DE1160981B

DE1160981B - Verfahren zur Gewinnung von kristallisiertem PGE und PGF

Info

Publication number: DE1160981B
Application number: DEB53207A
Authority: DE
Inventors: Sune Bergstroem; Jan Sjoevall
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1958-05-28
Filing date: 1959-05-12
Publication date: 1964-01-09
Also published as: GB1040545A; DK126106B; DE1643738B1; US3691216A; US3795697A; SE339531B; DE1643740C2; DE1443474A1; US3598858A; US3706789A; DE1643740B1; SE323473B; GB851827A; GB1040544A; SE305869B; US3069322A; SE337887B; US3852337A; DK130067C; DK130067B

Description

BUNDESREPUBLIK DEUTSCHLAND

DEUTSCHES

PATENTAMT

AUSLEGESCHRIFT

Internat. Kl.: A 61 k

Deutsche KL: 30 h-2/04

Nummer: 1160981

Aktenzeichen: B 53207IV a / 30 h

Anmeldetag: 12. Mai 1959

Auslegetag: 9. Januar 1964

Die Erfindung bezieht sich auf die Herstellung neuer kristalliner Stoffe, die in der Beschreibung als PGE und PGF bezeichnet werden, ihrer Ester und Salze, die eine pharmacodynamische Wirksamkeit besitzen. PGE wirkt sowohl als Anreger des glatten Muskelgewebes und zur Senkung des Blutdrucks. PGF bewirkt ebenfalls eine Reizung des glatten Muskelgewebes, übt jedoch keine Wirkung auf den Blutdruck aus.

Man weiß, daß die aus Genitalnebendrüsen, Samen u. dgl. erhältlichen Rohprodukte pharmacodynamische Wirkungen, z. B. hyper- oder hypotensive Wirksamkeit und die glatten Muskeln anregende Wirksamkeit besitzen. So wurde hypertensive Wirksamkeit von J a ρ e 11 i und S c ο ρ a 1906 (Arch. Ital. Biol., 45, S. 165) in einem Extrakt aus Hundevorsteherdrüsen festgestellt; hypotensive Wirksamkeit und glatte Muskeln anregende Wirksamkeit wurde von Kurzrok 1931 (Proc. Soc. Exp. Biol., N. Y., 28, S. 268) festgestellt, ferner von Goldblatt 1933 (Chem. E. Ind., 52, S. 1056) und von E u 1 e r in 1931 bis 1936 (Arch. Exp. Path. Pharmak., 175, S. 78 [1934], 181 [1936]; J. Physiol., 72, S. 74 [1931]; 81, S. 102 [1934]; 84, S. 21 [1935]; 88, S. 213 [1936]; Klin. Wschr., 14, S. 1182 [1935]). Ein Rohmaterial unter der Bezeichnung Prostaglandin, das hypotensive Wirksamkeit und muskelanregende Wirksamkeit besitzt, wurde von E u 1 e r beschrieben. Jedoch keines der bisherigen Produkte wurde aus dem Säugetierdrüsengewebe oder -produkten abgetrennt und keines besaß glatte muskelanregende Wirksamkeit, die frei von hypotensiver Wirksamkeit war.

Nach der Erfindung wurden nun zwei voneinander verschiedene Verbindungen, die mit PGE und PGF bezeichnet werden, in im wesentlichen reiner kristalliner Form aus Rohmaterialien, wie z. B. dem von E u 1 e r bezeichneten Prostaglandin oder direkt aus Materialien, wie z. B. aus Vorsteherdrüsen und Samen, gewonnen. Beide Verbindungen, PGE und PGF, besitzen die glatten Muskeln anregende Wirksamkeit, aber nur die Verbindung PGE hat hypotensive Wirksamkeit. Die Verwendung von reinem kristallinem PGE und PGF beseitigt die Möglichkeit, daß unerwünschte Nebenwirkungen auftreten, die normalerweise zu erwarten sind, wenn ein natürliches Produkt, wie z. B. pulverförmiges, trockenes Drüsengewebe, verwendet wird, und macht die Stoffe in Konzentrationen verfügbar, die für die praktische Erzielung ihrer entsprechenden pharmacodynamischen Wirkungen wirksam sind.

Das Verfahren besteht darin, die beiden neuen Substanzen aus einer wäßrigen alkalischen Lösung, die durch Extraktion eines organischen Lösungsmittelextraktes akzessorischer Geschlechtsdrüsen vonSäuge-Verfahren zur Gewinnung von kristallisiertem
PGE und PGF

Anmelder:

Sune Bergström,

Jan Sjövall, Lund (Schweden)

Vertreter:

Dr. W. Beil und A. Hoeppener, Rechtsanwälte,

Frankfurt/M.- Höchst, Antoniterstr. 36

Als Erfinder benannt:

Sune Bergström,

Jan Sjövall, Lund (Schweden)

Beanspruchte Priorität:

V. St. v. Amerika vom 28. Mai 1958
(Nr. 738 514)

tieren in wäßrigem Alkali erhalten wird, zu gewinnen, und ist dadurch gekennzeichnet, daß der wäßrige alkalische Extrakt auf einen pH-Wert von etwa 3 bis 3,5 angesäuert, mit Äther extrahiert, der Ätherextrakt zur Trockne eingedampft wird und der Rückstand zwischen einer wäßrigen Pufferlösung mit einem pH-Wert von etwa 6,4 und Äther durch Gegenstromverteilung fraktioniert wird und dann beide Fraktionen chromatographisch gereinigt werden. Die erhaltenen Wirkstoffe können gegebenenfalls noch an ihren Carboxylgruppen verestert oder in Salze übergeführt werden.

Sowohl PGE als auch PGF sind ungesättigte, nichtaromatische Oxycarbonsäuren, die nur die Elemente Kohlenstoff, Wasserstoff und Sauerstoff im Verhältnis von etwa 4:7:1 enthalten. Beide kristallisieren als nadeiförmige, farblose Kristalle. Beide bilden für Carbonsäuren typische Ester und Salze. Beide werden durch 30minutiges Erhitzen auf 100°C in 0,43 n-Salzsäure in 50%igem Äthanol inaktiviert. Beide nehmen bei Hydrierung ein Mol Wasserstoff auf. Beide ergeben nach 85minutiger Behandlung mit konzentrierter Schwefelsäure bei Raumtemperatur charakteristische, wenn auch verschiedene Ultraviolettspektren. Beide ergeben charakteristische, wenn auch verschiedene Infrarotspektren. Beide bilden Kristalle mit charakteristischen, jedoch verschiedenen Röntgendiffraktionsmustern. Beide ergeben charakteristische, jedoch verschiedene Massenspektrographien. Beide haben ein Molekulargewicht von etwa 350 ± 10. Es wird angenommen, daß PGE die Molekularformel C₂₀H₃₄-S₈Ob und PGF im wesentlichen die gleiche Molekularformel

309 778/342

besitzt. Beide haben im wesentlichen die gleiche Elementaranalyse für Kohlenstoff, Wasserstoff und Sauerstoff. Beide besitzen etwa die gleiche Wirksamkeit zur Anregung des glatten Muskelgewebes. PGE senkt den Blutdruck, d. h., es hat hypotensive Wirksamkeit, PGF dagegen nicht.

_ Ester von PGE und PGF wie z. B. die Methyl-, Äthyl-, 2-Äthylhexyl-, Cyclohexyl-, Benzyl-, Benzhydryl- und ähnliche niedere Hydrocarbylester lassen sich nach üblichen Methoden, z. B. durch Umsetzung mit Diazomethan oder anderen geeigneten Diazokohlenwasserstoffen herstellen. Diese Ester besitzen die gleiche Art Wirksamkeit wie die freien Säuren. Der Methylester von PGF ist zur Anregung des glatten Muskelgewebes wirksamer als PGF, während der Methylester von PGE etwa so wirksam wie PGE ist. Die Hydrierung von PGE und PGF kann nach üblichen Methoden zur Sättigung von Äthendoppelbindungen erfolgen, z. B. durch Hydrierung in einem Lösungsmittel, z. B. Äthanol, Essigsäure oder einem Gemisch aus den beiden, in Anwesenheit von Raneynickel-, Platin- oder ähnlichen Hydrierungskatalysatoren, wobei als Produkte, Dihydro-PGE und Dihydro-PGF entstehen, die ebenfalls physiologisch wirksam sind. In Anwesenheit einer Base entstehen Salze. So bilden die Säuren der Erfindung Salze mit Alkalimetall- und Erdalkalimetallbasen wiez. B. Natrium-, Kalium-, Lithium-, Ammonium-, Calcium-, Barium-, Strontium- und Magnesiumhydroxyden und -carbonaten und basische Amine wie z. B. Mono-, Di- und Trimethylamine, Mono-, Di- und Triäthylamine, Mono-, Di- und Tripropylamine (iso- und normal) Äthyldimethylamin, Benzyldiäthylamin, Cyclohexylamin, Benzylamin, Dibenzylamin, Ν,Ν-Dibenzyläthylendiamin, Bis-ortho-methoxy-N-methyl, Ortho-phenylisopropylamin, Methoxyphenylisopropylamin und ähnliche niedere aliphatische niedere cycloaliphatische und niedere araliphatische Amine bis zu und einschließlich etwa acht Kohlenstoffatome; heterocyclische Amine, wie z. B. Piperidin, Morpholin, Pyrrolidin, Piperazin und deren niedere Alkylderivate wie z. B. 1-Methylpiperidin, 4-Äthylmorpholin, 1-Isopropylpyrrolidin, 1,4-Dimethylpiperazin, 1-n-Butylpiperidin, 2-Methylpiperidin, l-Äthyl-2-methylpiperidin sowie Amine, die wasserlöslich machende oder hydrophile Gruppen enthalten, wie z. B. Mono-, Di- und Triäthanolamine, Äthyldiäthanolamin,n-Butylmonoäthanolamin,2-Amino-1-butanol, 2-Amino-2-äthyl-l,3-propandiol, 2-Amino-2-methyl-l-propanol, Tris-(oxymethyi)-aminomethan, Phenylmonoäthanolamin, p-tertiäres Amylphenyldiäthanolamin und Galaktamin, N-Methylglucamin, N-Methylglucosamin, Ephedrin, Phenylephrin, Epinephrin, Procain.

Die neuen Verbindungen lassen sich als Heilmittel verwenden, z. B. in Form von pharmazeutischen Präparaten, die die Verbindung oder eines ihrer Salze in Mischung mit einem pharmazeutischen organischen oder anorganischen Träger enthalten, der sich für enternale, parenterale oder örtliche Anwendung eigne . Zur Herstellung derartiger Träger verwendet man Stoffe, die mit den neuen Verbindungen nicht reagieren, z. B. Wasser, Gelatine, Lactose, Stärken, Maj-nesiumstearat, Talg, Pflanzenöle, Benzylalkohol, Gummiarten, Polyalkylenglycole, Petroleumgallert, Cholesterol oder andere bekannte Träger für Heilmittel. Die pharmazeutischen Präparate können z. B. als Tabletten, Kapseln, Pillen, Suppositorien, Bougies oder Flüssigkeiten, wie Lösungen, Suspensionen oder Emulsionen, zur Anwendung kommen. Gegebenenfalls können sie sterilisiert werden und/oder zusätzliche Substanzen, wie z. B. Konservierungsmittel, Stabilisierungs-. Benetzung- oder Emulgierungsmittel, Salze, zur Regulierung des osmotischen Drucks oder Puffersubstanzen enthalten. Außerdem können sie andere therapeutisch wertvolle Substanzen, z. B. antibakteriell wirkende Mittel enthalten.

In den Beispielen sind alle Prozente als Volumprozente angegeben, soweit nicht anders vermerkt ist.

Beispiel 1

Durch Gefrieren getrocknete Vorsteherdrüsen von Schafen wurden in einer Fleischhackmaschine zer-

¹S kleinert. Unter Anwendung von 41 pro Kilogramm getrocknete Drüsen wurden diese in destilliertem Wasser suspendiert. Nach 15 Minuten wurden 121 95%iges Äthanol zugesetzt. Die gemahlenen Drüsen wurden etwa 1 Stunde mechanisch gerührt, dann ließ man sie über Nacht absetzen. Die oben schwimmende klare Äthanollösung wurde dekantiert und der unlösliche Rückstand durch Gaze hindurchgepreßt und filtriert. Die oben schwimmende Schicht und das FiI-trat wurde vereinigt und im Vakuum auf ein Zwanzigstel des ursprünglichen Volumens, d. h. auf etwa 3 1 eingedampft. Dieser Rohe.xtrakt wurde mit etwa 3 1 Äther extrahiert. Danach wurde die wäßrige Phase auf einen pH-Wert von 3,5 angesäuert und erneut mit 31 Äther und anschließend zweimal mit 1,51 Äther extrahiert. Die vereinigten Ätherextrakte wurden sechsmal mit ¹Z₁ Volumen oder etwa 2,251 von 0,2molarer Phosphatpuffersubstanz mit einem pH-Wert von 8 extrahiert. Während der ersten Extraktion wurde der pH-Wert der Puffersubstanz mit 2normalem Natriumcarbonat zurück auf den pH-Wert 8 gebracht. Die vereinigten Puffersubstanzphasen wurden mit 6-n-Salzsäure auf einen pH-Wert von 3 gebracht, mit 1 Volumen, d. h. etwa 13,5 1 Äther ausgezogen und anschließend drei zusätzliche Male mit je 7 1 Äther ausgezogen. Die

Ätherextrakte wurden vereinigt und mit kleinen Mengen Wasser gewaschen, bis sie frei von Chloridionen waren, wobei jede Wassermenge durch eine zweite Ätherphase geleitet wurde. Der Äther wurde im Vakuum verdampft, wobei ein fester Rückstand zurückblieb. Der Rückstand wurde einer fünfstufigen Gegenstromverteilung zwischen gleichen Volumen Äther und 0,5molarer Phosphatpuffersubstanz bei einem ρπ-Wert von 6,4 unterzogen, wobei pro 5 g Extrakt 200 ecm verwendet wurden. Die Puffersubstanzphasen wurden angesäuert

und dreimal mit Äther ausgezogen. Sämtliche Phasen wurden zur Trockene verdampft, gewogen, und von jeder wurde die physiologische Wirksamkeit bestimmt.

	60	Äther	1	Probe Nr.	Gewicht	Physiologische
Phase Nr		2		(gi	Wirksamkeit Relative Einheiten
		3	a	6.40	pro Phase pro mg
		4	b	0.80	7200 1
65 Puffer	5	C	0.25	2200 3
substanz	5	d	0.15	1300 5
	4	e	0,10	1000 7
	3	f	0,06	1200 12
	2	S.	0.05	1700 28
		h	0.05	1900 38
		i	0,08	2400 - 48
j	0,80	2200 37
	2100 3

ϊ 160

Die physiologische Wirksamkeit wurde an Zwölffingerdarmstreifen von Kaninchen in einem Bad von 30 ecm nach dem Verfahren von E u 1 e r (Archiv für Physiologie, 77, S. 96 bis 99 [1937] ermittelt.

Die Proben d bis einschließlich i, die die Hauptmasse des PGF enthielten, wurden gesammelt und zwecks Entfernung von Verunreinigungen weiterbehandelt. Die Proben a bis einschließlich c, die die Hauptmasse des PGE enthielten, wurden ebenfalls gesammelt und zwecks Entfernung von Verunreinigungen behandelt. Jede Mischung (die PGE-Mischung und die PGF-Mischung) wurde in der beweglichen Phase eines Systems aus Isooctanol, Chloroform, Methanol und Wasser im Verhältnis (1: 1 : 10: 10) im Umfang von 100 mg pro 3 bis 5 ecm beweglicher Phase gelöst. Die Säule, in der 4 ecm statischer Phase (obere Phase) eines Isooctanol-Chlorof orm-Methanol- Wasser-Systems (1: 1 : 10: 10) auf 4,5 g wasserabweisendem Diatomit (mit Chlormethylsilan behandelte Kieselgur) getragen wurde, wurde mit 100 mg der gesammelten Probe beschickt, die mit einem Minimum von etwa 3 bis 5 ecm beweglicher Phase gemischt war und anschließend mit beweglicher Phase entwickelt. Die ersten 50 ecm der Eluate waren physiologisch unwirksam, die nächsten 65 ecm (etwa 50 bis 115 ecm) zeigten Wirksamkeit mit einer Spitze bei etwa dem 60. ecm des Ausflusses von etwa 2000 Euler-Einheiten. Der übrige Teil des Ausflusses war inaktiv. Mit dieser Stufe wurde eine etwa fünffache Reinigung der aktiven Verbindungen erzielt.

Das PGF- und PGE-Konzentrat, die 50-bis-l 15-ccm-Fraktion, wurde weitergereinigt und durch umgekehrte Phasenchromatographie, wie oben beschrieben, unter Verwendungeines Lösungsmittelsystems aus Methanol, Wasser, Isoamylacetat, Chloroform (35 : 65 : 4: 6) getrennt.

Das PGF wurde in der 25-bis-45-ccm-Fraktion gefunden und das PGE in der lOO-bis-130-ccm-Fraktion. Die Spitzen der PGF- und PGE-Fraktion maßen etwa 2000 von Euler-Einheiten.

Die Spitzenfraktionen waren verhältnismäßig rein, da die Trennchromatographie (nicht die umgekehrte Phasenchromatographie) von ihnen unter Verwendung eines Lösungsmittelsystems aus Äthylench'orid, Heptan, Essigsäure und Wasser (15:15:6:4) Fraktionen mit idealen Kurven ergab, d. h. Kurven, die typisch für im wesentlichen reine Verbindungen sind, die beim Stehen bei 4° C Kristalle von PGE und PGF ergaben. Diese Kristalle waren folgendermaßen gekennzeichnet:

PGF

Kristallform

Farblose Nadeln
Schmelzpunkt

102 bis 103⁰C

Ultraviolettabsorptionsspektrum

mit Säure zersetztes Material (40 mg in 1 ecm konzentrierter Schwefelsäure nach 85 Minuten bei Raumtemperatur) zeigt Spitzen bei etwa 308 und 465 Millimikron

Infrarotabsorptionsspektrum

Der Methylester von PGF zeigt charakteristische Absorption bei den folgenden in reziproken Zentimetern ausgedrückten Wellenlängen:

1253 1099 977 765 1235 1074 945 726 1223 1046 932

Elementaranalyse für C₂₀H₃₄-S₆O₅:

Berechnet ... C 67,4 bis 67,8, H 9,7 bis 10,2, O 22,4 bis 22,6;

gefunden

C 67,2
O 22,6.

H 10,0,

3279	1340	1205	1030	942
2611	1299	1172	1022	825
1700	1272	1124	995	816

Die durch Röntgenstrahlendiffraktion von kristallinem PGF erhaltenen interplan aren Abstände sind folgende:

dk I

16,44 Scharf

9,46 Schwach

8,16 Schwach

6,19 Mittel

5,46 Mittel

5,05 Mittel

4,71 Sehr schwach

4,63 Sehr scharf

4,54 Mittel

4,46 Mittel

4,08 Mittel

4,02 Scharf

3,74 Schwach

3,56 Schwach

3,45 Sehr schwach

3,07 Sehr schwach

2,93 Schwach

2,80 Schwach

2,67 Sehr schwach

2,56 Sehr schwach

2,48 Sehr schwach

2,39 Sehr schwach

2,34 Sehr schwach

2,02 Schwach

1,48 Schwach

Kristallform

Nadeiförmiger orthorhombischer loser Kristall.

I₁I-^ farb

55

60 Die Einheitszellendimensionen sind: A entspricht 8,23 ± 0,04 Ä B entspricht 19,4 dz 0,1 Ä C entspricht 25,9 ±0,1 Ä Pro Einheitszelle enthält es 8 Moleküle und hat ein Molekulargewicht von 353 ± 5. Bei Schwimmaufbereitung in Kaliumbromidlösung zeigt es ein spezifisches Gewicht von etwa 1,135 g/cem.
Schmelzpunkt 115 bis 117⁰C.

Ultraviolettabsorptionsspektrum Mit Säure zersetztes Material (38 mg kristallinisches PGE in 1 ecm konzentrierter Schwefelsäure, nach 85 Minuten bei Raumtemperatur) zeigt Spitzen bei etwa 250, 328 und 477 Millimikron.

Claims

7 8

Infrarotabsorptionsspektrum gebracht wird. Gleiche Mengen von Fraktionen aus der Der Methylester von PGE zeigt charakteristische Gegenstromverteilung z. B. von Beispiel 1 wurden auf Absorption bei den folgenden in reziproken Zenti- ^den Ausgangspunkt eines Streifens von Whatman-

metern ausgepreßten Wellenlängen: Filterpapier aufgetragen. Man ließ das Papier 16 Stun-

5 den in einem Behälter in den Dämpfen beider Phasen

1364 1109 667 hängen, bevor man es in Kontakt mit der beweglichen

1351 1073 Phase brachte. Danach ließ man das Chromatogramm

1319 1020 ^ Stunden unter Verwendung des Steigverfahrens

.,„ -».„ _Q71 arbeiten. Auf diese Weise wurde eine Trennung von

140U 1Z3U y/i _io pop und PGE erzielt, wobei sich das PGF langsamer

1197 912 _aj_s ^as pQ£ bewegte. Die Flecke wurden dadurch

1166 726 deutlich gemacht, daß man sie mit einer 15°/_oigen

äthanolischen Lösung von Phosphomolybdänsäure

Elementaranalyse für C₂₀H₃₄-S₆O₅: bespritzte und einige Minuten bei 80⁰C erhitzte. Das

Berechnet ... C 67,4 bis 67,8, H 9,7 bis 10,2, ₁₅ PGE und PGF wurden aus dem sie enthaltenden Teil

O 22,4 bis 22,6; des Papiers mit Äthylacetat ausgewaschen und daraus

gefunden ... C 66,5 bis 67,0, H 10,6 b^:s 10,3, auskristallisiert.

^{0 22}>⁹· B e i s ρ i e 1 3

Durch Röntgenstrahlenstreuung von kristallmi- Ätherlösung von 1 mg (2,8 Mikro-

schem PGE wurden folgende interplanare Abstande- _{kristallinen PGE wurde} |_in geringer Überschuß

m Ängstromemheiten erzielt: Diazomethan zugesetzt, das aus 4 Mikromol Nitroso-

^ ^ / methyluräthan hergestellt worden war. Man ließ das

„„. S h f Reaktionsgemisch etwa 5 Minuten stehen und destil-

' 25 lierte den Äther und das überschüssige Diazomethan

⁶>⁴⁵ ^{Sehr sc}h^wac" ab. Bei Destillation zur Trockene erhielt man den

6,13 Sehr schwach kristallinen Methylester von PGE mit dem charakte-

5,80 Schwach ristischen Infrarotabsorptionsspektrum.

5J5 Mittel B e i s ρ i e 1 4

' , Unter Benutung des Verfahrens des Beispiels 3 er-

⁴'²⁶ ^behT ^scnwacn hielt man bei Verwendung von kristallinen PGF an

4,20 Sehr schwach stelle des kristallinen PGE den kristallinen Methyl-

4,14 Sehr scharf ester von PGF mit dem charakteristischen Infrarot-

3₅97 Scharf 35 absorptionsspektrum.

3 οι Mittel ^^e obengenannten Infrarotspektren wurden durch

' _c , , - das KBr-Scheibenverfahren erhalten.

³> '* ^{beiir scftwacn} An Stelle von Diazomethan in den Beispielen 3 und 4

3,48 Schwach können zur Herstellung des Äthylesters von PGE, des

3,25 Schwach 40 2-Äthylhexyleslers von PGE, des Cyclohexylmethyl-

3^8 Schwach esters von PGE, des Benzylesters von PGE, des Benz-

3 Og Schwach hydrylesters von PGE, des Äthylester von PGF, des

' , , , 2-Äthylhexylesters von PGF, des Cyclohexylmethyl-

²>*' ^{benr scnwacn} esters von PGF, des Benzylesters von PGF, des Benz-

2,75 Schwach ₄₅ hydrylesters von PGF u. dgl. andere Diazoalkane, wie

2,65 Sehr schwach z. B. Diazoäthan, l-Diazo-2-äthylhexan, Cyclohexyl-

2,59 Sehr schwach diazomethan, Phenyldiazomethan, Diphenyldiazo-

2 50 Schwach methan u. a. verwendet werden. Zur Herstellung der

' , , gleichen Ester können auch andere Verfahren Verwen-

²'⁴⁴ ^{beiir scilwacn} ₅o dung finden. Zum Beispiel kann man die Silbersalze

2,39 Sehr schwach _von poE und PGF mit dem entsprechenden Jodid,

2,38 Sehr schwach z. B. Methyl-, Äthyl-, 2-Äthylhexyl-, Benzyl- oder

2,35 Sehr schwach Benzhydryljodid umsetzen.

In einer Konzentration von 10 · 10~⁹ g/ccm ist das 55 Patentansprüche: kristalline PGE wirksam und verursacht eine merkliche

Zusammenziehung eines Zwölffingerdarmstreifens. Das 1. Verfahren zur Gewinnung von kristallisiertem

kristalline PGF ist in einer Konzentration von etwa PGE und PGF aus einer wäßrigen alkalischen Lö-

· 10-⁹ g/ccm wirksam. Bei Einspritzung von 2 bis sung, die durch Extraktion eines organischen Lö-

Mikrogramm in ein 2,5 kg schweres Kaninchen 60 sungsextraktes akzessorischer Geschlechtsdrüsen

senkt das kristalline PGE den Blutdruck um etwa von Säugetieren mit wäßrigem Alkali erhalten wor-

bis 20mm. den ist, dadurch gekennzeichnet, daß

_R . -ι-) der wäßrige alkalische Extrakt auf einen pH-Wert

ti e 1 s ρ 1 e 1 1 _von g_{twa 3 bis 3j5 angesauert5 m}i_t Äther extrahiert,

PGF und PGE lassen sich auch unter Verwendung 65 der Ätherextrakt zur Trockne eingedampft und der

eines Lösungsmittelsystems trennen und isolieren, das Rückstand zwischen einer wäßrigen Pufferlösung

aus Äthylenchlorid—Heptan—Essigsäure—Wasser mit einem ρπ-Wert von etwa 6,4 und Äther durch

(5:5:7:3) besteht und bei 23 ⁰C ins Gleichgewicht Gegenstromverteilung fraktioniert wird und beide

9 10

Fraktionen chromatographisch gereinigt und die mit einem Lösungsmittelgemisch aus Äthylenerhaltenen Wirkstoffe gegebenenfalls an ihren chlorid, Heptan, Essigsäure und Wasser (5:5:7:3) Carboxylgruppen verestert oder in Salze überge- chromatographiert wird.

führt werden.

2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekenn- S In Betracht gezogene Druckschriften:

zeichnet, daß das PGE und PGF aus dem Extrakt Schwedische Patentschrift Nr. 91 825.

309 778/342 12.63 © Bundesdruckerei Berlin