1. Förfarande för framställning av ett farmaceutiskt an-vändbart derivat av 2'-deoxi-5-fluoruridin med formeln (I) o