DE2003652B2 - Biotechnisches Verfahren zur Herstellung von Cellulase - Google Patents
Biotechnisches Verfahren zur Herstellung von CellulaseInfo
- Publication number
- DE2003652B2 DE2003652B2 DE2003652A DE2003652A DE2003652B2 DE 2003652 B2 DE2003652 B2 DE 2003652B2 DE 2003652 A DE2003652 A DE 2003652A DE 2003652 A DE2003652 A DE 2003652A DE 2003652 B2 DE2003652 B2 DE 2003652B2
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- atcc
- cellulase
- activity
- nutrient medium
- cmc
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
- C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
- C12N9/2405—Glucanases
- C12N9/2434—Glucanases acting on beta-1,4-glucosidic bonds
- C12N9/2437—Cellulases (3.2.1.4; 3.2.1.74; 3.2.1.91; 3.2.1.150)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
- C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
- C12Y302/01004—Cellulase (3.2.1.4), i.e. endo-1,4-beta-glucanase
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/911—Microorganisms using fungi
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/911—Microorganisms using fungi
- Y10S435/913—Aspergillus
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/911—Microorganisms using fungi
- Y10S435/945—Trichoderma
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstel- nicht aus einem einzigen Enzym, sondern ais einem
lung von Cellulase durch aerobes Züchten eines Ma- Komplex verschiedener Enzyme besteht. Nach
kroorganismus in einem hierfür geeigneten Nährme- Reeds (E. T. Reeds: Applied Microbiology, 1956,
dium bei hierfür üblichen Temperatur- und pH-Wen- Bd. 4, S. 39) kann das durch folgende Gleichung ge-
Verhälinissen. Man hat behauptet, daß Cellulase 15 zeigt werden:
Natürl. Celluose -^A'^?.™ + u-Glucan (gebunden in ß-1, 4-Stellung)
Cellobiose Cellobiase,
/i-GIukosidase
/i-GIukosidase
Glukose
Das Cj-Enzym der Cellulose ist jedoch das praktisch
allein wirksame, so daß man sie zur teilweisen Zersetzung der Cellulosestruktur verwendet. So wird
Cellulase beispielsweise eingesetzt, um die Oberfläche bzw. Umhüllung von Bohnen und Getreidekörnern,
die als Futtermittel verwendet werden, zu zerstören, um die Verdaulichkeit zu verbessern, oder auch um
Stärke aus Sojabohnen oder Mais extrahieren zu können. Je höher die ^-Aktivität der Cellulase ist,
um so bessei ist sie für die genannten Zwecke geeignet.
Für die Herstellung von Cellulase nach dem eingangs genannten Verfahren ist der Einsatz folgender
Mikroorganismen bekannt: Fomitopsis (Fomes) annosa (vgl. »Chemical Abstracts«, Vol. 66, 1967,
Ref. 9937 v); Fomitopsis (Fomes) pinicola (vgl. »Chemical Abstracts«, Vol.66, 1967, Ref. 9938c);
Oxyporus populinus (Schum. ex Fr.) Donk (vgl. deutsche Auslegeschrift 1243618); Trichoderma
viride (vgl. deutsche Auslegeschrift 1233 358); Aspergillus niger TPR-3801 (vgl. schweizerische Patentschrift
444 097); Trametes sanguinea ATCC 14622 und Trametes cinnabaüna ATCC 14623 (vgl.
britische Patentschrift 1 084 265); Trichoderma viride ATCC 16325 und Penicillium variable ATCC 16340
(vgl. USA.-Patentschrift 3 398 055); Trametes suaveolens (vgl. USA.-Patentschrift 3 310 476); Trichoderma
koningii IMI 73 022 (vgl. »Biochemical Journal«, Vol. 109,1968, S. 217 bis 227).
Demgegenüber besteht die Erfindung in einem Verfahren zur Herstellung von Cellulase der eingangs
genannten Art, welches dadurch gekennzeichnet ist, daß man als Mikroorganismus Lampteromyces
japonicus ATCC 20 195 einsetzt.
Dieser Stamm kann in einem festen oder flüssigen Nährmedium gezüchtet werden, letzteres ist jedoch
vorzuziehen. In dem Nährmedium können als C-Quelle Saccharose, Glukose, Maltose, Laktose,
Stärke, Dextrin, Melasse, Cellulosepulver, aufsaugende Baumwolle u. dgl. sowie als N-Quelle anorganische
und organische stickstoffhaltige Materialien, wie Ammoniumsalze, Nitrate, Peptone, Fleischextrakt,
Maisquellflüssigkeit, Sojabohneneiweiß, Weizenmehl, Hefezellen, lösliche Destillate, Harnstoff u. dgl. verwendet
werden. Falls erwünscht, können auch anorganische Substanzen und Metallsalze, wie Phosphate,
Kaliumsalze, Magnesiumsalze, Eisensalze, Zinksalze u. dgl. verwendet werden. Ferner können
Vitamine, wachstumsfördernde Faktoren u. dgl. zugesetzt werden. Vorzugsweise beträgt die Zuchttemperatur
20 bis 35° C und liegt derpH-Wert desNährmediums zwischen 4 und 7. Die Anhäufung an Cellulase
erreicht ihr Maximum nach fünf- bis zehntägigem Züchten. Die beim Züchten erhaltene Cellulase
kann gewonnen werden durch Zufügen von 50 bis 65 Volumprozent eines organischen Lösungsmittels,
wie Aceton, Alkohol od. dgl., oder 40 bis 70 Volumprozent eines Fällungsmittels, wie Ammoniumsulfat,
Calciumchlorid od. dgl., und zwar im Falle der Züchtung auf einem festen Nährmsdium zu einem wäßrigen
Extrakt der Kultur und im Falle der Flüssigkeitszüchtung zu einem Filtrat der Zuchtbrühe. Das
Konzentrat kann leicht durch bekannte Methoden, wie Adsorption an einem Ionenaustauscherharz und
Eluierung, gereinigt werden. Die auf diese Weise gewonnene Cellulase ist im Wasser löslich und hat nicht
nur eine starke Cj-Aktivität, sondern auch eine starke CMC-ase-Aktivität. Ferner ist das pH-Optimum
niedriger als das irgendeiner der bekannten Cellulasen. Die günstigste Temperatur für die Cellulase-Aktivität
ist 40 bis 50° C.
Im folgenden werden die Erfindung und der durch sie erzielte Fortschritt weiter erläutert, wobei die angegebenen
Werte für die ^-Aktivität und die CMC-ase-Aktivität auf nachfolgende Weise bestimmt
wurden:
Zur Bestimmung der Cj-Aktivität wurden zwei Filterpapiere von je 1 · 1 cm bei einer Temperatur
von 40° C mit einer Mischung aus 1 ml der Enzymlösung, deren Cj-Aktivität zu bestimmen war, und
aus 4 ml einer Zitronensäure-Pufferlösung, deren pH auf ein für das jeweilige Enzym optimalen Wert eingestellt
wurde, zur Reaktion gebracht. Die C1-AkU-vität
ist die Zeit, innerhalb der die Filterpapiere vollständig zersetzt werden.
Die CMC-ase-Aktivität wurde entweder durch Ermittlung der Aktivität infolge Verflüssigung von
CMC-Gel oder durch Ermittlung der CMC-Zersetzungsaktivität (Cx-Aktivität) bestimmt. Zur Bestimmung
der Aktivität infolge Verflüssigung von CMC-
Gel wurden in ein Teströhrchen etwa 10 ml eines CNiC-GeIs eingebracht, welches aus einer 4%
Na-CMC enthaltenden Zitronensäure-Pufferlösung bestand, deren pH auf ein für das jeweilige Eiuym
optimalen Wert eingestellt wurde. Die Abmessungen des Teströhrchens waren so gewählt, daß das CMC-Gel
eine Säule von 58 mm Höhe bildete. Auf die CMC-GeMuIe wurde 1 ml der zu untersuchenden
Enzymlösung aufgegeben, worauf man die Enzymlösung bei 30° C 24 Stunden lang mit dem CMC-Gel
reagieren ließ. Die CMC-ase-Aktivität ist in diesem Fall die Länge der verflüssigten CMC-Gelschicht.
Zur Bestimmung der CA.-Aktivität wurden 4 ml einer 0,62% Na-CMC enthaltenden Zitronensäure-Pufferlösung,
deren pH auf ein für das jeweilige Enzym optimalen Wert eingestellt wurde, und 1 ml der zu
untersuchenden Enzymlösung bei 45° C für 1 Stunde miteinander zur Reaktion gebracht. Die Menge des
dabei gebildeten Zuckers (Glukose), welche nach der sogenannten Nelson-Somogi-Methode (vgl. »J. Biol.
Chem.«, Vol. 160/1945, S. 61 bis 68 sowie Vol. 195/ 1952, S. 19 bis 23) ermittelt wurde, ist ein Maß für
die Cv-Aktivität.
Der durch das erfindungsgemäße Verfahren gegenüber den aus der schweizerischen Patentschrift
444 097 und USA.-Patentschrift 3 310 476 bekannten Verfahren erreichte Vorteil besteht darin, daß beim
erfindungsgemäßen Verfahren die Gewinnung der Cellulase durch Ausfällung aus der nitrierten Gärbrühe
möglich ist, während bei den beiden obengenannten bekannten Verfahren die Cellulase erst nach
Extraktion aus den Zellen ausgefällt werden kann.
Gemäß Beispiel 3 der deutschen Auslegeschrift 1 243 618 werden 500 mg Filterpapier durch das auf
das Fünffache des ursprünglichen Volumens konzentrierte Kulturfiltrat von Oxyporus populinus (Schum.
ex Fr) Donk in 48 Stunden nur zu 41,4"/O abgebaut, während das Kulturfiltrat des Lampteromyces japonicus
ATCC 20 195 gemäß dem vorliegenden Beispie! ohne Konzentrierung das eingesetzte Filterpapier bereits
in nur 105 Minuten vollständig löst. Obgleich zwar die eingesetzten Filterpapiere nicht identisch
sein dürften, so spricht doch die obige Gegenüberstellung deutlich zugunsten des erfindungsgemäßen
Verfahrens.
30 ml eines Nährmediums aus 2%> Saccharose, 1 % Cellulosepulver, 3 % löslichen Destillaten, 0,3 %
Hefeextrakt, 0,5% KH2PO4 und 0,05% MgSO4 ■
7 H2O wurden auf ein pH von 5,5 eingestellt, in einen 250-ml-Kolben eingefüllt und sterilisiert. Teile dieses
Nährmediums wurden getrennt mit Lampteromyces japonicus ATCC 20 195, Fomitopsis annosa ATCC
20 194 und Fomitopsis pinicola ATCC 20 036 beimpft. Danach wurde 7 Tage lang unter Schütteln bei
30° C gezüchtet. Die ^-Aktivitäten (in Minuten) und die durch Verflüssigung von CMC-Gel bestimmten
CMC-ase-Aktivitäten (in mm) pro ml der filtrierten Zuchtbrühen sind in der folgenden Übersicht angegeben:
C1 | CMC-ase | |
ATCC 20 195 | 105 | 50 |
ATCC 20 194 | 180 | 35 |
ATCC 20 036 | 180 | 50 |
Diese Ergebnisse zeigen unmittelbar, daß die erfindungsgemäß
hergestellte Cellulase besser ist als die Cellulase, welche nach »Chemical Abstracts«, Vol. 66,
1967, Ref. 9937 ν und 9938 c, gewonnen werden ':aun, wo der Einsatz eines beliebigen Stammes von
Fomitopsis (Fomes) annosa und Fomitopsis (Fomes) pinicola zum Erfolg führen soll.
ίο Weizenkleie, Reiskleie, Sojabohnenmehl und lösliche
Destillate wurden im Verhältnis 10:1:1:1 vermischt, gut mit Wasser angefeuchtet und sterilisiert,
um ein festes Nährmedium zu erhalten, welches mit dem zuvor in flüssigem Medium gezüchteten
t5 Lampteromyces japonicus ATCC 20195 beimpft und
dann 10 Tage lang bei 25° C gezüchtet wurde. Nach dem Züchten wurde das Kulturmedium fein zerteilt
und 2 Stunden lang bei Zimmertemperatur mit der fünffachen Volumenraeuge Wasser extrahiert. Die
ao Cj-Aktivität betrug pro ml des Extraktes 150 Minuten.
3000 ml eines Nährmediums aus 2% Saccharose, 1 % Sojabohnenmehl, 3 % löslichen Destillaten, 0,3 %
Hefeextrakt, 0,5 % KH2PO4 und 0,05 % MgSO4 · 7 H2O
wurden auf ein pH von 5,5 eingestellt. Das Nährmedium wurde mit Lampteromyces japonicus ATCC
20 195 beimpft. Danach wurde 5 Tage lang unter Rühren aerob bei 30° C gezüchtet. Das Filtrat der
Gärbrühe wurde auf 0° C abgekühlt, worauf 65 Volumprozent Aceton zugefügt wurde, welches vorher
auf —20° C heruntergekühlt worden war. Der erhaltene Niederschlag wurde mit Äther gewaschen und
im Vakuum getrocknet; es ergaben sich 27 g eines kräftigbraunen Pulvers. Die C.-Aktivität betrug pro g
des Pulvers 95 Minuten.
Vergleichsversuch I
Jeweils 30 ml eines auf ein pH von 4,5 eingestellten Nährmediums I aus 2 % Saccharose, 1 % Sojabohnenmehl,
3% löslichen Destillaten, 0,3% Hefeextrakt, 0,1% KH2PO4, 0,02% MgSO4-7H2O und
eines Nährmediums II, wie es im Beispiel 1 der deutsehen Auslegeschrift 1 233 358 angegeben ist, wurden
jeweils getrennt in einen Erlenmeyerkolben eingegeben und sterilisiert. Jedes der beiden Nährmedien
wurde jeweils getrennt mit Lampteromyces japonicus ATCC 20 195 und Trichoderma viride ATCC 16 325
geimpft. Anschließend erfolgte fünftägige Züchtung bei 30° C in einem Drehschüttler (250 U/min). Nach
der Züchtung wurden die mikrowellen Teile aus der Zuchtbrühe abgefiltert. Die Cj-Aktivität pro ml des
jeweiligen Filtrats ist in der nachfolgenden Übersicht in Minuten wiedergegeben, während das Symbol +
einen 25prozentigen Zerfall nach 5 Stunden Reaktionszeit angibt:
60 | ATCC 20 195 | I | TI |
ATCC 16 325 | 90 + |
+ 110 |
6s Das Ergebnis dieses Vergleichsversuches zeigt die
Überlegenheit des erfindungsgemäßen Verfahrens gegenüber dem aus der deutschen Auslegeschrift
1 233 358 (Beispiel 1) bekannten Verfahren.
Vergleichsversuch II
Nährmedien und Mikroorganismen der nachstehend aufgeführten Art wurden in der Weise verwendet,
daß 30 ml jedes Nährmediums auf ein für den eingeimpften Stamm geeignetes pH eingestellt, das Nährmedium
dann in einen 250 ml Erlenmeyerkolben eingebracht und sterilisiert, der Stamm eingeimpft und
anschließend durch Schütteln mittels eines Drehschüttlers (250 U/min) bei 28° C gezüchtet wurde.
Verwendete Mikroorganismen: Lampteromyces japonicus ATCC 20 195, Trametes sangiunea ATCC
14 622, Trametes cinnabarina ATCC 14 623. Trichoderma
viride ATCC 16 325, Penicillium variable ATCC 16340, Trichoderma koningii IMT 73022.
Verwendete Nährmedien: Nährmedium A gemäß dem vorstehenden Beispiel 1, bestehend aus 2 0Z0 Saccharose,
1 «/o Sojabohnenmehl, 3 % lösliche Destillate, 0,3Vo Hefeextrakt, 0,]% ΚΗ.,ΡΟ., 0,02 V» MgSO, ·
7H,O.
Nährmedium B gemäß britische Patentschrift 1 084 265, Beispiel 1, bestehend aus 4 0Zo Saccharose,
2°/o Glukose, 3Vo Sojabohnenmehl, 1% Maiswasser, 0,2Vo (NH4).,SO4, 0,2 Vo KR1PO4, 0,1Vo MgSO4-7
H2O, 0,05 Vo CuSO4 · 5 H2O. "
Nährmedium C in etwa gemäß USA.-Patentschrift 3 398 055, bestehend aus 0,1 Vo Laktose, 1 Vo kristalline
Cellulose, 1,5% Maishülsen, 0,03Vo Harnstoff (getrennt sterilisiert), 0,4% (NHJ0HPO., 0,1%
KH2PO4, 0,03 Vo MgSO4 · 7 H2O.
D~er pH-Wert des Nährmediums wurde für ATCC 20 195 auf 4,5, für ATCC 14 622 und ATCC 14 623
auf 6,0, für ATCC 16 325, ATCC 16 340 und IMT 73 022 auf 5,0 eingestellt.
Nach einer Zuchtdauer von 3,4 bzw. 5 Tagen wurden die mikrowellen Teile durch Filtration von der
Zuchtbrühe abgetrennt. Für jedes der so erhaltenen Filtrate wurde dann die C?-Aktivität und die Cx-Aktivität
bestimmt, letztere jeweils unter Verwendung von 1 ml des um das Zehnfache verdünnten Filtrats.
In Tabelle 1 sind die pH-Werte der Reaktionslösungen angegeben. Tabelle 2 gibt die CrAktivitäten wieder,
wobei die Zahlenwerte die Zeit in Minuten, in welcher die Filterpapiere zersetzt wurden, und bei
unvollständiger Zersetzung die Symbole +, + +, + + + angeben, ob die Filterpapiere nach jeweils
fünfstündiger Reaktion zu 1Ai bzw. xn bzw. 3A zersetzt
waren. Tabelle 3 gibt die Ergebnisse für die Cx-Aktivitäten
wieder. Die Werte der Tabellen 2 und 3 geben jeweils den günstigsten Wert wieder, der für
einen Mikroorganismus aus den nach 3,4 oder 5 Tagen gezüchteten Zuchtbrühen gewonnen wurde.
Tabelle 1
pH-Wert der Reaktionslösungen
pH-Wert der Reaktionslösungen
C1 | 3,0 4,5 4,5 5,0 |
|
ATCC ^O 195 | 2,5 4,0 4,0 5,0 |
5,0 5,0 |
ATCC 14 622 | 5,0 5,0 |
|
ATCC 14 623 | ||
ATCC 16 325 | ||
ATCC 16 340 | ||
IMI 73 022 |
Tabelle 2
C,-Aktivität
C,-Aktivität
Nährmedium | A | 90 | B | C |
ATCC 20 195 | + + + | 240 | + + + | |
ATCC 14 622 | + + | 120 | ||
ATCC 14 623 | + | 130 | ||
ATCC 16 325 | -f- | -j- 4 | 180 | |
ATCC 16 340 | -t- | -I- -f | ||
IMI 73 022 | + + | + + |
Tabelle 3
Cx-Aktivität
Cx-Aktivität
Nährmedium | A | B | C | |
ATCC | 20 195 . | 1060 | 210 | 1200 |
ATCC | 14 622 | 800 | 2600 | 2450 |
ATCC | 14 623 | 1270 | 1100 | 4120 |
ATCC | 16 325 . | 200 | 110 | 2165 |
ATCC | 16 340 . | 350 | 230 | 500 |
IMI 73 | 022 | 150 | 140 | 125 |
Wie die vorstehend genannten Ergebnisse zeigen, ist das erfindungsgemäße Verfahren den aus der britischen
Patentschrift 1 084 265, USA.-Patentschrift 3 398 055 sowie aus »Biochemical Journal«, Vol. 109,
1968, S. 217 bis 227, bekannten Verfahren weit überlegen,
da die durch Verwendung von Lampteromyces japonicus ATCC 20 195 erhaltene Cellulase die
stärkste Cj-Aktivität besitzt.
Claims (1)
- Patentanspruch:Verfahren zur Herstellung von Cellulase durcli aerobes Züchten eines Mikroorganismus in einem hierfür geeigneten Nährmediuin bei hierfür üblichen Temperatur- und pH-Wert-Verhältnissen, dadurch gekennzeichnet, daß man als Mikroorganismus Lampteromyces japonicus ATCC 20 195 einsetzt.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP727569 | 1969-02-03 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE2003652A1 DE2003652A1 (de) | 1970-07-30 |
DE2003652B2 true DE2003652B2 (de) | 1974-01-24 |
DE2003652C3 DE2003652C3 (de) | 1974-08-15 |
Family
ID=11661460
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE2003652A Expired DE2003652C3 (de) | 1969-02-03 | 1970-01-28 | Biotechnisches Verfahren zur Herstellung von CelluJase |
Country Status (4)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US3677899A (de) |
DE (1) | DE2003652C3 (de) |
FR (1) | FR2037059A1 (de) |
GB (1) | GB1278195A (de) |
Families Citing this family (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4165411A (en) * | 1975-06-18 | 1979-08-21 | W. R. Grace & Co. | Flame retardant urethane and method |
US4628029A (en) * | 1983-08-25 | 1986-12-09 | Parsons & Whittemore, Inc. | Method for the conversion of a cellulosic substrate to glucose using Microbispora bispora, strain Rutgers P&W |
JPH0220292A (ja) * | 1988-07-06 | 1990-01-23 | Agency Of Ind Science & Technol | 低分子化キトサンの製造方法 |
US5110735A (en) | 1989-09-26 | 1992-05-05 | Midwest Research Institute | Thermostable purified endoglucanase from thermophilic bacterium acidothermus cellulolyticus |
JP4231358B2 (ja) * | 2003-07-25 | 2009-02-25 | 株式会社エス・ディー・エス バイオテック | 木材の腐朽診断方法及びこの方法に用いる木材の腐朽診断薬 |
CN109440478A (zh) * | 2018-09-20 | 2019-03-08 | 武汉爱帝针纺实业有限公司 | 一种改善聚酯纤维吸湿性的工艺 |
CN109837263A (zh) * | 2019-03-20 | 2019-06-04 | 南京康之春生物科技有限公司 | 用于产纤维素酶的混合菌剂的培养基及其制备方法 |
-
1970
- 1970-01-21 US US4733A patent/US3677899A/en not_active Expired - Lifetime
- 1970-01-28 DE DE2003652A patent/DE2003652C3/de not_active Expired
- 1970-02-02 FR FR7003496A patent/FR2037059A1/fr not_active Withdrawn
- 1970-02-03 GB GB5166/70A patent/GB1278195A/en not_active Expired
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
FR2037059A1 (de) | 1970-12-31 |
DE2003652C3 (de) | 1974-08-15 |
GB1278195A (en) | 1972-06-14 |
US3677899A (en) | 1972-07-18 |
DE2003652A1 (de) | 1970-07-30 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DE2003652C3 (de) | Biotechnisches Verfahren zur Herstellung von CelluJase | |
DE2167078C2 (en) | Amylase prepn - for prodn of maltose from starch | |
CH576487A5 (en) | Validamycin a - from the hydrolysis ofvalidamycin c, e, and f | |
DE2116791A1 (de) | Verfahren zur Herstellung von körnigen Enzympräparaten | |
DE2021465B2 (de) | Verfahren zur Herstellung eines Enzympräparates, welches die OH-Gruppe in der 3beta-Stellung des Cholesterins dehydriert | |
EP0021311B1 (de) | Verfahren zur Gewinnung von Cholesterinoxidase | |
DE1642625C3 (de) | Verfahren zur Herstellung von Isoamylase durch Fernmentation | |
DE1692783A1 (de) | Verfahren zur Herstellung von 5-Nucleotide enthaltenden Wuerzstoffgemischen | |
DE3013627A1 (de) | Verfahren zur gewinnung von cellulaseenzymen aus thielavia terrestris | |
DE2318650C2 (de) | Fermentative Herstellung von Deacetylcephalosporin C | |
AT405941B (de) | Verfahren zur herstellung von xanthangummi durch fermentation | |
DE2557499A1 (de) | Verfahren zur herstellung von cholestrin-oxidase | |
DE1949719A1 (de) | Verfahren zur Herstellung von Dextranase | |
DE3025424A1 (de) | Verfahren zur herstellung von galactoseoxidase | |
DE19821038A1 (de) | Neue Glykoside des Acarviosins, Synthese eines neuen Saccharase-Inhibitors durch Biotransformation der Acarbose | |
DE2223535C3 (de) | Hydrochlorid des Kupferkomplexes der Bleomycinsäure, sowie dessen Herstellung | |
CH647258A5 (de) | Verfahren zur herstellung von mildiomycin. | |
DE2502896A1 (de) | Verfahren zur herstellung von alpha-galactosidase | |
DE882138C (de) | Verfahren zur Herstellung von Substanzen, die das Wachstum pathogener Mikroorganismen hemmen | |
DE3706838A1 (de) | Neue, physiologisch aktive substanz "aldostatin" und verfahren zu ihrer herstellung | |
DE2239210A1 (de) | Verfahren zur zersetzung von raffinose unter verwendung von alpha-galactosidase | |
DE3617368A1 (de) | Verfahren zur herstellung eines stickstoffhaltigen polysaccharids | |
DE1492703C (de) | Verfahren zur Herstellung von kandier ten Fruchten | |
DE1092906B (de) | Verfahren zur Herstellung von 12a-Hydroxylverbindungen der Tetracyclinreihe | |
DE1795721C2 (de) | Verfahren zur fermentativen Herstellung von Orotidylsäure |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C3 | Grant after two publication steps (3rd publication) | ||
E77 | Valid patent as to the heymanns-index 1977 | ||
8339 | Ceased/non-payment of the annual fee |