DE945649C

DE945649C - Verfahren zur Anreicherung von Vitamin B

Info

Publication number: DE945649C
Application number: DEF10761A
Authority: DE
Inventors: Dr Karl Kuehn; Dr Fritz Lindner
Original assignee: Hoechst AG
Current assignee: Hoechst AG
Priority date: 1953-01-06
Filing date: 1953-01-06
Publication date: 1956-07-12

Description

Verfahren zur Anreicherung von Vitamin B12 Das Hauptpatent 920 933 bezieht sich auf ein Verfahren zur Anreicherung von Vitamin B12 aus Organextrakten oder Kulturfiltraten von Mikroorganismen, das dadurch gekennzeichnet ist, daß das Vitamin B12 an Hydroxylverbindungen von aro- matischen Kohlenwasserstoffen mit kondensierten Benzolkernen ad-sorbiert wird.
Bei der weiteren Bearbeitung des Gebietes wurde nun gefunden, daß die beschriebenen Hydroxylverbindungen sich nicht nur in fester Form zur Adsorption des Vitamins B1.2 eignen, sondern daß sie in geeigneten organischen Lösungsmitteln auch als flüssige Phase zur Extraktion des Vitamins B12 dienen können. Es hat sich gezeigt, daß konzen trierte Lösungen der Hydroxylverbindungen in geeigneten, in Wasser schwer löslichen organischen Lösungsmitteln, beispielsweise Benzylalkohol oder aliphatischen Alkoholen mittlerer Kettenlänge, wie Octylalkohol, eine erheblich bessere Lösungsfähigkeit für das Vitamin B12 aufweisen, als die bisher zur Extraktion verwendeten Lösungsmittel.
Man hatte bereits zur Anreicherung von Vitamin B12 phenolhaltige Lösungsmittelgemische verwendet, doch waren hierzu verhältnismäßig große Mengen an solchen Gemischen, bestehend aus z. B. io biss 250%igen Phenollösungen in einem apolaren organischen Lösungsmittel (deutsche Patentschrift 859 352) oder aus einem Phenol-Butanol-Gemisch (britische Patentschrift 667 o39), erforderlich.
Erfindungsgemäß kann man mit wenig Prozenten einer hochprozentigen Lösung von a-Naphthöl in Benzylalkohol oder Octylalkohol das Vitamin Bit aus den Kulturlösungen praktisch quantitativ extrahieren. Durch Zugabe von Salzen, die die Löslichkeit des organischen Lösungsmittels in der wäßrigen Phase herabdrücken, erreicht man eine weitere Verbesserung der Affinität des Vitamins B12 zur organischen Phase und damit Ersparnis an Lösungsmitteln.
Die weitere Reinigung und Verarbeitung der erhaltenen Lösungen auf reines Vitamin B12 kann nach an sich bekannten Methoden erfolgen. Beispiel i Man löst 6o g Kochsalz in Zoo ccm vom Mycel befreiter und aufgeschlossener Kulturlösung von Streptomyces olivaceus und, extrahiert die kochsalzhaltige .wäßrige Phase einmal mit einer Lösung. aus 2 g a-Naphthol in 4 ccm Benzylalkohol und anschließend mit einer Lösung aus 2 g a-Naphthol in 2 ccm Benzylalkohol. Die Phasen werden durch Zentrifugieren getrennt. Die abgetrennten organischen Phasen vereinigt man, gießt sie in 120 ccm Aceton, dem etwas Kieselgar beigegeben ist, wäscht den Rückstand zweimal mit etwas Aceton nach und extrahiert ihn mit Wasser. Das der wäßrigen Phase beträgt 10,3 ccm. Der Vitamin-B12 Gehalt der Ausgangslösung beträgt 2,5 7/ccm = o,5 mg Vitamin B12 und der Vitamin-B"-Gehalt der extrahierten Lösung <o,15 y/ccm. Die wäßrige Endphase enthält 45 y/ccm = 0,464 mg Vitamin B12. Das Trockengewicht an Vitamin B12 beträgt .in der Ausgangslösung 26 mg/ccrn = 5,2 g und in der wäßrigen Endphase 16 mg/ccm = o,i6 g. Der Reinheitsgrad an Vitamin B12 beträgt in der Ausgangslösung i : 56oo und in der Endlösung r 35o.
Beispiel 2 io ccm Kulturlösung -gemäß Beispiel i werden mit einer Lösung von o,2 g a-Naphthol in o,4 ccm Benzylralkahol extrahiert, die Phasen getrennt, und anschließend wird die wäßrige Phase nochmals mit einer Lösung von o,2 g a-Naphthol in o,2 ccm Benzylalkohol extrahiert. Der Vitämin-B12 Gehalt beträgt in der Ausgangslösung 2,5 y/ccm und in der extrahierten Lösung o, i 32 y/com.

Claims

PATENTANSPRÜCHE: i. Verfahren zur Anreicherung von Vitamin B12 aus - Organextrakten oder l#,'-ulturfiltraten aus . Mikroorganismen unter Verwendung von Hydroxylverbindungen aromatischer Kohlenwasserstofte mit kondensierten Benzolkerrnen nach Hauptpatent 92o 933, dadurch gekennzeichnet, daß zur Extraktion Lösungen der Hydroxylverbimdungen aromatischer Kohlenwasserstoffe mit kondensierten Benzolkernen in organischen, in Wasser schwer löslichen Lösungsmitteln verwendet werden.
2. Verfahren nach Anspruch i, dadurch gekennzeichnet, daß als Hydroxylverbindungen Naphthole und als organische Lösungsmittel in Wasser schwer lösliche Alkohole verwendet werden.
3. Verfahren nach Anspruch i und 2, dadurch gekennzeichnet, daß die zu extrahierenden Flüssigkeiten vorher ganz oder teilweise mit Salzen gesättigt werden. Angezogene Druckschriften: Deutsche Patentschriften Nr. -8,59352, 835 178; britische Patentschriften Nr. 667 039, 681- 5o3.