DE2460672C2

DE2460672C2 - Verfahren zum Züchten von Mikroorganismen

Info

Publication number: DE2460672C2
Application number: DE2460672A
Authority: DE
Inventors: David Ernest Forester Sheldwich Lees Faversham Kent Harrison; John Harry Teynham Sittingbourne Kent Harwood; Barry Neil Murston Sittinbourne Kent Herbert
Original assignee: Shell Internationale Research Maatschappij BV
Current assignee: Shell Internationale Research Maatschappij BV
Priority date: 1974-01-07
Filing date: 1974-12-20
Publication date: 1983-04-28
Also published as: FI53224C; FR2256957B1; ES433184A1; IT1030943B; BE823623A; DE2460672A1; GB1467022A; SU615870A3; FI370874A; FR2256957A1; HU169929B; CH614234A5; NO744645L; NL7416644A; JPS50116680A; CA1037398A; DK140903B; US3996105A; NO140800C; NO140800B

Description

züchtet.

Es sind viele Mikroorganismen bekannt, die Kohlenwasserstoffe oder bestimmte sauerstoffhaltige oder sonstige Derivate davon als Kohlenstoff- und/oder Energiequelle verwenden können. Die getrocknete Biomasse, die nach Züchtung solcher Mikroorganismen erhalten werden kann und oft als »Einzelzcllprotein« bezeichnet wird, ist reich an Eiweißstoffen und kann als löslicher Nährstoff oder Nährstoffzusatz für Menschen und Tiere angewandt werden. Von besonderem Interesse in diesem Zusammenhang sind Mikroorganis men, die imstande sind, gasförmige organische Verbindungen, die ein oder mehrere Kohlenstoffatome im Molekül enthalten, wie zum Beispiel Methan, zu verbrauchen.

Es ist Aufgabe der vorliegenden Erfindung, ein verbessertes Verfahren zur Züchtung von Mikroorganismen zu entwickeln, die eine hochwertige, eiweißreiche, getrocknete Biomasse ergeben.

Diese Aufgabe wird gelöst durch das im Anspruch gekennzeichnete Verfahren.

Es hat sich gezeigt, daß bei dem erfindungsgemäßen Verfahren eine synergistische Wirkung auftritt, die zu einer höheren Wachstumsgeschwindigkeit und Ausbeute der Mikroorganismen führt, als wenn der Methanverbrauchende Mikroorganismus allein gezüchtet wird oder wenn Methan- und Mcthanol-vcrbratichcnde M'kroorganismen zusammen gezüchtet werden. Außerdem \\erien auch verschiedene ander·.· Vorteile erreicht z- B. eine erhöhte Widerstandsfähigkeit gegen Infektion und verminderte Schaumbildung, verglichen mit Verfahren, bei denen nur eine Mikroorganismusart angewandt wird.

Es ist bekannt, daß Methanol ein Zwischenmetabolit beim mikrobiologischen Methanverbrauch ist und als solcher in einem Kulturmedium während des Wachstums von Methan-verbrauchenden Bakterien vorhanden sein kann. So kann das Vorhandensein von

ic Methanol-verbrauchenden Mikroorganismen neben dem Methan-verbrauchenden Bakterium vermutlich die Ausbeute an Mikroorganismen bei einem bestimmten Gewicht an Methan erhöhen, indem es zu einer vollständigeren Umwandlung des Methans in Biomasse führt Diese Tatsache konnte bestätigt werden. Die Ausbeute wurde weiter erhöht durch das Vorhandensein einer 3. Gruppe (nicht-methylotropher) Mikroorganismen. Diese Tatsache kann folgendermaßen erklärt werden: Der nicht-methylotrophe Organismus ver braucht organische Substanzen, die während des Metabolismus von Methan und Methanol gebildet werden, und erhöht dadurch die Ausbeute an Biomasse, entfernt störende Metaboliten und bildet wachstumsfördernde Moleküle.

Das flüssige Wachstumsmedium umfaßt auch eine stickstoffhaltige Verbindung, die Ammoniak, Harnstoff, ein Ammoniumsalz, wie das Sulfat, Chlorid oder Nitrat sein kann, z. B. ein Alkalinitrat. Die Verbindung ist günstigerweise in einer Konzentration von 3 —50 g/l vorhanden.

Andere Elemente, die in dem Medium vorhanden sein können, sind Phosphor, Schwefel, Magnesium und Eisen. Die Phosphorquelle ist vorzugsweise eines oder mehrere Phosphate, z. B. K₂HPO₄, KH₂PO₄, Na₂HPO₄ oder (NH₄J₂HPO₄ oder Phosphorsäure, vorzugsweise in einer Konzentration von 3-20 g/l. Die Schwefelquelle kann Schwefelsäure oder ein Sulfat wie (NH₄)₂SO₄ sein, günstigerweise in einer Konzentration von 0,5 —5,0 g/l. Die beiden Metalle werden in Form des einen oder anderen ihrer Salze zur Verfügung gestellt, z. B. in Form von MgSO₄ · 7 H₂O in einer Konzentration von 0,2 —2,0 g/l und FeCb · 6 H₂O in einer Konzentration von 0,01 -0,1 g/l.

Das Medium kann auch Spuren anderer Elemente in

"5 Form geeigneter Salze enthalten, z. B. Calcium, Mangan, Zink, Kobalt, Molybdän und Bor. Beispiele für geeignete Medien sind in den Beispielen angegeben.

Das erfindungsgemäße Verfahren kann ansatzweise, halbkontinuierlich, aber vorzugsweise kontinuierlich durchgeführt werden. Um ein Wachstum zu erreichen, wird das Medium mit den Mikroorganismen beimpft und mit einem Gasgemisch, enthaltend Methan und Sauerstoff, zusammengebracht. Methan kann in Form von natürlichem Gas zur Verfügung gestellt werden. Für die kontinuierliche Kultur können die Mikroorganismen in irgendeinem entsprechend angepaßten Fermentationsgefäß gezüchtet werden, z. B. in einem gerührten Fermentationsgefäß mit Ablenkblechen oder einem Fermentationsgefäß in Form eines Sprühturms, das entweder mit einer inneren Kühlung oder einer äußeren Umlaufkühlschleife versehen ist. Frisches Medium wird kontinuierlich zu der Kultur gepumpt, mit Geschwindigkeiten entsprechend 0,02 bis 1,0 Volumina der Kultur pro Stunde und die Kultur wird mit ei.ier solchen

^ Geschwindigkeit abgezogen, daß das Volumen der Kultur konstant bleibt. Ein Gasgemisch, enthaltend Methan und Sauerstoff und gegebenenfalls Kohlendioxid oder andere Gase, wird mit dem Medium in

Kontakt gebracht, vorzugsweise indem es kontinuierlich durch eine Verteilerplatte am Boden des Gefäßes eingeblasen wird Die Sauerstoffquelle für die Kultur kann Luft, Sauerstoff oder mit Sauerstoff angereicherte Luft sein. Das verbrauchte Gas wird vom Kopf des Gefäßes abgezogen. Das verbrauchte Gas kann entweder über eine äußere Schleife oder innen mit Hilfe einer Gasumwälzpumpe zurückgeführt werden. Der Gasfluß und die Gasrückführung sollten so geleitet werden, daß man ein maximales Wachstum der Organismen und eine maximale Ausnutzung des Methans erreicht

Die Temperatur der Kultur wird im allgemeinen bei 30 bis 50⁰C, vorzugsweise bei 38 bis 45° C gehalten. Der pH-Wert der Kultur wird auf einen Wert von 6,0 bis 8,0, vorzugsweise 6,4 bis 7,4 eingestellt durch entsprechende Zugabe von Alkali, z. B. NaOH, KOH, NH₄OH und/oder einer Säure, z. B. H₂SO₄ oder H₃PO₄.

Die Mikroorganismuszellen können von dem Wachstumsmedium nach irgendeinem üblicherweise angewandten Standard-Verfahren gewonnen werden, z. B. durch Ausflocken, Sedimentation und/oder Ausfällung und anschließende Zentrifugierung und/oder Filtration. Die Biomasse wird dann getrocknet, z. B. durch Gefrieren oder Sprühtrocknen und kann in dieser Form als Proteinnährstoff oder Nahrungszusatz für Menschen oder Tiere verwendet werden.

Isolierung der Mischkultur NCIB 11 085

Es wurde ein Ausgangsmedium auf der Grundlage des von Sheehan & Johnson beschriebenen (im folgenden als ISM-Medium bezeichnet) hergestellt, das die folgenden Bestandteile enthielt:

KH₂PO₄	1,6 g/l
Na₂HPO₄	1,16 g/l
NaNO₃	1,18 g/l
MgSO₄ · 7 H₂O	0,08 g/l
FeSO₄ · 7 H₂O	0,014 g/l
Ca(NO₃M H₂O	0,025 g/i
CuSO₄ · 5 H₂O	8 χ 10-6 g/1
ZnSO₄ · 7 H₂O	6,8 XlO-⁷ g/l
MnSOi · 4 H₂O	6,0 xlO-⁷ g/l
Na₂MoO₄ ■ 2 H₂O	4,8 xlO-⁷ g/l

Eine gemischte Kultur von Bakterien, die auf Methan wächst, wurde aus einer Schlammprobe gewonnen, die aus einer tropischen Entenfarm stammte. 2 g der Probe wurden in einen 250-ml-Schüttelkolben, enthaltend 25 ml des ISM-Mediums gegeben und zweimal täglich mit einem Gasgemisch, bestehend aus 25% Methan und 75% Luft belüftet. Der Kolben wurde auf einer Rotations-Schüttelvorrichtung mit einem Orbital-Radius von 2,5 cm mit 200 UpM 1 Woche geschüttelt. Aus der Kultur, in der sich eine Trübung gebildet hatte, wurden Unterkulturen gebildet, indem 2 ml Inokulum in ähnliche Schüttelkolben gegeben wurde, wobei aseptische Bedingungen eingehalten wurden. Dieses Verfahren wurde einige Male wiederholt und wenn ein reproduzierbares gutes Wachstum erhalten worden war, wurden die Kulturen in dem Schüttelkolben angewandt, um einen Fermenter der in Beispiel 3 beschriebenen Art zu beimpfen.

Mikrobiologische Charakteristika
der Kultur NCIB 11 085

(1) Die Kultur besteht aus dem Methan-verbrauchenden Mikroorganismus NCIB 11 084, der zusammen mit den Methanol-verbrauchenden Mikroorganismen und den nicht-methylotrophen Mikroorganismen wächst (vgL Patentanspruch unter b)). Der Methan-verbrauchende Organismus NCIB 11084 besitzt eine etwas variable Morphologie und erschein* als kurze Stäbchen oder Kokken-Stäbchen und besitzt eine innere Membranstruktur, die in parallelen Schichten in der Zelle angeordnet ist Dieser Organismus wächst nur schwach, wenn er allein auf Methan ist Aufgrund dieser

Beschreibung scheint der Organismus zu der Art Methylomonas zu gehören.

(2) Der Methanol-verbrauchende Organismus NCIB 11 112 ist charakterisiert durch seine Fähigkeit nur auf Agarplatten, die Methanol als einzige Kohlenstoffquelle

enthalten, zu wachsen und Kolonien zu bilden. In Gegenwart von Glucose, Lactose, Saccharose, Mannit Inosit, Citrat oder Nährstoffagar tritt kein Wachstum ein. Der Organismus ist ungefähr 2 μπι lang und 1 μπι breit mit einer einziger, polaren Geißel. Kolonien auf Agar sind glatt und grau mit einem vollständigen Rand und treten auf Methanol/Mineralsalz-Agarplatten nach zweitätiger Inkubation bei 42°C auf. Aufgrund dieser Beschreibung scheint der Organismus zu der Art Pseudomonas zu gehören.

(3) Andere Arten von Organismen, die weder auf Methan noch Methanol als einziger Kohlenstoffquelle wachsen konnten, wurden aus dem Gemisch isoliert. Diese wurden Standard-Tests unterworfen, um zu bestimmen, zu welcher allgemeinen Art sie gehörten.

jo Die angewandten Versuche sind in Standard-Werken beschrieben, wie in

(a) »Manual for the Identification of Medical Bacteria«, S.T. Cowan und K.J. Steel, Cambridge

" University Press (1966),

(b) »Bergey's Manual of Determinative Bacteriology«, 7. Auflage Williams und Wilkins (1959),

(c) »A. Guide to the Identification of the General of Bacteria«, V.B.D. Skerman, 2. Aufl. Williams und

Wilkins (1967).

Für einige dieser Versuche stehen Alternativ-Verfahren zur Verfügung und weitere Einzelheiten sind unten kurz angegeben, um das tatsächlich angewandte Testverfahren zu beschreiben.

Oxidase-Test — Kovacs, 1956
Indol-Bildung — Kovacs-Reagens, 1928
Voges-Proskauer-Test — Barritt, 1936
Urease-Bildung — Oxoid-Medien,

Christensen-Medium, 1946
Citrat-Verbrauch,

Wachstum auf Simons-Citrat-Schrägen,
bestätigt in Koser's-Brühe.

Die Ergebnisse dieser Versuche sind in Tabellen 1 und 2 angegeben.

(,ο Aus den Ergebnissen dieser Versuche können die folgenden Folgerungen gezogen werden bezüglich der Identität der Organismen.

NCIB 11 062 ist eine Art von Pseudomonas;
NCIB 11 061 ist eine Art von Mycobacterium;
NCIB 11 063 ist eine Art von Pseudomonas, und
NCIB 11 065 ist eine Art von Pseudomonas.

5 6

Tabelle 1

Identifizierung von kein Methan verbrauchenden Bakterien in der gemischten Kultur NCIB 11085 - 1. Versuchsstufe

	NCIB-Nr.
	11062
GRAM-Färbung	—
Form	Stäbchen
Sporen-Bildung	-
beweglich	+ mit Hilfe
	polarer Geißeln
Katalase-Bildung	+
Oxidase- Aktivität	+
Glucose-Verbrauch (Säure)	-
O - F Test (Hugh & Leifson)	-
Säure-resistent	/

11061

11063

11065

Stäbchen

-f mit Hilfe
polarer Geißeln

Oxidativ

Stäbchen

+ mit Hilfe
polarer Geißeln

Oxidativ

nicht Säureresistent

Tabelle 2

Identifizierung der kein Methan verbrauchenden Bakterien in der gemischten Kultur NCIB 11085 - 2. Versuchsstufe

NCIB-Nr.
11062

11061

11063

11065

Urease-Aktivität Citrat-Verbrauch Gelatine-Hydrolyse Indol-Bildung

MR (Methyl-rot) & VP (Voges-Proskauer) Reaktionen

Glucose (Säure-Bildung)

Lactose (Säure)

Saccharose (Säure) Mannit (Säure) Maltose (Säure) Wachstum auf Nährstoff-Agar Katalase-Aktivität

Reduktion von Nitrat schwach

schwach

Die Erfindung wird durch die folgenden Beispiele näher erläutert:

Beispiel 1

Es wurden Kulturen aus Gemischen der folgenden Bakterien

NCIB 11 084 (wächst nur auf Methan) NCIB 11112 (wächst nur auf Methanol) NCIB 11 062

(ein nicht-methylotrophes Bakterium) NCIB 11 061

(ein nicht-methylotrophes Bakterium) NCIBIl 063

(ein nicht-methylotrophes Bakterium) NCIBIl 065 (ein nicht-methyloliophes Baklerium)

in sterilen Glasgefäßen mit einem Volumen von 500 ml 5« auf dem ISM-Medium gezüchtet, durch das ein kontinuierlicher Strom eines Methan/Luft-Gemisches geleitet wurde.

Die Vorrichtung bestand aus einer Reihe von Gefäßen, durch die ein Gemisch von 25% Methan und

V) 75% Luft über ein Sintersol-Filter geleitet wurde. Die öffnungen der Vorrichtung erlaubten ein Beimpfen und eine Probenentnahme.

Die Kolben wurden mit 1,5 ml einer frischen Kullur (24 h alt) von jedem der vier nicht-methylotrophen

wi Organismen beimpft. 4 ml sowohl des Methan-verbrauchenden als auch des Methanol-verbrauchenden Mikroorganismus wurden von 2 bis 3 Tage alten Kulturen zugegeben, die in Schüttelkolben auf ISM-Medium gewachsen waren.

-λ Das Medium in den Gefäßen war 400 ml ISM-Medium, und das Wachstum wurde bestimmt durch Messung der optischen Dichte (OD) bei einer Wellenlänge von 625 nm.

Die Ergebnisse sind in Tabelle 3 angegeben. Diese Ergebnisse zeigen, daß eine gemischte Kultur für das beste Wachstum auf Methan erforderlich ist. Eine gewisse Verbesserung erreicht man durch das Vorhan-Tabelle 3

densein des Methanol-verbrauchenden Organismus, aber für das beste Wachstum sind alle Organismen erforderlich.

Auf Methan nach 3 Tagen erhaltenes Wachstum bei Verwendung verschiedener Kombinationen von Bakterien, die in der Kultur NCIB 11085 vorhanden sind

In dem Inokulum vorhandener Organismus

Wachstum (Einheiten der
optischen Dichte nach
3 Tagen)

NCIB 11084

NCIB 11084,11112

NCIB 11084, 11062, 11061, 11063, 11065

NCIB 11084, 11112, 11062, 11061, 11063, 11065 0,14
0,25
0,27
0,59

Diese Ergebnisse sind der Mittelwert von 3 Versuchen, die jeweils aus zwei oder drei Replikationen bestanden.

Beispiel 2

Die folgenden Versuche waren dazu bestimmt, festzustellen, ob die Komponenten der Kultur NCIB 11 085 durch andere Mikroorganismen mit ähnlichen Eigenschaften ersetzt werden können. Es wurden Kulturen in Glasgefäßen mit durchgeleitetem Gas wie in Beispiel 1 angesetzt, aber in einigen Fällen wurde der Methanol-verbrauchende Organismus aus der Kultur NCIB 11 085 ersetzt durch den Methanol-verbrauchenden Organismus NCIB 11040. Ähnlich wurden die nicht-methylotrophen Komponenten von NCIB 11 081 durch die nicht-methylotrophen Organismen NCIB 11 019,11 020,11 021 und 11 022. Die Ergebnisse dieser Versuche sind in Tabelle 4 angegeben.

Tabelle 4

Zunahme der optischen Dichte (bei 625 nm) von verschiedenen gemischten Kulturen die auf Methan wachsen (Mittelwerte von 2 Versuchen mit jeweils 4 Replicationen pro Kultur)

Kultur	I	Methanol	Methanol	nicht-methyl-	nicht-methyl-	OD bei
■ Methan-	verbrauchender	verbrauchender	otrophe	otrophe	625 nm
M verbrauchender	Organismus	Organismus	Organismen	Organismen	nach 3 Tg.
■ Organismus	(NCIB 11112)	(NCIB 11040)	(NCIB 11062,	(NCIB 11019-
(NCIB 11084)			11061, 11063 u.	11022)
			11065)
	+	-	+	-
+	-	+	+	-
+	-	+	-	+	0,53
+	vorhanden.				0,56
+ = in der Kultur w a^^ rl A^ Br Il If Hr				0,57

Die Unterschiede in den senkrechten Spalten der Tabelle 6 sind nicht wesentlich. Es kann daraus geschlossen werden, daß der Methanol-verbrauchende 'm Organismus NCIB 11 040 anstelle von NCIB 11 112 verwendet werden kann. Ähnlich sind die nicht-methylotrophen Bestandteile austauschbar.

B e i s ρ i e 1 3

Fermentationen unter Anwendung der Kultur NCIB 11 085

Die Kultur wurde kontinuierlich auf einem mineralischen bzw. anorganischen Medium, Methan und Luft fn gezüchtet. Ein Fermentationsgefäß mit einem Arbeitsvolumen von 2,5 ! wurde angewandt. Methan und Luft wurden durch Verteilerplatten in die Flüssigkeit mit einer Geschwindigkeit von 150 ml/min bzw. 450 ml/min geleitet. Die Temperatur des Mediums wurde auf 42° C gehalten und der pH-Wert auf 7,4 durch automatische Zugabe von 2 η NaOH. Das Medium wurde mit einer Geschwindigkeit von 1000 UpM gerührt und der Druck in dem Fermentationsgefäß war nur leicht über Atmosphärendruck.

Das für die kontinuierliche Kultur angewandte als SJ 4 bezeichnete Medium besaß die folgende Zusammensetzung:

KH₂PO₄	1,6 g/l
Na₂HPO₄	1,16 g/I
NaNO₃	3,18 g/l
MgSO< · 7 H₂O	0,107 g/l
FeSO₄ · 7 H₂O	0,009 g/l

CuSO₄	5H₂O	3 g/l
ZnSO₄	7H₂O	0,336 g/I
MnSO₄ ·	4H₂O	0,5 g/l
NaMoO₄	• 2H₂O	0,213 g/l
CoCI₂ · 6	H₂O	0,015 g/l

Diese Ausgangslösung wurde zu dem Rest des Mediums in einer Konzentration von 1 m/l — wie oben erwähnt — zugegeben.

Das Fermentationsgefäß wurde zunächst mit 21 ISM-Medium gefüllt, gerührt, belüftet und — wie oben angegeben — Methan eingeleitet. Es wurde mit 100 ml im Schüttelkolben vollständig gezüchteter Kultur NCIB 11 085 beimpft. Nachdem das Wachstum in dem Fermentationsgefäß begonnen hatte, wurde Medium SJ 4 mit einer Verdünnungsgeschwindigkeit von 0,08 h-¹ eingeleitet. Die Geschwindigkeit wurde in Stufen von 0,02 h-¹ in zweitägigen Intervallen auf 0,22 h-¹ erhöht, ohne daß die Kultur ausgewaschen wurde. Es wurden Gleichgewichtszustände erreicht, bei denen die Konzentration der Biomasse 2,5 bis 6 g/l betrug. Das stellt keineswegs die höchste Biomassen-Konzentration dar, die bei kontinuierlichen Kulturen erhalten wurde. Die Kultur wurde mehr als 3000 h kontinuierlich fortgesetzt. Die Organismen wurden gewonnen und der Analyse unterworfen. Die Ergebnisse dieser Analyse sind in den folgenden Beispielen angegeben.

Bei irgendeinem Gleichgewichtszustand eines bestimmten Verdünnungsgrads bei der kontinuierlichen Kultur ändert sich der Anteil einer einzelnen Bakterienart an der Gesamtbakterienmenge nicht. Die Kultur war auch sehr beständig gegen Infektion durch fremde Mikroorganismen, so daß keine Verunreinigung nachgewiesen werden konnte, selbst wenn die Kultur vorsätzlich mit fremden Organismen infiziert wurde.

Beispiel 4

Es wurde eine gemischte Kultur von Methan-verbrauchenden Bakterien in einer kontinuierlichen Kultur in einem 300-1-Fermentationsgefäß unter Bedingungen gezüchtet, die im wesentlichen den für die Fermentation im kleinen Maßstab angegebenen entsprachen. Die Zeilen wurden durch Zentrifugieren gewonnen und sprühgetrocknet. Es wurde ein freifließendes farbloses geruchloses Pulver (SCP) erhalten, das aus trocknen BakterienzeLlen bestand. Es besaß einen Proteingeha'lt von e. 78% (berechnet als N χ 6,25). Die Nährstoffqualität des Pulvers wurde wie folgt in Fütterungsversuchen bei Ratten untersucht

Ca(NO₃)₂ · 4 H₂O 0,06 g/l

Spurenelemente-Lösung 1 ml/1

Konz. Schwefelsäure 0,33 ml/l

dest. Wasser auf 1 I

Die zur Herstellung des Mediums angewandte Spurenelemente-Lösung besaß die folgende Zusammensetzung:

SCP wurde eben abgesetzten Ratten in 10 Tage langen Versuchen verabreicht, wobei das SCP die einzige Proteinquelle der Nahrung bildete. Bei jedem Versuch wurde eine Vergleichsnahrung, die Casein als , einzige Proteinquelle enthielt, verabreicht. HeringsmehT, eine der reichsten Formen von tierischem Nahrungszusatz wurde ebenfalls zum Vergleich an Ratten verfüttert. Der rohe Proteingehalt (N χ 6,25) in jeder Nahrung betrug 10%, aber alle anderen Nährstoffe wurden in Mengen, wie sie für das optimale Wachstum erforderlich sind, verabreicht. Die Ergebnisse der Fütterungsversuche sind in Tabelle 5 angegeben.

Tabelle 5

Nahrungsbestandteil

Wirksame
Nahrungsumwandlung

Wirksames
Proteinverhältnis

Casein	0,243	(2,50)
SCP	0,256	2,59
Heringsmehl	0,233	2,2

Aus Tabelle 5 geht hervor, daß SCP, das aus einer gemischten Bakterienkultur gebildet worden ist, die auf Methan gewachsen ist, eine gute Form von Protein darstellt. Es ist sogar besser als Fischmehl als Nahrungsbestandteil für Tiernahrung.

Das Aminosäurespektrum des SCP wurde analysiert und die Ergebnisse sind in Tabelle 6 angegeben. Diese Ergebnisse zeigen, daß das Aminosäuregleichgewicht so ist, daß SCP sehr geeignet ist als Protein zur Tiernahrung.

Tabelle 6

Aminosäure

% des rohen Proteins

Aspartinsäure	8,48
Threonin	4,00
Serin	3,30
Glutaminsäure	9,96
45 Prolin	4,18
Glycin	4,63
Alanin	6,16
Valin	5,91
Cystin (1/2)	0,31
so Methionin	2,78
Isoleucin	4,50
Leucin	7,02
Tyrosin	3,51
Phenylalanin	4,37
55 Ammoniak	2,09
Ornithin	0,16
Lysin	5,43
Histidin	2,00
Arginin	5,84

Claims

Patentanspruch:

Verfahren zum Züchten von Mikroorganismen in einem wäßrigen Wachstumsmedium und Trocknen der Biomasse, dadurch gekennzeichnet, daß man dabei

a) den methanverbrauchenden Stamm Methylomonas NCIB 11 084 in Gegenwart des methanolverbrauchenden Stammes NCIB 11 112, Hyphomicrobium NCIB 11040, Pseudomonas extorquens NCIB 10 508, NCIB 10 509, NCIB 10 510, NCIB 10 511, NCIB 10 512, NCIB 10 513, NCIB 10 514, NCIB 10 515, Pseudomonas methylotropha NCIB 10 592, NCIB 10 593, NClB 10 594, NCIB 10 595 und/oder NCIB

10 596 und in Gegenwart des nicht-methylotrophen Stammes Mycobacterium NCIB 11061, Pseudomonas NCIB 11 062, NCIB 11 063, NCIB

11 065, NCJB 11019, NCiB 11 022, Actionbacter NCIB 11 020 und/oder Curtobacterium NCIB 11 021 oder

b) die Mischkultur NCIB 11085, bestehend aus dem methanverbrauchenden Stamm Methylomonas NCIB 11 084, dem methanolverbrauchenden Stamm NCIB 11 112 und dem nichtmethylotrophen Stämmen Mycobacterium NCIB 11 061, Pseudomonas NCIB 11 062, NCIB 11 063 und NCIB 11 065,