DE3231627T1 - Verbessertes Elektrophorese-Verfahren zur Trennung von Serumproteinen und verbessertes Elektrophorese-Gel zur Verwendung für das Elektrophorese-Verfahren - Google Patents

Verbessertes Elektrophorese-Verfahren zur Trennung von Serumproteinen und verbessertes Elektrophorese-Gel zur Verwendung für das Elektrophorese-Verfahren

Info

Publication number
DE3231627T1
DE3231627T1 DE19823231627 DE3231627T DE3231627T1 DE 3231627 T1 DE3231627 T1 DE 3231627T1 DE 19823231627 DE19823231627 DE 19823231627 DE 3231627 T DE3231627 T DE 3231627T DE 3231627 T1 DE3231627 T1 DE 3231627T1
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
acid
electrophoresis gel
gel according
electrophoresis
group
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
DE19823231627
Other languages
English (en)
Other versions
DE3231627C2 (de
Inventor
William Allan 92670 Placentia Calif. Gurske
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Beckman Coulter Inc
Original Assignee
Beckman Instruments Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Beckman Instruments Inc filed Critical Beckman Instruments Inc
Publication of DE3231627T1 publication Critical patent/DE3231627T1/de
Application granted granted Critical
Publication of DE3231627C2 publication Critical patent/DE3231627C2/de
Expired legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N27/00Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
    • G01N27/26Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
    • G01N27/416Systems
    • G01N27/447Systems using electrophoresis
    • G01N27/44704Details; Accessories
    • G01N27/44747Composition of gel or of carrier mixture

Description

. ^v,u^M»,uuC, Uli ρ ι.-1 ng. o u π vv au ac η
Europäische Patentvertreter ^ D i P L-I η g. 6 ü nther Koch
European Patent Attorney " & ' Dipl.-PhyS. Dr.Tino Haibach
3 2 316 2 7 Dipl.-lng. Rainer Feldkamp
D-8000 München 2 · Kaufingerstraße 8 ■ Telefon (0 89) 2 60 80 78 - Telex 5 29 513 wakai d
17. Sep., 1982
Unser Zeichen: 17 525 H/Nu
Beckman Instruments, Inc., Fullerton, Kai./USA
Verbessertes Elektrophorese-Verfahren zur Trennung von Serumproteinen und verbessertes Elektrophorese-Gel zur Verwendung für das Elektrophorese-Verfahren
Hintergrund der Erfindung
1. Allgemeines Gebiet der Erfindung
Die Erfindung betrifft ein Elektrophorese-Verfahren zur Trennung von Serumproteinen sowie ein Elektrophorese-Gel zur Verwendung in diesem Verfahren.
2. Beschreibung des Standes der Technik
Elektrophoretische Verfahren zur Trennung von Serumproteinen sowie Elektrophorese-Gele zur Verwendung bei diesen Elektrophorese-Verfahren sind dem Fachmann bekannt, vergleiche Cawley, Electrophoresis and Immunoelectro-
' :-■'. ■■ ' .' ■·■ ■■ ·?'·■ ' ■'. ■■ ■■■■'■ ■ ■ ' ' :■'
phoresis, Little, Brown and Company, Boston, Mass- (1969) Allgemein sind die zur Trennung von Serumproteinen verwendeten elektrophoretischen Gele von einem Typ, der ein Polysaccharid enthält. Auch ein Puffer mit einem basischen pH-Wert liegt gewöhnlich in diesen Elektrophorese-Gels vor.
Typische Polysaccharide, wie sie in Elektrophorese-Gels nach dem Stande der Technik verwendet werden, sind unter anderem (ohne Beschränkung hierauf) Stärke, Celluloseacetat, Agar, Agarose sowie Kombinationen hiervon.
Typische in Elektrophorese-Gels nach dem Stande der Technik verwendete Puffer mit einem basischen pH-Wert sind unter anderem (jedoch ohne Beschränkung hierauf) die in der Tabelle I des obengenannten Werks von Cawley, Seiten 331-332, angegebenen basischen pH-Puffer.
Ein Problem bei den Elektrophorese-Verfahren nach dem Stande der Technik zur Trennung von Serumproteinen besteht darin, daß eine beträchtliche Zeitdauer (in der Größenordnung von 30 Minuten und länger) erforderlich ist, bis die Serumproteine fixiert, d. h. für die visuelle Beobachtung zugänglich werden. Diese verhältnismäßig lange Protein-Fixierperiode macht das Serum-Elektrophorese-Verfahren nach dem Stande der Technik zu ,einer zeitaufwendigen Prozedur.
Es wäre daher sehr erwünscht, über ein Elektrophorese-Verfahren zur Trennung von Serumproteinen zu verfügen, bei welchem die Protein-Fixierperiode relativ kurz ist. Ein derartiges verbessertes Elektrophorese-Verfahren zur
3221627
Trennung von Serumproteinen würde es dem klinischen Laboratorium ermöglichen, dem Diagnostiker lebenswichtige Information in einer kürzeren Zeitdauer zu liefern.
Zusammenfassung der Erfindung
Durch die vorliegende Erfindung wird ein verbessertes Elektrophorese-Verfahren zur Trennung von Serumproteinen geschaffen, bei dem man eine rasche Fixierung von Serumproteinen erhalten kann. Das Elektrophorese-Verfahren gemäß der Erfindung gehört zu dem Typ, bei welchem eine zu untersuchende Probe auf bzw. in ein elektrophoretisches Gel auf- bzw. eingebracht und dieses Elektrophorese-Gel der Elektrophorese unterworfen wird. Das verbesserte Elektrophorese-Verfahren gemäß der Erfindung ist durch die Verwendung eines neuen Elektrophorese-Gels gekennzeichnet. Dieses Elektrophorese-Gel seinerseits ist dadurch gekennzeichnet, daß es des weiteren ein saures Pplysaccharid und dessen Salze enthält, wobei der Säureanteil dieser Stoffe wenigstens eine Carboxylgruppe umfaßt. Durch das Vorhandensein des sauren Polysaccharide sowie seiner Salze in dem Elektrophorese-Gel wird es möglich, die rasche Fixierung der Serumproteine zu erzielen.
Weitere Merkmale und zugehörige Vorteile der vorliegenden Erfindung ergeben sich für den Fachmann aus der folgenden detaillierten Beschreibung bevorzugter Ausführungsb^&ispiele.
_ if _
■■ ■ ■.■■■'■■ .. ~s' : ■ ■ ■ ' .■ . ' ':
Beschreibung der "bevorzugten Ausführungsformen
Zur Verwendung in dem erfindungsgemäßen Verfahren geeignete saure Polysaccharide sind unter anderem (jedoch ohne Beschränkung hierauf) Arabinsäure, Trägantsäure ("tragacanth acid")» Karragheensäure ("kahya acid")» Alginsäure, Pektinsäureund Leinölsäure. Das bevorzugte saure Polysaccharid ist Arabinsäure.
Zur Verwendung für die Zwecke der vorliegenden Erfindung geeignete Salze von sauren Polysacchariden sind unter anderem (jedoch ohne Beschränkung hierauf) deren Natrium-, Kalium-, Calcium- und Magnesiumsalze. Beispiele derartiger saurer Polysaccharidsalze sind unter anderem (jedoch ohne Beschränkung hierauf) Gummiarabicumsäure, Tragantgummisäure, Karragheen- bzw. Khayagummisäure,"Algingummisäure, Pektingummisäure sowie Leinölgummisäure.
Polysaccharide, welche bevorzugt in dem Elektrophorese-Gel gemäß der Erfindung verwendet werden können, sind Agar und Agarοse. Die Agarose kann entweder niedrig-elektroendosmotische Agarose, mittel-elektroendosmotische oder hoch-elektroendosmotische Agarose sein. Besonders bevorzugt wird als Polysaccharid in dem elektrophoretischen Gel gemäß der Erfindung hoch-elektroendosmotische Agarose verwendet.
Vorzugsweise besitzt der erfindungsgemäß verwendete Puffer einen pH-Wert von etwa 7 bis etwa 10. Besonders bevorzugt weist der Puffer einen pH-Wert von etwa 8 bis etwa 9 auf.
Das elektrophoretische Gel gemäß der Erfindung kann gege<-benenfalls des weiteren ein Konserviermittel enthalten. Typische Konserviermittel sind unter anderem (jedoch ohne Beschränkung hierauf) Antibiotika, halogenierte organische Verbindungen sowie anorganische Verbindungen. Ein für die Zwecke der Erfindung geeignetes, leicht verfügbares Konserviermittel ist Natriumazid.
Das erfindungsgemäße Elektrophorese-Gel kann gegebenenfalls auch ein Alkylpolyol mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen und 2 bis 4- Hydroxylgruppen enthalten. Für die Zwecke der vorliegenden Erfindung geeignete Alkylpolyöle sind unter anderem (jedoch ohne Beschränkung hierauf) Athylenglykol, Propandiol, Butandiol, Pentandiol und Glycerol. Vorzugsweise weist das Alkylpolyol 2 bis 4- Kohlenstoffatome auf." . · ' ■■;■■■ ' ' ' ■ ■ . - ' ■ : .■■'■■'■'"
Die in dem Elektrophorese-Gel gemäß der Erfindung verwendeten jeweiligen genauen Konzentrationen der verschiedenen Bestandteile sind nicht kritisch. Jedoch weist das Elektrophorese-Gel gemäß der Erfindung vorzugsweise von etwa 0,4- bis etwa 1,5 % Gewicht/Volumen höch-elektroendosmotische AgarOse; von etwa 0,01 bis etwa 5 % Gewicht/Volumen Arabinsäure; bis zu 20 % Volumen/Volumen Athylenglykol; bis zu 1 % Gewicht/Volumen Natriumazid; sowie einen Puffer mit einem pH-Wert von etwa 7 bis etwa 10 und einer Molarität von etwa 0,001 bis etwa 3 auf. Besonders bevorzugt weist das Elektrophorese-Gel gemäß der Erfindung von etwa 0,7 bis etwa 1,2 % Gewicht/Volumen hoch-elektroendosmotische Agarose; von etwa 0,5 bis etwa 1,5 % Gewicht/Volumen Arabinsäure; von etwa 1 bis etwa 10 % Volumen/Volumen Athylenglykol; von etwa 0,05 bis etwa
0,15% Gewicht/Volumen Natriumazid; sowie einen Puffer mit einem pH-Wert von etwa 8 bis etwa 9 und einer Molarität von etwa 0,05 bis etwa 1 auf. In optimaler Ausführung weist das Elektrophorese-Gel gemäß der Erfindung etwa 1 % Gewicht/Volumen hoch-elektroendosmotische Agarose; etwa
1 % Gewicht/Volumen Arabinsäure; etwa 5 % Volumen/Volumen Ithylenglykol; etwa 0,1 % Gewicht/Volumen Natriumazid; sowie einen Barbitalpuffer mit einem pH-Wert von etwa 8,6 und einer Molaritat von etwa 0,05 auf.
Die Elektrophorese-Gels gemäß der Erfindung können nach einem beliebigen dem Fachmann bekannten Verfahren hergestellt werden, vergleiche beispielsweise Cawley, a. a. O. Allgemein wird die Gel-Lösung durch Mischen ihrer verschiedenen Bestandteile bei gleichzeitiger Erhitzung des Gemische auf eine Temperatur von etwa 80 bis etwa 100 0C hergestellt. Das Elektrophorese-Gel kann nach üblichen Formgebungs- oder Gießverfahren hergestellt werden. Die erfindungsgemäßen Gele können bei praktisch jeder bequemen Temperatur, beispielsweise bei Temperaturen von etwa
2 0C bis etwa 4Ό 0C, vorzugsweise bei Temperaturen zwischen etwa 18 0C bis etwa 26 0C gelagert werden. Vorzugsweise werden die Elektrophorese-Gels bis zur Gebrauchsanwendung in versiegelten Kunststoffbehältern aufbewahrt.
Die Aufgabe der Proben zu den erfindungsgemäßen elektrophoretischen Gelen kann nach einem beliebigen im Stande der Technik verwendeten Verfahren erfolgen, beispielsweise mittels einer Mikroliter-Injizierspritze. Die Elektrophorese-Gele können bei 100 V über 20 Minuten der Elektrophorese unterworfen werden. Falls gewünscht, können die Gele in einem Alkohol/Essigsäure-Gemisch aus
-i
beispielsweise 60 % Alkohol, 30 % entionisiertem Wasser und 10 % Eisessigsäure fixiert werden. Außerdem können die Gele gegebenenfalls bei etwa 80 0C bis etwa 90 0C getrocknet werden.
Die folgenden Beispiele sollen nur zur weiteren Erläuterung dienen, und es soll ihnen keinerlei einschränkende Bedeutung für die Erfindungsoffenbarung zukommen.
Beispiel 1
Die beiden in der Tabelle I angegebenen Elektrophorese-Gel-Zusammensetzungen wurden jeweils gemäß dem nachfolgenden Versuchsprotokoll verwendet, zur Veranschaulichung des verbesserten Elektrophorese-Verfahrens gemäß der Erfindung für die Trennung von Serumproteinen und des verbesserten Elektrophorese-Gels hierfür. Der einzige Unterschied zwischen den beiden in diesem Vergleichsexperiment verwendeten Elektrophorese-Gels bestand darin, daß das innerhalb des Rahmens der Erfindung liegende Elektrophorese-Gel Arabinsäure, d. h. ein spezielles saures Polysaccharide enthielt, während das außerhalb des Eahmehs der Erfindung liegende Elektrophorese-Gel frei von Jeglichem saurem Polysaccharid war.
Protokoll
Elektrophorese-Verfahren
1.0 Eine Serumprobe wurde nach einem Schablonen-
Verfahren auf die Oberfläche des Gels aufgebracht.
2.0 Das Gel wurde in einem Barbitalpuffer mit pH 8,6 "r ·: " der Elektrophorese unterworfen.
3·0 Das Gel wurde in eine entionisiertes Wasser, Äthylalkohol und Eisessigsäure (3:6:1) enthaltende Fixierlösung bis zum Ausfällen gebracht und beobachtet.
Die bei Ausführung dieses Versuchsprotokolls für die beiden Gelzusammensetzungen gemäß Tabelle I erhaltenen Ergebnisse sind ebenfalls in der Tabelle I angegeben.
Tabelle I
Elektrophore se-Gel inner
Elektrophore se-Gel außer
Zusammenset zungsbestandteile
halb des Rah mens der Erfindung
halb des Rah mens der Erfindung
1 % Gew./Vol. Agarose
(hoch-elektroendosmotisch) X
Λ % Gew.AoI. Arabinsäure X 0,1 % Gew./Vol. Natriumazid X 5 % Vol./Vol. Äthylenglykol X
Barbitalpuffer, pH 8,6 .
+ 0,1 bei 20 bis 25 C;
Tonenstärke 0,05 X
X X
Zeitdauer (t) der Serumprotein-Fixierung (in Minuten) t < 3 t > 30
Wie die Serumprotein-Fixierzeiten, in Tabelle I zeigen, ermöglicht ein Elektrophorese-Verfahren zur Trennung von Serumproteinen unter Verwendung des verbesserten Elektrophorese-Gels gemäß der Erfindung die Fixierung von Serumproteinen in weniger als 3 Minuten. Demgegenüber konnte mit einem ähnlichen Verfahren, das sich lediglich darin unterschied, daß das dabei verwendete Elektrophorese-Gel keinerlei saures Polysaccharid (in welchem der Säureanteil wenigstens eine Carboxylgruppe enthält) oder die Salze eines derartigen sauren Polysaccharide enthält, das Serumprotein selbst nach einer Periode von 30 Minuten nicht fixiert werden.
Auf der Grundlage der vorstehenden Offenbarung ergeben sich für den Fachmann mannigfache andere Modifikationen und Ausgestaltungsmöglichkeiten von selbst. Diese werden vom Rahmen der vorliegenden Erfindung mit umfaßt.

Claims (36)

P a te η t a η s ρ r ü c he
1. Elektrophoretisches Gel des Typs mit einem PoIysaccharid, dadurch g e k e η η ζ e i c h η et, daß das Elektrophorese-Gel des weiteren ein saures Polysaccharid und Salze hiervon enthält, wobei der Säurehestandteil des sauren Polysaccharide wenigstens eine Carboxylgruppe umfaßt.
2. Elektrophorese-Gel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das saure Polysaccharid aus der Gruppe Arabinsäure, Tragantsäure
, JKhayasäure
("tragacanth acid"), Karragheen- bzw.' ("Ehaya acid"), Alginsäure, Pektinsäure und Leinölsäure ausgewählt ist.
3· Elektrophorese-Gel nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet , daß die Salze des sauren Polysaccharide aus der Gruppe Natrium-, Kalium-, Calcium- und Magnesiumsalze gewählt sind.
4. Elektrophorese-Gel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet , daß das saure Polysaccharid Arabinsäure ist.
5· Elektrophorese-Gel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet , daß es zusätzlich einen Puffer mit einem basischen pH-Wert enthält.
6. Elektrophorese^Gel nach Anspruch 5» dadurch gekennzeichnet , daß das saure PoIysaccharid aus der Gruppe Arabinsäure, Tragantsäure ("tragacanth acid"), Karragheensäure ("khaya acid"), Alginsäure, Pektinsäure und Leinölsäure ausgewählt ist.
7. Elektrophorese-Gel nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet , daß die Salze des sauren Polysaccharide aus der Gruppe Natrium-, Kalium-, Calcium- und Magnesiumsalze gewählt sind.
8. Elektrophorese-Gel nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet , daß das saure PoIysaccharid Arabinsäure ist·
9. Elektrophorese-Gel nach Anspruch 5» d a du rc h
g e k e η η ze i c h η et , daß es zusätzlich ein Konservierungsmittel enthält,
10. Elektrophorese-Gel nach Anspruch 9, d a d u r c h gek e nn ze i c hn et , daß das saure PoIysaccharid aus der Gruppe Arabinsäure, Tragantsäure ("tragacanth acid"), Karragheensäure ("khaya acid"), Alginsäure, Pektinsäure und Leinölsäure ausgewählt ist.
11. Elektrophorese-Gel nach Anspruch 10, da d u r c h g e k e η η ζ e i c h η e t , daß die Salze des sauren Polysaccharids aus der Gruppe Natrium-,
Kalium-, Calcium- und Magnesiumsalze gewählt sind.
12. Elektrophorese-Gel nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet , daß das saure PoIysaccharid Arabinsäure ist.
13. Elektrophorese-Gel nach Anspruch 5» dadurch gekennzeichnet, daß es des weiteren ein Alkylpolyol mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen und 2 bis 4 Hydroxylgruppen enthält.
14. Elektrophorese-Gel nach Anspruch 13, dadurch gekennzeichnet, daß das saure PoIysaccharid aus der Gruppe Aräbinsäure, Tragantsäure ("tragacanth acid")» Karragheensäure ("khaya acid"), Alginsäure, Pektinsäure und Leinölsäure ausgewählt ist. .-■■■.
15· Elektrophorese-Gel nach Anspruch 14, dadurch gekennzeichnet , daß die Salze des sauren Polysaccharide aus der Gruppe Natrium-, Kalium-, Calcium- und Magnesiumsalze ausgewählt sind.
16. Elektrophorese-Gel nach Anspruch 13» dadurch gek enn ze ic hn e t, daß das saure PoIysaccharid Arabinsäure ist.
17. Elektrophorese-Gel nach Anspruch 5» dadurch gekennzeichnet , daß es zusätzlich ein Konservierungsmittel und ein Alkylpolyol mit 2 bis
Kohlenstoffatomen enthält.
18. Elektrophorese-Gel nach Anspruch 17» dadurch gekennzeichnet , daß das Polysaccharid aus der Gruppe Agar und Agarose gewählt ist·
19. Elektrophorese-Gel nach Anspruch 17, da d u r c h gekennz eich η et, daß das Alkylpolyol 2 bis 4- Kohlenstoffatome aufweist.
20. Elektrophorese-Gel nach Anspruch 17» dadurch gekennzeichnet , daß das Konservierungsmittel Natriumazid ist.
21. Elektrophorese-Gel nach Anspruch 17» dadurch gekennzeichnet, daß der Puffer einen pH-Wert im Bereich von etwa 7-bis etwa 10 aufweist.
22. Elektrophorese-Gel nach Anspruch 17» dad ui c h g e ken η ζ e i c h net ,■ daß das Polysaccharid aus der Gruppe Agar und Agarose gewählt ist, daß das Alkylpolyol 2 bis 4- Kohlenstoffatome aufweist, daß das Konservierungsmittel Natriumazid ist und daß der Puffer einen pH-Wert von etwa 7 bis etwa 10 auf-*· weist.
23. Elektrophorese-Gel nach Anspruch 22, d a durch g e k e η η ζ e i c h η e t , daß das saure Polysaccharid aus der Gruppe Arabinsäure, Tragantsäure ("tragacanth acid"), Karragheensäure ("khaya acid"),
— Ί *5 —
Alginsäure, Pektinsäure und Leinölsäure ausgewählt
ist.
24. Elektrophorese-Gel nach Anspruch 23, dadurch g e k e η η ζ e i c h η e t , daß die Salze des
sauren Polysaccharide aus der Gruppe Natrium-,
Kalium-, Calcium- und Magnesiumsalze gewählt sind.
25· Elektrophorese-Gel nach Anspruch 22, d a d u r c h gekennzeichnet , daß das saure PoIysaccharid Arabinsäure ist.
26. Elektrophorese-Gel nach Anspruch 22, d a du r c h gekennzeichnet, daß das Polysaccharid hoch-elektroendosmotische Agarose ist.
2?. Elektrophorese-Gel nach Anspruch 22, da d u r c h
gekennzeichnet , daß das Alkylpolyol
Äthylenglykol ist.
28. Elektrophorese-Gel nach Anspruch 22, dadurch gekennzeichnet , daß der Puffer einen pH-Wert im Bereich von etwa 8 bis etwa 9 besitzt.
29- Elektrophorese-Gel nach Anspruch 22, dadurch gek e nn ζ e i c hn et , daß das Polysaccharid hoch-elektroendosmotische Agarose ist, daß das Alkylpolyol Äthylenglykol ist, daß das Konservierungsmittel Natriumazid ist und daß der Puffer einen pH-Wert im Bereich von etwa 8 bis etwa 9 besitzt.
30. Elektrophorese-Gel nach Anspruch 29» dadurch gekennzeichnet , daß das saure PoIysaccharid aus der Gruppe Arabinsäure, Tragantsäure ("tragacanth acid")» Karragheensäure ("khaya acid"), Alginsäure, Pektinsäure und Leinölsäure ausgewählt ist.
31. Elektrophorese-Gel nach Anspruch 30, da d u rc h gekennzeichnet , daß die Salze des sauren Polysaccharide aus der Gruppe Natrium-, Kalium-, Calcium- und Magnesiumsalze gewählt sind.
32. Elektrophorese-Gel nach Anspruch 29, dadurch gekennzeichnet , daß das saure PoIysaccharid Arabinsäure ist.
33. Elektrophorese-Gel nach Anspruch 5» g e k e η η ζ e i c h η et du r c h die folgenden Gehalte:
(a) von etwa 0,4- bis etwa 1,5 % Gewicht/Volumen hochelektroendosmotische Agarose,
(b) von etwa 0,01 bis etwa 5 % Gewicht/Volumen Arabinsäure,
(c) bis zu 20 % Volumen/Vplumen Ithylenglykol,
(d) bis zn Λ % Gewicht/Volumen Natriumazid und
(e) daß der Puffer einen pH-Wert im Bereich von etwa 7 bis etwa 10 und eine Molarität im Bereich von
etwa 0,001 bis etwa 3 besitzt.
34. Elektrophorese-Gel nach. Anspruch 5» g e k e η η ζ e i c hne t durc h einen Gehalt
(a) von etwa 0,7 bis etwa 1,2 % Gewicht/Volumen hochelektroendosmotische Agarose,
(b) von etwa 0,5 bis etwa 1,5 % Gewicht/Volumen Arabinsäure,
(c) von etwa 1 bis etwa 10 % Volumen/Volumen Äthylenglykol,
(d) von etwa 0,05 bis etwa 0,15 % Gewicht/Volumen Natriumazid
und
(e) daß der Puffer einen pH-Wert von etwa 8 bis etwa 9 und eine Molarität von etwa 0,05 bis etwa 1 besitzt.
35· Elektrophorese-Gel nach Anspruch 5, gekennzeichnet durch die folgenden Gehalte:
(a) etwa 1 % Gewicht/Volumen hoch-elektroendosmotische Agarose,
(b) etwa 1 % Gewicht/Volumen Arabinsäure,
(c) etwa 5 % Volumen/Volumen Äthylenglykol,
(d) etwa 0,1 % Gewicht/Volumen Natriumazid und
(e) daß der Puffer ein Barbitalpuffer mit einem pH-Wert von etwa 8,6 und einer Molarität von etwa 0,05 ist.
36. Verbessertes elektrophoretisch^s Verfahren zur Bestimmung der relativen Verteilung von Proteinen, des allgemeinen Typs, bei welchem die zu untersuchende Probe auf ein Elektrophorese-Gel aufgebracht und das Elektrophorese-Gel der Elektrophoresebehandlung unterworfen wird, dadurch gekennzeichnet, daß das Elektrophorese-Gel ein Elektrophorese-Gel nach einem oder mehreren der Ansprüche 1 bis 34 oder 35 ist.
DE19823231627 1981-01-19 1982-01-11 Elektrophoresegel auf Polysaccharidbasis und dessen Anwendung Expired DE3231627C2 (de)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US06/226,566 US4319976A (en) 1981-01-19 1981-01-19 Electrophoretic technique for separating serum proteins and improved electrophoretic gel for use therein

Publications (2)

Publication Number Publication Date
DE3231627T1 true DE3231627T1 (de) 1983-12-01
DE3231627C2 DE3231627C2 (de) 1987-06-19

Family

ID=22849431

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE19823231627 Expired DE3231627C2 (de) 1981-01-19 1982-01-11 Elektrophoresegel auf Polysaccharidbasis und dessen Anwendung

Country Status (5)

Country Link
US (1) US4319976A (de)
DE (1) DE3231627C2 (de)
IT (1) IT1151101B (de)
SE (1) SE452197B (de)
WO (1) WO1982002599A1 (de)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS61500810A (ja) * 1984-03-12 1986-04-24 ベツクマン インスツルメンツ インコ−ポレ−テツド ヘモグロビン変異体の分離のための電気泳動方法およびそれに使用する改良電気泳動ゲル
US4808288A (en) * 1984-03-12 1989-02-28 Beckman Instruments, Inc. Electrophoretic gel for separating hemoglobin variants
EP0162657B1 (de) * 1984-05-14 1991-02-06 Fuji Photo Film Co., Ltd. Elektrophoretischer Bestandteil
JPS6266153A (ja) * 1985-09-18 1987-03-25 Fuji Photo Film Co Ltd 電気泳動用媒体
US5144013A (en) * 1986-09-24 1992-09-01 Ube Industries, Ltd. Body fluid purifying material and method for purifying body fluid by use thereof
US4997537A (en) * 1986-10-21 1991-03-05 Northeastern University High performance microcapillary gel electrophoresis
US5665216A (en) * 1986-10-21 1997-09-09 Northeastern University Capillary column for high performance electrophoretic separation and detection of SDS proteins and system and using the same
US4857163A (en) * 1987-07-17 1989-08-15 Beckman Instruments, Inc. High resolution electrophoretic gel and method for separating serum proteins
US4999340A (en) * 1988-08-04 1991-03-12 Board Of Regents, The University Of Texas System Rehydratable agarose gels
FR2684998B1 (fr) * 1991-12-11 1994-10-28 Sebia Sa Procede de separation de la lp(a) par electrophorese, gels pour la mise en óoeuvre de ce procede, et application a la determination in vitro du risque atherogene lie a la presence de la lp(a).

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3527712A (en) * 1967-03-07 1970-09-08 Marine Colloids Inc Dried agarose gel,method of preparation thereof,and production of aqueous agarose gel
US3959251A (en) * 1970-06-25 1976-05-25 Exploaterings Aktiebolaget T.B.F. Stabilized agar product and method for its stabilization
US3956273A (en) * 1971-06-07 1976-05-11 Marine Colloids, Inc. Modified agarose and agar and method of making same
GB1435508A (en) * 1972-05-01 1976-05-12 Rech Et Dapplications Scient S Process for the preparation of crosslinked polysaccharide gels
US3766047A (en) * 1972-09-11 1973-10-16 F Elevitch Gel for electrophoresis
US3947352A (en) * 1974-05-31 1976-03-30 Pedro Cuatrecasas Polysaccharide matrices for use as adsorbents in affinity chromatography techniques
US4305798A (en) * 1980-04-11 1981-12-15 Bryce Allen Cunningham Method of preparative, Kohlrausch-regulated electrophoresis using polyethylene glycol derivatized trailing ions

Also Published As

Publication number Publication date
DE3231627C2 (de) 1987-06-19
SE8205388D0 (sv) 1982-09-20
IT8219190A0 (it) 1982-01-19
IT1151101B (it) 1986-12-17
SE8205388L (sv) 1982-09-20
US4319976A (en) 1982-03-16
SE452197B (sv) 1987-11-16
WO1982002599A1 (en) 1982-08-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE2645466C2 (de) Verfahren zum Isolieren von Albumin aus Plasmaprodukten
DE3004526C2 (de)
DE2500076A1 (de) Verfahren zur erhoehung der intravenoesvertraeglichkeit von aus blut oder blutprodukten ausgefaellten gammaglobulinen
DE3231627T1 (de) Verbessertes Elektrophorese-Verfahren zur Trennung von Serumproteinen und verbessertes Elektrophorese-Gel zur Verwendung für das Elektrophorese-Verfahren
DE3614135A1 (de) Elektrolytloesung fuer karl fischers coulometrische titration und ihre verwendung bei der bestimmung des wassergehaltes
DE3231628C2 (de) Elektrophoresegel
DE2928880A1 (de) Blutserum-standard-zubereitung und verfahren zur erhoehung ihrer lagerbestaendigkeit
DE2604759A1 (de) Verbessertes verfahren zur erhoehung der intravenoesvertraeglichkeit von gammaglobulinen
DE3447455A1 (de) Elektrolyt fuer die coulometrische karl-fischer-titration
DE1090850B (de) Verfahren zum Schutz von Naturkautschuk gegen Oxydation
DE3344437C2 (de)
DE3231626T1 (de) Elektrophoretisches gel zur trennung von isoenzymen
DE2019778B2 (de) Verfahren zur bestimmung der intrazellulaeren verteilung von ribonukleinsaeuren
EP0108248B2 (de) Lösungsvermittlerfreie, wässrige Nitroglycerinlösung
AT215599B (de) Verfahren zur Herstellung eines Plasmapräparates zur Frühdiagnose des Karzinoms
DE3935020A1 (de) Verbesserte elektrophoresegele aus agarose
EP0230226A2 (de) Antimykotische Emulsionen
DE681757C (de) Verfahren zum Weich- und Elastischmachen von eiweisshaltigen Kunststoffen
Ebner et al. Fibrinnachweis mit einem Enzym-Antiserum-Konjugat beim Lichen ruber planus
DE3226202A1 (de) Verfahren zur groessenfraktionierung von linearen polymeren durch fluessigkeit-fluessigkeit-chromatographie
DE2447894B2 (de) Epoxyharz-Zusammensetzung
DE3032072C2 (de) Verfahren zur Analyse von Protein-Untereinheiten mit Hilfe der Elektrophorese an dünnen Schichten, welche Tetramethylharnstoff o.ä. Harnstoffderivate enthalten
DE415227C (de) Verfahren zur Herstellung von haltbaren, oeligen Emulsionen von Wismutsalzen
AT227477B (de) Flüssige Schädlingsbekämpfungsmittel auf Basis von O, O-Dimethyldithiophosphorylessigsäure-N-monomethylamid
DE2100475A1 (de) Neue Steroid Thioester und Ver fahren zu ihrer Herstellung