DE602004007145T2

DE602004007145T2 - Regioselektive synthese von cci-779

Info

Publication number: DE602004007145T2
Application number: DE602004007145T
Authority: DE
Inventors: Warren Outremont Quebec CHEW; Chia-Cheng Saint Laurent SHAW
Original assignee: Wyeth LLC
Current assignee: Wyeth LLC
Priority date: 2003-08-07
Filing date: 2004-07-15
Publication date: 2008-02-28
Anticipated expiration: 2024-07-16
Also published as: JP4227649B2; CA2532988A1; AU2004265267A1; US20050033046A1; ATE365169T1; CO5650251A2; CN1829722A; RU2006106910A; ZA200601055B; RU2339639C2; ES2287772T3; KR20060057605A; PT1658295E; UA83245C2; EP1658295A2; WO2005016935A3; WO2005016935A2; CN1829722B; CR8189A; IL173134A0

Description

HINTERGRUND DER ERFINDUNG
Diese Erfindung schlägt eine regioselektive Synthese von CCI-779 vor, der als antineoplastischer Wirkstoff nützlich ist.
Der Rapamycin 42-Ester mit 3-Hydroxy-2-(Hydroxymethyl)-2-Methylpropionsäure(CCI-779) ist ein Ester des Rapamycins, der signifikante inhibitorische Effekte auf das Tumorwachstum bei in vitro- und in vivo- Modellen bewiesen hat.
CCI-779 kann die Tumorentwicklung hinauszögern oder die Zeitspanne, bis es zu einem Tumorrezidiv kommt, verlängern, eine Eigenschaft, die für zytostatische typischer als für zytotoxische Agenzien ist. Man nimmt an, dass CCI-779 einen Wirkungsmechanismus zeigt, der dem des Sirolimus ähnelt. CCI-779 bindet an das zytoplasmatische Protein FKBP, das ein Enzym, das mTOR (Mammalian target of rapamycin, auch bekannt als FKBP12-Rapamycin assoziiertes Protein [FRAP]) hemmt, und bildet einen Komplex mit diesem. Die Inhibierung der mTOR-Kinase-Aktivität hemmt eine Vielfalt von Signal-Transduktionspfaden, einschließlich der Zytokin-stimulierten Zellproliferation, der Translation von mRNAs für mehrere Schlüsselproteine, die die G1-Phase des Zellzyklus regulieren, und der IL-2-induzierten Transkription, wodurch es zur Inhibierung des Verlaufs des Zellzyklus von G1 bis S kommt. Der Wirkungsmechanismus von CCI-779, der zum G1-S-Phasenblock führt, ist für ein Antikrebsmittel neuartig.
In vitro wurde nachgewiesen, dass CCI-779 das Wachstum einer Anzahl histologisch unterschiedlicher Tumorzellen hemmt. Das Karzinom des Zentralnervensystems (ZNS), die Leukämie (T-Zellen), der Brustkrebs, das Prostatakarzinom und Melanoma-Linien waren unter denen, die am sensitivsten auf CCI-779 reagierten. Die Verbindung stoppte die Zellen in der G1-Phase des Zellzyklus.
In vivo-Studien an nackten Mäusen bewiesen, dass CCI-779 gegen humane Tumorxenotransplantate unterschiedlicher histologischer Typen wirkt. Glioma reagierten besonders sensitiv auf CCI-779, und die Verbindung war an einem orthotopischen Gliom-Modell nackter Mäuse wirksam. Die durch Wachstumsfaktor induzierte (Thrombozyten-abgeleitete) Stimulation einer humanen Glioblastom-Zelllinie wurde durch CCI-779 in vitro auf ausgeprägte Weise supprimiert. Das Wachstum mehrerer humaner Pankreastumore nackter Mäuse sowie eine von zwei in vivo untersuchten Brustkrebslinien wurden ebenfalls durch CCI-779 inhibiert.
Die Herstellung und Verwendung von Hydroxyestern des Rapamycins, einschließlich des CCI-779, sind auch in den U.S.- Patenten 5.362.718 offen gelegt. Eine regiospezifische Synthese von CCI-779 ist im U.S.-Patent 6.277.983 beschrieben.
CCI-779 kann synthetisiert werden durch nicht-regioselektives Acylieren des Rapamycins, wie es im U.S.-Patent 5.362.718 beschrieben ist. Die Synthese wird jedoch durch Mischungen des gewünschten 42-Esters mit 31-esterifiziertem Rapamycin, sowie mit 31, 42-diesterifiziertem Rapamycin und nicht reagiertem Rapamycin kompliziert.
CCI-779 kann auch zubereitet werden durch Acylierung des 31-Silylethers des Rapamycins mit einem Ketal der Bis-(Hydroxymethyl)Propionsäure, gefolgt von der Entfernung der 31-Silylether- und Ketalschutzgruppe aus der Bis-(Hydroxymethyl)Propionsäure, wie es im U.S.-Patent 6.277.983 beschrieben ist. Jedoch erfordert der aus dieser regioselektiven Synthese produzierte rohe 42-Monoester eine weitere Reinigung durch Säulenchromatographie, um restliche Mengen von Diester-Nebenprodukten und nicht reagiertem Rapamycin-Ausgangsmaterial zu entfernen.
ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG
Diese Erfindung schlägt eine auf der Borsäurechemie basierende, regioselektive Synthese des Rapamycin 42-Esters mit 3-Hydroxy-2-(Hydroxymethyl)-2-Methylpropionsäure (CCI-779) vor. Die Erfindung überwindet die Komplexität und häufig arbeitsintensive Reinigung des unter Anwendung früherer Verfahren gewonnenen Rapamycin 42-Monoesters.
Andere Aspekte und Vorteile dieser Erfindung werden aus der folgenden detaillierten Beschreibung der Erfindung leicht verständlich.
DETAILLIERTE BESCHREIBUNG DER ERFINDUNG
Vorliegende Erfindung schlägt eine regioselektive Synthese eines Rapamycin 42-Esters durch Acylieren eines Rapamycin 31-Silylethers mit einer Verbindung der Formel HOOC.CR⁷R⁸R⁹ oder eines Mischanhydrids davon vor,
wobei:
R⁷ Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen, Alkenyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Alkynyl mit 2 bis 7 C-Atomen, -(CR¹²R¹³)_fOR¹⁰, -CF₃, -F oder -CO₂R¹⁰ ist;
R¹⁰ Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen, Alkenyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Alkynyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Triphenylmethyl, Benzyl, Alkoxymethyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Chlorethyl oder Tetrahydropyranyl ist;
R⁸ und R⁹ zusammen genommen werden, um X zu bilden;
X ein 2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-5-yl oder ein 2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-4-yl ist,
wobei das Phenyl optional substituiert sein kann;
R¹² und R¹³ ein jeder unabhängig Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen, Alkenyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Alkynyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Trifluormethyl oder -F ist;
und
f = 0 bis 6;
um einen 42-Esterboronat 31-Silylether des Rapamycins zu liefern.
Danach wird Rapamycin 31-Silylether 42-Boronat unter mild sauren Bedingungen hydrolysiert, um ein Rapamycin 42-Esterboronat zu bilden. Das Rapamycin 42-Esterboronat wird mit einem geeigneten Diol behandelt. Das Verfahren ermöglicht die Zubereitung eines regiospezifischen Rapamycin 42-Esters.
Zubereitung, Isolierung und Reinigung eines Rapamycin 42-Esters aus einem Rapamycinsilylether nach dem erfindungsgemäßen Verfahren sind mit einer Transboronationsreaktion verbunden, bei der das Phenylboronatstück aus der Verbindung zu einem Diol transferiert wird. Eine Präzipitation des Rapamycin 42-Esters aus Ether:Heptanen folgt dieser Transboronation. Die synthetische Route dieser Erfindung bietet mehrere unterschiedliche Vorteile vor der bisher für die Zubereitung von Rapamycin-Estern oder -Ethern veröffentlichten synthetischen Verfahrensweise, die sich hauptsächlich bei der Reinigung, in Materialkostensenkung, erhöhter Sicherheit, erhöhtem Durchsatz und Betriebszeitreduzierung bemerkbar machen. Dieses erfindungsgemäße Verfahren bietet eine neuartige Herangehensweise an die Herstellung von Rapamycin 42-Estern (z. B. des CCI-779). Ein arbeitsintensiver Chromatographieschritt, der bisher bei allen Chargen großer Mengen des dargestellten CCI-779 durchgeführt wurde, ist eliminiert. Die große Menge an Lösemittel, die für die im U.S.-Patent 6.277.983 beschriebene Chromatographie erforderlich war, erübrigt sich, wodurch die Materialkosten gesenkt werden. Reaktorbetriebszeit und Rohstoffe sind um 50% reduziert. Die Größe des für die Synthese großer Mengen an CCI-779 benötigten Reaktors ist reduziert, wodurch sich der Gesamtdurchsatz erhöht. Das neuartige, in dieser Erfindung beschriebene Transboronationsverfahren reduziert die Gesamtverfahrensdauer.
Die Diethylether-Endreinigung der früheren Synthesemethoden wurde ebenfalls durch ein Einbau-Reinigungsverfahren dieser Erfindung abgeschafft.
Erfindungsgemäß wird ein 31-Silylether Rapamycin unter Verwendung einer Verbindung der Formel HOOC.CR⁷R⁸R⁹ oder eines Anhydrids davon wie oben definiert acyliert, um ein 31-Silylethyl 42-Esterboronat zu erhalten. Bei einer Ausführung wird ein Rapamycin 31-Silylether unter Verwendung einer 5-Methyl-2-Boronat[1,3-Dioxan]-5-Carbonsäure (beispielhaft dargestellt als Verbindung [A] im Schema 1 unten) oder eines 2,4,6-Trichlorbenzoyl Mischanhydrids der 5-Methyl-2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-5-Carbonsäure acyliert.
Eine besonders wünschenswerte Methode für die Zubereitung von Rapamycin 31-Silylethern ist im U.S.-Patent 6.277.983 offen gelegt. Die Erfindung ist nicht auf diese Methode zur Gewinnung von Rapamycin 31-Silylethern beschränkt. Jedoch wird üblicherweise bevorzugt, dass der 31-Silylether des Rapamycins der Rapamycin 31-O-Trimethylsilylether ist.
Bei einer Ausführung ist ein Rapamycin 31-Silylether dadurch charakterisiert, dass er folgende Formel aufweist:
wobei R ausgewählt ist aus -O-C=O.CR⁷R⁸R⁹, wobei:
R⁷ Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen, Alkenyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Alkynyl mit 2 bis 7 C-Atomen, -(CR¹²R¹³)_fOR¹⁰, -CF₃, -F oder -CO₂R¹⁰ ist;
R¹⁰ Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen, Alkenyl mit 2 bis 7 C- Atomen, Alkynyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Triphenylmethyl, Benzyl, Alkoxymethyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Chlorethyl oder Tetrahydropyranyl ist;
R⁸ und R⁹ zusammen genommen werden, um X zu bilden;
X ein 2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-5-yl oder ein 2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-4-yl ist,
wobei das Phenyl optional substituiert sein kann;
R¹² und R¹³ ein jeder unabhängig Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen, Alkenyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Alkynyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Trifluormethyl oder -F ist;
und
f = 0 bis 6,
und wobei R', R'' und R''' dieselben oder unterschiedlich und aus Alkyl von 1 bis 6 C-Atomen, Phenyl und Benzyl ausgewählt sind.
Vorliegende Erfindung schlägt die Verbindung [A] als neuartige Verbindung vor, die für die Herstellung von CCI-779 und Analogen davon brauchbar ist. Die Zubereitung der Verbindung [A] involviert das Mischen einer Phenylborsäure mit 2,2-Bis(Hydroxymethyl)-Propionsäure bei Raumtemperatur, um ein Phenylborinan zu erhalten. Typische Erträge sind > 90%. Die Reaktion kann in Methylenchlorid durchgeführt werden, aber das bevorzugte Lösmittel ist das Tetrahydrofuran (THF).
Es ist wünschenswert, dass das Phenylborinan eine 2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-5-Carbonsäure ist, wobei das Phenyl optional substituiert ist. Bei einer anderen Ausführung ist das Phenylborinan ein 2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-4-yl, wobei das Phenyl optional substituiert ist. Eine besonders wünschenswerte Substitution auf der Phenylgruppe ist ein Alkyl, am meisten wünschenswert ein C_1, C₂, C₃, C₄, C₅ oder C₆ Alkyl. Andere Aryl-(einschließlich der Phenyl-)Borsäuren können bei dieser Reaktion verwendet werden. Diese umfassen mono-, di- und tri-substituierte Arylborsäuren, bei denen die Substituenten dieselben oder unterschiedlich sind. Substituenten auf der Arylgruppe umfassen Halogen, Alkyl, Alkoxy, Aryloxy (z. B. Phenoxy), Aralkyl, Nitro, Cyano, kondensiertes Phenyl wie die Naphthalylborsäure. Der Begriff Alkyl schließt, wenn er als Gruppe oder Teil einer Gruppe wie Alkoxy oder Aralkyl verwendet wird, Alkylanteile von 1 bis 12 C-Atomen, z. B. 1 bis 6 C-Atomen, ein. Der Begriff Aryl bedeutet als eine Gruppe oder Teil einer Gruppe, z. B. Aralkyl oder Aryloxy, eine aromatische Gruppe einschließlich solcher von 6 bis 10 C-Atomen, wie Phenyl oder Naphthyl. Die bevorzugte Arylborsäure ist die Phenylborsäure.
Kurz ausgedrückt: es wird bevorzugt, dass Rapamycin an den Positionen 31 und 42 mit Trimethylsilylchlorid bis-silyliert wird, gefolgt von regioselektiver Desilylierung an der 42-Position mit verdünnter Schwefelsäure. Das isolierte Produkt wird an der 42-Position mit dem von der 2-Phenylborsäure abgeleiteten Anhydrid acyliert. Dimethylaminopyridin wurde als Katalysator zugefügt, um die Reaktion zum Abschluss voranzutreiben. Die Reaktion erforderte ~3 Äquivalente des Mischanhydrids, um das gesamte 31-Trimethylsilyl Rapamycin aufzubrauchen. Nach Beendigung der Reaktion wurde die resultierende Lösung bei 0 bis 10 °C gelagert, bis sie für den nächsten Schritt benötigt wurde. Beim Stehen in Acetonlösung erfährt das Produkt eine Dissoziation zur Verbindung [B]. Dies stellt kein Problem dar, da der nächste Schritt in der Hydrolyse der funktionellen Silylgruppe besteht. Fast die komplette Umwandlung (< 3%) zu [B] wurde nach 83 Tagen in Aceton bei 0 bis 10 °C erreicht.
Die Bildung des Mischanhydrids kann durch REACTIR (ASI Applied Systems) verfolgt werden. Das REACTIR-System (ASI Applied Systems) ist ein speziell konstruiertes Instrument für die Realzeit-in-situ-Analyse einer Vielfalt chemischer Reaktionen. Vorausgesetzt, dass das Mischanhydrid aus einer Carbonsäure und einem Säurechlorid gebildet wird, ist die Reaktion gut geeignet für die Überwachung durch Infrarotspektroskopie (IR). Die IR ist eine leistungsfähige Methode zur Detektion der Gegenwart funktioneller Carbonylgruppen und, im Fall von REACTIR, zur Überwachung des Erscheinens oder Verschwindens funktioneller Carbonylgruppen. Bei einem typischen REACTIR-Verfahren (ASI Applied Systems) wurde die Verbindung [A] mit Diisopropylethylamin in Methylenchlorid vermischt und auf 0 bis 5 °C im Eisbad abgekühlt. Ein IR-Spektrum wurde erfasst, das als Hintergrundscan dient. 2,4,6-Trichlorbenzoylchlorid wurde dann zugefügt. Ein zweiter IR-Spektralscan wurde erfasst, der als T = 0 Minuten (d. h. Beginn der Reaktion) dient. Das Experiment wurde derart durchgeführt, dass ein IR-Spektrum alle 5 Minuten während 5 Stunden erfasst wurde, wobei die Badtemperatur bei 0 bis 5 °C aufrechterhalten wurde. Die charakteristischen Schlüsselbanden waren 1818 cm^–1, 1741 cm^–1 und 1031 cm^–1. In dem Moment, in dem das Säurechlorid zur Mixtur der Verbindung [A] und des Diisopropylethylamins zugefügt wurde (T = 0 Minuten), zeigte das Spektrum im Wesentlichen kein Peaksignal. Jedoch hatten sich die Carbonyl- und Anhydrid- (C-O-C) Frequenzregionen mit der Zeit vermehrt, was auf die Bildung des Mischanhydrids hinwies.
Die Mischanhydridreaktion kann in Ethylacetat, t-Butylmethylether, Diethylether und Tetrahydrofuran (THF) durchgeführt werden, aber die Reaktionen sind träger. Das bevorzugte Lösemittel ist Methylenchlorid wegen seiner leichten Reaktionsbeendigung. DMAP ist der bevorzugte Basenkatalysator für diese Reaktion. Andere Basen, die verwendet werden können, sind 4-Pyrrolidinpyridin, N-Methylimidazol und Pyridin.
Das Mischanhydrid ist eine instabile Art und wird in situ bei niedrigen Temperaturen zubereitet. Es ist stabil für bis zu 48 Stunden bei –5 bis 0 °C. Es kann bei –50 bis 20 °C zubereitet werden, der bevorzugte Temperaturbereich liegt jedoch zwischen –6 und 5 °C. Das Mischanhydrid ist bis zu 8 Stunden alt vor der Kopplungsreaktion. Die bevorzugte Wartezeit vor Zugabe des 31-Trimethylsilyl (TMS) Rapamycin Kopplungspartners beträgt 4 bis 5 Stunden.
Die Kopplungsreaktion kann zwischen –20 °C und 20 °C durchgeführt werden, der bevorzugte Temperaturbereich liegt jedoch zwischen 11 °C und –5 °C. Bei höheren Temperaturen wird die Reaktion träger und zusätzliche Chargen des Mischanhydrids werden für die Beendigung benötigt. Bei niedrigeren Temperaturen ist das Mischanhydrid stabiler, obgleich die Reaktionszeit länger ist. Im Allgemeinen ist die Reaktion innerhalb von 12 bis 17 Stunden abgeschlossen.
Die Verbindung [B] wurde zubereitet, isoliert und gereinigt in einer aus 3 Schritten bestehenden Container-Sequenz in 1 Reaktion. Das Schlüsselelement bei dieser Reaktion war die Wahl des Acetons als das Lösemittel. Andere Lösemittel, die bei dieser Zubereitung verwendet werden können, umfassen Diethylether, Acetonitril, Ethylacetat, THF, t-Butylmethylether und Methylenchlorid. Gegenwärtig ist Aceton das bevorzugte Lösemittel.
So wird 31-Trimethylsilyl-CCI-779-Boronat, [D], in Aceton als Konzentrat gelöst. Bei einigen Ausführungen kann jedoch eine Hydrolyse durchgeführt werden unter Anwendung eines Einphasensystems aus wässriger Säure/organischem Lösemittel.
Die Hydrolyse der 31-Trimethylsilylgruppe (um [B] zu erhalten) wird unter mild sauren Bedingungen durchgeführt. So wird das ausgewählte organische Lösemittel (z. B. Aceton) mit einer verdünnten anorganischen Säure, wie z. B. Schwefel-, Salz- oder Phosphorsäure, vermischt. Beispiele geeigneter verdünnter anorganischer Säurekonzentrationen reichen von etwa 0,1 N bis etwa 3 N, etwa 0,2 N bis etwa 2 N oder betragen etwa 0,5 N. Typischerweise wird dieser Schritt bei einer Temperatur von etwa 25 °C oder darunter, von etwa –5 °C bis etwa 10 °C oder etwa 0 °C bis etwa 5 °C ausgeführt. Wünschenswerterweise erfolgt dieser Schritt bei einem pH-Wert 5 bis 6. Optional werden ein geeigneter Puffer, z. B. Natriumacetat, oder in Gegenwart von Natriumbicarbonat und/oder Essigsäure der Mixtur zugesetzt, um den pH-Wert an den gewünschten Bereich anzupassen oder diesen aufrecht zu halten.
Bei den nachfolgenden Beispielen wendet die Hydrolysereaktion 0,5 N Schwefelsäure bei 0 bis 5°C an. Die Reaktion ist typischerweise nach 5 bis 6 Stunden abgeschlossen und die Verbindung [B] wurde leicht durch einfache Filtration erhalten. Die Verwendung von fluoridbasierten Reagenzien zur Entfernung der 31-Trimethylsilylgruppe wird jedoch nicht bevorzugt, da sich Zersetzungsprodukte bilden.
Der Rapamycin 42-Boronatester ist eine neuartige Zwischenverbindung, die beim erfindungsgemäßen Verfahren zur Zubereitung eines Rapamycin 42-Esters brauchbar ist. Bei einer Ausführung ist die Zwischenverbindung der Rapamycin 42-Ester mit der 5-Methyl-2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinat-5-Carbonsäure.
Bei einer Ausführung schlägt die Erfindung eine Rapamycin 42-Esterboronat-Verbindung der Formel I vor:
wobei R ausgewählt ist aus -O-C=O.CR⁷R⁸R⁹, wobei:
R⁷ Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen, Alkenyl mit 2 bis 7 C Atomen, Alkynyl mit 2 bis 7 C-Atomen, -(CR¹²R¹³)_fOR¹⁰, -CF₃, -F oder -CO₂R¹⁰ ist;
R¹⁰ Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen, Alkenyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Alkynyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Triphenylmethyl, Benzyl, Alkoxymethyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Chlorethyl oder Tetrahydropyranyl ist;
R⁸ und R⁹ zusammen genommen werden, um X zu bilden;
X ein 2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-5-yl oder ein 2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-4-yl ist, wobei das Phenyl optional substituiert sein kann;
R¹² und R¹³ ein jeder unabhängig Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen, Alkenyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Alkynyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Trifluormethyl oder -F ist;
und
f = 0 bis 6.
In diesem Stadium des erfindungsgemäßen Verfahrens liegt das nach dem erfindungsgemäßen Verfahren zubereitete Rapamycin 42-Esterboronat normalerweise in Form von B- und C-Isomeren der Verbindung vor. [Diese beiden Isomere der beispielhaften Verbindung [B] sind unten dargestellt.] In diesem Stadium beträgt das B:C-Isomer-Verhältnis normalerweise < 10:1. Die Erfinder entdeckten, dass das B-Isomer kristalliner ist als das C-Isomer und in Aceton weniger löslich ist als das C-Isomer. Um sich diese Eigenschaften zunutze zu machen, wiesen die Erfinder darauf hin, dass im Natriumacetatpuffer bei einem pH-Wert 5 bis 6 das B:C-Isomerverhältnis auf über 20:1 erhöht werden kann. Durch Erhöhung dieses Verhältnisses kann die Gewinnung der Verbindung [B] gesteigert werden. So ist es wünschenswert, das B:C-Isomerverhältnis auf wenigstens 1:1, wünschenswerter auf über 5:1, über 10:1, über 15:1, über 20:1 und am meisten bevorzugt auf über 25:1 zu erhöhen. Natriumbicarbonat wurde zugesetzt, um die Schwefelsäure zu neutralisieren und den pH-Wert auf 7 bis 8 anzupassen. Dann wurde Essigsäure zugefügt, um Natriumacetat zu bilden und den pH-Wert auf 5 bis 6 zu senken. Nach Aufbewahrung der Reaktionsmixtur für 16 Stunden erreichte das Isomerverhältnis den Wert von ~25:1. Andere Puffer, wie Kaliumacetat und Zinkacetat, können verwendet werden, aber der bevorzugte ist das Natriumacetat.
Die Mixtur wurde filtriert, gewaschen und getrocknet, um die rohe Verbindung [B] zu erhalten. Die Mutterlaugen enthalten vorherrschend das C-Isomer, die Bis-Ester-Nebenprodukte und andere unbekannte Unreinheiten in Verbindung mit dem rohen kristallinen Rapamycin-Ausgangsmaterial.
Um die Gewinnung des reinen Produkts zu erleichtern, ist es wesentlich an diesem Punkt, den Rapamycin-Spiegel in der rohen Verbindung [B] zu überwachen. Der Rapamycin-Gehalt beträgt typischerweise ~5% (Flächen-%) bei der Hochleistungs-Flüssigchromatographie (HPLC). Durch Rekristallisationen wird der Rapamycin-Gehalt auf < 0,7% gesenkt. Die Reinigung in geeigneten Lösemitteln wie Aceton konnte die Rapamycin-Spiegel senken. Die Verbindung [B] ist wie im Schema dargestellt ein festes weißes Pulver, das bei Raumtemperatur stabil ist.
Die Reaktion kann in einem Lösemittel wie einem Ether-Lösemittel oder bevorzugt THF durchgeführt werden, wobei die Reaktionsmixtur mit t-Butylmethylether oder Toluen verdünnt und eine wässrige Extraktionsmethode angewandt wird, um überschüssiges Diol und Diolboronat-Nebenprodukte zu entfernen. Sowohl das Diol als auch das Diolboronat ist wasserlöslich. Die bevorzugte Methode erübrigt eine wässrige Extraktion. Die bevorzugte Methode involviert einen einfachen Filtrationsschritt. Das Verfahren besteht im Auflösen der Verbindung [B] in THF, t-Butylmethylether oder Acetonitril, Zufügen des Diols und Mischen bei Raumtemperatur für 3 Stunden. Das Lösemittel wurde destilliert, wodurch die Reaktionsmixtur zu Schaum/Öl wird. Ether wurde hinzugefügt und das Produkt mit Heptanen kopräzipitiert. Das Verfahren kann wiederholt werden, um CCI-779 mit einem Ertrag von 80% bis 90% aus der Verbindung [B] zu gewinnen.
Durch die anfängliche Behandlung mit Diol wird das Meiste der Phenylborsäure in der Reaktionsmixtur entfernt. Restliche, noch verbleibende Mengen an Phenylborsäure werden durch eine zusätzliche Behandlung mit Diol einfach ausgespült. Die aus diesem Vorgehen resultierende Endverbindung [C] zeigt, dass der Phenylborsäuregehalt annehmbar ist. Überschüssiges Diol in der Transboronationsbehandlung kann verwendet werden, aber die bevorzugte Menge beträgt 1 bis 5 mol-Äquivalente. Der aus dieser Transboronation hervorgehende Ertrag war 86%. Der Gesamtertrag aus dem Rapamycin betrug 47% bis 50%.
Eine Vielfalt von 1,2-, 1,3-, 1,4- und 1,5-Diolen kann verwendet werden, um diese Transboronation zu bewirken. Alkylsubstituierte Diole werden bevorzugt, wie das 2-Methyl-2,4-Pentandiol. Diethanolamin oder festphasenunterstütztes Polystyrendiethanolamin (PS-DEAM) sind brauchbar.
Die Transboronation kann auch durch die Verwendung von Carbonsäurereagenzien wie der Oxal-, Malon-, Wein-, Phthal- und Salicylsäure erreicht werden. 2,2-Bis(Hydroxymethyl)Propionsäure war wirksam, konnte aber nicht aus dem Endprodukt entfernt werden.
Das Verfahren ist in folgendem Schema erläutert. Dieses Schema dient nur der Veranschaulichung und begrenzt nicht den Umfang der Erfindung.
Zubereitung der 5-Methyl-2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-5-Carbonsäure [A]
Zu einer Suspension von 2,2-Bis(Hydroxymethyl)Propionsäure (131 g, 0,98 mol) in Tetrahydrofuran (500 ml) wurde eine Lösung von Phenylborsäure (122 g, 1,0 mol) in Tetrahydrofuran (500 ml) zugefügt. Die Mixtur wurde für 3 h 5 gerührt und Toluen (1,0 l) zugefügt. Wasser wurde entfernt durch azeotropische Destillation mit Toluen. Heptane (500 ml) wurden dem ausgefällten Produkt zugefügt, dies wurde auf Reflux erhitzt und abgekühlt. Die Mixtur wurde filtriert und mit Heptanen (2 × 300 ml) gewaschen. Die Feststoffe wurden unter Vakuum bei 70 bis 75 °C bis zu einem konstanten Gewicht getrocknet, um 94% Ertrag zu ergeben. ¹H NMR: δ(DMSO-d₆) 7,65 (d, 2H, Ar), 7,40 (m, 3H, Ar), 4,35 (d, 2H, CH₂), 3,92 (d, 2H, CH₂), 1,17 (s, 3H, CH₃).
Zubereitung von Rapamycin 42-Ester mit 5-Methyl-2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-5-Carbonsäure [B]
Wie im U.S.-Patent 6.277.983 (2001) beschrieben, wurde in einen 3 l Kolben Rapamycin (100 g, 0,104 mol) eingefüllt, das in Ethylacetat (1,50 l) gelöst wurde. Die Lösung wurde auf 5 bis 10 °C abgekühlt. Imidazol (30 g, 0,44 mol, 4,23 Äq.) wurde zugegeben und gelöst. Unter Stickstoffschutz wurde Trimethylsilylchlorid (44 g, 0,405 mol, 4,0 Äq.) über 30 bis 40 Minuten zugefügt, wobei die Temperatur bei 0 bis 5 °C während der Zugabe beibehalten wurde. Die Mixtur wurde mindestens 0,5 h aufbewahrt. Die Reaktion wurde durch TLC (30:70 Aceton:Heptaneluent) verfolgt. Die Reaktion war abgeschlossen, als das gesamte Rapamycin aufgebraucht war.
Zwei bis drei Tropfen der Reaktionsmixtur wurden entfernt und als ein 31,42-Bis(Trimethylsilyl)Rapamycin-Bezugsstandard zurückgehalten. 0,5 N Schwefelsäure (300 ml) wurden dem 3 l Kolben über 0,5 h zugefügt unter Beibehaltung der Temperatur von 0 bis 5 °C. Die Mixtur wurde kräftig gerührt und für 5 h aufbewahrt. Die Reaktion wurde durch Dünnschichtchromatographie (TLC) (30:70 Aceton:Heptaneluent) verfolgt. Die Reaktion war abgeschlossen, als im Wesentlichen kein 31,42-Bis-(Trimethylsilyl)Rapamycin mehr vorhanden war. Die Schichten wurden getrennt und die untere wässrige Schicht wurde mit Ethylacetat (500 ml) zurückextrahiert. Die vereinigten organischen Schichten wurden mit gesättigter Salzlösung (500 ml) und gesättigtem Natriumbicarbonat (2 × 200 ml) gewaschen, bis der pH-Wert 8 erreicht war. Die organische Schicht wurde mit Wasser (2 × 500 ml) und Salzlösung (500 ml) gewaschen, bis der pH-Wert 6 bis 7 erreicht war. Die Lösung wurde über Magnesiumsulfat (100 g) für 30 Minuten getrocknet, in einen 2 l Kolben filtriert und zu einem Volumen von 135 ml konzentriert. Ethylacetat (500 ml) wurde zugefügt und zu einem Volumen von 135 ml konzentriert. Die Wasserspülung wurde noch einmal mit Ethylacetat (500 ml) wiederholt. Methylenchlorid (300 ml) wurde zugefügt und die Lösung aufbewahrt, bis sie beim nächsten Schritt benötigt wurde.
In einen mit einem mechanischen Rührwerk ausgerüsteten 3 l Kolben wurde die Verbindung [A] (75 g, 0,341 mol) in Methylenchlorid (400 ml) eingefüllt. Diisopropylethylamin (66,1 g, 0,51 mol) wurde über 20 Minuten hinzugetropft und mit Methylenchlorid (25 ml) gespült. 2,4,6-Trichlorbenzoylchlorid (80 g, 0,328 mol) wurde zugefügt und mit Methylenchlorid (25 ml) gespült. Die Mixtur wurde bei 0 bis 5 °C für 4 h aufbewahrt und auf –10 ± 5 °C abgekühlt.
Die Lösung von 31-Trimethylsilyl Rapamycin wurde zu dem 3 l Kolben, der das Mischanhydrid enthielt, zugefügt und mit Methylenchlorid (25 ml) gespült. Eine Lösung von Dimethylaminopyridin (48,5 g, 0,397 mol) in Methylenchlorid (150 ml) wurde zubereitet, über 1,5 Stunden unter Beibehaltung der Temperatur < –8 °C zugefügt und mit Methylenchlorid (25 ml) gespült. Die Mixtur wurde für 12 Stunden bei –11 bis –5 °C aufbewahrt. Die Reaktionsmixtur wurde mit 1 N Schwefelsäure (600 ml) gelöscht unter Beibehaltung der Temperatur von < 10 °C. Die Mixtur wurde gerührt und für 30 Minuten aufbewahrt. Der pH-Wert der oberen wässrigen Schicht war ≤ 2. Die Schichten wurden getrennt und die unteren organischen Schichten mit Salzlösung (450 ml), gesättigtem Natriumbicarbonat (500 ml) bis zum pH-Wert ≥ 8 gewaschen. Die organische Schicht wurde mit Wasser (450 ml) gewaschen, bis der pH-Wert 6 bis 7 erreicht war. Die Lösung wurde konzentriert, Aceton (250 ml) zugegeben und konzentriert. Dies wurde mit einer weiteren Portion Aceton (250 ml) wiederholt und konzentriert.
Die Lösung wurde mit Aceton verdünnt. 0,5 N Schwefelsäure (500 ml) wurde über 30 Minuten hinzugetropft unter Beibehaltung der Topftemperatur von 0–5 °C. Die Mixtur wurde mindestens 5 Stunden aufbewahrt, währenddessen sich das Produkt aus der Lösung absetzte. Wässriges Natriumbicarbonat (30 g in 375 ml Wasser) wurde über 30 Minuten hinzugetropft, währenddessen die Topftemperatur bei 0 bis 5 °C gehalten wurde; die Mixtur wurde für mindestens 30 Minuten aufbewahrt. Essigsäure (25 ml) wurde bis zum pH-Wert 5 bis 6 unter Beibehaltung der Topftemperatur bei < 10 °C zugefügt. Die Mixtur wurde auf Raumtemperatur erwärmt und für 16 Stunden aufbewahrt. Das feste Produkt wurde filtriert und mit Wasser (2 × 100 ml) gefolgt von 1:1 Aceton:Wasser (2 × 100 ml) gewaschen. Der Kuchen wurde in Aceton (375 ml) gereinigt, um 65 g (58% insgesamt aus dem Rapamycin) des Produkts [B] zu erhalten. LC/MS unter Anwendung einer Elektrospray Interface im positiven lonenmodus lieferte das molekulare Ion [M + Na] = 1138,5 Atommasseneinheiten (amu).
Zubereitung von Rapamycin 42-Ester mit 2,2-Bis(Hydroxymethyl)-Propionsäure [C]
Die Verbindung [B] (200 g, 0,179 mol) wurde in Tetrahydrofuran (600 ml) gelöst. 2-Methyl-2,4-Pentandiol (42,3 g, 0,358 mol, 2,0 Äq.) wurde zugefügt und die Mixtur mindestens für 3 Stunden gerührt. Die Reaktionsmixtur wurde zu einem Schaum konzentriert. Diethylether (1,0 l) wurde zugegeben und die Mixtur für 2 Stunden gerührt. Heptane (1,0 l) wurden über 1 Stunde hinzugetropft und die Mixtur für 2 Stunden gerührt. Die Mixtur wurde filtriert und das feste Produkt mit Heptanen (500 ml) gewaschen. Die Feststoffe wurden in Aceton (400 ml) wieder gelöst, mit 2-Methyl-2,4-Pentandiol (21,1 g, 0,179 mol, 1 Äq.) in Aceton (200 ml) wieder behandelt, durch einen 0,2 Mikron Kerzenfilter geklärt und mit Aceton (200 ml) gespült. Die Lösung wurde zu einem Schaum konzentriert. Diethylether (1,0 l), vorfiltriert durch einen 0,2 Mikron Kerzenfilter, wurde zugefügt und die Mixtur für 2 Stunden gerührt. Die Mixtur wurde kopräzipitiert durch Zugabe von vorfiltrierten Heptanen (1,0 l). Die ausgefällten Feststoffe wurden filtriert und mit Ether:Heptan (2 × 500 ml) gewaschen. Die Feststoffe wurden getrocknet (55 bis 60 °C, 10 mmHg, mindestens für 24 Stunden), um 159 g (86%) des Produkts [C] zu liefern. LC/MS unter Anwendung von APCI im positiven lonenmodus lieferte das molekulare Ion [M + NH₄] = 1047,0 amu. Die ¹H NMR des Produkts (CCI-779) war identisch mit dem im Beispiel 11 des U.S.-Patents 5.362.718 (1994) beschriebenen Produkt.
Alle Patente, Patentanmeldungen, Artikel und sonstige Dokumente, auf die hier verwiesen wurde, sind durch den Verweis einbezogen. Dem Fachmann der Technologie wird klar sein, dass die spezifischen, hier beschriebenen Ausführungen modifiziert werden können, ohne vom Umfang der Erfindung abzuweichen.

Claims

Verfahren zum Zubereiten eines Rapamycin 42-Esters, das folgende Schritte umfasst: (a) Acylieren eines Rapamycin 31-Silylethers mit einer Verbindung der Formel HOOC.CR⁷R⁸R⁹ oder eines gemischten Anhydrids davon, wobei: R⁷ Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen, Alkenyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Alkynyl mit 2 bis 7 C-Atomen, -(CR¹²R¹³)_fOR¹⁰, -CF₃, -F oder -CO₂R¹⁰ ist; R¹⁰ Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen, Alkenyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Alkynyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Triphenylmethyl, Benzyl, Alkoxymethyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Chlorethyl oder Tetrahydropyranyl ist; R⁸ und R⁹ zusammen genommen werden, um X zu bilden; X ein 2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-5-yl oder ein 2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-4-yl ist, wobei das Phenyl optional substituiert sein kann; R¹² und R¹³ ein jeder unabhängig Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen, Alkenyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Alkynyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Trifluormethyl oder -F ist; und f = 0 bis 6; um einen 42-Esterboronat 31-Silylether des Rapamycins zu liefern; (b) selektives Hydrolysieren des 42-Esterboronat 31-Silylethers unter milden säurehaltigen Bedingungen, um ein Rapamycin 42-Esterboronat zu liefern; und (c) Behandeln des Rapamycin 42-Esterboronats mit einem geeigneten Diol, um einen Rapamycin 42-Ester zu liefern.
Verfahren nach Anspruch 1, wobei der zubereitete Rapamycin 42-Ester CCI-779 ist und wobei der Acylierungsschritt (a) das Acylieren des Rapamycin 31-Silylethers mit 5-Methyl-2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-5-Carbonsäure oder einem gemischten Anhydrid der 5-Methyl-2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-5-Carbonsäure umfasst, um das Rapamycin 31-O-Silylether, 42-Esterboronat zu liefern.
Verfahren nach Anspruch 1 oder Anspruch 2, wobei der 31-Silylether folgende Formel aufweist: -OSiR'R''R''' wobei R', R'' und R''' dieselben oder unterschiedlich und aus Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen, Phenyl und Benzyl ausgewählt sind.
Verfahren nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 3, wobei der 31-Silylether ein Trimethylsilylether ist.
Verfahren nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 4, wobei der Acylierungsschritt (a) mit 5-Methyl-2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-5-Carbonsäure durchgeführt wird.
Verfahren nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 4, wobei der Acylierungsschritt (a) unter Verwendung des mit 2,4,6-Trichlorbenzoyl gemischten Anhydrids der 5-Methyl-2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-5-Carbonsäure durchgeführt wird.
Verfahren nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 6, bei dem Schritt (a) bei einer Temperatur von etwa –50 °C bis etwa 20 °C durchgeführt wird.
Verfahren nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 7, wobei die Säure des Schritts (b) eine verdünnte anorganische Säure ist.
Verfahren nach Anspruch 8, wobei die beim Schritt (b) verwandte Säure etwa 0,1 N bis etwa 3 N ausmacht.
Verfahren nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 9, wobei Schritt (b) in einem System aus einer wässrigen Säure und einem organischen Lösemittel in einer einzigen Phase durchgeführt wird.
Verfahren nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 10, wobei Schritt (b) bei einer Temperatur von etwa –5 °C bis etwa 10 °C durchgeführt wird.
Verfahren nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 11, wobei das beim Schritt (c) verwandte Diol ein 1,2-, 1,3-, 1,4- oder 1,5-Diol ist.
Verfahren nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 12, wobei das Diol des Schritts (c) in einer Menge von etwa 1 bis etwa 5 mol Äquivalenten verwendet wird.
Verfahren nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 13, wobei Schritt (c) bei einer Temperatur von etwa –5 °C bis etwa +25 °C durchgeführt wird.
Verfahren nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 14, wobei Schritt (c) in Gegenwart des Tetrahydrofuranlösemittels durchgeführt wird.
Verfahren nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 14, das in Gegenwart eines Etherlösemittels durchgeführt wird.
Verfahren nach Anspruch 1, wobei das Rapamycin 31-O-Trimethylsilylether, 42-Esterboronat folgende Formel aufweist:
wobei R-O-C=O.CR⁷R⁸R⁹ ist, wobei: R⁷ Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen, Alkenyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Alkynyl mit 2 bis 7 C-Atomen, -(CR¹²R¹³)_fOR¹⁰, -CF₃, -F oder –CO₂R¹⁰ ist; R¹⁰ Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen, Alkenyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Alkynyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Triphenylmethyl, Benzyl, Alkoxymethyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Chlorethyl oder Tetrahydropyranyl ist; R⁸ und R⁹ zusammen genommen werden, um X zu bilden; X ein 2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-5-yl oder ein 2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-4-yl ist, wobei das Phenyl optional substituiert sein kann; R¹² und R¹³ ein jeder unabhängig Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen, Alkenyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Alkynyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Trifluormethyl oder -F ist; und f = 0 bis 6.
Verfahren nach Anspruch 1, wobei der Rapamycin 42-Boronatester folgende Formel aufweist:
wobei R-O-C=O.CR⁷R⁸R⁹ ist, wobei: R⁷ Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen, Alkenyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Alkynyl mit 2 bis 7 C-Atomen, -(CR¹²R¹³)_fOR¹⁰, -CF₃, -F oder -CO₂R¹⁰ ist; R¹⁰ Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen, Alkenyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Alkynyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Triphenylmethyl, Benzyl, Alkoxymethyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Chlorethyl oder Tetrahydropyranyl ist; R⁸ und R⁹ zusammen genommen werden, um X zu bilden; X ein 2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-5-yl oder ein 2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-4-yl ist, wobei das Phenyl optional substituiert sein kann; R¹² und R¹³ ein jeder unabhängig Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen, Alkenyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Alkynyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Trifluormethyl oder -F ist; und f = 0 bis 6.
Verfahren zum Zubereiten einer Verbindung der Formel:
das das Behandeln eines 31-Silylether, Rapamycin 42-Boronatesters mit einem geeigneten Diol umfasst.
Verfahren nach Anspruch 19, wobei das verwandte Diol ein 1,2-, 1,3-, 1,4- oder 1,5-Diol ist.
Verfahren nach Anspruch 19 oder Anspruch 20, wobei das Diol 2-Methyl-2,4-Pentandiol ist.
Verfahren nach irgendeinem der Ansprüche 19 bis 21, wobei das Diol in einer Menge von etwa 1 bis etwa 5 mol Äquivalenten verwendet wird.
Verfahren nach irgendeinem der Ansprüche 19 bis 22, das bei einer Temperatur von etwa –5 °C bis etwa +25 °C durchgeführt wird.
Verfahren nach irgendeinem der Ansprüche 19 bis 23, das in Gegenwart des Tetrahydrofuranlösemittels durchgeführt wird.
Verfahren nach irgendeinem der Ansprüche 19 bis 23, das in Gegenwart eines Etherlösemittels durchgeführt wird.
Verfahren zum Zubereiten der 5-Methyl-2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-5-Carbonsäure, das das Reagieren der 2,2-bis(Hydroxymethyl)Propionsäure mit Phenylboronsäure umfasst.
Verfahren nach Anspruch 26, das in Gegenwart des Tetrahydrofuranlösemittels durchgeführt wird.
Verfahren zur Erhöhung der Reinheit einer Verbindung der Formel
in einer Lösung, die die Isomere B und C in einem Verhältnis von < etwa 10:1 enthält,
das den Schritt der Anpassung des pH-Wertes der Lösung an einen pH-Wert von etwa 5 bis etwa 6 umfasst.
Verfahren nach Anspruch 28, das in Gegenwart des Acetonlösemittels durchgeführt wird.
Verfahren nach Anspruch 28 oder Anspruch 29, das in Gegenwart des Natriumacetatpuffers durchgeführt wird.
Verfahren nach Anspruch 28 oder Anspruch 29, das in Gegenwart von Natriumbicarbonat und Essigsäure durchgeführt wird.
Verbindung der Formel (I):
wobei R ausgewählt ist aus: -O-C=O.CR⁷R⁸R⁹, wobei: R⁷ Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen, Alkenyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Alkynyl mit 2 bis 7 C-Atomen, -(CR¹²R¹³)_fOR¹⁰, -CF₃, -F oder -CO₂R¹⁰ ist; R¹⁰ Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen, Alkenyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Alkynyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Triphenylmethyl, Benzyl, Alkoxymethyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Chlorethyl oder Tetrahydropyranyl ist; R⁸ und R⁹ zusammen genommen werden, um X zu bilden; X ein 2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-5-yl oder ein 2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-4-yl ist, wobei das Phenyl optional substituiert sein kann; R¹² und R¹³ ein jeder unabhängig Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen, Alkenyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Alkynyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Trifluormethyl oder -F ist; und f = 0 bis 6.
Verbindung der Formel:
wobei R ausgewählt ist aus: -O-C=O.CR⁷R⁸R⁹, wobei: R⁷ Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen, Alkenyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Alkynyl mit 2 bis 7 C-Atomen, -(CR¹²R¹³)_fOR¹⁰, -CF₃, -F oder -CO₂R¹⁰ ist; R¹⁰ Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen, Alkenyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Alkynyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Triphenylmethyl, Benzyl, Alkoxymethyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Chlorethyl oder Tetrahydropyranyl ist; R⁸ und R⁹ zusammen genommen werden, um X zu bilden; X ein 2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-5-yl oder ein 2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-4-yl ist, wobei das Phenyl optional substituiert sein kann; R¹² und R¹³ ein jeder unabhängig Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen, Alkenyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Alkynyl mit 2 bis 7 C-Atomen, Trifluormethyl oder -F ist; und f = 0 bis 6; und wobei R', R'' und R''' dieselben oder unterschiedlich und aus Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen, Phenyl und Benzyl ausgewählt sind.
Verbindung, die ein Rapamycin 42-Ester mit 5-Methyl-2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-5-Carbonsäure ist.
Verbindung, die ein Rapamycin 31-O-Trimethylsilylether, 42-Ester mit 5-Methyl-2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-5-Carbonsäure ist.
Verbindung der Formel: HO-C=O.C R⁷R⁸R⁹, wobei R⁷, R⁸ und R⁹ wie in Anspruch 1 definiert oder ein gemischtes Anhydridderivat davon sind.
Verbindung nach Anspruch 36, die die 5-Methyl-2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-5-Carbonsäure, wobei das Phenyl optional substituiert ist, oder ein mit 2,4,6-Trichlorbenzoyl gemischtes Anhydridderivat davon ist.
Verbindung nach Anspruch 36, die die 5-Methyl-2-Phenyl-1,3,2-Dioxaborinan-5-Carbonsäure oder ein mit 2,4,6-Trichlorbenzoyl gemischtes Anhydridderivat davon ist.