DE1202936B

DE1202936B - Verfahren zur Gewinnung von Masern-Virus-Vaccine

Info

Publication number: DE1202936B
Application number: DEW37502A
Authority: DE
Inventors: Gwenneth Doreen Laurence
Original assignee: Wellcome Foundation Ltd
Current assignee: Wellcome Foundation Ltd
Priority date: 1961-09-08
Filing date: 1962-09-03
Publication date: 1965-10-14

Description

Verfahren zur Gewinnung von Masern-Virus-Vaccine Die Erfindung betrifft Verfahren zur Gewinnung von Masernvirus-Vaccinen.
Es ist bekannt, daß ein nicht immunes Lebewesen vor einem nachfolgenden Angriff eines Virenbefalis durch Immunisieren mit einer Vaccine geschützt werden kann, welche lebenden Virus, der immunologisch mit dem virulenten Virus verwandt, aber selbst nicht pathogen ist, enthält. Solch eine Vaccine kann einen abgeschwächten Stamm enthalten, welcher von dem natürlichen Virus abstammt. Die Wirksamkeit der Vaccine hängt von der Antigenität des Virus ab, welchen sie enthält.
Der Erreger der Masern ist ein Virus, und ein Mensch kann gegen Maserngeschütztwerden durchAnwendung einer Vaccine mit einem abgeschwächten Masernvirus. Es ist bekannt, derartig abgeschwächten Virus auf Kükenembryo-Gewebekultur zu ziehen, wobei die Vaccine aus der infizierten Gewebekultur durch Abtrennen der zellfreien Flüssigkeit gewonnen werden kann.
Es ist bei der Vaccine-Herstellung während des Wachstums von Masernviren von Bedeutung, daß der Virus seinen Grad an Abschwächung und seine Immunisierungseigenschaften behält, ohne in ein pathogenes Stadium zu verfallen.
Es ist bekannt, daß mit gewissen Unterschieden bei verschiedenen Stämmen Masernvaccinen Nebenprodukte enthalten, welche nach der Verabfolgung bei Patienten unerwünschte Reaktionen auslösen.
Überraschenderweise wurde nun gefunden, daß die Bildung solcher Nebenprodukte unterbleibt und damit die unerwünschten Reaktionen vermieden werden können, wenn die Vaccine durch Bebrüten von abgeschwächtem Masernvirus auf Kükenembryo-Kultur bei 32"C gewonnen wird.
Das folgende Beispiel erläutert die Erfindung.
Masernvaccine Abgeschwächter Masernvirus (Stamm Enders) wurde auf Kükenembryo-Gewebekultur vermehrt. Die durch Behandlung mit Trypsin von geköpften 7 bis 11 Tage alten Kükenembryos erhaltenen Zellen wurden in einem Nährmedium suspendiert, welches Serum enthielt, und in Roux-Kulturflaschen verpflanzt. Die Kulturen wurden bei 370 C bebrütet, bis eine geschlossene Zellfläche gebildet wurde, und dann mit Masernvirus geimpft. Jede Kultur wurde mit eingestellter Salzlösung zweimal vor der Impfung mit dem Virus und zweimal, nachdem der Virus 1 Stunde lang in Kontakt mit der Zelle war, gewaschen. Die Kulturen wurden mit Medium SM 199 ernährt und bei 32"C 7 bis 14 Tage lang bebrütet. Die gesamte Flüssigkeit eines Kulturansatzes wurde zusammengegeben und große Zelltrümmer durch Zentrifugieren entfernt. Die auf diese Weise erhaltene feuchte Vaccine, welche Masernvirus im Medium SM 199 enthielt, wurde bei +4"C bis zur Gefriertrocknung gelagert. Die Gefriertrocknung kann vor allem wie folgt durchgeführt werden: Zu 700 ml feuchter Vaccine wurden 100 ml 40 obige Sorbitlösung im Medium SM 199 zugegeben. Dieses Gemisch, welches 50/, Sorbit enthielt, wurde in Ampullen abgefüllt, 0,5 ml pro Ampulle, und gefriergetrocknet, um eine stabile Masernvaccine zu ergeben.
Die Trocknung wurde in zwei Stufen durchgeführt, zuerst unter Verwendung eines festen Kohlendioxyd-Alkohol-Kühlers und danach unter Verwendung von Phosphor-pentoxyd als Trocknungsmittel.

Claims

Patentanspruch: Verfahren zur Herstellung von lebenden, abgeschwächten Masernvirus enthaltenden Vaccinen unter Wachstum des abgeschwächten Masernvirus auf Kükenembryo-Gewebekultur, d a d II r c h g e k e n n z e i c h n e t, daß die mit abgeschwächtem Virus infizierte Kultur bei 32"C bebrütet wird.