FI57421B - Foerfarande foer framstaellning av ett preparat ur maenniskoblodplasma med blodets koagulation befraemjande verkan - Google Patents

Foerfarande foer framstaellning av ett preparat ur maenniskoblodplasma med blodets koagulation befraemjande verkan Download PDF

Info

Publication number
FI57421B
FI57421B FI772408A FI772408A FI57421B FI 57421 B FI57421 B FI 57421B FI 772408 A FI772408 A FI 772408A FI 772408 A FI772408 A FI 772408A FI 57421 B FI57421 B FI 57421B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
factor
feiba
activity
plasma
vii
Prior art date
Application number
FI772408A
Other languages
English (en)
Other versions
FI772408A (fi
FI57421C (fi
Inventor
Johann Eibl
Otto Schwarz
Fritz Elsinger
Original Assignee
Immuno Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Immuno Ag filed Critical Immuno Ag
Publication of FI772408A publication Critical patent/FI772408A/fi
Publication of FI57421B publication Critical patent/FI57421B/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI57421C publication Critical patent/FI57421C/fi

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/745Blood coagulation or fibrinolysis factors
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/827Proteins from mammals or birds
    • Y10S530/829Blood
    • Y10S530/83Plasma; serum
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S930/00Peptide or protein sequence
    • Y10S930/01Peptide or protein sequence
    • Y10S930/28Bound to a nonpeptide drug, nonpeptide label, nonpeptide carrier, or a nonpeptide resin

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • External Artificial Organs (AREA)

Description

F55F71 [B] (11)*UULUTUSJULKAISU ΖΠ A
c (4S) l····' u ^ ::'- ^ ^ (51) K».ik.3/intci.3 C 07 G 7/00, A 61 K 35/16 SUOM I — FI N LAN D (21) PK*nttH»k*»Mi« — PattntaiMdkjilng 772^08 (22) H«k«mlipilvi — Antöknlngtdig 10. 08.7 7 (23) Alkupllvi—GiM(h«tad«| 10.08.77 (41) Tulhit JulklMksi — Bllvit offwttllg 01.03*78
Patentti· ja rakl.t.rihallitu. Nihavilcip™ „ kuuLjullatam pvm. _
Patent· och ragiatantyralaan Amftktn utkgd och uti.*krtft«n pubiicand 30.0U. 80 (32)(33)(31) Pyydetty «tuoikout—Begird priorltvt 30.08.76
Itävalta-Österrike(AT) A 6405/76 (71) "Immuno" Aktiengesellschaft fiir chemisch-medizinische Produkte,
IndustrLestrasse 72, 1220 Wien, Itävalta-Österrike(AT) (72) Johann Eibl, Wien, Otto Schwarz, Wien, Fritz Elsinger, Wien, Itävalta-Österrike(AT) (7*0 Oy Kolster Ab (5^) Menetelmä veren hyytymistä edistävän preparaatin valmistamiseksi ihmisen veriplasmasta - Förfarande för framställning av ett preparat ur människo-blodplasma med blodets koagulation befrämjande verkan
Keksinnön kohteena on menetelmä veren hyytymistä edistävän preparaatin valmistamiseksi ihmisen veriplasmasta, joka preparaatti sisältää uutta, veren hyytymiseen vaikuttavaa ainetta, nimeltään "FEIBA".
Tämä aine vaikuttaa uudella tavalla veren hyytymiseen ja korvaa faktori VIII:n vaikutuksen, mikä merkitsee, että veren hyytyminen ilman faktori VIII:n lisäystä normalisoituu. Preparaatti soveltuu erityisesti hemofilia A:ta potevien potilaiden käsittelyyn, potilaiden, joilla on faktori VIII:n inhibiittori. lyhennys "FEIBA" on muodostettu sanoista "Factor Eight Inhibitor-Bypassing Activity".
Hemofilia A on jo kauan tunnettu sairaus (verenvuototauti), jossa veren hyytyminen on häiriintynyt erään verenhyytymistekijän aktiivisuuden puuttumisen vuoksi. Tätä tekijää nimitetään antihemofiliatekijäksi (AHF) tai faktori Villiksi. Parantuminen sellaisenaan tästä synnynnäisestä, geenidefektistä johtuvasta sairaudesta, ei ole mahdollista. Hoitona voidaan käyttää - verenvuodon sattuessa - faktori Villin 2 57421 vastaavan määrän antamista laskimoon, mikä tekijä on peräisin terveen luovuttajan verestä. Kun aikaisemmin oltiin kokoveren tai kokoplasman varassa, jota oli annettava suuret määrät, on nykyisin valmisteita, jotka sisältävät faktori VIII:n konsentroidussa ja myös stabiilimmassa sekä jäädytyskuivatussa muodossa. Näillä valmisteilla suoritettu hoito johtaa useimmissa tapauksissa nopeaan veren vuodon tyrehtymiseen.
On kuitenkin myös potilaita, joilta ei puutu ainoastaan faktori VIII:n aktiivisuus, vaan joilla on faktori VIII:n inhibiittori, joka - läsnäolevasta määrästä riippuen - inhibition kautta estää lisätyn faktori VIII:n vaikutuksen. Näillä faktori VIII-inhibiittori-potilailla on tähän mennessä ollut vähän toiveita menestyksellisestä hoidosta. Ainoa mahdollisuus on ollut poistaa inhibiittori ennen faktori VIII-konsentraatilla tapahtuvaa käsittelyä, mikä on mahdollista vain suorittamalla potilaan plasman vaihto terveen henkilön plasmaa tai plasmakorviketta vastaan; tämä vaatii suuria teknisiä ja lääketieteellisiä kustannuksia. Plasman vaihto täytyy toistaa ennen uutta käsittelyä, koska inhibiittori, erityisesti uuden faktori VIII:n lisäyksen jälkeen, syntyy jälleen antigeeninä "booster-effek-tin" kautta. Inhibiittorin omaavien potilaiden käsittely immunosuppressiiviaineella in vivo inhibiittorin synteesin tukahduttamiseksi on tähän mennessä ollut enimmäkseen tuloksetonta.
Vähän aikaa sitten on esitetty faktori VIII-inhibiittori-potilaiden uusi hoitomahdollisuus. Kurczynski ja Penner, New Engl. J. Med., voi. 291, sivut 16U-167, 1971+» julkaisivat ensimmäisinä artikkelin faktori VIII-inhibiittori-potilaiden menestyksellisestä käsittelystä niin sanotulla aktivoidulla protrombii-nikompleksikonsentraatilla. Myös julkaisuissa Suitan, Brouet ja Debre, New Engl.
J. Med., voi. 291» sivu 1087, 197^ ja Abildgaard, Britton ja Roberts, Blood, voi. 1+1+, sivu 933, 1971+ esitetään kokemuksia aktivoidun protrombiinikompleksivalmisteen kliinisesti menestyksellisestä käytöstä vuotavien faktori VIII-inhibiittoripoti-laiden hoidossa.
Tämän protrombiinikompleksikonsentraatin aktivointi johtuu todennäköisesti tuntemattomista epäpuhtauksista. Valmisteita ei ole voitu tutkia vaikuttavan aineensa suhteen eikä standardisoida. Tulokset ovat sen tähden epävarmoja ja tuskin toistettavia.
Keksinnön kohteena on kuvattujen haittojen ja vaikeuksien voittaminen ja sen tarkoituksena on saada aikaan preparaatti, joka toistettavalla ja tarkoituksenmukaisella tavalla takaa FEIBA-aktiivisuuden. FEIBA-aktiivisuus tulee olla mitattavissa ja standardisoitavissa soveliaan koemenetelmän avulla. Preparaatin tulee olla aktiivisesti tehokas ja sopiva, ts. saadaan aikaan vuotavilla faktori VIII-inhibiittori-potilailla verenvuodon tyrehtyminen eikä sillä tule olla ei-toivottuja sivuvaikutuksia.
57421
Uutta preparaattia valmistettaessa lähtömateriaalina käytetään ihmisen sitraattiplasmaa, jossa kaikki hyytymistekijät ovat natiivissa muodossa; voidaan käyttää myös plasmafraktioita, jotka jäävät jäljelle faktori VIII:n (AHF) erottamisen jälkeen, kuten esimerkiksi kryosaostuman tai Cohn'in saostuma L:n plasma-jäännettä.
On tarkoituksenmukaista käyttää veteen liukenemattania, epäorgaanisia, koagulointifysiologisia, pinta-aktiivisiä aineita 0,05~5 %r etupäässä 0,1-1 % plasman määrästä.
Plasman käsittelyyn voidaan käyttää aineita, jotka ovat suureksi osaksi hie-nojakoista piidioksidia, esim. piimaata Celit.^ (valmistaja Johns-Manville Internat. Corp., New York), tai aineita, jotka koostuvat piidioksidista ja alumi-niumoksidista, esim. kaoliinia. Yleensä soveltuvat aineet, jotka ovat veren hyyty-misjärjestelmässä tunnettuja pinta-aktiivisina aineina, jotka voivat pinta-aktiivisuutensa vuoksi panna alkuun veren hyytymisen kosketusvaiheen. Kun näiden aineiden avulla, pinta-aktiivisuuden johdosta aktivoituvat hyytymistekijät (faktori XI ja XII) adsorboidaan tässä vaiheessa, aktivoidussa muodossaan, faktorit II, VII, IX, X muodostuneen FEIBA-yhdisteen kanssa jäävät jäljelle ja voidaan pinta-aktiivisten, veteen liukenemattomien aineiden poistamisen jälkeen erottaa tai konsentroida käyttämällä tunnettuja menetelmiä. Myöhemmissä vaiheissa voidaan käyttää esim. heikosti emäksisiä ioninvaihtajia, dietyyliaminoetyyli (DEAE)-ryhmiä sisältäviä suuri-molekyylisiä aineita, esim. DEAE sidottuna selluloosaan tai ristisidoksia sisältävään dekstraaniin, on osoittautunut soveliaaksi. Adsorboimalla mainittuihin io-ninvaihtajiin, pesemällä ja eluoimalla adsorboidut plasmaproteiinit nostaen ioni-vahvuutta, voidaan eristää proteiinifraktio, joka sisältää FEIBA-aktiivisuuden puhdistetussa ja rikastetussa muodossa. Poistamalla suolat ja suorittamalla lisäksi jäädytyskuivaus, saadaan raaka, FEIBA-aktiivisuutta sisältävä fraktio kuivassa, stabiilissa muodossa. Tästä saadaan valmis valmiste liuottamalla se uudelleen veteen, lisäämällä suoloja, säätämällä pH, steriilisuodatuksen ja toistetun jää-dytyskuivauksen avulla.
11 57421
Keksinnön mukaisten valmisteiden ominaisuuksien tutkimukset todistivat, että faktori Ilatlla ja Xarlla ei ollut osuutta FEIBA-aktiivisuuteen. Vähäiset määrät trombiinia, jota voi olla keksinnön mukaisissa valmisteissa, eivät lyhennä faktori VIII-inhibiittoriplasman aktivoitua, osittaista tromboplastiiniaikaa. Myöskään soijapapu-trypsiini-inhibiittori, joka on tunnettu faktori Xa-aktiivisuuden inhibiittori, ei estä valmisteen FEIBA-aktiivisuutta. Geelikromatografisten tutkimusten perusteella on osoittautunut, että uudella aineella on suurempi mole-kyylipaino kuin proirombiinikompleksin tunnetuilla faktoreilla II, VII, IX ja X.
Kun viimeksi mainittujen tekijöiden molekyylipaino on noin 70 000, on uuden aineen molekyylipaino noin 100 000. Koska protrombiinikompleksin aktivoidut tekijät syntyvät siten, että vastaavasta natiivista (ei aktivoidusta) hyytymistekijästä osa lohkeaa entsymaattisesti, syntyy tällöin pienempiä molekyylejä kuin vastaavien ei-aktivoitujen tekijöiden molekyylit, on varmuudella oletettava, että FEIBA-aktiivisuus keksinnön mukaan valmistetuissa valmisteissa ei vaikuta protrombiinikompleksin aktivoidun tekijän välityksellä, vaan juuri suuremman molekyylipainon omaavan, uuden syntyneen aineen välityksellä.
Uuden aineen tunnusmerkkinä voidaan käyttää toisaalta hyytymistekijöiden II, VII, IX ja X:n aktiivisuuksien suhdetta FEIBA-aktiivisuuteen: tämä suhde, yksikköinä ilmaistuna, on 0,1:n ja 10:n välillä, etupäässä 0,5:n ja 2:n välillä, jolloin yksi yksikkö faktoria II, VII, IX, X vastaa tämän tekijän aktiivisuutta, joka keskimäärin sisältyy 1 ml:aan tuoretta ihmisen sitraattiplasmaa, ja yksi FEIBA-yksikkö on määritetty sinä FEIBA-aktiivisuutena, joka lyhentää korkeatiit-terisen faktori VIII-inhibiittoriplasman aktivoidun, osittaisen tromboplastiini-ajan puoleen tyhjäkokeen arvosta. Toisaalta voidaan uuden yhdisteen tunnusmerkkinä käyttää myös sen amidolyyttistä aktiivisuutta. Amidolyyttisellä aktiivisuudella tarkoitetaan aineen kykyä lohkaista standardisoiduista peptidisidoksista, jotka ovat amidisidoksella sidotut p-nitroaniliinikromoforiin, p-nitroaniliini, joka määritetään fotometrisesti. Toiminimi Kabi Ruotsissa valmistaa standardisoituja peptidivalmisteita; S-2160 N-bentsoyyli-L-fenyylialanyyli-L-valyyli-L-arginiini-p-nitroanilidi.HC1 (lyhennettynä: Bz-Phe-Val-Arg-p-nitroanilid.HCl) on spesifinen trombiinille, S-2222 N-bentsoyyli-L-isoleusyyli-L-glutanyyli-L-glysyyli-L-arginyyli-p-nitroanilidi.HCl (lyhennettynä: Bz-Ile-Glu-Gly-Arg-p-nitroanilid.HCl), spesifinen Xa:lle ja S-2251 D-Valyyli-L-leusyyli-L-lysyyli-p-nitroanilid.2HCl (lyhennettynä: D-Val-Leu-Iys-p-nitroanilid.2HCl) on spesifinen plasmiinille. Kun tutkitaan keksinnön mukaiset valmisteet mainittujen substraattien suhteen, niin havaitaan vähäistä amidolyyttistä aktiivisuutta, joka ei ole huomion arvoista. Toisaalta osoittaa trombiinia tai faktori Xa:a sisältävää valmistetta koskeva koe, kun trombiini tai faktori Xa säädetään siihen FEIBA-aktiivisuuteen, joka on keksinnön mukaisella valmisteella, suurta amidolyyttistä aktiivisuutta.
5 57421
Keksinnön mukaisen valmisteen eräs tunnusmerkki on edelleen se, että sillä on vain vähäistä trombiiniaktiivisuutta tai ei ollenkaan. Trombiiniaktiivisuuden suhde FEIBA-aktiivisuuteen ei ylitä arvoa 0,02, jolloin trombiinin aktiivisuus on ilmaistu NIH-yksiköissä (NIH = US-National Institute of Health) FEIBA-aktiivi-suus on ilmaistu FEIBA-yksiköissä.
Seuraavissa esimerkeissä kuvataan FEIBA-tuotteen valmistusta ja ominaisuuksia.
Esimerkki 1
Tuoreena jäädytetty plasma sulatetaan 0-U°C:ssa ja tällöin muodostuva kryo-saostuma erotetaan sentrifugoimalla. Kevyemmän fraktion pH säädetään 7>0:aan 0,5n suolahapolla, kevyempään fraktioon lisätään litraa kohti 5 g kaoliinia ja sitä sekoitetaan +4°C:ssa yhden tunnin ajan. Tämän jälkeen kaoliini erotetaan sentrifugoiden. Syntynyt aine, FEIBA, adsorboidaan liuoksesta yhdessä protrombiini-kompleksin tekijöiden kanssa DEAE-Sephadexiin.
Tätä tarkoitusta varten yhteen litraan kaoliinikäsittelyn jälkeen saatua kevyempää fraktiota lisätään 0,5 g DEAE-Sephadex A~50 ja sekoitetaan puolen tunnin ajan +1+°C:ssa. DEAE-Sephadex erotetaan; jäljelle jäänyt plasma voidaan käyttää gammaglobuliinin ja albumiinin saantiin; DEAE-Sephadex pestään kaksi kertaa trinatriumsitraatti-natrium-kloridiliuoksella, jolloin pH-arvo pidetään 7,5:ssä.
Eluointia varten sekoitetaan DEAE-Sephadexia 3 % natriumkloridin, 0,1 % trinatriumsitraatti^H^Orn kanssa (2 % alkuperäisestä plasman tilavuudesta) 20 minuutin ajan ja eluaatti otetaan talteen suodattamalla. Se dialysoidaan yön yli +i*°C:ssa 0,05 % trinatriumsitraatti.2^0, 0,1 % natriumkloridiliuosta, pH 7, vastaan, sen jälkeen jäädytetään ja suoritetaan ensimmäinen lyofilisaatio (bulk). "Bulk"-materiaalista määritetään FEIBA-aktiivisuus sekä protrombiinikompleksin tekijöiden aktiivisuus.
Farmaseuttisesti käyttökelpoisten valmisteiden valmistamista varten tulee faktoreiden II, VII, IX, X yksiköiden suhde FEIBA-yksiköihin olla 0,5~2; se voidaan saada sekoittamalla sopivia "bulk"-eriä. "Bulk"-materiaali liuotetaan tislatulla, pyrogeenittömällä vedellä, niin että FEIBA-aktiivisuus on 10-50 FEIBA-yksikköä ml:a kohti (kyseessä olevassa tapauksessa 25 FEIBA-yksikköä ml:a kohti). Tarvittavien suolojen lisäyksen jälkeen, isotonisuuden aikaansaamiseksi ja pH:n 6 57421 säätämistä varten 7»0-7»5:ksi, liuos kirkastetaan membraanisuodattimen avulla ja lopuksi steriloidaan suodattamalla 0,2 pm membraanisuodattimen läpi. Liuos täytetään steriileissä olosuhteissa 20 ml:n säilytysastiaan, syväjäähdytetään ja lyofilisoidaan.
Esimerkki 2 Lähtömateriaalina on tuore, jäädytetty plasma tai siitä saatu kryojäännös. Kryojäännökseen lisätään ilman pH:n säätöä (natiivi pH = 7,ö) 10 g Celit^ 512 (piimaata, valmistaja Johns-Manville Internet. Corp., New York) yhtä litraa kohti ja sekoitetaan kolme tuntia +k°C:ssa. Sen jälkeen, kun Celit® on erotettu sent-rifugoimalla, jatketaan FEIBA-valmisteen valmistamista samalla tavalla kuin esimerkissä 1.
Valmiista valmisteista määritettiin steriiliyden, vaarattomuuden ja pyro-geenittömyyden suhteen suoritettavien tavanomaisten varmuuskokeiden rinnalla HBs~ antigeenin puuttumistesti aktiivisuuteen (FEIBA-aktiivisuuteen) nähden, protrom-biinikompleksitekijä- ja trombiinisisältö samoin kuin amidolyyttinen aktiivisuus kolmea substraattia S-2160, S-2222 ja S-2251 kohtaan.
Mainitut kokeet suoritettiin seuraavasti kuvatulla tavalla: 1. Aktiivisuuden määrittäminen (FEIBA-yksiköiden määrittäminen) a) Reagenssit:
Faktori VIII-inhibiittoriplasma:
Lyofilisoitu sitraattiplasma hemofilia A:a potevasta potilaasta, jolla on inhibiittori faktori VIII vastaan (inhibiittoritiitteri vähintään 10 yksikköä ml:a kohti). Koejakson aikana pidetään inhibiittariplasma jäähauteessa.
Fosfolipidi-kaoliini-suspensio:
Fosfolipidikonsentraatti (Tachostyphan, Hormon Chemie Munchen) laimennetaan suhteessa 1:200 Owren-puskuriin (11,75 g natriumdietyylibarbituraattia ja lk,67 g NaCl liuotettuna seokseen, joka sisältää 1 570 ml tislattua vettä ja k30 ml 0,1-n HC1; pH 7»35) ja sekoitetaan 5 % kaoliinin kanssa (paino/tilavuus) (0,5 g 100 ml:ssa). Seos säilytetään syväjäädytettynä. Koejakson aikana pidetään se huoneen lämpötilassa.
τ 57421
Sitraatti-/keittosuolaliuos kokeen laimennusaineena: 0,7 % natriumkloridi/0,7 % natriumsitraatti·2Η^0 m/20 kaisiurakloridi: pidetään kokeen aikana 37°C:ssa.
b) Koemenetelmä:
Kun tutkittava FEIBA-kokeen fraktio ja FEIBA-standardivai-miste, jonka FEIBA-yksiköt ml:a kohti on määritetty, on liuotettu ilmoitettuun määrään tislattua vettä, valmistetaan käyttämällä sit-raatti-/keittosuolaliuosta 6 geometrista laimennusta, jolloin aloitetaan konsentraatiolla 5 FEIBA-yksikköä millilitraa kohti. Nämä laimennukset pidetään koejakson aikana jäähauteessa. Reagenssit pipetoidaan seuraavalla tavalla lasiputkiin: 0,05 ml tekijä VIII -inhibiittoriplasmaa 0,05 ml näytettä (koenäytteiden ja standardien laimennukset, samoin myös sitraatti-/keittosuolaliuos tyhjäkokeena) 0,05 ml fosfolipidi-kaoliini-suspensiota inkuboidaan 6 minuuttia 37°C:ssa 0,05 ml m/20 kai siumkloridia.
Mitataan sekuntikellolla aika kalsiumkloridin lisäyksestä hyytymän muodostumiseen (kallistamalla koeputkia tai käyttämällä automaattista koaguloitumismittaria).
c) FEIBA-yksiköiden määrittäminen pulloa kohti:
Laaditaan kaiibrointikäyrä, jossa esitetään kaksoislogarit- misella millimetripaperilla FEIBA-standardivalmisteen laimennusten hyytymisajat (sekunteina) vastaavia konsentraatioita (FEIBA-yksi-köissä ml:a kohti) vastaan. Koenäytelaimennusten FEIB-aktiivisuu-det lasketaan käyttämällä kalibrointikäyrää ja kertomalla vastaa-- valla laimennustekijällä. Näiden tulosten keskiarvo vastaa koenäyt- teen FEIBA-aktiivisuutta FEIBA—yksikköinä millilitraa kohti ilmaistuna. Kun tämä arvo kerrotaan liuostilavuudella (mi 11ilitroissa) , saadaan FEIBA-yksiköiden kokonaismäärä pulloa kohti.
2. Hyytymistekijöiden II, VII, IX ja X aktiivisuuden määrittäminen.
A) Faktori II -määritys: a) Reagenssit:
Seerumi: terveen henkilön verta (ilman hyytymistä estävää e 57421 ainetta) inkuboidaan 2k tuntia 37°C:ssa. Verestä erotetaan seerumi, sentrifugoidaan, jaetaan osiin ja säilytetään syväjäädytettynä.
Naudan oksalaattiplasma, bariumsulfaatilla adsorboitu (tekijä V:n lähtömateriaalina ja laimennusaineena kokeita varten): yhdeksän osaa naudan verta sekoitetaan yhden osan kanssa 1,3U % nat-riumoksalaattia. Saatu plasma adsorboidaan 10 % bariumsulfaatilla. Sentrifugoinnin jälkeen adsorboitu plasma jaetaan osiin ja säilytetään syväjäädytettynä.
"Thromborel" (kalsiumia sisältävä ihmisen "Thromboplastin") Behringwerke AG, Marburg-Lahn.
b) Koemenetelmä:
Reagenssit (paitsi Thromborel, säilytetään kokeen kuluessa jäähauteessa) pipetoidaan seuraavasti lasiputkiin: 0,05 ml seerumia 0,05 ml näytettä (määritettävän näytteen tai normaaliplas-man tai standardin laimennussarjaa) inkuboidaan 37°C:ssa minuutin ajan 0,2 ml Thromborel (on pidettävä kokeen kuluessa 37°C:ssa)
Mitataan sekuntikellolla aika, joka kuluu Thromborelin lisäämisestä hyytymän muodostumiseen.
c) Faktori II -konsentraatioiden laskeminen:
Standardiplasma valmistetaan vähintään 15 terveen luovuttajan poolatuista plasmanäytteistä. Tätä plasmapoolia pidetään "normaal iplasmana" ja sen faktori II -aktiivisuus oletetaan 100 $:ksi. Laaditaan kaiibrointikäyrä, jolla esitetään, kaksoislogaritmista millimetripaperia käyttäen, tämän poolatun plasman laimennussarjan näytteiden (laimentamaton, 1:2, 1:U, 1:8 ...) hyytymisajat vastaavia konsentraatioita vastaan. Koenäytelaimennusten faktori II -kon-sentraatiot ilmaistaan prosentteina normaalista plasmasta käyttäen apuna kalibrointikäyrää ja kerrotaan vastaavalla laimennustekijällä. Tämän tuloksen keskimääräinen arvo vastaa koemateriaalin aktiivisuutta faktori II:n prosentteina. Yhdessä pullossa olevan faktori II:n määrä lasketaan seuraavan kaavan mukaan: faktori II _ (faktori II:n konsentraatio %) x (tilavuus ml:na) yksiköt 100 9 57421
Faktori II:n yksi yksikkö on yhtä suuri kuin sen faktori II:n aktiivisuus, joka keskimäärin sisältyy 1 ml:aan tuoretta sitraattiplasmaa.
B) Faktori Vll-määritys: a) Reagenssit:
Faktori VII-puuteplasma. Sitraattiplasma potilaasta, jolla on voimakas faktori VII:n puute (faktori VII alle 1 %), varastoidaan syväjäädytettynä tai lyofilisoituna sen jälkeen kun on lisätty 1 % paino/tilavuus HEPES-puskuria (N-2-hydroksietyylipiperatsiini-N-2-etaanisulfonihappo) pH-arvon ollessa 7,0.
Näytteen laimennusaineena keittosuolaliuos, johon on lisätty sitraattia: 0,7 % trinatriumsitraatti.211^0, 0,7 % natriumkloridi.
"Thromborel" kalsiumpitoinen ihmisen "Thromboplastin" Behringwerke AG, Marburg/Lahn.
b) Koemenetelmä:
Puuteplasma ja näytteen laimennin säilytetään jäähauteessa. "Thromborel" pidetään kokeen aikana 37°C:ssa.
Reagenssit pipetoidaan lasiputkeen seuraavalla tavalla: 0,05 ml faktori VII-puuteplasmaa 0,05 ml näytettä (tutkittavan näytteen, "normaali plasmaa" tai standardin laimennus s arj a)
Minuutin inkubointi 37°C:ssa 0,2 ml "Thromborel".
Sekuntikellolla mitataan aika "Thromborelin" lisäyksestä hyytymän muodostumiseen.
c) Faktori VII-konsentraation laskeminen:
Faktori VII-konsentraation laskeminen suoritetaan samalla tavalla kuin faktori II:lie.
C) Faktori IX-määritys: a) Reagenssit:
Faktori IX-puuteplasma: vaikeaa hemofilia B:a potevan potilaan sitraattiplasma (faktori IX alle 1 %), säilytetty syväjäädytettynä.
Fosfolipidi/kaoliini-suspensio: fosfolipidi-konsentraatti (Tachostyphan, Hormon Chemie Miinchen) laimennetaan 1:200 Owrenin 10 57421 puskurilla, sekoitetaan kaoliinin kanssa (0,5 g per 100 ml) ja säilytetään syväjäädytettynä. Naudan oksalaattiplasma absorboitu ba-riumsulfaatilla, näytteen laimennusaineena: 9 osaa naudanverta sekoitetaan yhden osan kanssa 1,3U % natriumoksalaattia. Saatu plasma absorboidaan 10 % bariumsulfaatilla. Sentrifugoinnin jälkeen jaetaan absorboitu plasma osiin ja säilytetään syväjäädytettynä.
m/20 kalsiumkloridi b) Koemenetelmä:
Faktori IX -puuteplasman inkubointi fosfolipidi/kaoliini-suspension kanssa: tarpeellinen määrä puuteplasmaa sekoitetaan yhtä suuren tilavuuden kanssa fosfolipidi/kaoliini-suspensiota, inkuboi-daan 37°C:ssa viiden minuutin ajan ja pidetään sitten 30 minuutin ajan jäähauteessa.
Reagenssit (paitsi kalsiumkloridi, säilytetään kokeen kulues-sajäähauteessa) pipetoidaan seuraavalla tavalla koeputkeen: 0,2 ml inkuboitua puuteplasma-fosfolipidi/kaoliini-suspensio-ta 0,1 ml näytettä (tutkittavan näytteen tai normaaliplasman tai standardin laimennussarja) inkuboidaan minuutti 37°C:ssa 0,1 ml m/20 kalsiumkloridia (on pidettävä kokeen kuluessa 37°C:s sa)
Mitataan sekuntikellolla aika kalsiumkloridin lisäämisestä hyytymän muodostumiseen.
c) Faktori IX -konsentraation laskeminen:
Faktori IX -konsentraation laskeminen suoritetaan samalla tavalla kuin faktori II:n yhteydessä on kuvattu.
D) Faktori X:n määrittäminen: a) Reagenssit:
Faktori X -puuteplasma: vaikeasta faktori X:n puutteesta kärsivän potilaan sitraattiplasma (faktori X:n määrä alle 1 #:n) säilytetty syväjäädytettynä ja lyofilisoitu, kun 1 % HEPES:a on lisätty ja pH:n arvo on säädetty 7,0:aan.
Sitraatti-keittosuolaliuos näytteiden laimennusaineena: 0,7 % natriumklor idi/0,7 % natriumsitraatti · 211^0 .
11 57421 "Thromborel" (kalsiumpitoinen, ihmisen Thromboplastin),
Behring-Werke AG, Marburg/Lahn.
b) Koemenetelmä:
Reagenssit (Thromboreliä lukuunottamatta säilytetään kokeen aikana jäähauteessa) pipetoidaan seuraavalla tavalla lasiputkeen: 0,05 ml tekijä X -puuteplasmaa 0,05 ml näytettä (tutkittavan näytteen tai "normaalia plasmaa" tai standardin laimennussarja) inkuboidaan 37°C:ssa minuutin ajan 0,2 ml Thromborel (pidettävä kokeen kuluessa 37°C:ssa).
Mitataan sekuntikellolla aika Thromborelin lisäämisestä hyytymän muodostumiseen.
c) Faktori X:n konsentraation laskeminen:
Faktori X:n konsentraation laskeminen suoritetaan samalla tavalla kuin faktori II:n yhteydessä on kuvattu.
3* Trombiinikoe.
a ) Reagenssit:
Ihmisestä saatua fibrinogeenia 1 %:n liuoksena standardisoitu trombiini (Topostasin, Roche, 3 000 NIH-trombiini -yksikköä pulloa koht i) 0,7 % natriumkloridi/0,7 % natriumsitraatti. 2Η^0 laimennus-aineena (sitraatti-/keittosuolaliuos).
b) Koemenetelmä:
Kun lyofilisoitu tuote on liuotettu ilmoitettuun määrään tislattua vettä, valmistetaan siitä kuusi geometrista laimennusta käyttämällä sitraatti-/keittosuolaliuosta ja standardisoidusta trom-biinista valmistetaan saman laimentimen avulla kahdeksan geometrista laimennusta, jolloin laimennussarja alkaa 1 NIH-yksiköllä per ml .
Koemenett ely: 0,2 ml 1 %:sta fibrinogeeniliuosta ja 0,2 ml näytettä (FEIBA-fraktion ja trombiinin laimennukset sekä tyhjäkoe käyttäen sitraatti-/keittosuolaliuosta) inkuboidaan 37°C:ssa. Aika hyytymän muodostumiseen mitataan kallistamalla koeputkia aina pitenevien aikavälien - 10 minuutista tuntiin - kuluttua.
,2 57421
Kokeen kulku kestää vähintäin kuusi tuntia. Viimeinen putkien kallistus suoritetaan yön yli tapahtuneen inkuhoinnin kuluttua. Tyhjä-kokeen (laimennusaine näytteenä) tulee säilyä stabiilina yli yön (ei hyytymän muodostumista).
c) Trombiinin konsentraation laskeminen:
Laaditaan kalibrointikäyrä, jolla esitetään trombiinistan-dardin geometristen laimennusten hyytymisajat vastaavia konsentraa-tioita vastaan (trombiiniyksiköt ml:a kohti) kaksoilogarit s emi s elia millimetripaperilla. Tutkittavan näytteen laimennusten trombiini-konsentraatiot lasketaan käyttäen kalibrointikäyrää ja kertomalla vastaavalla laimennustekijällä. Näiden tulosten keskiarvo, ilmaistuna trombiiniyksikköinä ml:a kohti, vastaa tutkittavan näytteen trom-biiniaktiivisuutta. Kun tämä arvo kerrotaan liuostilavuudebla miina, niin saadaan trombiiniyksiköiden kokonaism-ärä pulloa kohti.
U. Amidolyyttisen aktiivisuuden määrittäminen.
a) Reagenssit:
Kromogeenisubstraatit: S-2l60: N-Bent soyyli-L-fenyylialanyyli-L-valyyli-L-argini i-ni-p-nitroanilidi-HCl (Lyhennettynä: Bz-Phe-Val-Arg-p-nitroani-lid'HCl) 0,5 mg/ml H^O = 0,73 mmoolinen S-2222: N-Bent soyyli-L-i soleusyyli-L-glutamyyli-L-glysyyli-L-arginyyli-p-nitroanilidi *HC1 (Lyhennettynä: Bz-Ile-Glu-Gly-Arg-p-nitroanilid · HC1 ) 1,1» mg/ml H^O = 1,91 mmoolinen S-2251: D-Valyyli-L-leusyyli-L-lysyyli-p-nitroanilidi·2Η01 (Lyhennettynä: D-Val-Leu-Lys-p-nitroanilid·2HC1) 1,65 mg/ml H^O * 2,99 mmoolinen.
Puskuri: 6.06 g "Tris" (Tris(hydroksimetyyli)-aminometaani) * 0,05 moolinen 10.6 g natriumkloridia = 0,l8 moolinen
Liuotetaan litraan tislattua vettä. pH-arvo säädetään konsentroidulla suolahapolla 7,l+:än.
b) Kokeen kulku: 1,0 ml puskuria 13 57421 0,1 ml näytettä (FEIBA:a sisältävä valmiste) 0,2 ml substraattia (S-2l60 tai S-2222 tai S-2251)
Seos kaadetaan 37°C:een termostoituun kyvettiin (kyvetin läpimitta 1 cm) ja mitataan fotometrillä, yhden minuutin välein, optisen tiheyden lisääntyminen U05 nmussä.
c) Tulosten arviointi: Vähintään viidestä yksittäismittauksesta lasketaan optisen toheyden keskimääräinen lisääntyminen minuuttia kohti ja kerrotaan 1000:11a; tämä arvo merkitään AQD.10 /min. ja sitä käytetään luonnehtimaan tutkitun näytteen amidolyyttistä aktiivisuutta (entsyymiaktiivisuutta) kulloinkin käytetyn substraatin suhteen.
Kun mitatut A. CD.10 /min.-arvot jaetaan näytteen aktiivisuulella FEIBA-yksikköinä 0,1 ml:ssa (käytetty näytteen määrä) tai faktori II, VII, IX, X-yksik-köinä 0,1 ml:ssa, saadaan kullekin näytteelle, mainituissa olosuhteissa, karakteristinen, "spesifinen amidolyyttinen aktiivisuus", ts. yhtä FEIBA-yksikköä tai yhtä faktori II, VII, IX, X-yksikköä vastaava ΛCD.10 /min.-arvo.
Esimerkkien 1 ja 2 mukaan valmistettujen valmisteiden ominaisuudet on esitetty taulukossa I.
Taulukossa I on myös esitetty seuraavien rakenteeltaan läheisten, kaupa-lisesti saatavien valmisteiden ominaisuudet: PPSB Behring Institut Valmisteen nimi: PPSB-protrombiinikonsentraatti, joka sisältää hyytymisfakfcoifit II, VII, X, IX.
Valmistaja: Behringwerke Marburg, Saksan Liittotasavalta PPSB Biotest Valmisteen nimi: PPSB-konsentraatti 500 (protrombiinikompleksi, peräisin ihmisestä) Valmistaja: Biotest-Serum-Institut GmbH, Frankfurt am Main, Saksan Liittotasavalta.
PPSB Intersero Valmisteen nimi: PPSB-konsentraatti, peräisin ihmisestä. Sisältää konsentroituneena Protrom-biinia (faktori II), Prokonvertiinia (faktori VII), Stuart-Prower-Faktoria (faktori X), Antihemolifaktori B:tä (faktori IX).
Valmistaja: Intersero AG, Zurich, Sveitsi.
Faktor-IX-komplex SRK Valmisteen nimi:
Faktor IX-komplex SRK
Valmistaja: Blutspendedienst des Schveizer Roter Kreuzes.
XU 57421 X ·Η Μ Μ rj
, B OOOO O A O O
In (tl ^ LA A A A
O H K O O CM CM CM CM
P PiM H
s §
Pm W O
Ö rj ra s oooo o o-3-o
„ B OOOO H
PQ Cl O O LA IA LA LA
CO -P A
di C Pk H
P
ra H
ω B oooo o o oo σ\ pq p o oo o o
to O O O MO A A MO
Pk ·Η CM
CM PP
rt ·Η -3 OO O CO O O O O
B M P O O h- -3 0-3
COflWCM 00 A -3 A
dl ω pj
Pm m h_________ M CM r— r-, _&
MO 00 t— A O
O -H CO OM O C— O —' —n
JSd Jd "·>««*> H Om OO
Λ „2 OOHOO E— t~- -3 d O Pi rj —' — --- ^
rH <C S O a O H H
d PO O S o OOOO O ^ ^ O) M g ·Η O CO -3 MO O i—I ·>
H W § ra CM CM CM CM 00 CM H HACM
h H H »
CM
- ——————----- H ^ (Y-|
O H 0\ A O
•H POH-3HO r-* —*
,id - *> * - " OO CO O
2 HHHHO -3 CM f- O Mi H ·— —' -— —- — · · ·» < a o a o h h pqroa o oooo -3 MS -HO t— HCMO-3 « PP S ra CM -3 MO A t-— A M Moo-3
Pm H pq cd
c O
0) cd H
Ό oj O cd H
Λ O M O cd d -rt
O H H M O CM P
2 H P H H +3
d CM d H iod CU
S CM PM p :0 <U
>cd CM Jd P
h icd ·ο icd 2 ·η M :0 -!d :0 icd ·Η ^ d M 2 2 so ra ·η
CM 2 ·Η 2 M M
•h ra -rl 2 >> M
«d ra 2 « -H cd ra :o 2 S 2 w a
P dd X X Aj M G O CM H
P2 I P a Q) G MO CM A
S* -rl I I G ·Η H CM CM
cdra h i i -nadJCMOJ
H J«ä M H >d -P
•H p M > H X *H -P» 00 I I i
P G X O
ra I ·η ·η ·η tm ·η h η Β to β Ρ GGBGGPJGÖ -rt G H ·
P <C OtUOdlOtUOtU <U O Q
O fP POP-ÖPOPO 0 P TfO
Ρ m 2χ5λ1λ2λ2λ oä ·η<1 •h w roocdOdOroo PO θ ^ l-P Cl, ClhXC^XCmAJPmUlJ Ρ,* *3 — 15 57421
Suluissa olevat luvut ilmaisevat vastaavan suhteen FEIBA-yksiköihin nähden. Amidolyyttisen aktiivisuuden ollessa kysymyksessä, suluissa oleva luku on "spesifinen amidolyyttinen aktiivisuus", ts. vastaava ÄGD.lO^/min.-arvo käytettyä FEIBA-yksikköä kohti kuvatussa koesysteemissä.

Claims (1)

  1. 57421 16 Patenttivaatimus: Menetelmä veren hyytymistä edistävän sellaisen preparaatin valmistamiseksi ihmisen veriplasmasta, joka sisältää uutta, veren hyytymiseen vaikuttavaa ainetta, nimeltä "Factor Eight Inhibitor-Bypassing Activity" protrombiinikompleksin tekijöiden II, VII, IX»X lisäksi, tunnettu siitä, että sitraatti-ioneja sisältävää ihmisen veriplasmaa, josta faktori VIII on tarvittaessa poistettu ja joka sisältää protrombiinikompleksin, käsitellään, kun läsnä ei ole vapaita kalsiumioneja, veteen liukenemattomilla, epäorgaanisilla koagulointifysiologisilla pinta-aktiivisilla aineilla, kuten silikageelillä tai kaoliinilla, pH-alueella 5»5-8,5 ja lämpötilassa 0-30°C uuden veren hyytymiseen vaikuttavan aineen, nimeltä FEIBA, muodostamiseksi, jolloin hyytymisfaktorien aktiviteetin suhde FEIBA-aktiivisuuteen on 0,1-10 yksikköä, edullisesti 0,5~2, jolloin yksi yksikkö faktoria II, VII, IX, X vastaa niiden faktorien aktiivisuutta, jotka sisältyvät keskimäärin 1 ml:aan tuoretta ihmisen sitraattiplasmaa ja yksi FEIBA-yksikkö määritellään FEIBA-aktiviteettina, joka lyhentää korkeatiitterisen faktori VIII-inhibiittoriplasman aktivoidun, osittaisen tromboplastiiniajan puoleen verrattuna sokeankokeen aikaan, ja että veteen liukenemattomat aineet erotetaan ja heitetään pois ja vesifaasia käsitellään sinänsä tunnetulla tavalla emäksisillä ioninvaihtajilla kuten dietyyliaminoetyyliryhmiä sisältävillä suurimolekyylisillä aineilla, jolloin FEIBA-aine adsorboituu niihin yhdessä faktoreiden II, VII, IX, X kanssa, minkä jälkeen ioninvaihtaja pestään laimealla suolaliuoksella ja sitten FEIBA sekä faktorit II, VII, IX, X eluoidaan pesuliuosta väkevämmällä suolaliuoksella, eluaattiliuos dialysoidaan ja lopuksi väkevöidään lyofilisoimalla.
FI772408A 1976-08-30 1977-08-10 Foerfarande foer framstaellning av ett preparat ur maenniskoblodplasma med blodets koagulation befraemjande verkan FI57421C (fi)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
AT640576A AT350726B (de) 1976-08-30 1976-08-30 Verfahren zur herstellung einer blut- gerinnungsfoerdernden praeperation aus menschlichem blutplasma
AT640576 1976-08-30

Publications (3)

Publication Number Publication Date
FI772408A FI772408A (fi) 1978-03-01
FI57421B true FI57421B (fi) 1980-04-30
FI57421C FI57421C (fi) 1980-08-11

Family

ID=3585985

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI772408A FI57421C (fi) 1976-08-30 1977-08-10 Foerfarande foer framstaellning av ett preparat ur maenniskoblodplasma med blodets koagulation befraemjande verkan

Country Status (17)

Country Link
US (1) US4160025A (fi)
AR (1) AR213861A1 (fi)
AT (1) AT350726B (fi)
BE (1) BE858031A (fi)
CA (1) CA1079191A (fi)
CH (1) CH635747A5 (fi)
DE (1) DE2734821C3 (fi)
DK (1) DK151932C (fi)
ES (1) ES461918A1 (fi)
FI (1) FI57421C (fi)
FR (1) FR2362633A1 (fi)
GB (1) GB1554051A (fi)
HU (1) HU180816B (fi)
LU (1) LU78024A1 (fi)
NL (1) NL170922C (fi)
NO (1) NO148142C (fi)
SE (1) SE443511B (fi)

Families Citing this family (35)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2902158A1 (de) * 1979-01-20 1980-07-31 Biotest Serum Institut Gmbh Verfahren zur herstellung von fibrinogen, einem die gerinnungsfaktoren ii, vii, ix und x enthaltenden prothrombinkomplex, antithrombin iii und einer loesung von lagerstabilen serumproteinen
US4287180A (en) * 1980-01-28 1981-09-01 Baxter Travenol Laboratories, Inc. Method for treating blood clotting factor inhibitors
US4286056A (en) * 1980-01-28 1981-08-25 Baxter Travenol Laboratories, Inc. Method for making therapeutic enzyme compositions
WO1981002105A1 (en) * 1980-01-28 1981-08-06 Baxter Travenol Lab Therapeutic compositions & methods for manufacture and use
EP0035204B2 (en) * 1980-03-05 1991-05-22 Miles Inc. Pasteurized therapeutically active protein compositions
DE3172210D1 (en) * 1980-05-27 1985-10-17 Miles Lab Blood coagulation promoting product and process of preparing same
US4364861A (en) * 1980-05-27 1982-12-21 Cutter Laboratories, Inc. Blood-coagulation-promoting products and methods of preparing them
US4361510A (en) * 1980-05-27 1982-11-30 Cutter Laboratories, Inc. Blood coagulation promoting product
US4391746A (en) * 1980-05-27 1983-07-05 Cutter Laboratories, Inc. Blood-coagulation-promoting products and methods of preparing them
US4404132A (en) * 1980-05-27 1983-09-13 Cutter Laboratories, Inc. Blood coagulation promoting product
AT368883B (de) * 1980-07-22 1982-11-25 Immuno Ag Verfahren zur herstellung einer neuen blutgerinnungsfoerdernden praeparation auf basis von humanproteinen
DE3101752A1 (de) * 1981-01-21 1982-08-26 Behringwerke Ag, 3550 Marburg "verfahren zur reinigung der blutgerinnungsfaktoren ii, vii, ix und/oder x und danach hergestellte praeparationen"
US4479938A (en) * 1981-06-25 1984-10-30 Baxter Travenol Laboratories, Inc. Therapeutic composition containing factor VIIa
US4382083A (en) * 1981-06-25 1983-05-03 Baxter Travenol Laboratories, Inc. Therapeutic method for treating blood-clotting defects with factor VIIa
JPS5866054A (ja) * 1981-10-14 1983-04-20 Sekisui Chem Co Ltd 血液検査用容器
JPS58105064A (ja) * 1981-12-17 1983-06-22 Sekisui Chem Co Ltd 血液凝固促進剤
AT389815B (de) * 1984-03-09 1990-02-12 Immuno Ag Verfahren zur inaktivierung von vermehrungsfaehigen filtrierbaren krankheitserregern in blutprodukten
DE3625090A1 (de) * 1986-07-24 1988-01-28 Behringwerke Ag Mittel zur therapie faktor viii-resistenter haemophilie a und verfahren zu seiner herstellung
CA1330302C (en) * 1988-01-18 1994-06-21 Miroslav Rybak Concentrates of coagulation factors ii, vii, ix and x, method of their preparation and use
AT402891B (de) * 1991-06-20 1997-09-25 Immuno Ag Verfahren zur herstellung eines inaktivierten blutproduktes
AT398079B (de) * 1991-11-04 1994-09-26 Immuno Ag Präparation mit thrombinaktivität sowie verfahren zu ihrer herstellung
AT399818B (de) * 1992-04-24 1995-07-25 Immuno Ag Verfahren zur herstellung einer hochgereinigten virussicheren faktor viii-präparation
AU6653094A (en) * 1992-12-16 1994-07-04 Immuno Aktiengesellschaft Process for preparing a virus-safe biological composition
DE4320294A1 (de) * 1993-06-18 1994-12-22 Immuno Ag Verwendung von humanem Protein C zur Verhinderung und Behandlung von Thrombozytenablagerungen
US5677162A (en) * 1995-05-01 1997-10-14 New York Blood Center, Inc. Method for activating prothrombin to thrombin
DE19531637A1 (de) * 1995-08-28 1997-03-06 Immuno Ag Pharmazeutische Zusammensetzung zur Behandlung von Blutgerinnungsstörugnen, Verfahren zur Herstellung derselben und deren Verwendung
ATE296109T1 (de) * 1996-03-20 2005-06-15 Baxter Ag Pharmazeutisches präparat zur behandlung von blutgerinnungsstörungen
AT405485B (de) 1997-05-28 1999-08-25 Immuno Ag Eine das vwf-propeptid enthaltende pharmazeutische präparation
AT407484B (de) * 1997-11-12 2001-03-26 Bio Prod & Bio Eng Ag Arzneimittel zur förderung der wundheilung
DE50311422D1 (de) * 2002-07-23 2009-05-28 Bio & Bio Licensing Sa Thrombingenerierfähige und thrombinhaltige pharmazeutische wirkstoffzubereitungen und arzneimittel
RS20050051A (en) * 2002-07-23 2007-06-04 Bio-Products & Bio Engineering Ag., Pharmaceutical active ingredient preparation and medicaments that contain thrombin or have a thrombin-generating capacity
EP2305289A1 (en) 2009-09-16 2011-04-06 Bio-Products & Bio-Engineering Aktiengesellschaft Medicinal products for the treatment of blood coagulation disorders
IS2809B (is) * 2011-03-08 2012-10-15 Haskoli Islands Blóðstorkumæling
RU2648517C1 (ru) * 2017-06-23 2018-03-26 Федеральное государственное бюджетное учреждение Гематологический научный центр Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ ГНЦ Минздрава России) Способ получения лиофилизированного препарата активированного протромбинового комплекса, обладающего фактор viii-шунтирующей активностью
WO2024012853A1 (de) 2022-07-12 2024-01-18 Biomedizinische Forschung & Bio-Produkte AG Arzneimittel zur förderung der hämostase

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2262520C3 (de) * 1972-12-20 1987-02-12 Miles Laboratories, Inc., Elkhart, Ind. Verfahren zur Herstellung eines lyophilisierten, lagerfähigen Konzentrats aus menschlichem Plasma
DE2459291C3 (de) * 1974-12-14 1981-06-04 Biotest-Serum-Institut Gmbh, 6000 Frankfurt Verfahren zur Herstellung eines antihämophiles Globulin A enthaltenden Konzentrats neben einem Prothrombin- Komplex und einer Lösung von lagerstabilen Serumproteinen
US3998946A (en) * 1975-04-23 1976-12-21 The Regents Of The University Of Minnesota Fibrinogen-free plasminogen-plasmin-free plasma and method of preparing and using same
DD121793A1 (fi) * 1975-07-17 1976-08-20
US4027013A (en) * 1976-01-22 1977-05-31 William L. Wilson Clottable fibrinogen free factor VIII and albumin product and process

Also Published As

Publication number Publication date
SE443511B (sv) 1986-03-03
DK151932B (da) 1988-01-18
NO148142B (no) 1983-05-09
ES461918A1 (es) 1978-12-16
DE2734821A1 (de) 1978-03-02
FI772408A (fi) 1978-03-01
DE2734821B2 (de) 1980-11-06
NL170922C (nl) 1983-01-17
HU180816B (en) 1983-04-29
GB1554051A (en) 1979-10-17
ATA640576A (de) 1978-11-15
NO772978L (no) 1978-03-01
DK151932C (da) 1988-06-20
SE7707992L (sv) 1978-03-01
FI57421C (fi) 1980-08-11
CA1079191A (en) 1980-06-10
NL170922B (nl) 1982-08-16
DK384577A (da) 1978-03-01
BE858031A (fr) 1977-12-16
DE2734821C3 (de) 1985-03-14
NO148142C (no) 1983-08-17
FR2362633B1 (fi) 1981-06-12
FR2362633A1 (fr) 1978-03-24
AR213861A1 (es) 1979-03-30
NL7708872A (nl) 1978-03-02
CH635747A5 (de) 1983-04-29
US4160025A (en) 1979-07-03
AT350726B (de) 1979-06-11
LU78024A1 (fi) 1978-01-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI57421B (fi) Foerfarande foer framstaellning av ett preparat ur maenniskoblodplasma med blodets koagulation befraemjande verkan
EP0217341B2 (en) Process for preparing an anticoagulating substance
JP3055933B2 (ja) 改良された安定な凝固対照
US3717708A (en) Blood coagulation complex
US4404132A (en) Blood coagulation promoting product
US4849403A (en) Protein C activator, methods of preparation and use thereof
Didisheim et al. Preparation of a human plasma fraction rich in prothrombin, proconvertin, Stuart factor, and PTC and a study of its activity and toxicity in rabbits and man
HU188298B (en) Process for producing phamraceutival compositions increasing coagulability of blodd, containing humane proteines
JPH0650999B2 (ja) 血液凝固因子安定化法
FI101476B (fi) Menetelmä kalsiumista riippuvan proteiini C:n vastaisen monoklonaalise n vasta-aineen valmistamiseksi
JPS6028812B2 (ja) 副作用のない血漿分別物の製造方法
Forbes et al. Studies on plasma thromboplastin antecedent (factor XI), PTA deficiency and inhibition of PTA by plasma: pharmacologic inhibitors and specific antiserum
Saba et al. The anticoagulant activity of lysosomal cationic proteins from polymorphonuclear leukocytes
US4081432A (en) Method of separating a Factor IX preparation from plasma using ethylene-maleic anhydride polymers
NATELSON et al. Acquired factor IX deficiency in the nephrotic syndrome
EP0044343A1 (en) THERAPEUTIC COMPOSITIONS CONTAINING PROTHROMBIN AND PROCESS FOR PRODUCING ENZYMATICALLY ACTIVE BLOOD COAGULATION FACTORS FROM BLOOD FRACTIONS CONTAINING PROTHROMBIN.
US4361510A (en) Blood coagulation promoting product
Suomela et al. Preparation and properties of a therapeutic factor IX concentrate
Spaet et al. Inactivation of thromboplastin in human blood
EP0041174B1 (en) Blood coagulation promoting product and process of preparing same
EP0052874A1 (en) Method for synthesizing procoagulant factor VIII activity
Chandra et al. Large scale preparation of nonthrombogenic prothrombin complex
Wickerhauser et al. Development of Large-Scale Fractionation Methods
Fantl et al. Comparison of blood clotting in marsupials and man.
Joist et al. Uroplastin, its nature and its excretion pattern in health and in certain disease states

Legal Events

Date Code Title Description
MA Patent expired
MA Patent expired

Owner name: "IMMUNO" AKTIENGESELLSCHAFT FUER