DE2915160C2

DE2915160C2 -

Info

Publication number: DE2915160C2
Application number: DE2915160A
Authority: DE
Inventors: Yohei Nishinomiya Hyogo Jp Hashimoto; Masaru Choshi Chiba Jp Ogura; Hiroyuki Niiza Saitama Jp Ishizone
Original assignee: Yamasa Shoyu Kk Choshi Chiba Jp
Current assignee: Yamasa Shoyu Kk Choshi Chiba Jp
Priority date: 1978-04-14
Filing date: 1979-04-12
Publication date: 1987-11-05
Also published as: FR2422684A1; GB2019407B; US4320225A; DE2915160A1; GB2019407A; FR2422684B1

Description

Die Erfindung betrifft Periandrine, die als süßschmeckende Substanzen in der Natur vorkommen.

Pflanzen der Gattung Periandra sind Sträucher, die zur Familie der Leguminosen gehören und die wild in den nördlichen und mittleren Teilen Brasiliens wachsen. In diesen Gebieten werden die Wurzeln dieser Pflanzen von den Eingeborenen "Alcaqus de terra" genannt, was "einheimisches Süßholz" bedeutet. Diese Wurzeln sind seit langer Zeit für medizinische Zwecke, beispielsweise als Expectorantien, verwendet worden. Die Wurzeln dieser Pflanzen besitzen Süße und auch einen erheblichen Anteil an Bitterstoffen. Deshalb konnten die durch Extrahieren dieser Wurzeln mit Wasser, Alkohol usw. erhaltenen Extrakte nicht als solche für Süßungsmittel oder Süßungshilfsmittel, wie Lakritzen- oder Süßholzextrakte, verwendet werden.

Im übrigen findet sich in "Chemical Abstracts", 36 (1942), S. 3319, der Hinweis, daß der in den Wurzeln von Periandra-Pflanzen vorliegende süßschmeckende Stoff Glycyrrhizin ist.

Vorliegender Erfindung lag nun die Aufgabe zugrunde, diese süßschmeckenden Stoffe bereitzustellen. Die Erfindung löst diese Aufgabe.

Gegenstand der Erfindung sind Periandrine der allgemeinen Formel Ia

in der R ein Rest der allgemeinen Formeln I bis IV

ist und M Wasserstoffatome, Alkalimetall-, Ammonium- und/oder Calciumionen bedeuten.

Die Periandrine mit den Resten der allgemeinen Formeln I bis IV werden nachstehend als Periandrine I, II, III und IV bezeichnet.

In den Zeichnungen bedeuten die Fig. 1 bis 4 die Infrarotspektren der Periandrine I bis IV.

Bei den Untersuchungen lagen die Periandrine I und II in Form der freien Säuren und die Periandrine III und IV in Form ihrer Monoammoniumsalze vor.

Nachstehend werden die chemischen Strukturformeln und die physikalischen und chemischen Eigenschaften der Periandrine I, II, III und IV angegeben.

Periandrin I

Periandrin I in Form seiner freien Säure (M = H) hat die nachstehenden physikalischen und chemischen Eigenschaften:

(a) Schmelzpunkt: < 300°C (wird bei etwa 190°C schwarz);
(b) Drehung: -23,0° (c = 1,0 in Wasser);
(c) Molekulargewicht: 822 (Massenspektrum nach der Felddesorptionsmethode: M⁺ · H · Na = 846);
(d) Analyse für C₄₂H₆₂O₁₆ · 4 H₂O:
ber.:C 56,36 H 7,88%, gef.:C 56,52 H 7,61%;
(e) Summenformel: C₄₂H₆₂O₁₆;
(f) IR-Spektrum (KBr): n _max 3400, 3200, 1700, 1600, 1400, 1100, 625 cm^-1 (Fig. 1);
(g) Löslichkeit:
leicht löslich in Wasser,
löslich in Pyridin,
schwer löslich in Methanol und Äthanol;
(h) Dünnschichtchromatographie:
- (1) n-Butanol-Benzol-Methanol-28%iger Ammoniak = 4 : 3 : 2 : 3; Rf-Wert: 0,18
- (2) Methylenchlorid-Methanol-Äthanol-40%ige Essigsäure = 8 : 4 : 1 : 2; Rf-Wert: 0,44;
- (3) Äthylacetat-n-Propanol-Wasser = 7 : 5 : 4; Rf-Wert: 0,17;
(i) UV-Spektrum: Endabsorption;
(j) Aussehen: farblose, rechteckige Plättchen (aus einem Wasser-Methanol-Gemisch)

Periandrin II

Periandrin II in Form seiner freien Säure (M = H) hat die nachstehenden physikalischen und chemischen Eigenschaften:

(a) Schmelzpunkt: 216 bis 220°C (Zers.);
(b) Drehung: +37,0° (c = 0,27 in Wasser);
(c) Analyse für C₄₂H₆₂O₁₆ · 3 H₂O:
ber.:C 57,52 H 7,82%, gef.:C 57,93 H 7,80%;
(d) Summenformel: C₄₂H₆₂O₁₆;
(e) IR-Spektrum (KBr): ν _max 3400, 3200, 2950, 1710, 1600, 1400, 1060 cm^-1 (Fig. 2);
(f) Löslichkeit:
leicht löslich in Wasser,
löslich in Pyridin,
schwer löslich in Methanol und Äthanol;
(g) Dünnschichtchromatographie:
- (1) n-Butanol-Benzol-Methanol-28%iger Ammoniak = 4 : 3 : 2 : 3; Rf-Wert: 0,18
- (2) Methylenchlorid-Methanol-Äthanol-40%ige Essigsäure = 8 : 4 : 1 : 2; Rf-Wert: 0,44;
- (3) Äthylacetat-n-Propanol-Wasser = 7 : 5 : 4; Rf-Wert: 0,15;
(h) UV-Spektrum: Endabsorption;
(i) Aussehen: farblose, rechteckige Plättchen (aus einem Wasser-Methanol-Gemisch)

Periandrin III

Periandrin III in Form seiner freien Säure (M = H) hat die nachstehenden physikalischen und chemischen Eigenschaften:

(a) Schmelzpunkt: < 300°C;
(b) Drehung: -24,5° (c = 1,1 in Wasser);
(c) Analyse für C₄₂H₆₄O₁₆ · 2 H₂O:
ber.:C 58,59 H 7,96%, gef.:C 58,07 H 8,17%;
(d) Summenformel: C₄₂H₆₄O₁₆;
(e) IR-Spektrum des Monoammoniumsalzes (KBr): νmax 3400, 2930, 1700, 1600, 1408, 1040 cm^-1 (Fig. 3);
(f) Löslichkeit:
leicht löslich in Wasser,
löslich in Pyridin,
schwer löslich in Methanol und Äthanol;
(g) Dünnschichtchromatographie:
- (1) n-Butanol-Benzol-Methanol-28%iger Ammoniak = 4 : 3 : 2 : 3; Rf-Wert: 0,15
- (2) Methylenchlorid-Methanol-Äthanol-40%ige Essigsäure = 8 : 4 : 1 : 2; Rf-Wert: 0,40;
- (3) Äthylacetat-n-Propanol-Wasser = 7 : 5 : 4; Rf-Wert: 0,14;
(h) UV-Spektrum: Endabsorption;
(i) Aussehen: farbloses, kristallines Pulver.

Perandrin IV

Periandrin IV in Form seiner freien Säure (M = H) hat die nachstehenden physikalischen und chemischen Eigenschaften:

(a) Schmelzpunkt: < 300°C;
(b) Drehung: +96,0° (c = 2,5 in Wasser);
(c) Analyse für C₄₂H₆₄O₁₆ · 3 H₂O:
ber.:C 57,39 H 8,03%, gef.:C 57,01 H 7,70%;
(d) Summenformel: C₄₂H₆₄O₁₆;
(e) IR-Spektrum des Monoammoniumsalzes (KBr): ν _max 3400, 2920, 1700, 1600, 1407, 1045 cm^-1 (Fig. 4);
(f) Löslichkeit:
leicht löslich in Wasser,
löslich in Pyridin,
schwer löslich in Methanol und Äthanol;
(g) Dünnschichtchromatographie:
- (1) n-Butanol-Benzol-Methanol-28%iger Ammoniak = 4 : 3 : 2 : 3; Rf-Wert: 0,15
- (2) Methylenchlorid-Methanol-Äthanol-40%ige Essigsäure = 8 : 4 : 1 : 2; Rf-Wert: 0,40;
- (3) Äthylacetat-n-Propanol-Wasser = 7 : 5 : 4; Rf-Wert: 0,19;
(h) UV-Spektrum: Endabsorption;
(i) Aussehen: farbloses, kristallines Pulver

Die vorgenannten Periandrine kommen in den Wurzeln von Pflanzen der Gattung Periandra vor, von denen typische Vertreter Periandra mediteranea und Periandra dulcis sind. Die Wurzeln dieser Pflanzen oder die getrockneten Wurzeln werden gegebenenfalls nach einem Zerkleinern oder Mahlen einer Extraktion unterworfen. Die Extraktion wird gewöhnlich durch Anwendung von

(a) Wasser oder einem Gemisch aus Wasser und einem hydrophilen bzw mit Wasser mischbaren organischen Lösungsmittel, wobei der Gehalt an diesem hydrophilen oder mit Wasser mischbaren organischen Lösungsmittel nicht über 80% liegt und als organische Lösungsmittel beispielsweise Methanol, Äthanol, Propanol, Butanol, Aceton oder Methyläthylketon unter der Bedingung eines pH-Wertes nicht unter 3 in Betracht kommen, oder
(b) einem Wasser enthaltenden oder einem wäßrigen hydrophilen organischen Lösungsmitttel, z. B. Äthanol mit einem Gehalt von nicht über 15% Wasser, unter sauren Bedingungen, und zwar eines pH-Wertes unter 3,

als Extraktionsmittel durchgeführt.

Die Temperatur für die Extraktion ist nicht in bsonderem Maße beschränkt und kann im Bereich zwischen dem Gefrierpunkt und dem Siedepunkt des Lösungsmittels liegen. Die Extraktion bei einer niedrigen Temperatur ist insofern vorteilhaft, als der erhaltene Extrakt einen geringen Anteil an Verunreinigungen aufweist, obwohl eine längere Extraktionszeit erforderlich ist. Bei einer höheren Temperatur wird die Extraktionszeit vorteilhafterweise abgekürzt. Die Dauer der Extraktion kann gegebenenfalls entsprechend der Art des Extraktionsmittels, der Extraktionstemperatur und anderer Bedingungen ausgewählt werden. Die Wirksamkeit der Extraktion kann durch Mitverwenden von Alkaliverbindungen, Polyphosphaten und/oder grenzflächenaktiven Verbindungen im Extraktionsmittel gesteigert werden.

Die Gewinnung und Reinigung der Periandrine aus den erhaltenen Extrakten kann mittels einer Kombination geeigneter üblicher Reinigungsverfahren durchgeführt werden, wie

(a) mittels Säurefällung,
(b) mittels Extrahieren mit einem Wasser enthaltenden oder mit einem wäßrigen, sauren, hydrophilen oder mit Wasser mischbaren organischen Lösungsmitteln bei einem pH-Wert unter 3,
(c) mittels Ausfällen unter Verwendung von hydrophilen oder mit Wasser mischbaren organischen Lösungsmitteln bei einem pH-Wert nicht unter 3,
(d) mittels Ionenaustauscher- oder Adsorptionschromatographie,
(e) mittels Behandlung mit Molekularsieb- oder Dialyse- Membranen oder
(f) durch Umkristallisieren

Die Ausführungen der typischen Reinigungsverfahren werden nachstehend näher erläutert.

Periandrine werden aus ihren wäßrigen Lösungen unter sauren Bedingungen, d. h. einem pH-Wert unter 3, ausgefällt. In diesem Fall verbleibt der größte Teil der Bittersubstanzen, die den Extrakt verunreinigen, in Lösung, so wie sie sind. Wenn Mineralsäuren, wie Chlorwasserstoffsäure oder Schwefelsäure, zu einer wäßrigen Lösung gegeben werden, die unmittelbar aus dem Extrakt zur Durchführung der Säurefällung hergestellt worden ist, werden die Periandrine zusammen mit Proteinen und zahlreichen säureunlöslichen Substanzen ausgefällt.

Um ein Mitausfällen der Proteine und dergleichen zu verringern, ist es möglich, je nach Erfordernis eine Vorbehandlung durchzuführen, wie

(a) Umwandeln der säureunlöslichen Substanzen, wie Proteine, in säurelösliche Peptide oder Aminosäuren mittels einer Behandlung mit Enzymen, wie Protease,
(b) Erhitzen der Proteine auf 70° oder höher, um sie zu koagulieren und zu entfernen, und
(c) Zufügen einer Lösung von Metallhydroxiden, wie Calciumhydroxid, Magnesiumhydroxid oder Aluminiumhydroxid, oder Zufügen zuerst einer Lösung von organischen Salzen dieser Metalle und dann Einstellen der Lösung auf einen alkalischen pH-Wert, wobei sich Metallhydroxide in der Lösung bilden, wodurch die Proteine ausgefällt und entfernt werden können.

Im Fall der Säurefällungsbehandlung kann die Ausbeute an dem ausgefällten Produkt durch Aussalzen in Gegenwart von Neutralsalzen, wie Natriumchlorid, Natriumsulfat, Natriumsulfat, Natriumnitrat, Natriumformiat oder Natriumacetat, erhöht werden.

Unter pH-Bedingungen im Bereich von schwach sauer, d. h., einem pH-Wert von 3 oder höher bis zu alkalischen Bedingungen, ist die Löslichkeit der Periandrine in einem Lösungsmittel mit einem Gehalt von etwa 85% oder mehr hydrophilen oder mit Wasser mischbaren organischen Lösungsmitteln niedrig, jedoch sind die Bittersubstanzen darin löslich, wodurch die Periandrine und die bitter schmeckenden Substanzen getrennt werden können. Demzufolge kann ein Periandrin als Niederschlag abgetrennt gesammelt werden, indem man ein hydrophiles oder ein mit Wasser mischbares organisches Lösungsmittel in einer Menge von 85% oder mehr, vorzugsweise 95% oder mehr, zu dem wäßrigen Extrakt, zu einer konzentrierten Lösung oder zu dem Feststoff einer abgetrennten und gereinigten Extraktlösung oder zu einer solchen Lösung zugibt, die durch Neutralisieren und Auflösen des Niederschlags aus der vorgenannten Säurefällungsstufe hergestellt worden ist. Das Periandrin kann man als Niederschlag auch aus einem Extrakt erhalten, der nach dem Extraktionsverfahren mit Wasser enthaltenden, hydrophilen organischen Lösungsmitteln eines pH-Wertes unter 3 erhalten worden ist, indem man in einfacher Weise den pH-Wert des Extrakts mittels alkalischer Verbindungen auf 3 oder höher einstellt.

Da das Periandrin bei einem pH-Wert unter 3 in Wasser enthaltenden (oder wäßrigen) hydrophilen (oder mit Wasser mischbaren) organischen Lösungsmitteln, wie wäßrigem Äthanol, löslich ist, wird der wäßrige Extrakt eingeengt und auf einen sauren pH-Wert eingestellt, oder der nach der vorgenannten Säurefällungsbehandlung gebildete Niederschlag wird gesammelt und dann mit einem hydrophilen organischen Lösungsmittel in einer solchen Menge versetzt, daß die Konzentration an dem Lösungsmittel 85% oder höher, vorzugsweise 95% oder höher, beträgt. Dadurch können Periandrine extrahiert werden. Bezühlich eines Verfahrens zur Herstellung einer wäßrigen Lösung des Periandrins aus dem erhaltenen Extrakt werden unlösliche Rückstände aus dem Extrakt entfernt, und entweder wird der Extrakt als solcher oder nach einer Einengung in Wasser suspendiert und dann durch Neutralisieren gelöst, oder zu dem Extrakt werden nicht-hydrophile (oder mit Wasser nicht mischbare) organische Lösungsmittel gegeben, die mit den hydrophilen oder mit Wasser mischbaren organischen Lösungsmitteln mischbar sind, um das Periandrin in Form eines Niederschlags zu erzeugen, der dann in Wasser gelöst wird.

Die Abtrennung der Periandrine von anderen Verunreingungen oder die Trennung der Periandrine voneinander kann dadurch erfolgen, daß man eine Periandrine enthaltende Lösung einer fraktionierten Absorptionsbehandlung oder einer fraktionierten Eluierungsbehandlung mit Ionenaustauschern, wie schwach basischen anionischen Austauscherharzen oder vernetzten Diäthylaminoäthyldextranen, oder mit Adsorptionsmitteln, wie synthetischen Adsorptionsmitteln, Silikagel, granulierten Polyamiden, Aktivkohle, aktiviertem Aluminiumoxid, aktiviertem Ton oder Diatomeenerde, unterwirft. Die Durchführung dieser Behandlungen erfolgt gewöhnlich mittels Säulenchromatographie. Die Arbeitsweisen und die Bedingungen können in geeigneter Weise entsprechend den Arten der verwendeten Trägermaterialien und anderer Faktoren ausgewählt und angewendet werden.

Die Reinigung wird in den nachstehenden Beispielen näher erläutert.

Beispiel 1

20 kg Wurzeln von Periandra dulcis werden in kleine Stücke geschnitten, die 24 Stunden mit 100 Liter Wasser bei 70 bis 80°C extrahiert werden. Die Extraktion wird zweimal wiederholt. Dann wird der Extrakt filtriert. Die Filtrate werden vereinigt und unter vermindertem Druck auf 8 Liter eingeengt. Der konzentrierten Flüssigkeit wird dann das 11fache Volumen Äthanol (88 Liter) unter Rühren zugegeben. Das Gemisch läßt man über Nacht bei 5°C abkühlen. Der gebildete Niederschlag (1,06 kg) wird abfiltriert und wieder in 4 Liter Wasser gelöst. Zu dieser Lösung fügt man unter Rühren das 11fache Volumen Äthanol (44 Liter) hinzu und läß das Gemisch über Nacht bei 5°C abkühlen.

Die gleiche Arbeitsweise wird wiederholt. Man erhält 870 g einer süßschmeckenden Rohfraktion, die mittels Säulenchromatographie an Silikagel gereinigt wird. 150 g der süßschmeckenden Rohfraktion werden an einer äquivalenten Menge Silikagel (Kieselgel 60′′) adsorbiert. Dann wird diese an Silikagel adsorbierte Fraktion auf eine Säule von 6 cm Durchmesser und 70 cm Länge gegeben, die zuvor mit 1 kg Silikagel gefüllt worden ist. Anschließend eluiert man die süßschmeckende Fraktion mit einem Lösungsmittelgemisch aus n-Butanol, Benzol, Methanol und 28prozentigem Ammoniak im Verhältnis 4 : 3 : 3 : 2 : 2. Auf diese Weise erhält man eine Fraktion mit den Periandrinen I und II und eine andere Fraktion mit den Periandrinen III und IV.

Man wiederholt zwei- bis dreimal die Chromatographie an Silikagel mit dem vorgenannten Lösungsmittelgemisch bei der Fraktion mit den Periandrinen I und II, bis die Periandrine I und II bei der Dünnschichtchromatographie einen einzigen Fleck zeigen. Als Laufmittel verwendet man ein Gemisch aus Methylenchlorid, Methanol, Äthanol und 40prozentiger Essigsäure im Verhältnis 8 : 4 : 1 : 2 und ein Gemisch aus Äthylacetat, n-Propanol und Wasser im Verhältnis 7 : 5 : 4. Nach der Bestätigung, daß die Substanzen bei der Dünnschichtchromatographie eine einzige Substanz zu sein scheinen, erhält man aus heißer Essigsäure 860 mg Periandrin I und aus einem Wasser-Alkohol-Gemisch 240 mg Periandrin II.

Die Fraktion mit den Periandrinen III und IV (1,1 g) wird an einer äquivalenten Menge Silikagel adsorbeirt. Diese an Silikagel adsorbierte Fraktion wird dann auf eine Säule von 6 cm Durchmesser und 70 cm Länge gegeben, die zuvor mit 1 kg Silikagel gefüllt worden ist. Die Säule wird dann mit einem Lösungsmittelgemisch aus Chloroform, Methanol und Wasser im Verhältnis 25 : 17 : 3 eluiert. Man wiederholt die Chromatographie an Silikagel zwei- bis dreimal mit dem Elutionsprodukt, bis die Periandrine III und IV bei der Dünnschichtchromatographie einen einzigen Fleck zeigen. Als Laufmittel verwendet man Äthylenchlorid, Methanol, Äthanol und 40prozentige Essigsäure im Verhältnis 8 : 4 : 1 : 2 und Äthylacetat, n-Propanol und Wasser im Verhältnis 7 : 5 : 4. Nach der Bestätigung, daß die erhaltenen Substanzen aufgrund der Dünnschichtchromatographie eine einzige Substanz zu sein scheinen, erhält man aus Wasser 40 mg Periandrin III und 19 mg Periandrin IV als kristalline Pulver.

Beispiel 2

30 kg Wurzeln von Periandra dulcis werden in kleine Stücke geschnitten und dann 24 Stunden bei Raumtemperatur mit 150 Liter 94prozentigem Äthanol extrahiert, der mittels Chlorwasserstoffsäure auf pH 2,0 bis 2,5 eingestellt worden ist. Die Extraktion wird zweimal wiederholt. Dann wird der Extrakt filtriert. Die Filtrate werden vereinigt, mit alkalichen Verbindungen neutralisiert und unter vermindertem Druck auf 6 Liter eingeengt. Zu der eingeengten Flüssigkeit wird unter Rühren das 11fache Volumen Äthanol (66 Liter) gegeben. Dann läßt man das Gemisch über Nacht bei 5°C abkühlen. Der gebildete Niederschlag wird abfiltriert und dann in 3 Litern Wasser gelöst. Zu dieser Lösung fügt man unter Rühren das 11fache Volumen Äthanol (33 Liter) hinzu. Dann läßt man das Gemisch über Nacht bei 5°C abkühlen. Der gebildete Niederschlag (430 g) wird abfiltriert.

Die derart erhaltene süßschmeckende Rohfraktion wird mittels Säulenchromatographie an Silikagel gereinigt. 100 g der süßschmeckenden Rohfraktion werden an einer äquivalenten Menge Silikagel ("Kieselgel 60′′) adsorbiert. Diese an Silikagel adsorbierte Fraktion wird anschließend auf eine Säule von 4,5 cm Durchmesser und 80 cm Länge gegeben, die zuvor mit 500 g Silikagel beschickt worden ist. Die süßschmeckende Fraktion wird mit einem Gemisch aus n-Butanol, Benzol, Methanol und 28prozentigem Ammoniak im Verhältnis 4 : 3 : 2 : 2 eluiert. Man erhält eine Fraktion mit den Periandrinen I und II und eine Fraktion mit den Periandrinen III und IV.

Mit der Fraktion mit den Periandrinen I und II wird die Säulenchromatographie an Silikagel mit dem vorgenannten Lösungsmittelgemisch ein- bis zweimal wiederholt, bis die Periandrine I und II bei der Dünnschichtchromatographie einen einzigen Punkt zeigen. Als Laufmittel verwendet man ein Gemisch aus Methylenchlorid, Methanol, Äthanol und 40prozentiger Essigsäure im Verhältnis 8 : 4 : 1 : 2 und ein Gemisch aus Äthylacetat, n-Propanol und Wassser im Verhältnis 7 : 5 : 4. Nach der Bestätigung, daß die Substanzen aufgrund der Dünnschichtchromatographie eine einzige Substanz zu sein scheinen, erhält man aus heißer Essigsäure 700 mg kristallines Periandrin I und aus einem Wasser- Alkohol-Gemisch 170 mg kristallines Periandrin II

Die Fraktion mit den Periandrinen III und IV (1,5 g) wird an einer äquivalenten Menge Silikagel adsorbiert. Die an Silikagel adsorbierte Fraktion wird dann auf einer Säule von 4,5 cm Durchmesser und 90 cm Länge gegeben, die zuvor mit 600 g Silikagel beschickt worden ist. Die Säule wird dann mit einem Gemisch aus Chloroform, Methanol und Wasser im Verhältnis 25 : 17 : 3 eluiert. Das Eluat wird nochmals ein- oder zweimal einer Chromatographie an Silikagel unterworfen, bis die Periandrine III und IV bei der Dünnschichtchromatographie einen einzigen Fleck zeigen. Als Laufmittel verwendet man ein Gemisch aus Methylenchlorid, Methanol, Äthanol und 40prozentiger Essigsäure im Verhältnis 8 : 4 : 1 : 2 und ein Gemisch aus Äthylacetat, n-Propanol und Wasser im Verhältnis 7 : 5 : 4. Nach der Bestätigung, daß die Substanzen aufgrund der Dünnschichtchromatographie eine einzige Substanz zu sein scheinen, erhält man aus Wasser 23 mg kristallines Periandrin III und 9 mg kristallines Periandrin IV.

Der Geschmack der Periandrine ist erfrischend und wohlschmeckend süß. Die Ergebnisse von Untersuchungen hinsichtlich des Süßgrades werden in dem folgenden Vergleichsbeispiel erläutert.

Vergleichsbeispiel

Es wird eine Reihe von Standardlösungen mit Süßstoffen hergestellt. Die fünf Klassen von wäßrigen Lösungen enthalten auf jeweils 100 ml 0,3 g, 0,5 g, 1 g, 2 g und 3 g Saccharose. Getrennt davon werden wäßrige Lösungen hergestellt, die jeweils in 100 ml 10 mg bzw. 20 mg der Periandrine I bis IV enthalten. Zu Vergleichszwecken werden wäßrige Lösungen mit 10 mg bzw. 20 mg Glycyrrhizin je 100 ml hergestellt.

Der Grad der Süße dieser wäßrigen Lösungen mit einem Gehalt an den süßschmeckenden Substanzen wird im Vergleich mit den Saccharoselösungen durch eine Gruppe von 15 Gutachtern bewertet. Der Grad der Süße als ein mehrfaches des Grades von Saccharose wird als Durchschnittswert der 15 Gutachter berechnet. Die Ergebnisse sind in der nachstehenden Tabelle angegeben.

Tabelle

Aus der Tabelle ist ersichtlich, daß die Periandrine praktisch die gleiche Süße wie Glycyrrhizin besitzen. Im Hinblick auf den Vergleich der Süße besitzen die Periandrine nur einen sehr schwachen oder gar keinen bitteren Geschmack, wohingegen Glycyrrhizin einen bitteren Geschmack aufweist. Es wurde ferner festgestellt, daß die Süße von Periandrinen schneller empfunden wird. Demzufolge sind die Periandrine sehr wertvoll als natürliche Süßstoffe von guter Qualität.

Bei den vorgenannten Beispielen ist die Dünnschichtchromatographie an Silikagel "Kieselgel 60 F254" durchgeführt worden.

Claims

Periandrine der allgemeinen Formel in der ein Rest der allgemeinen Formeln I bis IV und ist und M Wasserstoffatome, Alkalimetall-, Ammonium- und/oder Calciumionen bedeuten.