HU180816B - Process for producing composition from human nlood plasma for improving agglutination of blood - Google Patents
Process for producing composition from human nlood plasma for improving agglutination of blood Download PDFInfo
- Publication number
- HU180816B HU180816B HU77IU288A HUIU000288A HU180816B HU 180816 B HU180816 B HU 180816B HU 77IU288 A HU77IU288 A HU 77IU288A HU IU000288 A HUIU000288 A HU IU000288A HU 180816 B HU180816 B HU 180816B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- plasma
- factor
- feiba
- blood
- activity
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
- Y10S530/829—Blood
- Y10S530/83—Plasma; serum
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S930/00—Peptide or protein sequence
- Y10S930/01—Peptide or protein sequence
- Y10S930/28—Bound to a nonpeptide drug, nonpeptide label, nonpeptide carrier, or a nonpeptide resin
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- External Artificial Organs (AREA)
Description
A találmány tárgya eljárás egy új véralvadás-elősegitő készítménynek emberi vérplazmából történő előállítására. A készítmény új VlII-faktor-inhibitor-áthidaló-aktivitású véralvadás-előidéző anyagot tartalmaz, amelyet az angol elnevezésének rövidítése alapján (Factor-Eight-Inhibitor-Bypassing-Activity) FEIBA-nak nevezünk. Ez a jelölés a szakirodalomban már ismertté vált.
Ez az anyag újfajta módon befolyásolja a véralvadást és lehetővé teszi az úgynevezett Vili-faktor (3 803 115 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás) hatásának megkerülését, ami azt jelenti, hogy az új szerrel a véralvadást Vili-faktor adagolás nélkül lehet normális mértékűre hozni. Ez a készítmény különösen az A-hemofiliában szenvedő betegek kezelésére alkalmas.
Az A-hemofília (vérzékenység) régóta ismert betegség, amelynél a véralvadási folyamatot egy véralvadási faktor aktivitásának hiánya zavarja. Ezt a faktort „antihemofíliafaktor” (AHF) vagy Vili-faktor néven ismerik. Az A-hemofília vele született betegség, amelyet hibás gének okoznak; ez a betegség lényegében nem gyógyítható. Gyógykezelés — vérzés esetén — csak megfelelő mennyiségű Vili-faktor intravénás adagolásával lehetséges; ezt a Vili-faktort egészséges véradók véréből nyerik ki. Míg régebben e célra teljes vért illetőleg teljes vérplazmát kellett alkalmazni nagy menynyiségekben, ma már vannak olyan készítmények, amelyek a Vili-faktort koncentrált, stabil, liofilizált alakban tartalmazzák. Az ilyen készítményekkel történő kezelés a legtöbb esetben a vérzés rövid idő alatt bekövetkező elállását eredményezi.
Vannak olyan betegek azonban, akiknek nemcsak a VIIIfliktor hiányzik szervezetükből, hanem ehelyett egy a VIIIfaktorral szemben ható gátló anyag (inhibitor) van jelen, amely — a jelenlevő mennyiségtől függően — a gyógykezelés 5 céljából beadagolt Vili-faktort semlegesíti illetőleg megsemmisíti. Az ilyen, VlII-faktor-inhibitort tartalmazó szervezetű betegek esetében eddig igen kevés kilátás volt az eredményes gyógykezelésre. Az egyetlen lehetőség az volt, hogy a VIIIfíiktor-koncentrátumokkal való kezelés előtt az inhibitort 10 eltávolítják a beteg véréből, ami csak a beteg vérplazmájának egészséges véradók plazmájával vagy valamely plazmapótszerrel való kicserélése útján volt megoldható; ez azonban igen nagy műszaki és orvosi problémát okoz. Emellett a plazma kicserélését a beteg újbóli kezelése előtt meg kell 15 ismételni, minthogy a beteg szervezetében az inhibitor — különösen újabb Vili-faktor beadása esetén, az úgynevezett „Booster-hatás” folytán, antigénként — újra képződik. Az ilyen, inhibitort tartalmazó vérű betegek úgynevezett immún-szuppresszív anyagokkal való kezelése, amely az inhibi20 tor in vivő szintézisét lenne hivatva meggátolni — eddig rendszerint eredménytelen volt.
A legutóbbi időben egy kedvező lehetőség látszik kialakulni a VlII-faktor-inhibitort tartalmazó vérű betegek gyógykezelésére. Kurczynski és Penner (New Engl. J. Med., 291, 25 164—167, 1974) elsőként számoltak be VHI-faktor-inhibitort tartalmazó vérű betegek eredményes kezeléséről; e kezelés céljaira úgynevezett „aktivált” protrombin-komplex-kmcentrátumokat alkalmaztak. Sül tan, Brouet és Debre [New Engl. J. Med., 291, 1087, (1974)] és Abildgaard, Brit30 tón és Roberts, [Blood 44, 933, (1974)] közleményeiben is az '0816
-1180816 aktivált protrombin-komplex-készítményeknek VlII-faktor-inhibitort tartalmazó vérű betegek vérzés esetén történt sikeres alkalmazásáról számolnak be.
Az ilyen protrombin-komplex-koncentrátumok úgynevezett aktiválása valószínűleg ismeretlen szennyezések jelenlétére vezethető vissza. Az ilyen készítményeket ugyanis nem lehetett tényleges hatóanyagukra vonatkozólag megvizsgálni és standardizálni. Az eredmények bizonytalanok és kétségesen reprodukálhatók.
A jelen találmány célkitűzése az volt, hogy a fentiekben ismertetett nehézségeket és hátrányokat kiküszöböljük és olyan készítményt állítsunk elő, amely ismételhetően és célzott módon alkalmazható a kívánt célra, a VlII-faktor-inhibitor hatásának megkerülésére. A VlII-faktor-inhibitort megkerülő aktivitás megfelelő vizsgálati módszerrel mérhető és standardizálható kell, hogy legyen. A készítménynek klinikailag hatékonynak és a páciensek által elviselhetőnek kell lennie, vagyis a VlII-faktor-inhibitort tartalmazó vérű páciensek vérzése esetén hatékonyan kell véralvadást előidéznie és nem szabad káros mellékhatásokat mutatnia.
Ezt a feladatot a találmány értelmében oly módon oldjuk meg, hogy citrát-iont és a protrombin-komplexet tartalmazó emberi vérplazmát 5,5—8,5 pH-értéken, 0—30 C° hőmérsékleten szabad kalcium-ionok távollétében a vérplazma mennyiségére számított 0,05—5% mennyiségben kovasavvagy szilikáttartalmú, a véralvadásra fiziológiai úton ható felületaktív anyagokkal, előnyösen szilikagéllel vagy kaolinnal kezelünk, ezt követően a vízben oldhatatlan anyagokat centrifugálással elválasztjuk és a szupernatáns folyadékot önmagában ismert módon, bázisos, előnyösen dietilaminoetil-csoportot tartalmazó nagymolekulájú anyaggal kezeljük, az ioncserélőt ezt követően sóoldattal mossuk, majd az új VlII-faktor-inhibitor-áthidaló-aktivitású véralvadás-előidéző anyagot és a II-, VII-, IX-, X-faktorokat sóoldattal eluáljuk, az eluátumot dializáljuk, majd liofilizálással koncentráljuk. Az új, „FEIBA” véralvadás-előidéző anyag fehérje-jellegű, a nem aktivált II-, VII-, IX- és X-faktoroknál (protrombin-komplex) nagyobb molekulasúlyú. Míg az említett faktorok molekulasúlya 70 000 körül van, addig az új hatóanyag molekulasúlya körülbelül 100 000.
Az új készítmény előállítására kiindulási anyagként citrátos emberi vérplazmát alkalmazunk, amely az összes véralvadási faktorokat natív alakban tartalmazza; alkalmazhatók továbbá oly vérplazma-frakciók is, amelyek a VIIIfaktor (AHF) elkülönítése után visszamaradnak, mint például a Kryo-precipitatum vagy a Cohn-féle I precipitatum leválasztása után kapott vérplazma-szupernatáns (3 803 115 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás).
A találmány szerinti eljárás során a kovasav- vagy szilikáttartalmú, a véralvadásra fiziológiai úton ható felületaktív anyagokat a vérplazma mennyiségére számítva 0,05—5%, előnyösen 0,1—1% mennyiségi arányban alkalmazzuk.
A vérplazma ily módon történő kezelésére célszerűen olyan anyagokat alkalmazunk, amelyek legnagyobbrészt finom eloszlású szilíciumdioxidból állnak, mint például a diatomaföld-típusú anyagok, például a celit, továbbá szilíciumdioxidból és aluminiumdioxidból álló anyagok, például kaolin. Általában olyan anyagok alkalmasak erre a célra, amelyeket a véralvadási rendszerben „felületaktív” anyagokként ismerünk, illetőleg amelyek felületaktív tulajdonságuk folytán képesek a véralvadás kontakt-fázisának a megindítására. Míg az ilyen anyagok felületaktív hatása folytán aktiválható véralvadási faktorok (XI- és ΧΙΙ-faktor) aktivált alakjukban adszorbeálódnak az említett felületaktív anyagokon, addig a II-, VII-, IX-, és X-faktor a keletkezett FEIBA véralvadást előidéző anyaggal együtt a szupernatáns folyadékban marad és a felületaktív anyag eltávolítása után, ismert módszerek alkalmazásával elkülöníthető vagy dúsítható. Éne a célra például gyengén bázisos ioncserélők alkalmazhatók; különösen jól beváltak a dietil-aminoetil(DEAE)-csoportot tartalmazó nagymolekulájú anyagok, például a cellulózhoz kötött DEAE vagy a térhálósított dextrán. Az ioncserélőn adszorbeált, fokozott ionerősségű plazma-fehérjék mosás és eluálás útján történő eltávolítása után a tisztított és dúsított FEIBA anyagot tartalmazó fehérje-frakció izolálható. A sók dialízissel történő eltávolítása és ezt követő liofilizálás útján száraz, stabil alakban különíthetjük el a FEIBA anyagot tartalmazó nyers frakciót. Ebből a nyers készítményből azután vízben való újbóli oldás, sók hozzáadása, pH-beálli(ás, steril szűrés és újbóli liofilizálás útján juthatunk a már felhasználásra kész készítményhez.
A találmány szerinti eljárással előállítható készítmény tulajdonságainak vizsgálata során kitűnt, hogy a IIA-faktor (trombin) és a Xa-faktor semmivel sem járul hozzá a FEIBA anyag aktivitáshoz. A találmány szerinti eljárással előállított készítményben esetleg nyomokban jelenlevő trombin semmivel sem rövidíti meg a VlII-faktor-inhibitor-plazma részleges tromboplasztin-idejét. A Xa-faktor-aktivitás inhibitoraként ismert szójabab-tripszin-inhibitor sem gátolja a találmány szerinti eljárással előállított készítmény FEIBA-anyag aktivitását. Gél-kromatográfiai vizsgálatokkal is kitűnt, hogy a találmány szerinti eljárással előállítható új anyag molekulasúlya nagyobb, mint a protrombin-komplex ismert faktorainak, a II-, VII-, IX- és X-faktornak a molekulasúlya. Minthogy továbbá a protrombin-komplex aktivált faktorai a megfelelő natív (nem aktivált) véralvadás-faktor egy töredékének enzimes lehasítása útján keletkeznek és így kisebb molekulákból állnak, mint a megfelelő nem aktivált faktor molekulája, bizonyossággal feltehető, hogy a találmány szerinti eljárással előállított készítményben a VlII-faktor-inhibitor-áthidaló aktivitást nem a protrombin-komplex valamely aktivált faktora okozza, hanem egy újonnan létrejött, nagyobb molekulasúlyú anyagnak tulajdonítandó ez a hatás.
Az ily módon képezett új anyag jellemzésére egyrészről a II-, VII-, IX- és X-véralvadás-faktorok aktivitásának a FEIBA anyag aktivitáshoz való viszonyát vehetjük alapul: ez a viszony egységekben kifejezve 0,1 és 10 között, különösen 0,5 és 2 között lehet. Egy II-VII-IX-X-faktor-egység e faktorok oly aktivitásának felel meg, amely átlagosan 1 ml friss citrátos emberi vérplazmában van jelen; egy FEIBAegységnek azt a FEIBA anyag aktivitást tekintjük, amely egy nagytiterű VlII-faktor-inhibitor-plazma aktivált parciális tromboplasztin-idejét a vak-érték felére csökkenti. Az új hatóanyag jellemzésére másrészről felhasználhatjuk ennek az anyagnak az amidolitikus aktivitását is. Amidolitikus aktivitáson valamely anyagnak azt a képességét értjük, hogy oly standardizált peptid-vegyületekben, amelyek egy amidkötésen keresztül kapcsolódnak a p-nitro-anilin kromofórhoz, p-nitro-anilint hasítanak le, amely azután fotometriásan meghatározható. Ilyen standardizált peptid-készítményeket például a svédországi KABI cég állít elő; igy az S —2160 peptid (N-benzoil-L-fenil-alanil-L-valil-L-arginin-p-nitro-anilid-hidroklorid) trombinra specifikus, az S—2222 készítmény (N-benzoil-L-izoIeucil-L-glutamil-L-glicil-L-arginil-p-nitro-anilid-hidroklorid) Xa-faktorra és az S— 2251 készítmény (D-valil-L-leucil-L-lizil-p-nitro-aniliddihidroklorid) plazminra specifikus. Ha a találmány szerinti eljárással előállított készítményt az említett szubsztrátumokkal szemben vizsgáljuk, akkor csak elhanyagolhatóan cse
-2180816 kély amidolitikus aktivitást tapasztalunk. Másrészről ha valamely trombint és/vagy Xa-faktort tartalmazó készítményt vizsgálnánk, amelyet a találmány szerint előállított készítménnyel azonos nagyságú FEIB-aktivitásra állítottunk be, akkor nagyfokú amidolitikus aktivitást tapasztalnánk.
A találmány szerinti eljárással előállított készítmény további jellemző tulajdonsága, hogy csak igen csekély trombin-aktivitást mutat vagy egyáltalán nem rendelkezik ilyen aktivitással. A találmány szerinti eljárással előállított készítmény esetében a trombin-aktivitásnak a FEIB-aktivitáshoz való viszonya nem nagyobb, mint 0,02, mimellett itt a trombin-aktivitást NIH (US National Institute of Health) egységekben, a FEIB-aktivitást pedig FEIBA-egységekben fejezzük ki.
A tatálmány szerinti eljárás gyakorlati kiviteli módjait és a találmány szerinti eljárással előállítható készítmény tulajdonságait az alábbi példák és vizsgálati eredmények szemléltetik.
1. példa
Frissen fagyasztott vérplazmát 0 C° és - 4 C° közötti hőmérsékleten felengedni hagyunk és az így kapott Kryo-precipitatumot centrifugálással eltávolítjuk. A szupernatáns folyadék pH-értékét 0,5 n sósavval 7,0-ra állítjuk be, 1 liter folyadékra 5 g kaolint adunk hozzá és + 4 C° hőmérsékleten 1 óra hosszat keverjük. Ezután a kaolint centrifugálással eltávolítjuk. A képződött FEIBA-hatóanyagot — a protrombin-komplex faktoraival együtt — dietilaminoetilcsoportokat tartalmazó Sephadex gyantán adszorbeáljuk.
Erre a célra 1 liter szupernatáns folyadékhoz 0,5 g DEAESephadex A—50 gyantát adunk és + 4 C“ hőmérsékleten I /2 óra hosszat keverjük. Az ioncserélőt ezután elkülönítjük; a szupernatáns plazma gamma-globulin és albumin kinyerésére használható fel. A DEAE-Sephadex gyantát trinátriumcitrátot és nátrium-kloridot tartalmazó oldattal kétszer mossuk, miközben a pH-értéket 7,5-ön tartjuk.
Eluálás céljából a DEAE-Sephadex gyantát 3% nátriumkloridot és 0,1% trinátrium-citrát-dihidrátot tartalmazó oldattal (az eredeti plazma-térfogat 2%-a) 20 percig keverjük, majd az eluátumot szűréssel elkülönítjük. Az így kapott eluátumot egy 0,05% trinátrium-citrát-dihidrátot és 0,1% nátrium-kloridot tartalmazó oldattal szemben, 7,0 pH-értéken, + 4 C° hőmérsékleten éjjelen át dializáljuk, majd megfagyasztjuk és egy első liofilizálási folyamatnak vetjük alá. Az így kapott nyers termékben meghatározzuk a FEIB-aktivitást, valamint a jelenlevő protrombin-komplex-faktorok aktivitását is.
A gyógyászati célra alkalmazható FEIB-aktivitású készítmény előállítása céljából oly anyagból indulunk ki, amelyben a II-VII-IX-X-faktor egységeknek a FEIBA-egységekhez viszonyított aránya 0,5 és 2 között van; ez a viszony a megfelelő nyers termékek különböző előállítási adagjainak összekeverése útján állítható be. Az így kiindulási anyagként alkalmazott nyers terméket pirogénmentes desztillált vízben oldjuk, olyan koncentrációban, hogy az oldat FEIB-aktivitása 10—50 egység/ml legyen (adott esetben például 25 FEIBA-egység/ml). Az izotóniás oldat előállításához szükséges sók hozzáadása és a pH-értéknek 7,0 és 7,5 közöttire történő beállítása után az oldatot membrán-szűrőn keresztül derítjük, majd végül egy 0,2 pm nyílású membránszűrőn keresztül sterilre szűrjük. Az így kapott oldatot steril körülmények között, 20 ml-es adagokban edényekbe töltjük, mélyhűtéssel fagyasztjuk és liofilizáljuk.
2. példa
Kiindulási anyagként ismét frissen fagyasztott vérplazmát illetőleg az ebből az 1. példában leírt módon kapott szupernatánst alkalmazzuk. Ennek natív állapotban 7,8 a pH-értéke; a pH-érték további beállítása nélkül 1 liter szupernatánsra számítva 10 g „Celit 512” adszorbenst adunk hozzá és + 4C° hőmérsékleten 3 óra hosszat keverjük. Az adszorbenst centrifugálással elkülönítjük, majd a kapott szupematánst, amely a keletkezett FEIBA-anyagot tartalmazza, az 1. példában leírt módon dolgozzuk fel.
A fenti példákban leírt módon előállított készítményeket azután a szokásos biztonsági vizsgálatok [sterilitás, ártalmatlanság, pirogén-mentesség, HBs-antigén-mentesség mellett hatásosságra, (FEIBA-aktivitásra), protrombin-komplex-faktor-tartalomra, trombin-tartalomra, valamint amidolitikus aktivitásra (a fentebb említett S—2160, S—2222 és S—2251 szubsztrátumokkal)] vizsgáljuk.
Az egyes vizsgálatokat az alább leírt módon folytattuk le:
1. Hatásossági próba (a FEIBA-egységek meghatározása)
a) Reagensek:
Vili-faktor inhibitor-plazma:
Egy A-hemofiliában szenvedő, Vili-faktorral szembeni inhibitorral rendelkező beteg citrát-plazmáját (inhibitortiter: legalább 10 egység/ml) liofilizáljuk. A vizsgálat folyamán az inhibitor-plazmát jégfürdőben tartjuk.
Foszfolipid-kaolin-szuszpenzió:
A Hormon-Chemie müncheni cég által gyártott, „Tachostyptan” márkájú foszfolipid-koncentrátumot Owrens-pufferrel 1 : 200 arányban hígítjuk és 0,5% kaolint (0,5 g/ 100 ml) adunk hozzá. Az elegyet mélyhűtve tároljuk. A vizsgálat folyamán ezt a reagenst szobahőmérsékleten tartjuk.
Citrát-konyhasó-oldat a minták hígítására:
0,7% nátrium-klorid, 0,7% nátrium-citrát. 2H2O. m/20 kalcium-klorid-oldat:
A vizsgálat folyamán 37 C° hőmérsékleten tartjuk.
b) Vizsgálati módszer:
A vizsgálandó FEIBA-anyagot tartalmazó frakcióból származó mintát és egy meghatározott egységszám/ml FEIBA-anyag tartalmú standard-készítményt a megadott mennyiségben desztillált vízben oldunk, majd citrát-konyhasó-oldat felhasználásával 6 hígítást készítünk mértani sorozatban, amelyet 5 FEIBA egység/ml koncentrációval kezdünk el. Ezeket a hígításokat a vizsgálat folyamán jégfürdőben tartjuk. A reagenseket az alábbi módon pipettázzuk kémcsövecskékbe:
0,05 ml Vili-faktor inhibitor-plazma
0,05 ml minta (a vizsgálandó minták és a standard-készítmény hígításai, valamint egy tiszta citrát-konyhasóoldat vakpróbaként)
0,05 ml foszfolipid-kaolin-szuszpenzió az elegyeket 37 C° hőmérsékleten 6 percig inkubáljuk, majd: 0,5 ml m/20 kalcium-klorid-oldat.
Stopperórával mérjük a kalcium-klorid-oldat hozzáadásától az alvadék-képződésig eltelő időt (az alvadék-képződést a kémcsövecske megdöntése vagy egy automatikus koagulometer alkalmazása útján állapítjuk meg).
c) A FEIBA-egységek kiszámítása mintánként:
Kalibrációs görbét készítünk oly módon, hogy a FEIBA anyag tartalmú standard-készítmény hígításainak másodpercekben mért megalvadási idejét a megfelelő (FEIBAegység/ml egységekben mért) koncentrációkkal állítjuk szembe kettős logaritmikus milliméterpapiron. A vizsgálandó minták hígításainak FEIB-aktivitását a kalibrációs görbe alapján, a megfelelő higítási faktorral való szorzás után
-3180816 számítjuk ki. Az így kapott eredmények átlagértéke megfelel a vizsgálandó minta FEIBA-egység/ml-ben kifejezett aktivitásának. Ha ezt az értéket azután az oldat ml-ben megadott térfogatával szorozzuk, akkor megkapjuk a teljes minta FEIBA-egység tartalmát.
2. A II. VII, IX és X alvadási faktorok aktivitásának meghatározása
A) A II-faktor meghatározása:
a) Reagensek:
Szérum: egy egészséges véradó vérét (antikoaguláns nélkül) 24 óra hosszat inkubáljuk 37 C° hőmérsékleten. A megalvadt vérből a szérumot eltávolítjuk, centrifugáljuk, adagokra osztjuk és mélyhűtve tároljuk.
Oxalátos marha-plazmát bárium-szulfáton adszorbeáltatunk (az V-faktor forrásaként, valamint hígítószerként a mintákhoz): 9 rész marhavért 1 rész 1,34%-os nátrium-oxalát-oldattal elegyítünk. Az igy kapott plazmát 10% bárium-szulfáton adszorbeáltatjuk. Centrifugálás után a plazmát adagonként letöltjük és mélyhűtve tároljuk.
„Thromborel” kalciumtartalmú emberi tromboplasztinkészítmény, a Behringwerke AG (Marburg-Lahn) gyártmánya.
b) Vizsgálati módszer:
A reagenseket (amelyeket a vizsgálat folyamán a „Thromborel” kivételével jégfürdőben tartunk) a következőképpen pipettázzuk kémcsövecskékbe:
0,05 ml szérum
0,05 ml minta (sorozatos hígítások a vizsgálandó mintából illetőleg egy normális plazmából vagy egy standard plazma-készítményből)
Az elegyet 37 C° hőmérsékleten 1 percig inkubáljuk, majd: 0,2 ml „Thromborel” (a vizsgálat folyamán 37 C° hőmérsékleten tartandó).
A „Thromborel” hozzáadásától a megalvadásig terjedő időt stopperórával mérjük.
c) A II-faktor koncentrációjának kiszámítása:
Legalább 15 egészséges véradó egyesített plazmamintájából egy standard-plazmát állítunk elő. Ezt „normális plazma” gyanánt tekintjük és II-faktor-aktivitását 100%-nak vesszük. Ezután kalibrációs görbét készítünk, oly módon, hogy az említett normális plazma hígitási sorozatát (hígítatlan, 1 : 2, 1 : 4, 1 : 8, ...) a megfelelő koncentrációkkal állítjuk szembe kétszeres logaritmikus milliméterpapíron. A minták hígitási sorozatának II-faktor-koncentrációját az említett kalibrációs görbe alapján, a normális plazmához viszonyított százalékokban adjuk meg és a megfelelő hígitási faktorral szorozzuk. Az igy kapott eredmények átlagértéke megfelel a vizsgált minta aktivitásának, a Π-faktor százalékában kifejezve. Az egy-egy üvegcsében jelenlevő II-faktor mennyiségét az alábbi képlet alapján számítjuk ki. II-faktor egységek = _ (II-faktor-koncentráció%) x (térfogat ml-ben)
Egy II-faktor-egység ekvivalens azzal a II-faktor-aktivitással, amely 1 ml friss citrát-plazmában jelen van.
B) A VH-faktor meghatározása:
a) Reagensek:
VH-faktor hiányplazma:
Egy súlyos VH-faktor-hiányban szenvedő (1%-nál kisebb VH-faktor-koncentrációjú) beteg citrát-plazmáját mélyhűtött állapotban tároljuk vagy 1 súly%/tf. HEPES hozzáadása után liofilizáljuk (pH-érték: 7,0).
Citrátos konyhasó-oldat (hígítószerként a mintákhoz): 0,7% trinátrium-citrát. 2H2O, 0,7% nátrium-klorid.
4„Thromborel” (kalciumtartalmú humán tromboplasztin), a Behringwerke AG (Marburg-Lahn) gyártmánya.
b) Vizsgálati módszer:
A hiányplazmát és a minta-hígításokat jégfürdőben tároljuk. A „Thromborel” készítményt a vizsgálat folyamán 37 C° hőmérsékleten tartjuk.
A reagenseket a következőképpen pipettázzuk kémcsövecskékbe:
0,05 ml VH-faktor hiányplazma
0,05 ml minta (hígitási sorozat a vizsgálandó mintából illetőleg egy normális plazmából vagy standard plazma-készítményből)
Az elegyet 37 C° hőmérsékleten 1 percig inkubáljuk, majd: 0,2 ml „Thromborel”.
A „Thromborel” hozzáadásától a megalvadásig terjedő időt stopperórával mérjük.
c) A VH-faktor koncentrációjának meghatározása:
A VH-faktor koncentrációját ugyanúgy számítjuk ki, amint ezt fentebb a ll-faktor esetében ismertettük.
C) A IX-faktor meghatározása:
a) Reagensek:
IX- faktor hiányplazma:
Egy súlyos B-hemofiliában (IX-faktor-tartalom 1% alatt) szenvedő beteg citrát-plazmáját mélyhűtött állapotban tároljuk.
F oszfolipid-kaolin-szuszpenzió:
A Hormon-Chemie müncheni cég által gyártott, „Tachostyptan” márkájú foszfolipid-koncentrátumot Owrens-pufferrel 1 : 200 arányban hígítjuk és 0,5% kaolint (0,5 g/ 100 ml) adunk hozzá. Az elegyet mélyhűtve tároljuk.
Oxalátos marha-plazma, bárium-szulfáton adszorbeáltatva (hígítószerként a mintákhoz): 9 rész marhavért 1 rész 1,34%-os nátrium-oxalát-oldattal elegyítünk. Az így kapott plazmát 10% bárium-szulfáton adszorbeáltatjuk. Centrifugálás után a plazmát adagonként letöltjük és mélyhűtve tároljuk.
m/20 kalcium-klorid-oldat.
b) Vizsgálati módszer:
A IX-faktor hiányplazma inkubálása foszfolipid-kaolinszuszpenzióval: a hiányplazma szükséges mennyiségét ugyanolyan térfogatú foszfolipid-kaolin-szuszpenzióval elegyítjük, 5 percig inkubáljuk 30 C“ hőmérsékleten, majd 30 percig jégfürdőben tartjuk.
A reagenseket, amelyeket a kalcium-klorid-oldat kivételével a vizsgálat folyamán jégfürdőben tartunk, az alábbi módon pipettázzuk kémcsövecskékbe:
0,2 ml inkubált hiányplazma-foszfolipid-kaolin szuszpenzió 0,1 ml minta (hígitási sorozat a vizsgálandó mintából illetőleg egy normális plazmából vagy standard plazmakészítményből)
Az elegyet 37 C° hőmérsékleten 1 percig inkubáljuk, majd: 0,1 ml m/20 kalcium-klorid-oldat (a vizsgálat folyamán 37 C° hőmérsékleten tartandó).
A kalcium-klorid-oldat hozzáadásától a megalvadásig terjedő időt stopperórával mérjük.
c) A IX-faktor koncentrációjának kiszámítása:
A IX-faktor koncentrációját ugyanúgy számítjuk ki, ahogyan ezt a II-faktor esetében fentebb megadtuk.
D) X-faktor meghatározása:
a) Reagensek:
X- faktor hiányplazma:
Egy súlyos X-faktor-hiányban (X-faktor 1% alatt) szenvedő betegtől vett citrát-plazmát mélyhűtve tárolunk, vagy 1% HEPES hozzáadása és a pH-érték 7,0-ra való beállítása után liofilizálunk.
-4180816
Citrát-konyhasó-oldat (higítószer a mintákhoz): 0,7% nátrium-klorid, 0,7% nátrium-citrát. 2H2O.
„Thromborel” (kalciumtartalmú humán tromboplasztin), a Behringwerke AG (Marburg-Lahn) gyártmánya.
b) Vizsgálati módszer: 5
A reagenseket, amelyeket a vizsgálat során a „thromborel” kivételével jégfürdőben tartunk, az alábbi módon pipettázzuk kémcsövecskékbe:
0,05 ml X-faktor hiányplazma
0,05 ml minta (hígitási sorozatok a vizsgálandó mintából 10 illetőleg a normális plazmából vagy egy standard plazma-készítményből)
Az elegyet 37 C° hőmérsékleten 1 percig inkubáljuk, majd: 0,2 ml „Thromborel” (a vizsgálat folyamán 37 C° hőmérsékleten tartandó). 15
A „Thromborel” hozzáadásától a megalvadásig terjedő időt stopperórával mérjük.
c) A X-faktor koncentrációjának kiszámítása:
A X-faktor koncentrációját ugyanolyan módon számítjuk ki, ahogyan ezt fentebb a II-faktor esetében ismertettük. 20
3. Trombin-próba
a) Reagensek:
1%-os fibrinogén-oldat (emberi eredetű)
Standardizált trombin (Topostasin, Roche, 3000 NIH-trombin-egység üvegcsénként) 25
Citrát-konyhasó-oldat: 0,7% nátrium-klorid, 0,7% nátrium-citrát. 2H2O.
b) Vizsgálati módszer:
A liofilizált mintát a megadott mennyiségű desztillált vízben oldjuk, majd 6 hígítást készítünk mértani sorozatban, 30 citrát-konyhasó-oldat felhasználásával, továbbá 8 hígítást mértani sorozatban a standardizált trombinból; a hígitási sorozatokat 1 NIH-egység/ml koncentrációval kezdjük
Vizsgálati eljárás:
0,2 ml 1%-os fibrinogén-oldat és 35
0,2 ml minta (FEIBA anyagot tartalmazó frakció- és trombin-hígitások, valamint tiszta citrát-konyhasó-oldat vakpróbaként) elegyét 37 C° hőmérsékleten inkubáljuk. A megalvadásig eltelő időt mérjük, a kémcsövecskéknek egyre nagyobbodó 40 időközökben (10 perctől 1 óráig) történő megdöntése útján. Ez a folyamat legalább 6 óra hosszat tart. A kémcsövecskék utolsó megdöntése az éjjelen át való inkubálás után történik. A vakpróbának (higítószer vizsgálandó minta nélkül) éjjelen át stabilnak kell mutatkoznia, alvadók képződése nélkül. 45
c) A trombin-koncentráció kiszámítása:
Kalibrációs görbét készítünk oly módon, hogy a standard trombin-készítmény mértani hígitási sorozatával kapott alvadási időket a megfelelő minta-koncentrációkkal (trombinegység/ml) vetjük össze kétszeres logaritmusos milliméterpa- 50 píron. A vizsgálandó minták hígitási sorozatának trombinkoncentrációit a kalibrálási görbe felhasználásával, a megfelelő hígitási faktorral való szorzás útján számítjuk ki. A kapott eredmények átlagértéke megfelel a vizsgálandó minta trombin-aktivitásának, trombin-egység/ml-ben kifejezve. 55 Ha az igy kapott értéket az oldat-térfogattal (ml) szorozzuk, úgy megkapjuk az üvegcsénként jelenlevő összes trombin mennyiségét egységben.
4. Az amidolitikus aktivitás meghatározása
a) Reagensek: 60
Kromogén szubsztrátumok:
S—2160: N-benzoil-L-fenilalanil-L-valil-L-arginin-p-nitroanilid-hidroklorid (rövidítve: Bz-Phe-Val-Arg-p-nitroanilid. HC1)
0,5 mg/ml H2O = 0,73 m mólos 65
S—2222: N-benzoil-L-izoleucil-L-glutamil-L-glicil-L-arginil-p-nitroanilid-hidroklorid (rövidítve: Bz-Ile-Glu-Gly-Arg-p-nitroanilid.
HC1)
1,4mg/ml H2O= 1,91 m mólos
S—2251: D-valil-L-leucil-L-lizil-p-nitroanilid-dihidroklorid (rövidítve: D-Val-Leu-Lys-p-nitroanilid. 2HC1) 1,65 mg/ml H2O = 2,99 m mólos
Puffer:
6,06 g „Tris” - trisz(hidroxi-metil)-amino-metán = 0,05 mólos '0,6 g nátrium-klorid = 0,18 mólos liter desztillált vízben oldjuk, majd az oldat pH-értékét lömény sósavval 7,4-re állítjuk be.
b) Vizsgálati eljárás:
1,0 ml puffer
0,1 ml vizsgálandó minta (FEIBA anyagtartalmú készítmény)
0,2 ml szubsztrátum (S—2160, S—2222 illetőleg S—2251).
Ezt az elegyet egy 37 C° hőmérsékletre beállítható küvetába (rétegvastagság: 1 cm) töltjük és fotométerrel, 405 nmrél mérjük 1 perces időközökben az optikai sűrűség növekedését.
c) Értékelés:
Mindenkor legalább 5 mérés átlaga alapján számítjuk ki íz optikai sűrűség percenkénti megnövekedésének az átlagértékét és ezt 1000-rel szorozzuk; ezt az értéket AOD.IO3/ perc értéknek nevezzük; ez az érték a vizsgált minta amidolitikus aktivitásának (enzim-aktivitásának) a mindenkor felhasznált szubsztrátumra vonatkoztatott jellemzésére szolgál.
Ha a fenti módon meghatározott AOD. 103/perc értéket a vizsgált minta FEIBA-egységekben kifejezett aktivitásával (az alkalmazott minta 0,1 ml mennyiségére vonatkoztatva) illetőleg a II-, VII-, IX- és X-faktor-egységekben (0,1 ml mennyiségre vonatkoztatva) osztjuk, akkor megkapjuk az adott esetben alkalmazott vizsgálati mintára, az adott vizsgálati körülmények között jellemző „specifikus amidolitikus aktivitás”-értéket, vagyis az 1 FEIBA-egységre illetőleg 1II-, VII-, IX- ill. X-faktor-egységre vonatkoztatott AOD.IO3/ perc értéket.
A fenti 1. és 2. példában leírt módon előállított készítmények a fent ismertetett módon lefolytatott vizsgálatok során az alábbi táblázatban megadott tulajdonságokat mutatták. A táblázatban a zárójelbe tett értékek a FEIBA-egységekhez viszonyított arányt mutatják az egyes faktor-egységek esetében. Az amidolitikus aktivitásnál zárójelben megadott számértékek a „specifikus amidolitikus aktivitás” értéket, vagyis a mindenkori AOD.103/perc értéket adják meg, a leírt vizsgálati rendszerbe bevitt 1 FEIBA-egységre vonatkoztatva.
Táblázat
| 1. Példa | 2. Példa | |
| Az oldat térfogata | 20 ml | 20 ml |
| FEIBA-egység palackonként | 470 | 280 |
| Π-faktor-egység palackonként | 610 (1,30) | 240 (0,86) |
| VH-faktor-egység palackonként | 520 (1,11) | 260 (0,93) |
| IX-faktor-egység palackonként | 700 (1,49) | 300 (1,07) |
-5180816
| 1. Példa | 2. Példa | |
| X-faktor-egység palackonként | 540 (1,15) | 210(0,75) |
| Trombin NIH-egységek palackonként | 1,4 (0,003) | 1,0 (0,004) |
| Amidolitikus aktivitás (AOD.103/'perc S—2160 S—2222 S—2251 | 1 (0,43) 3 (1,28) 4 (1,70) | 1 (0,71) 2,5 (1,79) 2 (1,43) |
Szabadalmi igénypontok
Claims (2)
1. Eljárás új, VlII-faktor-inhibitor-áthidaló-aktivitású véralvadás-előidéző anyagot és II, VII, IX, X protrombinkomplex-faktorokat tartalmazó véralvadás-elősegítő készítmény előállítására emberi vérplazmából, azzal jellemezve, hogy citrát-iont és a protrombinkomplexet tartalmazó, adott esetben a Vili-faktortól mentes vérplazmát 5,5—8,5 pH-értékben 0—30 C° hőmérsékleten szabad kalcium-ionok távollétében a vérplazma mennyiségére számítva 0,05—5% mennyiségben kovasav- vagy szilikáttartalmú, a véralvadás5 ra fiziológiai úton ható felületaktív anyagokkal, előnyösen szilikagéllel vagy kaolinnal kezeljük, a vízben oldhatatlan anyagokat centrifugálással elválasztjuk, a szupematáns folyadékot önmagában ismert módon bázisos ioncserélővel, előnyösen dietilaminoetil-csoportot tartalmazó nagymole10 kulájú anyaggal kezeljük, az ioncserélőt ezt követően sóoldattal mossuk, majd az új VlII-faktor-inhibitor-áthidalóaktivitású véralvadás-előidéző anyagot és a II, VII, IX, Xfaktorokat eluáljuk, az eluátumot dializáljuk, majd liofilizálással koncentráljuk.
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a kovasav- illetve szilikáttartalmú, a véralvadásra fiziológiai úton ható felületaktív anyagokat a vérplazma mennyiségére számítva előnyösen 0,1—1% menynyiségben alkalmazzuk.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| AT640576A AT350726B (de) | 1976-08-30 | 1976-08-30 | Verfahren zur herstellung einer blut- gerinnungsfoerdernden praeperation aus menschlichem blutplasma |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU180816B true HU180816B (en) | 1983-04-29 |
Family
ID=3585985
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU77IU288A HU180816B (en) | 1976-08-30 | 1977-08-26 | Process for producing composition from human nlood plasma for improving agglutination of blood |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4160025A (hu) |
| AR (1) | AR213861A1 (hu) |
| AT (1) | AT350726B (hu) |
| BE (1) | BE858031A (hu) |
| CA (1) | CA1079191A (hu) |
| CH (1) | CH635747A5 (hu) |
| DE (1) | DE2734821C3 (hu) |
| DK (1) | DK151932C (hu) |
| ES (1) | ES461918A1 (hu) |
| FI (1) | FI57421C (hu) |
| FR (1) | FR2362633A1 (hu) |
| GB (1) | GB1554051A (hu) |
| HU (1) | HU180816B (hu) |
| LU (1) | LU78024A1 (hu) |
| NL (1) | NL170922C (hu) |
| NO (1) | NO148142C (hu) |
| SE (1) | SE443511B (hu) |
Families Citing this family (35)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2902158A1 (de) * | 1979-01-20 | 1980-07-31 | Biotest Serum Institut Gmbh | Verfahren zur herstellung von fibrinogen, einem die gerinnungsfaktoren ii, vii, ix und x enthaltenden prothrombinkomplex, antithrombin iii und einer loesung von lagerstabilen serumproteinen |
| WO1981002105A1 (en) * | 1980-01-28 | 1981-08-06 | Baxter Travenol Lab | Therapeutic compositions & methods for manufacture and use |
| US4286056A (en) * | 1980-01-28 | 1981-08-25 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Method for making therapeutic enzyme compositions |
| US4287180A (en) * | 1980-01-28 | 1981-09-01 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Method for treating blood clotting factor inhibitors |
| EP0035204B2 (en) * | 1980-03-05 | 1991-05-22 | Miles Inc. | Pasteurized therapeutically active protein compositions |
| US4361510A (en) * | 1980-05-27 | 1982-11-30 | Cutter Laboratories, Inc. | Blood coagulation promoting product |
| US4391746A (en) * | 1980-05-27 | 1983-07-05 | Cutter Laboratories, Inc. | Blood-coagulation-promoting products and methods of preparing them |
| EP0041174B1 (en) * | 1980-05-27 | 1985-09-11 | Miles Laboratories, Inc. | Blood coagulation promoting product and process of preparing same |
| US4404132A (en) * | 1980-05-27 | 1983-09-13 | Cutter Laboratories, Inc. | Blood coagulation promoting product |
| US4364861A (en) * | 1980-05-27 | 1982-12-21 | Cutter Laboratories, Inc. | Blood-coagulation-promoting products and methods of preparing them |
| AT368883B (de) * | 1980-07-22 | 1982-11-25 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung einer neuen blutgerinnungsfoerdernden praeparation auf basis von humanproteinen |
| DE3101752A1 (de) * | 1981-01-21 | 1982-08-26 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | "verfahren zur reinigung der blutgerinnungsfaktoren ii, vii, ix und/oder x und danach hergestellte praeparationen" |
| US4382083A (en) * | 1981-06-25 | 1983-05-03 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Therapeutic method for treating blood-clotting defects with factor VIIa |
| US4479938A (en) * | 1981-06-25 | 1984-10-30 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Therapeutic composition containing factor VIIa |
| JPS5866054A (ja) * | 1981-10-14 | 1983-04-20 | Sekisui Chem Co Ltd | 血液検査用容器 |
| JPS58105064A (ja) * | 1981-12-17 | 1983-06-22 | Sekisui Chem Co Ltd | 血液凝固促進剤 |
| AT389815B (de) * | 1984-03-09 | 1990-02-12 | Immuno Ag | Verfahren zur inaktivierung von vermehrungsfaehigen filtrierbaren krankheitserregern in blutprodukten |
| DE3625090A1 (de) * | 1986-07-24 | 1988-01-28 | Behringwerke Ag | Mittel zur therapie faktor viii-resistenter haemophilie a und verfahren zu seiner herstellung |
| US5118614A (en) * | 1988-01-18 | 1992-06-02 | Tessek Sdruzeni Praha | Concentrates of coagulation factors ii, vii, ix and x, method of their preparation and use |
| AT402891B (de) * | 1991-06-20 | 1997-09-25 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung eines inaktivierten blutproduktes |
| AT398079B (de) * | 1991-11-04 | 1994-09-26 | Immuno Ag | Präparation mit thrombinaktivität sowie verfahren zu ihrer herstellung |
| AT399818B (de) * | 1992-04-24 | 1995-07-25 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung einer hochgereinigten virussicheren faktor viii-präparation |
| AU6653094A (en) * | 1992-12-16 | 1994-07-04 | Immuno Aktiengesellschaft | Process for preparing a virus-safe biological composition |
| DE4320294A1 (de) * | 1993-06-18 | 1994-12-22 | Immuno Ag | Verwendung von humanem Protein C zur Verhinderung und Behandlung von Thrombozytenablagerungen |
| US5677162A (en) * | 1995-05-01 | 1997-10-14 | New York Blood Center, Inc. | Method for activating prothrombin to thrombin |
| DE19531637A1 (de) * | 1995-08-28 | 1997-03-06 | Immuno Ag | Pharmazeutische Zusammensetzung zur Behandlung von Blutgerinnungsstörugnen, Verfahren zur Herstellung derselben und deren Verwendung |
| EP0796623B1 (de) * | 1996-03-20 | 2005-05-25 | Baxter Aktiengesellschaft | Pharmazeutisches Präparat zur Behandlung von Blutgerinnungsstörungen |
| AT405485B (de) | 1997-05-28 | 1999-08-25 | Immuno Ag | Eine das vwf-propeptid enthaltende pharmazeutische präparation |
| AT407484B (de) * | 1997-11-12 | 2001-03-26 | Bio Prod & Bio Eng Ag | Arzneimittel zur förderung der wundheilung |
| ATE428440T1 (de) * | 2002-07-23 | 2009-05-15 | Bio & Bio Licensing Sa | Thrombingenerierfähige und thrombinhaltige pharmazeutische wirkstoffzubereitungen und arzneimittel |
| RS20050051A (en) * | 2002-07-23 | 2007-06-04 | Bio-Products & Bio Engineering Ag., | Pharmaceutical active ingredient preparation and medicaments that contain thrombin or have a thrombin-generating capacity |
| EP2305289A1 (en) | 2009-09-16 | 2011-04-06 | Bio-Products & Bio-Engineering Aktiengesellschaft | Medicinal products for the treatment of blood coagulation disorders |
| IS2809B (is) * | 2011-03-08 | 2012-10-15 | Haskoli Islands | Blóðstorkumæling |
| RU2648517C1 (ru) * | 2017-06-23 | 2018-03-26 | Федеральное государственное бюджетное учреждение Гематологический научный центр Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ ГНЦ Минздрава России) | Способ получения лиофилизированного препарата активированного протромбинового комплекса, обладающего фактор viii-шунтирующей активностью |
| WO2024012853A1 (de) | 2022-07-12 | 2024-01-18 | Biomedizinische Forschung & Bio-Produkte AG | Arzneimittel zur förderung der hämostase |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2262520B2 (de) * | 1972-12-20 | 1979-10-11 | Cutter Laboratories Inc., Berkeley, Calif. (V.St.A.) | Verfahren zur Herstellung eines lyophilisierten, lagerfähigen Konzentrats aus menschlichem Plasma |
| DE2459291C3 (de) * | 1974-12-14 | 1981-06-04 | Biotest-Serum-Institut Gmbh, 6000 Frankfurt | Verfahren zur Herstellung eines antihämophiles Globulin A enthaltenden Konzentrats neben einem Prothrombin- Komplex und einer Lösung von lagerstabilen Serumproteinen |
| US3998946A (en) * | 1975-04-23 | 1976-12-21 | The Regents Of The University Of Minnesota | Fibrinogen-free plasminogen-plasmin-free plasma and method of preparing and using same |
| DD121793A1 (hu) * | 1975-07-17 | 1976-08-20 | ||
| US4027013A (en) * | 1976-01-22 | 1977-05-31 | William L. Wilson | Clottable fibrinogen free factor VIII and albumin product and process |
-
1976
- 1976-08-30 AT AT640576A patent/AT350726B/de not_active IP Right Cessation
-
1977
- 1977-07-08 SE SE7707992A patent/SE443511B/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-08-02 DE DE2734821A patent/DE2734821C3/de not_active Expired
- 1977-08-03 GB GB32578/77A patent/GB1554051A/en not_active Expired
- 1977-08-08 US US05/822,679 patent/US4160025A/en not_active Expired - Lifetime
- 1977-08-10 FI FI772408A patent/FI57421C/fi not_active IP Right Cessation
- 1977-08-11 AR AR268769A patent/AR213861A1/es active
- 1977-08-11 NL NLAANVRAGE7708872,A patent/NL170922C/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-08-19 CH CH1022077A patent/CH635747A5/de not_active IP Right Cessation
- 1977-08-19 CA CA285,026A patent/CA1079191A/en not_active Expired
- 1977-08-22 FR FR7725597A patent/FR2362633A1/fr active Granted
- 1977-08-23 BE BE180368A patent/BE858031A/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-08-25 LU LU78024A patent/LU78024A1/xx unknown
- 1977-08-26 ES ES461918A patent/ES461918A1/es not_active Expired
- 1977-08-26 HU HU77IU288A patent/HU180816B/hu unknown
- 1977-08-29 NO NO772978A patent/NO148142C/no unknown
- 1977-08-30 DK DK384577A patent/DK151932C/da not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NL170922C (nl) | 1983-01-17 |
| DE2734821C3 (de) | 1985-03-14 |
| CH635747A5 (de) | 1983-04-29 |
| NL7708872A (nl) | 1978-03-02 |
| SE7707992L (sv) | 1978-03-01 |
| ES461918A1 (es) | 1978-12-16 |
| DK151932C (da) | 1988-06-20 |
| AR213861A1 (es) | 1979-03-30 |
| FI772408A (fi) | 1978-03-01 |
| DK151932B (da) | 1988-01-18 |
| NO772978L (no) | 1978-03-01 |
| BE858031A (fr) | 1977-12-16 |
| SE443511B (sv) | 1986-03-03 |
| FR2362633B1 (hu) | 1981-06-12 |
| NL170922B (nl) | 1982-08-16 |
| DK384577A (da) | 1978-03-01 |
| US4160025A (en) | 1979-07-03 |
| NO148142C (no) | 1983-08-17 |
| GB1554051A (en) | 1979-10-17 |
| FR2362633A1 (fr) | 1978-03-24 |
| FI57421B (fi) | 1980-04-30 |
| DE2734821B2 (de) | 1980-11-06 |
| FI57421C (fi) | 1980-08-11 |
| DE2734821A1 (de) | 1978-03-02 |
| LU78024A1 (hu) | 1978-01-11 |
| AT350726B (de) | 1979-06-11 |
| NO148142B (no) | 1983-05-09 |
| ATA640576A (de) | 1978-11-15 |
| CA1079191A (en) | 1980-06-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| HU180816B (en) | Process for producing composition from human nlood plasma for improving agglutination of blood | |
| US4297344A (en) | Blood coagulation factors and process for their manufacture | |
| JP3701028B2 (ja) | 高純度フォンビルブラント因子の入手方法 | |
| US7795399B2 (en) | Stable therapeutic proteins | |
| US4404132A (en) | Blood coagulation promoting product | |
| JPH05186369A (ja) | 治療的用途のためのヒトトロンビン濃厚液の製造法 | |
| US3717708A (en) | Blood coagulation complex | |
| JPH0650999B2 (ja) | 血液凝固因子安定化法 | |
| JPH01193229A (ja) | 抗血液凝固剤 | |
| US4287180A (en) | Method for treating blood clotting factor inhibitors | |
| EP0041173B1 (en) | Blood-coagulation-promoting products and methods of preparing them | |
| JPS6028812B2 (ja) | 副作用のない血漿分別物の製造方法 | |
| JPH09221432A (ja) | フォンビルブラント因子を含む医薬調製物 | |
| EP0044343B1 (en) | Prothrombin-containing therapeutic compositions and methods of producing enzymatically active blood clotting factors from prothrombin-containing blood fractions | |
| US4357321A (en) | Method and composition for treating clotting factor inhibitors | |
| US4361510A (en) | Blood coagulation promoting product | |
| EP0052874A1 (en) | Method for synthesizing procoagulant factor VIII activity | |
| US4459288A (en) | Therapeutic blood clotting factor compositions and their use | |
| Chandra et al. | Large scale preparation of nonthrombogenic prothrombin complex | |
| EP0041174B1 (en) | Blood coagulation promoting product and process of preparing same | |
| JP2535547B2 (ja) | 第▲ｖｉｉｉ▼因子抵抗性血友病ａ治療剤およびその製法 | |
| US4663164A (en) | Aqueous compositions for treating blood clotting factor inhibitors | |
| US4391746A (en) | Blood-coagulation-promoting products and methods of preparing them | |
| EP0401232B1 (en) | A process for pasteurization of aqueous solutions of factor viii | |
| PL166579B1 (pl) | Kompozycja do stabilizacji osocza krwi podczas pasteryzacji PL |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HU90 | Patent valid on 900628 |