JPS58105064A - 血液凝固促進剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

本発明ねａ！取された血液の凝固を促進する作用を南す
る血液凝固促進剤に関し、詳しく奢、１、短１時間で血
清を分離する目的あるいは血液凝固棟１！Ｉ−ｅ（おけ
る凝固時間の判定を短時間で遂行する目的のだめに、採
取された血液に混入させてＩＶｉ用される皿液凝固促赫
剤に関する。 ）「年子防医学の目ざましい進歩と相俟って、血清生化
学快食、血清免投字４ｔ１食、血球検査等の１用液検食
が広く鯉及し、とりわけ血清検査は血准検査の主体をな
しており、検査に要する血清＃Ｊ血准検青用容器に採取
した血液を凝固させた俵、遠ノし・分離により、比重の
異なる血ｆ＃［（フィブリンと血球とが混合して形成さ
れるゲル様塊状物）から分離採取される。 面Ｗ＆凝ＩＮ検査は、血液凝固に関わる諸因子の油性評
価あるい（」血小板機能評価を行なうことによって各種
の出血性疾患すなわち、血管の機能障害疾患、血小板の
機能障害疾患、凝固障害疾患などを判定する重要な臨床
検査法として実用的な意味を持つ。そして従来採用され
ている各種の血液凝固検査は、検体より採取された血液
の凝固時間測定に基礎を置いている。 上記の血清検査および血液凝固検査において、従来問題
とされてきた点は、検体より血液を採取した後短時間に
検査を実施し、測定値を得ることかで１ないことにおシ
、この原因は採取された血液が凝固する゛までにかなり
の時間を要することにあった。 上記の問題点を解決するため従来、血液検査用容器中に
採取された血液にカオリン、セライト、ガラス、ば化シ
リコン、ベントナイ）Ｗの無情Ｘ８末を加え、凝固を促
進させる方法、ポリスチレンなどのプラスチックの小球
あるいはペレットを加える方法あるいは、生物体より抽
出された凝固促進活性を肴する物質、例えば蛇毒よシ得
られるトロンビン様物質、動物脳よシ抽出されるトロン
ボグラスナン物實を用いる方法等が用いられて米だ。し
かしながら上記無機質粉末やプラスチックの小球あるい
はベレットを用いる方法においては、血液凝固時間の短
幅効果が未だイく十分であったり、多量に使用する場合
、浴面を生じるなどの問題が存していた。 ′また上記の生物体よりの抽出物質を用いる方法Ｖ（お
いては、保存中に活性を失ない易いこと、Ｈ３価である
こと等の問題が存していた。 −ｌ　ｉ’ｆ己の問題点を解消するだめに、本発明者等
は面取凝固におｒｊる凝固因子や血小板をｒ６性化する
ために有効な物質を鋭意探索した。 その結果、担体表面に界面活性剤と吸着性態（幾物を並
存させることにより、血′ｔｉ凝固促進作用を有し、血
液凝固に匿する時間を短縮すると共に、鳩ｉｆ＞分離に
より血清と血ｍトを良好に分離することができることを
兄出し本発明を兄成するに主っだ。 本発明の俊旨は、担体表面に界面活性剤及び吸着１ｒＪ
：岬ｄ幾物が存在せしめられている、血液凝固促進剤に
存する。 次に本発明血液凝固健進剤について更に詳細に説明する
。 担体としては、例えば全組、セラミック、プラスチック
、ゴム等の粒状体が使用される。担体が粒状体である場
合には、その表面に界面活性剤及び吸着性無機物を存在
させたものを血液中に分散させ遠心分離にかけた際に血
清と血餅との分離をしやすいものとなる。しかしながら
担体の形状は粒状に限られるものでなく棒状、筒状、フ
ィルム状、シート状、繊維状、廠゛布状、不織布状等の
種々の形状をとりうる。 担体の表面に界面活性剤及び吸着性無機物が存在せしめ
られている。界面活性剤としては、非イオン性界面油性
剤が好ましく、なかでもポリグリセリンの脂肪酸エステ
ル、ソルビットの脂ＩｔＪｊ＆エステル、ポリエーテル
変性を施したシリコーンオイル等が好適であり、更に具
体的には、例えばステアリン酸ポリグリセライド、オレ
イン酸ポリグリセライド、ンルビタンモノステア５−一 レート、ソルビタン七ノオレート、ポリエチレングリコ
ール変性シリコーンオイル、ポリプロピレングリコール
変性シリコーンオイルなどがある。 吸着性無機物としては、吸着剤として使用されていたよ
うな無機物、例えばガラス、シリカ、カオリン、セライ
ト、ベントナイト等の水不溶性の無機質微粉末がこれに
該当す７１１゜又、吸着性無機物は粒悦が５０声以下で
あって、平均粒径が１０戸以下のものを使用するのが好
適である。そして特に血液凝固時間を短縮させるに有効
な吸着性無機物はシリカであり、とり分は無定形成分を
２０重量％以上含有する多孔性のシリカがすぐれた効果
を発揮する。 か＼る吸着性無機物は、血液と接触した場合に血液凝固
検査の活性化を促進し、又血小板の縦梁を促がす作用を
有する。しかしながら吸着性無機物が血液凝固促進作用
を効果的に発揮するためには、アマニ油吸油値、ＢＥＴ
比表面積値、比抵抗値が一定の範凹内に存在することが
好ま６− しい。 アマニ油吸油景及びＢＥＴ比表血槓値ヲ：１、吸着性無
機質微粉末の表面種の程度を表わし、又表面種は吸着性
無機物の有する表面孔隙の程度と関連するので、吸油着
及び比表面績によって表面孔隙の程度を知ることができ
る。ぞして本発明における吸着性無機物は、アマニ油吸
油鼠が２０〜４ｏ＊／１ｏｏｐ、　ＢＥＴ比表面槙仙が
５０００〜３００　ｆ＋　Ｏｔｍ／　ｆ　　であるもの
が使用される。 アマニ油吸油蓋は日本工業規格に−５１０１に準拠して
測定される１１１１を示し、吸着性無機物１乃至５ｙを
ガラス板（約２５０Ｘ２５０Ｘ５猷）にとり、アマニ油
をビユレットから少址ずつ前記試料の中央にｌ＠下し、
その都度全体をヘラで充分に練シ合わせ、ＭｉｌｔＭ２
試料がアマニ油の−４−で急倣にやわらかくなりガラス
板に粘りつく直前を終点としそれ迄に使用したアマニ油
の１を求め、試料１００ｙに対するアマニ油のｍｅ数を
以ってアマニ油吸油区とする。 ＢＦＴ比表Ｉ川績用け、Ｈｒｕｎａｕｅｒ−Ｅｉｍｍｅ
ｔｔ−Ｔｅｌｌｅｒによって提案され多分子層吸着理論
から求められる値であり、そのｆＭ論ａ、Ｊｏｕｒｎａ
ｌ　ｏｆ　ＡｍｅｒｌｃａｎＣｂｅｍｉｃａｌ　５ｏｃ
ｉｅｔｙ　リ−３０９（１９３８）ｉ５９．２ｆｉ８２
　（１９３７）等において詳説されている。 １３　Ｅ　’ｌ”比表面積値は、吸着性無機物の表面に
吸着さｉする気体の吸着鮭、その時の平衡圧、吸着ガス
の飽和蒸気圧から単分子層として表向をお＼い切る気体
鼠を求め、これに吸着気体分子の平均断面積を乗じて算
出された（ｔｈを指すものであり、吸着気体としては窒
素ガス、酸素ガス、アルゴンガス、メタンガス等が使用
される。そし、てこの方法によれば、アマニ油眩油量の
測定に１つでは測にできない細孔を含めた衣曲稙値が測
シ■！される。 血液縦置に際して目、第ＸＩＩ因子、すなわち接触因子
が活性化されるが、このために１１異物六面上に第ＸＩ
Ｉ因子、ブレカリク１／イン、尚分イギニノーケンの３
推の物質が錯体を形成して吸／７１さｉすることか必要
であり、これらの一つ父ｔにつが欠けた状態での吸着は
活性化に主ら々いとされている。ところで、血液凝固促
進作用を期待して吸着性無機物を使用した場合に１表面
種が非常に大きなものであると、吸着性無機物の表面上
には錯体を形成しない状態での第ＸＩＩ因子、プレカリ
クレイン、高分子キニノーゲンの吸着の割合が高まるこ
とになり、言い換えると、第ＸＩＩ因子の活性化に必蟹
な三者の錯体形成割合は減少することになり、かえって
血液凝固促進作用は減殺されることになる。また逆に吸
着性無機物の表面種が小さずぎると、凝固因子の吸着の
確率が小さくなり、血液凝固促進作用を期待することが
できなくなる。このために本発明における吸着性無機物
ｔ」°アマニ油眩油１１が２０〜４０ｔｒｌ／　１００
　ｆ、　　Ｂ　Ｋ　Ｔ比表面積値が５０００〜３０００
０ｃｄ／ｙの範囲の表面種を有するこζが０．Ｉ　Ｌい
ものである。 父、本発明における吸着性無機質微粉末の比抵抗値は１
×１０　Ω・ｔｓ以下、より好ましくは５×１０Ω・４
以下であるものが使用される。 ９− 比抵抗１１１（け霜、気伝導度の逆Ｖであり、常温Ｖ（
おりる値である。 血液が異物に接触すると、面猷凝固現象に先）′ｆ。 つてアルブミン、グロブリンや種々の血液凝固因子等の
蛋白質が直ちに異物表面へ吸着し、その際の蛋白質分子
のコンフォーメーションの変化が、引続いて生ずる生化
学反応に様々な影響を及ｔｆす。特にＩ拝素反応でおる
血液凝固因子の油性化１１．１大きな影響を受は場合に
よっては凝固機能を損なう。 父、大きなコンフォーメーションの変化を生じた吸着グ
ロブリン、アルブミンの上に０虐

【７た」１１１小板は
異常な溶融良形をさたし、重合析出し／ζ−フィブリン
鎮が吸着性無機物に強く固層するという４」を尿を引き
起こす、、仮名の現象が血清採取を目的とする谷≠ｉ内
で生ずると、遠心分離を付なっても、血餅と血清とに分
離せず、その１」的を達成することができなくなる。 蛋白餉のコンフォーメーションの変化は吸８ｍ無機物と
８１Ｔ白買間の疎水性相互作用、水素結合１０− 性相互作用、静電的相互作用等の様々な相互作用の結果
生ずるが、このうち静電的相互作用については比較的導
電性の高い吸着性無機物を用いると緩和される。す々わ
ち、蛋白質の持つ極性基群により吸着性無機物中には、
それらに応じた分布を持つ双極子モーメント群が訪起さ
れるわけであるが、吸着性無機物が非導電性で、ちれば
導電性の場合に比して応答性が急くなシ、表面に吸着し
ている蛋白質の有する電位分布と吸着性無機物の有する
電位分布とは相互に整合性を欠き、これが蛋白質に局が
「的で不均一な歪みを生じさせコンフォーメーションの
変化へとつながる。従って吸着性無機物が導電性を有す
ることは、蛋白質と吸着性無機貢倣粉末との間の電位分
布の整合性を保持し、蛋白質のコンフォーメーションの
変化を防止するために必要である。 このために本発明における吸着性無機物は、比抵抗仙が
１×１００・ａｍ以下のものとされるのである。 吸着性無機物１Ｙ１血液を吸着させる性質を有し、又、
血液凝固因子に約する活性化作用により血液凝固促進作
用を有する。しかし吸着性無機物が、相体表面に単独で
存在される場合ね１、血液凝固ｉＭ度は早められるもの
の、凝固により生じた血餅−を担体表面に付着させる働
きをも有するものとなり、遠心分離にかけた際に担体と
その表面に付着した血餅との間に強いずシ応カが発生し
、このだめに赤血球が破壊されて血清中に癌は込Ａ７で
しまうことになりゃすい。 しかり、なから相体表面に吸着性無機物と共に界面活性
剤が存在される場合は、血餅の担体表面への付層を防ぎ
、遠心分離にかけた際の血清中への俗血を防ぐことがで
きる。 １、ｘ１ｏｒ／ｃｌｉとされるのが好適である。担体よ
りも少ない場合は、担体表面への血餅の付着防止が充分
とならず、又Ｉ　Ｘ　１０　　ｆ／７よりも多い場合は
、界１ｍ活性剤が血清中に混ってしまい血清検査を閉害
するおそれが生ずる。又相体表ｉ伯への吸着性無機物の
存在量は１×１０〜Ｉ　Ｘ　１０　　ｙ　／ｃｒ４とさ
れるのが好適である。担体表面への吸着性無機物の存在
量がｔ　ｘ　ｌｏ　ｙ／ｃ：ｒＡよシも少ない場合は血
液凝固因子に対する活性化作用が充分得られないものと
なシ、又ｌＸ１０＝ｙ／ｃｔＡよりも多い場合は吸着性
無機物の血清中への混入を生じ血清検査を阻害するおそ
れが生ずる。 相体表面に界面活性剤及び吸着性無機物を存在させるに
は、たとえば、界面活性剤と吸着性無機物を適当な結合
剤や溶剤中に溶解、分散させた状態で、あらかじめ用意
された担体に塗付、あるいは含浸させてやればよい。ま
た、担体がプラスチック製である場合は、成形材料とし
てのプラスチックにあらかじめ、界面活性剤を混合しこ
れを押出成形、射出成形、ブロー成形、圧縮成形、トラ
ンスファー成形、真空成形、流延成形等適宜の成形方法
によって」１体を成形し、これに適当な結合剤や溶剤中
に分散させた吸着１５− 性無機物を塗付してもよい。 担体衣１１に界面活性剤及び吸着性無機物が存在せしめ
られてなる、血液凝固促進剤の比重は１０３〜１．０８
とされるのが好適であり、か＼る場合は血清と血餅との
中間程度の比重を有するものとなるので、遠心分離にか
けた際に血清と血餅の境界部分に集合し、血清や血餅へ
の混入が防がれる。 本発明血液凝固促進剤によれば、血液凝固因子が迅速に
活性化せしめられ、面数凝固に要する時間が著しく短縮
されると共に血清と血餅との分離が容易に行なわれ、血
餅成分の血清中への浴は込みを防ぐことができる等の利
点が存する。 夾施例１゜ ポリスチレン１００ｊｉｉ量部当たり、ポリエチレング
リコール変性シリコーンオイル】ｏ重ｉ都を６加した成
形Ｉ料を押出成形して、直径２馴長さ２關の粒状体を得
た。この粒状体１０　（１重量部当たり、微粉末状シリ
カ（平均粒径４．Ｃ）声１０、アマニ油吸油Ｍ　３０ｄ
／１００ｆ、ＢＥＴ比表向１４− 積値１２０００ａＪ／ｆ、比抵抗値２−６Ｘ１０−Ω・
耐、の２重ｉｔチメチルアルコール分散液１！ｉ部を加
えて、充分に混合し、次いで乾燥させて血液凝固促進剤
を得た。粒状体表面のポリエチレングリコール変性シリ
コーンオイルの　存在量は１×１０　ｙ／ｄ　であり、
シリカの存在量は１×１０　ｙ／ｄであった。この凝固
促進剤をｌ〇−用アクリル樹脂製スピッツ、及びガラス
製スピッツに夫々１ｙ添加し、これに入断鮮血８　Ｉｌ
ｅを注入した後、２０℃で放置して、全面が完全に流動
しなくなるまでに要した時間を血液凝固時間として測定
し、血液凝固性を評価した。血液凝固後、直ちに３００
０回転／回転目転速度で５分間遠心分離を行ない、血清
分離状態を観察するとともに、上泄み血清をピペットに
て採取し、その址を血清収量とした。表１の実施例１の
欄の結果から明らかなように、この血液凝固促進剤は、
血液凝固が極めて速やかであり、血清分離状態も極めて
良好で溶血を生ずることもなく、血清収量も良好であっ
た。 実施例２゜ ソルビ重量子ンステアレート０１重量係、実施例１にお
けると同じ微粒子状シリカ１重１ｔ％を各々含有するメ
チルアルコール分散液を再生セルロース製不織布に含浸
させ、乾燥させて、血液凝固促進剤を得た。この不織布
表面のソルビタンモノステアレートの存在量はＩｘｉｏ
　ｙ／７であり、シリカの存在量はｌＸｌ０　　ｆ／ｌ
−Ｊであった。これを１　（ｌ　ｄ用アクリル樹脂製ス
ピッツ、及びガラス製スピッツに４７投入し、これに入
断鮮血８−を注入して、実施例１と同様にして血液凝固
性、血清分離状態、血清収量を評価した。その結果を表
１の実施例２の欄に示す。この結果からも明らかなよう
に、この血液凝固促進剤１１血液凝固が極めて速やかで
血清分離状―も極めて良好で溶血を生ずることもなく、
又血清状にも良好であった。 比較例１ 実施例１において、ポリエチレングリコール変性シリコ
ーンオイルが添加されない以外は実施例１と同様にして
表面に微粉末状シリカが付着されたポリスチレン微粉末
を得た。これを１ＯＩＩＣ用アクリル樹脂製スピツツ及
びガラス製スビノツに夫々１ｙ添加し、実施例１と同様
にして入断鮮血による評価を行なった。 その結果を表１の比較例１の欄に示す。この結果からも
明らかなように、血清分離状態が悪く血清への溶血を生
じ、また血清収量も低かった。 比較例２ 実施例２において、ソルビタンモノステアレートが使用
されない以外は実施例１と同様にして、微粉末状シリカ
が付着された再生セルロース製不絨布を得た１、これを
ｌ〇−用アクリル樹脂製スピッツ及びガラス製スピッツ
に４ｅｄｉｔ′投入し、実施例２と同様にして入断鮮血
による評価を行なった。。 その結果を表１の比較例２の欄に示す。この結果からも
明らかなように、血清分離状態が悪く、血清への溶血を
生じ、また血清収量も低かった。。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、　担体表面に、界面粘性剤及び吸矯性無機物が存在
   せしめられている、血液凝固促進剤２　界面活性剤が、
   非イオン系界面活性剤である、％ｒｔ請求の範囲第１項
   記載の血液凝固促進剤１０ ３、　担体表面における界面活性剤の存在鼠が１×１０
   〜ｘｘｔｏｒ／７である、特許請求の範囲第１項又は第
   ２項記載のｎｏ液凝固促進剤 ４、　吸腐性無慎物のアマニ油吸油耐が２０〜４０ｍｅ
   ７１００Ｐ　。 ＢＥＴ比表面績値が５０００〜３００００ｔｉ／Ｐであ
   る、特許請求の＋１Ｉｉｂ囲第１項から第３項のいずれ
   かａ己礒の血液凝固促進剤 ５、　麩磨性無機物の比抵抗値が１×１００・ｍ以下で
   ある、特許請求の範囲第１項から第４Ｊ）Ｌのいずれか
   記載の血液ｉｉＬ固促進剤 ６、　担体表ｍｌにおける晒庸性無機物の存在ｉ１か１
   ×１０’−”　’　０−Ｖ／１ｒｌｌである、４’ｚ　
   ｈ請求の範囲第１鳴から第１５項のいずれがｓｔｉ戦の
   血液凝固促進剤