NO148142B - Fremgangsmaate ved fremstilling av et blodkoaguleringsfremmende preparat fra humant blodplasma - Google Patents
Fremgangsmaate ved fremstilling av et blodkoaguleringsfremmende preparat fra humant blodplasmaInfo
- Publication number
- NO148142B NO148142B NO772978A NO772978A NO148142B NO 148142 B NO148142 B NO 148142B NO 772978 A NO772978 A NO 772978A NO 772978 A NO772978 A NO 772978A NO 148142 B NO148142 B NO 148142B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- factor
- plasma
- feiba
- activity
- vii
- Prior art date
Links
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 title claims description 61
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 31
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 15
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 title claims description 12
- 239000008280 blood Substances 0.000 title claims description 12
- 230000001112 coagulating effect Effects 0.000 title 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 44
- 108010018823 anti-inhibitor coagulant complex Proteins 0.000 claims description 37
- 229940105776 factor viii inhibitor bypassing activity Drugs 0.000 claims description 37
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 claims description 28
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 25
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 15
- 239000005995 Aluminium silicate Substances 0.000 claims description 14
- 102100027378 Prothrombin Human genes 0.000 claims description 14
- AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M cobalt(2+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+2].N#[C-].[N-]([C@@H]1[C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP(O)(=O)O[C@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M 0.000 claims description 14
- 229940039716 prothrombin Drugs 0.000 claims description 14
- 108010054218 Factor VIII Proteins 0.000 claims description 13
- 102000001690 Factor VIII Human genes 0.000 claims description 13
- 229960000301 factor viii Drugs 0.000 claims description 13
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 12
- 235000012211 aluminium silicate Nutrition 0.000 claims description 12
- NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N kaolin Chemical compound O.O.O=[Al]O[Si](=O)O[Si](=O)O[Al]=O NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 claims description 8
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 claims description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 7
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 claims description 7
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 7
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 5
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 claims description 5
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 4
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims description 3
- -1 diethylaminoethyl groups Chemical group 0.000 claims description 3
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 claims description 2
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 23
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 21
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 21
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 20
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 19
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 16
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 12
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 12
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 230000003024 amidolytic effect Effects 0.000 description 10
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 9
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 9
- TZCXTZWJZNENPQ-UHFFFAOYSA-L barium sulfate Chemical compound [Ba+2].[O-]S([O-])(=O)=O TZCXTZWJZNENPQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 8
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 8
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 8
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 7
- 108010014173 Factor X Proteins 0.000 description 7
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 7
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 7
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 7
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 7
- 102000015081 Blood Coagulation Factors Human genes 0.000 description 6
- 108010039209 Blood Coagulation Factors Proteins 0.000 description 6
- 102100022641 Coagulation factor IX Human genes 0.000 description 6
- 108010076282 Factor IX Proteins 0.000 description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 description 6
- 229960004222 factor ix Drugs 0.000 description 6
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 6
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- PGOHTUIFYSHAQG-LJSDBVFPSA-N (2S)-6-amino-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-4-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-1-[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-1-[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]propanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]acetyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-sulfanylpropanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-4-carboxybutanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]hexanoic acid Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O PGOHTUIFYSHAQG-LJSDBVFPSA-N 0.000 description 5
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 5
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 5
- 102100023804 Coagulation factor VII Human genes 0.000 description 5
- 108010023321 Factor VII Proteins 0.000 description 5
- 108010000499 Thromboplastin Proteins 0.000 description 5
- 102000002262 Thromboplastin Human genes 0.000 description 5
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 5
- 229940012413 factor vii Drugs 0.000 description 5
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 5
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 5
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 5
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 4
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 4
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 4
- 208000034158 bleeding Diseases 0.000 description 4
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 4
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 201000003542 Factor VIII deficiency Diseases 0.000 description 3
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 3
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 3
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 3
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 239000012898 sample dilution Substances 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- CAJXYXPLLJDEOB-SLFFLAALSA-N (2s)-6-amino-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-amino-3-methylbutanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-n-(4-nitrophenyl)hexanamide Chemical compound CC(C)[C@@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 CAJXYXPLLJDEOB-SLFFLAALSA-N 0.000 description 2
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TYMLOMAKGOJONV-UHFFFAOYSA-N 4-nitroaniline Chemical compound NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 TYMLOMAKGOJONV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- 229940124135 Factor VIII inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 108010074860 Factor Xa Proteins 0.000 description 2
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 2
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000603 anti-haemophilic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 239000013590 bulk material Substances 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 150000001860 citric acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N heavy water Substances [2H]O[2H] XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N 0.000 description 2
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 229940039748 oxalate Drugs 0.000 description 2
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 108010012557 prothrombin complex concentrates Proteins 0.000 description 2
- ZNCPFRVNHGOPAG-UHFFFAOYSA-L sodium oxalate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)C([O-])=O ZNCPFRVNHGOPAG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229940039790 sodium oxalate Drugs 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N Alumina Chemical compound [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100026735 Coagulation factor VIII Human genes 0.000 description 1
- 208000027205 Congenital disease Diseases 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108010014172 Factor V Proteins 0.000 description 1
- 229940121854 Factor VII inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 1
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 208000009292 Hemophilia A Diseases 0.000 description 1
- 101000911390 Homo sapiens Coagulation factor VIII Proteins 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 108010034278 S 2160 Proteins 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 229940122618 Trypsin inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 239000012496 blank sample Substances 0.000 description 1
- 229940019700 blood coagulation factors Drugs 0.000 description 1
- 238000004820 blood count Methods 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000701 coagulant Substances 0.000 description 1
- 229910052681 coesite Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000571 coke Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 229910052906 cristobalite Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 201000007386 factor VII deficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000005376 factor X deficiency Diseases 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 1
- 208000009429 hemophilia B Diseases 0.000 description 1
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 238000005374 membrane filtration Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- QQVNCBCBFNWLJX-KCHLEUMXSA-N n-[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-5-(diaminomethylideneamino)-1-(4-nitroanilino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]benzamide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NC=1C=CC(=CC=1)[N+]([O-])=O)NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 QQVNCBCBFNWLJX-KCHLEUMXSA-N 0.000 description 1
- IQFRQVCWHMZHOA-KCHLEUMXSA-N n-[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-5-(diaminomethylideneamino)-2-(4-nitroanilino)pentanoyl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]benzamide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC=1C=CC(=CC=1)[N+]([O-])=O)NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 IQFRQVCWHMZHOA-KCHLEUMXSA-N 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 229940099990 ogen Drugs 0.000 description 1
- UWBHMRBRLOJJAA-UHFFFAOYSA-N oxaluric acid Chemical compound NC(=O)NC(=O)C(O)=O UWBHMRBRLOJJAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003058 plasma substitute Substances 0.000 description 1
- 229940012957 plasmin Drugs 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 239000002510 pyrogen Substances 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000011076 safety test Methods 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N silicic acid Chemical compound O[Si](O)(O)O RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 description 1
- 229910052682 stishovite Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- GXAVVILCWDFBPG-UHFFFAOYSA-J tetrasodium 2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylate chloride Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Cl-].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O GXAVVILCWDFBPG-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 108010059178 topostasin Proteins 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 229910052905 tridymite Inorganic materials 0.000 description 1
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940038773 trisodium citrate Drugs 0.000 description 1
- 239000002753 trypsin inhibitor Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
- Y10S530/829—Blood
- Y10S530/83—Plasma; serum
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S930/00—Peptide or protein sequence
- Y10S930/01—Peptide or protein sequence
- Y10S930/28—Bound to a nonpeptide drug, nonpeptide label, nonpeptide carrier, or a nonpeptide resin
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- External Artificial Organs (AREA)
Description
Foreliggende oppfinnelse angår en fremgangsmåte ved fremstilling av et blodkoaguleringsfremmende preparat av menneskelig blodplasma som inneholder et nytt blodkoaguleringsvirksomt stoff, kalt "FEIBA".
Dette stoff påvirker på ny måte blodkoaguleringen og be-virker en omgåelse av faktor VIII-virkningen, hvilket betyr at blodkoaguleringen normaliseres uten tilførsel av faktor VIII. Preparatet er særlig egnet for behandling av hemofili A-pasienter med inhibitor. Forkortelsen "FEIBA" står for "Factor Eight Inhibitor-Bypassing Activity".
Hemofili A er en lenge kjent sykdom (blødersykdom), ved hvilken blodkoaguleringsforløpet er forstyrret ved mangelen av aktiviteten av en blodkoaguleringsfaktor. Denne faktor betegnes som antihemofil-faktor (AHF) eller faktor VIII. En helbredelse av denne medfødte, av defekte gener betingede sykdom som sådan er ikke mulig. Behandlingen kan, i tilfelle av en blødning, bare skje ved intravenøs tilførsel av tilsvarende mengder av faktor VIII, som stammer fra blodet fra en sunn giver. Mens man tidligere var henvist til fullblod, hhv. fullplasma, av hvilke store mengder måtte anvendes, finnes det i dag preparater som inneholder faktor VIII i konsentrert form og også stabil, frysetørret form. Behandlingen med disse preparater fører i de fleste tilfelle til
en hurtig blodstilning.
Det finnes imidlertid også pasienter ved hvilke det ikke
bare foreligger en feil i faktor Vlll-aktiviteten, men som også har et mot faktor VIII rettet hemningsstoff (inhibitor), som, alt efter den tilstedeværende mengde, tilintetgjør virkningen av til-ført faktor VIII ved nøytralisasjon (inhibering). Ved disse faktor Vlll-inhibitor-pasienter har det hittil vært liten utsikt for en vellykket behandling. Den eneste mulighet besto i fjern-elsen av inhibitoren før behandlingen med faktor Vlll-konsentrater, hvilket bare er mulig ved plasmautbytte av pasient-
plasmaet mot plasma fra en sunn giver, eller med plasmaerstat-ningsmiddel. Dette krever en stor teknisk og medisinsk innsats. Plasmautbytningen må gjentaes ved fornyet behandling, da inhibitoren, spesielt efter tilførsel av ny faktor VIII som antigen ved "boostereffekt", igjen efterdannes. En behandling av inhibitor-pasienten med såkalt "immunsuppressiva" for undertrykningen av in vivo-syntesen av inhibitoren har hittil for det meste vært resultatløs.
For kort tid siden viste der seg en ny mulighet for behandling av faktor Vlll-inhibitor-pasienter. Kurczynski og Penner, New Engl. J. Med., bd. 291, sider 164 til 167, 1974, beretter som
de første om en vellykket behandling av faktor Vlll-inhibitor-pasienter med såkalte "aktiverte" prothrombinkompleks-konsentrater. Også i publikasjoner av Sultan, Brouet og Debre, New Engl. J. Med.,
bd. 291, side 1087, 1974, og Abildgaard, Britton og Roberts,
Blood, bd. 44, side 933, 1974, berettes om klinisk resultatrik anvendelse av aktiverte prothrombinkompleks-preparater på blød-
ende faktor Vlll-inhibitor-pasienter.
Den såkalte aktivering av disse prothrombinkompleks-konsentrater er øyensynlig å tilbakeføre til ukjente forurensninger. Preparatene kunne ikke prøves med hensyn til sitt virksomme
prinsipp og ikke standardiseres. Resultatene er derfor usikre og neppe reproduserbare.
US-PS 3 998 946 angår en fremgangsmåte for behandling av blod, plasma eller plasmafraksjoner med kolloidalt SiC^» med det formål å stabilisere plasmaproteinproduktet for langvarig lagring, hvorved plasmaproteiner slik som fibrinogen, plasmin(ogen), cholesterin, lipo-proteiner og triglycerider ble fjernet ved Si02~behandlingen. Når det gjelder generering og etterfølgende isolering, kan man ikke finne noe angitt i US-PS 3 998 946. Fra patentskriftet fremgår det ikke annet enn at siliciumdioxydet er en adsorbent.
DE-OS 2 262 520 angår en fremgangsmåte for fremstilling av et lagringsdyktig blodkoaguleringskonsentrat fra humant plasma, hvilken fremgangsmåte består av forskjellige absorpsjons- og elueringstrinn. Generering av en substans med FEIB-aktivitet finnes ikke angitt i motholdet, tvert om. er det på side 6, 2. avsnitt, uttrykkelig angitt at preparatet er fritt for trombin, den aktiverte form av faktor X, og at koagulasjonsfaktorene II, VII, IX og X ikke inneholdes i ' aktivert form.
DI>AS 2 4 59 291 ar.yår en frongar.gsn-.åte for fremstilling av
et antihemofilt globulinholdig konsentrat hvor man ved siden av et faktor Vlll-holdig protein og et protrombinkompleks fremstiller en stabil løsning av serumproteiner. Kolloidal kiselsyre anvendes for å befri supernatanten for labile proteiner etter isolering av protrombinkomplekset, for å oppnå en stabil løsning av serumproteiner.
Denne fremgangsmåte har således svært lite til felles med foreliggende fremgangsmåte.
Foreliggende oppfinnelse tar sikte på å overvinne de omtalte ulemper og vanskeligheter og har stilt seg som mål å løse den oppgave å fremskaffe et preparat som på reproduserbar og tilsiktet vis sikrer en dannelse av den ønskede faktor VIII-inhibitor-bypass-aktivitet. Faktor Vlll-inhibitor-bypass-aktiviteten skal være målbar og standardiserbar ved hjelp av et egnet forsøks-system. Preparatet skal være klinisk virksomt og forlikelig,
dvs. ved blødende faktor Vlll-inhibitor-pasienter føre til en blodstilling og ikke vise noen uønskede bivirkninger.
Oppfinnelsen angår således en fremgangsmåte ved fremstilling av et blodkoaguleringsfremmende preparat fra humant blodplasma, som inneholder et nytt blodkoaguleringsvirksomt stoff kalt Factor-Eight-Inhibitor-Bypassing-Activity sammen med protrombinets faktorer II, VII, IX, X, hvilken fremgangsmåte er kjennetegnet ved at menneskelig citrationholdig plasma, fra hvilken faktorer VIII etter behov er fjernet og som inneholder protrombinkomplekset, i fravær av fri calciumioner behandles med vannuoppløselige uorganiske koagulenngsfysiologisk-overflateaktive stoffer slik som silicagel, diatoméjord eller kaolin ved et pH-område på 5,5 - 8,5 og ved en temperatur på 0 - 3 0°C, hvorved det nye stoff benevnt FEIBA dannes, hvoretter de vannuoppløselige stoffer fraskilles og den ovenstående væske derpå i og for seg kjent måte behandles med basiske ionebyttere, slik som diethylaminoethyl-gruppeholdige molekylære stoffer på hvilke FEIBA absorberes sammen med faktorene II, VII, IX, X, hvoretter ionebytteren vaskes med en fortynnet saltløsning og behandles med en saltløsning med høyere konsentrasjon enn vaskeoppløsningen for å eluere FEIBA og faktor II, VII, IX, X i.et aktivitetsforhold på 0,1 - 10, fortrinnsvis 0,5 - 2, hvoretter eluatet dialyseres og deretter konsentreres ved lyofilisering.
Det nye stoff med FEIBA-aktiviteten er et protein med en høyere molekylvekt enn den for de ikke aktiverte faktorer II, VII, IX, X (protrombinkompleks). Mens de sistnevnte faktorer har en molekylvekt på ca. 7 0.ooo, har det nye s♦toff en molekylvekt i om-rådet av ca. 100.000.
Som utgangsmateriale ved fremstillingen av det nye preparat anvendes menneskelig citratplasma, som inneholder alle koa-guleringsfaktorene i naturlig form; videre kan også anvendes plasmafraksjoner, som fås etter fraskillelse av faktor VIII (AHF), som f.eks. et over kryopresipiat eller over presipitat I ifølge Cohn stående plasma.
Dannelsen av stoffet FEIBA skjer under over-
holdelse av et pH-område fra 5,5 til 8,5 og en temperatur på
0 - 30°C.
Hensiktsmessig anvendes herved de vannuoppløselige uorgan-. iske koaguleringsfysiologisk-overflateaktive stoffer i en mengde på 0,05 til 5%, fortrinnsvis 0,1 til 1%, beregnet på mengden av plasmaet.
For behandling av plasmaet kan anvendes stoffer som for størstedelen består av findelt siliciumdioxyd, f.eks. stoffer av gruppen diatoméjord, som celit , eller stoffer som er sammensatt av siliciumdioxyd og aluminiumtrioxyd, f.eks. kaolin. Generelt er de stoffer egnet som er kjent som "overflateaktive" i koagul-eringssystemet, hhv. de som ved sin overflateaktivitet er i stand til å innlede kontaktfasen av blodkoaguleringen. Mens overflateaktivebare koaguleringsfaktorer (faktorene XI og
XII) absorberes av disse stoffer i sin aktiverte "form i dette trinn, forblir faktorene II, VII, IX, X sammen med det dannede stoff FEIBA i den overstående væske og kan efter fraskillelse av de overflateaktive, vannuoppløselige stoffer fraskilles under anvendelse av kjente metoder, og anrikes. Til det siste skritt kan f.eks. svakt basiske ioneutbyttere anvendes; diethylaminoethyl-aminoethyl (DEAE) -gruppe-holdiqe, høymolekylære stoffer,f.eks.DEAE
•bundet til cellulose eller tverrbundne dextraner, har vist seg særlig.vellykket. Ved adsorpsjon på de nevnte ioneutbyttere, vasking og eluering av det adsorberte plasmaprotein med øket ione-styrke kan proteinfraksjonen som nå inneholder FEIB-aktiviteten 1 renset og anriket form, isoleres. Efter fjernelse av saltene
ved dialyse og påfølgende frysetørring får man den rå, FEIB-aktivitet inneholdende fraksjon i tørr, stabil, form. Av denne dannes det ferdige preparat ved gjenoppløsning i vann, tilsetning av salter, pH-innstilling, sterilfiltrering og fornyet fryse-tørring .
Undersøkelser over egenskapene av de ifølge oppfinnelsen fremstilte preparater brakte bevis for at faktorene Ila (thrombin) og Xa, ikke bidrar noe til FEIB-aktiviteten. Thrombin i spor som det kan være tilstede i de ifølge oppfinnelsen fremstilte preparater, gir ingen forkortelse av den aktiverte partielle thromboplastintid av faktor Vlll-inhibitorplasma. Heller ikke soya-bønne -t rypsininhibitor , en kjent inhibitor for faktor Xa-aktivitet , hemmer FEIB-aktiviteten av preparatet. på grunnlag av gel-kromatografiske undersøkelser har det vist seg at det nye stoff har en høyere molekylvekt enn de kjente faktorer av prothrombinkomplekset II, VII, IX og X. Da videre de aktiverte faktorer av prothrombinkomplekset opstår ved enzymatisk avspaltning av et brudd-stykke av den tilsvarende naturlige (ikke aktiverte) koaguler-ingsfaktor, altså mindre molekyler oppstår enn molekylet for de tilsvarende ikke-aktiverte faktorer, kan med sikkerhet antaes at FEIB-aktiviteten i preparatene fremstilt ifølge oppfinnelsen,
ikke bevirkes av en aktivert faktor av prothrombinkomplekset, men nettopp av det nydannede stoff med høyere molekylvekt.
For karakterisering av det nye stoff kan på den ene side trekkes frem forholdet av aktivitetene av koagulerings-
faktorene II, VII, IX og X til FEIB-aktiviteten: disse forhold, uttrykt i enheter, ligger mellom 0,1 og 10, fortrinnsvis mellom 0,5 og 2, idet en enhet av faktor II-VII-IX-X tilsvarer aktiviteten av disse faktorer, som gjennomsnittlig inneholdes i 1 ml friskt menneskelig eit ratplasma, og en FEIBA-enhet er definert som den FEIB-aktivitet som forkorter den aktiverte partielle thromboplastintid av et -faktor VII-inhibitorplasma med høy titor til halvparten av tiden jevenført med tiden i et blindforsøk.
På den annen side kan til karakterisering av det nye stoff også anvendes dets amidolytiske aktivitet. Ved amidolytisk aktivitet forstår man et stoffs evne, til å avspalte p-nitroanilin i standari-serte peptidforbindelser som over en amidbinding er bundet til kromoforen p-nitroanilin, hvilket bestemmes fotcmetrisk. Slike standardiserte peptidpreparater fremstilles f.eks. av firmaet Kabi i Sverige. således er peptidet S-2l6o N-benzoyl-L-f enyla lany1-L-valyl-L-arginin-p-nit roanilid.HCl (kortform: Bz-Phe-Va 1-Arg-p-nit roa nil id . HC1) spesifikt for thrombin, S-2222 N-benzoyl-L-isoleucyl-L-glutamyl-L-glycyl-L-arginyl-p-nitroanilid.HC1 (kort form: Bz-Ile-Glu-Gly-Arg-p-nitro - anilid.HCl) for Xa og S-2251 D-valy1-L-leucyl-L-lysyl-p-nitroanilid.2HCl (kort form: D-Val-Leu-Lys-p-nitroanilid.2HC1) for plasmLn. Prøver man de ifølge oppf innelsen, f remst ilt e preparater mot de nevnte substrater, finner man en forsvinnende liten amidolytisk aktivitet. På den annen side ville en prøve av et preparat med et innhold av thrombin og/eller faktor Xa, når dette innstilles på den samme FEIB-aktivitet, som de ifølge oppfinnelsen fremstilte preparater oppviser, vise en høy amidolytisk aktivitet.
Et videre kjennetegn på preparatene fremstilt ifølere oppfinnelsen ligger også i at de bare har en liten thrombinaktivitet hvis de overhodet har noen. Forholdet mellom thrombinaktiviteten og FEIB-aktiviteten overskrider ikke 0,02, idet thrombinaktiviteten er. uttrykt i NIH-enheter (NIH = US-National Institute of Health), og FEIB-aktiviteten er uttrykt i FEIBA-enheter.
Foreliggende fremgangsmåte og egenskapene av de derved fremstilte preparater er nærmere beskrevet i de følgende eksempler og forsøksresultater.
Eksempel 1
Friskt frosset plasma opptines ved 0 til +4°C, og det derved dannede kryopresipitat fraskilles ved sentrifugering. Den kryo-overstående væske innstilles på pH 7,0 med 0,5 N saltsyre, tilsettes 5 g kaolin pr. 1 liter kryo-overstående væske, og omrøres ved +4°C i 1 time. Derpå fraskilles kaolinet ved sentrifugering. Det dannede stoff FEIBA blir nu, sammen med faktorene av prothrombinkomplekset, adsorbert på DEAE- Sephadex®.
Til dette formål tilsettes 0,5 g DEAE- Sephadex<®>A-50 pr.
1 liter kaolin-overstående væske, og der omrøres i en halv time ved +4°C. DEAE- Sephadexet<®> fraskilles, det overstående plasma kan anvendes for utvinning av gamma-globulin og albumin. DEAE-Sephadex underkastes en to gangers vaskeprosess med en tri-natriumcitrat-natriumkloridoppløsning, idet der anvendes en pH-verdi på 7,5-
For eluering omrøres det erholdte DEAE- Sephadex med 3% natriumklorid, O,1% trinatriumcit rat.2H20 (2% av det opprinnelige plasmavolum) i 20 minutter, og eluatet utvinnes ved filtrering. Dette dialyseres over natten mot 0,05% t rinat riumcit rat .2H,,0 ,
0,1% nat riumkloridoppløsning ved pH 7,0 ved +4°C, fryses så og underkastes en første lyofiliseringsbehandling (bulk). I bulk-materialet bestemmes FEIB-aktiviteten såvel som aktiviteten av faktorene av prothrombinkomplekset.
For fremstilling av det farmasøytisk anvendbare preparat med FEIB-aktivitet skal forholdet av enheter av faktor II-VII-IX-X til FEIBA-enheter ligge mellom 0,5 og 2. Dette kan skje ved blanding av egnede bulk-satser. Bulk-materialet oppløses i destillert, pyrogenfritt vann, slik at FELB-aktivit et en utgjør mellom 10 og 50 FEIBA-enheter pr. ml (i foreliggende fall 25 FEIBA-enheter pr. ml). Efter tilsetning av de nødvendige salter for dannelse av en isoton oppløsning og innstilling av pH mellom 7,0 og 7,5, klares oppløsningen ved membranfi 11 rering og steril - filtreres til slutt gjennom et 0,2 [ im membra nf i lt er. Oppløsningen fylles under sterile betingelser til 20 ml i sluttbeholderne, dypfryses og 1yofi lise res.
Eksempel 2
Som utgangsmateriale tjener igjen friskt frosset plasma, hhv. den derav resulterende kryo-overstående væske. Den kryo-overstående væske tilsettes uten pH-innstilling (naturlig pH = 7,8) 10 g "Celit 512" pr. 1 liter kryo-overstående væske, og omrøres i 3 timer ved +4°C. Efter fraskilling av "Celit" ved sent r i.f ugering skjer opparbeidelsen av preparatet med det dannede stoff FEIBA på samme måte som i eksempel 1.
På de ferdige preparater ble der foruten de vanlige sikker-hetsprøver på sterilitet, uskadelighet, pyrogenfrihet, fravær av HB^-antigen, utført prøver på virksomhet (FEIB-aktivitet), innhold av prothrombinkompleks-faktorer, thrombininnhold såvel som den amidolytiske aktivitet med de tre substrater S-2l6o, S-2222 og S-2251.
De foretatte prøver ble utført på den nedenfor beskrevne måte:
1. Virksomhetsprøve (bestemmelse av FEIBA-enheter).
a) Reagenser:
Faktor V111-inhibitorplasma:
Citratplasma av en pasient med hemofili A lyofilisert.med en inhibitor mot faktor VIII (inhibitortiter minst 10 enheter pr. ml). Under forsøksperioden ble inhibitorplasmaet anbrakt i isbad.
Fosfolipid-kaolin-suspensjon:
Fosfolipid-konsentratet ("Tachostyptan") fortynnes 1:200 i Owrens puffer og tilsettes 0,5% kaolin G/V (0,5 g/lOO ml). Blandingen oppbevares dypfrossen. Under forsøksperioden holdes den ved værelsetemperatur.
Citrat-/koksaltoppløsning som fortynningsmiddel for prøver:
0,7% natriumklorid/O,7% nat riumcitrat.2H20
m/20 calciumklorid:
Under forsøksperioden holdes den ved 37°C.
b) Forsøksmetode:
Efter oppløsning av fraksjon FEIBA-prøven som skal undersøkes
og et FEIBA st andardpreparat med definerte FEIBA-enheter
pr. ml i den angitte mengde destillert vann, fremstilles seks geometriske fortynninger under anvendelse av citrat/ koksaltoppløsningen idet man begynner med 5 FEIBA-enheter pr. ml. Disse fortynninger blir under forsøksperioden holdt i et isbad. Reagensene pipetteres på følgende måte i små glassrør: 0,05 ml faktor Vlll-inhibitorplasma 0,05 ml prøve (fortynninger av forsøksprøven og standarden, såvel som eit rat-/koksaltoppløsning som blindprøve)
0,05 ml fosfolipid-kaolin-suspensjon inkuberes i 6 minutter ved 37°C
0,05 ml m/20 calciumklorid
Tiden fra calciumkloridtilsetningen til koagulatdannelse måles med en stoppeklokke (helling på forsøksrørene eller anvendelse av et automatisk koagulometer).
c) Beregning av FEIBA-enhetene pr. flaske:
Der settes opp en målekurve idet man oppfører koaguleringstidene (i sekunder) for fortynningene av FEIBA-standard-preparatet mot de tilsvarende konsentrasjoner (i FEIBA-enheter pr. ml) på dobbelt logaritmisk millimeterpapir. FEIB-aktiviteten av forsøksprøvefortynningene beregnes under anvendelse av målekurven og ved multiplikasjon med den tilsvarende fortynningsfaktor. Middelverdien av disse resultater tilsvarer FEIB-aktiviteten i forsøksprøven, uttrykt i FEIBA-enheter pr. ml. Multipliserer man denne verdi med oppløsningsvolumet (i ml), får man totalmengden av FEIBA-enheter pr. flaske. 2. Bestemmelse av aktiviteten av koagulasjonsfaktorene II, VII, IX og X.
A) Faktor II-bestemmelse:
a) Reagenser:
Serum: Blod fra en sunn giver (uten antikoagulans) inkuberes i 24 timer ved 37°C. Serumet skilles fra det koagulerte blod, sentrifugeres, oppdeles i porsjoner og oppbevares dypfrosset.
Okse-oxalatplasma absorbert med bariumsulfat (som kilde til faktor V og som fortynningsmiddel for prøver): 9 deler okseblod blandes med 1 del 1,34%-ig natrium-oxalat. Det resulterende plasma absorberes med 10% bariumsulfat. Efter sentrrfugering oppbevares det absorberte plasma oppfylt i porsjoner og dypfrosset.
"Thromborel" (calciumholdig, menneske-thromboplast in) .
b) Forsøksmetode:
Reagensene (de oppbevares med unntagelse av "Thromborel",
under forsøket i et isbad), pipetteres i små glassrør på følgende måte:
O ,05 nil serum
0,05 ml prøve (rekkefortynninger av prøven som skal undersøkes, hhv. et "normalplasma" eller en standard)
inkuberes i 1 minutt ved 37°C
0,2 ml "Thromborel" (holdes under forsøket på 37°C) Tiden fra tilsetningen av "Thromborel" inntil koagulatdannelse måles med en stoppeklokke.
c) Beregning av faktor II-konsentrasjonen:
Av forenede plasmaprøver fra minst 15 sunne givere fremstilles en standardplasma. Denne "poolplasma" gjelder som "normalplasma", og dens faktor II-aktivitet settes til 100%. Derpå oppsettes en målekurve idet man på dobbelt logaritmisk millimeterpapir oppfører koagulasjons-tidene for plasmarekkefortynningene av dette "normalplasma" (ufortynnet, 1:2, 1:4, 1=8, •••) mot de tilsvarende konsentrasjoner. Faktor II-konsentrasjonene av prøvefortynningene uttrykkes i % av normalplasmaet under anvendelse av målekurven og multipliseres med den tilsvarende fortynningsfaktor. Gjennomsnittsverdien av disse resultater tilsvarer aktiviteten av forsøks-materialet i % av faktor IT. Mengden av faktor II som er tilstede i en flaske, beregnes efter følgende formel:
En enhet av faktor II er ekvivalent med den faktor II-aktivitet som gjennomsnittlig er tilstede i 1 ml friskt eit ratplasma.
B) Faktor VII-bestemmelse:
a) Reagenser:
Faktor Vll-mangelplasma: Citratplasma fra en pasient med
sterk faktor VII-mangel (faktor VII under 1%), oppbevares
i dypfrossen tilstand og lyofiliseres efter tilsetning av IO g/l HEPES, med en pH-verdi på 7,0.
Citrat-/koksaltoppløsning som fortynningsmiddel for prøven: 0,7% t rinat riumcit rat . 211^0 , 0,7% nat r iumklor id .
"Thromborel" (calciumholdig menneske-thromboplast in)
b) Forsøksmetode:
Mangelplasraaen og fortynningene av prøven oppbevares i
isbad. "Thromborel" oppbevares under forsøkene ved 37°C. Reagensene pipetteres i små glassrør på følgende måte:
0,05 ml faktor VII-mangelplasma
0,05 ml prøve (rekkefortynninger av prøven som skal undersøkes, hhv. et "normalplasma" eller en standard)
1 minutts inkubering ved 37°C
0,2 ml "Thromborel"
Tiden fra "Thromborel"-tilsetningen inntil koagulatdannelse måles med stoppeklokke. c) Beregning av faktor VII-konsentrasjonen: Beregningen av faktor VII-konsentrasjonen skjer på samme
måte som beskrevet for faktor II.
C) Faktor IX-bestemmelse:
a) Reagenser:
Faktor IX-mangelplasma: Citratplasma fra en pasient med
alvorlig hemofili B (faktor IX under 1%), oppbevares i dypfrossen tilstand.
Fosfolipid/kaolin-suspensjon: Fosfolipid-konsent rat ("Tachostyptan") fortynnes 1:200 i Owrens puffer, tilsettes kaolin (0,5 g/100 ml) og oppbevares dypavkjølt. Okse-oxalatplasma absorbert med bariumsulfat som fortynningsmiddel for prøver: 9 deler okseblod blandes med 1 del 1,34%-ig nat riumoxalat . Det resulterende plasma absorberes med 10% bariumsulfat. Efter sent rifugering fylles det absorberte plasma i porsjoner og oppbevares dypf rosset .
m/20 calciumklorid
b) Forsøksmetode:
Inkubasjon av faktor IX-mangelplasma med fosfol ipid/kaolin-suspensjon: Den nødvendige mengde mangelplasma blandes med-et like stort volum fosfo1ipid/kao1in-suspensjon, inkuberes i 5 minutter ved 37°C og oppbevares derpå i 30 minutter i et isbad.
Reagensene (de oppbevares, med unntagelse av calciumklorid, under forsøket i et isbad), pipetteres, i små glassrør på følgende måte: 0,2 ml inkubert mangelplasma-fosfolipid/kaolin-suspensjon
0,1 ml prøve (rekkefortynninger av prøven som skal undersøkes, hhv. et "normalplasma" eller en st andard)
inkubering i 1 minutt ved 37°C
0,1 ml m/20 calciumklorid (måles under forsøket ved 37°C)
Tiden fra tilsetningen av calciumkloridet inntil koagulat-dannelsen måles med stoppeklokke.
c) Beregning av faktor IX-konsentrasjonen:
Beregningen av faktor IX-konsentrasjonen skjer på samme
måte som beskrevet for faktor II.
D) Faktor X-bestemmelse:
a) Reagenser:
Faktor X-mangelplasma: Citratplasma fra en pasient med
alvorlig faktor x-mangel (faktor X under 1%) oppbevares dypavkjølt eller lyofiliseres efter tilsetning av 10 g/l HEPES og innstilling av pH-verdien på 7,0.
Citrat-koksaltoppløsning som fortynningsmiddel for prøver: 0,7% natriumklorid/O,7% natriumcitrat.2H20 "Thromborel" (calciumholdig, menneskelig thromboplastin).
b) Forsøksmetode:
Reagensene (de oppbevares, med unntagelse av "Thromborel"
under forsøket i et isbad), pipetteres i små glassrør på følgende måte:
0,05 ml faktor X-mangelplasma
0,05 ml prøve (rekkefortynninger av prøven som skal undersøkes, hhv. av "normalplasmaet" eller en standard)
inkubering i 1 minutt ved 37°C
0,2 ml "Thromborel" (holdes under forsøket ved 37°C)
Tiden fra tilsetningen av "Thromborel" inntil koagulatdannelse måles med stoppeklokke.
c) Beregning av en faktor X-konsentrasjon: Beregningen av faktor X-konsentrasjonen skjer på samme
måte som beskrevet for faktor II.
3. Thrombinprøve.
a) Reagenser:
1%-ig fibrinogenoppløsning av menneskelig opprinnelse.
Standardisert thrombin ("Topostasin", Roche, 3000 NIH-thrombin-enheter pr. flaske).
0,7% natriumklorid/O,7% natriumcitrat.2H20 som fortynningsmiddel (citrat-/koksaltoppløsning).
b) Forsøksmetode:
Efter oppløsning av det lyofiliserte produkt i den angitte
mengde destillert vann fremstilles 6 geometriske fortynninger under anvendelse av citrat-/koksaltoppløsning og 8 geometriske fortynninger av det standardiserte thrombin, idet man begynner med 1 NIH-enhet pr. ml.
Forsøksf remgangsmåte:
0,2 ml 1%-ig fibrinogenoppløsning og 0,2 ml prøve (fraksjon FEIBA- og thrombinfortynninger,
såvel som en blindprøve med citrat-/koksaltoppløs-ning)
inkuberes ved 37°C. Tiden inntil koagulatdannelse måles ved tipping av forsøksrørene med stadig større tidsrom, og således fra 10 minutter inntil 1 time. Denne prosess strekker seg over minst 6 timer. En siste tipping av rørene skjer efter inkubasjon over natten. Blindprøven (fortynningsmiddel som prøve) må forbli stabil over natten (ingen koagulatdannelse).
c) Beregning av thrombin-konsentrasjonen:
Der oppstilles en målekurve idet man på dobbelt logaritmisk
millimeterpapir avsetter koaguleringstidene av de geometriske fortynninger av st andardthrombinet mot de tilsvarende konsentrasjoner (thrombinenheter pr. ml). Thrombin-konsentrasjonene av forsøksprøvefortynningene beregnes under anvendelse av målekurven og ved multiplikasjon med den tilsvarende fortynningsfaktor. Middelverdien av disse resultater tilsvarer thrombinaktiviteten av forsøksprøven, uttrykt i thrombinenheter pr. ml. Multipliserer man denne verdi med oppløsningsvolumet i ml, får man totalmengden av thrombinenheter pr. flaske.
4. Bestemmelse av den amidolytiske aktivitet,
a) Reagenser:
Kromogene substrater:
S-2l60: N-benzoyl-L-fenylalanyl-L-valyl-L-arginin-p-
nit roanilid .HC1
(Kort form: Bz-Phe-Val-Arg-p-nitroanilid.HC1)
0,5 mg/ml H20 = 0,73 m molar
S-2222: N-benzoyl-L-isoleucyl-L-glutamyl-L-glycyl-L-arginyl-p-nitroanilid.HC1
(Kort form: Bz-Ile-Glu-Gly-Arg-p-nitroanilid. HC1)
1,4 mg/ml H20 = 1,91 m molar
S-2251: D-valyl-L-leucyl-L-lysyl-p-nitroanilid.2HC1
(Kort form: D-Val-Leu-Lys-p-nitroanilid.2HC1)
1,65 mg/ml H20 = 2,99 m molar
Puffer:
6,06 g "Tris" (tris-(hydroxymethyl)-aminomethan)
= 0,05 molar
10,6 g nat riumklorid = 0,18 molar oppløses i 1 liter destillert vann. pH innstilles med konsentrert saltsyre på 7,4-
b) Forsøksfremgangsmåte:
1,0 ml puff er
0,1 ml forsøksprøve (preparat inneholdende FEIBA) 0,2 ml substrat (S-2160 hhv. S-2222 hhv. S-2251)
Denne blanding fylles i en ved 37°C temperert kyvette (skikttykkelse 1 cm) og økningen av optisk tetthet måles i et fotometer ved 405 nm i tidsintervaller på 1 minutt.
c) Beregning:
Av minst 5 enkeltmålinger beregnes den gjennomsnittlige
økning av den optiske tetthet pr. minutt og multipliseres med 1000. Denne verdi betegnes med AOD.lO^/min, og tjener til å karakterisere den amidolytiske aktivitet (enzym-aktivitet) av den undersøkte prøve med hensyn til det i hvert tilfelle anvendte substrat.
Divideres nu den målte AOD.10 -3/min-vercli med aktiviteten av forsøksprøven i FEIBA-enheter pr. 0,1 ml (anvendt prøve-mengde) hhv. i faktor II, VII, IX, X-enheter pr. 0,1 ml, får man en for angjeldende forsøksprøve, under de nevnte forsøksbetingelser, karakteristisk "spesifikk amidolytisk aktivitet", dvs. den til 1 enhet FEIBA, hhv. 1 enhet faktor II, VII, IX, X svarende A0C.10J/min-verdi.
De i eksempel 1 og 2 fremstilte preparater viste ved de på den beskrevne måte utførte prøver, de i nedenstående tabell angitte egenskaper.
Tallene i parentes angir i hvert tilfelle forholdet til FEIBA-enhetene. Ved de amidolytiske aktiviteter er tallene i parentes den "spesifikke amidolytiske aktivitet", dvs. den angjeldende AOD. 10 ,/min-verdi pr. en i det beskrevne f orsøkssyst em anvendt FEIBA-enhet.
Claims (2)
1. Fremgangsmåte ved fremstilling av et blodkoaguleringsfremmende preparat fra humant blodplasma, som inneholder et nytt blodkoaguleringsvirksomt stoff kalt Factor-Eight-Inhibitor-Bypassing-Activity sammen med protrombinets faktorer II, VII, IX, X, karakterisert ved at menneskelig citrationholdig plasma, fra hvilket faktor VIII etter behov er fjernet og som inneholder protrombinkomplekset, i fravær av fri calciumioner behandles med vannuoppløselige uorganiske koaguleringsfysiologisk-overflateaktive stoffer slik som silicagel, diatoméjord eller kaolin ved et pH-område på 5,5 - 8,5 og ved en temperatur på 0 - 30°C, hvorved det nye stoff benevnt FEIBA dannes, hvoretter de vannuoppløselige stoffer fraskilles og den ovenstående væske derpå på i og for seg kjent måte behandles med basiske ionebyttere, slik som diethylaminoethyl-gruppeholdige molekylære stoffer på hvilke FEIBA absorberes sammen med faktorene II, VII, IX, X, hvoretter ionebytteren vaskes med en fortynnet saltløsning og behandles med en saltløsning med høyere konsentrasjon enn vaskeoppløsningen for å eluere FEIBA og faktor II, VII, IX, X i et aktivitetsforhold på 0,1 - 10, fortrinnsvis 0,5 - 2, hvoretter eluatet dialyseres og deretter konsentreres ved lyofilisering.
2. Fremgangsmåte ifølge krav 1,
karakterisert ved at de vannuoppløselige uorganiske koaguleringsfysiologisk-overflateaktive stoffer anvendes i en mengde fra 0,05 til 5%, fortrinnsvis 0,1 til 1%, beregnet på mengden av plasma.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| AT640576A AT350726B (de) | 1976-08-30 | 1976-08-30 | Verfahren zur herstellung einer blut- gerinnungsfoerdernden praeperation aus menschlichem blutplasma |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO772978L NO772978L (no) | 1978-03-01 |
| NO148142B true NO148142B (no) | 1983-05-09 |
| NO148142C NO148142C (no) | 1983-08-17 |
Family
ID=3585985
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO772978A NO148142C (no) | 1976-08-30 | 1977-08-29 | Fremgangsmaate ved fremstilling av et blodkoaguleringsfremmende preparat fra humant blodplasma |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4160025A (no) |
| AR (1) | AR213861A1 (no) |
| AT (1) | AT350726B (no) |
| BE (1) | BE858031A (no) |
| CA (1) | CA1079191A (no) |
| CH (1) | CH635747A5 (no) |
| DE (1) | DE2734821C3 (no) |
| DK (1) | DK151932C (no) |
| ES (1) | ES461918A1 (no) |
| FI (1) | FI57421C (no) |
| FR (1) | FR2362633A1 (no) |
| GB (1) | GB1554051A (no) |
| HU (1) | HU180816B (no) |
| LU (1) | LU78024A1 (no) |
| NL (1) | NL170922C (no) |
| NO (1) | NO148142C (no) |
| SE (1) | SE443511B (no) |
Families Citing this family (35)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2902158A1 (de) * | 1979-01-20 | 1980-07-31 | Biotest Serum Institut Gmbh | Verfahren zur herstellung von fibrinogen, einem die gerinnungsfaktoren ii, vii, ix und x enthaltenden prothrombinkomplex, antithrombin iii und einer loesung von lagerstabilen serumproteinen |
| US4287180A (en) * | 1980-01-28 | 1981-09-01 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Method for treating blood clotting factor inhibitors |
| US4286056A (en) * | 1980-01-28 | 1981-08-25 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Method for making therapeutic enzyme compositions |
| WO1981002105A1 (en) * | 1980-01-28 | 1981-08-06 | Baxter Travenol Lab | Therapeutic compositions & methods for manufacture and use |
| DE3176491D1 (en) * | 1980-03-05 | 1987-11-26 | Miles Lab | Pasteurized therapeutically active protein compositions |
| US4391746A (en) * | 1980-05-27 | 1983-07-05 | Cutter Laboratories, Inc. | Blood-coagulation-promoting products and methods of preparing them |
| US4361510A (en) * | 1980-05-27 | 1982-11-30 | Cutter Laboratories, Inc. | Blood coagulation promoting product |
| DE3172210D1 (en) * | 1980-05-27 | 1985-10-17 | Miles Lab | Blood coagulation promoting product and process of preparing same |
| US4404132A (en) * | 1980-05-27 | 1983-09-13 | Cutter Laboratories, Inc. | Blood coagulation promoting product |
| US4364861A (en) * | 1980-05-27 | 1982-12-21 | Cutter Laboratories, Inc. | Blood-coagulation-promoting products and methods of preparing them |
| AT368883B (de) * | 1980-07-22 | 1982-11-25 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung einer neuen blutgerinnungsfoerdernden praeparation auf basis von humanproteinen |
| DE3101752A1 (de) * | 1981-01-21 | 1982-08-26 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | "verfahren zur reinigung der blutgerinnungsfaktoren ii, vii, ix und/oder x und danach hergestellte praeparationen" |
| US4479938A (en) * | 1981-06-25 | 1984-10-30 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Therapeutic composition containing factor VIIa |
| US4382083A (en) * | 1981-06-25 | 1983-05-03 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Therapeutic method for treating blood-clotting defects with factor VIIa |
| JPS5866054A (ja) * | 1981-10-14 | 1983-04-20 | Sekisui Chem Co Ltd | 血液検査用容器 |
| JPS58105064A (ja) * | 1981-12-17 | 1983-06-22 | Sekisui Chem Co Ltd | 血液凝固促進剤 |
| AT389815B (de) * | 1984-03-09 | 1990-02-12 | Immuno Ag | Verfahren zur inaktivierung von vermehrungsfaehigen filtrierbaren krankheitserregern in blutprodukten |
| DE3625090A1 (de) * | 1986-07-24 | 1988-01-28 | Behringwerke Ag | Mittel zur therapie faktor viii-resistenter haemophilie a und verfahren zu seiner herstellung |
| CA1330302C (en) * | 1988-01-18 | 1994-06-21 | Miroslav Rybak | Concentrates of coagulation factors ii, vii, ix and x, method of their preparation and use |
| AT402891B (de) * | 1991-06-20 | 1997-09-25 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung eines inaktivierten blutproduktes |
| AT398079B (de) * | 1991-11-04 | 1994-09-26 | Immuno Ag | Präparation mit thrombinaktivität sowie verfahren zu ihrer herstellung |
| AT399818B (de) * | 1992-04-24 | 1995-07-25 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung einer hochgereinigten virussicheren faktor viii-präparation |
| EP0674531A1 (de) * | 1992-12-16 | 1995-10-04 | IMMUNO Aktiengesellschaft | Verfahren zur herstellung eines virussicheren biologischen präparates |
| DE4320294A1 (de) * | 1993-06-18 | 1994-12-22 | Immuno Ag | Verwendung von humanem Protein C zur Verhinderung und Behandlung von Thrombozytenablagerungen |
| US5677162A (en) * | 1995-05-01 | 1997-10-14 | New York Blood Center, Inc. | Method for activating prothrombin to thrombin |
| DE19531637A1 (de) * | 1995-08-28 | 1997-03-06 | Immuno Ag | Pharmazeutische Zusammensetzung zur Behandlung von Blutgerinnungsstörugnen, Verfahren zur Herstellung derselben und deren Verwendung |
| DK0796623T3 (da) * | 1996-03-20 | 2005-08-01 | Baxter Ag | Farmaceutisk præparat til behandling af blodkoagulationslidelser |
| AT405485B (de) | 1997-05-28 | 1999-08-25 | Immuno Ag | Eine das vwf-propeptid enthaltende pharmazeutische präparation |
| AT407484B (de) * | 1997-11-12 | 2001-03-26 | Bio Prod & Bio Eng Ag | Arzneimittel zur förderung der wundheilung |
| RS20050051A (en) * | 2002-07-23 | 2007-06-04 | Bio-Products & Bio Engineering Ag., | Pharmaceutical active ingredient preparation and medicaments that contain thrombin or have a thrombin-generating capacity |
| RS52080B (sr) * | 2002-07-23 | 2012-06-30 | Bio & Bio Licensing Sa | Farmaceutski aktivna supstanca preparata i lekova koji su u stanju da stvaraju trombin i/ili da sadrže trombin |
| EP2305289A1 (en) | 2009-09-16 | 2011-04-06 | Bio-Products & Bio-Engineering Aktiengesellschaft | Medicinal products for the treatment of blood coagulation disorders |
| IS2809B (is) * | 2011-03-08 | 2012-10-15 | Haskoli Islands | Blóðstorkumæling |
| RU2648517C1 (ru) * | 2017-06-23 | 2018-03-26 | Федеральное государственное бюджетное учреждение Гематологический научный центр Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ ГНЦ Минздрава России) | Способ получения лиофилизированного препарата активированного протромбинового комплекса, обладающего фактор viii-шунтирующей активностью |
| WO2024012853A1 (de) | 2022-07-12 | 2024-01-18 | Biomedizinische Forschung & Bio-Produkte AG | Arzneimittel zur förderung der hämostase |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2262520B2 (de) * | 1972-12-20 | 1979-10-11 | Cutter Laboratories Inc., Berkeley, Calif. (V.St.A.) | Verfahren zur Herstellung eines lyophilisierten, lagerfähigen Konzentrats aus menschlichem Plasma |
| DE2459291C3 (de) * | 1974-12-14 | 1981-06-04 | Biotest-Serum-Institut Gmbh, 6000 Frankfurt | Verfahren zur Herstellung eines antihämophiles Globulin A enthaltenden Konzentrats neben einem Prothrombin- Komplex und einer Lösung von lagerstabilen Serumproteinen |
| US3998946A (en) * | 1975-04-23 | 1976-12-21 | The Regents Of The University Of Minnesota | Fibrinogen-free plasminogen-plasmin-free plasma and method of preparing and using same |
| DD121793A1 (no) * | 1975-07-17 | 1976-08-20 | ||
| US4027013A (en) * | 1976-01-22 | 1977-05-31 | William L. Wilson | Clottable fibrinogen free factor VIII and albumin product and process |
-
1976
- 1976-08-30 AT AT640576A patent/AT350726B/de not_active IP Right Cessation
-
1977
- 1977-07-08 SE SE7707992A patent/SE443511B/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-08-02 DE DE2734821A patent/DE2734821C3/de not_active Expired
- 1977-08-03 GB GB32578/77A patent/GB1554051A/en not_active Expired
- 1977-08-08 US US05/822,679 patent/US4160025A/en not_active Expired - Lifetime
- 1977-08-10 FI FI772408A patent/FI57421C/fi not_active IP Right Cessation
- 1977-08-11 NL NLAANVRAGE7708872,A patent/NL170922C/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-08-11 AR AR268769A patent/AR213861A1/es active
- 1977-08-19 CA CA285,026A patent/CA1079191A/en not_active Expired
- 1977-08-19 CH CH1022077A patent/CH635747A5/de not_active IP Right Cessation
- 1977-08-22 FR FR7725597A patent/FR2362633A1/fr active Granted
- 1977-08-23 BE BE180368A patent/BE858031A/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-08-25 LU LU78024A patent/LU78024A1/xx unknown
- 1977-08-26 HU HU77IU288A patent/HU180816B/hu unknown
- 1977-08-26 ES ES461918A patent/ES461918A1/es not_active Expired
- 1977-08-29 NO NO772978A patent/NO148142C/no unknown
- 1977-08-30 DK DK384577A patent/DK151932C/da not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK151932C (da) | 1988-06-20 |
| CA1079191A (en) | 1980-06-10 |
| BE858031A (fr) | 1977-12-16 |
| NL170922B (nl) | 1982-08-16 |
| DK384577A (da) | 1978-03-01 |
| NL7708872A (nl) | 1978-03-02 |
| FI57421B (fi) | 1980-04-30 |
| FI57421C (fi) | 1980-08-11 |
| NL170922C (nl) | 1983-01-17 |
| FR2362633A1 (fr) | 1978-03-24 |
| NO148142C (no) | 1983-08-17 |
| DE2734821B2 (de) | 1980-11-06 |
| CH635747A5 (de) | 1983-04-29 |
| AT350726B (de) | 1979-06-11 |
| ES461918A1 (es) | 1978-12-16 |
| FI772408A (fi) | 1978-03-01 |
| AR213861A1 (es) | 1979-03-30 |
| LU78024A1 (no) | 1978-01-11 |
| DE2734821A1 (de) | 1978-03-02 |
| DK151932B (da) | 1988-01-18 |
| DE2734821C3 (de) | 1985-03-14 |
| SE443511B (sv) | 1986-03-03 |
| GB1554051A (en) | 1979-10-17 |
| HU180816B (en) | 1983-04-29 |
| ATA640576A (de) | 1978-11-15 |
| SE7707992L (sv) | 1978-03-01 |
| FR2362633B1 (no) | 1981-06-12 |
| NO772978L (no) | 1978-03-01 |
| US4160025A (en) | 1979-07-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NO148142B (no) | Fremgangsmaate ved fremstilling av et blodkoaguleringsfremmende preparat fra humant blodplasma | |
| Girolami et al. | A ‘new’congenital haemorrhagic condition due to the presence of an abnormal factor X (factor X Friuli): study of a large kindred | |
| Hougie et al. | Stuart clotting defect. I. Segregation of an hereditary hemorrhagic state from the heterogeneous group heretofore called “stable factor”(SPCA, proconvertin, factor VII) deficiency | |
| Kluft et al. | A familial hemorrhagic diathesis in a Dutch family: an inherited deficiency of alpha 2-antiplasmin | |
| Zucker et al. | Aggregation and release reaction induced in human blood platelets by zymosan | |
| JP2540541B2 (ja) | 第ｖ因子濃縮物の製法 | |
| Biggs et al. | Tissue extract and the contact reaction in blood coagulation | |
| US5906942A (en) | Method for preparing stable coagulation controls | |
| JPH05186369A (ja) | 治療的用途のためのヒトトロンビン濃厚液の製造法 | |
| DK165199B (da) | Aktivatorpraeparat, fremgangsmaade til kvantitativ bestemmelse af protein c under anvendelse af praeparatet, antithrombotisk laegemiddel indeholdende praeparatet og fremgangsmaade til udvinding af aktiveret protein c under anvendelse af praeparatet | |
| Oesterud et al. | Activation of the coagulation factor VII by tissue thromboplastin and calcium | |
| Ikkala et al. | Congenital deficiency of fibrin stabilizing factor | |
| Abildgaard | Inhibition of the thrombin-fibrinogen reaction by antithrombin III, studied by N-terminal analysis | |
| JPH0424360B2 (no) | ||
| EP0044343B1 (en) | Prothrombin-containing therapeutic compositions and methods of producing enzymatically active blood clotting factors from prothrombin-containing blood fractions | |
| DK147408B (da) | Fremgangsmaade til udvinding af thrombinagtige enzymer fra slangegifte eller slangegiftfraktioner | |
| US4361510A (en) | Blood coagulation promoting product | |
| EP0052874A1 (en) | Method for synthesizing procoagulant factor VIII activity | |
| Josso et al. | A new variant of human prothrombin: prothrombin Metz, demonstration in a family showing double heterozygosity for congenital hypoprothrombinemia and dysprothrombinemia | |
| EP0041174B1 (en) | Blood coagulation promoting product and process of preparing same | |
| JP2535547B2 (ja) | 第▲ｖｉｉｉ▼因子抵抗性血友病ａ治療剤およびその製法 | |
| Sala et al. | Dysfunctional activated protein C (PC Cadiz) in a patient with thrombotic disease | |
| Nour-Eldin et al. | The separation of human and bovine plasma thromboplastin with ether and a study of its properties | |
| Karpatkin et al. | In vivo and in vitro binding of factor VIII to human platelets | |
| Bick | Hereditary plasma protein disorders |