DE2324386C2 - Wäßriger Cholestrin-Standard - Google Patents

Wäßriger Cholestrin-Standard

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DE2324386C2 DE2324386A DE2324386A DE2324386C2 DE 2324386 C2 DE2324386 C2 DE 2324386C2 DE 2324386 A DE2324386 A DE 2324386A DE 2324386 A DE2324386 A DE 2324386A DE 2324386 C2 DE2324386 C2 DE 2324386C2
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Description

gleichen Bedingungen keinerlei Änderung des Cholesteringehaltes feststellen. In der besonders bevorzugten Ausführungsform ergab sich auch nach 2jähriger Lagerungsdauer noch völlige Stabilität.
Die folgenden Beispiele erläutern den erfindungsgemäßen Cholesterin-Standard weiter.
Beispiel 1
40 g Cholesterin (umkristallisiert) werden in 11 Oxypolyäthoxydodecan unter Erwärmen in einem Wasserbad von 400C gelöst. Diese Lösung wird mit 400C warmem bidestilliertem Wasser verdünnt, dann werden 100 ml einer 10%igen wäßrigen Alkyldimethylbenzylammoniumchloridlösung und 11 Äthanol dazugegeben, und nach Abkühlen auf Raumtemperatur wird auf genau 10 1 mit bidestilliertem Wasser aufgefüllt.
Beispiel 2
40 g Cholesterin _ werden in 11 Oxypolyäthoxydodecan und 11 Äthanol gelöst und danach mit 0,9 %iger Natriumchloridlösung auf 101 aufgefüllt.
Beispiel 3
40 g Cholesterin werden in 11 Oxypolyäthoxydodecan, 11 n-Butanol, 100 ml einer 10 %igen wäßrigen Alkyldimethylbenzylammoniumchloridlösung und 100 ml Tetramethyl-Harnstoff gelöst und mit bidestilliertem Wasser auf 101 aufgefüllt.
Beispiel 4
40 g Cholesterin werden in 61 Diäthylenglykolmonobutyläther gelöst, 0,5 1 Äthanol dazugegeben und auf 101 mit bidestUliertem Wasser aufgefüllt.

Claims (3)

kennzeichnet ist durch einen Gehalt von 1 bis 20 Vo- Patentansprüche: lumprozent eines primären oder sekundären aliphatischen Alkohols mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen zu-
1. Wäßrige Cholesterin-Standard-Lösung, ge- sammen mit 5 bis 20Volumprozent Oxypolyäthoxykennzeichnet durch einen Gehalt von 5 dodecan oder 40 bis 60Volumprozent Diäthylen-1 bis 20 Volumprozent eines primären oder sekun- glykolmonobutyläther, 0,5 bis 5 Gewichtsprozent NaCl dären aliphatischen Alkohols mit 1 bis 4 Kohlen- oder/und 0.01 bis 0,5 Gewichtsprozent Alkyldimethylstoffatomen zusammen mit 5 bis 20 Volumprozent benzylammoniurnchlorid mit 8 bis 18 Koh'enstoff-Oxypolyäthoxydodecan oder 40 bis 60 Volum- atomen in der Alkylgruppe.
prozent Diäthylenglykolmonobutyläther, 0,5 bis io Die Erfindung beruht auf der überraschenden Fest-
5 Gewichtsprozent NaCl oder/und 0,01 bis 0,5 Ge- stellung, daß eine Lösung von Cholesterin in ver-
wichtsprozentAlkyldimethylbenzylammoniumchlo- dünntem wäßrigen Alkohol, die als Lösungsvermittler
rid mit 8 bis 18 Kohlenstoffatomen in der Alkyl- die angegebene Menge Oxypolyäthoxydodecan oder
gruppe. Diäthylenglykolmonobutyläther und als Stabilisie-
2. Cholesterin-Standard-Lösung nach Anspruch 1, 15 rungsmittel entweder NaCl oder Alkyldimethylbenzylgekennzeichnet durch einen zusätzlichen Gehalt ammoniumchlorid enthält, hervorragend stabil ist und von 0,5 bis 5% Tetramethylharnstoff. sich selbst bei jahrelanger Lagerung unter Normal-
3. Cholesterin-Standard-Lösung nach Anspruch 1 bedingungen hinsichtlich des Cholesterin-Gehaites oder 2, gekennzeichnet durch einen Gehalt von nicht verändert.
0,05 bis 2 % Alkaliazid und einen pH-Wert zwischen ao Bevorzugt wird im Rahmen der erfindungsgemäßen
6,5 und 8. Cholesterin-Standard-Lösung die Kombination des
verdünnten Alkohols mit Oxypolyäthoxydodecan und
NaCl. In dieser bevorzugten Zusammensetzung werden die besten Ergebnisse bei einem Gehalt von 8 bis 35 12 Volumprozent Alkohol wie Äthanol, Isopropanol oder n-Butanol und 0,8 bis 1,0 Gewichtsprozent NaCl
Gegenstand der Erfindung ist ein Cholesterin-Stan- erzielt. Wird an Stelle von NaCl Alkyldimethylbenzyl-
dard in Form einer wäßrigen Cholesterin-Lösung mit ammoniumchlorid verwendet, so beträgt ^ie bevor-
bestimmtem und stabilem Gehalt an Cholesterin. zugte Menge 0,05 bis 0,15 Gewichtsprozent.
Es ist eine Reihe von chemischen und enzymatiachen 30 Alternativ besteht eine bevorzugte Cholesterin-
Verfahren zur quantitativen Bestimmung des Cho- Standard-Lösung aus 8 bis 12 Volumprozent Alkohol,
lesterins in verschiedenen Materialien, insbesondere in 55 bis 60 Volumprozent Diäthylenglykolmonobutyl-
biologischen Flüssigkeiten, bekannt bzw. vorgeschla- äther und 0,05 bis 0,15 Gewichtsprozent Alkyl-
gen worden. Bei diesen Verfahren ist es fast stets er- dimethylbenzylammoniumchlorid.
Forderlich, zur Auswertung der Meßergebnisse Cho- 35 Gemäß einer weiteren bevorzugten Ausführungs-
lesterinlösungen mit bestimmtem, bekanntem Gehalt form enihält die erfindungsgemäße Standard-Lösung
βη Cholesterin als Standard in die Messung einzu- zusätzlich eine kleine Menge Tetraniethylharnstoff. Die
beziehen. Man verwendet zu diesem Zweck Choleste- Menge kann 0,5 bis 5 Volumprozent, vorzugsweise 0,8
rin-Lösungen mit definiertem Cholesteringehalt, die bis 1,5 Volumprozent, betragen,
als Cholesterin-Standard bezeichnet werden. Bei den *o Je nach den zu erwartenden Lagerungsbedingungen
bisher bekannten Standards wird Cholesterin in Eis- kann es darüber hinaus zweckmäßig sein, zur Ver-
essig, Chloroform, absolutem Alkohol o. ä. gelöst. Die hinderung eines Bakterienbefalles Alkaliazid zuzu-
SO erhaltene wasserfreie Standard-Lösung gibt jedoch setzen, wobei in diesem Falle durch Zusatz eines ge-
bei der Cholesterin-Bestimmung mit dem Färb- eigneten Puffers ein pH-Wert über 6,5 eingestellt wer-
reagenz nach Liebermann — Burchard eine 45 den muß. Zweckmäßig wird in diesem Falle 0,05 bis
zum Serum unterschiedliche Farbintensität und führt 0,2 %, vorzugsweise 0,1 %, Natriumazid in einem
Ku falschen Cholesterin-Werten im Serum (L. V a s s, Puffer pH 7 bis 8, beispielsweise Triäthanolamin-
Schweiz. med. Wschr., 102, 914 [1972]). puffer, eingesetzt.
Dieser Nachteil kann durch die Verwendung einer Die erfindungsgemäße Cholesterin-Standard-Lösung wäßrigen Cholesterin-Standard-Lösung behoben wer- 50 enthält bis zu 400 mg Cholesterin in 100 ml des Loden. Die bekannten wäßrigen Cholesterin-Standard- sungsmittelgemisches. Die außergewöhnliche Halt-Lösungen, welche Oxypolyäthoxydodecan als Lö- barkeit der Lösungen erfordert weder Lichtausschluß sungsvermittler enthalten, weisen aber wiederum in· noch Sauerstoffausschluß. Dies ist um so übersofern einen schwerwiegenden Nachteil auf, als sich raschender, als bekanntlich Cholesterin sogar in ihr Cholesteringehalt rasch verändert und bereits 55 festem Zustand unter Inertgas und Lichtausschluß aufinnerhalb von einigen Tagen merklich absinkt. Da es bewahrt werden muß. Die Stabilisierung beruht dabei bei einem Cholesterin-Standard jedoch vor allem auf offensichtlich auf dem Zusammenwirken der verschieeinen absolut konstanten Cholesterin-Gehalt an- denen Bestandteile der erfindungsgemäßen Standardkommt, war man bisher gezwungen, die wäßrige Lösung, da mit den Einzelkomponenten allein keiner-Cholesterin-Standard-Lösung jeweils vor Gebrauch 60 lei Stabilisierung erzielbar ist. Beispielsweise enthält frisch herzustellen, was einen beträchtlichen Nachteil eine Lösung, die ursprünglich 400 mg Cholesterin in darstellt und überdies die Zuverlässigkeit der Cho- 100 ml einer Mischung von 10 Volumprozent Oxylesterin-Bestimmung in Frage stellt. polyäthoxydodecan und 90 Volumprozent Wasser
Aufgabe der Erfindung ist die Beseitigung dieser enthielt, nach 3wöchiger Lagerung bei 33°C nur noch
Nachteile und die Schaffung eines stabilen wäßrigen 65 80% des ursprünglichen vorhandenen Cholesterins.
Cholesterin-Standards. Demgegenüber läßt sich bei der erfindungsgemäßen
Gelöst wird diese Aufgabe erfindungsgemäß durch Standard-Lösung in ihren verschiedenen Ausführungseine wäßrige Cholesterin-Standard-Lösung, die ge- formen auch nach 3monatiger Lagerung unter den
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