DD139858A5

DD139858A5 - Verfahren zur herstellung von pleuromutilinglycosidderivaten

Info

Publication number: DD139858A5
Application number: DD78209624A
Authority: DD
Inventors: Ramakrishnan Nagarajan
Original assignee: Lilly Co Eli
Priority date: 1977-12-08
Filing date: 1978-12-08
Publication date: 1980-01-23
Also published as: RO84426A; FI783709A; CS219342B2; IL56115A0; RO80082B; CS219344B2; GB2009738A; FR2411205B1; IT1160316B; IE782421L; ZA786872B; GR72774B; BE872489A; RO84425B; DE2862226D1; CA1109866A; JPS5498751A; ATA871578A; HU181429B; AU4216278A

Description

Anwendungsgebiet der Erfindung

Neue Pleuromutilxnglycosidderivate sind wirksame Mittel gegen grampositive und gramnegative Bakterien, anaerobe Bakterien und Mycoplasma. Sie v/erden durch Umsetzung einer acetylierten Glycosylverbindung mit Pleuromutilin oder einem Derivat davon oder einem Glycosylderivat von Pleuromutilin hergestellt.

,Charakteristik der bekannten technischen Lösungen Das Antibiotikum Pleuromutilin ist 1951 durch Kavanagh et al. /Proc. Natl. Acad. Soc. 37, 570-574 (T951j_/ isolierb worden. Später ist folgende Struktur für Pleuromutilin nachgewiesen worden:

KX)CHsOH

Alkalische Hydrolyse von Pleuromutilin ergibt eine als Mutilin bekannte Verbindung folgender Struktur:

II

Es ist eine große Anzahl von Pleuromutilinderivaten hergestellt worden /CH-PS 572 894 (Derwent No. 26553X); NL-PS 69 11083 (Derwent No. 40 642); Knauseder et al., US-PS 3 716 579; Egger et al., US-PS 3 919 290; Brandl et al., US-PS 3 949 079; Riedl, US-PS 3 979 423; Baughn et al., US-PS 3.987 194; Egger et al., US-PS 4 032 530; K. Riedl, "Studies on Pleuromutilin and Some of Its Derivatives," J. Antibiotics 29, 132-139 (1976); , H. Egger und H. Reinshagen, "New Pleuromutilin Derivatives with Enhanced Antimicrobial Activity. I. Synthesis," J. Antibiotics 29, 915-922 (1976) und "II. Structure-Activity Correlations, " ibid., 923-927 (1976); F.- Knauseder and E. Brandl, "Pleuromutilins: Fermentation, Structure and Biosynthesis," J. Antibiotics 29, 125-131 (1976); J. Drews et al., "Antimicrobial Activities of 81 723 hfu, a New Pleuromutilin Derivative," Antimicrob. Agents and Chemotherapy 7, 507-516 (1975).

- 3 - 209 624

Vor kurzem haben Michel und Higgens Antibiotikum A-40104-Faktor A gefunden, wobei es sich um ein neues Mitglied der Pleuromutilingruppe von Antibiotika handelt. Dieses Antibiotikum ist in einer gleichzeitig eingereichten Patentanmeldung der gleichen Anmelderin mit dem internen Aktenzeichen X-4688 und der Bezeichnung "Verfahren zur Herstellung von A-40104-Antibiotika und Derivaten davon" abgehandelt. Die Struktur des Antibiotikum A-40104-Faktor A entspricht der Formel

il

-β

III

CH3

worin die D-Xylopyronosegruppe in der ß-Konfiguration angeordnet ist

Ziel der Erfindung

Durch die Erfindung werden neue Pleuromutilinglycosidderivate zugänglich gemacht, die nicht nur gegen grampositive und gramnegative Bakterien und anaerobe Organismen Wirksamkeit aufweisen, sondern auch gegen Mycoplasma. Damit werden der Human- und Veterinärmedizin weitere Mittel zur Behandlung von Infektionskrankheiten von Menschen und Haustieren an die Hand gegeben, und der zur Verfügung stehende Schatz an Wirkstoffen wird erheblich bereichert.

209 624

Darlegung des Wesens der Erfindung

Gegenstand der Erfindung ist ein Verfahren zur Herstellung von Pleuromutilinglycosidderivaten der Formel

i-C-CH -R¹

IV .

worin bedeuten:

eine Ethyl- oder Vinylgruppe,

a) das alpha- oder ß-Anomere einer der folgenden Hexopyranosen oder Hexofuranosen: D- und L-Glucose; D- und L-Galactose; D- und L-Mannose; D- und L-Gulose; D- und L-Idose; D- und· L-Altrose, L- und D-Rhamnose; D- und L-Fucose, 1-Thio-D- und -L-glucose; 1-Thio-D- und -L-galactose; 1-Thio-D- und -L-mannose; 1-Thio-D- und -L-gulose; 1-Thio-D- und -L-idose; 1-Thio-D- und -L-altrose; 1-Thio-L- und -D-rhamnose und 1-Thio-D- und -L-fucose,

uranosen:

_{; D}_ ThIo-D- _una ., "

aas alpha-

^{und 1}

_fol

^L"^xylose

das alpha- oder _R

-1-

xy.lose;

- _und

alpha- od_{er β} Pyranose-

- _una

-^-xylose; ₂-

n^se thio-D- _und . '

^¹

-6- 209 624

g) das alpha- oder ß-Anomere eines der folgenden Disaccharide: Maltose; Cellobiose, Lactose; Gentiobiose; Isomaltose; MeIibiose, Raffinose und Xylobiose; 1-Thiomaltose; 1-Thiocellobiose; 1-Thiolactose; 1-Thiogentiobiose; 1-Thioisomaltose; 1-Thiomelibiose; 1-Thioraffinose und 1-Thioxylobiose;

h) das alpha- oder ß-Anomere der Trisaccharide Maltotriose; Cellotriose; Xylotriose; 1-Thiomaltotriose; 1-Thiocellotriose und 1-Thioxylotriose;

i) 2-Desoxy-2-(hydroxyimino)-3,4,6-tri-0-acetyl-alpha-D-glucopyranosyl; 2-Desoxy-2-(hydroxyimino)-3,4,6-tri-0-acetyl-alpha-D-galactopyranosyl; 2-Desoxy-2-(hydroxyimino) -alpha-D-galactopyranosyl ; 2-Desoxy-2-amino-4,6-di-O-acetyl-alpha-D-glucopyranosyl; 2-Desoxy-2-acetamido-3,4,6-tri-0-acetyl-alpha-D-glucopyranosyl oder

j) eine der unter a) bis h) angegebenen Gruppen in mit Cp-C.-Alkanoyl oder Benzoyl peracylierter oder benzylierter Form;

2 1

R Wasserstoff oder, wenn R eine der in j) definierten Gruppen ist, einen C^-C^-Alkanoyl-, Benzoyl- oder Benzylrest,

sowie der pharmazeutisch annehmbaren Säureadditionssalze der Verbindungen, in deren Formel R eine der unter f) angegebenen Bedeutungen hat, dadurch gekennzeichnet,

daß ein Glycosylderivat, dessen Glycosy!gruppe ein per-O-acyliertes oder benzyliertes alpha- oder ß-Anomeres der unter a) bis h) genannten Stoffe oder einer der unter i) genannten acetylierten Glycosylreste ist, mit einem Pleuromutilin oder einem Derivat desselben der Formel

C-CH -Y

worin Y eine Mercaptogruppe oder Halogen bedeutet, umgesetzt wird und daß, wenn im Endprodukt die Glycosylgruppe von R eine der in den Gruppen a) bis h) angegebenen und/oder R eine Ethylgruppe bedeutet, das erhaltene Produkt einer Hydrierung oder Hydrolyse zur Entfernung der O-Acyl- oder -Benzylgruppen unterworfen und/oder die 12-Vinylgruppe zu Ethyl reduziert wird und daß, wenn die Glycosylgruppe in R eine der unter f) genannten ist, das Produkt gegebenenfalls in an sich bekannter Weise in ein pharmazeutisch annehmbares Salz übergeführt wird.

Die Verbindungen, in deren Formel R Wasserstoff bedeutet, werden erfindungsgemäß durch Umsetzung von Pleuromutilin mit dem entsprechenden Zuckerrest nach für die Herstellung von Glycosiden allgemein bekannten Methoden

hergestellt.' Beispielsweise werden diejenigen Glycoside, die ß-Anomere darstellen, ganz allgemein nach der Koenigs-Knorr-Methode (vgl. H. Krauch und W. Kunz, "Organic Name Reactions," John Wiley and Sons, New York, N.Y., 1964, S. 269) hergestellt. Die Glycoside, die alpha-Anomere darstellen, werden ganz allgemein durch halogenkatalysierte Glycosidierung hergestellt. Bromderivate sind .für diese Reaktionen besonders bevorzugt.

Eine weitere zur Herstellung einiger der Verbindungen gemäß der Erfindung geeignete Glycosidierung bedient sich einer Mercuriverbindung, wie Mercuricyanid, als Katalysator.

Wie ersichtlich'ist bei diesen Methoden ein Per-O-acylglycosylhalogenid das passende Zuckerausgangsmaterial. Die Herstellung dieser Per-O-acylglycosylhalogenide ist allgemein bekannt. Eine Übersicht über die Chemie dieser Verbindungen findet sich in.Advan. Garbohyd. Chem. 10, 207-256 (1955)'. Die Per-O-acetylglycosylhalogenide sind die am häufigsten eingesetzten Ausgangszucker, aber auch andere Acylglycosylhalogenide, zum Beispiel Per-0- (C^C.-alkanoyDglycosylhalogenide und Per-O-benzoylglycosylhalogenide sind geeignet. Die Bromide und Chloride sind die meist verwendeten Halogenidderivate, da sich die Iodide leicht zersetzen und die Fluoride weniger reaktionsfähig sind.

Bei einem weiteren Verfahren zur Herstellung einiger der Verbindungen gemäß der Erfindung wird Pleuromutilin mit dem Nitrosylchloridaddukt des per-O-acylierten Glycalderivats des entsprechenden Zuckers zu dem entsprechenden 2-(Hydroxyimino)-derivat umgesetzt und anschließend das Produkt in das angestrebte Aminoglycosid übergeführt. .

209 624

Die Thioglycosidderivate, in deren Formel R Wasserstoff bedeutet, werden erfindungsgemäß durch Umsetzung von 14-Desoxy-14-(monoiodacetoxy)-mutilin, im folgenden als Iodpleuromutilin bezeichnet, mit dem entsprechenden Per-O-acylmercaptozuckerderivat hergestellt. Iodpleuromutilin wird nach der Vorschrift in US-PS 3 979 423 erhalten. Die per-O-acylierten Mercaptozuckerderivate können aus den entsprechenden halogensubstituierten per-O-acylierten Zuckeranaloga nach allgemein bekannten Arbeitsweisen erhalten werden. Bei einem weiteren Verfahren zur Herstellung der entsprechenden Mercaptozuckerderivate wird eine durch Bortrifluoridetherat katalysierte Kondensation eines Per-O-acylzuckers mit Pleuromutilinthiol nach der Arbeitsweise von R. J. Ferrier und R. H. Furneaux, Carbohydrate Research 52, 63-68 (1976) angewandt.

2-Amino-t-thio-alpha-D-glycoside werden zweckmäßigerweise durch Kondensation von 1 4-Desoxy-14-(mercaptoacetoxy)-mutilin, das im folgenden als Pleuromutilinthiol bezeichnet wird, mit einem 2-Desoxy-2-(hydroxyimino)-per-O-acyl-alpha-D-glycosylchlorid unter Bildung des entsprechenden 2-(Hydroxyimino)-derivats und anschließende Reduktion dieses Oximinoderivats zu der gewünschten 2-Aminoverbindung hergestellt.

Dialkylamino-1-thio-ß-D-glycopyranosylderivate werden durch Überführung von Dialkylamino-per-O-acyl-i-bromalpha-D-glycopyranosiden /für ihre Herstellung siehe ,J. Amer. Chem. Soc. 99, 5826 (1977J/ in die entsprechenden Dialkylamino-per-O-acyl-1-mercapto-ß-D-glycopyranoside und anschließende Kupplung mit Iodpleuromutilin hergestellt. .

-209..6

Diejenigen Verbindungen, in deren Formel R die Ethylgruppe bedeutet, können aus den entsprechenden Verbindungen, in deren Formel R die Vinylgruppe bedeutet, durch übliche Reduktionsarbeitsweisen, zum Beispiel durch Hydrierung unter Verwendung von Palladium-auf-Kohle als Katalysator, hergestellt werden. Sie können aber auch durch Umsetzung von 19,20-Dihydropleuromutilin mit dem entsprechenden Zucker, wie oben beschrieben, erhalten werden.

Diejenigen Verbindungen, in deren Formel R eine per-O-acylierte Zuckergruppe bedeutet, eignen sich (1) als Zwischenprodukte für Verbindungen, in deren Formel R eine der unter a) bis h) angegebenen Gruppen bedeutet, und (2) als Wirkstoffe.

Diejenigen Verbindungen, m deren Formel R eine der unter a) bis h) angegebenen Grupppen bedeutet, werden aus den entsprechenden per-o-acylierten Verbindungen, in deren Formel R eine der unter j) angegebenen Gruppen bedeutet, durch Abspaltung der Acylgruppen in Gegenwart einer Base, wie Triethylamin, erhalten..

Die Verbindungen, in deren Formel R eine C~-C,--Alkanoyl- oder Benzoylgruppe bedeutet, werden am zweckmäßigsten durch Acylierung von Jodpleuromutilin nach üblichen Arbeitsweisen und anschließende Umsetzung der so erhaltenen 11-Desoxy-i1-acyloxyiodpleuromutiline mit dem entsprechenden Per-O-acylmercaptozuckerderivat nach üblichen Methoden hergestellt.

Ausfühiungsbeispiele

Durch die folgenden Beispiele wird die Erfindung weiter erläutert.

- 209 6 24

Beispiel. 1

Herstellung von 14-Desoxy-14-/(2,3,4,6-tetra-O-benzyl-alpha-D-glucopyranosyl)oxyacetoxy_/mutilin

4,8012 g 2,3,4,6-Tetra-O-benzyl-alpha-D-glucose und 15 ml Thionylchlorid werden unter Rühren 4 Stunden in einem Ölbad von 70 ⁰C gehalten. Das Reaktionsgemisch wird im Vakuum bis zu einem dicken öl eingedampft. Dieses öl wird dreimal mit jeweils etwa 30 ml Toluol behandelt, wobei jedesmal zur Entfernung von überschüssigem SOCl- eingedampft wird und wodurch schließlich ein gelbbraunes öl erhalten wird, das 5,1931 g ausmacht.

Dieses öl wird sofort in 35 ml CH₃Cl₂ gelöst. Zu der so erhaltenen Lösung werden 1,6834 g (C₃H₅J₄NBr, 2 ml N,N-Diisopropylethylamin und 1,743 g Pleuromutilin gegegeben. Die so erhaltene Mischung wird T Woche lang bei Zimmertemperatur in einem gut verschlossenen Kolben gerührt. Dann wird das Reaktionsgemisch mit einem gleichen Volumen CH₅Cl₃ verdünnt, und die erhaltene Lösung wird nacheinander mit Wasser, 1n HCl und Wasser gewaschen. Die CH₃Cl₃-Schicht wird über Na₃SO₄ getrocknet, filtriert und im Vakuum zur Trockne eingedampft, wodurch 5,5174 g Rohprodukt erhalten werden.

Dieses Produkt wird dann in einer Säule aus Kieselgel (Merck) mit den Abmessungen 3,5 χ 100 cm chromatographiert, wobei mit Ethylacetat/Toluol (1:1) eluiert wird und Fraktionen mit einem Volumen von 8 ml in Abständen von jeweils einer halben Stunde aufgefangen werden. Die Zusammensetzung der Fraktionen wird durch Dünnnschichtchromatographie (TLC) unter Verwendung des gleichen Adsorbens-Lösungsmittel-Systems und Entwicklung in einer Iodkammer

- 12- 209 624

verfolgt. Durch Vereinigung der entsprechenden Fraktionen und Eindampfen im Vakuum werden 0,4624 g 14-Desoxy-14-/(2,3,4,6-tetra-O-benzyl-alpha-D-glucopyranosyl)oxyacetoxy_/oxyacetoxy/mutilin erhalten, Ausbeute 11,167 %.

Be i s ρ ie I

Herstellung von 14-Desoxy-14-\/(alpha-D-glucopyranosyDoxyacetoxyy-TiJ^O-dihydroinutilin

400 mg 14-Desoxy-14^/(2,3,4,6-tetra-0-benzyl-alpha-D-glucopyranosyl)oxyacetoxv_/mutilin (Beispiel 1) werden in 25 ml 95-prozentigem Ethanol gelöst. Die Lösung wird zu 263 mg 5 % Palladium aufweisender Kohle gegeben, und die Mischung wird 1,5 Tage einer Wasserstoffatmosphäre ausgesetzt. Die erhaltene Reaktionsmischung wird durch einen Glassintertrichter mit einer 3 cm dicken Schicht aus fest gepacktem Eelite filtriert. Durch Eindampfen des Filtrats im Vakuum werden 234,9 mg 14-Desoxy-14-/(alpha-D-glucopyranosyl)oxyacetoxy_/-1 9, 20-dihydromutilin erhalten.

Beispiel

Herstellung von 14-Desoxy-14-/(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-ß-D-glucopyranosyl)oxyacetoxy_/mutilin .

1,6945 g (4,48 mmol) Pleuromutilin werden in 300 ml Nitromethan/Benzol (1:1) gelöst. Etwa 100 ml dieser Lösung werden abdestilliert, wodurch völlige Trockenheit gesichert ist. Diese Lösung wird mit 1,0694 g (4,23 mmol) Hg(CN)₂ versetzt. Das Reaktionsgemisch wird unter einer Stickstoffatmosphäre in einem Ölbad von 60 ⁰C gehalten und

- 209 624

innerhalb von 6 Stunden tropfenweise mit einer Lösung von 2,009 g (4,89 mmol) Acetobromglucose in 100 ml Nitromethan/Benzol (1:1) versetzt. Das Reaktionsgemisch wird 20 Stunden unter diesen Bedingungen gerührt. Dann wird es mit weiteren 762 mg (etwa 3 mmol) Hg(CN)₂ und anschließend mit einer Lösung von 964,2 mg (2,34 mmol) 2,3,4,6-Tetra-O-acetyl-alpha-D-glucop'yranosylbromid in 50 ml Nitromethan/ Benzol (1:1) wie oben tropfenweise versetzt. Das Reaktionsgemisch wird weitere 2 Tage gerührt. Dann wird es in einem Eisbad gekühlt und nacheinander mit kalter gesättigter NaHCO^-Lösung (einmal) und kalter gesättigter NaCl-Lösung (zweimal) gewaschen. Nach jeder Wäsche wird die wäßrige Schicht mit CH„C1~ rückextrahiert. Die organischen Schichten werden vereinigt, über wasserfreiem MgSO. eine Stunde getrocknet und dann im Vakuum zur Trockne eingedampft, wodurch 4,05 g Rohprodukt erhalten werden.

Dieses Rohprodukt wird durch Chromatographie an Kieselgel (Merck) in einer Säule mit den Abmessungen 3 χ 95 cm, Elut.ion mit Ethylacetat/Toluol (1:1) und Auffangen von Fraktionen mit einem Volumen von etwa 8 bis 10 ml in Abständen von 45 Minuten weiter gereinigt. Die Zusammensetzung der Fraktionen wird durch Kieselgel-TLC unter Verwendung von Ethylacetat/Toluol (1:1) als Lösungsmittel und Iod zum Nachweis verfolgt. Durch Vereinigung entsprechender Fraktionen und Eindampfen im Vakuum werden 515,3 mg gereinigtes 14-Desoxy-14-/(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-ß-D-glucöpyranosyl)oxyacetoxy_/mutilin erhalten, Ausbeute 16,24 %.

- 14 - 209 6 24·

Beispiel 4

Herstellung von 14-Desoxy-1 4-_/ (ß-D-glucopyranosyl)oxyacet-

oxy_/mutilin

1,237 g (ca. 1,74 minol) 14-Desoxy-14-/2,3,4,6-tetra-O-acetyl-ß-D-glucopyranosyl) -oxyacetoxy_/mutilin, hergestellt nach Beispiel 3, werden in 100 ml wasserfreiem Methanol gelöst. Zu dieser Lösung werden 100 ml Wasser und dann unter beständigem Rühren bei Zimmertemperatur 30 ml destilliertes (C₃H₅)., gegeben. Nach 3-tagigem Rühren des erhaltenen Reaktionsgemischs bei Zimmertemperatur wird es im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand enthält immer noch Spuren von (C₉H_n.) _N und wird im Vakuum weiter gereinigt, wodurch 1,3762 g Rohprodukt erhalten werden. ' .

Dieses Rohprodukt wird durch Chromatographie an einer Kieselgelsäule mit einem Durchmesser von 2 cm (150 g, Merck) weiter gereinigt, wobei mit Ethylacetat/Ethanol (4:1) eluiert wird und Fraktionen mit einem Volumen von etwa 2 ml in Abständen von 20 Minuten aufgefangen werden. Die Überwachung erfolgt durch Kieselgel-TLC unter Verwendung des gleichen Lösungsmittelsystems und von Iod zum Nachweis. Die Fraktionen 98 bis 130 werden vereinigt und im Vakuum zur Trockne eingedampft, wodurch 278,6 mg 14-Desoxy-1 4-/(ß-D-glucopyranosyl)oxyacetoxy_/mutilin erhalten werden. . ·..".-

209 624

Beispiel

Herstellung von 14-Desoxy-14-/2-desoxy-2-(hydroxyimino)-3,4, ö-tri-O-acetyl-alpha-D-glucopyranosyl) oxyacetoxy_/-

mutilin

3,9797 g (0,01052 mol) Pleuromutilin werden in 75 ml Dimethylformamid gelöst' und mit 3,6756 g (0,0109 mol) D-GIucaltriacetat-NOCl-Addukt versetzt. Nach 4-tägigem Rühren bei Zimmertemperatur wird das Reaktionsgemisch im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der getrocknete Rückstand wird in CH₃Cl₂ gelöst, und diese Lösung wird viermal mit gesättigter NaCl-Lösung gewaschen. Die CH₉Cl₀-Lösung wird 30 Minuten über MgSO, getrocknet und dann im Vakuum zur Trockne eingedampft, wodurch 7,25 g Rohprodukt erhalten werden.

Dieses Rohprodukt wird durch Chromatographie an einer Kieselgelsäule mit den Abmessungen 3,5 χ 100 cm weiter gereinigt, wobei mit Ethylacetat/Toluol (1:1) eluiert wird und Fraktionen mit einem Volumen von etwa 10 ml in Abständen von 45 Minuten aufgefangen werden. Die Überwachung der Chromatographie erfolgt durch Kieselgel-TLC unter Verwendung des gleichen Lösungsmittelsystems. Passende Fraktionen werden vereinigt und im Vakuum eingedampft, wodurch 1,9 g Produkt erhalten werden. Durch erneutes Chromatographieren von vereinigten Fraktionen, die eine, andere Verunreinigung enthalten, unter den gleichen Bedingungen werden weitere·1,2141 g Produkt erhalten, womit sich die Gesamtausbeute auf 3,1141 g 14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-(hydroxyimino)-3,4,6-tri-O-acetyl-alpha-D-glucopyranosyl)oxyacetoxy/mutilin oder 43,67 % beläuft.

- 209 624

Beispiel

Herstellung von 14-Desoxy-1 4-/^ (2-desoxy-2- (hydroxyimino) 3,4,G-tri-O-acetyl-alpha-D-glucopyranosylJoxyacetoxyy-19,20-dihydromUtilin

3,5 g 14-Desoxy-14-_/(2-desoxy-2- (hydroxyimino)-3,4,6-tri-O-acetyl-alpha-D-glucopyranosyl) oxyacetoxy_/mutilin, hergestellt nach Beispiel 5, werden in 50 ml wasserfreiem Ethanol gelöst und zu 2,9495 g PtO₂ gegeben, das in 50 ml wasserfreiem Ethanol 30 Minuten vorreduziert worden war. Dann wird 1,5 Tage bei Zimmertemperatur hydriert. Das Reaktionsgemisch wird durch einen Glassintertrichter mit einer Schicht aus Celite filtriert. Das Filtrat wird im Vakuum zur Trockne eingedampft und zur Entfernung von Lösungsmittelspuren 1 Stunde unter einem Hochvakuum gehalten, wodurch 3,33 g Rohprodukt erhalten werden.

Dieses Rohprodukt wird an einer Kieselgelsäule mit den Abmessungen 3 χ 105 cm chromatographiert, wobei mit Toluol/Aceton (2:1) eluiert wird und Fraktionen mit einem Volumen von 8 bis 10 ml in Abständen von 30 Minuten aufgefangen werden. Der Verlauf der Chromatographie wird durch Kieselgel-TLC unter Verwendung des gleichen Lösungsmittelsystems verfolgt. Entsprechende Fraktionen werden vereinigt und im Vakuum zur Trockne eingedampft, wodurch 2,5914 g 14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-(hydröxyimino)-3,4,6-tri-O-acetyl-alpha-D-glucopyranosyl)oxyacetoxy_/-1 9, 20-dihydromutilin erhalten werden.

209 624

Beispiel

Herstellung von 14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-(hydroxyimino)-3,4,ö-tri-O-acetyl-alpha-D-galactopyranosyl)oxyacetoxy/-

mutilin

7,6342 g (20,19 mmol) Pleuromutilin werden unter den in Beispiel 5 beschriebenen Bedingungen mit 7,6723 g (22,76 mmol) D-Galactaltriacetat-NOCl-Addukt umgesetzt. Nach Reinigung durch Kieselgelchromatographie unter Verwendung von Ethylacetat:Toluol (1:1) als Lösungsmittelsystemwerden 10,0739 g (14,8 mmol) 14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-(hydroxyimino)-3,4,6-tri-O-acetyl-alpha-D-galactopyranosyl) oxyacetoxy_/mutilin erhalten; Ausbeute 7 3 %.

Beispiele

Herstellung von 14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-(hydroxyimino) alpha-D-galactopyranosyl)oxyacetoxy/mutilin

1,5 g 14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-(hydroxyimino)-3,4,6-tri-O-acetyl-alpha-D-galactopyranosyl) oxyacetoxy_/mutilin, hergestellt nach Beispiel 7, werden in 50 ml Methanol und 50 ml Wasser gelöst. Nach Zugabe von 50 ml (C₃H₅)^N wird die erhaltene Lösung 3 Tage bei Zimmertemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wird dann'im Vakuum eingedampft, und nach Zugabe von CHCl₃ wird Vakuum an den Rückstand angelegt, wodurch Schäumen verursacht wird. Durch einstündige Anwendung eines Hochvakuums werden 414 mg Rohprodukt erhalten.

Das Rohprodukt wird in einer möglichst kleinen Menge Methanol gelöst und auf eine Kieselgelsäule mit den Abmessungen 1,5 χ 70 cm aufgegeben, worauf mit Ethylacetat/Ethanol (9:1) eluiert wird und Fraktionen mit einem

-18-209 6 24

Volumen von etwa 2 bis 3 ml in Abständen von 1 Stunde aufgefangen werden. Der Verlauf der Chromatographie wird durch Kieselgel-TLC unter Verwendung des gleichen Lösungsmittelsystems verfolgt. Entsprechende Fraktionen werden vereinigt und zur Trockne eingedampft, wodurch insgesamt 104,4 mg 14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-(hydroxyimino)-alpha-D-galactopyranosy1)öxyacetoxy_/mutilin erhalten werden.

Beispiel

Herstellung von 14-Desoxy-i4-/(2-desoxy-2-amino-4,6-di-

O-acetyl-alpha-D-glucopyranosyl)oxyacetoxy_/-19,20-dihydromutilin

508,6 mg 14-Desoxy~14-/(2-desoxy-2-(hydroxyimino)-3,4,6-tri-O-acetyl-alpha-D-glucopyranosyl) oxyacetoxy_/mutilin (hergestellt nach Beispiel 5) werden in 50 ml absolutem Ethanol gelöst und in Gegenwart von 0,5 g Raneynickel bei Zimmertemperatur über Nacht hydriert. Das erhaltene Reaktionsgemisch wird durch einen· Glassintertrichter mit einer Schicht aus Celite filtriert. Das Filtrat wird zur Trockne verdampft, der Rückstand wird in einer kleinen Menge CHC1.,· gelöst, und dann wird wieder im Vakuum zur Trockne eingedampft. Dadurch wird ein weißer Schaum erhalten, der etwa 2 Stunden einem Hochvakuum unterworfen wird, wodurch 381,7 mg Rohprodukt erhalten werden.

Dieses Rohprodukt wird in einer möglichst kleinen Menge Methanol gelöst und an einer 1,5 χ 75 cm Säule aus Kieselgel (Merck) chromatographiert. Die Säule wird mit Acetonitril/Wasser (4:1) eluiert, wobei Fraktionen mit einem Volumen von etwa 2 bis 3 ml in Abständen von 60 Minuten aufgefangen werden. Der Verlauf wird durch

209 624

Kieselgel-TLC unter Verwendung des oben angegebenen Lösungsmittelsystems sowie eines Lösungsmittelsystems aus Ethylacetat und Ethanol (9:1) verfolgt. Entsprechende Fraktionen werden vereinigt und im Vakuum -zur Trockne eingedampft, wodurch 25,5 mg 14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-amino-4,ö-di-O-acetyl-alpha-D-glucopyranosyl)oxyacet-..oxyy-19, 20-dihydromutdlin erhalten werden.

Beispiel 10

Herstellung von 11-Acetyl-14-desoxy-14-/^(2-desoxy-2-acetamido-3,4,ö-tri-O-acetyl-alpha-D-glucopyranosyl)oxyacet-

οχγ_/-1 9,20-dihydromutilin

17 mg 14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-amino-4,6-di-0-acetylalpha-D-glucopyranosyl) oxyacetoxy_/~1 9, 20-dihydromutilin (hergestellt nach Beispiel 9) werden mit 0,5 ml Essigsäureanhydrid und 0,5 ml Pyridin unter den üblichen Bedingungen über Nacht acetyliert. Das Reaktionsgemisch wird zu kaltem Wasser gegeben, und das wäßrige Gemisch wird mit CHCl-, extrahiert. Die erhaltene CHCl^-Lösung wird mit 1n HCl und gesättigter NaHCO.,-Lösung gewaschen, über wasserfreiem Na₇SO₄ getrocknet und eingedampft. Dadurch werden 9 mg 11-Acetyl-14-desoxy-14-/(2-desoxy-2-acetamido-3,4,ö-tri-O-acetyl-alpha-D-glucopyranosyl)oxyacetoxy_/-1 9,20-dihydromutilin erhalten.

Beispiel 11

Herstellung von 1 4-Desoxy-14-_/(2-desoxy-2-amino-alpha-D-galactopyranosyl) oxyacetoxy_/-1 9 , 20-dihydromutilin.

566,6 mg (1,02459 mmol) 14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-(hydroxyimino)-alpha-D-galactopyranosyl)oxyacetoxy/mutilin

²°- 209 624

(hergestellt nach Beispiel 8) werden in 25 ml Ethanol gelöst. Nach Zugabe von 333 mg 5. % Palladium tragender Kohle und 1,2 ml 1n HCl wird etwa 4 Tage bei Zimmertemperatur hydriert. Nach Entfernung des Katalysators wird das Filtrat im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird wenigstens 4 Stunden einem Hochvakuum unterworfen, wodurch 606,7 mg Rohprodukt als weißer Schaum erhalten werden. Dieses Rohprodukt wird durch Chromatographie an einer Kieselgelsäule mit einem Durchmesser von 2,7 cm (150 g, Merck) unter Verwendung von CH₃CNiH₂O (9:1) weiter gereinigt, wobei Fraktionen mit einem Volumen von etwa 4 ml in Abständen von· 30 Minuten aufgefangen werden. Der Verlauf wird durch Kieselgel-TLC unter Verwendung des gleichen Lösungsmittelsystems und von Iod zum.Nachweis verfolgt. Die Fraktionen werden im Vakuum zur Trockne eingedampft. Die Fraktionen 371 bis 420 werden vereinigt, wodurch 33,2 mg 14-Desoxy-14-/^(2-desoxy-2-amino-alpha-D-galactopyranosyl) oxyacetoxy_/-1 9,20-dihydromutilin erhalten werden.

Beispiel 12

Herstellung von 14-Desoxy-14-/(2,3,4,6-tetra-0-acetyl-ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin

Eine Lösung von 577,3 mg Iodpleuromutilin (hergestellt nach Beispiel 3 der US-PS 3 979 423) in" 2 ml Aceton wird zu einer Lösung von 428,8 mg 2,3,4,6-Tetra-0-acetyl-ß-D-glucopyranosylmercaptan in 2 ml Aceton gegeben. Das Reaktionsgemisch wird unter Rühren mit einer Lösung von 168,4 mg K₃CO., in 1 ml Wasser versetzt, und das Rühren wird bei Zimmertemperatur noch 30 Minuten fortgesetzt, Dann wird das Reaktionsgemisch in 25 ml entionisiertes Wasser gegossen, und die wäßrige Lösung wird mit

- 21 - 209 624

extrahiert. Die CH-Cl„-Lösung wird "über Na₃SO₄ getrocknet, filtriert und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird 1,5 Stunden unter einem Hochvakuum getrocknet, wodurch 989,7 mg 14-Desoxy-14-/(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin erhalten werden.

Beispiel 13

Herstellung von 14-Desoxy-1 A-/_(2 , 3 ,4 , 6-tetra-O-acetyl-ß-D-glucopyranosyl.) thioacetoxy_/-1 9, 20-dihydromutilin

611 mg 14-Desoxy-14-_/ (2 , 3,4 ,6-tetra-O-acetyl-ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin (hergestellt nach Beispiel 12) werden in 55 ml Ethanol gelöst und mit 495 mg 5 % Palladium-auf-Kohle versetzt. Das Reaktionsgemisch wird etwa 10 Stunden hydriert und dann durch einen Glassintertrichter mit einer Celiteschicht filtriert. Das Filtrat wird im Vakuum zur Trockne eingedampft und nach Zugabe einer kleinen Menge CHCl₃ wiederum eingedampft, wodurch 500 mg 14-Desoxy-14-/(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-ß-D-glucopyranosyl)thioacetoxY/-19,20-dihydromutilin als weißer Schaum erhalten werden.

Beispiel 14

Herstellungvon 14-Desoxy-14-/(ß-D-glucopyranosyl)-thio-

acetoxy_/mutilin

529,8 mg,14-Desoxy-14-/(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin (hergestellt nach Beispiel 13) werden in 50 ml Methanol gelöst. Nach Zugabe von 50 ml Wasser und 50 ml (C-Hj-J^N wird die gebildete

-22- 209 624

Lösung 3 Tage bei Zimmertemperatur gerührt und dann im Vakuum zur Trockne eingedampft, wobei auch alle Spuren des Lösungsmittels entfernt werden. Durch Eindampfen des mit CHCl₃ aufgenommenen Rückstands werden 492 mg Rohprodukt erhalten.

Dieses Produkt wird durch Chromatographie an einer Kieselgelsäule mit einem Durchmesser von 2 cm (150 g, Merck) weiter gereinigt, wobei mit Ethylacetat/Ethanol (9:1) eluiert wird und Fraktionen mit einem Volumen von etwa 6 ml in Abständen von 30 Minuten aufgefangen werden. Die Zusammensetzung der Fraktionen wird durch Kieselgel-TLC unter Verwendung des gleichen Lösungsmittelsystems und Iod zum Nachweis überwacht. Die Fraktionen 28 bis 120 werden vereinigt und eingedampft; wodurch 366 mg 14-Desoxy-1 A-/_(ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin erhalten werden.

Beispiel 15

Herstellung von 14-Desoxy-14-/(ß-D-glucopyranosyl)-thio-

acetoxy_/-1 9 ,20-dihydromutilin

465/5 mg 1 4-Desoxy-1 4-/(ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/-mutilin (hergestellt nach Beispiel 14) werden in 100 ml warmem Tetrahydrofuran gelöst. Nach Zugabe von 250 mg 5 % Palladium tragender Kohle wird die Mischung 7 Stunden bei Zimmertemperatur hydriert. Dann wird durch einen Glassintertrichter mit einer Celitschicht filtriert und das Filtrat im Vakuum zur Trockne eingedampft. Man erhält so 500 mg 14-Desoxy-14-/(ß-D-glucopyranosyl)thioacetoxy_/-1 9, 20-dihydromutilin. .

209 624

- 23 Beispiel 16

A. Herstellung von 2,3,4-Tri-0-acetyl-1-thiouronium-ß-D-. ' '-' ' xylopyränose-hydrobromid

1,3 g (3,83 mmol) 2,3,4-Tri-O-acetyl-alpha-D-xylopyranosylbromid (hergestellt nach "Methods of Carbohydrate Chemistry," Bd. 1, Academic Press, New York, N.Y., 1962, S. 183) werden in 3 ml Aceton gelöst und mit 330 mg (4,33 mmol) Thioharnstoff versetzt. Nach Zugabe weiteren Acetons (etwa 3 ml) wird die gebildete Lösung etwa 20 Minuten zum Sieden unter Rückfluß erwärmt (Ölbad von 70 ⁰C). Nach Abkühlen des Reaktionsgemisches in einem Eisbad kristallisiert das Produkt aus. Die Kristalle werden abfiltriert, mit einer möglichst kleinen Menge Aceton gewaschen und getrocknet, wodurch 849 mg'2,3,4-Tri-0-acetyl-1-thiouronium-ß-D-xylopyranosehydrobromid vom F. = 174 bis 175 ⁰C erhalten werden.

B. Herstellung von 2,3,^-Tri-O-acetyl-i-thio-ß-D-xylopyra-

· · ·. nose

5 ml Wasser und 5 ml CCl. werden zu 608,4 mg (1,466 mmol) 2,3 ,4~Tri-0-acetyl-1~thiouronium-ß-D-xylopyranosehydrobromid (hergestellt nach Abschnitt A) und 218 mg (1,14 mmol) Na-S-Oc gegeben. Das Reaktionsgemisch wird 40 Minuten zum Sieden unter Rückfluß erwärmt und dann auf Zimmertemperatur abgekühlt. Die CCl.-Schieht wird abgetrennt, und die wäßrige Schicht wird zweimal mit je 10 ml CCl. gewaschen. Die CCl.-Fraktionen werden-vereinigt, über wasserfreiem Na2S0^ getrocknet, filtriert und im Vakuum eingedampft, wodurch 212,9 mg 2,3,4-Tri-0-acetyl-1-thio-ß-D-xylopyranose als gelbes öl erhalten werden. Durch weitere Reinigung dieses Präparats an einer Kieselgelsäule werden 132,3 mg eines Öls erhalten, das kristallisiert (F = 117 bis 122 ⁰C). Bei späteren Ansätzen ist diese chromatographische Reinigung nicht erforderlich, denn das Produkt kristallisiert direkt nach Animpfen.

C. Herstellung von 14-Desoxy-14-/2,3,4-tri-O-acetyl-ß-D-xylopyranosyl)thioacetoxy/mutilin

1,46 g (5 mmol) 2,3^-Tri-O-acetyl-i-thio-ß-D-xylopyranose (hergestellt nach Abschnitt B) werden in 10 ml Aceton gelöst. Nach Zugabe von 2,48 g (5,08 mmol) Iodpleuromutilin in 10 ml Aceton wird das Reaktionsgemisch unter Rühren mit einer Lösung von 721 mg (5,19 mmol) K₂CO₃ in 5 ml Wasser versetzt. Die gebildete Lösung wird noch 20 Minuten bei Zimmertemperatur gerührt und dann in 100 ml entionisiertes Wasser gegossen. Anschließend wird mit CH₇Cl₇ extrahiert, und die .CH,,CI₀-Lösung wird über wasserfreiem Na₀SO₄ getrocknet, filtriert, im Vakuum zur Trockne eingedampft und im Hochvakuum 8 Stunden weiter getrocknet. Dadurch werden 3,8246 g Produkt als weißer Schaum erhalten, der aus diethylether/Hexan oder Diethylether/Ethylacetat kristallisiert; F = 91 bis 97 ⁰C.

Beispiel 17

Herstellung von 14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-O-acetyl-ß-D-xylopyranosyl)thioacetoxy_/-19,20-dihydromutilin

523 mg 14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-O-acetyl-ß-D-xylopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin (hergestellt nach Beispiel 16) werden in 20 ml Ethanol gelöst. Nach Zugabe von 216 mg 5 % Palladium-auf-Kohle wird die Mischung 11,5 Stunden bei Zimmertemperatur hydriert. Das Reaktionsgemisch wird durch eine Celiteschicht filtriert, und das Filtrat wird im Vakuum eingedampft. Man erhält so 44 6 mg 14-Desoxy-14-/(2 ,3,4-tri-O-acetyl-ß-D-xylopyranosyl) thioacetoxy_/-19,20-dihydromutilin.

-25- 209 624

Beispiel 18

Herstellung von 14-Desoxy-14-/(ß~D-xylopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin

1,5954 g 14-Desoxy-14-_/(2,3,4-tri-O-acetyl-ß-D-xylopyranosyl)thioacetoxy/mutilin (hergestellt nach Beispiel 16) werden in 60 ml Methanol gelöst und mit 50 ml Wasser und 55. ml (C₉H₁.)-,^N versetzt. Das erhaltene Reaktionsgemisch wird 2 Tage bei Zimmertemperatur gerührt und dann im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird erneut in CHCl., gelöst und wieder eingedampft, was etwa viermal durchgeführt wird. Der Rückstand wird im Hochvakuum etwa 4 Stunden getrocknet, wodurch 1,79 g Rohprodukt erhalten werden.

Dieses Produkt wird durch Chromatographie an einer Kieselgelsäule mit einem Durchmesser von 2,7 cm (200 g, Merck) gereinigt, wobei mit Ethylacetat/Ethanol (9:1) eluiert wird und Fraktionen mit einem Volumen von etwa 5 ml in Abständen von 20 Minuten aufgefangen werden. Die Zusammensetzung der Fraktionen wird durch Kieselgel-TLC unter Verwendung des gleichen Lösungsmittelsystems und von Iod zum Nachweis verfolgt. Die Fraktionen 38 bis 60 werden vereinigt und im Vakuum eingedampft, wodurch 1,2066 g 14-Desoxy-14-/(ß-D-xylopyranosyl)thioacetoxy/mutilin erhalten werden.

209 624

Beispiel 19

Herstellung von 14-Desoxy-14-/(ß-D-xylopyranosyl) thioacetoxy/-19,20-dihydromutilin

285 mg 1 4-Desoxy-14-/ (ß-D-xylopyranosyl) thioacetoxy/- mutilin (hergestellt nach Beispiel 18) werden in 10 ml Ethanol gelöst und mit 145 mg 5 % Palladium-auf-Kohle versetzt. Die erhaltene Mischung wird 7 Stunden bei Zimmertemperatur hydriert und dann durch Celite filtriert. Eindampfen des Filtrats ergibt einen weißen Schaum, der 30 Minuten unter einem Hochvakuum weiter getrocknet wird, wodurch das Produkt in quantitativer Ausbeute erhalten wird. 7,75 g in gleicher Weise hergestelltes Produkt werden aus 15 ml Ethylacetat umkristallisiert und ergeben 5,87 g 14-Desoxy-14-/(ß-D-xylopyranosyl) thioacetoxy/- 1 9,20-dihydromutilin vom F. = 93 bis 95 ⁰C.

Beispiel 20

Herstellung von 14-Desoxy-14-/2,3,4-tri-O-acetyl-ß-D* arabinopyranosyl)thioacetoxy/mutilin

3,177 g (0,0109 mol) 2,3,4-Tri-0-acetyl-1-thio-ß-D-arabinose (hergestellt nach den Abschnitten A und B des Beispiel 16) werden in 20 ml Aceton gelöst und mit einer Lösung von 5,31 g (0,0109 mol) Iodpleuromutilin in 20 ml Aceton vermischt. Dann werden 1,506 g (0,0109 mol) K₂CO-. in 10 ml Wasser zugegeben. Die gebildete Lösung wird 30 Minuten bei Zimmertemperatur gerührt und dann in 100 ml Wasser gegossen. Die wäßrige Lösung ird dreimal mit je 50 ml CH-Cl- extrahiert. Die CH₂C1₂-Extrakte werden vereinigt, über wasserfreiem Na₃SO₄

209 624

getrocknet und filtriert. Das Filtrat wird im Vakuum zur Trockne eingedampft, wodurch 7,1 g Rohprodukt erhalten werden.

Dieses Produkt wird durch Hochleisutngsflüssigkeitschromatographie (HPLC; Waters¹ Associates Prep. LC/Systern 500) weiter gereinigt, wobei mit Toluol/Ethylacetat (1:1) mit einer Strömungsgeschwindigkeit von 250 ml/Minute eluiert wird und Fraktionen mit einem Volumen von 250 ml aufgefangen werden. Der Gehalt der Fraktionen wird durch Kieselgel-TLC unter Verwendung von Toluol/Ethylacetat (1:1) als Lösungsmittel und von Iod zum Nachweis verfolgt. Die Fraktionen 17 bis 22 enthalten die größte Menge an gereinigtem Produkt. Diese Fraktionen werden vereinigt und im Vakuum eingedampft, wodurch 4,989 g 14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-O-acetyl-ß-D-arabinopyranosyl)thioacetoxy/mutilin erhalten werden.

Beispiel 21

Herstellung von 14-Desoxy-14-/(2,3, 4-tri-O-acetyl-ß-D-arabinopyranosyl) thioacetoxy;/-1 9, 20-dihydromutilin

100 mg 14-Dasoxy-14-/2,3,4-tri-O-acetyl-ß-D-arabinopyranosyl)thioacetoxy/mutilin (hergestellt nach Beispiel 20) werden in 10 ml wasserfreiem Ethanol gelöst. Nach Zugabe von 25 mg 5 % Palladium-auf-Kohle wird das Reaktionsgemisch über Nacht hydriert und dann zur Entfernung des Katalysators durch Celite filtriert. Durch Verdampfen des Lösungsmittels im Vakuum werden 100,5 mg 14-Desoxy-14-/ (2,3,4-tri-O-acetyl-ß-D-arabinopyranosyl) thioacetoxy_/-19,20-dihydromutilin erhalten.

209 624

Beispiel 22

Herstellung von 14-Desoxy-14-/(ß-D-arobinopyranosyl)thio-

acetoxy/mutilin

1 g 14-Desoxy-14-/(2_/3_f4-tri-O-acetyl-ß-D-arabinopyranosyl)thioacetoxy/mutilin (hergestellt nach Beispiel 20) wird in 50 ml Methanol gelöst. Nach Zugabe von 50 ml Wasser und dann von 50 ml Triethylamin wird die erhaltene Lösung 48 Stunden bei Zimmertemperatur gerührt. Durch Verdampfen des Lösungsmittels im Vakuum wird ein Rohprodukt erhalten. Dieses Produkt wird durch HPLC wie in Beispiel 20 beschrieben weiter gereinigt, wobei mit einem stufenweise abgeänderten Lösungsmittel (von Ethylacetat bis•Ethylacetat/95-prozentiges Ethanol (9:1) eluiert wird. Es werden 0,62 g 14-Desoxy-14-/(ß-D-arabinopyranosyl) thioacetoxy/mutilin erhalten.

Beispiel 23

Herstellung von 14-Desoxy-14-/(ß-D~arabinopyranosyl) thioacetoxy_/-1 9,20-dihydromutilin

100 mg 1 4-Desoxy-14-/(ß-D-arabinopyranosyl) thioacetoxy_/-mutilin (hergestellt nach Beispiel 22) werden 24 Stunden nach der in Beispiel 21 beschriebenen Arbeitsweise hydriert, wodurch 100 mg 1 4-Desoxy-1 ^-[_(ß-D-arabinopyranosyl) thioacetoxy/-19,20-dihydromutilin erhalten werden.

- 29- 209 624

Beispiel 24

Herstellung von 14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-O-acetyl-ß-L-arabinopyranosyl)thioacetoxy/mutilin

4,636 g (O₇OO95 mol) Io.dpleuromutilin werden mit 2,76 g (0,0095 mol) 2,3,4-Tri-0-acetyl-1-thio-L-arabinose nach der in Beispiel 20 beschriebenen Arbeitsweise umgesetzt, wdurch 6,265 g Rohprodukt erhalten werden, das durch HPLC wie in Beispiel 20 beschrieben unter Verwendung eines abgestuften Lösunsmittels von 4 1 Toluol bis 4 1 Toluol/Ethylacetat (1:1) gereinigt wird. Es werden 3,53 g 14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-0-acetyl-ß-L-arabinopyranosyl)thioacetoxy/mutilin erhalten.

Beispiel 25

Herstellung von 14-Desoxy-14-/(ß-L-arabinopyranosyl)thio-. . acetoxy_/mutilin

T g 14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-O-acetyl-ß-L-arabinopyranosyl)thioacetoxy/mutilin (hergestellt nach Beispiel 24) wird nach der in Beispiel 22 beschriebenen Arbeitsweise entacyliert, wodurch 1,09 g Rohproudkt erhalten wird. Dieses Produkt wird durch HPLC unter Verwendung eines abgestuften Lösungsmittels von 4 1 Ethylacetat bis 4 Ethylacetat/Ethanol (9:1) gereinigt, wodurch 0,6862 g 14-Desoxy-14-/(ß-L-arabinopyranosyl)thioacetoxv/mutilin erhalten werden.

_ 209 624

Beispiel 26

14-Desoxy-14-/(2, 3,4-tri-O-acetyl-ß-L-arabinopyranosyl) thioacetoxy_/-1 9,20-dihydromutilin wird aus 14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-O-acetyl-ß-L-arabinopyranosyl) thioacetoxy/-mütilin nach der' in Beispiel 21 beschriebenen Arbeitsweise hergestellt.

Beispiel 27

1 4-Desoxy-14-/(ß-L-arabinopyranosyl)thioacetoxy/-1 9, 20-dihydromutilin wird aus 14-Desoxy-14-/ß-L-arabinopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin nach der in Beispiel 23 beschriebenen Arbeitsweise hergestellt.

Beispiel 28

Herstellung von 1 4-Desoxy-'14-/2 ,3 , 4 , 6-tetra-0-acetylß-D-galactopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin

9,27 g (0,019 mol) Iodpleuromutilin werden mit 6,96 g (0,019 mol) 2,3,4,6-Tetra-O-acetyl-ß-D-galactopyranosylmercaptan nach der in Beispiel 12 beschriebenen Arbeitsweise umgesetzt, wodurch 14,14 g Rohprodukt erhalten werden. Dieses Produkt wird durch HPLC wie in Beispiel 20 beschrieben gereinigt, wobei ein abgestuftes Lösungsmittel von 4 1 Toluol bis 4 1 Toluol/Ethylacetat (1:1) (8 1) verwendet und der Verlauf durch TLC überwacht wird..Es werden 3,99 g 14-Desoxy-14-/(2,3,4,6-tetra-0-acetyl-ß-D-galactopyranosyl)thioacetoxy/mutilin erhalten.

Beispiel 29

Herstellung von 14-Desoxy-14-/2,3,4,6-tetra-O-acetylß-D-galactopyranosyl) thioacetoxy_/-1 9, 2Ö-dihydromutilin

200 mg 14-Desoxy-14-/(2,3,4,'6-tetra-O-acetyl-ß-D-galactopyranosyl) thioacetoxy_/rautilin (hergestellt nach Beispieles) werden 20 Stunden nach der in Beispiel 13 beschriebenen Arbeitsweise hydriert, wodurch 0,19 g 14-Desoxy-14-/(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-ß-D-galactopyranosyl) thioacetoxy_/-1 9, 20-dihydromutilin erhalten werden.

Beispiel· 30

Herstellung von 14-Desoxy-14-/(ß-D-galactopyranosyl)

thioace toxy_/mu t i 1 in

1 g 14-Desoxy-14-/2,3,4,6-tetra-O-acetyl-ß-D-galactopyranosyl)thioacetox^/mutilin (hergestellt nach Beispiel 28) wird nach der in Beispiel 14 beschriebenen Arbeitsweise entacetyliert, wodurch 1,16 g Rohprodukt erhalten werden. Dieses Produkt wird durch HPLC wie in Beispiel 20 beschrieben, jedoch unter Verwendung eines abgestuften Lösungsmittels von 4 1 Ethylacetat bis 4 1 Ethylacetat/Ethanol (9 : 1) weiter gereinigt. Dadurch werden 0,49 g 14-Desoxy-14-/(ß-D-galactopyranosyl)thioacetoxy/mutilin erhalten.

209-62

Beispiel 31

14-Desoxy-14-/ (ß-D-galactopyranosyl) thioacetoxy_/-19 ,20-dihydromutilin wird aus ^-Desoxy-^-Ziß-D-galactopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin nach der in Beispiel 15 beschriebenen Arbeitsweise hergestellt.

B e i s ρ i e 1 32

14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-0-acetyl-ß-L-xylopyranosyl)thioacetoxy_/mutilin wird nach der in Beispiel 16 beschriebenen Arbeitsweise, jedoch ausgehend von L-Xylose hergestellt. In der Endstufe werden 31 g Iodpleuromutilin mit 19 g 2,3,4-Tri-p-acetyl-i-thio-ß-L-xylose umgesetzt. Die so erhaltenen 39,6 g Rohprodukt werden durch HPLC wie in Beispiel 20 beschrieben, jedoch unter Verv/endung eines abgestuften Lösungsmittelsystems (8 1) von Toluol bis Toluol/Ethylacetat (7:3) gereinigt. Die gereinigten Fraktionen kristallisieren aus Toluol/Ethylacetat, und es werden 21,05 g 14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-0-acetylß-L-xylopyranosyl)thioacetoxy/mutilin, F. =210 bis 213 ⁰C₇ erhalten.

Beispiel 33

14-Desoxy-14-/2,3,4-tri-O-acetyl-ß-L-xylopyranosyl)thioacetoxy_/-19,20-dihydromutilin wird aus 2,56 g 14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-O-acetyl-ß-L-xylopyranosyl)thioacetoxv/-mutilin (hergestellt nach Beispiel 32) nach der in Beispiel 19 beschriebenen Arbeitsweise hergestellt. Es werden 2,23 g Produkt erhalten.

209 624

Beispiel 34

14-Desoxy-1 4-V (ß-L-xylopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin wird aus 15,8 g 14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-O-acetoyl-ß-L-xylopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin (hergestellt nach Beispiel 32) nach der in Beispiel 18 beschriebenen Arbeitsweise hergestellt. Es werden 14,3 g Produkt als weißer Schaum erhalten.

Beispiel 35

14-Desoxy-1 4-/(ß-L-xylopyranosyl) thioacetoxy_/-1 9, 20-dihydromutilin wird aus 7 g 14-Desoxy-14-/(ß-L-xylopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin (hergestellt nach Beispiel 34) nach der in Beispiel 19 beschriebenen Arbeitsweise hergestellt. Es werden 6,3 g Produkt als weißer Schaum erhalten.

Beispiel 36 A. Herstellung von Pleuromutilinthiouronium-hydroiodid

46,8 g Iodpleuromutilin werden in 300 ml Aceton gelöst und mit 7,418 g Thioharnstoff und weiteren 60 ml Aceton versetzt. Das erhaltene Reaktionsgemisch wird in einem Ölbad von 90 °C etwa 30 Minuten zum Sieden unter Rückfluß erwärmt. Nach Abkühlenlassen auf Zimmertemperatur wird das Reaktionsgemisch im Vakuum zur Trockne eingedampft, wodurch 60 g 14-Desoxy-14-(thiouronium-acetoxy) mutilin-hydroiodid, das im folgenden als Pleuromutilinthiouronium-hydroiodid bezeichnet wird, als weiße amorphe Verbindung erhalten werden.

B. Herstellung von Pleuromutilinthiol

60 g des wie in Abschnitt A beschrieben hergestellten Pleuromutilinthiouronium-hydroiodid werden in 200 ml.Wasser und zur vollständigen Lösung ausreichendem warmem Methanol gelöst. Eine Lösung von 23 g Na₃S₃O₁- in 100 ml Wasser und 150 bis 200 ml CCl. wird zu dieser Lösung gegeben. Das erhaltene Reaktionsgemisch wird etwa 30 Minuten in einem Ölbad von 80'bis 90 ⁰C zum Sieden unter Rückfluß erwärmt. Die Chloroformschicht wird abgetrennt, über wasserfreiem Na₃SO₄ getrocknet und zur Trockne eingedampft, wodurch 32,5 g Pleuromutilinthiol als weißer amorpher Stoff erhalten werden.

C. Herstellung der alpha- und ß-Anoraeren von 14-Desoxy-14-/(2,3, 4-tri-O-acetyl-D-ribopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin

7,53 g (19,1 mmol) des wie in Abschnitt B beschrieben hergestellten Pleuromutilinthiols werden in 100 ml CHCl- gelöst und mit 6,19 g (19,46 mmol) Tetra-O-acetyl-ribopyranose versetzt. Nach Zugabe von 9 ml BF-.-Etherat wird das Reaktionsgemisch etwa 2 1/2 Stunden bei Zimmertemperatur gerührt und dann im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der so erhaltene Rückstand wird in CHCl-. erneut gelöst und zweimal mit einem gleichen Volumen Wasser gewaschen. Die CHCl...-Schicht wird abgetrennt, über wasserfreiem Na₃SO₄ über Nacht getrocknet und dann im Vakuum zur Trockne eingedampft, wodurch 13 g einer Mischung der alpha- und ß-Anomeren von 14-Desoxy-14- JjL , 3 , 4-tri-O-acetyl-D-ribopyrariosyl) thioacetox^/mutilin erhalten werden. Dieses Rohprodukt wird durch HPLC nach der in Beispiel 20 beschriebenen Arbeitsweise unter Verwendung eines abgestuften Lösungsmittels von 4 1 Toluol bis 4 1 Toluol/Ethylacetat (3:1) und dann von 4 1 Toluol/Ethylacetat (3:1) und schließlich von 2 1 Ethylacetat weiter gereinigt. Passende Fraktionen aus dieser HPLC werden durch

.209 624

eine weitere HPLC unter Verwendung von 4 1 Toluol und dann eines abgestuften Lösungsmittels von 4 1 Toluol bis 4 1 Toluol/Ethylacetat (4:1) weiter gereinigt. Wiederum werden passende Fraktionen vereinigt, wodurch ein gereinigtes Produkt erhalten wird. Dieses Produkt (immer noch eine Anomerenmischung) wird an einer Kieselgelsäule mit einem Durchmesser von 3,J5-cm weiter gereinigt, wobei ein Tolüol/Isobutylalkohol(9:1)-Lösungsmittelsystem verwendet wird und Fraktionen mit einem Volumen von etwa 5 ml in Abständen von 30 Minuten aufgefangen werden. Der Fraktionengehalt wird ebenfalls durch TLC verfolgt. Es werden 307,3 mg des alpha-Anomeren und 1,32 g des ß-Anomeren isoliert.

Beispiel 37

14-Desoxy-14-/(alpha-D-ribopyranosyl)thioacetoxy/mutilin wird aus 14-DeSOXy-^-/(2,3,4-tri-O-acetyl-alpha-D-ribopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin (hergestellt nach Beispiel 36) nach dem in Beispiel 15 beschriebenen Verfahren hergestellt.

Beispiel 38

14-Desoxy-14-/(ß-D-ribopyranosyl)thioacetoxy/-mutilin wird aus 14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-O-acetyl-ß-D-ribopyra-.nosyl)thioacetoxy/mutilin (hergestellt nach Beispiel-36) nach der in Beispiel 15 beschriebenen Arbeitsweise hergestellt. . .

Beispiel 39

14-Desoxy-14-y (alpha-D-ribopyranosyl) thioacetoxy_/-1 9,20-dihydromutilin wird aus ^-Desoxy-^-Z^alpha-D-ribopyranosyl.) thioacetoxy_/mutilin (hergestellt nach Beispiel 37) nach dem in Beispiel 19 beschriebenen Verfahren hergestellt.

Beispiel 40

14-Desoxy-1 4-_/ (ß-D-ribopyranosyl) thioacetoxy_/-1 9, 20-dihydromutilin wird aus 14-Desoxy-1 A-/_(ß-D-ribopyranosyl)-thioacetoxy_/mutilin (hergestellt nach Beispiel 38) nach der in Beispiel 19 beschriebenen Arbeitsweise hergestellt.

Beispiel 41

Herstellung der alpha- und ß-Anomeren von 14-Desoxy-14-/_(2 ,3, 5-tri-O-acetyl-D-ribof uranosyl) thioacetoxy/mutilin

6,5 g (16,49 mmol) des wie in Beispiel 36, Abschnitt B, beschrieben hergestellten Pleuromutilinthiols werden in 150 ml Chloroform gelöst und mit 6,9 g (21,69 mmol) Tetra-O-acetyl-ß-D-ribofuranose versetzt. Zu der erhaltenen Lösung werden allmählich 10 ml BF₃~Etherat gegeben. Die Umsetzung wird nach der in Beispiel 36, Abschnitt C, beschriebenen Arbeitsweise durchgeführt, und es werden 10 g Rohprodukt, das eine Anomerenmischung darstellt, erhalten.

Diese Mischung wird wie in Beispiel 20 durch HPLC unter Verwendung von zunächst 8 1 eines abgestuften Lösungsmittels von Toluol bis Toluol-Ethylacetat (3:1) und dann von 8 1 eines abgestuften Lösungsmittels von Toluol/Ethylacetat (3:1) bis Toluol/Ethylacetat (1:3) getrennt, wodurch

209 624

1,6589 g gereinigtes Rohprodukt erhalten werden. Dieses Produkt wird an einer Kieselgelsäule mit 2,5 cm Durchmesser (225 g, Merck) unter Verwendung von Toluol/Isobutylalkohol (9:1) als Lösungsmittelsystem chromatographiert, wobei Fraktionen mit einem Volumen von 3 ml' in Abständen von 30 Minuten aufgefangen werden. Die Fraktionen 205 bis 250 werden vereinigt und im Vakuum eingedampft, wodurch 0,494 g weiter gereinigtes Material erhalten' werden. Dieses Material wird erneut an einer anderen Kieselgelsäule und unter Anwendung der gleichen Bedingungen chromaotgraphiert. Die Fraktionen 209 bis 215 werden vereinigt und im Vakuum eingedampft, wodurch 56 mg 14-Desoxy-14-/(2,3,5-tri-0-acetyl-alpha-D-ribof uranosyl) thioacetoxy_/mutilin erhalten werden. Durch Vereinigung der Fraktionen 248 bis 260 in gleicher.Weise werden 28 mg 14-Desoxy-14-/2,3,5-tri-O-acetyl-ß-D-ribofuranosyl) thiacetoxy_/mutilin erhalten.

Beispiel 42

14-Desoxy-14-/(2,3,S-tri-O-acetyl-alpha-D-ribofuranosyl) thioacetoxyj/-1 9 , 20-dihydromutilin wird aus 14-Desoxy-14-/(2,3, 5-tri-O-acetyl-alpha-D-ribofuranosyl·) thioacetoxy_/-mutilin (hergestellt nach Beispiel 41) nach der in Beispiel 17 beschriebenen Arbeitsweise hergestellt.

Beispiel 43

14-Desoxy-14-/(2,3,5-tri-O-acetyl-ß-D-ribofuranosyl)-thioacetoxy_/-1 9,20-dihydromutilin wird aus 14-Desoxy-1 4-/(2 ,3,5-tri-O-acetyl-ß-D-ribof uranosyl) thioacetoxy_/-mutilin (hergestellt nach Beispiel 41) nach der in Beispiel 17 beschriebenen Arbeitsweise hergestellt.

Beispiel 44

14-Desoxy-1 4-/ (alpha-D-ribof uranosyl) thioacetoxy_/mutilin wird aus 14-Desoxy-14-/(2,3,5-tri-O-acetyl-alpha-D-ribof uranosyl) thioacetoxy_/mutilin (hergestellt nach Beispiel 41) nach der Arbeitsweise von Beispiel 18.hergestellt.

Beispiel 45

14-Desoxy-14-/(ß-D-ribofuranosyl)thioacetoxv/mutilin wird aus 14-Desoxy-14-/(2,3,5-tri-O-acetyl-ß-D-ribofuranosyl) thioacetoxy_/mutilin (hergestellt nach Beispiel 41) nach der in Beispiel 18 beschriebenen Arbeitsweise hergestellt.

Beispiel 46

14-Desoxy-14-/(alpha-D-ribofuranosyl)thioacetoxv_/-19,20-dihydromutilin wird aus 14-Desoxy-14-_/(alpha-D-ribof uranosyl) thioacetoxy_/mutilin (hergestellt nach Beispiel 44) nach der Arbeitsweise von Beispiel 19 hergestellt.

Beispiel 47

14-Desoxy-1 4-/(ß-D-ribof uranosy 1) thioacetoxy_/-1 9, 20-dihydromutilin wird aus 14-Desoxy-14-/(ß-D-ribofuranosyl)-thioacetoxy/mutilin (hergestellt, nach Beispiel 45) nach der Arbeitsweise von Beispiel 19 hergestellt.

- 39 - 209 624

Beispiel 48

Herstellung von 14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-(N,N-dimethylamino) -3,4, ö-tri-O-acetyl-ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/

mutilin

Zu einer Lösung von 10,8 g (0,05 mol) D-Glucosamin-hydrochlorid in 250 ml Wasser werden 250 ml einer 37-prozentigen wäßrigen Formaldehydlösung und 5 g 10 % Palladium-auf-Kohle gegeben. Die erhaltene Mischung wird bis zum Erreichen der theoretischen Wasserstoffaufnahme für die Überführung in 2-Desoxy-2-(N,N-dimethylamino)-D-glucosamin hydriert. Der Katalysator wird abfiltriert, und das Filtrat wird lyophylisiert. Das erhaltene Produkt wird mit Essigsäureanhydrid und Pyridin zu dem entsprechenden Tetra-O-acetylderivat acetyliert. Dieses Derivat wird in 2-Desoxy-2-(Ν,Ν-dimethylaminö)-3,4,6-tri-O-acetyl-D-glucopyranosylbromid übergeführt, das dann nach der in Beispiel 16 beschriebenen Arbeitsweise in das entsprechende 1-Mercaptoderivat übergeführt wird. Das gewünschte Produkt wird durch Kupplung der 2-pesoxy-2-(N,N-dimethylamino)-3,4,6-tri-0-acetyl-1-thio-D-glucopyranose mit Iodpleuromutilin nach der in Beispiel 16, Abschnitt C, beschriebenen Arbeitsweise erhalten.

Beispiel 49

14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-(Ν,Ν-dimethylamirio)-3,4,6-tri-0-acetyl-ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/-1 9, 20-dihydromutilin wird aus 14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-(N,N-dimethylamino)-3,4,6-tri-O-acetyl-ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin (hergestellt nach Beispiel 48) nach der Methode von Beispiel 17 hergestellt.

Beispiel 50

14-Desoxy-14-/(2~desoxy-2-(N,N-dimethylamino)-ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin wird aus 14-Desoxy-14--/(2-desoxy-2-(Ν,Ν-dimethylamino) -3,4, 6-tri-0-acetyl-ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin (hergestellt nach Beispiel 48) nach der Methode von.Beispiel 18. hergestellt.

Beispiel 51

1 4-Desoxy-1 4-_j/(2-desoxy-2- (Ν,Ν-dimethylamino)-ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/~1 9,20-dihydromutilin wird aus 14-Desoxy-14-j/(2-desoxy-2-(Ν,Ν-dimethylamino) -ß-D-glucopyranosyl )-thioacetoxy_/mutilin (hergestellt'nach Beispiel 50) nach der Methode von Beispiel 19 hergestellt.

Beispiel 52

Herstellung von 14-Desoxy-14-/(4-0-(2,3,4,6-tetra-0-acetyl-alpha-D-glucopyranosyl)-2,3,6-tri-O-acetyl-ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin

Diese Verbindung, die im folgenden als das Heptaacetylthiomaltose-derivat bezeichnet.wird, wird nach der in Beispiel 16 beschriebenen Arbeitsweise hergestellt mit der Ausnahme, daß als Ausgangsmaterial Maltose-octa-O-acetat verwendet wird. Maltose-octa-O-acetat wird wie in Methods, Bd. 1, S. 334 bschrieben hergestellt. Hieraus wird Hepta-O-acetylmaltosebromid nach der Arbeitsweise von Finan und Warren, J. Chem. Soc. 1962, 2823, hergestellt. 8,6 g Iodpleuromutilin werden mit 11,8 g Hepta-O-acetylmaltosethiol (hergestellt in Analogie zu der in Beispiel 16, Abschnitt A und B, beschriebenen Arbeitsweise) nach der Arbeitsweise von Beispiel 16, Abschnitt C, umgesetzt, wodurch 17g Produkt als weißer Schaum erhalten werden. Dieses Produkt wird einer weiteren Reinigung durch HPLC unter Verwendung von 8 1 eines abgestuften Lösungsmittels von Ethylacetat bis Ethylacetat/Ethanol (1:1) unterworfen, wodurch 1,12 g des Heptaacetylthiomaltosederivats erhalten werden.

4! - 209 624

Beispiel 53

14-Desoxy~14-/4-0-(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-alpha-D-glucopyranosyl)-2,3,G-tri-O-acetyl-ß-D-glucopyranosyl)thioacetoxy/-19,20-dihydromutilin, das im folgenden als Dihydroheptaacetylthiomaltosederivat bezeichnet wird, wird durch Reduktion von 330 mg des Heptaacetylthiomaltosederivats nach der Arbeitsweise von Beispiel 17 hergestellt. Es werden 334,5 mg des Dihydroheptaacetylthiomaltosederivats erhalten.

Beispiel 54

14-Desoxy-14-/(4-0-(alpha-D-glucopyranosyl)-ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin, das im folgenden als das Thiomaltosederivat bezeichnet wird, wird durch Entacylierung von 1,1 g des Heptaacetylthiomaltosederivats nach der in Beispiel 18 beschriebenen Arbeitsweise hergestellt. Dabei werden 1,1 g Rohprodukt als blaßgelber Rückstand erhalten. Dieses Produkt wird durch HPCL wie in Beispiel 22 beschrieben weiter gereinigt, wodurch 732,6 mg des Thiomaltosederivats erhalten werden.

Beispiel 55

.14-Desoxy-14-/(4-0-(alpha-D-glucopyranosyl)-D-glucopy~ ranosyl) thioacetoxy_/-1 9,20-dihydromutilin, das im folgenden als Dihydrothiomaltosederivat bezeichnet wird, wird aus 266,7 mg des Thiomaltosederivats durch Reduktion nach der in Beispiel 19 beschriebenen Arbeitsweise hergestellt. Es werden 243 mg Dihydrothiomaltosederivat erhalten.

Beispiele 56-78

Die folgenden Verbindungen werden nach den in den Beispielen 1 bis 55 beschriebenen Verfahren hergestellt:

14-Desoxy-14-/(ß-D-galactopyranosyl)oxyacetoxy_/mutilin, 14-Desoxy-14-/(alpha-D-mannofüranosyl)oxyacetoxy_/mutilin,

14-Desoxy-14-/ (alpha-L-gulopyranosyl) oxyacetoxy_/1 9,20-dihydromutili.n,

14-Desoxy-14-/(ß-D-idopyranosyl)oxyacetoxy_/mutilin,

14-Desoxy-1 4-/(alpha-D-altropyranosyl) oxyacetoxy_/mutilin,

1 4-Desoxy-1 4-/ (alpha-L-rhamnopyranosyl) oxyacetoxy_/-1 9, 20-dihydromutilin,

1 4-Desoxy-1 4-/(alpha-D-fucopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin, 14-Desoxy-14-/(alpha-D-galactofuranosyl)oxyacetoxy_/mutilin,

1 4-Desoxy-1 4-/ (alpha-D-mannopyranosyl) thioacetoxy_/-1 9 , 20-dihydromutilin,

1 4-Desoxy-1 4-/(ß-D-gulopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin,

1 4-Desoxy-14-/(ß-D-idopyranosyl) thioacetoxy_/-1 9,20-dihydromutilin,

14-Desoxy-1 4-/(alpha-D-rhamnopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin,

1 4-Desoxy-1 4-/ (alpha-D-lyxopyranosyl) thioacetoxy_/-1 9 , 20-dihydromutilin, ·

14-Desoxy-14-/ (ß-D-xylopyranosyl) thioacetoxy^/mutilin,

- 209 624

14-Desoxy-14-/(2-Desoxy-2-amino-alpha-D-mannopyranosyl)-thioacetoxy/mutilin,

14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-(N-ethylamino)-alpha-D-glucopyranosyDoxyacetoxv/mutilin,

14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-(N-tert-butylamino)-ß-D-xylopyranosy 1 j thioacetoxy_/-1 9,20-dihydromutilin,

14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-(N-methy!amino)-ß-D-idopyranosyl)-oxyacetoxy_/mutilin,

14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-(N-methyl,N-ethylamino)-ß-D-xylopyranosyl) thioacetoxy_/-1 9,20-mutilin,

14-Desoxy-14-/(4-0-(ß-D-galactopyranosyl)-ß-D-glucopyranosyl)thioacetoxyy-19,20-dihydromutilin,

14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-O-butyryl-ß-D-xylopyranosyl)-thioacetox^/mutilin,

14-Desoxy-14-/(2,3,4,6-tetra-O-propionyl-ß-D-glucopyranosyl) oxyacetoxy_/-1 9, 20-dihydromutilin,

14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-(Ν,Ν-dimethylamino)-ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin,

14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-(Ν,Ν-dimethylamino)-ß-D-glucopyranosyl)thioacetox^/-19,20-dihydromutilin,

14-Desoxy-14-/2-desoxy-2-(Ν,Ν-dimethylamino)-ß-D-mannopyranosyl)thioacetox^/mutilin,

14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-(Ν,Ν-dimethylamino)-ß-D-mannopyranosyl)thioacetox^/-19,20-dihydromutilin,

14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-(Ν,Ν-dimethylamino)-ß-D-xylopyranosyl)thioacetox^/mutilin,

14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-(Ν,Ν-dimethylamino)-ß-D-xylopyranosyl)thioacetox^/-19,20-dihydromutilin.

- 44- 209 6 24

Wirksamkeit der Pleuromutilinglycosidderivate

Die Verbindungen gemäß der Erfindung hemmen oder verhindern das Wachstum von bestimmten pathogenen Organismen, insbesondere grampositiven Bakterien. Die Verbindungen werden zweckmäßigerweise gegen einen typischen grampositiven Organismus, Staphylococcus aureus, unter Anwendung einer turbidometrischen Prüfung in einem halbautomatisierten System (Autoturb Microbiological Assay System, Elanco), das von N.R.Kuzel und F. W. Kavanagh in J. Pharmaceut. Sei, 60 (5), 764 und 767 (1971) beschrieben ist, getestet. Das Testen dieser Verbindungen erfolgt unter Anwendung folgender Parameter: · Styphylococcus aureus (H-Heatley) NRRL B-314 in einem Nährmedium (pH 7), etwa 4-stündige Inkubation bei 37 ⁰C. Die Testproben und als Standard verwendeter A-40104-Faktor A werden in Wasser gelöst. Der Standard wird in Konzentrationen von 1,25, 2,50, 3,75, 5,00 und 6,25 mcg/ml eingesetzt. Die Testverbindungen werden auf einen Gehalt von etwa 2,5 bis 5,0 meg Aktivität je ml verdünnt und so bei dem Test eingesetzt. Die Aktivitätseinheiten eini-

ger der typischen Verbindungen gemäß der Erfindung (R=H bei der getesteten Gruppe) bei dieser in-vitro-Prüfung sind in Tabelle I zusammengestellt.

624

Tabelle I

Testverbindung

R¹ Aktivitätseinheiten

(mcg/mg)

Vinyl ß-D-Xylopyranosyl (Standard) 446-452

Ethyl alpha-D-Glucopyranosyl 100

Vinyl 2,3,4-Tri-0-acetyl-1-thio-ß-D-xylopyranosyl 568-579

Vinyl 1-Thio-ß-D-xylopyranosyl 995-1003

Ethyl 1-Thio-ß-D-xylopyranosyl 1150-1243

Ethyl 2,3,4,6-Tetra-O-acetyl-1-thioß-D-glucopyranosyl 203-220

Ethyl 2,3,4-0-Triacetyl-1-thio-ß-D-

xylopyranosyl 746-883

Ethyl 1-Thio-ß-D-glucopyranosyl 29-31

Vinyl ß-D-Glucopyranosyl 12-13

Vinyl 3,4,6-Tri-0-acetyl-2-desoxy-2-

(hydroxyimino)-alpha-D-glucopyranosyl 11-12

Vinyl 2,3,4,6-Tetra-0-acetyl-ß-D-glucopyranosyl

75-85

Vinyl 3,4,6-Tri-0-acetyl-2-desoxy-2-

(hydroxyimino)-alpha-D-galactopyranosyl 53-54

Vinyl 1-Thio-ß-D-glucopyranosyl

Vinyl 2,3,4,6-Tetra-0-acetyl-1-thio-ß D-glucopyranosyl 253-265

• - 46 - 209 624

Tabelle I (Fortsetzung)

m ν -, Aktivitäts-

einheiten

R ' R (mcg/mg)

Vinyl 2,3,4-Tri-O-acetyl-i-thio-alpha-

D-ribopyranosyl 50

Vinyl 2,3,4-Tri-O-acetyl-i-thio-ß-D-

ribopyranosyl 325-360

Ethyl 2,3,4-Tri-0-acetyl-1-thio-ß-D-

ribopyranosyl 480-500

Vinyl 1-Thio-ß-D-ribopyranosyl 1070

Ethyl 1-Thio-ß-D-ribopyranosyl 1500

Vinyl 2,3,4-Tri-0-acetyl-1-thio-ß-

D-ribopyranosyl 30

Vinyl 1-Thio-alpha-D-ribopyranosyl 350 Ethyl 1-Thio-alpha-D-ribopyranosyl 430-433

Vinyl 2,3,5-Tri-O-acetyl-i-thio-alpha-

D-ribofuranosyl ca. 200

Vinyl 2,3,5-Tri-O-acetyl-i-thio-ß-

D-ribofuranosyl ca. 450

Vinyl Hepta-0-acetyl~1-thiomaltose 40

Ethyl Hepta-0-acetyl-1-thiomaltose 28

Vinyl 2,3,4-Tri-0-acetyl-1-thio-ß-

D-arabinopyranosyl 430

Ethyl 2,3,4-Tri-0-acetyl-1-thio-ß-

d-arabinopyranosyl . 380

Vinyl 1-Thio-ß-D-arabinopyranosyl 380

Ethyl 1-Thio-ß-D-arabinopyranosyl 420

Ethyl 4-Desoxy-4-(dimethylamino)-ß-

D-xylopyranosyl 300

Die Pleuromutilinglycoside gemäß der Erfindung sind verhältnismäßig untoxisch. Beispielsweise liegen die LD₁. -Werte von 14-Desoxy-14^/(ß-D-xylopyranosyl)thioacetoxv/mutilin und 14-Desoxy-1 A-/_ (ß-D-xylopyranosyl) thioacetoxy/-1 9,20-dihydromutilin bei der intraperitonealen Injektion bei Mäusen bei über 1500 mg/kg und der LD₅ -Wert von 14-Desoxy-14-/(3,4,6-tri-0-acetyl-2-desoxy-2-(hydroxyimino)-alpha-D-glucopyranosyl)oxyacetoxy_/-19,20-dihydromutilin liegt, gleichfalls bei intraperitonealer Injektion bei Mäusen, bei über 300 mg/kg.

Verbindungen gemäß der Erfindung zeigen in vivo antimicrobielle Aktivität gegen experimentelle bakterielle Infektionen. Bei Verabreichung von 2 Dosen dieser Verbindungen an Mäuse mit beispielhaften Infektionen wird die beobachtete Wirksamkeit als ED₅ -Wert (wirksame Dosis in mg/kg mit der 50 % der Testtiere geschützt werden; vgl. Warren Wick, et al., J. Bacteriol. 81, 233-235, 1961) bestimmt. Die für diese Verbindungen festgestellten ED_5Q-Werte sind in den Tabelle II und III aufgeführt.

Tabelle II In Vivo-Aktivität von 14-Desoxy-14-_/(ß-D-xylopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin

Testorganismus Weg EDj-_Ax2 Infektiönserzeugung durch

Staphylococcus aureus 3055 se 1,85 82 χ LD₅ (ip)

Staphylococcus aureus 3055 oral 44 3400 χ LD_cr. (ip)

DU I

SC	1,85
oral	44
oral	32,4
SC	11,4
SC	65
SC	15,3

Staphylococcus aureus 3055 oral 32,4 500 χ LD^_n (ip) . °°

Streptococcua pyogenes C2O3 se 11,4 370 χ LD^_n (ip)

Streptococcus pneumoniae Park I se 65 42 χ LDc_n. (ip)

Streptococcus pneumoniae B1492 se 15,3 340 χ LDj. (ip)

Tabelle III

In Vivo-Aktivität von 14~Desoxy-14-y/ (ß-D-xylopyranosyl) thioacetoxy_/-19,20-dihydromutilin

Testorganismus

Staphylococcus aureus 3055 Staphylococcus aureus 3055 Staphylococcus aureus 3055 Streptococcus pyogenes C2O3 Streptococcus pneumoniae Park I Streptococcus pneumoniae B1343 Streptococcus pneumoniae B1492

Weg	ED₅₀X₂
SC	1,6
oral	29
oral	21
SC	7,0
SC	58,5
SC	16,3
SC	13,25

Infektionserzeugung durch

400 χ LD₅₀ (ip)

χ LD₅₀ (ip)

500 χ LD₅₀ (ip)

500 χ LD₅ (ip)

42 χ LD₅₀ (ip)

30 χ LD₅₀ (ip)

340 χ LD₅₀ (ip)

Die Verbindungen gemäß der Erfindung inhibieren auch das Wachstum einer Vielzahl verschiedener anaerober Bakterien, In Tabelle IV sind die Aktivitäten "beispielshafter Verbindungen gemäß der Erfindung, die durch den Standardagarverdünnungstest bestimmt wurden, zusammengestellt.

Tabelle

IV

	israelii	fragilis	MIC (mcg/ml) Verbindung 1	* 2	3	0	,0	4	,5	I 5	6	2	1°
Actinomyces	perfringens	fragilis	< 0,5 <	0,5	2		< 0		i< 0,5	>128
Clostridium	septicum	fragilis	16,0	2,0	1	.5	>128	,0	8, 0	1
Clostridium	aerofaciens		< 0,5	2,0	0		4		32,0	16	?°
Eubacterium	asaccharo-	16,0	1,0		,5 ,125	>128		4,0
Pejptococcus	prevoti			0 < 0	,125		,5 ?°		4 2	,0 7°
lyticus Peptococcus	Peptostreptococcus anaerobius	< 0« 5 < < 0,5 <	0,5 0,5	< 0		< 0 8	1°	4,0 2,0	< 0	>⁵
	Peptostreptococcus intermedius	< 0,5 <	0,5	0		1	1°	8,0	4	7O
Bacteroides	< 0,5 <	0,5		»o	2		2,0
111 Bacteroides			2			7°		2	1°
1877 Bacteroides	8,0	1,0	1		32	r0	64,0	2
1936B	4,0	1,0	1	32	1°	64,0	8
8,0	1,0		64	128

Tabelle IV (Fortsetzung)

Actinomyces israelii Clostridium perfringens Clostridium septicum Eubacterium aerofaciens

Peptococcus asaccharolyticus

Peptococcus prevoti

Peptostreptococcus an a e rob i us

Peptostreptococcus

interrnedius

Bacteroides fragilis 111

Bacteroides fragilis 1877

Bacteroides fragilis 1936B

MIC (mcg/ml)* Verbindung

8 9 10

64,0

8,0

>128 >128 >128 >128 >128 >128

64,0

8,0 128 >128

64,0 64,0

>128 >128

>128 >128 1,0

16,0 16,0

>128

>128 >128 >128

>128 >128 >128 2,0 6-4,0 64,0 16,0

2,0 <_ 0,5 >128 4,0

128

64,0

11

<_ 0,5 >128

16,0 >128

1,0

128 32,

32,0

Tabelle IV (Fortsetzung)

MIC -(meg/ml)*

Verbindung·

Bacteroides thetaiota~ omicron

Bacteroides inelaninogenicus 1856/28

Bacteroides melaninogenicus 2736

Bacteroides vulgatis Bacteroides corrodens Fusobacteriura symbiosum

Fusobacterium necrophorum <

>128

1,0

1,0 I₁O I₁O 2,0

⁰T⁵

0,5

0,25

0,5

1,0-

1,0

I₁O

64,0

8,0

4,0 32 _T0 32,0 128

64,0

2,0

4,0 32,0 64,0 16_T0

8,0.

8,0

2,0

4_r0

4,0 4,0 4,0

T a b eile IV (Fortsetzung)

	7	8	MIC (mcg/ml)* Verbindung	10	11
			9
Bacteroides thetaiota-	>128	>128		64.0 *	16.0
omicron			>128
BacteroidGS melanino-	>128	>128		>128	>128
genicus 1856/28			>128
Bacteroides melanino-	32 >128	>128 >128		32^J.O 64.0	16.0 32.0
genicus 2736 Bacteroides vulgatis	>128	>128	>128 >128	64.0	32.0
Bacteroides corrodens	•4.0	>128	>128	64.0	128
Fusobacterium symbiosum			>12-8
Fusobacterium necro-	>128	>128		,0 2.0	16.0
phoruin		64.

Endpunktablesung nach 24 Stdn. Inkubation

Tabelle IV (Fortsetzung) Verbindung Bezeichnung

1 14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-O-acetyl-ß-D-xylopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin

2 14-Desocy-14-/(ß-D-xylopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin *

3 14-DeSOXy-^-/(ß-D-xylopyranosyl) thioacetoxy_/-1 9,20-dihydromutilin

4 . 14-Desoxy-14-/(2,3, 4, ö-tetra-O-acetyl-ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/-

19,20-dihydromutilin

5 14-DeSOXy-^-/(ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/-1 9 ,20-dihydromutilin

6 14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-O-acetyl-ß-D-xylopyranosyl)thioacetoxY/-19_f20- ' dihydromutilin oi

O . I

7 14-Desoxy-14-/(3,4,6-tri-0-acetyl-2-desoxy-2-(hydroxyimino)-alpha-D-glucopyranosyl)oxyacetoxy_/mutilin

8 14-Desoxy-14-/(3,4,6-tri-0-acetyl-2-desoxy-2-(hydroxyimino)-alpha-D-glucopyranosyl)oxyacetoxy_/-19,20-dihydromutilin ' .

9 14-Desoxy-14-/(3, 4, 6-tri-0-acetyl-2-desoxy-2- (hydroxyimino) -alpha-D-galactopyranosyl)oxyacetoxy_/mutilin

14-Desoxy-14-/(ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin

14-Desoxy-14-/(2,3,4,6-tetra-0-acetyl-ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/-mutilin

Der Wirksamkeit der Verbindungen gemäß der Erfindung gegen Mycoplasmen kommt besondere Bedeutung zu. Mycoplasmaspecies sind für Menschen und verschiedene Tiere pathogen. Gegen Mycoplasmen wirksame Mittel werden besonders zur Verhütung und Behandlung von mycoplasmalen Erkrankungen von Geflügel, Schweinen und Rindern benötigt.

14-Desoxy-14-/(ß-D-xylopyranosyl)thioacetoxy/mutilin und 14-Desoxy-14-//(ß-D-xylopyranosyl) thioacetoxy_/-19 / 20-dihydromutilin beispielsweise sind bei in-vitro-Tests gegen Isolate von Ureaplasma sp., Mycoplasma bovis, Mycoplasma dispar und verschiedene andere Species von Rindermycoplasmen bereits in Mengen von 0,024 mcg/ml wirksam.

Die minimalen inhibierenden Konzentrationen (MIC) einer

Reihe verschiedener Verbindungen gemäß der Erfindung

2 (R = H bei der geprüften Gruppe) gegen verschiedene

Mycoplasmaspecies, bestimmt durch in-vitro-Brüheverdünnungsprüfungen sind in Tabelle V zusammengestellt.

Tabelle

MIC (ntcg/ml)

Test-Verbindung

Vinyl Vinyl Vinyl

Vinyl Ethyl Ethyl

Vinyl Vinyl

3,4,6-Tri-0-acetyl-2-desoxy-2-(hydroxy imino) alpha-D-glucopyranosyl

ß-D-Glucopyranosyl

2,3,4,6-Tetra-O-acetyl-ß-D-glucopyranosyl

3,4,6-Tri-0-acetyl-2-desoxy-2-(hydroxyimino)-alpha-D-glucopyranosyl

1-Thio-ß-D-xylopyranosyl 1-Thio-ß-D-xylopyranosyl

2,3,4-Tri-O-acetyl-1-thio-ß-D-xylopyranosyl

3,4,6-Tri-0-acetyl-2-desoxy-2-(hydroxyimino)-alpha-D-galactopyranosyl

2,3,4,6-Tetra-0-acetyl-1-thio-ß-D-glucopyranosyl

1-Thio-ß-D-glucopyranosyl

2,3,4,6-Tetra-O-benzyl-alpha-D-glucopyranosyl

Mycoplasma	Mycoplasma
gallisepticum	synoviae
3,12	6,25
0,39	0,78
0,78	0,78
0,78	> 6,25
0,78	0, 78
0,39	0,39
0,78	0,78
< 0,78	4. 0,78
< 0,78	1 ,56
1,56	3,12

25,0

50,0

Tabelle V (Fortsetzung)

MIC (mcg/ml)

Test-Verbindung R

Vinyl Vinyl Vinyl

Vinyl Ethyl Ethyl Vinyl

Vinyl Vinyl

3,4,6-Tri-0-acetyl-2-desoxy-2-(hydroxyimino)-alpha-D-glucopyranosyl

ß-D-Glucopyranosyl

2,3,4,e-Tetra-O-acetyl-ß-D-glucopyranosyl

3,4,6-Tri-0-acetyl-2-desoxy-2-(hydroxyimino)-alpha-D-glucopyranosyl

1-Thio-ß-D-xylopyranosyl 1-Thio-ß-D-xylopyranosyl 2,3,4-Tri-0-acetyl-1-thio-ß-D-xylopyranosyl

3,4,6-Tri-0-acetyl-2-desoxy-2-(hydroxyimino)-alpha-D-galactopyranosyl

2,3,4,6-Tetra-0-acetyl-1-thio-ß-D-glucopyranosyl

1-Thio-ß-D-r-glucopyranosyl

2,3,4,6-Tetra-0-benzyl-alpha~D-glucopyranosyl

Mycoplasma	Mycoplasma
hyorhinis	hyopneumoniae
6,25
0,78
0,78
0,78
0,39	<0,15
0,39	< 0,1 5
0,39	< 0,15

1,56

0,78 1,56

50,0

0,78

209 624

Die Verbindungen gemäß der Erf indung jzeigen auch in-vitro-Aktivität gegen Pasteurella multocida, Pasteurella heinolytica und eine für Fische pathogene Pseudomonasspecies. P. multocida ist ein Respirationsinfektionen bei Rindern, Geflügel und Schweinen verursachender .Organismus, und P. hemolytica ist eine der Hauptursachen von Erkrankungen der Atemwege von Rindern. ,

So liegen bei in-vitro-Tests gegen Pasteurella hemolytica die mittleren MIC-Werte für 14-Desoxy-14-y (ß-D-xylopyranosyl)thioacetoxy/mutilin und 1 4-Desoxy-1 4-/(ß-D-xylopyranosyl) thioacetoxy_/-19,20-dihydromutilin bei 12,5 mcg/ml bzw. 10,4 mcg/ml.

Die Wirksamkeit repräsentativer Verbindungen gemäß der

Erfindung (R = H bei der Testgruppe) gegen P. multocic und Pseudomonas sp. ist in Tabelle VI angegeben.

Tabelle VI

R

Vinyl Ethyl Ethyl

Vinyl

Testverbindung

1-Thio-ß-D-xylopyranosyl

2,3,4-Tri-O-acetyl-i-thio-ß-D-xylopyranosyl

2,3,4-Tri-0-acetyl-1-thio-ß-D-xylopyranosyl

	MIC (mcg/ml)	Pseudomonas
Pasteurella	Pasteurella	sp. (Fisch)
multocida	multocida
(Rind)	(Truthahn)	6,25 12,5
3,12 6,25	6,25 6,25

>50,0 ^50,0

^50,0

50/0

12,5

_ 209 624

Ein weiteres wichtiges Merkmal der Verbindungen gemäß der Erfindung besteht darin, daß sie gegen Spiroplasmen wirksam sind. Spiroplasma citri verursacht Starrkrankheit bei Citrusfrüchten. Ein anderes Spiroplasma, Maisverkümmerungs-Spiroplasma, beeinträchtigt das Wachstum von Mais. In Tabelle VII sind die in-vitro-Aktivitäten

repräsentativer Verbindungen gemäß der Erfindung (R = H bei dieser Gruppe) gegen Spiroplasma citri angegeben. Bei diesem Test wird die Inhibition von S. citri durch eine Farbreaktion bestimmt. Rot (R) bezeichnet vollständige Inhibierung; Rot-Orange (RO) bezeichnet teilweise Inhibierung und Gelb (Y) bezeichnet keine Inhibierung. So inhibiert beispielsweise 14-Desoxy-14-/(ß-D-xylopyranosyl) thiacetoxy_/-19, 20-dihydromutilin das Wachstum von S. citri bereits in einer Konzentration von 0,01 ppm.

Tabelle VII Testverbindung

1,0

Aktivität - ppm 0,1 0,05

0,01

Ethyl Vinyl

Ethyl

Vinyl Ethyl

Ethyl Vinyl

Vinyl Ethyl

1-Thio-ß-D-xylopyranosyl

2,3,4-Tri-0-acetyl-1-thioß-D-xylopyranosyl

1-Thio-ß-D-xylopyranosyl

2,3,4,6-Tetra-O-acetyl-ithio-ß-D-glucopyranosyl

1-Thio-ß-D-glucopyranosyl

2,3,4,β-Tetra-O-acetyl-ß-D-Glucopyranosyl

ß-D-Glucopyranosyl

3,4,6-Tri-0-acetyl-2-desoxy-2~ (hydroxyimino) -alpha-D^-glucopyranosyl

R R,R

R R

R R,R

R R, R

-,R

R R

R Y, RO

RO RO, RO

Y Y

209 6 24

Die Verbindungen gemäß der Erfindung können auch zur Behandlung von Schweinedysenterie verwendet werden. Aus US-PS 4 041 175 ist bekannt, daß Pleuromutilin bei der Behandlung von Schweinedysenterie wirksam ist. Es hat sich gezeigt, daß die Pleuromutilinglycosidderivate gemäß der Erfindung gleichfalls gegen Treponema hyodysenteriae, den am häufigsten mit Schweinedysenterie verbundenen Organismus, wirksam sind. Die Aktivität gegen T. hyodysenteriae wird mit Hilfe eines in-vitro-Tests ermittelt, wobei die Verbindung in Mengen von 50, 5,0, 0,5 und 0,05 mcg/ml in Trypticase-Sojaagarplatten eingebracht wird, die 5 % defibriniertes Rinderblut enthalten. Die Agaroberfläche wird mit 0,1 ml einer 10 -Verdünnung einer Suspension von T. hyodysenteriae inokuliert. Die Platten werden "4 Tage unter anaeroben Bedingungen inkubi-ert und dann bezüglich des Vorhandenseins oder Fehlens eines Wachstums von hämolytischen Treponema bewertet. 14-Desoxy-1 4-/ (ß-D-xylopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin und 14-Desoxy-14-/(ß-D-xylopyranosyl)thioacetoxy/-19,20-dihydromutilin inhibieren das Wachstum bei Agarkonzentrationen von 50, 5,0 und 0,5 mcg/ml.

Zur Behandlung von Schweinedysenterie können die Verbindungen gemäß der Erfindung oral an erkrankte Schweine in Form von Tabletten, Kapseln, Pulvern und dergleichen verabreicht werden. Eine bevorzugte Methode der Verabreichung besteht jedoch darin, die Verbindung in das Schweinefutter einzuführen.

Claims

Erfindungsanspruch

a) das alpha- oder ß-Anomere einer der folgenden Hexopyranosen oder Hexofuranosen: D- und L-Glucose; D- und L-Galactose; D- und L-Mannose; D- und L-Gulose; D- und L-Idose; D- und L-Altrose, L- und D-Rharnnose; D- und L-Fucose, 1-Thio-D- und -L-glucose; 1-Thio-D- und ' -L-galactose; 1-Thio-D- und -L-mannose; 1-Thio-D- und -L-gulose; 1-Thio-D- und -L-idose; 1-Thio-D- und -L-altrose; 1-Thio-L- und -D-rhamnose und 1-Thio-D- und -L-fucose,

209 624

b) das alpha- oder ß-Anomere einer der folgenden Pentopyranosen oder Pentofuranosen:

. D- und L-Lyxose, D- und L- Ribose, L- und D-Arabinose, D- und L-2-Desoxyribose; 1-Thio-D- und -L-lyxose, 1-Thio-D- und -L-ribose, 1-Thio-L-·und D-arabinose und D- und L-2-Desoxy-1-thioribose;

c) das alpha- oder ß-Anomere einer der folgenden Pentofuranosen: D- und L-Xylose und 1-Thio-D- und -L^-xylose;

d) das alpha- oder ß-Anomere der Pentopyranoseform von L-Xylose und 1-Thio-D- und -L»-xylose;

e) das alpha-Anomere der Pentopyranoseform von D-Xylose;

f) das alpha- oder ß-Anomere einer der folgenden Pyranose- oder Furanoseaminozucker: 2-Desoxy-2-amino-D- und L-glucose; 2-Desoxy-2-amino-D- und -L-mannose; 2-Desoxy-2-amino-D- und -L-xylose; 2-Desoxy-2-amino-D- und -L-lyxose; 2-Desoxy-2-amino-D- und -L-galactose; 4-Desoxy-4-amino-D- und -L-xylose; 2-Desoxy-2-amino-1-thio-D- und -L-glucose; 2-Desoxy-2-amino-1-thio-D- und -L-mannose; 2-Desoxy-2-amino-1-thio-D- und -L-xylose; 2-Desoxy-2-amino-1-thio-D- und L-lyxose; 1-Thio-D- und -L-galactosamin; 4-Desoxy-4-amino-1-thio-D- und -L-xylose und die N-Mono(C. -C₄) alkyl- und N,N-Di (C..-C .) alkylderivate dieser Aminozucker;

g) das alpha- oder ß-Anomere eines der folgenden Disaccharide.: Maltose; Cellobiose, Lactose; Gentiobiose; Isomaltose; MeIibiose, Raffinose und Xylobiose; 1-Thiomaltose; 1-Thiocellobiose; 1-Thiolactose; 1-Thiogentipbiose; 1-Thioisomaltose; 1-Thiomelibiose; 1-Thiofaffinose und 1-Thioxylobiose;

h) das alpha- oder ß-Anomere der Trisäccharide Maltotriose; Cellotriose; Xylotriose; 1-Thiomaltotriose; 1-Thiocellotriose und 1-Thioxylotriose;

i) 2-Desoxy-2-(hydroxyimino)-3,4,6-tri-O-acetyl-alpha-D-glucopyranosyl; 2-Desoxy-2~ (hydroxyimino)-3,4,6-tri-O-acetyl-alpha-D-galactopyranosyl; 2-Desoxy-2-(hydroxyimino) -alpha-D-galactopyranosyl ; 2-Desoxy-2-amino-4,6-di-O-acetyl-alpha-D-glucopyranosyl; 2-Desoxy-2-acetamido-3,4,6-tri-0-acetyl-alpha-D-glucopyranosyl oder

j) eine der unter a) bis h) angegebenen Gruppen in mit C„-C.-Alkanoyl oder Benzoyl peracylierter oder benzylierter Form;

2 1

R Wasserstoff oder, wenn R exne der in j) defxnierten Gruppen ist, einen C₂-C.-Alkanoyl-, Benzoyl- oder Benzylrest,

sowie der pharmazeutisch annehmbaren Säureadditionssalze der Verbindungen, in deren Formel R eine der unter f) angegebenen Bedeutungen hat, dadurch gekennzeichnet , daß ein Glycpsy!derivat,

- 67 - 209 6 24

dessen Glycosylgruppe ein per-O-acyliertes oder benzyliertes alpha- oder ß-Anomeres der unter a) bis h) genannten Stoffe,oder einer der unter i) genannten acetylierten Glycosylreste ist, mit einem Pleuromutilin oder einem Derivat desselben der Formel

worin Y eine Mercaptogruppe oder Halogen bedeutet, umgesetzt wird und daß, wenn im Endprodukt die Glycosylgruppe von R eine der in den Gruppen a) bis h) angegebenen und/oder R eine Ethylgruppe bedeutet, das erhaltene Produkt einer Hydrierung oder Hydrolyse zur Entfernung der O-Acyl- oder -Benzylgruppen unterworfen und/oder die 12-Vinylgruppe zu Ethyl reduziert wird und daß, wenn die Glycosylgruppe in R eine der unter f) genannten ist, das Produkt gegebenenfalls in an sich bekannter Weise in ein pharmazeutisch annehmbares Salz übergeführt wird.
2. Verfahren nach Punkt 1, dadurch ge kennzeichnet , daß Pleuromutilin mit einem alpha-Per-O-acyl- oder -benzylglycosylhalogenid in Gegenwart von Halogenionen als Katalysator umgesetzt und ein alpha-Anomeres eines Pleuromutilinglycosids gewonnen wird.
3. Verfahren nach Punkt 2,dadurch ge kennzeichnet , daß 2,3,4,6-Tetra-O-benzylalpha-D-glucopyranosylchlorid mit Pleuromutilin in Gegenwart von Bromionen umgesetzt und 1 4-Desoxy-1 4-/^2 , 3,4 , 6-tetra-O-benzyl-alpha-D-glucopyranosyl) -oxyacetoxy_/mutilin gewonnen wird. .
4. Verfahren nach Punkt 1, dadurch ge kennzeichnet , daß Pleuromutilin mit einem alpha-Per-O-acyl- oder -benzylglucosylhalogenid in Gegenwart von Mercuriionen als Katalysator umgesetzt und ein ß-Anomeres eines Pleuromutilinglycosids gewonnen wird.
5. Verfahren nach Punkt 4, dadurch ge ken-nz eichnet , daß als eines der Ausgangsmaterialien 2,3,4,6-Tetra-O-acetyl-alpha-D-glucopyranosylbromid verwendet, die Umsetzung in Gegenwart von Mercuricyanid durchgeführt und 14-Desoxy-14-/^(2, 3,4,6-tetra-O-acetyl-ß-D-glucopyranosyl) -oxyacetoxy_/mutilin gev7onnen wird.
6. Verfahren nach Punkt 1, dadurch ge kennzeichnet , daß Pleuromutilin mit dem Nitrosylchloridaddukt des per-O-acylierten oder benzylierten Glycalderivats des entsprechenden Zuckers umgesetzt und ein Pleuromutilin-2-(hydroxyimino)glycosid gewonnen wird.
7. Verfahren nach Punkt 6, dadurch ge kennzeichnet , daß Pleuromutilin mit D-GIucaltriacetat-NOCl-Addukt umgesetzt und 14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-(hydroxyimino)-3,4,6-tri-O-acetyl-alpha-D-glucopyranosyl)oxyacetoxy_/mutilin gewonnen wird.
8. . Verfahren nach Punkt 6·, dadurch ge kennzeichnet , daß Pleuromutilin mit D-Galactaltriacetat-NOCl-Addukt umgesetzt und 14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-(hydroxyimino)-3,4,6-tri-O-acetyl-alpha-D-galactopyranosyl)oxyacetoxy_/mutilin gewonnen wird.
9. Verfahren nach Punkt 1, dadurch ge kennzeichnet, daß Iodpleuromutilin mit dem entsprechenden per-O-acylierten oder -benzylierten Glycosylmercaptan umgesetzt und ein Pleuromutilinthioglycosid gewonnen wird.
10. Verfahren nach Punkt 9, dadurch gekennzeichnet , daß Iodpleuromutilin mit 2_f 3,4,e-Tetra-O-acetyl-ß-D-glucopyranosylmercaptan umgesetzt und 14-Desoxy-14-/2,3,4,6-tetra-O-acetyl-ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin gewonnen wird.

- 209 6 24
11. Verfahren nach Punkt 9, dadurch g e kennz e ichnet , daß Iodpleuromutilin mit 2,3,4 Tri-0-acetyl-1-thio-ß-D-xylopyranose umgesetzt und 14-Desoxy-14-/(2,3, 4-tri-O-acetyl-ß-D-xylopyranosyl) thioacetoxy_/ mutilin gewonnen wird.
12. Verfahren nach Punkt 9, dadurch g e kennz e ichnet , daß Iodpleuromutilin mit 2,3,4-Tri-0-acetyl-1-thio-ß-D-arabinose umgesetzt und 14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-O-acetyl-ß-D-arabinopyranosyl)-thioacetoxy_/mutilin gewonnen wird.
13. Verfahren nach Punkt 9, dadurch gekennzeichnet , daß Iodpleuromutilin mit 2,3,4-Tri-0-acetyl-1-thio-L-arabinose umgesetzt und 14-Desoxy-14-/^(2, 3, 4-tri-O-acetyl-ß-L-arabinopyranosyl) -thioacetoxy_/-· mutilin gewonnen wird.
14. Verfahren nach Punkt 9, dadurch g e kennzeichnet , daß Iodpleuromutilin mit 2,3,4,6-Tetra-O-acetyl-ß-D-galactopyranosylmercaptan umgesetzt und 14-Desoxy-14-/(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-ß-D-galactopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin gewonnen wird.
15. Verfahren nach Punkt 9, dadurch gekennzeichnet , daß Iodpleuromutilin mit 2-Desoxy-2-(N,N-dimethylamino)-3,4,6-tri-O-acetyl-i-thio-D-glucopyranose umgesetzt und 14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-(N,N-dimethylamino)-3,4,ö-tri-O-acetyl-ß-D-glucöpyranosyl)thioacetoxy_/mutilin gewonnen wird. ;

209 624
16. Verfahren nach Punkt 9, dadurch ge kennzeichnet, daß Iodpleuromutilin mit Hepta-O-acetylthiomaltose umgesetzt und 14-Desoxy-14-_/(4-O-(2,3,4,ö-tetra-O-acetyl-alpha-D-glucopyranosyl)-2,3,6-tri-O-acetyl-ß-D-glucopyranosyl) -thioacetoxy_/mutilin gewonnen wird.
17. Verfahren nach Punkt 9, dadurch gekennzeichnet , daß Iodpleuromutilin mit 2,3,4-, Tri-O-acetyl-i-thio-ß-L-xylose umgesetzt und 14-Desoxy-14-/^(2,3,4-tri-O-acetyl-ß-L-xylopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin gewonnen wird.

18, Verfahren nach Punkt 1,dadurch gekennzeichnet , daß Pleuromutilinthiol mit einem per-O-acylierten oder benzylierten Zucker in Gegenwart von Bortrifluoridetherat umgesetzt und gegebenenfalls die gebildeten alpha- und ß-Anoraeren der Pleuromutilinthioglycoside voneinander getrennt werden.
19. Verfahren nach Punkt 18, dadurch g.e kennzeichnet , daß Pleuromutilinthiol mit Tetra-O-acetylribopyranose in Gegenwart von Bortrifluoridetherat umgesetzt wird und gegebenenfalls die gebildeten alpha- und ß-Anomeren von 14-Desoxy-1 4-/_2, 3 ,4-tri-O-acetyl-D-ribopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin voneinander getrennt werden.

2O. Verfahren nach Punkt 18, dadurch ge kennzeichnet, daß Pleuromutilinthiol mit Tetra-O-acetyl-ß-D-ribofuranose umgesetzt wird und das alpha- und/oder ß-Anomere von 14-Desoxy-14-/(2,3,5-tri-O-acetyl-D-ribofuranosyl) thioacetoxy_/mutilin gewonnen wird.
21. Verfahren nach Punkt 1, dadurch gekennzeichnet, daß ein Pleuromutilinglycosid, in dessen Formel R eine Viny!gruppe bedeutet, hydriert wird,
22. Verfahren nach Punkt 21, dadurch ge kennzeichnet , daß 14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-hydroxyimino)-3,4,6-tri-O-acetyl-aipha-D-glucopyranosyl)oxyacetoxy_/mutilin hydriert und 14~Desoxy-14-/(2-desoxy-2-(hydroxyimino)-3,4,6-tri-O-acetyl-alpha-D-glucopyranosyl)oxyacetoxy_/-19,20-dihydromutilin gewonnen · wird.
23. Verfahren nach Punkt 21, dadurch ge kennzeichnet , daß 14-Desoxy-14-/2-desoxy-2-amino-4, ö-di-O-acetyl-alpha-D-glucopyranosyl) oxyacetoxy_/-mutilin hydriert und 14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-amino-4 , ö-di-O-acetyl-alpha-D-glucopyranosyl) oxyacetoxy_/-1 9 , 20-dihydrornutiiin gewonnen wird.
24. Verfahren nach Punkt 21, dadurch gekennzeichnet , daß 14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-amino-alpha-D-galactopyranosyl) oxyacetoxy_/mutilin hydriert und 14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-amino-alpha~D-ga~ lactopyranosyl) oxyacetoxy/-1 9 _c 20-dihydromutlin gev7onnen wird.

209 624
25. Verfahren nach Punkt 21, dadurch ge kennzeichnet , daß 14-Desoxy-14-/(2_/3,4,6-tetra-O-acetyl-ß-D-glucopyranosyl)thioacetoxy_/mutilin hydriert und 14-Desoxy-14-/(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/-1 9, 20-dihydromutilin gewonnen wird.
26. Verfahren nach Punkt 21, dadurch ge kennzeichnet , daß 14-Desoxy-14-/(ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin hydriert und 1 4-Desoxy-14-/(ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/-1 9,20-dihydromutilin gewonnen wird.
27. Verfahren nach Punkt 21, dadurch ge kennzeichnet, daß 14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-.O-acetyl-ß-D-xylopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin hydriert und 14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-O-acetyl-ß-D-xylopyranosyl)-thioacetoxy_/-1 9, 20-dihydromutilin gewonnen wird.
28. Verfahren nach Punkt 21, dadurch ge kennz e i c.hn e t , daß 14-Desoxy-14-/(ß-D-xylopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin hydriert und 14-Desoxy~ 14-/(ß-D-xylopyranosyl) thioacetoxy_/-1 9 , 20-dihydromutilin gewonnen wird.
29. Verfahren nach Punkt 21, dadurch ge kennzeichnet , daß 14-DeSOXy-^-/(2, 3 , 4-tri-O-acetyl-ß-D-arabinopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin hydriert und 14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-O-acetyl-ß-D-arabinopyfanosyl) thioacetoxy_/-1 9, 20-dihydromutilin gewonnen wird.
30. Verfahren nach Punkt 21, dadurch ge ke.nnzei.chn. et , daß 14-Desoxy-14-/(ß-D-arabinopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin hydriert und T4-Desoxy-14-/(ß-D-arabinopyranosyl) thioacetoxy_/-19,20-dihydromutilin gewonnen wird.
31. Verfahren nach Punkt 21, dadurchge kennzeichnet , daß 14-Desoxy-14-/2 ,3 ,4-tri-O-acetyl-ß-L-arabinopyranosyl) thioacetoxy_/nmtilin hydriert und 14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-O-acetyl-ß-L-arabinopyranosyl)thioacetoxy-19,20-dihydromutilin gewonnen wird.
32. Verfahren nach Punkt 21, dadurch ge kennz e i chne t , daß 14--Desoxy-14-/(ß-L-arabinopyranosyl)thioacetoxy/mutilin hydriert und 14-Desoxy-14-/(ß-L-arabinopyranosyl) thioacetqxy_/-T9,20-dihydromutiⁱlin gewonnen wird.
33. Verfahren nach Punkt 21, dadurch ge kennzeichnet , daß 14-Desoxy-14-/(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-ß-D-galactopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin hydriert und 14-Desoxy-14-/(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-ß-D-galactopyranosyl) thioacetoxy_/-1 9 , 20-dihydromutilin gewonnen wird.
34. Verfahren nach Punkt 21, d ad u.r c h ge kennzeichnet , daß 14-Desoxy-14~/(ß-D-galactopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin hydriert und 14-Desoxy-14-/(ß-D-galactopyranosyl)thioacetoxv/-19,20-dihydromutilin gewonnen wird.

- 73 -

209 624
25. Verfahren nach Punkt 21, dadurch ge kennzeichnet, daß 14-Desoxy-14-/(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-ß-D-glucopyranosyl)thioacetoxy/mutilin hydriert und 14-Desoxy-14-/(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/-19,20-dihydromutilin gewonnen wird.
26. Verfahren nach Punkt 21, dadurch ge kennzeichnet , daß 14-Desoxy-14-/(ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin hydriert und 1 4-Desoxy-14-/(ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/-1 9 , 20-dihydromutilin gewonnen wird.
27. Verfahren nach Punkt 21, dadurch ge kennzeichnet , daß 14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-.O-acetyl-ß-D-xylopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin hydriert und 14-Desoxy~14-/(2,3,4-tri-O-acetyl-ß-D-xylopyranosyl)-thioacetoxy_/-1 9, 20-dihydromutilin gewonnen wird.
28. Verfahren nach Punkt 21, dadurch gekennzeichnet , daß 14-DeSOXy-^-Z(B-D-XyIopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin hydriert und 14-Desoxy~ T4-/(ß-D-xylopyrähosyl) thioacetoxy_/-1 9 ,20-dihydromutilin gewonnen wird.
29. Verfahren nach Punkt 21, dadurch ge kennzeichnet , daß 14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-O-acetyl-ß-D-arabinopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin hydriert und 14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-O-acetyl-ß-D-arabinopyranosyl) thioacetoxy_/-1 9, 20-dihydromutilin gewonnen wird.
40. Verfahren nach . Punkt 21, dadurch ge k e η η ζ e i c h η e t , daß 14-Desoxy-14-/(alpha-D-ribofuranosyl) thioacetoxy_/mutilin hydriert und 14-Desoxy-14-/(alpha-D-ribofuranosyl) thioacetoxy_/-1 9 ,20-dihydromutilin gewonnen wird. .
41. Verfahren nach Punkt ι 21, dadurch ge k e η η ζ e ic h η e t , daß 14-Desoxy-14-/(ß-D-ribofuranosyl) thioacetoxy_/mutilin hydriert und 14-Desoxy-14-/^(ß-D-ribofuranosyl) thioacetoxy_/-1 9 , 20-dihydromutilin
gewonnen wird.
42. Verfahren nach Punkt 21, dadurch ge kennzeichnet , daß 14-DeSOXy-^-/(2-desoxy-2-(N,N-dimethylamino)-3,4,6-tri-O-acetyl-ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin hydriert und 1 4-Desoxy-1 4-/^(2-desoxy-2-(N,N-dimethylamino)-3,4,6-tri-O-acetyl-ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/-1 9, 20-dihydromutilin gewonnen wird.
43. Verfahren nach Punkt ι 21, dadurch ge kennzeichnet , daß 14-Desoxy-1 4-/_(2-desoxy-2-(Ν,Ν-dimethylamino) -ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/inutilin hydriert und 1 4-Desoxy-1 4-_/(2-desoxy-2-(N,N-dimethylamino)-ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/-1 9 , 20-dihydromutilin gewonnen wird.
44. Verfahren nach Punkt \ 21, dadurch gekennzeichnet, daß 14-Desoxy-14-/4-O-(2,3,4,δ-tetra-O-acetyl-alpha-D-glucopyranosyl)-2,3,6-tri-O-acetylß-D-glücopyranosyl) thioacet.oxy_/mutilin hydriert und 14-Desoxy-14-/4-0-(2,3,4,e-tetra-O-acetyl-alpha-D-glucopyranosyl)-2,3,e-tri-O-acetyl-ß-D-glucopyranosyl)thioacetoxv/-19,20-dihydromutilin gewonnen wird.

209 624
45. Verfahren nach Punkt : 21, dadurch ge kennzeichnet , daß 14-Desoxy-14-/(4-O-(alpha-D-glucopyranosyl)-D-glucopyranosyl)thioacetoxy_/mutilin
hydriert und 14-Desoxy-14-/^ (4-0- (alpha-D-glucopyranosyl) D-glucopyranosyl)thioacetox^/-19,20-dihydromutilin gewonnen wird.
46. Verfahren nach Punkt 21, dadurch g
kennzeichnet , daß 14-Desoxy-1 4-/^(2, 3 ,5-tri-O-acetyl-ß-D-ribofuranosyl) thioacetoxy_/mutilin hydriert
und 14-Desoxy-14-/(2,3,5-tri-0-acetyl-ß-D-ribofuranosyl)-thioacetoxy_/-1 9, 20-dihydromutilin gewonnen wird.
47. Verfahren nach Punkt 1, dadurch ge kennzeichnet , daß ein Pleuromutilin-per-O-benzylglycosid hydriert und ein unbenzyliertes Pleuromutilinglycosid gewonnen wird.

48. Verfahren nach Punkt 47, dadurch ge kennzeichnet , daß 14-Desoxy-14-/(2,3,4,6-tetra-O-benzyl-alpha-D-glucopyranosyDoxyacetoxyymutilin
hydriert und 14-Desoxy-14-/(alpha-D-glucopyranösyl)oxy- . acetoxy_/-1 9, 20-dihydromutilin gewonnen wird.
49. Verfahren nach Punkt -\_f dadurch ge kennzeichnet , daß das Pleuromutilin-per-O-acylglycosid hydrolysiert und ein nichtacyliertes Pleuromutilinglycosid gewonnen wird.
50. Verfahren nach , Punkt 49, dadurch ge kennzeichnet , daß 14-Desoxy-14-/(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin hydrolysiert und 14-Desoxy-14-/(ß-D-glucopyranosyl)thioacetoxy_/mutilin gewonnen wird.
51. Verfahren nach Punkt 49, dadurch gekennzeichnet , daß 14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-0-acetyl-D-xylopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin hydrolysiert und 14-Desoxy-14-/(ß-D-xylopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin gewonnen wird.
52. Verfahren nach Punkt 49, dadurch ge kennzeichnet , daß 14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-O-acetyl-ß-D-arabinopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin hydrolysiert und 14-Desoxy-14-/(ß-D-arabinopyranosyl)thioacetoxy_/mutilin gewonnen wird..
53. Verfahren nach Punkt 49, dadurch gekennzeichnet, daß 14-DeSOXy-^-/(2,3, 4-tri-0-acetyl-ß-L-arabinopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin hydrolysiert und 14-Desoxy-14-/(ß-L-arabinopyranosyl)thioacetoxv/-mutilin gewonnen wird.
54. Verfahren nach Punkt ' 49, dadurch ge kennzeichnet, daß 14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-O-acetyl-ß-L-xylopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin hydrolysiert und 14-Desoxy-1 4-_/(ß-L-xylopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin oewonnen wird.

-79- 209 6 24
55. Verfahren nach Punkt 49, dadurch ge kennzeichnet , daß 14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-O-acetyl-alpha-D-ribopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin hydrolysiert und 14-Desoxy-14-/(alpha-D-ribopyranosyl)thioacetoxy_/mutilin gewonnen wird.
56. Verfahren nach Punkt 49, dadurch ge kennzeichnet , daß 14-Desoxy-14-/(2,3,4-tri-O-acetyl-ß-D-ribopyranosyl)thioacetoxy/mutilin hydrolysiert und 14-Desoxy-14-/(ß-D-ribopyranosyl) thioacetoxy_/-mutilin gewonnen wird.
57. Verfahren nach Punkt 49, dadurch ge kennzeichnet , daß. 14-Desoxy-14-/ (2 ,3 ,5-tri-O-acetyl-alpha-D-ribofuranosyl)thioacetoxy/mutilin hydrolysiert und 14-Desoxy-14-/(alpha-D-ribofuranosyl)thioacetoxy/mutilin gewonnen wird.
58. Verfahren nach Punkt 49, dadurch ge kennzeichnet , daß 14-Desoxy-14-/(2,3,5-tri-O-acetyl-ß-D-ribofuranosyl) thioacetoxy_/mutilin hydrolysiert und 14-Desoxy-14-/(ß-D-ribofuranosyl) thioacetox^;/ mutilin gewonnen wird.
59. Verfahren nach Punkt 49, dadurch ge kennzeichnet , daß 14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-(Ν,Ν-dimethylamino)-3,4,6-tri-O-acetyl-ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/inutilin hydrolysiert und 14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-(Ν,Ν-dimethylamino)-ß-D-glucopyranosyl)thioacetoxy_/mutilin gewonnen wird.

- 8O -
60. Verfahren nach Punkt 49, dadurch gekennzeichnet, daß 14-Desoxy-14-/(4-0-(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-alpha-D-glucopyranosyl)-(3,4,6-tri-0-acetylß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin hydrolysiert und 14-Desoxy-14-/(4-0-(alpha-D-glucopyranosyl)-ß-D-glucopyranosyl) thioacetoxy_/mutilin gewonnen wird.
61. Verfahren nach Punkt 49, dadurch ge kennzeichnet , daß 14-Desoxy-14-/(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-ß-D-glucopyranosyl) oxyacetoxy_/mutilin hydrolysiert und 14-Desoxy-14-/(ß-D-glucopyranosyl)oxyacetoxy_/mutilin gewonnen wird.
62. Verfahren nach Punkt 49, dadurch ge kennzeichnet , daß 14-Desoxy-14-/(2-desoxy-2-(hydroxyimino)-3,4,6-tri-O-acetyl-alpha-D-galactopyranosyl) oxyäcetoxy_/inutilin hydrolysiert und 14-Desoxy-14-/(2-des~ oxy-2-(hydroxyimino)-alpha-D-galactopyranosyl)oxyacetoxy/-mutilin gewonnen wird.
63. Verfahren nach Punkt 49, dadurch ge kennzeichnet, daß 14-Desoxy-14-/(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-ß-D-galactopyranosyl)thioacetoxy/mutilin hydrolysiert und 14-Desoxy-14-/(ß-D-galactopyranosyl)thioacetoxy_/mutilin gewonnen wird. .