DK151932B - Fremgangsmaade til fremstilling af et blodstoerkningsfremmende praeparat af menneskeligt blodplasma - Google Patents
Fremgangsmaade til fremstilling af et blodstoerkningsfremmende praeparat af menneskeligt blodplasma Download PDFInfo
- Publication number
- DK151932B DK151932B DK384577AA DK384577A DK151932B DK 151932 B DK151932 B DK 151932B DK 384577A A DK384577A A DK 384577AA DK 384577 A DK384577 A DK 384577A DK 151932 B DK151932 B DK 151932B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- feiba
- factor
- plasma
- activity
- vii
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
- Y10S530/829—Blood
- Y10S530/83—Plasma; serum
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S930/00—Peptide or protein sequence
- Y10S930/01—Peptide or protein sequence
- Y10S930/28—Bound to a nonpeptide drug, nonpeptide label, nonpeptide carrier, or a nonpeptide resin
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- External Artificial Organs (AREA)
Description
DK 151932 B
Den foreliggende opfindelse angår en fremgangsmåde til fremstilling af et blodstørkningsfremmende farmaceutisk præparat af menneskeligt blodplasma, som indeholder et hidtil ukendt blodstørkningsaktivt stof kaldet faktor-VIII-inhibitor-Bypassing-Activity (FEIBA) sammen med • 5 prothrombinkompleksets faktorer II, VII, IX og X.
Dette stof FEIBA påvirker på ny måde blodstørkningen og bevirker en omgåelse af faktor VIII virkningen, hvilket betyder, at blodstørkningen normaliseres uden tilførsel af faktor VIII. Præparatet er især _ _ _ i · -i i . i n · _ /» i (.' 1 · __J ! j _ ^ wk-l L.·.' i.^·» Π Y7TTT υΛν*1τΛν
2 DK 1S1932 B
teisen "FEIBA" står for "Factor Eight Inhibitor-Bypassing Activity".
Hæmofili A er en længe kendt sygdom (blodsygdom), ved hvilken forløbet af blodstørkningen er forstyrret ved mangel på aktivitet af en blodstørkningsfaktor. Denne faktor betegnes som antihæmofil faktor 5 (AHF) eller faktor VIII. En helbredelse af denne medfødte,af defekte gener betingede sygdom som sådan er ikke mulig. Behandlingen kan, i tilfælde af en blødning, kun ske ved intravenøs tilførsel af tilsvarende mængder af faktor VIII, der stammede fra blod fra sunde dono rer. Medens man tidligere var henvist til fuldblod eller fuldplasma, 10 hvoraf der måtte anvendes store mængder, findes der i dag præparater der indeholder faktor VIII i koncentreret og også stabil frysetørret form. Behandling med disse præparater fører i de fleste tilfælde til en hurtig blodstandsning.
15 Der findes dog også patienter, hos hvilke der ikke blot mangler faktor VIII-aktivitet, men som også har et overfor faktor VIII rettet hæmningsstof (inhibitor), som, alt efter den tilstedeværende mængde, tilintetgør virkningen af tilført faktor VIII ved neutralisation (inhibition). Hos disse faktor VIII-inhibitor-patienter har der hid-20 til været ringe udsigt til en vellykket behandling. Den eneste mulighed bestod i fjernelse af inhibitoren før behandlingen med faktor VIII-koncentrater, hvilket kun er muligt ved plasmaudbytning af patientplasraaet med plasma fra en sund donor eller med plasmaerstatningsmidler. Dette kræver store tekniske og medicinske udgifter.
25 Plasmaombytningen må gentages før behandling på ny, da inhibitoren specielt efter tilførsel af ny faktor VIII gendarmes som antigen i kraft af boostervirkning. En behandling af inhibitorpatienterne med såkaldte "Immunsuppressiva" til undertrykkelse af in vivo syntesen af inhibitoren er hidtil for det meste forløbet resultatløs.
30
For nylig har der aftegnet sig en ny mulighed til behandling af faktor VIII inhibitor-patienter. Kurczynski og Penner, New England Journal Medicin, bind 291, side 164-167, 1974 berettede som de første om en vellykket behandling af faktor VIII-inhibitor-patienter O ir
med såkaldte aktiverede prothrombinkomplekskoncentrater. Også i artikler af Sultan, Brouet og Debre, New England Journal Medicin, bind 291, side 1087, 1974 og Abildgaard, Britton og Roberts, Blood, bind 44, side 933, 1974 berettes om klinisk vellykkede anvendelser af aktiverede prothrombinkomplekspræparater til blødende faktor VIIJ
3
DK 151932 B
inhibitor-patienter.
Den såkaldte aktivering af disse prothrombinkomplekskoncentrater kan sandsynligvis tilskrives ukendte forureninger. Præparaterne kunne ikke afprøves med hensyn til deres aktive princip og kunne ikke standardi-5 seres. Resultaterne er derfor usikre og næppe reproducerbare.
Tysk fremlæggelsesskrift nr. 2.459.291 beskriver en fremgangsmåde til fremstilling af et antihæmofilt, globulinholdigt koncentrat, hvor man ved siden af et faktor VIII-holdigt protein og et prothrombinkompleks 2Q fremstiller en stabil opløsning af serumproteiner. Kolloid kiselsyre anvendes til at befri en supernatant for labile proteiner efter isolering af prothrombinkomplekset for at opnå en stabil opløsning af serumproteiner. Ved denne fremgangsmåde kan der ikke optræde FEIBA, fordi prothrombinkomplekset adsorberes straks til aluminiumhydroxid.
15
Tysk fremlæggelsesskrift nr. 2.262.520 beskriver en fremgangsmåde til fremstilling af et lagerholdbart prothrombinkompleks-koncentrat af humant plasma, hvilken fremgangsmåde består af forskellige adsorptions-og elueringstrin. Udvikling af et stof med FEIBA-aktivitet er ikke 20 nævnt i beskrivelsen, men det er tværtimod anført i spalte 6, afsnit 2, at præparatet er frit for thrombin, den aktiverede form af faktor X, og at koagulationsfaktorerne II, VII, IX og X ikke indeholdes i aktiveret form.
25 Opfindelsen tilsigter at overvinde de beskrevne ulemper og vanskeligheder og har den opgave at tilvejebringe et præparat, som på reproducerbar og målrettet måde sikrer en skabelse af den ønskede faktor VIII-inhibitor-Bypass-aktivitet. Faktor VIII-inhibitor-Bypass-aktiviteten skal være målelig og standardiserbar ved hjælp af et 30 egnet prøvesystem. Præparatet skal være klinisk virksomt og kunne tåles, d.v.s. hos blødende faktor Vlll-inhibitor patienter føre til en blodstandsning og ikke vise nogen uønskede bivirkninger.
Denne opgave løses ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen ved, at men-35 neskeligt citrationholdigt plasma, fra hvilket faktor VIII eventuelt er fjernet, og som indeholder prothrombinkomplekset, i fravær af frie calciumioner behandles med vanduopløselige, uorganiske, størknings-
DK 151932 B
4 fysiologisk overfladeaktive stoffer valgt blandt stoffer, der er sammensat af diatoméjord, siliciumdioxid og aluminiumoxid ved et pH på 5,5 til 8,5 og en temperatur på 0 til 30°C, hvorved det hidtil ukendte stof dannes, hvorefter de vanduopløselige stoffer fra-5 skilles, og den ovenstående væske på i og for sig kendt måde behandles med basiske ionbyttere valgt blandt diethylaminoethylgruppehol-dige højmolekylære stoffer, hvorved stoffet FEIBA adsorberes dertil sammen med faktorerne II, VII, IX og X, hvorpå ionbytteren vaskes med fortyndet saltopløsning og behandles med en saltopløsning med 10 højere koncentration end vaskeopløsningen for at eluere FEIBA og faktorerne II, VII, IX og X, hvorpå ionbytteren vaskes med fortyndet saltopløsning og behandles med en saltopløsning med højere koncentration end vaskeopløsningen for at eluere FEIBA og faktorerne II, VII, IX og X under opnåelse af et aktivitetsforhold mellem faktorerne 15 II, VII, IX, X og FEIBA på 0,1 til 10, fortrinsvis 0,5-2, hvorefter eluatet dialyseres og koncentreres ved frysetørring.
Som udgangsmateriale til fremstillingen af det nye præparat anven-des menneskeligt citratplasma, der indeholder alle størkningsfaktorer i nativ form. Endvidere kan der også anvendes plasmafraktioner, der fremkommer efter fraskillelse af faktor VIII (AHF), f.eks. en ovenstående plasmavæske fra kryoudfældning eller ira udfældning I ifølge Cohn.
25 Hensigtsmæssigt anvendes hertil de vanduopløselige,uorganiske,størkningsfysiologisk, overf ladeaktive stoffer i en mængde på 0,05 til 5$» fortrinsvis 0,1 til 1%, beregnet på mængden af plasmaet.
Til behandling af plasmaet kan anvendes stoffer, der for størstede-3Q len består af findelt siliciumdioxid, f.eks. stoffer fra gruppen diatomejord, såsom Gelit^eller stoffer, der er sammensat af silicium= dioxid og aluminiumoxid, f.eks. kaolin. Generelt er egnede stoffer, der er kendt som "overfladeaktive" i størkningssysternet eller som i kraft af deres overfladeaktivitet er i stand til at indlede blod-35 størkningens kontaktfase. Medens der på disse stoffer adsorberes overfladeaktiverbare størkningsfaktorer (faktor XI og XII) f de-'-' res aktiverede form, forbliyer' faktorerne lif VII, IX,· -χ sam- 5
DK 151932 B
men med det dannede · stof FEIBA i den ovenstående væske, og kan efter fraskillelse af de overfladeaktive, vanduopløselige stoffer fraskilles eller koncentreres under anvendelse af kendte metoder.
Til sidstnævnte trin kan f.eks. anvendes svagt basiske ionbyttere.
5 Diethylaminoethyl (DEAE)-gruppeholdige højmolekulære stoffer f.eks. DEAE bundet til cellulose eller tværbundne dextraner har vist sig særligt egnede. Ved adsorption på de nævnte ionbyttere, vask og eluering af de adsorberede plasmaproteiner med forhøjet ionstyrke kan proteinfraktionen, som indeholder FElBA-aktiviteten i nu renset 10 og beriget form, isoleres. Efter fjernelse af saltene ved dialyse og påfølgende frysetørring får man den rå fraktion indeholdende FEIBA- '· aktiviteten i tør, stabil form. Af denne opstår det færdige præparat ved genopløsning i vand, tilsætning af salte, pH-indstilling, sterilfiltrering og frysetørring igen.
15
Undersøgelser af egenskaberne af de ved· fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede. præparater gav bevis for, at faktorerne Ila (thrombin) og Xa ikke bidrager til FElBA-aktiviteten. Spor af thrombin, som kan være indeholdt i de ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede præparater, giver ingen 20 forkortelse af den aktiverede partielle thromboplastintid af faktor VIII-inhibitorplasma. Heller ikke sojabønne-trypsininhibitor, en kendt inhibitor af faktor Xa-aktivitet, hæmmer præparatets FEIBA-ak-tivitet. På grundlag af gelkromatografiske undersøgelser har det vist sig, at det nye stof har en højere molekylvægt end de kendte 25 faktorer af prothrombinkomplekset II, VII, IX og X. Da endvidere de aktiverede faktorer af prothrombinkomplekset opstår ved enzymatisk fraspaltning af et brudstykke af den tilsvarende native (ikke-aktiverede) størkningsfaktor og der derved opstår mindre molekyler end molekylerne af de tilsvarende ikke-aktiverede faktorer kan det med 30 sikkerhed antages, at FElBA-aktiviteten i de ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede præparater ikke bevirkes af en aktiveret faktor af prothrombinkomplekset, men derimod af det nye udviklede stof med højere molekylvægt.
35
Til kendetegning af det nye stof kan på den ene side anvendes forholdet mellem aktiviteterne af størkningsfaktorerne II, VII, IX og X og FElBA-aktiviteten: · Dette forhold udtrykt i enheder ligger mellem 0,1 og 10, fortrinsvis mellem 0,5 og 2, idet en enhed af faktor
DK 151932 B
6 II-VII-IX-X svarer til aktiviteten af disse faktorer, som gennemsnitligt er indeholdt i 1 ml frisk menneskeligt citratplasma og en FEIBA-enhed defineres som den FEIBA-aktivitet, som forkorter den aktivere-\ de partielle thromboplastintid af en højtiter faktor VIII-inhibitorplasma til halvdelen af den tomme værdi. På den anden side kan der 5 til kendetegning af det nye stof også anvendes dets amidolytiske aktivitet. Ved amidolytisk aktivitet forstår man evnen hos et stof til i standardiserede peptidforbindelser,som via en amidbinding er forbundet med chromoforen p-nitroanilin, at fraspalte p-nitroanilin som bestemmes fotometrisk. Sådanne standardiserede peptidpræparater L0 fremstilles f.eks. af firmaet KABI i Sverige. Således er peptidet S-2160 N-benzoyl-L-phenylalanyl-L-valyl-L-arginin-p-nitroanilid,HC1 (kort form: Bz-Fhe-Val-Arg-p-nitroanilid,HCl) specifik for thrombin, S-2222 N-benzoyl-L-isoleucyl-L-glutamyl-L-glycyl-L-arginyl-p-nitro= anilid,HCl (kort form: Bz-Ile-Glu-Gly-Arg-p-nitroanilid,HC1) for Xa ]_5 og S-2251 D-valyl-0-leucyl-L-lysyl-p-nitroanilid,2HCl (kort form: D-Val-Leu-Lys-p-nitroanilid,2HCl) for plasmin. Hvis man afprøver det ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede præparat overfor de nævnte substrater finder man en negligerbar ringe amidolytisk aktivitet. På den anden side ville en prøve af et præparat med et indhold af 20 thrombin og/eller faktor Xa vise en høj amidolytisk aktivitet, hvis man indstiller det på samme FEIBA-aktivitet som det ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede præparat udviser.
En yderligere ejendommelighed ved præparatet fremstillet ved frem-25 gangsmåden ifølge opfindelsen ligger også i, at det har en ringe thrombinaktivitet om overhovedet nogen. Forholdet mellem thrcmbinaktivitet og FEIBA-aktivitet overstiger ikke 0,02, idet'thrombinaktivitet udtrykkes i NIH-enheder (NIH= US National Institute of. Health) og FEIBA-aktiviteten i FEIBA-enheder.
30 Fremgangsmåden ifølge opfindelsen og egenskaberne af de derved fremstillede præparater er nærmere belyst af følgende eksempler og forsøgsresultater.
Eksempel 1 35
Frisk,frosset plasma optøes ved 0 til +4°C og det derved fremkomne kryobundfald fraskilles ved centrifugering. Kryooverstanden indstil 7
DK 151932 B
les til pH 7,0 med 0,5 n saltsyre og der tilsættes 5 g kaolin pr. liter kryooverstand og omrøres ved +4° C i 1 time. Derefter fraskilles kaolin ved centrifugering. Det dannede stof FEIBA bliver nu sammen med protbrombinkompleksets faktorer adsorberet på DEAE-Se= 5 phadex®·
Til dette formål tilsættes 0,5 g DEAE- sephadex A-50 pr. liter kaolin-overstand og der omrøres en Halv time ved +4°C. DEAE-Sephadex fraskilles. Det ovenstående plasma kan anvendes til udvinding af gamma-10 globulin og albumin. DEAE-Sephadex underkastes en dobbelt vask med en trinatriumcitrat-natriumchloridopløsning, idet der overholdes en pH-værdi på 7,5.
Med henblik på eluering omrøres DEAE-Sephadex med 3% natriumchlorid, 15 0,1% trinatriumcitrat,2H20 (2% af det oprindelige plasmarumfang) i 20 minutter og eluatet udvindes ved filtrering. Dette dialyseres natten over overfor 0,05% trinatriumcitrat^^O, 0,1% natriumchlo= ridopløsning ved pH 7,0 og ved +4°C, fryses derefter og underkastes en første lyofilisering (bulk). I bulk-materialet bestemmes FEIBA-20 aktiviteten samt aktiviteten af protbrombinkompleksets faktorer.
Til fremstilling af det farmaceutisk anvendelige præparat med FEIBA-aktivitet skal forholdet mellem enheder faktor II-VII-IX-X og FEIBA-enheder ligge mellem 0,5 og 2. Dette kan ske ved blanding af egnede 25 bulk-partier. Bulk-materialet opløses med destilleret pyrogenfrit vand, således at FEIBA-aktiviteten. er mellem 10 og 50 FEIBA-enheder pr. ml (i det foreliggende tilfælde 25 FEIBA-enheder pr. ml). Efter tilsætning af de nødvendige salte til fremstilling af isotoni og indstilling af pH-værdien mellem 7,0 og 7,5 klares opløsningen med 30 membranfilter og sterilfiltreres til sidst gennem et 0,2 μιη membranfilter. Opløsningen fyldes under sterile betingelser i 20 ml beholdere, dybfryses og lyofiliseres.
Eksempel 2 35
Som udgangsmateriale tjener igen frisk, frosset plasma eller den deraf fremkomne kryooverstand. Til kryooverstanden sættes uden pH-indstilling (nativ pH-værdi = 7,8) 10 g Celite^512 pr. 1 kryooyer-
DK 151932 B
8 stand og der omrøres i 3 timer ved +4°C. Efter fraskillelse af Ce= litten ved centrifugering foretages oparbejdningen af præparatet med det udviklede stof FEIBA på samme måde som i eksempel 1.
Med de færdige præparater blev der foruden de sædvanlige sikkerheds- 5 prøver med hensyn til sterilitet, uskadelighed, pyrogenfrihed, fravær af HB -antigen(dvs. Hepatitis B-surfac.e antigen) udført som prøver for virkning (FElBA'-aktiv'itet), indhold af prothrombinkompleksfaktorer, thrornbinindhold samt amidolytisk aktivitet med de tre substrater S-2160, S-2222 og S-2251.
10 De foretagne prøver blev udført på følgende måde; 1. Aktivitetsprøve (bestemmelse af FEIBA-enheder).
a) Reagenser:
Faktor VIII-inhibitorplasma: 15 Citratplasma fra en patient med hæmofili A med en inhibitor overfor faktor VIII (inhibitortiter mindst 10 enheder pr. ml), lyofiliseret. Under forsøgsperioden stilles inhibitorplasmaet i isbad.
20 Phospholipid-kaolin-suspension:
Phospholipid-koncentratet (Tachostypta^ Hormon Chemie Miinchen) fortyndes i 1:200 i Owens stødpude og der tilsættes 0,5% kaolin G/V (0,5 g pr. 100 ml). Blandingen lagres dybfrossen. Under for-25 søgsperioden holdes den ved stuetemperatur.
Citrat-/kogsaltopløsning som fortyndingsmiddel for prøver: 0,7% natriumchlorid/0,7% natriumcitrat,2^0 m/20 calciumchlorid: 30
Under forsøgsperioden holdt ved 37°C.
b) Forsøgsmetode:
Efter opløsning af den fraktion FEIBA-prøve, som skal undersø-35 9
DK 151932 B
ges, og et FEIBA-standardpræparat med veldefinerede FElBA-enhe-der pr. ml i den anførte mængde destilleret vand fremstilles under anvendelse af citrat-/kogsaltopløsning 6 geometriske fortyndinger, idet man begynder med 5 FEIBA-enheder pr. ml, dvs.
5 at der fremstilles følgende fortyndinger: ufortyndet (5 FEIBA- enheder/ml), 1:2 fortyndet med citrat/kogsaltopløsning (2,5 FEIBA-enheder/ml), 1:4 fortyndet (1,25 FEIBA-enheder/ml) osv. til 1:32 fortyndet (0,15625 FEIBA-enheder/ml). Disse fortyndinger holdes under forsøgsperioden i isbad. Reagenserne pipetteres i glasrør 10 på følgende måde: 0,05 ml faktor VIII-inhibitorplasma 0,05 ml prøve (fortyndinger af forsøgsprøverne og standarden samt citrat-/kogsaltopløsning som tom værdi) ^ 0,05 ml phospholipid kaolinsuspension inkubering i 6 minutter ved 37°C 0,05 ml ^q- m calciumchlorid.
Tiden fra tilsætningen af calciumchlorid til dannelse af en 20 størknet masse måles med et stopur (kipning af prøverørene el ler anvendelse af en automatisk koagulometer).
c) Beregning af FEIBA-enheder pr. flaske: .
2^ Der fremstilles en målekurve, idet man på dobbelt logaritmisk millimeterpapir optegner størkningstiderne (i sekunder) af fortyndingerne af FEIBA-standard-præparatet som funktion af de tilsvarende koncentrationer (i FEIBA-enheder pr. ml). FEIBA-aktivi-teten af forsøgsprøvefortyndingerne beregnes under anvendelse 30 af målekurven og ved multiplikation med den tilsvarende fortyn dingsfaktor. Middelværdien af disse resultater svarer tiliFElBA-aktiviteten af forsøgsprøven udtrykt i FEIBA-enheder pr. ml. Multiplicerer man denne værdi med opløsningsrumfanget (i ml) får man den samlede mængde FEIBA-enheder pr. flaske.
2. Bestemmelse af aktiviteten af størkningsfaktorerne II, VII, IX og X.
35 ίο
DK 151932B
A) Faktor Il-bestemmelse: a) Reagenser:
Serum: Blod fra en sund donor (uden antikoagulans) inkuberes i 24 timer ved 37°C. Serumet fjernes fra det størknede blod, 5 centrifugeres, opdeles i portioner og opbevares dybfrossen.
Okseoxalatplasma absorberet med bariumsulfat (som kilde til faktor V og som fortyndingsmiddel til prøver): 9 dele okseblod blandes med 1 del 1,34% natriumoxalat. Den fremkomne 10 plasma absorberes med 10% bariumsulfat. Efter centrifugering opdeles den absorberede plasma i portioner og opbevares dybkølet.
"Thromborel (calciumnoldig, menneskelig thromboplastin) 15 Behringwerke AG, Marburg-Lahn.
b) Forsøgsmetode:
(S
Reagenserne (med undtagelse af i’hr ombor elSopbe1var es de under forsøget i isbad) pipetteres i glasrør på følgende måde: 2 0 0,05 ml serum 0,05 ml prøve (rækkefortyndinger af de prøver der skal undersøges henholdsvis et normaltplasma eller en standard)
inkubering i 1 minut ved 37°C
0,2 ml ThromboreiP·(skal under forsøget holdes på 37°C).
Tiden fra tilsætning af Thromborej^til dannelse af en størknet masse måles med et stopur.
J U
c) Beregning af faktor Il-koncentration:
Af samlede plasmaprøver fra mindst 15 sunde donorer fremstilles et standardplasma. Denne "Poolplasma" gælder som "normal-35 plasma" og dens faktor Il-aktivitet ansættes til 100%. Nu fremstilles en målekurve, idet man på dobbelt logaritmisk millimeterpapir optegner størkningstiderne af plasmarækkefor-
DK 151932B
11 tyndingerne af dette samlede plasma (ufortyndet, 1:2, 1:4, 1:8 ...) som funktion af de tilsvarende koncentrationer. Faktor Il-koncentrationerne af forsøgsprøvefortyndingerne bliver under anvendelse af målekurven udtrykt i .% af det 5 normale plasma og multipliceres med den tilsvarende fortyn dingsfaktor. Gennemsnitsværdien af disse resultater svarer til aktiviteten af forsøgsmaterialet i % af faktor II□ Mængden af den i en flaske værende faktor II beregnes af følgende formel: lo
Enheder (% faktor Il-koncentration) x (volumen i ml) Faktor II 200
En enhed faktor II er ækvivalent med den faktor Il-aktivitet, 15 som gennemsnitlig findes i 1 ml frisk citratplasma- B) Faktor VII-bestemmelse: a) Reagenser:
Faktor VII-mangelplasma: Citratplasma fra en patient med svær faktor VII-mangel (faktor VII under 1%) lagret i dybfrossen tilstand eller lyofiliseret efter tilsætning af 1 'vægt%/volumen HEPES (stødpude af 2,4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazinyl-ethansulf onsyre) med en pH-værdi på 7,0.
Citratholdig kogsaltopløsning som fortyndingsmiddel for prø- 25 ven: 0,7% trinatriumci trat, 21^0, 0,7% natriumo'hlorid.
"tfhromborel '^( calciumholdig human thromboplastin.) fra Beh-ring-Werke AG, Marburg/Lahn.
30 b) Undersøgelsesmetode:
Mangelplasmaen og fortyndingerne af prøven opbevares i isbad. "Thromborel'^lagres ved 37°C under undersøgelsen., 35 Reagenserne pipetteres på følgende måde i glasrør: i 12
DK 151952B
0,05 ml faktor Vll-mangelplasma 0,05 ml prøve (rækkefortyndinger af den prøve der skal undersøges henholdsvis et "normalplasma” eller en standard) 5 inkubering ved 37°C i 1 minut 0,2 ml "Thromborel"^
Tiden fra ThromboreJ^tilsætningen til dannelse af en størknet masse måles med et stopur.
10 c) Beregning af faktor VII-koncentrationen:
Beregningen af faktor VII-koncentrationen sker på samme måde som for faktor II.
15 C) Faktor IX-bestemmelse: a) Reagenser:
Faktor IX-mangelplasma: Citratplasma fra en patient med svær hæmofili B (faktor IX under 1%) lagret i dybfrossen 20 tilstand.
Phospholipid/kaolin-suspension: Phospholipid-koncentrat (Tachostyptan^Hormon Chemie Munchen) fortyndes i 1:200 i
Owens stødpude (11,75 g natriumdiethylbarbitarat og 14,67 2 5 g natriumchlorid opløses i en blanding af 1570 ml destilleret vand og 430 ml 0,1 normal saltsyre (ph 7,35)), og der tilsættes kaolin (0,5 g pr. 100 ml) og lagres dybkølet. Okseoxalatplasma absorberet med bariumsulfat som fortyndingsmidler til prøver: 9 dele okseblod blandes med 1 del 1,34 % natriumoxalat. Det fremkomne plasma absorberes med 10% bariumsulfat. Efter centrifugering deles det absorberede plasma i portioner og opbevares dybfrossen.
m/20 calciumchlorid.
35 b) Forsøgsmetode:
Inkubation af faktor IX-mangelplasma med phospholipid/kaolin-suspension: Den nødvendige mængde mangelplasma blandes med 13
DK 1519 32 B
et lige så stort rumfang af phospholipid/kaolin-suspension, inkuberes i 5 minutter ved 37°C og lagres så i 30 minutter i et isbad.
Reagenserne (med undtagelse af calciumchlorid opbevares un-5 der forsøget i isbad) pipetteres på følgende måde i glasrør: 0,2 ml inkuberet mangelplasma-phospholipid/kaolin-suspension 0,1 ml prøve (rækkefortyndinger af de prøver der skal 10 undersøges henholdsvis et "normalplasma" eller en standard) inkubering ved 37°C i 1 minut 0,1 ml m/20 calciumchlorid (skal under forsøget holdes ved 37°C.
15
Tiden fra tilsætningen af calciumchlorid til dannelse af en størknet masse måles med et stopur.
c) Beregning af faktor IX-koncentrationen: 20 Beregningen af faktor IX-koncentrationen sker på samme måde som beskrevet for faktor II.
D) Faktor X-bestemmelse: a) Reagenser: 25
Faktor X-mangelplasma: Citratplasma fra en patient med svær faktor X-mangel (faktor X under 1%) lagres dybkølet eller lyofiliseres efter tilsætning af 1% HEPES og indstilling af pH-værdien til.7,0.
30
Citrat-kogsaltopløsning som fortyndingsmiddel til prøver: 0,7% natriumchlorid/0,7% natriumcitrat,2^0.
"Thromborel(calciumholdig, menneskelig thromboplastin) 35 Beringwerke AG, Marburg/Lahn.
DK 151932 B
14 b) Undersøgelsesmetode:
Reagenserne (med undtagelse af Thromborei^opbevares de under forsøget i isbad) pipetteres på følgende måde i glasrør: 0,05 ml faktor X-mangelplasma 5 0,05 ml prøve (rækkefortyndinger af de prøver der skal undersøges henholdsvis "normalplasma" eller en standard) inkubering ved 37°C i 1 minut 0,2 ml Thrombore]F(skal under forsøget holdes på 37°C).
10
Tiden fra tilsætning af T.hromborei^til dannelse af en størknet masse måles med et stopur.
c) Beregning af en faktor X-koncentration:
Beregningen af faktor X-koncentrationen sker på samme måde som beskrevet for faktor II.
3. Thrombinprøve.
a) Reagenser: 1 % fibrinogenopløsning af menneskelig oprindelse standardiseret thrombin (Topostasiiif·1 Roche, 3000 NIH-thrombinenhe-der pr. flaske).
25 0,7% natriumchlorid/0,7% natriumcitrat,21^0 som fortyndings middel (citrat-/kogsaltopløsning).
b) Undersøgelsesmetode:
Efter opløsning af det lyofiliserede produkt i den anførte 30 mængde destilleret vand fremstilles seks geometriske fortyndinger under anvendelse af citrat-/kogsaltopløsning og otte geometriske fortyndinger af standardiseret thrombin, idet man begynder med 1 NIH-enheder pr. ml.
DK 151932B
15
Forsøgsfremgangsmåde: 0,2 ml 1 % fibrinogenopløsning og 0,2 ml prøve (fraktion FEIBA- og thrombinfortyndinger samt en tom værdi med citrat-/kogsaltopløsning) 5 inkuberes ved 37°C. Tiden til dannelse af en størknet masse måles ved kipning af prøverørene med stadig større tidsafstande nemlig fra 10 minutter til 1 time. Denne fremgangsmåde strækker sig over mindst 6 timer. En sidste kipning af rørene sker efter inkubation natten over. Tomværdien (fortyn-10 dingsmiddel som prøve) må forblive stabil natten over (ingen dannelse af størknet masse).
c) Beregning af thrombinkoncentration:
Der fremstilles en målekurve, idet man på dobbelt logaritmisk 15 millimeterpapir optegner størkningstiden for de geometriske fortyndinger af standardthrombinet som funktion af den tilsvarende koncentration (thrombinenheder pr. ml). Thrombin-koncentrationerne af forsøgsprøvefortyndingerne beregnes under anvendelse af målekurven og ved multiplikation med den tilsvarende fortyndingsfaktor. Gennemsnitsværdien af disse resultater svarer til thrombinaktiviteten af forsøgsprøven udtrykt i thrombinenheder pr. ml. Multiplicerer man denne værdi med opløsningsrumfanget i ml får man den samlede mængde thrombinenheder pr. flaske.
25 4. Bestemmelse af amidolytisk aktivitet, a) Reagenser: 30 Chromogene substrater: S-2160: N-benzoyl-L-phenylalanyl-L-valyl-L-arginin-p-nitroanilid,HCl (kort form: Bz-Phe-Val-Arg-p-nitroanilid,HC1) 0,5 mg/ml H20 = 0,73 m molær 16
DK 151932B
S-2222: N-benzoyl-L-isoleucyl-L-glutamyl-L-glycyl-L- arginyl-p-nitroanilid,HCl (kort form: Bz-Ile-Glu-Gly-Arg-p-nitro anilid, HC1) 1,4 mg/ml H20 = 1,91 m molær 5 S-2251: D-Valyl-0-leucyl-L-lysyl-p-nitroanilid,2HCl (kort form: D-Val-Leu-Lys-p-nitroanilid,2HCl) 1,65 mg/ml H20 = 2,99 m molær.
Stødpude: 6,06 g "Tris" (tris(hydroxymethyl)-aminomethan) 10 =0,05 molær 10,6 g natriumchlorid = 0,18 molær.
Det opløses med 1 1 destilleret vand. pH-værdien indstilles 15 med koncentreret saltsyre til 7,4.
b) Undersøgelsesmetode: 1,0 ml stødpude 0,1 ml forsøgsprøve (præparat indeholdende FEIBA) 20 0,2 ml substrat (S-2160 henholdsvis S-2222 henholdsvis S-2251).
Denne blanding fyldes i en til 37°C tempererbar Kiivette (lagtykkelse 1 cm) og i et fotometer ved 405 nm måles væk-25 sten i optisk tæthed i tidsintervaller på 1 minut.
c) Bedømmelse:
Af mindst 5 enkeltmålinger beregnes den gennemsnitlige tilvækst i optisk tæthed pr. minut og multipliceres med 1000, Denne værdi betegnes AOD.lO^/min. og tjener til karakterisering af den amidolytiske aktivitet (enzymaktivitet) af den undersøgte prøve overfor det i hvert enkelt tilfælde anvendte substrat.
3 17
DK 151932 B
Dividerer man nu den målte ΔΟΌ.10 /minutværdi med aktiviteten af forsøgsprøven i FEIBA-enheder pr. 0,1 ml (anvendt prøvemængde) henholdsvis i faktor II, VII, IX, X-enheder pr. 0,1 ml fås en for hver enkelt forsøgsprøve under de nævnte forsøgsbetingelser karakteristisk "specifik amidolytisk aktivitet", d.v.s. den til 1 5 enhed FEIBA henholdsvis 1 enhed faktor II, VII, IX, X hørende 3 AOD.10 /minutværdi.
De ifølge eksemplerne 1 og 2 fremstillede præparater udviste ved de 10 på den beskrevne måde udførte forsøg de i tabellen anførte egenskaber.
Tabel: 15 Eksempel 1 Eksempel 2
Aftappet eller opløsningsrumfang 20 ml 20 ml FEIBA-enheder pr. flaske 470 280
Faktor Il-enheder pr. flaske 610 (1,30) 240 (0,86) 20 Faktor VII-enheder pr. flaske 520 (1,11) 260 (0,93)
Faktor IX-enheder pr. flaske 700 (1,49) 300 (1,07)
Faktor X-enheder pr. flaske 540 (1,15) 210 (0,75)
Thrombin NIH-enheder pr. flaske 1,4 (0,003) 1,0 (0,004) 25 Amidolytiske aktiviteter (AOD.10^/min) S-2160 1 (0,43) 1 (0,71) S-2222 3 (1,28) 2,5 (1,79) S-2251 4 (1,70) 2 (1,43) 30
Tallene i parentes angiver i hvert enkelt tilfælde forholdet til FEIBA-enheder. For den amidolytiske aktivitet er tallene i parentes den "specifikke amidolytiske aktivitet" d.v.s. AOD.10^/minutværdi en pr. en i det beskrevne forsøgssystem anvendt FEIBA-enhed. ις
Claims (2)
1. Fremgangsmåde til fremstilling af et blodstørkningsfremmende farmaceutisk præparat af menneskeligt blodplasma, som indeholder et hidtil ukendt blodstørkningsaktivt stof kaldet faktor-VIIl-inhibitor-Bypassing-Activity (FEIBA) sammen med prothrombinkompleksets faktorer II, VII, IX og X, k endete g n e t ved, at menneskeligt citrationholdigt plasma, fra DK 151932 B hvilket faktor VIII eventuelt er fjernet, og som indeholder prothrombinkomplekset, i fravær af frie calciumioner behandles med vanduopløselige, uorganiske^ størkningsfysiologisk overfladeaktive stoffer valgt blandt stoffer, der er sammen-5 sat af diatoméjord, siliciumdioxid og aluminiumoxid ved et pH på 5,5 til 8,5 og en temperatur på 0 til 30°C, hvorved det hidtil ukendte stof dannes., hvorefter de vanduopløselige stoffer fraskilles, og den ovenstående væske på i og for sig kendt måde behandles med basiske ionbyttere valgt 10 blandt diethylaminoethylgruppeholdige højmolekulære stoffer, hvorved stoffet FEIBA adsorberes dertil sammen med faktorerne II, VII, IX og X, hvorpå ionbytteren vaskes med fortyndet saltopløsning og behandles med en saltopløsning med højere koncentration end vaskeopløsningen for at eluere FEIBA og 15 faktorerne II, VII, IX og X, hvorpå ionbytteren vaskes med fortyndet saltopløsning og behandles med en saltopløsning med højere koncentration end vaskeopløsningen for at eluere FEIBA og faktorerne II, VII, IX og X under opnåelse af et aktivitetsforhold mellem faktorerne II, VII, IX, X og FEIBA 2o på 0,1 til 10, fortrinsvis 0,5-2, hvorefter eluatet dialyseres og koncentreres ved frysetørring.
2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at de vanduopløselige, uorganiske, størkningsfysiologisk over-25 fladeaktive stoffer anvendes i en mængde på 0,05 til 5%, fortrinsvis 0,1 til 1% beregnet på mængden af plasma. 30
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| AT640576 | 1976-08-30 | ||
| AT640576A AT350726B (de) | 1976-08-30 | 1976-08-30 | Verfahren zur herstellung einer blut- gerinnungsfoerdernden praeperation aus menschlichem blutplasma |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK384577A DK384577A (da) | 1978-03-01 |
| DK151932B true DK151932B (da) | 1988-01-18 |
| DK151932C DK151932C (da) | 1988-06-20 |
Family
ID=3585985
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK384577A DK151932C (da) | 1976-08-30 | 1977-08-30 | Fremgangsmaade til fremstilling af et blodstoerkningsfremmende praeparat af menneskeligt blodplasma |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4160025A (da) |
| AR (1) | AR213861A1 (da) |
| AT (1) | AT350726B (da) |
| BE (1) | BE858031A (da) |
| CA (1) | CA1079191A (da) |
| CH (1) | CH635747A5 (da) |
| DE (1) | DE2734821C3 (da) |
| DK (1) | DK151932C (da) |
| ES (1) | ES461918A1 (da) |
| FI (1) | FI57421C (da) |
| FR (1) | FR2362633A1 (da) |
| GB (1) | GB1554051A (da) |
| HU (1) | HU180816B (da) |
| LU (1) | LU78024A1 (da) |
| NL (1) | NL170922C (da) |
| NO (1) | NO148142C (da) |
| SE (1) | SE443511B (da) |
Families Citing this family (35)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2902158A1 (de) * | 1979-01-20 | 1980-07-31 | Biotest Serum Institut Gmbh | Verfahren zur herstellung von fibrinogen, einem die gerinnungsfaktoren ii, vii, ix und x enthaltenden prothrombinkomplex, antithrombin iii und einer loesung von lagerstabilen serumproteinen |
| US4287180A (en) * | 1980-01-28 | 1981-09-01 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Method for treating blood clotting factor inhibitors |
| US4286056A (en) * | 1980-01-28 | 1981-08-25 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Method for making therapeutic enzyme compositions |
| WO1981002105A1 (en) * | 1980-01-28 | 1981-08-06 | Baxter Travenol Lab | Therapeutic compositions & methods for manufacture and use |
| DE3176491D1 (en) * | 1980-03-05 | 1987-11-26 | Miles Lab | Pasteurized therapeutically active protein compositions |
| US4391746A (en) * | 1980-05-27 | 1983-07-05 | Cutter Laboratories, Inc. | Blood-coagulation-promoting products and methods of preparing them |
| US4361510A (en) * | 1980-05-27 | 1982-11-30 | Cutter Laboratories, Inc. | Blood coagulation promoting product |
| DE3172210D1 (en) * | 1980-05-27 | 1985-10-17 | Miles Lab | Blood coagulation promoting product and process of preparing same |
| US4404132A (en) * | 1980-05-27 | 1983-09-13 | Cutter Laboratories, Inc. | Blood coagulation promoting product |
| US4364861A (en) * | 1980-05-27 | 1982-12-21 | Cutter Laboratories, Inc. | Blood-coagulation-promoting products and methods of preparing them |
| AT368883B (de) * | 1980-07-22 | 1982-11-25 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung einer neuen blutgerinnungsfoerdernden praeparation auf basis von humanproteinen |
| DE3101752A1 (de) * | 1981-01-21 | 1982-08-26 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | "verfahren zur reinigung der blutgerinnungsfaktoren ii, vii, ix und/oder x und danach hergestellte praeparationen" |
| US4479938A (en) * | 1981-06-25 | 1984-10-30 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Therapeutic composition containing factor VIIa |
| US4382083A (en) * | 1981-06-25 | 1983-05-03 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Therapeutic method for treating blood-clotting defects with factor VIIa |
| JPS5866054A (ja) * | 1981-10-14 | 1983-04-20 | Sekisui Chem Co Ltd | 血液検査用容器 |
| JPS58105064A (ja) * | 1981-12-17 | 1983-06-22 | Sekisui Chem Co Ltd | 血液凝固促進剤 |
| AT389815B (de) * | 1984-03-09 | 1990-02-12 | Immuno Ag | Verfahren zur inaktivierung von vermehrungsfaehigen filtrierbaren krankheitserregern in blutprodukten |
| DE3625090A1 (de) * | 1986-07-24 | 1988-01-28 | Behringwerke Ag | Mittel zur therapie faktor viii-resistenter haemophilie a und verfahren zu seiner herstellung |
| CA1330302C (en) * | 1988-01-18 | 1994-06-21 | Miroslav Rybak | Concentrates of coagulation factors ii, vii, ix and x, method of their preparation and use |
| AT402891B (de) * | 1991-06-20 | 1997-09-25 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung eines inaktivierten blutproduktes |
| AT398079B (de) * | 1991-11-04 | 1994-09-26 | Immuno Ag | Präparation mit thrombinaktivität sowie verfahren zu ihrer herstellung |
| AT399818B (de) * | 1992-04-24 | 1995-07-25 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung einer hochgereinigten virussicheren faktor viii-präparation |
| EP0674531A1 (de) * | 1992-12-16 | 1995-10-04 | IMMUNO Aktiengesellschaft | Verfahren zur herstellung eines virussicheren biologischen präparates |
| DE4320294A1 (de) * | 1993-06-18 | 1994-12-22 | Immuno Ag | Verwendung von humanem Protein C zur Verhinderung und Behandlung von Thrombozytenablagerungen |
| US5677162A (en) * | 1995-05-01 | 1997-10-14 | New York Blood Center, Inc. | Method for activating prothrombin to thrombin |
| DE19531637A1 (de) * | 1995-08-28 | 1997-03-06 | Immuno Ag | Pharmazeutische Zusammensetzung zur Behandlung von Blutgerinnungsstörugnen, Verfahren zur Herstellung derselben und deren Verwendung |
| DK0796623T3 (da) * | 1996-03-20 | 2005-08-01 | Baxter Ag | Farmaceutisk præparat til behandling af blodkoagulationslidelser |
| AT405485B (de) | 1997-05-28 | 1999-08-25 | Immuno Ag | Eine das vwf-propeptid enthaltende pharmazeutische präparation |
| AT407484B (de) * | 1997-11-12 | 2001-03-26 | Bio Prod & Bio Eng Ag | Arzneimittel zur förderung der wundheilung |
| RS20050051A (en) * | 2002-07-23 | 2007-06-04 | Bio-Products & Bio Engineering Ag., | Pharmaceutical active ingredient preparation and medicaments that contain thrombin or have a thrombin-generating capacity |
| RS52080B (sr) * | 2002-07-23 | 2012-06-30 | Bio & Bio Licensing Sa | Farmaceutski aktivna supstanca preparata i lekova koji su u stanju da stvaraju trombin i/ili da sadrže trombin |
| EP2305289A1 (en) | 2009-09-16 | 2011-04-06 | Bio-Products & Bio-Engineering Aktiengesellschaft | Medicinal products for the treatment of blood coagulation disorders |
| IS2809B (is) * | 2011-03-08 | 2012-10-15 | Haskoli Islands | Blóðstorkumæling |
| RU2648517C1 (ru) * | 2017-06-23 | 2018-03-26 | Федеральное государственное бюджетное учреждение Гематологический научный центр Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ ГНЦ Минздрава России) | Способ получения лиофилизированного препарата активированного протромбинового комплекса, обладающего фактор viii-шунтирующей активностью |
| WO2024012853A1 (de) | 2022-07-12 | 2024-01-18 | Biomedizinische Forschung & Bio-Produkte AG | Arzneimittel zur förderung der hämostase |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2262520A1 (de) * | 1972-12-20 | 1974-06-27 | Cutter Lab | Verfahren zur herstellung eines lagerfaehigen blutgerinnungskonzentrats aus menschlichem plasma |
| DE2459291A1 (de) * | 1974-12-14 | 1976-06-16 | Biotest Serum Institut Gmbh | Verfahren zur gleichzeitigen herstellung von drei therapeutisch verwendbaren produkten aus einem ausgangsmaterial |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3998946A (en) * | 1975-04-23 | 1976-12-21 | The Regents Of The University Of Minnesota | Fibrinogen-free plasminogen-plasmin-free plasma and method of preparing and using same |
| DD121793A1 (da) * | 1975-07-17 | 1976-08-20 | ||
| US4027013A (en) * | 1976-01-22 | 1977-05-31 | William L. Wilson | Clottable fibrinogen free factor VIII and albumin product and process |
-
1976
- 1976-08-30 AT AT640576A patent/AT350726B/de not_active IP Right Cessation
-
1977
- 1977-07-08 SE SE7707992A patent/SE443511B/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-08-02 DE DE2734821A patent/DE2734821C3/de not_active Expired
- 1977-08-03 GB GB32578/77A patent/GB1554051A/en not_active Expired
- 1977-08-08 US US05/822,679 patent/US4160025A/en not_active Expired - Lifetime
- 1977-08-10 FI FI772408A patent/FI57421C/fi not_active IP Right Cessation
- 1977-08-11 NL NLAANVRAGE7708872,A patent/NL170922C/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-08-11 AR AR268769A patent/AR213861A1/es active
- 1977-08-19 CA CA285,026A patent/CA1079191A/en not_active Expired
- 1977-08-19 CH CH1022077A patent/CH635747A5/de not_active IP Right Cessation
- 1977-08-22 FR FR7725597A patent/FR2362633A1/fr active Granted
- 1977-08-23 BE BE180368A patent/BE858031A/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-08-25 LU LU78024A patent/LU78024A1/xx unknown
- 1977-08-26 HU HU77IU288A patent/HU180816B/hu unknown
- 1977-08-26 ES ES461918A patent/ES461918A1/es not_active Expired
- 1977-08-29 NO NO772978A patent/NO148142C/no unknown
- 1977-08-30 DK DK384577A patent/DK151932C/da not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2262520A1 (de) * | 1972-12-20 | 1974-06-27 | Cutter Lab | Verfahren zur herstellung eines lagerfaehigen blutgerinnungskonzentrats aus menschlichem plasma |
| DE2459291A1 (de) * | 1974-12-14 | 1976-06-16 | Biotest Serum Institut Gmbh | Verfahren zur gleichzeitigen herstellung von drei therapeutisch verwendbaren produkten aus einem ausgangsmaterial |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK151932C (da) | 1988-06-20 |
| CA1079191A (en) | 1980-06-10 |
| BE858031A (fr) | 1977-12-16 |
| NL170922B (nl) | 1982-08-16 |
| DK384577A (da) | 1978-03-01 |
| NL7708872A (nl) | 1978-03-02 |
| FI57421B (fi) | 1980-04-30 |
| FI57421C (fi) | 1980-08-11 |
| NL170922C (nl) | 1983-01-17 |
| FR2362633A1 (fr) | 1978-03-24 |
| NO148142C (no) | 1983-08-17 |
| DE2734821B2 (de) | 1980-11-06 |
| CH635747A5 (de) | 1983-04-29 |
| AT350726B (de) | 1979-06-11 |
| ES461918A1 (es) | 1978-12-16 |
| FI772408A (fi) | 1978-03-01 |
| AR213861A1 (es) | 1979-03-30 |
| LU78024A1 (da) | 1978-01-11 |
| DE2734821A1 (de) | 1978-03-02 |
| NO148142B (no) | 1983-05-09 |
| DE2734821C3 (de) | 1985-03-14 |
| SE443511B (sv) | 1986-03-03 |
| GB1554051A (en) | 1979-10-17 |
| HU180816B (en) | 1983-04-29 |
| ATA640576A (de) | 1978-11-15 |
| SE7707992L (sv) | 1978-03-01 |
| FR2362633B1 (da) | 1981-06-12 |
| NO772978L (no) | 1978-03-01 |
| US4160025A (en) | 1979-07-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK151932B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af et blodstoerkningsfremmende praeparat af menneskeligt blodplasma | |
| US5099003A (en) | Method of preparing a sterile plasma-protein solution containing fibrinogen and factor xiii | |
| US3682881A (en) | Fractionation of plasma using glycine and polyethylene glycol | |
| AU645172B2 (en) | Process for an industrial-scale preparation of a standardized human von Willebrand factor concentrate of very high purity and suitable for therapeutic use | |
| JP2540541B2 (ja) | 第ｖ因子濃縮物の製法 | |
| Zucker et al. | Aggregation and release reaction induced in human blood platelets by zymosan | |
| US3717708A (en) | Blood coagulation complex | |
| Heystek et al. | Contributions to the optimal use of human blood | |
| DK141274B (da) | Fremgangsmåde til isolering af blodkoagulationsfaktorerne. | |
| DK155568B (da) | Fremgangsmaade til stabilisering af koagulationsfaktorerne ii, viii, xiii og antithrombin iii samt plasminogen, og saaledes at disse er fibrinogen-fri og fri for risiko for en hepatitis-overfoering | |
| NL8003402A (nl) | Nieuwe plasminogeen-activator en farmaceutisch preparaat met trombolytische werking. | |
| CA2621025A1 (en) | An ultra-high yield intravenous immune globulin preparation | |
| JPH0143728B2 (da) | ||
| AU2006287833A1 (en) | An ultra-high yield intravenous immune globulin preparation | |
| JPS6160614A (ja) | 第８因子製剤およびその製造方法 | |
| JPH0424360B2 (da) | ||
| US4774323A (en) | Purification of von Willebrand Factor solutions using gel permeation chromatography | |
| JP5261478B2 (ja) | 第Ｘ因子，活性化第Ｘ因子，不活性第Ｘ因子および不活性化第Ｘａ因子の調製方法、ならびに該因子を含む医薬組成物 | |
| Ng et al. | Pasteurization of antihemophilic factor and model virus inactivation studies | |
| FI81363B (fi) | Foerfarande foer pastoerisering av preparat av blodkoaguleringsfaktorerna ii, vii, ix och x. | |
| DK147408B (da) | Fremgangsmaade til udvinding af thrombinagtige enzymer fra slangegifte eller slangegiftfraktioner | |
| EP0000651A1 (en) | Method of separating a factor IX preparation from blood plasma | |
| JPS6072818A (ja) | ヒト血漿の低温殺菌法 | |
| EP0044343A1 (en) | THERAPEUTIC COMPOSITIONS CONTAINING PROTHROMBIN AND PROCESS FOR PRODUCING ENZYMATICALLY ACTIVE BLOOD COAGULATION FACTORS FROM BLOOD FRACTIONS CONTAINING PROTHROMBIN. | |
| US4822872A (en) | Method of purifying factor VIII |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PUP | Patent expired |