KR810002101B1 - 프레우로무티린 글리코사이드 유도체의 제조방법 - Google Patents

Abstract

내용 없음.

Description

[발명의 명칭]

프레우로무티린 글리코사이드 유도체의 제조방법

[발명의 상세한 설명]

본 발명은 그람-양성 및 그람-음성 박테리아, 혐기성 박테리아 및 마이코플라스마(mycoplasma)에 유효한 다음 구조식(Ⅳ)의 프레우로무티린 글리코사이드 유도체 및 약학적으로 무독한 이의 산부가염의 제조방법에 관한 것이다.

상기 구조식에서

R은 에틸 또는 비닐이며,

R¹은 다음 그룹, 즉

a) 다음과 같은 헥소피라노즈 및 헥소푸라노즈 α 및 β-아노머; 즉 D-및 L-글루코즈, D-및 L-갈락토즈, D-및 L-만노즈, D-및 L-글로즈, D-및 L-아이도즈, D-및 L-알트로즈, L-및 D-람노즈, D-및 L-푸코즈, 1-티오-D-및 L-글루코즈, 1-티오-D-및 L-아이도즈, 1-티오-D-및 L-알트로즈, 1-티오-L-및 D-람노즈 및 1-티오-D-및 L-푸코즈

b) 다음과 같은 펜토피라노즈 및 펜토푸라노즈의 α-및 β-아노머; 즉 D-및 L-릭소즈, D-및 L-리보즈, L-및 D-아라비노즈, D-및 L-2-데옥시리보즈, 1-티오-D-및 L-릭소즈, 1-티오-D-및 L-리보즈, 1-티오-L-및 D-아라비노즈 및 D-및 L-2-데옥시-1-티오리보즈;

c) 다음과 같은 펜토푸라노즈의 α-및 β-아노머; 즉 D-및 L-크실로즈 및 1-티오-D-및 L-크실로즈;

d) 펜토피라노우즈 형태인 L-크실로즈 및 1-티오-D-및 L-크실로즈의 α-및 β-아노머;

e) 펜토피라노즈 형태인 D-크실로즈의 α-아노머;

f) 다음과 같은 피라노즈 및 푸라노즈 아미노슈가의 α-및 β-아노머; 즉 2-데옥시-2-아미노-D-및 L-글루코즈, 2-데옥시-2-아미노-D-및 L-만노즈, 2-데옥시-2-아미노-D-및 L-크실로즈, 2-데옥시-2-아미노-D-및 L-갈락토즈, 4-데옥시-4-아미노-D-및 L-크실로즈, 2-데옥시-2-아미노-1-티오-D-및 L-글루코즈, 2-데옥시-2-아미노-1-티오-D-및 L-만노즈, 2-데옥시-2-아미노-1-티오-D-및 L-크실로즈, 2-데옥시-2-아미노-1-티오-D-및 L-크실로즈, 1-티오-D-및 L-갈락토사민, 4-데옥시-4-아미노-1-티오-D-및 L-크실로즈 및 이러한 아미노슈가의 N-모노(C₁내지 C₄)알킬 및 N, N-디(C₁내지 C₄)알킬 유도체;

g) 다음과 같은 디사카라이드의 α-및 β-아노머; 즉 말토즈, 셀로비오즈, 락토즈, 젠티오비오즈, 이소말토즈, 멜리비오즈, 라피노즈, 크실로비오즈, 1-티오말토즈, 1-티오셀로비오즈, 1-티오-악토즈, 1-티오젠티오비오즈, 1-티오이소말토즈, 1-티오멜리비오즈, 1-티오라피노즈 및 1-티오-크실로비오즈

h) 트리사카라이드 말토트리오즈의 α-및 β-아노머; 즉 1-티오말토트리오즈, 1-티오셀로트리오즈 및 1-티오크실로트리오즈;

i) 2-데옥시-2-(하이드록시이미노)-3, 4, 6-트리-0-아세틸-α-D-글루코피라노실, 2-데옥시-2-(하이드록시이미노)-3, 4, 6-트리-0-아세틸-α-D-갈락토피라노실, 2-데옥시-2-(하이드록시이미노)-α-D-갈락토피라노실, 2-데옥시-2-아미노-4, 6-디-0-아세틸-α-D-글루코피라노실, 2-데옥시-2-아세트아미도-3, 4, 6-트리-0-아세틸-α-D-글루코피라노실;

j) 탄소수 2 내지 4의 알카노일로 미리 아실화한 (a)에서 (h)까지의 그룹 또는 벤조일 또는 벤질화한 그룹

R²는 수소 또는 R¹이 (j)에서 정의된 그룹중에서 선택될 경우 탄소수 2 내지 4의 알카노일, 벤조일 또는 벤질이다.

본 화합물은 아실화한 글리코실을 프레우로무티린 또는 이의 유도체 또는 프레우로무티린의 글리코실 유도체와 반응시켜서 제조한다.

항생물질인 프레우로무티린은 1951년에 카바나그등에 의해 분리되었다.

[Proc. Natl. Acad. Soc37, 570 574(1951)].

프레우로무티린의 구조는 다음과 같다.

프레우로무티린을 알카리성 가수분해를 함으로서 무티린으로 알려진 화합물을 얻게 된다. 무티린은 다음과 같은 구조를 갖는다.

수많은 프레우로무티린 유도체의 제조방법은 다음과 같은 문헌에 기재되어 있다.

참조 : Swiss Patent 572,894(Derwent No. 26553X);

Netherlands Patent 69, 11083(Derwent No. 40,642);

Knauseder et al., U.S. Patent 3,716,579;

Egger et al., U.S. Patent 3,919,290 :

Brandl et al., U.S. Patent 3,949,079;

Riedl, U.S. Patent 3,979,423 :

Baughn et al., U.S. Patent 3,987,194;

Egger et al., U.S. Patent 4,032,530;

K. Riddl, ＂Studies on Pleuromutilin and Some of its Derivatives,＂ J. Antibiotics 29, 132-139(1976);

H. Egger and H. Reinshagen, ＂New Pleuromutilin Derivatives with Enhanced Antimicrobial Activity I. Synthesis＂, J. Antibiotics 29, 915-922(1976) and ＂II. Structure-Activity Correlations＂, ibid., 923-927(1976); F. Knausederand E. Brandl, ＂Pleuromutilins; Fermentation, Structure and Biosynthesis＂, J. Antibiotics 29, 125-131(1976); J. Drews et al., ＂Antimicrobial Activities of 81.723hfu, a New Pleuromutilin Derivative＂, Antimicrob. Agents and Chemotherapy 7, 507-516(1975)

최근 미첼 및 하이겐스는 항생물질인 프레우로무티린류에 속하는 신규의 항생물질인 A-40104인자 A를 발견하였다. 이 항생물질은 A-40104 항생제 및 이의 제조공정이라는 제목하에 미첼 및 하이겐스에 의해 출원되어 심사중에 있다.

항생물질인 A-40104인자 A의 구조는 다음과 같다.

상기 구조식에서 D-크실로피라노즈그룹은 β-배치에 있다.

본 발명으로 그람양성, 그람음성 박테리아 및 혐기성 박테리아뿐만 아니라 마이코프라스마에 대해서도 효과가 있는 신규의 유익한 프레우로무티린 글리코사이드 유도체를 얻게 된다. 외과의사나 수의사는 인체 및 가축의 전염치료에 선택하여 사용할 수 있다.

본 발명에 따라 글리코실 유도체(여기에서 글리코실 부위는 퍼-0-아실화 또는 벤질화에서 선택되거나 또는 상기(a)에서 (h)까지의 그룹중에서 선택된 α 또는 β 아노머이거나 또는 상기 (i)의 아실화글리코실에서 선택된 것임)를 프레우로무티린 또는 다음 구조식(Ⅴ)인 이의 유도체와 반응시키고 최종 생성물에 있어서 R¹중의 글리코실 부위가 상기(a)에서 (h)까지의 그룹에서 선택되거나 및/또는 R이 에틸인 경우 수득된 생성물의 수소화 또는 가수분해로 0-아실 또는 벤질부위를 제거하고 및/또는 12-비닐을 에틸로 환원시키며 R¹중의 글리코실 부위가 상기(f) 그룹에서 선택될 경우는 생성물을 통상적인 방법에 의해 약학적으로 무독한 염으로 전환시킴을 특징으로 하여 상기 구조식(Ⅳ)의 프레우로무티릴 글리코사이드 유도체를 제조하는 방법을 얻게 된다.

상기 구조식에서

Y는 메르캅토 또는 할로이다.

R²가 수소인 본 발명 화합물은 프레우로무티린을 글리코사이드를 형성시키는 통상적 방법을 사용하여 적합한 당(糖)부위와 반응시켜서 제조한다. 예를 들면 β-아노머인 이러한 글리코사이드는 일반적으로 다음 방법에 따라 제조한다. (참조 : Koenigs-Knorr method, H. Kranch and W. Kung, ＂Organic Name Reactions John Wiley and Sons, New York, N. Y., 1964, page 269)

α-아노머인 글리코사이드는 일반적으로 할로촉매화된 글리코사이드 반응으로 제조한다. 브로모 유도체는 이러한 반응에 특히 바람직하다.

본 발명 화합물을 제조하는데 있어서 또 다른 글리코사이드 반응에 따른 유효한 방법에, 촉매로서 시안화제이수은과 같은 수은화합물을 사용하는 방법도 포함된다.

이러한 방법에 있어서 퍼-0-아실글리콜할라이드는 출발물질이 당부위로 알려져 있으며 이 퍼-0-아실글리코실할라이드의 제법은 공지되어 있다. (참조 : Advan. Carbohyd. Chem. 10, 207-256(1955)).

퍼-0-아세틸글리코실 할라이드는 당 부위를 출발물질로 자주 사용된다. 그러나 퍼-0-(C₂내지 C₄-알카노일)-글리코실할라이드 및 퍼-0-벤조일글리코실 할라이드와 같은 다른 아실글리코실 할라이드 역시 유효하며, 브로마이드 및 클로로라이드는 가장 일반적으로 사용되는 할라이드 유도체이다. 왜냐하면 요다이드는 쉽게 분해하고 플루오라이드는 반응성이 적기 때문이다.

본 발명 화합물을 제조하는 다른 방법은 프레우로무티린을 적합한 당의 퍼-0-아실화 글리칼 유도체의 니트로실 클로라이드 부가체와 반응시켜 상응하는 2-(하이드록시이미노) 유도체를 얻고 이어서 목적하는 아미노글리코사이드로 전환시키는 방법이다.

R²가 수소인 본 발명의 티오글리코사이드 유도체는 14-데옥시-14-(모노요도아세톡시) 무티린(이하요도프레우로 무티린이라 칭함)을 적합한 퍼-0-아실메르캅토 당 유도체와 반응시켜 제조한다. 요도프레우로무티린은 미국특허 제3,979,423호에 기술된 방법에 따라 제조한다. 퍼-0-아실화메르캅토 당 유도체는 표준방법에 따라 적합한 할로-치환 퍼-0-아실화 당 동족체로부터 제조할 수 있다.

적합한 메르캅토 당 유도체를 제조하는 또 다른 방법은 다음 문헌에 기술된 방법에 따라 적합한 퍼-0-아실 당 부위를 프레우로무티린과 보론 트리플루오라이드 에테레이트촉매화로 축합시키는 것이다. (R. J. Ferrier and R. H. Furneaux, Carbohydrate Research 52, 63-68(1976)).

2-아미노-1-티오-α-D-글리코사이드는 14-데옥시-14-(메르캅토아세톡시) 무티린(이하 프레우로무티린 티올이라 칭함)을 적합한 2-데옥시-2-(하이드록시이미노)-퍼-0-아실-α-D-글리코실 클로라이드와 축합시켜 상응하는 2-(하이드록시이미노) 유도체를 얻고 이어서 이 옥시이미노 유도체를 환원하여 목적하는 2-아미노 화합물을 얻는 간편한 방법으로 제조한다.

디알킬아미노-1-티오-β-D-글리코피라노실 유도체는 디알킬아미노-퍼-0-아실-1-브로모-α-D-글리코피라노 사이드 (참조 : J. Amer. Chem. Soc. 99, 5826(1977))를 상응하는 디알킬아미노-퍼-0-아실-1-메르캅토-β-D-글리코피라노사이드로 전환시키고 요도프레우로무티린과 커플링시켜서 제조한다.

R이 에틸인 본 발명 화합물은 R이 비닐인 상응하는 화합물로부터 표준 환원방법 즉 촉매로서 탄소상의 팔라듐을 사용하는 수소화반응으로 제조할 수 있다. 이러한 화합물은 19, 20-디하이드로프레우로무티린을 상술한 바와 같이 적합한 당 부위와 반응시켜 제조할 수 있다.

R¹이 퍼-0-아실화된 당부위인 이러한 화합물은

1) R¹이 (a)-(h) 그룹에서 선택된 화합물인 중간물질로서

2) 유효화합물로서 유효하다.

R¹이 (a)-(h)에서 선택된 이러한 화합물은 R¹이 (J)인 적합한 퍼-0-아실화 화합물로부터 이 아실그룹을 트리에틸아민과 같은 염기 존재하에 아실그룹을 분리시켜 제조한다.

R²가 탄소수 2 내지 6의 알카노일 또는 벤조일인 화합물인 표준방법으로 처음에 요소프레우로무티린을 아실화하고 제조된 11-데옥시-11-아실옥시-요도프레우로무티린을 적합한 퍼-0-아실메르캅토 당 유도체와 통상적 방법으로 반응시킴으로서 가장 간편하게 제조할 수 있다.

본 발명 화합물의 제법은 다음 실시예에서 상세히 설명하였다.

[실시예 1]

14-데옥시-14-[(2, 3, 4, 6-테트라-0-벤질-α-D-글루코 피라노실) 옥시아세톡시] 무티린의 제법

2, 3, 4, 6-테트라-0-벤질-α-D-글루코즈 4.8012g 및 티오닐 클로라이드 15ml를 70℃ 오일베스상에서 4시간동안 교반하면서 반응시킨다. 반응 혼합물을 진공하에 증발시켜 걸죽한 오일을 얻는다. 오일을 톨루엔 약 30ml로 3회 처리한다을 증발시켜 과량의 50Cl₂를 제거하여 황갈색오일 5.1931g을 수득한다. 이 오일을 즉시 CH₂Cl₂35ml에 용해시키고 생성된 용액에 (C₂H₅)₄NBr 1.6834g, N, N-디이소프로필에틸아민 2ml 및 프레우로무티린 1.743g을 가한다. 이 혼합물을 마개를 한 플라스크중에서 실온에서 1주일동안 교반해준다. 반응혼합물을 동량의 CH₂Cl₂로 희석시킨 다음 이 용액을 물, 1N 염산, 물로 연속하여 세척한다. CH₂Cl₂층을 황산나트륨으로 탈수하고 여과한후 진공하에 증발 건조시켜 불순한 생성물 5.5174g을 수득한다.

이 생성물을 3.5×100cm 실리카겔(Merck) 컬럼상에서 에틸 아세테이트 : 톨루엔(1 : 1)으로 용출하면서 30분 간격으로 8ml씩의 획분을 모으고 크로마토그래피 한다. 획분을 동일한 흡착제 및 용매를 사용하고 요드 상자내에서 전개시키는 TLC로서 검출한다. 적합한 획분을 합하여 진공하에 증발하면 0.4624g의 14-데옥시-14-[(2, 3, 4, 6-테트라-0-벤질-α-D-글루코피라노실) 옥시아세토기] 무티린이 수득된다.

수율 : 11.167

[실시예 2]

14-데옥시-14-[(α-D-글루코피라노실) 옥시아세토기]-19, 20-디하디드로 무티린의 제법

14-데옥시-14-[(2, 3, 4, 6-테트라-0-벤질-α-D-글루코피라노실) 옥시아세톡시] 무티린 400mg (실시예 1에서 기술한 바와 같이 제조함)을 95% 에탄올 25ml에 용해한다. 이 용액을 탄소상의 5% 팔라듐 263㎎에 가한다음 1.5일 동안 수소대기하에 반응하도록 방치해둔다. 생성된 반응혼합물을 셀라이트로 잘 충진시킨 3㎝ 길이의 층을 가진 반융 유리깔대기를 통해 여과한다. 여액을 진공하에 증발하면 234.9㎎의 14-데옥시-14-[(α-D-글루코피라노실) 옥시아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린이 수득된다.

[실시예 3]

14-데옥시-14-[(2, 3, 4, 6-테트라-0-아세틸-β-0-글루코피라노실) 옥시아세톡시] 무티린의 제법

프레우로무티린 1.6945g(4.48미리몰)을 니트로메탄 : 벤젠(1 : 1) 300ml에 용해시킨 다음 이 용액 약 100ml를 증류하여 건조한다. Hg(CN)₂1.0694g(4.24미리몰)을 이 용액에 가한다. 반응혼합물을 질소대기하에 60℃ 오일베스상에서 방치하고 아세토브로모글루코즈 2.009g(4.98미리몰)을 니트로메탄 : 벤젠(1 : 1) 100ml에 가한 용액을 6시간에 걸쳐 적가한다. 반응 혼합물을 이 조건하에 20시간 동안 교반해준다. 이때 Hg(CN)₂762㎎(약 3미리몰)을 반응 혼합물에 더 가해주고 니트로메탄 : 벤젠(1 : 1) 50ml에 2, 3, 4, 6-테트라-0-아세틸-α-D-글루코피라노실 브로마이드 964.2㎎(2.34미리몰)을 가한 용액을 상기와 같이 적가한 다음 반응혼합물을 2일간 더 교반해준다. 반응 혼합물을 얼음베스상에서 냉각하고 차게 한 포화중탄산나트륨 용액(1회), 차게 한 포화 염화나트륨용액(2회)으로 세척한 후 수용성층을 CH₂Cl₂로 추출한다.

유기층을 합하고 무수 황산마그네슘으로 1시간동안 탈수한후 진공하에 증발, 건조시키면 불순한 생성물 4.05g이 수득된다. 이 불순한 생성물을 3×95㎝ 실리카겔(Merck) 컬럼상에서 에틸아세테이트 : 톨루엔(1 : 1)으로 용출하면서 45분 간격으로 8 내지 10ml씩 획분을 수집하며 크로마토그라피하여 더욱 정제한다. 획분을 에틸아세테이트 : 톨루엔(1 : 1) 용매 및 요드를 사용하는 실리카겔 TLC로서 검출한다.

적합한 획분을 모으고 진공하에 증발하면 515.3㎎의 순수한 14-데옥시-14-[(2, 3, 4, 6-테트라-0-아세틸-β-D-글루코피라노실) 옥시아세톡시 무티린이 수득된다. 수율 : 16.24%

[실시예 4]

14-데옥시-14-[(β-D-글루코피라노실) 옥시아세톡시] 무티린의 제법

실시예 3에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(2, 3, 4, 6-테트라-0-아세틸-β-D-글루코피라노실) 옥시아세톡시] 무티린 1.237g (약 1.74밀리몰)을 무수메탄올 100ml에 용해한다. 이 용액에 물 100ml를 가한 다음 실온에서 계속하여 교반해주고 (C₂H₅)₃N 30ml로 희석한다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 3일간 교반해 준후 진공하에 증발건조시킨다. 잔사에는 아직도 (C₂H₅)₃N이 흔적량 존재하므로 진공하에 더 건조시키면 1.3762g의 불순한 생성물이 얻어진다.

이 불순한 생성물을 직경 2㎝인 실리카겔 150g(Merck) 컬럼상에서 에틸아세테이트 : 에탄올(4 : 1)로 용출하면서 20분 간격으로 2ml씩 획분을 모으며 크로마토그라피하여 더욱 정제한다. 동일한 용매 및 요드를 사용하여 실리카겔 TLC로서 획분을 검출한다. 획분 번호 98-130을 합하고 진공하에 증발건조하면 278.6㎎의 14-데옥시-14-[(β-D-글루코피라노실) 옥시아세톡시] 무티린이 수득된다.

[실시예 5]

14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(하이드록시이미노)-3, 4, 6-트리-0-아세틸-α-D-글루코피라노실) 옥시아세톡시] 무티린의 제법

플레우로무티린 3.9797g(0.01052몰)을 디메틸포름아마이드 75ml에 용해한다. D-글루칼 트리아세테이트 NOCl 부가체 3.6756g(0.0109몰)을 이 용액에 가한다. 반응 혼합물을 실온에서 4일간 교반해조고 진공하에 증발, 건조시킨다.

건조된 잔사를 CH₂Cl₂에 용해시키고 이 용액을 포화 염화나트륨용액으로 4회 세척한다. CH₂Cl 용액을 30분간 황산마그네슘으로 탈수한후 진공하에 증발건조시켜 7.25g의 불순한 생성물을 얻는다.

이 불순한 생성물을 3.5×100㎝ 실리카겔 컬럼상에서 에틸아세테이트 : 톨루엔(1 : 1)으로 용출시키면서 45분간격으로 약 10ml씩 획분을 모으면서 크로마토그라피하여 더욱 정제한다. 같은 용매를 사용하여 실리카겔 TLC로서 크로마토그라피를 검출한다.

적합한 획분을 모으고 진공하에 증발시키면 1.9g의 목적생성물이 수득된다. 동일조건하에 또 다른 불순물을 함유한 획분을 다시 크로마토그라피하여 1.2141g의 생성물을 더 얻는다. 따라서 생성물의 총량 3.1141g인 14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(하이드록시이미노)-3, 4, 6-트리-0-아세틸-α-D-글루코피라노실)옥시아세톡시] 무티린을 수득하게 된다. 수율 : 43.67%

[실시예 6]

14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(하이드록시아미노)-3, 4, 6-트리-0-아세틸-α-D-글루코피라노실) 옥시아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린의 제법

실시예 5에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(하이드록시이미노)-3, 4, 6-트리-0-아세틸-α-D-글루코피라노실) 옥시아세톡시]-무티린 3.5g을 무수에탄올 50ml에 용해시키고 무수에탄올 50ml에 30분동안 미리 환원시킨 산화백금 2.9495g에 가한다. 생성된 용액을 실온에서 1.5일동안 수소화한다. 반응혼합물을 셀라이드층을 가진 반융 유리 깔때기를 통해 여과한다. 여액을 진공하에 증발건조시킨후 고진공하에 1시간동안 증발시켜 흔적량의 용매를 제거하여 불순한 생성물 3.33g을 얻는다.

이 불순한 생성물을 3×105㎝ 실리카겔 컬럼상에서 톨루엔 : 아세톤(2 : 1)으로 용출시키면서 30분간격으로 8내지 10ml씩 획분을 수집하여 크로마토그라피하여 정제한다. 크로마토그라피의 획분을 동일한 용매를 사용한 실리카겔 TLC로서 검출한다. 적합한 획분을 합하고 진공하에 증발, 건조시키면 2.5914g의 14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(하이드록시이미노)-3, 4, 6-트리-0-아세틸-α-D-글루코피라노실) 옥시아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린이 수득된다.

[실시예 7]

14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(하이드록시이미노)-3, 4, 6-트리-0-아세틸-α-D-갈락토피라노실) 옥시아세톡시]-무티린의 제법

프레우로무티린 7.6342g(20.19미리몰)을 실시예 5에서 기술한 조건하에 D-갈락탈트리아세테이트 NOCl부가체 7.6723g(22.76미리몰)과 반응시키고 에틸 아세테이트 : 톨루엔(1 : 1)의 용매를 사용하는 실리카겔크로마토그라피로서 정제하여 14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(하이드록시이미노)-3, 4, 6-트리-0-아세틸-α-D-갈락토피라노실) 옥시아세톡시]무티린을 수득한다. 수율 : 73%

[실시예 8]

14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(하이드록시이미노)-α-D-갈락토피라노실) 옥시아세톡시] 무티린의 제법

실시예 7에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(하이드록시이미노)-3, 4, 6-트리-0-아세틸-α-D-갈락토피라노실) 옥시아세톡시 무티린 1.5g을 메탄올 50ml에 용해시키고 물 50ml, (C₂H₅)₃N 50ml를 용액에 가한다. 생성된 용액을 실온에서 3일간 교반해준다음 반응혼합물물을 진공하에 증발시키고 클로로포름을 가한 후 잔사를 진공하에 정치하여 거품이 일게한후 고진공하에 1시간동안 건조하면 414㎎의 불순한 생성물이 수득된다.

불순한 생성물을 최소량의 메탄올에 용해시키고 1.5×70㎝ 실리카겔(Merck) 컬럼에서 에틸아세테이트 : 에탄올(9 : 1)로 용출하면서 1시간 간격으로 2 내지 3ml씩 획분을 모은다. 동일 용매를 사용하는 실리카겔 TLC로서 획분을 검출한다. 적합한 획분을 모으고 증발 건조하면 104.4㎎의 14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(하이드록시이미노)-α-D-갈락토피라노실) 옥시아세톡시] 무티린이 수득된다.

[실시예 9]

14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-아미노-4, 6-디-0-아세틸-α-D-글루코피라노실) 옥시아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린의 제법

실시예 5에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(하이드록시이미노)-3, 4, 6-트리-0-아세틸-α-D-글루코피라노실) 옥시아세톡시] 무티린 508.6㎎을 무수에탄올 50ml에 용해하고 실온에서 하루밤동안 라니 닉켈 0.5g을 가하여 수소화한다. 생성된 반응혼합물을 셀라이드층을 가진 반융유리깔대기를 통하여 여과한다. 여액을 증발, 건조한 후 클로로포름 소량으로 다시 용해시키고 진공하에 재차 증발시켜 건조하여 흰색 거품상 물질을 얻는다.

이 생성물을 고진공하에 2시간동안 건조시켜 381.7㎎의 불순한 생성물을 수득한다. 이 불순한 생성물을 메탄올 최소량으로 용해시키고 1.5×75㎝ 실리카겔(Merck) 컬럼상에서 크로마토그라피한다. 60분 간격으로 2내지 3ml씩 획분을 모으면서 컬럼을 아세토니트릴 : 물(4 : 1)로 용출시킨다. 컬럼에 사용한 용매 및 에틸아세테이트 : 에탄올(9 : 1)용매를 사용해서 TLC하여 컬럼을 검출한다.

적합한 획분을 합하고 진공하에 증발시키면 25.5㎎의 14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-아미노-4, 6-디-0-아세틸-α-D-글루코피라노실) 옥시아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린의 수득된다.

[실시예 10]

11-아세틸-14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-데옥시아세트아미노-3, 4, 6-트리-0-아세틸-α-D-글루코피라노실) 옥시아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린의 제법

실시예 9에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-아미노-4, 6-디-0-아세틸-α-D-글루코피라노실) 옥시아세톡시-19, 20-디하이드로무티린 17㎎을 표준상태하에서 무수초산 0.5ml 및 피리딘 0.5ml로 아세틸화한다.

반응혼합물을 냉수에 가한 수용성 용액을 클로로포름으로 추출한다. 생성된 클로로포름용액을 1N 염산 및 포화 중탄산나트륨으로 세척한다음 무수황산나트륨으로 탈수하고 증발시키면 9㎎의 11-아세틸-14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-아세트아미도-3, 4, 6-트리-0-아세틸-α-D-글루코피라노실) 옥시아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린이 수득된다.

[실시예 11]

14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-아미노-α-D-갈락토피라노실) 옥시아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린의 제법

실시예 8에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(하이드록시이미노)-α-D-갈락토피라노실) 옥시아세톡시 무티린 566.6㎎(1.02459미리몰)을 에탄올 25ml에 용해시킨다.

이 용액에 탄소상의 5% 팔라듐 333㎎ 및 1N 염산 1.2ml를 가한다. 생성된 용액을 실온에서 약 4일간 수소화시킨후 촉매를 제거하고 여액을 진공하에 증발, 건조시킨다.

잔사를 고진공하에 적어도 4시간동안 건조하면 606.7㎎의 불순한 생성물이 흰색 거품상으로서 수득된다. 이 불술한 생성물을 직경이 2.7㎝인 실리카겔컬럼(150g, Merck)상에서 CH₃CN : H₂O(9 : 1)의 용매를 사용하고 30분 간격으로 약 4ml씩 획분을 모으며 크로마토그라피하여 더 정제한다. 동일한 용매 및 요드를 사용하여 실리카겔로서 컬럼을 검출한다.

획분을 진공하에 증발, 건조시킨다. 획분번호 371 내지 420을 합하면 33.2㎎의 14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-아미노-α-D-갈락토피라노실)-옥시아세톡시]-19, 20-디하이드로 무티린이 수득된다.

[실시예 12]

14-데옥시-14-[(2, 3, 4, 6-테트라-0-아세틸-β-D-글루코피라노실) 티오아세톡시] 무티린의 제법

미국특허 제3,979,423호의 실시예 3에 기술된 바와 같이 제조한 요도프레우로무티딘 577.3㎎을 아세톤 2ml에 가한 용액을, 2, 3, 4, 6-테트라-0-아세틸-β-D-글루코피라노실 메르캅탄 428.8㎎을 아세톤 2ml에 녹인 용액에 가한다. 이 반응혼합물에 탄산칼륨 168.4㎎을 물 1ml에 녹인 용액을 교반하면서 가한후 생성된 용액을 실온에서 30분간 교반해준다. 반응 혼합물을 탈이온화수 25ml에 붓고 수용성용액을 메틸렌클로라이드로 추출한다. 메틸렌클로라이드 용액을 황산나트륨으로 탈수시키고 여과한다음 진공하에 증발, 건조시킨다. 잔사를 고진공하에 1.5시간동안 건조시키면 989.7㎎의 14-데옥시-14-[(2, 3, 4, 6-테트라-0-아세틸-β-D-글루코피라노실) 티오아세톡시] 무티린이 수득된다.

[실시예 13]

14-데옥시-14-[(2, 3, 4, 6-테트라-0-아세틸-β-D-글루코피라노실) 티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린의 제법

실시예 12에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(2, 3, 4, 6-테트라-0-아세틸-β-D-글루코피라노실) 티오아세톡시] 무티린 611㎎을 에탄올 55ml에 용해시키고 탄소상의 5% 팔라듐 495㎎을 가한다. 반응혼합물을 10시간동안 수소화시킨후 셀라이트상의 반응 유리여과기를 통해 여과한다. 여액을 진공하에 증발, 건조시키고 소량의 클로로포름으로 다시 증발시키면 500㎎의 14-데옥시-14-[(2, 3, 4, 6-테트라-0-아세틸-β-D-글루코피라노실) 티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린이 흰색거품상 물질로서 수득된다.

[실시예 14]

14-데옥시-14-[(β-D-글루코피라노실) 티오아세톡시] 무티린의 제법

실시예 13에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(2, 3, 4, 6-테트라-0-아세틸-β-D-글루코피라노실) 티오아세톡시] 무티린 529.8m을 메탄올 50ml에 용해시킨다. 물 50ml 및 (C₂H⁵)₃N50ml를 이 용액에 가한다.

생성된 용액을 실온에서 3일간 교반해준후 진공하에 증발, 건조시켜서 흔적량의 용매 전부를 제거한다. 잔사를 클로로포름으로 재증발시켜 불순한 생성물 492㎎을 얻는다.

이 생성물을 직경 2㎝인 실리카겔컬럼(150, Merck) 상에서 에디아세테이트 : 에탄올(9 : 1)로 용출시키면서 30분 간격으로 약 6ml씩 획분을 모으며 크로마토그라피하여 더 정제한다. 획분을 동일용매 및 요드를 에용하는 TLC로서 검출한다. 획분번호 28-120을 합하고 증발시키면 366㎎의 14-데옥시-14-[(1β-D-글루코피라노실)티오아세톡시] 무티린이 수득된다.

[실시예 15]

14-데옥시-14-[(β-D-글루코피라노실) 티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린의 제법

실시예 14에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(β-D-글루코피라노실) 티오아세톡시] 무티린 465.5㎎을 따뜻한 테트라하이드로푸란 100ml에 용해시키고 이 용액에 탄소상의 5% 팔라듐 250㎎을 가한다. 혼합물을 실온에서 7시간동안 수소화시키고 생성된 반응혼합물을 셀라이트층을 가진 반융 유리 깔대기를 통해 여과한다. 여액을 고진공하에 증발, 건조시키면 500㎎의 14-데옥시-14-[(D-글루코피라노실) 티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린이 수득된다.

[실시예 16]

A. 2, 3, 4-트리-0-아세틸-1-티오우로늄-β-D-크실로피라노즈 하이드로브로마이드의 제법

다음 문헌에 기술된 방법 [참조 : ＂Methods of Carbohydrate Chemistry＂, Vol. 1, Academic Press, New York, N. Y., 1962, P. 183]으로 제조한 2, 3, 4-트리-0-아세틸-α-D-크실로피라노실 브로마이드 1.3g(3.83미를몰)을 아세톤 3ml에 용해시킨다. 티오우레아 330㎎(4.33미리몰)을 이 용액에 가한다.

아세톤 3ml을 더 가한후 생성된 용액을 환류하여(70℃ 오일베스) 약 20분간 가열한다. 반응혼합물을 얼음베스상에서 냉각시켜 생성물을 결정화한다.

결정을 여과하여 분리한후, 최소량의 아세톤으로 세척하고 건조하면 849㎎의 2, 3, 4-트리-0-아세틸-1-티오우로늄-β-D-크실로피라노즈 하이드로브로마이드가 수득된다. 융점 : 174 내지 175℃

B. 2, 3, 4-트리-0-아세틸-1-티오-β-D-크실로 피라노즈의 제법

A부에서 기술한 바와 같이 제조한 2, 3, 4-트리-0-아세틸-1-티오우로늄-β-D-크실로피라노즈 하이드로브로마이드 608.4㎎(1.466미리몰) 및 Na₂S₂O₅218㎎(1.14미리몰)에 물 5ml 및 사염화탄소 5ml를 가한다. 반응혼합물을 환류하에 40분간 가열한후 실온으로 냉각한 다음 사염화탄소층을 분리시킨다. 수용성층을 사염화탄소 10ml씩으로 2회 세척한다. 사염화탄소 획분을 합하고 무수 황산나트륨으로 탈수시키고 여과한 후 진공하에 증발시키면 212.9㎎의 2, 3, 4-트리-0-아세틸-1-티오-β-D-크실로피라노즈를 황색 오일로서 수득한다.

이 생성물을 실리카겔 컬럼상에서 더 정제하여 132.3㎎의 오일을 수득하는데 이것을 결정화한다. (융점 117 내지 122℃). 최종 생성물은 크로마토그라피로 정제할 필요가 없으므로 결정핵으로 직접 결정화한다.

C. 14-데옥시-14-[(2, 3, 4-트리-0-아세틸-β-D-크실로피라노실) 티오아세톡시] 무티린의 제법

B부에서 기술한 바와 같이 제조한 2, 3, 4-트리-0-아세틸-1-티오-β-D-크실로피라노즈 1.46g(5미리몰)을 아세톤 10ml에 용해시킨다. 요도프레우로무티린 2.48g(5.08미리몰)을 아세톤 10ml에 가한 용액을 가한다. 이 반응혼합물에 물 5ml에 탄산칼륨 721㎎(5.19미리몰)을 가한 용액을 가한다. 생성된 용액을 실온에서 20분간 교반해주고 탈이온화수 100ml에 붓는다.

이 용액을 클로로메탄으로 추출하고, 클로로메탄용액을 무수황산나트륨으로 탈수하여 여과하고 진공하에 증발, 건조시킨 다음 고진공하에 8시간동안 건조시켜 3.8246g의 생성물을 흰색 거품상물질로서 수득하는데 이것을 디에틸에테르-헥산 또는 디에틸 에테르-에틸 아세테이트로 결정화한다. 융점 : 91 내지 97℃

[실시예 17]

14-데옥시-14-[(2, 3, 4-트리-0-아세틸-β-D-크실로피라노실) 티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린의 제법

실시예 16에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(2, 3, 4-트리-0-아세틸-β-D-크실로피라노실) 티오아세톡시] 무티린 523㎎을 에탄올 20ml에 용해시킨다. 이 용액에 탄소상의 5% 팔라듐 216㎎을 가한다. 반응 혼합물을 실온에서 11.5시간동안 수소화한다. 반응혼합물을 셀라이트층을 통해 여과하고 여액을 진공하에 증발시키면 446㎎의 14-데옥시-14-[(2, 3, 4-트리-0-아세틸-β-D-크실로피라노실) 티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린이 수득된다.

[실시예 18]

14-데옥시-14-[(β-D-크실로피라노실) 티오아세톡시] 무티린의 제법

실시예 16에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(2, 3, 4-트리-0-아세틸-β-D-크실로피라노실) 티오아세톡시] 무티린 1.5954g을 메탄올 60ml에 용해시키고 물 50ml 및 (C₂H₅)₃N₅₆ml을 가한다.

생성된 반응혼합물을 실온에서 2일간 교반해준후 진공하에 증발, 건조시킨다. 잔사를 클로로포름으로 재용해하고 4회 재증발시킨 다음 잔사를 고진공하에 4시간동안 건조하여 1.79g의 불순한 생성물을 수득한다.

이 생성물을 직경 2.7㎝인 실리카겔컬럼(200g, Merck)상에서 에틸아세테이트 : 에탄올(9 : 1)로 용출시키면서 20분 간격으로 약 5ml씩 획분을 모으며 크로마토그라피하여 정제한다. 획분을 동일용매 및 요드를 사용하는 실리카겔 TLC로서 검출한다. 획분 제38-60을 합하고 진공하에 증발시키면 12066g의 14-데옥시-14-[(β-D-크실로피라노실) 티오아세톡시] 무티린이 수득된다.

[실시예 19]

14-데옥시-14-[(β-D-크실로피라노실) 티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린의 제법

실시예 18에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(β-D-크실로피라노실) 티오아세톡시] 무티린을 에탄올 10ml에 용해시킨다음 탄소상의 5% 팔라듐 145㎎을 가한다. 생성된 혼합물을 실온에서 7시간동아 수소화한후 셀라이트를 통해 여과한다. 여액을 증발시켜 흰색 거품상 물질을 얻는데 이것을 고진공하에 약 30분간 건조시키면 생성물이 정랑으로 얻어진다. 이와 유사하게 제조된 생성물 7.75g을 에틸아세테이트 15ml로 결정화하면 5.87g의 14-데옥시-14-[(β-D-크실로피라노실)티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린이 수득된다. 융점 : 93 내지 95℃

[실시예 20]

14-데옥시-14-[(2, 3, 4-트리-0-아세틸-β-D-아라비노피라노실) 티오아세톡시] 무티린의 제법

실시예 16, A 및 B부에서 기술한 방법을 사용하여 2, 3, 4-트리-0-아세틸-1-티오-β-D-아라비노즈 3.177g(0.0109몰)을 아세톤 20ml에 용해시키고 요도프레오무티린 5.31g(0.0109몰)도 아세톤 20ml에 용해한다음 서로 잘 혼합시키고 탄산칼륨 1.506g(0.0109몰)을 물 10ml에 녹인 용액을 가한다. 생성된 용액을 실온에서 30분간 교반해주고 물 10ml에 붓는다. 수용성 용액을 CH₂Cl₂50ml씩으로 3회 추출한후 CH₂Cl₂추출물을 합하고 무수황산나트륨으로 탈수시킨다음 여과한다. 여액을 진공하에 증발, 건조시켜서 7.1g의 불순한 생성물을 얻는다.

이 생성물을 톨루엔 : 에틸 아세테이트(1 : 1) 용매로 유출속도 250ml/min으로 하고 250ml씩 획분을 모으며 HPLC(Waters' Associates Prep. LC/system500)하여 더 정제한다. 톨루엔 : 에틸아세테이트(1 : 1)및 요드를 사용하는 실리카겔 TLC로서 획분함량을 검출한다. 획분 17-22에는 정제된 생성물 최대량이 함유되어 있다.

이 획분을 합하고 진공하에 증발시키면 4.989g의 14-데옥시-14-[(2, 3, 4-트리-0-아세틸-β-D-아라비노 피라노실) 티오아세톡시] 무티린이 수득된다.

[실시예 21]

14-데옥시-14-[(2, 3, 4-트리-0-아세틸-β-D-아라비노피라노실) 티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린의 제법

실시예 20에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(2, 3, 4-트리-0-아세틸-β-D-아라비노피라노실) 티오아세톡시] 무티린 100㎎을 무수에탄올 10ml에 용해시키고 탄소상의 5% 팔라듐 25㎎을 가한다. 반응 혼합물을 하루밤동안 수소화시키고 셀라이트를 통해 여과하여 촉매를 제거한다. 용매를 진공하에 증발시키면 100.5㎎의 14-데옥시-14-[(2, 3, 4-트리-0-아세틸-β-D-아라비노피라노실) 티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린이 수득된다.

[실시예 22]

14-데옥시-14-[(β-D-아라비노피라노실) 티오아세톡시] 무티린의 제법

실시예 20에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(2, 3, 4-트리-0-아세틸-β-D-아라비노피라노실) 티오아세톡시] 무티린 1g을 메탄올 50ml에 용해시킨 다음 이 용액에 물 50ml로 가한 후 트리에틸아민 50ml를 가한다.

생성된 용액을 실온에서 48시간동안 교반해주고 용매를 진공하에 증발시켜 불순한 생성물을 수득한다. 이 생성물을 실시예 20에서 기술한 바와 같이 경사 용매 [처음에 에틸아세테이트로 용출시킨 다음 에메아세테이트 : 95% 에탄올(9 : 1)로 용출시킴]를 사용하고 HPLC를 하여 더 정제하면 0.62g의 14-데옥시-14-[(β-D-아라비노피라노실) 티오아세톡시] 무티린이 수득된다.

[실시예 23]

14-데옥시-14-[(β-D-아리비노피라노실) 티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린의 제법

실시예 22에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(β-D-아라비노피라노실) 티오아세톡시] 무티린 100㎎을 실시예 21의 방법을 사용하여 24시간동안 수소화하여 100㎎의 14-데옥시-14-[(β-D-아라비노피라노실) 티오아세톡시] 19, 20-디하이드로무티린을 수득한다.

[실시예 24]

14-데옥시-14-[(2, 3, 4-트리-0-아세틸-β-L-아라비노피라노실) 티오아세톡시] 무티린의 제법

실시예 20의 방법에 따라 요도푸레우로무티린 4.636g(0.0095몰)을 2, 3, 4-트리-0-아세틸-1-티오-L-아라비노즈 2.76g(0.0095몰)과 반응시키면 6.265g의 불순한 생성물이 수득되는데 이것을 실시예 20에서 기술한대로 경사용매 [톨루엔 4ℓ, 톨루엔 : 에틸아세테이트(1 : 1)4ℓ]를 사용하고 CPLC하여 정제하면 14-데옥시-14-[(2, 3, 4-트리-0-아세틸-β-L-아라비노피라노실) 티오아세톡시] 무티린이 수득된다.

[실시예 25]

14-데옥시-14-[(β-L-아라비노피라노실) 티오아세톡시] 무티린의 제법

실시예 24에서 기술한대로 제조한 14-데옥시-14-[(2, 3, 4-트리-0-아세틸-β-L-아라비노피라노실) 티오아세톡시] 무티린 1g을 실시예 22의 방법으로 탈아실화하여 1.09g의 불순한 생성물을 얻는다.

이 생성물을 경사용매[에틸 아세테이트 4ℓ, 에틸아세테이트 : 에탄올(9 : 1)4ℓ를 사용하고 HPLC하여 정제하면 0.6862g 14-데옥시 14-[(β-L-아라비노피라노실) 티오아세톡시] 무티린이 수득된다.

[실시예 26]

실시예 21에 기술된 방법에 따라 14-데옥시-14-[(2, 3, 4-트리-0-아세틸-β-L-아라비노피라노실) 티오아세톡시]무티린으로부터 14-데옥시-14-[(2, 3, 4-트리-0-아세틸-β-L-아라비노피라노실) 티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린을 제조한다.

[실시예 27]

실시예 23에 기술된 방법에 따라 14-데옥시-14-[(β-L-아라비노피라노실)티오아세톡시]무티린으로부터 14-데옥시-14-[(β-L-아라비노피라노실)티오아세톡시]-19,20-디하이드로무티린을 제조한다.

[실시예 28]

14-데옥시-14-[(2, 3, 4, 6-테트라-0-아세틸-β-D-갈락토피라노실)티오아세톡시]무티린의 제법

실시예 12에서 기술된 방법에 따라 요도푸레우로무티린 9.27g(0.019몰)을 2, 3, 4, 6-테트라-0-아세틸-β-D-갈락토피라노실메르캅탄 6.96g(0.019몰)과 반응시켜서 14.14g의 불순한 생성물을 얻는다. 이 생성물을 경사용매 [톨루엔 4ℓ, 톨루엔 : 에틸아세테이트(1 : 1) 4ℓ] 8ℓ를 사용하여 실시예 20에서 기술된 대로 HPLC를 사용하여 정제한 다음 TLC로 검출하면 3.99g의 14-데옥시-14-[(2, 3, 4, 6-테트라-0-아세틸-β-D-갈락토피라노실)티오아세톡시]무티린이 수득된다.

[실시예 29]

14-데옥시-14-[(2, 3, 4, 6-테트라-0-아세틸-β-D-갈락토 피라노실) 티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린의 제법

실시예 28에서 기술한대로 제조한 14-데옥시-14-[(2, 3, 4, 6-테트라-0-아세틸-β-D-갈락토피라노실)티오아세톡시]무티린 200㎎을 실시예 13의 방법을 사용하여 20시간동안 수소화하면 0.19g의 14-데옥시-14-[(2, 3, 4, 6-테트라-0-아세틸-β-D-갈락토피라노실)티오아세톡시]-19, 20-디하이드로 무티린이 수득된다.

[실시예 30]

14-데옥시-14-[(β-D-갈락토피라노실)티오아세톡시] 무티린의 제법

실시예 28에서 기술한대로 제조한 14-데옥시-14-[(2, 3, 4, 6-테트라-0-아세틸-β-D-갈락토피라노실)티오아세톡시]무티린 1g을 실시예 14에서 기술한 방법을 사용하여 탈아세틸화하여 1.16g의 불순한 생성물을 수득한다. 이 생성물을 실시예 20에서 기술한 대로 HPLC를 하는데 단 여기서는 경사용매, 에틸아세테이트 4ℓ, 에틸아세테이트 : 에탄올 (9 : 1) 4ℓ를 사용하여 정제하면 0.49g의 14-데옥시 14-[(β-D-갈락토피라노실)티오아세톡시] 무티린이 수득된다.

[실시예 31]

실시예 15에서 기술한 대로 14-데옥시-14-[(β-D-갈락토피라노실)티오아세톡시]무티린으로부터 14-데옥시-14-[(β-D-갈락토피라노실)티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린을 제조한다.

[실시예 32]

L-크실로즈를 출발물질로하여 실시예 16에서 기술한 방법으로 14-데옥시-14-[(2, 3, 4-트리-0-아세틸-β-L-크실로피라노실)티오아세톡시]무티린을 제조한다.

최종단계에서 요도프레오무티린 31g을 2, 3, 4-트리-0-아세틸-1-티오-β-L-크실로즈 19g과 반응시켜 39.6g의 불순한 생성물을 수득한다. 이 불순한 생성물을 실시예 20에서 기술한대로 HPLC를 하여 정제하는데 단 여기서는 경사용매, [톨루엔으로부터 톨루엔 : 에틸아세테이트(7 : 3)] 8ℓ를 사용한다. 정제획분을 톨루엔 : 에틸아세테이트로 결정화하여 21.05g의 14-데옥시-14-[(2, 3, 4-트리-0-아세크-β-L-크실로피라노실)티오아세톡시]무티린을 수득한다. 융점 : 210 내지 213℃

[실시예 33]

실시예 32에서 기술한대로 제조한 14-데옥시-14-[(2, 3, 4-트리-0-아세틸-β-L-크실로피라노실)티오아세톡시]무티린 2.56g으로부터 실시예 19의 방법을 사용하여 14-데옥시-14-[(2, 3, 4-트리-0-아세틸-β-L-크실로피라노실) 티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린 2.23g을 수득한다.

[실시예 34]

실시예 32에서 기술한대로 제조한 14-데옥시-14[(2, 3, 4-트리-0-아세틸-β-L-크실로피라노실)티오아세톡시]무티린 15.8g으로부터 실시예 18의 방법에 따라 14-데옥시-14-[(β-L-크실로피라노실)티오아세톡시]무티린 14.3g을 흰색 거품상물질로서 수득한다.

[실시예 35]

실시예 34에서 기술한 대로 제조한 14-데옥시-14-[(β-L-크실로피라노실)티오아세톡시]무티린 7g으로부터 실시예 19의 방법에 따라 14-데옥시-14-[(β-L-크실로피라노실)티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린 6.3g을 흰색거품상 물질로서 수득한다.

[실시예 36]

A. 프레우로무티린 티오우로늄 하이드로요다이드의 제법

요로프레우로무티린 46.8g을 아세톤 300ml에 용해하고 티오우레아 7.418g 및 아세톤 60ml를 이 용액에 가한다. 생성된 반응혼합물을 90℃ 오일베스에서 환류하에 약 30분 동안 가열한다음 반응혼합물을 방치하여 실온으로 냉각한다. 진공하에 증발, 건조하여 60g의 14-데옥시-14-(티오우로늄 아세톡시)무티린 하이드로요다이드(이하 프레우로무티린 티오우로늄하이드로요다이드라 칭함)를 흰색 무정형 화합물로서 수득한다.

B. 프레우로무티린 티올의 제법

A. 부에서 기술한대로 제조한 프레우로무티린 티오우로늄 하이드로 요다이드 60g을 물 200ml에 용해시키고 충분한 양의 가온한 메탄올을 가하여 완전한 용액으로 만든다음 Na₂S₂O₅23g을 물 100ml에 용해하고 사염화탄소 150내지 200ml를 가한 용액을 상기 용액에 가한다.

생성된 반응혼합물을 80 내지 90℃ 오일베스상에서 약 30분간 환류하에 가열한다. 클로로포름층을 분리하고 뭇 황산나트륨으로 탈수한후 증발, 건조하면 32.5g의 프레우로무티린 타올을 흰색 무정형 화합물로서 수득된다.

C. 14-데옥시-14-[(2, 3, 4-트리-0-아세틸-D-리보피라노실)티오아세톡시] 무티린의 α-및 β-아노머의 제법

B. 부에서 기술한 바와 같이 제조한 프레우로무티린 티올 7.53g(19.1미리몰)을 클로로포름 100ml에 용해하고 테트라-0-아세틸리보피라노즈 6.19g(19.46미리몰)을 가한다. 생성된 용액에 BF₃에테레이트 9ml를 가한다음 반응혼합물을 실온에서 약 30분간 교반해주고 진공하에 증발, 건조시킨다. 수득된 잔사를 클로로포름에 재용해시키고 동량의 물로 2회 세척한다.

클로로포름층을 분리한 후 무수 황산나트륨으로 하루밤 탈수시킨 다음 진공하에 증발, 건조하면 13g의 14-데옥시-14-[(2, 3, 4-트리-0-아세틸-D-리보피라노실) 티오아세톡시] 무티린의 α-및 β-아노머의 혼합물을 수득한다. 이 불순한 생성물을 처음에는 경사용매[톨루엔 4ℓ, 톨루엔 : 에틸아세테이트(3 : 1) 4ℓ]를 사용한 다음 톨루엔 : 에틸아세테이트(3 : 1) 4ℓ, 마지막에는 에틸아세테이트 2ℓ를 사용하여 실시예 20에서 기술된 바와 같이 HPLC하여 더 정제한다. HPLC로부터 적합한 획분을 톨루엔 4ℓ를 사용한 다음 경사용매[톨루엔 4ℓ, 톨루엔 : 에틸아세테이트(4 : 1)4ℓ]를 사용하고 다시 HPLC하여 정제한다. 다시 적합한 획분을 합해서 정제된 생성물을 얻는다. 이 생성물(아노머혼합물)을 직경 3.5㎝인 실리카겔컬럼상에서 톨루엔 : 이소부틸 알콜(9 : 1) 용매를 사용하고 30분간격으로 5ml씩 획분을 수집하며 더욱 정제한다. 획분을 TLC로 검출한 결과 307.3㎎의 α-아노머 및 1.32g의 β-아노머가 분리되었다.

[실시예 37]

실시예 36에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(2, 3, 4-트리-0-아세틸-α-D-리보피라노실) 티오아세톡시] 무티린으로부터 실시예 15의 방법에 따라 14-데옥시-14-[(α-D-리보피라노실) 티오아세톡시] 무티린을 제조한다.

[실시예 38]

실시예 36에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(2, 3, 4-트리-0-아세틸-β-D-리보피라노실) 티오아세톡시] 무티린으로부터 실시예 15의 방법에 따라 14-데옥시-14-[(β-D-리보피라노실) 티오아세톡시)무티린을 제조한다.

[실시예 39]

실시예 37에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(α-D-리보피라노실) 티오아세톡시] 무티린으로부터 실시예 19의 방법에 따라 14-데옥시-14-[(α-D-리보피라노실) 티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린을 제조한다.

[실시예 40]

실시예 38에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(β-D-리보피라노실) 티오 아세톡시] 무티린으로부터 실시예 19의 방법에 따라 14-데옥시-14-[(β-D-리보피라노실) 티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린을 제조한다.

[실시예 41]

14-데옥시-14-[(2, 3, 5-트리--0-아세틸-D-리보피라노실) 티오아세톡시] 무티린의 α-및 β-아노머의 제법.

실시예 36 B. 부에서 기술한 바와 같이 제조한 프레우로무티린티올 6.5g(16.49미리몰)을 클로로포름 150ml에 용해시킨 다음 테트라-0-아세틸-β-D-리보피라노즈 6.9g(21.69미리몰)을 이 용액에 가한다. 생성된 용액에 BF₂에테레이트 10ml를 서서히 가한후 실시예 36C 부에서 기술한 방법에 따라 반응을 수행하면 10g의 아노머 혼합물인 불순한 생성물이 얻어진다.

이 혼합물을 처음엔 경사용매 즉 톨루엔으로부터, 톨루엔 : 에틸 아세테이트(3 : 1) 8ℓ, 톨루엔 : 에틸아세테이트(3 : 1) 내지 톨루엔 : 에틸 아세테이트(1 : 3)8ℓ를 사용하여 실시예 20에서 기술한 바와 같이 HPLC로 분리하여 1.6589g의 불순한 생성물을 수득한다. 이 생성물을 직경 2.5㎝인 실리카겔(225g, Merck) 컬럼상에서 톨루엔 : 이소부틸알콜(9 : 1)의 용매를 사용하고 30분 간격으로 3ml씩 획분을 모으며 크로마토그라피한다.

획분 번호 205-250을 합하고 진공하에 증발시키면 0.49g의 정제된 물질이 수득된다. 이 물질을 같은 조건하에 다른 실리카겔컬럼상에서 재차 크로마토그라피한다. 획분 번호 209 내지 215를 합하고 진공하에 증발시키면 56㎎의 14-데옥시-14-[(2, 3, 5-트리-0-아세틸-α-D-리보피라노실) 티오아세톡시] 무티린이 수득된다. 획분번호 248 내지 260을 이와 유사하게 합하면 28㎎의 14-데옥시-14-[(2, 3, 5-트리-0-아세틸-β-D-리보피라노실)티오아세톡시]무티린이 수득된다.

[실시예 42]

실시예 41에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(2, 3, 5-트리-0-아세틸-α-D-리보피라노실) 티오아세톡시] 무티린으로부터 실시예 17의 방법에 따라 14-데옥시-14-[(2, 3, 5-트리-0-아세틸-α-D-리보피라노실) 티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린을 제조한다.

[실시예 43]

실시예 41에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(2, 3, 5-트리-0-아세틸-β-D-리보피라노실) 티오아세톡시] 무티린으로부터 실시예 17의 방법에 따라 14-데옥시-14-[(2, 3, 5-트리-0-아세틸-β-D-리보피라노실) 티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린을 제조한다.

[실시예 44]

실시예 41에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(2, 3, 5-트리-0-아세틸-α-D-리보피라노실) 티오아세톡시] 무티린으로부터 실시예 18의 방법에 따라 14-데옥시-14-[(α-D-리보피라노실)무티린을 제조한다.

[실시예 45]

실시예 41에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(2, 3, 5-트리-0-아세틸-β-D-리보피라노실) 티오아세톡시] 무티린으로부터 실시예 18의 방법에 따라 14-데옥시-14-[(β-D-리보피라노실) 티오아세톡시] 무티린을 제조한다.

[실시예 46]

실시예 44에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(α-D-리보피라노실) 티오아세톡시] 무티린으로부터 실시예 19의 방법에 따라 14-데옥시-14-[(α-D-리보피라노실) 티오 아세톡시] 무티린을 제조한다.

[실시예 47]

실시예 45에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(β-D-리보피라노실) 티오아세톡시] 무티린으로부터 실시예 19의 방법에 따라 14-데옥시-14-[(β-D-리보피라노실) 티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린을 제조한다.

[실시예 48]

14-데옥시-14-[(2-디옥시-2-(N, N-디메틸아미노)-3, 4, 6-트리 0-아세틸-β-D-글루코피라노실)티오아세톡시] 무티린의 제법.

물 250ml에 D-글루코사민 하이드로클로라이드 10.8g(0.05몰)을 녹인 용액에 37% 포름알데하이드 용액 250ml 및 탄소상의 10% 팔라듐 5g을 가한다. 생성된 혼합물을 2-데옥시-2-(N, N-디메틸아미노)-D-글루코사민 이론양으로 전환될 때까지 수소화시킨다음 촉매를 여과하여 제거하고 여액을 동결건조시킨다. 수득된 생성물을 무수초산 및 피리딘으로 아세틸화하면 상응하는 테트르-0-아세틸 유도체가 얻어진다. 이 생성물을 2-데옥시-2-(N, N-디메틸아미노)-3, 4, 6-트리-0-아세틸-D-글루코피라노실 브로마이드로 전환시킨 다음 실시예 16에서 기술된 방법에 따라 상응하는 1-메르캅토 유도체로 전환시킨다.

실시예 16. C부의 방법에 따라 2-데옥시-2-(N, N-디메틸아미노)-3, 4, 6-트리-0-아세틸-1-티오-D-글루코피라노즈를 요도푸레우로무티린과 커플링시켜서 목적하는 생성물을 수득한다.

[실시예 49]

실시예 48에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(N, N-디메틸아미노)-3, 4, 6-트리-0-아세틸-β-D-글루코피라노실)티오아세톡시]무티린으로부터 실시예 17의 방법에 따라 14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(N, N-디메틸아미노)-3, 4, 6-트리-0-아세틸-β-D-글루코피라노실)티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린을 제조한다.

[실시예 50]

실시예 48에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(N, N-디메틸아미노)-3, 4, 6-트리-0-아세틸-β-D-글루코피라노실)티오아세톡시]무티린으로부터 실시예 18의 방법에 따라 14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(N, N-디메틸아미노)-β-D-글루코피라노실)티오아세톡시]무티린을 제조한다.

[실시예 51]

실시예 50에서 기술한 바와 같이 제조한 14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(N, N-디메틸아미노)-β-D-글루코피라노실)티오아세톡시]무티린으로부터 실시예 19의 방법에 따라 14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(N, N-디메틸아미노)-β-D-글루코피라노실)티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린을 제조한다.

[실시예 52]

14-데옥시-14-[(4-0-(2, 3, 4, 6-테트라-0-아세틸-α-D-글루코피라노실)2, 3, 6-트리-0-아세틸-β-D-글루코피라노실)티오아세톡시]무티린의 제법.

상기 화합물(이하 헵타아세틸티오말토즈 유도체라 칭함)은 말토즈 옥타-0-아세테이트를 출발물질로 사용하여 실시예 16의 방법에 따라 제조한다. 말토즈 옥타-0-아세테이트는 다음 문헌에 기술된 바와 같이 제조하고 [참조 : Methods, Vol 1, P. 334] 이 화합물로부터 피난 및 와렌에 의해 기술된 방법에 따라 헵타-0-아세틸 말토즈브로마이드를 제조한다. [J. chem. soc. 1962, 2823] 요도프레우로무티린 8.6g을 실시예 16, A 및 B부에서 기술한 바와 같은 유사한 방법으로 제조한 헵타-0-아세틸 말토즈 티올 11.8g과 실시예 16, C부의 방법에 따라 반응시키면 흰색거품상 생성물 17g이 수득된다.

이 생성물을 경사용매 [에틸아세테이트로부터 에틸아세테이트 : 에탄올(1 : 1)]8ℓ를 사용하고 HPLC하여 더 정제시키면 1.12g의 헵타아세틸 티오말토즈 유도체가 수득된다.

[실시예 53]

실시예 17의 방법에 따라 헵타아세틸 티오말토즈 유도체 330㎎을 환원시켜서 14-데옥시-14-[(4-0-(2, 3, 4, 6-테트라-0-아세틸-α-D-글루코피라노실)-2, 3, 6-트리-0-아세틸-α-D-글루코피라노실)티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린(이하 디하이드로헵타아세틸 티오말토즈 유도체라 칭함)334.5㎎이 수득된다.

[실시예 54]

실시예 18의 방법에 따라 헵타아세틸티오말토즈 유도체 1.1g을 탈아실화시켜서 14-데옥시-14-[(4-0-(α-D-글루코피라노실)-β-D-글루코피라노실)티오아세톡시]무티린(이하 티오말토즈 유도체라 칭함) 1.1g의 불순한 생성물을 담황색 잔사로서 수득한다. 이 생성물의 실시예 22의 방법에 따라 HPLC로 정제하면 732.6㎎의 티오말토즈유도체가 수득된다.

[실시예 55]

실시예 19의 방법에 따라 티오말토즈 유도체 266.7㎎을 환원시켜서 14-데옥시-14-[(4-0-(α-D-글루코피라노실)-글루코피라노실)티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린(이하 디하이드로 티오말토즈 유도체라 칭함) 243㎎이 수득한다.

[실시예 56-78]

다음 화합물은 실시예 1-5에 기술된 방법에 따라 제조한다.

14-데옥시-14-[(β-D-갈락토피라노실)옥시아세톡시]-무티린

14-데옥시-14-[(α-D-만노푸라노실)옥시아세톡시]무티린

14-데옥시-14-[(α-L-데옥시글루피라노실)옥시아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린

14-데옥시-14-[(β-D-요도피라노실)옥시아세톡시]-무티린

14-데옥시-14-[(α-D 알트로피라노실)옥시-아세톡시]무티린

14-데옥시-14-[(α-L-람노피라노실)옥시아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린

14-데옥시-14-[(α-D-푸코피라노실)티오아세톡시]무티린

14-데옥시-14-[(α-D-갈락토푸라노실)옥시아세톡시]무티린

14-데옥시-14-[(α-D-만노피라노실)티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린

14-데옥시-14-[(β-D-글로피라노실)티오아세톡시]무티린

14-데옥시-14-[(β-D-요도피라노실)티오아세톡시]-19, 30-디하하이드로무티린

14-데옥시-14-[(α-D-람노피라노실)티오아세톡시]무티린

14-데옥시-14-[(α-D-릭소피라노실)티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린

14-데옥시-14-[(β-D-크실로피라노실)티오아세톡시]무티린

14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-아미노-α-D-만노-피라노실)티오아세톡시]무티린

14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(N-에틸아미노)-α-D-글루코피라노실)옥시아세톡시]무티린

14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(N-3급-부틸-아미노)-β-D-크실로피라노실)티오아세톡시]19, 20-디하이드로무티린

14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(N-메틸아미노)-β-D-요도피라노실)옥시아세톡시]무티린

14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(N-메틸, N-에틸-아미노)-β-D-크실로피라노실)티오아세톡시]-19, 20-무티린

14-데옥시-14-[(4-0-(β-D-갈락토피라노실)-β-D-글루코피라노실)티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린

14-데옥시-14-[(2, 3, 4-트리-0-부티릴-β-D-크실로피라노실)티오아세톡시]무티린

14-데옥시-14-[(2, 3, 4, 6-테트라-0-프로피오닐-β-D-글루코피라노실)옥시아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린

14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(N, N-디메틸아미노)-β-D-글루코피라노실)티오아세톡시]무티린

14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(N, N-디메틸아미노)-β-D-글루코피라노실)티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린

14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(N, N-디메틸아미노)-β-D-만노피라노실)티오아세톡시]무티린

14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(N, N-디메틸아미노)-β-D-만노피라노실)티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린

14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(N, N-디메틸아미노)-β-D-크실로피라노실)티오아세톡시]무티린

14-데옥시-14-[(2-데옥시-2-(N, N-디메틸아미노)-β-D-크실로피라노실)티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린.

[프레우로무티린 글루코사이드 유도체의 작용]

본 발명 화합물은 독성미생물 특히 그람양성균의 성장을 억제한다. 본 화합물을 반자동 비탁분석장치(Autoturb Microbiological Assay System, Elanco, hy N.R. Kuzel and F.W. Kavanaghin J. Pharmaceut Sci., 60(5), 764 and 767(1971)를 사용하여 전형적 그람양성 박테리아인 스타필로코쿠스 아우레우스(Staphylococcus aureus)에 대해 시험하였다.

본 화합물의 시험에서 시험조건은 다음과 같다.

균주 : 스타필로코쿠수 아우레우스(H-Heatley) NRRL B-314

배지 : 영약 육즙배지(pH 7)

배양온도 및 시간 : 37℃에서 4시간

시료 및 표준시료로 사용된 A-40104인자 A를 물에 용해시킨다.

표준시료는 ml당 1.25, 2.50, 3.75, 5.00 및 6.25㎎의 농도로 하여 자동현탁 회전기(Autoturbcarrousel)에 넣었다. 시험 화합물도 희석하여 회전기에 넣은 것과 같이 ml당 약 2.5 내지 5.0㎎함유시켰다. 시험관내 시험에서의 본 발명의 전형적 화합물(R²=H)의 작용단위를 표 1에 일괄하여 나타내었다.

[표 1]

본 발명의 프레우로무티린 글리코사이드는 비교적 무독성이다. 예를 들면 14-데옥시-14-[(β-D-크실로피라노실)티오아세톡시]무티린 및 14-데옥시-14-[(β-D-크실로피라노실)티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린을 쥐에 복강내 주사한 LD₅₀은 ㎏당 1500㎎ 이상이고 14-데옥시-14-[(3, 4, 6-트리-0-아세틸-2-데옥시-2-(하이드록시이미노)-α-D-글루코피라노실)옥시아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린을 역시 쥐에 복강내 주사한 LD₅₀은 ㎏당 300㎎이었다. 본 발명의 전형적 화합물은 실험용 박테리아감염균에 대해 생체내에서 살균작용을 나타냈다.

이러한 화합물을 실험적으로 감염시킨 쥐에게 2회 투여하고 그 작용효과를 ED₅₀치(시험동물 50%를 보호하기 위한 유효 투여량, ㎎/㎏)으로 측정하였다.

[참조 : Warren wick, et al., J. Bacteriol. 81, 233 235(1961)]

본 화합물로 측정된 ED₅₀치를 표 2 및 3에 기록하였다.

[표 2]

[표 3]

14-데옥시-14-[(β-D-크실로피라노실)-티오아세톡시]-19,20-디하이드로 무티린의 생체내 작용

본 발명 화합물은 또한 수종의 혐기성 박테리아 성장을 억제한다. 본 발명의 전형적 화합물의 작용을 한천 희석배양시험으로 측정하고 그 결과를 표 4에 나타내었다.

[표 4]

[표 4a]

본 발명 화합물의 중요한 점은 마이코프라스마에 대한 작용이다. 마이코프라스마종은 인체 및 많은 동물에 독소를 끼친다. 마이코프라스마에 대한 유효한 제제는 특히 가축, 돼지 및 소의 마이코프라스마성질병의 예방과 치료에 필요한 물질이다.

예를 들면 14-데옥시-14-[(β-D-크실로피라노실)티오아세톡시]무티린 및 14-데옥시-14-[(β-D-크실로피라노실)티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린은 우레아프라스마종인 마이코프라스(Myoplcasma bovis), 마보비스마이코프라스마 디스파(Mycoplasma dispar) 및 기타 보빈 마이코프라스마종의 분리물에 대한 시험관내 시험에서 ml당 0.024㎎의 낮은 농도에서도 유효하였다.

본 발명 화합물의 많은 전형적인 화합물(R²=H)을 수종의 마이코프라스마종에 대해 시험관내 육즙 희석배양 시험으로 측정한 최소억제농도(MIC'S)를 표 5에 총괄하여 나타내었다.

[표 5]

본 발명 화합물은 또한 소, 가금 및 돼지의 호흡기 감염을 일으키는 파스테우렐라 멀토시다(Pasteurella multocida) 소의 호흡기 질환의 주원인이 되는 파스테우렐라 헤모리티카(Pasteurella hemolytica) 및 어류에 독성을 주는 시우도모나스(Pseudomonas)종에 대한 시험관내 시험에서 효과를 나타내었다.

파스테우렐라 헤모리티카에 대한 시험관내 시험에서 14-데옥시-14-[(β-D-크실로피라노실)티오아세톡시]무티린 및 14-데옥시-14-[(β-D-크실로피라노실)티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린의 MIC 평균치는 각기 21.5mcg/ml 및 10.4mcg/ml이었다.

P. 멀토시다 및 시우도모나스종에 대한 본 발명의 대표적 화합물(R²=H)의 효능을 표 6에 총괄하여 나타내었다.

[표 6]

또 본 발명 화합물은 스피로프라스마(Spirolasma) 즉 감귤류의 질병을 일으키는 스피로프라스마 시트리(Spiroplasma citri), 옥수수의 성장을 저해하는 스피로프라스마에 대해 유효하였다.

스피로프라스마 시트리에 대한 본 발명의 대표적 화합물(R²=H)이 시험관내 시험결과를 표 7에 총괄하여 나타내었다. 이 시험에서 S. 시트리의 억제효과는 착색반응으로 측정한 것이다. 즉

적색(R)은 완전억제,

적색-오렌지(RO)는 부분억제,

황색(Y)는 억제없음을 나타낸 것이다.

따라서 14-데옥시-14-[(β-D-크실로피라노실)티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린은 S. 시트리의 성장을 0.01ppm의 낮은 농도에서도 억제하였다.

[표 7]

본 발명의 중요한 점은 돼지의 적리 치료에 본 발명 화합물을 사용하는데 있로.

프레우로무티린이 돼지의 적리 치료에 효과적임은 발표되었다(by W. E. Brownet. al in U. S. Patentent 4,041,175).

본 발명의 프레우로무티린 글리코사이드 유도체가 돼지의 적리를 일으키는 병원균인 트레포네마 하이오다이센테리아에 대해서 유효함을 발견하였다.

T. 하이오다이센테리아에 대한 효능은 시험관내 시험으로 측정하였다. 이 시험에서는 5%의 소탈피브린 혈액을 함유시킨 트립티카제 대두 한천 평편 배양기중에 본 화합물을 ml당 50, 5.0, 0.5 및 0.05mcg의 농도로 혼합시켰다. 한천표면에 T. 하이오다이센테리아 현탁액 0.1ml를 10^-1로 희석하여 접종하였다. 이것을 혐기조건하에 4일간 배양시킨 다음 헤모리틱 트레포네마(hemolytic Treponema)의 성장여부를 평가하였다. 14-데옥시-14-[(β-D-크실로피라노실)티오아세톡시]무티린 및 14-데옥시-14-[(β-D-크실로피라노실)티오아세톡시]-19, 20-디하이드로무티린은 50, 5.0 및 0.5mcg/ml 한천배지농도에서 성장을 억제하였다. 돼지의 적리 치료에 사용할 경우는 본 발명 화합물을 정제, 캅셀, 분말등의 형태로 하여 질병에 감염된 돼지에게 경구로 투여할 수 있다.

그러나 바람직한 투여방법은 돼지사료의 일정량에 본 화합물을 혼합시키는 것이다.

Claims (1)

1. 글리코실유도체(여기에서 글리코실부위는 하기(a)에서 (h)까지의 그룹중에서 선택된 퍼-0-아실화 또는 α 또는 β 아노머이거나 또는 하기(i)의 아실화글리코실에서 선택됨)를 다음 구조식(Ⅴ)인 프레우로무티린 또는 이의 유도체와 반응시키고 최종생성물에 있어서 R' 중의 글리코실 부위가 하기(a)에서 (h)까지의 그룹에서 선택되고/또는 R이 에틸인 경우 수득된 생성물의 수소화 또는 가수분해로 0-아실 또는 벤질부위를 제거하고/또는 12-비닐을 에틸로 환원시킴을 특징으로 하여 다음 구조식(Ⅳ)의 프레우로무티린 글리코사이드 유도체 및 약학적으로 무독한 이의 염을 제조하는 방법.

   

   상기 구조식에서

   R은 에틸 또는 비닐이며;

   R¹은 다음 그룹, 즉(a)에서 (j)까지의 그룹중에서 선택되고

   a) 다음과 같은 헥소피라노즈 및 헥소푸라노즈의 α및 β-아노머; D-및 L-글루코즈, D-및 L-갈락토즈, D-및 L-만노즈, D-및 L-글루로즈, D-및 L-아이도즈, D-및 L 알트로즈, D-및 L-람노즈, D-및 L-푸코즈, 1-티오-D-및 L-글루코즈, 1-티오-D-및 L-갈락토즈, 1-티오-D-및 L-만노즈, 1-티오-D-및 L-글루코즈, 1-티오-D-및 L-아이도즈, 1-티오-D-및 L-알트로즈, 1-티오-L-및 D-람노즈 및 1-티오-D-및 L-푸코즈.

   b) 다음과 같은 펜토피라노즈 및 펜토푸라노즈 | α-및 β-아노머; D-및 L-릭소즈, D-및 L-리보즈, L-및 D-아라비노즈, D-및 L-2-데옥시리보즈, 1-티오-D-및-릭소즈, 1-티오-D-및 L-리보즈, 1-티오-D-및 L-아라비노즈 및 D-및 L-2-데옥시-1-티오리보즈;

   c) 다음과 같은 펜토푸라노즈의 α-및 β-아노머; D-및 L-크실로크 및 1-티오-D-및 L-크실로즈

   d) 펜토피라노 우즈형태인 L-크실로즈 및 1-티오-D-및 L-크실로즈의 α-및 β-아노머,

   e) 펜토피라노즈형태인 D-크실로즈의 α-아노머,

   f) 다음과 같은 피라노즈 및 푸라노즈아미노 슈가의 α-및 β-아노머; 2-데옥시-2-아미노-D-및 L-글루코즈, 2-데옥시-2-아미노-D-및 L-만노즈, 2-데옥시-2-아미노-D-및 L-크실로즈, 2-데옥시-2-아미노-D-및 L-크실로즈, 2-데옥시-2-아미노-D-및 L-갈락토즈, 4-데옥시-4-아미노-D-및 L-크실로즈, 2-데옥시-2-아미노-1-티오-D-및 L-글루코즈, 2-데옥시-2-아미노-1-티오-D-및 L-만노즈, 2-데옥시-2-아미노-1-티오-D- 및 L-크실로즈, 2-데옥시-2-아미노-1-티오-D-및 L-크실로즈, 1-티오-D-및 L-갈락토스아민, 4-데옥시-4-아미노-1-티오-D-및 L-크실로즈 및 이러한 아미노슈가의 N-모노(C₁내지 C₄)알킬 및 N, N-디(C₁내지 C₄)알킬 유도체;

   g) 다음과 같은 디사카라이드의 α-및 β-아노머; 말토즈, 셀로비오즈, 락토즈, 젠티비오즈, 이소말토즈, 멜리비오즈, 라피노즈, 크실로비오즈, 1-티오말토즈, 1-티오셀로비오즈-1-티올락토즈, 1-티오젠티오비오즈, 1-티오이소말토즈, 1-티오멜리비오즈, 1-티오라피노즈 및 1-티오-크실로비오즈;

   h) 트리사카라이드 말토트리오즈의 α-및 β-아노머; 1-티오말토트리오즈, 1-티오셀로트리오즈 및 1-티오크실로트리오즈;

   i) 2-데옥시-2-(하이드록시이미노)-3, 4, 6-트리-0-아세틸-α-D-글루코피라노실, 2-데옥시-2-(하이드록시이미노)-3, 4, 6-트리-0-아세틸-α-D갈락토피라노실, 2-데옥시-2-(하이드록시이미노)-α-D-갈락토피라노실, 2-데옥시-2-아미노-4, 6-디-0-아세틸-α-D-글루코피라노실, 2-데옥시-2-아세트아미도-3, 4, 6-트리-0-아세틸-α-D-글루코피라노실;

   j) 탄소수 2 내지 4의 알카노일 또는 벤조일로 퍼아실화 또는 벤질화된 (a)에서 (h)까지 중의 어느 하나의 그룹;

   R²는 수소 또는

   R'이 (j)에서 정의된 그룹중에서 선택될 경우 탄소수 2 내지 4의 알카노일, 벤조일 또는 벤조일이고, Y는 메르캅토 또는 할로이다.