DK157553B

DK157553B - Alfa-(2-oxo-2,4,5,6,7,7a-hexahydrothieno(3,2-c)-5-pyridyl)phenyleddikesyrer eller derivater deraf og laegemidler indeholdende disse

Info

Publication number: DK157553B
Application number: DK047186A
Authority: DK
Inventors: Alain Badorc; Daniel Frehel; Jean-Pierre Maffrand; Eric Vallee
Original assignee: Sanofi Sa
Priority date: 1985-01-31
Filing date: 1986-01-30
Publication date: 1990-01-22
Also published as: FI860473A; FI860473A0; PT81946B; HUT40440A; EP0192535A1; PL145159B1; ES550448A0; DK157553C; ES8703881A1; DD242229A5; MA20619A1; DK47186A; HU193625B; FR2576901B1; FR2576901A1; DK47186D0; IL77598A; CA1265517A; YU11986A; OA08196A

Description

i

DK 157553 B

Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte a-(2-oxo~ 2,4,5,6,7,7a-hexahydrothieno(2,3-c)-5-pyri dy1) phenyl eddikesyrer eller derivater deraf og lægemidler indeholdende disse.

5 De omhandlede forbindelser har følgende almene formel: ? · —x Y ί Y^i

λΥ Y

15 hvori Y er hydroxyl eller en OR-gruppe, hvori R er en lineær eller forgrenet Ci~C4-alkylgruppe, en benzyl- eller phenethyl-gruppe eller en dialkylaminoalkylgruppe med formlen: 20 R1 /

- (CH2)n " N

\ R2 25 hvori n betegner et helt tal fra 1 til 4 , og Ri og R2 hver er en C^-C4-alkylgruppe, og hvor X betegner hydrogen, halogen, en Ci~C4-alkylgruppe eller en Cx-C4~alkoxygruppe, eller er additionssalte deraf med farmaceutisk acceptable uorganiske eller 30 organiske syrer eller isomerer deraf eller blandinger deraf.

Forbindelserne med ovenstående formel (I) indeholder mindst to asymmetriske centre og kan foreligge i form af flere isomerer {diastereoisomerer og enantiomerer). Opfindelsen angår hver 35 stereoisomer og blandinger deraf.

Forbindelsen fremstillet ifølge det efterfølgende eksempel 1, hvilken forbindelse har formlen

DK 157553 B

2 %/0CH3 -=τ|·//^ΧχΝX ^ ^ 5 forbindelse nr. 1 og forbindelsen kendt fra beskrivelsen til europæisk patentansøgning nr. 0054442 svarende til dansk patentansøgning nr.

10 5207/81 med formlen — CH2— 1. ClA^-1 forbindelse nr. 2 og endelig forbindelsen kendt fra beskrivelsen til europæisk 20 patentansøgning nr. 0099802 svarende til dansk patentansøgning nr. 3041/83 med formlen °*./0CH3 forbindelse nr. 3 30 er blevet sammenlignet med forbindelsen Ticlopidin, som kendes fra fransk patentskrift nr. 2.215.948, og som har interessante bl odpiadeeegenskåber og antitrombotiske anti-aggregerende egenskaber, hvilken forbindelse har været genstand for talrige undersøgelser (HAEMOSTASIS, bind 13, supplement 1, 1983).

De til sammenligning benyttede forsøgsmetoder er beskrevet sidst i beskrivelsen. Ved visse forsøg blev forsøgsforbindel - 35 3

DK 157 553 B

sen kun administreret en enkelt gang, medens den ved andre forsøg blev administreret tre gange med en dags mellemrum.

Nedenfor er virkningen af forbindelse nr. 1 ifølge den fore-5 liggende opfindelse vist i sammenligning med virkningen af de nævnte kendte forbindelser nr. 2 og nr. 3, medens virkningen af forbindelse nr. 1 og andre af forbindelserne ifølge opfindelsen er vist i sammenligning med virkningen af kontrolforbindelsen Ticlopidin efter udførelseseksemplerne. I tabel 1 er 10 således vist antiaggregationsvi rkni ngen over for AOP {adeno-sin-diphosphat), medens tabel 2 viser antiaggregationsvirk-ningen over for collagen, og tabel 3 viser den antitromboti ske virkning ved spiralmodellen.

15 20 25 30 35

DK 157553B

TABEL 1 4

Forbin- Orale % ikke-aggrege- % inhibe- % s igni- delser doser rede blodplader ring fikans 5 _ i mg/kg____(P)

Kontrol 0 5 ± 1

Forbindel se nr. 1 2,5 (xl)_54 t 12__52__0,001_

Kontrol 0 6 ± 1

Forbindel se nr. 1 5 (xl) 96 ± 2__96__0,001

Kontrol 0 14 ± 2 10 Forbin- 25 (xl) 91 ± 4 90 0,001 delse 12,5 (xl) 80 ± 7 77 0,01 nr. 3__5 (xl) 34 ± 6__23__0,05_

Kontrol 0 16 ± 4

Forbin- 25 (x3) 94 ± 3 93 0,001 delse 12,5 (x3) 84 ± 3 81 0,001 nr. 3__5 (x3) 82 i 5__79__0,001 15 Kontrol 0 14 ± 2

Forbin- 25 (x3) 76 ± 7 72 0,001 delse 12,5 (x3) 55 ± 12 48 0,001 nr. 2 5 (x3)l 16 t 5__2 _ TABEL 2 on -----

Forbin- Orale % ikke-aggrege- % inhibe- % signi- delser doser rede blodplader ring fikans i mg/kg (p) (antal __flange.)____

Kontrol 0 2,48 ± 0,32

Forbindel 25 se nr. 1 5 (xl)_0__100__0,001

Kontrol 0 1,18

Forbi ndel se nr. 1 2,5 (xl) 0,11 ± 0,03__91__0,001_

Kontrol 0 2,62 ± 0,17

Forbindelse 12,5 (Xl) 0,24 ± 0,08 91 0,001 nr. 3 5 (xl) 0,96 ± 0,06__63__0,001_

Kontrol 0 3,12 ± 0,47

Forbin- 25 (x3) 0,14 ± 0,03 96 0,001 delse 12,5 (x3) 0,27 ± 0,04 91 0,05 nr. 3 5 (x3) 0,19 t 0,04__94__0,01_

Kontrol 0 3,6 ± 0,8

Forbin- 25 (x3) 0,4 ± 0,1 89 0,01 delse 12,5 (x3) 0,6 ± 0,2 83 0,01 3 5 1 nr. 2 1 5 (x3)| 2,3 ± 0,6 36 ns_ TABEL 3 5

DK 157553 B

Forbin- Orale % ikke-aggrege- % inhibe- % signi- delser doser rede blodplader ring fikans i mg/kg 5 (antal __gange)____

Kontrol 0 3,44 ± 0,35 forbi ndel se nr. 1 12,5__1,49 t 0.16__57 0,001

Kontrol 0 4.82 ± 0,31

Forbi ndel se nr. 1 25__1,18 ± 0,18__76__0.001

Kontrol 0 4,83 ± 0,36

Forbindelse 25 2,42 ± 0,33 50 0,001 nr. 3 12,5__2,91 ± 0,43__40__0,01_

Kontrol 0 6,38 ± 0,79

Forbin- 25 (x3) 1,13 ± 0,23 82 0,001 del se 15 nr. 3_____

Kontrol 0 4,18 ± 0,26

Forbin- 25 (x3) 2,09 t 0,16 50 0,001 delse 12,5 (x3) 2,48 ± 0,27 41 0,001 nr. 2 15 (x3)| 3,43 t 0,28 18 1 ns_

Disse resultater og resultaterne af forsøgene vist sidst i be- 20 skrivelsen viser, at virkningen af forbindelserne ifølge opfindelsen er meget kraftigere - eller lige så kraftig ved mindre doser - end virkningen af de nærmest beslægtede kendte forbindelser.

25

De omhandlede forbindelser kan fremstilles ved kondensation af 5,6,7,7a-tetrahydro-4H-thieno (3,2-c)pyridon med formlen (II): nh (II) 30 med en a-halogen-phenyleddikesyre med formlen (Illa)

O^OH

CH hal (Illa) 35 j

DK 157553 B

6 eller med et α-halogen-phenylacetat med formlen (mb):

^0R

S

CH _ hal (IHb)

5 /V

x 10 i hvilke formler hal er et halogenatom, fortrinsvis chlor, jod eller brom, og X og OR har de ovenfor definerede værdier, i overensstemmelse med reaktionsskemaet:

1K CH—hal (III) Y

15 nh Vj. I - (I) u D base X 7 20 hvori Y, X og hal har ovennævnte betydning.

Denne kondensation foretages i nærværelse af en svag base, 25 især et alkalimetalhydrogencarbonat, såsom natrium- eller kaliumbicarbonat, i et indifferent opløsningsmiddel, såsom dimethylformamid, tetrahydrofuran eller 1,2-dimethoxyether, ved temperaturer mellem 40°C og opløsningsmidlets kogepunkt.

30 a-halogen-phenyleddikesyrerne (Illa) og de a-halogenerede estere med formlen (Hib) fremstilles ved hjælp af kendte metoder (f.eks. E.L. ELIEL, M.T. FISK og T. PROSSER, Organic Synthesis, Coll. Vol. IV, J. WILEY and Sons Inc., New York, 1963, side 169).

Den hitil ukendte 5,6,7,7a-tetrahydrothieno(3,2-c)-2-pyridon med formlen (II) opnås ved hjælp af en fremgangsmåde omfattende : 35

DK 157553 B

7 a) fiksering af triphenylmethyl (eller trityl) -beskyttelsesgruppen til 4,5,6,7-tetrahydrothieno(3,2-c)-pyridinets nitrogenfunktion til opnåelse af forbindelsen med formlen (IV) : 5 | j *j C (C6H5}3 (IV) 10 b) fiksering af den borholdige gruppe -B(0R’)2 i 2-stillingen til thieno(3,2-c)pyridinsketettet via 1 ithiumderivatet med formlen (V) ifølge reaktionsskemat

>T „ 4 R"Li . --^^N-C (C.HrK

-r N C -' I : 6 5 3

15 I I

(IV) (V) Ί

20 B (OR’)o R'Ox J

R'CT b (VI) hvori R' er lavere alkyl, især n-butyl, og R"Li er alkyllithi-25 um, såsom butyllithium, eller lithiumamid, såsom 1 i thiumdiiso-propylamid, c) oxidation af borsyrederivatet med formlen (VI) til borsyre-derivatet med formlen (VII): 30 [j j C (C6H5}3 (VII)

R'O. J

/B -O

R'O^ S

hvori R' har den ovenfor nævnte betydning, 35 8

DK 157553 B

d) øjeblikkelig hydrolysering af forbindelsen med formlen (VII) til det tritylerede derivat med formlen (VIII): N C (Cz-Ht-)o (vin)

5 [ b b J

0 ^ S

10 idet denne forbindelse kan foreligge i den hydroxylerede tau-tomere form ifølge den tautomere ligevægt: f===r'/V^N —C (C6H5)3 -“C (C6H5)3

I J . l IJ

15 (f\s HO

e) selektiv fraspaltning af tri tylgruppen ved styret syrehydrolyse til opnåelse af 5,6,7,7a-tetrahydro-4H-thieno(3,2-c)- 20 2-pyridonen med formlen (II). Denne forbindelse med formlen (II) kan også eksistere i den tautomere hydroxylerede form: m _

U s HO S

De tre trin b), c) og d) udføres i samme reaktionsbeholder uden isolation af mellemprodukterne med formlerne (V), (VI) og (VII).

30

Det tritylerede derivat (IV) fremstilles ved kondensation af triphenylmethyl (trityl)-chlorid med 4,5,6,7-tetrahydro-thieno (3,2-c) pyridin i nærværelse af en organisk base som protonacceptor, især triethylamin, i et indifferent opløs-35 ningsmiddel, såsom dichlormethan, chloroform, tetrahydrofu-ran, 1,2-dimethoxyethan og dimethylformamid. Denne kondensation udføres fortrinsvis ved omgivelsernes temperatur (20°C).

DK 157553 B

s

Lithiumering af den tritylerede forbindelse med formlen (IV) med alkyllithium R"Li, såsom butyllithium,eller lithiumamid, såsom lithiumdiisopropylamid, fører til det lithiumerede derivat med formlen (V). Denne metalering foretages fortrins-5 vis mellem 0°C og 20°C i et indifferent opløsningsmiddel, såsom hexan eller tetrahydrofuran.

I den samme reaktionsbeholder kondenseres dette lithiumerede derivat (V) med et alkylborat B(0R')3, hvori R' er lavere al-10 kyl, især n-butyl, ved temperaturer mellem -20°C og -40°C, til opnåelse af borderivatet med formlen (VI). I den samme reaktor tilsættes en vandig 30% opløsning af hydrogenperoxid til oxidation af borderivatet med formlen (VI) til boratet med formlen (VII), som øjeblikkelig hydrolyseres i reaktionsmediet til 15 opnåelse af det tritylerede derivat med formlen (VIII).

Den styrede syrehydrolyse af det tritylerede derivat med formlen (VIII) under anvendelse af 98% myresyre, trifluoreddike- syre eller en opløsning af hydrogenchloridgas i ethylacetat 20 ved,ikonceitrationer mellem 2 og 5 mol pr. liter ved temperatu rer mellem 40°C og tilbagesvalingstemperaturen for reaktionsmediet muliggør selektiv fraspaltning af tritylbeskyttelses-gruppen uden spaltning af thiophenringen, hvilket resulterer i forbindelsen med formlen (II).

25 I en anden modifikation kan estrene med formlen (I), hvori Y er en alkoxygrupe OR (R er som ovenfor defineret) opnås ud fra syren med formlen (I), hvori Y er hydroxylgruppen OH.

30 Hvis det ikke er fuldt ud muligt at opnå alle estrene med formlen (I), hvori Y er en alkoxygruppe OR (R er som ovenfor defineret) ved hjælp af reaktionen mellem forbindelserne med formlen (II) og (111b), foretrækkes det ud fra et økonomisk synspunkt at fremstille visse af dem ud fra syren med formlen 35 (I), hvori Y er hydroxy 1 gruppen OH, og den tilsvarende alkohol R OH i nærværelse af hydrogenchloridgas eller thionylchlorid ved hjælp af kendte metoder i overensstemmelse med reaktionsskemaet :

DK 157553 B

to

°χ /OB

rWr\ o^\ v J-2-25—> S Χ-'^^-ΈΟΙ gas eller 5 X S0Clo ® 0 2

^ OR

to hvori X og R har ovennævnte betydning

Visse estere med formlen (I), hvor Y er en alkoxygruppe OR (R er som ovenfor defineret), kan fremstilles ved omsætning af 15 syren med formlen (I), hvori γ er hydroxygruppen OH, efter aktivering, med alkoholen R OH.

Aktiveringen af syren med formlen (I), hvori Y er hydroxyl-gruppen OH, kan opnås ved behandling med et lavere alkylchlor-20 formiat, især ethylchlorformiat eller isobutylchlorformiat, i nærværelse af et ringe overskud af triethylamin ved temperaturer mellem -5°C og -10°C i et indifferent opløsningsmiddel, såsom chloroform, dichlormethan, 1,2-dimethoxyethan eller tetrahydrofuran. Et blandet anhydrid med formlen (XI) dannes: 25 Οχ /0 NC - O - alk - —j n, ji ; (xi) 30 oA.A^

b X

(alk kan være ethyl, men især isobutyl), hvis behandling in situ med et ringe overskud af alkoholen R OH ved temperaturer 35 mellem 10°C og stuetemperatur resulterer i estrene med formlen (I) i overensstemmelse med reaktionsskemaet: 11.

DK 157553 B

V0H

Base Cl “ C * 0 ” slk

II

0 Ψ e^cya-c-o-tik (IX) =-~yVå

A.A/1 sA

X

0 , OR

'»C7

/s. J

0 NX /O' •χ 12

DK 157553 B

Ifølge en anden modifikation kan syren med formlen (I), hvori Y er hydroxylgruppen OH, opnås ved selektiv hydrolyse af estre-ne med formlen (I), hvori Y er en alkoxygruppe OR (JR er som ovenfor defineret), i overensstemmelse med reaktionsskemaet: 5 '=====//,/ΧΧχΝ selektiv hydrolyse (A./'sJ kk *

10 x X

0 OH ^ C

15 O^N ^XX

X

Især foretages hydrolysen af tert.-butylesteren med formlen 20 (I) (R = tert.-butyl) i et surt medium, såsom trifluoreddike- syre eller 98% myresyre ved temperaturer mellem 5°C og reaktionsmediets kogepunkt.

De farmakologiske og toksikologiske resultater, der er omtalt 25 nedenfor, viser egenskaberne hos derivaterne ifølge opfindel sen, både med hensyn til toksicitet og tolerans og med hensyn til deres virkninger, især inhibering af blodpladeaggregation og antitrombotisk aggregation.

30 Opfindelsen angår også et lægemiddel, der især har inhiberende virkninger på blodepladeaggregation og antitrombotisk aggregation, hvilket lægemiddel er ejendommeligt ved, at det som aktivt stof indeholder et derivat med formlen (I) eller et additionssalt deraf med en farmaceutisk acceptabel uorganisk eller 35 organisk syre.

Lægemidlet ifølge opfindelsen kan til oral administration foreligge i form af tabletter, dragéer, kapsler, dråber, gra-

DK 157553B

13 nulater eller sirup. Det kan også til rektal administration foreligge i form af suppositorier og til parenteral administration i form af en injicerbar opløsning.

5 Hver enhedsdosis indeholder fordelagtigt fra 0,005 g til 0,250 g af et derivat ifølge opfindelsen, og de dagligt administrerbare doser kan variere fra 0,005 g til 1,00 g aktivt stof i overensstemmelse med patientens alder og alvorligheden af den lidelse, der behandles.

10

Som følge af dets inhiberende egenskaber med hensyn til blod-pladeaggregation samt antitrombotiske aggregation er lægemidlet ifølge opfindelsen egnet til forebyggelse og behandling af forstyrrelser, der forårsager patologiske modifikationer 15 af blodpladeaggregation, såsom trombo-emboliske forstyrrelser.

De efterfølgende eksempler illustrerer nærmere opfindelsen.

Eksempel 1 20 5-triphenylmethyl-4i5i6i7-tetrahydrothieno{3i2-c2pyridin_^iy2

Til en opløsning af 100 g (0,718 mol) 4,5,6,7-tetrahydrothi-eno-(3,2-c)-pyridin i 200 ml dichlormethan sættes 80 ml (0,789 mol) triethylamin og derpå dråbevis 200,2 g (0,718 mol) tri-25 phenylmethylchlorid ved omgivelsernes temperatur. Reaktionsmediet lades henstå natten over ved omgivelsernes temperatur. Reaktionsmediet udhældes derpå i 2000 ml vand. Den organiske fase dekanteres fra, tørres over natriumsulfat og inddampes til tørhed. Resten renses ved filtrering på et silicalag 30 (eluering med dichlormethan). Hvide krystaller med smelte- Λ punkt = 95°C (pasta), udbytte: 96%, RMN, H (i ppm) (CDCl3): 7,57-6,90 (m, 15H); 6,80 (c, J = 6,5 Hz, lH); 6,43 (d, J = 6,5 Hz, IH); 3,35 (s, 14), 3,00-2,33 (m, 4H).

35 14

DK 157553 B

5-triphenylmethyl-5,6,1,7a-tetrahydro-4H-thieno(3,2-c)-2-py-ridon (VIII).

Til en opløsning af 27 g (0,0707 mol) 5-triphenylmethyl-4,-5 5,6,7-tetrahydrothieno-(3,2-c)-pyridin (IV) i 300 ml tetra- hydrofuran sættes dråbevis ved 0°C 5,31 ml butyllithium (1,6M opløsning i hexan) (0,085 mol). Der omrøres i 15 minutter ved omgivelsernes temperatur og køles derpå til -20°C, hvorpå der ved denne temperatur dråbevis tilsættes 23 ml (0,085 mol) tri-n-butylborat opløst i 50 ml tetrahydrofuran. Der omrøres i 1 time ved 10°C. Efter køling af reaktionsmediet til -40°C tilsættes dråbevis 20,1 ml (0,177 mol) 30 volu-men% hydrogenperoxid. Man lader blandingen vende tilbage til stuetemperatur og omrører ved denne temperatur i 1 time.

I5 Vand sættes til reaktionsmediet, og det ekstraheres med di- chlormethan. Den organiske ekstraktionsfase vaskes med vand og tørres over natriumsulfat. Afdampning af opløsningsmidlet til tørhed efterlader en rest, som krystalliseres i di-isopropylether.

20

Beige krystaller med smeltepunkt = 210°C (dekomponering), udbytte: 64%..

IR (KBr);Vc _ : 1675 cirf1 25 RMN (i ppm) (CDC13); 7,48-6,96 (m, 15H); 6,02 (s, IH); 4,08 (m, IH); 3,78-1,43 (m, 6H).

30 5,6,7,7a-tetrahydro-4H-thieno(3,2-c)-2-pyridon (II) 56,9 g (0,143 mol) 5-triphenylmethyl-5,6,7,7a-tetrahydro-4H-thieno-(3,2-c)-2-pyridon (VIII) opvarmes til 90°C i 1 time i 350 ml 98% myresyre. Efter køling tilsættes et over-35 skud af en mættet opløsning af hydrogenchloridgas i diethyl- ether, og reaktionsmediet inddampes til 100 ml. Derpå tilsættes 1000 ml diethylether, og de opnåede krystaller filtre 15

DK 157553 B

res fra og vaskes med diethylether. De opnåede krystaller genopløses i vand, og den vandige opløsning frysetørres efter behandling med dyrekul og filtrering på et »celite®"-lag.

De således opnåede krystaller vaskes i rækkefølge med ace-5 tone og derpå med diethylether samt tørres.

Flødefarvede krystaller, smeltepunkt = 210°C (dekomponering), udbytte: 81%, RMN 1H i ppm (DMSO-dg): 6,47 (s, 1H ); 4,97-4,58 (m, IH); 4,46-3,83 (2d,2H).

10

Methyl-g-(2-oxo-2,4,5,6,7,7a-hexahydrothieno(3,2-c)-5-pyri- dylM2-chlorphenyl)-acetat (I: Y = OCH^; X = 2-Cl) (derivat nr. 1).

Til en opløsning af 10 g (0,052 mol) 5,6,7,7a-tetrahydro-4H-thieno(3,2-c)-2-pyridonhydrochlorid (II) i 100 ml dimethyl-formamid sættes 10,43 g (0,104 mol) kaliumbicarbonat og 7,82 20 g (0,052 mol) natriumjodid samt derpå 11,65 g (0,0532 mol) methyl-a-chlor-(2-chlorphenyl)-acetat (III: Y = OCH^; X = 2-Cl; hal = Cl). Reaktionsmediet opvarmes til 60°C i 90 minutter. Efter køling udhældes reaktionsmediet i 600 ml vand. Det ekstraheres med ethylacetat, og den organiske ekstrakt 25 vaskes med vand. Den organiske fase tørres over natriumsul fat. Afdampning af opløsningsmidlet efterlader en rest, som renses ved filtrering på et silicalag (eluering med ethylacetat). Det opnåede olieagtige produkt omdannes til hydro- chloridet med henblik på eventuel rensning.

30

Hydrochlorid, hvide krystaller, smeltepunkt = 130°C (dekom-ponering) \ udbytte: 58% IR (KBr);Vc_0 (ester): 1745 cm S c _ (thiolacton) : 1680 35 cm-1 RMN 1H i ppm (DMSO-dg): 7,43 (m, 4H); 6,27 (s, IH); 5,33 og 5,25 (s, lH, 2-diastereoisomerer); 4,77-4,38 (m, IH); 3,67 (s, 3H).

16

DK 15 7 5 5 3 B

Eksempel 2

Methyl-α-(οχο-2,3,5/6,7,7a-hexahydrothieno (3,2-c) -5-pyridyl) -phenylacetat (I ; Y = OCH^; X = H) 5 (derivat nr. 2).

Denne forbindelse fremstilles ved hjælp af den i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde ved alkylering af 5,6,7,7a-tetrahy-dro-4H-thieno(3,2-c)-2-pyridonen (II) med methyl-°<-chlorphenyl-10 acetat (III: Y = OCH3? X = H; hal = Cl).

Hydrobromid, hvide krystaller med smeltepunkt = 205°C (de-komponering), udbytte 86% IR (KBr) : v c = 0 (este^: 1745 cm >) c ___ (thiolacton): 1695 cm 15 RMN 1H i ppm (DMZO-dg): 7,60 (m, 5H); 6,57 (s, IH); 5,83 (s, IH); 3,77 (s, 3H).

Eksempel 3 20 Methyl-g-(2-oxo—~2,4,5,6,7,7a-hexahydrothieno(3,2-c)-5-pyri dyl- (2-fluorphenyl)-acetat (I : Y = OCH3; X = 2-F), derivat nr. 3.

Denne forbindelse fremstilles ved hjælp af den i eksempel 25 1 beskrevne fremgangsmåde ved alkylering af 5,6,7,7a-tetra- hydro-4H-thieno(3,2-c)-2-pyridon (II) med methyl-a-chlor-(2-fluorphenyl)-acetat (III: Y = OCH3; X = 2-F; hal =

Cl).

Hydrobromid, hvide krystaller med smeltepunkt = 213°C, ud-30 bytte: 70% IR (KBr):v? (ester): 1745 cm (thiolacton): c — o c = o 1690 cm RMN 1H i ppm (DMSO-d6): 7,48 (m, 4H); 6,43 (s, IH); 5,60 (s, IH); 4,83-3,87 (m, 3H); 3,72 (s, 3H).

35 17

DK 157553 B

Eksempel 4

Ethyl-g-(2-oxo-2,4,5,6,7,7a-hexahydrothieno(3,2-c) -5-pyri-dyl) (2-chlorphenyl)-acetat 5 (I : Y = (X^H^; X = 2-Cl), derivat nr. 4.

Denne forbindelse fremstilledes ved hjælp af den i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde ved alkylering af 5,6,7,7a-tetra-hydro-4H-thieno(3,2-c)-2-pyridon (II) med ethyl-a-chlor (2-10 chlorphenyl)-acetat (III: Y = (X^H,.; X = 2-Cl; hal = Cl)

Hydrobromid, hvide krystaller med smeltepunkt 200 C, udbytte: 64% IR (KBr):V _ (ester): 1755 cm S'V _ (thiolacton) :

1 C O CO

1690 cm 15 RMN 1H i ppm (DMSO-d6): 7,52 (m, 4H); 6,53 (s, lH); 5,78 (s, IH); 4,30 (m, 2H); 1,18 (t,J = 7Hz, 3H).

Eksempel 5 20 Ethyl-g-(2-oxo-2,4,5,6,7,7a-hexahydrothieno(3,2-c)-5-pyri- dylHfe-methylphenyl)-acetat (I : Y = (X^H^; X = 2-CHg), derivat nr. 5.

Denne forbindelse fremstilles ved hjælp af den i eksempel 25 1 beskrevne fremgangsmåde ved alkylering af 5,6,7,7a-tetra- hydro-4H-thieno(3,2-c)-2-pyridon (II) med ethyl-g-chlor(2-methylphenyl)-acetat (III: Y = CX^Ht-; X = hal = Cl)

Hydrobromid, hvide krystaller med smeltepunkt = 222 C (dekomponer ing) , udbytte: 79% S® IR (KBr) =V _ (ester): 1745 cm _ (thiolacton):

η C O CO

1685 cm , RMN H i ppm (DMSO-d6): 7,38 (m, 4H); 6,60 (s, IH); 5,60 (s, IH); 4,23 (m, 2H); 2,53 (s, 3H); 1,13 (t,J = 7Hz, 3H).

35 Eksempel 6

Isopropyl-g-(2-oxo-2,4,5,6,7,7a-hexahydrothieno(3,2-c)-5-py-ridyl) (2-chlorphenyl)-acetat.

(I : Y = OCH (CH^^i x = 2-Cl), derivat nr. 6.

18

DK 157553 B

Denne forbindelse fremstilledes ved hjælp af den i eksempel 1 beskrevne metode ved alkylering af 5,6,7,7a-tetrahydro-4H-thieno(3,2-c)-2-pyridon (II) med isopropyl-a-chlor (2-chlor-phenyl)acetat (III: Y = OCH(CH3)2, X = 2-Cl; hal = Cl) 5 Hemisulfat, beige krystaller med smeltepunkt = 110°C, udbytte: 69% IR (KBr):^ _ (ester): 1750 cm S _ (thiolacton) :

η C O C - O

1690 cm x RMN XH i ppm (DMSO-d6): 7,50 (m, 4H); 6,36 og 6,28 (s, 1H,2 diatereoisomerer); 5,36 og 5,28 (s, 1H,2 diastereoisomerer, 1,33-0,87 (m, 6H).

Eksempel η 15

Tert.-butyl-a-(2-oxo-2,4,4,5,7,7a-hexahydrothieono(3,2-c)- 5-pyridyl)-2-chlorphenyl-acetat (I : Y = OCiCH^)^; X = 2-Cl), derivat nr. 7.

Denne forbindelse fremstilles ved· hjælp af den i eksempel 20 1 beskrevne metode ved alkylering af 5,6,7,7a-tetrahydro-4H-thieno(3,2-c)-2-pyridon (II) med tert.-butyl-a-chlor (2-chlor-phenyl)-acetat.

(Ill: Y = OC(CH3)3; X = 2-Cl? hal = Cl)

Base, olie, udbytte: 69%.

25 IR (film):>3 c = 0 (ester): 1740 cm"1? = 0 (thiolacton): 1690 cm 1 RMN 1H i ppm (DMSO-d6); 7,36 (m, 4H); 6,02 (s, IH); 4,63 (s, IH)? 4,76-4,13 (m, IH)? 1,40 (m, 9H).

30

Eksempel 8 α-(2-OXO-2,4,5,6,7,7a-hexahydrothieno(3,2-c)-5-pyridyl)(2- chlorphenyl)-eddikesyre (I : Y = OH; X = 2-Cl), derivat nr.

10.

35 19

DK 157553 B

a) Direkte alkylering af 5,6,7,7a-tetrahydro-4H-thieno(3,2-c)-2-pyridon (II)

Til en opløsning af 1 g (0,00522 mol) 5,6,7,7a-tetrahydro-4H-thieno(3,2-c)-2-pyridon (II) i 15 ml tørt dimethylform-5 amid sættes 1,09 g (0,011 mol) kaliumbicarbonat og 0,8 g (0,0052 mol) natriumjodid samt 1,07 g (0,00522 mol) a-chlor-(2-chlorphenyl)-eddikesyre (III: R1 = OH; X = 2-C1; hal = Cl), og temperaturen bringes op på 60°C i 2,5 time. Reaktionsmediet udhældes i et overskud af IN saltsyre. Præcipitatet 1 0 filtreres fra, vaskes med vand og derpå med acetone og diethyl-ether. De opnåede beige krystaller tørres i en ovn.

Udbytte: 60%.

b) Selektiv hydrolyse af esteren 15

En opløsning af 9 g (0,024 mol) tert.-butyl-a-(2-oxo-2,4,5,-6,7,7a-hexahydrothieno(3,2-c)-5-pyridyl-(2-chlorphenyl)-acetat (I : Y = OC(CH3)3; X = 2-C1) i 50 ml trifluoreddikesyre omrøres ved omgivelsernes temperatur natten over. Den ind- 2 0 dampes til tørhed, og resten krystalliseres i diisopropyl-ether. De beige krystaller (smeltepunkt ca. 100°C, pasta-agtigt smeltende) opløses i 100 ml 2N saltsyre. Der sker opløsning og derpå genudfældning. Krystallerne drænes, vaskes med vand og tørres.

25 o

Beige krystaller med smeltepunkt = 210 C, udbytte 80%.

IR (KBr):V (syre): 1725 cm v> (thiolacton) : 1690 ^ c = o J c = o cm RMN ^H i ppm (CF3 COOD); 7,52 (m, 4H); 6,53 (s, IH); 580 (s, IH).

30

Eksempel 9 2-phenylethyl·-a-(2-oxo-2,4,5,6,7,7a-hexahydrothieno(3,2-c)-5-py-ridyl)-2-chlorphenylacetat 35 (I : Y = OCH2 CH2C6H5; X = 2-C1).

20

DK 157553 B

Denne forbindelse fremstilles ved hjælp af den i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde ved alkylering af 5,6,7,7a-tetra-hydro-4H-thieno(3,2-c)-2-pyridon (II) med 2-phenylethyl-g-chlor-(2-chlorphenyl)-acetat (III: Y = OCH2CH2C6H5; X = 2-Cl; 5 hal = Cl).

Hydrochlorid, beige krystaller med smeltepunkt = 175°C (acetone); udbytte 71%.

IR (KBr):Vc _ Q (ester: 1755 cm _ (thiolacton): 1690 cm”1.

RMN 1H i ppm (DMS0-d6); 7,80-6,83 (m, 9H, aromatisk); 6,28 (s, IH); 5,46 og 5,28 (s, IH, 2 diastereoisomerer).

Eksempel 1.0 15 Ethyl-g-(2-oxo-2,4,5,6,7,7a-hexahydrothieno-(3,2-c)-5-pyri- dyl)-(4-methoxyphenyl)-acetat (I : = OC2H5; X = 4-OCH3)

Denne forbindelse fremstilles ved hjælp af den i eksempel 20 1 beskrevne fremgangsmåde ved alkylering af 5,6,7,7a-tetra- hydro-4H-thieno-(3,2-c)-2-pyridon (II) med ethyl-g-chlor- (4-methoxyphenyl)-acetat (III: Y = 02H^; ^ = hal =

Cl)

Hydrochlorid, hvide krystaller med smeltepunkt = 140°C; ud-25 bytte: 91%.

IR (KBr): v (ester): 1715 cm”1;^ __ (thiolacton): c = o c — o 1690 cm RMN 1H i ppm (DMS0-d6): 7,65 (m, 4H); 6,53 og 6,61 (s, IH, 2 diastereoisomerer); 5,73 og 5,63 (s, IH, 2 diastereoisomerer): 30 3,80 (s, 3H).

Eksempel 11 [2-(N,N-diethylamino)-ethyl 3-g-(2-oxo-2,4,5,6,7,7a-hexahydro-35 thieno-(3,2-c)-5-pyridylH 2-chlorphenyl)-acetat (I: Y = OCH2CH2N(C2H5)2; X = 2-Cl).

21

DK 157553 B

Denne forbindelse fremstilles ved hjælp af den i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde ved alkylering af 5,6,7,7a-tetra-hydro-4H-thieno- ( 3,2-c )-2-pyridon (II) med 2-N,N-diethylaminoethyl-• α-chlor-(2-chlorphenyl)-acetat (III: Y = OCH2CH2N(C2H^ 5 X = 2-C1; hal = Cl)

Oxalat, beige krystaller med smeltepunkt = 130°C; udbytte: 61%.

IR (KBr):^c _ o (ester): 1745 cm S _ Q (thiolacton): 1685 cm ^ 10 RMN ·*Ή i ppm (DMSO-d6): 7,64 - 7,25 (m, 4H); 6,23 (s, IH); 4,94 (s, IH).

Toksikologisk undersøgelse..

15 Forbindelserne ifølge opfindelsen udmærker sig ved fortrin lig tolerans og lav toksicitet.

Endvidere har forsøg udført vedrørende akut, kronisk, sub-kronisk og forsinket toksicitet i forskellige dyrearter ikke 20 muliggjort påvisning af nogen lokal eller generel reaktion, forstyrrelse eller anomali ved de biokemiske, makroskopiske eller mikroskopiske undersøgelser, der blev udført under disse forsøg.

25

Farmakologisk undersøgelse.

Denne undersøgelse, som blev udført til sammenligning med den mest repræsentative forbindelse omhandlet i ovennævnte franske patentskrift, Ticlopidin, har vist de inhiberende blod-30 pladeaggregationsvirkninger og antitrombotiske aggregations virkninger af derivaterne ifølge opfindelsen.

1) Inhiberende virkning på blodpladeaggregation 35 Disse forsøg blev udført med rotter, der oralt blev indgivet X mg af forbindelserne ifølge opfindelsen på tidspunktet -2h.

På tidspunktet Oh blev 4 ml blod udtaget ved hjælp af Renaud- 22

DK 157553 B

metoden fra det bedøvede dyrs halsvene. Det er det citratbehandlede blod, som benyttes til aggregationsmålingerne.

a) Måling af blodpladeagqregationen med A.D.P.

5 2 ml citratbehandlet blod udhældes hurtigt i et lille bægerglas, der er placeret på en magnetisk omrører og forsynet med en magnetisk stang. Efter nogle sekunders omrøring indføres der i bægerglasset 0,4 ml af en opløsning indeholdende 0,6 g adenosin-diphosphat (A.D.P.) pr. ml. Efter 90 sekunders omrøring fremstilledes 2 blodprøver på 0,5 ml: - den første blandes med 0,5 ml af en EDTA-formaldehydopiøsning, - den anden blandes med 0,5 ml af en opløsning af EDTA alene.

15 EDTA-formaldehydtilsætningen sker med henblik på stabilisering af blodet og således fiksering af aggregationen, medens EDTA derimod forårsager deaggregation af alle blodpladeansamlin-gerne.

20 Efter henstand i 10 minutter og centrifugering af de to blan dinger ved langsom hastighed i 5 minutter med henblik på separering af de røde blodceller fjernes det blodpladerige plasma (PRP) som ovenpå liggende væske, som fortyndes og tælles for blodplader.

25

Aggregationsintensiteten bestemmes ved forholdet an^- k^Pi!"|er 100 = procentdel af ikke- antal blodplader i EDTA aggregerede blodplader.

30

Forsøgsproduktet er des mere blodpladeaggreationsinhiberende, jo mere forholdet nærmer sig 100.

b) Måling af blodpladeagqregationen med collagen 35 1,5 ml citratbehandlet blod tilsættes 0,10 ml af en opløsning indeholdende 10 g collagen pr. ml. Mediet holdes under om-

V DK 157553B

23 røring, medens tællingen af blodpladerne udføres uden afbrydelse.

Reduktionen af antallet af frie blodplader som funktion af 5 tiden følges kontinuerligt og gør det muligt at optegne en graf, hvis hældning angiver den indledningsvise aggregationshastighed.

De mest signifikante resultater er samlet i den følgende tabel.

10 2) Antitrombotisk virkning

Denne virkning blev undersøgt ved hjælp af den venøse spiral-trombosemetode.

15

Denne består i en tilpasning af fremgangsmåden ifølge TRIEDMAN og medarbejdere (Mt. J. Physiol., 1060, 199, 770-774). En efterpoleret metalspiral (et pastafyideapparat, der benyttes af tandlæger) indføres i en rottes vena cava inferior, hvilken rotte 2 timer forinden 2° oralt blev behandlet med forsøgsforbindelsen suspenderet i 10 ml/kg af en 5% vandig gummiarabicumopløsning.

Fem timer senere blev denne spiral udtaget tilligemed den trombe, som den fastholder, hvorpå den blev tørret omhygge-25 ligt ved succesiv dubning på filtrerpapir samt vejet. Spi ralen befris derefter for tromben, tørres og vejes atter.

På denne måde opnås ved hjælp af forskellen trombens middelvægt.

30 35 24

DK 157553 B

De mest signifikante resultater er samlet i den følgende tabel. 5

Antiaggregationsvirkning med hensyn til ADP

Porbin- Orale % ikke-aggrege- % inhibe- % signi- delser doser de blodplader ring fikans 10___i mg/kg____

Kontrol 5 + i derivat 2,5 54 7 12 52 0,001 nr. 1 —

Kontrol 5 + 1 15 derivat 5,0 96 + 2 95 0,001 nr. 1 ~

Kontrol 3+0 derivat 5,0 47 7 12 nr. 2 - “ 45 0,05

Kontrol 3+0 derivat 5,0 83+2 82 0,001 nr. 3 -

Kontrol 5+1 derivat 5,0 49+18 nr. 4 46 0,05 25-----

Kontrol 5 + 1 derivat 5,0 70 7 17 68 0,05 nr. 5 ~

Kontrol 8 + 1

Ticlopi- 300 g 10+1 2 ns 30 Tf__[____

Kontrol 16+4

Ticlopi- 100,0 x 60 T 7 din 3 dage — 52 0,001 I___ 35 \

DK 157553B

25

Antiaggregationsvirkning med hensyn til collagen 5 Forbin- Orale Aggregations- % inhibering signifi- delser doser tilbøjelighed kans (p) __i mq/kq____'__

Kontrol 1,18 + 0,11 derivat 2,5 0,11 + 0,03 91 0,001 nr. 1 10 Kontrol 2,48 + 0,32 derivat 5,0 0 100 0,001 nr. 1

Kontrol 1,71 + 0,52 derivat 5,0 0,15 + 0,10 91 0,01 nr. 2 15________

Kontrol 1,71 + 0,52 derivat 5,0 0,08 + 0,04 95 0,01 nr. 3

Kontrol 1,94 + 0,16 derivat 5,0 0,65+0,24 66 0,01 20 nr. 4

Kontrol 10,3 + 1,17

Ticlopi- 300,0 7,94 + 1,33 23 ns din

Kontrol 100,0 5,1 +0,2

Ticlopi- x 3 2,2 + 0,2 58 0,01 din dage 30 35 26

DK 157553 B

Antitrombotisk virkning ved spiralmodel 5

Forbin- Orale Vægt af trombe % inhibering signifi-delser doser i i mg kans (p) __mg/kg____

Kontrol derivat 3,44 + 0,35 nr. 1 12,5 1,49 + 0,18 57 0,021 10

Kontrol 4,82 + 0,31 derivat 25,0 1,18+0,18 78 0,001 nr. 1

Kontrol 5,03 + 0,59 15 derivat 25,0 1,69 + 0,16 66 0,001 nr. 2

Kontrol 3,2 8 + 0,29 derivat 25,0 0,94 + 0,05 71 0,001 nr. 3 20______

Kontrol 5,25 + 1,79 derivat 25,0 1,63 + 0,08 69 0,001 nr. 4

Kontrol 3,90 + 0,40 derivat 25,0 1,65 + 0,14 58 0,001 25 nr. 5

Kontrol 3,90 + 0,40 derivat 25,0 2,63 + 0,20 33 0,01 nr. 6 30 Kontrol 5,52 + 0,37

Ticlopi- 200,0 5,05 + 0,48 9 ns din

Kontrol 200,0 x 4,47+2,03

Ticlopi- 3 dage 2,03+0,25 55 0,001 din \ 35 27

DK 157553 B

De toksikologiske og farmakologiske undersøgelser, der netop er blevet omtalt, har vist den lave toksicitet af forbindelserne ifølge opfindelsen tilligemed deres fortrinlige tole-rans og deres interessante blodpladeaggregationsinhiberende g og antitrombotiske egenskaber, der gør dem meget nyttige til human og veterinær behandling.

Nedenfor anføres eksempler på nogle farmaceutiske sammensæt-ninger af lægemidlet ifølge opfindelsen.

10 1) Tabletter

Derivat nr. 1 0,100 g

Excipiens: majsstivelse, lactose, dicalciumphosphat, magne-15 siumstearat.

2) Dragéer

Derivat nr. 2 0,100 g 20

Excipiens: levilite, kartoffelstivelse, stearinsyre, gummilak, talk, pulverformet gummiarabicum, krystallinsk sukker, carnaubavoks,. orange yellow S.

3) Kapsler 2 5

Derivat nr. 5 0,100 g

Excipiens: magnesiumstearat, *levilite,f, majsstivelse, lactose.

3 0 4) Injicerbar opløsning

Derivat nr. 9 0,075 g

Isotonisk opløsningsmiddel indtil 5 ml.

3 5 5) Suppositorier

Derivat nr. 10 0,100 g

Halvsyntetiske triglycerider, til 1 suppositorium.

Claims

1. Stereoisomere a-(2-oxo-2,4,5f6,7,7a-hexahydrothieno(3,2-c)-5 5-pyridylJphenyleddikesyrer eller derivater deraf, kendetegnet ved, at de har formlen %C/Y 10 0Oo * Q x/ 15 hvori Y er hydroxyl eller en OR-gruppe, hvori R er en lineær eller forgrenet Cj-C4-alkylgruppe, en benzyl- eller phenethyl-gruppe eller en dialkylaminoalkylgruppe med formlen: 20 Ri / - (CH2)n - N \

25 R2 hvori n betegner et helt tal fra 1 til 4 , og R* og R2 hver er en Ci-04-alkylgruppe, og hvor X betegner hydrogen, halogen, en C^-C4-alkylgruppe eller en Ci-C4-alkoxygruppe, eller er addi-30 tionssalte deraf med farmaceutisk acceptable uorganiske eller organiske syrer eller isomerer deraf eller blandinger deraf.

2> Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den er valgt blandt methyl-a-(2-oxo-2,4,5,6,7,7a-hexahy-35 drothieno (3,2-c)-5-pyridyl)-(2-ohlorphenyl)-acetat, methyl-ot- (2-OXO-2,4,5,6,7,7a-hexahydrothieno (3,2-c) -5-pyridyl) -phe-nylacetat, methyl-α-(2-oxo-2,4,5,6,7,7a-hexahydrothieno (3,2-c)-5-pyridyl)-(2-fluorphenyl)-acetat, ethyl-α-(2-oxo-2,4,5,6,7,7a- DK 157553B hexahydrothieno (3,2-)-5-pyridylM2-chlorphenyl)-acetatf ethyl-a-(2-oxo-2,4,5,6,7,7a~hexahydrothieno-(3,2-c)-5-pyridyl)—(2-methylphenyl)-acetat, isopropyl-cc-(2,oxo-2,4,5,6,7,7a-hexa-g hydrothieno (3,2-c)-5-pyridyl)-(2-chlorphenyl)-acetat, tert.- butyl-a-(2-oxo-2,4,5,6,7,7a-hexahydrothieno (3,2-c)-5-pyridyl) (2-chlorphenyl)-acetat '0g a-(2-oxo-2,4,5,6,7,7a- hexahydrothieno (3,2-c)-5-pyridyl)-(2-chlorphenyl)-eddikesyre. 10

3. Lægemiddel, der især har inhiberende virkning på blod- pladeaggregation samt antitrombotisk aggregation, kendetegnet ved, at det som aktivt stof indeholder et derivat med formlen (I) ifølge krav 1 eller et additionssalt deraf med en farmaceutisk acceptabel uorganisk eller organisk 15 syre eller en af isomererne deraf eller en blanding deraf.

4. Lægemiddel ifølge krav 3, kendetegnet ved, at det foreligger i en form, der er egnet til oral, parenteral eller rektal administration. 20

5·. Lægemiddel ifølge krav 3 eller 4} kendeteg-* net ved, at det foreligger i form af enhedsdoser indeholdende 0,005 g til 0,250 g aktivt stof sammen med en farmaceutisk acceptabel bærer. 25 30 35